CN101979403A - 新型半胱氨酸天冬氨酸广谱蛋白酶抑制剂及其制备方法和用途 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种新型半胱氨酸天冬氨酸广谱蛋白酶抑制剂及其制备方法和用途。该抑制剂具有式I所示结构的化合物或其光学异构体。本发明的化合物与临床药物IDN-6556相比有更低的IC50，并且比动物实验药物Q-VD-OPH更好的IC50，因此本发明的化合物很有希望应用于制备治疗乙型肝炎药物。
Description
技术领域
本发明属于药物化学领域，具体涉及一种半胱氨酸天冬氨酸广谱蛋白酶抑制剂及其制备方法和在药物方面的用途。
背景技术
细胞凋亡(apoptosis)或程序化细胞死亡(programmed cell death，PCD)，是多细胞有机体为调控机体发育，维护内环境稳定基因控制的细胞主动死亡过程。细胞凋亡是以细胞核浓缩、染色体DNA被以核小体为单位切成梯状片段(ladder)、细胞缩小，最终形成细胞凋亡小体等形态变化为特征。细胞凋亡的重要标志是caspase酶的激活。caspase是一组存在于胞质溶胶中的结构上相关的半胱氨酸蛋白酶，它们可特异地断开天冬氨酸残基后的肽键。切割的结果是使某些蛋白活化或失活，由此引发CASPASE级联反应。CASPASE级联反应将导致细胞由正常功能的细胞变成凋亡细胞。正常的细胞凋亡发生于各种生命体，并且有助于保持生命体的内稳性(homeostasis)。但是不正常的细胞凋亡往往就和恶性疾病联系在一起，特别是肝脏疾病。
针对细胞凋亡抑制剂在药物方面的应用已经有诸多的报道。例如：最原型的caspase抑制剂Z-VAD-FMK曾被应用于各种动物实验和各种细胞凋亡有关的研究，比方说肝脏损伤。最近几年对其他新型caspase抑制剂的研究表明，它们能有效的治疗啮齿目动物的肝脏疾病。这些前期研究表明广谱caspase抑制剂将非常有可能用于治疗人类的肝脏疾病。在很多常见肝脏疾病中，对肝细胞通常都能检测到异常高的细胞凋亡活性。这些疾病包括肝移植后的损伤，酒精性肝炎，威尔逊氏病，以及最常见的病毒性肝炎(B，C型)等。
作为细胞凋亡的最重要一环，Caspase和炎症以及细胞死亡密切相关，所以，以Caspase成为目标物的药物大多都有非常好的应用前景。病毒性肝炎(B型和C型)就是一个很好的例子。正是基于这个基本的论断，位于美国圣地亚哥的Idun Pharmaceuticals成功的研发了，IDN-6556，一种广谱caspase抑制剂，并获得了FDA的Orphan Drug认证。现在这个药在进行二期临床。主要面向病人就是丙型病毒性肝炎患者和肝移植后的肝损伤患者，该药物能够有效减少这类病人的血浆ALT活性。这是第一种应用在人体上的caspase抑制剂药物。所有的临床试验数据表明，该药物效力强，见效快，而且主要在肝脏富集，是非常有前途推向市场的新药。Orphan Drug认证是FDA为了鼓励制药公司研发面向较小市场的新药而制定的规范。虽然病毒性肝炎在美国是个小市场，但是在中国就是一个很大的市场，这类新药的研制必定会带来可观的利润。
发明内容
本发明的目的是在现有技术的基础上，提供一种新型的对乙型肝炎具有治疗活性的半胱氨酸天冬氨酸广谱蛋白酶抑制剂。
我们利用高通量虚拟筛选及合理设计的方法先进行药物先导物的发现，针对疾病相关的几类蛋白质靶标开展药物设计、合成及生物活性评价。同时着重研究药物设计中的难点问题，从事计算生物，药物辅助设计和分子模拟的研究。应用同源建模原理建立生物大分子模型，采用生物大分子三维结构的分子对接方法来研究小分子与生物大分子结合的三维结构和结合的强度。并根据现有药物的结构、理化性质与活性关系的分析建立定量构效关系、药效基团模型和分子动力模型，运用先进的虚拟筛选技术从数据库搜寻新药。
我们应用了先进的新药模拟筛选技术--计算机辅助药物设计(CADD)，以人类Capase-3和天然多肽(N-acetyl-L-tyrosyl-L-valyl-L-alanyl-L-aspartic acid)的共晶体结构为参照，并选取IDN-6556和其他机构非常相似的Caspase抑制剂及其实验结果作为起点，来进行新的药物分子的筛选。通过CADD技术对候选结构的药物活性进行半定量的预测，通过空间和数字模拟找出和受体结合最佳的分子，进而筛选出和参照结构有相近甚至更好生物活性的目标分子，一些预测并无很好生物活性的分子在进行生物试验之前就直接被淘汰，大大节省了时间和金钱。因为我们同时了解已知活性的目标分子(IDN-6556和其他相似抑制剂)和受体的性质(Caspase)，我们就可以同时运用两种不同的方法(基于配体的和基于受体的设计)进行筛选，这样也大大曾加了结果的可靠性。我们最终锁定了的非常有前途的活性结构，在酶试验和细胞试验中，新设计的活性化合物和临床药物IDN-6556有更低的IC50，并且比动物实验药物Q-VD-OPH更好的IC50。
本发明的目的可以通过以下措施达到：
一种半胱氨酸天冬氨酸广谱蛋白酶抑制剂，该类化合物或其光学异构体具有式I所示结构，
式中，
A环为五元含氮杂环或六元环，优选为吡咯、咪唑或苯环，进一步优选为吡咯或苯环。
X为O、N、S，或者X两端的碳原子之间直接形成单键；X优选为O、N，或者X两端的碳原子之间直接形成单键。
Y为-CH＝或者Y两端的碳原子之间直接形成单键，且X两端的碳原子与Y两端的碳原子不同时形成单键；
X1为单取代或多取代的卤素；X1优选为单取代或多取代的氯或氟。
R1为单取代或多取代的H或C1-10烷基；R1优选为单取代或多取代的H或C1-6烷基；R1进一步优选为单取代或多取代的H或C1-4烷基。
R2为H或C1-6烷基；R2优选为H。
本发明的“五元含氮杂环”，是指含有N原子的饱和或不饱和的五元环，如吡咯、噻唑、咪唑等。
本发明中的“X两端的碳原子之间直接形成单键”是指X处仅为单键，而无其他杂原子，当X两端的碳原子之间直接形成单键时，X所处的六元环即变为五元环。
本发明中，“Y为-CH＝”时，是指Y亚甲基，且该亚甲基与羰基的碳原子之间为单键相连，与X和Y之间的碳原子之间为双键相连。
本发明中的“Y两端的碳原子之间直接形成单键”是指Y处仅为单键，且无其他原子，当Y两端的碳原子之间直接形成单键时，Y所处的六元环即变为五元环。
X与Y所处的环由于X与Y的不同选择，使得X与Y所处的环可以为4-酮-二氢吡喃、3-酮-二氢呋喃、3-酮-环丙烯、4-酮-二氢吡啶、6-酮-1，4，5，6-四氢环戊二烯等。
本发明的化合物进一步优选选自如下化合物：
3-(2-(3-叔丁基-6-酮-1，4，5，6-四氢环戊二烯并[b]吡咯-5-甲酰胺基)-3-甲基丁酰胺基)-5-(4-氯苯氧基)-4-酮戊酸；
(R)-3-((S)-3-甲基-2-(4-酮-4，7-二氢吡喃[2，3-b]吡咯-2-甲酰胺基)丁酰胺)-4-酮-5-(2，3，5，6-四氟苯氧基)戊酸；
(R)-3-((S)-2-(6，8-二叔丁基-4-酮-4H-苯并吡喃-2-甲酰胺基)-3-甲基丁酰胺基)-4-酮-5-(2，3，5，6-四氯苯氧基)戊酸；
(R)-5-(2，6-二氟苯氧基)-3-((S)-3-甲基-2-(5-甲基-3-酮-2，3-苯并二氢呋喃-2-甲酰胺基)丁酰胺基)-4-酮戊酸；(R)-5-(2，6-二氟苯氧基)-3-((S)-3-甲基-2-(1-酮-1H-茚-3-甲酰胺基)丁酰胺基)-4-酮戊酸；
(R)-3-((S)-2-(6，8-二叔丁基-4-酮-1，4-二氢喹啉-2-甲酰胺基)-3-甲基丁酰胺基)-4-酮-5-(五氟苯氧基)戊酸。
本发明的化合物的制备方法，其特征在于当R2为H时，其反应路线如下：
式I化合物先与式II化合物反应制备式III化合物，再脱保护得到式IV化合物，式IV化合物与式V化合物反应制备式VI化合物，式VI化合物在碱性条件下得到式VII化合物后再与CH2N2反应制备IX化合物，再与卤代苯酚反应制备化合物X，最后脱保护得到化合物XI，其中R基团为
当R2为H时，更详细的合成路线如下：
本发明的化合物，当R2为C1-6烷基时，其反应路线如下：
式I化合物先与式II化合物反应制备式III化合物，再脱保护得到式IV化合物，式IV化合物与式V’化合物反应制备式VI’化合物，式VI’化合物进一步得到式VII’化合物后再与CH2N2反应制备IX’化合物，再与卤代苯酚反应制备化合物XI，其中R基团为
当R2为C1-6烷基时，更详细的合成路线如下：
本发明的化合物与临床药物IDN-6556相比有更低的IC50，并且比动物实验药物Q-VD-OPH更好的IC50，因此本发明的化合物很有希望应用于制备治疗乙型肝炎药物。
附图说明
图1.实施例1化合物和其前体Q-VD-OPH的浓度反应曲线。
图2.实施例1化合物抑制程序性细胞凋亡的浓度曲线。X轴表示Log2(化合物浓度)(μM).Y轴表示在只加入0.4μM staurosporine(红线)，或同时加入不同浓度新型活性化合物时，与只加DMSO空白对照而言(100％)相比的相对细胞存活率。
图3.实施例1化合物抑制程序性细胞凋亡的浓度曲线。X轴表示Log2(化合物浓度)(μM).Y轴表示新型活性化合物诱导的细胞存活率。
具体实施方式
实施例1：3-(2-(3-叔丁基-6-酮-1，4，5，6-四氢环戊二烯并[b]吡咯-5-甲酰胺基)-3-甲基丁酰胺基)-5-(4-氯苯氧基)-4-酮戊酸
一、
1、250毫升三颈瓶放入10毫升DMF，0.856克(5毫摩尔)H-Val-OtBu，1.11克(5毫摩尔)原料1，0.675克(5毫摩尔)HOBt，1克(5毫摩尔)HBTU，和4.3毫升(25毫摩尔)DIEA，搅拌至全部溶解。继续在室温下搅拌1个小时。加入200毫升乙酸乙酯继续搅拌2分钟后，用分液漏斗分出乙酸乙酯层。有机相依次用100毫升水，100毫升碳酸氢钠饱和溶液和100毫升氯化钠水溶液荡洗。分离有机相后，用无水硫酸镁干燥2小时。旋转蒸发仪除去溶剂后得到粗中间产物2。粗中间产物2用柱色谱纯化后(乙酸乙酯∶正己烷＝3∶7，Rf＝0.54)得到中间产物2，1.62克，产率86％。中间产物2质谱：M+1＝377.23
2、将中间产物2溶解于少量95％的三氟乙酸后，继续搅拌一小时。减压(或用氮气吹)除去大部分三氟乙酸后，加入20毫升正己烷，得到白色沉淀。沉淀用正己烷洗三次后，置于真空中干燥，得到1.2克(3.7毫摩尔)产物3，产率88％。化合物3质谱：M+1＝321.20
二、
1、250毫升三颈瓶放入10毫升DMF，0.751克(3.7毫摩尔)H-Asp(OtBu)-OMe，1.2克(3.7毫摩尔)化合物3，0.54克(4毫摩尔)HOBt，1.52克(4毫摩尔)HBTU，和2.5毫升(15毫摩尔)DIEA，搅拌至全部溶解。继续在室温下搅拌1个小时。加入200毫升乙酸乙酯继续搅拌2分钟后，用分液漏斗分出乙酸乙酯层。有机相依次用100毫升水，100毫升碳酸氢钠饱和溶液和100毫升氯化钠水溶液荡洗。分离有机相后，用无水硫酸镁干燥2小时。旋转蒸发仪除去溶剂后得到粗中间产物4。粗中间产物4用柱色谱纯化后(乙酸乙酯∶正己烷＝3∶7，Rf＝0.3)得到中间产物4，(1.3克，2.6毫摩尔)，产率70％。化合物4质谱：M+1＝506.18.
2、将中间产物4(1.3克，2.6毫摩尔)溶解于8毫升乙氰和15毫升0.25N的氢氧化钠溶液组成的混和溶液，室温下搅拌2个小时。反应结束后加入30毫升水并用2x50毫升乙酸乙酯洗涤。分理出水相，用6N盐酸调节pH值至2.0。用3x50毫升乙酸乙酯萃取水相，合并有机相后用无水硫酸镁干燥2小时。减压下除去溶剂后，得到产物5，0.93克(1.9毫摩尔)，产率74％。
三、重氮甲烷的制备
1、在配有滴液漏斗、冷凝管和接收装置的200毫升蒸馏烧瓶内放入50毫升96％的乙醇和10克(0.18毫摩尔)氢氧化钾，接收端用一个500毫升的烧瓶接收，并将接受容器置于冰盐浴中。蒸馏装置尾气用置于冰盐浴中的乙醚吸收。(装置图略)
2、将蒸馏烧瓶加热至60～65C，然后通过滴液漏斗逐滴加入250毫升，4.3克(0.2毫摩尔)N-methyl-N-nitroso-p-toluenesulphonamide的乙醚溶液，控制滴加速度在45分钟内加完所有溶液，并尽量保持滴加速度和蒸馏速度平衡。全部滴加完后，滴液漏斗内加入30毫升乙醚，继续滴加至蒸馏出的液体变为无色。
3、合并蒸馏出的乙醚溶液和吸收装置中的乙醚溶液，直接将溶液用于下一步反应。溶液呈黄色，含有5.9～6.1克重氮甲烷，产率70％。
四、
1、将化合物5(0.9克，1.9毫摩尔)和N-甲基吗啡啉(N-methyl morpholine，0.202克，2毫摩尔)溶解于5毫升干燥四氢呋喃(THF)溶液中，干燥环境下冷却至-20C。加入(0.27克，2毫摩尔)氯甲酸异丁酯(Isobutyl Chloroformate)-20C下搅拌15分钟。加入25毫升冷的四氢呋喃(THF)溶液，过滤反应混合物。
2、收集滤液并加入50毫升新制备的重氮甲烷乙醚溶液，0C下搅拌1个小时后让反应自然升温至室温。减压除去溶剂得到粗产物。
3、用柱色谱纯化粗产物(乙酸乙酯∶正己烷＝1∶1，Rf＝0.4)得到产物6(0.67克，1.33毫摩尔)，产率70％。
五、
1、将化合物6(0.67克，1.33毫摩尔)溶解在50毫升四氢呋喃和乙醚的混合溶剂中(THF∶Ether＝1∶1，v/v)中并冷却至-15C。将33％的溴化氢乙酸溶液溶解于10毫升同样的混合溶剂中，并在搅拌下，滴加入化合物6的溶液，滴加过程控制在15分钟左右。用TLC跟踪反应，直到反应完全。升温至0度后继续反应1小时，然后自然升至室温。加入50毫升饱和氯化钠水溶液终止反应。
2、用50毫升四氢呋喃和乙醚的混合溶剂萃取反应混合物，有机相先后用50毫升饱和碳酸氢钠水溶液和50毫升饱和氯化钠水溶液荡洗。分离有机相并用无水硫酸镁干燥2小时。减压除去溶剂得到中间产物7(白色粉末)，0.57克(1.01毫摩尔)，产率76％。
3、将中间产物7，0.57克(1.01毫摩尔)，溶解于8毫升DMF中，并加入0.26克，(2毫摩尔)对氯苯酚和500毫克氟化钾，搅拌过夜。反应结束后用100毫升乙酸乙酯萃取水层。有机相先后用50毫升水，50毫升饱和氯化钠水溶液洗涤。有机相并用无水硫酸镁干燥2小时。减压除去溶剂得到粗产物，粗产物用硅胶柱色谱纯化(乙酸乙酯∶正己烷＝1∶1，Rf＝0.5)得到中间产物8，308毫克(0.5毫摩尔)，产率50％。
4、将中间产物8溶解于少量95％的三氟乙酸后，继续搅拌一小时。减压(或用氮气吹)除去大部分三氟乙酸后，加入20毫升正己烷，得到白色沉淀。沉淀用正己烷洗三次后，置于真空中干燥，得到277毫克(0.49毫摩尔)最终产物9，产率99％。
化合物9质谱：M+1＝560.18，核磁共振氢谱：δ＝0.99(6H，q，-CH(CH3)2)，1.31(9H，s，-C(CH3)3)，2.65(1H，m，-CH-)，2.79(2H，d，-CO-CH2-)，3.01(2H，m，-CH2-)，3.68(1H，m，-CO-CH-CO-)，4.52(1H，m，-CO-CH-N)，4.78(1H，m，-CO-CH-N)，6.52(1H，s，C＝CH-N)，7.03～7.38(4H，dd，-O-C6H4-Cl)，8.03(2H，m，-NH-CO-)
实施例2：(R)-3-((S)-3-甲基-2-(4-酮-4，7-二氢吡喃并[2，3-b]吡咯-2-甲酰胺基)丁酰胺)-4-酮-5-(2，3，5，6-四氟苯氧基)戊酸
按实施例1的方法，以4-酮-4，7-二氢吡喃并[2，3-b]吡咯-2-甲酸代替化合物1，以2，3，5，6-四氟苯酚代替步骤五中的对氯苯酚，制备(R)-3-((S)-3-甲基-2-(4-酮-4，7-二氢吡喃并[2，3-b]吡咯-2-甲酰胺基)丁酰胺)-4-酮-5-(2，3，5，6-四氟苯氧基)戊酸。质谱：M+1＝556.43。
实施例3：(R)-3-((S)-2-(6，8-二叔丁基-4-酮-4H-苯并吡喃-2-甲酰胺基)-3-甲基丁酰胺基)-4-酮-5-(2，3，5，6-四氯苯氧基)戊酸
按实施例1的方法，以6，8-二叔丁基-4-酮-4H-苯并吡喃-2-甲酸代替化合物1，以2，3，5，6-四氯苯酚代替步骤五中的对氯苯酚，制备(R)-3-((S)-2-(6，8-二叔丁基-4-酮-4H-苯并吡喃-2-甲酰胺基)-3-甲基丁酰胺基)-4-酮-5-(2，3，5，6-四氯苯氧基)戊酸。质谱：M+1＝745.49。
实施例4：(R)-5-(2，6-二氟苯氧基)-3-((S)-3-甲基-2-(5-甲基-3-酮-2，3-苯并二氢呋喃-2-甲酰胺基)丁酰胺基)-4-酮戊酸
按实施例1的方法，以5-甲基-3-酮-2，3-苯并二氢呋喃-2-甲酸代替化合物1，以2，6-二氟苯酚代替步骤五中的对氯苯酚，制备(R)-5-(2，6-二氟苯氧基)-3-((S)-3-甲基-2-(5-甲基-3-酮-2，3-苯并二氢呋喃-2-甲酰胺基)丁酰胺基)-4-酮戊酸。质谱：M+1＝533.49。
实施例5：(R)-5-(2，6-二氟苯氧基)-3-((S)-3-甲基-2-(1-酮-1H-茚-3-甲酰胺基)丁酰胺基)-4-酮戊酸
按实施例1的方法，以1-酮-1H-茚-3-甲酸代替化合物1，以2，6-二氯苯酚代替步骤五中的对氯苯酚，制备(R)-5-(2，6-二氟苯氧基)-3-((S)-3-甲基-2-(1-酮-1H-茚-3-甲酰胺基)丁酰胺基)-4-酮戊酸。质谱：M+1＝548.38。
实施例6：(R)-3-((S)-2-(6，8-二叔丁基-4-酮-1，4-二氢喹啉-2-甲酰胺基)-3-甲基丁酰胺基)-4-酮-5-(五氟苯氧基)戊酸
按实施例1的方法，以6，8-二叔丁基-4-酮-1，4-二氢喹啉-2-甲酸代替化合物1，以五氟苯酚代替步骤五中的对氯苯酚，制备(R)-3-((S)-2-(6，8-二叔丁基-4-酮-1，4-二氢喹啉-2-甲酰胺基)-3-甲基丁酰胺基)-4-酮-5-(五氟苯氧基)戊酸。质谱：M+1＝696.67。
酶和细胞试验
材料和方法
1.测化合物半数抑制浓度常数(IC50)
本实验采用CASPASE-3荧光试剂盒(SIGMA-ALDRICH；CASP3F-1KT).其中主要包括底物acetyl Asp-Glu-Val-Asp 7-amido-4-methylcoumarin(Ac-DEVD-AMC)，缓冲剂(20mM HEPES，pH 7.4，2mM EDTA，0.1％CHAPS，5mM DTT)和活性形式的CASPASE-3酶(SIGMA-ALDRICH；C1224).水解作用释放所得7-amino-4-methylcoumarin(AMC)的荧光强度表征酶活性强度.本实验用高度精确，敏感和快速的2104
Xcite MultilabelReader(PerkinElmer，USA)测量荧光强度(AMC的激发波长和发射波长分别为360nm和460nm).
实验反应在黑色平底Corning 96孔板(SIGMA-ALDRICH；CLS3631)中进行.反应体积为200微升.根据试剂盒使用说明书，CASPASE-3酶浓度和底物浓度分别设为12.5pg/μl和16.6μM.反应中采用前体化合物Q-VD-OPH作为有效酶抑制剂的阳性对照.实验中采用4倍稀释以得到10个新型活性化合物或Q-VD-OPH的浓度点.实验采用不加任何抑制剂的反应作为阳性对照，并以不加酶的反应作为空白对照.反应开始后2小时内每10分钟测得荧光强度以得到酶动态曲线.为保准确度和可重复性，每个数据点至少重复2次，并且整个实验独立重复3次.数据分析采用PRISM软件包得到非线性拟合曲线.
2.测化合物细胞学活性
在96孔板内，HeLa细胞以20,000个/孔的密度生长在200微升含10％小牛血清(INVITROGEN；26140)的DMEM(Dulbecco′s Modified Eagle Medium)(INVITROGEN；10313)培养液内.过夜培养后，加入起始浓度为25μM以两倍逐量稀释的化合物.在部分孔中同时加入0.4μM staurosporine.20小时后，每孔内加入CellTiter-Glo(Promega，G7570)，并用2104Xcite Multilabel Reader(PerkinElmer，USA)测得用光强代表的活细胞数量.
结果
1.IC50
实施例1化合物和其前体Q-VD-OPH的浓度反应曲线如图1所示(X轴代表抑制剂浓度对数，Y轴代表酶活性).根据非线性拟合曲线，新型活性化合物和Q-VD-OPH的IC50分别为13.6nM 72.3nM.3次独立重复实验得到类似结果.因此，新型活性化合物的活性比Q-VD-OPH提高了～5.3倍，成为目前活性最强的CASPASE-3酶抑制剂之一.
2.细胞学活性
Staurosporine在HeLa细胞中诱导部分通过CASPASE-3传导的程序性死亡(Janickeet al 1998).如图2所示，加入0.4μM staurosporine 20小时后，HeLa细胞存活率为～23.5％.新型活性化合物以与浓度成正相关的趋势增加细胞存活率(图2)，从而证明新型活性化合物可进入细胞达到预期的作用.与Janicke et al的报导相似，我们发现12.5μM的新型活性化合物导致最高细胞存活率为67.9％.新型活性化合物不能完全抑制staurosporine诱导的程序性死亡从侧面证明新型活性化合物只抑制CASPASE-3，而不抑制其它CASPASE成员.
新型活性化合物抑制CASPASE-3的动态曲线由相对细胞存活率((细胞存活率-23.5％)/67.9％)得到.如图3所示，新型活性化合物(实施例1化合物)的IC50为95.9nM(53.8～170.9nM，95％可信区间).
本发明各实施例的化合物的实验结果如下：
Claims (10)
1.一种式I所示结构的化合物或其光学异构体，
式中，
A环为五元含氮杂环或六元环；
X为O、N、S，或者X两端的碳原子之间直接形成单键；
Y为-CH＝或者Y两端的碳原子之间直接形成单键，且X两端的碳原子与Y两端的碳原子不同时形成单键；
X1为单取代或多取代的卤素；
R1为单取代或多取代的H或C1-10烷基；
R2为H或C1-6烷基。
2.根据权利要求1所述的化合物或其光学异构体，其中A环为吡咯、咪唑或苯环。
3.根据权利要求1所述的化合物或其光学异构体，其中X为O、N，或者X两端的碳原子之间直接形成单键。
4.根据权利要求1所述的化合物或其光学异构体，其中X1为单取代或多取代的氯或氟。
5.根据权利要求1所述的化合物或其光学异构体，其中R1为单取代或多取代的H或C1-6烷基。
6.根据权利要求1所述的化合物或其光学异构体，其中R2为H。
7.根据权利要求1所述的化合物或其光学异构体，其中所述的化合物选自：
3-(2-(3-叔丁基-6-酮-1，4，5，6-四氢环戊二烯并[b]吡咯-5-甲酰胺基)-3-甲基丁酰胺基)-5-(4-氯苯氧基)-4-酮戊酸；
(R)-3-((S)-3-甲基-2-(4-酮-4，7-二氢吡喃[2，3-b]吡咯-2-甲酰胺基)丁酰胺)-4-酮-5-(2，3，5，6-四氟苯氧基)戊酸；
(R)-3-((S)-2-(6，8-二叔丁基-4-酮-4H-苯并吡喃-2-甲酰胺基)-3-甲基丁酰胺基)-4-酮-5-(2，3，5，6-四氯苯氧基)戊酸；
(R)-5-(2，6-二氟苯氧基)-3-((S)-3-甲基-2-(5-甲基-3-酮-2，3-苯并二氢呋喃-2-甲酰胺基)丁酰胺基)-4-酮戊酸；
(R)-5-(2，6-二氟苯氧基)-3-((S)-3-甲基-2-(1-酮-1H-茚-3-甲酰胺基)丁酰胺基)-4-酮戊酸；
(R)-3-((S)-2-(6，8-二叔丁基-4-酮-1，4-二氢喹啉-2-甲酰胺基)-3-甲基丁酰胺基)-4-酮-5-(五氟苯氧基)戊酸。
8.权利要求1～7中任一所述的化合物或其光学异构体的制备方法，其特征在于当R2为H时，其反应路线如下：
式I化合物先与式II化合物反应制备式III化合物，再脱保护得到式IV化合物，式IV化合物与式V化合物反应制备式VI化合物，式VI化合物在碱性条件下得到式VII化合物后再与CH2N2反应制备IX化合物，再与卤代苯酚反应制备化合物X，最后脱保护得到化合物XI，其中R基团为
9.权利要求1～7中任一所述的化合物的制备方法，其特征在于当R2为C1-6烷基时，其反应路线如下：
式I化合物先与式II化合物反应制备式III化合物，再脱保护得到式IV化合物，式IV化合物与式V’化合物反应制备式VI’化合物，式VI’化合物进一步得到式VII’化合物后再与CH2N2反应制备IX’化合物，再与卤代苯酚反应制备化合物XI，其中R基团为
10.权利要求1～7中任一所述的化合物或其光学异构体在制备治疗乙型肝炎药物方面的应用。
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|---|---|---|---|---|
| CN102603520A (zh) * | 2012-03-23 | 2012-07-25 | 中国药科大学 | 1h-茚-1-酮-3-甲酸类化合物的制备方法 |
Citations (3)
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|---|---|---|---|---|
| WO1993009135A1 (en) * | 1991-11-04 | 1993-05-13 | Sandoz Ltd. | Peptides inhibiting il-1 beta release |
| CN1942466A (zh) * | 2004-02-27 | 2007-04-04 | 沃泰克斯药物股份有限公司 | 天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶抑制剂及其用途 |
| CN101268084A (zh) * | 2005-07-28 | 2008-09-17 | 沃泰克斯药物股份有限公司 | 天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶抑制剂前体药物 |
-
2010
- 2010-09-13 CN CN2010102794996A patent/CN101979403A/zh active Pending
Patent Citations (3)
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