CN101658494B - 一种石杉碱甲固体脂质纳米粒及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及药物制剂领域，公开了一种石杉碱甲固体脂质纳米粒及其制备方法。所述石杉碱甲固体脂质纳米粒由以下重量百分比的组分制成：石杉碱甲0.05～1％，脂质材料3～10％，乳化剂2～10％，余量为水。本发明所述制备方法采用高压乳匀法，将石杉碱甲包载于固体脂质纳米粒中制得。本发明制备的石杉碱甲固体脂质纳米粒的粒径为10～100nm，不仅药物包封率及载药量高，稳定性好；同时避免使用对人体有害的附加剂和有机溶剂；并且提高了生物利用度，增加脑靶向性，药剂量和毒副作用小。

Description

一种石杉碱甲固体脂质纳米粒及其制备方法

技术领域

本发明涉及药物制剂领域，具体涉及一种中药石杉碱甲的固体脂质纳米粒及其制备方法。

背景技术

石杉碱甲(Huperzine A，C₁₅H₁₈N₂O)，是我国医药研究者从石杉科植物石杉全草中分离得到的新结构生物碱，药理研究结果表明石杉碱甲是一种高效、可逆的胆碱酯酶抑制剂，对真性胆碱酶(AChE)有很强的抑制作用。1993年美国FDA批准上市，1996年我国批准为二类新药，用于治疗和预防老年性痴呆及提高青少年智力记忆。临床试验证实，它能防止脑组织中乙酚胆碱的分解，提高脑力活动效率，直接改善记忆力。具有选择性高、毒性低和药效时间长等特点。是迄今为止国际上治疗老年痴呆较理想的前景。

目前涉及石杉碱甲的制剂产品有片剂、胶囊和注射剂。但是石杉碱甲生物半衰期较短，石杉碱甲口服或注射给药时会引起的血药浓度峰谷现象，由此产生耳鸣、头晕、肌束颤动、出汗腹痛、呕吐、大便增加、视力模糊、心率改变、流涎、思睡等不良反应。影响了该药的治疗效果。

目前，有关石杉碱甲的专利有：石杉碱甲缓释微球、石杉碱甲缓释骨架片、石杉碱甲滴丸、石杉碱甲植入剂等。这些制剂在增加药物吸收，提高治疗效果方面和普通制剂相比，具有显著优点。但进一步提高石杉碱甲的生物利用度，减少不良反应，尤其是提高对特定部位的靶向作用方面仍然是石杉碱甲记性研究需要解决的问题。

固体脂质纳米粒(lipid Solid nanoparticles，SLN)是20世纪90年代发展起来的一种可替代乳剂、脂质体、聚合纳米粒的新型胶体给药系统。它以生理相容性好固态的天然或合成的类脂为载体，将药物包裹于类脂核中制成固态胶粒。因其在制备时使用的载体材料在室温下是固体，使得其既具有聚合物纳米球和纳米囊的物理稳定性高、药物泄露少、具有缓释性和靶向性、可以灭菌等特点，有兼有脂质体毒性低、易于大规模生产的优点。目前实验室多采用微乳法、溶剂蒸发法、沉淀法以及注射法等方法来制备SLN。但上述制方法都要用到有机溶剂，而要完全除尽有害的有机溶剂是不可能的，从而限制了SLN药用载体的应用。目前，现有尚未有采用高压乳匀技术制备中未见有石杉碱甲固体脂质纳米粒的报道。

发明内容

本发明的目的在于弥补已有技术的不足，提供一种有较高生物利用度的、较强脑靶向性的、用药剂量小、毒副作用小的石杉碱甲固体脂质纳米粒。

本发明的另一目的是提供上述石杉碱甲固体脂质纳米粒的制备方法。

本发明通过以下技术方案实现上述目的：

一种石杉碱甲固体脂质纳米粒，由以下重量百分比的组分制成：

石杉碱甲    0.05～1％，

脂质材料    3～10％，

乳化剂      2～10％，

余量为水。

所述脂质材料优选单硬脂酸甘油酯、双硬脂酸甘油酯、三硬脂酸甘油酯、山嵛酸甘油酯、三棕榈酸甘油酯、三月桂酸甘油酯、三肉豆蔻酸甘油酯、辛癸酸甘油酯、硬脂酸、棕榈酸、癸酸、油酸中的任何一种或两种以上的混合物。

所述乳化剂优选大豆磷脂、蛋黄磷脂、泊洛沙姆188、泊洛沙姆407、吐温-80、吐温-20、司盘-20、卖泽、苄泽中的任何一种或两种以上的混合物。

本发明的石杉碱甲固体脂质纳米粒的制备方法包括以下步骤：

步骤1：将乳化剂和适量蒸馏水或去离子水超声分散至完全溶解，制成水相；将石杉碱甲、脂质材料混合熔融，制成油相；

步骤2：将水相和油相分别加热至65～85℃，待油相澄清后，在搅拌条件下将水相滴加到油相中，保持恒温搅拌10～30分钟，然后停止加热并继续搅拌至室温，形成初乳；

步骤3：将制得初乳经乳匀后，制得石杉碱甲固体脂质纳米粒。

步骤2中所述加热的方式优选水浴加热；所述搅拌优选恒温磁力搅拌，搅拌速度为800～1500rpm；所述初乳为乳白色乳浊液。

步骤3中所述乳匀优选高压均质机500～1200bar乳匀2～7次。

所述制得的石杉碱甲固体脂质纳米粒是分散在水中的石杉碱甲固体脂质纳米粒水分散体，在3～5℃密封保存。

所述石杉碱甲固体脂质纳米粒水分散体进行微孔滤膜过滤后，再加入冻干保护剂冷冻干燥即得冻干制剂。冻干保护剂可任选，如蔗糖、乳糖等。

与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：

本发明采用固体脂质纳米粒技术包封了石杉碱甲，制得的石杉碱甲固体脂质纳米粒增强了药物的稳定性，提高了药物的生物利用度，提高了药物的治疗指数，减少了用药剂量和毒副作用，同时还增加了脑靶向性。

与现有的脂质体相比，本发明采用高压乳匀法制备石杉碱甲固体脂质纳米粒，与其他药物制备固体脂质纳米粒相比，本发明无需使用有机溶剂，可制备出包封率高、稳定性好并有一定缓控释作用的固体脂质纳米粒载体系统，纳米粒粒径在10～100nm之间，包封率大于50％。

本发明提供的石杉碱甲固体脂质纳米粒的制备方法——高压乳匀法是利用高压推动液体通过一个狭窄的管道，液体通过很短的距离而获得很大的速度，分裂成纳米级的小粒子。本法可避免使用对人体有害的附加剂和有机溶剂，尤其适用于对热不稳定的药物，还比较适合工业化大生产，同时本发明还结合熔融法及冻干法制得石杉碱甲固体脂质纳米粒及冻干制剂，填补了这一技术领域中的空白。

附图说明

图1为石杉碱甲固体脂质纳米粒粒径分布图。

图2为石杉碱甲固体脂质纳米粒Zeta电位图。

具体实施方式

以下通过具体实施例对本发明作进一步说明，所述及的石杉碱甲固体脂质纳米粒的形态、粒径、ζ电位、包封率、载药量等指标的评价试验方法如下：

1、形态观察

取适量经水稀释的石杉碱甲固体脂质纳米粒水分散体液滴加在覆盖有碳膜的铜网上，用2％的磷钨酸溶液负染，自然晾干后，在透射电镜下观察其形态。

2、粒径与ζ电位的测定

取石杉碱甲固体脂质纳米粒水分散体用蒸馏水适量稀释，用激光粒度仪测定纳米粒的粒径及ζ电位。

3、包封率的测定

精密移取2mL石杉碱甲固体脂质纳米粒水分散体，加至超滤离心管中超滤，弃去初滤液，收集续滤液。精密移取1mL续滤液置于10mL容量瓶中，加80％甲醇水溶液稀释定容，经0.22μm微孔滤膜过滤，然后注入液相色谱仪进行测定，计算游离药物的量(W_f)。同时精密移取1mL石杉碱甲固体脂质纳米粒水分散体加80％甲醇水溶液破乳定容至10mL，离心处理后用0.22μm微孔滤膜过滤，注入液相色谱仪进行测定，计算SLN中药物总含量(W_t)。按下面公式计算包封率。

4、载药量的测定

将石杉碱甲固体脂质纳米粒水分散体分装后，冷冻干燥得冻干粉剂。按下面公式计算载药量。

实施例1

制备石杉碱甲固体脂质纳米粒(处方中的百分比为该组分在整个处方中所占的重量百分比，下列各实施例相同)：

处方：石杉碱甲          30mg

      单硬脂酸甘油酯    1.5g

      泊洛沙姆188       0.5g

      吐温-80           0.5g

      蒸馏水            50mL

制备方法：

步骤1：称取泊洛沙姆188、吐温-80，加适量蒸馏水超声分散至完全溶解，构成水相；将石杉碱甲、单硬脂酸甘油酯混合熔融，构成油相；

步骤2：将水相和油相水浴分别加热至65℃，待油相完全溶解为澄清热体后，在恒温磁力搅拌条件下将水相滴加到油相中，搅拌速度1500rpm，保持恒温搅拌10分钟；然后移去水浴继续搅拌至室温，使其成乳白色乳浊液，形成初乳；

步骤3：将制得初乳经高压均质机500bar乳匀7次，制得石杉碱甲固体脂质纳米粒水分散体，约在3～5℃密封保存。

检测：石杉碱甲固体脂质纳米粒的平均粒径为58.1nm，包封率为57.6％。

实施例2

制备石杉碱甲固体脂质纳米粒：

处方：石杉碱甲          80mg

      单硬脂酸甘油酯    2g

      泊洛沙姆188       1g

      蛋黄磷脂          0.5g

      蒸馏水            50mL

步骤1：称取泊洛沙姆188、蛋黄磷脂，加适量蒸馏水超声分散至完全溶解，构成水相；将石杉碱甲、单硬脂酸甘油酯混合熔融，构成油相；

步骤2：将水相和油相分别水浴加热至85℃，待油相完全溶解为澄清热体后，在恒温磁力搅拌条件下将水相滴加到油相中，搅拌速度为800rpm，保持恒温搅拌30分钟；然后移去水浴继续搅拌至室温，使其成乳白色乳浊液，形成初乳；

步骤3：将制得初乳经高压均质机1200bar乳匀2次，制得石杉碱甲固体脂质纳米粒水分散体，约3～5℃密封保存。

检测：石杉碱甲固体脂质纳米粒的平均粒径为34.6nm，包封率为53.7％。

实施例3

制备石杉碱甲固体脂质纳米粒：

处方：石杉碱甲          180mg

      单硬脂酸甘油酯    3g

      泊洛沙姆188       1.5g

      吐温-80           1.5g

      蒸馏水            50mL

制备方法：

步骤1：称取泊洛沙姆188、吐温-80，加适量蒸馏水超声分散至完全溶解，构成水相；将石杉碱甲、单硬脂酸甘油酯混合熔融，构成油相；

步骤2：将水相和油相分别水浴加热至70℃，待油相完全溶解为澄清热体后，在恒温磁力搅拌条件下将水相滴加到油相中，搅拌速度为1000rpm，保持恒温搅拌18分钟；然后移去水浴继续搅拌至室温，使其成乳白色乳浊液，形成初乳；

步骤3：将制得初乳经高压均质机700bar乳匀5次，制得石杉碱甲固体脂质纳米粒水分散体，约3～5℃密封保存。

检测：石杉碱甲固体脂质纳米粒的平均粒径为62.2nm，包封率为55.1％。

实施例4

制备石杉碱甲固体脂质纳米粒：

处方：石杉碱甲          350mg

      单硬脂酸甘油酯    3g

      油酸              1g

      泊洛沙姆188       3.5g

      蒸馏水            50mL

制备方法：

步骤1：称取泊洛沙姆188，加适量蒸馏水超声分散至完全溶解，构成水相；将石杉碱甲、单硬脂酸甘油酯、油酸混合熔融，构成油相；

步骤2：将水相和油相分别水浴加热至75℃，待油相完全溶解为澄清热体后，在恒温磁力搅拌条件下将水相滴加到油相中，搅拌速度为1200rpm，保持恒温搅拌25分钟；然后移去水浴继续搅拌至室温，使其成乳白色乳浊液，形成初乳；

步骤3：将制得初乳经高压均质机900bar乳匀4次，制得石杉碱甲固体脂质纳米粒水分散体，约3～5℃密封保存。

检测：石杉碱甲固体脂质纳米粒的平均粒径为29.6nm，包封率为54.3％。

实施例5

处方：石杉碱甲          500mg

      单硬脂酸甘油酯    3.8g

      油酸              1.2g

      泊洛沙姆188       4g

      蒸馏水            50mL

制备方法：

步骤1：称取泊洛沙姆188，加适量蒸馏水超声分散至完全溶解，构成水相；将石杉碱甲、单硬脂酸甘油酯、油酸混合熔融，构成油相；

步骤2：将水相和油相分别水浴加热至80℃，待油相完全溶解为澄清热体后，在恒温磁力搅拌条件下将水相滴加到油相中，搅拌速度为1200rpm，保持恒温搅拌25分钟；然后移去水浴继续搅拌至室温，使其成乳白色乳浊液，形成初乳；

步骤3：将制得初乳经高压均质机900bar乳匀3次，制得石杉碱甲固体脂质纳米粒水分散体，约3～5℃密封保存。

检测：石杉碱甲固体脂质纳米粒的平均粒径为75.9nm，包封率为52.9％。

Claims (2)

1.一种石杉碱甲固体脂质纳米粒，其特征在于处方为：

由以下方法获得：

步骤1：称取泊洛沙姆188、蛋黄磷脂，加适量蒸馏水超声分散至完全溶解，构成水相；将石杉碱甲、单硬脂酸甘油酯混合熔融，构成油相；

步骤2：将水相和油相分别水浴加热至85℃，待油相完全溶解为澄清热体后，在恒温磁力搅拌条件下将水相滴加到油相中，搅拌速度为800rpm，保持恒温搅拌30分钟；然后移去水浴继续搅拌至室温，使其成乳白色乳浊液，形成初乳；

步骤3：将制得初乳经高压均质机1200 bar乳匀2次，制得石杉碱甲固体脂质纳米粒水分散体，3～5℃密封保存。

2.一种石杉碱甲固体脂质纳米粒，其特征在于处方为：

由以下方法获得：

步骤1：称取泊洛沙姆188，加适量蒸馏水超声分散至完全溶解，构成水相；将石杉碱甲、单硬脂酸甘油酯、油酸混合熔融，构成油相；

步骤2：将水相和油相分别水浴加热至75℃，待油相完全溶解为澄清热体后，在恒温磁力搅拌条件下将水相滴加到油相中，搅拌速度为1200rpm，保持恒温搅拌25分钟；然后移去水浴继续搅拌至室温，使其成乳白色乳浊液，形成初乳； 

步骤3：将制得初乳经高压均质机900 bar乳匀4次，制得石杉碱甲固体脂质纳米粒水分散体，3～5℃密封保存。 

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