CN100441570C

CN100441570C - 一种米格列奈钙的制备及质量控制方法

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Publication number: CN100441570C
Application number: CNB2006100119707A
Authority: CN
Inventors: 严洁
Original assignee: Individual
Current assignee: Tianjin Sino Pharmaceutical Biotechnology Co Ltd
Priority date: 2006-05-24
Filing date: 2006-05-24
Publication date: 2008-12-10
Anticipated expiration: 2026-05-24
Also published as: CN1844096A

Abstract

本发明涉及一种米格列奈钙的制备及质量控制方法，该方法包括的步骤如下：步骤1、顺-环己基-1，2-二甲酰亚胺的合成；步骤2、顺-六氢异吲哚的合成；步骤3、α-苄基丙二酸二乙酯的合成；步骤4、苄基丁二酸的合成；步骤5、S-苄基丁二酸甲基苄胺盐的合成；步骤6、S-苄基丁二酸的合成；步骤7、(2S)-2-苄基-3-(顺-六氢异吲哚-2-羰基)丙酸的合成；步骤8、米格列奈钙粗品的合成；步骤9、米格列奈钙的精制。本发明还包括米格列奈钙的质量控制方法，该方法包括以下步骤：对性状进行观察，测比旋度，鉴别，检查，对米格列奈钙进行含量测定。

Description

一种米格列奈钙的制备及质量控制方法

技术领域

本发明涉及一种降血糖药物的制备及检测方法，特别涉及米格列奈钙的的制备及质量控制方法。

背景技术

糖尿病是常见病、多发病，其患病人数正随着人民生活水平的提高、人口老化、生活方式的改变以及诊断技术的进步而迅速增加。据WHO有关资料表明，糖尿病的患病率、致残率和死亡率以及危害程度已居非传染性疾病的第3位，它已成为继心脑血管疾病及肿瘤之后，严重威胁人类健康的第三大疾病，此病不仅给患者带来极大痛苦，生活质量受到极大影响，还给社会带来沉重的经济负担。

目前，临床用于治疗II型糖尿病的口服降糖药主要是磺酰脲类、双胍类、α-葡萄糖苷酶抑制剂、噻唑烷二酮类和美格列脲类等。其中，促胰岛素分泌型磺酰脲类药除了首次治疗失败率较高外，约有10％的病人对随后的治疗没有应答。其主要不良反应是低血糖和体重严重增加。尤其对氯磺丙脲和格列本脲更为常见，已超重的病人不宜使用此类药物治疗。不增加胰岛素分泌的双胍类药通过增进细胞利用葡萄糖、抑制葡萄糖摄取和异生达到降血糖作用，虽在50年代末已用于治疗糖尿病，但明显的消化道和乳酸中毒等不良反应限制其使用。竞争抑制葡萄糖苷酶的α-葡萄糖苷酶抑制剂减少双糖转化为单糖，延缓肠腔吸收碳水化合物，以降低餐后高血糖，但胃肠道副作用及贫血等不良反应限制其使用。胰岛素增敏剂噻唑烷二酮类代表药曲格列酮因肝功衰竭导致患者死亡已受到美国FDA三次警告，肝脏毒性严重影响了患者对此类药物的信心。

糖尿病可分为胰岛素依赖型和非胰岛素依赖型。II型糖尿病又称非胰岛素依赖型糖尿病，是一种以胰岛素β细胞损伤为特征的自身免疫性疾病。在糖尿病病人中，该类型占90％。其特征为胰岛素分泌减少，胰岛素抵抗及肝脏葡萄糖生成增多，这些病人空腹胰岛素水平可能正常或偏高，进餐时胰岛素早期释放减少，加重了高胰岛素血症的危险。因此，控制餐后高血糖可改善II型糖尿病患者的血糖控制，有效预防糖尿病进程中出现的各种慢性并发症，降低患者病死率。

近年发现，早期相胰岛素分泌能力的损害是II型糖尿病发展的重要因素。餐后血糖调节剂是20世纪90年代研究进展较快、最引人关注的药物，可针对II型糖尿病患者脉冲式初相胰岛素分泌缺陷，增加患者餐时初相胰岛素水平，即时降低早期餐后血糖水平，控制血糖波动。因此开发新的可以恢复餐后胰岛素早期分泌相并降低餐后高血糖的药物成为降糖药物开发的新靶点。米格列奈钙正是用以恢复或替代早期相胰岛素分泌的抗高血糖新药。

米格列奈钙由日本橘生制药公司研制，现已经上市的药物，美国专利(US006133454A)介绍了一条适用于工业生产的米格列奈钙的合成途径(也见发明专利说明书授权公告号CN 1108291C)，日本专利(特開2001-261644)介绍了向(S)-苄基丁二酸加上顺-六氢异吲哚的方法。Drugs of the Future 2000，25(10)也介绍了一种制备米格列奈钙的方法，这些方法合成路线复杂，收率低，操作不便，条件苛刻，不适合工业化生产。因此，本发明提供一种米格列奈钙的新的合成方法。

另外，由于米格列奈钙含有一定的水分，又具有一定的旋光性，产品质量难以控制，为使其质量能够得到好的控制，本发明还提供米格列奈钙的质量控制方法，该方法特别适合于米格列奈钙原料药，对于在工业化生产中控制产品质量具有良好的作用。

发明内容：

本发明提供一种米格列奈钙的制备方法。

米格列奈钙英文名：Mitiglinide Calcium

化学名：双[(2S)-2-苄基-3-(顺-六氢异吲哚-2-羰基)丙酸]单钙二水合物

结构式：

分子式及分子量：C₃₈H₄₈CaN₂O₆·2H₂O 704.91

本发明提供的合成路线如下：

其中中间体IX的制备路线如下：

其中

XI 环己烯-1，2-二甲酰亚胺

X 顺-环己基-1，2-二甲酰亚胺

IX 顺-六氢异吲哚

VIII 苄氯

VII 丙二酸二乙酯

VI α-苄基丙二酸二乙酯

V 苄基丁二酸

IV S-苄基丁二酸甲基苄胺盐

III S-苄基丁二酸

II (2S)-2-苄基-3-(顺-六氢异吲哚-2-羰基)丙酸

I 米格列奈钙(双[(2S)-2-苄基-3-(顺-六氢异吲哚-2-羰基)丙酸]单钙二水合物)

操作步骤如下：

步骤1、顺-环己基-1，2-二甲酰亚胺的合成

步骤2、顺-六氢异吲哚的合成

步骤3、α-苄基丙二酸二乙酯的合成

步骤4、苄基丁二酸的合成

步骤5、S-苄基丁二酸甲基苄胺盐的合成

步骤6、S-苄基丁二酸的合成

步骤7、(2S)-2-苄基-3-(顺-六氢异吲哚-2-羰基)丙酸的合成

步骤8、米格列奈钙粗品的合成

步骤9、米格列奈钙的精制

以VII、VIII为原料制备米格列奈钙经7步反应。

总收率％＝0.455×0.545×0.191×0.899×0.857×0.487×0.932×100％＝1.7％

本发明最优选的操作步骤见实施例。

本发明还包括米格列奈钙的质量控制方法，该方法包括以下步骤：

对性状进行观察，测比旋度，鉴别，检查，对米格列奈钙进行含量测定。

具体步骤为：

本品为双[(2S)-2-苄基-3-(顺-六氢异吲哚-2-羰基)丙酸]单钙二水合物。含米格列奈钙(C₃₈H₄₈CaN₂O₆·2H₂O)不得少于98.0％。

【性状】本品为白色结晶性粉末；无臭，味苦。

本品在甲醇中易溶，在无水乙醇和二甲基亚砜中溶解，在水中和乙腈中几乎不溶；在冰醋酸中易溶。

比旋度取本品，精密称定，加甲醇制成每1ml含米格列奈钙10mg的溶液，依法测定(中国药典2000年版二部附录VI E)，比旋度为+5.0°~+6.5°

【鉴别】(1)取本品，加甲醇适量使溶解，加水稀释制成每1ml含米格列奈钙1mg的溶液，照分光光度法(中国药典2000年版二部附录IV A)测定，在259nm的波长处有最大吸收。

(2)取本品适量，加少量甲醇使溶解，并制成每1ml含10mg的溶液，加加草酸铵试液适量，即生成白色沉淀，沉淀不溶于醋酸，但可溶于盐酸。

(3)本品红外光吸收图谱应与对照品的图谱一致(中国药典2000年版二部附录IVC)

【检查】有关物质取本品，约25mg，精密称定，置50ml量瓶中，加甲醇5ml使溶解，加水稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液；量取适量，加流动相稀释成每1ml中含米格列奈钙5ug的溶液作为对照溶液。照含量测定项下色谱条件试验，取对照溶液20μl注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使主成分色谱峰的峰高约为满量程的10~20％；再取供试品溶液20μl，注入液相色谱仪，记录色谱图至主成分峰保留时间的3倍。供试品溶液的色谱图中如显杂质峰，除溶剂峰外，各杂质峰面积的总和，不得大于对照溶液的主峰面积(1.0％)。

左旋异构体色谱条件与系统适用性试验用SUMICHIRAL OA-3100R(5μm，4.6mm×250mm)手性柱为色谱柱，以正己烷∶氯仿∶甲醇∶三氟醋酸(80∶160∶7.5∶0.5)为流动相，检测波长259nm，理论板数按米格列奈钙峰计算应不低于1000，米格列奈钙与左旋异构体的分离度符合要求。

测定法精密称取米格列奈钙原料约50mg，置10ml量瓶中，加甲醇适量，加流动相稀释至刻度，摇匀，滤过，作为供试品溶液(5mg/ml)。精密量取供试品溶液1.0ml，置100ml量瓶中，用流动相稀释至刻度，混匀，作为对照溶液(1)(0.05mg/ml)。精密称取米格列奈钙对映体约10mg，置10ml量瓶中，加甲醇适量，加流动相稀释至刻度，摇匀，滤过，作为对照溶液(2)(1mg/ml)。精密量取供试品溶液、对照溶液(2)各2ml，置试管中，摇匀，作为对照溶液(3)。

取对照溶液(3)20ul注入液相色谱仪，使米格列奈钙与左旋异构体分离符合要求。取对照溶液(1)20ul注入液相色谱仪，调节检测器灵敏度，使主成分色谱峰的峰高为满量程的10％；再取供试品溶液和对照溶液(1)、对照溶液(2)各20ul分别注入液相色谱仪，记录色谱图，供试品色谱图中与对照溶液(2)主峰相应位置处如有杂质峰，其面积不得大于对照溶液(1)主成份的峰面积的1/2(0.5％)。

氯化物取本品0.20g，加甲醇10ml使溶解，依法检查(中国药典2000年版二部附录VIII A)，与标准氯化钠溶液4.0ml制成的对照液比较，不得更浓(0.02％)。

甲醇、乙醇、二氯甲烷、乙酸乙酯、四氢呋喃

精密称取二氯甲烷45mg、四氢呋喃54mg置25ml量瓶中，加二甲基亚砜稀释至刻度，摇匀，制成每1ml含1.8mg二氯甲烷和2.16mg四氢呋喃的溶液。另精密称取甲醇45mg、乙醇75mg、乙酸乙酯75mg及二氯甲烷和四氢呋喃溶液5ml，置同-50ml量瓶中，加二甲基亚砜稀释至刻度，摇匀，精密量取1ml置于10ml量瓶中，精密加入内标溶液(1mg/ml正己烷溶液)1ml，加二甲基亚砜稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液；另取本品约300mg，精密称定，置10ml量瓶中，精密加入内标溶液(1mg/ml正己烷溶液)1ml，加二甲基亚砜稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。取上述溶液照气相色谱法(中国药典2000年版二部附录V E测定)，用6％氰丙苯基-94％二甲基聚硅氧烷(按甲醇峰计算的理论板数应大于3000)石英毛细管柱，在柱温60℃保持5分钟后，以每1分钟40℃的速率升温至160℃测定。含甲醇不得过0.3％(g/g)、乙醇不得过0.5％(g/g)、二氯甲烷不得过0.06％(g/g)、乙酸乙酯不得过0.5％(g/g)、四氢呋喃不得过0.072％(g/g)。

水分取本品，照水分测定法(中国药典2000年版二部附录VIII M第一法A)测定，含水分应为4.8％~6.0％。

【含量测定】照高效液相色谱法(中国药典2000年版二部附录V D)测定。

色谱条件与系统适用性试验以碱纯化硅胶为填充剂(ABZ+Plus，5um，15cm)；以乙腈-水-正戊醇(40∶59∶1)(用磷酸调节pH值为2.5)为流动相；检测波长为210nm；流速为每分钟1.0ml；米格列奈钙主峰与相邻杂质峰的分离度应符合要求；米格列奈钙主峰的理论塔板数应不低于2000。重复进样6次，其相对标准差应小于2.0％。

测定法：取本品，约25mg，精密称定，置50ml量瓶中，加甲醇5ml，超声使溶解，加水稀释至刻度，摇匀，精密量取5ml置50ml量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，取20μl注入色谱仪中，记录色谱图；另取米格列奈钙对照品适量，同法测定，按外标法以峰面积计算，即得。

以上质量控制方法中所述本品是指根据本发明的合成方法制备的的米格列奈钙产品。

本发明的质量控制方法是根据对米格列奈钙理化性质、纯度检查、异位异构体和光学异构体检查、含量测定等项目的研究结果而制订。

[含量限度]根据实验室合成的米格列奈钙三批样品(批号：040401、040402、040403)测定结果，含量分别为100.2％，100.5％，99.8％，含量均在98.5％以上，故将含量限度订为不得少于98.0％。

[性状]根据合成的三批样品(批号：040401、040402、040403)，均为白色结晶和粉末，故将其性状列为白色结晶或粉末。

溶解度：按中国药典2000年版二部凡例方法测定米格列奈钙溶解度并将结论列入质量标准。

比旋度：三批样品(批号：040401、040402、040403)均在规定的限度之内。

[鉴别]1、紫外光谱法本品在紫外区吸收虽然较弱，但在259nm波长处有特征吸收，可用于鉴别。

2、本品含有钙，照中国药典2000年版二部附录III，可用于鉴别。

3、红外光谱法本品为原料药，与对照品比较可用红外光谱法鉴别。

根据对本品三批(批号：040401、040402、040403)的鉴定结果，均显阳性反应，故将三项鉴别列入质量标准。

[检查]有关物质异位异构体及其他有关物质的检查，采用HPLC方法，以碱纯化硅胶为填充剂(ABZ+Plus，5um，15cm)；以乙腈-水-正戊醇(59∶40∶1)(用磷酸调节pH值为2.5)为流动相，干扰因素少，准确度，灵敏度高。

氯化物按中国药典2000年版二部附录VIII A检查，本品三批(批号：040401、040402、040403)均小于0.02％。

甲醇、乙醇、二氯甲烷、乙酸乙酯、四氢呋喃为合成中使用的溶剂，按ICH规定为二、三类有毒溶剂，经方法学研究，将其列入质量标准。

水分本品含有2个结晶水，照水分测定法(中国药典2000年版二部附录VIII M第一法A)测定，三批样品测定结果均在4.8％~6.0％。

[含量测定]HPLC方法干扰因素少，准确度，灵敏度高，故含量检测方法选用了HPLC法。色谱条件选择同有关物质检查。

本发明的合成方法，收率高，成本低，便于操作，条件简单，适合工业化生产。

本发明的质量控制方法，准确度，灵敏度高，有利于生产过程的质量监督。

具体实施方式：

以下通过实施例进一步说明本发明，但不作为对本发明的限制。

实施例1

步骤1、顺-环己基-1，2-二甲酰亚胺的合成

将环己烯-1，2-二甲酰亚胺(30g，199mmol)溶于甲醇(1000ml)，加入10％Pd/C(0.3g)，通氢气，室温搅拌28小时至不吸氢结束，过滤，滤液浓缩得白色结晶。质量为：30.2g；收率为：99.3％。

步骤2、顺-六氢异吲哚的合成

将四氢铝锂(18.6g，490mmol)加入到干燥的四氢呋喃(150ml)中，搅拌下滴加顺-环己基-1，2-二甲酰亚胺(30g，196mmol)的四氢呋喃(500ml)溶液，滴加速度为保持四氢呋喃溶液微微回流。全部加入后，将反应液回流30小时，冷却，加入少量水分解过量的四氢铝锂，将产生的沉淀过滤，滤液浓缩，残留物用乙醚(500ml)提取3次，合并乙醚加无水硫酸钠干燥后，过滤，浓缩，残留物减压蒸馏得产物。质量为：19.6g；收率为：79.9％。

步骤3、α-苄基丙二酸二乙酯的合成

向三颈瓶中加入无水乙醇500ml，加入金属钠23g，待金属钠全部反应后，将冷淋管上加上无水氯化钙干燥管，通过滴液漏斗滴加丙二酸二乙酯166g，滴加完毕后，在2~3小时内滴加苄氯126.5g，滴毕加热回流8~11小时，反应完成后，冷却，浓缩蒸除乙醇，残留物中加水500ml，震摇，加氯化钠盐析分层，有机层再加水500ml水洗，分层，有机层减压分馏得产物。质量为：118g；收率为：45.5％。

步骤4、苄基丁二酸的合成

将α-苄基丙二酸二乙酯(75g，300mmol)和α-溴乙酸乙酯(51g，300mmol)加入到乙醇钠100ml中(钠7.5g溶于无水乙醇100ml中制得)，加毕，升温回流12小时后浓缩去溶剂，残留物用3N硫酸200ml酸化，用乙醚500ml萃取，乙醚层浓缩得油状物，将油状物投入到含氢氧化钾70g，乙醇280ml和水180ml的混合液中，加热回流4小时后，浓缩掉乙醇，残留物加6N盐酸400ml酸化，用乙醚500ml萃取2次，合并乙醚层浓缩得淡黄色固体，将淡黄色固体分三次加入到外浴温度为160~170℃的反应瓶中脱羧，加毕后，继续加热15小时，冷却得固体，并用10倍水重结晶。质量为：34g；收率为：54.5％；熔点为：160~161℃。

步骤5、S-苄基丁二酸甲基苄胺盐的合成

在反应瓶中加入苄基丁二酸(20.8g，100mmol)，加无水乙醇500ml溶解，滴加R-甲基苄胺(24.24g，200mmol)滴加完毕，加热至回流，待白色固体完全溶解后，降温静置析晶，室温放置过夜，过滤，干燥得1次结晶，加入20倍无水乙醇重结晶，连续两次得产物。质量为：8.6g；收率为：19.1％；旋光度：[α]²⁶ _D＝-12°~-13°(C＝1，H₂O)。

步骤6、S-苄基丁二酸的合成

将S-苄基丁二酸甲基苄胺盐45g中加入2N盐酸120ml，室温搅拌1小时，加入250ml乙醚萃取2次，分层，合并乙醚层，无水硫酸钠干燥，浓缩得白色固体。质量为：18.7g；收率为：89.9％；旋光度：[α]²⁶ _D＝-27°(C＝2，乙酸乙酯)，[α]²⁶ _D＝-103°(C＝15，甲醇)；熔点：159~161℃。

步骤7、(2S)-2-苄基-3-(顺-六氢异吲哚-2-羰基)丙酸的合成

将咪唑(55.4g，810mmol)的二氯甲烷溶液(300ml)，冷却至0℃，滴加氯化亚砜(14.5ml，200mmol)的二氯甲烷溶液(100ml)，在0℃下搅拌1小时后，在反应液中加入S-苄基丁二酸(20.8g，100mmol)，0℃下搅拌2小时，滴加顺-六氢异吲哚(13.0g，100mmol)的二氯甲烷溶液(100ml)，滴加完毕慢慢升至室温搅拌过夜，反应液中加入1N盐酸200ml搅拌1小时后，分液，有机层水洗，减压浓缩，残留物用乙酸乙酯溶解，用饱和碳酸氢钠溶液200ml提取2次，合并水层，用乙酸乙酯洗，取水层用浓盐酸调至酸性，水层用乙酸乙酯200ml提取，水洗，有机层用无水硫酸钠干燥，减压浓缩得油状物。质量为：27.0g，收率为：85.7％，旋光度：[α]²⁴ _D＝-3.5°(C＝1.04，甲醇)。

步骤8、米格列奈钙粗品的合成

(2S)-2-苄基-3-(顺-六氢异吲哚-2-羰基)丙酸(40.4g，128mmol)的乙醇溶液(150ml)，加入2N氢氧化钠(64ml，128mmol)，减压浓缩，残留物加水30ml溶解，剧烈搅拌下，滴加无水氯化钙(28.4g，256ml)的水溶液100ml，搅拌1小时后，过滤，干燥得粗品。质量为：44g；收率为：48.7％；熔点为：179~185℃。

步骤9、米格列奈钙的精制

称取米格列奈钙粗品，在40℃下用20倍重量的95％的乙醇溶解，保温1小时，降至室温静置析晶。过滤，干燥，得精品。质量为：41g；收率为：93.2％。

Claims

1、一种米格列奈钙的制备方法，步骤如下：

步骤1、顺-环己基-1，2-二甲酰亚胺的合成

将30g环己烯-1，2-二甲酰亚胺溶于甲醇1000ml，加入0.3g 10％Pd/C，通氢气，室温搅拌28小时至不吸氢结束，过滤，滤液浓缩得白色结晶；质量为：30.2g；收率为：99.3％；

步骤2、顺-六氢异吲哚的合成

将18.6g四氢铝锂加入到干燥的四氢呋喃150ml中，搅拌下滴加30g顺-环己基-1，2-二甲酰亚胺的四氢呋喃溶液500ml，滴加速度为保持四氢呋喃溶液微微回流；全部加入后，将反应液回流30小时，冷却，加入少量水分解过量的四氢铝锂，将产生的沉淀过滤，滤液浓缩，残留物用500ml乙醚提取3次，合并乙醚加无水硫酸钠干燥后，过滤，浓缩，残留物减压蒸馏得产物；质量为：19.6g；收率为：79.9％；

步骤3、α-苄基丙二酸二乙酯的合成

向三颈瓶中加入无水乙醇500ml，加入金属钠23g，待金属钠全部反应后，将冷淋管上加上无水氯化钙干燥管，通过滴液漏斗滴加丙二酸二乙酯166g，滴加完毕后，在2-3小时内滴加苄氯126.5g，滴毕加热回流8-11小时，反应完成后，冷却，浓缩蒸除乙醇，残留物中加水500ml，震摇，加氯化钠盐析分层，有机层再加水500ml水洗，分层，有机层减压分馏得产物；质量为：118g；收率为：45.5％；

步骤4、苄基丁二酸的合成

将75g α-苄基丙二酸二乙酯和51g α-溴乙酸乙酯加入到由7.5g钠溶于100ml无水乙醇中制得的100ml乙醇钠中，加毕，升温回流12小时后浓缩去溶剂，残留物用3N硫酸200ml酸化，用乙醚500ml萃取，乙醚层浓缩得油状物，将油状物投入到含氢氧化钾70g，乙醇280ml和水180ml的混合液中，加热回流4小时后，浓缩掉乙醇，残留物加6N盐酸400ml酸化，用乙醚500ml萃取2次，合并乙醚层浓缩得淡黄色固体，将淡黄色固体分三次加入到外浴温度为160-170℃的反应瓶中脱羧，加毕后，继续加热15小时，冷却得固体，并用10倍水重结晶；质量为：34g；收率为：54.5％；熔点为：160-161℃；

步骤5、S-苄基丁二酸甲基苄胺盐的合成

在反应瓶中加入20.8g苄基丁二酸，加无水乙醇500ml溶解，滴加24.24g R-甲基苄胺滴加完毕，加热至回流，待白色固体完全溶解后，降温静置析晶，室温放置过夜，过滤，干燥得1次结晶，加入20倍无水乙醇重结晶，连续两次得产物；质量为：8.6g；收率为：19.1％；旋光度：[α]²⁶ _D＝-12°～-13°C＝1，H₂O；

步骤6、S-苄基丁二酸的合成

将S-苄基丁二酸甲基苄胺盐45g中加入2N盐酸120ml，室温搅拌1小时，加入250ml乙醚萃取2次，分层，合并乙醚层，无水硫酸钠干燥，浓缩得白色固体；质量为：18.7g；收率为：89.9％；旋光度：[α]²⁶ _D＝-27°C＝2，乙酸乙酯，[α]²⁶ _D＝-103°C＝15，甲醇；熔点：159-161℃；

步骤7、(2S)-2-苄基-3-(顺-六氢异吲哚-2-羰基)丙酸的合成

将55.4g咪唑的二氯甲烷溶液300ml，冷却至0℃，滴加14.5ml氯化亚砜的二氯甲烷溶液100ml，在0℃下搅拌1小时后，在反应液中加入20.8g S-苄基丁二酸，0℃下搅拌2小时，滴加13.0g顺-六氢异吲哚的二氯甲烷溶液100ml，滴加完毕慢慢升至室温搅拌过夜，反应液中加入1N盐酸200ml搅拌1小时后，分液，有机层水洗，减压浓缩，残留物用乙酸乙酯溶解，用饱和碳酸氢钠溶液200ml提取2次，合并水层，用乙酸乙酯洗，取水层用浓盐酸调至酸性，水层用乙酸乙酯200ml提取，水洗，有机层用无水硫酸钠干燥，减压浓缩得油状物；质量为：27.0g，收率为：85.7％，旋光度：[α]²⁴ _D＝-3.5°C＝1.04，甲醇；

步骤8、米格列奈钙粗品的合成

40.4g(2S)-2-苄基-3-(顺-六氢异吲哚-2-羰基)丙酸的乙醇溶液150ml，加入64ml 2N氢氧化钠，减压浓缩，残留物加水30ml溶解，剧烈搅拌下，滴加256ml无水氯化钙的水溶液100ml，搅拌1小时后，过滤，干燥得粗品；质量为：44g；收率为：48.7％；熔点为：179-185℃；

步骤9、米格列奈钙的精制

称取米格列奈钙粗品，在40℃下用20倍重量的95％的乙醇溶解，保温1小时，降至室温静置析晶；过滤，干燥，得精品；质量为：41g；收率为：93.2％。