CN108218968B

CN108218968B - 一种植物籽粒性状相关蛋白及其编码基因和应用

Info

Publication number: CN108218968B
Application number: CN201611195844.1A
Authority: CN
Inventors: 刘红霞; 张学勇; 赵静; 李洋
Original assignee: Institute of Crop Sciences of Chinese Academy of Agricultural Sciences
Current assignee: Institute of Crop Sciences of Chinese Academy of Agricultural Sciences
Priority date: 2016-12-21
Filing date: 2016-12-21
Publication date: 2019-07-16
Anticipated expiration: 2036-12-21
Also published as: CN108218968A

Abstract

本发明公开了一种植物籽粒性状相关蛋白及其编码基因和应用。本发明提供了TaTPP‑7A蛋白，是由序列表中序列1所示的氨基酸序列组成的蛋白质。编码TaTPP‑7A蛋白的基因也属于本发明的保护范围。本发明还保护一种培育转基因植物的方法，包括如下步骤：将TaTPP‑7A基因导入出发植物，得到转基因植物；所述转基因植物满足如下至少一种：(e1)籽粒千粒重大于所述出发植物；(e2)籽粒粒重大于所述出发植物；(e3)籽粒大于所述出发植物；(e4)籽粒粒长大于所述出发植物；(e5)籽粒粒宽大于所述出发植物；(e6)籽粒粒厚大于所述出发植物。因此，本发明所提供的蛋白质及其编码基因可以用于植物品质改良以及增加植物籽粒产量，具有广阔的应用前景。

Description

一种植物籽粒性状相关蛋白及其编码基因和应用

技术领域

本发明涉及一种植物籽粒性状相关蛋白及其编码基因和应用。

背景技术

小麦是我国和世界上重要的粮食作物之一，直接影响着人民生活水平的高低和国家的粮食安全。提高小麦单产、促其高产稳产、一直以来也是我国小麦育种家们长期追求的主要目标。随着粮食种植面积的日益减少、土地沙漠化、盐碱化、全球气候变暖以及人口增长基数的不断增大等矛盾的冲突，如何提高小麦单产，解决日益增长的口粮需求问题成为越来越突出和重要的育种任务。因此，利用分子生物学技术克隆小麦产量相关功能基因，对其功能进行深入解析，对于小麦分子标记辅助育种标记开发、提供重要参考基因资源、加速我国小麦育种进程、提高我国小麦产量等方面具有重要的科学意义和实际应用价值。

粒重是产量的三要素之一，决定粒重的关键因素包括粒型和籽粒的灌浆速率。在生产和育种实践中，千粒重常被用作为衡量籽粒大小的指标，主要由粒型性状指标(如粒长、粒宽和粒厚等影响要素)构成并与产量呈显著正相关关系。

发明内容

本发明的目的是提供一种植物籽粒性状相关蛋白及其编码基因和应用。

本发明提供了一种蛋白质，命名为TaTPP-7A蛋白，获自小麦，是如下(a1)或(a2)：

(a1)由序列表中序列1所示的氨基酸序列组成的蛋白质；

(a2)将(a1)经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且与植物籽粒性状相关的由(a1)衍生的蛋白质。

为了使(a2)中的蛋白质便于纯化和检测，可在由序列表中序列1所示的氨基酸序列组成的蛋白质的氨基末端或羧基末端连接上如表1所示的标签。

表1标签的序列

标签	残基	序列
			Poly-Arg	5-6(通常为5个)	RRRRR
Poly-His	2-10(通常为6个)	HHHHHH
			FLAG	8	DYKDDDDK
Strep-tag II	8	WSHPQFEK
			c-myc	10	EQKLISEEDL

上述(a2)中的蛋白质可人工合成，也可先合成其编码基因，再进行生物表达得到。上述(a2)中的蛋白质的编码基因可通过将序列表中序列2或序列3所示的DNA序列中缺失一个或几个氨基酸残基的密码子，和/或进行一个或几个碱基对的错义突变，和/或在其5′端和/或3′端连上表1所示的标签的编码序列得到。

编码TaTPP-7A蛋白的基因(TaTPP-7A基因)也属于本发明的保护范围。

TaTPP-7A基因为如下(b1)或(b2)或(b3)或(b4)或(b5)：

(b1)编码区如序列表中序列2所示的DNA分子；

(b2)序列表中序列3自5’末端第23-2115位核苷酸所示的DNA分子；

(b3)序列表中序列3所示的DNA分子；

(b4)在严格条件下与以上(b1)至(b3)中任一所述DNA分子杂交且编码TaTPP-7A蛋白的DNA分子；

(b5)与以上(b1)至(b3)中任一所述DNA分子具有90％以上同源性且编码TaTPP-7A蛋白的DNA分子。

上述严格条件可为用0.1×SSPE(或0.1×SSC)，0.1％SDS的溶液，在DNA或者RNA杂交实验中65℃下杂交并洗膜。

含有TaTPP-7A基因的重组表达载体、表达盒、转基因细胞系、转基因植物组织或重组菌均属于本发明的保护范围。

可用现有的植物表达载体构建含有TaTPP-7A基因的重组表达载体。所述植物表达载体包括双元农杆菌载体和可用于植物微弹轰击的载体等。使用TaTPP-7A基因构建重组表达载体时，可在其转录起始核苷酸前加上任何一种增强型、组成型、组织特异型或诱导型启动子，它们可单独使用或与其它的植物启动子结合使用；此外，使用TaTPP-7A基因构建重组表达载体时，还可使用增强子，包括翻译增强子或转录增强子，这些增强子区域可以是ATG起始密码子或邻接区域起始密码子等，但必需与编码序列的阅读框相同，以保证整个序列的正确翻译。所述翻译控制信号和起始密码子的来源是广泛的，可以是天然的，也可以是合成的。翻译起始区域可以来自转录起始区域或结构基因。为了便于对转基因植物细胞或植物进行鉴定及筛选，可对所用植物表达载体进行加工，如加入在植物中表达可产生颜色变化的酶或发光化合物的基因、具有抗性的抗生素标记物或是抗化学试剂标记基因等。从转基因植物的安全性考虑，可不加任何选择性标记基因，直接以表型筛选转化植株。所述重组表达载体的出发载体可为重组质粒pWMB110-TaTPP-7A。重组质粒pWMB110-TaTPP-7A是在质粒pWMB110的多克隆位点(例如Bam HⅠ和Eco RⅠ酶切位点之间)插入序列表的序列2所示DNA分子得到的重组质粒。质粒pWMB110的构建方法如下：(1)取pCAMBIAL3301载体，用限制性内切酶EcoRⅠ和PmlⅠ进行双酶切，回收载体骨架(约8.5kb)；(2)取pWMB003载体，用限制性内切酶HindⅢ和EocRⅠ进行双酶切，回收约2.2kb的Ubi-MCS-Nos片段；(3)将步骤(1)得到的载体骨架和步骤(2)得到的Ubi-MCS-Nos片段连接，得到质粒pWMB110。

本发明还保护TaTPP-7A蛋白的应用，为如下(c1)至(c12)中的至少一种：

(c1)调控植物籽粒大小；

(c2)使植物籽粒变大；

(c3)调控植物籽粒千粒重；

(c4)使植物籽粒千粒重增加；

(c5)调控植物籽粒粒重；

(c6)使植物籽粒粒重增加；

(c7)调控植物籽粒粒长；

(c8)使植物籽粒粒长增加；

(c9)调控植物籽粒粒宽；

(c10)使植物籽粒粒宽增加；

(c11)调控植物籽粒粒厚；

(c12)使植物籽粒粒厚增加。

所述植物可为单子叶植物或双子叶植物。所述单子叶植物具体可为小麦，例如小麦Fielder。

本发明还保护TaTPP-7A基因在培育转基因植物中的应用；所述转基因植物为如下(d1)至(d6)中的至少一种：

(d1)籽粒千粒重增加的植物；

(d2)籽粒粒重增加的植物；

(d3)籽粒变大的植物；

(d4)籽粒变长的植物；

(d5)籽粒变宽的植物；

(d6)籽粒变厚的植物。

本发明还保护一种培育转基因植物的方法，包括如下步骤：将TaTPP-7A基因导入出发植物，得到转基因植物；所述转基因植物满足如下(e1)至(e6)中的至少一种：

(e1)籽粒千粒重大于所述出发植物；

(e2)籽粒粒重大于所述出发植物；

(e3)籽粒大于所述出发植物；

(e4)籽粒粒长大于所述出发植物；

(e5)籽粒粒宽大于所述出发植物；

(e6)籽粒粒厚大于所述出发植物。

所述TaTPP-7A基因具体可通过以上任一所述重组表达载体导入所述出发植物。携带有TaTPP-7A基因的重组表达载体可通过Ti质粒、Ri质粒、植物病毒载体、直接DNA转化、显微注射、电导、农杆菌介导等常规生物学方法转化到植物中。

所述出发植物可为单子叶植物或双子叶植物。所述单子叶植物具体可为小麦，例如小麦Fielder。

本发明还保护一种植物育种方法，包括如下步骤：增加植物中TaTPP-7A蛋白的含量或活性，从而促使植物满足如下(f1)至(f6)中的至少一种：

(f1)籽粒千粒重增加；

(f2)籽粒粒重增加；

(f3)籽粒变大；

(f4)籽粒变长；

(f5)籽粒变宽；

(f6)籽粒变厚。

本发明还保护TaTPP-7A蛋白或TaTPP-7A基因或以上任一所述方法在植物育种中的应用。所述植物可为单子叶植物或双子叶植物。所述单子叶植物具体可为小麦，例如小麦Fielder。

本发明受到科技部十三五项目“主要农作物产量性状形成的分子基础(项目批号：2016YFD0100402；任务负责人：刘红霞)”的支持。本发明受到国家自然基金“小麦5DS籽粒产量相关重要候选基因的功能分析及其调控机制研究(项目批号：31471492；项目负责人：刘红霞)”的支持。

因此，本发明所提供的蛋白质及其编码基因可以用于植物品质改良以及增加植物籽粒产量，具有广阔的应用前景。

附图说明

图1为部分株系的部分籽粒照片。

图2为各株系的籽粒的平均粒长和平均千粒重。

具体实施方式

以下的实施例便于更好地理解本发明，但并不限定本发明。下述实施例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法。下述实施例中所用的试验材料，如无特殊说明，均为自常规生化试剂商店购买得到的。以下实施例中的定量试验，均设置三次重复实验，结果取平均值。

pCambia3301载体：优宝生物，产品编号VT1386。

pWMB003载体：余茂云、殷桂香、张平治、叶兴国，三种适用于作物遗传转化的载体构建与验证，2014学术年会：转基因作物研究及安全管理，58-67。

根癌农杆菌GV3101：参考文献：Yadav S,Sharma P,Srivastava A,Desai P,Shrivastava N.Strain specific Agrobacterium-mediated genetic transformationof Bacopa monnieri.Journal of Genetic Engineering and Biotechnology.2014,12:89–94.

小麦Fielder：参考文献：Richardson T,Thistleton J,Higgins T J,Howitt C,Ayliffe M.Efficient Agrobacterium transformation of elite wheat germplasmwithout selection.Plant Cell Tiss Organ Cult.2014,DOI 10.1007/s11240-014-0564-7.

实施例1、TaTPP-7A蛋白及其编码基因的获得

根据实验室前期在小麦自然群体(329份小麦材料)中的粒重关联分析、SSR分子标记在作图群体(小麦粒重F2分离群体)中的精细定位分析、BAC文库筛选以及比较基因组学方法获得的候选基因的基因组序列信息，设计引物，分别从二倍体祖先种A基因组小麦(乌拉尔图小麦)和普通六倍体小麦(中国春小麦)中扩增目的基因。

提取乌拉尔图小麦的基因组DNA,采用TaTPP-F1和TaTPP-R1组成的引物对进行PCR扩增，PCR扩增产物进行TA克隆测序，取15个阳性克隆进行测序。

提取中国春小麦的基因组DNA，先采用TaTPP-F1和TaTPP-R1组成的引物对进行第一轮PCR扩增，然后将第一轮PCR扩增产物作为模板，再采用TaTPP1cDNA-F1和TaTPP1cDNA-R1组成的引物对进行第二轮PCR扩增，PCR扩增产物进行TA克隆测序，取15个阳性克隆进行测序。

测序结果表明，乌拉尔图小麦相应的PCR扩增产物如序列表的序列3所示，中国春小麦相应的第二轮PCR扩增产物如序列表的序列3自5’末端第23-2115位核苷酸所示。

将序列表的序列1所示的蛋白质命名为TaTPP-7A蛋白。将编码TaTPP-7A蛋白的基因命名为TaTPP-7A基因，其基因组序列如序列表的序列3所示，其cDNA序列如序列表的序列2所示。

通过比对分析，设计特异的亚基因组定位引物(QST-TPP-7A-F和QST-TPP-7A-R)，并利用小麦第7同源群缺四体材料对上述序列再次进行染色体定位分析，将TaTPP-7A基因定位于小麦7A染色体,进一步将TaTPP-7A基因精细定位于小麦7As上。

TaTPP-F1：5’-CGTGTGGTTGTTTGCGTG-3’；

TaTPP-R1：5’-CTAGATATAGGCGAGGGTTATTAC-3’。

TaTPP1cDNA-F1：5’-ATGGCGAACCAGGACGT-3’；

TaTPP1cDNA-R1：5’-CTACACTCTTGCGCGCAT-3’。

QST-TPP-7A-F：5'-CCATGCCTTGTCCTTGATGT-3'；

QST-TPP-7A-R：5'-AAACCAAGAAAAGCGAGAGATC-3'。

实施例2、转基因植物的获得和鉴定

一、重组质粒的构建

1、合成序列表的序列2所示的双链DNA分子。

2、以步骤1合成的DNA分子为模板，采用TPP-TaA-F和TPP-TaA-R组成的引物对进行PCR扩增。

TPP-TaA-F：5'-CGGGATCCATGGCGAACCAGGACGT-3'

TPP-TaA-R：5'-CGGAATTCCTACACTCTTGCGCGCAT-3'

3、取步骤2得到的PCR扩增产物，用限制性内切酶Bam HⅠ和Eco RⅠ进行双酶切，回收酶切产物。

4、构建重组质粒pWMB110

(1)取pCambia3301载体，用限制性内切酶EcoRⅠ和PmlⅠ进行双酶切，回收载体骨架(约8.5kb)。

(2)取pWMB003载体，用限制性内切酶HindⅢ和EocRⅠ进行双酶切，回收约2.2kb的Ubi-MCS-Nos片段。

(3)采用In-Fusion HD Cloning Kit(Takara公司产品)将步骤(1)得到的载体骨架和步骤(2)得到的Ubi-MCS-Nos片段连接，得到重组质粒pWMB110。

5、取重组质粒pWMB110，用限制性内切酶Bam HⅠ和Eco RⅠ进行双酶切，回收约10.6kb的载体骨架。

6、将步骤3的酶切产物和步骤5得到的载体骨架连接，得到重组质粒pWMB110-TaTPP-7A。根据测序结果，对重组质粒pWMB110-TaTPP-7A进行结构描述如下：Bam HⅠ和EcoRⅠ酶切位点之间的小片段如序列表的序列2所示。

二、转基因植物的获得

1、将重组质粒pWMB110-TaTPP-7A导入根癌农杆菌GV3101，得到重组农杆菌。

2、取步骤1得到的重组农杆菌，对小麦Fielder的幼胚愈伤组织进行遗传转化，然后培养，获得T₀再生植株。T₀再生植株自交得到T₁代植株。T₁代植株自交得到T₂代植株。

对T₀再生植株、T₁代植株和T₂代植株进行Bar基因鉴定和靶基因鉴定。具体步骤如下：先取植株的叶片，采用PAT/bar转基因试剂盒并按说明书操作鉴定Bar基因；Bar基因鉴定呈阳性的植株再进行靶基因鉴定(提取叶片的基因组DNA，采用TPP-TaA-F和TPP-TaA-R组成的引物对进行PCR鉴定，如果得到1.1kb的扩增产物，PCR鉴定为阳性)。对于某一T₀和T₁代植株检测均有阳性，植株分离比符合3:1，且T₂代植株PCR鉴定阳性并且后代性状不再发生分离，该T₂及其自交后代为一个纯合的转基因株系。

随机取三个纯合的转基因株系(TaTPP-5-3株系、TaTPP-10-4株系和TaTPP-13-7株系)进行性状鉴定。

三、转空载体植株的获得

用重组质粒pWMB110代替重组质粒pWMB110-TaTPP-7A，按照步骤二进行操作，得到转空载体株系。

四、性状鉴定

试验对象为：TaTPP-5-3株系的T₂代植株、TaTPP-10-4株系的T₂代植株、TaTPP-13-7株系的T₂代植株、转空载体株系的T₂代植株以及小麦Fielder。

每个株系50株植株。

将各个试验对象进行平行培养(即种植于同一地块，在完全相同的条件下进行培养)，收获期收获籽粒。经测量，得到每个株系的籽粒的平均粒长、平均粒宽、平均粒厚和平均千粒重。

部分株系的部分籽粒照片见图1。TaTPP-10-4株系的籽粒的表型、TaTPP-13-7株系的籽粒的表型与图1中TaTPP-5-3株系的籽粒的表型没有显著差异。转空载体株系的籽粒的表型与图1中小麦Fielder的籽粒的表型没有显著差异。

各株系的籽粒的平均粒长、平均粒宽、平均粒厚和平均千粒重见表2。部分结果见图2。各个转基因株系的籽粒的粒长、粒宽和粒厚均高于小麦Fielder，差异显著。转空载体株系的籽粒的粒长、粒宽和粒厚与小麦Fielder基本一致。三个转基因株系的平均千粒重分别为41.6g、38.53g和40.1g，与小麦Fielder(26.5g)相比，千粒重大幅度提高，差异达极显著水平(P<0.001)。结果表明，TaTPP-7A蛋白对小麦产量存在正调控作用，有提高千粒重和增长粒长的功效。

表2

	TaTPP-5-3	TaTPP-10-4	TaTPP-13-7	Fielder	转空载体株系
						平均粒长(cm)	6.53	6.568	6.625	5.863	5.658
平均粒宽(cm)	3.40	3.33	3.495	2.884	2.879
						平均粒厚(cm)	3.10	3.06	3.0575	2.483	2.469
平均千粒重(g)	41.6	38.53	40.1	26.5	26.3

SEQUENCE LISTING

<110> 中国农业科学院作物科学研究所

<120> 一种植物籽粒性状相关蛋白及其编码基因和应用

<130> GNCYX162120

<160> 3

<170> PatentIn version 3.5

<210> 1

<211> 361

<212> PRT

<213> 小麦

<400> 1

Met Ala Asn Gln Asp Val Val Leu Arg Pro Asp Met Gly Gly Ile Ala

1 5 10 15

Ala Ala Ala Ala Met Pro Gly Ser Ser Ser Arg Ala Ile Phe Ala Cys

20 25 30

Arg Gly Ala Ala Ser Ser Ser Leu Arg Arg Arg Ser Ala Val Asp Asp

35 40 45

Glu Phe Arg Ala Gly Ser Pro Cys Ala Thr Ser Trp Val Val Gln Ala

50 55 60

Met Arg Ala Ser Ser Pro Ala Arg Ser Ala Ala Val Asp Glu Tyr Ala

65 70 75 80

Ala Trp Thr Arg Lys His Pro Ser Ala Leu Ala Ser Phe Glu Gln Ile

85 90 95

Ala Ala Ala Ala Lys Gly Lys Gln Val Val Val Phe Leu Asp Tyr Asp

100 105 110

Gly Thr Leu Ser Pro Ile Val Ala Asp Pro Asp Thr Ala Val Ile Ser

115 120 125

Gly Glu Met Arg Glu Ala Val Arg Gly Val Ala Lys His Phe Pro Ala

130 135 140

Ala Ile Val Thr Gly Arg Cys Val Glu Lys Val Cys Ser Phe Val Gly

145 150 155 160

Leu Ser Glu Leu Tyr Tyr Ala Gly Ser His Gly Met Asp Ile Lys Gly

165 170 175

Pro Gly Ser Asn Ala Glu Glu Val Leu Leu Gln Pro Ala Arg Glu Phe

180 185 190

Leu Pro Val Ile Ala Glu Val Tyr Glu Ala Leu Val Glu Lys Thr Lys

195 200 205

Ser Thr Pro Gly Ala Arg Val Glu Asn Asn Lys Phe Cys Leu Ser Val

210 215 220

His Phe Arg Cys Val Asp Glu Lys Arg Trp Ser Pro Leu Ala Glu Gln

225 230 235 240

Ala Lys Glu Val Leu Arg Asp Tyr Pro Asp Leu Ser Leu Asn Glu Gly

245 250 255

Arg Lys Val Leu Glu Ile Arg Pro Ser Ile Met Trp Asp Lys Gly Lys

260 265 270

Ala Val Glu Phe Leu Leu Gln Ser Leu Gly Phe Asp Gly Arg Ser Asp

275 280 285

Val Leu Pro Leu Tyr Leu Gly Asp Asp Arg Thr Asp Glu Asp Ala Phe

290 295 300

Lys Met Leu Arg Lys Arg Gly His Gly Leu Gly Ile Leu Val Ser Lys

305 310 315 320

Cys Pro Arg Glu Thr Asp Ala Ser Tyr Ser Leu Gln Asp Pro Thr Glu

325 330 335

Val Met Glu Phe Leu His Arg Leu Val Gln Trp Arg Arg Arg Arg Ser

340 345 350

Ser Ser Ser Ala Met Arg Ala Arg Val

355 360

<210> 2

<211> 1086

<212> DNA

<213> 小麦

<400> 2

atggcgaacc aggacgtggt gctccgcccg gacatgggcg gcatagcggc ggccgcggcc 60

atgccgggct cctccagccg cgcgatcttc gcgtgccgcg gcgccgcgtc ctcctccctg 120

cggcgccgct ccgccgtcga cgacgagttc cgcgccgggt caccctgcgc cacaagctgg 180

gtcgtccagg ccatgcgggc ttcttcgccg gcccgctccg cagccgtcga cgagtacgcc 240

gcgtggacga ggaagcaccc gtcggccctt gctagcttcg agcagatcgc ggcggccgcc 300

aaggggaagc aggtggtcgt gttcctggac tacgacggca cgctctcgcc catcgtcgcc 360

gaccccgaca cggcggtcat cagcggagag atgcgggagg cagtgcgcgg cgttgcgaag 420

cacttcccgg cggcgatcgt caccggccgg tgcgtggaga aggtgtgcag cttcgtaggc 480

ctctcggagc tctactacgc gggcagccac ggcatggaca tcaaaggccc aggctctaac 540

gcggaggagg tgctcctgca acctgctcgc gagttcctcc cggtcatcgc cgaggtctac 600

gaggctctgg tggagaagac caagagcacg ccgggggcca gggtggaaaa caacaagttc 660

tgcctctccg tgcacttccg gtgcgtggat gaaaagagat ggagtccatt ggccgagcaa 720

gccaaggagg tgctccggga ctaccccgat ctcagcctca acgaaggcag aaaggtcctg 780

gagatccggc cttccatcat gtgggacaag ggcaaggccg tggagttctt gctccaatcc 840

ctgggattcg acggacgcag cgacgtcctg ccgctgtacc tcggggacga ccggactgac 900

gaggatgctt tcaagatgct gagaaagaga ggtcatggcc tcggcatcct tgtctccaag 960

tgccctaggg agaccgacgc ctcctactct ctccaggacc ccactgaggt catggagttc 1020

cttcaccgct tggtgcagtg gaggcgccgg cgttcgtcat cgtcggcgat gcgcgcaaga 1080

gtgtag 1086

<210> 3

<211> 2254

<212> DNA

<213> 小麦

<400> 3

cgtgtggttg tttgcgtgcg ccatggcgaa ccaggacgtg gtgctccgcc cggacatggg 60

cggcatagcg gcggccgcgg ccatgccggg ctcctccagc cgcgcgatct tcgcgtgccg 120

cggcgccgcg tcctcctccc tgcggcgccg ctccgccgtc gacgacgagt tccgcgccgg 180

gtcaccctgc gccacaagct gggtcgtcca ggccatgcgg gcttcttcgc cggcccgctc 240

cgcagccgtc gacgagtacg ccgcgtggac ggtgagtttg gcggctggtt tggtgaggcg 300

cgcgtgccca cgcattgctg tgagagcgcg ccggccgggc tgttttccgt ccattctgat 360

gattgatctg cgtttctttt ttccttggtt ggcgcgcgca gaggaagcac ccgtcggccc 420

ttgctagctt cgagcagatc gcggcggccg ccaaggggaa gcaggtggtc gtgttcctgg 480

actacgacgg cacgctctcg cccatcgtcg ccgaccccga cacggcggtc atcagcggag 540

aggtaagata agagaccgcg ataaccagcc tggctagcta cttcaagcaa cgctcacatc 600

gccgaccatg ccttgtcctt gatgttctag atgcgggagg cagtgcgcgg cgttgcgaag 660

cacttcccgg cggcgatcgt caccggccgg tgcgtggaga aggtgtgcag cttcgtaggc 720

ctctcggagc tctactacgc gggcagccac ggcatggaca tcaaaggccc aggctctaac 780

gtacgccatc tctctcaagc atctctccgt cgcgcaagaa tctaactggc catgcatggc 840

ccatccctct ccaatcattc gtgcctgatt ccatcaatta ttcctcgccc tatttgcagg 900

cggaggaggt gctcctgcaa cctgctcgcg agttcctccc ggtcatcgcc gaggtacacg 960

acttttgtta gttagttgag ccacgaggaa cttaccaacg gcgcatgtac tgatctctcg 1020

cttttcttgg ttttattttg gtttgggtgc caggtctacg aggctctggt ggagaagacc 1080

aagagcacgc cgggggccag ggtggaaaac aacaagttct gcctctccgt gcacttccgg 1140

tgcgtggatg aaaaggtaac cagagagctc accaatcaaa ttaatcagca acaatctagc 1200

taagtcaaac aagaaggttc taagttaatg agagagatcc tcatcgatct caactgctcc 1260

gatcccctct gcagagatgg agtccattgg ccgagcaagc caaggaggtg ctccgggact 1320

accccgatct cagcctcaac gaaggcagaa aggttggttg attggccatg gatcgatcat 1380

ggagttaatt actagcagcg cttactaaat catgttattt aacatttgct cactgagccc 1440

gtgaatattg aatctactgg gcgtaggtcc tggagatccg gccttccatc atgtgggaca 1500

agggcaaggc cgtggagttc ttgctccaat ccctgggtag gtgcccctgc caccctgccc 1560

gctgcgtcgt cttcgtcctc gtcggataaa atgacgggtt gcatataaaa tctgctgctg 1620

tgctgtctct aggattcgac ggacgcagcg acgtcctgcc gctgtacctc ggggacgacc 1680

ggactgacga ggatgctttc aaggtgcacg gattaaacta acacacgtcg cgtccaactg 1740

atttcatttg tagttttgta catatatatg catgctagct acgaacctag tgatttcatt 1800

tgttttggct gcttctttat cttctgattt tgttgatgtc aactagatgc tgagaaagag 1860

aggtcatggc ctcggcatcc ttgtctccaa gtgccctagg gagaccgacg cctcctactc 1920

tctccaggac cccactgagg tgtatataca tacatatatc atgacgcaga tccctgctaa 1980

gtctagtcat cagtgattgt agcttacata gtattaattt ctccttgttt tcgtcaggtc 2040

atggagttcc ttcaccgctt ggtgcagtgg aggcgccggc gttcgtcatc gtcggcgatg 2100

cgcgcaagag tgtagcacag tcacagactg ccacatcagc ggctgctcct ggcactgatt 2160

tatcaagaag cttcagcatg attaattaag tagtttgtta gctaatttgg ttatatcata 2220

ttccatgcat gtaataaccc tcgcctatat ctag 2254

Claims

1.一种蛋白质，是由序列表中序列1所示的氨基酸序列组成的蛋白质。

2.编码权利要求1所述蛋白质的基因。

3.如权利要求2所述的基因，其特征在于：所述基因为如下(b1)或(b2)或(b3)：

(b1)编码区如序列表中序列2所示的DNA分子；

(b2)序列表中序列3自5’末端第23-2115位核苷酸所示的DNA分子；

(b3)序列表中序列3所示的DNA分子。

4.含有权利要求2或3所述基因的重组表达载体、表达盒或重组菌。

5.权利要求1所述蛋白质的应用，为如下(c1)至(c12)中的至少一种：

(c1)调控植物籽粒大小；

(c2)使植物籽粒变大；

(c3)调控植物籽粒千粒重；

(c4)使植物籽粒千粒重增加；

(c5)调控植物籽粒粒重；

(c6)使植物籽粒粒重增加；

(c7)调控植物籽粒粒长；

(c8)使植物籽粒粒长增加；

(c9)调控植物籽粒粒宽；

(c10)使植物籽粒粒宽增加；

(c11)调控植物籽粒粒厚；

(c12)使植物籽粒粒厚增加。

6.权利要求2或3所述基因在培育转基因植物中的应用；所述转基因植物为如下(d1)至(d6)中的至少一种：

(d1)籽粒千粒重增加的植物；

(d2)籽粒粒重增加的植物；

(d3)籽粒变大的植物；

(d4)籽粒变长的植物；

(d5)籽粒变宽的植物；

(d6)籽粒变厚的植物。

7.一种培育转基因植物的方法，包括如下步骤：将权利要求2或3所述基因导入出发植物，得到转基因植物；所述转基因植物满足如下(e1)至(e6)中的至少一种：

(e1)籽粒千粒重大于所述出发植物；

(e2)籽粒粒重大于所述出发植物；

(e3)籽粒大于所述出发植物；

(e4)籽粒粒长大于所述出发植物；

(e5)籽粒粒宽大于所述出发植物；

(e6)籽粒粒厚大于所述出发植物。

8.一种植物育种方法，包括如下步骤：增加植物中权利要求1所述蛋白质的含量或活性，从而促使植物满足如下(f1)至(f6)中的至少一种：

(f1)籽粒千粒重增加；

(f2)籽粒粒重增加；

(f3)籽粒变大；

(f4)籽粒变长；

(f5)籽粒变宽；

(f6)籽粒变厚。

9.权利要求1所述蛋白质，或，权利要求2或3所述基因，或，权利要求7所述方法，在植物育种中的应用。