CN107661416A - 一种预防和治疗畜禽呼吸道疾病的中药提取物复方制剂 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种预防和治疗畜禽呼吸道疾病的中药提取物复方制剂，由下述重量百分比的原料制成：金银花提取物10～15%、黄芩提取物3～7%、连翘提取物23～27%、贯叶连翘提取物10～15%、板蓝根提取物10～15%、大青叶提取物10～15%、桔梗提取物1～6%、薄荷提取物1～6%、柴胡提取物5～10%、甘草提取物1～5%，上述原料的质量百分比之和为100%。本发明的预防和治疗畜禽呼吸道疾病的中药提取物复方制剂，能减少化学抗菌类药物所造成的安全隐患，疗效确实，能有效缓解呼吸道症状，消除呼吸系统组织损伤，适用于由病毒和细菌等引起的畜禽呼吸道感染。

Description

一种预防和治疗畜禽呼吸道疾病的中药提取物复方制剂

技术领域

本发明属于医药技术领域，涉及一种预防和治疗畜禽呼吸道疾病的药物，具体涉及一种预防和治疗畜禽呼吸道疾病的中药提取物复方制剂。

背景技术

畜禽呼吸道系统疾病主要是引起喷嚏、咳嗽和呼噜等以呼吸道症状为主的一系列疾病的总称，多发于秋冬两季，细菌和病毒是引起该类疾病的主要病原体，导致畜禽生产性能降低、饲料利用率和日增重下降，甚至造成畜禽的死亡，严重影响我国养殖业的发展，对养殖业的经济造成巨大的损失。目前尚无特效药可有效的防治畜禽呼吸道感染。虽然国内外以疫苗为主对该类疾病进行免疫预防，但是由于病原体变异株的出现和疫苗免疫不当或失败所引起的问题，往往使疫苗免疫达不到人们所期望的效果。

在疫苗对畜禽呼吸道疾病免疫效果不理想的情况下，抗生素和化学药物在预防和治疗该类疾病中的应用越来越广泛，大量的使用抗生素和化学药品极易产生耐药性问题。而且随着生态养殖和绿色食品等概念的提出，我国规定在饲料和食品中严禁使用兽医临床中抗生素类药物和化学类药物。因此，急需开发出无残留、毒性小和无耐药性的抗生素代替品。而中药的抗病毒和抗菌的作用效果好，毒副作用小，不但能提高机体免疫力，还具有促进生长，提高生产性能等优点使人们看到了希望。尤其是近年来，中药在兽医临床中用来治疗和预防疾病的发生越来越受关注。因此，研制开发中药制剂用于预防和治疗畜禽呼吸道疾病具有重要意义。

发明内容

针对上述现有技术中存在的问题与缺陷，本发明的目的在于提供一种预防和治疗畜禽呼吸道疾病的中药制剂，该中药制剂具有疏散风热，清肺平喘，清热解毒，利咽消肿的功效，主治由病毒或细菌单一感染或混合感染所导致的畜禽呼吸道疾病。

实现上述发明目的所采用技术方案是一种预防和治疗畜禽呼吸道疾病的中药提取物复方制剂，由下述重量百分比的原料制成：金银花提取物10～15％、黄芩提取物3～7％、连翘提取物23～27％、贯叶连翘提取物10～15％、板蓝根提取物10～15％、大青叶提取物10～15％、桔梗提取物1～6％、薄荷提取物1～ 6％、柴胡提取物5～10％、甘草提取物1～5％，上述原料的质量百分比之和为 100％。

本发明所述的预防和治疗畜禽呼吸道疾病的中药提取物复方制剂的优选配方由下述重量百分比的原料制成：金银花提取物11～14％、黄芩提取物4～ 6％、连翘提取物24～26％、贯叶连翘提取物11～14％、板蓝根提取物11～14％、大青叶提取物11～14％、桔梗提取物2～5％、薄荷提取物2～5％、柴胡提取物 7～9％、甘草提取物2～4％，上述原料的质量百分比之和为100％。

本发明所述的预防和治疗畜禽呼吸道疾病的中药提取物复方制剂的最佳配方由下列质量百分比的原料制成：金银花提取物13％、黄芩提取物5％、连翘提取物25％、贯叶连翘提取物13％、板蓝根提取物13％、大青叶提取物13％、桔梗提取物4％、薄荷提取物3％、柴胡提取物8％、甘草提取物3％。

本发明所述的预防和治疗畜禽呼吸道疾病的中药制剂的制作方法：取配方中的中药提取物，按照配方的比例混匀制成散粉剂；也可在散粉剂中加入适量比例的辅料糊精，混匀，在制粒机中制成颗粒；也可将散粉剂配制成每毫升含1克生药的溶液，加入适量的辅料苯甲酸钠，搅匀，静置，灭菌，制成中药提取物复方制剂口服液。

本发明所述的用于治疗畜禽呼吸道疾病的中药提取物复方制剂，是基于中医药理论，参照现代中药现代化研究成果，按照中医药配伍原则制成。本发明具有疏散风热，清肺平喘，清热解毒，利咽消肿的功效，主治由病毒或细菌单一感染或混合感染所导致的畜禽呼吸道疾病。

本发明的处方中金银花、连翘为主药，二药相须为用，清热解毒，疏散风热，辛凉解表，协同增效；其中所含的绿原酸类、甙类、黄酮类和挥发油成分具有抗多种病原微生物作用。板蓝根、大青叶、黄芩和贯叶连翘为辅药，具有清热解毒，透热外出等功效，其中板蓝根和大青叶中主要成分靛蓝、靛玉红等具有抗菌、抗内毒素和一定的提高机体免疫力作用，主治温毒发斑和咽喉肿痛；黄芩清热泻火，用于温病引起的肺热咳嗽；贯叶连翘中含有金丝桃素，具有抗流感病毒作用。薄荷、柴胡为佐药，薄荷宣散风热、清头目，主治温病引起的头痛和目赤；柴胡具有和解表里、疏肝和升阳的功效。甘草润肺止咳；桔梗具有宣肺祛痰和排脓消肿，载药入肺经的功效，共为使药。诸药合用，具有疏散风热，清热解毒，清肺平喘，利咽消肿的功效。

本发明制备的预防和治疗畜禽呼吸道疾病的中药提取物复方制剂，能减少化学抗菌类药物所造成的安全隐患，疗效确实，能有效缓解呼吸道症状，消除呼吸系统组织损伤，适用于由病毒和细菌等引起的畜禽呼吸道感染。

特别说明：文中出现的中药提取物复方制剂，均为本发明的治疗畜禽呼吸道疾病的药物。

经药理学试验和动物试验研究证明，该中药提取物复方制剂具有抗病毒、抗菌和提高机体免疫力的功效，对病毒和细菌引起的畜禽呼吸道感染有较好的预防和治疗作用。所建立的薄层层析和高效液相色谱检测方法能够对中药提取物复方制剂的质量进行检测。

附图说明

图1是黄芩薄层色谱图；

图2是连翘薄层色谱图；

图3是黄芩苷对照品的溶液HPLC测定图

图4是本发明中药提取物复方制剂中黄芩提取物的HPLC测定图；

图5是阴性对照品的溶液HPLC测定图。

具体实施方式

以下通过实施例来进一步阐述本发明中药提取物复方制剂。以下实施例主要是用于进一步说明本发明，而不是限制本发明的范围。

为了更好地说明本发明的实质性、有效性和安全性，主要进行了以下药效学试验。

按下述配比称取中药提取物：金银花提取物15g、黄芩提取物5g、连翘提取物23g、贯叶连翘提取物10g、板蓝根提取物10g、大青叶提取物15g、桔梗提取物6g、薄荷提取物3g、柴胡提取物10g、甘草提取物3g。上述药物混合均匀，制成散粉剂，总量100g。

制法：取配方中的中药提取物，充分混匀制成散粉剂；也可在散粉剂中加入适量比例的辅料糊精，混匀，在制粒机中制成颗粒；也可将散粉剂配制成每毫升含1克生药的溶液，加入适量的辅料苯甲酸钠，搅匀，静置，灭菌，制成中药提取物复方制剂口服液。

1.中药提取物复方制剂对鸡新城疫病毒增殖的抑制作用

将80枚9日龄健康鸡胚随机分为低剂量预防组(含生药0.5g/mL)、中剂量预防组(含生药1g/mL)、高剂量预防组(含生药2g/mL)、低剂量治疗组(含生药0.5g/mL)、中剂量治疗组(含生药1g/mL)、高剂量治疗组(含生药2g/mL)、阳性对照组和阴性对照组共8组，每组10枚鸡胚。预防组先在鸡胚尿囊腔注射中药制剂0.2mL，置于37℃温箱中培养60min，再接种新城疫疫苗毒(新城疫La Sota株)0.2mL；治疗组先在尿囊腔接种疫苗毒0.2mL，置于37℃温箱中培养60min，再注射中药0.2mL；阳性对照组注射疫苗毒0.2mL，放置 37℃温箱中培养96h，每12h照蛋一次，弃掉24h内死亡的鸡胚，收集24h 后死亡的鸡胚，放于4℃下保存，采集尿囊液，测定血凝效价(HA)。试验结果见表1，由表可知，中药提取物复方制剂能够降低新城疫病毒的血凝效价，中剂量(含生药1g/mL)和高剂量(含生药2g/mL)时效果显著(P﹤0.01或P﹤ 0.05)。

表1中药提取物复方制剂对鸡新城疫病毒增殖作用效果

注：同列中不同小写字母表示差异显著(P﹤0.05)，不同大写字母表示差异极显著(P﹤0.01)。

2.疫苗免疫增强试验

50只25日龄肉鸽随机分为5组：低剂量口服液组(NDV免疫+0.5g/mL药)、中剂量口服液组(NDV免疫+1g/mL药)、高剂量口服液组(NDV免疫+2g/mL 药)、阴性对照组(未免疫)、阳性对照组(NDV免疫)。28日龄开始饮水给药，连续7d，31日龄进行疫苗免疫，分别于免疫当天，免疫后7d、14d、 21d、28d每组随机抽取5只通过翼静脉采血，分离血清，测定血凝抗体效价。试验结果见表2，在免疫后14d、21d和28d，高剂量组和中剂量组抗体水平均高于阳性对照组，中剂量组与其他各组的抗体水平相比差异显著(P﹤0.05)，高剂量组和阳性对照组之间差异显著(P﹤0.05)，低剂量组和阳性对照组的抗体水平基本保持相同的水平上，差异不显著。以上结果表明，各浓度的药物组都能够增强NDV的免疫效果，以中剂量组的免疫增强效果最好。

表2NDV疫苗免疫增强试验结果

注：同列中不同小写字母表示差异显著(P﹤0.05)，不同大写字母表示差异极显著(P﹤0.01)。

3.中药提取物复方制剂对肉鸽免疫器官发育的影响

1)对肉鸽免疫器官指数的影响

试验结果见表3，各组的脾脏和胸腺器官指数差异不显著；法氏囊器官指数在高剂量组、低剂量组与阳性对照组之间差异不显著，中剂量组与阳性对照组相比差异显著(P﹤0.05)。

表3中药提取物制剂对肉鸽免疫器官指数的影响

注：同列不同字母者差异极显著或差异显著(P﹤0.05)。

2)对肉鸽免疫器官组织发育的影响

各组的脾脏脾小结结构清晰，脾动脉周围淋巴鞘轮廓明显，脾小结内淋巴细胞排列紧密，中剂量组、低剂量组和阳性对照组的淋巴细胞数量较对照组的淋巴细胞数量明显增多；高剂量组、中剂量组、低剂量组和阳性对照组胸腺小叶内淋巴细胞排列紧密，且淋巴细胞数量高于对照组。

4.人工感染试验

将120只健康雏鸡随机分为以下3组，每组40只，用于传染性支气管炎病毒感染实验，感染病毒量为0.5mL/只(含2.65×103ELD₅₀)，药物灌服剂量为每只每次0.5mL，12h灌服1次。(1)预防组：于给药后24h接种病毒 0.5mL，连续给药3d。(2)治疗组：于给药前24h接种病毒0.5mL，连续给药3d。(3)对照组：灌服生理盐水前24h接种病毒0.5mL，每12小时灌服生理盐水0.5mL，连续3d。观察各组鸡的临床症状、死亡情况及剖检变化，并记录结果。结果表明，传染性支气管炎病毒对照组在给毒48h后，逐渐出现临床症状；60h后，其他2组出现临床症状。咳嗽，打喷嚏，流鼻涕及气管啰音，精神沉郁，食欲减退，饮水量增加。96～128h间为发病高峰期。剖检可见气管有浆液性渗出物，肾脏苍白、肿大、肾小管和输尿管因尿酸盐沉积而扩张。治疗组、预防组与对照组之间进行X²检验，结果治疗组、预防组与对照组相比均差异显著，说明中药提取物复方制剂有明显抑制病毒的作用。雏鸡发病数和发病率见表4。

表4传染性支气管炎病毒人工感染试验雏鸡发病情况

注：*与对照组相比差异显著(P<0.05)

5.细菌体外抑制试验

采用微量法测定中药提取物复方制剂对大肠埃希菌、鼠伤寒沙门氏菌、多杀性巴氏杆菌、无乳链球菌、金黄色葡萄球菌(均为标准菌株)的最小杀菌浓度，分别为15.6mg/mL、125mg/mL、31.2mg/mL、15.6mg/mL、31.2 mg/mL，由此可知，中药提取物复方制剂对以上5种菌有很好的体外抑制作用。

6.中药提取物复方制剂的急性毒性试验

1)对小鼠的毒性试验

昆明种小鼠40只，18～22g，雌雄各半，随机分为四组，分别灌服4g/mL、2g/mL、1g/mL和0.5g/mL中药提取物复方制剂0.5mL，每12h一次，连续观察2周。结果：各组小鼠在急性毒性试验期间生长情况良好，均未见异常反应，无死亡发生。根据急性毒性分级标准，中药提取物复方制剂属无毒物。

2)对鸡胚的毒性试验

取中药提取物复方制剂配成含生药4g/mL、2g/mL、1g/mL和0.5g/mL 的药液，每组6枚9日龄健康鸡胚，每个尿囊腔注射稀释成各浓度的中药提取物复方制剂药物，每枚鸡胚0.2mL，同时设置对照组，放置37℃温箱中培养96h，每12h照蛋一次，弃掉24h内死亡的鸡胚，收集24h后死亡的鸡胚，观察鸡胚死亡数量。结果显示，各组鸡胚均正常孵化至出壳，未发现对鸡胚具有毒性。

7.质量控制试验

1)薄层层析(TLC)

取中药提取物复方制剂，参照《中华人民共和国兽药典》(2015)所述方法对黄芩苷、连翘苷进行TLC检测。结果见图1和图2，图1是黄芩薄层色谱图，图中1.样品2.黄芩苷3.阴性对照4.黄芩提取物；图2是连翘薄层色谱图，图中1.连翘提取物2.阴性对照3.连翘苷4.样品。供试品色谱中，在与标准对照品和提取物色谱相应的位置上显示相同颜色的荧光斑点。

2)HPLC检测黄芩甙

参照《中华人民共和国兽药典》(2015)对黄芩苷的含量测定方法进行检测，制备黄芩苷样品、标准对照品和阴性对照品的溶液，分别进样HPLC测定，记录峰面积，计算样品中黄芩苷的含量。试验结果见图3(黄芩苷对照品)、图4(本发明中药提取物复方制剂)和图5(阴性对照)。在供试品中的黄芩苷峰保留时间与标准对照品中的峰是一致的，在无黄芩的阴性对照品中相同的保留时间没有出现黄芩苷峰，供试品中的黄芩苷峰与其他相邻的峰分离良好，且无黄芩阴性对照品中对黄芩苷无干扰现象。

8.临床应用实例

实施例1

中药提取物复方制剂由金银花提取物15g、黄芩提取物5g、连翘提取物 23g、贯叶连翘提取物10g、板蓝根提取物10g、大青叶提取物15g、桔梗提取物6g、薄荷提取物3、柴胡提取物10g、甘草提取物3g。上述药物混合均匀，制成散粉剂，总量100g。

实施例2：

中药提取物复方制剂由金银花提取物10g、黄芩提取物7g、连翘提取物 27g、贯叶连翘提取物15g、板蓝根提取物12g、大青叶提取物12g、桔梗提取物1g、薄荷提取物6g、柴胡提取物5g、甘草提取物5g。上述药物混合均匀，制成散粉剂。

咸阳养殖户张××：1000余只120日龄种用肉鸽，2016年3月9日发病；症状：鸽群中部分出现“咯咯”声，啰音，伸颈，仰头，张口呼吸，精神不振，食欲减少，排绿色稀粪；每次用50g药物，使用前用适量凉白开水溶解，供鸽群自由饮用，连续服用三天，每天两次，每只每次用药量为0.05g。鸽群全部恢复健康。

实施例3：

中药提取物复方制剂由金银花提取物11g、黄芩提取物3g、连翘提取物 24g、贯叶连翘提取物14g、板蓝根提取物15g、大青叶提取物14g、桔梗提取物3g、薄荷提取物5g、柴胡提取物7g、甘草提取物4g。上述药物混合均匀，制成散粉剂。

宝鸡养殖户惠××：2000余只蛋鸡，240日龄，2016年12月11日发病；症状：鸡表现为咳嗽，喘气，有“咯咯“声，产蛋量下降，产畸形蛋，沙皮蛋。个别死亡鸡剖检可见喉部黏膜上有淡黄色凝固物附着，不易擦去，排绿色稀粪；每次用400g药物，使用前用适量凉白开水溶解，供鸡群自由饮用，连续五天，每天两次，每只每次用药量为0.2g。鸡群95％以上恢复健康。

实施例4：

中药提取物复方制剂由金银花提取物12g、黄芩提取物4g、连翘提取物 25g、贯叶连翘提取物13g、板蓝根提取物14g、大青叶提取物13g、桔梗提取物5g、薄荷提取物4g、柴胡提取物9g、甘草提取物1g。上述药物混合均匀，制成散粉剂。

商洛养殖户王××：养殖母猪100头，育肥猪800余头，2017年2月，由于天气变化，冷热不均，其中育肥猪50余头发生食欲不振、高热、咳嗽、气喘，呼吸困难、被毛粗乱、精神沉郁。每次用95g使用前适量凉白开水溶解，并适当添加电解多维，加入饮水器中，连续饮服用中药提取物复方制剂五天，每天两次，每头每次用药量为5g。猪群95％以上恢复健康。无临床症状者全群药量减半预防，再未出现上述疾病。

实施例5：

中药提取物复方制剂由金银花提取物13g、黄芩提取物6g、连翘提取物 26g、贯叶连翘提取物12g、板蓝根提取物13g、大青叶提取物15g、桔梗提取物4g、薄荷提取物1g、柴胡提取物8g、甘草提取物2g。上述药物混合均匀，制成散粉剂。

实施例6：

中药提取物复方制剂由金银花提取物14g、黄芩提取物7g、连翘提取物 27g、贯叶连翘提取物11g、板蓝根提取物11g、大青叶提取物11g、桔梗提取物6g、薄荷提取物2g、柴胡提取物6g、甘草提取物5g。上述药物混合均匀，制成散粉剂。

以上所述，仅为本发明的较佳实例，因此在不脱离本发明总体构思下的变化和修改，应属于本发明的保护范围之内。

Claims (3)

1.一种预防和治疗畜禽呼吸道疾病的中药提取物复方制剂，其特征在于，由下述重量百分比的原料制成：金银花提取物10～15%、黄芩提取物3～7%、连翘提取物23～27%、贯叶连翘提取物10～15%、板蓝根提取物10～15%、大青叶提取物10～15%、桔梗提取物1～6%、薄荷提取物1～6%、柴胡提取物5～10%、甘草提取物1～5%，上述原料的质量百分比之和为100%。

2.根据权利要求1所述的预防和治疗畜禽呼吸道疾病的中药提取物复方制剂，其特征在于，由下述重量百分比的原料制成：金银花提取物11～14%、黄芩提取物4～6%、连翘提取物24～26%、贯叶连翘提取物11～14%、板蓝根提取物11～14%、大青叶提取物11～14%、桔梗提取物2～5%、薄荷提取物2～5%、柴胡提取物7～9%、甘草提取物2～4%，上述原料的质量百分比之和为100%。

3.根据权利要求1所述的预防和治疗畜禽呼吸道疾病的中药提取物复方制剂，其特征在于，由下述重量百分比的原料制成：金银花提取物13%、黄芩提取物5%、连翘提取物25%、贯叶连翘提取物13%、板蓝根提取物13%、大青叶提取物13%、桔梗提取物4%、薄荷提取物3%、柴胡提取物8%、甘草提取物3%。