CN104725447A

CN104725447A - 一种3-S-四羟基-β-D-葡萄糖苷-1,2,4-三唑类化合物

Info

Publication number: CN104725447A
Application number: CN201510154077.9A
Authority: CN
Inventors: 卢俊瑞; 张瑞波; 刘金彪; 王宏韫; 杨旭云; 穆江蓓
Original assignee: Tianjin University of Technology
Current assignee: Tianjin University of Technology
Priority date: 2015-04-02
Filing date: 2015-04-02
Publication date: 2015-06-24

Abstract

一种3-S-四羟基-β-D-葡萄糖苷-1,2,4-三唑类化合物，其制备方法是：取代苯甲酰肼与二硫化碳生成钾盐，然后和水合肼作用，得到3-巯基-4-氨基-5-取代芳基-1,2,4三唑类化合物；与溴代乙酰化α-D-吡喃型葡萄糖反应合成3-S-2′,3′,4′,6′-四-O-乙酰基-β-D-吡喃葡萄糖基-4-氨基-5-取代苯基-1,2,4-三唑类化合物；在碱性条件下生成3-S-2′,3′,4′,6′-四羟基-β-D-吡喃葡萄糖基-4-氨基-5-取代苯基-1,2,4-三唑类化合物。该类化合物对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌和白色念珠菌均显示了较好的抑菌活性；制备方法简单、生成成本低、产率高。

Description

一种3-S-四羟基-β-D-葡萄糖苷-1,2,4-三唑类化合物

技术领域

本发明涉及一种3-S-四羟基-β-D-葡萄糖苷-1,2,4-三唑类化合物及其制备方法和应用。

背景技术

近年来1,2,4-三唑糖苷类化合物由于具有广泛的生物活性如抗菌、抗癌、抗病毒、消炎等，因而备受人们的关注参见文献：El，S，H.El，A.；El，S，H.El T.；Mohy，E，D，A，El，F.；Ahmed，T.A.B.；Heba M.A，El，N.Eur.J.Med.Chem.2013,66,106-113；Karim，A，D.；Fazel，N，Pur；Nima，H，J.；Asma，A.；Zahra，N。；Farrin，M.Phosphorus,Sulfur,and Silicon.2014,189,81-87。

2013年，戢丹等以邻羟苯甲酸脂为起始原料，合成的含有1,2,4-三唑糖苷类化合物，生物活性测试表明：对白色念珠菌(M.a.)(ATCC10231)有较好的抗菌活性，但对金黄色葡萄球菌(S.a.)(ATCC 6538)和大肠杆菌(E.c.)(8099)抗菌活性不敏感，参见文献：Ji,D，Lu J R,Lu B W,Xin C W,Peng C Y,Bao X R,Bioorg.Med.Chem.Lett，2013,23,1997。

我们根据生物活性叠加原理，将“邻羟苯基”分子片断与“1,2,4-三唑”、“糖基”合理组装，设计合成了一种3-S-四羟基-β-D-葡萄糖苷-1,2,4-三唑类化合物，抗菌活性突出，表现出较强的广谱抗菌活性，同时大大提高溶解性能，降低了副作用。

目前，开发新型的低毒、广谱、耐药性强的抗菌药物已成为急需研究的问题。因此本发明提供了一种具有极强抗菌活性的3-S-四羟基-β-D-葡萄糖苷-1,2,4-三唑类化合物，经生物活性测试表明，该类化合物对革兰氏阴性、阳性和真菌都有较好的抗菌活性，表现出较强的广谱抗菌活性，极具开发潜力，具有很好的应用前景。

发明内容

本发明的目的在于针对上述技术分析，提供一种3-S-四羟基-β-D-葡萄糖苷-1,2,4-三唑类化合物，这类化合物不仅结构新颖、合成步骤简单、生产成本低、产率高，而且抑菌活性强、副作用低，其在抗革兰氏阴性菌、阳性菌和真菌都具有很好的应用前景。

本发明的技术方案

一种3-S-四羟基-β-D-葡萄糖苷-1,2,4-三唑类化合物，其化学式为3-S-2′,3′,4′,6′-四-羟基-β-D-吡喃葡萄糖基-4-氨基-5-取代苯基-1,2,4-三唑类化合物，其结构式为：

(Ⅲ)式中：R为苯、卤代苯、氨基苯、羟基苯或硝基苯。

一种所述3-S-四羟基-β-D-葡萄糖苷-1,2,4-三唑类化合物的制备方法，其合成路线如下：

制备步骤如下：

1)中间体溴代乙酰化葡萄糖的制备

在装有温度计和恒压滴液漏斗的反应器中加入乙酸酐，滴加浓度为70-72wt％的HClO₄溶液，HClO₄溶液与乙酸酐的体积比为1:90-120，然后将无水葡萄糖加入到反应器中，并用冰水浴控制温度在30-200℃，继续反应至溶液澄清，加入红磷，控制反应温度在20℃以下，充分搅拌后逐滴加入液溴，反应半小时，逐滴加入水并且控制温度不超过20℃，其中乙酸酐、无水葡萄糖、红磷、液溴和水的摩尔比为7-10：1：0.2：2-4：4-6，待水滴加完后，撤掉冰浴继续反应两个小时，然后加入溶剂A，无水葡萄糖和溶剂A质量比为1：4-6，抽滤，将滤液倒至冰水中，分出有机层，水洗，然后再用饱和NaHCO₃溶液调到中性，有机相用无水MgSO₄干燥，抽滤，在压力为100-200Pa下减压旋蒸，得亮黄色糖浆状固体，用溶剂B重结晶，得到白色固体状中间体；

2)3-S-2′,3′,4′,6′-四-O-乙酰基-β-D-吡喃葡萄糖基-4-氨基-5-取代苯基-1,2,4-三唑(Ⅱ)的制备

在反应器中，加入蒸馏水、溶剂C和碱，搅拌溶解后加入化合物3-巯基-4-氨基-5-取代芳基-1,2,4三唑(Ⅰ),其中化合物Ⅰ、碱、蒸馏水和溶剂C的摩尔比为1:1-5:10-12:30-40，搅拌30min，加入溴代乙酰化葡萄糖，化合物Ⅰ和溴代乙酰化葡萄糖的摩尔比为1:1-2，于室温下搅拌反应，TLC跟踪至原料斑点消失后停止反应，展开剂为体积比为1:2的乙酸乙酯和石油醚的混合物，在压力为100-200Pa下减压旋蒸除掉溶剂C，将所得固体溶于溶剂D中，水洗2次，水相用溶剂D萃取2次，然后合并有机相，有机相经无水硫酸镁干燥后过滤，在压力为100-200Pa下减压旋蒸除去溶剂D，得到目标化合物(Ⅱ)；

3)3-S-四羟基-β-D-葡萄糖苷-1,2,4-三唑类化合物即3-S-2′,3′,4′,6′-四-羟基-β-D-吡喃葡萄糖基-4-氨基-5-取代苯基-1,2,4-三唑(Ⅲ)的制备

在反应器中加入溶剂E和碱，再加入上述化合物(Ⅱ)，其中化合物Ⅱ、碱和溶剂E的摩尔比为1:1-5:100-150，搅拌溶解，室温下搅拌反应，TLC跟踪至原料斑点消失后停止反应，展开剂为体积比为5:1的二氯甲烷与甲醇的混合物，加入732型强酸性阳离子交换树脂调PH至中性，硅胶柱层析分离，得到目标化合物(Ⅲ)。

所述步骤1)中溶剂A为甲醇、乙醇、正丙醇、异丙醇、正丁醇、异丁醇、叔丁醇、仲丁醇、丁二醇、正戊醇、异戊醇、正己醇、环己醇、正庚醇、正辛醇、异辛醇、仲辛醇、乙腈、二氯甲烷、氯仿、丙酮和乙醚中的一种、两种或者两种以上任意比例的混合物；溶剂B为甲醇、乙醇、正丙醇、异丙醇、正丁醇、异丁醇、叔丁醇、仲丁醇、丁二醇、正戊醇、异戊醇、正己醇、环己醇、正庚醇、正辛醇、异辛醇、仲辛醇、乙腈、二氯甲烷、氯仿、丙酮和乙醚中的一种或两种以上任意比例的混合物；

所述步骤2)中所用的碱为氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化锂、碳酸钠、碳酸钾、碳酸锂、碳酸氢钾、硫酸钠、硫酸钾、硫酸锂、硫酸氢钠、硫酸氢钾、磷酸钠、磷酸氢二钠和磷酸二氢钠中的一种、两种或者两种以上任意比例的混合物。

所述步骤2)中溶剂C为甲醇、乙醇、正丙醇、异丙醇、正丁醇、异丁醇、叔丁醇、仲丁醇、丁二醇、正戊醇、异戊醇、正己醇、环己醇、正庚醇、正辛醇、异辛醇、仲辛醇、乙腈、二氯甲烷、氯仿、丙酮和乙醚中的一种、两种或者两种以上任意比例的混合物；溶剂D为甲醇、乙醇、正丙醇、异丙醇、正丁醇、异丁醇、叔丁醇、仲丁醇、丁二醇、正戊醇、异戊醇、正己醇、环己醇、正庚醇、正辛醇、异辛醇、仲辛醇、乙腈、二氯甲烷、氯仿、丙酮和乙醚中的一种或两种以上任意比例的混合物。

所述步骤3)中所用的碱为氢化钠、甲醇钠、乙醇钠、叔丁醇钠、二乙胺、三乙胺、乙二胺、甲胺、乙胺、三乙醇胺、苯胺、吡啶和4-二甲氨基吡啶中的一种或两种以上任意比例的混合物。

所述步骤3)溶剂E为甲醇、乙醇、正丙醇、异丙醇、正丁醇、异丁醇、叔丁醇、仲丁醇、丁二醇、正戊醇、异戊醇、正己醇、环己醇、正庚醇、正辛醇、异辛醇、仲辛醇、乙腈、二氯甲烷、氯仿、丙酮和乙醚中的一种或两种以上任意比例的混合物。

一种所述3-S-四羟基-β-D-葡萄糖苷-1,2,4-三唑类化合物的应用，用于抗革兰氏阴性菌、阳性菌和抗真菌药物的制备。

本发明的优点和积极效果是：

该类化合物结构新颖、合成步骤简单、生产成本低、产率高，从设计、生产到应用都符合环境友好和绿色化学的要求；该类化合物对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌和白色念珠菌均显示了较好的抑菌活性，具有广谱抗菌开发价值和应用前景，可以为安全高效抗微生物新药研制提供先导化合物、基础理论和技术支撑。

具体实施方式

为了进一步理解本发明，提供了实施例，特定的物质及所用的条件是旨在说明本发明的，并不对其合理的范围构成限制。

实施例1：

(Ⅲ)式中：R为4-羟基苯，其合成路线如下：

制备步骤如下：

1)中间体溴代乙酰化葡萄糖的制备

在装有温度计和恒压滴液漏斗的100mL三口瓶中加入15mL乙酸酐，滴加浓度为70wt％的HClO₄溶液，HClO₄溶液与乙酸酐的体积比为1:100，然后将5.0g无水葡萄糖加入到三口瓶中，并用冰水浴控制温度在30-40℃之间，继续反应至溶液澄清，加入0.75g红磷,控制反应温度在20℃以下，充分搅拌后逐滴加入3.0mL液溴；反应半小时，逐滴加入1.8mL水并且控制温度不超过20℃。待水滴加完后，撤掉冰浴继续反应两个小时，然后加入15mL二氯甲烷，抽滤，将滤液倒至50mL冰水中，分出有机层,水洗,然后再用饱和NaHCO₃溶液调至中性。有机相用无水MgSO4干燥。抽滤，减压旋蒸，得亮黄色糖浆状固体，用无水乙醚加热溶解，放置冰箱中，析出白色固体,产率90.0％，熔点：86-88℃。

2)3-S-2′,3′,4′,6′-四-O-乙酰基-β-D-吡喃葡萄糖基-4-氨基-5-(4-羟基-苯基)-1,2,4-三唑的合成

于50mL三口瓶中，加入0.12g(2.0mmol)KOH,2mL蒸馏水，10mL丙酮溶液，2.0mmol化合物3-巯基-4-氨基-5-(4-羟基-苯基)-1,2,4-三唑，搅拌30min，用10mL丙酮溶液溶解0.98g(2.4mmo1)2′,3′,4′,6′-四-O-乙酰基-α-D-溴代葡萄糖，加入反应器中，于室温下搅拌反应16h，TLC跟踪至原料斑点消失后停止反应，展开剂为体积比为1:2的乙酸乙酯和石油醚的混合物，在压力为100-200Pa下减压旋蒸除掉溶剂C，将所得固体溶于20mL二氯甲烷中，水洗2次(2×20mL)，水相用二氯甲烷萃取2次，然后合并有机相。有机相经无水硫酸镁干燥后过滤，减压旋干除去溶剂得粗品，硅胶柱层析分离得产品，白色固体，产率：68.7％，m.p.178.3～179.4℃。¹H NMR(DMSO-d₆,400MHz)δ:9.93(s,1H,OH),7.89(d,2H,J＝8.8Hz,ArH),6.88(d,2H,J＝8.4Hz,ArH),6.00(s,2H,NH₂),5.52(d,1H,J_{H-1’-H-2’}＝10.0Hz,H-1’),5.38(t,1H,J_{H-3’-H-4’}＝J_{H-3’-H-2’}＝9.6Hz,H-3’),5.02(t,1H,J_{H-2’-H-1’}＝J_{H-2’-H-3’}＝9.4Hz,H-2’),4.97(t,1H,J_{H-4’-H-5’}＝J_{H-4’-H-3’}＝9.6Hz,H-4’),4.12(dd,1H,J_{H-6’-H-5’}＝5.2Hz,J_{H-6’-H-6”}＝12.0Hz,H-6’),4.07(dd,1H,J_{H-6”-H-5’}＝5.2Hz,J_{H-6”-H-6’}＝12.0Hz,H-6”),4.03～3.99(m,1H,H-5’),2.08,1.99,1.96,1.89(4s,12H,CH₃CO)；¹³C NMR(DMSO-d₆,400MHz)δ:170.43,169.96,169.72,169.61,159.44,154.87,148.38,130.00,117.96,115.69,83.13,75.14,73.30,70.38,68.22,62.23,20.88,20.82,20.78,20.73；IR(KBr)ν:3442,3230,1751,1614,1467,1401,1223,1045,848cm^-1；ESI-MS m/s:539.1461[M+H]⁺,HRMS calcd for C₂₂H₂₇N₄O₁₀S[M+H]⁺539.1448,found 539.1461.此化合物编号为化合物a.。

3)3-S-2′,3′,4′,6′-四羟基-β-D-吡喃葡萄糖基-4-氨基-5-(4-羟基-苯基)-1,2,4-三唑的合成

在50mL三口瓶中加入10mL甲醇，然后加入0.092g(4.0mmol)金属钠溶解，再加入10mL二氯甲烷，加入1.08g(2.0mmol)化合物5R¹，搅拌溶解，室温反应，TLC跟踪至原料斑点消失后停止反应，展开剂为体积比为5:1的二氯甲烷与甲醇的混合物，待反应结束后，加入732型强酸性阳离子交换树脂，搅拌测量溶液PH至中性，硅胶柱层析分离得产品，黄色固体，产率：73.9％，m.p.119.4～121.3℃。¹H NMR(DMSO-d₆,400MHz)δ:9.93(s,1H,OH),7.89(d,2H,J＝8.8Hz,ArH),6.88(d,2H,J＝8.8Hz,ArH),6.04(s,2H,NH₂),5.55(d,1H,J＝6.4Hz,H-1’),5.18(d,1H,J＝12.0Hz,H-3’),5.04(d,1H,J＝4.8Hz,H-2’),4.75(d,1H,J＝10.0Hz,H-4’),4.63(t,1H,J＝5.2,10.4Hz,H-6’),3.88～3.58(m,2H,H-5’,H-6”),3.20～3.07(m,4H,OH)；¹³C NMR(DMSO-d₆,400MHz)δ:159.30,154.73,149.11,130.06,118.34,115.63,87.68,81.52,78.24,73.37,70.12,61.39；IR(KBr)ν:3416,2921,2862,1620,1463,1276,1172,1054,830cm^-1；ESI-MS m/s:371.1021[M+H]⁺,HMRS calcd forC₁₄H₁₉N₄O₆S[M+H]⁺371.1025,found 371.1021.。此化合物编号为化合物A。

实施例2：

(Ⅲ)式中：R为2-氯苯，其合成路线如下：

制备步骤如下：

1)中间体溴代乙酰化葡萄糖的制备方法与实施例1相同。

2)3-S-2′,3′,4′,6′-四-O-乙酰基-β-D-吡喃葡萄糖基-4-氨基-5-(2-氯-苯基)-1,2,4-三唑的合成与实施例1相同，制得3-S-2′,3′,4′,6′-四-O-乙酰基-β-D-吡喃葡萄糖基-4-氨基-5-(2-氯-苯基)-1,2,4-三唑，黄色固体，产率：63.2.0％，m.p.66.6～67.9℃.¹HNMR(DMSO-d₆,400MHz)δ:7.64(dd,1H,J＝2.8,5.2Hz,ArH),7.60～7.56(m,1H,ArH),7.50～7.49(m,2H,ArH),5.59(d,1H,J_{H-1’-H-2’}＝10.4Hz,H-1’),5.43(t,1H,J_{H-3’-H-4’}＝9.6Hz,J_{H-3’-H-2’}＝9.2Hz,H-3’),5.06(t,1H,J_{H-2’-H-1’}＝J_{H-2’-H-3’}＝9.6Hz,H-2’),4.96(t,1H,J_{H-4’-H-5’}＝9.6Hz,J_{H-4’-H-3’}＝10Hz,H-4’),4.15(dd,1H,J_{H-6’-H-5’}＝5.2Hz,J_{H-6’-H-6”}＝12.0Hz,H-6’),4.11(dd,1H,J_{H-6”-H-5’}＝5.2Hz,J_{H-6”-H-6’}＝12.0Hz,H-6”),4.04～3.96(m,1H,H-5’),2.10,2.03,1.99,1.98(4s,12H,CH₃CO)；¹³C NMR(DMSO-d₆,400MHz)δ:170.41,169.95,169.72,169.58,149.21,133.66,132.82,132.45,130.26,127.72,126.45,83.07,75.24,73.32,70.49,68.22,62.17,20.90,20.86,20.79,20.71；IR(KBr)ν:3446,2961,1752,1635,1441,1376,1226,1046,767cm^-1；ESI-MS m/s:557.1107[M+H]⁺,HRMS calcd for C₂₂H₂₆ClN₄O₉S[M+H]⁺557.1109,found 557.1107.此化合物编号为化合物b。

3)3-S-2′,3′,4′,6′-四羟基-β-D-吡喃葡萄糖基-4-氨基-5-(2-氯-苯基)-1,2,4-三唑的合成

在50mL三口瓶中加入10mL甲醇，然后加入0.092g(4.0mmol)金属钠溶解，再加入10mL二氯甲烷，加入1.11g(2.0mmol)化合物3-S-2′,3′,4′,6′-四-O-乙酰基-β-D-吡喃葡萄糖基-4-氨基-5-(2-氯-苯基)-1,2,4-三唑，搅拌溶解，室温反应，TLC跟踪至原料斑点消失后停止反应，展开剂为体积比为5:1的二氯甲烷与甲醇的混合物，待反应结束后，加入732型强酸性阳离子交换树脂，搅拌测量溶液PH至中性，硅胶柱层析分离得产品，白色固体，产率：82.4％，m.p.108.8～110.2℃；¹H NMR(DMSO-d₆,400MHz)δ:7.63(d,1H,J＝8.0Hz,ArH),7.59～7.55(m,1H,ArH),7.49(d,2H,J＝4.0Hz,ArH),5.54(d,1H,J＝6.0Hz,H-1’),5.24(d,1H,J＝4.8Hz,H-3’),5.05(t,2H,J＝4.0,5.2Hz,H-2’,H-4’),4.46(t,1H,J＝5.6,11.2Hz,H-6’),3.64～3.60(m,1H,H-6”),3.45～3.41(m,1H,H-5’),3.22～3.16(m,4H,OH)；¹³CNMR(DMSO-d₆,400MHz)δ:149.45,144.97,133.44,132.66,132.61,130.41,127.90,126.31,86.94,81.78,78.43,73.30,69.92,61.23；IR(KBr)ν:3473,3416,1626,1423,1122,1053,769cm^-1；ESI-MS m/s:389.0666[M+H]⁺,HMRS calcd forC₁₄H₁₈ClN₄O₅S[M+H]⁺389.0686,found 389.0666.此化合物编号为化合物B。

实施例3：

(Ⅲ)式中：R为4-溴苯，其合成路线如下：

制备步骤如下：

1)中间体溴代乙酰化葡萄糖的制备与实施例1相同。

2)3-S-2′,3′,4′,6′-四-O-乙酰基-β-D-吡喃葡萄糖基-4-氨基-5-(4-溴-苯基)-1,2,4-三唑的合成与实施例1相同，得到3-S-2′,3′,4′,6′-四-O-乙酰基-β-D-吡喃葡萄糖基-4-氨基-5-(4-溴-苯基)-1,2,4-三唑，黄色固体，产率：65.6％，m.p.152.7～153.8℃.¹HNMR(DMSO-d₆,400MHz)δ:8.03(d,2H,J＝8.8Hz,ArH),7.76(d,2H,J＝8.4Hz,ArH),6.10(s,2H,NH₂),5.57(d,1H,J_{H-1’-H-2’}＝10.0Hz,H-1’),5.39(t,1H,J_{H-3’-H-4’}＝9.6Hz,J_{H-3’-H-2’}＝9.2Hz,H-3’),5.05(t,1H,J_{H-2’-H-1’}＝9.6Hz,J_{H-2’-H-3’}＝10.0Hz,H-2’),4.98(t,1H,J_{H-4’-H-5’}＝9.2Hz,J_{H-4’-H-3’}＝9.6Hz,H-4’),4.13(dd,1H,J_{H-6’-H-5’}＝5.2Hz,J_{H-6’-H-6”}＝11.6Hz,H-6’),4.08(dd,1H,J_{H-6”-H-5’}＝5.2Hz,J_{H-6”-H-6’}＝12.0Hz,H-6”),4.03～4.00(m,1H,H-5’),2.06,1.99,1.96,1.90(4s,12H,CH₃CO)；¹³C NMR(DMSO-d₆,400MHz)δ:170.41,169.96,169.72,169.62,153.92,149.62,132.04,130.23,126.45,123.99,82.93,75.19,73.31,70.37,68.19,62.19,20.88,20.82,20.81,20.74；IR(KBr)ν:3450,1751,1635,1454,1382,1226,1094,828cm^-1；ESI-MS m/s:601.0608[M+H]⁺,HRMS calcd for C₂₂H₂₆BrN₄O₉S[M+H]⁺601.0604,found 601.0608.此化合物编号为c。

3)3-S-2′,3′,4′,6′-四羟基-β-D-吡喃葡萄糖基-4-氨基-5-(4-溴-苯基)-1,2,4-三唑的合成

在50mL三口瓶中加入10mL甲醇，然后加入0.092g(4.0mmol)金属钠溶解，再加入10mL二氯甲烷，加入1.20g(2.0mmol)化合物3-S-2′,3′,4′,6′-四-O-乙酰基-β-D-吡喃葡萄糖基-4-氨基-5-(4-溴-苯基)-1,2,4-三唑，搅拌溶解，室温反应，TLC跟踪至原料斑点消失后停止反应，展开剂为体积比为5:1的二氯甲烷与甲醇的混合物，待反应结束后，加入732型强酸性阳离子交换树脂，搅拌测量溶液PH至中性，黄色固体，产率：75.1％，m.p.115.0～116.3℃；¹H NMR(DMSO-d₆,400MHz)δ:8.03(d,1H,J＝8.4Hz,ArH),7.75(t,2H,J＝8.4,8.4Hz,ArH),7.69(d,1H,J＝8.4Hz,ArH),6.15(s,2H,NH₂),5.60(d,1H,J＝5.6Hz,H-1’),5.22(d,1H,J＝4.8Hz,H-3’),5.07(d,1H,J＝5.2Hz,H-2’),4.96(d,1H,J＝10.0Hz,H-4’),4.81(d,1H,J＝9.6Hz,H-6’),4.65(t,1H,J＝5.2,10.8Hz,H-6”),3.43～3.40(m,1H,H-5’),3.22～3.13(m,4H,OH)；¹³C NMR(DMSO-d₆,400MHz)δ:153.74,150.38,132.57,131.97,130.33,129.51,87.58,81.56,78.34,73.39,70.12,61.39；IR(KBr)ν:3475,3415,1626,1447,1257,1121,1063,834cm^-1；ESI-MS m/s:433.0182[M+H]⁺,HMRS calcd forC₁₄H₁₈BrN₄O₅S[M+H]⁺433.0181,found 433.0182.此化合物编号为化合物C。

实施例1-3所制备的3-S-四羟基-β-D-葡萄糖苷-1,2,4-三唑类化合物用于抗革兰氏阴性菌、阳性菌和抗真菌药物的制备。

所制备的3-S-四羟基-β-D-葡萄糖苷-1,2,4-三唑类化合物生物活性实验：

参照美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)最小抑菌浓度(MIC)的测定方法，以氟康唑和三氯生为参照药物,对目标化合物进行了体外抑菌活性测试，所用菌株为大肠杆菌(E.c.)(8099)、金黄色葡萄球菌(S.a.)(ATCC 6538)、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis,B.s.)(ATCC 6051)和白色念珠菌(M.a.)(ATCC10231)，天津医科大学微生物实验室提供。

抑菌实验实施例：

3-S-2′,3′,4′,6′-四羟基-β-D-吡喃葡萄糖基-4-氨基-5-(4-羟基-苯基)-1,2,4-三唑生物活性测试

具体操作如下：

1)抗菌药物贮存液制备

配制浓度为256μg.mL^-1的抗菌药物贮存液10mL，用分析天平，称取化合物3.4mg，所用药物为粉剂，其药物的有效力为750μg·mL^-1。计算得稀释剂用量为：3.4mg×750μg·mL^-1)/256μg·mL^-1＝10.0mL，用2mL DMF和8mL蒸馏水溶解药物。0℃以下贮存抗菌药物贮存液。

2)培养基

配制好相应的培养基：培养细菌用营养肉汤培养基，培养真菌用沙氏葡萄糖液体培养基。

3)稀释抗菌药物的制备

将10支无菌试管(13×100mm)排成一排，第1管除外，其余每管加入1.0mL培养基，在第1管加入抗菌药物贮存液(如256μg·mL^-1)2mL混匀，吸取1mL加到第2管，混匀后再吸取1mL至第3管，如此连续至第9管，并从第9管中吸取1mL弃去，第10管为不含药物的阴性对照。第1管至第9管药物浓度分别为256、128、64、32、16、8、4、2、1μg·mL^-1。

4)接种物制备

挑取菌落制备0.5麦氏比浊标准的菌悬液，经液体培养基1∶1000稀释后(约含1～2×10⁸CFU.mL^-1)，向每管加100μL，密封后置37℃恒温培养箱中，细菌培养16～20h，真菌培养72h判断结果。

5)结果判断

待细菌培养16～20h，真菌培养72h后，检查结果并记录数据。首先检查阴性对照管的菌株是否情况良好，并保证没有被污染。然后肉眼观察，最低浓度管无菌株生长者，即为测试菌株的最小抑菌浓度(MIC)。

按抑菌实验实施例1的方法，对上述实施例中的化合物和氟康唑以及三氯生进行抑菌生物活性测试，上述实施例中的3个化合物与氟康唑以及三氯生的测试结果如下：

化合物的体外最小抑菌浓度(μg·mL^-1)结果见下表：

抑菌测试表明，3-S-2′,3′,4′,6′-四羟基-β-D-吡喃葡萄糖基-4-氨基-5-(4-羟基-苯基)-1,2,4-三唑对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和白色念珠菌的MIC＝16μg/mL，对枯草芽孢杆菌的MIC＝64μg/mL；3-S-2′,3′,4′,6′-四羟基-β-D-吡喃葡萄糖基-4-氨基-5-(2-氯-苯基)-1,2,4-三唑对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌的MIC＝16μg/mL，对白色念珠菌的MIC＝8μg/mL；3-S-2′,3′,4′,6′-四羟基-β-D-吡喃葡萄糖基-4-氨基-5-(4-溴-苯基)-1,2,4-三唑对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌和白色念珠菌的MIC分别为2、8、32和8μg/mL。该类化合物对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌和白色念珠菌均显示了较好的抑菌活性，具有广谱抗菌开发价值和应用前景。

上述参照实施例对该式(Ⅲ)的3-S-2′,3′,4′,6′-四羟基-β-D-吡喃葡萄糖基-4-氨基-5-取代苯基-1,2,4-三唑类化合物及其制备方法和在抗菌方面的应用进行的详细描述，是说明性的而不是限定性的；因此在不脱离本发明总体构思下的变化和修改，应属本发明的保护范围之内。

Claims

1.一种3-S-四羟基-β-D-葡萄糖苷-1,2,4-三唑类化合物，其特征在于化学式为3-S-2′,3′,4′,6′-四-羟基-β-D-吡喃葡萄糖基-4-氨基-5-取代苯基-1,2,4-三唑类化合物，其结构式为：

(Ⅲ)式中：R为苯、卤代苯、氨基苯、羟基苯或硝基苯。

2.一种如权利要求1所述3-S-四羟基-β-D-葡萄糖苷-1,2,4-三唑类化合物的制备方法，其特征在于合成路线如下：

制备步骤如下：

1)中间体溴代乙酰化葡萄糖的制备

3.根据权利要求2所述3-S-四羟基-β-D-葡萄糖苷-1,2,4-三唑类化合物的制备方法，其特征在于：所述步骤1)中溶剂A为甲醇、乙醇、正丙醇、异丙醇、正丁醇、异丁醇、叔丁醇、仲丁醇、丁二醇、正戊醇、异戊醇、正己醇、环己醇、正庚醇、正辛醇、异辛醇、仲辛醇、乙腈、二氯甲烷、氯仿、丙酮和乙醚中的一种、两种或者两种以上任意比例的混合物；溶剂B为甲醇、乙醇、正丙醇、异丙醇、正丁醇、异丁醇、叔丁醇、仲丁醇、丁二醇、正戊醇、异戊醇、正己醇、环己醇、正庚醇、正辛醇、异辛醇、仲辛醇、乙腈、二氯甲烷、氯仿、丙酮和乙醚中的一种或两种以上任意比例的混合物。

4.根据权利要求2所述3-S-四羟基-β-D-葡萄糖苷-1,2,4-三唑类化合物的制备方法，其特征在于：所述步骤2)中所用的碱为氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化锂、碳酸钠、碳酸钾、碳酸锂、碳酸氢钾、硫酸钠、硫酸钾、硫酸锂、硫酸氢钠、硫酸氢钾、磷酸钠、磷酸氢二钠和磷酸二氢钠中的一种、两种或者两种以上任意比例的混合物。

5.根据权利要求2所述3-S-四羟基-β-D-葡萄糖苷-1,2,4-三唑类化合物的制备方法，其特征在于：所述步骤2)中溶剂C为甲醇、乙醇、正丙醇、异丙醇、正丁醇、异丁醇、叔丁醇、仲丁醇、丁二醇、正戊醇、异戊醇、正己醇、环己醇、正庚醇、正辛醇、异辛醇、仲辛醇、乙腈、二氯甲烷、氯仿、丙酮和乙醚中的一种、两种或者两种以上任意比例的混合物；溶剂D为甲醇、乙醇、正丙醇、异丙醇、正丁醇、异丁醇、叔丁醇、仲丁醇、丁二醇、正戊醇、异戊醇、正己醇、环己醇、正庚醇、正辛醇、异辛醇、仲辛醇、乙腈、二氯甲烷、氯仿、丙酮和乙醚中的一种或两种以上任意比例的混合物。

6.根据权利要求2所述3-S-四羟基-β-D-葡萄糖苷-1,2,4-三唑类化合物的制备方法，其特征在于：所述步骤3)中所用的碱为氢化钠、甲醇钠、乙醇钠、叔丁醇钠、二乙胺、三乙胺、乙二胺、甲胺、乙胺、三乙醇胺、苯胺、吡啶和4-二甲氨基吡啶中的一种或两种以上任意比例的混合物。

7.根据权利要求2所述3-S-四羟基-β-D-葡萄糖苷-1,2,4-三唑类化合物的制备方法，其特征在于：所述步骤3)溶剂E为甲醇、乙醇、正丙醇、异丙醇、正丁醇、异丁醇、叔丁醇、仲丁醇、丁二醇、正戊醇、异戊醇、正己醇、环己醇、正庚醇、正辛醇、异辛醇、仲辛醇、乙腈、二氯甲烷、氯仿、丙酮和乙醚中的一种或两种以上任意比例的混合物。

8.一种如权利要求1所述3-S-四羟基-β-D-葡萄糖苷-1,2,4-三唑类化合物的应用，其特征在于：用于抗革兰氏阴性菌、阳性菌和抗真菌药物的制备。