CN100582092C - 制备二苯基氮杂环丁烷酮衍生物的方法 - Google Patents
制备二苯基氮杂环丁烷酮衍生物的方法 Download PDFInfo
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Abstract
本发明涉及制备通式(I)的二苯基氮杂环丁烷酮衍生物或其取代基X、R1和/或R2被保护的形式的方法,见右式(Ⅰ)。其中的符号、取代基和标记具有下列含义:X=H、OH;R1=OH、OCH3;R2=F、CH2CH3、CH2NHR4;R3=H、F;R4=H、CO-(CH2-)nCO-R5、CO-(CH2-)nNHR6;n=4-16的整数;R5=OH、NH-CH2-[CH(OH)-]mCH2OH;R6=H、CO-[CH(OH)-]mCH2OH;m=1-5的整数。根据所述方法,将通式(II)的新化合物,见右式(Ⅱ)。其中Y=H,H;H,OH;H,OAc;H,OSi(烷基)o(芳基)p,o,p=0、1、2或3且o+p=3;H,OTHP;H,OC(芳基)3;H,OCH2O烷基;H,OCH(O烷基)CH3;H,O烷基;H,OCH2芳基;O烷基,O烷基;环状酮酰基如O-(CH2-)q-O,q=2或3,与通式(III)的亚胺反应,见右式(Ⅲ)。其中R7=R1以及O保护基且R8=R2。
Description
本发明涉及通过某些β-氨基羧酰胺或β-氨基羧酸酯的环化制备1,4-二苯基氮杂环丁烷酮衍生物的方法。
作为这些化合物的已知代表,依泽替米贝阻碍胆固醇的肠吸收,从而使患者的LDL水平降低,甘油三酯减少。具体而言,它是下式的1-(4-氟苯基)-3(R)-[3-(4-氟苯基)-3(S)-羟丙基]-4(S)-(4-羟基苯基)-2-氮杂环丁烷酮(参见EP 0 720 599 B1的权利要求8):
关于该化合物本身、一些化学修饰、通过各种方法变体实现的它们的制备以及它们用于治疗高血脂症、动脉硬化和高胆固醇血症的治疗用途,尤其可参见下述出版物,其中已经进行了各种尝试,例如以确定具有同等疗效但是肠吸收更少的化学修饰。
EP 0 524 595 A1描述了下式的依泽替米贝的化学修饰:
其尤其是还可以在氮杂环丁烷酮环的3位上具有第二个取代基(R2),还可以在氮杂环丁烷酮环的4位的苯环与氮杂环丁烷酮环之间具有连接部分(A),并且可以在苯环(R3,R4)上没有或具有氟以外的其它取代基。该化合物的合成方法有(例如,R2=H时):用例如三烷基膦/偶氮二甲酸二烷基酯、相转移催化剂、氯磷酸二烷基酯/四正丁基硫酸氢铵或二氯苯甲酰氯/NaH环化下式的羟基酰胺:
或者使下式的酯(Rx是例如烷基)与亚胺在强碱存在下反应:
或者类似的反应,但是使用不同的羧酸衍生物,例如酰氯或混合酸酐(在该情况下,不存在ORx,而是例如2-氧代-N-甲基碘化吡啶鎓),
或者在下式化合物的(前体)阶段对以上的羟基酰胺的制备进行调整,
(Ry,Rz例如彼此独立地是H、(C1-C6)烷基、苯基、苄基),
方法是使其与上述的亚胺R1-A-CH=N-R4之一在TiCl4和TMEDA(四甲基乙二胺)存在下反应,得到
并且进一步与双三甲基硅烷基氨基钠(Na bistrimethylsilylamide)或双三甲基硅烷基氨基锂(Li bistrimethylsilylamide)反应,得到
EP 0 707 567 B1公开了一种制备这类氮杂环丁烷酮衍生物的特定方法,其中(Q=H或例如烷基)
被适当保护的上式的β-(取代的氨基)酰亚胺(其中G尤其是以下基团之一:
与硅烷化试剂和作为环化剂的氟离子催化剂或与手性化合物的盐(G+盐)、特别是双(三甲基硅烷基)乙酰胺和四正丁基氟化铵反应。
对二苯基氮杂环丁烷酮衍生物的进一步的化合物修饰在例如WO02/50027中有描述,其中分子中存在的3位苯基上至少一个取代基是(C1-C30)亚烷基-(LAG)基团,其中亚烷基上的一个或多个C原子可以被例如-O-、-CH=CH-或-NR-[R=H、(C1-C6)烷基、(C1-C6)亚烷基-苯基]替代,并且LAG是例如糖、二糖、三糖、氨基酸或寡肽残基。
该方法的一个缺点是使用大量的硅烷化试剂,如N,O-双(三甲基硅烷基)乙酰胺,因为在后处理过程中产生乙酰胺,而乙酰胺被归类为致癌物。此外,在用烯醇化物和亚胺进行的加成反应阶段中的非对映立体选择性中等,这使得必须进行另外的分离步骤。
本发明的目的是提供上述化合物的另一种合成变体,其也能立体特异性地进行且产率高,并且需要毒性极小的辅助试剂,因此当在工业上应用时在车间中不会产生严重问题。
一个方案是用于制备式(I)的二苯基氮杂环丁烷酮衍生物的方法,
其中的符号、取代基和标记具有下列含义:
X=H、OH;
R1=OH、OCH3;
R2=F、CH2CH3、CH2NHR4;
R3=H、F;
R4=H、CO-(CH2-)nCO-R5、CO-(CH2-)nNHR6;
n=4-16的整数;
R5=OH、NH-CH2-[CH(OH)-]mCH2OH;
R6=H、CO-[CH(OH)-]mCH2OH;
m=1-5的整数;
其中将式(II)的化合物
其中Y=H,H;H,OH;H,OAc;H,OSi(烷基)o(芳基)p,o,p=0、1、2或3且o+p=3;H,OTHP(THP是四氢呋喃基保护基);H,OC(芳基)3;H,OCH2O烷基;H,OCH(O烷基)CH3;H,O烷基;H,OCH2芳基;O烷基,O烷基;环状缩酮如O-(CH2-)q-O,q=2或3,
与式(III)的亚胺反应,
其中
R7=R1以及O-保护基
R8=R2、CH2N[Si(烷基)o(芳基)p]CO2CH2(C6H5)、CH2N[Si(烷基)o(芳基)p]C O2叔丁基、CH2N=CH(C6H5)、CH2N=CH(C6H4-p O CH3)、CH2N=CH[C6H4(R4)]和
得到式(IV)的中间体
之后,如果合适,将这些式(IV)的氨基酰胺转化为式(V)的酯、混合酸酐或活性酯
在该过程中可能产生R9=H的羧酸中间体,且其中
R9是(C1-C4)烷基、CO(C1-C4)烷基、COO(C1-C4)烷基、SO2芳基,随后将式(IV)的化合物或如果合适式(V)的化合物环化,得到式(VI)的内酰胺,
并且如果合适,最后将式(VI)的化合物去保护和/或反应生成式(I)的化合物。
作为典型被引述的反应顺序(包括前体)在下文中以举例方式进行描述。5-(4-氟苯基)-5-氧代戊酸甲酯(VII)可以如Tetrahedron(第49卷,第3193-3202页,1993)所述由氟苯来制备。
在接下来的步骤中,利用手性还原剂将酮基还原为醇(VIII),S对映体。在该情况下可以采用本领域技术人员已知的所有方法。其实例是用硼烷-二甲硫络合物或硼烷-四氢呋喃络合物进行的(R)-甲基-CBS催化的还原(参见例如WO 00/34240)和钌(II)催化的不对称氢化(类似于J.Am.Chem.Soc.1996,118,2521-2522)。还发现也可以使用手性络合的一氢化铜(I)催化的对映选择性氢化硅烷化[关于原理,参见B.Lipshutz等,J.Am.Chem.Soc.2003,125,8779-8789]。
与用硼烷络合物进行的噁唑硼烷(oxazaborolidine)催化的还原相比以及与不对称氢化相比,在前体情况下[δ-酮酸酯(VII),下文](特别是存在于本发明的方法中)以及从工业级别的可行性、环境相容性和经济性方面来看,这种不对称氢化硅烷化具有许多优点。优选的还原剂聚(甲基氢硅氧烷)(poly(methylhydrosiloxane))=(PMHS)在工业级别上价格很合适(最便宜的已知硅烷),挥发性低(沸点>177℃),搬运时无危险,具有良好的环境相容性。与之相反,硼烷-THF或-DMS络合物价格明显更高,挥发性强得多,安全的工业搬运需要一些费用,而且该物质是重要的环境污染物。在生产中使用硼烷络合物需要例如连续的废气燃烧系统,因为硼烷本身和二甲硫均非常臭。此外,用硼烷络合物进行的还原在各反应阶段和后处理程序中伴有氢的形成。为了避免通向废气燃烧系统的管道中出现氧/氢爆炸的可能,必须连续供给大量氮气以便能可靠地预防达到爆炸限。此外,市售(R)-甲基-CBS溶液很贵,并且反应只能被中等催化。
在本申请的实施例1中,下文所用的经典的Corey步骤典型地需要2-5mol%的噁唑硼烷催化剂,即,该反应以20-25∶1(S/C=20∶1-50∶1)的底物/催化剂比进行。在关于CBS-催化的还原的文献中没有描述S/C>100的实例。相反,实施例32和33证明在通过Lipshutz方法以3660(S/L=3660)的底物/配体比进行的不对称氢化硅烷化中用配体例如BINAP以高的化学和光学产率获得醇(VIH)。
另一个优点是不对称氢化硅烷化以高浓度在甲苯溶剂中发生(参见实施例32和33),而CBS还原通常在较高的稀释度下进行,并且使用在工业上不太合乎需要的溶剂如二氯甲烷或THF。
与Ru(II)催化的Noyori不对称氢化(R.Noyori等,J.Am.Chem.Soc.2003,125,13490;J.Am.Chem.Soc.2002,124,6508;Angew.Chem.2001,113,40)相比,氢化硅烷化的优点主要在于催化剂的费用低。不对称氢化烷基化经由手性络合的CuH催化剂进行,该催化剂由低成本的铜(I)盐(如CuCI)、配体和硅烷、优选PMHS在反应溶剂(如甲苯)中原位生成。因此,只要S/L比足够高,无论是否达到S/C比,催化剂成本均是次要的。与之相反,用于非螯合芳基酮的不对称Noyori氢化的钌预催化剂(precatalyst)是由合适的钌(II)化合物、任选纯的二胺和任选纯的二膦(diphosphane)制备得到的。这三种成分中的每一种以及预催化剂的制备均很贵。
因此,通过适当的δ-酮酸酯如(VII)的酮基的不对称氢化硅烷化进行的式(II)[Y=H,OH]的δ-羟基-伪麻黄碱酰胺的合成是本发明优选的实施方案之一。
不对称氢化硅烷化可以在-78℃至+30℃的温度范围中进行,优选在-50℃至+10℃下、特别优选在-20℃至0℃下进行。原则上可以使用所有对所用的硅烷呈惰性的非质子溶剂,优选醚类以及氯化的饱和的或芳族的烃类,特别优选甲苯、THF、氟苯、氯苯、二氯甲烷、环己烷、庚烷或戊烷,尤其是甲苯。(以上)化学计量的还原剂是硅烷,如聚甲基氢硅氧烷(PMHS)、二苯基甲基硅烷(Ph2MeSiH)、二苯基硅烷(Ph2SiH2)、苯基硅烷(PhSiH3)、四甲基二硅氧烷(tetramethyldisiloxane)(TMDS)、叔丁基二甲基硅烷(TBS-H)、三乙基硅烷(TES-H),优选PMHS、Ph2MeSiH或TMDS,特别优选PMHS。基于前体,使用过量的硅烷,优选1.2-6.0当量,特别优选2.0-5.0当量。
催化活性剂可能是一氢化铜(I)与手性二膦的螯形络合物。该催化剂优选在反应混合物中由适当的铜化合物、强碱、螯合手性二膦和硅烷原位产生。作为铜化合物,优选使用CuCl、CuCl2、CuF2或Stryker试剂[(PPh3)CuH]6,特别优选CuCl或Stryker试剂。基于前体(酮),铜化合物的用量为0.01mol%至10mol%,优选0.1mol%至3mol%,特别优选0.5mol%至1.0mol%。
强碱优选为碱金属醇化物或碱金属六甲基二硅烷基胺,特别优选叔丁醇钠、甲醇钠或NaHMDS。相对于铜化合物,碱的用量为等摩尔的或过量的,基于铜化合物,碱的用量优选为1.0至10.0当量,特别优选1.0至6.0当量。
所使用的配体是手性螯合二膦,在通常情况下当手性二磷的双面角较小时,催化氢化硅烷化的对映选择性和催化剂的生产力较高。优选的配体衍生自二膦类BINAP、DuPHOS、FerroTANE、JOSIPHOS、WALPHOS、BITIANP、BIPHEMP、MeO-BIPHEP和SEGPHOS。特别优选的配体是BINAP、Cy2PF-PCy2、BITIANP、5-Xyl-MeO-BIPHEP、4-MeO-3,5-DTBM-MeO-BIPHEP、DM-SEGPHOS、DTBM-SEGPHOS,非常特别优选5-Xyl-MeO-BIPHEP、4-MeO-3,5-DTBM-MeO-BIPHEP、DM-SEGPHOS、DTBM-SEGPHOS。
底物(酮)与配体(手性二膦)的比是S/L=100-500000,优选500-100000,特别优选5000-50000。而二膦配体的螯合作用使CuH类稳定,CuH的游离的非络合部分是热不稳定的。因此,在特别优选的温度范围-20℃-0℃内,在数小时的反应时间中可能经常观察到CuH游离部分的逐渐的进行性分解,形成黑色颗粒。在一个优选的方法变体中,通过在存在一当量三苯膦(基于CuH)的情况下原位进行CuH的制备(例如由CuCl制备)或者使用预先形成的Stryker试剂作为预催化剂来抑制这种分解。初始存在的CuH-PPh3络合物在-20℃-0℃的范围内是热稳定的,但是在这些条件下不引起酮基的显著还原。只有当这种“CuH存储形式”在反应混合物中遇到少量的手性二膦分子时,才能通过络合转移作用(transcomplexation)生成手性的高反应性的CuH络合物,并且在配体促发的反应中将酮基还原成具有旋光活性的醇。
根据所用的硅烷、反应条件和后处理条件不同,可控制酮的不对称氢化硅烷化,使得分离的反应产物直接是游离的具有旋光活性的醇或其硅烷基醚,然后可将所述硅烷基醚任选地去保护,生成游离醇,或者可以以被保护的形式进一步发生反应。使用PMHS并直接分离游离的具有旋光活性的醇经常得到更好的结果,因此这是优选的。然而,使用其它硅烷如TBS-H或TES-H、然后分离手性醇的叔丁基二甲基硅烷基醚或三乙基硅烷基醚也是本发明的实施方案之一。
然后可以将所得的羟基任选地进行保护(R10=氢原子或保护基团,后者例如Ac、Si(烷基)o(芳基)p,o,p=0,1,2或3且o+p=3)。在这方面,优选硅烷基保护基团、三苯甲基、THP、1-乙氧基乙基和烷氧基甲基保护基团,特别优选叔丁基二甲基硅烷基、三苯甲基、THP和乙氧基甲基。保护基团的引入可以通过本领域技术人员已知的方法进行,例如如“Protective Groups in Organic Synthesis”,第3版[T.W.Green,P.G.M.Wuts(编辑),John Wiley&Sons,Inc.,1999]中所述。
然后用(+)-(1S,2S)-伪麻黄碱(X)将酯(IX)转化成酰胺(XI)。在这种情况下可以使用本领域技术人员已知的所有方法。其实例被A.G.Myers等人在J.Am.Chem.Soc.(1997,第119卷,第6496-6511,656-673页)和OrganicSynthesis(1999,第76卷,第57-76页)中描述。
用于将酯(IX)转化成酰胺(XI)的可靠的和温和的多步骤方法包括:首先将甲基酯水解成游离羧酸,然后使游离羧酸与约1.0当量的适当的碳酰氯如新戊酰氯或与氯甲酸酯如氯甲酸异丁酯在合适的碱、优选约2.2当量三乙胺存在下、在合适的溶剂、优选二氯甲烷、丙酮或甲苯中、于约0℃下进行反应,得到混合酸酐,然后在加入约1.0当量的(+)-(1S,2S)-伪麻黄碱(X)后使该混合酸酐优选在一锅式(one-pot)反应中于约0℃下发生反应,得到s酰胺(XI)。
还有另一种可能来一步获得酰胺(XI),方法是使麻黄碱与甲基酯(IX)在碱性条件下按照以下两种方法变体之一进行直接缩合。在第一种方法变体中,将(+)-(1S,2S)-伪麻黄碱[基于酯(IX),1.0-1.2当量]在-78℃至+20℃的温度范围内、优选在-20℃至+10℃下、特别优选在-5℃至+5℃下、在合适的溶剂、优选选自醚类的溶剂、特别优选THF中、在无水氯化锂(约2当量)的存在下用正丁基锂溶液(2.5-10M的己烷溶液,基于甲麻黄碱,0.1-1.0当量,优选0.2-0.6当量,特别优选0.25-0.4当量)去质子化。然后滴加1.0当量的甲基酯(IX)的溶液,优选在相同溶剂中的溶液,将反应混合物在-20℃至+40℃的温度范围内、优选在0℃至+25℃下、特别优选在+15℃至+25℃下进一步进行搅拌。认为这种伪麻黄碱酰胺(XI)的一步合成法涉及甲基酯与伪麻黄碱仲羟基的有机酯交换反应,然后是分子内的O→N酰基转移。
在供选择的第二种方法变体中,使用低于化学计量的甲醇钠或甲醇锂替代正丁基锂来进行伪麻黄碱的去质子化。优选使用基于伪麻黄碱0.2-0.6当量的NaOMe或LiOMe,特别优选0.4-0.5当量。其它反应参数与上述的第一种方法变体一致。通常第一种和第二种方法变体得到同等产率的酰胺(XI)。
对于随后的加成而言必需的亚胺构建块(III)是通过已知方法由相应的苯胺衍生物和醛获得的。在该情况下反应中产生的水可以例如通过与甲苯共沸蒸馏除去。
烯醇化物是由酰胺(XI)和适当的碱制备的,并加成到亚胺(III)上。由此生成曼尼希产物(XII)。其一般实例在J.Org.Chem.(2001,第66卷,第9030-9032页)、Organic Letters(2001,第3卷,第773-776页和2000,第2卷,第3527-3529页)中有描述。酰胺(XI)向曼尼希产物(XII)的转化是一锅式反应,其通过如下所述的2-4个阶段进行。所有反应阶段均在具有醚性质的极性较强的溶剂中进行,所述溶剂对于锂盐必须具有良好的溶解性并且对于锂碱具有良好的稳定性。优选的溶剂是四氢呋喃、1,4-二噁烷、1,2-二甲氧基乙烷、二乙氧基甲烷(DEM,甲醛缩二乙醇)、1,1-二甲氧基甲烷(甲醛缩二甲醇)、二甘醇二甲醚(二乙二醇二甲醚)、三甘醇二甲醚(三乙二醇二甲醚)和二氯甲烷。特别优选四氢呋喃和二乙氧基甲烷,尤其是四氢呋喃。酰胺(XI)的烯醇化物与亚胺(III)的加成在所需的-10℃至+40℃的反应温度下以适当的速度进行,并且只有反应介质基本上被无水锂盐、优选氯化锂饱和时才能基本上反应完全。当反应混合物包含约3-8当量锂盐(基于酰胺(XI)),优选4-6.5当量时,在所述温度范围内用特别优选的溶剂达到该状态。锂盐是否被引入到反应混合物中(仅对于烯醇化物与亚胺的加成(第4阶段)而言)或者其是否被较早加入从而在第1、2或3阶段中存在不是关键。
第1阶段[获得锂碱]:合适的碱是二异丙基氨基锂(LDA)或1,1,1,3,3,3-六甲基二硅烷基胺锂盐(LiHMDS,双三甲基硅烷基氨基锂)。优选LDA。可以使用可商购获得的碱或者通过向二异丙胺或1,1,1,3,3,3-六甲基二硅烷基胺(HMDS,双三甲基硅烷基胺)的溶液中加入恰好当量的正丁基锂溶液而可原位获得的锂碱。为了原位生成锂碱,在惰性气体下,将胺在上述具有醚性质的干燥溶剂之一、特别优选THF中的溶液引入到完全干燥的反应容器中。对于第4阶段所需的锂盐、优选氯化锂,任选地可以已经被溶解/部分混悬在该溶液中。在-78℃至+10℃下,优选在-30℃至0℃下,特别优选在-20℃下,缓慢加入基于胺0.92-0.99当量1.5-10.0摩尔浓度的正丁基锂的己烷溶液,优选约0.95当量约2.5摩尔浓度的溶液。使混合物升温至0℃,然后在该温度下搅拌5-10分钟。
第2阶段[酰胺(XI)向烯醇化锂的转化]:伪麻黄碱酰胺(XI)去质子化生成烯醇化锂的反应用2.0至3.2当量的锂碱、优选用约2.05当量的LDA进行,条件是酰胺(XI)不含有除伪麻黄碱的羟基以外的其它未保护的质子官能团(OH,NHR)。否则,还必须使用使该官能团去质子化所需量的锂碱。第4阶段所需的锂盐、优选氯化锂可以任选地已经被溶解/部分混悬在反应混合物中。用LDA进行的酰胺(XI)去质子化生成烯醇化锂的反应在-78℃至+40℃下、优选在-20℃至+20℃下进行。特别优选地将酰胺(XI)的溶液在约-20℃下历经约30分钟至1小时滴加到LDA溶液中,所述LDA溶液可以任选地还包含氯化锂。将混合物在-20℃下搅拌约15-30分钟,使其历经30分钟升温至0℃,然后在该温度下搅拌15分钟。烯醇化在0℃下通常很迅速,因此在这时反应完全。然而,任选地可以迅速升温至+25℃并在该温度下再搅拌5分钟,因为伪麻黄碱酰胺烯醇化物具有良好的热稳定性(半衰期>12小时;参见A.G.Myers等,J.Am.Chem.Soc.1997,119,6496,第6497页)。用LiHMDS(优选3.0-3.5当量)进行的酰胺(XI)去质子化生成烯醇化锂的反应在-78℃至+40℃下、优选在-20℃至+20℃下进行。特别优选地将LiHMDS溶液(优选约3.2当量)在-5℃至0℃下历经约30分钟缓慢滴加到酰胺(XI)的溶液中,所述酰胺(XI)的溶液可以任选地包含约4当量氯化锂。然后在0℃下再搅拌1小时。
第3阶段[任选地酰胺烯醇化锂的金属转移作用]:可以将伪麻黄碱酰胺(XI)的烯醇化锂在对亚胺(III)进行曼尼希加成之前进行金属转移生成烯醇化钛、烯醇化硼、烯醇化锌,或者可以不进行预先的金属转移而直接用于曼尼希加成(第4阶段)。优选直接使用烯醇化锂或金属转移生成烯醇化锌,特别优选不进行金属转移使用烯醇化锂。烯醇化锌是通过冷却第2阶段获得的烯醇化锂的溶液并在-78℃至0℃下、优选在-20℃至0℃下加入2当量无水氯化锌在THF中的溶液来生成的。如果ZnCl2的加入在-78℃下进行,则随后将混合物在该温度下搅拌1小时。如果所述加入在-20℃至0℃下进行,则随后的搅拌时间仅30-10分钟。
第4阶段[酰胺烯醇化物对亚胺(III)的曼尼希加成]:将第2阶段或第3阶段生成的伪麻黄碱酰胺(XI)的烯醇化物与亚胺(III)进行加成,以高的反/顺-和π侧非对映立体选择性形成2,3-反式-3-芳基氨基羧酰胺(XII)。在所研究的实施例中,所需的非对映体(XII)与所有其它非对映体的总量的比>85%,在一些情况下高达97%。该加成在存在3-8当量锂盐、优选氯化锂的情况下进行,特别优选在存在4-6.5当量氯化锂的情况下进行。基于酰胺烯醇化物,使用1.1-5.0当量亚胺(III),优选1.3-4.0当量,特别优选1.5-2.0当量。曼尼希加成在-20℃至+30℃下、优选在-10℃至+20℃下、特别优选在0℃至+10℃下进行。在一个特别优选的实施方案中,将1.5-2.0当量1摩尔浓度的亚胺(III)的THF溶液在0至+10℃下历经10分钟滴加到1当量0.2-0.5摩尔浓度的烯醇化锂的THF溶液中,所述烯醇化锂的THF溶液包含6-6.5当量氯化锂,然后将混合物在该温度下搅拌1-3小时。将反应混合物进行后处理,通过本领域技术人员公知的常规方法分离曼尼希产物。
伪麻黄碱的消除可以通过用质子酸或用路易斯酸进行的酸水解进行。然而,伪麻黄碱酰胺也可以通过碱水解或在沸水中裂解。其实例可在上述A.G.Myers的出版物中以及在D.Badia等,J.Org.Chem.2001,66,9030-9032和Org.Lett.2001,3(5),773-776中找到。对于本发明的α-烷基-取代的β-芳基-β-芳基氨基丙酸伪麻黄碱酰胺(XII)的酰胺裂解,优选使用碱水解,因为在酸性条件下消除反应可产生杂质,酰胺裂解在沸水中仅能非常缓慢地进行。在沸腾的氢氧化钠的含水乙醇溶液中进行的碱性酰胺裂解过程中,可能存在α位的差向异构化,程度或高或低,这必须尽可能地被抑制。已经发现,在此过程中发生的碱性酰胺水解的速度和α-差向异构的程度在很大程度上取决于曼尼希产物(XII)中的5(S)-羟基是否被保护或怎样被保护。在其它反应参数相同的情况下,当使用具有未保护的5(S)-羟基的曼尼希产物(XII)(即R10=H)时,碱性酰胺水解的速度最大,α-差向异构化最小。如果使用的(XII)具有对高碱性的反应条件不是惰性的保护基,当保护基R10被更快地消除时,酰胺裂解的速度更快,α-差向异构化更小。如果使用惰性保护基R10,酰胺裂解缓慢,α-差向异构化的程度高,在惰性保护基R10的非极性增加的情况下更甚。因此,优选的是用具有未保护的5(S)-羟基(R10=H)的曼尼希产物(XII)的碱性酰胺裂解。一种供选择的可能还有通过使用酰胺裂解酶来消除伪麻黄碱。另一种选择是如N.M.Kostic等,J.Am.Chem.Soc.2004,126,696-697所述在pH 7.0和25℃下在0.1M磷酸盐缓冲液中用高氯酸钯(II)四水合物进行的酰胺裂解。
如果需要,可以任选地通过本领域技术人员已知的方法将保护基重新引入到酰胺裂解反应的产物(式XIII)中[参见“Protective Groups ofOrganic Synthesis”(T.W.Green,P.G.M.Wuts(编辑),John Wiley&Sons,Inc.,1999)]。
可由此在任选的方法变体中获得的R9=H的羧酸(XIII)可以被直接或在活化后-在R9是(C1-C4)烷基、CO(C1-C4)烷基、COO(C1-C4)烷基、SO2-芳基的情况下-被转化成β-内酰胺(XIV)。这也可直接由(XII)得到。对于可能的反应条件的综述可在“Methoden der Organische Chemie(Houben-Weyl)”(第16b卷,第60-114页,Georg Thieme Verlag Stuttgart,纽约,1991)中找到。优选将羧酸(XIII,R9=H)转换成甲基酯((XIII,R9=CH3),后者在碱存在下环化成β-内酰胺(XIV)。该环化反应特别优选地用1-2当量作为碱被加入到作为溶剂的THF中的双(三甲基硅烷基)氨基锂(LHMDS)进行。该环化反应在-40℃至+50℃的温度范围内、优选在-20℃至+25℃下、特别优选在-10℃至0℃下进行。
最后,可以利用本领域技术人员已知的方法除去保护基。
在式(VI)化合物进一步反应生成其中R2是CH2NHR4(R4≠H)的式(I)化合物的情况下,式(VI)的胺、即其中R8在去保护后是R2且特别是CH2NHR4(R4=H)的化合物与式(XV)或(XVI)的化合物反应,
在消除先前的保护基团得到所需的化合物(I)(通过肽偶联)。通过将相应的式(VI)化合物简单去保护而无需进一步反应即获得式(I)的其它化合物。
此外,定义中所用的术语具有下列含义(上文已经规定的除外):
Ac=乙酰基;烷基=(C1-C14)烷基,优选(C1-C8)烷基,直链的或支链的;芳基=(C6-C10)芳基;在取代基前面的p如“pOCH3”表示在芳族系统的4位。
本发明的方法确保了本身已知的二苯基氮杂环丁烷酮衍生物可以以良好的产率被制得,而且没有现有技术的缺点,例如使用导致不需要的副产物的辅助试剂。
此外,下列实施例用于解释本发明。
实施例1-14和18-35显示了前体或中间体的制备,实施例15-17显示了二苯基氮杂环丁烷酮的生成以及它们的去保护。此外,出于比较目的,还给出了参考实施例C1。
实施例1
通过不对称的(R)-Me-CBS-催化的酮还原制备5-(4-氟苯基)-5(S)-羟基戊酸甲酯
将890ml二氯甲烷在氮气下引入到带有机械搅拌器、滴液漏斗(带有测微器)和热敏元件的四颈圆底烧瓶中。加入210ml(420mmol)2M的硼烷-二甲硫络合物的THF溶液,然后将溶液冷却到-5℃。加入21ml(21.4mmol)1.02M的(R)-四氢-1-甲基-3,3-二苯基-1H,3H)-吡咯并[1,2-C][1,3,2]噁唑硼烷的甲苯溶液[“(R)-Me CBS”,由Strem提供],将反应混合物在-5℃下搅拌15分钟。在-5℃下历经3小时以均匀的速度滴加93.5g(414.5mmol)纯度为99.4%的5-(4-氟苯基)-5-氧代-戊酸甲酯在600ml二氯甲烷中的溶液,然后搅拌1小时。薄层色谱法(=TCL)(乙酸乙酯/正庚烷8∶2)检测显示酮酸酯完全转化成了羟基酯。历经30分钟滴加60ml(约1470mmol)甲醇,然后缓慢滴加255ml(约2960mmol)35%的过氧化氢水溶液。该滴加过程伴随着大量放热并放出气体。滴加83ml 2-标准(normal)硫酸水溶液,将混合物搅拌15分钟。分离有机相并依次用600ml 2-标准硫酸水溶液、3×600ml5%的亚硫酸钠水溶液和600ml饱和氯化钠水溶液洗涤。将溶液干燥,过滤,真空浓缩,在高真空(=HV)下干燥残余物。获得91.6g(根据重量,405mmol)微黄色油状物。HPLC(100面积%分析,250×4.6mm ChiralpakAD-H;15℃;正己烷/乙醇90∶10;1ml/min.;检测波长210nm)显示化学纯度为92%,96%ee(ee是对映体过量的缩写)[(S)-对映体的tret:13.8min.,(R)-对映体:16.7min.]。根据化学纯度校正的产率是理论值的90%。1H-NMR(400MHz,CDCl3):δ=1.55-1.85(m,4H,2×CH2),2.03(s,宽,1H,OH),2.34(td,2H,CH2CO2),3.66(s,3H,OCH3),4.67(t,1H,CH-OH),7.03(~t,2H,芳族-H),7.31(~dd,2H,芳族-H)。
实施例2
5(S)-(叔丁基二甲基硅烷基氧基)-5-(4-氟苯基)戊酸甲酯
将90.5g(368mmol)来自实施例1的纯度为92%的羟基酯在800ml二氯甲烷中的溶液引入到带有机械搅拌器、滴液漏斗和热敏元件的双颈圆底烧瓶中。加入54.5g(800mmol)咪唑,短暂搅拌后溶解,在此期间内部温度从20℃降低到13℃。滴加74.5g(479mmol)纯度为97%的叔丁基二甲基氯硅烷在135ml二氯甲烷中的溶液,在此期间内部温度从14℃上升到27℃,有白色沉淀析出。然后将反应混合物在回流下沸腾4小时。TLC检测(乙酸乙酯/正庚烷1∶1)现在显示仅有痕量前体。将混悬液通过已经以在500ml二氯甲烷中的浆液形式被填充到柱中的200g硅胶60(Merck,0.035-0.07mm)过滤。用2×250ml乙酸乙酯洗涤(洗脱)。真空浓缩合并的有机相,在HV下干燥残余物。获得136.5g(根据重量,400mmol)浅黄色油状物。HPLC(250×4.6mm Chiralpak AD-H;10℃;正己烷/iPrOH 95∶5;0.5ml/min.;检测波长210nm)显示96%ee[(R)-对映体的tret:5.7min.(S)-对映体的tret:6.6min.]。1H-NMR(400MHz,CDCl3):δ=-0.15(s,3H,Si-CH3),0.02(s,3H,Si-CH3),0.88(s,9H,Si-tBu),1,55-1,75(m,4H,2×CH2),2,28(td,2H,CH2-CO2),3.65(s,3H,OCH3),4,65(~t,1H,CH-OSi),6.98(~t,2H,芳族-H),7,24(~dd,2H,芳族-H)。
实施例3
[2(S)-羟基-1(S)-甲基-2-苯基乙基]-N-甲基-5(S)-(叔丁基二甲基硅烷基氧基)-5-(4-氟苯基)戊酰胺
在充分加热干燥的带有机械搅拌器、隔板和温度计的三颈圆底烧瓶中,将5.03g(117mmol)纯度为99%的无水氯化锂和9.9g(58.7mmol)纯度为98%的(+)-(1S,2S)-伪麻黄碱在81ml无水THF中的溶液在冰浴中冷却到<2℃。历经10分钟利用注射器通过隔板滴加5.9ml(14.6mmol)2.5摩尔浓度的正丁基锂的己烷溶液,在此期间澄清的反应溶液的内部温度升高到5℃。10分钟后,历经30分钟滴加25g(53.6mmol)纯度为73%的来自实施例2的酯在17ml无水THF中的溶液。然后将反应混合物在室温下搅拌36小时。TLC检测(乙酸乙酯/正庚烷1∶1)显示前体和产物的比例为约1∶3。向在冰中冷却的反应混合物中滴加80ml水,开始缓慢滴加,然后更快速地滴加,在此期间形成两相。真空蒸馏出大部分THF(90ml馏出液)。首先用80ml二氯乙烷萃取水性残余物,然后再用2×40ml二氯甲烷萃取。将合并的萃取物用碳酸钾干燥,过滤,真空浓缩,在HV下干燥残余物。得到34.6g粘性的黄色油状物。将粗品用柱色谱法(900g Merck硅胶60,0.04-0.063,用3L二氯甲烷洗脱,然后用二氯甲烷/甲醇(99∶12L,然后98∶22L,然后97∶32L;流速80ml/分钟;250ml级分)处理,得到5.4g(13.5mmol,理论值的25%)纯度为约85%的回收的酯(级分6-9)和19.0g(40.1mmol,理论值的75%)酰胺(级分33-41)。按照上述类似的方法使回收的酯反应,但使用0.4当量(而不是0.25当量)n-BuLi(基于(+)-伪麻黄碱),酯完全转化,用乙酸乙酯(代替二氯甲烷)萃取后,得到另外4.4g(9.3mmol)酰胺。因此总收率(浅黄色树脂)合计达到23.4g(49.4mmol,理论值的92%)。
HPLC[色谱柱:250×4.6mm(R,R)-Whelk 01;洗脱液:正己烷/iPrOH 90∶10;流速:1ml/min;温度:25℃;检测波长:210nm,5(S)-硅烷基氧基-非对映体的tret8.4min.;相同的UV光谱的峰(可能5(R)-非对映体):tret7.4min]显示非对映体纯度为96%de(de是非对映体过量的缩写)。1H-NMR(400MHz,CDCl3):由于存在酰胺官能团的两个旋转异构体(比例为约2.8∶1),产生两组信号。主要旋转异构体的信号用(*)标识,次要旋转异构体的信号用(#)标识。未标识的信号归属于重叠的旋转异构体信号。δ=-0.12(s,3H,Si-CH3),0.03(s,3H,Si-CH3),0.89(s,9H,Si-tBu),0.92(#,d,3H,CH-CH 3 ),1.09(*,d,3H,CH-CH 3 ),1.5-1.8(m,4H,2×CH2),2.20-2.48(m,2H,CH2CON),2.78(*,s,3H,N-CH3),2.89(#,s,3H,N-CH3),3.93(#.qui,1H,CHCH3),4.20(s,宽,1H,OH),4.42(*,qui,1H,CHCH3),4.57(m,1H,CHOH),4.67(m,1H,CHOSi),6.97(~t,2H,芳族-H),7.20-7.40(m,7H,芳族-H)。
HPLC-MS(TOF,正ESI)[TOF是飞行时间质谱的缩写;ESI是电喷雾离子化的缩写]:m/z=474(100%,M+H+),342(64%,M+H+-tBuMe2SiOH)。
实施例4
(4-甲氧基亚苄基)-(4-{[(4-甲氧基亚苄基)氨基]甲基}苯基)胺
将430ml甲苯和40ml(349mmol)纯度为99%的4-氨基苄基胺引入到带有机械桨搅拌器、脱水器和回流冷凝器的四颈烧瓶中。由于胺的溶解度低,获得两相的混合物。加入96ml(775mm0l)纯度为98%的茴香醛,用油浴将混合物加热到140℃。在升温相中,反应混合物在约80℃开始沸腾,混浊的水/甲苯共沸物蒸馏到脱水器中。约30分钟后,最高内部温度为114℃,现在只有澄清的甲苯蒸馏出来。分离出12.5ml水(相当于两当量水的理论值的100%)。TLC检测(通过预先放置在NEt3(三乙胺)蒸气饱和的槽中被失活的板,乙酸乙酯/正庚烷1∶1加1%NEt3)显示4-氨基苄基胺完全转化。将混合物主动冷却到室温。然后,缓慢加入800ml正庚烷和200ml乙酸乙酯的混合物,在此期间,加入仅约200ml后,自动析出浅黄色沉淀。将混合物搅拌1小时,抽滤出沉淀物,在HV下干燥。产率:105.6g。将滤液真空浓缩到约50ml。向剩余的混悬液中滴加160ml庚烷和40ml乙酸乙酯的混合物。搅拌30分钟后,抽滤出沉淀物,在HV下干燥。产率:15.6g。总产率:121.2g(338.1mmol,理论值的97%)黄色晶体。
1H-NMR(400MHz,CDCl3):δ=3.84(s,3H,OCH3),3.88(s,3H,OCH3),4.80(s,2H,CH2),6.93(d,2H,芳族-H),6.98(d,2H,芳族-H),7.18(d,2H,芳族-H),7.34(d,2H,芳族-H),7.73(~d,2H,芳族-H),7.84(~d,2H,芳族-H),8.32(s,1H,N=CH),8.39(s,1H,N=CH)。
实施例5
[2(S)-羟基-1(S)-甲基-2-苯基乙基]-N-甲基-5(S)-(叔丁基二甲基硅烷基氧基)-5-(4-氟苯基)-2(R)-[(4-{[(4-甲氧基亚苄基)氨基]甲基}苯基氨基)-(4-甲氧基苯基)-(S)-甲基]戊酰胺(“亚胺-保护的曼尼希产物”)
将氯化锂(纯度99%)在150-200℃/4×10-3mbar下干燥3小时。用CaH2新鲜蒸馏二异丙胺(纯度99.5%),根据卡尔·费歇尔滴定法,其含有0.02重量%的水。通过用干燥氩气鼓泡将四氢呋喃(THF)脱气,格努照卡尔·费歇尔滴定法,其含有<0.005重量%的水。在充分加热干燥的带有磁力搅拌器、隔板、滴液漏斗(带有氮气入口管)和低温温度计的三颈圆底烧瓶中,将47.6ml THF和12.6ml(89.6mmol)二异丙胺加入到10.1g(236mmol)干燥的氯化锂中。将混合物在干冰/丙酮浴中冷却到-78℃,历经20分钟用注射器泵滴加33.2ml(82.7mmol)2.5摩尔浓度的正丁基锂的己烷溶液。使反应混合物升温到0℃,在-30℃下变得非常混浊,在0℃下搅拌5分钟。再次冷却到-78℃,得到搅拌非常困难的浓浆液。历经30分钟通过滴液漏斗滴加18.9g(40.0mmol)伪麻黄碱酰胺(来自实施例3)在80ml THF中的溶液。为了改进机械搅拌器的搅拌效果,最初短暂移开冷却浴,在此期间内部温度上升到最高-50℃。混合物的粘性迅速减小,因此可以将反应烧瓶重新浸入冷却浴中。在-78℃下继续搅拌1小时。使混合物升温到0℃,在该温度下搅拌15分钟并在室温下再搅拌5分钟,再次冷却到0℃。历经20分钟滴加28.6g(79.7mmol,基于酰胺,2当量)双亚胺(bisimine)(来自实施例4)在95ml THF中的溶液,在此期间反应混合物颜色变深。然后,在0℃下搅拌1小时。
HPLC检测[色谱柱:150×4.6mm Zorbax Eclipse XDB-C8;流动相:洗脱液A(NEt3/AcOH-缓冲液20mM pH 7.0),洗脱液B(CH3CN);在15分钟内A∶B梯度9∶1,线性变化到1∶9,然后10min等度洗脱A∶B=1∶9;温度25℃,流速1ml/min.;检测波长:254nm(210nm用于酰胺和伪麻黄碱);样品溶液的浓度为约2mg/ml;进样体积5μl]显示伪麻黄碱酰胺(tret 17.4分钟)大部分转化为曼尼希产物(tret19.5分钟),有少量的其非对映体(tret 18.8分钟)。亚胺-去保护的曼尼希产物有少量,显示为变宽的峰(tret 16.9分钟),其来自于HPLC进样溶液的水解。过量的双亚胺在tret 13.9min有显示,其水解产物茴香醛在tret9.1min有显示,痕量伪麻黄碱在tret 4.0min有显示。将反应混合物在氮气下倒入在4L的烧瓶中进行剧烈机械搅拌并冷却到0℃的1.6L 10%的乙酸水溶液和1.6L二氯甲烷的混合物中,颜色变浅和变黄。使混合物升温到室温,分离出有机相,水相(pH 3-4)用2×600ml二氯甲烷萃取。用总量1.4L的饱和NaHCO3水溶液洗涤合并的有机相,补充洗涤溶液直到振摇后水相的pH保持在7-8。将有机相用碳酸钾干燥,过滤,真空浓缩,在HV下干燥残余物。得到41.7g粗产物,为粘性棕色树脂状物。用HPLC测定含量。为此目的,用色谱纯化的亚胺-保护的曼尼希产物和亚胺-去保护的曼尼希产物的样品作为参照标准。校准溶液(0.2-0.8mg/ml)是通过将两种标准品各自准确称量入三个容量瓶中来制备的。将亚胺-保护的曼尼希产物和亚胺-去保护的曼尼希产物的这些校准溶液各自产生的HPLC峰面积相对于校准溶液的各自溶度作图,以这种方式获得两条校准线。随后,将三份粗产物样品准确称量入容量瓶中。使用这些样品羧产生的HPLC峰面积可以由校准线读出亚胺-保护的曼尼希产物和亚胺-去保护的曼尼希产物的含量。粗产物含有57重量%的亚胺-保护的曼尼希产物和8重量%的亚胺-去保护的曼尼希产物。
产率:23.8g(28.6mmol,理论值的71.4%)亚胺-保护的曼尼希产物,3.3g(4.6mmol,理论值的11.6%)亚胺-去保护的曼尼希产物。曼尼希产物的总产量合计33.2mmol(理论值的83%)。
通过制备HPLC[100×19mm(BV=28.3ml)Xterra C18 MS 5μm(Waters);洗脱液A(20mM三乙胺的在溶液,用乙酸调至pH 7),洗脱液B(乙腈/水95∶5);梯度和流速:25min等度洗脱10ml/min.30%A/70%B,然后在45min内以9ml/min的速度线性梯度至0%A/100%B;线性流速193cm/h;柱温19-22℃;检测波长254nm;进样溶液:将100mg粗产物溶解在6.5ml洗脱液B中,用3ml洗脱液A稀释,将所得溶液进样;产物分离:使纯的级分进入30ml磁力搅拌的氯仿中,使用分液漏斗分离出氯仿相,在25℃下真空蒸发至干]。
1H-NMR(400MHz,CDCl3):由于存在酰胺官能团的两个旋转异构体(比例为约3.5∶1),产生两组信号。主要旋转异构体的信号用(*)标识,次要旋转异构体的信号用(#)标识。未标识的信号归属于重叠的旋转异构体信号。δ=-0.23(#,s,3H,Si-CH3),-0.15(*,s,3H,Si-CH3),-0.11(#,s,3H,Si-CH3),-0.02(*,s,3H,Si-CH3),0.69(*,d,3H,CHCH 3 ),0.75(#,s,9H,Si-tBu),0.79(#,d,3H,CHCH 3 ),0.86(*,s,9H,Si-tBu),1.40-2.10(m,5H,2×CH2,CHCON),2.32(*,s,3H,NCH3),2.88(#,s,3H,NCH3),3.08(*,m,1H,NH-CH),3.24(#,m,1H,NH-CH),3.75(*,s,3H,OCH3),3.78(#,s,3H,OCH3),3.87(s,3H,OCH3),4.12和4.38-4.80(m,6H,CHCH3,CH-0H,CH-OSi,=N-CH2),6.45(*,d,2H,芳族-H),6.50(#,d,2H,芳族-H),6.78(d,2H,芳族-H),6.80-7.08(m,6H,芳族-H),7.08-7.47(m,9H,芳族-H),7.70(~d,2H,芳族-H),8.22(#,s,1H,CH=N),8.26(*,s,1H,CH=N)。HPLC-MS(输注,TOF,正ESI):m/z=854(7%,M+Na+),832(2%,M+H+),697(100%,M+Na+-tBu)。
实施例6
[2(S)-羟基-1(S)-甲基-2-苯基乙基]-N-甲基-2(R)-[(4-氨基甲基-苯基氨基)-(4-甲氧基苯基)-(S)-甲基]-5(S)-(叔丁基二甲基硅烷基氧基)-5-(4-氟苯基)戊酰胺(“亚胺-去保护的曼尼希产物”)
在1.0ml乙腈中制备450mg实施例5的曼尼希产物粗品的澄清溶液。加入0.4ml去离子水,此时棕色溶液变得轻微混浊。用注射器滴加45μl(0.78mmol)冰醋酸,然后加入另外0.6ml去离子水。所得溶液的pH为5.4。在室温下放置1小时后对溶液进行HPLC分析,显示几乎完全转化。将溶液上样至半制备HPLC柱[19×100mm Xterra C18MS,5μm(Waters)]上,用下列梯度洗脱[溶剂A:20mM NEt3的水溶液,用乙酸调至pH 7;溶剂B:CH3CN/水95∶5v/v;在28.5分钟内从A∶B=60∶40(10ml/min)线性至A∶B=27∶73(10ml/min);然后3.9min等度洗脱,A∶B=27∶73(9ml/min);然后在0.1min内洗到100%B(9ml/min),用100%B(9ml/min)进行7min等度洗脱,然后回到A∶B 60∶40]。收集纯的产物洗脱级分(tret=23-25分钟),在100mbar和30℃下浓缩,然后用二氯甲烷萃取三次。真空浓缩合并的萃取物,将残余物在HV下干燥。得到173mg(0.242mmol,理论值的68%)无定形米黄色固体。
1H-NMR(400MHz,CDCl3):由于存在酰胺官能团的两个旋转异构体(比例为约2∶1),产生两组信号。主要旋转异构体的信号用(*)标识,次要旋转异构体的信号用(#)标识。未标识的信号归属于重叠的旋转异构体信号。δ=-0.28(#,s,3H,Si-CH3),-0.18(*,s,3H,Si-CH3),-0.14(#,s,3H,Si-CH3),-0.02(*,s,3H,Si-CH3),0.67(*,d,3H,CHCH 3 ),0.71(#,s,9H,tBu),0.74(#,d,3H,CHCH 3 ),0.84(*,s,9H,tBu),1.4-2.05(m,5H,CH和2×CH2),2.30(*,s,3H,NCH3),2.5(s,非常宽,3H,NH2和NH),2.84(#,s,3H,NCH3),3.07(*,~qui,1H,NHCH),3.20(#.~qui,1H,NHCH),3.55(#,AB系统,2H,CH 2 NH2),3.66(*,s,2H,CH 2 NH2),3.72(*,s,3H,OCH3),3.76(#,s,3H,OCH3),4.07-4.19和4.35-4.72(m,4H,CHCH3,CHOH和CHOSi),6.43和6.73-7.43(m,17H,芳族-H)。用一种特殊的脉冲程序(2D EXSY;参见Braun,Kalinowski,Berger,“150 And More Basic NMR Experiments”,Experimetn 10.23,第420页,第二次扩充版,Wiley-VCH Verlag GmbH,Weinheim 1998)证明两套信号的质子相互转换,因此存在旋转异构体而非立体异构体。
MS(在Quattroultima上输注,TOF,正ESI):m/z=714(63%,M+H+),697(100%,M+H+-NH3)。
实施例7
[2(S)-羟基-1(S)-甲基-2-苯基乙基]-N-甲基-2(R)-[(4-氨基甲基苯基氨基)-(4-甲氧基苯基)-(S)-甲基]-5(S)-(叔丁基二甲基硅烷基氧基)-5-(4-氟苯基)戊酰胺(“亚胺-去保护的曼尼希产物”)
在氮气和磁力搅拌下,将7.6ml 20%的乙酸/乙酸钠缓冲液(pH 4.5)滴加到1.47g(1.76mmol)色谱纯化的亚胺-保护的曼尼希产物在7.6ml甲醇中的澄清的黄色溶液中。在此期间,前体以油状物的形式短暂析出,但是几秒钟后复溶。获得pH 5的澄清溶液。在室温下搅拌5分钟后,HPLC显示出茴香醛和向产物的定量转化。搅拌30分钟后,将溶液用45ml水稀释,当它变得混浊时,用0.1ml冰醋酸调节至pH 4。通过用4×30ml正庚烷萃取完全除去茴香醛。将30ml二氯甲烷加入酸性水相中,在剧烈搅拌的同时用19.5ml 1N的氢氧化钠水溶液将pH调节至11。分离出有机相,用2×30ml二氯甲烷萃取水相。将合并的二氯甲烷萃取物用硫酸钠干燥,过滤,真空浓缩,将残余物在HV下干燥。得到1.09g(1.53mmol,理论值的87%)纯产物,为无定形米黄色固体。
在碱化水相前完全除去茴香醛是非常重要的。如果由茴香醛残余物残留,则重新形成相应量的前体。
实施例8
2(R)-[(4-氨基甲基苯基氨基)-(4-甲氧基苯基)-(S)-甲基]-5-(4-氟苯基)-5(S)-羟基戊酸
在带有搅拌棒的三颈梨形烧瓶中,将10ml乙醇和4ml(12.9mmol)3.22N的氢氧化钠水溶液加入到2.09g(2.5mmol)色谱纯化的酰胺(来自实施例5)中。将混合物加热至回流,慢慢变成澄清溶液。23小时后,HPLC检测(系统如实施例5所述,检测波长254nm)显示除前体(tret 19.4min)和亚胺-去保护的前体(tret 18.6min)[共57面积%]外,主要是茴香醛(tret 9.1min,5面积%)、伪麻黄碱(tret 4.2min,210nm)和tret为6.9和6.5min的两个产物峰(共26面积%,比例4.8∶1),所述峰被归属为产物和其差向异构体(碱诱导的羧基α-位的差向异构化)。加入另外4ml(12.9mmol)3.22N氢氧化钠水溶液,将混合物再回流2天。将混合物冷却并真空除去乙醇。将水性残余物与25ml水混合,再次真空浓缩至总体积约25ml。用3×40ml乙醚洗涤水性残余物。HPLC分析显示,醚相含有未裂解的前体和茴香醛,同时大于90面积%的酸性水相包含产物和其差向异构体(比例为4.3∶1)。在剧烈搅拌的同时,向水相中加入50ml二氯甲烷,用约8ml 2N的盐酸将pH调节至7,从而有细小的沉淀物析出。抽滤出所述沉淀物,用水和二氯甲烷洗涤,在HV下干燥。获得850mg(1.88mmol,理论值的75%)微黄色粉末。
粉末的HPLC分析显示产物与差向异构体的比例为6∶1,化学纯度为93面积%。
1H-NMR和MS数据与实施例10的(更纯的)产物的数据一致。
实施例9
2(R)-[(4-氨基甲基苯基氨基)-(4-甲氧基苯基)-(S)-甲基]-5-(4-氟苯基)-5(S)-羟基戊酸
在带有搅拌棒的圆底烧瓶中,将0.8ml N-甲基-2-吡咯烷酮和0.98ml(5.98mmol)40%的四丁基氢氧化铵水溶液加入到209mg(0.25mmol)色谱纯化的酰胺(来自实施例5)中。将反应混合物加热到40℃。HPLC检测(系统如实施例5所述,检测波长254nm)显示1小时后仍残留30%前体,3小时后前体完全转化。产物和差向异构体的峰与实施例8的峰具有相同的保留时间,它们的比例为5∶1。
实施例10
2(R)-[(4-氨基甲基苯基氨基)-(4-甲氧基苯基)-(S)-甲基]-5-(4-氟苯基)-5(S)-羟基戊酸
在带有搅拌棒的三颈梨形烧瓶中,将750mg(1.05mmol)纯亚胺-去保护的曼尼希产物(来自实施例7)在12ml乙醇中的澄清的黄色溶液加热到75℃,缓慢滴加9ml(29mmol)3.22N的氢氧化钠溶液,同时保持内部温度直到持续出现轻微混浊。然后,将混合物加热至回流达19小时。HPLC检测(系统如实施例5所述,检测波长254nm)显示有两种产物信号(总计90面积%),比例为5∶1,还有3.6面积%的未反应的前体以及(在210nm下)消除的伪麻黄碱。冷却反应混合物,加入20ml水,然后真空浓缩到总体积为约20ml以除去乙醇。向水性残余物中再次加入20ml水,将其再次浓缩。用2×20ml乙醚洗涤混浊的水性残余物,然后根据HPLC分析,其含有纯度为96面积%的产物且比例为5∶1。在冰浴中用14ml 2N的盐酸将水相调节至pH 7,开始加入后不久就析出絮状黄色沉淀。在剧烈搅拌的同时加入10ml二氯甲烷,从而沉淀物转化成细小的颗粒。将其抽滤,用二氯甲烷和少量水洗涤,在HV下干燥。产率:340mg(0,75mmol,理论值的72%)浅黄色的粉末,根据HPLC分析,其含有纯度为95面积%的产物,比例为91∶9。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6):δ=1.14-1.60(m,4H,2×CH2),2.38(m,1H,CHCO2),2.7-4.2(s,非常宽,3-4H,NH2,NH和可能地OH),3.63(s,2H,CH 2 N),3.68(s,3H,OCH3),4.21(d,1H,NCH),4.37(t,1H,CHOH),6.32(d,2H,芳族-H),6.74(d,2H,芳族-H),6.98(d,2H,芳族-H),7.04(t,2H,芳族-H),7.12-7.28(m,4H,芳族-H)。MS(在pH 7下输注,Quattroultima TOF,正ESI):m/z=453[3%,C26H29FN2O4的M+H+],436[100%,M+H+-NH3]。
实施例11
2(R)-[(4-{[(叔丁基二甲基硅烷基)氨基]甲基}苯基氨基)-(4-甲氧基苯基)-(S)-甲基]-5(S)-(叔丁基二甲基硅烷基氧基)-5-(4-氟苯基)戊酸叔丁基二甲基硅烷基酯
在带有磁力搅拌器、温度计和回流冷凝器的三颈梨形烧瓶中,将311mg(0.687mmol)氨基羟基羧酸(来自实施例10)混悬在2ml二氯甲烷中。加入272mg(3.94mmol)纯度为99%的咪唑并溶解。然后滴加306mg(1.97mmol,2.9当量)纯度为97%的叔丁基二甲基氯硅烷(TBDMS-Cl)在0.5ml二氯甲烷中的溶液。形成澄清的黄色溶液,将该溶液加热至回流达4小时。HPLC(系统如实施例5所述,检测波长254nm)显示存在tret11.7min的产物,含量为99.0面积%。将混合物在冰浴中冷却,同时进行剧烈搅拌,加入3ml水。分离各相,用2×5ml二氯甲烷萃取水相。由于咪唑不溶解,所以合并的有机相是混浊的,将其用硫酸钠干燥,过滤,真空浓缩,将残余物在HV下干燥,在此期间,最初的树脂状固体碎裂成无定形黄色粉末。产率:529mg(0.665mmol,理论值的97%)。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6):δ=-0.25(s,3H,Si-CH3),-0.12(s,3H,Si-CH3),-0.03(s,6H,Si(CH3)2),0.02(s,6H,Si(CH3)2),0.71(s,9H,Si-tBu),0.85(s,9H,Si-tBu),0.86(s,9H,Si-tBu),1.07-1.53(m,4H,2×CH2),2.38(t,1H,CHCO2),3.64(s,2H,NCH2),3.68(s,3H,OCH3),4.25(d,1H,NCH),4.52(t,1H,CHOSi),6.40(d,2H,芳族-H),6.77(d,2H,芳族-H),6.98(d,2H,芳族-H),7.06(t,2H,芳族-H),7.19(t,2H,芳族-H),7.24(d,2H,芳族-H)。根据NMR,存在3.9重量%(32mol%)的咪唑杂质。
MS(在pH 7下输注,Quattroultima TOF,正ESI):m/z=679(81%,二硅烷基化合物的M-H-),565(100%,单硅烷基化合物的M-H-)。因此,发现了单硅烷基化合物(O-TBDMS,-CO2H,-NH2)和二硅烷基化合物(O-TBDMS,CO2H,-NH-TBDMS)。不能检测到三硅烷基化合物的分子峰,因为硅烷基酯基团在MS条件下极不稳定。
实施例12
2(R)-[(4-氨基甲基苯基氨基)-(4-甲氧基苯基)-(S)-甲基]-5(S)-(叔丁基二甲基硅烷基氧基)-5-(4-氟苯基)戊酸
在10ml量筒中,将72μl冰醋酸(Merck)溶解在甲醇中,并用甲醇定容至刻度。
在氮气下,在带有磁力搅拌器的圆底烧瓶中,将200mg(0.241mmol)纯度为96%的Tris-TBDMS化合物(来自实施例11)溶解在1.0ml冰醋酸的甲醇溶液中。将混合物在室温下搅拌2小时,然后真空浓缩,将残余物在HV下干燥。样品的1H-NMR分析(400MHz,CDCl3)显示苄基TBDMS醚官能团根本未进行去保护,而TBDMS酯约70%、TBDMS胺约35%去保护。将残余物(189mg)溶解在1.0ml冰醋酸的甲醇溶液中,在室温下搅拌18小时,然后如前面一样蒸发至干。样品的1H-NMR显示TBDMS醚根本没有去保护,TBDMS酯约85%去保护,TBDMS胺约43%去保护。因此乙酸的量不足以使TBDMS酯和胺足够快地去保护。将两份NMR溶液与残余物合并,蒸发至干。得到200mg固体黄色泡沫状物。
在另一个10ml量筒中,将210ml冰醋酸溶解在甲醇中,并用甲醇定容至刻度。
在氮气下,将上述200mg残余物溶解在1.0ml冰醋酸的甲醇溶液中,在40℃的浴温下加热3小时,在室温下放置过夜,然后再在40℃下加热2小时。在HV下除去所有挥发性成分。残余物:197mg固体黄色泡沫状物。样品的1H-NMR显示TBDMS醚根本没有去保护,TBDMS酯几乎完全去保护,TBDMS胺约90%去保护。
1H-NMR (400MHz,CDCl3):δ=-0.27(s,3H,Si-CH3),-0.12(s,3H,Si-CH3),0.73(s,9H,Si-tBu),1.40-1.67(m,4H,2×CH2),2.41(宽,1H,CH-CO2),3.69(AB系统,2H,NCH2),3.80(s,3H,OCH3),4.12(宽,1H,NCH),4.41(t,1H,CH-OSi),6.20(宽,2H,芳族-H),6.75-7.23(m,10H,芳族-H).MS(在pH 7下输注,Quattroultima TOF,正ESI):m/z=567(100%,M+H+)。
实施例13
2(R)-[(4-氨基甲基苯基氨基)-(4-甲氧基苯基)-(S)-甲基]-5(S)-(叔丁基二甲基硅烷基氧基)-5-(4-氟苯基)戊酸甲酯
在Aldrich生产的重氮甲烷发生器中,按照Aldrich Technical BulletinNo.AL-113由N-甲基-N-亚硝基-对甲苯磺酰胺(Diazogen)生成约0.25M的重氮甲烷在乙醚(无乙醇)中的溶液,将其新鲜蒸馏。
在进行涡旋振荡的同时,将5ml重氮甲烷的乙醚溶液加入到190mg羧酸粗品(来自实施例12,即0.229mmol)在1.0ml甲醇中的溶液中。HPLC检测(系统如实施例5所述,检测波长254nm)显示前体几乎完全反应(残留0.5面积%,tret11.7分钟),全部形成单硅烷化甲基酯(92面积%tret 17.8分钟)和二硅烷化甲基酯(6面积%,tret 19.8分钟)。通过在溶液上吹氮气流蒸发过量的重氮甲烷和大部分溶剂。将残余物在HV下蒸发至干,得到161mg固体黄色树脂状物。将粗产物用快速色谱法处理[20g Merck硅胶60,0.04-0.063mm;与色谱柱有关的条件为EtOAc/MeOH 99∶1+1%NEt3流动相,然后用100ml该流动相洗脱,接着用200ml EtOAc/MeOH 98∶2+1%NEt3洗脱]。收集10ml级分。产物在级分9-26中被洗脱。
产率:105mg(181mmol,基于三硅烷基化合物,2个步骤的产率为理论值的79%)固体黄色泡沫状物。
1H-NMR(400MHz,CDCl3):δ=-0.23(s,3H,Si-CH3),-0.09(s,3H,Si-CH3),0.78(s,9H,Si-tBu),1.5-2.0(m,6H,2×CH2,NH2),2.62(t,1H,CH-CO2Me),3.58(s,3H,CO2CH3),3.66(s,2H,NCH2),3.77(s,3H,OCH3),4.38(s宽,1H,NH),4.45和4.53(m和dd,2×1H,CH-Osi和NCH),6.48(d,2H,芳族-H),6.80(d,2H,芳族-H),6.90-7.05(m,4H,芳族-H),7.10-7.20(m,4H,芳族-H).MS(在pH 7下输注,TOF,正ESI):m/z=581(23%,M+H+),564(100%,M+H+-NH3)。
实施例14
5(S)-(叔丁基二甲基硅烷基氧基)-5-(4-氟苯基)-2(R)-[(4-{[(4-甲氧基亚苄基)氨基]甲基}苯基氨基)-(4-甲氧基苯基)-(S)-甲基]戊酸甲酯
将95mg(0.163mmol)色谱级甲基酯(来自实施例13)和22μl(0.178mmol)纯度为98%的p-茴香醛在3ml甲苯中的溶液在旋转蒸发器中于在30℃下真空浓缩。将残余物溶解在3ml份的甲苯中两次以上,并且每次都蒸发至干。样品的HPLC检测(系统如实施例5所述,检测波长254nm)显示92%的前体(tret18.0分钟)转化为产物(tret19.3分钟),存在茴香醛(tret9.1分钟)和甲苯(tret12.6分钟)的微弱的峰。在HV下将粘性的黄色油状物干燥到恒重。
产率:110mg(0.157mmol,理论值的96%)。
1H-NMR(400MHz,CDCl3):δ=-0.23(s,3H,Si-CH3),-0.09(s,3H,Si-CH3),0.77(s,9H,Si-tBu),1.44-1.75(m,5H,2×CH2,NH),2.61(m,1H,CH-CO2Me),3.57(s,3H,CO2CH3),3.76(s,3H,OCH3),3.82(s,3H,OCH3),4.42(d,1H,N-CH),4.50(dd,宽,1H,CH-OSi),4.59(s,2H,N-CH2),6.47(d,2H,芳族-H),6.79(d,2H,芳族-H),6.89(d,2H,芳族-H),6.94(t,2H,芳族-H),7.00(d,2H,芳族-H),7.09-7.20(m,4H,芳族-H),7.66(d,2H,芳族-H),8.22(s,1H,N=CH)。
实施例15
3(R)-[3(S)-(叔丁基二甲基硅烷基氧基)-3-(4-氟苯基)丙基]-1-(4-{[(4-甲氧基亚苄基)氨基]甲基}苯基)-4(S)-(4-甲氧基苯基)氮杂环丁烷-2-酮
在带有磁力搅拌器的充分加热干燥的圆底烧瓶中,在氮气下,将135μl(0.143mmol)1.06M的双(三甲基硅烷基)氨基锂的THF溶液加入到100mg(0.143mmol)亚胺-保护的甲基酯粗品(来自实施例14)在1.8ml THF中的-20℃的溶液中。反应溶液变成黄色。搅拌1小时,在此期间,温度升高到-10℃。HPLC检测(系统如实施例5所述,检测波长254nm)显示66%的前体(tret19.4分钟)全部转化为产物。此外,将产物与参考实施例1的确证的样品一起进行色谱分析。然后,在-15℃下向反应溶液中加入另外135μl(0.143mmol)1.06M的双(三甲基硅烷基)氨基锂的THF溶液。HPLC检测现在显示前体完全转化成产物。将反应混合物与3ml饱和的碳酸氢钠水溶液混合,用3×3ml二氯甲烷萃取。将有机相过滤,真空浓缩,将残余物在HV下干燥。产率:90mg(0.135mmol,理论值的94%)黄色固体。
1H-NMR(400MHz,CDCl3):δ=-0.14(s,3H,Si-CH3),0.03(s,3H,Si-CH3),0.90(s,9H,Si-tBu),1.75-2.00(m,5H,2×CH2,CH-CO-N),3.02(m,1H,N-CH),3.81(s,3H,OCH3),3.86(s,3H,OCH3),4.52-4.74(m,3H,CH-OSi,N-CH2),6.88(d,2H,芳族-H),6.93(d,2H,芳族-H),7.00(t,2H,芳族-H),7.16-7.27(m,8H,芳族-H),7.70(d,2H,芳族-H),8.28(s,1H,N=CH)。MS(在pH 7下输注,TOF,正ESI):m/z=667(100%,M+H+),532(5%,M+H+-CH3O-C6H4-CH=NH)。1H-NMR、MS、UV光谱和HPLC的tret与参考实施例1的确证的对照物质相同。
实施例16
1-(4-氨基甲基苯基)-3(R)-[3(S)-(叔丁基二甲基硅烷基氧基)-3-(4-氟苯基)丙基]-4(S)-(4-甲氧基苯基)氮杂环丁烷-2-酮
通过将亚胺-保护的β-内酰胺(来自实施例15)溶解在乙腈/水/冰醋酸中并将该溶液用半制备HPLC处理用与实施例6类似的方法消除亚胺保护基。
HPLC分析(系统如实施例5所述):前体(tret 19.9分钟)完全转化为产物(tret 17.1分钟)。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6):δ=-0.16(s,3H,Si-CH3),0.02(s,3H,Si-CH3),0.87(s,9H,Si-tBu),1.76(m,4H,2×CH2),2.10(非常宽,1H,CH-CO-N),3.06(m,1H,N-CH),3.60(s,2H,N-CH2),3.73(s,3H,OCH3),4.37(s,宽,2H,NH2),4.76(m,1H,CH-OSi),6.92(d,2H,芳族-H),7.10-7.18(m,4H,芳族-H),7.21(d,2H,芳族-H),7.28-7.38(m,4H,芳族-H)。光谱与按照WO 02/50027的信息制备的确证的样品相同。
实施例17
1-(4-氨基甲基苯基)-3(R)-[3(S)-羟基-3-(4-氟苯基)丙基]-4(S)-(4-甲氧基苯基)氮杂环丁烷-2-酮
在氮气下,将0.5ml(3.57mmol)50%的硫酸水溶液滴加到在冰中冷却的70mg(0.105mmol)被保护的β-内酰胺粗品(来自实施例15)在0.5ml 1,4-二噁烷中的溶液中。从油状物析出后,使混合物升温到室温,加入另外的1.0ml 1,4-二噁烷,再次得到澄清的黄色溶液。5分钟后,样品的HPLC(系统如实施例5所述,254nm)显示除了部分去保护的中间体(6面积%,tret16.9分钟)和未反应的前体(18面积%,tret 20.0分钟)之外还形成了产物(36面积%,tret 8.9分钟)和茴香醛(21面积%,tret 9.1分钟)。35分钟后,样品的HPLC显示前体定量转化。
HPLC-MS(TOF,正ESI):m/z=418(100%,M+H+-NH3)。
实施例18
5(S)-(4-氟苯基)-5-[四氢吡喃-2(RS)-基氧基]戊酸甲酯
在带有磁力搅拌器的双颈烧瓶中,在氮气下,向6.80g(25.8mmol)纯度为86面积%的5-(4-氟苯基)-5-(S)-羟基戊酸甲酯在210ml二氯甲烷中的溶液中加入4.23ml(45mmol)纯度为97%的3,4-二氢-2H-吡喃,然后加入762mg(3.0mmol)对甲苯磺酸吡啶输。将反应混合物在室温下搅拌24小时。HPLC分析(系统如实施例5所述)显示除了吡啶(tret4.8分钟)和1.5面积%的前体(tret9.8分钟)外,还有两种非对映体形式的产物(比例为约1∶1,tret14.1和14.4分钟)。将反应溶液真空浓缩到70ml,用100ml乙醚稀释,用1×100ml和2×50ml水洗涤。真空浓缩有机相,将残余物在HV下干燥。得到9.70g浅黄色油状物,根据HPLC,其纯度为76面积%。产率:23.75mmol,理论值的92%。
1H-NMR(400MHz,CDCl3):δ=1.4-1.9(m,10H,5×CH2),2.32(m,2H,CH2-C=O),3.27(dt,0.5H,O-CH,一个非对映体),3.50(m,1H,O-CH,两个非对映体),3.64(s,3H,CO2CH3),3.91(m,0.5H,O-CH,一个非对映体),4.35(t,0.5H,O-CH-O,一个非对映体),4.56(t,0.5H,芳基-CH-O,一个非对映体),4.67(dd,0.5H,芳基-CH-O,一个非对映体),4.80(t,0.5H,O-CH-O,一个非对映体),7.01(m,2H,芳族-H),7.22-7.34(m,2H,芳族-H)。HPLC-MS(Quattroultima,正ESI):两个非对映体显示出m/z=328(M+NH4 +,强度60-80%)和m/z=209(M+H+-2-羟基-THP,强度100%)。
实施例19
5(S)-(4-氟苯基)-5-三苯甲基氧基戊酸甲酯
在带有磁力搅拌器和隔板的三颈烧瓶中,将13.6g(51.7mmol)纯度为86%面积%的5-(4-氟苯基)-5-(S)-羟基戊酸甲酯、18.1g(63.0mmol)纯度为97%的三苯基氯甲烷、12.0ml(89.9mmol)纯度为99%的2,4,6-三甲基吡啶和23.8g(63.1mmol)纯度为98%的碘化四丁基铵溶于36ml二氯甲烷中,将反应混合物在氮气下于回流下沸腾12小时(内部温度57℃)。HPLC分析(系统如实施例5所述)显示除了三甲基吡啶(tret8.1分钟)和三苯甲基氯(tret14.3分钟)之外,还有产物(tret17.8分钟)和痕量前体(tret9.8分钟)。冷却混合物,用300ml二氯甲烷稀释,用1×200和2×100ml 10%的乙酸水溶液洗涤,然后用2×100ml饱和NaHCO3水溶液洗涤,然后用2×100ml水洗涤。将100ml正庚烷加入到有机相中(混浊),然后真空浓缩。在此期间,有油状物析出,并迅速结晶。抽滤出晶体物质并用正庚烷和少量异丙醇洗涤。滤饼用正庚烷研磨并抽滤三次。将粗产物(28g棕色树脂)通过28g硅胶(Baker30-60μm)过滤,首先用400ml 98∶2的乙酸乙酯/正庚烷洗脱,然后用400ml95∶5的乙酸乙酯/正庚烷洗脱,从而除去前体残余物。得到25.4g黄色树脂状物,根据HPLC,纯度为85面积%(11面积%的三苯甲基氯杂质)。产率:46.1mmol,理论值的89%。
1H-NMR(400MHz,CDCl3):δ=1.15-1.48(m,4H,2×CH2),2.01(t,2H,CH2C=O),3.58(s,3H,CO2CH3),4.48(dd,1H,芳基-CH-O),6.82(~t,2H,芳族-H),7.02(~dd,2H,芳族-H),7.13-7.23(m,9H,芳族-H),7.43(~dd,6H,芳族-H)。
利用色谱法得到的纯度为97面积%的分析样品的HPLC-MS:仅能观测到m/z=243的三苯甲基阳离子。GC-MS(在CH2Cl2中进样,以Cl进行检测):仅能观测到m/z=243的三苯甲基阳离子。
实施例20
5(S)-乙氧基甲氧基-5-(4-氟苯基)戊酸甲酯
在带有机械搅拌器的四颈烧瓶中,将40.6g五氧化二磷加入到剧烈搅拌的10.5g(42.7mmol)纯度为92%面积%的5-(4-氟苯基)-5-(S)-羟基戊酸甲酯(实施例1)在220ml二氧甲烷和152ml(1200mmol)纯度为99%的二乙氧基甲烷中的溶液中,内部温度从最初的23℃升高到30℃。首先形成白色混悬液,其颗粒迅速聚集并形成粘性团块,所述团块部分粘附在烧瓶底部,颜色经黄色变成棕色。HPLC分析(系统如实施例5所述)显示仅仅5分钟后前体(tret9.8分钟)完全转化为产物(tret13.4分钟)。将反应混合物在29℃下搅拌0.5小时,没有外部加热(即连续放热反应),但是这样的唯一效果是增加杂质(tret13.2分钟)。将反应混合物在冰浴中冷却到10℃,向混合物中加入100g冰。粘性固体团块仅缓慢溶解,甚至在剧烈搅拌下也是如此。将混合物转移到分液漏斗中并用200ml乙醚稀释。分离有机相,再次用100ml乙醚萃取水相。用100ml饱和碳酸氢钠水溶液和100ml饱和氯化钠水溶液洗涤合并的萃取物,然后真空浓缩,将残余物在HV下干燥。得到13.83g棕色油状物。粗产物的GC纯度为84面积%。将其在HV(0.005mbar)下通过一个镀银的15cm的有真空套层的Vigreux柱进行蒸馏。初馏分(fore-run)(1g,b.p.33-88℃,无色油状物)后,在160-170℃的浴温下蒸馏出产物(9.5g,b.p.102-103℃,无色油状物),瓶底残留3g沸点更高的杂质。产率:9.5g(33.4mmol),理论值的78%。
1H-NMR(400MHz,CDCl3):δ=1.18(t,3H,C-CH3),1.56-1.90(m,4H,2×CH2),2.34(t,2H,CH2-C=O),3.48(dqua,1H,CH3-CH 2),3.67(s,3H,CO2CH3),3.72(dqua,1H,CH3-CH 2),4.52(d,1H,OCH2O),4.58(dd,1H,芳基-CH-O),4.62(d,1H,OCH2O),7.03(~t,2H,芳族-H),7.29(~dd,2H,芳族-H)。HPLC-MS(在pH 7下输注,Quattroultima,TOF,正ESI):m/z=302(20%,M+NH4 +),209(65%,M+H+-EtOCH2OH)。GC-MS(CI):m/z=302(11%,M+NH4 +),209(100%,M+H+-EtOCH2OH)。
实施例21
[2(S)-羟基-1(S)-甲基-2-苯基乙基]-N-甲基-5(S)-(4-氟苯基)-5-[四氢吡喃-2(RS)-基氧基]戊酰胺
在250ml的带有磁力搅拌器、隔板和温度计的四颈圆底烧瓶中,在0-2℃下,在氩气下,历经10分钟将5.3ml(13.3mmol)2.5摩尔浓度的正丁基锂的己烷溶液通过注射器滴加到2.85g(66.8mmol)无水氯化锂和5.59g(33.2mmol)纯度为98%的(+)-伪麻黄碱在46ml无水THF中的溶液中,在此期间,温度升高到5-6℃。10分钟后,历经10分钟滴加9.31g(22.8mmol)纯度为76面积%的5(S)-(4-氟苯基)-5-[四氢吡喃-2(RS)-基氧基]戊酸甲酯(来自实施例18)在9.5ml无水THF中的溶液,使混合物升温到室温。将澄清的反应溶液在室温下搅拌3天。HPLC(系统如实施例5所述)显示除了伪麻黄碱(tret4.2分钟)外,现在只有痕量的两种非对映体前体(tret 14.1和14.4分钟),形成了非对映体对形式的产物(tret13.3和13.5分钟)和产物(tret9.0分钟)。用冰冷却混合物,滴加45ml水,最初非常缓慢地滴加,然后以更快地速度递交。形成两相。真空蒸馏除去大部分THF。用3×25ml乙酸乙酯从水相中萃取油状物,用6ml 10%的乙酸将pH调节至6-7,以便达到可接受的相分离速度。用20ml饱和NaHCO3溶液以及20ml水洗涤合并的萃取物,然后将溶剂真空蒸馏除去。在HV下干燥残余物。得到13.0g粗产物,为浅黄色的大体积固体泡沫状物,其HPLC纯度为76面积%。将粗产物通过30g硅胶60(0.04-0.063mm)柱过滤,用乙酸乙酯/正庚烷2∶8至8∶2/0.5%三乙胺洗脱,得到10.6g粘性的黄色树脂状物,将其从热二异丙醚中重结晶。将密集的晶体块抽滤出来,用少量二异丙醚洗涤并在HV下干燥。得到9.0g颗粒状的无色晶体,HPLC纯度为95面积%,为1∶1的非对映体对,mp.93-95℃。产率:19.3mmol,相当于理论值的85%。1H-NMR(400MHz,CDCl3):由于存在两种旋转异构体,两种非对映体中的每一种都显示出两组信号(比例为2.8∶1)。主要旋转异构体的信号用(*)标识,次要旋转异构体的信号用(#)标识。未标识的信号归属于重叠的旋转异构体信号。δ=0.94(#,2×d),1.09(*,d)和1.13(*,d)(3H,C-CH3);1.38-1.93(m,10H,5×CH2);2.18-2.55(m,2H,CH2-C=O);2.76(*),2.78(*)和2.89(#)(3×s,3H,N-CH3);3.27和3.92(dt,1H,OCH2);3.48(m,1H,OCH2);3.97(#)和4.43(*)(2×qui,1H,CHCH3);4.18(br.,1H,OH);4.35和4.81(2×t,1H,O-CH-O);4.54和4.68(隐藏的和dd,1H,芳基-CH-O);4.57(t,1H,CH-OH);7.01(2×t,2H,芳族-H);7.22-7.41(m,7H,芳族-H)。HPLC-MS(Quattroultima,TOF,正ESI):m/z=444(58%,M+H+),360(100%,M+H+-DHP),342(68%,M+H+-THPOH)。
实施例22
[2(S)-羟基-1(S)-甲基-2-苯基乙基]-N-甲基-5(S)-(4-氟苯基)-5-三苯甲基氧基戊酰胺
在带有磁力搅拌器、隔板和温度计的三颈烧瓶中,在0-2℃、氩气下,将3.97mL(9.93mmol)2.5摩尔浓度的正丁基锂的己烷溶液历经10分钟通过注射器泵滴加到1.90g(44.4mmol)无水氯化锂和3.74g(22.2mmol)纯度为98%的(+)-伪麻黄碱在30mL无水THF中的溶液中,在此期间温度升高到5-6℃。10分钟后,历经5分钟滴加10.50g(19.0mmol)纯度为85面积%的5(S)-(4-氟苯基)-5-三苯基甲氧基戊酸甲酯(来自实施例19)在10ml无水THF中的溶液,使混合物的温度升温至室温。将澄清的反应溶液在室温下搅拌3天。HPLC(系统如实施例5所述)显示除伪麻黄碱(tret 4.2分钟)外,目前仅有痕量前体(tret 17.8分钟),形成了产物(tret 17.0分钟)。用冰将混合物冷却,并且滴加30mL水,最初非常缓慢,然后以更快的速度滴加。形成两相。将大部分THF在真空下蒸馏除去。用3×15mL乙酸乙酯从水相中萃取油状物,用4mL 10%的乙酸水溶液将pH调节至6以达到适当的相分离速度。将合并的萃取物用15mL饱和NaHCO3水溶液和15mL水洗涤,然后将溶剂在真空下蒸馏除去。在HV下干燥残余物。获得13.2g粗产物,为黄色大体积的固体泡沫状物,其HPLC纯度为72面积%。通过中压柱色谱法[130g硅胶60(Merck),0.04-0.063mm,用0.4L乙酸乙酯/庚烷2∶8加0.5%三乙胺老化,流动相为100mL乙酸乙酯/庚烷2∶8加0.5%三乙胺,然后是1L乙酸乙酯/庚烷1∶1加0.5%三乙胺,流速为25ml/min,收集20mL级分(65秒)]得到产物,为浅黄色树脂状物,其HPLC纯度为97面积%。产率:9.40g(15.2mmol),相当于理论值的80%。
1H-NMR(400MHz,CDCl3):由于存在2种旋转异构体,产物显示出两组信号(比例约2.7∶1)。用(*)标识主要旋转异构体的信号,用(#)标识次要旋转异构体的信号。未标识的信号归属为重叠的旋转异构体信号。δ=0.86(#)和1.03(*)(2×d,3H,C-CH3);1.16-1.54(m,4H,2×CH2);1.87-2.04(*)和2.04-2.20(#)(2×m,2H,CH2-C=O);2.63(*)和2.83(#)(2×s,3H,N-CH3);3.76(#)和4.34(*)(2×~qui,1H,CHCH3);4.16(br s,1H,OH);4.45-4.56(m,2H,芳基-CH-O和CHOH);6.76(#)和6.80(*)(2×t,2H,芳族-H);7.02(dd,2H,芳族-H);7.12-7.38(m,14H,芳族-H);7.44(dd,6H,芳族-H)。HPLC-MS(Quattroultima,TOF,正ESI):m/z=243(100%,Ph3C+)。MS(输注,Quattroultima,TOF,负ESI):m/z=660(100%,M+AcO-)。
实施例23
[2(S)-羟基-1(S)-甲基-2-苯基乙基]-N-甲基-5(S)-乙氧基甲氧基-5-(4-氟苯基)戊酰胺
在带有磁搅拌器、隔板和温度计的三颈烧瓶中,在0-2℃、氩气下,将3.56mL(8.91mmol)2.5摩尔浓度的正丁基锂的己烷溶液历经10分种通过注射器泵滴加到1.91g(44.7mmol)无水氯化锂和3.74g(22.2mmol)纯度为98%的(+)-伪麻黄碱在30mL无水THF中的溶液中。10分钟后,历经30分钟用注射器泵滴加5.68g(18.4mmol)纯度为92面积%的5(S)-乙氧基甲氧基-5-(4-氟苯基)戊酸甲酯(来自实施例20)在7.5mL无水THF中的溶液,使混合物升温至室温。将澄清的反应溶液在室温下搅拌3天。HPLC(系统如实施例5)显示除7面积%的伪麻黄碱(tret4.2分钟)外,目前还有痕量前体(tret13.4分钟)以及形成的产物(68面积%,tret 12.7分钟)。用冰将混合物冷却,并且滴加30mL水,最初非常缓慢,然后以更快的速度滴加。形成两相。将大部分THF在真空下蒸馏除去。用1×30mL和2×15mL乙酸乙酯萃取析出的油状物,用4mL 10%的乙酸水溶液将pH调节至6以获得足够快的相分离。将合并的有机萃取物用15mL饱和NaHCO3水溶液和15mL水洗涤,在真空下浓缩,在HV下干燥残余物。获得8.4g缓慢结晶的微黄色油状物。将粗产物在10mL二异丙醚中剧烈搅拌并加热至回流,于是大部分固体溶解。将其缓慢冷却至10℃,抽滤出晶体并用2mL二异丙醚洗涤,在HV下干燥晶体。获得5.90g无色固体,m.p.91-92℃,经HPLC分析其纯度为92面积%。产率:13.00mmol,相当于理论值的71%。
1H-NMR(400MHz,CDCl3):由于存在2种旋转异构体,产物显示出两组信号(比例约2.7∶1)。用(*)标识主要旋转异构体的信号,用(#)标识次要旋转异构体的信号。未标识的信号归为重叠的旋转异构体信号。δ=0.94(#)和1.08(*)(2×d,3H,C-CH3);1.15(#)和1.16(*)(2×t,3H,CH2-CH 3 );1.53-1.91(m,4H,CH 2 -CH 2 );2.21-2.55(m,2H,CH2-C=O);2.78(*)和2.89(#)(2×s,3H,N-CH3);3.46(m,1H,OCH-CH3),3.70(m,1H,OCH-CH3);3.95(#)和4.44(*)(2×~qui,1H,CHCH3);4.19(br s,1H,OH);4.51(d,1H,O-CH-O);4.57(m,2H,芳基-CH-O和CHOH);4.61(d,1H,O-CH-O),7.01(~t,2H,芳族-H);7.22-7.41(m,7H,芳族-H)。HPLC-MS(Quattroultima,TOF,正ESI):m/z=418(100%,M+H+),342(32%,M+H+-EtOCH2OH)。
实施例24
[2(S)-羟基-1(S)-甲基-2-苯基乙基]-N-甲基-2(R)-[(4-氨基甲基-苯基氨基)-(4-甲氧基苯基)-(S)-甲基]-5(S)-[(4-氟苯基)-5-[四氢吡喃-2(RS)-基氧基]戊酰胺(“THP-保护的亚胺-去保护的曼尼希产物”)
将氯化锂(纯度99%)在150-200℃/4×10-3mbar下干燥3小时。用CaH2新鲜蒸馏二异丙胺(纯度99.5%),根据卡尔.费歇尔滴定法其包含0.02重量%水。通过用干燥的氩气鼓泡将四氢呋喃(THF)脱气,根据卡尔.费歇尔滴定法其包含<0.005重量%水。
在充分加热干燥的带有磁搅拌器、隔板、氩气进口和低温温度计的三颈圆底烧瓶中,将12.0mL THF和3.2mL(22.5mmol)二异丙胺加入到2.53g(59.1mmol)干燥的氯化锂中。将混合物在干冰/丙酮浴中冷却至-78℃,历经20分钟通过注射器泵滴加8.3mL(20.8mmol)2.5摩尔浓度的正丁基锂的己烷溶液。混合物为稠的糊状物。使其升温至0℃,然后在0℃搅拌5分钟,在此期间形成混浊溶液。再次将其冷却至-78℃,再次得到搅拌困难的稠糊状物。历经20分钟通过注射器泵滴加4.44g(9.51mmol)纯度为95面积%的伪麻黄碱酰胺(来自实施例21)在20mL THF中的溶液。混合物颜色变为浅黄色,并且固体溶解。将混合物在-78℃下搅拌1小时。使混合物升温至0℃,在该温度下搅拌15分钟并且在室温下再搅拌5分钟,再次冷却至0℃。历经10分钟滴加7.17g(20.0mmol,基于酰胺,2当量)双亚胺(来自实施例4)在24mL THF中的溶液,在此期间反应混合物颜色变为橙色,随后在0℃下搅拌3小时,在此期间颜色变为棕色。反应过程的HPLC监测(系统如实施例5所述)显示除了非对映体对形式的未反应的伪麻黄碱酰胺(6面积%;tret 13.3分钟和13.6分钟)和过量的双亚胺(tret 14.0分钟)外,还有1∶1非对映体对形式的(tret 16.3分钟和16.7分钟)亚胺-保护的曼尼希产物(48面积%)。在氮气下,将冰冷的反应混合物在搅拌下倒入112mL冰/水中,于是其颜色变为黄色并且形成两相。用1×80mL和2×35mL二氯甲烷萃取。将合并的萃取物在真空下浓缩,将残余物在HV下干燥。获得12.0g黄色无定形粘性泡沫状物,根据HPLC,其中包括45面积%亚胺-保护的曼尼希产物,6面积%的伪麻黄碱酰胺(前体)和双亚胺。将粗产物用色谱法纯化,同时消除亚胺保护基。为此目的,在Büchi中压系统中将玻璃柱(直径7.0cm,长46cm)内填入1770mL(约900g)硅胶60(Merck,0.04-0.063mm)。将柱以130mL/min的流速先用1.5L CH2Cl2/MeOH/NH4OH(浓度25%)9∶1.5∶0.3、然后用2L CH2Cl2老化。将溶解在15mL CH2Cl2中的粗产物上样至柱中。将非极性杂质用1L CH2Cl2、然后用0.5L CH2Cl2/MeOH99∶1、接着用0.5L CH2Cl2/MeOH 98∶2、接着用0.5L CH2Cl2/MeOH 95∶5洗脱。然后,将在柱上进行了水性去保护的产物用1L CH2Cl2/MeOH/NH4OH(浓度25%)9∶0.5∶0.1、然后用3L CH2Cl2/MeOH/NH4OH(浓度25%)9∶1∶0.2、接着用2L CH2Cl2/MeOH/NH4OH(浓度25%)9∶1.5∶0.3洗脱。收集约140mL级分(收集时间95秒)。将级分25-31与加入的甲苯合并。在浓缩中用甲苯将水共沸夹带防止了残留在水残余物中的产物产生氨,其中它将进行逆向曼尼希反应。将溶剂在真空下除去,在HV下干燥残余物。获得4.50g HPLC纯度>99面积%的米黄色无定形凝胶状物。产率:6.51mmol,相当于理论值的68%。
1H-NMR(400MHz,CDCl3):由于THP保护基上的手性中心,产物是约1∶1的非对映体混合物,并且对于每个非对映体存在氨基官能团的两个旋转异构体(比例约3.2∶1),因此存在四组信号。由于光谱很复杂,因此在信号归属上存在不确定性。基于同样的原因,通过反应产物的NMR和HPLC不可能可靠地评估曼尼希加成的非对映立体选择性。用(*)标识主要旋转异构体的信号,用(#)标识次要旋转异构体的信号。未标识的信号归属为重叠的旋转异构体信号或者由于光谱的复杂性而不能被确定地归属为特定的旋转异构体。δ=0.67(*),0.67(*),0.81(#),0.83(#)(4×d,3H,C-CH3);1.30-2.13(m,13-14H,5×CH2,CH-C=O,NH2,也可能是OH);2.29(*),2.34(*),2.83(#)(3×s,3H,NCH3);3.07-3.50(m,2H,CH-NH芳基,O-CH-CH2);3.58(#),3.64(*)(2×s,变宽,2H,CH 2 NH2);3.73(*),3.73(*),3.75(#)(3×s,3H,OCH3);约3.75-3.91(m,1H,O-CH-CH2);4.05-4.79(m,4-5H,CHCH3,CHOH,CHOTHP,OCHO,也可能是OH);5.94(#),5.98(*)(2×t,部分隐藏,1H,芳族-H);6.41(*),6.43(*),6.44(#),6.46(#)(4×d,2H,芳族-H);6.75,6.77(2×d,2H,芳族-H);6.84-7.44(m,13H,芳族-H)。HPLC-MS(Quattroultima,TOF,正ESI):两种非对映体产物(比例1∶1,t ret 14.38分钟和14.81分钟),均显示出m/z=684(100%,M+H+),667(分别为22%和15%,M+H+-NH3),583(分别为68%和61%,M+H+-THP-O)。MS(输注,Quattroultima,TOF,正ESI):m/z=684(100%,M+H+),667(76%,M+H+-NH3)。
实施例25
[2(S)-羟基-1(S)-甲基-2-苯基乙基]-N-甲基-2(R)-[(4-氨基甲基-苯基氨基)-(4-甲氧基苯基)-(S)-甲基]-5(S)-[(4-氟苯基)-5-三苯甲基氧基]戊酰胺(“三苯甲基保护的亚胺-去保护的曼尼希产物”)
将氯化锂(纯度99%)在150-200℃/4×10-3mbar下干燥3小时。用CaH2新鲜蒸馏二异丙胺(纯度99.5%),根据卡尔-费歇尔滴定法其包含0.02重量%的水。通过用干燥的氩气鼓泡将THF脱气,根据卡尔-费歇尔滴定法其包含<0.005重量%的水。
在充分加热干燥的带有磁搅拌器、隔板、氩气进口和低温温度计的250mL的四颈圆底烧瓶中,将12.0mL THF和3.2mL(22.5mmol)二异丙胺加入到2.53g(59.1mmol)干燥的氯化锂中。将混合物在干冰/丙酮浴中冷却至-78℃,历经20分钟通过注射器泵滴加8.3mL(20.8mmol)2.5摩尔浓度的正丁基锂的己烷溶液。混合物为稠糊状物。使其升温至0℃,然后在0℃下搅拌5分钟,在此期间形成混浊的溶液。再次将其冷却至-78℃,然后历经20分钟通过注射器泵滴加6.02g(9.70mmol)纯度为97面积%的伪麻黄碱酰胺(来自实施例22)在20mL THF中的溶液,在此期间混合物变为赭色。然后将混合物在-78℃下搅拌1小时。使混合物升温至0℃,在该温度下搅拌15分钟,在室温下再搅拌5分钟,再次冷却至0℃。历经10分钟滴加7.17g(20.0mmol,基于酰胺,2当量)双亚胺(来自实施例4)在24mLTHF中的溶液,在此期间反应混合物颜色变为深棕色。在0℃下搅拌2.5小时。反应过程的HPLC监测(系统如实施例5中所述)显示1小时后除了未反应的前体(5.7面积%;tret 17.06分钟)和过量的双亚胺(tret14.0分钟)外,还有亚胺-保护的曼尼希产物(47面积%,tret18.7分钟)。在氮气下,将冰冷的反应混合物在搅拌下倒入112mL冰/水中,于是颜色变为黄色且形成两相。用1×80mL和2×35mL二氯甲烷萃取。将合并的萃取物在真空下浓缩,将残余物在HV下干燥。获得13.2g黄色无定形的固体泡沫状物,根据HPLC,其包含45面积%的亚胺-保护的曼尼希产物,7面积%的伪麻黄碱酰胺(前体)和双亚胺。将该粗产物通过色谱法纯化,同时除去亚胺保护基。为此目的,在Büchi中压系统中将玻璃柱(直径7.0cm,长46cm)填入1770mL(约900g)硅胶60(Merck,0.04-0.063mm)。将柱以130mL/min的流速先用1.5L CH2Cl2/MeOH/NH4OH(浓度25%)9∶1.5∶0.3、然后用2LCH2Cl2进行老化。将溶解在15mL CH2Cl2中的粗产物上样至柱中。用1LCH2Cl2、然后用0.5L CH2Cl2/MeOH 99∶1、接着用0.5L CH2Cl2/MeOH 98∶2、接着用0.5L CH2Cl2/MeOH 95∶5洗脱非极性杂质。然后,将在柱上进行了水性去保护的产物用1L CH2Cl2/MeOH/NH4OH(浓度25%)9∶0.5∶0.1、然后用3L CH2Cl2/MeOH/NH4OH(浓度25%)9∶1∶0.2、接着用2LCH2Cl2/MeOH/NH4OH(浓度25%)9∶1.5∶0.3洗脱。收集约140mL级分(收集时间95秒)。将级分10-30与加入的甲苯合并。在浓缩中用甲苯将水共沸夹带防止了残留在水残余物中的产物产生氨,其中它将进行逆向曼尼希反应。将溶剂在真空下除去,在HV下干燥残余物。获得5.30g HPLC纯度为97面积%的棕色无定形固体泡沫状物。产率:6.11mmol,相当于理论值的63%。
1H-NMR(400MHz,CDCl3):因为存在酰胺官能团的两种旋转异构体(比例约3∶1),所以产生两组信号。用(*)标识主要旋转异构体的信号,用(#)标识次要旋转异构体的信号。未标识的信号归属为重叠的旋转异构体信号。δ=0.64(*),0.72(#)(2×d,3H,C-CH3);1.30-1.68(m,5H,CH 2 -CH 2 -CH-C=O);2.08(s,非常宽,1H,OH);2.14(s,尖峰,2H,NH2);2.35(*),2.74(#)(2×s,3H,NCH3);2.72(*),2.81(#)(2×m,1H,CH-NH芳基);3.59(#),3.66(*)(2×s,2H,CH 2 NH2);3.71(*),3.74(#)(2×s,3H,OCH3);3.73(#,大部分重叠),4.55(*,qui)(1H,CHCH3);4.26(#),4.43(*)(2×dd,1H,CHO三苯甲基);4.30(d,1H,NH芳基);4.36(t,1H,CHOH);6.34(*),6.35(#)(2×d,2H,芳族-H);6.70-7.45(m,30H,芳族-H)。HPLC-MS(Quattroultima,TOF,正ESI):单峰,tret21.82分钟),m/z=842(8%,M+H+),583(98%,M+H+-Ph3CO),243(100%,Ph3C+)。
曼尼希产物的HPLC、HPLC-MS和1H-NMR没有提供关于存在少量非对映体的证据。因此,曼尼希加成的立体选择性高。
实施例26
[2(S)-羟基-1(S)-甲基-2-苯基乙基]-N-甲基-2(R)-[(4-氨基甲基-苯基氨基)-(4-甲氧基苯基)-(S)-甲基]-5(S)-[(乙氧基甲氧基)-(4-氟苯基)]戊酰胺(“乙氧基甲氧基保护的亚胺-去保护的曼尼希产物”)
将氯化锂(纯度99%)在150-200℃/4×10-3mbar下干燥3小时。用CaH2新鲜蒸馏二异丙胺(纯度99.5%),根据卡尔-费歇尔滴定法其包含0.02重量%的水。通过用干燥的氩气鼓泡将四氢呋喃(THF,Fluka)脱气,根据卡尔-费歇尔滴定法其包含<0.005重量%的水。
在充分加热干燥的带有磁搅拌器、隔板、氩气进口和低温温度计的四颈圆底烧瓶中,将17.0mL THF和4.44mL(31.5mmol)二异丙胺加入到3.54g(82.7mmol)干燥的氯化锂中。将混合物在干冰/丙酮浴中冷却至-78℃,历经20分钟通过注射器泵滴加11.7mL(29.3mmol)2.5摩尔浓度的正丁基锂的己烷溶液,在此期间出现黄色。使混合物升温至0℃,在0℃下搅拌5分钟。再次将其冷却至-78℃,然后历经20分钟通过注射器泵滴加5.84g(12.87mmol)纯度为92面积%的伪麻黄碱酰胺(来自实施例23)在28mLTHF中的溶液,在此期间混合物变为黄色。然后将混合物在-65℃下搅拌1小时。使混合物升温至0℃,在该温度下搅拌15分钟,在室温下再搅拌5分钟,再次冷却至0℃。历经5分钟滴加10.0g(27.9mmol,基于酰胺,2当量)双亚胺(来自实施例4)在33mL THF中的溶液,在此期间反应混合物颜色变为橙-红色。在0℃下搅拌2.5小时。反应过程的HPLC监测(系统如实施例5中所述)显示2小时后除了未反应的前体(4.8面积%;tret 12.7分钟)和过量的双亚胺(tret13.9分钟)外,还有亚胺-保护的曼尼希产物(40面积%;tret 16.0分钟)。在氮气下,将冰冷的反应混合物在搅拌下倒入156mL冰/水中,于是颜色变为黄色且形成两相。用1×110mL和2×50mL二氯甲烷萃取。将合并的萃取物在真空下浓缩,将残余物在HV下干燥。获得16.2g黄色无定形固体泡沫状物。将粗产物通过色谱法纯化,同时除去亚胺保护基。为此目的,在Büchi中压系统中将玻璃柱(直径7.0cm,长46cm)填入1770mL(约900g)硅胶60(Merck,0.04-0.063mm)。将柱以130mL/min的流速用3L CH2Cl2/MeOH/NH4OH(浓度25%)9∶1.5∶0.3、然后用2L CH2Cl2进行老化。将溶解在30mL CH2Cl2中的粗产物上样至柱中。用1L CH2Cl2、然后用0.5L CH2Cl2/MeOH 99∶1、接着用0.5L CH2Cl2/MeOH 98∶2、接着用0.5L CH2Cl2/MeOH 95∶5洗脱非极性杂质。然后,将在柱上进行了水性去保护的产物用1L CH2Cl2/MeOH/NH4OH(浓度25%)9∶0.5∶0.1、然后用4L CH2Cl2/MeOH/NH4OH(浓度25%)9∶1∶0.2、接着用1LCH2Cl2/MeOH/NH4OH(浓度25%)9∶1.5∶0.3洗脱。收集约140mL级分(收集时间95秒)。在色谱法将近结束时,由于压力下降,级分的体积变小。在级分10中以几乎纯的形式获得主要曼尼希产物的两种非对映体(213mg,米黄色无定形固体泡沫状物)。将包含纯的主要曼尼希产物的级分13-24与加入的甲苯合并。在浓缩中用甲苯将水共沸夹带防止了残留在水残余物中的产物产生氨,其中它将进行逆向曼尼希反应。将溶剂在真空下除去,在HV下干燥残余物。获得5.56g HPLC纯度为99面积%的浅棕色无定形固体泡沫状物。产率:8.37mmol,相当于理论值的65%。
1H-NMR(400MHz,CDCl3):因为存在酰胺官能团的两种旋转异构体(比例约3.5∶1),所以产生两组信号。用(*)标识主要旋转异构体的信号,用(#)标识次要旋转异构体的信号。未标识的信号归属为重叠的旋转异构体信号。δ=0.67(*),0.81(#)(2×d,3H,C-CH3);1.08(#),1.10(*)(2×t,3H,OCH2 CH 3 );1.50-2.14(m,5H,CH 2 -CH 2 -CH-C=O);2.31(*),2.83(#)(2×s,3H,NCH3);3.16(*),3.45(#)(2×dqua,1H,NCH-CH3);3.27(#),3.41(*)(2×dd,1H,CHNH芳基);3.57(#),3.63(*)(2×s,变宽,2H,CH2NH2);3.72(*),3.76(#)(2×s,3H,OCH3);4.15(#),4.74(*)(2×~qui宽,1H,CHOH);4.36(dd,1H,CHOCH2O);4.44(#),4.52(*)(2×qua,2H,CH 2 CH3);4.48(d,1H,OCHO);4.58(d,1H,OCHO);5.97(d,变宽,1H,芳基-NH);6.42(*),6.44(#)(2×d,2H,芳族-H);6.63-7.43(m,15H,芳族-H)。HPLC-MS(Quattroultima,TOF,正ESI):单峰,tret 13.30分钟),m/z=658(100%,M+H+),641(32%,M+H+-NH3),536(32%,M+H+-H2NCH2-C6H4-NH2)。
曼尼希产物的HPLC、HPLC-MS和1H-NMR没有提供关于存在少量非对映体的证据。仅在预级分10(231mg)中存在立体异构体。因此,曼尼希加成的立体选择性高(非对映体的总量约4%)。
实施例27
2(R)-[(4-氨基甲基苯基氨基)-(4-甲氧基苯基)-(S)-甲基]-5-(4-氟苯基)-5(S)-[四氢吡喃-2(RS)-基氧基]戊酸
在氮气下,在带有搅拌棒和回流冷凝器的三颈烧瓶中,将2.07g(3.00mmol)纯度>99面积%的THP-保护的亚胺-去保护的曼尼希产物(来自实施例24)在15mL乙醇中的澄清的黄色溶液加热到75℃,缓慢滴加10.0mL(32.2mmol)3.22N的氢氧化钠水溶液。然后,将混合物加热至回流达6天,同时保持体积恒定(偶尔添加乙醇以弥补蒸发损失)。HPLC监测(系统如实施例5中所述,检测波长254nm)显示95%转化为四种异构体产物(峰面积比为17.8∶12.5∶38.8∶30.8;tret 8.36、8.40、8.53和8.63分钟),并且存在(在210nm处分析)tret4.4分钟的消除的伪麻黄碱。将反应混合物冷却,加入20mL水,然后将混合物在真空下浓缩至总体积约20mL以除去乙醇。向水性残余物中再加入20mL水,再次浓缩。通过加入20mL水使结晶的固体重新溶解。将水溶液用2×20mL乙醚洗涤。将水溶液在冰浴中冷却并且在用电极监控pH的同时通过缓慢滴加14.4mL 2N的盐酸水溶液将pH值从开始的13.2调节至7.5,于是逐渐沉淀出密集的固体团块。抽滤,用水洗涤,在HV下用五氧化二磷干燥。该粗产物(2.57g,理论值的160%)包含通过热氢氧化钠溶液对烧瓶壁的作用产生的硅酸盐。将该粗产物与125mL乙醇混合,将混悬液在室温下搅拌2小时。将未溶解的残余物用玻璃过滤器抽滤并用乙醇洗涤几次。将滤液在真空下浓缩并在HV下干燥残余物。获得1.11g(2.07mmol,理论值的69%)HPLC纯度为99面积%的米黄色无定形固体泡沫状物,其含有四种非对映异构体,比例为18∶13∶38∶31,事实上与已经反应的反应混合物的异构体组成相比没有变化。因此,约31%的前体的羰基α位的立体中心发生了差向异构化。由于THP保护基中的立体中心,所需产物和其差向异构体均以约1.3∶1的非对映体混合物的形式存在。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6):δ=1.20-1.84(m,10H,5×CH2),2.26-2.46(m,1H,CHCO2),3.17(m,1H,OCH 2 CH2),3.38(m,1H,OCH 2 CH2),3.58(s略微变宽,2H,CH 2 N),3.68(s,3H,OCH3),4.17-4.63(m,4H,CHNH-芳基,芳基CHOCHO-),6.32(m,2H,芳族-H),6.75(dt,2H,芳族-H),6.95(m,2H,芳族-H),7.07(dt,2H,芳族-H),7.13-7.32(m,4H,芳族-H)。HPLC-MS(Quattroultima,TOF,正ESI):所有4种异构体(tret=11.60、11.91、12.16和12.55分钟)显示m/z=537(3-10%,M+H+),520(100%,M+H+-NH3)。
实施例28
2(R)-[(4-氨基甲基苯基氨基)-(4-甲氧基苯基)-(S)-甲基]-5-(4-氟苯基)-5(S)-(三苯甲基氧基)戊酸
在氮气下,在带有搅拌棒和回流冷凝器的三颈烧瓶中,将2.19g(2.52mmol)纯度>99面积%的三苯甲基-保护的亚胺-去保护的曼尼希产物(来自实施例25)在15mL乙醇中的澄清的黄色溶液加热到75℃,缓慢滴加9.0mL(29.0mmol)3.22N的氢氧化钠水溶液。然后,在剧烈搅拌和保持体积恒定(偶尔添加乙醇以弥补蒸发损失)的情况下将棕色混浊溶液加热至回流达7天。HPLC监测(系统如实施例5中所述,检测波长254nm)显示92%转化为2种异构体产物(峰面积比为40∶60;tret 12.1和12.2分钟),并且存在(在210nm处分析)消除的伪麻黄碱(tret4.4分钟)。将反应混合物冷却,加入20mL水,然后将混合物在真空下浓缩至总体积约20mL以除去乙醇。向水性残余物中加入另外20mL水,并且再次蒸发。加入20mL水。将所得的乳状液用2×20mL乙醚洗涤。将水相在冰浴中冷却,在用pH电极进行监控的同时通过缓慢滴加12.5mL 2N的盐酸水溶液将pH值从开始的13.2调节至7.5,在此期间逐渐沉淀出密集的固体团块。抽滤,用水洗涤并且在HV下用五氧化二磷干燥。该粗产物(2.38g,理论值的136%)包含通过热氢氧化钠溶液对烧瓶壁的作用产生的硅酸盐。将粗产物与125mL乙醇混合,将混悬液在室温下搅拌2小时。将未溶解的残余物用玻璃过滤器抽滤并用乙醇洗涤几次。将滤液在真空下浓缩并且在HV下干燥残余物。获得1.48g(2.13mmol,理论值的84%)HPLC纯度为95面积%的米黄色无定形固体泡沫状物,其含有2种非对映异构体,比例为38∶62。38%的非对映体是通过酰胺裂解过程中羰基α位的立体中心的差向异构化而产生的。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6):δ=1.10-1.36(m,2H,CH2),1.48-1.65(m,2H,CH2),2.05(m,1H,CHCO2),3.55(s,宽,3H,NH3 +),3.62(s,2H,CH 2 N),3.68(s,3H,OCH3),4.03(d,1H,NH),4.25(m,1H,CHN),4.44(~t,1H,CHOCPh3),6.24(m,2H,芳族-H),6.64和6.70(2×d,2H,芳族-H),6.73-7.10(m,8H,芳族-H),7.10-7.25(m,9H,芳族-H),7.25-7.37(m,6H,芳族-H)。HPLC-MS(Quattroultima,TOF,正ESI):两种非对映体(tret=15.54和16.18分钟)显示m/z=694(分别为4和12%,M+),678(分别为94和81%,M+H+-NH3),436(100%,M+H+-Ph3CO),243(分别为87和72%,Ph3C+)。
实施例29
2(R)-[(4-氨基甲基苯基氨基)-(4-甲氧基苯基)-(S)-甲基]-5(S)-(乙氧基甲氧基)-5-(4-氟苯基)戊酸
在氮气下,在带有搅拌棒和回流冷凝器的三颈烧瓶中,将1.99g(3.00mmol)纯度>99面积%的乙氧基甲氧基-保护的亚胺-去保护的曼尼希产物(来自实施例26)在15ml乙醇中的澄清的黄色溶液加热到75℃,缓慢滴加10.0ml(32.2mmol)3.22N的氢氧化钠水溶液。然后,在剧烈搅拌和保持体积恒定(偶尔添加乙醇以弥补蒸发损失)的情况下将浅黄色的澄清溶液加热至回流达4天。HPLC监测(系统如实施例5中所述,检测波长254nm)显示94%转化为两种异构体产物(峰面积比例为31∶69;tret 8.0和8.2分钟),并且存在(在210nm处分析)消除的伪麻黄碱(tret 4.4分钟)。冷却反应混合物,加入20ml水,然后将混合物真空浓缩至总体积约20ml以除去乙醇。向水性残余物中加入另外20ml水,再次浓缩。加入20ml水,用2×20ml乙醚洗涤。用玻璃过滤器过滤水相以除去不溶物。在冰浴中冷却滤液,在用pH电极监测的同时通过缓慢滴加13.4ml 2N的盐酸水溶液将pH值从开始的13.3调节至7.5,于是逐渐沉淀出密集的固体团块。抽滤,用水洗涤并在HV下用五氧化二磷干燥。该粗产物(2.25g,理论值的146%)包含通过热氢氧化钠溶液对烧瓶壁的作用产生的硅酸盐。将粗产物与125ml乙醇混合,将混悬液在室温下搅拌2小时。用玻璃过滤器抽滤未溶解的无色残余物,并用乙醇洗涤几次。真空浓缩滤液并在HV下干燥残余物。得到1.33g(2.60mmol,理论值的87%)HPLC纯度为99面积%的米黄色无定形固体泡沫状物,其含有两种非对映体,比例为33∶67。33%的非对映体是通过酰胺裂解过程中羧基α位的立体中心的差向异构化产生的。“错误的”非对映体(差向异构化产物)在沉淀反应产物(通过中和作用)的水性母液中极为丰富。这表示通过从热水中重结晶可以令人满意地纯化所需的非对映体。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6):δ=1.01(t,3H,CH 3 CH2O),1.17(m,1H,CH2),1.40(m,1H,CH2),1.50-1.86(m,2H,CH2),2.30-2.46(m,1H,CHCO2),3.21-3.37(m,1H,CH3CH 2O),3.38-3.54(m,1H,CH3CH2O),3.59和3.61(2×s,略微变宽,2H,CH 2 N),3.69(s,3H,OCH3),4.19(d,略微变宽,1H,NH),NCH),4.29(d,1H,OCH 2O),4.32-4.43(m,1H,CHNH芳基),4.45(d,1H,OCH 2O),4.47(m,部分隐藏,1H,CHOCH2O),6.28和6.32(2×d,2H,芳族-H),6.73和6.74(2×d,2H,芳族-H),6.96和6.98(2×d,2H,芳族-H),7.04-7.28(m,6H,芳族-H)。HPLC-MS(Quattroultima,TOF,正ESI):两种非对映体(tret=10.83和11.39分钟)均显示m/z=511(分别为1和2%,M+H+),494(100%,M+H+-NH3)。
实施例30
[2(S)-羟基-1(S)-甲基-2-苯基乙基]-N-甲基-2(R)-[(4-氨基甲基苯基氨基)-(4-甲氧基苯基)-(S)-甲基]-5(S)-[(4-氟苯基)-5-羟基]戊酰胺(“羟基-未被保护的亚胺-去保护的曼尼希产物”)
在单颈圆底烧瓶中,将14mg(0.058mmol,5摩尔当量)对甲苯磺酸吡啶输和111mg(0.058mmol,5摩尔当量)对甲苯磺酸水合物加入到800mg(1.16mmol)纯度为99面积%的THP-保护的亚胺-去保护的曼尼希产物(来自实施例24)在20ml甲醇中的溶液中。将溶液贮存过夜后,HPLC(系统如实施例5中所述;检测波长254nm)显示只有少量前体(tret 13.2分钟)THP消除形成产物(tret 10.3分钟)。加入另外111mg(0.58mmol,50摩尔当量)对甲苯磺酸水合物。HPLC监测显示了一个清楚的反应过程,1小时后25%THP消除,4小时后44%THP消除,20小时后83%THP消除。向反应混合物中加入20ml对二甲苯(b.p.138℃),然后将溶剂和已经形成的2-甲氧基-THP(Lit.b.p.128-129℃)在40℃、6mbar下真空蒸馏除去。将固体残余物用20ml对二甲苯吸收,再次真空蒸馏除去溶剂。将微黄色固体溶解在20ml甲醇中,在室温下在封闭的烧瓶中放置16小时。HPLC显示存在93.0面积%的产物和5.4面积%的前体。加入20ml对二甲苯,然后将溶剂和所形成的任何2-甲氧基-THP真空蒸馏除去。将微黄色固体溶解在30ml二氯甲烷中并用2×10ml饱和NaHCO3水溶液和10ml水洗涤。真空蒸馏除去二氯甲烷,在HV下干燥残余物。得到649mg(1.082mmol,理论值的93%)浅棕色结晶性固体,根据HPLC,其含有95面积%的产物(约616mg,1.027mmol,理论值的89%)和5面积%的前体。1H-NMR(400MHz,CDCl3):由于存在2种旋转异构体(比例约5∶1),产生两组信号。主要旋转异构体的信号用(*)标识,次要旋转异构体的信号用(#)标识。未标识的信号归属于重叠的旋转异构体信号。δ=0.66(*),0.82(#)(2×d,C-CH3);1.56-1.89(m,4H,2×CH2);2.18(m,1H,CH-C=O);2.28(*),2.82(#)(2×s,3H,N-CH3);2.31(s,2H,NH2);3.24(*),3.32(#)(2×m,1H,NCH-CH3);3.55(#),3.59(*)(2×s,略微变宽,2H,CH2NH2);3.72(*),3.74(#)(2×s,3H,OCH3);4.12(#),4.83(*)(2×qui,1H,CH2CHOH);4.34(*),4.42(#)(2×d,1H,OH);4.47(#),4.61(*)(2×dd,1H,CHMe-CHOH);4.52(*),4.56(#)(2×dd,1H,CHNH芳基);5.98(d,略微变宽,1H,NH);6.42(*),6.44(#)(2×d,2H,芳族-H);6.77(d,2H,芳族-H);6.83-7.41(m,13H,芳族-H)。FT-IR(固体):v=3355(宽,O-H,N-H,NH2的伸缩振动),1613(酰胺的C=O的伸缩振动),1576(arC-C),1246,1217,1027,835,702cm-1。
HPLC-MS(Quattroultima,TOF,正ESI):产物(tret=10.00分钟)显示m/z=600(100%,M+H+),583(92%,M+H+-NH3);前体(tret=12.66分钟)显示m/z=684(65%,M+H+),667(100%,M+H+-NH3)。
实施例31
2(R)-[(4-氨基甲基苯基氨基)-(4-甲氧基苯基)-(S)-甲基]-5-(4-氟苯基)-5(S)-羟基戊酸
在带有搅拌棒的三颈梨形烧瓶中,将5ml乙醇加入到360mg(0.60mmol)羟基-未保护的亚胺-去保护的曼尼希产物(来自实施例30)中,然后恰好在沸点以下,加入5ml(16.2mmol,27当量)3.22N的氢氧化钠水溶液。将澄清的微黄色溶液加热至回流。3小时后HPLC检测(系统如实施例5中所示,检测波长254nm)没有残留的前体(tret10.5分钟),存在82面积%的预期羧酸(tret 6.9分钟),14面积%的差向异构的羧酸(tret6.5分钟)和4面积%的杂质(tret13.8分钟)。消除的伪麻黄碱可在210nm下检测到(tret4.4分钟)。将冷却的混合物溶液与11ml去离子水混合并真空浓缩以除去乙醇。加入另外11ml去离子水并再次真空浓缩。通过加入去离子水溶解油性残余物,然后用2×11ml乙醚洗涤该碱性溶液。醚相的HPLC显示存在伪麻黄碱和至多痕量的产物。水相的HPLC显示存在所需的羧酸和其差向异构体,比例为87∶13,纯度为99.5面积%。在冰浴中冷却的同时,用约8ml 2N的盐酸将水相的pH值从14.1调节到7-8(用玻璃电极监测),从约pH 11开始有油状物析出,并在加入晶种后结晶。然后将沉淀物在冰浴中搅拌30分钟,抽滤,用水洗涤并在高真空下用Sicapent干燥。得到173mg(0.38mmol,理论值的64%)HPLC纯度>99面积%的米黄色固体,其包含所需的羧酸和其差向异构体,比例为92∶8。产物的1H-NMR和MS数据与实施例10的产物的数据一致。
在水性母液中,差向异构体达到30面积%。
实施例32
通过底物与配体比为200∶1的不对称氢化硅烷化制备5-(4-氟苯基)-5(S)-羟基戊酸甲酯
将市售叔丁醇钠在高真空下升华并在氩气下贮存于干燥器中直到不久后使用。将所用的甲苯用预先干燥的分子筛(0.4nm)在超声浴中脱气5分钟。将玻璃烧瓶在氩气流中用热空气干燥。在温和逆流的氩气下称量固体。加入溶剂,利用注射器/针通过烧瓶中的隔板取样品,用五氧化二磷贮存在干燥器中直到使用。
称量25.8mg(0.26mmol)氯化铜(I)、25.6mg(0.26mmol)叔丁醇钠和27.4mg(0.0436mmol)(R)-(+)-BINAP加入到25ml的带有搅拌棒、隔板、温度计和塞的三颈磺化烧瓶中。用冷却浴(异丙醇/干冰)将烧瓶在氩气下冷却到-50℃。用针通过隔板加入12.5ml脱气的甲苯。在-50℃下搅拌15分钟后,通过用冰浴代替所述冷却浴使混合物升温到0℃,搅拌约2分钟,然后再次冷却到-50℃。将该过程重复三次。由此生成几乎澄清的溶液。在一个单独的磺化烧瓶中,制备1.97g(8.70mmol)纯度为99%的5-(4-氟苯基)-5-氧代戊酸甲酯在5ml脱气甲苯中的溶液(溶解度约630mg/ml)。在-50℃下,向催化剂溶液中缓慢滴加2.8ml(46.8mmol,基于酮酸酯,5.38当量)聚(甲基氢硅氧烷)(PMHS)。用冰浴使混合物升温到0℃,历经10分钟滴加酮酸酯的甲苯溶液。然后将黄色的反应溶液立即冷却到-10℃,在该温度下继续进行搅拌。反应30分钟后(即加入结束后20分钟)所取的HPLC样品显示77%的前体全部转化为醇。反应1小时后有97%转化,2小时后检测到小于0.4面积%的前体和96面积%的醇。将反应混合物倒入200ml冰冷的1%的乙酸(玻璃烧杯)中并剧烈搅拌30分钟。加入50ml甲苯,除去冰浴,在约20℃下继续剧烈搅拌1小时。分离澄清的无色水相(下层),将浅黄色的浑浊的有机相(上层)与50ml 1%的乙酸水溶液一起再次剧烈搅拌1小时。分离水相并用硫酸钠干燥有机相。过滤并真空浓缩有机相,然后在高真空下干燥残余物,得到1.97g(理论值的100%)微黄色油状物。1H-NMR与实施例1的产物的1H-NMR一致。通过手性相HPLC(系统如实施例1中所述)得到93%ee的所需的(S)醇。
实施例33
通过底物与配体比为3660∶1的不对称氢化硅烷化制备5-(4-氟苯基)-5(S)-羟基戊酸甲酯
将市售叔丁醇钠在高真空下升华并在氩气下贮存于干燥器中直到不久后使用。将所用的甲苯用预先干燥的分子筛(0.4nm)在超声浴中脱气5分钟。将玻璃烧瓶在氩气流中用热空气干燥。在温和逆流的氩气下称量固体。加入溶剂,利用注射器/针通过烧瓶中的隔板取样品,用五氧化二磷贮存在干燥器中直到使用。
称量25.5mg(0.258mmol)氯化铜(I)和25.3mg(0.258mmol)叔丁醇钠加入到25ml的带有搅拌棒、隔板、温度计和塞的三颈磺化烧瓶中。将烧瓶冷却到-10℃。用针通过隔板加入12.5ml脱气的甲苯。在-10℃下搅拌15分钟后,使混合物升温到0℃,搅拌2分钟,再次冷却到-10℃。通过隔板加入1.50mg(0.0024mmol)(R)-(+)-BINAP的甲苯溶液(3.12ml浓度为0.48mg/ml的溶液),使混合物再次升温到0℃达2分钟,再次冷却到-10℃。得到几乎澄清的溶液。在一个单独的磺化烧瓶中,制备1.97g(8.70mmol)纯度为99%的5-(4-氟苯基)-5-氧代戊酸甲酯在5ml脱气甲苯中的溶液(溶解度约630mg/ml)。在-10℃下,将2.8ml(46.8mmol,基于酮酸酯,5.38当量)聚(甲基氢硅氧烷)利用注射器缓慢滴加到催化剂溶液中。其后立即在-10℃下历经5分钟利用注射器滴加前体的甲苯溶液。然后将混合物在-10℃、氩气下搅拌12小时。在HPLC中,样品显示97%前体全部转化为醇,仅有0.9面积%的前体。将反应混合物通过有凹槽的过滤器倒在100ml冰冷的1%的乙酸(玻璃烧杯)上并剧烈搅拌1小时。分离澄清的无色水相(下层),将米黄色的乳状混浊的有机相(上层)与50ml 1%的乙酸水溶液一起再次剧烈搅拌1小时。分离水相并用硫酸钠干燥有机相。过滤并真空浓缩有机相,然后在高真空下干燥残余物,得到1.96g(理论值的100%)微黄-棕色油状物。1H-NMR与实施例1的产物的1H-NMR一致。通过手性相HPLC(系统如实施例1中所述)得到90%ee的所需的(S)醇。
实施例34
[2-(S)-羟基-1(S)-甲基-2-苯基乙基]-N-甲基-5-(4-氟苯基)-5-氧代戊酰胺
在0-5℃下,向42.0g(0.2mol)5-(4-氟苯基)-5-氧代戊酸在500ml无水四氢呋喃中的溶液中首先滴加30.4g(0.3mol,1.5摩尔当量)三乙胺,然后缓慢滴加21.7g(0.2mol,1.0摩尔当量)。然后将混合物在0-5℃下搅拌1小时。然后分批引入33.0g(0.2mol,1.0摩尔当量)(+)-(1S,2S)-伪麻黄碱。通过在20-25℃下搅拌2小时反应完成(TLC检测:二氯甲烷/甲醇=9/1)。将溶剂基本上真空蒸馏除去并将200ml冰水加入到残余物中。用乙酸乙酯(2×250ml)萃取产物,依次用2N盐酸、饱和碳酸氢钠溶液和饱和氯化钠溶液各100ml洗涤有机相。用硫酸钠干燥溶液,过滤,真空浓缩。得到61.9g(173mmol,理论值的86%)油状物,若干天后结晶(m.p.87-88℃)。
HPLC-MS[柱:20×2mm YMC J′sphere ODS H 80;洗脱液A:0.5%三氟乙酸水溶液,洗脱液B:0.5%三氟乙酸的乙腈溶液,梯度:T=0分钟:96%A,T=2分钟:95%B,T=2.4分钟:95%B,流速:1ml/min;温度:30℃;UV-检测波长220nm,tret 1.33分钟],所得纯度为(面积百分比)94%(m/z=358(100%,M+H+)。
1H-NMR(400MHz,CDCl3):由于存在酰胺官能团的两种旋转异构体(比例约1.6∶1),产生两组信号。主要旋转异构体的信号用(*)标识,次要旋转异构体的信号用(#)标识。未标识的信号归属于重叠的旋转异构体信号。δ=0.98(#),1.10(*)(2×d,C-CH3);2.0-2.15和2.33-2.52(2×m,4H,2×CH2);2.85(#),2.92(*)(2×s,3H,N-CH3);2.99-3.13(m,2H,CH2);4.11(m,1H,NCH-CH3);4.48(m,宽,1H,OH);4.58(m,1H,CH2CHOH);7.09-7.42(m,7H,芳族-H);7.96-8.09(m,2H,芳族-H)。
实施例35
4-[2-(4-氟苯基)-[1,3]二氧戊环-2-基]-N)((S)-2-羟基-(S)-1-甲基-2-苯基乙基)-N-甲基丁酰胺
将10.2ml(180mmol,6摩尔当量)乙二醇和570mg(3mmol,0.1摩尔当量)对甲苯磺酸水合物加入到10.7g(30mmol)[2-(S)-羟基-1(S)-甲基-2-苯基乙基]-N-甲基-5-(4-氟苯基)-5-氧代戊酰胺在100ml甲苯中的混悬液中。将混合物用脱水器在回流下加热9小时。将冷反应溶液用50ml饱和碳酸氢钠溶液洗涤,用硫酸钠干燥,过滤并真空浓缩。用色谱法(200g硅胶35-70μm,流动相:正庚烷/乙酸乙酯=1/1,然后是乙酸乙酯)纯化残余物。得到3.3g(8.2mmol,理论值的27%)油状物。
HPLC-MS [柱:20×2mm YMC J′sphere ODS H 80;洗脱液A:0.5%三氟乙酸水溶液,洗脱液B:0.5%三氟乙酸的乙腈溶液,梯度:T=0分钟:96%A,T=2分钟:95%B,T=2.4分钟:95%B,流速:1ml/min;温度:30℃;UV-检测波长220nm,tret1.27分钟],所得纯度为(面积百分比)95%(m/z=358(100%,M+H+)。
1H-NMR(400MHz,CDCl3):由于存在酰胺官能团的两种旋转异构体(比例约2∶1),产生两组信号。主要旋转异构体的信号用(*)标识,次要旋转异构体的信号用(#)标识。未标识的信号归属于重叠的旋转异构体信号。δ=1.25(*),1.38(#)(2×d,C-CH3);1.74-2.03和(m,4H,2×CH2);2.81(*),2.86(#)(2×s,3H,N-CH3);2.74-2.95(m,2H,CH2);3.55-3.74(2m,4H,CH2);(3.95-4.10(m,1H,NCH-CH3);4.73(m,1H,CH2CHOH);7.08-7.35(m,7H,芳族-H);7.94-8.03(m,2H,芳族-H)。
参考实施例C1
3(R)-[3(S)-(叔丁基二甲基硅烷基氧基)-3-(4-氟苯基)丙基]-1-(4-{[(4-甲氧基亚苄基)氨基]甲基}苯基)-4(S)-(4-甲氧基苯基)氮杂环丁烷-2-酮
用确证的游离氨基β-内酰胺样品制备亚胺-保护的β-内酰胺对照样品。
如WO 02/50027描述制备确证的1-(4-氨基甲基苯基)-3(R)-[3(S)-(叔丁基二甲基硅烷基氧基)-3-(4-氟苯基)丙基]-4(S)-(4-甲氧基苯基)氮杂环丁烷-2-酮。
在氮气下,在带有磁力搅拌器、蒸馏装置、滴液漏斗和温度计的圆底烧瓶中,将200μl(1.61mmol)p-茴香醛(Fluka)加入到827g纯度为96%的确证的氨基β-内酰胺在6ml甲苯中的溶液中。将反应混合物在油浴中加热到50℃。甚至在加热过程中,冷凝物沉积在烧瓶壁上。压力降低到90mbar,以至于甲苯连续蒸出并被从滴液漏斗中滴加的甲苯替代。HPLC检测显示15分钟后基本上达到定量转化。将反应混合物真空浓缩,并在HV下除去残留的甲苯。产率:980mg(1.47mmol,理论值的100%)微黄色粘性油状物。
1H-NMR、MS和HPLC保留时间与实施例15的产物相同。
Claims (11)
1.制备式(I)的二苯基氮杂环丁烷酮衍生物或其取代基X、R1和/或R2被保护的形式的方法,
其中的符号、取代基和标记具有下列含义:
X=H、OH;
R1=OH、OCH3;
R2=F、CH2CH3、CH2NHR4;
R3=H、F;
R4=H、CO-(CH2-)nCO-R5、CO-(CH2-)nNHR6;
n=4-16的整数;
R5=OH、NH-CH2-[CH(OH)-]mCH2OH;
R6=H、CO-[CH(OH)-]mCH2OH;
m=1-5的整数;
其中将式(II)的化合物
其中Y=H,H;H,OH;H,OAc;H,OSi(烷基)o(芳基)p,o、p=0、1、2或3且o+p=3;H,OTHP;H,OC(芳基)3;H,OCH2O烷基;H,OCH(O烷基)CH3;H,O烷基;H,OCH2芳基;O烷基,O烷基;环状缩酮,与式(III)的亚胺反应,
其中
R7=R1或O-保护基
R8=R2、CH2N[Si(烷基)o(芳基)p]CO2CH2(C6H5)、CH2N[Si(烷基)o(芳基)p]CO2叔丁基、CH2N=CH(C6H5)、CH2N=CH(C6H4-pOCH3)、CH2N=CH[C6H4(R4)]或
得到式(IV)的中间体,
之后,如果合适,将这些式(IV)的氨基酰胺转化为式(V)的酯、混合酸酐或活性酯,
在该过程中可能产生R9=H的羧酸中间体,且其中
R9是(C1-C4)烷基、CO(C1-C4)烷基、COO(C1-C4)烷基、SO2芳基,随后将式(IV)的化合物或如果合适式(V)的化合物环化,得到式(VI)的内酰胺,
并且如果合适,最后将式(VI)的化合物去保护和/或将其中R8在去保护后是R2的式(VI)的胺与式(XV)或(XVI)的化合物反应,
生成式(I)的化合物。
2.权利要求1所述的方法,其中所述的环状缩酮是O-(CH2-)q-O,q=2或3。
3.权利要求1所述的方法,其中在式(VI)的胺中,R8在去保护后是CH2NHR4,R4=H。
4.权利要求1所述的方法,其中Y是H,OH的式(II)的化合物是由前体5-苯基-5-氧代戊酸或其甲基酯和由其制得的5-苯基-5-羟基戊酸或其甲基酯通过最后与(+)-(1S,2S)-伪麻黄碱(X)反应制备的。
5.权利要求1至4中任意一项所述的方法,其中式(II)、(IV)以及如果合适式(V)的取代基Y中的羟基是未被保护的。
6.权利要求1至4中任意一项所述的方法,其中用于保护羟基的保护基是OAc、o、p=0、1、2或3且o+p=3的OSi(烷基)o(芳基)p、OTHP、OC(芳基)3、OCH2O烷基或OCH(O烷基)CH3。
7.权利要求4所述的方法,其中在制备Y=H,OH的式(II)化合物的反应序列中,酮到羟基的反应是用手性还原剂通过(R)-甲基-CBS-催化的还原、Ru(II)-催化的不对称氢化或手性络合的氢化亚铜(I)-催化的对映选择性氢化硅烷化来进行的。
9.权利要求8所述的化合物,其中所述的环状缩酮是O-(CH2-)q-O,q=2或3。
10.式(IV)的化合物,
其中R3是H、F;R7是OH或OCH3,如果合适,还可以是保护的基团;
R8是F;CH2CH3;R4=H的CH2NHR4;CO-(CH2-)nCO-R5或CO-(CH2-)nNHR6,R5是OH、NH-CH2-[CH(OH)-]mCH2OH,R6是H、CO-[CH(OH)-]mCH2OH,n=4-16的整数,m=1-5的整数;CH2N[Si(烷基)o(芳基)p]CO2CH2(C6H5);CH2N[Si(烷基)o(芳基)p]CO2叔丁基;CH2N=CH(C6H5);CH2N=CH(C6H4-pOCH3);CH2N=CH[C6H4(R4)];或
Y=H,H;H,OH;H,OAc;H,o、p=0、1、2或3且o+p=3的OSi(烷基)o(芳基)p;H,OTHP;H,OC(芳基)3;H,OCH2O烷基;H,OCH(O烷基)CH3;H,O烷基;H,OCH2芳基;O烷基,O烷基;环状缩酮。
11.权利要求10所述的化合物,其中所述的环状缩酮是O-(CH2-)q-O,q=2或3。
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