CN106366078A

CN106366078A - 吲唑-噁二唑类衍生物、含其的药物组合物及其在抗肿瘤中的应用

Info

Publication number: CN106366078A
Application number: CN201510443488.XA
Authority: CN
Inventors: 盛荣; 胡永洲; 曹戟; 李姗; 裘妮; 赵梦丹; 杨波; 何俏军
Original assignee: Zhejiang University ZJU
Current assignee: Zhejiang University ZJU
Priority date: 2015-07-24
Filing date: 2015-07-24
Publication date: 2017-02-01

Abstract

本发明公开一种吲唑-噁二唑类衍生物，具有通式a结构：

Description

吲唑-噁二唑类衍生物、含其的药物组合物及其在抗肿瘤中的应用

技术领域

本发明涉及药物领域，具体涉及一种吲唑-噁二唑类衍生物、含其的药物组合物及其在抗肿瘤中的应用。

背景技术

虽然近年来肿瘤的早期诊断和治疗领域取得长足进步，抗肿瘤药物已经能够控制或延缓部分肿瘤的发展，如白血病，但是对于占恶性肿瘤90％以上的实体瘤的治疗远未达到满意的疗效。在实体瘤的发展过程中，低氧环境是它必须经历的环境条件之一，而肿瘤细胞处于低氧环境下，会作出一系列生物学特性改变，产生相应的对抗机制，如肿瘤血管生成、细胞增殖、细胞凋亡抑制、细胞周期停滞、能量代谢及侵袭转移等，从而产生对放疗、化疗的耐受，直接影响降低治疗效果。低氧诱导因子-1(HIF-1)在细胞适应低氧环境的各条信号传导通路中起核心作用，可调控有关肿瘤血管生成、糖类代谢、细胞存活、转录调节等上百种靶基因，因此，靶向HIF-1的低氧抗肿瘤策略已经成为当前抗肿瘤药物研究的热点。

目前已经发现的低氧诱导因子(HIF)有HIF-1,HIF-2和HIF-3三种。HIF-1于1992年由Semenza等首先发现，它是细胞在缺氧条件下的关键核转录调控因子，在细胞适应低氧环境的各条信号传导通路中起核心作用。HIF-2和HIF-3与HIF-1分别42％和37％的结构同源性，但是其功能尚未完全明。HIF-1是由HIF-1α和HIF-1β亚基组成的异源二聚体蛋白，HIF-1α为HIF-1所特有，它既是调节亚基也是功能亚基，二级结构包括碱基-螺旋-环-螺旋(bHLH)结构域、PAS结构域、氧依赖降解(ODD)结构域和转录激活域(N-TAD和C-TAD)，因此其蛋白表达水平受到细胞内氧浓度的调控。HIF-1β是结构亚基，不含氧依赖降解(ODD)结构域，在细胞内稳定表达。

由于HIF-1涉及信号通路、肿瘤基因众多，现有技术报道的HIF-1抑制剂之间结构差异巨大，药物之间相关性小，如PI3K抑制剂LY29400、mTOR抑制剂雷巴霉素、EGFR抑制剂吉非替尼、Topo I抑制剂拓扑替康、热休克蛋白HSP90抑制剂Geldanamycin等等。这些抑制剂通过干预细胞内HIF-1的转录、翻译和降解等重要生命环节，影响HIF-1的蛋白水平，但是，作为HIF-1非特异性的抑制剂，上述化合物易引起其他不可预测的生物学效应，体内毒副作用较大。因此，研制新型HIF-1的抑制剂有望为肿瘤治疗提供全新作用机制的临床药物。

发明内容

针对现有技术的不足，本发明所要解决的技术问题是提供一种新型的吲唑-噁二唑类衍生物、含其药物组合物及其作为HIF-1抑制剂在抗肿瘤中的应用。

术语说明：本发明所用术语“烷基”，除非指明不同数目的原子，是指包含1-6个碳原子的直链或支链烃链。本发明所用“烷基”的实例包括但不限于甲基、乙基、正丙基、正丁基、正戊基、异丁基、异丙基和叔丁基。“烷基”还包括取代烷基。所述烷基可任选被卤素或羟基一次或多次取代。因此，术语“烷基”可包括，如三氟甲基和三氟乙基，以及其它卤代烷基，和羟基甲基和所指明的其它羟基化的烷基。

本发明所用术语“烷氧基”是指-O-烷基基团，其中烷基如上所定义。本文所用“烷氧基”的实例包括但不限于甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基和叔丁氧基。“烷氧基”还包括取代烷氧基。烷氧基可任选被卤素取代一次或多次。

本发明所用术语“芳基”是指5-12个碳原子的全碳单环或稠合多环基团，具有完全共轭的π电子系统。芳基的非限制性实例有：苯环、萘环、蒽环。

本发明所用术语“杂环芳基”是指5-12个环原子的不饱和的碳环，其中一个或多个碳被杂原子例如氧、氮、硫等置换。杂芳环可以是单环，也可以是双环，即通过两个环稠合而成。具体的杂环芳基可以是：呋喃基，噻吩基，吡啶基，嘧啶基，吡嗪基，异恶唑基，异噻唑基、吡唑基、噻唑基、恶唑基和咪唑基等。

本发明所用术语“芳基胺”是指氨分子中的氢原子被芳基取代后的一类有机胺化合物，其中“芳基”如上所定义。

本发明所用术语“杂环芳基胺”是指氨分子中的氢原子被杂环芳基取代后的一类有机胺化合物，其中“杂环芳基”如上所定义。

本发明所用术语“脂肪胺”指氨分子中的氢原子被脂肪烷基取代后的一类有机胺化合物，包括烷基胺和环烷基胺。其中，“烷基胺”是指包含1-6个碳原子的直链胺或支链烃链胺，实例包括但不限于甲基胺、乙基胺、正丙基胺、正丁基胺、正戊基胺、异丁基胺、异丙基胺和叔丁基胺等。“环烷基胺”是指具有3-6个碳原子的饱和单环碳环胺，除非指明不同数目的原子，具体的“环烷基”包括例如环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基和环辛基。

本发明所用术语“含氮杂环脂肪胺”是指环烷基上至少有一个碳原子被氮原子取代后的一类有机胺化合物，实例包括但不限于吗啉、哌嗪、哌啶、四氢吡咯、氮杂环丁烷。“含氮杂环脂肪胺”还包括取代含氮杂环脂肪胺，具体包括N-甲基哌嗪、4-羟基哌啶、4-甲醇哌啶等。

本发明所用术语“卤素”指氟、氯、溴或碘。

本发明采用如下的技术方案：

一类吲唑-噁二唑类衍生物，具有通式a结构：

或其药学上可接受的盐或溶剂合物,其中：

X为O或N，Y为N，Z为N或O；

R₁选自-(CH₂)_m-N(R₃R₄)、苯甲酰基、苯胺甲酰基、苯磺酰基、R₅取代的苄基，m代表2-8的整数；其中，R₅选自氢、卤素、硝基、C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、CO-NR₃R₄、O(CH₂)_n-NR₃R₄， n代表2-6的整数；-NR₃R₄为胺；

R₂选自无取代或由R₆取代的芳基、杂环芳基、苄基；其中R₆选自卤素、C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、三氟甲氧基、三氟甲基、二甲胺基；

进一步地，本发明优选的吲唑-噁二唑类化合物，由X、Y、Z组成的五元环优选自

进一步地，本发明优选的吲唑-噁二唑类化合物，R₂选自无取代或由R₆取代的苯基、呋喃基、噻吩基、吡啶基、苄基；

进一步地，本发明优选的吲唑-噁二唑类化合物，所述的-NR₃R₄选自芳基胺、杂环芳基胺、脂肪胺、含氮杂环脂肪胺；

进一步地，本发明优选的吲唑-噁二唑类化合物，所述的-NR₃R₄选自五元或六元芳基胺、包含O、N或S原子的五元杂环芳基胺、包含O、N或S原子的六元杂环芳基胺、1-6个碳原子长度的脂肪胺、3-6元含氮杂环脂肪胺，例如苯胺，萘胺，咪唑-2-胺、噻吩-2-胺、噻唑-2-胺、丙胺、异丙胺、哌啶、吗啉、4-羟基哌啶、N-甲基哌嗪、哌啶-4-甲醇、环丙基胺等。作为优选，所述的包含O、N或S原子的五元或六元杂环芳基胺中，所述的O、N或S原子的数量可以是1-4个。

进一步地，本发明优选的吲唑-噁二唑类化合物，所述的R₁为R₅取代的苄基，其中，R₅为苄基的苯环上任意位置取代的O(CH₂)_n-NR₃R₄，R₂为R₆取代的苯基。

应了解，本发明包括本发明定义的特定基团的所有组合和亚组，包括上文的简述中定义的、在整个说明书中的各个实施例中所示例的以及所附权利要求中所述的取代基。

更具体地，本发明通式a结构的吲唑-噁二唑类衍生物的优选化合物选自：

5-(1-(4-氯苄基)-1H-吲唑-3-基)-3-(4-三氟甲氧基苯基)-1,2,4-噁二唑；

5-(1-(4-氯苄基)-1H-吲唑-3-基)-3-(4-甲氧基苯基)-1,2,4-噁二唑；

5-(1-(4-氯苄基)-1H-吲唑-3-基)-3-(4-三氟甲基苯基)-1,2,4-噁二唑；

5-(1-(4-氯苄基)-1H-吲唑-3-基)-3-(4-氯苯基)-1,2,4-噁二唑；

5-(1-(4-氯苄基)-1H-吲唑-3-基)-3-(吡啶-4-基)-1,2,4-噁二唑；

5-(1-(4-氯苄基)-1H-吲唑-3-基)-3-苯基-1,2,4-噁二唑；

3-(4-氯苄基)-5-(1-(4-氯苄基)-1H-吲唑-3-基)-1,2,4-噁二唑；

3-苄基-5-(1-(4-氯苄基)-1H-吲唑-3-基)-1,2,4-噁二唑；

3-(4-叔丁基苯基)-5-(1-(4-氯苄基)-1H-吲唑-3-基)-1,2,4-噁二唑；

2-(5-(1-(4-氯苄基)-1H-3-吲唑基)-3-1,2,4-噁二唑基)乙酸乙酯；

5-(1-(4-氯苄基)-1H-3-吲唑基)-3-(2-甲氧基苯基)-1,2,4-噁二唑；

5-(1-(4-氯苄基)-1H-吲唑-3-基)-3-(2-氯苯基)-1,2,4-噁二唑；

5-(1-(4-氯苄基)-1H-吲唑-3-基)-3-(4-二甲氨基苯基)-1,2,4-噁二唑；

5-(1-(4-氯苄基)-1H-吲唑-3-基)-3-(噻吩-2-基)-1,2,4-噁二唑；

5-(1-(4-氯苄基)-1H-吲唑-3-基)-3-(呋喃-2-基)-1,2,4-噁二唑；

5-(1-(4-氯苄基)-1H-吲唑-3-基)-3-(3-甲氧基苯基)-1,2,4-噁二唑；

5-(1-(4-氯苄基)-1H-吲唑-3-基)-3-(3-氯苯基)-1,2,4-噁二唑；

5-(1-(4-氯苄基)-1H-吲唑-3-基)-3-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1,2,4-噁二唑；

2-(5-(1-(4-氯苄基)-1H-吲唑-3-基)-1,2,4-噁二唑-3-基)乙醇；

5-(1-(4-氟苄基)-1H-吲唑-3-基)-3-(4-三氟甲氧基苯基)-1,2,4-噁二唑；

5-(1-(4-硝基苄基)-1H-吲唑-3-基)-3-(4-三氟甲氧基苯基)-1,2,4-噁二唑；

5-(1-(3-氟苄基)-1H-吲唑-3-基)-3-(4-三氟甲氧基苯基)-1,2,4-噁二唑；

5-(1-(4-甲氧基苄基)-1H-吲唑-3-基)-3-(4-三氟甲氧基苯基)-1,2,4-噁二唑；

5-(1-(2,6-二氟苄基)-1H-吲唑-3-基)-3-(4-三氟甲氧基苯基)-1,2,4-噁二唑；

5-(1-(吡啶-2基甲基)-1H-吲唑-3-基)-3-(4-三氟甲氧基苯基)-1,2,4-噁二唑；

5-(1-(吡啶-4-基甲基)-1H-吲唑-3-基)-3-(4-三氟甲氧基苯基)-1,2,4-噁二唑

5-(1-(4-甲基苄基)-1H-吲唑-3-基)-3-(4-三氟甲氧基苯基)-1,2,4-噁二唑；

N-(4-氯苯基)-3-(3-(4-三氟甲氧基苯基)-1,2,4-噁二唑-5-基)-1H-吲唑-1-羧酰胺；

(3-(3-(4-三氟甲氧基苯基)-1,2,4-噁二唑-5-基)-1H-吲唑-1-基)(4-氯苯基)甲酮；

5-(1-对甲苯磺酰基-1H-吲唑-3-基)-3-(4-三氟甲氧基苯基)-1,2,4-噁二唑；

5-(1-(3-(1-4-甲基哌嗪-丙基)-1H-3-吲唑基)-3-(4-三氟甲氧基苯基)-1,2,4-噁二唑；

5-(1-(3-(1-吗啉丙基)-1H-3-吲唑基)-3-(4-三氟甲氧基苯基)-1,2,4-噁二唑；

5-(1-(3-(1-4-羟基哌啶-丙基)-1H-3-吲唑基)-3-(4-三氟甲氧基苯基)-1,2,4-噁二唑；

吗啉-3-(3-(5-(3-(4-三氟甲氧基苯基))-1,2,4-噁二唑)-1H-吲唑甲基)苯甲酮；

(4-甲基哌嗪-1-基)(3-(3-(3-(4-三氟甲氧基苯基))-1,2,4-噁二唑-5-基)-1H-吲唑-1-基)甲基)苯甲酮；

5-(1-(3-(2(4-甲基哌嗪-1-基)乙氧基)苄基)-1H-吲唑-3-基)-3-(4-三氟甲氧基苯基)-1,2,4-噁二唑；

5-(1-(3-(2(吗啉-1-基)乙氧基)苄基)-1H-吲唑-3-基)-3-(4-三氟甲氧基苯基)-1,2,4-噁二唑；

5-(1-(3-(2(4-羟基哌啶-1-基)乙氧基)苄基)-1H-吲唑-3-基)-3-(4-三氟甲氧基苯基)-1,2,4-噁二唑；

N-(环丙基甲基)-2-(3-((3-(4-三氟甲氧基苯基)-1,2,4-噁二唑-5-基)-1H-吲唑-1-基)甲基)苯氧基)乙胺；

5-(1-(4-(2(4-羟基哌啶-1-基)乙氧基)苄基)-1H-吲唑-3-基)-3-(4-三氟甲氧基苯基)-1,2,4-噁二唑；

2-(1-(4-氯苄基)-1H-吲唑-3-基)-5-(吡啶-4-基)-1,3,4-噁二唑

或其上述化合物药学上可接受的盐或溶剂合物。

通式a结构的吲唑-噁二唑类衍生物可通过以下步骤合成：

化合物I系列的合成方法：

可以先引入吲唑1-位取代苄基，然后再制备3-取代-5-吲唑-1,2,4-噁二唑衍生物：

具体的反应过程可以是：吲唑-3羧酸(化合物3)与取代腈(化合物1)可直接购买。化合物1与盐酸羟胺在碱性条件下生成N-羟基苯甲脒衍生物(化合物2)，所用的碱可以是有机碱或无机碱，有机碱可以选用吡啶、三乙胺、N,N-二异丙基乙胺，无机碱可以选用碳酸钾、碳酸钠，所用的溶剂为乙醇-水，反应温度在20-90℃之间，具体情况见实施例。化合物3在氯化亚砜与低分子醇(如甲醇)作用下，室温反应得到吲唑-3羧酸酯(如化合物4)，再与R₅取代的苄基溴或者苄基氯在碱性条件下发生取代反应，得到1-(R₅取代苄基)-1H-吲唑-3羧酸甲酯(化合物5)，所用溶剂一般为N,N-二甲基甲酰胺(DMF)或者四氢呋喃(THF)，所用的碱主要是氢化钠或叔丁醇钾，反应温度在20-60℃之间。化合物5在碱性条件下水解得到1-(R₅取代苄基)-1H-吲唑-3羧酸(化合物6)，溶剂主要选用乙醇-水、二氧六环-水等，所用的碱主要是氢氧化锂、氢氧化钠、氢氧化钾等，反应温度在20-60℃之间。最后，化合物6在EDCI(1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐)和HOBt(1-羟基苯并三唑)作用下与N-羟基苯甲脒衍生物2反应得到目标化合物I系列，所用的溶剂为N,N-二甲基甲酰胺(DMF)，先室温反应两小时，然后加热至140℃反应半小时，经柱层析纯化可得纯品。

也可以先制备3-芳基-5-吲唑-1,2,4-噁二唑(化合物7)，再与R₅取代的苄基溴或苄基氯发生取代反应：

具体的反应过程可以是：化合物3与化合物2在EDCI和HOBt作用下反应得到3-芳基-5-吲唑-1,2,4-噁二唑(化合物7)，所用的溶剂为N,N-二甲基甲酰胺(DMF)或乙腈，室温反应两小时后再加热至140℃反应半小时，产物经柱层析纯化。化合物7与R₅取代的苄基溴或苄基氯在碱性条件下发生取代反应,经柱层析纯化得到目标化合物I，所用溶剂一般为N,N-二甲基甲酰胺(DMF)、四氢呋喃(THF)、乙腈等，所用的碱主要是碳酸钾、氢化钠或叔丁醇钾，一般在室温下反应。

化合物II-V系列化合物的合成方法：

首先合成3-芳基-5-吲唑-1,2,4-噁二唑(化合物7)，然后引入相应的吲唑N-1位取代基，制备系列化合物II，III，IV和V：

具体的反应过程可以是：化合物7与R₅取代的苯异氰酸酯衍生物发生取代反应,经过柱层析纯化得到系列化合物II，所用溶剂一般为四氢呋喃(THF)、乙腈、二氯甲烷、三氯甲烷等，一般在室温下反应。

化合物7与R₅取代苯甲酰氯衍生物在碱性条件下发生取代反应,经过柱层析纯化得到系列化合物III，所用溶剂一般为N,N-二甲基甲酰胺(DMF)、四氢呋喃(THF)、乙腈、二氧六环等，所用的碱为氢化钠、叔丁醇钾、氢氧化钠等，一般在室温下反应。

化合物7与R₅取代苯磺酰氯衍生物在碱性条件下发生取代反应,经过柱层析纯化得到系列化合物IV，所用溶剂一般为N,N-二甲基甲酰胺(DMF)、四氢呋喃(THF)、乙腈、二氧六环等，所用的碱为氢化钠、叔丁醇钾、氢氧化钠等，一般在室温下反应。

化合物7与1,3-溴氯丙烷在碱性条件下发生取代反应,得到化合物8，经过柱层析纯化，所用溶剂一般为DMF或THF，所用的碱主要是氢化钠或叔丁醇钾，一般在室温下反应。化合物8在碱性条件下与各种胺反应得到系列化合物V，所用的溶剂一般为乙腈或者四氢呋喃，所用的碱主要是三乙胺或者碳酸钾等，反应温度一般在80-100℃。

VI系列化合物的合成方法：

具体的反应过程可以是：化合物5与水合肼经取代反应得到化合物9，在二异丙基乙基胺(DIPEA)和O-苯并三氮唑-N,N,N',N'-四甲基脲四氟硼酸酯(TBTU)的催化下与取代羧酸R₂COOH发生反应，并进一步在DIPEA和对甲苯磺酰氯(TsCl)催化下环合，经柱层析纯化得到目标产物化合物VI，所用溶剂一般为乙腈、二氧六环、四氢呋喃等，在20-100℃下进行。

本发明还提供一种药物组合物，所述药物组合物包含至少一种活性组分以及至少一种药学上可接受的载体，所述的活性组分可任选自通式a结构的化合物及其优选化合物、所述化合物在药学上可接受的盐、所述化合物的溶剂合物中的任意一种或任意多种。

所述“药学上可接受的载体”是指药学领域常规的药物载体，包括药学领域的常规稀释剂、赋形剂如水等，填充剂如淀粉等，粘合剂如纤维素衍生物、明胶等，湿润剂如甘油，崩解剂如琼脂、碳酸钙等，吸收促进剂如季铵化合物，表面活性剂如十六烷醇，吸附载体如高岭土和皂黏土，润滑剂如滑石粉等，必要时还可以加入香味剂，甜味剂等。

药物制剂适用于通过任何适当途径给药，如口服(包括含服或舌下给药)、直肠给药、经鼻给药、局部给药(包括含服、舌下给药或经皮给药)、阴道给药或胃肠外给药(包括皮下注射、肌内注射、静脉注射或皮内注射)途径。这些制剂可由药剂学领域中已知的任何方法制备。例如通过将活性成分与载体或赋形剂混在一起的方法。

本发明提供所述的通式a结构的化合物及其优选化合物、所述化合物在药学上可接受的盐、所述化合物的溶剂合物、与其他药物联合使用在制备抗癌药物中的用途。进一步地，所述的癌症选自乳腺癌、肉瘤、肺癌、前列腺癌、结肠癌、直肠癌、肾癌、胰腺癌、血癌、成神经细胞瘤、神经胶质瘤、头癌、颈癌、甲状腺癌、肝癌、卵巢癌、外阴癌、子宫颈癌、子宫内膜癌、睾丸癌、膀胱癌、食管癌、胃癌、鼻咽癌、颊癌、口腔癌、胃肠道间质瘤、皮肤癌、多发性骨髓瘤。

能和本发明所提供的化合物或其可药用盐联合使用的抗肿瘤药包括但并非限定至少一种以下种类：有丝分裂抑制剂(如长春碱、长春地辛和长春瑞宾)；微管蛋白分解抑制剂(如泰素)；烷基化试剂(如顺铂、卡铂和环磷酰胺)；抗代谢物(如5-氟尿嘧啶、替加氟、甲氨蝶呤、阿糖胞苷和羟基脲)；可插入抗生素(如阿雷素、丝裂霉素和争光霉素)；酶(如天门冬氨酶)；拓朴异构酶抑制剂(如依托伯苷和喜树碱)；生物反应调节剂(如干扰素)；蛋白酶体抑制剂(如硼替佐米)。

本发明发明人通过多次实验证实，本发明所合成的化合物均具有HIF-1的抑制作用，其中大部分化合物对HIF-1有显著的抑制作用，对人结肠癌细胞株(HCT116)等肿瘤细胞株显示出强效的体内外抗HIF-1的作用。因此，本发明化合物可作为HIF-1抑制剂应用于治疗人或动物细胞增殖性相关的实体瘤的药物中。

附图说明

图1是化合物I-30、I-32对体内HIF-1转录活性的抑制作用图。其中，A图为化合物抑制小鼠体内HIF-1转录活性实验的操作流程图；B图为用药三天后，利用Xenogen成像系统显示对照组及用药组(化合物I-30、I-32及YC-1^[1])对体内HIF-1的抑制效果图；C图为用药组与对照组的冷光强度比值，取平均值±标准偏差(n≥3,*,p<0.05,***,p<0.001)。

具体实施方式

下面包含的特定实施例是为了举例说明，不应被理解为对本发明范围的限制。此外应理解，在阅读了本发明讲授的内容之后，本领域技术人员可以对本发明作各种改动或修改，这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定的范围。

实施例1：化合物2(取代N-羟基苯甲脒)的制备

4-三氟甲氧基-N-羟基苯甲脒(化合物2a)的制备

将盐酸羟胺(2.8g，40mmol)、碳酸钠(2.7g，26mmol)溶解于水(33mL)中，加入4-三氟甲氧基苯甲腈(3.0g，16mmol)和乙醇(17mL)，升温回流反应6小时。冷却至室温后用乙酸乙酯(2×100mL)提取，合并有机层，饱和NaCl洗涤，无水Na₂SO₄干燥，回收溶剂得白色粉末3.1g，产率89％；熔点：107-109℃；¹H-NMR(δ,DMSO-d₆)：9.76(s,1H,OH),7.79(d,2H,J＝8.5Hz,ArH),7.38(d,2H,J＝8.5Hz,ArH),5.90(s,2H,NH)。

4-甲氧基-N-羟基苯甲脒(化合物2b)的制备

操作过程同化合物2a的合成，只是用4–甲氧基苯甲腈代替4-三氟甲氧基苯甲腈，得到白色固体，产率65％；熔点：119-120℃。

4-三氟甲基-N-羟基苯甲脒(化合物2c)的制备

操作过程同化合物2a的合成，只是用4-三氟甲基苯甲腈代替4-三氟甲氧基苯甲腈，得到白色固体，产率92％；熔点：113-114℃；¹H-NMR(δ,DMSO-d₆)：9.92(s,1H,OH),7.90(d,2H,J＝8.5Hz,ArH),7.75(d,2H,J＝8.0Hz,ArH),5.98(s,2H,NH)。

4-氯-N-羟基苯甲脒(化合物2d)的制备

操作过程同化合物2a的合成，只是用4–氯苯甲腈代替4-三氟甲氧基苯甲腈，得到白色固体，产率81％；熔点：133-134℃。

4-吡啶基偕胺肟(化合物2e)的制备

操作过程同化合物2a的合成，只是用4–氰基吡啶代替4-三氟甲氧基苯甲腈，得到白色固体，产率90％；熔点：197-198℃。

N-羟基苯甲脒(化合物2f)的制备

操作过程同化合物2a的合成，只是用苯甲腈代替4-三氟甲氧基苯甲腈，得到白色固体，产率73％；熔点：73-75℃。

N-羟基-2-(4-氯苯基)乙脒(化合物2g)的制备

操作过程同化合物2a的合成，只是用2-(4-氯苯基)乙腈代替4-三氟甲氧基苯甲腈，得到白色固体，产率67％；熔点：94-96℃。

N-羟基2-苯基乙脒(化合物2h)的制备

操作过程同化合物2a的合成，只是用2-苯基乙腈代替4-三氟甲氧基苯甲腈，得到白色固体，产率70％；熔点：65-66℃。

4-叔丁基-N-羟基苯甲脒(化合物2i)的制备

操作过程同化合物2a的合成，只是用4–叔丁基苯甲腈代替4-三氟甲氧基苯甲腈，得到白色固体，产率73％；熔点：147-149℃；¹H-NMR(δ,CDCl₃)：7.57(d,2H,J＝8.5Hz,ArH),7.43(d,2H,J＝8.5Hz,ArH),4.90(brs,2H,NH),1.33(s,9H,3×CH₃)。

3-羟氨基-3-脒基丙酸乙酯(化合物2j)的制备

操作过程同化合物2a的合成，只是用氰乙酸乙酯代替4-三氟甲氧基苯甲腈，得到淡黄色固体，产率66％；熔点：58-59℃。

2-甲氧基-N-羟基苯甲脒(化合物2k)的制备

操作过程同化合物2a的合成，只是用2–甲氧基苯甲腈代替4-三氟甲氧基苯甲腈，得到白色固体，产率94％；熔点：104-105℃。

2-氯-N-羟基苯甲脒(化合物2l)的制备

操作过程同化合物2a的合成，只是用2–氯苯甲腈代替4-三氟甲氧基苯甲腈，得到白色固体，产率84％；熔点：116-118℃。

4-二甲氨基-N-羟基苯甲脒(化合物2m)的制备

操作过程同化合物2a的合成，只是用4–二甲氨基苯甲腈代替4-三氟甲氧基苯甲腈，得到白色固体，产率94％；熔点：179-180℃。

N-羟基-2-噻吩甲脒(化合物2n)的制备

操作过程同化合物2a的合成，只是用噻吩-2-腈代替4-三氟甲氧基苯甲腈，得到白色固体，产率73％；熔点：86-88℃。

N-羟基-2-呋喃甲脒(化合物2o)的制备

操作过程同化合物2a的合成，只是用呋喃-2-腈代替4-三氟甲氧基苯甲腈，得到白色固体，产率44％；熔点：52-53℃。

3-甲氧基-N-羟基苯甲脒(化合物2p)的制备

操作过程同化合物2a的合成，只是用3–甲氧基苯甲腈代替4-三氟甲氧基苯甲腈，得到白色固体，产率94％；熔点：100-102℃。

3-氯-N-羟基苯甲脒(化合物2q)的制备

操作过程同化合物2a的合成，只是用3–氯苯甲腈代替4-三氟甲氧基苯甲腈，得到白色固体，产率95.7％；熔点：111-112℃。

3,4,5-三甲氧基-N-羟基苯甲脒(化合物2r)的制备

操作过程同化合物2a的合成，只是用3,4,5-三甲氧基苯甲腈代替4-三氟甲氧基苯甲腈，得到白色固体，产率83.87％；熔点:155-157℃；¹H-NMR(δ,DMSO-d₆)：9.56(s,1H,OH),6.99(s,2H,ArH),5.82(s,2H,NH),3.80(s,6H,2×OCH₃),3.67(s,3H,OCH₃)。

实施例2：5-(1-(4-氯苄基)-1H-吲唑-3-基)-3-R₂-1,2,4-噁二唑(化合物I-1～I-19)的制备

步骤1. 1H-吲唑-3-羧酸甲酯(化合物4’)的制备

将1H-吲唑-3-羧酸(1.50g，9.3mmol)溶于甲醇(50mL)中，冰浴下缓慢加入二氯亚砜(2.20g，18.6mmol)，室温反应过夜。减压回收溶剂，残留物中加入水(30mL)，并用乙酸乙酯(2×100mL)萃取，合并有机层，饱和NaCl洗涤，无水Na₂SO₄干燥，回收溶剂得白色粉末1.51g，产率93.0％；熔点：163-165℃。

步骤2. 1-(4-氯苄基)-1H-吲唑-3-羧酸甲酯(化合物5’)的制备

将1H-吲唑-3-羧酸甲酯(化合物4’)(0.30g，1.7mmol)溶于无水DMF(5mL)中，冰浴下加入氢化钠(0.08g，1.8mmol)并室温搅拌30min，加入对氯氯苄(0.30g，1.8mmol)，继续反应4h后加水(20mL)淬灭，用乙酸乙酯(40mL)萃取两次，合并有机层，依次用水、饱和NaCl洗涤，无水Na₂SO₄干燥，浓缩后经硅胶柱层析纯化，以石油醚:二氯甲烷(3:5)洗脱，得白色固体0.29g，产率57％；熔点156-157℃；¹H-NMR(δ,CDCl₃)：8.28(d,1H,J＝8.0Hz,ArH),7.43(t,1H,J＝7.5Hz,ArH),7.36(m,2H,ArH),7.30(d,2H,J＝8.0Hz,ArH),7.18(d,2H,J＝8.0Hz,ArH),5.69(s,2H,benzylic-CH₂),4.07(s,3H,OCH₃)。

步骤3. 1-(4-氯苄基)-1H-吲唑-3-羧酸(化合物6’)的制备

将1-(4-氯苄基)-1H-吲唑-3-羧酸甲酯(化合物5’)(0.17g，0.58mmol)溶于四氢呋喃(5mL)中，室温下加入0.25N氢氧化钠水溶液(5mL)并反应过夜。加入乙酸乙酯(20mL)和水(15mL)，分出有机层，弃去；水层用1N盐酸调节PH至1，析出大量白色固体，抽滤，滤饼用少量水洗，减压干燥，得到白色固体0.11g，产率69％；熔点：196-197℃。

步骤4. 5-(1-(4-氯苄基)-1H-吲唑-3-基)-3-(4-三氟甲氧基苯基)-1,2,4-噁二唑(化合物I-1)的制备

将1-(4-氯苄基)-1H-吲唑-3-羧酸(化合物6’)(80mg，0.28mmol)溶于无水DMF(2.0mL)，加入EDCI(64mg，0.33mmol)和HOBt(45mg，0.33mmol)，室温搅拌30min后加入4-三氟甲氧基-N-羟基苯甲脒(化合物2a)(74mg，0.33mmol)继续反应1h，再升温至140℃反应1h，冷却至室温后加水(8mL)淬灭，乙酸乙酯(25mL)萃取两次，依次用水、饱和NaCl洗涤，无水Na₂SO₄干燥，浓缩后经硅胶柱层析纯化，以石油醚/二氯甲烷(1:1)洗脱，得白色固体97mg，产率74％；133-135℃；¹H-NMR(δ,CDCl₃)：8.37(d,1H,J＝8.0Hz,ArH),8.32(d,2H,J＝7.5Hz,ArH),8.00(d,1H,J＝8.5Hz,ArH),7.60-7.64(m,3H,ArH),7.51(t,1H,J＝7.5Hz,ArH),7.43(d,2H,J＝8.5Hz,ArH),7.38(d,2H,J＝8.5Hz,ArH),5.92(s,2H,benzylic-CH₂)。

5-(1-(4-氯苄基)-1H-吲唑-3-基)-3-(4-甲氧基苯基)-1,2,4-噁二唑(化合物I-2)的制备

操作过程同化合物I-1的制备，只是用化合物2b代替化合物2a，得到白色固体，产率57％；熔点：157-159℃；¹H-NMR(δ,CDCl₃)：8.35(d,1H,J＝8.5Hz,ArH),8.12(d,2H,J＝9.0Hz,ArH),7.98(d,1H,J＝8.5Hz,ArH),7.62(t,1H,J＝7.5Hz,ArH),7.49(t,1H,J＝7.5Hz,ArH),7.42(d,2H,J＝8.5Hz,ArH),7.36(d,2H,J＝8.5Hz,ArH),7.17(d,2H,J＝9.0Hz,ArH),5.90(s,2H,benzylic-CH₂),3.86(s,3H,OCH₃)。

5-(1-(4-氯苄基)-1H-吲唑-3-基)-3-(4-三氟甲基苯基)-1,2,4-噁二唑(化合物I-3)的制备

操作过程同化合物I-1的制备，只是用化合物2c代替化合物2a，得到白色固体，产率62％；熔点：185-186℃；¹H-NMR(δ,CDCl₃)：8.40(d,2H,J＝8.0Hz,ArH),8.37(d,1H,J＝8.5Hz,ArH),7.98-8.01(m,3H,ArH),7.63(t,1H,J＝7.5Hz,ArH),7.51(t,1H,J＝7.5Hz,ArH),7.42(d,2H,J＝8.5Hz,ArH),7.38(d,2H,J＝8.5Hz,ArH),5.91(s,2H,benzylic-CH₂)。

5-(1-(4-氯苄基)-1H-吲唑-3-基)-3-(4-氯苯基)-1,2,4-噁二唑(化合物I-4)的制备

操作过程同化合物I-1的制备，只是用化合物2d代替化合物2a，得到白色固体，产率71％；熔点：175-176℃；¹H-NMR(δ,CDCl₃)：8.34(d,1H,J＝8.0Hz,ArH),8.19(d,2H,J＝8.5Hz,ArH),7.99(d,1H,J＝8.5Hz,ArH),7.70(d,2H,J＝8.5Hz,ArH),7.62(t,1H,J＝7.5Hz,ArH),7.50(t,1H,J＝7.5Hz,ArH),7.42(d,2H,J＝8.5Hz,ArH),7.37(d,2H,J＝8.5Hz,ArH),5.91(s,2H,benzylic-CH₂)。

5-(1-(4-氯苄基)-1H-吲唑-3-基)-3-(吡啶-4-基)-1,2,4-噁二唑(化合物I-5)的制备

操作过程同化合物I-1的制备，只是用化合物2e代替化合物2a，得到白色固体，产率66％；熔点：182-184℃；¹H-NMR(δ,CDCl₃)：8.86(d,2H,J＝6.0Hz,ArH),8.37(d,2H,J＝8.5Hz,ArH),8.11(d,2H,J＝6.0Hz,ArH),8.00(d,1H,J＝8.5Hz,ArH),7.63(t,1H,J＝7.5Hz,ArH),7.51(t,1H,J＝7.5Hz,ArH),7.42(d,2H,J＝8.5Hz,ArH),7.37(d,2H,J＝9.0Hz,ArH),5.92(s,2H,benzylic-CH₂)。

5-(1-(4-氯苄基)-1H-吲唑-3-基)-3-苯基-1,2,4-噁二唑(化合物I-6)的制备

操作过程同化合物I-1的制备，只是用化合物2f代替化合物2a，得到白色固体，产率77％；熔点：144-145℃；¹H-NMR(δ,CDCl₃)：8.37(d,1H,J＝8.0Hz,ArH),8.19(dd,2H,J1＝8.0Hz,J1＝2.0Hz,ArH),7.99(d,1H,J＝8.5Hz,ArH),7.59-7.65(m,4H,ArH),7.50(t,1H,J＝7.5Hz,ArH),7.42(d,2H,J＝9.0Hz,ArH),7.37(d,2H,J＝9.0Hz,ArH),5.91(s,2H,benzylic-CH₂)。

3-(4-氯苄基)-5-(1-(4-氯苄基)-1H-吲唑-3-基)-1,2,4-噁二唑(化合物I-7)的制备

操作过程同化合物I-1的制备，只是用化合物2g代替化合物2a，得到白色固体，产率20％；熔点：126-128℃；¹H-NMR(δ,CDCl₃)：8.17(d,1H,J＝8.5Hz,ArH),7.95(d,1H,J＝8.5Hz,ArH),7.58(t,1H,J＝7.5Hz,ArH),7.40-7.44(m,5H,ArH),7.40(d,2H,J＝8.5Hz,ArH),7.32(d,2H,J＝8.5Hz,ArH),5.86(s,2H,benzylic-CH₂),4.24(s,2H,benzylic-CH₂)。

3-苄基-5-(1-(4-氯苄基)-1H-吲唑-3-基)-1,2,4-噁二唑(化合物I-8)的制备

操作过程同化合物I-1的制备，只是用化合物2h代替化合物2a，得到白色固体，产率23％；熔点：120-121℃；¹H-NMR(δ,CDCl₃)：8.17(d,1H,J＝8.5Hz,ArH),7.95(d,1H,J＝8.5Hz,ArH),7.58(t,1H,J＝7.5Hz,ArH),7.44(d,1H,J＝7.5Hz,ArH),7.37-7.41(m,6H,ArH),7.32(d,2H,J＝8.5Hz,ArH),7.28(t,1H,J＝7.5Hz,ArH),5.86(s,2H,benzylic-CH₂),4.23(s,2H,benzylic-CH₂)。

3-(4-叔丁基苯基)-5-(1-(4-氯苄基)-1H-吲唑-3-基)-1,2,4-噁二唑(化合物I-9)的制备

操作过程同化合物I-1的制备，只是用化合物2i代替化合物2a，得到白色固体，产率61％；熔点：162-163℃；¹H-NMR(δ,CDCl₃)：8.35(d,1H,J＝8.0Hz,ArH),8.10(d,2H,J＝8.5Hz,ArH),7.98(d,1H,J＝8.5Hz,ArH),7.65(d,2H,J＝8.5Hz,ArH),7.62(t,1H,J＝7.5Hz,ArH),7.50(t,1H,J＝7.5Hz,ArH),7.42(d,2H,J＝8.5Hz,ArH),7.36(d,2H,J＝8.5Hz,ArH),5.91(s,2H,benzylic-CH₂),1.34(s,9H,3×CH₃)。

2-(5-(1-(4-氯苄基)-1H-3-吲唑基)-3-1,2,4-噁二唑基)乙酸乙酯(化合物I-10)的制备

操作过程同化合物I-1的制备，只是用化合物2j代替化合物2a，得到白色固体，产率12.46％；熔点：147-148℃；¹H-NMR(δ,CDCl₃)：8.12(d,1H,J＝8.0Hz,ArH),7.97(d,1H,J＝8.5Hz,ArH),7.60(t,1H,J＝7.5Hz,ArH),7.46(t,1H,J＝7.5Hz,ArH),7.41(d,2H,J＝8.5Hz,ArH),7.35(d,2H,J＝8.5Hz,ArH),5.88(s,2H,benzylic-CH2),4.18(q,2H,J＝7.0Hz,CH₂CH₃),4.05(s,2H,CH2),1.29(t,3H,J＝7.0Hz,CH₂CH₃)。

5-(1-(4-氯苄基)-1H-3-吲唑基)-3-(2-甲氧基苯基)-1,2,4-噁二唑(化合物I-11)的制备

操作过程同化合物I-1的制备，只是用化合物2k代替化合物2a，得到白色固体，产率70％；熔点：154-155℃；¹H-NMR(δ,CDCl₃)：8.43-8.45(m,1H,ArH),8.35(dd,1H,J1＝7.5Hz,J2＝1.5Hz,ArH),7.52-7.55(m,1H,ArH),7.47-7.50(m,1H,ArH),7.40-7.43(m,2H,ArH),7.32(d,2H,J＝8.5Hz,ArH),7.24(d,2H,J＝9.0Hz,ArH),7.13-7.16(m,1H,ArH),7.12(d,1H,ArH),5.77(s,2H,benzylic-CH₂),4.05(s,3H,CH₃)。

5-(1-(4-氯苄基)-1H-吲唑-3-基)-3-(2-氯苯基)-1,2,4-噁二唑(化合物I-12)的制备

操作过程同化合物I-1的制备，只是用化合物2l代替化合物2a，得到白色固体，产率67％；熔点：132-133℃；¹H-NMR(δ,CDCl₃)：8.44(d,1H,J＝8.0Hz,ArH),8.17(dd,1H,J1＝8.0Hz,J2＝2.0Hz,ArH),7.61(dd,1H,J₁＝8.0Hz,J₂＝1.5Hz,ArH),7.41-7.51(m,5H,ArH),7.33(d,2H,J＝8.5Hz,ArH),7.25(d,2H,J＝9.0Hz,ArH),5.77(s,2H,benzylic-CH₂)。

5-(1-(4-氯苄基)-1H-吲唑-3-基)-3-(4-二甲氨基苯基)-1,2,4-噁二唑(化合物I-13)的制备

操作过程同化合物I-1的制备，只是用化合物2m代替化合物2a，得到白色固体，产率55％；熔点：205-207℃；¹H-NMR(δ,CDCl₃)：8.44(d,1H,J＝8.5Hz,ArH),8.16(d,2H,J＝9.9Hz,ArH),7.46-7.48(m,1H,ArH),7.39-7.42(m,2H,ArH),7.30(d,2H,J＝8.5Hz,ArH),7.22(d,2H,J＝7.5Hz,ArH),6.84(d,2H,J＝6.5Hz,ArH),5.75(s,2H,benzylic-CH₂),3.01(s,6H,2×CH₃)。

5-(1-(4-氯苄基)-1H-吲唑-3-基)-3-(噻吩-2-基)-1,2,4-噁二唑(化合物I-14)的制备

操作过程同化合物I-1的制备，只是用化合物2n代替化合物2a，得到白色固体，产率72％；熔点：173-174℃；¹H-NMR(δ,CDCl₃)：8.43(d,1H,J＝8.5Hz,ArH),8.01(dd,1H,J₁＝4.0Hz,J₂＝1.5Hz,ArH),7.58(dd,1H,J₁＝5.0Hz,J2＝1.0Hz,ArH),7.44-7.51(m,1H,ArH),7.42-7.45(m,2H,ArH),7.32(d,2H,J＝8.5Hz,ArH),7.21-7.24(m,3H,ArH),5.77(s,2H,benzylic-CH₂)。

5-(1-(4-氯苄基)-1H-吲唑-3-基)-3-(呋喃-2-基)-1,2,4-噁二唑(化合物I-15)的制备

操作过程同化合物I-1的制备，只是用化合物2o代替化合物2a，得到白色固体，产率67％；熔点：191-192℃；¹H-NMR(δ,CDCl₃)：8.41(d,1H,J＝9.0Hz,ArH),7.67(d,1H,J＝1.0Hz,ArH),7.46-7.50(m,1H,ArH),7.40-7.43(m,2H,ArH),7.34(d,2H,J＝3.0Hz,ArH),7.31(d,2H,J＝8.5Hz,ArH),7.23(d,2H,J＝8.5Hz,ArH),6.62(dd,1H,J₁＝3.5Hz,J₂＝2.0Hz,ArH),5.74(s,2H,benzylic-CH₂)。

5-(1-(4-氯苄基)-1H-吲唑-3-基)-3-(3-甲氧基苯基)-1,2,4-噁二唑(化合物I-16)的制备

操作过程同化合物I-1的制备，只是用化合物2p代替化合物2a，得到白色固体，产率73％；熔点：156-157℃；¹H-NMR(δ,CDCl₃)：8.46(d,1H,J＝8.5Hz,ArH),7.91(d,1H,J＝6.0Hz,ArH),7.82(s,1H,ArH),7.42-7.52(m,4H,ArH),7.33(d,2H,J＝8.5Hz,ArH),7.25(d,2H,J＝8.5Hz,ArH),7.12(dd,1H,J₁＝8.5Hz,J₂＝3.0Hz,ArH),5.77(s,2H,benzylic-CH₂),3.94(s,3H,CH₃)。

5-(1-(4-氯苄基)-1H-吲唑-3-基)-3-(3-氯苯基)-1,2,4-噁二唑(化合物I-17)的制备

操作过程同化合物I-1的制备，只是用化合物2q代替化合物2a，得到白色固体，产率67％；熔点：136-137℃；¹H-NMR(δ,CDCl₃)：8.44(d,1H,J＝8.0Hz,ArH),8.30(t,1H,J＝2.0Hz,ArH),8.16-8.18(m,1H,ArH),7.50-7.53(m,1H,ArH),7.46-7.49(m,2H,ArH),7.41-7.45(m,2H,ArH),7.31(d,2H,J＝8.5Hz,ArH),7.23(d,2H,J＝8.5Hz,ArH),5.76(s,2H,benzylic-CH₂)。

5-(1-(4-氯苄基)-1H-吲唑-3-基)-3-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1,2,4-噁二唑(化合物I-18)的制备

操作过程同化合物I-1的制备，只是用化合物2r代替化合物2a，得到白色固体，产率76％；熔点：125-126℃；¹H-NMR(δ,CDCl₃)：8.44(d,1H,J＝8.5Hz,ArH),7.54(s,2H,ArH),7.51(d,1H,J＝8.0Hz,ArH),7.43-7.46(m,2H,ArH),7.33(d,2H,J＝8.5Hz,ArH),7.26(d,2H,J＝8.5Hz,ArH),5.78(s,2H,benzylic-CH₂),4.01(s,6H,2×OCH₃),3.96(s,3H,OCH₃)。

2-(5-(1-(4-氯苄基)-1H-吲唑-3-基)-1,2,4-噁二唑-3-基)乙醇(化合物I-19)的制备

将氢化铝锂(52mg，1.38mmol)于0℃加入到无水乙醚(1mL)中，缓慢滴入化合物I-10(39mg，0.98mmol)的无水乙醚(5mL)溶液，0℃反应1h。缓慢向体系中加入水(2mL)和氯化铵饱和水溶液(2mL)淬灭反应，过滤。滤液用乙酸乙酯(15mL)萃取，依次水洗，饱和NaCl洗涤，无水Na₂SO₄干燥，浓缩后经硅胶柱层析纯化，以石油醚：乙酸乙酯(1:1)洗脱，得白色固体21mg，产率60％；熔点：118-119℃；¹H-NMR(δ,CDCl₃)：8.33(d,1H,J＝8.0Hz,ArH),7.47-7.50(m,1H,ArH),7.39-7.44(m,2H,ArH),7.32(d,2H,J＝8.5Hz,ArH),7.23(d,2H,J＝8.5Hz,ArH),5.73(s,2H,benzylic-CH₂),4.17(t,2H,J＝5.5Hz,CH₂),3.19(t,2H,J＝6.0Hz,CH₂)。

实施例3：5-(1-(R₅取代苄基)-1H-吲唑-3-基)-3-(4-三氟甲氧基苯基)-1,2,4-噁二唑(化合物I-20～I-27)的制备

步骤1. 5-(1H-吲唑-3-基)-3-(4-三氟甲氧基苯基)-1,2,4-噁二唑(化合物7’)的制备

将1H-吲唑-3-羧酸(702mg，4.3mmol)溶于无水DMF(24mL)中，加入EDCI(905mg，4.7mmol)和HOBt(638mg，4.7mmol)，室温搅拌30min后加入4-三氟甲氧基-N-羟基苯甲脒(化合物2a)(867mg，3.9mmol)并继续反应1h，再升温至140℃反应1h，冷却至室温后加水(60mL)淬灭，粗产品用乙酸乙酯(150mL)萃取，依次水洗，饱和NaCl洗涤，无水Na₂SO₄干燥，浓缩后经硅胶柱层析纯化，以石油醚：二氯甲烷(1:1)洗脱，得白色固体704mg，产率52％；熔点：209-210℃；¹H-NMR(δ,DMSO-d₆)：δ14.31(s,1H,N-H),8.36-8.32(m,3H,ArH),7.79(d,J＝8.5Hz,ArH),7.65(d,J＝8.6Hz,ArH),7.59(t,J＝8.0Hz,ArH),7.47(t,J＝8.0Hz,ArH)。

步骤2. 5-(1-(4-氟苄基)-1H-吲唑-3-基)-3-(4-三氟甲氧基苯基)-1,2,4-噁二唑(化合物I-20)的制备

将化合物7’(80mg，0.23mmol)溶于无水DMF(2mL)，冰浴下加入氢化钠(11mg，0.27mmol)，室温搅拌30min后加入对氟氯苄(40mg，0.27mmol)并继续反应4h，加水(5mL)淬灭，粗产品用乙酸乙酯(15mL)萃取，依次水洗，饱和NaCl洗涤，无水Na₂SO₄干燥，浓缩后经硅胶柱层析纯化，以石油醚：二氯甲烷(1:1)洗脱，得白色固体63mg，产率60％；熔点：128-130℃；¹H-NMR(δ,CDCl₃)：8.36(d,1H,J＝8.5Hz,ArH),8.32(d,2H,J＝9.0Hz,ArH),8.02(d,1H,J＝8.5Hz,ArH),7.60-7.63(m,3H,ArH),7.50(t,1H,J＝7.5Hz,ArH),7.40-7.43(m,2H,ArH),7.20(t,2H,J＝89.0Hz,ArH),5.90(s,2H,benzylic-CH₂)。

5-(1-(4-硝基苄基)-1H-吲唑-3-基)-3-(4-三氟甲氧基苯基)-1,2,4-噁二唑(化合物I-21)的制备

操作过程同化合物I-20的制备，只是用对硝基苄溴代替对氟氯苄，得到白色固体，产率17％；熔点：175-176℃；1H-NMR(δ,CDCl₃)：8.40(d,1H,J＝8.0Hz,ArH),8.33(d,2H,J＝9.0Hz,ArH),8.24(d,2H,J＝8.5Hz,ArH),8.02(d,1H,J＝8.5Hz,ArH),7.63-7.65(m,3H,ArH),7.57(d,2H,J＝8.5Hz,ArH),7.54(t,1H,J＝7.5Hz,ArH),6.11(s,2H,benzylic-CH₂)。

5-(1-(3-氟苄基)-1H-吲唑-3-基)-3-(4-三氟甲氧基苯基)-1,2,4-噁二唑(化合物I-22)的制备

操作过程同化合物I-20的制备，只是用间氟苄氯代替对氟氯苄，得到白色固体，产率46％；熔点：128-129℃；¹H-NMR(δ,CDCl₃)：8.39(d,1H,J＝8.0Hz,ArH),8.34(d,2H,J＝8.5Hz,ArH),8.02(d,1H,J＝8.5Hz,ArH),7.62-7.65(m,3H,ArH),7.53(t,1H,J＝7.5Hz,ArH),7.39-7.43(m,1H,ArH),7.22(d,1H,J＝9.5Hz,ArH),7.14-7.18(m,2H,ArH),5.96(s,2H,benzylic-CH₂)。

5-(1-(4-甲氧基苄基)-1H-吲唑-3-基)-3-(4-三氟甲氧基苯基)-1,2,4-噁二唑(化合物I-23)的制备

操作过程同化合物I-20的制备，只是用对甲氧基苄氯代替对氟氯苄，得到白色固体，产率33％；熔点：144-145℃；¹H-NMR(δ,CDCl₃)：8.34(d,1H,J＝8.0Hz,ArH),8.31(d,2H,J＝9.0Hz,ArH),8.00(d,1H,J＝8.5Hz,ArH),7.63(d,2H,J＝8.5Hz,ArH),7.59(d,1H,J＝8.0Hz,ArH),7.48(t,1H,J＝7.5Hz,ArH),7.34(d,2H,J＝8.5Hz,ArH),6.91(d,2H,J＝9.0Hz,ArH),5.81(s,2H,benzylic-CH₂),3.70(s,3H,OCH₃)。

5-(1-(2,6-二氟苄基)-1H-吲唑-3-基)-3-(4-三氟甲氧基苯基)-1,2,4-噁二唑(化合物I-24)的制备

操作过程同化合物I-20的制备，只是用2,6-二氟苄氯代替对氟氯苄，得到白色固体，产率37％；熔点：183-184℃；¹H-NMR(δ,CDCl₃)：8.36(d,1H,J＝8.5Hz,ArH),8.31(d,2H,J＝9.0Hz,ArH),8.04(d,1H,J＝8.5Hz,ArH),7.70(t,1H,J＝7.5Hz,ArH),7.63(d,2H,J＝8.5Hz,ArH),7.48-7.54(m,2H,ArH),7.21(t,2H,J＝8.0Hz,ArH),5.95(s,2H,benzylic-CH₂)。

5-(1-(吡啶-2基甲基)-1H-吲唑-3-基)-3-(4-三氟甲氧基苯基)-1,2,4-噁二唑(化合物I-25)的制备

操作过程同化合物I-20的制备，只是用2-氯甲基吡啶代替对氟氯苄，得到白色固体，产率42％；熔点：168-169℃；¹H-NMR(δ,CDCl₃)：8.51(d,1H,J＝4.0Hz,ArH),8.38(d,1H,J＝8.0Hz,ArH),8.33(d,2H,J＝8.5Hz,ArH),7.95(d,1H,J＝8.5Hz,ArH),7.82(t,1H,J＝7.5Hz,ArH),7.60-7.64(m,3H,ArH),7.52(t,1H,J＝7.5Hz,ArH),7.30-7.34(m,2H,ArH),6.02(s,2H,benzylic-CH₂)。

5-(1-(吡啶-4-基甲基)-1H-吲唑-3-基)-3-(4-三氟甲氧基苯基)-1,2,4-噁二唑(化合物I-26)的制备

操作过程同化合物I-20的制备，只是用4-氯甲基吡啶代替对氟氯苄，得到白色固体，产率50％；熔点：163-164℃；¹H-NMR(δ,CDCl₃)：8.55(d,2H,J＝6.0Hz,ArH),8.40(d,1H,J＝8.5Hz,ArH),8.33(d,2H,J＝8.5Hz,ArH),7.97(d,1H,J＝8.5Hz,ArH),7.62-7.65(m,3H,ArH),7.54(t,1H,J＝7.5Hz,ArH),7.23(d,2H,J＝5.5Hz,ArH),6.01(s,2H,benzylic-CH₂)。

5-(1-(4-甲基苄基)-1H-吲唑-3-基)-3-(4-三氟甲氧基苯基)-1,2,4-噁二唑(化合物I-27)的制备

操作过程同化合物I-20的制备，只是用对甲基氯苄代替对氟氯苄，得到白色固体，产率37％；熔点：129-130℃；¹H-NMR(δ,CDCl₃)：8.35(d,1H,J＝8.5Hz,ArH),8.31(d,2H,J＝8.5Hz,ArH),7.97(d,1H,J＝8.5Hz,ArH),7.63(d,2H,J＝8.0Hz,ArH),7.61(t,1H,J＝7.5Hz,ArH),7.25(d,2H,J＝8.0Hz,ArH),7.21(t,1H,J＝8.0Hz,ArH),7.15(d,2H,J＝8.0Hz,ArH),5.84(s,2H,benzylic-CH₂),2.24(s,3H,CH₃)。

实施例4：R₂R₁N-3-(3-(5-(3-(4-三氟甲氧基苯基))-1,2,4-噁二唑)-1H-吲唑甲基)苯甲酮(化合物I-28～I-29)的制备

步骤1. 3-溴甲基苯甲酸(化合物10)的制备

将间甲基苯甲酸(2.0g，14.7mmol)和过氧化苯甲酰(BPO，0.036g，0.15mmol)溶于二氯甲烷(6mL)并加热回流，分批加入NBS(2.6g，14.7mmol)，继续加热回流2h，冷却至室温后加水(10mL)淬灭反应，用二氯甲烷(50mL)萃取，依次水洗，饱和NaCl洗涤，无水Na₂SO₄干燥，浓缩后得淡黄色固体2.7g，产率86％；熔点149-151℃。

步骤2.(3-溴甲基苯基)(吗啉)甲酮(化合物11)的制备

将3-溴甲基苯甲酸(1.3g，5.9mmol)和二氯亚砜(0.8mL，10.8mmol)加入无水反应瓶中，加热回流1.5h后减压除去二氯亚砜。向反应瓶中加入无水二氯甲烷(10mL)溶解剩余物，冷却至0℃，缓慢加入二异丙基乙基胺(1.40g，10.8mmol)和吗啉(0.51g，5.9mmol)，0℃继续反应20min后加入饱和碳酸氢钠水溶液(10mL)淬灭反应，用二氯甲烷(50mL)萃取，依次水洗，饱和NaCl洗涤，无水Na₂SO₄干燥，浓缩后得淡黄色油状物1.55g，产率93％；ESI-MS:m/z＝248[M+1]⁺.

(3-溴甲基苯基)(4-甲基哌啶-1-基)甲酮(化合物12)的制备

操作过程同化合物11的制备，只是用N-甲基哌嗪代替吗啉，得淡黄色油状物，产率90％；ESI-MS:m/z＝297[M+1]⁺。

步骤3.吗啉-3-(3-(5-(3-(4-三氟甲氧基苯基))-1,2,4-噁二唑)-1H-吲唑甲基)苯甲酮(化合物I-28)的制备

操作过程同化合物I-20的制备，只是用化合物11代替对氟氯苄，得到白色固体，产率15％；熔点：124-126℃；¹H-NMR(δ,CDCl₃)：8.35(d,1H,J＝8.5Hz,ArH),8.30(d,2H,J＝9.0Hz,ArH),8.88(d,1H,J＝8.5Hz,ArH),7.59-7.62(m,3H,ArH),7.50(t,1H,J＝7.5Hz,ArH),7.42-7.43(m,2H,ArH),7.38(s,1H,ArH),7.33-7.35(m,1H,ArH),5.95(s,2H,benzylic-CH₂),3.26-3.56(m,8H,morpholine)。

(4-甲基哌嗪-1-基)(3-(3-(3-(4-三氟甲氧基苯基))-1,2,4-噁二唑-5-基)-1H-吲唑-1-基)甲基)苯甲酮(化合物I-29)的制备

操作过程同化合物I-20的制备，只是用化合物12代替对氟氯苄，得到白色固体，产率19％；熔点：129-130℃；¹H-NMR(δ,CDCl₃)：8.48(d,1H,J＝8.5Hz,ArH),8.31-8.27(m3H,ArH),7.85(d,1H,J＝8.5Hz,ArH),7.60-7.50(m,2H,ArH),7.46-7.37(m,5H,ArH),5.97(s,2H,benzylic-CH₂),3.71(brs,4H,piperazine),3.15(s,3H,CH3),2.36(brs,4H,piperazine)。实施例5：化合物I-30～化合物I-34的制备

步骤1. 3-叔丁基二甲基硅氧基苯甲酸甲酯(化合物13)的制备

将间羟基苯甲酸甲酯(3.3g，21.7mmol)、二甲氨基吡啶(DMAP)(0.13g，1.1mmol)与三乙胺(6.0mL，43.4mmol)溶于二氯甲烷(30mL)中，冰浴下缓慢加入叔丁基二甲基氯硅烷(6.6g，43.4mmol)的二氯甲烷(10mL)溶液，室温搅拌过夜。依次用饱和 NH₄Cl、饱和NaCl洗涤，无水Na₂SO₄干燥，浓缩后经硅胶柱层析纯化，以石油醚/二氯甲烷(10:1)洗脱，得无色油状物4.6g，产率79％；¹H-NMR(δ,CDCl₃)：7.64(d,1H,J＝8.0Hz,ArH),7.49(d,1H,J＝2.0Hz,ArH),7.31(t,1H,J＝8.0Hz,ArH),7.04(dd,1H,J₁＝8.0Hz,J₂＝2.0Hz,ArH),3.90(s,3H,OCH₃),0.99(s,9H,3×CH₃),0.22(s,6H,2×CH₃)。

4-叔丁基二甲基硅氧基苯甲酸甲酯(化合物14)的制备

操作过程同化合物13的制备，只是用对羟基苯甲酸甲酯代替间羟基苯甲酸甲酯，得到无色油状物，产率73％；¹H-NMR(δ,CDCl₃)：7.95(d,2H,J＝8.0Hz,ArH),6.86(d,2H,J＝8.0Hz,ArH),4.36(q,2H,OCH₂CH₃),1.38(t,3H,OCH₂CH₃),0.98(s,9H,3×CH₃),0.22(s,6H,2×CH₃)。

步骤2. 3-溴甲基苯氧基叔丁基二甲基硅烷(化合物15)的制备

将氢化铝锂(1.4g，37.5mmol)加入到无水四氢呋喃(30mL)中，室温搅拌10min后冷却至0℃，缓慢加入化合物13(4.0g，15.0mmol)的无水四氢呋喃(20mL)溶液，继续反应30min.，0℃缓慢加入水(20mL)淬灭反应，再加入饱和NH₄Cl溶液(50mL)，过滤，滤液用乙酸乙酯(40mL)萃取两次，依次用水、饱和NaCl洗涤，无水Na₂SO₄干燥，浓缩后经硅胶柱层析纯化，以石油醚:二氯甲烷(1:2)洗脱，得无色油状物2.4g。将三苯基膦(1.7g，6.6mmol)、咪唑(0.5g，7.4mmol)溶于无水二氯甲烷(20mL)并于0℃缓慢加入液溴(0.32mL，6.4mmol)，搅拌15min后加入上述油状物(1.2g，4.9mmol)的二氯甲烷(4mL)溶液，保持0℃继续反应1h。二氯甲烷稀释，依次水洗，饱和NaCl洗涤，无水Na₂SO₄干燥，浓缩后经硅胶柱层析纯化，以石油醚:二氯甲烷(1.5:1)洗脱，得无色油状物0.65g，产率44％；¹H-NMR(δ,CDCl₃)：7.21(t,1H,J＝8.0Hz,ArH),6.99(d,1H,J＝8.0Hz,ArH),6.88(d,1H,J＝2.0Hz,ArH),6.78(dd,1H,J₁＝8.0Hz,J₂＝2.0Hz,ArH),4.44(s,2H,benzylic-CH₂),0.99(s,9H,3×CH₃),0.21(s,6H,2×CH₃)。

4-溴甲基苯氧基叔丁基二甲基硅烷(化合物16)的制备

操作过程同化合物15的制备，只是用化合物14代替化合物13，得到无色油状物，产率55％；¹H-NMR(δ,CDCl₃):7.27(d,2H,J＝8.5Hz,ArH),6.80(d,2H,J＝8.5Hz,ArH),4.49(s,2H,benzylic-CH₂),0.98(s,9H,3×CH₃),0.20(s,6H,2×CH₃)。

步骤3. 5-(1-(3-((叔丁基二甲基硅基)氧基)苄基)-1H-吲唑-3-基)-3-(4-三氟甲氧基苯基)-1,2,4-噁二唑(化合物17)的制备

操作过程同化合物I-20的制备，只是用化合物15代替对氟氯苄，得到白色固体，产率31％；熔点：139-140℃；¹H-NMR(δ,CDCl₃)：8.42(d,1H,J＝8.0Hz,ArH),8.35(d,2H,J＝9.0Hz,ArH),7.46-7.41(m,2H,ArH),7.39(d,2H,J＝8.5Hz,ArH),7.19(t,1H,J＝8.0Hz,ArH),6.89(d,1H,J＝8.0Hz,ArH),6.76(d,1H,J＝8.0Hz,ArH),6.72(s,1H,ArH),5.74(s,2H,benzylic-CH₂),0.91(s,9H,3×CH₃),0.09(s,6H,2×CH₃).

5-(1-(4-((叔丁基二甲基硅基)氧基)苄基)-1H-吲唑-3-基)-3-(4-三氟甲氧基苯基)-1,2,4-噁二唑 (化合物18)的制备

操作过程同化合物I-20的制备，只是用化合物16代替对氟氯苄，得到白色固体，产率38％；熔点：142-143℃；¹H-NMR(δ,CDCl₃)：8.41(d,1H,J＝8.0Hz,ArH),8.34(d,2H,J＝9.0Hz,ArH),7.46(d,2H,J＝8.0Hz,ArH),7.42-7.39(m,1H,ArH),7.38(d,2H,J＝9.0Hz,ArH),7.19(d,2H,J＝8.5Hz,ArH),6.79(d,2H,J＝8.5Hz,ArH),5.72(s,2H,benzylic-CH₂),0.95(s,9H,3×CH₃),0.16(s,6H,2×CH₃)。

步骤4. 5-(1-(3-羟基苄基)-1H-3-吲唑基)-3-(4-三氟甲氧基苯基)-1,2,4-噁二唑(化合物19)的制备

将化合物17(49mg，0.086mmol)溶于无水四氢呋喃(3mL)中，0℃缓慢加入四丁基氟化铵(45mg，0.17mmol)的四氢呋喃(2mL)溶液，室温反应30min，用乙酸乙酯稀释，依次水洗，饱和NaCl洗涤，无水Na₂SO₄干燥，浓缩后经硅胶柱层析纯化，以石油醚:乙酸乙酯(1.5:1)洗脱，得白色固体37mg，产率97％，熔点：173-174℃；¹H-NMR(δ,CDCl₃)：8.39(d,1H,J＝8.0Hz,ArH),8.28(d,2H,J＝9.0Hz,ArH),7.43(d,2H,J＝8.5Hz,ArH),7.40-7.37(m,1H,ArH),7.36(d,2H,J＝8.5Hz,ArH),7.23(t,1H,J＝7.5Hz,ArH),6.89(d,1H,J＝8.0Hz,ArH),6.78-6.76(m,1H,ArH),6.69(s,1H,ArH),5.73(s,2H,benzylic-CH₂)。

5-(1-(4-羟基苄基)-1H-3-吲唑基)-3-(4-三氟甲氧基苯基)-1,2,4-噁二唑(化合物20)的制备

操作过程同化合物19的制备，只是用化合物18代替化合物17，得到白色固体，产率92％；熔点：220-221℃；¹H-NMR(δ,CDCl₃)：8.41(d,1H,J＝8.5Hz,ArH),8.34(d,2H,J＝9.0Hz,ArH),7.47(d,2H,J＝2.5Hz,ArH),7.43-7.41(m,1H,ArH),7.39(d,2H,J＝8.5Hz,ArH),7.28(d,2H,J＝8.5Hz,ArH),6.88(d,2H,J＝9.0Hz,ArH),5.73(s,2H,benzylic-CH₂)。

步骤5. 5-(1-(3-(2-溴乙氧基)苄基)-1H-3-吲唑基)-3-(4-三氟甲氧基苯基)-1,2,4-噁二唑(化合物21)的制备

将化合物19(150mg，0.33mmol)和1,2-二溴乙烷(0.3mL，3.3mmol)溶于无水丙酮(20mL)中，加入无水碳酸钾(275mg，2.0mmol)，回流反应24h后用乙酸乙酯稀释，依次水洗，饱和NaCl洗涤，无水Na₂SO₄干燥，浓缩后经硅胶柱层析纯化，以石油醚:乙酸乙酯(5:1)洗脱，得白色固体75mg，产率52％，熔点：164-165℃；¹H-NMR(δ,CDCl₃)： 8.43(d,1H,J＝8.5Hz,ArH),8.34(d,2H,J＝9.0Hz,ArH),7.48-7.45(m,2H,ArH),7.43-7.40(m,1H,ArH),7.39(d,2H,J＝8.0Hz,ArH),7.26-7.24(m,1H,ArH),6.92(d,1H,J＝7.5Hz,ArH),6.85-6.83(m,2H,ArH),5.76(s,2H,benzylic-CH₂),4.24(t,2H,J＝7.5Hz,CH₂),3.60(t,2H,J＝7.5Hz,CH₂)。

5-(1-(4-(2-溴乙氧基)苄基)-1H-3-吲唑基)-3-(4-三氟甲氧基苯基)-1,2,4-噁二唑(化合物22)的制备

操作过程同化合物21的制备，只是用化合物20代替化合物19，得到白色固体，产率46％；熔点：133-134℃；¹H-NMR(δ,CDCl₃)：8.42(d,1H,J＝8.0Hz,ArH),8.34(d,2H,J＝8.5Hz,ArH),7.49-7.45(m,2H,ArH),7.43-7.41(m,1H,ArH),7.39(d,2H,J＝8.5Hz,ArH),7.28(d,2H,J＝8.5Hz,ArH),6.88(d,2H,J＝9.0Hz,ArH),5.73(s,2H,benzylic-CH₂),4.27(t,2H,J＝6.0Hz,CH₂),3.62(t,2H,J＝7.5Hz,CH₂)。

步骤6. 5-(1-(3-(2(4-甲基哌嗪-1-基)乙氧基)苄基)-1H-吲唑-3-基)-3-(4-三氟甲氧基苯基)-1,2,4-噁二唑(化合物I-30)的制备

将化合物21(40mg，0.072mmol)溶于无水乙腈(4mL)中，加入无水碳酸钾(59mg，0.42mmol)和N-甲基哌嗪(43mg，0.42mmol)，加热回流24h后冷却至室温，加水(5mL)淬灭反应，粗产品用乙酸乙酯(50mL)萃取，依次水洗，饱和NaCl洗涤，无水Na₂SO₄干燥，浓缩后经硅胶柱层析纯化，以乙酸乙酯：甲醇：三乙胺(50:5:1)洗脱，得淡黄色固体21mg，产率52％；熔点：62-63℃；¹H-NMR(δ,CDCl₃)：8.41(d,1H,J＝8.0Hz,ArH),8.33(d,2H,J＝8.5Hz,ArH),7.47-7.43(m,2H,ArH),7.42-7.40(m,1H,ArH),7.38(d,2H,J＝8.5Hz,ArH),7.24(t,1H,J＝7.5Hz,ArH),6.91-6.84(m,2H,ArH),6.83(d,1H,J＝8.0Hz,ArH),5.74(s,2H,benzylic-CH₂),4.03(t,2H,J＝6.0Hz,CH₂),2.76(t,2H,J＝6.0Hz,CH₂),2.57-2.46(brd,8H,piperazine),2.70(s,3H,CH₃)；¹³C-NMR(δ,CDCl₃)：171.25,167.75,159.21,151.33,140.56,136.91,130.04,130.00,129.49,127.70,125.43,123.74,123.20,121.73,121.06,119.76,114.20,113.78,110.39,65.89,57.03,55.01,54.97,54.25,53.53,45.99。

5-(1-(3-(2(吗啉-1-基)乙氧基)苄基)-1H-吲唑-3-基)-3-(4-三氟甲氧基苯基)-1,2,4-噁二唑(化合物I-31)的制备

操作过程同化合物I-30的制备，只是用吗啉代替N-甲基哌嗪，得到白色固体，产率61％；熔点：62-63℃；¹H-NMR(δ,CDCl₃)：8.41(d,1H,J＝8.0Hz,ArH),8.33(d,2H,J＝9.0Hz,ArH),7.49-7.41(m,2H,ArH),7.42-7.39(m,1H,ArH),7.38(d,2H,J＝8.0Hz,ArH),6.89 (d,1H,J＝7.5Hz,ArH),6.84-6.82(m,2H,ArH),5.74(s,2H,benzylic-CH₂),4.05(t,2H,J＝5.5Hz,CH₂),3.71(t,4H,J＝4.5Hz,morpholine),2.75(t,2H,J＝5.5Hz,CH2),2.54(t,4H,J＝4.5Hz,morpholine)；¹³C-NMR(δ,CDCl₃)：171.24,167.76,159.14,151.33,140.56,136.95,130.06,130.02,129.48,127.71,125.40,123.75,123.20,121.74,121.07,119.84,114.20,113.76,110.37,66.83,65.68,57.50,54.23,54.03。.

5-(1-(3-(2(4-羟基哌啶-1-基)乙氧基)苄基)-1H-吲唑-3-基)-3-(4-三氟甲氧基苯基)-1,2,4-噁二唑(化合物I-32)的制备

操作过程同化合物I-30的制备，只是用4-羟基哌啶代替N-甲基哌嗪，得到白色固体，产率86％；熔点：60-61℃；¹H-NMR(δ,DMSO-d₆)：8.37(d,1H,J＝8.5Hz,ArH),8.33(d,2H,J＝8.5Hz,ArH),8.00(d,1H,J＝8.5Hz,ArH),7.65-7.60(m,3H,ArH),7.50(t,1H,J＝7.5Hz,ArH),7.26(t,1H,J＝8.0Hz,ArH),6.94(t,1H,J＝1.5Hz,ArH),6.88-6.86(m,2H,ArH),5.87(s,2H,benzylic-CH₂),4.53(d,1H,J＝4.0Hz,OH),4.02(t,2H,J＝5.5Hz,CH₂),3.44-3.39(m,1H,piperidine),2.74-2.72(m,2H,CH2),2.61-2.59(m,2H,piperidine),2.09-2.05(m,2H,piperidine),1.68-1.65(m,2H,piperidine),1.37-1.32(m,2H,piperidine)；¹³C-NMR(δ,CDCl₃)：δ171.23,167.75,158.93,151.33,140.56,136.98,130.06,129.48,127.74,125.38,123.76,123.18,121.73,121.07,119.92,114.13,113.81,110.38,65.39,56.58,54.19,50.94,50.91,33.50。

N-(环丙基甲基)-2-(3-((3-(4-三氟甲氧基苯基)-1,2,4-噁二唑-5-基)-1H-吲唑-1-基)甲基)苯氧基)乙胺(化合物I-33)的制备

操作过程同化合物I-30的制备，只是用环丙基胺代替N-甲基哌嗪，得到白色固体，产率59％；熔点：65-66℃；¹H-NMR(δ,DMSO)：8.36(d,1H,J＝8.5Hz,ArH),8.32(d,2H,J＝9.0Hz,ArH),7.98(d,1H,J＝8.5Hz,ArH),7.64-7.59(m,3H,ArH),7.50(t,1H,J＝7.5Hz,ArH),7.26(t,1H,J＝8.0Hz,ArH),6.91(d,1H,J＝2.0Hz,ArH),6.89-6.86(m,2H,ArH),5.86(s,2H,benzylic-CH₂),3.96(t,2H,J＝6.0Hz,CH₂),2.88(t,2H,J＝6.0Hz,CH₂),2.10-2.06(m,1H,cyclopropyl),0.33-0.30(m,2H,cyclopropyl),0.19-0.16(m,2H,cyclopropyl)。

5-(1-(4-(2(4-羟基哌啶-1-基)乙氧基)苄基)-1H-吲唑-3-基)-3-(4-三氟甲氧基苯基)-1,2,4-噁二唑(化合物I-34)的制备

操作过程同化合物I-30的制备，只是用4-羟基哌啶代替N-甲基哌嗪，用化合物22代替21，得到白色固体，产率62％；熔点：103-104℃；¹H-NMR(δ,CDCl₃)：8.41(d,1H,J＝ 8.0Hz,ArH),8.34(d,2H,J＝9.0Hz,ArH),7.47(d,2H,J＝8.5Hz,ArH),7.42-7.39(m,1H,ArH),7.39(d,2H,J＝8.5Hz,ArH),7.26(d,2H,J＝8.5Hz,ArH),6.86(d,2H,J＝9.0Hz,ArH),5.72(s,2H,benzylic-CH₂),4.07(s,2H,CH₂),2.87(s,2H,CH₂),2.80(s,2H,piperidine),2.30(s,2H,piperidine),1.62(s,4H,piperidine),1.39(s,1H,piperidine)。

实施例6：N-(4-氯苯基)-3-(3-(4-三氟甲氧基苯基)-1,2,4-噁二唑-5-基)-1H-吲唑-1-羧酰胺(化合物II-1)的制备

将70mg(0.20mmol)化合物7’溶于无水四氢呋喃(2mL)，加入31mg(0.20mmol)对氯苯基异氰酸酯，加热回流反应10h，加水(5mL)淬灭，粗产品用乙酸乙酯(15mL)萃取，依次水洗，饱和NaCl洗涤，无水Na₂SO₄干燥，浓缩后经硅胶柱层析纯化，以石油醚/二氯甲烷(4:1)洗脱，得白色固体25mg，产率25％；熔点：118-119℃；¹H-NMR(δ,DMSO-d₆)：14.32(s,1H,CONH),8.35-8.31(m,3H,ArH),7.79(d,1H,J＝8.0Hz,ArH),7.65(d,2H,J＝8.0Hz,ArH),7.58(t,1H,J＝8.0Hz,ArH),7.48(t,1H,J＝8.0Hz,ArH),7.01(d,2H,J＝9.0Hz,ArH),6.54(d,2H,J＝9.0Hz,ArH),5.23(s,2H,benzylic-CH₂)。

实施例7：(3-(3-(4-三氟甲氧基苯基)-1,2,4-噁二唑-5-基)-1H-吲唑-1-基)(4-氯苯基)甲酮(化合物III-1)的制备

操作过程同化合物I-20的制备，只是用4-氯苯甲酰氯代替对氟氯苄，得到白色固体，产率40％；熔点：160-161℃；¹H-NMR(δ,CDCl₃)：8.66(d,1H,J＝8.5Hz,ArH),8.55(d,1H,J＝8.0Hz,ArH),8.33(d,2H,J＝9.0Hz,ArH),8.21(d,2H,J＝9.0Hz,ArH),7.79(t,1H,J＝7.0Hz,ArH),7.66(t,1H,J＝8.0Hz,ArH),7.59(d,2H,J＝8.5Hz,ArH),7.41(d,2H,J＝8.0Hz,ArH)。

实施例8：5-(1-对甲苯磺酰基-1H-吲唑-3-基)-3-(4-三氟甲氧基苯基)-1,2,4-噁二唑(化合物IV-1)的制备

操作过程同化合物I-20的制备，只是用对甲苯磺酰氯代替对氟氯苄，得到白色固体，产率52％；熔点：188-189℃；¹H-NMR(δ,CDCl₃)：8.44(d,1H,J＝8.0Hz,ArH),8.34(d,1H, J＝8.5Hz,ArH),8.30(d,2H,J＝8.5Hz,ArH),8.02(d,1H,J＝8.5Hz,ArH),7.70(t,1H,J＝8.0Hz,ArH),7.56(t,1H,J＝7.5Hz,ArH),7.39(d,2H,J＝8.0Hz,ArH),7.32(d,2H,J＝8.5Hz,ArH),2.38(s,3H,CH₃)。

实施例9：5-(1-(3-NR₁R₂-1H-3-吲唑基)-3-(4-三氟甲氧基苯基)-1,2,4-噁二唑(化合物V-1～V-3)的制备

步骤1. 5-(1-(3-氯丙基)-1H-吲唑-3-基)-3-(4-三氟甲氧基苯基)-1,2,4-噁二唑(化合物8’)的制备

操作过程同化合物I-20的制备，只是用1,3-溴氯丙烷代替对氟氯苄，得到白色固体，产率54％；熔点：106-107℃；¹H-NMR(δ,CDCl₃)：8.42(d,1H,J＝8.5Hz,ArH),8.34(d,2H,J＝8.5Hz,ArH),7.67(d,1H,J＝8.5Hz,ArH),7.58(t,1H,J＝7.5Hz,ArH),7.46(t,1H,J＝7.5Hz,ArH),7.39(d,2H,J＝8.5Hz,ArH),4.77(t,2H,J＝7.0Hz,CH₂),3.57(t,2H,J＝6.0Hz,CH₂),2.57-2.52(m,2H,CH₂)。

步骤2. 5-(1-(3-(1-4-甲基哌嗪-丙基)-1H-3-吲唑基)-3-(4-三氟甲氧基苯基)-1,2,4-噁二唑(化合物V-1)的制备

将化合物8’(80mg，0.19mmol)溶于无水乙腈(6mL)中，加入三乙胺(96mg，0.95mmol)和N-甲基哌嗪(76mg，0.76mmol)，加热回流反应24h，冷却至室温后加水(10mL)淬灭反应，粗产品用乙酸乙酯(50mL)萃取，依次水洗，饱和NaCl洗涤，无水Na₂SO₄干燥，浓缩后经硅胶柱层析纯化，以二氯甲烷:乙酸乙酯:甲醇(3:3:1)洗脱，得淡黄色固体48mg，产率52％；熔点：89-90℃；¹H-NMR(δ,CDCl₃)：8.30(d,1H,J＝8.0Hz,ArH),8.33(d,2H,J＝8.5Hz,ArH),7.65(d,1H,J＝8.5Hz,ArH),7.53(t,1H,J＝8.0Hz,ArH),7.43(t,1H,J＝7.5Hz,ArH),7.38(d,2H,J＝8.0Hz,ArH),4.66(t,2H,J＝7.0Hz,CH₂),2.36(t,2H,J＝7.0Hz,CH₂),2.31(s,3H,CH₃),2.24(m,2H,CH₂),2.28-2.53(m,8H,4×CH₂)。

5-(1-(3-(1-吗啉丙基)-1H-3-吲唑基)-3-(4-三氟甲氧基苯基)-1,2,4-噁二唑(化合物V-2)的制备

操作过程同化合物V-1的制备，只是用吗啉代替N-甲基哌嗪，得到淡黄色油状物，产率49％；¹H-NMR(δ,CDCl₃)：8.35(d,1H,J＝8.5Hz,ArH),8.33(d,2H,J＝9.0Hz,ArH),7.97(d,1H,J＝8.5Hz,ArH),7.59-7.64(m,3H,ArH),7.49(t,1H,J＝7.5Hz,ArH),4.68(t,2H,J＝ 6.5Hz,CH₂),3.50(t,4H,J＝4.0Hz,2×CH₂),2.24-2.27(m,6H,3×CH₂),2.08-2.13(m,2H,CH₂)。

5-(1-(3-(1-4-羟基哌啶-丙基)-1H-3-吲唑基)-3-(4-三氟甲氧基苯基)-1,2,4-噁二唑(化合物V-3)的制备

操作过程同化合物V-1的制备，只是用4-羟基哌啶代替N-甲基哌嗪，得到白色固体，产率58％；熔点：73-74℃；¹H-NMR(δ,CDCl₃)：8.39(d,1H,J＝8.0Hz,ArH),8.33(d,2H,J＝9.0Hz,ArH),7.66(d,1H,J＝8.5Hz,ArH),7.53(t,1H,J＝7.5Hz,ArH),7.42(t,1H,J＝7.0Hz,ArH),7.37(d,2H,J＝8.0Hz,ArH),4.65(t,2H,J＝6.5Hz,CH₂),3.70(m,1H,OCH),2.71-2.69(m,2H,CH₂),2.33-2.30(m,2H,piperidine),2.22-2.20(m,2H,CH2),2.09(brs,2H,piperidine),1.91-(m,2H,piperidine),1.61-1.55(m,2H,piperidine)。

实施例10：2-(1-(4-氯苄基)-1H-吲唑-3-基)-5-(吡啶-4-基)-1,3,4-噁二唑(化合物VI-1)的制备

步骤1. 1-(4-氯苄基)-1H-吲唑-3-甲酰肼(化合物9’)的制备

将1-(4-氯苄基)-1H-吲唑-3-羧酸(化合物6’)(0.30g，1.1mmol)和水合肼(80％)(5mL)加入到反应瓶中，加热回流2h，冷却至室温后析出白色晶体，抽滤，水洗得到白色固体0.24g，收率75.0％；熔点：160-161℃；¹H-NMR(δ,DMSO-d₆)：9.92(s,1H,CONH),7.73(d,1H,J＝8.5Hz,ArH),7.69(d,1H,J＝8.5Hz,ArH),7.39(d,1H,J＝8.5Hz,ArH),7.33-7.28(m,3H,ArH),7.21(t,1H,J＝8.5Hz,ArH),5.89(s,2H,benzylic-CH₂),4.72(s,2H,NHNH₂)。

步骤2. 2-(1-(4-氯苄基)-1H-吲唑-3-基)-5-(吡啶-4-基)-1,3,4-噁二唑(化合物VI-1)的制备

将1-(4-氯苄基)-1H-吲唑-3-甲酰肼(化合物9’)(110mg，0.37mmol)、异烟酸(45mg，0.37mmol)、二异丙基乙二胺(0.19ml，1.10mmol)和O-苯并三氮唑-N,N,N',N'-四甲基脲四氟硼酸(TBTU)(130mg，0.40mmol)溶于无水乙腈(5mL)中，室温搅拌3h。向反应体系中加入二异丙基乙二胺(0.13mL，0.73mmol)和对甲苯磺酰氯(210mg，1.20mmol)继续室温搅拌2h，减压除去溶剂，粗产品用乙酸乙酯(50mL)萃取，依次水洗，饱和NaCl洗涤，无水Na₂SO₄干燥，浓缩后经硅胶柱层析纯化，以石油醚：乙酸乙酯(1:1)洗脱，得淡白色固体82mg，产率57％；熔点：232-233℃；¹H-NMR(δ,CDCl₃)：8.87(d,2H,J＝5.5Hz,ArH),8.32(d,1H,J＝8.0Hz,ArH),8.01(d,2H,J＝5.0Hz,ArH),7.96(d,1H,J＝8.5Hz,ArH),7.61(t,1H,J＝8.0Hz,ArH),7.47(t,1H,J＝7.5Hz,ArH),7.42(d,2H,J＝8.0Hz,ArH),7.34(d,2H,J＝8.5Hz,ArH),5.90(s,2H,benzylic-CH₂)。

实施例11：吲唑-噁二唑类衍生物对体外HIF-1转录活性的抑制作用

1.实验方法

采用荧光素酶报告基因实验测定化合物对人结肠癌细胞HCT116的HIF-1转录活性抑制作用。取对数生长期的人结肠癌细胞HCT116接种于60mm塑料培养皿中，待细胞贴壁后，采用Lipo2000转染试剂，对HCT116细胞转染pcDNA3.1-HRE-luciferase质粒。继续培养48小时后，给予含G418的培养剂(G418终浓度为400ug/ml)筛选14天，获得稳定表达HRE-luciferase的HCT116细胞株。取该稳定转染的HCT116细胞接种于96孔板，每孔细胞数目控制在6000个左右，待细胞贴壁后，给予梯度浓度的待测化合物。将96孔板在常氧环境中培养1小时后，迅速放入含1％氧气的细胞培养箱中，常氧对照组则依旧放置于常氧细胞培养箱中。继续作用24小时后，按照试剂说明书的方法检测各孔荧光素酶的数据，并按照计算公式(抑制率％＝(对照组数值-实验组数值)/对照组数值*100％)计算抑制率以及相应的IC₅₀值。

2.实验结果

具体结果见表1。

表1 部分化合物对人结肠癌细胞HCT116的HIF-1转录活性抑制作用

3.实验结果与分析

经多次试验验证，本发明所合成的化合物均有HIF-1的抑制作用，其中大部分化合物显示出与阳性对照YC-1相似或更优的体外HIF-1转录抑制效果，尤其是化合物I-30和 I-32，半数抑制率均小于1.00μM，活性比YC-1提高8倍左右，是有效的HIF-1抑制剂(详见表1)。

实施例12：吲唑-噁二唑类衍生物I-30、I-32对体内HIF-1转录活性的抑制作用

1.实验方法

将稳转了荧光素酶报告基因(HRE-luciferase)的HCT116结肠癌细胞株注入到20只裸鼠中，当肿瘤大小达到200mm³后，将小鼠分为四组，分别为对照组、I-30用药组、I-32用药组和YC-1用药组，连续用药三天，每天一次，用药剂量为50mg/kg。用药三天后，利用Xenogen成像系统显示对照组及用药组对体内HIF-1的抑制效果。利用软件计算冷光的释放强度，以及对照组与实验组的强度比值，取平均值进行作图。(动物实验经浙江大学动物研究委员会批准，编号Zju2013101032)

2.实验结果与分析

图1的B图表明，化合物I-30、I-32和YC-1均能显著降低小鼠体内荧光素发冷光的强度，说明受试化合物在移植瘤中也能抑制HIF-1的活性；图1的C图表明，化合物I-30、I-32的抑制效果优于阳性对照YC-1，说明受试化合物能有效抑制小鼠体内的HIF-1转录活性，是强效的HIF-1抑制剂。

Claims

1.一种吲唑-噁二唑类衍生物，具有通式a结构：

或其药学上可接受的盐或溶剂合物，式中：

X为O或N，Y为 N，Z为N或O；

R₁选自-(CH₂)_m-N(R₃R₄)、苯甲酰基、苯胺甲酰基、苯磺酰基、R₅取代的苄基，m代表2-8的整数；其中，R₅选自氢、卤素、硝基、C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、CO-NR₃R₄、O(CH₂)_n-NR₃R₄，n代表2-6的整数；-NR₃R₄为胺；

卤素表示氟、氯、溴或碘。

2.根据权利要求1所述的吲唑-噁二唑类化合物，其特征在于：所述的R₂选自无取代或由R₆取代的苯基、呋喃基、噻吩基、吡啶基、苄基。

3.根据权利要求1所述的吲唑-噁二唑类化合物，其特征在于：所述的-NR₃R₄选自芳基胺、杂环芳基胺、脂肪胺、含氮杂环脂肪胺。

4.根据权利要求3所述的吲唑-噁二唑类化合物，其特征在于：所述的-NR₃R₄选自五元或六元芳基胺、包含O、N或S原子的五元杂环芳基胺、包含O、N或S原子的六元杂环芳基胺、1-6个碳原子长度的脂肪胺、3-6元含氮杂环脂肪胺。

5.根据权利要求1-4任一项所述的吲唑-噁二唑类化合物，其特征在于：所述的R₁为R₅取代的苄基，其中，R₅为苄基的苯环上任意位置取代的O(CH₂)_n-NR₃R₄，R₂为R₆取代的苯基。

6.根据权利要求1所述的化合物，其特征在于所述的化合物选自：