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CN108484728A - 一种路邓素直链衍生物、其制备办法及用途 - Google Patents

一种路邓素直链衍生物、其制备办法及用途 Download PDF

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CN108484728A
CN108484728A CN201810245806.5A CN201810245806A CN108484728A CN 108484728 A CN108484728 A CN 108484728A CN 201810245806 A CN201810245806 A CN 201810245806A CN 108484728 A CN108484728 A CN 108484728A
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CN
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boc
solvent
condensing agent
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valines
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CN201810245806.5A
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王志强
赵立双
金英学
檀雪莹
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Harbin Normal University
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Harbin Normal University
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Abstract

一种路邓素直链衍生物、其制备办法及用途，本发明属于合成药物化学技术领域，具体是一种新型结构的路邓素开链类似物的制备及其用途，还涉及该化合物在抗肿瘤方面的应用。本发明是要解决现有路邓素制备过程中合成较为困难，环合过程易产生二聚体或多聚体，收率很低的问题。路邓素直链衍生物的化学名称为N‑三甲基硅甲基‑N‑苄基‑邻苯二甲酰甘氨酰‑L‑THC‑D‑缬‑L‑色‑D‑亮‑L‑缬‑D‑缬‑L‑缬酰胺，结构式为：方法：将路邓素结构中的2‑异丁基噻唑烷‑4‑羧酸残基变为L‑硫代脯氨酸残基，然后在开链类似物的两端引入保护基邻苯二甲酰甘氨酰基和三甲基硅甲基苄胺基，得到目标化合物。本发明用于肿瘤治疗领域。

Description

一种路邓素直链衍生物、其制备办法及用途
技术领域
本发明属于合成药物化学技术领域，具体是一种新型结构的路邓素的开链类似物及其合成方法，还涉及该化合物在抗肿瘤方面的用途。
背景技术
肽类化合物在自然界中广泛存在。植物、动物、低等海洋生物、微生物、细菌和病菌等含有微量的多肽，这些特异结构使其呈现多种多样的药理作用，如防治癌症、艾滋病、心脑血管病、老年病等疑难杂症，已成为开发新药、特效药的主要方向之一。
路邓素(lugdunin)是路邓葡萄球菌(Staphylococcus lugdunensis，S.lugdunensis)分泌出的一种环肽抗生素，其化学结构为依次由噻唑烷杂环、D-缬氨酸、L-色氨酸、D-亮氨酸、L-缬氨酸和D-缬氨酸相连环合的杂环六肽。科学家首次于2016年从人类鼻腔中发现了这种细菌和它分泌的化合物，并发现这种化合物能够有效遏制耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的繁殖和感染，此外，其对包括MRSA在内的多种革兰氏阳性菌表现出强有力的抗菌活性，而且还不易在金黄色葡萄球菌内产生耐药性。
许多微生物产生的抗生素都显示一定的抗肿瘤活性，有些已经成为重要的抗肿瘤药物，如放线菌素D就是吩噁嗪酮母核与多肽侧链相连组成的具有优秀抗肿瘤活性的药物；盐酸博来霉素亦是由放线菌培养液中分离得到的糖肽抗生素，对鳞状上皮细胞癌、宫颈癌、脑癌都有效。路邓素是从路邓葡萄球菌(Staphylococcus lugdunensis，S.lugdunensis)分泌出的一种环肽抗生素，研究其抗肿瘤性显得尤为重要。但是路邓素来源较为困难，不能满足人们需要，人工制备成为重要的得到产品的方法，但是环肽的合成较为困难，在环合过程常常产生二聚体或多肽体，收率很低，因此进一步对路邓素进行结构修饰并合成其类似物显得尤为重要。此外，邻苯二甲酰亚胺结构由于具有合适的脂水分配系数和电中性，是许多抗肿瘤化合物的重要基团，因此在化合物中引入该基团可能有效提高其抗肿瘤活性。而祼露的C端或N端常常使多肽更易代谢，因此采用一定手段将其保护起来是提高稳定性的有效手段。
发明内容
本发明目的是在于提供一种路邓素直链衍生物以及其在抗肿瘤方面的应用，还要解决现有路邓素制备过程中环肽的合成较为困难，在环合过程常常产生二聚体或多肽体，收率很低的问题，而提供一种路邓素直链衍生物、其制备办法及用途。
本发明一种路邓素直链衍生物的化学名称为N-三甲基硅甲基-N-苄基-邻苯二甲酰甘氨酰-L-THC-D-缬-L-色-D-亮-L-缬-D-缬-L-缬酰胺，结构式为：
其中R和S表示氨基酸α碳的手性构型，THC为噻唑烷-4-甲酸残基。
本发明所述的路邓素直链衍生物的制备方法通过如下反应过程实现：
一种路邓素直链衍生物的制备方法是按以下步骤进行：
一、①将Boc-L-缬氨酸溶解在溶剂Ⅰ中，在缩合剂Ⅰ催化下与N-三甲基硅甲基苄胺缩合，再采用三氟乙酸脱去氨基端的Boc保护，得到中间产物Ⅰ；②将Boc-D-缬氨酸溶解在溶剂Ⅱ中，在缩合剂Ⅱ催化下与中间产物Ⅰ缩合，再采用三氟乙酸脱去氨基端的Boc保护，得到中间产物Ⅱ；③将Boc-L-缬氨酸溶解在溶剂Ⅲ中，在缩合剂Ⅲ催化下与中间产物Ⅱ缩合，再采用三氟乙酸脱去氨基端的Boc保护，得到中间产物Ⅲ；④将Boc-D-亮氨酸溶解在溶剂Ⅳ中，在缩合剂Ⅳ催化下与中间产物Ⅲ缩合，再采用三氟乙酸脱去氨基端的Boc保护，得到中间产物Ⅳ；⑤将Boc-L-色氨酸溶解在溶剂Ⅴ中，在缩合剂Ⅴ催化下与中间产物Ⅳ缩合，再采用三氟乙酸脱去氨基端的Boc保护，得到中间产物Ⅴ；⑥将Boc-D-缬氨酸溶解在溶剂Ⅵ中，在缩合剂Ⅵ催化下与中间产物Ⅴ缩合，再采用三氟乙酸脱去氨基端的Boc保护，得到中间产物Ⅵ；⑦将Boc-L-硫代脯氨酸溶解在溶剂Ⅶ中，在缩合剂Ⅶ催化下与中间产物Ⅵ缩合，再采用三氟乙酸脱去氨基端的Boc保护，得到线性肽N-末端三甲基硅甲基苄基取代的七肽；步骤①中Boc-L-缬氨酸与缩合剂Ⅰ的摩尔比为1:(1～3)，步骤①中所述Boc-L-缬氨酸与N-三甲基硅甲基苄胺的量的关系为等当量；步骤②中Boc-D-缬氨酸与缩合剂Ⅱ的摩尔比为1:(1～3)，步骤②中Boc-D-缬氨酸与中间产物Ⅰ的量的关系为等当量；步骤③中Boc-L-缬氨酸与缩合剂Ⅲ的摩尔比为1:(1～3)，步骤③中Boc-L-缬氨酸与中间产物Ⅱ的量的关系为等当量；步骤④中Boc-D-亮氨酸与缩合剂Ⅳ的摩尔比为1:(1～3)，步骤④中Boc-D-亮氨酸与中间产物Ⅲ的量的关系为等当量；步骤⑤中Boc--L-色氨酸与缩合剂Ⅴ的摩尔比为1:(1～3)，步骤⑤中Boc--L-色氨酸与中间产物Ⅳ的量的关系为等当量；步骤⑥中Boc-D-缬氨酸与缩合剂Ⅵ的摩尔比为1:(1～3)，步骤⑥中Boc-D-缬氨酸与中间产物Ⅴ的量的关系为等当量；步骤⑦中Boc-L-硫代脯氨酸与缩合剂Ⅶ的摩尔比为1:(1～3)，步骤⑦中Boc-L-硫代脯氨酸与中间产物Ⅵ的量的关系为等当量；所述溶剂Ⅰ为卤代烃或四氢呋喃，所述溶剂Ⅱ为卤代烃或四氢呋喃，所述溶剂Ⅲ为卤代烃或四氢呋喃，所述溶剂Ⅳ为卤代烃或四氢呋喃，所述溶剂Ⅴ为卤代烃或四氢呋喃，所述溶剂Ⅵ为卤代烃或四氢呋喃，所述溶剂Ⅶ为卤代烃或四氢呋喃；所述缩合剂Ⅰ为2-乙氧基-1-乙氧碳酰基-1,2-二氢喹啉或二环己基碳二亚胺，所述缩合剂Ⅱ为2-乙氧基-1-乙氧碳酰基-1,2-二氢喹啉或二环己基碳二亚胺，所述缩合剂Ⅲ为2-乙氧基-1-乙氧碳酰基-1,2-二氢喹啉或二环己基碳二亚胺，所述缩合剂Ⅳ为2-乙氧基-1-乙氧碳酰基-1,2-二氢喹啉或二环己基碳二亚胺，所述缩合剂Ⅴ为2-乙氧基-1-乙氧碳酰基-1,2-二氢喹啉或二环己基碳二亚胺，所述缩合剂Ⅵ为2-乙氧基-1-乙氧碳酰基-1,2-二氢喹啉或二环己基碳二亚胺，所述缩合剂Ⅶ为2-乙氧基-1-乙氧碳酰基-1,2-二氢喹啉或二环己基碳二亚胺；
二、将线性肽N-末端三甲基硅甲基苄基取代的七肽和缚酸剂溶于溶剂中，得到反应液，将反应液的温度从室温冷却至0℃后，在温度为-10℃～40℃和搅拌的条件下将邻苯二甲酰甘氨酰氯溶液滴入到反应液中，然后持续搅拌1h～1.5h，反应完成后采用水清洗反应液3～5次，有机层采用无水硫酸钠干燥，减压除去溶剂，得到粗产品，粗产品采用柱层析分离纯化，得到白色固体，即为N-三甲基硅甲基-N-苄基-邻苯二甲酰甘氨酰-L-THC-D-缬-L-色-D-亮-L-缬-D-缬-L-缬酰胺；所述线性肽N-末端三甲基硅甲基苄基取代的七肽与缚酸剂的摩尔比1:(4～6)；所述邻苯二甲酰甘氨酰氯溶液的浓度为(0.5～5mol/L)；所述邻苯二甲酰甘氨酰氯溶液与反应液的体积比为1:(4～10)；所述溶剂为卤代烃；所述邻苯二甲酰甘氨酰氯溶液中的溶剂为二氯甲烷或1,4-二氧六环。
一种路邓素直链衍生物的用途是将路邓素直链衍生物用于抑制人肝癌细胞HepG2。
本发明的优点：本发明制备的路邓素直链类似物，其具有与路邓素类似的肽链骨架，但是将原路邓素合成中较昂贵的2-(1-氨基-2-甲基丙基)噻唑烷-4-羧酸替换为较为经济便宜的硫代脯氨酸，合成工艺简单，原料成本低，反应条件温和。同时本发明所述化合物在直接肽两端分别被保护起来，从而增加其代谢稳定性。所得产物具有抗肿瘤活性，因而具有抗肿瘤应用的潜力。
附图说明
图1为采用实施例一制备的N-三甲基硅甲基-N-苄基-邻苯二甲酰甘氨酰-L-THC-D-缬-L-色-D-亮-L-缬-D-缬-L-缬酰胺进行抗肿瘤活性实验药物浓度与肝癌细胞HepG2细胞生存率的柱状对比图。
具体实施方式
具体实施方式一：本实施方式一种路邓素直链衍生物的化学名称为N-三甲基硅甲基-N-苄基-邻苯二甲酰甘氨酰-L-THC-D-缬-L-色-D-亮-L-缬-D-缬-L-缬酰胺，结构式为：
其中R和S表示氨基酸α碳的手性构型，THC为噻唑烷-4-甲酸残基。
具体实施方式二：本实施方式一种路邓素直链衍生物的制备方法是按以下步骤进行：
一、①将Boc-L-缬氨酸溶解在溶剂Ⅰ中，在缩合剂Ⅰ催化下与N-三甲基硅甲基苄胺缩合，再采用三氟乙酸脱去氨基端的Boc保护，得到中间产物Ⅰ；②将Boc-D-缬氨酸溶解在溶剂Ⅱ中，在缩合剂Ⅱ催化下与中间产物Ⅰ缩合，再采用三氟乙酸脱去氨基端的Boc保护，得到中间产物Ⅱ；③将Boc-L-缬氨酸溶解在溶剂Ⅲ中，在缩合剂Ⅲ催化下与中间产物Ⅱ缩合，再采用三氟乙酸脱去氨基端的Boc保护，得到中间产物Ⅲ；④将Boc-D-亮氨酸溶解在溶剂Ⅳ中，在缩合剂Ⅳ催化下与中间产物Ⅲ缩合，再采用三氟乙酸脱去氨基端的Boc保护，得到中间产物Ⅳ；⑤将Boc-L-色氨酸溶解在溶剂Ⅴ中，在缩合剂Ⅴ催化下与中间产物Ⅳ缩合，再采用三氟乙酸脱去氨基端的Boc保护，得到中间产物Ⅴ；⑥将Boc-D-缬氨酸溶解在溶剂Ⅵ中，在缩合剂Ⅵ催化下与中间产物Ⅴ缩合，再采用三氟乙酸脱去氨基端的Boc保护，得到中间产物Ⅵ；⑦将Boc-L-硫代脯氨酸溶解在溶剂Ⅶ中，在缩合剂Ⅶ催化下与中间产物Ⅵ缩合，再采用三氟乙酸脱去氨基端的Boc保护，得到线性肽N-末端三甲基硅甲基苄基取代的七肽；步骤①中Boc-L-缬氨酸与缩合剂Ⅰ的摩尔比为1:(1～3)，步骤①中所述Boc-L-缬氨酸与N-三甲基硅甲基苄胺的量的关系为等当量；步骤②中Boc-D-缬氨酸与缩合剂Ⅱ的摩尔比为1:(1～3)，步骤②中Boc-D-缬氨酸与中间产物Ⅰ的量的关系为等当量；步骤③中Boc-L-缬氨酸与缩合剂Ⅲ的摩尔比为1:(1～3)，步骤③中Boc-L-缬氨酸与中间产物Ⅱ的量的关系为等当量；步骤④中Boc-D-亮氨酸与缩合剂Ⅳ的摩尔比为1:(1～3)，步骤④中Boc-D-亮氨酸与中间产物Ⅲ的量的关系为等当量；步骤⑤中Boc--L-色氨酸与缩合剂Ⅴ的摩尔比为1:(1～3)，步骤⑤中Boc--L-色氨酸与中间产物Ⅳ的量的关系为等当量；步骤⑥中Boc-D-缬氨酸与缩合剂Ⅵ的摩尔比为1:(1～3)，步骤⑥中Boc-D-缬氨酸与中间产物Ⅴ的量的关系为等当量；步骤⑦中Boc-L-硫代脯氨酸与缩合剂Ⅶ的摩尔比为1:(1～3)，步骤⑦中Boc-L-硫代脯氨酸与中间产物Ⅵ的量的关系为等当量；所述溶剂Ⅰ为卤代烃或四氢呋喃，所述溶剂Ⅱ为卤代烃或四氢呋喃，所述溶剂Ⅲ为卤代烃或四氢呋喃，所述溶剂Ⅳ为卤代烃或四氢呋喃，所述溶剂Ⅴ为卤代烃或四氢呋喃，所述溶剂Ⅵ为卤代烃或四氢呋喃，所述溶剂Ⅶ为卤代烃或四氢呋喃；所述缩合剂Ⅰ为2-乙氧基-1-乙氧碳酰基-1,2-二氢喹啉或二环己基碳二亚胺，所述缩合剂Ⅱ为2-乙氧基-1-乙氧碳酰基-1,2-二氢喹啉或二环己基碳二亚胺，所述缩合剂Ⅲ为2-乙氧基-1-乙氧碳酰基-1,2-二氢喹啉或二环己基碳二亚胺，所述缩合剂Ⅳ为2-乙氧基-1-乙氧碳酰基-1,2-二氢喹啉或二环己基碳二亚胺，所述缩合剂Ⅴ为2-乙氧基-1-乙氧碳酰基-1,2-二氢喹啉或二环己基碳二亚胺，所述缩合剂Ⅵ为2-乙氧基-1-乙氧碳酰基-1,2-二氢喹啉或二环己基碳二亚胺，所述缩合剂Ⅶ为2-乙氧基-1-乙氧碳酰基-1,2-二氢喹啉或二环己基碳二亚胺；
二、将线性肽N-末端三甲基硅甲基苄基取代的七肽和缚酸剂溶于溶剂中，得到反应液，将反应液的温度从室温冷却至0℃后，在温度为-10℃～40℃和搅拌的条件下将邻苯二甲酰甘氨酰氯溶液滴入到反应液中，然后持续搅拌1h～1.5h，反应完成后采用水清洗反应液3～5次，有机层采用无水硫酸钠干燥，减压除去溶剂，得到粗产品，粗产品采用柱层析分离纯化，得到白色固体，即为N-三甲基硅甲基-N-苄基-邻苯二甲酰甘氨酰-L-THC-D-缬-L-色-D-亮-L-缬-D-缬-L-缬酰胺；所述线性肽N-末端三甲基硅甲基苄基取代的七肽与缚酸剂的摩尔比1:(4～6)；所述邻苯二甲酰甘氨酰氯溶液的浓度为(0.5～5mol/L)；所述邻苯二甲酰甘氨酰氯溶液与反应液的体积比为1:(4～10)；所述溶剂为卤代烃；所述邻苯二甲酰甘氨酰氯溶液中的溶剂为二氯甲烷或1,4-二氧六环。
具体实施方式三：本实施方式与具体实施方式二不同的是：步骤一①中将Boc-L-缬氨酸溶解在溶剂Ⅰ中，在缩合剂Ⅰ催化下与N-三甲基硅甲基苄胺缩合，再采用三氟乙酸脱去氨基端的Boc保护，得到中间产物Ⅰ的具体操作是按以下步骤进行的：将Boc-L-缬氨酸溶于溶剂Ⅰ中，向其中加入缩合剂Ⅰ和N-三甲基硅甲基苄胺，在室温条件下搅拌10h～15h后减压除去溶剂Ⅰ，加水，采用乙酸乙酯萃取，浓缩有机层，得到Boc-L-缬氨酸酰胺，将Boc-L-缬氨酸酰胺和三氟乙酸混合，在室温条件下搅拌1h～3h脱去保护，然后以硅胶柱层析纯化，得到中间产物Ⅰ。其它与具体实施方式二相同。
具体实施方式四：本实施方式与具体实施方式二或三之一不同的是：步骤一①中所述硅胶柱层析纯化中的洗脱液为乙酸乙酯与正己烷按体积比1:2的混合。其它与具体实施方式二或三相同。
具体实施方式五：本实施方式与具体实施方式二至四之一不同的是：步骤一①～⑧所述缩合的反应温度均为10～50℃。其它与具体实施方式二至四之一相同。
具体实施方式六：本实施方式与具体实施方式二至五之一不同的是：步骤一中所述卤代烃均为二氯甲烷、三氯甲烷或1,2-二氯乙烷。其它与具体实施方式二至五之一相同。
具体实施方式七：本实施方式与具体实施方式二至六之一不同的是：步骤二中所述缚酸剂为三乙胺。其它与具体实施方式二至六之一相同。
具体实施方式八：本实施方式与具体实施方式二至七之一不同的是：步骤二中所述线性肽N-末端三甲基硅甲基苄基取代的七肽与缚酸剂的摩尔比1:5。其它与具体实施方式二至七之一相同。
具体实施方式九：本实施方式与具体实施方式二至八之一不同的是：步骤二中所述硅胶柱层析纯化中的洗脱液为乙酸乙酯与正己烷按体积比1:1的混合。其它与具体实施方式二至八之一相同。
具体实施方式十：本实施方式一种路邓素直链衍生物的用途是将路邓素直链衍生物用于抑制人肝癌细胞HepG2。
通过以下实施例验证本发明的有益效果：
实施例一：①将Boc-L-缬氨酸(6.5g，0.03mol)溶于200mL二氯甲烷中，加入等当量的EEDQ(7.4g)和N-(三甲基硅基甲基)苄胺(0.58g),室温搅拌12h，减压除去二氯甲烷，加入150mL水，用50ml乙酸乙酯萃取三次,合并有机层,无水硫酸钠干燥，减压浓缩得到9.42g浅黄色油状物；将上步产物溶于50mL二氯甲烷中,加入1.3当量的(10mL)三氟乙酸,室温搅拌2h脱去保护。产物以硅胶柱层析纯化(洗脱液:V乙酸乙酯∶V正己烷＝1∶2)得7.1g浅黄色油状物L-缬氨酸酰胺，产率81％。
②将Boc-D-缬氨酸(0.024mol)溶解在100mL二氯甲烷中，加入6g EEDQ，和上步产物，室温搅拌10h，减压除去溶剂，加入100mL水，用乙酸乙酯萃取，浓缩有机层得到9.3g浅黄色油状物，再采用三氟乙酸室温搅拌2h,脱去Boc保护，以柱层析方法(同上一步)纯化产物，得到7.5g白色固体Ⅱ，产率80％。
③将Boc-L-缬氨酸(0.02mol)溶解在80mL二氯甲烷中，加入等当量EEDQ和上步产物，室温搅拌10h，减压除去溶剂，加入100mL水，用乙酸乙酯萃取，浓缩有机层得到8.7g浅黄色油状物，再采用三氟乙酸室温搅拌2h,脱去Boc保护，以柱层析方法(同上一步)纯化产物，得到6.9g白色固体Ⅲ，产率70.1％。
④将Boc-D-亮氨酸(0.015mol)溶解在二氯甲烷中，加入等当量EEDQ和上步产物，室温搅拌12h，减压除去溶剂，加入100mL水，用乙酸乙酯萃取，浓缩有机层得到6.8g浅黄色油状物，再采用三氟乙酸室温搅拌2h,脱去Boc保护，以柱层析方法(同上一步)纯化产物，得到5.5g白色固体Ⅳ，产率61.0％。
⑤将Boc-L-色氨酸0.01mol溶解在溶剂Ⅴ中，加入等当量EEDQ和上步产物，室温搅拌10h，减压除去溶剂，加入80mL水，用乙酸乙酯萃取，浓缩有机层得到7.5g浅黄色油状物，再采用三氟乙酸室温搅拌2h,脱去Boc保护，以柱层析方法(同上一步)纯化产物，得到5.2g浅黄色固体Ⅴ，产率65.9％。
⑥将Boc-D-缬氨酸0.008mol溶解50ml二氯甲烷中中，加入等当量EEDQ和上步产物，室温搅拌10h，减压除去溶剂，加入80mL水，用乙酸乙酯萃取，浓缩有机层得到6g浅黄色油状物，再采用三氟乙酸室温搅拌2h,脱去Boc保护，以柱层析方法(同上一步)纯化产物，得到4.9g白色固体Ⅵ，产率68.9％。
⑦将Boc-L-硫代脯氨酸0.006mol溶解50ml二氯甲烷中中，加入等当量EEDQ和上步产物，室温搅拌8h，减压除去溶剂，加入50mL水，用乙酸乙酯萃取，浓缩有机层得到4.6g浅黄色油状物，再采用三氟乙酸室温搅拌2h,脱去Boc保护，以柱层析方法(同上一步)纯化产物，得到3.5g N-末端三甲基硅甲基苄基取代的七肽(白色固体)，产率58.1％。
二、将步骤一得到的线性肽N-末端三甲基硅甲基苄基取代的七肽(0.0035mol)和三乙胺(0.02mol)溶于50mL干燥二氯甲烷中，冷却到0℃，在搅拌下将溶于10mL二氧六环的邻苯二甲酰甘氨酰氯滴入到反应液中(0.8g，0.0036mol)。滴毕，常温下搅拌1h，之后反应液用20ml水洗两次，有机层用无水硫酸钠干燥，减压除去溶剂，粗产品用柱层析分离纯化(洗脱液:V乙酸乙酯∶V正己烷＝1∶1)，得到3.5g白色固体5，即为N-三甲基硅甲基-N-苄基-邻苯二甲酰甘氨酰-L-THC-D-缬-L-色-D-亮-L-缬-D-缬-L-缬酰胺，产率84％。
1HNMR(CDCl3)δ:0.00～0.03(m,9H,SiMe3),0.75～1.28(m,30H,(CHCH3)10),1.35～1.39(m,2H,CHCH2CH),1.40～1.46(m,1H,CH2CH(CH3)2),1.85～2.45(m,6H,(CH(CH3)2)4andCHCH2C),2.85～3.32(m,4H,CH2SiMe3andSCH2CH),3.87～4.23(m,4H,CH2PhandSCH2N),4.25～4.84(m,6H,(NHCHCO)4andNCH2CO),4.85～5.21(m,3H,NCHCH2(CO),NCHCH2(CO)andNCHCH2CO),7.07～7.70(m,14H,ArH)；
本发明制备的路邓素开链类似物具有较好的抗肿瘤活性，其制备方法简单，易操作，有潜力开发新型抗肿瘤药物。
实施例二：化合物抗肿瘤活性实验：
选择人肝癌细胞HepG2细胞，以四唑盐比色法(MTT法)，计算药物作用HeLa细胞48小时后的细胞存活率，以此计算化合物的半数抑制浓度(IC50)。
测试分为空白对照组和线性肽实验组，将对数生长期(4×103个/mL)的人肝癌细胞HepG2细胞用胰蛋白酶消化后，用质量分数为10％的小牛血清培养基配成细胞浓度为6000个/mL的细胞悬液，接种于96孔培养板中。实验组分别给予不同浓度的样品。每个剂量重复做六个孔。给药后培养48h，每孔加入MTT溶液(100μL，0.5mg/mL)，继续在37℃培养4h，弃去上清液，加入150μL的DMSO溶解甲臜沉淀，用振荡器混匀后，在酶标仪上于490nm波长处,测定光密度(OD)值。图1为采用实施例一制备的N-三甲基硅甲基-N-苄基-邻苯二甲酰甘氨酰-L-THC-D-缬-L-色-D-亮-L-缬-D-缬-L-缬酰胺进行抗肿瘤活性实验药物浓度与肝癌细胞HepG2细胞生存率的柱状对比图。细胞存活率(％)用下面的公式计算：存活率(％)＝A490(样品)/A490(对照)×100％；在A490(样品)代表不同浓度样品处理细胞的吸光度值，A490(对照)代表用DMEM+10％胎牛血清细胞的吸光度值。化合物的IC50＝115μM结果显示目标化合物显示较好的抗肿瘤活性。

Claims (10)

1.一种路邓素直链衍生物，其特征在于一种路邓素直链衍生物的化学名称为N-三甲基硅甲基-N-苄基-邻苯二甲酰甘氨酰-L-THC-D-缬-L-色-D-亮-L-缬-D-缬-L-缬酰胺，结构式为：
其中R和S表示氨基酸α碳的手性构型，THC为噻唑烷-4-甲酸残基。
2.如权利要求1所述的一种路邓素直链衍生物的制备方法，其特征在于路邓素直链衍生物的制备方法是按以下步骤进行：
一、①将Boc-L-缬氨酸溶解在溶剂Ⅰ中，在缩合剂Ⅰ催化下与N-三甲基硅甲基苄胺缩合，再采用三氟乙酸脱去氨基端的Boc保护，得到中间产物Ⅰ；②将Boc-D-缬氨酸溶解在溶剂Ⅱ中，在缩合剂Ⅱ催化下与中间产物Ⅰ缩合，再采用三氟乙酸脱去氨基端的Boc保护，得到中间产物Ⅱ；③将Boc-L-缬氨酸溶解在溶剂Ⅲ中，在缩合剂Ⅲ催化下与中间产物Ⅱ缩合，再采用三氟乙酸脱去氨基端的Boc保护，得到中间产物Ⅲ；④将Boc-D-亮氨酸溶解在溶剂Ⅳ中，在缩合剂Ⅳ催化下与中间产物Ⅲ缩合，再采用三氟乙酸脱去氨基端的Boc保护，得到中间产物Ⅳ；⑤将Boc-L-色氨酸溶解在溶剂Ⅴ中，在缩合剂Ⅴ催化下与中间产物Ⅳ缩合，再采用三氟乙酸脱去氨基端的Boc保护，得到中间产物Ⅴ；⑥将Boc-D-缬氨酸溶解在溶剂Ⅵ中，在缩合剂Ⅵ催化下与中间产物Ⅴ缩合，再采用三氟乙酸脱去氨基端的Boc保护，得到中间产物Ⅵ；⑦将Boc-L-硫代脯氨酸溶解在溶剂Ⅶ中，在缩合剂Ⅶ催化下与中间产物Ⅵ缩合，再采用三氟乙酸脱去氨基端的Boc保护，得到线性肽N-末端三甲基硅甲基苄基取代的七肽；步骤①中Boc-L-缬氨酸与缩合剂Ⅰ的摩尔比为1:(1～3)，步骤①中所述Boc-L-缬氨酸与N-三甲基硅甲基苄胺的量的关系为等当量；步骤②中Boc-D-缬氨酸与缩合剂Ⅱ的摩尔比为1:(1～3)，步骤②中Boc-D-缬氨酸与中间产物Ⅰ的量的关系为等当量；步骤③中Boc-L-缬氨酸与缩合剂Ⅲ的摩尔比为1:(1～3)，步骤③中Boc-L-缬氨酸与中间产物Ⅱ的量的关系为等当量；步骤④中Boc-D-亮氨酸与缩合剂Ⅳ的摩尔比为1:(1～3)，步骤④中Boc-D-亮氨酸与中间产物Ⅲ的量的关系为等当量；步骤⑤中Boc--L-色氨酸与缩合剂Ⅴ的摩尔比为1:(1～3)，步骤⑤中Boc--L-色氨酸与中间产物Ⅳ的量的关系为等当量；步骤⑥中Boc-D-缬氨酸与缩合剂Ⅵ的摩尔比为1:(1～3)，步骤⑥中Boc-D-缬氨酸与中间产物Ⅴ的量的关系为等当量；步骤⑦中Boc-L-硫代脯氨酸与缩合剂Ⅶ的摩尔比为1:(1～3)，步骤⑦中Boc-L-硫代脯氨酸与中间产物Ⅵ的量的关系为等当量；所述溶剂Ⅰ为卤代烃或四氢呋喃，所述溶剂Ⅱ为卤代烃或四氢呋喃，所述溶剂Ⅲ为卤代烃或四氢呋喃，所述溶剂Ⅳ为卤代烃或四氢呋喃，所述溶剂Ⅴ为卤代烃或四氢呋喃，所述溶剂Ⅵ为卤代烃或四氢呋喃，所述溶剂Ⅶ为卤代烃或四氢呋喃；所述缩合剂Ⅰ为2-乙氧基-1-乙氧碳酰基-1,2-二氢喹啉或二环己基碳二亚胺，所述缩合剂Ⅱ为2-乙氧基-1-乙氧碳酰基-1,2-二氢喹啉或二环己基碳二亚胺，所述缩合剂Ⅲ为2-乙氧基-1-乙氧碳酰基-1,2-二氢喹啉或二环己基碳二亚胺，所述缩合剂Ⅳ为2-乙氧基-1-乙氧碳酰基-1,2-二氢喹啉或二环己基碳二亚胺，所述缩合剂Ⅴ为2-乙氧基-1-乙氧碳酰基-1,2-二氢喹啉或二环己基碳二亚胺，所述缩合剂Ⅵ为2-乙氧基-1-乙氧碳酰基-1,2-二氢喹啉或二环己基碳二亚胺，所述缩合剂Ⅶ为2-乙氧基-1-乙氧碳酰基-1,2-二氢喹啉或二环己基碳二亚胺；
二、将线性肽N-末端三甲基硅甲基苄基取代的七肽和缚酸剂溶于溶剂中，得到反应液，将反应液的温度从室温冷却至0℃后，在温度为-10℃～40℃和搅拌的条件下将邻苯二甲酰甘氨酰氯溶液滴入到反应液中，然后持续搅拌1h～1.5h，反应完成后采用水清洗反应液3～5次，有机层采用无水硫酸钠干燥，减压除去溶剂，得到粗产品，粗产品采用柱层析分离纯化，得到白色固体，即为N-三甲基硅甲基-N-苄基-邻苯二甲酰甘氨酰-L-THC-D-缬-L-色-D-亮-L-缬-D-缬-L-缬酰胺；所述线性肽N-末端三甲基硅甲基苄基取代的七肽与缚酸剂的摩尔比1:(4～6)；所述邻苯二甲酰甘氨酰氯溶液的浓度为(0.5～5mol/L)；所述邻苯二甲酰甘氨酰氯溶液与反应液的体积比为1:(4～10)；所述溶剂为卤代烃；所述邻苯二甲酰甘氨酰氯溶液中的溶剂为二氯甲烷或1,4-二氧六环。
3.根据权利要求2所述的一种路邓素直链衍生物的制备方法，其特征在于步骤一①中将Boc-L-缬氨酸溶解在溶剂Ⅰ中，在缩合剂Ⅰ催化下与N-三甲基硅甲基苄胺缩合，再采用三氟乙酸脱去氨基端的Boc保护，得到中间产物Ⅰ的具体操作是按以下步骤进行的：将Boc-L-缬氨酸溶于溶剂Ⅰ中，向其中加入缩合剂Ⅰ和N-三甲基硅甲基苄胺，在室温条件下搅拌10h～15h后减压除去溶剂Ⅰ，加水，采用乙酸乙酯萃取，浓缩有机层，得到Boc-L-缬氨酸酰胺，将Boc-L-缬氨酸酰胺和三氟乙酸混合，在室温条件下搅拌1h～3h脱去保护，然后以硅胶柱层析纯化，得到中间产物Ⅰ。
4.根据权利要求2所述的一种路邓素直链衍生物的制备方法，其特征在于步骤一①中所述硅胶柱层析纯化中的洗脱液为乙酸乙酯与正己烷按体积比1:2的混合。
5.根据权利要求2所述的一种路邓素直链衍生物的制备方法，其特征在于步骤一①～⑧所述缩合的反应温度均为10～50℃。
6.根据权利要求2所述的一种路邓素直链衍生物的制备方法，其特征在于步骤一中所述卤代烃均为二氯甲烷、三氯甲烷或1,2-二氯乙烷。
7.根据权利要求2所述的一种路邓素直链衍生物的制备方法，其特征在于步骤二中所述缚酸剂为三乙胺。
8.根据权利要求2所述的一种路邓素直链衍生物的制备方法，其特征在于步骤二中所述线性肽N-末端三甲基硅甲基苄基取代的七肽与缚酸剂的摩尔比1:5。
9.根据权利要求2所述的一种路邓素直链衍生物的制备方法，其特征在于步骤二中所述硅胶柱层析纯化中的洗脱液为乙酸乙酯与正己烷按体积比1:1的混合。
10.如权利要求1所述的一种路邓素直链衍生物的用途，其特征在于是将路邓素直链衍生物用于抑制人肝癌细胞HepG2。
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Citations (11)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0155862A1 (fr) * 1984-02-16 1985-09-25 Societe Nationale Des Poudres Et Explosifs Procédé de préparation de dérivés de l'acide carbamique
CN1163271A (zh) * 1988-04-05 1997-10-29 藤泽药品工业株式会社 肽衍生物的制备方法
CN101270154A (zh) * 2008-05-09 2008-09-24 暨南大学 一种具有抗肿瘤活性的环五肽
WO2011140393A1 (en) * 2010-05-05 2011-11-10 Prolynx Llc Controlled release from macromolecular conjugates
CN102659920A (zh) * 2012-05-14 2012-09-12 兰州大学 C端苯丙氨酸对位氨基化修饰的内吗啡肽-1类似物及其制备和应用
CN103665102A (zh) * 2013-12-31 2014-03-26 陕西东大生化科技有限责任公司 一种ghk三肽的合成方法
CN103819539A (zh) * 2013-05-22 2014-05-28 兰州大学第一医院 一种胸腺五肽的液相合成方法
CN104356197A (zh) * 2014-09-30 2015-02-18 重庆泰濠制药有限公司 一种卡非佐米中间体及其制备方法,以及一种卡非佐米的制备方法
CN104945468A (zh) * 2014-03-28 2015-09-30 苏州宜百奥生物科技有限公司 Mmaf手性异构体的制备方法及其应用
EP3072899A1 (en) * 2015-03-23 2016-09-28 Eberhard Karls Universität Tübingen Novel anti-infective compound
CN106146614A (zh) * 2015-05-14 2016-11-23 沈阳科海医药科技有限公司 一种rgd三肽的制备方法

Patent Citations (11)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0155862A1 (fr) * 1984-02-16 1985-09-25 Societe Nationale Des Poudres Et Explosifs Procédé de préparation de dérivés de l'acide carbamique
CN1163271A (zh) * 1988-04-05 1997-10-29 藤泽药品工业株式会社 肽衍生物的制备方法
CN101270154A (zh) * 2008-05-09 2008-09-24 暨南大学 一种具有抗肿瘤活性的环五肽
WO2011140393A1 (en) * 2010-05-05 2011-11-10 Prolynx Llc Controlled release from macromolecular conjugates
CN102659920A (zh) * 2012-05-14 2012-09-12 兰州大学 C端苯丙氨酸对位氨基化修饰的内吗啡肽-1类似物及其制备和应用
CN103819539A (zh) * 2013-05-22 2014-05-28 兰州大学第一医院 一种胸腺五肽的液相合成方法
CN103665102A (zh) * 2013-12-31 2014-03-26 陕西东大生化科技有限责任公司 一种ghk三肽的合成方法
CN104945468A (zh) * 2014-03-28 2015-09-30 苏州宜百奥生物科技有限公司 Mmaf手性异构体的制备方法及其应用
CN104356197A (zh) * 2014-09-30 2015-02-18 重庆泰濠制药有限公司 一种卡非佐米中间体及其制备方法,以及一种卡非佐米的制备方法
EP3072899A1 (en) * 2015-03-23 2016-09-28 Eberhard Karls Universität Tübingen Novel anti-infective compound
CN106146614A (zh) * 2015-05-14 2016-11-23 沈阳科海医药科技有限公司 一种rgd三肽的制备方法

Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
ALEXANDER ZIPPERER等: "Human commensals producing a novel antibiotic impair pathogen colonization", 《NATURE》 *
余蓉等: "《生物化学》", 31 August 2018, 中国医药科技出版社 *
林龙等: "多肽类药物体外合成方法的研究进展", 《大连医科大学学报》 *

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