CN102274142B

CN102274142B - 一种复方中药洗液的制备方法

Info

Publication number: CN102274142B
Application number: CN 201110202334
Authority: CN
Inventors: 葛喜珍; 万秋爽; 李想; 谷春秀; 王玥
Original assignee: College of Biochemical Engineering of Beijing Union University
Current assignee: College of Biochemical Engineering of Beijing Union University
Priority date: 2011-07-19
Filing date: 2011-07-19
Publication date: 2013-01-23
Anticipated expiration: 2031-07-19
Also published as: CN102274142A

Abstract

本发明涉及一种复方中药洗液的制备方法，其原料中药材及重量配比为：苦参6份、紫花地丁3-6份、大青叶3-6份、蛇床子2-3份、蒲公英2-3份、杜仲叶1-2份和银杏叶1-2份；所述制备方法为：称取药材并混合，以水浸泡，加入纤维素酶及果胶酶酶解；向酶解产物中加入水浸提三次，合并三次浸提的滤液，离心取上清液，上清液加入乙醇醇沉，取上清液，减压浓缩；双氧水脱色；加入辅剂，即得所述复方中药洗液。本发明洗液对需经常使用洗液洗手的医务人员是一个保护手部皮肤的很好选择，同时也适用于银行点钞人员、卫生防疫人员、宾馆服务人员洗手之用。

Description

一种复方中药洗液的制备方法

技术领域

本发明属于日用品领域，更具体地，涉及一种抗菌中药复方洗液的制备工艺和应用。

背景技术

目前，市场上的消毒剂品种繁多，以含氯消毒剂使用最为广泛，存在着稳定性差、腐蚀性强、毒性高、刺激性大等问题，而且普通液体洗涤剂中大多含有促氯分解的活性物质，使含氯洗涤剂的的消毒功能很难实现。洗手液是与人体皮肤相接触的产品，因此用于洗手液的消毒剂成分应该在具有高效消毒杀菌的同时不能有毒副作用，并且在一定时间内消毒彻底。

本专利加入纯中药复方提取液作为抗菌、抗病毒的主要成分，其刺激性小，对皮肤的伤害低，安全性高，对环境的污染小，真正符合人们对回归大自然的最求，对纯净生活的向往，是符合当今时代意义的高品质、绿色环保产品。

根据前期大量筛选，苦紫洗液由苦参、紫花地丁、蛇床子、大青叶、蒲公英、银杏叶、杜仲叶7味中药组成，以上中药均有清热解毒、抗菌、抗病毒之功效，含有抗菌、抗病毒的有效成分，将其酶解使其中的主要成分能更多溶出，脱色处理使其外观更美观，将提取液研制成抗菌、抗病毒洗手。上述药材资源丰富、成本低，适宜大量工业化生产。

发明内容

本发明的目的在于提供一种方法简单易行、成本低廉、适于大规模生产、具有杀菌作用的苦紫复方洗液的制备工艺。

为实现上述目的，本发明采取以下技术方案：

一种复方中药洗液的制备方法，其中，

所述复方中药洗液的原料中药材及重量配比为：苦参6份、紫花地丁3-6份、大青叶3-6份、蛇床子2-3份、蒲公英2-3份、杜仲叶1-2份和银杏叶1-2份；

所述制备方法的步骤如下：

a.称取原料中药材并混合均匀，加水至浸没药材3-5cm，浸泡，以HCl调节药材与水混合物的pH至4.5-5.0，按每1g药材加入1.67-2.2×10^-4g纤维素酶及0.5-0.9×10^-4g果胶酶的比例加入两种酶，搅拌均匀后，在50-55℃水浴中酶解2.5-3h；

b.向酶解产物中加入蒸馏水，加入水的重量与干燥原料中药材的重量之比为4-8∶1，80-90℃下浸提1小时后过滤，重复提取三次，合并滤液，3000r/min下离心20min，取上清液，向上清液中加入70体积％乙醇醇沉24h，取上清液，减压浓缩至液体体积与原料中药材重量之比为100mL∶100-120g，得到复方中药提取液；

c.双氧水脱色：在室温下，将提取液调pH至3.5-3.8，按照每100mL复方中药提取液加入6-8mL双氧水的比例加入30wt％双氧水，在黑暗处脱色处理24h，备用；

d.配制浓度为5％g/mL的聚乙烯醇水溶液，水浴加热至90℃，搅拌至完全溶解，在50-55℃水浴中保温，备用；

e.将30g十二烷基苯磺酸钠在50℃水浴中与800mL脱色后的复方中药提取液混合，溶解后加入椰油5mL；

f.完全溶解后，加入50℃水浴保温的用95体积％乙醇溶解的羊毛脂10g、液体石蜡10mL和羧甲基纤维素钠10g，再加入10mL的吐温-80，然后加入所述的保温的5％g/mL聚乙烯醇水溶液10mL，充分搅拌；

g.完全溶解后，将所得溶液冷却至35-40℃，加入山梨酸钾1g、尼泊金乙脂2g和氯化钠10g，再加入95体积％的乙醇80mL，最后用水定容至1000mL，即得所述复方中药洗液。

本发明的有益效果为：

1、本发明洗液具有明显的抗菌作用，对菌悬液内大肠杆菌和金黄色葡萄球菌作用5min，杀灭率均达100％。

2、本发明洗液产品安全性高，对环境的污染小。本发明洗液对家兔皮肤刺激反应积分值为0，对豚鼠皮肤致敏率为0，志愿者90人使用30天均无刺激和变态反应。洗液产品外观、稳定性、泡沫性能、去污力、pH值等均符合GB9985-2000的要求，澄清透明，气味芳香，pH值为6.5，接近皮肤环境。

3、本发明洗液所用原料药材和辅料成本低，且制备方法可行性强。

综上，本发明洗液对需经常使用洗液洗手的医务人员是一个保护手部皮肤的很好选择，同时也适用于银行点钞人员、卫生防疫人员、宾馆服务人员洗手之用。

具体实施方式

一、试剂与仪器

苦参、紫花地丁、大青叶、蛇床子、蒲公英、杜仲叶及银杏叶，购自河北安国中药材市场。

纤维素酶60万单位、果胶酶30万单位，湖州礼来生物技术有限公司产品。

30wt％双氧水，深圳市瑞鑫达实验仪器有限公司产品。

活性炭，唐山联合炭业科技有限公司产品。

十二烷基硫酸钠LAS，济南创龙化工公司产品。

聚乙烯醇、羧甲基纤维素钠、吐温-80、羊毛脂及椰油，天津市北方浩铭化工有限公司产品。

液体石蜡，广东省汕头市西陇化工厂产品。

尼泊金乙脂，上海福森化工有限公司产品。

METTLER AE100电子分析天平及RE-3000旋转蒸发仪，上海亚荣生化仪器厂产品。

SHZ-95B型循环水式多用真空泵，河南巩义市英峪予华仪器厂产品。

数显恒温水浴锅，型号HW·SY11-K，北京市长风仪器仪表公司产品。

KQ-50DE型数控超声波清洗器，昆山市超声仪器有限公司。

DZTW调温电热套，北京市永光明医疗仪器厂产品。

TU-1810PC紫外分光光度计，北京普系统用仪器有限公司产品。

DL-5低速大容量离心机，上海浦东物理光学仪器厂产品。

电热恒温鼓风干燥箱DHG-9070A型，上海一恒科学仪器有限公司产品。

二、中药提取液的制备

实施例1

复方药材比例为6∶3∶3∶3∶3∶2∶1，即按照苦参30g、紫花地丁15g、大青叶15g、蛇床子15g、蒲公英15g、杜仲叶10g、银杏叶5g的比例称量药材，加水至浸没药材3-5cm，浸泡。以稀盐酸调药材与水混合物pH至4.5，按每1g药材加入1.67×10^-4g纤维素酶和0.5×10^-4g果胶酶的比例加入两种酶，搅拌均匀后，在50℃水浴中酶解3h。

酶解产物加水浸提，三次浸提时分别加入8、7、6倍于原料干药材重量的水，分别在90℃下提取1小时，分别过滤后合并滤液。3000r/min下离心20min，取上清液。上清液以75体积％乙醇醇沉24h，取上清液，减压浓缩至100mL，即浓缩后的中药提取液体积与原料药材重量之比为1∶1.05(mL/g)。

实施例2

复方药材比例为6∶6∶3∶3∶3∶1∶1，即按照苦参30g、紫花地丁30g、大青叶15g、蛇床子15g、蒲公英15g、杜仲叶5g、银杏叶5g的比例称量药材，加水至浸没药材3-5cm，浸泡。以稀盐酸调药材与水混合物pH至5，按每1g药材加入2.2×10^-4g纤维素酶和0.9×10^-4g果胶酶的比例加入两种酶，搅拌均匀后，在52℃水浴中酶解2.5h。

酶解产物加水浸提，三次浸提时分别加入7、6、4倍于原料干药材重量的水，分别在85℃下提取1小时，分别过滤后合并滤液。3000r/min下离心20min，取上清液。上清液以75体积％乙醇醇沉24h，取上清液，减压浓缩至100mL，即浓缩后的中药提取液体积与原料药材重量之比为1∶1.15(mL/g)。

实施例3

复方药材比例为6∶5∶4∶3∶2∶1∶1，即按照苦参30g、紫花地丁25g、大青叶20g、蛇床子15g、蒲公英10g、杜仲叶5g、银杏叶5g的比例称量药材，加水至浸没药材3-5cm，浸泡。以稀盐酸调药材与水混合物pH至4.8，按每1g药材加入2.0×10^-4g纤维素酶和0.6×10^-4g果胶酶的比例加入两种酶，搅拌均匀后，在52℃水浴中酶解2.5h。

酶解产物加水浸提，三次浸提时分别加入8、5、5倍于原料干药材重量的水，分别在87℃下提取1小时，分别过滤后合并滤液。3000r/min下离心20min，取上清液。上清液以75体积％乙醇醇沉24h，取上清液，减压浓缩至100mL，即浓缩后的中药提取液体积与原料药材重量之比为1∶1.1(mL/g)。

三、中药提取液的脱色

A.活性炭脱色：用去离子水将活性炭洗净，将其煮沸，持续搅拌1h，用去离子水冲洗，以除去表面吸附物。用布式漏斗过滤，将滤出活性炭置于坩埚，160℃马弗炉烘干2h，待冷确即可。脱色处理：按照100g药材加入7-8g活性炭的比例向提取液中加入活性碳，加热至微沸，持续搅拌30min，趁热抽滤，得滤液，定容。

B.双氧水脱色：室温下，将提取液调节pH至3.5-3.8，按照100mL提取液加入6-8mL双氧水的比例，加入30wt％双氧水，在黑暗处脱色处理24h，即可。

脱色效果评定：评定色泽和脱色工艺效果的标准有适用于浅色的罗维朋比色法和适用于深色的分光光度法。本发明提取液外观呈黄褐色，属于深色产品，故采用深色的分光光度法，通过测得在固定波长下的透光率测定脱色效果。不同产品的固定波长不一样，一般在400-700nm之间。将本提取液加入1cm的比色皿中，用分光光度计测定从400-700nm的吸光值，测试结果表明，产品在661nm处有最大吸收峰，故以661nm光谱吸收计算脱色率。

脱色率＝(A0-A1)/A0×100％，式中：A0为脱色前的吸光值；A1为脱色后的吸光值。

上述两种脱色方法的效果见表1。

表1复方提取液的脱色效果

实验证明，苦紫复方提取液的最佳脱色方法为30wt％双氧水，用量为60mL/L提取液，在黑暗处脱色处理24h，脱色率高、简单、易行。

四、洗液的制备

配置5％g/mL的聚乙烯醇水溶液，水浴加热至90℃，搅拌至完全溶解，将其在50-55℃水浴中保温备用。

按照表2的配方中的加入量，将十二烷基苯磺酸钠在50℃水浴中与药液溶解，加入椰油，待其完全溶解后，加入事先用热乙醇溶解的羊毛脂、液体石蜡和羧甲基纤维素钠，然后加入吐温-80，然后加入保温的聚乙烯醇，充分粉搅拌，待完全溶解后，将上述溶液冷却至35-40℃加入山梨酸钾、尼泊金乙脂和氯化钠适量，用蒸馏水定容置100ml，即得。

表2洗液配方

制得洗液的性状见表3。

表3各组配方制得洗液的性状

结果：试验6为最佳配方。即将30g十二烷基苯磺酸钠在50℃水浴中与800mL中药提取液混合，溶解后加入椰油5mL；待其完全溶解后，加入预先在50℃水浴中保温的用95体积％乙醇溶解的羊毛脂10g、液体石蜡10mL和羧甲基纤维素钠10g，再加入10mL的吐温-80，然后加入前述的保温的5％g/mL聚乙烯醇水溶液10mL，充分搅拌；待完全溶解后，将上述溶液冷却至35-40℃，加入山梨酸钾1g、尼泊金乙脂2g和氯化钠10g，再加入95体积％乙醇80mL，最后用水定容至1000mL，即制得本发明洗液成品。大规模生产时，各组分用量可等比例放大。

五、洗液质量检查

根据GB9985-2000，检测洗液的气味、高温稳定性、低温稳定性、泡沫性能、去污力与pH值等指标，结果见表4。

表4洗液各项指标

六、洗液定量杀菌试验

在25℃条件下进行试验。将洗液原液(阳性对照为PBS溶液)以5.0mL量分装到无菌试管内，加入0.1mL菌悬液混合均匀。作用至规定时间，取菌药混合液0.5mL加入到装有4.5mL中和剂的试管内混匀，终止杀菌作用。所述中和剂为4g/L聚山梨醇-80、8g/L卵磷脂和10g/L琼脂溶于水中的混合液。中和作用10min后，取0.5mL该液作活菌计数，计算杀灭率。试验重复3次，结果见表6。

表6本发明中药洗液的杀菌效果

试验表明，用本发明中药洗液原液对悬液内大肠杆菌和金黄色葡萄球菌作用5min，杀灭率可达100％。

七、毒性试验

(1)皮肤刺激试验

选体重为2.0±0.2kg的新西兰种家兔4只(北京维通利华实验动物技术有限公司，许可证号：SCXK(京)2005-0003)，采用一次皮肤刺激试验法。试验前24h，剪去家兔背部脊柱两侧各约3cm×3cm范围的毛。将本发明洗液原液0.5mL滴在3cm×3cm的3层纱布上，敷贴于兔子背部左侧去毛皮肤上，玻璃纸覆盖后，用胶布固定；右侧皮肤以蒸馏水作对照。敷贴5h，用温水洗去皮肤上残留洗液，并于洗后2h、24h、48h、72h分别观察皮肤局部反应，评价刺激强度。结果表明，该洗液原液作用家兔皮肤作用后，未见有红斑和水肿反应，刺激反应积分值为0，按皮肤刺激强度分级标准，属无刺激性。

(2)皮肤变态反应

选体重0.25-0.30kg的健康白色豚鼠51只(由北京医科大学实验动物中心提供)，随机分成试验组、阴性对照组和阳性对照组共三组，每组17只，雌雄各半。试验前24h，将试验组豚鼠背部两侧2.5cm×2.5cm范围内的毛去掉，取0.5mL洗液滴在2.5cm×2.5cm大小的2层纱布上敷贴在豚鼠背部一侧去毛皮肤上，用一层玻璃纸覆盖，以胶布固定，持续作用6h，作为初次接触致敏。分别于第7d、14d、21d用同法各重复一次接触致敏。阳性对照组用10mg/mL浓度的2，4-二硝基氟苯替代本发明洗液，阴性对照以蒸馏水作为致敏接触。在末次致敏后21d，按上述方法将滴有洗液的纱布敷贴于受试豚鼠背部另一侧的去毛区，作为激发接触致敏。阳性对照组用8mg/mL浓度的2，4-二硝基氟苯激发处理，洗液组给予本发明洗液激发处理。于除药后24和48h后观察受试皮肤反应。结果表明，各组豚鼠在激发接触洗液后，均未见受试皮肤出现红斑和水肿反应等刺激反应。皮肤致敏率为0，表明洗液对豚鼠皮肤无致变态反应。

九、志愿者试验

选择21-60岁大学生和教师志愿者95例，其中女性63例，男性32例，早、中、晚各用洗液洗手1次，连续60d。均未见致敏和变态反应。

Claims

1.一种复方中药洗液的制备方法，其特征在于，所述复方中药洗液的原料中药材及重量配比为：苦参6份、紫花地丁3-6份、大青叶3-6份、蛇床子2-3份、蒲公英2-3份、杜仲叶1-2份和银杏叶1-2份；所述制备方法为：称取药材并混合，以水浸泡，加入纤维素酶及果胶酶酶解；向酶解产物中加入水浸提三次，合并三次浸提的滤液，离心取上清液，上清液加入乙醇醇沉，取上清液，减压浓缩得到复方中药提取液；双氧水脱色后加入辅剂，所述的加入辅剂是指按照以下步骤进行操作：

配制5%g/mL的聚乙烯醇水溶液，水浴加热至90℃，搅拌至完全溶解，将其在50-55℃水浴中保温备用；

将30g十二烷基苯磺酸钠在50℃水浴中与800mL中药提取液混合，溶解后加入椰油5mL；

待其完全溶解后，加入预先在50℃水浴中保温的用95体积%乙醇溶解的羊毛脂10g、液体石蜡10mL和羧甲基纤维素钠10g，再加入10mL的吐温-80，然后加入前述的保温的5%g/mL聚乙烯醇水溶液10mL，充分搅拌；

待完全溶解后，将上述溶液冷却至35-40℃，加入山梨酸钾1g、尼泊金乙酯2g和氯化钠10g，再加入95体积%乙醇80mL，最后用水定容至1000mL，即得到所述复方中药洗液，大规模生产时，各组分用量可等比例放大。

2.一种复方中药洗液的制备方法，其特征在于，

所述制备方法的步骤如下：

b.向酶解产物中加入蒸馏水，加入水的重量与干燥原料中药材的重量之比为4-8:1，80-90℃下浸提1小时后过滤，重复提取三次，合并滤液，3000r/min下离心20min，取上清液，向上清液中加入70体积%乙醇醇沉24h，取上清液，减压浓缩至液体体积与原料中药材重量之比为100mL:100-120g，得到复方中药提取液；

c.双氧水脱色：在室温下，将提取液调pH至3.5-3.8，按照每100mL复方中药提取液加入6-8mL双氧水的比例加入30wt%双氧水，在黑暗处脱色处理24h，备用；

f.完全溶解后，加入50℃水浴保温的用95体积%乙醇溶解的羊毛脂10g、液体石蜡10mL和羧甲基纤维素钠10g，再加入10mL的吐温-80，然后加入所述的保温的5%g/mL聚乙烯醇水溶液10mL，充分搅拌；

g.完全溶解后，将所得溶液冷却至35-40℃，加入山梨酸钾1g、尼泊金乙酯2g和氯化钠10g，再加入95体积%的乙醇80mL，最后用水定容至1000mL，即得所述复方中药洗液。

3.按照权利要求2所述的制备方法制成的复方中药洗液。