CN106478753A - 一种nuc‑1031单一异构体的制备方法和用途 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种NUC‑1031单一异构体的制备方法和用途,具体采用将第一步反应产物进行异构体分离,再经过2步化学合成,制备包含高纯度化合物(Sp‑1)的组合物。该方法操作简便,成本低,最终制备的组合物中含单一异构体(Sp‑1)纯度高,HPLC纯度在97%以上,进一步的在99%以上,该方法适合工业化生产,制备的组合能够满足临床研究需要。此外,本发明还涉及该组合物的用途以及含该组合物和至少一种药学可接受的赋形剂的药物组合物。
Description
本发明是申请号为 201510586447.6 、申请日为 2015 年 9 月 16 日、发明名称为“一种富集了NUC-1031单一异构体的组合物及其制备方法和用途”的专利的分案申请。
技术领域
本发明涉及一种富集了NUC-1031单一异构体的组合物及其制备方法,还涉及该组合物的用途以及含该组合物和至少一种药学可接受的赋形剂的药物组合物,本发明还涉及晶体形式的化合物Sp-1及其制备方法。
背景技术
NUC-1031是吉西他滨前药,由NuCana BioMed 公司开发,目前处于临床II期,用于治疗晚期实体瘤,胰腺癌,乳腺癌等癌症。NUC-1031的CAS为840506-29-8,具有下式1所示的结构,包含 Rp-1和Sp-1两种单一异构体:
,
,。
WO2005012327说明书第70页公开了NUC-1031的具体结构及制备方法,具体采用吉西他滨与苄基-(苯甲酰基-L-丙氨酸)-氯代磷酸酯以摩尔比为1:3,在NMI存在条件下,以THF/吡啶为溶剂反应2小时,得到粗品,采用硅胶柱分离纯化,以二氯甲烷/甲醇(95:5)洗脱,得到泡沫状固体,收率仅为16%。
WO2014076490A1公开了以下制备NUC-1031的方法,
,
将3’-Boc保护的吉西他滨(100mg)与2mol当量的苯基(苄基-L丙氨酸)氯代磷酸酯(150mg)反应,并以0.5mol当量的三(乙酰丙酮)铁(III)(56mg)作为催化剂,1.5mol当量的DIPEA(55μL)作为碱,10mlTHF作为反应溶剂,氮气保护下,室温反应24小时,收率45%,其中异构体Rp:Sp=3:1。
题目为Application of ProTide Technology to Gemcitabine: A SuccessfulApproach to Overcome the Key Cancer Resistance Mechanisms Leads to a NewAgent (NUC-1031) in Clinical Development(Journal of Medicinal Chemistry,Volume 57,Issue 4,Pages 1531-1542)的文献报道了下式化合物5f以二氯甲烷为溶剂,在TFA存在下脱去羟基保护,最后通过硅胶柱纯化制备NUC-1031的方法,收率70%,其中异构体的含量分别为48%,52%。
目前现有技术中没有关于NUC-1031单一异构体的制备方法报道,由于NUC-1031分子结构中手性P的两个对应异构体结构非常相似,极性非常接近,通过从NUC-1031混旋体中分离出高纯度的单一异构体,变得非常困难,尤其要在纯化过程中同时兼顾纯度和收率,就更加困难了。发明人尝试了本领域常规的结晶、硅胶柱层析、以及C18硅胶键合的反相制备色谱和球型硅胶的正相制备色谱及手性色谱分离等各种方法对NUC-1031进行纯化,均难以分离出纯度不低于90%的单一异构体。
本领域已知的,通常手性化合物作为药物使用时,异构体构型与药理关系可分为以下几种情况:(1)、药物的药理作用完全或主要由其中一个对映异构体产生,如(S)-萘普生的镇痛作用比R异构体强35倍;(2)、两个异构体具有完全相反的药理作用,如哌西那朵的右旋异构体为阿片受体的激动剂,而其左旋体为阿片受体的拮抗剂;(3)、一个异构体具有严重的不良反应,如驱虫药四咪唑的呕吐反应即由其右旋体产生;(4)、一种药理作用具有高度的立体选择性,而其他的药理作用的立体选择性很低或无,如镇咳药美沙芬的成瘾性主要由其左旋体产生,而镇咳作用则两则强度一样;(5)两个对映体的药理作用不同,但合并用药有利,如降压药萘必洛尔的右旋体为β-受体阻滞剂,而左旋体能降低外周血管的阻力,并对心脏有保护作用。
已知的,NUC-1031分子中含有多个手性原子,从NUC-1031中分离单一异构体,并对其分别进行生物活性研究,对NUC-1031的药理作用、毒副作用或不良反应等进行研究,以开发出活性更好,毒副作用更小的类似药物将具备非常重要的意义。制备能满足临床研究需要的高纯度单一异构体以及筛选出在NUC-1031的药理活性中起重要作用的单一异构体,目前仍是本领域亟待解决的问题。
发明内容
为解决上述问题,本发明第一方面提供了一种富集了化合物(Sp-1)的组合物;
本发明第二方面提供了该组合物的制备方法;
本发明第三方面提供了该组合物在制备治疗癌症的药物中的用途;
本发明第四方面还提供了包含该组合物的药物组合物。
本发明第五方面还提供了晶体形式的化合物(Sp-1)及其制备方法。
第一方面,本发明提供了一种富集了化合物(Sp-1)的组合物,所述组合物中化合物(Sp-1)的纯度不低于90%,并且所述组合中化合物(Sp-1)与化合物(Rp-1)的重量比不低于90:10,
,。
进一步的,所述组合物中,化合物(Sp-1)的纯度不低于97%,并且所述组合中化合物(Sp-1)与化合物(Rp-1)的重量比不低于97:3。
更进一步的,所述组合物中,化合物(Sp-1)的纯度不低于99%,并且所述组合中化合物(Sp-1)与化合物(Rp-1)的重量比不低于99:1。
第二方面,本发明提供了上述化合物(Sp-1)的制备方法,所述方法包括以下步骤,
(1)、化合物(61501h)与化合物(61501g)在碱性条件下反应后,再与化合物(61501f)反应,制备化合物(61502):
;
(2)、将化合物(61502)通过结晶,分离出化合物(61501b):
;
(3)、将化合物(61501b)与化合物(61501c)反应,制备化合物(61501a):
;
(4)、将化合物(61501a)脱去羟基保护基,得到化合物(Sp-1):
。
上述方法中,步骤(1)优选反应在N2保护下进行,将化合物(61501h)加入到合适的溶剂(如二氯甲烷、异丙醇、DMF、二氧六环等)中,在合适的温度(优选-80℃)下,加入化合物(61501g)和合适的碱(如三乙胺、DIPEA、NMM、吡啶、哌啶),滴加完毕后,优选在室温下反应过夜,然后,向反应液中加入化合物(61501f)和合适的碱(如三乙胺、DIPEA、NMM、吡啶、哌啶),反应结束后,蒸出溶剂,加入乙酸乙酯和水萃取,分离得到目标化合物(61502)。
步骤(2)将步骤(1)制备得到的化合物,进一步结晶,分离得到异构体(61501b);优选结晶溶剂为乙酸乙酯和石油醚,更进一步的优选,将化合物(61502)加入到乙酸乙酯中,搅拌,然后缓慢滴加石油醚,析出晶体,得到目标化合物(61501b);其中,优选化合物(61502)与乙酸乙酯的重量体积比为2:5~4:5,乙酸乙酯与石油醚的体积比为1:4~1:6。
上述步骤(3),优选在氮气保护下,将化合物(61501c)在合适的溶剂(如四氢呋喃、二氯甲烷)和合适的温度(如-10℃~5℃,优选0℃)条件下,加入格式试剂(如叔丁基氯化镁,优选叔丁基氯化镁的四氢呋喃溶液)反应约0.5~3小时后,加入步骤(2)分离得到的化合物(61501b),反应至结束,向反应液中加入水,然后用乙酸乙酯萃取,得到粗品化合物(61501a);上述粗品可通过常规方法如结晶、柱层析等进一步纯化,优选以二氯甲烷-甲醇作为洗脱剂,用硅胶柱层析纯化。
上述步骤(4),优选在氮气保护下,将化合物(61501a)在合适的溶剂(例如二氯甲烷、乙酸乙酯)和适宜的温度(如-10℃~5℃,优选0℃)条件下,用酸(例如三氟醋酸、氯化氢/乙酸乙酯)催化脱去羟基保护基,反应结束后,加入弱碱水溶液(如饱和碳酸氢钠溶液)和有机溶剂(如乙酸乙酯),分离有机层,浓缩、干燥,得到粗品化合物(Sp-1),进一步的优选将上述粗品纯化,如采用硅胶柱层析,以二氯甲烷-甲醇为洗脱剂。
进一步的,上述方法步骤(3)中所述化合物(61501c)是由化合物(61501d)制备获得:
。
进一步的,优选,化合物(61501d)在合适的溶剂(如四氢呋喃、二氯甲烷、异丙醇或其与水的混合溶液)中,在碱性(如碳酸钠、碳酸氢钠等)条件与二碳酸二叔丁酯反应,制备获得。
本发明第三方面提供了上述组合物的用途,其用于制备治疗癌症的药物;进一步的,所属癌症包括所述癌症包括胰腺癌、晚期实体瘤、卵巢肿瘤、非小细胞肺癌、乳腺癌、膀胱癌、宫颈癌、间皮瘤、食管癌、胃癌、大肠癌、肝癌、胆管癌、鼻咽癌、睾丸癌、淋巴瘤或头颈部癌;更优选的,所述癌症包括胰腺癌、晚期实体瘤、卵巢肿瘤、乳腺癌。
本发明第四方面还提供了包含该组合物的药物组合物,所述药物组合物,包括本发明提供的富集化合物(Sp-1)的组合物和至少一种药学可接受的赋形剂。
所述的药物组合物可以通过口服或胃肠道外给药,包括静脉给药、皮下给药、腹膜内给药、肌肉注射、吸入给药、直肠给药及局部给药(如口腔或舌下给药)。
其中,用于口服给药的药物组合物包括片剂、胶囊、颗粒剂或混悬剂;用于口服的片剂包括本发明提供的组合物作为活性成分,还可包含一种或多种可药用的赋形剂,例如稀释剂、崩解剂、粘合剂、润滑剂,甜味剂、矫味剂、色素及防腐剂。当玉米淀粉和海藻酸作为崩解剂时,合适的惰性稀释剂包括碳酸钠、碳酸钙、磷酸钠、磷酸钙和乳糖。粘合剂包括淀粉和明胶,任选的,润滑剂为硬脂酸镁、硬脂酸或滑石粉。任选的,所述片剂还可以使用单硬脂酸甘油酯或甘油二硬脂酸酯进行包衣,以延缓在胃中的吸收。
用于口服给药的胶囊剂包括硬胶囊和软胶囊,其中硬胶囊包含本发明提供的组合物作为有效活性成分和一种固体稀释剂;软胶囊包含本发明提供的药物组合物作为有效活性成分,与水或油(如花生油、液体石蜡或橄榄油)。
用于直肠给药的剂型栓剂,其中栓剂的基质可以是可可粉油或水杨酸盐。
用于阴道给药的制剂形式为子宫托、棉球、霜、凝胶、糊剂、泡沫剂、或喷雾剂,所述制剂包括含活性成分的组合物和本领域已知的常规的载体。
用于静脉注射、腹膜内给药、皮下给药和肌注给药的剂型时,本发明提供的组合物通常为无菌溶液或无菌悬浮液,并具有合适的pH值和渗透压。该类制剂的制备,可按照本领域公知的常规方法制备获得。
所述组合物的给药剂量为0.1~300mg/kg体重/天;优选0.5mg mg/kg体重/天;进一步的优选合适的给药剂量为1~50 mg/kg体重/天,更优选为1~50 mg/kg体重/天。优选一天分2次、3次、4次或5次间隔给药。优选包含10~1500mg活性成分,更优选包含20~1000mg活性成分,最优选包含50~700mg活性成分作为一个给药剂量单位。
另一方面,本发明提供了晶体形式的化合物Sp-1,特别是基本上纯净的晶体形式。优选的。该晶体形式的特点在于不含有或基本上不含有水。进一步的,所述晶体形式的化合物Sp-1具有晶格:a=11.36Å,b=34.84Å,c=15.12 Å,体积为5554 Å3。为了有助于新晶型的鉴定,本发明提供了X-射线衍射分析数据及获得这些数据所采用的条件,如下:
。
晶体形式的化合物(Sp-1)可以这样制备:将本发明前述方法或具体实施例中提到的方法制备的化合物(Sp-1)加入到溶剂例如低级醇和水组成的溶剂中,将体系温度从30~50℃缓慢降低到0~5℃,得到棒状单晶。优选所述低级醇为C1~3醇(如甲醇、乙醇、丙醇或异丙醇),更优选的,所述低级醇为乙醇;其中低级醇与水的用量比优选为1:3(v/v)。
另一方面,本发明还提供了一种药物组合物,含有所述晶体形式的化合物(Sp-1)和至少一种药学可接受的赋形剂。晶体形式的化合物(Sp-1)可以用于与NUC-1031已知治疗的相同适应症,例如胰腺癌、晚期实体瘤、卵巢肿瘤、非小细胞肺癌、乳腺癌、膀胱癌、宫颈癌、间皮瘤、食管癌、胃癌、大肠癌、肝癌、胆管癌、鼻咽癌、睾丸癌、淋巴瘤或头颈部癌等。含有所述晶体形式的化合物(Sp-1)和至少一种药学可接受的赋形剂的药物组合物可以经任意常规途径给药,例如口服(如片剂或胶囊)、或鼻或肺给药(吸入)等。
本发明提供的富集化合物(Sp-1)的组合物,对BxPC-3、MIA Paca-2和OVCAR-3肿瘤细胞均表现出相对较强的细胞毒性作用,IC50值约在0.01 nM~0.05nM之间;其在体外对肿瘤细胞增殖活性抑制作用约为化合物(Rp-1)的10倍;与吉西他滨、化合物(Rp-1)相比,本发明提供的富集化合物(Sp-1)的组合物具有更好的体内抗肿瘤活性。药代动力学评价结果显示,本发明提供的富集化合物(Sp-1)的组合物,在瘤组织活性代谢产物dFdCTP浓度显著高于化合物(Rp-1)。
其次,本发明提供的组合物中,单一异构体(Sp-1)含量高,为临床进一步开展NUC-1031药理活性研究,及未来开发新的活性好,副作用低的抗癌药物提供了原料基础。并且发明人创造性的从第一步反应结束后,就进行单一异构体分离,与现有技术从混旋体和/或消旋体中分离单一异构体相比,大大节省了原料,同时,第一步反应异构体的分离采用结晶方法,操作方便,与现有技术中采用手性色谱柱分离相比,大大节省成本。另外,本发明提供的制备方法,整条路线操作简便,对设备要求低,获得产品纯度高,适合工业化生产。
第三、本发明对所提供的化合物(Sp-1)进行了结构解析,确定了该化合物的化学结构:单晶解析确定了磷原子P1(S),与C9(S),C18(R),C19(R),C21(R)的绝对构型。本发明还提供了一种全新的化合物(Sp-1)的晶体。
附图说明
图1显示按照实施例2方法制备得到的化合物(61501b)的HPLC分析谱图,其中化合物(61501b)的HPLC纯度为100.0%,其峰数据如下所示:
。
图2显示按照实施例5方法制备得到的化合物(SP-1)的HPLC分析谱图,其中化合物(SP-1)的HPLC纯度为100.0%,其峰数据如下所示:
。
图3显示按照实施例5方法制备得到的化合物(SP-1)的31P-NMR谱图,其中,δP 3.64。
图4显示按照实施例5方法制备得到的化合物(SP-1)的1H-NMR。
图5显示对比实施例2方法制备得到的化合物1的31P-NMR谱图,其中,δP 3.81,3.64。
图6显示化合物(SP-1)单晶的显微照片。
图7显示化合物(SP-1)单晶的模拟XRPD与单晶的反射XRPD的对比图。
图8显示化合物(SP-1)单晶的晶胞图。
图9显示化合物(SP-1)的立体结构图。
图10显示化合物(SP-1)的立体结构图。
图11显示对比实施例2中制备化合物1所采用的化合物(61502)的HPLC谱图,其异构体61501e与61501b的比率为26.25%:72.03%。
图12显示按照对比实施例2方法制备的化合物1的HPLC谱图,其异构体(Rp-1)与(Sp-1)的比例为10.82%:89.18%,其峰数据如下所示:
。
图13显示化合物(SP-1),化合物(RP-1)和NUC-1031体外抗肿瘤细胞增殖的IC50值测定结果。
图14显示化合物(Sp-1)、化合物(Rp-1)和NUC-1031在人胰腺癌小鼠皮下移植模型中的药效学评价。
图15显示受试药化合物(Sp-1)和化合物(Rp-1)单次给药后在MIA PaCa-2人胰腺癌小鼠皮下移植模型中的药代动力学评价。
具体实施例
以下结合实施例对本发明的内容做进一步的阐释和说明,应理解,这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。下列实施例中未注明具体条件的实验方法,通常按照常规条件或按照制造厂商所建议的条件。除非另外说明,否则所有的百分数、比率、比例、或份数按重量计。
单晶样品的显微照片使用上海测维体视显微镜PXS9-T在室温下拍摄。单晶衍射数据用Buker D8 ADVANCE单晶衍射仪(Mo Kα,λ=0.71073Å)在123(2)K采集。
本发明试验实施例中所述的化合物(Rp-1)是指富集化合物(Rp-1)的组合物,其中化合物(Rp-1)的质量百分含量不低于95%或者更高,所用的化合物(Sp-1)是指本发明提到的富集化合物(Sp-1)的组合物,其中化合物(Sp-1)的质量百分含量不低于90%,优选不低于99%。化合物(Rp-1)可类似化合物(Sp-1)的制备方法获得,不同之处是将化合物(61502)异构体分离后得到化合物(61501e),用化合物(61501e)替代化合物(61501b)参与后续反应,以获得化合物(Rp-1)。
本发明中的重量体积百分比中的单位是本领域技术人员所熟知的,例如是指在100毫升的溶液中溶质的重量。除非另行定义,文中所使用的所有专业与科学用语与本领域熟练人员所熟悉的意义相同。此外,任何与所记载内容相似或均等的方法及材料皆可应用于本发明方法中。文中所述的较佳实施方法与材料仅作示范之用。
本发明中,化合物(Sp-1)的纯度通过HPLC方法测定,HPLC采用以下柱和条件进行:十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂(YMC-hydrosphere C18柱,150mm×4.6mm 3μm);以0.1%磷酸-甲醇(10~50∶90~50)为流动相,流速1.0(ml/min),检测波长为272nm。
本发明中间体化合物(61501b)的纯度也是通过HPLC方法测定,HPLC采用以下柱和条件进行:YMC hydrosphere 150*4.6mm,3um;流动相采用40%~85%甲醇,2‰磷酸/水,运行46min,各种线性梯度和在必要时的调节剂,1.0(ml/min)。
实施例1化合物(61502)的制备:
在-80℃下向61501h(20g)的二氯甲烷(60ml)溶液中加入61501g(20.6g),接着加入19.3g三乙胺(20ml二氯甲烷稀释)溶液。将混合物在室温下搅拌过夜。向混合物中加入61501f,接着加入19.3g三乙胺(20ml二氯甲烷稀释)溶液,混合物在室温下搅拌4h。混合物直接脱溶,残余物溶解于乙酸乙酯(200ml)和水(400ml),分离乙酸乙酯后,用乙酸乙酯(2*100ml)洗水相,合并乙酸乙酯相,用盐水洗涤乙酸乙酯相,并用无水硫酸钠干燥。蒸除乙酸乙酯,得到目标化合物(61502),直接用于下一步纯化。
实施例2化合物(61501b)的制备:
化合物61502(120g)用乙酸乙酯(240ml)溶解,不断搅拌,在室温下缓慢滴加石油醚(720ml),有晶体析出,过滤除去滤液,共得到化合物61501b(49.5g),收率41.2%,HPLC:100.0%(如图1所示)。
实施例3化合物(61501c)的制备:
室温下向化合物(61501d)(20g)于四氢呋喃(200ml)和水(100ml)的混合溶液中加入碳酸钠(35.4g),接着加入二碳酸二叔丁酯(17.5g),室温搅拌至反应完毕。用乙酸乙酯(3*200ml)萃取混合物,合并乙酸乙酯,并用食盐水洗涤,无水硫酸钠干燥。蒸除溶剂后通过硅胶色谱法(2.5%~10%甲醇/二氯甲烷)纯化残余物,得到化合物(61501c) 18g,收率:67%。
实施例4化合物(61501a)的制备:
在0℃下向化合物(61501c)(5g)的四氢呋喃(25ml)溶液中加入叔丁基氯化镁溶液(1.0m 41.28ml),搅拌反应1h后,加入实施例2获得的化合物(61501b)(12.42g),室温搅拌至反应完毕。向混合物中加入氯化铵饱和水溶液(250ml),用乙酸乙酯(3*250ml)萃取水相,合并乙酸乙酯相,用食盐水洗涤,并用无水硫酸钠干燥,脱溶。通过硅胶柱层析(流动相:甲醇/二氯甲烷(甲醇所占比例由2.5%升至5%),梯度洗脱)纯化得化合物(61501a)6.7g,收率71.3%,HPLC:95.1%。
实施例5化合物(Sp-1)的制备:
在0℃下向化合物(61501a)(6.7g)的二氯甲烷(33.5ml)溶液中加入三氟醋酸(20.1ml),保温搅拌至反应完毕。混合物脱溶后加入碳酸氢钠溶液(150ml),用乙酸乙酯萃取(3*150ml)合并乙酸乙酯相,用食盐水洗涤,并用无水硫酸钠干燥,脱溶后,通过硅胶柱层析(流动相:甲醇/二氯甲烷(甲醇所占比例由2.5%升至10%),梯度洗脱)纯化,得到化合物(SP-1)(4.1g,收率:72%),HPLC:100.0%(如图2所示);31P-NMR (202MHz,MeOD): δP 3.64.(如图3所示);1H-NMR(500MHz,MeOD):δH: 7.56,7.52 (2d,J=7.5Hz,1H,H-6), 7.38-7.33(m,7H,ArH), 7.26-7.19(m,3H,ArH), 6.25(apparent q, J=7.5Hz,1H,H-1’), 5.88,5.84 (2×d,J=7.5Hz,1H,H-5), 5.18-5.12(m,2H,OCH2Ph), 4.49-4.42(m,1H,H-5’), 4.38-4.31(m,1H,H-5’),4.25-4.18(m,1H,H-3’), 4.07-4.01(m,2H,H-4’,CHCH3), 1.38 (apparentt,J=8.5Hz,3H,CHCH3)(如图4所示)。
实施例6化合物(Sp-1)的制备:
在0℃下向化合物(61501a)(2g)的乙酸乙酯(10ml)溶液中加入氯化氢/乙酸乙酯(7mol/L 6ml),保温搅拌至反应完毕。蒸除溶剂后,加入碳酸氢钠溶液(50ml),用乙酸乙酯萃取(3*50ml)合并乙酸乙酯相,用食盐水洗涤,并用无水硫酸钠干燥,蒸除有机溶剂后,残余物,通过硅胶柱层析(流动相:甲醇/二氯甲烷(甲醇所占比例由2.5%升至10%),梯度洗脱)纯化,得到化合物(SP-1)(1225mg,收率:70%),HPLC:99.21%;31P-NMR (202MHz,MeOD): δP3.64.;1H-NMR(500MHz,MeOD):δH: 7.56,7.52 (2d,J=7.5Hz,1H,H-6), 7.38-7.33(m,7H,ArH), 7.26-7.19(m,3H,ArH), 6.25(apparent q, J=7.5Hz,1H,H-1’), 5.88,5.84 (2×d,J=7.5Hz,1H,H-5), 5.18-5.12(m,2H,OCH2Ph), 4.49-4.42(m,1H,H-5’), 4.38-4.31(m,1H,H-5’), 4.25-4.18(m,1H,H-3’), 4.07-4.01(m,2H,H-4’, CHCH3), 1.38 (apparentt,J=8.5Hz,3H,CHCH3)。
实施例7 晶体形式的化合物(Sp-1)的制备
将实施例5制备得到的化合物(Sp-1)加入到乙醇/水(1/3,v/v)体系中,从50℃以0.01℃/min的速率缓慢降温至5℃,得到棒状单晶(如图6所示),将获得的单晶进行XRPD检测,结果如图7所示,单晶的晶胞图如图8所示;单晶解析确定化合物(Sp-1)分子的绝对构型:磷原子P1(S),与C9(S),C18(R),C19(R),C21(R),其立体结构如图9和10所示)。
实施例8晶体形式的化合物(Sp-1)的制备
将实施例6制备得到的化合物(Sp-1)加入到乙醇/水(1/3,v/v)体系中,从30℃以缓慢降温至0℃,得到与实施例7相同的晶体形式的化合物(Sp-1)。
对比实施例1:化合物1的制备:
(1)、化合物(615012a)的制备:在0℃下向化合物(61501c)(2g)的四氢呋喃(10ml)溶液中加入叔丁基氯化镁溶液(1.0m 16ml),搅拌反应1h后,加入化合物(61502)(5g)(其中异构体61501e与61501b的比率为26.25%:72.03%,如图11所示),室温搅拌至反应完毕。向混合物中加入水(50ml),用乙酸乙酯(3*100ml)萃取水相,合并乙酸乙酯相,用食盐水洗涤,并用无水硫酸钠干燥,脱溶。通过硅胶柱层析(洗脱剂:甲醇/二氯甲烷2.5%~5%梯度洗脱)纯化得化合物(615012a)1.9g,收率53%。
(2)、化合物1的制备:在0℃下向化合物(615012a)(3.98g)的二氯甲烷(10ml)溶液中加入三氟醋酸(12ml),保温搅拌至反应完毕。混合物脱溶后加入碳酸氢钠溶液(100ml),用乙酸乙酯萃取(3*80ml)合并乙酸乙酯相,用食盐水洗涤,并用无水硫酸钠干燥,脱溶后,通过多次硅胶柱层析(流动相:甲醇/二氯甲烷(甲醇所占比例由2.5%升至10%),梯度洗脱)纯化,得到化合物(1)(1.1g),HPLC:100%,其中异构体Rp-1与Sp-1的比例:10.82%:89.18%(如图12所示);31P-NMR (202MHz,MeOD): δP 3.81,3.64,其中δP 3.81是异构体Rp-1中31P的吸收位置,δP 3.64是异构体Sp-1中31P的吸收位置。
药理活性测定:
实施例7 体外抗肿瘤细胞增殖的IC50值测定:
用CTG方法测试化合物(Sp-1)、化合物(Rp-1)和NUC-1031在BxPC-3、MIA Paca-2和OVCAR-3肿瘤细胞系中的细胞增殖50%抑制浓度(IC50)。
收集处于指数生长期的细胞并用Vi-Cell XR细胞计数仪进行活细胞计数。用各细胞相应培养基将细胞悬液调整到3.33 x 10e4/ml或5.56 x 10e4/ml。每孔加90 µl 细胞悬液于96-孔细胞培养板,最终细胞浓度为BxPC-3、MIA Paca-2 3000细胞/孔,OVCAR-3 5000细胞/孔。以DMSO溶解各供试化合物为10 mM储存液。用储存液和DMSO制备3.16 X系列梯度稀释液。然后分别用培养基稀释100倍。最后每株细胞每孔分别加入10 µl 相应的10倍溶液,每个药物浓度各3个复孔(见化合物配制方法和加样设计:IC50实验孔板加样设计),最终测试所用供试化合物和对照化合物浓度范围参见后页化合物配制方法和加样设计:供试化合物和对照化合物稀释,每孔DMSO终浓度为0.1%。置于37ºC, 5% CO2孵箱中培养72小时(BxPC-3,MIAPaca-2)或96小时(OVCAR-3)。药物处理72或96小时后,按照CTG操作说明,每孔加入50 µl(1/2培养体积)预先融化并平衡到室温的CTG 溶液,用微孔板震荡器混匀2分钟,于室温放置10分钟后用Envision2104读板仪测定萤光信号值。
细胞存活率用公式:Vsample/Vvehicle control x100% 计算。其中Vsample 为药物处理组的读数,Vvehicle control 为溶剂对照组的平均值。应用GraphPad Prism 5.0 软件, 使用非线性回归模型绘制S型剂量-存活率曲线并计算IC50 值。供试化合物在3个细胞系的细胞增殖IC50结果如下表1所示。
表1:供试化合物在3个细胞系的细胞增殖IC50结果
上述实验结果表明化合物(Sp-1)、化合物(Rp-1)和NUC-1031对BxPC-3、MIA Paca-2和OVCAR-3肿瘤细胞均表现出相对较强的细胞毒性作用,IC50值约在0.01 nM~1 nM之间;化合物(Sp-1)在体外对肿瘤细胞增殖活性抑制作用约为化合物(Rp-1)的10倍,这些在图13中也有体现。
实施例8 受试药化合物(Sp-1)、化合物(Rp-1)和NUC-1031人胰腺癌小鼠皮下移植模型中的药效学评价:
细胞培养:MIA PaCa-2细胞培养在含10% 胎牛血清和2.5% HS的DMEM培养液中。收集指数生长期的MIA PaCa-2细胞,PBS重悬至适合浓度用于裸鼠皮下肿瘤接种。
动物造模及分组:BALB/c裸小鼠,雌性,6-8周(肿瘤细胞接种时的小鼠预计周龄),18-22g,购自上海灵畅生物科技有限公司。共需52只鼠(40只加上30%富余)。分组后共5组,每组8只。所有实验小鼠均饲养在屏障系统中,并且提前适应环境至少7天。每只鼠于右侧背部皮下接种3×106 MIA PaCa-2细胞,细胞重悬在1:1的PBS与基质胶中(0.1ml/只),定期观察肿瘤生长情况,待肿瘤生长至平均150~200mm3时根据肿瘤大小和小鼠体重随机分组给药。详细的给药方法、给药剂量和给药途径见表2。
表2 受试药在MIA PaCa-2 动物模型中的给药途径、剂量及方案
注:
i.p.:腹腔注射给药;
BIW:每周给药2次;
实验观察指标及计算:
相对肿瘤抑制率TGI(%):TGI%=(1-T/C)× 100%。T/C % 为相对肿瘤增值率,即在某一时间点,治疗组和对照组相对肿瘤体积或瘤重的百分比值。T和C分别为治疗组和对照组在某一特定时间点的相对肿瘤体积(RTV)或瘤重(TW)。
计算公式如下:T/C % = TRTV / CRTV × 100%(TRTV:治疗组平均RTV ;CRTV:溶媒对照组平均RTV;RTV=Vt/V0,V0为分组时该动物的瘤体积,Vt为治疗后该动物的瘤体积)。或
T/C % = TTW / CTW × 100% (TTW:治疗组实验终结时平均瘤重;CTW:溶媒对照组实验终结时平均瘤重)。
实验结果:
连续4周,每周2次给予吉西他滨对肿瘤有良好的抑制作用,相对肿瘤抑制率达55%。连续4周,每周两次给予与吉西他滨等摩尔剂量的化合物(Sp-1)、化合物(Rp-1)和NUC-1031后TGI(%)分别为79、22和54%。结果表明化合物(Sp-1)比化合物(Rp-1)具有更好地体内抗肿瘤活性(如图14所示)。
实施例9受试药化合物(Sp-1)和化合物(Rp-1)单次给药后在MIA PaCa-2人胰腺癌小鼠皮下移植模型中的药代动力学评价:
细胞培养:MIA PaCa-2细胞培养在含10% 胎牛血清和2.5% HS的DMEM培养液中。收集指数生长期的MIA PaCa-2细胞,PBS重悬至适合浓度用于裸鼠皮下肿瘤接种。
动物造模及分组:BALB/c裸小鼠,雌性,6-8周(肿瘤细胞接种时的小鼠预计周龄),18-22g,购自上海灵畅生物科技有限公司。共需47只鼠(36只加上30%富余)。分组后共6组,每组6只。所有实验小鼠均饲养在屏障系统中,并且提前适应环境至少7天。每只鼠于右侧背部皮下接种3×106 MIA PaCa-2细胞,细胞重悬在1:1的PBS与基质胶中(0.1ml/只),定期观察肿瘤生长情况,待肿瘤生长至平均200~250mm3时根据肿瘤大小和小鼠体重随机分组给药。详细的给药方法、给药剂量和给药途径见表:3。
表3 受试药在MIA PaCa-2 动物模型中的给药途径、剂量及方案
注:
i.p.:腹腔注射给药;
BIW:每周给药2次;
于给药后0.5 h、2 h和24 h分别收集肿瘤组织,肿瘤采集后立即置于液氮中速冻,称量肿瘤重量,使用20%甲醇/水冰浴匀浆以1:5匀浆比例,用LC-MS/MS测定肿瘤组织中活性代谢产物dFdCTP的浓度。
实验结果:
腹腔注射给予110 mg/kg的化合物(Sp-1) 和化合物(Rp-1)后的实验结果如图15。腹腔注射给予化合物(Sp-1)后0.5、2和24 小时瘤组织活性代谢产物dFdCTP的浓度分别为12.0、5.97和0.504 µg/g,腹腔注射化合物(Rp-1)后0.5、2和24 小时瘤组织活性代谢产物dFdCTP的浓度分别为3.03、1.67和0.157 µg/g。BP124a给药后0.5、2和24 h瘤组织活性代谢产物dFdCTP浓度分别为化合物(Rp-1)的3.96、3.57和3.21倍(如图15所示)。
Claims (8)
1.一种化合物(Sp-1)的制备方法,其特征在于,所述方法包括以下步骤,
(1)、化合物(61501h)与化合物(61501g)在碱性条件下反应后,再与化合物(61501f)反应,制备化合物(61502):
;
(2)、将化合物(61502)通过结晶,分离出化合物(61501b):
;
(3)、将化合物(61501b)与化合物(61501c)反应,制备化合物(61501a):
;
(4)、将化合物(61501a)脱去羟基保护基,得到化合物(Sp-1):
。
2.根据权利要求1所述方法,其特征在于,所述化合物(61501c)是由化合物(61501d)制备获得:
。
3.根据权利要求1所述方法,其特征在于,步骤(2)结晶溶剂为乙酸乙酯/石油醚。
4.根据权利要求3所述方法,其特征在于,化合物(61502)与乙酸乙酯的重量体积比为2:5~4:5,乙酸乙酯与石油醚的体积比为1:4~1:6。
5.根据权利要求1~4任一项所述方法,其特征在于,所制备的化合物(Sp-1)纯度不低于90%,并且(Sp-1)与化合物(Rp-1)的重量比不低于90:10。
6.根据权利要求5所述方法,其特征在于,所制备的化合物(Sp-1)的纯度不低于99%,并且化合物(Sp-1)与化合物(Rp-1)的重量比不低于99:1。
7.一种权利要求1~6任一项所制备的化合物(Sp-1)的用途,其特征在于,用于制备治疗癌症的药物,所述癌症包括胰腺癌、晚期实体瘤、卵巢肿瘤、非小细胞肺癌、乳腺癌、膀胱癌、宫颈癌、间皮瘤、食管癌、胃癌、大肠癌、肝癌、胆管癌、鼻咽癌、睾丸癌、淋巴瘤或头颈部癌。
8.一种药物组合物,包含权利要求1~4任一项所制备的化合物(Sp-1)和至少一种药学可接受的赋形剂。
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Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN113234102A (zh) * | 2021-05-18 | 2021-08-10 | 宁波大学 | 一种三配位磷衍生物及中间体及制备方法 |
US11603382B2 (en) * | 2015-12-11 | 2023-03-14 | NuCana plc | Diastereoselective synthesis of phosphate derivatives |
Families Citing this family (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN106543220A (zh) | 2015-09-16 | 2017-03-29 | 博瑞生物医药(苏州)股份有限公司 | 氨基磷酸酯化合物及其制备方法和晶体 |
GB201522771D0 (en) * | 2015-12-23 | 2016-02-03 | Nucana Biomed Ltd | Crystalline form of a phosphate derivative |
CN107652342A (zh) * | 2016-07-23 | 2018-02-02 | 江苏万高药业股份有限公司 | 核苷氨基磷酸酯类前药的多晶型及其制备方法 |
GB201709471D0 (en) | 2017-06-14 | 2017-07-26 | Nucana Biomed Ltd | Diastereoselective synthesis of hosphate derivatives |
WO2022047229A1 (en) * | 2020-08-27 | 2022-03-03 | Emory University | Novel forms of antiviral nucleosides |
Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2005012327A2 (en) * | 2003-07-21 | 2005-02-10 | University College Cardiff Consultants Limited | Nucleotide phosphoramidates as anticancer agents |
CN104903339A (zh) * | 2012-11-16 | 2015-09-09 | 卡迪夫大学学院顾问有限公司 | 用于制备核苷前体药物的方法 |
Family Cites Families (15)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
TWI583692B (zh) * | 2009-05-20 | 2017-05-21 | 基利法瑪席特有限責任公司 | 核苷磷醯胺 |
US8618076B2 (en) | 2009-05-20 | 2013-12-31 | Gilead Pharmasset Llc | Nucleoside phosphoramidates |
JP2013527145A (ja) | 2010-03-31 | 2013-06-27 | ギリード・ファーマセット・エルエルシー | リン含有活性化剤の立体選択的合成 |
MX2013000656A (es) | 2010-07-19 | 2013-04-03 | Gilead Sciences Inc | Metodos para la preparacion de profarmacos de fosforamidato diastereomericamente puros. |
ES2716158T3 (es) * | 2010-11-30 | 2019-06-10 | Gilead Pharmasset Llc | 2'-spiro-nucleótidos para el tratamiento de hepatitis C |
US9156874B2 (en) * | 2011-01-03 | 2015-10-13 | Nanjing Molecular Research, Inc. | Double-liver-targeting phosphoramidate and phosphonoamidate prodrugs |
WO2013187978A1 (en) * | 2012-06-16 | 2013-12-19 | Nanjing Molecular Research, Inc. | Double-liver-targeting phosphoramidate and phosphonoamidate prodrugs |
ES2671478T3 (es) | 2012-08-31 | 2018-06-06 | Novartis Ag | Derivados de 2'-etinil nucleósidos para el tratamiento de infecciones virales |
MX353422B (es) | 2012-10-08 | 2018-01-12 | Idenix Pharmaceuticals Llc | Análogos de 2'-cloronucleósido para infección por vhc. |
WO2015081133A2 (en) * | 2013-11-27 | 2015-06-04 | Idenix Pharmaceuticals, Inc. | Nucleotides for the treatment of liver cancer |
JP6581100B2 (ja) * | 2014-02-06 | 2019-09-25 | リボサイエンス・エルエルシー | インフルエンザrna複製の阻害剤としての4’−ジフルオロメチル置換ヌクレオシド誘導体 |
MX2016015629A (es) * | 2014-06-25 | 2017-08-02 | Nucana Biomed Ltd | Formulacion que comprende un profarmaco de gemcitabina. |
EA034890B1 (ru) * | 2014-06-25 | 2020-04-02 | НУКАНА ПиЭлСи | Продукты гемцитабина |
JP6646663B2 (ja) * | 2014-07-22 | 2020-02-14 | ニューカナ バイオメッド リミテッドNucana Biomed Limited | ゲムシタビン−[フェニル(ベンゾキシ−l−アラニニル)]ホスフェートの製造方法リン酸誘導体を製造する方法 |
GB201417644D0 (en) * | 2014-10-06 | 2014-11-19 | Nucana Biomed Ltd | Method of separating phosphate diastereoisomers |
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Patent Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2005012327A2 (en) * | 2003-07-21 | 2005-02-10 | University College Cardiff Consultants Limited | Nucleotide phosphoramidates as anticancer agents |
CN104903339A (zh) * | 2012-11-16 | 2015-09-09 | 卡迪夫大学学院顾问有限公司 | 用于制备核苷前体药物的方法 |
Cited By (2)
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