CN1098635C - 线虫生防颗粒剂及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明为一种从自然土壤中分离出来的厚垣轮枝菌(Verticil-lium chlamydosporium)为主效成分的用于生物防治植物寄生线虫病害的颗粒状制剂及其生产过程。该颗粒剂主要用于胞囊线虫和根结线虫病害的生物防治。它具有长期持久、不污染环境、施用方便、成本低廉等特点。
Description
本发明属一种线虫的生物农药，更详细地说是一种利用天敌真菌防治植物寄生线虫的生物制剂及其制备方法。
植物线虫病害是当今世界各国最难解决的土传病害之一，多种重要的线虫病害如大豆胞囊线虫病，各种根结线虫病给农业生产造成了重大损失，大田作物一般因线虫损失为10％左右，蔬菜和经济作物一般损失20-30％，有的甚至绝收。过去防治这类病害一般采用化学药剂，如呋喃丹、涕灭成和二溴氯丙烷等，但由于这些农药全部为高毒农药，造成的环境污染非常严重，因此，近年来某些化学杀线虫剂相继被一些国家颁布法律而禁用，致使化学杀线虫剂走向低谷。而利用生物制剂来防治线虫为世界各国的植物保护工作者所青睐。从欧洲到美洲很多国家纷纷立题对线虫生防菌进行研究，如巴氏穿刺芽孢杆菌、淡紫拟青霉等。但作为生产上可使用的生防菌剂，在当前世界上为数还很少。现有的生防制剂多采用拌种剂或种衣剂的形式出现，由于各种技术原因，这些制剂携带的菌量有限，同时，施到土壤中存活和定殖受土壤环境影响较大，因此，不易形成群体，特别是专性寄生线虫的生防菌更是如此，在土壤里虽然对线虫的寄生率较高，但由于存活时间较短，繁殖困难，所以，总体防治效果不佳。
本发明的目的是提供一种低成本的高效防治土壤线虫的生防颗粒剂及其制备方法。
本发明的目的是接如下内容实现的：
这种线虫生防颗粒剂，其中每100克成分为：
厚垣轮枝菌Verticillium chlamydospori-um 500-5000个厚垣孢子水 10-15克
微量元素 0.05-0.2克
载体 84.9-89.9克。
本发明所采用真菌是来自自然土培的厚垣轮枝菌，将其经过固体发酵或液体发酵两种方式制备成原菌剂。
所采用的固体发酵的培养基的成分以重量百分比计算为：
高梁渣或玉米渣 70-80％
水 20-30％
上述固体培养基发酵温度为；第一天至第八天为28-30℃，第九天至第二十一天为18-25℃。
所采用的液体发酵的培养基的成分以重量百分比计算为；
高梁浸汁 10-20％
硝酸钾 1-2％
磷酸二氢钾 0.2-5％
硫酸镁 0.2-0.3％
三氯化铁 0.01-0.03％
蔗糖 5-7％
水 65-84％
上述液体培养基调PH至7-8后经121℃灭菌30分钟后使用，发酵温度为开始到第48小时为28-30℃，48到96小时为23-25℃，96小时到7天为16-22℃。
本颗粒剂的生产加工工艺流程见附图1。
本发明利用的从自然土壤中分离出来的厚垣轮枝菌(Verticil-lium chlamydosporium)是一种兼性寄生不活泼线虫如胞囊或根结线虫雌虫的寄生真菌，因此，在没有活线虫时，这种真菌还可进行腐生生活，在土壤中容易长期存活并繁殖成一定的群体，同时，本制剂应用的真菌具有厚垣孢子，耐运输、贮藏，保持活性时间较长，对植物线虫有长期稳定的防治效果。
本发明所述的制剂的价格和使用成本仅为化学药剂的30-50％，同时该制剂为生物制剂，持效期长，不污染环境，对人畜安全，播种时一次施入，省工省时，经济和社会效益显著。
实施例1
取自然土壤50克，将土壤用水稀释5000-10000倍，在PDA平板养基(马铃薯200克、蔗糖20克、琼脂18克，加水至1000毫升)上每皿移入20微升，于25℃下培养3天后，检查获得厚垣轮枝菌(Ve-rticillium chlamydosporium)。经25℃下转移培养纯化后备作母菌剂使用。
对母菌剂进行固体发酵，温度：第一天至第八天为28℃，第九至第二十一天为20℃。经发酵二十一天后作为原菌剂。
50克原菌剂(每克内含20000个孢子)，加入50克硫酸锌，与11.9公斤的水及88公斤的干鸡粪混匀，经江苏常州机械厂生产的FS4型压粒机压制成直径3mm的颗粒。亩用量3公斤，随种子播入，防治大豆胞囊线虫，效果达60-70％，其使用成本为呋喃丹的30％。
实施例2
取自然土壤50克，将土壤用水稀释10000倍，在PDA平板养基(马铃薯200克、蔗糖20克、琼脂18克，加水至1000毫升)上每皿移入20微升，于25℃下培养3天后，检查获得厚垣轮枝菌(Verti-cillium chlamydosporium)。经25℃下转移培养纯化后备作母菌剂使用。
母菌剂采用固体发酵，温度为：第一天至第八天为30℃，第九至第二十一天为22℃。经发酵二十一天后作为原菌剂。
50克原菌剂(每克内含10000个孢子)，加入200克硫酸铜，与13.75公斤的水及86公斤的干猪粪混匀，经江苏常州机械厂生产的FS4型压粒机压制成直径3mm的颗粒。亩用量10公斤，随种子播入，防治根结线虫，效果达50-60％，其使用成本为涕灭威的50-60％。
实施例3
取自然土壤50克，将土壤用无菌水稀释10000倍，在PDA平板养基(马铃薯200克、蔗糖20克、琼脂18克，加水至1000毫升)上每皿移入20微升，于25℃下培养3天后，检查获得厚垣轮枝菌(Vert-icillium chlamydosporium)。经25℃下转移培养纯化后备作母菌剂使用。
母菌剂采用液体发酵，培养基的成分以重量百分比计算为：
高梁浸汁 12％
硝酸钾 1％
磷酸二氢钾 0.4％
硫酸镁 0.2％
三氯化铁 0.01％
蔗糖 5％
蒸馏水 81.39％
上述培养基调PH至7天后经121℃灭菌30分钟使用，发酵温度为开始到第48小时为28℃，第48到第96小时为23℃，第96小时到7天为16℃。经发酵7天后作为原菌剂。
100毫升原菌剂(每克内含40000个孢子)，加入100克硼砂，与10.8公斤的水及89公斤的干鸡粪混匀，经江苏常州机械厂生产的FS4型压粒机压制成直径3mm的颗粒。亩用量10公斤，随种苗播入，防治根结线虫，效果达50-70％，其使用成本为涕灭成的50-60％。
实施例4
取自然土壤50克，将土壤用无菌水稀释10000倍，在PDA平板养基(马铃薯200克、蔗糖20克、琼脂18克，加水至1000毫升)上每皿移入20微升，于25℃下培养3天后，检查获得厚垣轮枝菌(Vert-icillium chlamydosporium)。经25℃下转移培养纯化后备作母菌剂使用。
母菌剂采用液体发酵，培养基配方为：
高梁浸汁 20％
硝酸钾 2％
磷酸二氢钾 5％
硫酸镁 0.2％
三氯化铁 0.03％
蔗糖 5％
蒸馏水 67.77％
上述培养基调PH至8天后经121℃灭菌30分钟使用，发酵温度为开始到第48小时为30℃，第48到第96小时为25℃，第96不时到7天为20℃。经发酵7天后作为原菌剂。
100毫升原菌剂(每克内含30000个孢子)，加入150克钼酸钠，与12.75公斤的水及87公斤的干猪粪混匀，经压粒机压制成直径3mm的颗粒。亩用量3公斤，随种子播入，防治大豆胞囊线虫，效果达60-70％，其使用成本为呋喃丹的30％。
Claims (4)
1、一种线虫生防颗粒剂，其特征是每100克成分如下：厚垣轮枝菌(Verticillium chlamydosporium)500-5000个厚垣孢子水 10-15克微量元素 0.05-0.2克载体 84.9-89.9克。
2、一种线虫生防颗粒剂制备方法，其特征是：以利用从自然土壤中分离出来的厚垣轮枝菌(Verticillum chlamydosporium)，采用固体发酵或液体发酵法而制得的母菌剂为主效成分，该母菌剂通过挤压造粒法固定于以农家肥和微量元素为载体的颗粒中；其中固体发酵所用的培养基的成分以重量百分比计算为：高粱渣或玉米渣70-80％、水20-30％，固体培养基发酵温度为：第一天至第八天为28-30℃，第九天至第二十一天为18-25℃；而液体发酵的培养基的成分以重量百分比计算为：高粱浸汁10-20％，硝酸钾1-2％，磷酸二氢钾0.2-5％，硫酸镁0.2-0.3％，三氯化铁0.01-0.03％，蔗糖5-7％，水65-84％，液体发酵培养基调PH至7-8后，经121℃灭菌30分钟后使用，发酵温度从开始到第48小时为28-30℃，第48到96小时为23-25℃，第96小时到第7天为16-22℃。
3、根据权利要求1所述的线虫生防颗粒剂，其特征是所说的载体为农家肥为干鸡粪或干猪粪。
4、根据权利要求1所述的线虫生防颗粒剂，其特征是所说的微量元素为锌、或硼、或铜、或钼。
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