CN104721240A - 一种从辣木叶中萃取并分离辣木黄酮和辣木皂苷的工艺 - Google Patents
一种从辣木叶中萃取并分离辣木黄酮和辣木皂苷的工艺 Download PDFInfo
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Abstract
本发明涉及一种从辣木叶中萃取并分离辣木黄酮和辣木皂苷的工艺，其特征在于：将辣木叶片干燥，粉碎，装入滤筐投入萃取釜中，密闭萃取釜。加入有机萃取剂，减压回收溶剂，得到黑绿色浸膏。后分别依次加入乙酸乙酯、正丁醇、水萃取，离心，取上清液，合并乙酸乙酯、正丁醇清液，减压浓缩，干燥后得到棕黄色浸膏，取该浸膏适量上硅胶柱，洗脱，检测，取黄酮含量较高部分洗脱液，浓缩至干粉，重结晶。取水溶出上清液，减压浓缩得到浸膏，取适量该浸膏上硅胶柱，洗脱，检测，用乙酸乙酯溶析结晶，再用乙醇、甲醇重结晶即得高纯皂苷类产品。
Description
技术领域
本发明属于辣木天然产物分离提纯领域，涉及辣木中生物活性物质黄酮、皂苷(甙)的提取及分离提纯方法，涉及到亚临界萃取技术和重结晶提纯等技术，是一种新颖的辣木叶萃取并分离辣木黄酮与皂苷生物活性物质的方法。
背景技术
辣木(Moringa oleifera Lam)，属白花菜目辣木科，又称鼓槌树、神奇树等，原产于北印度亚喜马拉雅区域及非洲，广泛分布在印度、巴基斯坦等国。辣木营养丰富，辣木树所含的钙质是牛奶的四倍，钾是香蕉的三倍，铁是菠菜的三倍，维他命C是柑桔的七倍，维他命A是胡萝卜的四倍。辣木叶片、果荚含有的多种矿物质、维生素等营养物质，使其作为食品食用有食疗保健的功能，也可用于医药、保健、工业等方面，被誉为“神奇之树”、“生命之树”。辣木叶是近年来在欧美新兴的一种保健植物(食品)，号称高钙、高蛋白质、高纤维、低脂质，并且具有增强体力、治疗贫血、抑制病菌、驱除寄生虫等功效。
辣木叶中富含辣木黄酮、辣木皂苷(甙)等生物活性物质，这些生物活性物质是体现辣木独特保健和药用价值的关键成份。黄酮类化合物泛指两个具有酚羟基的苯环通过中央三碳原子相互连结而成的一系列化合物，其基本母核为2-苯基色原酮。它是一种很强的抗氧剂，可有效清除体内的氧自由基，阻止细胞的退化、衰老，也可阻止癌症的发生。皂苷(甙)是苷元为三萜或螺旋甾烷类化合物的一类糖苷，许多中草药如人参、远志、桔梗、甘草、知母和柴胡等的主要有效成分都含有皂苷。皂苷还具有抗菌的活性或解热、镇静、抗癌等有价值的生物活性。
从辣木中提取、分离生物活性物质的方法，目前广泛使用的是传统溶剂提取法。此种方法将辣木叶片干燥粉碎，然后使用有机溶剂室温或加热回流提取，减压浓缩，得到生物活性物质富集的浓缩萃取液。传统方法提取天然产物中的生物活性成分是一件耗时耗能又耗费溶剂的工作，同时还存在被提取成分损失大、操作周期长、能耗高、操作不便、提取率不高等缺点，已不能适应现代化生产的需要，特别是在现代化中草药有效成分的提取过程中这些缺点日渐显现，造成了人力、物力资源的极大浪费。
亚临界流体是指某些化合物在温度高于其沸点但低于临界温度，且压力低于其临界压力的条件下，以流体形式存在的该物质。亚临界流体具有近似超临界流体的浸润性和扩散性，却没有那么严苛的温度和压力要求。选择合适的物质，可以在较低温度和压力下操作。这些性质均有利于从天然产物中提取生物活性物质。
亚临界流体萃取技术，是利用亚临界流体作为萃取剂，在密闭、无氧、低压的压力容器内，根据有机物相似相溶的原理，通过物料与萃取剂在浸泡过程中的扩散作用，达到固体物料中的目标成分扩散转移到萃取剂中，再通过减压蒸发的过程将萃取剂与目的产物分离，最终得到目的产物的一种新型萃取与分离技术。1939年，美国的Henry Rosenthal首创将压缩后液化的低级气态烷烃用于油料浸出，成为亚临界萃取方法的雏形。
使用亚临界流体萃取技术相比传统溶剂加热回流提取的方法具有以下优点：提取速度快，提取效率高，对比孙鸣燕和王羽梅等研究所使用的传统乙醇回流提取法(提取3次，每次提取的时间1.5小时)，亚临界流体萃取技术可以缩短提取时间3倍以上；溶剂消耗量少，97％以上的溶剂可以回收循环使用；浸出液浓度高，大大减少了后期处理的成本；提取温度不高，适用于是热敏性物料提取；生产连续性好，应能适于现代化大规模连续性生产；节约能源，安全可靠；结构简单，操作方便。此外，我们还将亚临界萃取后的黄酮与皂苷混合物进行柱层析、重结晶分离，分别得到纯度较高的辣木黄酮与辣木皂苷。
发明内容
本发明的目的是提供一种高效提取辣木中黄酮类和皂苷(甙)类生物活性物质方法。该方法操作简单，可以缩短提取时间、减少溶剂用量、降低能耗；并对萃取物进行了辣木黄酮与辣木皂甙的分离，提高目标组份的纯度。
本发明的所要解决的技术问题是通过以下技术方案来实现的：
将新鲜采摘的辣木叶片干燥，粉碎至200～700目，装入滤筐中，投入亚临界萃取釜中，密闭萃取釜，调节萃取釜内真空度至0.06～0.1Mpa。然后加入有机萃取剂，调节固液比1∶5～1∶20(g∶ml)，升温至80～200℃，仪表指示压力范围在108kPa～4048kPa，每次所得萃取液投入溶剂回收釜，减压回收溶剂，提取2～3次，每次的提取时间为0.2h～1h，得到黑绿色浸膏。后本分别依次加入5倍量的乙酸乙酯、正丁醇、乙醚或丙酮萃取2～3次，离心，取上清液，合并乙酸乙酯、正丁醇清液，减压浓缩，干燥后得到棕黄色浸膏，取该浸膏适量上硅胶柱，用洗脱液按极性由小到大梯度洗脱，检测，取黄酮含量较高部分洗脱液，浓缩至干粉，用甲醇或乙醇重结晶2～4次即得纯度为98％以上的黄酮类产品。取乙醚或丙酮溶出的上清液，减压浓缩得到黄绿色浸膏，取适量该浸膏上硅胶柱，用洗脱液按极性由小到大梯度洗脱，检测，取皂苷(甙)含量较高部分洗脱液，用水溶析结晶，再用乙醇、甲醇重结晶2～4次即得纯度98％以上皂苷类产品。
所述的有机萃取剂是体积分数70％～100％的甲醇或乙醇、乙醚、石油醚等。
所述的亚临界萃取设备为亚临界萃取成套设备。
所述的干燥方法为真空干燥或冷冻干燥。
所述的硅胶是200～300目，称量40g硅胶，溶于两倍体积的洗脱液中，并超声除气泡。
所述的梯度洗脱速率为0.2～3mL／min。
所述洗脱液为一定体积配比的甲醇一二氯甲烷、乙醇一二氯甲烷、乙醇一水体系
本发明的亚临界流体萃取技术提取辣木中的黄酮类和皂苷(甙)类物质具有以下优点：
1、本发明相比较的传统的从辣木中提取生物活性物质的方法，涉及了辣木中生物活性物质的精细分离，更有利于充分发挥辣木中生物活性物质的作用。
2、亚临界流体萃取技术具有操作周期短、节能省时、操作简便等优点，亚临界流体萃取技术可缩短提取时间3倍以上。
3、相比较传统的水溶液提取、乙醇加热回流萃取，亚临界流体萃取技术提取的黄酮类和皂苷类物质杂质含量少、提取率高。对比陈瑞娇等研究，亚临界流体萃取技术单次黄酮提取率为2.21％，单次黄酮提取率提高2倍。
4、提取时间短、提取效率高有效地避免了辣木中黄酮类和皂苷类物质的受热分解，充分保留了生物活性物质的生理活性。
5、采用硅胶柱层析与重结晶工艺，将萃取获得的辣木黄酮与皂苷混合物进行了提纯分离。
附图说明
图1：亚临界流体萃取技术提取辣木中的黄酮类和皂苷(甙)类物质操作流程图；
具体实施例
以下为本发明的具体实施方式，所述实施例是为进一步描述本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。
实施例1
取辣木叶1kg，粉碎过300目筛，装入滤框中，投入亚临界萃取釜，加入甲醇萃取剂，调节固液比为1∶5，调节提取温度100℃，提取压力0.35MPa，提取3次，每次提取15min，提取液投入溶剂回收釜，减压回收溶剂，真空干燥，得到黑绿色浸膏。浸膏用二氯甲烷除去叶绿素等脂溶性成分，分别用乙酸乙酯、正丁醇萃取不同的黄酮类物质，各萃取3次；萃余相用乙醚萃取3次。合并黄酮类物质的两种萃取液并减压浓缩得棕黄色浸膏，取该浸膏适量上硅胶柱，用洗脱液按极性由小到大梯度洗脱，检测，取黄酮含量较高部分洗脱液，浓缩至干粉，用甲醇重结晶4次即得黄铜类产品26.7g纯度为99.1％；合并乙醚萃取液并减压浓缩至浸膏，取该浸膏适量上硅胶柱，用洗脱液按极性由小到大梯度洗脱，取皂苷(甙)含量较高部分洗脱液浓缩，用水溶析结晶，用甲醇重结晶4次即得皂苷(甙)类产品87.3g，纯度为98.7％。
实施例2
取辣木叶1kg，粉碎过250目筛，装入滤框中，投入亚临界萃取釜，加入甲醇萃取剂，调节固液比为1∶10，提取温度140℃，提取压力1.08MPa，提取2次，每次提取0.5h，提提取液投入溶剂回收釜，减压回收溶剂，真空干燥，得到黑绿色浸膏。浸膏用二氯甲烷除去叶绿素等脂溶性成分，分别用乙酸乙酯、正丁醇萃取不同的黄酮类物质，各萃取2次；萃余相用丙酮萃取2次。合并黄酮类物质的三种萃取液并减压浓缩得黄绿色浸膏，取该浸膏适量上硅胶柱，用洗脱液按极性由小到大梯度洗脱，检测，取黄酮含量较高部分洗脱液，浓缩至干粉，用乙醇重结晶3次即得黄铜类产品28.4g，纯度99.0％；合并丙酮萃取液并减压浓缩至浸膏，取该浸膏适量上硅胶柱，用洗脱液按极性由小到大梯度洗脱，取皂甙含量较高部分洗脱液浓缩，用水溶析结晶，用乙醇重结晶3次即得皂苷(甙)类产品80.3g，纯度99.2％。
实施例3
取辣木叶1kg，粉碎过200目筛，装入滤框中，投入亚临界萃取釜，加入乙醇萃取剂，调节固液比为1∶15，提取温度120℃，提取压力0.42MPa，提取3次，每次提取20min，提取液投入溶剂回收釜，减压回收溶剂，真空干燥，得到黑绿色浸膏。浸膏用二氯甲烷除去叶绿素等脂溶性成分，分别用乙酸乙酯、正丁醇萃取不同的黄酮类物质，各萃取3次；萃余相用丙酮萃取3次。合并黄酮类物质的三种萃取液并减压浓缩得黄绿色浸膏，取该浸膏适量上硅胶柱，用洗脱液按极性由小到大梯度洗脱，检测，取黄酮含量较高部分洗脱液，浓缩至干粉，用甲醇重结晶4次即得黄铜类产品30.2g，纯度98.9％；合并丙酮萃取液并减压浓缩至浸膏，取该浸膏适量上硅胶柱，用洗脱液按极性由小到大梯度洗脱，取皂苷(甙)含量较高部分洗脱液浓缩，用水溶析结晶，用甲醇重结晶4次，即得皂苷(甙)类产品82.3g，纯度99.3％。
实施例4
取辣木叶1kg，粉碎过100目筛，装入滤框中，投入亚临界萃取釜，加入乙醇萃取剂，调节固液比为1∶15，提取压力1.24MPa，提取温度160℃，提取2次，每次提取0.5h，提取液投入溶剂回收釜，减压回收溶剂，真空干燥，得到黑绿色浸膏。浸膏用二氯甲烷除去叶绿素等脂溶性成分，分别用乙酸乙酯、正丁醇萃取不同的黄酮类物质，各萃取2次；萃余相用乙醚萃取2次。合并黄酮类物质的三种萃取液并减压浓缩得黄绿色浸膏，取该浸膏适量上硅胶柱，用洗脱液按极性由小到大梯度洗脱，检测，取黄酮含量较高部分洗脱液，浓缩至干粉，用甲醇重结晶3次即得黄铜类产品32.2g，纯度98.8％；合并乙醚萃取液并减压浓缩至浸膏，取该浸膏适量上硅胶柱，用洗脱液按极性由小到大梯度洗脱，取皂甙含量较高部分洗脱液浓缩，用乙酸乙酯溶析结晶，用甲醇重结晶4次即得皂苷(甙)类产品88.3g，纯度99.1％。
Claims (6)
1.一种从辣木叶中萃取并分离辣木黄酮和辣木皂苷的工艺，其特征在于：将新鲜采摘的辣木叶片干燥，粉碎至200～700目，装入滤筐中，投入亚临界萃取釜中，密闭萃取釜，调节萃取釜内真空度至0.06～0.1Mpa；然后加入有机萃取剂，调节固液比1∶5～1∶20(g∶ml)，升温至80～200℃，每次所得萃取液投入溶剂回收釜，减压回收溶剂，提取2～3次，每次的提取时间为0.1h～4h，得到黑绿色浸膏；后本分别依次加入5倍量的乙酸乙酯、正丁醇、水萃取2～3次，离心，取上清液，合并乙酸乙酯、正丁醇清液，减压浓缩，干燥后得到棕黄色浸膏，取该浸膏适量上硅胶柱，用洗脱液按极性由小到大梯度洗脱，检测，取黄酮含量较高部分洗脱液，浓缩至干粉，用甲醇或乙醇重结晶2～4次即得纯度为98％以上的黄酮类产品；取水溶出上清液，减压浓缩得到黄绿色浸膏，取适量该浸膏上硅胶柱，用洗脱液按极性由小到大梯度洗脱，检测，取皂苷含量较高部分洗脱液，用乙酸乙酯溶析结晶，再用乙醇、甲醇重结晶2～4次即得高纯皂苷类产品。
2.如权利要求1所述的一种从辣木叶中萃取并分离辣木黄酮和辣木皂苷的工艺，其特征在于所述的亚临界萃取设备为亚临界萃取成套设备，温度80～200℃，压力范围在10gkPa～4048kPa。
3.如权利要求1所述的一种从辣木叶中萃取并分离辣木黄酮和辣木皂苷的工艺，其特征在于所述的亚临界有机萃取剂是体积分数70％～100％的甲醇或乙醇、乙醚、石油醚等。
4.如权利要求1所述的一种从辣木叶中萃取并分离辣木黄酮和辣木皂苷的工艺，其特征在于所述柱层析的硅胶是200～300目，硅胶溶于两倍体积的洗脱液中，并超声除气泡，梯度洗脱速率为0.2～3mL／min。
5.如权利要求1所述的一种从辣木叶中萃取并分离辣木黄酮和辣木皂苷的工艺，其特征在于所述洗脱液为一定体积配比的甲醇一二氯甲烷、乙醇一二氯甲烷、乙醇一水体系。
6.如权利要求1所述的一种从辣木叶中萃取并分离辣木黄酮和辣木皂苷的工艺，其特征在于所述的精制方法为重结晶，干燥方法为真空干燥或冷冻干燥。
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| 陈瑞娇等: "辣木叶总黄酮的提取及其降血糖的作用", 《食品与生物技术学报》 * |
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