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CN106596968A - 一种检测尿微量白蛋白斑点金渗滤试剂盒及其应用 - Google Patents

一种检测尿微量白蛋白斑点金渗滤试剂盒及其应用 Download PDF

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CN106596968A
CN106596968A CN201611095552.0A CN201611095552A CN106596968A CN 106596968 A CN106596968 A CN 106596968A CN 201611095552 A CN201611095552 A CN 201611095552A CN 106596968 A CN106596968 A CN 106596968A
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刘志文
夏宣喜
梁伟业
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Guangdong Unity Biotechnology Co Ltd
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Abstract

本发明提供了一种检测尿微量白蛋白的斑点金渗滤试剂盒及其应用，包括：样本稀释液、洗涤液、胶体金标记人血清白蛋白抗体、尿微量白蛋白层析器和定标卡，所述样本稀释液包括Triton‑100、磷酸盐缓冲液溶液和Tris缓冲液溶液；所述洗涤液包括牛血清白蛋白、磷酸盐缓冲液溶液和Tris缓冲液溶液。与现有技术相比，由于胶体金颗粒的表面带负电荷，可以与尿微量白蛋白抗体蛋白分子的正电荷基团因静电作用形成牢固的结合，同时金颗粒又有高电子密度的特性，当被金颗粒标记的抗体与相应的抗原配体结合，金颗粒在抗体配体位点大量聚集时，便形成肉眼可见的红色斑点。本发明的尿微量白蛋白斑点金渗滤试剂盒具有检测时间短，精密度好，对仪器和环境的要求较低，便于临床推广应用等优点。

Description

一种检测尿微量白蛋白斑点金渗滤试剂盒及其应用
技术领域
本发明涉及医学检验技术领域，尤其涉及一种检测尿微量白蛋白斑点金渗滤试剂盒及其应用。
背景技术
白蛋白是一种血液中的正常蛋白质，但在生理条件下尿液中仅出现极少量白蛋白。微量白蛋白尿反映肾脏异常蛋白质渗漏。人体代谢正常情况下，尿中的白蛋白极少，具体到每升尿白蛋白不超过20mg(<20mg/L)，所以叫微量白蛋白。如果在体检后发现尿中的微量白蛋白在20mg/L-200mg/L范围内，就属于微量白蛋白尿。临床中，通常应用尿微量蛋白指标来监测肾脏疾病的发生。
尿微量蛋白的检测是早期发现肾病最敏感、最可靠的诊断指标之一。通过尿微量白蛋白的数值，结合发病情况、症状以及病史陈述就可以较为准确的诊断病情和判断病程。通过规范治疗肾脏后，肾单位得以修复，尿液中白蛋白的量恢复正常水平，所以尿微量白蛋白可作为肾脏疾病预后的一个指标。
尿微量白蛋白检测技术主要有免疫比浊法、胶体金法、酶联免疫法等。免疫比浊法相对操作较为繁琐且在高浓度抗原存在的情况下易出现钩状效应，从而影响测量的结果；同时其不适宜小批量包装，限制了其在基层医院的推广。胶体金法测试时间较长，精密度较差，且容易受环境条件的影响。酶联免疫法则操作极为繁琐且对操作者要求较高，检测耗时久，限制了其在临床中的推广应用。
发明内容
本发明解决的技术问题在于提供一种检测尿微量白蛋白斑点金渗滤试剂盒及其应用，具有检测时间短、精密度好的特点。
有鉴于此，本发明提供了一种检测尿微量白蛋白的斑点金渗滤试剂盒，包括：pH值为6.5～6.7的样本稀释液、pH值为6.2～6.4的洗涤液、胶体金标记人血清白蛋白抗体、尿微量白蛋白层析器和定标卡，所述样本稀释液包括Triton-100、磷酸盐缓冲液溶液和Tris缓冲液溶液；所述洗涤液包括牛血清白蛋白、磷酸盐缓冲液溶液和Tris缓冲液溶液。
优选的，所述样本稀释液中Triton-100的浓度为0.1～10％，磷酸盐缓冲液溶液的浓度为0.005～1mol/L，Tris缓冲液溶液的浓度为0.01～1mol/L；所述洗涤液中牛血清白蛋白的浓度为0.1～10％，磷酸盐缓冲液溶液的浓度为0.01mol/L，Tris缓冲液溶液的浓度为0.01～1mol/L。
优选的，所述磷酸盐缓冲液溶液由以下原料配制：Na2HPO4 0.263-0.376重量份、KH2PO4 1.109-1.000重量份、NaCl 6重量份、KCl 0.2重量份、蒸馏水1000重量份、牛血清白蛋白7重量份；所述Tris缓冲液溶液由三羟甲基氨基甲烷4.6-5.5重量份、KH2PO4 3.0-2.1重量份、NaCl 8重量份、KCl 0.3重量份、蒸馏水1200重量份、牛血清白蛋白9重量份配制而成。
优选的，所述胶体金标记人血清白蛋白抗体按照如下方法制备：将质量分数为1％的氯金酸与双蒸水按体积比1：79配成A液；将质量分数为1％的柠檬酸三钠、质量分数为1％的鞣酸、25mM K2CO3与双蒸水按体积比4：0.035～0.080：0.035～0.080：15.84～15.93配成B液；将所述A液和B液在水浴内同时加热至59～61℃，搅拌A液，快速加入B液中，继续搅拌1分钟，在10～13分钟内加热至沸腾，得到胶体金液；利用0.25M K2CO3调整所述胶体金液pH值为6.8～7.1；将人血清白蛋白抗体原液在4℃下以6000～13000r/min速度离心60分钟，吸取上清液；将所述上清液装入透析袋，用双蒸水透析去除盐分后，装瓶冷冻，得到人血清白蛋白抗体；将所述人血清白蛋白抗体缓慢加入所述胶体金液中进行标记，所述人血清白蛋白抗体与所述胶体金液的质量体积比为0.27～0.30mg：100ml，搅拌15分钟后，依次加入1～30％迭氮钠和0.1～10％牛血清白蛋白，所述迭氮钠、牛血清白蛋白与所述胶体金液的体积比为500μl：100μl：100ml，搅匀后在2.5～4.0℃，6000r/min条件下离心30分钟，去除上清液，沉淀物即胶体金标记人血清白蛋白抗体。
优选的，所述柠檬酸三钠、鞣酸、K2CO3与双蒸水的体积比为4：0.08：0.08：15.84，所述胶体金液中形成直径为10＜D＜11nm的胶体金颗粒。
优选的，所述尿微量白蛋白层析器内设置有直径为2.8cm的反应盒，所述反应盒包括盒底和盒盖，所述盒盖顶面中央设置有一个上表面直径为0.56cm，下表面直径为0.27cm的小圆孔；所述反应盒内垫满吸水材料；在所述小圆孔下方和所述吸水材料上方之间放置一张1.18×1.18cm的包被人血清白蛋白抗体的硝酸纤维素膜。
优选的，所述包被人血清白蛋白抗体的硝酸纤维素膜按照以下步骤制备：将人血清白蛋白包被抗体原液在4℃下以6000～13000r/min速度离心60分钟，吸取上清液；将所述上清液装入透析袋，用双蒸水透析去除盐分，超滤浓缩后装瓶冷冻，得到人血清白蛋白抗体；用磷酸盐缓冲液溶液和Tris缓冲液溶液稀释所述人血清白蛋白抗体，得到0.8mg/ml的包被液；将所述包被液滴加至裁切好的硝酸纤维素膜上，每张膜片0.02ml，将膜片置于烘箱中干燥后得到包被人血清白蛋白抗体的硝酸纤维素膜。
优选的，所述定标卡为人血清白蛋白梯度质量浓度溶液所检测颜色相对应的检测信号值。根据检测试纸显示的信号值，与定标卡信号值比对，即可定量判定其质量浓度。
优选的，所述梯度质量浓度分别为5mg/L、10mg/L、20mg/L、40mg/L、80mg/L、120mg/L、200mg/L，并且该梯度质量浓度检测的信号与定标卡相对应。
相应的，本发明还提供一种检测尿微量白蛋白的斑点金渗滤试剂盒的应用，包括以下步骤：采集中段尿液，室温放置15min-2h，以3000r/min速度离心30min，吸取上清液至样本稀释液中混匀，得到待测样本；利用移液器准确吸取待检测样本，点在反应盒圆孔内硝酸纤维素膜面上；待检测样本渗入后，向反应盒膜面滴加胶体金标记人血清白蛋白抗体，所述胶体金标记人血清白蛋白抗体与所述检测样本的体积比为1：1；待胶体金标记人血清白蛋白抗体渗入后，向反应盒膜面上滴加洗涤液，所述洗涤液与所述检测样本的体积比为1：1；观察反应盒膜面，待洗涤液完全渗入膜面后，检测尿微量白蛋白层析器信号值，通过仪器结合定标卡信息计算检测样本尿微量白蛋白浓度，定量判定其质量浓度。
本发明提供了一种检测尿微量白蛋白的斑点金渗滤试剂盒及其应用，包括：pH值为6.5～6.7的样本稀释液、pH值为6.2～6.4的洗涤液、胶体金标记人血清白蛋白抗体、尿微量白蛋白层析器和定标卡，所述样本稀释液包括Triton-100、磷酸盐缓冲液溶液和Tris缓冲液溶液和；所述洗涤液包括牛血清白蛋白和磷酸盐缓冲液溶液和Tris缓冲液溶液。与现有技术相比，由于胶体金颗粒的表面带负电荷，可以与尿微量白蛋白抗体蛋白分子的正电荷基团因静电作用形成牢固的结合，同时金颗粒又有高电子密度的特性，当被金颗粒标记的抗体与相应的抗原配体结合，金颗粒在抗体配体位点大量聚集时，便形成肉眼可见的红色斑点。本发明的尿微量白蛋白斑点金渗滤试剂盒具有检测时间短，精密度好，对仪器和环境的要求较低，便于临床推广应用等优点。
具体实施方式
为了进一步理解本发明，下面结合实施例对本发明优选实施方案进行描述，但是应当理解，这些描述只是为进一步说明本发明的特征和优点，而不是对本发明权利要求的限制。
本发明实施例公开了一种检测尿微量白蛋白的斑点金渗滤试剂盒，包括：pH值为6.5～6.7的样本稀释液、pH值为6.2～6.4的洗涤液、胶体金标记人血清白蛋白抗体、尿微量白蛋白层析器和定标卡，所述样本稀释液包括Triton-100、磷酸盐缓冲液溶液和Tris缓冲液溶液；所述洗涤液包括牛血清白蛋白、磷酸盐缓冲液溶液和Tris缓冲液溶液。
斑点免疫金渗滤法是让待测样本垂直渗滤过微孔膜(例如：硝酸纤维素膜)，被膜上包被的捕获探针捕获，再以同样方式让胶体金标探针渗滤过微孔膜，与被捕获的配体结合后聚集形成肉眼可见的红色斑点。本发明斑点金标免疫渗滤法以亲和层析原理为基础，采用硝酸纤维素膜为固相载体，以吸附在硝酸纤维素上的抗体为固相，以人血中抗原以及抗体标记胶体金为液相，并同时以抗体标记胶体金作为探针和指示剂，而建立起来一种新型的免疫检测方法。其中胶体金颗粒的表面带负电荷与尿微量白蛋白抗体蛋白分子的正电荷基团因静电作用形成牢固的结合，同时金颗粒又有高电子密度的特性，当被金颗粒标记的抗体与相应的抗原配体结合，金颗粒在抗体配体位点大量聚集时，便形成肉眼可见的红色斑点。
作为优选方案，所述样本稀释液中Triton-100的浓度为0.1～10％，磷酸盐缓冲液溶液的浓度为0.005～1mol/L，Tris缓冲液溶液的浓度为0.01～1mol/L；所述洗涤液中牛血清白蛋白的浓度为0.1～10％，磷酸盐缓冲液溶液的浓度为0.005～1mol/L，Tris缓冲液溶液的浓度为0.01～1mol/L。所述磷酸盐缓冲液溶液优选由以下原料配制：Na2HPO4 0.263-0.376重量份、KH2PO4 1.109-1.000重量份、NaCl 6重量份、KCl 0.2重量份、蒸馏水1000重量份、牛血清白蛋白7重量份；所述Tris缓冲液溶液由三羟甲基氨基甲烷4.6-5.5重量份、KH2PO4 3.0-2.1重量份、NaCl 8重量份、KCl 0.3重量份、蒸馏水1200重量份、牛血清白蛋白9重量份配制而成。
作为优选方案，所述胶体金标记人血清白蛋白抗体按照如下方法制备：将质量分数为1％的氯金酸与双蒸水按体积比1：79配成A液；将质量分数为1％的柠檬酸三钠、质量分数为1％的鞣酸、25mM K2CO3与双蒸水按体积比4：0.035～0.080：0.035～0.080：15.84～15.93配成B液；将所述A液和B液在水浴内同时加热至59～61℃，搅拌A液，快速加入B液中，继续搅拌1分钟，在10～13分钟内加热至沸腾，得到胶体金液；利用0.25M K2CO3调整所述胶体金液pH值为6.8～7.1；将人血清白蛋白抗体原液在4℃下以6000～13000r/min速度离心60分钟，吸取上清液；将所述上清液装入透析袋，用双蒸水透析去除盐分后，装瓶冷冻，得到人血清白蛋白抗体；将所述人血清白蛋白抗体缓慢加入所述胶体金液中进行标记，所述人血清白蛋白抗体与所述胶体金液的质量体积比为0.27～0.30mg：100ml，搅拌15分钟后，依次加入1～30％迭氮钠和0.1～10％牛血清白蛋白，所述迭氮钠、牛血清白蛋白与所述胶体金液的体积比为500μl：100μl：100ml，搅匀后在2.5～4.0℃，6000r/min条件下离心30分钟，去除上清液，沉淀物即胶体金标记人血清白蛋白抗体。
作为优选方案，将质量分数为1％的柠檬酸三钠、质量分数为1％的鞣酸、25mMK2CO3与双蒸水按体积比4：0.08：0.08：15.84配成B液，所述胶体金液中形成直径为10＜D＜11nm的胶体金颗粒。
作为优选方案，所述尿微量白蛋白层析器内设置有直径为2.8cm的反应盒，所述反应盒包括盒底和盒盖，所述盒盖顶面中央设置有一个上表面直径为0.56cm，下表面直径为0.27cm的小圆孔；所述反应盒内垫满吸水材料；在所述小圆孔下方和所述吸水材料上方之间放置一张1.18×1.18cm的包被人血清白蛋白抗体的硝酸纤维素膜，合紧盒盖即组成反应盒。可避免大部分待测样本和标记探针从斑点以外的非相关区域流失，影响检测灵敏度，可以使得该技术在临床检验中广泛使用。
作为优选方案，所述包被人血清白蛋白抗体的硝酸纤维素膜按以下步骤制备：将人血清白蛋白包被抗体原液在4℃下以6000～13000r/min速度离心60分钟，吸取上清液；将所述上清液装入透析袋，用双蒸水透析去除盐分，超滤浓缩后装瓶冷冻，得到人血清白蛋白抗体；用磷酸盐缓冲液溶液和Tris缓冲液溶液稀释所述人血清白蛋白抗体，得到0.8mg/ml的包被液；将所述包被液滴加至裁切好的硝酸纤维素膜上，每张膜片0.02ml，将膜片置于烘箱中干燥后得到包被人血清白蛋白抗体的硝酸纤维素膜。
作为优选方案，所述定标卡为人血清白蛋白梯度质量浓度溶液所检测颜色相对应的检测信号值。所述梯度质量浓度分别优选为5mg/L、10mg/L、20mg/L、40mg/L、80mg/L、120mg/L、200mg/L。
相应的，本发明还提供一种检测尿微量白蛋白斑点金渗滤试剂盒的应用，包括以下步骤：采集中段尿液，室温放置15min-2h，以3000r/min速度离心30min，吸取上清液至样本稀释液中混匀，得到待测样本；利用移液器准确吸取待检测样本，点在反应盒圆孔内硝酸纤维素膜面上；待检测样本渗入后，向反应盒膜面滴加胶体金标记人血清白蛋白抗体，所述胶体金标记人血清白蛋白抗体与所述检测样本的体积比为1：1；待胶体金标记人血清白蛋白抗体渗入后，向反应盒膜面上滴加洗涤液，所述洗涤液与所述检测样本的体积比为1：1；观察反应盒膜面，待洗涤液完全渗入膜面后，检测尿微量白蛋白层析器信号值，通过仪器结合定标卡信息计算检测样本尿微量白蛋白浓度，定量判定其质量浓度。
从以上方案可以看出，本发明简单便捷，根据尿微量白蛋白层析器显示的颜色，与对应批次定标信息，即可定量待检测物质的质量浓度。
为了进一步理解本发明，下面结合实施例对本发明提供的技术方案进行详细说明，本发明的保护范围不受以下实施例的限制。
本发明实施例采用的原料和化学试剂均为市购。
实施例1
一种检测尿微量白蛋白的斑点金渗滤试剂盒，包括：pH值为6.6的样本稀释液、pH值为6.3的洗涤液、胶体金标记人血清白蛋白抗体、尿微量白蛋白层析器和定标卡，所述样本稀释液包括Triton-100、磷酸盐缓冲液溶液和Tris缓冲液溶液；所述洗涤液包括牛血清白蛋白、磷酸盐缓冲液溶液和Tris缓冲液溶液。所述样本稀释液中Triton-100的浓度为5.6％，磷酸盐缓冲液溶液的浓度为0.58mol/L，Tris缓冲液溶液的浓度为0.55mol/L；所述洗涤液中牛血清白蛋白的浓度为0.47％，磷酸盐缓冲液溶液的浓度为0.49mol/L，Tris缓冲液溶液的浓度为0.52mol/L。所述磷酸盐缓冲液溶液优选由以下原料配制：Na2HPO4 0.313重量份、KH2PO4 1.05重量份、NaCl 6重量份、KCl 0.2重量份、蒸馏水1000重量份、牛血清白蛋白7重量份；所述Tris缓冲液溶液由三羟甲基氨基甲烷4.9重量份、KH2PO4 2.45重量份、NaCl8重量份、KCl 0.3重量份、蒸馏水1200重量份、牛血清白蛋白9重量份配制而成。
所述尿微量白蛋白层析器内设置有直径为2.8cm的反应盒，所述反应盒包括盒底和盒盖，所述盒盖顶面中央设置有一个上表面直径为0.56cm，下表面直径为0.27cm的小圆孔；所述反应盒内垫满吸水材料；在所述小圆孔下方和所述吸水材料上方之间放置一张1.18×1.18cm的包被人血清白蛋白抗体的硝酸纤维素膜，合紧盒盖即组成反应盒。
所述包被有人血清白蛋白抗体的硝酸纤维素膜按以下步骤制备而成：
(1)抗体的纯化，人血清白蛋白包被抗体的纯化与透析，将抗体原液在4℃下9500r/min离心60分钟，吸取上清液即为人血清白蛋白抗体；将该抗体装入透析袋，用双蒸水透析去除盐分后，超滤浓缩后装瓶冷冻，备用；(2)用磷酸盐缓冲液溶液和Tris缓冲液溶液稀释上述抗体至0.8mg/ml为包被液；(3)将包被液滴加至裁切好的硝酸纤维素膜上，每张膜片0.02ml，将膜片置于烘箱中干燥后即制成包被有人血清白蛋白抗体的硝酸纤维素膜。
所述胶体金标记人血清白蛋白抗体按以下步骤制备而成：(1)胶体金的制备以质量分数分别为1％氯金酸、1％柠檬酸三钠、1％鞣酸、25mM K2CO3及双蒸水为原料，先将1％氯金酸与双蒸水按体积1：79配成A液；将1％柠檬酸三钠、1％鞣酸、25mMK2CO3与双蒸水按体积4：0.055：0.051：15.88配成B液；再将A液、B液在水浴内同时加热到60.5℃，搅拌A液，快速加入B液，继续搅拌1分钟，在11分钟30秒内加热至沸腾，制成颗粒直径10.2nm的胶体金，该胶体金液颜色由黑→蓝→紫→红色时即成；(2)胶体金pH值的调整将步骤(1)胶体金液用0.25M K2CO3调整pH值为6.98后备用；(3)人血清白蛋白抗体的制备与透析，将抗体在4℃下9500r/min离心60分钟，吸取上清液即为人血清白蛋白抗体；将该抗体装入透析袋，用双蒸水透析去除盐分后，装瓶冷冻，备用；(4)胶体金标记人血清白蛋白抗体，将步骤(3)人血清白蛋白抗体0.288mg，缓慢加入步骤(2)制备的100ml胶体金液中进行包被，搅拌15分钟后，依次加入10％迭氮钠500μl、1％牛血清白蛋白100μl，搅匀后在3.3℃，6000r/min条件下离心30分钟，去除上清液，即成胶体金标记的人血清白蛋白抗体。
一种检测尿微量白蛋白斑点金渗滤试剂盒定量检测方法，按以下步骤操作：(1)待检人尿液的采集：用离心管收集中段尿样，混匀，置室温放置50min，3000r/min离心30min，吸取上清液25μL于样本稀释液中，混匀即为检测样本；(2)检测样本加样：用移液器准确吸取25μL检测样本，点在反应盒圆孔内硝酸纤维素膜面上；(3)滴加胶体金标记人血清白蛋白抗体：待检测样本渗入后，再往反应盒膜面滴加25μL胶体金标记人血清白蛋白抗体；(4)待胶体金标记人血清白蛋白抗体渗入后，再往反应盒膜面上滴加25μL洗涤液；(5)检测并记录结果：观察反应盒膜面，待洗涤液完全渗入膜面后，检测尿微量白蛋白层析器信号值，通过仪器结合定标卡信息计算检测样本尿微量白蛋白浓度，即可定量判定其质量浓度。
实施例2
一种检测尿微量白蛋白的斑点金渗滤试剂盒，包括：pH值为6.5的样本稀释液、pH值为6.2的洗涤液、胶体金标记人血清白蛋白抗体、尿微量白蛋白层析器和定标卡，所述样本稀释液包括Triton-100、磷酸盐缓冲液溶液和Tris缓冲液溶液；所述洗涤液包括牛血清白蛋白、磷酸盐缓冲液溶液和Tris缓冲液溶液。所述样本稀释液中Triton-100的浓度为0.％，磷酸盐缓冲液溶液的浓度为0.05mol/L，Tris缓冲液溶液的浓度为0.01mol/L；所述洗涤液中牛血清白蛋白的浓度为0.1％，磷酸盐缓冲液溶液的浓度为0.005mol/L，Tris缓冲液溶液的浓度为0.01mol/L。所述磷酸盐缓冲液溶液优选由以下原料配制：Na2HPO4 0.263重量份、KH2PO4 1.0重量份、NaCl 6重量份、KCl 0.2重量份、蒸馏水1000重量份、牛血清白蛋白7重量份；所述Tris缓冲液溶液由三羟甲基氨基甲烷4.6重量份、KH2PO4 2.1重量份、NaCl 8重量份、KCl 0.3重量份、蒸馏水1200重量份、牛血清白蛋白9重量份配制而成。
所述尿微量白蛋白层析器内设置有直径为2.8cm的反应盒，所述反应盒包括盒底和盒盖，所述盒盖顶面中央设置有一个上表面直径为0.56cm，下表面直径为0.27cm的小圆孔；所述反应盒内垫满吸水材料；在所述小圆孔下方和所述吸水材料上方之间放置一张1.18×1.18cm的包被人血清白蛋白抗体的硝酸纤维素膜，合紧盒盖即组成反应盒。
所述包被有人血清白蛋白抗体的硝酸纤维素膜按以下步骤制备而成：
(1)抗体的纯化，人血清白蛋白包被抗体的纯化与透析，将抗体原液在4℃下6000r/min离心60分钟，吸取上清液即为人血清白蛋白抗体；将该抗体装入透析袋，用双蒸水透析去除盐分后，超滤浓缩后装瓶冷冻，备用；(2)用磷酸盐缓冲液溶液和Tris缓冲液溶液稀释上述抗体至0.8mg/ml为包被液；(3)将包被液滴加至裁切好的硝酸纤维素膜上，每张膜片0.02ml，将膜片置于烘箱中干燥后即制成包被有人血清白蛋白抗体的硝酸纤维素膜。
所述胶体金标记人血清白蛋白抗体按以下步骤制备而成：(1)胶体金的制备以质量分数分别为1％氯金酸、1％柠檬酸三钠、1％鞣酸、25mM K2CO3及双蒸水为原料，先将1％氯金酸与双蒸水按体积1：79配成A液；将1％柠檬酸三钠、1％鞣酸、25mMK2CO3与双蒸水按体积4：0.035：0.035：15.84配成B液；再将A液、B液在水浴内同时加热到59℃，搅拌A液，快速加入B液，继续搅拌1分钟，在10分钟内加热至沸腾，制成颗粒直径8nm的胶体金，该胶体金液颜色由黑→蓝→紫→红色时即成；(2)胶体金pH值的调整将步骤(1)胶体金液用0.25M K2CO3调整pH值为6.8后备用；(3)人血清白蛋白抗体的制备与透析，将抗体在4℃下6000r/min离心60分钟，吸取上清液即为人血清白蛋白抗体；将该抗体装入透析袋，用双蒸水透析去除盐分后，装瓶冷冻，备用；(4)胶体金标记人血清白蛋白抗体，将步骤(3)人血清白蛋白抗体0.27mg，缓慢加入步骤(2)制备的100ml胶体金液中进行包被，搅拌15分钟后，依次加入10％迭氮钠500μl、1％牛血清白蛋白100μl，搅匀后在2.5℃，4600r/min条件下离心45分钟，去除上清液，即成胶体金标记的人血清白蛋白抗体。
一种检测尿微量白蛋白斑点金渗滤试剂盒定量检测方法，按以下步骤操作：(1)待检人尿液的采集：用离心管收集中段尿样，混匀，置室温放置15min，2000r/min离心45min，吸取上清液25μL于样本稀释液中，混匀即为检测样本；(2)检测样本加样：用移液器准确吸取25μL检测样本，点在反应盒圆孔内硝酸纤维素膜面上；(3)滴加胶体金标记人血清白蛋白抗体：待检测样本渗入后，再往反应盒膜面滴加25μL胶体金标记人血清白蛋白抗体；(4)待胶体金标记人血清白蛋白抗体渗入后，再往反应盒膜面上滴加25μL洗涤液；(5)检测并记录结果：观察反应盒膜面，待洗涤液完全渗入膜面后，检测尿微量白蛋白层析器信号值，通过仪器结合定标卡信息计算检测样本尿微量白蛋白浓度，即可定量判定其质量浓度。
实施例3
一种检测尿微量白蛋白的斑点金渗滤试剂盒，包括：pH值为6.7的样本稀释液、pH值为6.4的洗涤液、胶体金标记人血清白蛋白抗体、尿微量白蛋白层析器和定标卡，所述样本稀释液包括Triton-100、磷酸盐缓冲液溶液和Tris缓冲液溶液；所述洗涤液包括牛血清白蛋白、磷酸盐缓冲液溶液和Tris缓冲液溶液。所述样本稀释液中Triton-100的浓度为10％，磷酸盐缓冲液溶液的浓度为1mol/L，Tris缓冲液溶液的浓度为1mol/L；所述洗涤液中牛血清白蛋白的浓度为10％，磷酸盐缓冲液溶液的浓度为1mol/L，Tris缓冲液溶液的浓度为1mol/L。所述磷酸盐缓冲液溶液优选由以下原料配制：Na2HPO4 0.376重量份、KH2PO41.109重量份、NaCl 6重量份、KCl 0.2重量份、蒸馏水1000重量份、牛血清白蛋白7重量份；所述Tris缓冲液溶液由三羟甲基氨基甲烷5.5重量份、KH2PO4 3.0重量份、NaCl 8重量份、KCl 0.3重量份、蒸馏水1200重量份、牛血清白蛋白9重量份配制而成。
所述尿微量白蛋白层析器内设置有直径为2.8cm的反应盒，所述反应盒包括盒底和盒盖，所述盒盖顶面中央设置有一个上表面直径为0.56cm，下表面直径为0.27cm的小圆孔；所述反应盒内垫满吸水材料；在所述小圆孔下方和所述吸水材料上方之间放置一张1.18×1.18cm的包被人血清白蛋白抗体的硝酸纤维素膜，合紧盒盖即组成反应盒。
所述包被有人血清白蛋白抗体的硝酸纤维素膜按以下步骤制备而成：
(1)抗体的纯化，人血清白蛋白包被抗体的纯化与透析，将抗体原液在4℃下13000r/min离心60分钟，吸取上清液即为人血清白蛋白抗体；将该抗体装入透析袋，用双蒸水透析去除盐分后，超滤浓缩后装瓶冷冻，备用；(2)用磷酸盐缓冲液溶液和Tris缓冲液溶液稀释上述抗体至0.8mg/ml为包被液；(3)将包被液滴加至裁切好的硝酸纤维素膜上，每张膜片0.02ml，将膜片置于烘箱中干燥后即制成包被有人血清白蛋白抗体的硝酸纤维素膜。
所述胶体金标记人血清白蛋白抗体按以下步骤制备而成：(1)胶体金的制备以质量分数分别为1％氯金酸、1％柠檬酸三钠、1％鞣酸、25mM K2CO3及双蒸水为原料，先将1％氯金酸与双蒸水按体积1：79配成A液；将1％柠檬酸三钠、1％鞣酸、25mMK2CO3与双蒸水按体积4：0.08：0.08：15.93配成B液；再将A液、B液在水浴内同时加热到61℃，搅拌A液，快速加入B液，继续搅拌1分钟，在13分钟内加热至沸腾，制成颗粒直径12nm的胶体金，该胶体金液颜色由黑→蓝→紫→红色时即成；(2)胶体金pH值的调整将步骤(1)胶体金液用0.25M K2CO3调整pH值为7.1后备用；(3)人血清白蛋白抗体的制备与透析，将抗体在4℃下13000r/min离心60分钟，吸取上清液即为人血清白蛋白抗体；将该抗体装入透析袋，用双蒸水透析去除盐分后，装瓶冷冻，备用；(4)胶体金标记人血清白蛋白抗体，将步骤(3)人血清白蛋白抗体0.30mg，缓慢加入步骤(2)制备的100ml胶体金液中进行包被，搅拌15分钟后，依次加入10％迭氮钠500μl、1％牛血清白蛋白100μl，搅匀后在4.0℃，8000r/min条件下离心19分钟，去除上清液，即成胶体金标记的人血清白蛋白抗体。
一种检测尿微量白蛋白斑点金渗滤试剂盒定量检测方法，按以下步骤操作：(1)待检人尿液的采集：用离心管收集中段尿样，混匀，置室温放置2h，4000r/min离心20min，吸取上清液25μL于样本稀释液中，混匀即为检测样本；(2)检测样本加样：用移液器准确吸取25μL检测样本，点在反应盒圆孔内硝酸纤维素膜面上；(3)滴加胶体金标记人血清白蛋白抗体：待检测样本渗入后，再往反应盒膜面滴加25μL胶体金标记人血清白蛋白抗体；(4)待胶体金标记人血清白蛋白抗体渗入后，再往反应盒膜面上滴加25μL洗涤液；(5)检测并记录结果：观察反应盒膜面，待洗涤液完全渗入膜面后，检测尿微量白蛋白层析器信号值，通过仪器结合定标卡信息计算检测样本尿微量白蛋白浓度，即可定量判定其质量浓度。
上实施方式和实施例均需根据具体情况适度调节温度和蒸馏水的使用量，本说明只是用于帮助理解本发明的方法及其核心思想。应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以对本发明进行若干改进和修饰，这些改进和修饰也落入本发明权利要求的保护范围内。
对所公开的实施例的上述说明，使本领域专业技术人员能够实现或使用本发明。对这些实施例的多种修改对本领域的专业技术人员来说将是显而易见的，本文中所定义的一般原理可以在不脱离本发明的精神或范围的情况下，在其它实施例中实现。因此，本发明将不会被限制于本文所示的这些实施例，而是要符合与本文所公开的原理和新颖特点相一致的最宽的范围。

Claims (10)

1.一种检测尿微量白蛋白的斑点金渗滤试剂盒，其特征在于，包括：
pH值为6.5～6.7的样本稀释液、pH值为6.2～6.4的洗涤液、胶体金标记人血清白蛋白抗体、尿微量白蛋白层析器和定标卡，
所述样本稀释液包括Triton-100、磷酸盐缓冲液溶液和Tris缓冲液溶液；
所述洗涤液包括牛血清白蛋白、磷酸盐缓冲液溶液和Tris缓冲液溶液。
2.根据权利要求1所述的斑点金渗滤试剂盒，其特征在于，
所述样本稀释液中Triton-100的浓度为0.1～10％，磷酸盐缓冲液溶液的浓度为0.005～1mol/L，Tris缓冲液溶液的浓度为0.01～1mol/L；
所述洗涤液中牛血清白蛋白的浓度为0.1～10％，磷酸盐缓冲液溶液的浓度为0.005～1mol/L，Tris缓冲液溶液的浓度为0.01～1mol/L。
3.根据权利要求1所述的斑点金渗滤试剂盒，其特征在于，所述磷酸盐缓冲液溶液由以下原料配制：Na2HPO4 0.263-0.376重量份、KH2PO4 1.109-1.000重量份、NaCl 6重量份、KCl0.2重量份、蒸馏水1000重量份、牛血清白蛋白7重量份；所述Tris缓冲液溶液由三羟甲基氨基甲烷4.6-5.5重量份、KH2PO4 3.0-2.1重量份、NaCl 8重量份、KCl 0.3重量份、蒸馏水1200重量份、牛血清白蛋白9重量份配制而成。
4.根据权利要求1所述的斑点金渗滤试剂盒，其特征在于，所述胶体金标记人血清白蛋白抗体按照如下方法制备：
将质量份数为1％的氯金酸与双蒸水按体积比1：79配成A液；将质量份数为1％的柠檬酸三钠、质量份数为1％的鞣酸、25mM K2CO3与双蒸水按体积比4：0.035～0.080：0.035～0.080：15.84～15.93配成B液；将所述A液和B液在水浴内同时加热至59～61℃，搅拌A液，快速加入B液中，继续搅拌1分钟，在10～13分钟内加热至沸腾，得到胶体金液；
利用0.25M K2CO3调整所述胶体金液pH值为6.8～7.1；
将人血清白蛋白抗体原液在4℃下以6000～13000r/min速度离心60分钟，吸取上清液；将所述上清液装入透析袋，用双蒸水透析去除盐分后，装瓶冷冻，得到人血清白蛋白抗体；
将所述人血清白蛋白抗体缓慢加入所述胶体金液中进行标记，所述人血清白蛋白抗体与所述胶体金液的质量体积比为0.27～0.30mg：100ml，搅拌15分钟后，依次加入1～30％迭氮钠和0.1～10％牛血清白蛋白，所述迭氮钠、牛血清白蛋白与所述胶体金液的体积比为500μl：100μl：100ml，搅匀后在2.5～4.0℃，6000r/min条件下离心30分钟，去除上清液，沉淀物即胶体金标记人血清白蛋白抗体。
5.根据权利要求4所述的斑点金渗滤试剂盒，其特征在于，所述柠檬酸三钠、鞣酸、K2CO3与双蒸水的体积比为4：0.08：0.08：15.84，所述胶体金液中形成直径为10＜D＜11nm的胶体金颗粒。
6.根据权利要求1所述的斑点金渗滤试剂盒，其特征在于，所述尿微量白蛋白层析器内设置有直径为2.8cm的反应盒，所述反应盒包括盒底和盒盖，所述盒盖顶面中央设置有一个上表面直径为0.56cm，下表面直径为0.27cm的小圆孔；所述反应盒内垫满吸水材料；在所述小圆孔下方和所述吸水材料上方之间放置一张1.18×1.18cm的包被人血清白蛋白抗体的硝酸纤维素膜。
7.根据权利要求6所述的斑点金渗滤试剂盒，其特征在于，所述包被人血清白蛋白抗体的硝酸纤维素膜按照以下步骤制备：
将人血清白蛋白包被抗体原液在4℃下以6000～13000r/min速度离心60分钟，吸取上清液；
将所述上清液装入透析袋，用双蒸水透析去除盐分，超滤浓缩后装瓶冷冻，得到人血清白蛋白抗体；
用磷酸盐缓冲液溶液和Tris缓冲液溶液稀释所述人血清白蛋白抗体，得到0.8mg/ml的包被液；
将所述包被液滴加至裁切好的硝酸纤维素膜上，每张膜片0.02ml，将膜片置于烘箱中干燥后得到包被人血清白蛋白抗体的硝酸纤维素膜。
8.根据权利要求1所述的斑点金渗滤试剂盒，其特征在于，所述定标卡为人血清白蛋白梯度质量浓度溶液所检测颜色相对应的检测信号值。
9.根据权利要求8所述的斑点金渗滤试剂盒，其特征在于，所述梯度质量浓度分别为5mg/L、10mg/L、20mg/L、40mg/L、80mg/L、120mg/L、200mg/L。
10.一种检测尿微量白蛋白的斑点金渗滤试剂盒的应用，其特征在于，包括以下步骤：
采集中段尿液，室温放置15min-2h，以3000r/min速度离心30min，吸取上清液至样本稀释液中混匀，得到待测样本；
利用移液器准确吸取待检测样本，点在反应盒圆孔内硝酸纤维素膜面上；
待检测样本渗入后，向反应盒膜面滴加胶体金标记人血清白蛋白抗体，所述胶体金标记人血清白蛋白抗体与所述检测样本的体积比为1：1；
待胶体金标记人血清白蛋白抗体渗入后，向反应盒膜面上滴加洗涤液，所述洗涤液与所述检测样本的体积比为1：1；
观察反应盒膜面，待洗涤液完全渗入膜面后，检测尿微量白蛋白层析器信号值，通过仪器结合定标卡信息计算检测样本尿微量白蛋白浓度，定量判定其质量浓度。
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Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN108303550A (zh) * 2018-02-09 2018-07-20 广东优尼德生物科技有限公司 一种检测脂联素的斑点金渗滤试剂盒及其定量检测方法
CN113009150A (zh) * 2021-02-20 2021-06-22 北京华科泰生物技术股份有限公司 用于收集汗液中尿微量白蛋白的浓缩装置及包括其的检测试剂盒及其应用

Families Citing this family (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN112485449A (zh) * 2020-11-23 2021-03-12 爱若维生物科技(苏州)有限公司 一种检测猫saa的斑点免疫金渗滤试剂盒及半定量检测方法
CN113588610B (zh) * 2021-07-21 2024-02-02 重庆创芯生物科技有限公司 用于提高免疫荧光检测灵敏度的过滤膜前处理液及其制备方法与应用

Citations (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1664585A (zh) * 2005-02-07 2005-09-07 浙江省医学科学院 家畜血吸虫抗体金标免疫快速检测试剂盒及制备方法
CN1700008A (zh) * 2005-06-21 2005-11-23 浙江省农业科学院 诊断家畜血吸虫病斑点金渗滤试剂盒其制备及应用方法
CN1866014A (zh) * 2006-05-19 2006-11-22 浙江省农业科学院 诊断猪囊虫病斑点金标免疫渗滤试剂盒其制备及应用方法
CN102053153A (zh) * 2010-11-25 2011-05-11 西安微通生物技术有限公司 斑点免疫金定向渗滤检测法试剂盒及其应用
CN102608321A (zh) * 2012-02-29 2012-07-25 厦门大学 多房棘球绦虫循环抗原斑点金免疫渗滤试剂盒及制备方法
CN204008663U (zh) * 2014-07-16 2014-12-10 李娟� 一种半定量金免疫渗滤尿微量白蛋白检测试剂盒
CN105785042A (zh) * 2016-04-06 2016-07-20 陈秀海 一种流行性出血热病毒检测试剂盒

Family Cites Families (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN2213997Y (zh) * 1994-08-30 1995-11-29 徐兵 一步渗滤法斑点免疫检测器
CN1164949C (zh) * 2001-08-17 2004-09-01 上海数康生物科技有限公司 用于同时检测多种传染性疾病的试剂盒及其制备方法
CN101320041B (zh) * 2007-08-09 2012-11-14 上海奥普生物医药有限公司 一种快速定量检测c-反应蛋白的胶体金法及其应用

Patent Citations (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1664585A (zh) * 2005-02-07 2005-09-07 浙江省医学科学院 家畜血吸虫抗体金标免疫快速检测试剂盒及制备方法
CN1700008A (zh) * 2005-06-21 2005-11-23 浙江省农业科学院 诊断家畜血吸虫病斑点金渗滤试剂盒其制备及应用方法
CN1866014A (zh) * 2006-05-19 2006-11-22 浙江省农业科学院 诊断猪囊虫病斑点金标免疫渗滤试剂盒其制备及应用方法
CN102053153A (zh) * 2010-11-25 2011-05-11 西安微通生物技术有限公司 斑点免疫金定向渗滤检测法试剂盒及其应用
CN102608321A (zh) * 2012-02-29 2012-07-25 厦门大学 多房棘球绦虫循环抗原斑点金免疫渗滤试剂盒及制备方法
CN204008663U (zh) * 2014-07-16 2014-12-10 李娟� 一种半定量金免疫渗滤尿微量白蛋白检测试剂盒
CN105785042A (zh) * 2016-04-06 2016-07-20 陈秀海 一种流行性出血热病毒检测试剂盒

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
曹丹如 等。: "快速检测尿微量白蛋白的半定量金免疫渗滤法的研究", 《检验医学》 *

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN108303550A (zh) * 2018-02-09 2018-07-20 广东优尼德生物科技有限公司 一种检测脂联素的斑点金渗滤试剂盒及其定量检测方法
CN113009150A (zh) * 2021-02-20 2021-06-22 北京华科泰生物技术股份有限公司 用于收集汗液中尿微量白蛋白的浓缩装置及包括其的检测试剂盒及其应用

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