[go: up one dir, main page]
More Web Proxy on the site http://driver.im/

CN107320735A - 一种他莫昔芬组合物及其制剂 - Google Patents

一种他莫昔芬组合物及其制剂 Download PDF

Info

Publication number
CN107320735A
CN107320735A CN201710551985.0A CN201710551985A CN107320735A CN 107320735 A CN107320735 A CN 107320735A CN 201710551985 A CN201710551985 A CN 201710551985A CN 107320735 A CN107320735 A CN 107320735A
Authority
CN
China
Prior art keywords
tam
water
aromatic hydrocarbons
composition
preparation
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN201710551985.0A
Other languages
English (en)
Inventor
黄飞鹤
上官莉卿
陈琪
史兵兵
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Zhejiang University ZJU
Original Assignee
Zhejiang University ZJU
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Zhejiang University ZJU filed Critical Zhejiang University ZJU
Priority to CN201710551985.0A priority Critical patent/CN107320735A/zh
Publication of CN107320735A publication Critical patent/CN107320735A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/13—Amines
    • A61K31/135—Amines having aromatic rings, e.g. ketamine, nortriptyline
    • A61K31/138—Aryloxyalkylamines, e.g. propranolol, tamoxifen, phenoxybenzamine

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)

Abstract

本发明公开了一种他莫昔芬组合物，含有可增加他莫昔芬在水中溶解度的水溶性柱[6]芳烃。水溶性柱[6]芳烃制备方法简便，绿色环保，细胞毒性低，同时通过主客体相互作用提高难溶抗癌药物他莫昔芬在水中的溶解性；该他莫昔芬组合物具有良好的水溶性和高效的抗癌效率，有利于他莫昔芬的溶出和吸收，可大大提高他莫昔芬的生物利用度，可作为一类新型超分子抗癌药物。

Description

一种他莫昔芬组合物及其制剂
技术领域
本发明属于生物医药科学领域，具体涉及一种他莫昔芬组合物及其制剂。
背景技术
癌症，目前已成为全世界人类健康的最大杀手。各国科学家为攻克癌症付出艰苦卓绝的努力，但仍然无法完全克制这一疾病，令其成为人类健康面临的最大威胁和恐惧。
经过不懈的研究和探索，多种多样的抗癌药物被开发用于癌症的药物治疗。全球各国已批准上市的抗癌药物大约有130～150种。用这些药物配制成的各种抗癌药物制剂大约有1300～1500种。除此之外，还有大量的新型的抗癌药物不断研发推出。而在这些药物当中，有许多药物由于水溶性太差而难以实现进一步的开发和应用。
使用增溶剂与药物分子组成超分子药物是一种促进药物分子在水中溶解进而增强药效的简单有效方法。但是这一方法中所使用的增溶剂必须满足一下几个条件：首先增溶剂本身无毒，其次是增溶剂的加入能够提高或者不影响药物分子本身的药效，同时实现药物分子在水溶液体系中较好的溶解性。
他莫昔芬是一种人工合成的非甾体类雌激素拮抗药物，择性雌激素受体调节剂，用于治疗晚期乳腺癌和卵巢癌。但在水中的溶解度极低，因此在临床应用中效率低下。
枸橼酸他莫昔芬目前主要有片剂、胶囊、注射剂等剂型供临床使用，这些剂型在胃肠道溶出度较差，生物利用度不高。CN1389199A公开了一种枸橼酸他莫昔芬缓释片，CN1654037A公开了一种枸橼酸他莫昔芬分散片。然而这种制剂成本高、生物利用度低，不能很好地应用于临床。
综上所述，能否利用现有技术，选择合适的新型增溶剂，通过超分子主客体作用形成超分子药物，简单有效的提高抗癌药物分子他莫昔芬的溶解性，是实现抗癌药物药效提高的关键。
发明内容
本发明的目的是针对现有技术中他莫昔芬水溶性不足的问题，提供一种含水溶性柱[6]芳烃的他莫昔芬组合物，水溶性柱[6]芳烃在水中具有良好的溶解度，毒性低，并且能够通过主客体相互作用高效的提高他莫昔芬在水中的溶解度，同时提高该药物的抗癌药效。
一种他莫昔芬组合物，含有可增加他莫昔芬在水中溶解度的水溶性柱[6]芳烃，所述水溶性柱[6]芳烃为式(Ⅰ)～(Ⅲ)所示化合物中的至少一种，
优选地，所述的他莫昔芬组合物由他莫昔芬与水溶性柱[6]芳烃以摩尔比为0.1～1:1组成。
进一步优选，他莫昔芬与水溶性柱[6]芳烃的摩尔比为0.3～0.6：1，他莫昔芬在水中的溶解性差，溶解度仅有5.90×10–3mg/mL，在该比例范围内，所述的他莫昔芬组合物能在水中完全溶解。
作为优选，所述水溶性柱[6]芳烃为式(Ⅰ)所示的全羧酸铵盐柱[6]芳烃(缩写为WP6)，全羧酸铵盐柱[6]芳烃的碱性较弱，对细胞的渗透的影响较小，其在水中的溶解度为92.4±1.5mg/mL，他莫昔芬能够和全羧酸铵盐柱[6]芳烃形成主客体络合物WP6-T，从而增强他莫昔芬在水中的溶解性和抗癌药效。
本发明还提供了含上述他莫昔芬组合物的制剂，该制剂由他莫昔芬组合物和药学上可接受的载体或其他药用活性成分组成。
优选地，所述制剂为固体制剂、半固体制剂或液体制剂。
其中，所述制剂为片剂、胶囊剂、颗粒剂、散剂、口服液等口服用常见剂型；所述药学上可接受的载体是指药学领域常规的药物载体，由选自填充剂、粘合剂、崩解剂、润滑剂、助溶剂、助悬剂、润湿剂、色素、香精、溶剂、稳定剂、表面活性剂或矫味剂中的一种或几种组成。
所述制剂为输液、水针、粉针等常见注射用常见剂型；所述药学上可接受的载体是指药学领域常规的药物载体，由选自渗透压调节剂、pH调节剂、增溶剂、助溶剂、冻干保护剂、抗氧剂和稳定剂中的一种或几种组成。
本发明中所使用的水溶性柱[6]芳烃本身细胞毒性较低，而他莫昔芬组合物对于乳腺癌细胞MCF-7以及海拉细胞Hela两种癌细胞均表现出了相比于自由的他莫昔芬药物更强的致死效率。说明该他莫昔芬组合物不仅具有很好的水溶性，而且具有较他莫昔芬更高的杀死癌细胞的效率。
与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：
(1)水溶性柱[6]芳烃制备方法简便，绿色环保，细胞毒性低，同时通过主客体相互作用提高难溶抗癌药物他莫昔芬在水中的溶解性；
(2)本发明他莫昔芬组合物，大大提高了他莫昔芬在水中的溶解度，制成口服制剂，有利于他莫昔芬的溶出和吸收，可大大提高他莫昔芬的生物利用度；
(3)本发明他莫昔芬组合物溶于水后形成的主客体络合物具有很高的癌细胞的致死效率，可作为一类新型抗癌药物。
附图说明
图1为WP6提高他莫昔芬溶解性的实验数据结果图；
图2为WP6、WP6-T及他莫昔芬对于乳腺癌细胞MCF-7以及海拉细胞Hela两种癌细胞的毒性试验结果图。
具体实施方式
实施例1
全羧酸铵盐柱[6]芳烃WP6的合成路线：
称取全羟基柱[6]芳烃c 0.730g于100mL圆底烧瓶中，依次加入2.59g的氯乙酸乙酯，6.62g的无水碳酸钾，50mL的乙腈，氩气保护，85～90℃下搅拌反应48～50小时。反应结束后，过滤，旋干溶剂，将所得固体溶于100～120mL的二氯甲烷中，用100～150mL的水洗涤三次，无水硫酸钠干燥30～35min，过滤，用硅胶柱层析分离，洗脱剂用：石油醚：乙酸乙酯＝3：1，浓缩得白色固体，即为全酯基柱[6]芳烃b(0.74g，产率46％)。
称取全酯基柱[6]芳烃b 0.74g于100mL圆底烧瓶中，依次加入1.60g的NaOH固体，40mL的乙醇，20～22mL的水，上述体系在90～95℃下反应12～13小时，冷却至室温，加入盐酸酸化，有大量固体析出，抽滤，滤饼用蒸馏水洗涤3～4次，真空干燥，得白色固体，即为全羧基柱[6]芳烃a(0.61g，产率93％)。
取全羧基柱[6]芳烃a 0.56于50mL圆底烧瓶中，加入40～45mL氨水，室温下搅拌反应4～5小时。减压旋干，得白色固体，即为全羧基铵盐柱[6]芳烃WP6(0.62g,产率为99％)。
本实施例制备的产品表征数据如下：
全酯基柱[6]芳烃b：
1H NMR(400MHz,CDCl3,298K,ppm):δ7.04(s,12H),4.56(s,24H,),3.87(s,12H),3.60(m,36H)；13C NMR(400MHz,CDCl3,298K,ppm):δ169.8,148.9,128.5,114.4,65.5,51.8,29.7,29.3。
全羧基柱[6]芳烃a：
1H NMR(400MHz,DMSO-d6,298K,ppm):δ12.96(s,12H),7.11(s,12H),4.71(s,12H),4.42(s,12H),3.74(s,12H)；13C NMR(400MHz,DMSO-d6,298K,ppm):δ170.5,148.4,128.0,114.2,65.0,28.6。
全羧基铵盐柱[6]芳烃WP6:
1H NMR(400MHz,D2O,298K,ppm):δ6.71(s,12H),4.20(s,24H),3.87(2,12H)；13CNMR(400MHz,D2O,298K,ppm):176.8,150.1,128.4,115.9,67.9,30.1。
WP6对他莫昔芬溶解度影响实验：
以WP6在水中的溶解度为范围，将WP6溶解于水中，设置其浓度梯度为1.63～81.68mg/mL。将过量的抗癌药物他莫昔芬粉末加入配好的WP6水溶液，在25℃下充分搅拌24～25小时后，用22μm水相滤膜滤除过量的未溶解的他莫昔芬固体，他莫昔芬和WP6形成主客体络合物WP6-T，得到含WP6-T的溶液。他莫昔芬含量测定方法如下，在D2O溶剂中，通过加入一定量的内标化合物均苯三甲酸钠后，在1H-NMR核磁氢谱上显示相应的质子信号。通过相应的质子信号峰的积分面积比例与内标化合物的加入量可以计算得到样品溶液中所溶解的他莫昔芬的含量。
实验结果如图1所示。
由实验结果分析可知：
WP6能够有效地通过主客体相互作用形成主客体络合物WP6-T，从而提高难溶性抗癌药物他莫昔芬在水中的溶解度，在测试范围内，最高可以将他莫昔芬在水中的溶解度提高至4.64mg/mL，与他莫昔芬自身的溶解度5.90×10–3mg/mL相比，显著提高。
检测WP6，主客体络合物WP6-T及他莫昔芬对于两种癌细胞乳腺癌细胞MCF-7以及海拉细胞Hela的致死效率。
在96孔板中，5％CO2，36至37摄氏度环境下孵育乳腺癌细胞MCF-7和海拉细胞Hela23至24小时备用。
分别配制WP6、主客体络合物WP6-T、他莫昔芬的不同浓度梯度的标准溶液0.5μM、1μM、2μM、5μM、10μM、15μM、20μM备用。其中，主客体络合物WP6-T的配制方法为：首先配制5mM的WP6水溶液，然后过量的他莫昔芬粉末加入该溶液，在25℃下充分搅拌24～25小时，滤除未溶解多余的他莫昔芬，将溶液稀释至所需的浓度；由于他莫昔芬自身溶解度过低，其溶液的配制方法为：先将他莫昔芬粉末大量地溶于DMSO，配制成他莫昔芬的浓溶液，然后稀释至所需浓度，同时使细胞培养体系中DMSO的含量不超过5％，保证细胞存活不受溶剂影响。
将上述溶液加入到乳腺癌细胞MCF-7和海拉细胞Hela的培养基中，在36～37℃下继续孵化4～5小时。用MTT法测定上述两种细胞的存活率，以此来测定WP6、WP6-T、他莫昔芬的细胞毒性
实验结果如图2所示，其中图(a)为WP6、WP6-T、他莫昔芬对乳腺癌细胞MCF-7的相对细胞活性；图(b)为WP6、WP6-T、他莫昔芬对海拉细胞Hela的相对细胞活性。
结果显示，WP6在测试的浓度范围内都具有较低的细胞毒性，且他莫昔芬由于处理时间较短，在4～5小时的孵化时间内也没有显示出明显的细胞毒性，而WP6-T对于两种测试癌细胞，都显示出明显的随浓度增大而升高的较强的细胞毒性，表明具有良好的抗癌效果，能增强他莫昔芬的抗癌药效。
实施例2
全羧酸钠盐柱[6]芳烃的合成：
取实施例1制备的全羧基柱[6]芳烃a
取全羧基柱[6]芳烃a 0.67～0.68g于50mL圆底烧瓶中，加入0.2～0.3g NaOH固体，30mL水，室温下搅拌反应12～13h。用1.0M～1.5M的盐酸溶液调节PH至6.5左右，减压旋干体系中的水，得白色固体，即为全羧基钠盐柱[6]芳烃(0.79～0.80g,产率为97～100％)。
本实施例制备的产品全羧基钠盐柱[5]芳烃的表征数据如下：
1H NMR(400MHz,D2O,298K,ppm):6.58(s,12H),4.08(s,24H),3.75(s,12H)；13CNMR(400MHz,D2O,298K,ppm):179.76,152.64,130.86,117.64,70.65,32.62。
实施例3
全羧酸钾盐柱[6]芳烃的合成：
取实施例1制备的全羧基柱[6]芳烃a
取全羧基柱[6]芳烃a 0.67～0.68g于50mL圆底烧瓶中，加入0.2～0.3g NaOH固体，30mL水，室温下搅拌反应12～13h。用1.0M～1.5M的盐酸溶液调节PH至6.5左右，减压旋干体系中的水，得白色固体，即为全羧基钠盐柱[6]芳烃(0.88～0.89g,产率为97～100％)。
本实施例制备的产品全羧基钠盐柱[5]芳烃的表征数据如下：
1H NMR(400MHz,D2O,298K,ppm):6.58(s,12H),4.08(s,24H),3.75(s,12H)；13CNMR(400MHz,D2O,298K,ppm):179.76,152.64,130.86,117.64,70.65,32.62。
实施例4
将全羧酸铵盐柱[6]芳烃与他莫昔芬以摩尔比为0.3:1混合，得到他莫昔芬组合物，所得他莫昔芬组合物在水中可溶解为澄清透明溶液，得到含主客体络合物WP6-T的水溶液。
实施例5
将全羧酸铵盐柱[6]芳烃与他莫昔芬以摩尔比为0.5:1混合，得到他莫昔芬组合物，所得他莫昔芬组合物在水中可溶解为澄清透明溶液，得到含主客体络合物WP6-T的水溶液。
实施例6
将全羧酸铵盐柱[6]芳烃与他莫昔芬以摩尔比为0.7:1混合，得到他莫昔芬组合物，所得他莫昔芬组合物在水中可溶解为澄清透明溶液，得到含主客体络合物WP6-T的水溶液。
实施例7
将全羧酸铵盐柱[6]芳烃与他莫昔芬以摩尔比为1:1混合，得到他莫昔芬组合物，所得他莫昔芬组合物在水中可溶解为澄清透明溶液，得到含主客体络合物WP6-T的水溶液。
实施例8
将全羧酸钠盐柱[6]芳烃与他莫昔芬以摩尔比为0.5:1混合，得到他莫昔芬组合物，所得他莫昔芬组合物在水中可溶解为澄清透明溶液。
实施例9
将全羧酸钾盐柱[6]芳烃与他莫昔芬以摩尔比为0.5:1混合，得到他莫昔芬组合物，所得他莫昔芬组合物在水中可溶解为澄清透明溶液。
实施例10
将全羧酸铵盐柱[6]芳烃与他莫昔芬以摩尔比为0.5:1混合，得到他莫昔芬组合物，粉碎过100目筛后，灌装胶囊。胶囊经辐照灭菌即制成他莫昔芬组合物胶囊。
实施例11
将全羧酸铵盐柱[6]芳烃与他莫昔芬以摩尔比为0.5:1混合，得到他莫昔芬组合物，粉碎过100目筛后，再将该药物组合物粉末与微晶纤维素以质量比为1：1混合充分，压片，包衣，制成片剂，片剂经辐照灭菌即制成他莫昔芬组合物片。

Claims (7)

1.一种他莫昔芬组合物，其特征在于，含有可增加他莫昔芬在水中溶解度的水溶性柱[6]芳烃，所述水溶性柱[6]芳烃为式(Ⅰ)～(Ⅲ)所示化合物中的至少一种，
2.根据权利要求1所述的他莫昔芬组合物，其特征在于，所述的他莫昔芬组合物由他莫昔芬与水溶性柱[6]芳烃以摩尔比为0.1～1:1组成。
3.根据权利要求2所述的他莫昔芬组合物，其特征在于，他莫昔芬与水溶性柱[6]芳烃的摩尔比为0.3～0.6：1。
4.根据权利要求1所述的他莫昔芬组合物，其特征在于，所述水溶性柱[6]芳烃为式(Ⅰ)所示的全羧酸铵盐柱[6]芳烃。
5.含权利要求1～4任一项所述的他莫昔芬组合物的制剂，其特征在于，由他莫昔芬组合物和药学上可接受的载体或其他药用活性成分组成。
6.根据权利要求5所述的制剂，其特征在于，所述制剂为固体制剂、半固体制剂或液体制剂。
7.根据权利要求6所述的制剂，其特征在于，所述制剂为片剂、胶囊剂、颗粒剂、散剂、输液、水针、粉针或口服液。
CN201710551985.0A 2017-07-07 2017-07-07 一种他莫昔芬组合物及其制剂 Pending CN107320735A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201710551985.0A CN107320735A (zh) 2017-07-07 2017-07-07 一种他莫昔芬组合物及其制剂

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201710551985.0A CN107320735A (zh) 2017-07-07 2017-07-07 一种他莫昔芬组合物及其制剂

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN107320735A true CN107320735A (zh) 2017-11-07

Family

ID=60196485

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201710551985.0A Pending CN107320735A (zh) 2017-07-07 2017-07-07 一种他莫昔芬组合物及其制剂

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN107320735A (zh)

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN109232614A (zh) * 2018-10-26 2019-01-18 四川理工学院 一种柱[5]芳烃-双杯[4]吡咯手性超分子、其制备方法及其应用
CN112608245A (zh) * 2020-12-11 2021-04-06 华南理工大学 一种阳离子型水溶性倾斜柱[6]芳烃及其合成方法

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102911071A (zh) * 2012-09-29 2013-02-06 上海大学 氨基酸与水溶性柱[5]芳烃超分子配合物及其制备方法
CN107213466A (zh) * 2016-03-22 2017-09-29 中国人民解放军军事医学科学院毒物药物研究所 一种柱芳烃类复合物、其制备方法、药物组合物和用途

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102911071A (zh) * 2012-09-29 2013-02-06 上海大学 氨基酸与水溶性柱[5]芳烃超分子配合物及其制备方法
CN107213466A (zh) * 2016-03-22 2017-09-29 中国人民解放军军事医学科学院毒物药物研究所 一种柱芳烃类复合物、其制备方法、药物组合物和用途

Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
GUOCAN YU ETAL: "A Pillararene-Based Ternary Drug-Delivery System with", 《SMALL》 *
YAMIN LIU ETAL: "Improved Solubility and Bioactivity of Camptothecin Family", 《ACS OMEGA》 *
喻国灿: ""基于柱芳烃主客体分子识别的超分子自组装及其相关应用"", 《中国博士学位论文全文数据库 工程科技Ⅰ辑》 *

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN109232614A (zh) * 2018-10-26 2019-01-18 四川理工学院 一种柱[5]芳烃-双杯[4]吡咯手性超分子、其制备方法及其应用
CN112608245A (zh) * 2020-12-11 2021-04-06 华南理工大学 一种阳离子型水溶性倾斜柱[6]芳烃及其合成方法

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN102382082B (zh) 一种炎琥宁化合物及其药物组合物
ES2693704T3 (es) Extracto rico en rutina de Uncaria elliptica y método de preparación
CN107417752A (zh) 一类具有抗癌活性的化合物及其制备方法和应用
CN106860465B (zh) 一种天麻素化合物及其制剂
CN102391336B (zh) 一种化合物、其制备方法及用途
CN101434635A (zh) 一类具抗肿瘤活性的水溶性酚性三萜化合物及其制备方法
CN107320735A (zh) 一种他莫昔芬组合物及其制剂
CN102796085B (zh) 香豆素三唑及其制备方法和用途
CN102816085B (zh) 碘海醇杂质的制备方法
CN107090082B (zh) 一种具有肿瘤组织还原敏感性的茄尼醇衍生物、其制备方法和应用
CN107056739B (zh) Bola型槲皮素衍生物及其制备方法和应用
CN102898433A (zh) 一种汉防己甲素的没食子酸盐、其药物组合物、其制备方法及其用途
CN111560044B (zh) 一种11-o-罗汉果醇肟醚衍生物及其制备方法
CN102344475A (zh) 一种灯盏花乙素衍生物及其制备方法和应用
CN105541859B (zh) 二氢呋喃并色满酮衍生物及其制备方法与医药用途
KR100406736B1 (ko) 나프토퀴논계 화합물을 포함하는 항암제
CN106317033A (zh) 一种水飞蓟宾23‑取代衍生物及其注射剂的制备方法和用途
CN104188980B (zh) 闭花木酮Cleistanone的O-(吗啉基)乙基衍生物、制备方法及其用途
CN103864642B (zh) 大黄酸衍生物及其合成方法和用途
CN111171015A (zh) 一种小檗碱-肉桂酸衍生物单晶体及其制备方法、应用
CN109675050A (zh) 以喜树碱为母核的类似物与非甾体抗炎药物的偶联物及其制备与应用
CN110128482A (zh) 一种具有肿瘤靶向的新型Pt(IV)配合物的制备方法及其应用
CN106967146A (zh) 齐墩果酸四唑衍生物及其制备方法和用途
CN104045598B (zh) 一种含芳胺结构的硫脲类化合物及其制备方法和应用
CN104095856B (zh) 闭花木酮Cleistanone的二乙胺衍生物在制备抗急性肾衰药物中的应用

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
RJ01 Rejection of invention patent application after publication
RJ01 Rejection of invention patent application after publication

Application publication date: 20171107