CN107440114B

CN107440114B - 一种具有抗pm2.5颗粒物功效的组合物

Info

Publication number: CN107440114B
Application number: CN201710588065.6A
Authority: CN
Inventors: 王昭日; 杨胜杰; 刘明川; 钟少达; 翁玲玲
Original assignee: Sinphar Tian Li Pharmaceutical Co Ltd
Current assignee: Sinphar Tian Li Pharmaceutical Co Ltd
Priority date: 2017-07-18
Filing date: 2017-07-18
Publication date: 2021-02-05
Anticipated expiration: 2037-07-18
Also published as: CN107440114A

Abstract

本发明涉及一种具有抗PM 2.5颗粒物功效的组合物。所述的组合物主要包括：苁蓉提取物、鹰嘴豆提取物以及核桃低聚肽。所述制备方法包括加入溶剂、提取、酶解、纯化、浓缩以及干燥。所述组合物具有显著的增强巨噬细胞对PM 2.5颗粒物的吞噬功能；促进肠道对颗粒物的分泌作用，因此可用于制备预防或治疗PM 2.5颗粒物引起相关疾病的药品、食品或保健食品。

Description

一种具有抗PM2.5颗粒物功效的组合物

技术领域

本发明属于健康产品领域，涉及一种以天然植物为原料加工成组合物的制备方法，特别是一种抗雾霾功效的组合物。本发明的组合物可以作为食品、保健食品、或药品使用。

背景技术

雾霾是特定气候条件与人类活动相互作用的结果，其主要成分包括烟雾、煤烟及粉尘等各种固态或液态颗粒或气溶胶。高密度人口的经济及社会活动必然会排放大量细颗粒物(PM 2.5)，一旦排放超过大气循环能力和承载度，细颗粒物浓度将持续积聚，此时如果受静稳天气等影响，极易出现大范围产生。大量的细颗粒物既是污染物，又是重金属、多环芳烃及病毒等有害物质的载体，不仅对大气能见度和气候有巨大的影响，其中可吸入颗粒物能够进入人体呼吸系统，更能对人体健康造成直接的严重威胁，已经成为危害人类健康和生命的重要杀手。因此制备效果较为显著的用于预防或者治疗PM 2.5颗粒物引起的相关症状的药物已经成为药物或者保健食品研究领域的热点之一

本发明旨在寻找一种具有较好抗PM 2.5颗粒物功效的中草药组合物，是以肉苁蓉、鹰嘴豆和核桃为原料。肉苁蓉味甘、咸，性温，具有补肾阳、益精血、润肠通便的功能，在我国已有两千多年的使用历史。现代药理学表明，肉苁蓉除作为传统的补肾壮阳中药外，更兼具有抗衰老、增强记忆、抗疲劳、免疫调节等多种功能。鹰嘴豆所含的营养成分非常丰富，含有18种以上的氨基酸(含人体必须但自身不能合成的全部8种氨基酸)，多种营养元素和微量元素，如：钙、罗、锌、镁、磷等。特别是每百克鹰嘴豆所含的钙高达350毫克，磷320毫克，高于大部分豆类，铁的含量达47毫克，比其它豆类高出90％，维生素C、B1、B2含量高达12毫克，膳食纤维含量更高于其它。维吾尔族用它治疗支气管炎、黏膜炎、霍乱、便秘痢疾、消化不良、肠胃气胀、毒蛇咬伤、糖尿病、性欲降低、皮肤瘙痒、高脂血症、中暑等疾病。在中医上，鹰嘴豆可以调节湿度，有止泻、解毒、壮身等作用。核桃属于四大坚果之一，具有很高的营养药用价值。在我国古医药书籍中，有明确记载，李时珍《本草纲目》记述“补气养血、润燥化痰、益命门、利三焦，温肺润肠。”等等。本发明将这三种植物经过特殊工艺制备得到具有显著抗PM 2.5颗粒物功效的组合物，并经生物活力实验得以确证。

发明内容

本发明要解决的技术问题是：克服现有技术的不足，提供了一种高效PM 2.5颗粒物的组合物，该组合物可以用作食品、保健食品以及药品，本发明另一个目的是提供了一种抗PM 2.5颗粒物功效组合物的制备方法，该方法简单、绿色环保，适合大规模生产。

本发明是通过下述技术方案实现的：

一种具有抗PM 2.5颗粒物功效的组合物，所述组合物是由苁蓉提取物、鹰嘴豆提取物以及核桃低聚肽组成。

优选地，苁蓉提取物9～90wt％，鹰嘴豆提取物9～90wt％，核桃低聚肽1～50wt％。

优选地，苁蓉提取物40～80wt％，鹰嘴豆提取物15～55wt％，核桃低聚肽5～20wt％。

优选地，苁蓉提取物74wt％，鹰嘴豆提取物22wt％，核桃低聚肽4wt％。

本发明还提供述的具有抗PM 2.5颗粒物功效组合物的制备方法，其特征在于包括下述步骤：首先制备肉苁蓉提取物，其次为鹰嘴豆提取物，最后为核桃低聚肽，按其优选百分配比混合而成。

优选地，包括下述步骤：

(1)肉苁蓉提取物的制备步骤为：将肉苁蓉药材中的肉质茎部分晾干并粉碎，取一定量的药粉与纯化水按质量比为1∶10～1∶20混合，加入药粉质量的0.1％～0.5％的生物蛋白酶，调节pH至5～9，恒温40～55℃搅拌3～6h。提取完成后，将药材提取液煮沸5～10min，待冷却至室温，离心过滤。将滤液浓缩至约30℃时的相对密度1.05～1.10g/mL，经干燥得到土黄色苁蓉提取物，收率不低于40wt％；

(2)鹰嘴豆提取物的制备步骤为：将鹰嘴豆晾干并粉碎，取一定量的鹰嘴豆粉与水按质量比为1∶10～1∶20混合，加入豆粉质量的0.1％～0.5％的生物蛋白酶，调节pH至5～9，恒温40～55℃搅拌3～6h。提取完成后，将提取液煮沸5～10min，待冷却至室温，离心过滤。将滤液浓缩至30℃时的相对密度1.05～1.10g/mL，经干燥得到乳白色鹰嘴豆提取物，收率不低于25wt％；

(3)核桃低聚肽的制备步骤为：将核桃去壳、脱油，得到脱脂核桃粕，取一定量脱脂后的核桃粕，与水按重量比为1∶5～1∶15混合，调节pH至9～11于室温提取1～2h，提取完成后，过滤，滤液备用；使用同样的条件再次对滤渣进行提取，提取完成后，过滤，滤液与第一次蛋白提取液合并。调节滤液pH为3～5，静置0.5～2h，弃去上清液，最后往沉淀物中加入体积比为1∶10～1∶20的水，搅拌均匀，得到核桃蛋白液。将蛋白液加热至40～55℃，加入核桃粕重量0.5～2％的生物酶，搅拌酶解3～6h后，煮沸灭活30min，离心，上清液即为蛋白酶解液。将蛋白酶解液使用孔径为0.1～0.5μm的微滤膜进行过滤，透过液再经2000～20000Dalton超滤膜处理后，透过液在50～80℃下浓缩至固含为3～5wt％时，经干燥得到核桃低聚肽，产率为20～30wt％；

优选地，所述的肉苁蓉提取物的提取原料可以为新鲜的肉苁蓉的干燥肉质茎，或者其经过水(不含生物酶)或者有机溶剂提取后的药渣；

所述的鹰嘴豆提取物的提取原料可以为鹰嘴豆干燥的种子，或者其经过渣油后的豆饼，或者其经过有机溶剂或者水(不含生物酶)提取后的豆渣，或者豆饼或者豆渣经蛋白提取后的下脚料。

优选地，所述的核桃仁的脱脂方法可以为冷榨、热榨或者有机溶剂脱脂法，优选地使用冷榨脱脂法。

优选地，所述的生物蛋白酶选自食品级的中性蛋白酶(酶活力≥20万u/g)、木瓜蛋白酶(酶活力≥40万u/g)、菠萝蛋白酶(酶活力≥30万u/g)、碱性蛋白酶(酶活力≥20万u/g)、胃蛋白酶(酶活力≥50万u/g)、胰酶(酶活力≥3000u/g)中的一种或者它们的混合物，优选地使用中性蛋白酶；

优选地，所述的浓缩方法可以为膜浓缩、减压浓缩、常压浓缩；

优选地，所述的干燥方法可以为喷雾干燥、真空干燥、加热干燥、冷冻干燥。

本发明还提供了一种组合物，其含有权利要求1-4任一所述的组合物和可药用或可食用辅料。

所述的组合物，其是片剂、分散片、胶囊剂、软胶囊剂、微囊剂、颗粒剂、注射剂、粉针剂、冻干粉针剂、微丸剂、滴丸剂、糖浆剂、散剂、浸膏剂、煎膏剂、口服液体制剂及其他药学上可以接受的剂型。

所述的提取组合物可增强巨噬细胞对PM 2.5颗粒物的吞噬功能；促进肠道对PM2.5颗粒物的分泌作用方面的用途。

所述的含有提取组合物的组合物在增强巨噬细胞对PM 2.5颗粒物的吞噬功能；促进肠道对PM 2.5颗粒物的分泌作用方面的用途。

所述的提取组合物在增强巨噬细胞对PM 2.5颗粒物的吞噬功能；促进肠道对PM2.5颗粒物的分泌作用方面的用途。

所述的含有提取组合物的组合物用于制备预防或治疗PM 2.5颗粒物引起的症状的药品、食品或保健食品方面的用途。

优选地，苁蓉提取物为15wt％、20wt％、25wt％、30wt％、35wt％、40wt％、45wt％、50wt％、55wt％、60wt％、65wt％、70wt％、75wt％、80wt％、85wt％；

优选地，鹰嘴豆提取物为15wt％、20wt％、25wt％、30wt％、35wt％、40wt％、45wt％、50wt％、55wt％、60wt％、65wt％、70wt％、75wt％、80wt％、85wt％；

优选地，核桃低聚肽为5wt％、10wt％、15wt％、20wt％、25wt％、30wt％、35wt％、40wt％、45wt％。

本领域技术人员可以理解的是，当苁蓉提取物、鹰嘴豆提取物或核桃低聚肽为相应优选的组分时，组合物中另一或两种组分含量，即苁蓉提取物、鹰嘴豆提取物或核桃低聚肽，可根据组合物物中三者量的总和等于100wt％，相应计算得出另一或两种组分的量。

另外，本领域技术人员可以理解的是，如果组合物中仅仅含有苁蓉提取物、鹰嘴豆提取物或核桃低聚肽，通过斑马鱼抗疲劳药效实验证明其仍具有一定的抗PM 2.5颗粒的功效。即可增强巨噬细胞对PM 2.5颗粒物的吞噬功能；促进肠道对PM 2.5颗粒物的分泌作用，因此可用于制备预防或治疗相关疾病的药品、食品或保健食品。

附图说明

图1：组合物对斑马鱼体内纳米活性炭(PM 2.5)分泌进入肠道促进作用的表型图；

图2：组合物对斑马鱼体内吞噬纳米活性炭(PM 2.5)的巨噬细胞吞噬功能促进作用的表型图。

实施例

下面通过实施例对本发明作进一步说明。应该理解的是，本发明实施例所述方法仅仅是用于说明本发明，而不是对本发明的限制，在本发明的构思前提下对本发明制备方法的简单改进都属于本发明要求保护的范围。如无特别说明，实施例中用到的所有原料和溶剂均为市售产品。

制备实施例：

将肉苁蓉药材中的肉质茎部分经CN 105796656 A实施例1水提后的药渣，将其晾干并粉碎，过60目筛网备用。称取100kg苁蓉药粉，与纯化水按质量比为1∶10混合，加入200g中性蛋白酶(酶活力为30万u/g)，调节pH至7～8，保持温度为45～50℃。搅拌提取3h后，将提取液煮沸5～10min，待冷却至室温，离心过滤，将滤液浓缩后，经喷雾干燥机进行干燥，，得到52kg土黄色苁蓉提取物。

称取100kg鹰嘴豆豆粉(专利CN 105949290 A实施例1蛋白质提取完成后的豆渣)与水按质量比为1∶10混合，加入100g中性蛋白酶(酶活力为30万u/g)，调节pH至7～8，恒温45～50℃搅拌提取；5小时后，提取液煮沸5分钟，冷却至室温后，离心过滤，将滤液浓缩后，经喷雾干燥机进行干燥，得到31kg乳白色鹰嘴豆提取物。

将100kg冷榨脱脂后的核桃粕，与水按重量比为1∶10混合，调节pH至10于室温提取2h；提取完成后，过滤，滤渣按照第一次提取条件再次提取，提取完成后，过滤，滤液与第一次过滤液合并，调节pH为5，静置2h，弃去上清液，最后往沉淀物中加入体积比为1∶10的水，搅拌均匀。将上述核桃蛋白液加热至45℃，将pH值调节至中性，加入1kg中性蛋白酶(酶活力为30万u/g)，搅拌酶解6h后，煮沸灭活30min，离心，上清液即为蛋白酶解液。将蛋白酶解液使用孔径为0.1μm的微滤膜进行过滤，透过液再经5000Dalton超滤膜处理后，透过液经浓缩后，喷雾干燥得到21kg淡黄色核桃低聚肽。

称取50kg苁蓉提取物、15kg鹰嘴豆提取物以及3kg核桃低聚肽混合均匀，即为组合物(批号为Z-1)，其中各提取物质量百分比是：苁蓉提取物74wt％，鹰嘴豆提取物22wt％，核桃低聚肽4wt％。

生物活性实施例：

1评价组合物对斑马鱼纳米活性炭分泌进入肠道的促进作用

实验动物：黑色素等位基因突变型半透明Albino品系斑马鱼，以自然成对交配繁殖方式进行。年龄为受精后2天，共150尾，每实验组为30尾。

实验模型的建立：将62.5mg/mL纳米活性炭(PM 2.5)作为纳米颗粒，注射到2dpf斑马鱼卵黄囊中(相当于人肌肉注射)，每尾斑马鱼注射10nL，即以625ng/尾剂量建立斑马鱼PM 2.5分泌模型。

实验步骤：随机选取150尾受精后2天(2dpf)黑色素等位基因突变型半透明Albino品系斑马鱼于六孔板中，每孔(实验组)均处理30尾斑马鱼，肌肉注射给予纳米活性炭建立斑马鱼纳米活性炭分泌进入肠道功能评价模型。水溶给予组合物(Z-1)2000μg/mL浓度，同时设置正常对照组(养鱼用水处理斑马鱼)和模型对照组，每孔(实验组)容量为3mL。供试品每天换液，处理5d后，统计体内纳米活性炭分泌进入肠道的斑马鱼数量(N)，根据纳米活性炭分泌发生率的统计学意义来评价供试品对纳米活性炭分泌进入肠道的影响。统计学处理结果用mean±SE表示，纳米活性炭分泌发生率计算公式为：分泌发生率(％)＝(N_{纳米活性炭分泌进入肠道}/N_总数)×100％。实验结果如表1所示。

表1组合物对斑马鱼肠道分泌的促进作用

由表1可知，模型对照组斑马鱼纳米活性炭分泌尾数为4/30，纳米活性炭分泌发生率为13.3％。而组合物在浓度为62.5μg/mL时，斑马鱼纳米活性炭分泌尾数为20/30尾，纳米活性炭分泌发生率为66.7％，表明组合物具有明显促进斑马鱼纳米活性炭分泌进入肠道的作用。

2评价组合物对吞噬纳米活性炭(PM 2.5)的巨噬细胞吞噬功能的促进作用

实验动物：黑色素等位基因突变型半透明Albino品系斑马鱼，以自然成对交配繁殖方式进行。年龄为受精后2天，共180尾，每实验组为30尾。

实验模型的建立：将62.5mg/mL纳米活性炭(PM 2.5)作为纳米颗粒，注射到2dpf斑马鱼血液循环中(相当于人静脉注射)，每尾斑马鱼注射10nL，即以625ng/尾剂量建立斑马鱼PM 2.5吞噬模型。

实验步骤：随机选取180尾受精后2天(2dpf)黑色素等位基因突变型半透明Albino品系斑马鱼于六孔板中，每孔(实验组)均处理30尾斑马鱼，静脉注射给予纳米活性炭建立斑马鱼纳米活性炭吞噬模型。水溶给予组合物(Z-1)浓度为2000μg/mL，同时设置正常对照组(养鱼用水处理斑马鱼)和模型对照组，每孔(实验组)容量为3mL。供试品每天换液，处理2d后，加入中性红溶液对斑马鱼进行活体染色16h，染色结束，在解剖显微镜下统计吞噬了纳米活性炭的巨噬细胞数量(N)，根据吞噬纳米活性炭的巨噬细胞数量的统计学意义来评价供试品对巨噬细胞吞噬作用的影响。统计学处理结果用mean±SE表示，巨噬细胞吞噬促进作用计算公式为：巨噬细胞吞噬促进作用(％)＝(N_供试品-N_{模型对照组})/N_{模型对照组}×100％。结果如表2所示。

表2组合物对斑马鱼巨噬细胞吞噬功能的促进作用

由表2可知，模型对照组吞噬纳米活性炭的巨噬细胞数量为11.1个，而组合物在2000μg/mL时，吞噬纳米活性炭的巨噬细胞数量为19.6个，巨噬细胞吞噬促进作用分别为77％，表明组合物对斑马鱼巨噬细胞吞噬功能具有明显的促进作用。

Claims

1.一种具有抗PM2.5颗粒物功效的组合物，所述组合物是由苁蓉提取物、鹰嘴豆提取物以及核桃低聚肽组成；苁蓉提取物74wt％，鹰嘴豆提取物22wt％，核桃低聚肽4wt％；其特征在于：所述组合物的制备方法，包括下述步骤：

(1)肉苁蓉提取物的制备步骤为：将肉苁蓉药材中的肉质茎部分晾干并粉碎，取一定量的药粉与纯化水按质量比为1∶10～1∶20混合，加入药粉质量的0.1％～0.5％的生物蛋白酶，调节pH至5～9，恒温40～55℃搅拌3～6h，提取完成后，将药材提取液煮沸5～10min，待冷却至室温，离心过滤，将滤液浓缩至约30℃时的相对密度1.05～1.10g/mL，经干燥得到土黄色苁蓉提取物，收率不低于40wt％；

(2)鹰嘴豆提取物的制备步骤为：将鹰嘴豆晾干并粉碎，取一定量的鹰嘴豆粉与水按质量比为1∶10～1∶20混合，加入豆粉质量的0.1％～0.5％的生物蛋白酶，调节pH至5～9，恒温40～55℃搅拌3～6h，提取完成后，将提取液煮沸5～10min，待冷却至室温，离心过滤，将滤液浓缩至30℃时的相对密度1.05～1.10g/mL，经干燥得到乳白色鹰嘴豆提取物，收率不低于25wt％；

(3)核桃低聚肽的制备步骤为：将核桃去壳、脱油，得到脱脂核桃粕，取一定量脱脂后的核桃粕，与水按重量比为1∶5～1∶15混合，调节pH至9～11于室温提取1～2h，提取完成后，过滤，滤液备用；使用同样的条件再次对滤渣进行提取，提取完成后，过滤，滤液与第一次蛋白提取液合并，调节滤液pH为3～5，静置0.5～2h，弃去上清液，最后往沉淀物中加入体积比为1∶10～1∶20的水，搅拌均匀，得到核桃蛋白液，将蛋白液加热至40～55℃，加入核桃粕重量0.5～2％的生物酶，搅拌酶解3～6h后，煮沸灭活30min，离心，上清液即为蛋白酶解液，将蛋白酶解液使用孔径为0.1～0.5μm的微滤膜进行过滤，透过液再经2000～20000 Dalton超滤膜处理后，透过液在50～80℃下浓缩至固含为3～5wt％时，经干燥得到核桃低聚肽，产率为20～30wt％。

2.一种组合物，其含有权利要求1所述的组合物和可药用辅料；所述的组合物，其是片剂、胶囊剂、颗粒剂、注射剂、粉针剂、微丸剂、滴丸剂、糖浆剂、浸膏剂、煎膏剂、口服液体制剂。

3.权利要求1所述的组合物或权利要求2所述的组合物用于制备预防或治疗PM2.5颗粒物引起的症状的药品方面的用途。