CN101669904B - 一种依前列醇脂质纳米粒及制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种依前列醇脂质纳米粒及制备方法，该脂质纳米粒中依前列醇，脂质材料和表面活性剂的重量比为1∶5～50∶2～20。采用熔融乳化-高压均质法制备，所制备的纳米粒不仅解决了药物的稳定性问题，而且降低了静脉给药的刺激性，增加了临床用药的安全性。

Description

一种依前列醇脂质纳米粒及制备方法

技术领域

本发明涉及一种依前列醇脂质纳米粒及其制备方法，含有该脂质纳米粒的剂型及其制备方法。

背景技术

依前列醇，又名前列环素(PGX)，前列腺素I₂(PGI₂)，本品为血管内皮产生的一种天然前列腺素。具有舒张血管、降低血压及抗血小板聚集、止血栓形成的作用。为血管内皮细胞产生的花生四烯酸代谢产物，能抑制血小板聚集，对冠脉、全身血管和肺血管有强烈舒张作用。其临床适应症为：用于不稳定型心绞痛、心肌梗死、顽固性心衰、外周血管痉挛性疾病及肺动脉高压。其抗血小板聚集作用可用于防止血栓形成。用于治疗某些心血管疾病和血液透析时(比肝素更为安全)作为抗凝剂：末梢血管病如雷诺病，用药后明显减少发作次数和发作持续时间；也用于血小板消耗综合征及减少血小板在体外循环中的损失等。不良反应静注速度超过每分钟10μg/kg时，可出现头痛、腹部不适、高血压等，超过20μg/kg时，可出现血压下降、心率减慢，甚至昏厥。不良反应发生率与剂量有关：静滴时不良反应有面部潮红、头痛、不安、焦虑、呕吐、腹部不适、低血压和心动过缓等。

目前已上市的剂型为粉针剂Flolan，每支冻干小瓶包含0.5mg或1.5mg依前列醇，3.76mg甘氨酸，2.93mg氯化钠和50mg甘露醇。还可加入氢氧化钠以便调节pH。另外还配有无菌稀释剂，含有94mg甘氨酸，73.5mg氯化钠，氢氧化钠(调节pH)，适量注射用水至50ml的玻璃瓶中。重新配置Flolan溶液具有10.2～10.8的pH。

依前列醇易水解，尤其在较低的pH条件下更不稳定，根据专利申请200780011395.3说明书第四页表1公开的数据，依前列醇在23℃，pH9.3条件下10小时降解50％，因此，将其开发成稳定的制剂需首先解决依前列醇的稳定性问题。该申请中提供一种pH＞11的碱化试剂的药物组合物，在高pH条件下，依前列醇溶液在15～30℃下24～48小时后仍然保持90％的依前列醇不降解。

静脉给药的pH范围4～9，pH过高或过低都容易引起刺激性，上述溶液虽然通过调节pH一定程度上解决了依前列醇的稳定性问题，但存在静脉给药的安全性隐患。因此，有必要研制一种稳定并且适合静脉给药的新剂型。

纳米粒载体是一种亚微粒药物载体输送系统。将药物包封于亚微粒中，可以改变药物在体内的分布、调节释药速度、提高生物利用度、增加药物对生物膜的透过性等，从而提高疗效、减少毒副作用。固体脂质纳米粒(solid lipid nanoparticles，SLN)是以固态的天然或合成的脂类为载体制成的粒径约为50至1000nm的固体胶粒给药体系。以生理相容的高熔点脂质(如脂肪酸甘油酯、硬脂酸、混合脂质)为骨架材料制备的SLN，在室温下通常呈固态，因此既具备聚合物纳米粒物理稳定性高、药物泄漏慢的优势，又兼具了脂质体、乳剂的毒性低、能大规模生产的优点，是一种极有发展前景的新型给药系统。纳米脂质载体(Nano-structruedlipid carries，NLC)是在固体脂质纳米粒基础上，向固体脂质中加入液态油，使纳米粒以结晶缺陷型或无定型结构存在，可以避免放置过程中药物的外排以及包封率的下降。本发明中，将固体脂质纳米粒，纳米脂质载体统称为脂质纳米粒。

上述现有技术中没有给出将依前列醇制成脂质纳米粒相关的技术启示。

发明内容

本发明所解决的技术问题是针对现有技术中依前列醇的稳定性差，提供一种能显著提高其稳定性的制剂，以及该制剂的制备方法。

本发明的技术方案如下：

本发明提供一种依前列醇脂质纳米粒，其特征在于，该脂质纳米粒中依前列醇，脂质材料和表面活性剂的重量比为1∶5～50∶2～20。

本发明所述依前列醇脂质纳米粒，其特征在于，所述的脂质材料为固体脂质材料山嵛酸甘油酯，硬脂酸甘油酯，棕榈酸甘油酯，硬脂酸棕榈酸甘油酯，硬脂酸乙二醇酯，棕榈酸乙二醇酯，硬脂酸棕榈酸乙二醇酯，白蜡，黄蜡，微晶蜡，巴西棕榈蜡，十六醇酯蜡，硬脂酸，羊毛脂，硬脂醇，凡士林羊毛醇中的一种或以上。

本发明所述的依前列醇脂质纳米粒，其特征在于，所述的脂质材料为固体脂质和液体脂质混合物，固体脂质与液体脂质的重量比为1∶1～9∶1，所述的液体脂质为大豆油，棉籽油，菜籽油，芝麻油，玉米油，花生油，葵花籽油，薏仁油，维生素E琥珀酸酯，中链甘油三酯，鱼油中的一种或以上。

所述的中链甘油三酯是指一个或多个具有约8～18个碳原子长度的中链脂肪酸的甘油三酯或其混合物。

本发明所述的依前列醇脂质纳米粒，其特征在于，所述的表面活性剂为大豆磷脂，蛋黄卵磷脂，泊洛沙姆，聚乙二醇1000维生素E琥珀酸酯(TPGS)，聚乙二醇660-12-羟基硬脂酸酯(HS-15)，聚氧乙烯-8-辛酸/癸酸甘油酯(Labrasol)，聚乙二醇二硬脂酰乙醇胺(PEG-DSPE)，乙二醇单乙基醚(Transcutol)，二己基琥珀酸酰磺酸钠(Aerosol OT)，聚氧乙烯脂肪酸酯，聚氧乙烯脂肪醇，胆酸及其盐，去氧胆酸及其盐中的一种或以上。

本发明所述的依前列醇脂质纳米粒的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)脂质材料加热60～80℃，加入依前列醇混合均匀，得油相；

(2)表面活性剂溶解于水中，加热至60～80℃，得水相；

(3)将水相加入到油相中，温度控制60～80℃，高速剪切分散，得初乳；

(4)所得初乳经高压均质成纳米乳；

(5)所得纳米乳快速冷却至4℃以下，形成依前列醇脂质纳米粒混悬液。

本发明所述的依前列醇脂质纳米粒的制备方法，其特征在于，步骤(3)所述的高速剪切分散的剪切速度为1000～5000rpm时间为10～60分钟，步骤(4)所述压力为600～2000bar，匀化次数3～6次。

本发明所述的依前列醇脂质纳米粒的剂型，其特征在于，该脂质纳米粒与药剂上可接受的辅料制成的剂型。

本发明所述的依前列醇脂质纳米粒的剂型，其特征在于，所述的剂型为粉针剂。

本发明所述的依前列醇脂质纳米粒粉针剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)脂质材料加热60～80℃，加入依前列醇混合均匀，得油相；

(2)表面活性剂溶解于水中，加热至60～80℃，得水相；

(3)将水相加入到油相中，温度控制60～80℃，高速剪切分散，剪切速度为1000～5000rpm时间为10～60分钟，得初乳；

(4)所得初乳经高压均质，压力为600～2000bar，匀化次数3～6次，得纳米乳；

(5)所得纳米乳快速冷却至4℃以下，形成依前列醇脂质纳米粒混悬液；

(6)将脂质纳米粒混悬液加入冻干保护剂，经0.22μm微孔滤膜过滤，无菌分装，冷冻干燥，即得。

本发明所述的依前列醇脂质纳米粒粉针剂，其特征在于，所述的冻干保护剂为海藻糖，蔗糖，麦芽糖，乳糖中的一种或以上。

相对现有技术来说，本发明将依前列醇制成脂质纳米粒，不仅解决了药物的稳定性问题，而且降低了静脉给药的刺激性，增加了临床用药的安全性。本发明所制备的依前列醇脂质纳米粒具有以下优点：

1、脂质载体毒性低，生理相容性好，降低了毒副作用，提高了机体耐受性；

2、所制备的脂质纳米粒将药物包封于脂质载体中，防止药物的水解，提高了产品的稳定性；

3、采用混合脂质载体，提高了药物的载药量。

具体实施方式

下面以具体实施例对本发明作详细说明，但以下实施例不得理解为任何意义上的对本发明权利要求的限制。

实施例1

处方：

依前列醇                        0.5g

山榆酸甘油酯                    25g

大豆磷脂                        5g

泊洛沙姆                        5g

制成1000ml

制备工艺：

(1)山榆酸甘油酯加热至70℃熔融，加入依前列醇，大豆磷脂混合均匀，得油相；

(2)泊洛沙姆溶于水中，加热至70℃，得水相；

(3)将水相加入到油相中，温度控制70℃，高速剪切分散，剪切速度为3000rpm时间为10分钟，得初乳；

(4)所得初乳经高压均质，压力为600～1200bar，匀化6次，得纳米乳；

(5)所得纳米乳快速冷却至0～2℃，形成依前列醇脂质纳米粒混悬液。

实施例2

处方：

依前列醇                        0.5g

山榆酸甘油酯                    1.5g

精制大豆油                      1.5g

大豆磷脂                        0.5g

泊洛沙姆                        0.5g

制成1000ml

制备工艺：

(1)山榆酸甘油酯加热至80℃熔融，加入精制大豆油，大豆磷脂，依前列醇混合均匀，得油相；

(2)泊洛沙姆溶于水中，加热至80℃，得水相；

(3)将水相加入到油相中，温度控制80℃，高速剪切分散，剪切速度为1000rpm时间为45分钟，得初乳；

(4)所得初乳经高压均质，压力为1000～1500bar，匀化4次，得纳米乳；

(5)所得纳米乳快速冷却至0～2℃，形成依前列醇脂质纳米粒混悬液。

实施例3

处方：

依前列醇                        0.5g

硬脂酸                          15g

蛋黄卵磷脂                      5g

泊洛沙姆                        2.5g

蔗糖                            150g

制成1000ml

制备工艺：

(1)硬脂酸加热至75℃熔融，加入蛋黄卵磷脂，依前列醇混合均匀，得油相；

(2)泊洛沙姆溶于水中，加热至75℃，得水相；

(3)将水相加入到油相中，温度控制75℃，高速剪切分散，剪切速度为2000rpm时间为20分钟，得初乳；

(4)所得初乳经高压均质，压力为1000bar，匀化5次，得纳米乳；

(5)所得纳米乳快速冷却至0～2℃，形成依前列醇脂质纳米粒混悬液；

(6)上述混悬液加入蔗糖，调节pH值，过滤除菌，无菌灌装，冷冻干燥，得注射用依前列醇脂质纳米粒。

实施例4

处方：

依前列醇                        0.5g

棕榈酸乙二醇酯                  9g

精制大豆油                      1g

大豆磷脂                        1.5g

聚乙二醇1000维生素E琥珀酸酯     0.5g

海藻糖                          100g

制成1000ml

制备工艺：

(1)棕榈酸乙二醇酯加热至65℃熔融，加入精制大豆油，大豆磷脂，依前列醇混合均匀，得油相；

(2)聚乙二醇维生素E琥珀酸酯溶于水中，加热至65℃，得水相；

(3)将水相加入到油相中，温度控制65℃，高速剪切分散，剪切速度为5000rpm时间为10分钟，得初乳；

(4)所得初乳经高压均质，压力为1400～1800bar，匀化3次，得纳米乳；

(5)所得纳米乳快速冷却至0～2℃，形成依前列醇脂质纳米粒混悬液；

(6)上述混悬液加入海藻糖，过滤除菌，无菌灌装，冷冻干燥，得注射用依前列醇脂质纳米粒。

实施例5

处方：

依前列醇                        0.5g

单硬脂酸甘油酯                  10g

蛋黄卵磷脂                      3g

聚乙二醇660-12-羟基硬脂酸酯     1g

制成1000ml

制备工艺：

(1)单硬脂酸甘油酯加热至70℃熔融，加入蛋黄卵磷脂，依前列醇混合均匀，得油相；

(2)聚乙二醇660-12-羟基硬脂酸酯溶于水中，加热至70℃，得水相；

(3)将水相加入到油相中，温度控制70℃，高速剪切分散，剪切速度为1500rpm时间为30分钟，得初乳；

(4)所得初乳经高压均质，压力为1000bar，匀化5次，得纳米乳；

(5)所得纳米乳快速冷却至0～2℃，形成依前列醇脂质纳米粒混悬液。

实施例6

处方：

依前列醇                        0.5g

三油酸甘油酯                    3g

中链甘油三酯                    1g

大豆磷脂                        2g

聚氧乙烯-8辛酸/癸酸甘油酯       0.5g

乳糖                            200g

制成1000ml

制备工艺：

(1)三油酸酯加热至60℃熔融，加入中链甘油三酯，大豆磷脂，依前列醇混合均匀，得油相；

(2)聚氧乙烯-8辛酸/癸酸甘油酯溶于水中，加热至60℃，得水相；

(3)将水相加入到油相中，温度控制60℃，高速剪切分散，剪切速度为2000rpm时间为20分钟，得初乳；

(4)所得初乳经高压均质，压力为1400～1800bar，匀化3次，得纳米乳；

(5)所得纳米乳快速冷却至0～2℃，形成依前列醇脂质纳米粒混悬液；

(6)上述混悬液加入乳糖，过滤除菌，无菌灌装，冷冻干燥，得注射用依前列醇脂质纳米粒。

实施例7

处方：

依前列醇                        0.5g

鲸蜡醇棕榈酸酯                  4g

棉籽油                          2g

大豆磷脂                        2.5g

聚乙二醇1000维生素E琥珀酸酯     5g

泊洛沙姆                        1g

制成1000ml

制备工艺：

(1)鲸蜡醇棕榈酸加热至70℃熔融，加入棉籽油，大豆磷脂，聚乙二醇1000维生素E琥珀酸酯，依前列醇混合均匀，得油相；

(2)泊洛沙姆溶于水中，加热至70℃，得水相；

(3)将水相加入到油相中，温度控制70℃，高速剪切分散，剪切速度为5000rpm时间为10分钟，得初乳；

(4)所得初乳经高压均质，压力为1400～1800bar，匀化3次，得纳米乳；

(5)所得纳米乳快速冷却至0～2℃，形成依前列醇脂质纳米粒混悬液；

实施例8

粒径分布测定

室温条件下，取SLN混悬液，用水稀释到适当的浓度，加入激光粒度仪的样品池中，测定粒径大小及分布。

实施例1～6平均粒径

比较实施例1 药物稳定性试验

参考专利申请200780011395.3说明书第四页的方法测定依前列醇缓冲盐溶液，脂质纳米粒溶液稳定性，结果见表1。结果表明，将其制成脂质纳米粒后，药物的稳定性大大改善。

比较实施例2 局部刺激性试验

家兔6只，雌性，2.0～2.4kg，分为两组，每组3只，每只左耳分别给依前列醇溶液和实施例3脂质纳米粒混悬液，右耳给等容量0.9％氯化钠注射液。各耳于注射前用医用酒精消毒后，在耳缘静脉距尖端约1cm处进针，缓慢注射受试物，每天给药一次，连续3天。每次给药后和下一次给药前观察注射部位静脉(血管)和周围皮下组织及耳表皮的刺激反应，作详细记录。按“血管刺激试验评分标准—肉眼检查分级”进行评分。于末次给药后24小时处死动物，剪取注射部位耳壳约5cm长，以10％福尔马林固定后，送检病理。最后综合肉眼和组织学评分值评价试验结果。

每次给药后和下一次给药前观察注射部位静脉(血管)和周围皮下组织及耳表皮的刺激反应，均未见明显变化。病理检查结果亦未见血管及周围组织有明显变化，按血管刺激评分标准累计得分为，脂质纳米粒组得分＜0.5，由此判断依前列醇脂质纳米粒无血管刺激性；依前列醇溶液组得分为2，轻度刺激性。结果表明，制成脂质纳米粒后，局部刺激性降低。

Claims (9)

1.一种依前列醇脂质纳米粒，其特征在于，该脂质纳米粒中依前列醇，脂质材料和表面活性剂的重量比为1∶5～50∶2～20，所述的脂质材料为固体脂质或固体脂质与液体脂质混合物，当所述的脂质材料为固体脂质和液体脂质混合物时，固体脂质与液体脂质的重量比为1∶1～9∶1；所述的表面活性剂选自大豆磷脂，蛋黄卵磷脂，泊洛沙姆，聚乙二醇1000维生素E琥珀酸酯，聚乙二醇660-12-羟基硬脂酸酯，聚乙二醇二硬脂酰乙醇胺，乙二醇单乙基醚，二己基琥珀酸酰磺酸钠，聚氧乙烯脂肪酸酯，聚氧乙烯脂肪醇，胆酸及其盐，去氧胆酸及其盐中的一种或多种。

2.根据权利要求1所述依前列醇脂质纳米粒，其特征在于，所述的脂质材料为固体脂质材料山嵛酸甘油酯，硬脂酸甘油酯，棕榈酸甘油酯，硬脂酸棕榈酸甘油酯，硬脂酸乙二醇酯，棕榈酸乙二醇酯，硬脂酸棕榈酸乙二醇酯，白蜡，黄蜡，微晶蜡，巴西棕榈蜡，十六醇酯蜡，硬脂酸，羊毛脂，硬脂醇，凡士林羊毛醇中的一种或多种。

3.根据权利要求2所述的依前列醇脂质纳米粒，其特征在于，所述的液体脂质为大豆油，棉籽油，菜籽油，芝麻油，玉米油，花生油，葵花籽油，薏仁油，维生素E琥珀酸酯，中链甘油三酯，鱼油中的一种或多种。

4.根据权利要求1～3中任一项所述的依前列醇脂质纳米粒的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)脂质材料加热60～80℃，加入依前列醇混合均匀，得油相；

(2)表面活性剂溶解于水中，加热至60～80℃，得水相；

(3)将水相加入到油相中，温度控制60～80℃，高速剪切分散，得初乳；

(4)所得初乳经高压均质成纳米乳；

(5)所得纳米乳快速冷却至4℃以下，形成依前列醇脂质纳米粒混悬液。

5.根据权利要求4所述的依前列醇脂质纳米粒的制备方法，其特征在于，步骤(3)所述的高速剪切分散的剪切速度为1000～5000rpm时间为10～60分钟，步骤(4)所述压力为600～2000bar，匀化次数3～6次。

6.一种含有权利要求1至5任一所述的依前列醇脂质纳米粒的剂型，其特征在于，该脂质纳米粒与药剂上可接受的辅料制成的剂型。

7.根据权利要求6所述的依前列醇脂质纳米粒的剂型，其特征在于，所述的剂型为粉针剂。

8.根据权利要求7所述的依前列醇脂质纳米粒粉针剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)脂质材料加热60～80℃，加入依前列醇混合均匀，得油相；

(2)表面活性剂溶解于水中，加热至60～80℃，得水相；

(3)将水相加入到油相中，温度控制60～80℃，高速剪切分散，剪切速度为1000～5000rpm时间为10～60分钟，得初乳；

(4)所得初乳经高压均质，压力为600～2000bar，匀化次数3～6次，得纳米乳；

(5)所得纳米乳快速冷却至4℃以下，形成依前列醇脂质纳米粒混悬液；

(6)将脂质纳米粒混悬液加入冻干保护剂，经0.22μm微孔滤膜过滤，无菌分装，冷冻干燥，即得。

9.根据权利要求8所述的依前列醇脂质纳米粒粉针剂的制备方法，其特征在于，所述的冻干保护剂为海藻糖，蔗糖，麦芽糖，乳糖中的一种或多种。