CN102847199B - 培养基体、应用该培养基体的移植体及移植体的制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种移植体,其包括一碳纳米管结构及一生物组织,所述碳纳米管结构的表面被极化,形成一极性化表面,所述生物组织吸附在该碳纳米管结构的极性化表面。本发明还提供一种上述移植体的制备方法,其包括如下步骤:提供一培养基体,该培养基体包括一碳纳米管结构,该碳纳米管结构被极化,形成一极性化表面;在所述碳纳米管结构的极性化表面种植多个细胞;以及培养所述多个细胞直到该多个细胞生长形成一生物组织。本发明还提供一种培养基体,用于培养所述生物组织,其包括一碳纳米管结构,该碳纳米管结构的表面被极化,形成一极性化表面,该极性化表面具有与待培养的生物组织相匹配的电荷极性。
Description
技术领域
本发明涉及一种培养基体、应用该培养基体的移植体以及该移植体的制备方法。
背景技术
在社会生活中,各种事故或灾害会不可避免造成生物体损伤,尤其是会损伤皮肤或神经系统。
目前,临床上对于大面积深度皮肤缺损等患者的创面修复治疗,一般采用皮肤移植的方法治疗。其中,皮肤移植大都采用自体植皮、自体皮浆或异体供皮等方法,存在皮源较少、取皮植皮方法繁锁、患者痛苦较大等问题。
神经系统受损会引起神经缺损,神经缺损是临床常见的致残性疾病。通常采用神经管“桥接”神经系统受损部位两端,该神经管是神经系统受损部位的神经细胞的承载体,受损部位的神经细胞(neurons)的神经突起(neurite)受到损伤,通过该神经管的支撑,该神经系统受损部位一端的神经细胞的神经突起沿所述神经管内壁生长,从而通过受损神经细胞的自我修复来完成受损神经系统的修复。然,当受损部位的神经细胞死亡时,通过植入上述神经管是不能修复受损的神经系统的。
发明内容
有鉴于此,确有必要提供一种培养基体,应用该培养基体的移植体及该移植体的制备方法,使用该培养基体的移植体内可以减少受损部位的修复时间。
一种移植体,其包括一碳纳米管结构及一生物组织,所述碳纳米管结构的表面被极化,形成一极性化表面,所述生物组织吸附在该碳纳米管结构的极性化表面,所述碳纳米管结构包括多个碳纳米管,该多个碳纳米管首尾相连形成一自支撑结构。
一种移植体的制备方法,其包括以下步骤:提供一培养基体,该培养基体包括一碳纳米管结构,该碳纳米管结构被极化,形成一极性化表面,所述碳纳米管结构包括多个碳纳米管,该多个碳纳米管首尾相连形成一自支撑结构;在所述自支撑的碳纳米管结构的极性化表面种植多个细胞;以及培养所述多个细胞直到该多个细胞生长形成一生物组织。
一种培养基体,用于培养生物组织,其包括一碳纳米管结构,该碳纳米管结构的表面被极化,形成一极性化表面,该极性化表面具有与待培养的生物组织相匹配的电荷极性,所述碳纳米管结构包括多个碳纳米管,该多个碳纳米管首尾相连形成一自支撑结构。
与现有技术相比较,本发明提供的培养基体中的碳纳米管结构被极化,形成所述极性化表面,该极性化表面具有与待培养的细胞相匹配的电荷极性,可以吸附细胞,因此该培养基体可以用来培养细胞。所述碳纳米管结构具有弹性佳、延展性良好、质量轻,可剪裁等优点,因此,该培养基体可根据受损组织的受损部位的形状、大小进行裁剪、拉伸并植入受损部位。由本发明提供的使用上述培养基体的移植体可根据受损组织的受损部位的形状、大小进行裁剪、拉伸并植入受损部位。所述移植体包括生物组织,当该移植体植入体内时,该生物组织中的细胞与所述受损部位两端或边缘的细胞的距离较近,因此该移植体中的细胞与受损部位边缘的细胞可以重新建立联系,完成受损部位的修复。另,本发明提供的移植体的制备方法不需要对所述碳纳米管结构进行镀层、涂层或化学修饰处理,就可以直接制备移植体,因此,该方法比较简单,易于实施。
附图说明
图1为本发明实施方式提供的移植体的结构示意图。
图2为本发明实施方式采用的一碳纳米管絮化膜的扫描电镜照片。
图3为本发明实施方式采用的一碳纳米管碾压膜的扫描电镜照片。
图4为本发明实施方式采用的一碳纳米管拉膜的扫描电镜照片。
图5为本发明实施方式采用的多层层叠设置的碳纳米管拉膜的扫描电镜照片。
图6为本发明实施方式采用的一非扭转的碳纳米管线的扫描电镜照片。
图7为本发明实施方式采用的一扭转的碳纳米管线的扫描电镜照片。
图8为本发明实施方式提供的移植体的制备流程示意图。
图9为本发明第一实施例提供的移植体的结构示意图。
图10为本发明第一实施例所提供的移植体通过荧光染色后的光学显微镜照片。
图11为本发明第二实施例所提供的移植体通过荧光染色后的光学显微镜照片。
主要元件符号说明
移植体 10;20
碳纳米管结构 12;22
生物组织 14
神经网络 24
载体 26
如下具体实施方式将结合上述附图进一步说明本发明。
具体实施方式
请参阅图1,本发明实施方式提供一种移植体10。该移植体10包括一碳纳米管结构12及设置在该碳纳米管结构12表面的生物组织14。
所述碳纳米管结构12为培养所述生物组织14的培养基体。该碳纳米管结构12的表面被极化,形成一极性化表面,该极性化表面具有与所述生物组织14相匹配的电荷极性,用以吸附所述生物组织14。具体地,该碳纳米管结构12由多个纯碳纳米管组成。其中,该纯碳纳米管指的是碳纳米管上没有经过修饰官能团,且仅由碳元素组成。该碳纳米管结构12的表面经过极性化处理,使得位于该碳纳米管结构12表面的碳纳米管被极性化形成所述极性化表面。所述碳纳米管结构12的形状及大小根据生物体受损部位的形状及大小来确定。该碳纳米管结构12中的碳纳米管之间通过范德华力连接,从而形成所述自支撑结构。所谓“自支撑”即该碳纳米管结构12不需要大面积的载体支撑,而只要相对两边提供支撑力即能整体上悬空而保持自身特定的形状,即将该碳纳米管结构12置于(或固定于)间隔设置的两个基底上时,位于两个基底之间的碳纳米管结构12能够悬空保持自身特定的形状。由于该自支撑的碳纳米管结构12中大量的碳纳米管通过范德华力相互吸引,从而使该碳纳米管结构12具有特定的形状,形成一自支撑结构。由于所述碳纳米管结构12基本由碳纳米管组成且碳纳米管之间通过范德华力连接,因此所述碳纳米管结构12具有弹性佳、延展性良好及质量轻等优点,便于裁剪和拉伸。所述碳纳米管结构12为自支撑结构时,该碳纳米管结构12可以为碳纳米管膜状结构或碳纳米管线状结构。该碳纳米管膜状结构可为由至少一碳纳米管膜形成的膜状结构或由至少一碳纳米管线通过弯折、相互交叉、编织或纺织等方式形成碳纳米管膜状结构。当所述碳纳米管膜状结构包括多个碳纳米管膜时,该多个碳纳米管膜层叠设置,相邻的碳纳米管膜之间通过范德华力相结合。当该碳纳米管膜状结构由碳纳米管膜组成时,该碳纳米管膜状结构中的多个碳纳米管的延伸方向可基本平行于该碳纳米管膜状结构的表面。所述碳纳米管线状结构可为由至少一碳纳米管线组成的线状结构,当所述碳纳米管线状结构包括多个碳纳米管线时,该多个碳纳米管线可以相互交叉或编织等方法形成该碳纳米管线状结构。
请参阅图2,所述碳纳米管膜可为一碳纳米管絮化膜,该碳纳米管絮化膜为将一碳纳米管原料絮化处理获得的一自支撑的碳纳米管膜。该碳纳米管絮化膜包括相互缠绕且均匀分布的碳纳米管。碳纳米管的长度大于10微米,优选为200微米到900微米,从而使碳纳米管相互缠绕在一起。所述碳纳米管之间通过范德华力相互吸引、分布,形成网络状结构。所述碳纳米管絮化膜各向同性。所述碳纳米管絮化膜中的碳纳米管无规则排列,形成大量间隙或微孔。所述碳纳米管絮化膜及其制备方法请参见申请人于2007年4月13日申请的,于2008年10月15日公开的第CN101284662A号中国专利申请“碳纳米管薄膜的制备方法”,申请人:清华大学,鸿富锦精密工业(深圳)有限公司。
所述碳纳米管膜可为一碳纳米管碾压膜,该碳纳米管碾压膜为通过碾压一碳纳米管阵列获得的一种具有自支撑性的碳纳米管膜。该碳纳米管碾压膜包括均匀分布的碳纳米管,碳纳米管沿同一方向或不同方向择优取向排列。所述碳纳米管碾压膜中的碳纳米管相互部分交迭,并通过范德华力相互吸引,紧密结合。所述碳纳米管碾压膜中的碳纳米管与形成碳纳米管阵列的生长基底的表面形成一夹角β,其中,β至少为0度且小于等于15度,该夹角β与施加在碳纳米管阵列上的压力有关,压力越大,该夹角越小,优选地,该碳纳米管碾压膜中的碳纳米管平行于该生长基底排列。该碳纳米管碾压膜为通过碾压一碳纳米管阵列获得,依据碾压的方式不同,该碳纳米管碾压膜中的碳纳米管具有不同的排列形式。具体地,碳纳米管可无序排列;请参阅图3,当沿不同方向碾压时,碳纳米管沿不同方向择优取向排列;当沿同一方向碾压时,碳纳米管沿一固定方向择优取向排列。该碳纳米管碾压膜中碳纳米管的长度大于45微米。所述碳纳米管碾压膜之中的相邻的碳纳米管之间具有一定间隙,从而在碳纳米管碾压膜中形成多个间隙或微孔。所述碳纳米管碾压膜及其制备方法请参见申请人于2007年6月1日申请的,于2008年12月3日公开的第CN101314464A号中国专利申请“碳纳米管薄膜的制备方法”,申请人:清华大学,鸿富锦精密工业(深圳)有限公司。
所述碳纳米管膜可为一碳纳米管拉膜,请参阅图4,所述若干碳纳米管沿该碳纳米管拉膜的长度方向择优取向排列。所述择优取向是指在碳纳米管拉膜中大多数碳纳米管的整体延伸方向基本朝同一方向。而且,所述大多数碳纳米管的整体延伸方向基本平行于碳纳米管拉膜的表面。
进一步地,所述碳纳米管拉膜中多数碳纳米管是通过范德华力首尾相连。具体地,所述碳纳米管拉膜中基本朝同一方向延伸的大多数碳纳米管中每一碳纳米管与在延伸方向上相邻的碳纳米管通过范德华力首尾相连。当然,所述碳纳米管拉膜中存在少数偏离该延伸方向的碳纳米管,这些碳纳米管不会对碳纳米管拉膜中大多数碳纳米管的整体取向排列构成明显影响。所述自支撑主要通过碳纳米管拉膜中存在连续的通过范德华力首尾相连延伸排列的碳纳米管而实现。具体地,所述碳纳米管拉膜中基本朝同一方向延伸的多数碳纳米管,并非绝对的直线状,可适当的弯曲;或者并非完全按照延伸方向上排列,可适当的偏离延伸方向。因此,不能排除碳纳米管拉膜的基本朝同一方向延伸的多数碳纳米管中并列的碳纳米管之间可能存在部分接触。具体地,该碳纳米管拉膜包括多个连续且定向排列的碳纳米管片段。该多个碳纳米管片段通过范德华力首尾相连。每一碳纳米管片段由多个相互平行的碳纳米管组成。该碳纳米管片段具有任意的长度、厚度、均匀性及形状。所述碳纳米管拉膜及其制备方法具体请参见申请人于2007年2月9日申请的,于2010年5月26日公告的第CN101239712B号中国公开专利“碳纳米管膜状结构及其制备方法”。
请参阅图5,当该碳纳米管结构包括多个碳纳米管拉膜时,所述多个碳纳米管拉膜层叠设置形成一层状结构,相邻的碳纳米管拉膜通过范德华力结合。该层状结构中相邻的碳纳米管拉膜中的碳纳米管之间具有一交叉角度α,且该α大于0度且小于等于90度,因此,该多个碳纳米管拉膜中的碳纳米管相互交织形成一网状结构,使所述碳纳米管结构的机械性能增加。如,所述碳纳米管结构包括多层层叠设置的碳纳米管拉膜,且相邻的碳纳米管拉膜中的碳纳米管之间的交叉角度α大致等于90度,即,相邻碳纳米管拉膜中的碳纳米管的延伸方向大致垂直。
所述碳纳米管线可以为非扭转的碳纳米管线。请参阅图6,该非扭转的碳纳米管线包括大多数沿该非扭转的碳纳米管线轴向方向平行排列的碳纳米管。非扭转的碳纳米管线可通过将碳纳米管膜通过有机溶剂处理得到。所述碳纳米管膜包括多个碳纳米管片段,该多个碳纳米管片段通过范德华力首尾相连,每一碳纳米管片段包括多个相互平行并通过范德华力紧密结合的碳纳米管。该碳纳米管片段具有任意的长度、厚度、均匀性及形状。该非扭转的碳纳米管线长度不限,直径为0.5纳米-1毫米。具体地,可将挥发性有机溶剂浸润所述碳纳米管膜的整个表面,在挥发性有机溶剂挥发时产生的表面张力的作用下,碳纳米管膜中的相互平行的多个碳纳米管通过范德华力紧密结合,从而使碳纳米管膜收缩为一非扭转的碳纳米管线。该挥发性有机溶剂为乙醇、甲醇、丙酮、二氯乙烷或氯仿,本实施例中采用乙醇。通过挥发性有机溶剂处理的非扭转碳纳米管线与未经挥发性有机溶剂处理的碳纳米管膜相比,比表面积减小,粘性降低。
所述碳纳米管线可以为扭转的碳纳米管线。请参阅图7,该扭转的碳纳米管线包括大多数绕该扭转的碳纳米管线轴向螺旋排列的碳纳米管。该碳纳米管线可采用一机械力将所述碳纳米管膜两端沿相反方向扭转获得。进一步地,可采用一挥发性有机溶剂处理该扭转的碳纳米管线。在挥发性有机溶剂挥发时产生的表面张力的作用下,处理后的扭转的碳纳米管线中相邻的碳纳米管通过范德华力紧密结合,使扭转的碳纳米管线的比表面积减小,密度及强度增大。
所述碳纳米管线及其制备方法请参见范守善等人于2002年9月16日申请的,2008年8月20日公告的,公告号为CN100411979C的中国专利;以及于2005年12月16日申请的,2009年6月17日公告的,公告号为CN100500556C的中国专利。
所述生物组织14在所述碳纳米管结构12的极性化表面的电荷的作用下,直接吸附贴合在该碳纳米管结构12的表面。该生物组织14包括多个细胞,该多个细胞吸附在所述碳纳米管结构12的表面,且相互连接形成一网状或片状结构。该细胞可以是神经细胞、肌肉细胞或皮肤细胞等。所述神经细胞可以是哺乳动物的神经细胞,如,海马神经细胞。因此,该生物组织14可以为神经网络、肌肉组织或皮肤组织等具有较大面积的组织。
所述碳纳米管结构具有弹性佳、延展性良好、及质量轻等优点,因此,该移植体可根据受损组织的受损部位的形状、大小进行裁剪、拉伸并植入受损部位,由于所述移植体中的细胞与所述受损部位两端或边缘的细胞的距离较近,所以该移植体中的细胞与受损部位边缘的细胞可以重新建立联系,完成受损部位的修复,从而减少受损的生物组织的修复时间。
可以理解,所述移植体10可以由所述碳纳米管结构及生物组织组成。该移植体10也可以进一步包括一具有生物兼容性的生物载体,所述碳纳米管结构12以及生物组织设置在所述生物载体表面,该生物载体设置于所述碳纳米管结构12远离生物组织14的表面,即,所述碳纳米管结构12设置于该生物载体及生物组织14之间。该生物载体的材料可以为生物降解材料或无生物毒性的材料。所述生物降解材料可以为热塑性淀粉塑料、脂肪族聚酯、聚乳酸、淀粉聚乙烯醇。所述无生物毒性的材料可以为硅胶,硅胶无生物毒性,且可以与生物体兼容。由于所述生物载体可以生物降解或无生物毒性,对生物体基本上没有危险,所以,该移植体可以直接植入生物体中。所述生物载体的形状与厚度可根据所述碳纳米管结构12的形状与厚度设计,所述碳纳米管结构12的形状应根据生物体受损部位的形状设计。可以理解,当所述碳纳米管结构12的厚度较薄时,该碳纳米管结构12具有较小机械强度及具有较大的比表面积,因此,该碳纳米管结构12容易受外力产生破损或容易粘附在其他物体上。将该碳纳米管结构12设置在所述生物载体的表面可以使该碳纳米管结构12更难受外来作用而产生破损,同时便于移动及防止该碳纳米管结构12粘附在亲水性物体上;而且移植之后,所述生物载体不用去除。
请参阅图8,本发明提供一种上述移植体10的制备方法,其包括:
S10,提供一培养基体,该培养基体包括所述碳纳米管结构12,该碳纳米管结构12被极化,形成所述极性化表面;
S20,在所述碳纳米管结构12的极性化表面种植多个细胞;以及
S30,培养所述多个细胞直到该多个细胞生长形成所述生物组织14。
步骤S10包括以下步骤:
S11,提供一碳纳米管结构;以及
S12,对所述碳纳米管结构12表面进行极性化处理。
所述步骤S12对所述碳纳米管结构的表面进行极性化处理主要是改变所述碳纳米管结构表面的碳纳米管的电荷极性,使得该极性化碳纳米管结构能够吸附并与待培养的生物组织生物兼容,有利于生物组织的细胞贴壁生长。具体地,步骤S12进一步包括以下步骤:
S121,对所述碳纳米管结构进行灭菌处理;以及
S122,采用一多聚赖氨酸(Poly-D-lysine,PDL)溶液或聚醚酰亚胺(PEI)溶液处理所述灭菌后的碳纳米管结构。
步骤S121对所述碳纳米管结构12进行灭菌处理的方式不限,只要能够杀死所述碳纳米管结构12中的大部分细菌即可。譬如可通过紫外光灭菌的方式对所述碳纳米管结构进行灭菌。
步骤S122包括如下步骤:将所述碳纳米管结构12浸泡在所述多聚赖氨酸溶液或聚醚酰亚胺溶液中;以及用灭菌后去离子水清洗浸泡过的碳纳米管结构12,以防止多聚赖氨酸或聚醚酰亚胺影响细胞的培养。所述碳纳米管结构12经过多聚赖氨酸溶液或聚醚酰亚胺溶液处理,直接改变碳纳米管结构12表面的碳纳米管的电荷极性,使得该碳纳米管结构12的表面具有与细胞相匹配的电荷极性,而不需要通过对所述碳纳米管结构12的表面进行镀层、涂层或化学修饰处理等方法来改变所述碳纳米管结构的表面极性。从而使得所述培养基体的结构及其制备方法比较简单。
为增加所述碳纳米管结构12的强度,所述培养基体还可以进一步包括一载体,所述碳纳米管结构12设置在该载体的表面,且该碳纳米管结构12的极性化表面远离该载体设置。所述载体的形状、材料和厚度可以根据需要确定。所述载体可以具有平面结构,也可以具有曲面结构,如,长方形的面状结构,弧形结构,折面结构等。所述载体的尺寸与厚度可根据实际需求而确定。譬如,如果所需移植体的面积为3平方厘米,则所述载体的面积可至少为3平方厘米。
所述载体的材料可以为所述生物载体,也可以为与生物不兼容的非生物载体。该非生物载体的材料可以为塑料,如聚苯乙烯。所述载体可以为塑料培养皿、塑料表面皿或方形塑料片。当所述载体为塑料培养皿或塑料表面皿时,可以直接用来培养细胞,而无需另外的器皿放置该碳纳米管结构。
此时,所述步骤S10可包括如下步骤:
S111,提供所述载体及所述碳纳米管结构;
S112,将所述碳纳米管结构设置在所述载体的表面;
S113,对所述碳纳米管结构进行灭菌处理;以及
S114,采用多聚赖氨酸溶液或聚醚亚酰胺溶液处理所述灭菌后的碳纳米管结构。
在步骤S112中,为使所述碳纳米管结构与所述载体表面结合更紧密,可对所述碳纳米管结构进行有机溶剂处理。具体地,可将设置在所述载体表面的碳纳米管结构覆盖或者滴上容易挥发的溶剂,如有机溶剂,再使所述溶剂挥发,从而可减小该碳纳米管结构的比表面积及增加该碳纳米管结构与所述载体的附着力。
当所述载体为面状结构时,所述培养基体还可以进一步包括一容器,所述设置有碳纳米管结构的载体置于该容器中。该容器具有一内表面,所述载体设置在该容器的内表面与所述碳纳米管结构之间。其中,所述容器为塑料培养皿或塑料表面皿等可以直接用来培养细胞的器皿。此时,所述步骤S112及S113之间进一步包括步骤:将设置有碳纳米管结构的载体置于一容器中。
在步骤S20中,在所述碳纳米管结构表面种植所述多个细胞的方法不限,可采用在该碳纳米管结构表面喷射或涂覆细胞液,也可采用将该碳纳米管结构及承载该碳纳米管结构的载体浸泡在所述细胞液中,只要使所述细胞液覆盖所述碳纳米管结构即可,其中,所述细胞液是指含有细胞并可以用于种植该细胞的溶液。为使所述细胞液覆盖所述碳纳米管结构,所述细胞液可盛放在一培养皿中。所述碳纳米管结构可悬空设置在所述培养皿中,也可设置在所述培养皿的一底面上。如,在所述碳纳米管结构表面种植多个神经细胞时,该步骤为:在所述碳纳米管结构的表面滴一神经细胞液直到该神经细胞液覆盖该碳纳米管结构的极性化表面,从而使神经细胞液中的神经细胞种植在该碳纳米管结构的极性化表面。
在步骤S30中,所述细胞的培养环境应尽量模拟该细胞在生物体中的生存环境。所述细胞的具体培养环境应根据该细胞的类型来确定。如,当培养神经细胞时,该步骤一般采用模拟所述神经细胞在生物体中的生存环境的方式来培养该神经细胞。通常,所述神经细胞在二氧化碳含量大致为5%,温度大致为37摄氏度的环境中进行培养。在培养时,所述碳纳米管结构中的生长因子可促进该神经细胞的吸附生长。
由本发明提供的移植体的制备方法不需要对所述碳纳米管结构进行镀层、涂层或化学修饰处理,就可以直接制备移植体,因此,该方法比较简单,易于实施。
以下将结合附图并以具体实施例方式详细说明本发明的移植体及其制备方法。
请参阅图9,本发明第一实施例提供一种移植体20,该移植体20为神经移植体,其由依次层叠设置的一神经网络24、一碳纳米管结构22以及一塑料方片状载体26组成。所述碳纳米管结构22及塑料方片状载体26组成所述神经网络24的培养基体。具体地,所述碳纳米管结构22由十层层叠设置的碳纳米管拉膜组成的碳纳米管结构,该碳纳米管结构固定在该塑料方片状载体的表面,其中,相邻的碳纳米管拉膜中的碳纳米管的延伸方向具有一大致等于90度的交叉角。该碳纳米管结构22的表面的碳纳米管被极化,在该碳纳米管结构22的表面形成极性化表面,该极性化表面的电荷极性与该神经网络24的电荷极性相匹配,因此,该神经网络24可以被吸附在该碳纳米管结构22的极性化表面。该碳纳米管结构22远离所述神经网络24的表面通过分子间的作用力或范德华力固定在所述塑料方片状载体26的表面。
上述神经移植体20的制备方法包括如下步骤:
提供所述塑料方片状载体26。将由十层层叠设置的碳纳米管拉膜组成的碳纳米管结构22放置在该塑料方片状载体26的表面,其中,相邻的碳纳米管拉膜中的碳纳米管的延伸方向具有一大致等于90度的交叉角;将无水乙醇滴在所述碳纳米管结构22的表面;挥发无水乙醇,该碳纳米管结构22紧密贴合在所述塑料方片状载体26的表面。在一紫外光灭菌箱中对所述碳纳米管结构22进行紫外光照射,大约照射0.5小时。然后将所述经过紫外光照射的碳纳米管结构22浸泡在浓度大致为20微克每毫升(μg/ml)的多聚赖氨酸溶液中大致为20小时;将所述灭菌后的碳纳米管结构22从所述多聚赖氨酸溶液取出,并用灭菌后的去离子水进行清洗所述碳纳米管结构22表面的多聚赖氨酸溶液,以去掉碳纳米管结构上的多聚赖氨酸,从而使得该碳纳米管结构22形成极性化表面。
将形成有极性化表面的碳纳米管结构及塑料方片状载体26置于一培养皿中,所述塑料方片状载体26与该培养皿的内表面接触,在所述碳纳米管结构的极性化表面滴加一海马神经细胞液直到该海马神经细胞液覆盖该碳纳米管结构,从而使海马神经细胞液中的海马神经细胞种植在所述碳纳米管结构的极性化表面,其中该海马神经细胞液是将未分化的海马神经细胞分散在一种植液中而形成的,且该海马神经细胞是从胎鼠的脑部提取的。
将培养有所述海马神经细胞的培养皿置于一二氧化碳培养箱中培养,并适时更换一饲养液。所述二氧化碳培养箱中的二氧化碳含量大致为5%,温度大致为37摄氏度。所述海马神经细胞在培养箱中,用饲养液培养7天左右,就可以形成所述神经移植体。图10为所述神经移植体经过荧光染色后的光学显微镜照片。从该光学显微镜照片可以清晰看出,所述神经移植体中的多个海马神经细胞分化出多个神经突起,该多个神经细胞通过多个神经突起连接在一起形成神经网络,使该多个神经细胞之间能相互联系。同时,部分神经细胞虽然延伸出多个神经突起,但并未通过该多个神经突起与其他神经细胞连接在一起,但这并不影响该神经移植体在整体上具有生物活性的性质。
本发明第二实施例提供一种移植体,该移植体包括依次层叠设置的一神经网络、一碳纳米管结构以及一载体。其中,第二实施例提供的移植体的结构与第一实施例提供的移植体20的结构基本相同,不同之处在于第二实施例中的碳纳米管结构为单层的碳纳米管拉膜;所述载体为硅胶载体。该第二实施例提供的移植体经过荧光染色后的光学显微镜照片请参阅图11。
该第二实施例提供的移植体的制备方法与第一实施例提供的移植体20的制备方法基本相同。
可以理解,本发明第一实施例及第二实施例中的生物组织不限于神经网络,也可以是皮肤组织或肌肉组织。
由本发明实施例提供的移植体的制备方法只需要对所述碳纳米管结构的表面直接进行极性化处理,不需要进行镀层、涂层或化学修饰处理,就可以直接培养细胞,形成移植体,因此,本发明提供的移植体的制备方法比较简单,易于实施。
本发明实施例提供的培养基体中的碳纳米管结构被极化,形成所述极性化表面,该极性化表面具有与待培养的细胞相匹配的电荷极性,可以吸附细胞,因此该培养基体可以用来培养细胞。所述碳纳米管结构具有弹性佳、延展性良好、质量轻,可剪裁等优点,因此,该培养基体可根据受损组织的受损部位的形状、大小进行裁剪、拉伸并植入受损部位。由本发明提供的使用上述培养基体的移植体可根据受损组织的受损部位的形状、大小进行裁剪、拉伸并植入受损部位。由于所述碳纳米管结构形成所述极性化表面,所述生物组织直接吸附在该碳纳米管结构的极性化表面,使得所述移植体的结构表面简单。所述移植体包括生物组织,当该移植体植入体内时,该生物组织中的细胞与所述受损部位两端或边缘的细胞的距离较近,因此该移植体中的细胞与受损部位边缘的细胞可以重新建立联系,完成受损部位的修复。
另外,本领域技术人员还可在本发明精神内做其它变化,当然,这些依据本发明精神所做的变化,都应包含在本发明所要求保护的范围之内。
Claims (23)
1.一种移植体的制备方法,其包括如下步骤:
提供一培养基体,该培养基体包括一碳纳米管结构,该碳纳米管结构被极化,形成一极性化表面,所述碳纳米管结构包括多个碳纳米管,该多个碳纳米管首尾相连形成一自支撑结构;
在所述自支撑的碳纳米管结构的极性化表面种植多个细胞;以及
培养所述多个细胞直到该多个细胞生长形成一生物组织。
2.如权利要求1所述的移植体的制备方法,其特征在于,所述碳纳米管结构包括至少一碳纳米管絮化膜,该碳纳米管絮化膜包括多个相互缠绕且均匀分布的碳纳米管。
3.如权利要求1所述的移植体的制备方法,其特征在于,所述碳纳米管结构包括至少一碳纳米管碾压膜,该碳纳米管碾压膜包括多个碳纳米管相互部分交迭,并通过范德华力相互吸引,紧密结合。
4.如权利要求1所述的移植体的制备方法,其特征在于,所述碳纳米管结构包括至少一碳纳米管拉膜,该碳纳米管拉膜包括多个沿同一方向择优取向排列的碳纳米管,且该多个碳纳米管通过范德华力首尾相连。
5.如权利要求1所述的移植体的制备方法,其特征在于,所述碳纳米管结构包括多个层叠设置的碳纳米管膜,相邻的碳纳米管膜之间通过范德华力连接。
6.如权利要求1所述的移植体的制备方法,其特征在于,所述碳纳米管结构为一碳纳米管线状结构,该碳纳米管线状结构包括至少一非扭转的碳纳米管线或至少一扭转的碳纳米管线。
7.如权利要求1所述的移植体的制备方法,其特征在于,所述培养基体的制备方法包括:提供所述碳纳米管结构;以及对所述碳纳米管结构表面进行极性化处理。
8.如权利要求7所述的移植体的制备方法,其特征在于,对所述碳纳米管结构表面进行极性化处理的步骤包括:对所述碳纳米管结构进行灭菌处理;以及采用多聚赖氨酸溶液或聚醚亚酰胺溶液处理所述灭菌后的碳纳米管结构。
9.如权利要求8所述的移植体的制备方法,其特征在于,采用多聚赖氨酸溶液或聚醚亚酰胺溶液处理所述灭菌后的碳纳米管结构的步骤为:将灭菌后的碳纳米管结构浸泡在所述多聚赖氨酸溶液或聚醚亚酰胺溶液中;以及用灭菌后的去离子水清洗浸泡过的碳纳米管结构以去除形成在该碳纳米管结构表面的多聚赖氨酸溶液或聚醚亚酰胺溶液。
10.如权利要求7所述的移植体的制备方法,其特征在于,所述培养基体进一步包括一载体,该培养基体的制备方法包括:提供所述载体及所述碳纳米管结构;将所述碳纳米管结构设置在所述载体的表面;对所述碳纳米管结构及载体进行灭菌处理;以及采用多聚赖氨酸溶液或聚醚亚酰胺溶液处理所述灭菌后的碳纳米管结构。
11.如权利要求1所述移植体的制备方法,其特征在于,在所述碳纳米管结构的极性化表面种植多个细胞的步骤为采用细胞液覆盖所述碳纳米管结构的极性化表面。
12.一种移植体,其包括:一碳纳米管结构及一生物组织,该碳纳米管结构的表面被极化,形成一极性化表面,该生物组织吸附在该碳纳米管结构的极性化表面,所述碳纳米管结构包括多个碳纳米管,该多个碳纳米管首尾相连形成一自支撑结构。
13.如权利要求12所述的移植体,其特征在于,所述碳纳米管结构的极性化表面是通过采用多聚赖氨酸溶液或聚醚亚酰胺溶液处理所述碳纳米管结构而形成的。
14.如权利要求12所述的移植体,其特征在于,该多个碳纳米管通过范德华力形成自支撑结构。
15.如权利要求14所述的移植体,其特征在于,所述碳纳米管结构表面的碳纳米管被极化,形成所述极性化表面,该极性化表面具有与所述生物组织相匹配的电荷极性。
16.如权利要求12所述的移植体,其特征在于,该移植体进一步包括一生物载体,所述碳纳米管结构设置在所述生物组织及该生物载体之间。
17.如权利要求16所述的移植体,其特征在于,所述生物载体的材料为无生物毒性材料或生物降解材料。
18.如权利要求12所述的移植体,其特征在于,所述生物组织为皮肤组织、肌肉组织或神经网络。
19.一种培养基体,用于培养生物组织,其包括一碳纳米管结构,该碳纳米管结构的表面被极化,形成一极性化表面,该极性化表面具有与待培养的生物组织相匹配的电荷极性,所述碳纳米管结构包括多个碳纳米管,该多个碳纳米管首尾相连形成一自支撑结构。
20.如权利要求19所述的培养基体,其特征在于,所述碳纳米管结构的极性化表面包括多个碳纳米管,该多个碳纳米管被极化。
21.如权利要求19所述的培养基体,其特征在于,该培养基体进一步包括一载体,所述碳纳米管结构设置在该载体的表面,且所述极性化表面远离该载体设置。
22.如权利要求21所述的培养基体,其特征在于,所述载体的材料为塑料、无生物毒性材料或生物降解材料。
23.如权利要求21所述的培养基体,其特征在于,该培养基体进一步包括一容器,该容器具有一内表面,所述载体设置在该容器的内表面与所述碳纳米管结构之间,且该容器为培养皿或表面皿。
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