CN105792837A - 包含胶原蛋白肽、弹性蛋白肽及蛋白多糖的组合物 - Google Patents
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Abstract
本发明的课题在于提供即使降低胶原蛋白肽的摄取量时，也能够发挥皮肤的美容改善效果的组合物。具体而言，为可提供如下组合物：通过使组合物中的胶原蛋白肽、弹性蛋白肽及蛋白多糖的重量比成为规定的比率，从而即使为低浓度的胶原蛋白肽也能够有效地发挥皮肤的美容改善效果。
Description
技术领域
本发明涉及包含胶原蛋白肽、弹性蛋白肽及蛋白多糖的组合物。更详细而言，本发明涉及具有皮肤的美容改善效果的组合物，其特征在于，胶原蛋白肽的重量与弹性蛋白肽及蛋白多糖的合计重量为规定的比率。
背景技术
皮肤由从外侧起角质层、表皮、基底膜及真皮构成。真皮为其中领域最广的部分，不像表皮那样密集地充满细胞。更不如说细胞外空间广阔，由被称作“细胞外基质”的巨大分子的网状结构填满。已知该细胞外基质与皮肤的弹性、紧致、水嫩度、新陈代谢等直接相关，所谓的皱纹、松弛的皮肤老化症状由以成纤维细胞和细胞外基质为主要构成成分的真皮结缔组织纤维引起。由于构成细胞外基质的胶原蛋白、弹性蛋白等的纤维性蛋白质，透明质酸，硫酸软骨素等的被称作酸性粘多糖的多糖类是由成纤维细胞所产生，因此促进成纤维细胞的增殖有助于给予皮肤紧致·光泽，预防·改善皮肤的皱纹、松弛。从相关的观点出发，提出了多种含有具备成纤维细胞增殖促进作用的成分的饮料、化妆品等。
近年来，胶原蛋白被发现有如下的生理作用：骨质疏松症的预防·改善关联的骨强化作用(专利文献1)，使伴随着加龄的生物体组织的功能低下改善的生物体组织的新陈代谢促进作用(专利文献2)，皮肤代谢促进作用，皮肤活化作用(专利文献3)，以皱纹的预防·改善为目的的皮肤的老化防止作用(专利文献4)等，作为化妆品及饮食品的原料，医药品的生物体功能性材料而被广泛利用。
然而，报道了为了使上述那样的生理作用在体内充分发挥，必须大量摄取胶原蛋白肽，为了显示出干燥皮肤改善作用，在经口摄取时人每天的有效摄取量为鱼鳞胶原蛋白肽5～10g，猪皮胶原蛋白肽10g以上(非专利文献1)。已知，胶原蛋白分解产物为，在被消化吸收过程中，被分解为氨基酸、二肽或三肽，其中，表明了二肽或三肽具有效果。此外，报道了包含来自胶原蛋白的羟基脯氨酸的二肽及三肽作用于皮肤成纤维细胞时，使其细胞增殖活化，促进胶原蛋白、透明质酸的产生(非专利文献2、专利文献5)。
现有技术文献
专利文献
专利文献1日本特开平9－255588号公报
专利文献2日本特开平7－278012号公报
专利文献3日本特开平9－67262号公报
专利文献4日本特开2005－314265号公报
专利文献5日本专利第4995155号公报
非专利文献
非专利文献1日本食品化学工学会杂志(日本食品化学工学会誌)2009年3月、第56卷、第3号、p.137～145
非专利文献2JournalofDermatologicalScience、2007年7月、第47卷、p.102，179
发明内容
如上所述，通常大量摄取胶原蛋白时，能够使有用的效果发挥，但为了抑制胶原蛋白特有的不优选的食味，可期待能够通过摄取较少量的胶原蛋白而使有用的皮肤的美容改善效果发挥的进一步的技术的开发。
即，本发明所要解决的技术课题为提供即使降低胶原蛋白肽的摄取量时，也能够使有用的皮肤的美容改善效果发挥的组合物。
对解决上述课题进行了深刻研究，结果发现通过摄取以规定的比率包含胶原蛋白肽、弹性蛋白肽及蛋白多糖的组合物，即使为低浓度的胶原蛋白肽也能够有效地显示出皮肤的美容改善效果，从而完成本发明。
本发明不限定于这些，包含以下的方式的发明。
(1)一种组合物，其包含胶原蛋白肽、弹性蛋白肽及蛋白多糖，其特征在于，胶原蛋白肽的重量与弹性蛋白肽及蛋白多糖的合计重量的重量比[(胶原蛋白肽)：(弹性蛋白肽+蛋白多糖)]为1：10～1：0.0000001。
(2)根据(1)所述的组合物，其特征在于，胶原蛋白肽的重量与弹性蛋白肽的重量的重量比[(胶原蛋白肽)：(弹性蛋白肽)]为1：5～1：0.000001。
(3)根据(1)所述的组合物，其特征在于，胶原蛋白肽的重量与蛋白多糖的重量的重量比[(胶原蛋白肽)：(蛋白多糖)]为1：0.2～1：0.0000001。
(4)根据(1)～(3)中任意一项所述的组合物，其特征在于，为经口用。
(5)根据(1)～(3)中任意一项所述的组合物，其特征在于，为饮食品。
(6)一种皮肤改善剂，其包含胶原蛋白肽、弹性蛋白肽及蛋白多糖，其特征在于，胶原蛋白肽的重量与弹性蛋白肽及蛋白多糖的合计重量的重量比[(胶原蛋白肽)：(弹性蛋白肽+蛋白多糖)]为1：10～1：0.0000001。
(7)根据(6)所述的皮肤改善剂，其特征在于，具备成纤维细胞增殖促进作用。
(8)根据(6)或(7)所述的皮肤改善剂，其特征在于，具备胶原蛋白产生促进作用。
(9)根据(6)～(8)中任意一项所述的皮肤改善剂，其特征在于，具备皮肤老化防止作用。
根据本发明，可提供即使为低浓度的胶原蛋白肽也能够有效地发挥皮肤的美容改善效果的组合物。
本发明的组合物在能够抑制呈现不优选的食味的胶原蛋白肽的量的点也有利。
具体实施方式
以下，对本发明的实施方式进行详细地说明。
组合物
<有效成分>
首先，作为本发明的一个方式的组合物，其特征在于，包含作为有效成分的胶原蛋白肽、弹性蛋白肽及蛋白多糖。本发明的组合物由于具有促进生物体组织，尤其是皮肤的真皮组织中存在的成纤维细胞的增殖的作用，因此能够实现皮肤的美容改善效果。
(胶原蛋白肽)
本发明中使用的胶原蛋白肽可使用将胶原蛋白或者明胶等的改性胶原蛋白通过实施由酶、酸、碱等水解处理等而得到的胶原蛋白肽，此外也可使用人工合成的胶原蛋白肽，也可使用这些中的1种或2种以上。作为胶原蛋白、明胶，可使用例如来自牛、猪、鸡等的动物或来自鱼的胶原蛋白、明胶，特别是从动物的皮肤、骨及肌腱等的结缔组织，鱼皮，鱼鳞提取的胶原蛋白蛋白质。
作为用于制备胶原蛋白肽的酶，只要是能切断胶原蛋白或明胶的肽键的酶即可，例如，可列举胶原酶、木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶、猕猴桃碱、无花果蛋白酶、组织蛋白酶、胃蛋白酶、凝乳酶、胰蛋白酶及混合这些酶的酶制剂等。作为酸，可使用例如盐酸、硫酸、硝酸等。作为碱，可使用例如氢氧化钠、氢氧化钙等。
本发明中，被水解的胶原蛋白肽的水溶液可直接使用，也可通过干燥等粉末化后使用。此外，也可将对该水溶液实施通常所使用的纯化处理后的物质以水溶液、粉末等的形态使用。使用这些中的任意形态的胶原蛋白肽，均对本发明的效果不产生任何影响。
此外，可使用所有的分子量的胶原蛋白肽，例如分子量为10，000以下，例如100～7，000，优选100～5，000的胶原蛋白肽。胶原蛋白肽的分子量可通过HPLC、凝胶过滤法等的公知的定量方法来测定。在此，通常胶原蛋白肽分子量越大体内吸收性越差，分子量小则体内吸收性增大，但会产生肽特有的不优选的食味(苦味、涩味等)。本发明中，由于通过合用弹性蛋白肽及蛋白多糖，能够将胶原蛋白肽的使用量抑制得较低，因此即使使用体内吸收性良好的分子量较小的胶原蛋白肽时，也不容易发生胶原蛋白肽特有的不优选的食味的问题。
胶原蛋白肽可使用提取物及纯化物中的任意一种，但优选使用纯度50重量％以上，更优选纯度70重量％以上，进一步优选纯度90重量％以上的胶原蛋白肽。胶原蛋白肽也可使用市售品，例如可使用“胶原蛋白肽SCP-5100”(新田明胶株式会社制)等。
本发明的组合物中的胶原蛋白肽含量根据合用原料的种类、含量等难以一律地规定，但为1重量％～99.9％重量％，优选30重量％～99.9重量％，更优选50重量％～90重量％。胶原蛋白肽的含量为1重量％以下或99.9重量％以上时，不能实现本发明所期望的效果。
(弹性蛋白肽)
本发明的弹性蛋白肽意味着水溶性弹性蛋白肽。作为弹性蛋白肽，可使用例如从牛、猪、鸡、羊、鱼等的动物性生物体组织提取的弹性蛋白肽或通过以酶、酸、碱等对水溶性、不溶性的弹性蛋白实施水解处理等所得到的分解产物，或者也可以使用人工合成的弹性蛋白肽，也可以使用这些中的一种或2种以上。
本发明中使用的弹性蛋白肽的分子量没有特别限定，可使用所有分子量的弹性蛋白。
弹性蛋白肽可使用提取物及纯化物中的任意一种，但优选使用纯度50重量％以上，更优选纯度70重量％以上，进一步优选纯度90重量％以上的弹性蛋白肽。弹性蛋白肽也可使用市售品，例如可使用“美弹弹性蛋白FI”(日本水产株式会社制)、“金枪鱼弹性蛋白HS-1”(羽衣食品株式会社制)、“鲣鱼弹性蛋白”(林兼产业株式会社制)等。
本发明的组合物中的弹性蛋白肽的含量，根据胶原蛋白肽等的合用原料的种类、含量等而变化，但为0.0000002重量％～10重量％，优选0.000002重量％～1重量％，更优选0.000004重量％～0.2重量％。
(蛋白多糖)
本发明中使用的蛋白多糖没有特别限定，但可使用例如从鲨鱼、鲸鱼、鲑鱼、鳐鱼等动物的软骨提取的蛋白多糖。
本发明中，没有特别限定，但可使用例如具有10，000～10，000，000的分子量，优选具有100，000～1，000，000的分子量的蛋白多糖。
蛋白多糖可使用提取物及纯化物中的任意一种，优选使用纯度5重量％以上，更优选纯度10重量％以上，进一步优选纯度15重量％以上的蛋白多糖。蛋白多糖也可使用市售品。
本发明的组合物中的蛋白多糖的含量，根据胶原蛋白肽等的合用原料的种类、含量等而变化，为0.0000001重量％～5重量％，优选0.000001重量％～0.5重量％，更优选0.000002重量％～0.1重量％。
<有效成分的重量比>
本发明中，组合物中的胶原蛋白肽的重量与弹性蛋白肽及蛋白多糖的合计重量的重量比[(胶原蛋白肽)：(弹性蛋白肽+蛋白多糖)]为，例如1：10～1：0.0000001，优选1：5～1：0.000001，更优选1：2～1：0.00001。本发明者们通过将胶原蛋白肽与弹性蛋白肽及蛋白多糖组合配合，得到与使用相同用量的胶原蛋白肽单体时相比，皮肤改善效果好的发现。因此，摄取以上述范围的重量比包含有效成分的组合物时，可期待与摄取相同用量的胶原蛋白肽时相比，带来更高的皮肤改善效果。此外，由于即使为较低浓度的胶原蛋白肽也有效地显示出皮肤改善效果，因此，通过摄取以上述范围的重量比包含有效成分的组合物，能够抑制胶原蛋白肽特有的不优选的食味。
此外，本发明的组合物中的胶原蛋白肽的重量与弹性蛋白肽的重量的重量比[(胶原蛋白肽)：(弹性蛋白肽)]为，例如1：5～1：0.000001，优选1：2～1：0.00001，更优选1：1～1：0.0001，组合物中的胶原蛋白肽的重量与蛋白多糖的重量的重量比[(胶原蛋白肽)：(蛋白多糖)]为，例如1：0.2～1：0.0000001，优选1：0.1～1：0.0000005，更优选1：0.02～1：0.000002。本发明者们通过实验还得到了如下预想之外的发现：相对于胶原蛋白肽，以低比率配合弹性蛋白肽及蛋白多糖时，可发挥特别好的胶原蛋白产生促进效果。即，摄取相同用量的胶原蛋白肽时，组合物中的弹性蛋白肽及蛋白多糖的重量比低时，可得到更好的皮肤改善效果。因此，根据本发明的组合物，可提供可将有效成分量抑制得非常低，经口摄取容易，且花费方面也优异的组合物。
<其他的成分>
对于本发明的组合物，除上述有效成分之外，可配合公知的添加剂。添加剂没有特别限定，但优选用于经口摄取通常所使用的添加剂，例如，可使用赋形剂、粘合剂、崩解剂、润滑剂、防腐剂、矫味剂、矫臭剂、着色剂、香料等的添加剂，还可使用已知有皮肤改善作用的原料。
此外，对于本发明的组合物，也可组合配合已知有皮肤改善效果的其他的美容·健康成分。可合用的成分没有特别限制，例如，可列举神经酰胺、乳酸菌、维生素(维生素C等)、矿物质(钙等)、植物提取物等。
进而，对于本发明的组合物，以下述进行例示，还可配合公知具备成纤维细胞增殖促进作用、胶原蛋白产生促进作用、皮肤老化防止作用的成分。
<形态及用量>
本发明的组合物优选为经口组合物。对于经口组合物没有特别的限定，例如包括饮食品、医药品、医药部外品等，优选为饮食品，更优选为饮料。作为饮食品，可列举健康食品、营养辅助食品、特定保健用食品、膳食补充剂、乳制品、清凉饮料、临用溶解用粉末等，也包括宠物用饮食品、家畜饲料等。特别优选为临用溶解用粉末。临用溶解用粉末为可进一步溶解于咖啡、红茶、果汁、酸奶、汤等中，或混合于料理中摄取的物质。临用溶解用粉末因保存中的稳定性，所谓的可溶解或添加于喜爱的物质中而摄取的易于服用的点而特别优选。此外，可使用片剂、胶囊剂的形态。医药品、医药部外品的形态，典型而言，为颗粒剂、片剂、胶囊剂、液体剂等的经口用制剂。
本发明的组合物的用量可基于对象的年龄、体重、健康状况等适当决定，例如，成人的一天摄取量为10mg～100，000mg，优选500mg～15，000mg，更优选3，000mg～10，000mg，可单次或分多次摄取·给药。伴随着胶原蛋白肽的低用量化，组合物的一天摄取量也可低用量化。
<作用·效果>
本发明的组合物可用于皮肤症状的预防·改善，例如，可预防或改善皮肤的保湿功能、弹力的降低，皮肤的张力、光泽的减少，粗糙，皱纹，暗沉等的症状。
在此，已知通过生物体组织，尤其是皮肤的真皮组织中存在的成纤维细胞的增殖促进作用，进而伴随着成纤维细胞增殖促进作用的胶原蛋白产生促进作用、皮肤老化防止作用，皮肤改善效果被发挥。因此，作为本发明的另一个方式，组合物具备成纤维细胞增殖促进作用、胶原蛋白产生促进作用、或皮肤老化防止作用。
成纤维细胞增殖促进作用意味着促进生物体组织，尤其是皮肤的真皮组织中存在的成纤维细胞的增殖的作用，可通过公知的方法进行评价。成纤维细胞增殖促进作用的有效成分为胶原蛋白肽、弹性蛋白肽及蛋白多糖。这些成分可制成固体状、糊状或液体的形态，他们可直接作为具备成纤维细胞增殖促进作用的皮肤改善剂，也可根据需要与具有成纤维细胞增殖促进作用的公知的添加剂合用，并通过常规方法使其含有而作为组合物进行制备。作为已知有成纤维细胞增殖促进作用的原料没有特别限定，除在上述作为现有技术文献列举的文献中记载的物质以外，可例示小球藻、库拉索芦荟(Aloevera)、稻、枣、艳山姜(月桃,Alpiniazerumbet)、芒果姜(Mangoginger)、蛇葡萄、铁线蕨、莲胚芽、芝麻、辣椒、当归、鱼腥草、蓝靛果忍冬果实、粗糠柴(Mallotusphilippensis)、藻类(蕨藻、racemosa)、栽秧泡(Rubusellipticus)、薏苡等的植物、藻类的干燥物或提取物，儿茶素类、含有亚氨基的肽、α-硫辛酸及其盐、酯、酰胺等的衍生物，二氢硫辛酸及其衍生物，壳多糖水解产物，N-乙酰-D-葡糖胺及其低聚物等。
胶原蛋白产生增强作用是指，增强生物体内的胶原蛋白的产生的作用，胶原蛋白的产生，更期待的是由真皮组织中的成纤维细胞引起的胶原蛋白的产生。胶原蛋白的产生，例如可通过公知的方法测定Ⅰ型胶原蛋白产生量从而进行评价，此外，还可通过公知的方法评价人皮肤成纤维细胞的胶原蛋白合成基因(COL1a1基因)的表达量从而进行确认。
皮肤老化防止作用意味着预防皮肤老化的症状，皮肤老化的症状包括选自皮肤的皱纹、色斑、暗沉、雀斑、松弛、毛孔的张开、干燥及皮肤粗糙中至少1种的症状。
本发明者们通过实验确认了通过合用胶原蛋白肽、弹性蛋白肽及蛋白多糖，与使用胶原蛋白肽单体时相比，人皮肤成纤维细胞的增殖进一步被促进，除此之外胶原蛋白合成基因的表达也升高，进而还确认胶原蛋白的产生被显著促进。通过这些发现，只要是本领域技术人员都应当能够理解即使胶原蛋白肽的摄取量比以往少时，也可通过组合摄取胶原蛋白肽、弹性蛋白肽及蛋白多糖而得到显著的皮肤改善效果。
<制造方法>
本发明的组合物的制造可依照常规方法进行，有效成分的胶原蛋白肽、弹性蛋白肽及蛋白多糖可直接配合，或也可以固体状、糊状或液体的形态配合。此外，可根据需要配合具备皮肤改善作用的公知的成分、添加剂等的其他的成分。有效成分、其他的成分的含量、重量比如上所述。
例如，胶原蛋白肽、弹性蛋白肽及蛋白多糖可根据需要与葡萄糖(葡萄糖)、糊精、乳糖、淀粉或其加工物、纤维素粉末等的赋形剂、维生素、矿物质、动植物或海鲜类的油脂、蛋白(来自动植物或酵母的蛋白质、其水解产物等)、糖类、色素、香料、抗氧化剂、表面活性剂、其他的食品添加剂、各种营养功能成分等，神经酰胺、酪蛋白等的粉末或提取物类等的食用原料一同混合，加工成粉末、颗粒、小药丸、片剂等的形状；通过常规方法对上述例子中的饮食品进行加工处理；将它们的混合后的液状物以明胶、海藻酸钠、羧甲基纤维素等的被膜物被膜，从而成形为胶囊；或加工成饮料(保健饮料类)的形态。尤其优选加工成营养辅助食品、健康食品，更优选加工成临用溶解用粉末的形态。
皮肤改善剂
作为本发明的另一个方式，可列举以规定的比率包含胶原蛋白肽、弹性蛋白肽及蛋白多糖的皮肤改善剂。皮肤改善剂中的胶原蛋白肽的重量与弹性蛋白肽及蛋白多糖的合计重量的重量比[(胶原蛋白肽)：(弹性蛋白肽+蛋白多糖)]为，例如1：10～1：0.0000001，优选1：5～1：0.000001，更优选1：2～1：0.00001。此外，胶原蛋白肽的重量与弹性蛋白肽的重量的重量比[(胶原蛋白肽)：(弹性蛋白肽)]为，例如1：5～1：0.000001，优选1：2～1：0.00001，更优选1：1～1：0.0001。进而，胶原蛋白肽的重量与蛋白多糖的重量的重量比[(胶原蛋白肽)：(蛋白多糖)]为，例如1：0.2～1：0.0000001，优选1：0.1～1：0.0000005，更优选1：0.02～1：0.000002。皮肤改善剂中所包含的有效成分、其他的成分，皮肤改善剂的形态及用量、作用·效果、制造方法，可适用记载的组合物相关的内容。
本发明所说的“皮肤改善剂”意味着用于预防或改善皮肤的保湿功能、弹力的降低，皮肤的张力、光泽的减少，粗糙，皱纹，暗沉等的症状的制剂。
此外，通过皮肤改善剂对皮肤的各症状的预防·改善，可以伴随着选自成纤维细胞增殖促进作用、胶原蛋白产生促进作用、及皮肤老化防止作用中1种以上的作用。
实施例
以下，基于实施例对本发明进行详细地说明，但本发明不限定于这些实施例。
实施例1：人皮肤成纤维细胞的增殖促进作用的研究
通过以下的方法调查本发明的成纤维细胞增殖促进剂对皮肤成纤维细胞的增殖带来的影响。
<试验试样的制备>
称量胶原蛋白肽、弹性蛋白肽及蛋白多糖，使其溶解于灭菌水中，用孔径为0.2μm的膜滤器过滤灭菌后，以含有0.1％FBS的DMEM培养基进行100倍稀释，从而成为下述表1所示的试样浓度，制备了试样2～6。作为对照，使用将灭菌水以含有0.1％FBS的DMEM培养基进行100倍稀释而制成的试样1。应予说明，各试验试样的浓度以作为成分的浓度而算出。使用的原料的详细如下所示。
胶原蛋白肽：新田明胶株式会社制，分子量100-1800，纯度100％
弹性蛋白肽：“美弹弹性蛋白FI”(日本水产株式会社制)，纯度100％
蛋白多糖：“蛋白多糖F”(一丸自然美健株式会社制)，分子量：约450，000，纯度20％
<评价方法>
将来自于成人的正常人皮肤成纤维细胞NHDF株(从仓敷纺绩株式会社购入)接种于含有10％胎牛血清(FBS)的达尔伯克改性MEM培养基(DMEM，日生公司制)中，在96孔培养板中播种以成为10，000细胞/孔，在37℃、5％CO2的条件下培养一晚。试验试样溶解于水后，如上所述以含有0.1％FBS的DMEM培养基进行100倍稀释而添加到细胞中。添加各试验试样(200μl)24小时后，测定细胞生存率。细胞生存率使用MTS试剂(Promega公司制)，由通过细胞内脱氢酶而还原生成的甲臜量而算出。各试验试样的细胞生存率以将只添加包含1％的水的含有0.1％FBS的DMEM培养基的试样的细胞生存率作为100％时的值(％)而求得。甲臜通过490nm处的紫外吸收而测定。应予说明，本发明者预先研究了细胞不增殖也不减少的FBS浓度，确认以含有0.1％FBS的DMEM培养基培养时满足该条件，并且通过将试验培养基的血清浓度制备成0.1％，能够定量评价仅试验试样的成纤维细胞增殖促进作用。
<评价结果>
评价结果示于表1。由表1的数据，确认了在胶原蛋白肽中，以任意的比率混合弹性蛋白肽，与胶原蛋白单体相比，均进一步提高了成纤维细胞的增殖促进效果，在胶原蛋白肽及弹性蛋白肽中进一步组合蛋白多糖时，增殖促进效果进一步提高。此外，由试样5、6的结果，明确了即使相对于胶原蛋白肽的蛋白多糖的配合比非常低时，也能够使成纤维细胞显著地增加。
表1
实施例2：人皮肤成纤维细胞的胶原蛋白产生促进作用的研究
<试验试样的制备>
按照实施例1的方法制备下述表2所示的试样1～7。
<评价方法>
将NHDF株接种于含有10％FBS的DMEM培养基中，在24孔培养板中播种以成为125，000细胞/孔，在37℃、5％CO2的条件下培养一晚。试验试样溶解于水后，以含有0.1％FBS的DMEM培养基进行100倍稀释，添加到细胞中。添加各试验试样72小时后，测定胶原蛋白产生量。胶原蛋白产生量使用CollagenTypeI，Human，ELISAKit(ACEL公司制)定量细胞培养上清中所分泌的I型胶原蛋白。对I型去端肽胶原使用特异性的多克隆抗体使其显色，通过450nm处的紫外吸收进行测定。各试验试样的胶原蛋白产生量以将只添加包含1％的水的含有0.1％FBS的DMEM培养基的试样的胶原蛋白产生量作为100％时的值(％)而求得。培养细胞时，与实施例1同样，通过降低培养液中的血清浓度，从而将对胶原蛋白合成的影响抑制得较低。
<评价结果>
评价结果示于表2。由表2的数据确认了在胶原蛋白肽中组合弹性蛋白肽及蛋白多糖时，与胶原蛋白单体相比，进一步提高了胶原蛋白的产生促进效果。此外，发现由于含有最低浓度的弹性蛋白肽及蛋白多糖的试样3的胶原蛋白产生量最多，因此弹性蛋白肽及蛋白多糖的浓度越低胶原蛋白的产生促进作用越强。
表2
实施例3：对人皮肤成纤维细胞各种基因表达带来的影响
<试验试样的制备>
按照实施例1的方法，制备下述表3所示的试样1～4。
<评价方法>
将NHDF株接种于含有10％FBS的DMEM培养基中，在96孔培养板中播种以成为10，000细胞/孔，在37℃、5％CO2的条件下培养一晚。试验试样溶解于水后，以含有0.1％FBS的DMEM培养基进行100倍稀释，添加到细胞中。添加各试验试样24小时后，通过定量实时PCR定量Ⅰ型胶原蛋白合成基因(COL1a1)的表达。对照使用作为看家(housekeeping)基因的β-actin。用PBS清洗细胞，按照TaqManGeneExpressionCell-to-CTKit(Ambion公司)的操作说明制成cDNA。将该cDNA作为模板，使用TaqManFastUniv.GeneExpressionMasterMix(AppliedBiosystems公司)，实施实时PCR。实时PCR使用StepOnePlus实时PCR系统(AppliedBiosystems公司)。分析使用ΔΔCT法，以未添加试验试样的培养细胞的校正值作为1的比来表示。
<评价结果>
评价结果示于表3。由表3的数据，确认了在胶原蛋白肽中组合弹性蛋白肽及蛋白多糖时，与胶原蛋白单体相比，提高了胶原蛋白合成基因的表达。
表3
制造例1：临用溶解用粉末
称量下述表4所示配合量的胶原蛋白、弹性蛋白、蛋白多糖、糊精，混合均匀，从而制造了临用溶解用粉末(6.5g)。将所得到的粉末溶解于水、果汁、或者清汤后，均分散性良好，适合作为临用溶解饮料。
表4
<临用溶解用粉末的组成>
| 成分 | 配合量(mg) | 配合率(重量％) |
| 胶原蛋白肽 | 5000.0 | 76.92 |
| 弹性蛋白肽 | 1.0 | 0.02 |
| 蛋白多糖 | 0.5 | 0.01 |
| 糊精 | 1498.5 | 23.05 |
| 合计 | 6500.0 | 100.00％ |
制剂例2：胶囊剂
在由下述成分制成的软胶囊剂皮中，通过常规方法填充上述的临用溶解用粉末，得到软胶囊。
制剂例3：片剂
将下述所示配合的混合物通过常规方法造粒及成型，从而得到片剂。
表5
产业上的可利用性
通过摄取以规定的比率包含胶原蛋白肽、弹性蛋白肽、蛋白多糖的组合物，即使为低浓度的胶原蛋白肽也能够发挥有用的皮肤的美容改善效果。
Claims (9)
1.一种组合物，其包含胶原蛋白肽、弹性蛋白肽及蛋白多糖，其特征在于，胶原蛋白肽的重量与弹性蛋白肽及蛋白多糖的合计重量的重量比即(胶原蛋白肽)：(弹性蛋白肽+蛋白多糖)为1：10～1：0.0000001。
2.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，胶原蛋白肽的重量与弹性蛋白肽的重量的重量比即(胶原蛋白肽)：(弹性蛋白肽)为1：5～1：0.000001。
3.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，胶原蛋白肽的重量与蛋白多糖的重量的重量比即(胶原蛋白肽)：(蛋白多糖)为1：0.2～1：0.0000001。
4.根据权利要求1～3中任意一项所述的组合物，其特征在于，为经口用。
5.根据权利要求1～3中任意一项所述的组合物，其特征在于，为饮食品。
6.一种皮肤改善剂，其包含胶原蛋白肽、弹性蛋白肽及蛋白多糖，其特征在于，胶原蛋白肽的重量与弹性蛋白肽及蛋白多糖的合计重量的重量比即(胶原蛋白肽)：(弹性蛋白肽+蛋白多糖)为1：10～1：0.0000001。
7.根据权利要求6所述的皮肤改善剂，其特征在于，具备成纤维细胞增殖促进作用。
8.根据权利要求6或7所述的皮肤改善剂，其特征在于，具备胶原蛋白产生促进作用。
9.根据权利要求6～8中任意一项所述的皮肤改善剂，其特征在于，具备皮肤老化防止作用。
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