CN104341401B

CN104341401B - C型肝炎病毒复制的新型抑制剂

Info

Publication number: CN104341401B
Application number: CN201410513720.8A
Authority: CN
Inventors: 布莱德·巴克曼; 约翰·B·尼古拉斯; 斯科特·D·塞沃特; 弗拉迪米尔·塞勒布莱恩尼
Original assignee: BEIJING KAWIN TECHNOLOGY Co Ltd
Current assignee: BEIJING KAWIN TECHNOLOGY Co Ltd
Priority date: 2009-12-18
Filing date: 2010-12-16
Publication date: 2017-02-15
Anticipated expiration: 2030-12-16
Also published as: HK1178165A1; CN102791687A; TW201130817A; US20110152246A1; CN104530079B; WO2011075607A1; CN104530079A; TWI543976B; AR079648A1; CN104341401A; CN102791687B

Abstract

实施方案提供了通式I的化合物以及包括包含题述化合物的药物组合物在内的组合物。实施方案还提供了治疗方法，其包括治疗C型肝炎病毒感染的方法和治疗肝纤维化的方法，所述方法通常包括给予有需要的个体有效量的题述化合物或组合物。

Description

C型肝炎病毒复制的新型抑制剂

相关领域描述

C型肝炎病毒(HCV)感染是美国最常见的慢性血源性感染。尽管新的感染数量已经下降，但是慢性感染的负担仍然是大量的，据疾病控制中心估计，美国存在三百九十万感染者(1.8％)。慢性肝病在美国成人死亡诱因中排第十位，并且每年引起约25,000人死亡，或为全部死亡的约1％。研究表明40％的慢性肝病与HCV有关，估计每年导致8,000-10,000人死亡。HCV-相关的末期肝病是成年人中最常见的肝移植指征。

在过去的十年内，慢性C型肝病的抗病毒治疗已经快速发展，从治疗效果中已看出有显著的改善。然而，即使使用聚乙二醇修饰的(pegylated)IFN-α加三唑核苷进行联合治疗，也有40％至50％的患者治疗失败，即，他们是无应答者或复发者。这些患者目前没有有效的治疗替换方案。特别地，在肝活组织检查上患有晚期纤维化或肝硬化的患者处于发展晚期肝病并发症的巨大危险中，以及处于肝细胞癌的显著增加的危险中，其中所述并发症包括腹水、黄疸、静脉曲张破裂出血、脑病变和渐进性肝衰竭。

慢性HCV感染的高度流行对美国慢性肝病的未来负担具有重要的公共健康影响。来自国家健康与营养调查(NHANES III)的数据表明，从20世纪60年代末期到20世纪80年代早期，新的HCV感染发生比率大幅增加，特别是在20至40岁的人群中。估计具有20年或更长的长期HCV感染的人数从1990到2015会增加四倍以上，即从750,000增加至超过3百万。感染30或40年的患者的比例增加量甚至将更大。由于HCV相关的慢性肝病的危险与感染持续时间相关，并且感染超过20年的患者的肝硬化危险逐渐增加，因此这将导致在1965-1985年感染的患者中，肝硬化相关的发病率和死亡率大幅度增加。

HCV是黄病毒科的被膜正链RNA病毒。认为单链HCV RNA基因组长度为约9500个核苷酸，并且具有单一开放阅读框(ORF)，所述单一开放阅读框编码具有约3000个氨基酸的单个大多聚蛋白。在感染的细胞中，认为细胞和病毒蛋白酶在多个位点裂解这种多聚蛋白以产生病毒的结构和非结构(NS)蛋白。对于HCV，认为两种病毒蛋白酶影响成熟非结构蛋白(NS2、NS3、NS4、NS4A、NS4B、NS5A和NS5B)的产生。认为第一病毒蛋白酶在多聚蛋白的NS2-NS3连接处裂解。认为第二病毒蛋白酶是包含在NS3的N-端区内的丝氨酸蛋白酶(本文称为“NS3 蛋白酶”)。认为NS3蛋白酶在相对于多聚蛋白的NS3位置下游的位点(即位于NS3的C-端与多聚蛋白的C-端之间的位点)处介导所有的后续裂解事件。NS3蛋白酶在NS3-NS4裂解位点表现出顺式活性，并且相反地，在余下的NS4A-NS4B、NS4B-NS5A和NS5A-NS5B位点表现出反式活性。NS4A蛋白被认为提供多种功能，充当NS3蛋白酶的辅因子，并且可能促进NS3和其他病毒复制酶成分的膜定位。显然地，NS3和NS4A之间的复合体形成可能是NS3-介导的加工事件所必须的，并且提高了在NS3识别的所有位点的蛋白水解效率。NS3蛋白酶也可能表现出核苷酸三磷酸酶和RNA解旋酶活性。认为NS5B是参与HCV RNA复制的RNA-依赖性RNA聚合酶。另外，在病毒复制中抑制NS5A作用的化合物可能对治疗HCV是有用的。

发明概述

某些实施方案包括具有通式I结构的化合物，或其药物可接受的盐：

其中：

每一R¹分别选自氢、R^1aS(O₂)–、R^1aC(＝O)–和R^1aC(＝S)–；

每一R^1a分别选自–C(R^2a)₂NR^3aR^3b、烷氧基烷基、C_1-6烷基OC(＝O)–、C_1-6烷基OC(＝O)C_1-6烷基、C_1-6烷基C(＝O)C_1-6烷基、芳基、芳基(CH₂)_n–、芳基(CH₂)_nO–、芳基(CH＝CH)_m–、芳基烷基O–、芳基烷基、芳基O烷基、环烷基、(环烷基)(CH＝CH)_m–、(环烷基)烷基、环烷基O烷基、杂环基、杂环基(CH＝CH)_m–、杂环基烷氧基、杂环基烷基、杂环基O烷基、羟基烷基、R^cR^dN–、R^cR^dN(CH₂)_n–、(R^cR^dN)(CH＝CH)_m–、(R^cR^dN)烷基、(R^cR^dN)C(＝O)–、被多至9个卤素任选取代的C_1-6烷氧基，以及被多至9个卤素任选取代的C_1-6烷基，所述芳基和杂芳基各自由：氰基、卤素、硝基、羟基、被多至9个卤素任选取代的C_1-6烷氧基和被多至9个卤素任选取代的C_1-6烷基任选取代；

分别选择每一R^cR^dN，其中R^c和R^d各自分别选自氢、烷氧基C(＝O)–、C_1-6烷基、C_1-6烷基C(＝O)–、C_1-6烷基磺酰基、芳基烷基OC(＝O)–、芳基烷基、芳基烷基C(＝O)–、芳基C(＝O)–、芳基磺酰基、杂环基烷基、杂环基烷基C(＝O)–、杂环基C(＝O)–、(R^eR^fN)烷基、(R^eR^fN)烷基C(＝O)–和(R^eR^fN)C(＝O)–，其中芳基烷基、芳基烷基C(＝O)–、杂环基烷基和杂环基烷基C(＝O)–的烷基部分各自被一个R^eR^fN–基团任选取代；并且其中芳基烷基、芳基烷基C(＝O)–、芳基C(＝O)–和芳基磺酰基的芳基部分，以及杂环基烷基、杂环基烷基C(＝O)–和杂环基C(＝O)–的杂环基部分各自被多至三个取代基任选取代，所述取代基各自独立地选自氰基、卤素、硝基、被多至9个卤素任选取代的C_1-6烷氧基和被多至9个卤素任选取代的C_1-6烷基；

分别选择每一R^eR^fN，其中R^e和R^f各自分别选自氢、C_1-6烷基、芳基、芳基烷基、环烷基、(环烷基)烷基、杂环基、杂环基烷基、(R^xR^yN)烷基和(R^xR^yN)C(＝O)-；

分别选择每一R^xR^yN，其中R^x和R^y各自分别选自氢、烷基OC(＝O)–、C_1-6烷基、C_1-6烷基C(＝O)–、芳基、芳基烷基、环烷基和杂环基；

分别选择每一C(R^2a)₂。其中每一R^2a分别选自氢、被多至9个卤素任选取代的C_1-6烷基，芳基(CH₂)_n–和杂芳基(CH₂)_n–，所述芳基和杂芳基各自被氰基、卤素、硝基、羟基、被多至9个卤素任选取代的C_1-6烷氧基和被多至9个卤素任选取代的C_1-6烷基任选取代，或者C(R^2a)₂为

每一R^3a分别选自氢和任选取代的C_1-6烷基；

每一R^3b分别选自任选取代的C_1-6烷基、杂芳基、-(CH₂)_nC(＝O)NR^4aR^4b、-(CH₂)_nC(＝O)OR^5a和-(CH₂)_nC(＝O)R^6a，所述杂芳基被氰基、卤素、硝基、羟基、被多至9个卤素任选取代的C_1-6烷氧基和被多至9个卤素任选取代的C_1-6烷基任选取代；

分别选择每一R^4aR^4bN，其中R^4a和R^4b各自分别选自氢、任选取代的C_1-6烷基和芳基(CH₂)_n–；

每一R^5a分别选自任选取代的C_1-6烷基和芳基(CH₂)_n–；

每一R^6a分别选自任选取代的C_1-6烷基和芳基(CH₂)_n–；

X¹为(C(R²)₂)_q、或者X¹不存在；

Y¹选自O(氧)、S(硫)、S(O)、SO₂、NR²和C(R²)₂，条件是当X¹不存在时，Y¹为C(R²)₂；

X²为(C(R²)₂)_q、或者X²不存在；

Y²选自O(氧)、S(硫)、S(O)、SO₂、NR²和C(R²)₂条件是当X²不存在时，Y²为C(R²)₂；

分别选择每一R²，其中R²选自氢、C_1-6烷氧基、C_1-6烷基、芳基、卤素、羟基、R^aR^bN–和被多至9个卤素任选取代的C_1-6烷基，或者任意两个邻近的R²和与它们连接的碳一起形成稠合的被多至两个C_1-6烷基任选取代的三元至六元碳环；

分别选择每一Z，其中Z选自O(氧)和CH₂，或者Z不存在；

每一A分别选自CR³和N(氮)；

每一R³分别选自氢、C_1-6烷氧基、C_1-6烷基OC_1-6烷基、C_1-6烷基OC(＝O)–、芳基烷基OC(＝O)–、–COOH、卤素、羟基、R^aR^bN–、(R^aR^bN)烷基、(R^aR^bN)C(＝O)–、被多至9个卤素和多至5个羟基任选取代的C_1-6烷基；

每一L₁分别选自：

–C(＝O)(CH₂)_mOC(＝O)–、–C(CF₃)₂NR^2c–、和

每一X³分别选自NH、NC_1-6烷基、O(氧)和S(硫)；

每一R⁷分别选自氢、C_1-6烷基OC(＝O)–、芳基烷基OC(＝O)–、–COOH、(R^aR^bN)C(＝O)–、三烷基甲硅烷基烷基O烷基和被多至9个卤素任选取代的C_1-6烷基；

分别选择每一R^aR^bN，其中R^a和R^b各自分别选自氢、C_2-6烯基和C_1-6烷基；

每一m分别为1或2；

每一n分别为0、1或2；

每一p分别为1、2、3或4；

每一q分别为1、2、3、4或5；

每一r分别为0、1、2、3或4；

B为稠合的任选取代的饱和或不饱和三元至七元碳环、稠合的任选取代的饱和或不饱和三元至七元杂环，或稠合的任选取代的五元或六元杂芳基环，每一B被一个或多个R⁴任选取代；以及

每一R⁴分别选自C_1-6烷氧基、C_1-6烷基OC_1-6烷基、C_1-6烷基OC(＝O)–、芳基烷基OC(＝O)–、–COOH、卤素、C_1-6卤代烷基、羟基、R^aR^bN–、(R^aR^bN)烷基、(R^aR^bN)C(＝O)–、被多至9个卤素和多至5个羟基任选取代的C_1-6烷基，或者任意两个偕R⁴一起为氧代。

在通式I的一些实施方案中，每一R¹分别选自氢和R^1aC(＝O)–以及R^1aC(＝S)–；

每一R^1a分别选自–C(R^2a)₂NR^3aR^3b、烷氧基烷基、C_1-6烷基OC(＝O)–、C_1-6烷基OC(＝O)C_1-6烷基、C_1-6烷基C(＝O)C_1-6烷基、芳基、芳基(CH＝CH)_m–、芳基烷基O–、芳基烷基、芳基O烷基、环烷基、(环烷基)(CH＝CH)_m–、(环烷基)烷基、环烷基O烷基、杂环基、杂环基(CH＝CH)_m–、杂环基烷氧基、杂环基烷基、杂环基O烷基、羟基烷基、R^cR^dN–、(R^cR^dN)(CH＝CH)_m–、(R^cR^dN)烷基、(R^cR^dN)C(＝O)–、被多至5个卤素任选取代的C_1-6烷氧基，以及被多至5个卤素任选取代的C_1-6烷基；

分别选择每一R^cR^dN，其中R^c和R^d各自分别选自氢、烷氧基C(＝O)–、C_1-6烷基、C_1-6烷基C(＝O)–、C_1-6烷基磺酰基、芳基烷基OC(＝O)–、芳基烷基、芳基烷基C(＝O)–、芳基C(＝O)–、芳基磺酰基、杂环基烷基、杂环基烷基C(＝O)–、杂环基C(＝O)–、(R^eR^fN)烷基、(R^eR^fN)烷基C(＝O)–和(R^eR^fN)C(＝O)–，其中芳基烷基、芳基烷基C(＝O)–、杂环基烷基和杂环基烷基C(＝O)–的烷基部分各自被一个R^eR^fN–基团任选取代；并且其中芳基烷基、芳基烷基C(＝O)–、芳基C(＝O)–和芳基磺酰基的芳基部分，以及杂环基烷基、杂环基烷基C(＝O)–和杂环基C(＝O)–的杂环基部分各自被多至三个取代基任选取代，所述取代基各自独立地选自氰基、卤素、硝基、被多至5个卤素任选取代的C_1-6烷氧基和被多至5个卤素任选取代的C_1-6烷基；

每一R^2a分别选自氢、C_1-6烷基、芳基(CH₂)_n–和杂芳基(CH₂)_n–；

每一R^3a分别选自氢和C_1-6烷基；

每一R^3b分别选自C_1-6烷基、-(CH₂)_nC(＝O)NR^4aR^4b、-(CH₂)_nC(＝O)OR^5a和-(CH₂)_nC(＝O)R^6a；

分别选择每一R^4aR^4bN，其中R^4a和R^4b各自分别选自氢、C_1-6烷基和芳基(CH₂)_n–；

每一R^5a分别选自C_1-6烷基和芳基(CH₂)_n-；

每一R^6a分别选自C_1-6烷基和芳基(CH₂)_n-；

X¹为C(R²)₂，或者X¹不存在；

Y¹选自O(氧)、S(硫)、S(O)、SO₂和C(R²)₂，条件是当X¹不存在时，Y¹为C(R²)₂；

X²为C(R²)₂，或者X²不存在；

Y²选自O(氧)、S(硫)、S(O)、SO₂和C(R²)₂，条件是当X²不存在时，Y²为C(R²)₂；

每一X³分别选自NH、O(氧)和S(硫)；

分别选择每一R²，其中R²选自氢、C_1-6烷氧基、C_1-6烷基、芳基、卤素、羟基、R^aR^bN–和被多至5个卤素任选取代的C_1-6烷基，或者任意两个邻近的R²和与它们连接的碳一起形成稠合的被多至两个C_1-6烷基任选取代的三元至六元碳环；

每一L₁分别选自

每一R³分别选自氢、C_1-6烷氧基、C_1-6烷基OC_1-6烷基、C_1-6烷基OC(＝O)–、芳基烷基OC(＝O)–、–COOH、卤素、羟基、R^aR^bN–、(R^aR^bN)烷基、(R^aR^bN)C(＝O)–、被多至5个卤素和多至5个羟基任选取代的C_1-6烷基；

每一R⁷分别选自氢、C_1-6烷基OC(＝O)–、芳基烷基OC(＝O)–、–COOH、(R^aR^bN)C(＝O)–、三烷基甲硅烷基烷基O烷基和被多至5个卤素任选取代的C_1-6烷基；以及

每一R⁴分别选自C_1-6烷氧基、C_1-6烷基OC_1-6烷基、C_1-6烷基OC(＝O)–、芳基烷基OC(＝O)–、–COOH、卤素、C_1-6卤代烷基、羟基、R^aR^bN–、(R^aR^bN)烷基、(R^aR^bN)C(＝O)–、被多至5个卤素和多至5个羟基任选取代的C_1-6烷基，或者任意两个偕R⁴一起为氧代。

在通式I的一些实施方案中，选自：

其中，

每一X₄分别选自CH、CR⁴和N(氮)；以及

每一Y₄分别选自C(R⁴)₂、NR⁴、O(氧)和S(硫)。

在通式I的一些实施方案中，每一Z均不存在。

在一些实施方案中，通式I化合物或其药物可接受的盐具有通式Ia的结构：

在一些实施方案中，通式I化合物或其药物可接受的盐具有通式Ib的结构：

在一些实施方案中，通式I化合物或其药物可接受的盐具有通式Ie的结构：

其中：

R⁶为被多至9个卤素任选取代的C_1-6烷基。

在一些实施方案中，通式I化合物或其药物可接受的盐具有通式If的结构：

其中：

R⁶为被多至9个卤素任选取代的C_1-6烷基。

在通式I、通式Ia、通式Ib、通式Ic或通式Id的一些实施方案中，每一R¹为R^1aC(＝O)–。

在通式I、通式Ia、通式Ib、通式Ic或通式Id的一些实施方案中，每一R^1a为-CHR^2aNHR^3b。

在通式I、通式Ia、通式Ib、通式Ic或通式Id的一些实施方案中，每一R^2a为C_1-6烷基；每一R^3b为-C(＝O)OR⁵；以及每一R⁵为C_1-6烷基。

在一些实施方案中，通式I化合物或其药物可接受的盐具有下列结构：

在通式I的一些实施方案中，化合物不具有下列结构：

一些实施方案提供了药物组合物，其包含药物可接受的赋形剂和通式I的化合物。

一些实施方案提供了治疗个体HCV感染的方法，所述方法包括向个体给予有效量的通式I的化合物或包含药物可接受的赋形剂和通式I的化合物的药物组合物。

一些实施方案提供了治疗个体HCV感染的方法，所述方法包括对个体给予有效量的通式I的化合物或包含药物可接受的赋形剂和通式I的化合物的药物组合物。在一些实施方案中，所述方法还包括鉴别患有C型肝炎感染的个体。

一些实施方案提供了治疗个体肝纤维化的方法，所述方法包括对个体给予有效量的通式I的化合物或包含药物可接受的赋形剂和通式I的化合物的药物组合物。在一些实施方案中，所述方法还包括鉴别患有C型肝炎感染的个体。

一些实施方案提供了增加患有C型肝炎病毒感染的个体的肝功能的方法，所述方法包括对个体给予有效量的通式I的化合物或包含药物可接受的赋形剂和通式I的化合物的药物组合物。在一些实施方案中，所述方法还包括鉴别患有C型肝炎感染的个体。

优选实施方案详述

定义

如本文所用，常见有机缩写的定义如下：

Ac 乙酰基

Ac₂O 乙酸酐

aq. 含水的

Bn 苄基

Bz 苯甲酰基

BOC或Boc 叔丁氧羰基

Bu 正丁基

cat. 催化的

Cbz 苄氧羰基

CDI 1,1’-羰基二咪唑

Cy (c-C₆H₁₁) 环己基

℃ 以摄氏度为单位的温度

DBU 1,8-二氮杂双环[5.4.0]十一碳-7-烯

DCE 1,2-二氯乙烷

DCM 二氯甲烷

DIEA 二异丙基乙胺

DMA 二甲基乙酰胺

DME 乙二醇二甲醚

DMF N,N'-二甲基甲酰胺

DMSO 二甲基亚砜

Et 乙基

EtOAc 乙酸乙酯

g 克

h 小时

HATU 2-(1H-7-氮杂苯并三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基脲六

氟磷酸酯

HOBT N-羟基苯并三唑

iPr 异丙基

LCMS 液相色谱-质谱

LDA 二异丙基氨基锂

mCPBA 间氯过氧化苯甲酸

MeOH 甲醇

MeCN 乙腈

mL 毫升

MTBE 甲基叔丁基醚

NH₄OAc 醋酸铵

PG 保护基团

Pd/C 活性碳钯

Ph 苯基

ppt 沉淀

RCM 闭环置换

rt 室温

sBuLi 仲丁基锂

TEA 三乙胺

TCDI 1,1'-硫代羰基二咪唑

Tert, t 叔

TFA 三氟乙酸

THF 四氢呋喃

TLC 薄层色谱

TMEDA 四甲基乙二胺

μL 微升

术语“个人”、“宿主”、“个体”和“患者”可在本文中交换使用，并且是指哺乳动物，其包括但不限于包括猴和人在内的灵长类动物。

如本文所用的术语“肝功能”是指肝的正常功能，其包括但不限于：合成功能，所述合成功能包括但不限于蛋白质的合成、胆红素的合成、胆固醇的合成和胆酸的合成，所述蛋白质例如血清蛋白(例如，白蛋白、凝血因子、碱性磷酸酶、氨基转移酶(例如，丙氨酸转氨酶、天冬氨酸转氨酶)、5’-核苷酶、γ-谷氨酰转肽酶等)；肝代谢功能，其包括但不限于碳水化合物代谢、氨基酸和氨代谢、激素代谢和脂质代谢；外来药物的解毒；血液动力学功能，其包括内脏和门静脉血液动力学；等。

如本文所用的术语“持续病毒反应”(SVR；也称为“持续反应”或“持久反应”)是指对于血清HCV滴定量，个体对HCV感染所用的治疗方案的反应。通常，“持续病毒反应”是指在治疗中断后至少约一个月、至少约两个月、至少约三个月、至少约四个月、至少约五个月或至少约六个月的时间内，在患者血清中没有发现可检测的HCV RNA(例如，每毫升血清小于约500，小于约200，或小于约100个基因组拷贝)。

如本文所用的“治疗失败患者”通常是指没有对先前的HCV治疗产生应答的HCV感染患者(称为“无应答者”)或者开始对先前的治疗应答，但是没有维持治疗应答的HCV感染患者(称为“复发者”)。先前的治疗通常能够包括用IFN-α单一治疗或IFN-α联合治疗进行的治疗，其中联合治疗可以包括给予IFN-α和诸如三唑核苷的抗病毒剂。

如本文所用的术语“治疗(treatment)”、“治疗(treating)”等是指获得期望的药理和/或生理效果。所述效果可以对完全或部分预防疾病或其病症为预防性的，和/或可以对部分或完全治愈疾病和/或疾病引起的负面影响为治疗性的。如本文所用的“治疗”包含对哺乳动物特别是人的疾病的任何治疗，并且包括：(a)预防疾病发生在可易于患有疾病但还未被诊断为患有该疾病的个体中；(b)抑制疾病，即阻止其发展；以及(c)缓解疾病，即导致疾病衰退。

如本文所用的术语“烷基”是指支链或非支链的完全饱和的无环脂肪族烃基(即，由不含双键或三键的碳和氢组成)。在一些实施方案中，烷基可以为取代的或未取代的。烷基包括但不限于甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、叔丁基、戊基、己基等，在一些实施方案中，它们中的每一个均可以为任选取代的。

如本文所用的术语“杂烷基”是指在碳骨架中包含一个或多个杂原子的支链或非支链的完全饱和的无环脂肪族烃基(即，其中用杂原子取代一个或多个碳原子的烷基)。在一些实施方案中，杂烷基可以为取代的或未取代的。杂烷基包括但不限于醚、硫醚以及烷基-氨基-烷基。

如本文所用的术语“卤素”是指氟、氯、溴或碘。

本文所用的术语“烷氧基”是指通过--O--键与母体分子共价连接的直链或支链烷基。在一些实施方案中，烷氧基可以为取代的或未取代的。烷氧基的实例包括但不限于甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、丁氧基、正丁氧基、仲丁氧基、叔丁氧基等。

本文所用的术语“烯基”是指包含至少一个碳-碳双键的二至二十个碳原子的单价直链或支链基团，其包括但不限于1-丙烯基、2-丙烯基、2-甲基-1-丙烯基、1-丁烯基、2-丁烯基等。在一些实施方案中，烯基可以为取代的或未取代的。

本文所用的术语“炔基”是指包含至少一个碳-碳叁键的二至二十个碳原子的单价直链或支链基团，其包括但不限于1-丙炔基、1-丁炔基、2-丁炔基等。在一些实施方案中，炔基可以为取代的或未取代的。

本文所用的术语“芳基”是指具有单环或多个稠合环的同素环芳香族基团。芳基的实例包括但不限于苯基、萘基、联苯基、菲基、并四苯基等。在一些实施方案中，芳基可以为取代的或未取代的。

本文所用的术语“环烷基”是指具有三至二十个碳原子的饱和脂肪族环体系基团，其包括但不限于环丙基、环戊基、环己基、环庚基等。在一些实施方案中，环烷基可以为取代的或未取代的。

本文所用的术语“环烯基”是指具有三至二十个碳原子的脂肪族环体系基团，其在环中具有至少一个碳-碳双键。环烯基的实例包括但不限于环丙烯基、环戊烯基、环己烯基、环庚烯基等。在一些实施方案中，环烯基可以为取代的或未取代的。

本文所用的术语“杂环”或“杂环基”或“杂环烷基”是指具有至少一个非芳香族环的环状环体系基团，其中一个或多个环原子不是碳，即杂原子。单环的“杂环”或“杂环基”部分是非芳香族的。双环的“杂环”或“杂环基”部分包括一个非芳香族环，其中至少一个杂原子存在于非芳香族环中。杂环基团的实例包括但不限于吗啉基、四氢呋喃基、二氧戊环基、吡咯烷基、噁唑基、吡喃基、吡咯基、异吲哚等。

本文所用的术语“杂芳基”是指具有单环或多个稠合环的芳香族环体系基团，其中一个或多个环原子不是碳，即杂原子。在稠合环体系中，一个或多个杂原子可以仅存在于一个环中。杂芳基的实例包括但不限于苯并噻唑基、苯并噁唑基、喹唑啉基、喹啉基、异喹啉基、喹喔啉基、吡啶基、吡咯基、噁唑基、吲哚基等。

本文所用的术语“杂原子”是指例如，氧、硫和氮。

本文所用的术语“芳基烷基”是指与烷基连接的一个或多个芳基。芳基烷基的实例包括但不限于苄基、苯乙基、苯丙基、苯丁基等。

本文所用的术语“环烷基烷基”是指与烷基连接的一个或多个环烷基。环烷基烷基的实例包括但不限于环己基甲基、环己基乙基、环戊基甲基、环戊基乙基等。在一些实施方案中，环烷基烷基可以为取代的或未取代的。

本文所用的术语“杂芳基烷基”是指与烷基连接的一个或多个杂芳基。杂芳基烷基的实例包括但不限于吡啶基甲基、呋喃基甲基、噻吩基乙基等。在一些实施方案中，杂芳基烷基可以为取代的或未取代的，并且能够在杂芳基或烷基部分上取代或在两部分上均取代。

本文所用的术语“杂环基烷基”是指与烷基连接的一个或多个杂环基。杂环基烷基的实例包括但不限于吗啉基甲基、吗啉基乙基、吗啉基丙基、四氢呋喃基甲基、吡咯烷基丙基等。在一些实施方案中，杂环基烷基可以为取代的或未取代的，并且能够在杂环基或烷基部分上取代或在两部分上均取代。

本文所用的术语“芳氧基”是指通过--O--键与母体分子共价连接的芳基。

本文所用的术语“烷硫基”是指通过--S--键与母体分子共价连接的直链或支链烷基。烷硫基的实例包括但不限于硫化甲烷(methanesulfide)、硫化乙烷、硫化丙烷、硫化异丙烷、硫化丁烷、硫化正丁烷、硫化仲丁烷、硫化叔丁烷等。

本文所用的术语“芳硫基”是指通过--S--键与母体分子共价连接的芳基。

本文所用的术语“烷基氨基”是指具有与其连接的一个或多个烷基的氮基团。因此，单烷基氨基是指具有与其连接的一个烷基的氮基团，并且二烷基氨基是指具有与其连接的两个烷基的氮基团。

本文所用的术语“氰基氨基”是指具有与其连接的腈基的氮基团。

本文所用的术语“氨基甲酰基”是指RNHC(O)O--。

本文所用的术语“酮基”和“羰基”是指C＝O。

本文所用的术语“羧基”是指-COOH。

本文所用的术语“氨磺酰基”是指-SO₂NH₂。

本文所用的术语“磺酰基”是指-SO₂-。

本文所用的术语“亚磺酰基”是指-SO-。

本文所用的术语“硫代羰基”是指C＝S。

本文所用的术语“硫代羧基”是指CSOH。

本文所用的术语“磺胺”是指–SO₂NR’₂，其中每一R’独立地选自(氢)、C₁-C₆烷基、C₃-C₇环烷基、芳基烷基和被C₁-C₆烷基任选取代的芳基。

本文所用的术语“酯”是指–COOR’，其中R’选自C₁-C₆烷基、C₃-C₇环烷基、芳基烷基和被C₁-C₆烷基任选取代的芳基。

本文所用的术语“C-酰胺”是指–C(＝O)NR’₂，其中每一R’独立地选自H(氢)、C₁-C₆烷基、C₃-C₇环烷基、芳基烷基和被C₁-C₆烷基任选取代的芳基。

本文所用的术语“N-酰胺”是指–NR’C(＝O)R’，其中每一R’独立地选自H(氢)、C₁-C₆烷基、C₃-C₇环烷基、芳基烷基和被C₁-C₆烷基任选取代的芳基。

本文所用的术语“N-氨基甲酸酯”是指–NR’C(＝O)OR’，其中每一R’独立地选自H(氢)、C₁-C₆烷基、C₃-C₇环烷基、芳基烷基和被C₁-C₆烷基任选取代的芳基。

本文所用的术语“O-氨基甲酸酯”是指–OC(＝O)NR’₂，其中每一R’独立地选自H(氢)、C₁-C₆烷基、C₃-C₇环烷基、芳基烷基和被C₁-C₆烷基任选取代的芳基。

本文所用的术语“脲”是指–NR’C(＝O)NR’₂，其中每一R’独立地选自H(氢)、C₁-C₆烷基、C₃-C₇环烷基、芳基烷基和被C₁-C₆烷基任选取代的芳基。

如本文所用，基团是指具有一个或多个未配对电子的物质，以使得含该基团的物质能与一种或多种其他物质共价连接。因此，在这种情况下，基团不一定是自由基。另外，基团表示较大分子的具体部分。术语“基团(radical)”能够与术语“部分”或“基团(group)”交换使用。

如本文所用，取代基来自未取代的母体结构，其中一个或多个氢原子已经与另一原子或基团发生交换。当被取代时，一个或多个取代基为各自独立地选自下列基团的一个或多个基团：C₁-C₆烷基、C₁-C₆烯基、C₁-C₆炔基、C₃-C₇环烷基(被卤素、烷基、烷氧基、羧基、卤代烷基、CN、-SO₂-烷基、-CF₃和-OCF₃任选取代)、偕连接的环烷基、C₁-C₆杂烷基、C₃-C₁₀杂环烷基(例如四氢呋喃基)(被卤素、烷基、烷氧基、羧基、CN、-SO₂-烷基、-CF₃和-OCF₃任选取代)、芳基(被卤素、烷基、被C₁-C₆烷基任选取代的芳基、芳基烷基、烷氧基、羧基、 CN、-SO₂-烷基、-CF₃和-OCF₃任选取代)、芳基烷基(被卤素、烷基、烷氧基、芳基、羧基、CN、–SO₂-烷基、–CF₃以及–OCF₃任选取代)、杂芳基(被卤素、烷基、烷氧基、芳基、芳烷基、羧基、CN、-SO₂-烷基、-CF₃和-OCF₃任选取代)、卤素(例如氯、溴、碘和氟)、氰基、羟基、–CF₃、C₁-C₆烷氧基、芳氧基、巯基(sulfhydryl)(巯基(mercapto))、卤代(C₁-C₆)烷基、C₁-C₆烷硫基、芳硫基、单-和二-(C₁-C₆)烷基氨基、季铵盐、氨基(C₁-C₆)烷氧基、羟基(C₁-C₆)烷基氨基、氨基(C₁-C₆)烷硫基、氰基氨基、硝基、氨基甲酰基、酮基(氧基)、羰基、羧基、羟乙酰基、甘氨酰基、肼基、脒基、氨磺酰基、磺酰基、亚磺酰基、硫代羰基、硫代羧基、磺胺、酯、C-酰胺、N-酰胺、N-氨基甲酸酯、O-氨基甲酸酯、脲、及其组合。能形成上述取代基的保护性衍生物的保护基团是本领域技术人员已知的，并且能够在参考文献中找到，例如Greene和Wuts Protective Groups inOrganic Synthesis(有机合成中的保护基团)；John Wiley and Sons：New York,1999。无论在何处将取代基描述为“任选取代的”，该取代基能够被上述取代基取代。

不对称碳原子可以存在于所述化合物中。意图将所有这样的异构体，包括非对映异构体和对映异构体及其混合物，包括在所描述的化合物的范围内。在某些情况下，化合物能够以互变异构体的形式存在。意图将所有的互变异构体都包括在该范围内。同样地，当化合物包含烯基或亚烯基时，存在该化合物的顺式-和反式-异构体形式的可能性。考虑顺式和反式异构体二者以及顺式和反式异构体混合物。因此，除非本文另外明确指出，本文提及化合物时包括所有上述异构体形式。

在实施方案中包括多种形式，其包括多晶型物、溶剂化物、水合物、构象异构体、盐和前药衍生物。多晶型物是具有相同化学式但结构不同的组合物。溶剂化物为由溶剂化形成的组合物(溶剂分子与溶质的分子或离子的组合)。水合物为由加入水而形成的化合物。构象异构体是构象的异构体的结构。构象异构现象是具有相同结构式但围绕旋转键具有不同原子构象(构象异构体)的分子的现象。能够通过本领域技术人员已知的方法制备化合物的盐。例如，能够通过使适当的碱或酸与化学计算当量的化合物反应来制备化合物的盐。前药为在表现其药理学作用前经过生物转变(化学转化)的化合物。例如，前药能够由此被视为包含以暂态方式使用的特定保护基团以改变或消除母体分子中的不期望性质的药物。因此，除非本文另外明确指出，提及化合物时包括所有上述形式。

如本文所用的术语“药物可接受的盐”，并且特别是涉及由本文公开的方法制备和合成的包括通式I、II、III、IV或V化合物在内的化合物的药物可接受的盐时，是指化合物的任意药物可接受的盐，并且优选是指化合物的酸加成盐。对于包含碱性氮的通过本实施方案的方法而合成的化合物，药物可接受的盐的优选实例是药物可接受的无机或有机酸的酸加成盐，所述酸包括但不限于氢卤酸、硫酸、磷酸、脂肪族或芳香族羧酸或磺酸。作为酸加成盐的组分，药物可接受的无机或有机酸的实例包括但不限于氢氯酸、氢溴酸、磷酸、硫酸、乙酸、琥珀酸、乳酸、苹果酸、酒石酸、柠檬酸、抗坏血酸、烟酸、甲磺酸、对甲苯磺酸或萘磺酸。对于包含酸性官能团的通过本实施方案的方法而合成的化合物，药物可接受的盐的优选实例包括但不限于碱金属盐(钠或钾)、碱土金属盐(钙或镁)、或源自氨或药物可接受的有机胺的铵盐，例如C₁-C₇烷基胺、环己基胺、三乙醇胺、乙二胺或三-(羟基甲基)-氨基甲烷。

同位素可以存在于所述化合物中。化合物结构中表示的每一化学元素可以包括所述元素的任何同位素。例如，在化合物结构中，氢原子可以明确公开在化合物中或被理解为存在于化合物中。在氢原子可以存在的化合物的任何位置处，氢原子能够为氢的任意同位素，其包括但不限于氢-1(氕)和氢-2(氘)。因此，除非本文另外明确指出，提及化合物时包括所有潜在的同位素形式。

无论在何处将取代基描述为双自由基(即具有两个与分子剩余部分连接的点)，除非另外声明，应当理解为能够以任何方向构型连接该取代基。因此，例如，描述为-AE-或的取代基包括被定向的取代基，以使在分子最左面的连接点处连接A，以及在分子最右面的连接点处连接A。

应当理解，根据上下文，某些基团命名惯例能够包括单自由基或双自由基。例如，如果取代基需要与分子剩余部分的两个连接点，则应当理解该取代基为双自由基。确认为需要两个连接点的烷基的取代基包括双自由基，例如-CH₂-、-CH₂CH₂-、-CH₂CH(CH₃)CH₂-等；描述为需要两个连接点的烷氧基的取代基包括双自由基，例如-OCH₂-、-OCH₂CH₂-、-OCH₂CH(CH₃)CH₂-等；并且描述为需要两个连接点的芳基C(＝O)-的取代基包括双自由基，例如等。

如果提供了值的范围，应当理解上限和下限以及该范围的上限和下限之间的每个中间值都包括在实施方案内。

除非另外定义，本文所用的所有技术和科学术语的含义与实施方案所属领域的技术人员通常理解的含义相同。虽然与本文描述的那些相似或相当的任意方法和材料也能够在实施方案的实践或试验中使用，但现在描述优选方法和材料。以引用的方式将本文提到的所有出版物并入本文以公开和描述与引用出版物相关的方法和/或材料。

必须注意除非本文另外明确指出，如本文和所附权利要求所用的单数形式“a(一个)”、“and(和)”和“the(一个)”包括复数指代物。因此，例如，提及“一个方法”时包括多个这样的方法，并且提及“一个剂量”时包括本领域技术人员已知的一个或多个剂量及其等价物等。

化合物

本实施方案提供了上述通式I的化合物，以及包含任意通式I化合物的药物组合物和制剂。如下文所讨论的，题述化合物对治疗HCV感染和其他病症是有用的。

在许多实施方案中，题述化合物抑制HCV病毒复制。例如，与没有该化合物情况下的HCV病毒复制相比，题述化合物以至少约10％、至少约15％、至少约20％、至少约25％、至少约30％、至少约40％、至少约50％、至少约60％、至少约70％、至少约80％或至少约90％或更多的比来抑制HCV病毒复制。使用包括体外病毒复制检验在内的本领域已知的方法能够确定题述化合物是否抑制HCV病毒复制。

组合物

本发明还提供了组合物，其包括药物组合物，所述药物组合物包含通式I化合物。

题述药物组合物包含：题述化合物；和药物可接受的赋形剂。各种药物可接受的赋形剂是本领域已知的并且不需要在本文中详细讨论。药物可接受的赋形剂已经详细记载于大量出版物中，其包括例如，A.Gennaro(2000)“Remington：The Science and Practiceof Pharmacy(雷氏：药物科学与实践)”第20版,Lippincott,Williams,&Wilkins；Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems(药物剂型和药物递送系统)(1999)H.C.Ansel等人编辑,第7版,Lippincott,Williams,&Wilkins；以及Handbook ofPharmaceutical Excipients(药物赋形剂手册)(2000)A.H.Kibbe等人编辑,第3版Amer.Pharmaceutical Assoc。

药物可接受的赋形剂，例如介质、佐剂、载体或稀释剂是本领域已知的。此外，药物可接受的助剂物质，例如pH调节剂和缓冲剂、张力调整剂、稳定剂、润湿剂等是本领域已知的。

在一些实施方案中，在含水缓冲剂中配制本文所述的化合物。适当的含水缓冲剂包括但不限于浓度在约5mM至约100mM间变化的醋酸盐、琥珀酸盐、柠檬酸盐和磷酸盐缓冲剂。在一些实施方案中，含水缓冲剂包括提供等渗溶液的试剂。这样的试剂包括但不限于氯化钠；以及糖，例如甘露醇、右旋糖、蔗糖等。在一些实施方案中，含水缓冲剂还包括非离子型表面活性剂，例如聚山梨醇酯20或80。任选地，制剂可以还包括防腐剂。适当的防腐剂包括但不限于苄醇、苯酚、氯丁醇、杀藻胺等。在许多情况下，在约4℃下储存制剂。也可以将制剂冻干，在这种情况下，它们通常包括冷冻保护剂，例如蔗糖、海藻糖、乳糖、麦芽糖、甘露醇等。能够在延长的时间内，甚至在环境温度下储存冻干的制剂。

因此，能够以多种方式实现药剂的给予，包括口服、口腔、直肠、肠胃外、腹膜内、皮内、皮下、肌内、经皮、气管内等给药。在一些实施方案中，通过团注，例如皮下团注、肌内团注等给药。

能够口服、肠胃外或通过植入的储库给予实施方案的药物组合物。口服给药或通过注射给药是优选的。

使用标准方法和装置实现实施方案的药物组合物的皮下给药，所述装置例如针和注射器、皮下注射口递送系统等。参见例如，第3,547,119、4,755,173、4,531,937、4,311,137和6,017,328号美国专利。用于通过所述口向患者给予实施方案的药物组合物的皮下注射口和装置的组合在本文中称为“皮下注射口递送系统”。在许多实施方案中，通过用针和注射器进行大剂量递送(bolus delivery)来实现皮下给药。

在药物剂型中，可以其药物可接受的盐的形式给予本文所述化合物，或者也可以单独使用它们或以与其他药物活性化合物适当结合以及组合的方式使用它们。下列方法和赋形剂仅是示例性的而绝非限制性的。

对于口服制剂，可以单独使用本文所述化合物，或以与适当的添加剂的组合形式来制备片剂、粉末剂、颗粒剂或胶囊剂，从而使用本文所述化合物，例如与常规添加剂组合，例如乳糖、甘露醇、玉米淀粉或马铃薯淀粉；与粘合剂组合，例如结晶纤维素、纤维素衍生物、阿拉伯树胶、玉米淀粉或明胶；与崩解剂组合，例如玉米淀粉、马铃薯淀粉或羧甲基纤维素钠；与润滑剂组合，例如滑石或硬脂酸镁；并且如果期望，与稀释剂、缓冲剂、润湿剂、防腐剂和增味剂组合。

能够通过将本文所述化合物溶解、悬浮或乳化在水性或非水性溶剂中，从而将本文所述化合物配制成用于注射的制剂，所述非水性溶剂例如植物油或其他类似油、合成脂肪酸甘油酯、高级脂肪酸的酯或丙二醇；并且如果期望，与常规添加剂一起配制，例如增溶剂、等张剂、悬浮剂、乳化剂、稳定剂和防腐剂。

此外，能够通过与多种基体混合将本文所述的化合物制成栓剂，所述基体例如乳化基体或水溶性基体。能够通过栓剂直肠给予实施方案的化合物。栓剂能够包括介质，例如可可油、碳蜡(carbowax)和聚乙二醇，其在体温下熔化，而在室温下固化。

可以提供用于口服或直肠给药的单位剂型，例如糖浆剂、酏剂和悬浮剂，其中每一剂量单位，例如一茶匙、一汤匙、片剂或栓剂包含预定量的含一种或多种本文所述化合物的组合物。类似地，注射或静脉内给药的单位剂型可以包括组合物中的本文所述化合物，其形式为无菌水、生理盐水或其他药物可接受的载体的溶液。

如本文所用的术语“单位剂型”是指适于作为人和动物个体的单位剂量的物理离散单位，每一单位包含预定量的实施方案的化合物，其量为足以与药物可接受的稀释剂、载体或介质结合产生期望效果的计算量。实施方案的新的单位剂型的说明依赖于所用的具体化合物和要实现的效果以及与宿主中每一化合物相关的药效学。

药物可接受的赋形剂，例如介质、佐剂、载体或稀释剂是本领域已知的。此外，药物可接受的辅助物质，例如pH调节剂和缓冲剂、张力调整剂、稳定剂、润湿剂等是本领域已知的。

治疗肝炎病毒感染

本文所述的方法和组合物通常可用于治疗HCV感染。

优选的实施方案提供了治疗个体的C型肝炎病毒感染的方法，所述方法包括给予个体有效量的包含题述化合物的组合物。

优选的实施方案提供了治疗个体的肝纤维化的方法，所述方法包括给予个体有效量的包含题述化合物的组合物。

优选的实施方案提供了增加患有C型肝炎病毒感染的个体的肝功能的方法，所述方法包括给予个体有效量的包含题述化合物的组合物。

能够通过病毒载量减少、血清转化时间减少(患者血清中不可检测到的病毒)、持续的病毒对治疗应答的速率增加、临床结果中发病率或死亡率降低，或疾病应答的其他指征来确定题述方法对治疗HCV感染是否有效。

通常，通式I、II、III、IV或V化合物以及任选的一种或多种另外的抗病毒剂的有效量是有效降低病毒载量或实现持续的病毒对治疗的应答的量。

能够通过检测病毒载量，或通过检测与HCV感染相关的参数来确定题述方法对治疗HCV感染是否有效，所述与HCV感染相关的参数包括，但不限于肝纤维化、血清转氨酶水平升高以及肝中坏死性炎症活性。下面详细讨论肝纤维化的指征。

在一些实施方案中，所述方法涉及给予任选与有效量的一种或多种其他抗病毒剂组合的有效量的通式I、II、III、IV或V化合物。在一些实施方案中，通式I、II、III、IV或V化合物和任选一种或多种另外的抗病毒剂的有效量是有效地将病毒滴定度降低至不可检测水平的量，例如降低至约1000至约5000、降低至约500至约1000，或降低至约100至约500基因组拷贝数/mL血清。在一些实施方案中，通式I、II、III、IV或V化合物和任选一种或多种另外的抗病毒剂的有效量是有效地将病毒载量降低至低于100基因组拷贝数/mL血清的量。

在一些实施方案中，通式I、II、III、IV或V化合物和任选一种或多种另外的抗病毒剂的有效量是在个体血清中有效地实现病毒滴定度的1.5-log、2-log、2.5-log、3-log、3.5-log、4-log、4.5-log或5-log降低的量。

在许多实施方案中，通式I、II、III、IV或V化合物和任选一种或多种另外的抗病毒剂的有效量是有效地实现持续病毒应答的量，例如在治疗中断后的至少约一个月、至少约两个月、至少约三个月、至少约四个月、至少约五个月或至少约六个月内，在患者血清中发现不可检测的或基本不可检测的HCV RNA(例如，小于约500、小于约400、小于约200，或小于约100基因组拷贝数每毫升血清)。

如上所述，能够通过检测诸如肝纤维化的与HCV感染相关的参数来确定题述方法对治疗HCV感染是否有效。下面详细讨论确定肝纤维化程度的方法。在一些实施方案中，肝纤维化的血清标记物水平标示肝纤维化程度。

作为一个非限制性实例，使用标准检验来测量血清丙氨酸转氨酶(ALT)水平。通常，小于约45个国际单位的ALT水平被认为是正常的。在一些实施方案中，通式I、II、III、IV或V化合物和任选一种或多种另外的抗病毒剂的有效量是有效地将ALT水平降低至小于约45IU/mL血清的量。

通式I、II、III、IV或V化合物和任选一种或多种另外的抗病毒剂的治疗有效量是与未治疗个体中标记物水平相比，或与安慰剂治疗个体相比，有效地将肝纤维化标记物的血清水平降低了至少约10％、至少约20％、至少约25％、至少约30％、至少约35％、至少约40％、至少约45％、至少约50％、至少约55％、至少约60％、至少约65％、至少约70％、至少约75％或至少约80％或更多的量。测量血清标记物的方法包括使用给定血清标记物的特异性抗体的基于免疫学的方法，例如，酶联免疫吸附测定(ELISA)、放射性免疫测定等。

在许多实施方案中，通式I、II、III、IV或V化合物和另外的抗病毒剂的有效量是协同量。如本文所用的通式I、II、III、IV或V化合物和另外的抗病毒剂的“协同组合”或“协同量”是指在HCV感染的治疗或预防性治疗中，与能够从仅为(i)当以与单一治疗相同的剂量给予时，通式I、II、III、IV或V化合物的治疗或预防益处和(ii)当以与单一治疗相同的剂量给予时，另外的抗病毒剂的治疗或预防益处的相加性组合中预测或期望的治疗结果的增加改进相比更有效的组合剂量。

在一些实施方案中，当在疾病的联合治疗中使用时，选定量的通式I、II、III、IV或V化合物和选定量的另外的抗病毒剂是有效的，但是当在疾病的单一治疗中使用时该选定量的通式I、II、III、IV或V化合物和/或该选定量的另外的抗病毒剂是有效性较差的。因此，实施方案包括(1)方案，其中当在疾病的联合治疗中使用时，选定量的另外的抗病毒剂增加选定量的通式I、II、III、IV或V化合物的治疗益处，其中当在疾病的单一治疗中使用时，该选定量的另外的抗病毒剂提供较少的治疗益处；(2)方案，其中当在疾病的联合治疗中使用时，选定量的通式I、II、III、IV或V化合物增加选定量的另外的抗病毒剂的治疗益处，其中当在疾病的单一治疗中使用时，该选定量的通式I、II、III、IV或V化合物提供较少的治疗益处；以及(3)方案，其中当在疾病的联合治疗中使用时，选定量的通式I、II、III、IV或V化合物和选定量的另外的抗病毒剂提供了治疗益处，其中当在疾病的单一治疗中使用时，每一选定量的通式I、II、III、IV或V化合物和另外的抗病毒剂分别提供较少的治疗益处。如本文所用的“协同有效量”的通式I、II、III、IV或V化合物和另外的抗病毒剂及其语法等价物应被理解为包括由上述(1)-(3)任意涵盖的任意方案。

纤维化

实施方案提供了治疗肝纤维化的方法(包括由HCV感染导致的或与HCV感染相关的肝纤维化形式)，其通常涉及给予治疗量的通式I、II、III、IV或V化合物和任选一种或多种另外的抗病毒剂。下面讨论具有或不具有一种或多种另外的抗病毒剂的有效量的通式I、II、III、IV或V化合物以及剂量方案。

通过任意许多已被接受的检测肝纤维化和肝功能的技术确定用通式I、II、III、IV或V化合物和任选一种或多种另外的抗病毒剂进行治疗对减少肝纤维化是否有效。通过分析肝活组织检查样本确定肝纤维化减少。肝活组织检查样本的分析包括两个主要要素的评价：通过作为严重性和发展中的疾病活性的检测的“级”而评价的坏死性炎症，以及由长期疾病进展反应的“期”而评价的纤维化和薄壁组织或血管重塑的损害。参见，例如Brunt(2000)Hepatol.31:241-246；和METAVIR(1994)Hepatology 20:15-20。基于肝活组织检查的分析来指定分数。存在许多标准化评分系统，其提供纤维化程度和严重性的定量评价。这些包括METAVIR、Knodell、Scheuer、Ludwig和Ishak评分系统。

METAVIR评分系统基于肝活组织检查的多个特征的分析，所述特征包括纤维化(门静脉纤维化、小叶中心纤维化(centrilobular fibrosis)和肝硬化)；坏死(碎片状坏死和小叶坏死、嗜酸收缩(acidophilic retraction)和气球样变性)；炎症(汇管区炎症、门静脉淋巴聚集和门静脉炎症的分布)；胆管改变；以及Knodell指数(门静脉周坏死、小叶坏死、门静脉炎症、纤维化和总的疾病活性的分数)。METAVIR系统中每个阶段的定义如下：分数：0，没有纤维化；分数：1，门管区星形扩大但没有形成隔膜；分数：2，门管区扩大且极少隔膜形成；分数：3，许多隔膜但没有肝硬化；以及分数：4，肝硬化。

也称为肝炎活性指数的Knodell的评分系统根据四类组织学特征的分数将样本分类：I.门静脉周和/或桥接坏死；II.小叶内退化和灶性坏死；III.门静脉炎症；以及IV.纤维化。在Knodell分期系统中，分数如下：分数：0，没有纤维化；分数：1，轻度纤维化(纤维性门管区扩张)；分数：2，中度纤维化；分数：3，重度纤维化(桥接纤维化)；以及分数：4，肝硬化。分数越高，肝组织损坏越严重。Knodell(1981)Hepatol.1:431。

在Scheuer评分系统中，分数如下：分数：0，没有纤维化；分数：1，扩大的、纤维化的门管区；分数：2，门静脉周或门静脉-门静脉隔膜，但有完整结构；分数：3，具有结构扭曲的纤维化，但没有明显肝硬化；分数：4，很可能的或确定的肝硬化。Scheuer(1991)J.Hepatol.13:372。

Ishak评分系统描述在Ishak(1995)J.Hepatol.22:696-699中。0期，没有纤维化；1期，一些门管区的纤维化膨胀，有或没有短纤维化隔膜；2期，大多数门管区的纤维化膨胀，有或没有短纤维化隔膜；3期，大多数门管区的纤维化膨胀，偶尔有门静脉至门静脉(portalto portal)(P-P)桥接；4期，具有明显桥接(P-P)以及门静脉-中心(P-C)的门管区的纤维化膨胀；5期，偶尔有结节(不完全肝硬化)的明显桥接(P-P和/或P-C)；6期，很可能的或确定的肝硬化。

也能够通过使用Child-Pugh评分系统检测和评价抗纤维化治疗的益处，所述系统包括基于血清胆红素水平、血清白蛋白水平、凝血酶原时间的异常、腹水的存在和严重性以及脑病的存在和严重性的多要素分数系统。基于这些参数的异常的存在和严重性，可以将患者置于逐渐增加严重性的临床疾病的三类：A、B或C中的一种。

在一些实施方案中，通式I、II、III、IV或V化合物和任选一种或多种另外的抗病毒剂的治疗有效量是基于治疗前和治疗后的肝活组织检查，影响纤维化阶段中一个或多个单位变化的量。在具体的实施方案中，治疗有效量的通式I、II、III、IV或V化合物和任选一种或多种另外的抗病毒剂将肝纤维化降低METAVIR、Knodell、Scheuer、Ludwig或Ishak评分系统中的至少一个单位。

肝功能的二级或间接指标也能够用于评价用通式I、II、III、IV或V化合物进行治疗的效力。还能测量基于肝纤维化的胶原蛋白和/或血清标记物的特异性染色的肝纤维化定量程度的形态计算机化的半自动评价，以作为所述治疗方法效力的指标。肝功能的二级指标包括但不限于血清转氨酶水平、凝血酶原时间、胆红素、血小板计数、门静脉压力、白蛋白水平和Child-Pugh分数评价。

通式I、II、III、IV或V化合物和任选一种或多种另外的抗病毒剂的有效量是与未治疗个体的肝功能指标相比，或与安慰剂治疗的个体相比，有效地将肝功能指标增加了至少约10％、至少约20％、至少约25％、至少约30％、至少约35％、至少约40％、至少约45％、至少约50％、至少约55％、至少约60％、至少约65％、至少约70％、至少约75％或至少约80％或更多的量。本领域技术人员能够使用标准检验方法容易地测量这样的肝功能指标，许多所述方法为可商购的，并且在临床应用中常规使用。

也能够测量检测肝纤维化的血清标记物，以作为所述治疗方法效力的指征。肝纤维化的血清标记物包括但不限于透明质酸盐、N-端原骨胶原III肽、IV型胶原蛋白的7S域、C-端原骨胶原I肽和层粘连蛋白。肝纤维化的另外的生物化学标记物包括α-2-巨球蛋白、触珠蛋白、γ球蛋白、阿朴脂蛋白A和γ谷氨酰转肽酶。

通式I、II、III、IV或V化合物和任选一种或多种另外的抗病毒剂的治疗有效量是与未治疗个体中标记物的水平相比，或与安慰剂治疗的个体相比，有效地将肝纤维化标记物的血清水平降低了至少约10％、至少约20％、至少约25％、至少约30％、至少约35％、至少约40％、至少约45％、至少约50％、至少约55％、至少约60％、至少约65％、至少约70％、至少约75％或至少约80％或更多的量。本领域技术人员能够使用标准检验方法容易地检测肝纤维化的这类血清标记物，许多所述方法为可商购的，并且在临床应用中常规使用。检测血清标记物的方法包括使用给定血清标记物特异性抗体的免疫学方法，例如酶联免疫吸附测定(ELISA)、放射性免疫测定等。

如本文所用的“与肝硬化相关的并发症”是指为失代偿性肝病后果的病症，即或者发生在肝纤维化发展之后并作为肝纤维化发展的结果，其包括但不限于腹水发展、静脉曲张出血、门静脉高压、黄疸、渐进性肝功能不全、脑病、肝细胞癌、需要肝移植的肝衰竭和肝相关的死亡。

通式I、II、III、IV或V化合物和任选一种或多种另外的抗病毒剂的治疗有效量是与未治疗个体相比，或与安慰剂治疗的个体相比，有效地将与肝硬化相关的病症的发生率(例如，个体会患病的可能性)降低了至少约10％、至少约20％、至少约25％、至少约30％、至少约35％、至少约40％、至少约45％、至少约50％、至少约55％、至少约60％、至少约65％、至少约70％、至少约75％，或至少约80％或更多的量。

本领域技术人员能够容易地确定使用通式I化合物和任选一种或多种另外的抗病毒剂的治疗对降低与肝硬化相关的病症的发生率是否有效。

肝纤维化的减少能增加肝功能。因此，本实施方案提供了增加肝功能的方法，通常涉及给予治疗有效量的通式I化合物和任选一种或多种另外的抗病毒剂。肝功能包括但不限于：诸如血清蛋白(例如白蛋白、凝血因子、碱性磷酸酶、氨基转移酶(例如丙氨酸转氨酶、天冬氨酸转氨酶)、5’-核苷酶、γ-谷氨酰转肽酶等)的蛋白质的合成、胆红素的合成、胆固醇的合成和胆酸的合成；肝代谢功能，其包括但不限于碳水化合物代谢、氨基酸和氨代谢、激素代谢和脂质代谢；外来药物的解毒；血液动力学功能，其包括内脏和门静脉血液动力学等。

本领域技术人员可使用已被接受的肝功能试验容易地确定肝功能是否增加。因此，能够使用标准免疫学和酶检验通过检测血清中这些标记物的水平来评价肝功能标记物的合成，所述肝功能标记物例如白蛋白、碱性磷酸酶、丙氨酸转氨酶、天冬氨酸转氨酶、胆红素等。能够使用标准方法通过门静脉楔压和/或阻力检测内脏循环和门静脉血液动力学。能够通过检测血清中氨水平来检测代谢功能。

能够使用标准免疫学和酶检验通过检测这类蛋白质的水平来确定肝正常分泌的血清蛋白是否在正常范围内。本领域技术人员已知这类血清蛋白的正常范围。下列是非限制性的实例。丙氨酸转氨酶的正常水平为约45IU每毫升血清。天冬氨酸转氨酶的正常范围为约5至约40单位每升血清。使用标准检验来检测胆红素。正常胆红素水平通常小于约1.2mg/dL。使用标准检验来检测血清白蛋白水平。血清白蛋白的正常水平为约35至约55g/L。使用标准检验来检测凝血酶原时间的延长。正常凝血酶原时间比对照长小于约4秒。

通式I化合物和任选一种或多种另外的抗病毒剂的治疗有效量是有效地将肝功能增加至少约10％、至少约20％、至少约30％、至少约40％、至少约50％、至少约60％、至少约70％、至少约80％或更多的量。例如，通式I化合物和任选一种或多种另外的抗病毒剂的治疗有效量是有效地将肝功能的血清标记物的升高水平降低了至少约10％、至少约20％、至少约30％、至少约40％、至少约50％、至少约60％、至少约70％、至少约80％或更多的量，或为有效地将肝功能的血清标记物的水平降低至正常范围内的量。通式I化合物和任选一种或多种另外的抗病毒剂的治疗有效量也是有效地将肝功能的血清标记物的减少水平增加了至少约10％、至少约20％、至少约30％、至少约40％、至少约50％、至少约60％、至少约70％、至少约80％或更多的量，或为有效地将肝功能的血清标记物的水平增加至正常范围内的量。

剂量、制剂和给药途径

在题述方法中，可以使用能够导致期望治疗效果的任何便捷的方法给予宿主活性剂(例如通式I化合物和任选一种或多种另外的抗病毒剂)。因此，能够将药剂并入多种用于治疗给药的制剂。更具体地，能够通过与适当的、药物可接受的载体或稀释剂组合来将实施方案的药剂配制成药物组合物，并且可以配制成固体、半固体、液体或气体形式的制剂，例如片剂、胶囊剂、粉末剂、颗粒剂、软膏剂、溶液剂、栓剂、注射剂、吸入剂和气雾剂。

其他抗病毒剂或抗纤维化剂

如上所述，在一些实施方案中，会通过给予通式I化合物和任选一种或多种另外的抗病毒剂来进行题述方法。

在一些实施方案中，所述方法还包括给予一种或多种干扰素受体激动剂。

在其他实施方案中，所述方法还包括给予吡非尼酮或吡非尼酮类似物。

适于用于联合治疗的另外的抗病毒剂包括但不限于核苷酸和核苷类似物。非限制性实例包括叠氮胸苷(AZT)(齐多呋定)及其类似物和衍生物；2’,3’-双脱氧肌苷(DDI)(地达诺新)及其类似物和衍生物；2’,3’-双脱氧胞苷(DDC)(扎西他滨)及其类似物和衍生物；2’,3’-双脱氢-2’,3’-双脱氧胸苷(D4T)(司他夫定)及其类似物和衍生物；双汰芝；阿巴卡韦；阿德福韦酯；西多福韦；三唑核苷；三唑核苷类似物；等。

在一些实施方案中，所述方法还包括给予三唑核苷。可购自ICNPharmaceuticals,Inc.,Costa Mesa,Calif.的三唑核苷，即1-β-D-呋喃核糖基-1H-1,2,4-三唑-3-甲酰胺描述在第十一版的默克索引第8199号化合物中。其制备和制剂描述在第4,211,771号美国专利中。一些实施方案还涉及使用三唑核苷衍生物(参见例如第6,277,830号美国专利)。可以以胶囊或片剂形式口服给予三唑核苷，或以与题述化合物相同或不同的给药形式和相同或不同的途径给予三唑核苷。当然，两种药物的其他给药类型，只要它们是可获得的，则其都是被考虑在内的，例如通过鼻内喷雾、经皮、静脉内、通过栓剂、通过缓释剂型等。只要递送适当的剂量而不破坏活性成分，则任何给药形式都可行。

在一些实施方案中，所述方法还包括给予利托那韦。可购自Abbott Laboratories的利托那韦，即10-羟基-2-甲基-5-(1-甲基乙基)-1-[2-(1-甲基乙基)-4-噻唑基]-3,6-二氧-8,11-双(苯基甲基)-2,4,7,12-四氮杂十三烷-13-酸,5-噻唑基甲基酯[5S-(5R*,8R*,10R*,11R*)]是人免疫缺陷病毒的蛋白酶抑制剂，也是在男性中频繁参与治疗分子的肝代谢的细胞色素P450 3A和P450 2D6肝酶的抑制剂。

在一些实施方案中，所述方法还包括给予蛋白酶抑制剂。在一些实施方案中，所述方法还包括给予NS5A抑制剂。在一些实施方案中，所述方法还包括给予螺旋酶抑制剂。在一些实施方案中，所述方法还包括给予聚合酶抑制剂。

在一些实施方案中，在题述化合物治疗的整个过程期间，给予另外的抗病毒剂。在其他实施方案中，在与题述化合物治疗重叠的时间内给予另外的抗病毒剂，例如能够在题述化合物治疗开始之前开始另外的抗病毒剂治疗，并且在题述化合物治疗结束之前结束另外的抗病毒剂治疗；能够在题述化合物治疗开始之后开始另外的抗病毒剂治疗，并且在题述化合物治疗结束之后结束另外的抗病毒剂治疗；能够在题述化合物治疗开始之后开始另外的抗病毒剂治疗，并且在题述化合物治疗结束之前结束另外的抗病毒剂治疗；或者能够在题述化合物治疗开始之前开始另外的抗病毒剂治疗，并且在题述化合物治疗结束之后结束另外的抗病毒剂治疗。

治疗方法

单一治疗

本文所述的化合物可以用于HCV疾病的急性或慢性治疗。在许多实施方案中，在约1天至约7天、或约1周至约2周、或约2周至约3周、或约3周至约4周、或约1月至约2月、或约3月至约4月、或约4月至约6月、或约6月至约8月、或约8月至约12月、或至少1年的时间内给予本文所述的化合物，并且可以在更长的时间内给予本文所述的化合物。能够每日5次、每日4次、每日3次、每日2次、每日1次、隔日1次、每周2次、每周3次、每周1次、隔周1次、每月3次、或每月1次给予本文所述的化合物。在其他实施方案中，以连续输注形式给予本文所述的化合物。

在许多实施方案中，口服给予实施方案的本文所述的化合物。

关于治疗患者的HCV疾病的上述方法，可以每日以1至5个分剂量形式，以每日约0.01mg/kg患者体重至约100mg/kg患者体重的剂量给予患者本文所述化合物。在一些实施方案中，可以每日以1至5个分剂量形式，以每日约0.5mg/kg患者体重至约75mg/kg患者体重的剂量给予本文所述的化合物。

可以与载体材料混合以制备剂型的活性成分的量能够根据要治疗的宿主和具体给药方式的变化而变化。典型的药物制剂能够包含约5％至约95％的活性成分(w/w)。在其他实施方案中，药物制剂能够包含约20％至约80％的活性成分。

技术人员将容易意识到，剂量水平能够随着具体化合物、症状严重性和个体对副作用的敏感性的变化而变化。本领域技术人员可通过多种方法容易地确定给定的化合物的优选剂量。优选方法是检测给定的干扰素受体激动剂的生理学效力。

在许多实施方案中，向个体给予多剂量的本文所述的化合物。例如，在约一天至约一周、约两周至约四周、约一个月至约两个月、约两个月至约四个月、约四个月至约六个月、约六个月至约八个月、约八个月至约一年、约一年至约两年、或约两年至约4年，或更长时间内，每月一次、每月两次、每月三次、隔周一次(qow)、每周一次(qw)、每周两次(biw)、每周三次(tiw)、每周四次、每周五次、每周六次、隔日一次(qod)、每日一次(qd)、每日两次(qid)或每日三次(tid)的方式来给予本文所述化合物。

与TNF-α拮抗剂和干扰素的联合治疗

一些实施方案提供了治疗患有HCV感染的个体的HCV感染的方法，所述方法包括给予有效量的本文所述化合物以及有效量的TNF-α拮抗剂以及有效量的一种或多种干扰素。

适于治疗的个体

在某些实施方案中，根据患者显示出的一些疾病参数选择用于治疗HCV患者的药物治疗的具体方案，所述疾病参数例如初始病毒负载、患者的HCV感染的基因型、患者的肝纤维化的肝组织学和/或阶段。

能够给予已经诊断为患有HCV感染的个体任意上述治疗方案。能够向通过Knodell分数为3或4所检测的患有晚期或严重阶段肝纤维化的个体、或者通过Knodell分数为0、1或2所检测的未患有或患有早期肝纤维化的个体给予任意上述治疗方案。能够给予已在HCV感染的先前治疗中失败的个体(包括无应答者和复发者在内的“治疗失败患者”)任意上述治疗方案。

在许多实施方案中，已经被临床诊断为感染有HCV的个体是特别关注的。感染有HCV的个体被鉴别为在其血液中具有HCV RNA，和/或在其血清中具有抗-HCV抗体。这样的个体包括抗-HCV ELISA-阳性个体，和具有阳性重组免疫印迹检验(RIBA)的个体。这样的个体也可以、但非必要地具有升高的血清ALT水平。

临床诊断为感染有HCV的个体包括初级个体(例如，以前没有治疗过HCV的个体，特别是以前没有接受基于IFN-α和/或基于三唑核苷的治疗的个体)和在先前的HCV治疗中失败的个体(“治疗失败”患者)。治疗失败患者包括无应答者(即，其中以前的HCV治疗没有显著或充分地减少HCV滴定量的个体，例如以前的IFN-α单一治疗、以前的IFN-α和三唑核苷联合治疗、或者以前的聚乙二醇化的IFN-α和三唑核苷联合治疗)；和复发者(即，以前治疗过HCV的个体，例如，接受了以前的IFN-α单一治疗、以前的IFN-α和三唑核苷联合治疗、或者以前的聚乙二醇化的IFN-α和三唑核苷联合治疗的个体，其HCV滴定量降低并随后增加)。

在关注的具体实施方案中，个体的HCV滴定量为至少约10⁵、至少约5×10⁵、或至少约10⁶、或至少约2×10⁶个HCV基因组拷贝数每毫升血清。患者可以感染有任意的HCV基因型(基因型1，包括1a和1b、2、3、4、6等和亚型(例如2a、2b、3a等))，特别是难以治疗的基因型，例如HCV基因型1并且特别是HCV亚型和准种。

还关注的是HCV-阳性个体(如上所述)，即，所述个体表现出严重纤维化或早期肝硬化(非失代偿性的、Child’s-Pugh A类或更低)或更晚期的肝硬化(失代偿性的、Child’s-Pugh B类或C类)，这归因于慢性HCV感染而导致的，并且尽管在先前采用基于IFN-α的治疗进行抗病毒治疗，但个体仍为病毒血症的，或个体不能忍受基于IFN-α的治疗或对这样的治疗具有禁忌症。在关注的具体实施方案中，根据METAVIR评分系统而具有3或4期肝纤维化的HCV阳性个体适于用本文所述的方法治疗。在其他实施方案中，适于用实施方案的方法治疗的个体为具有失代偿性肝硬化临床表现的患者，其包括具有极晚期肝硬化的患者，包括等待肝移植的那些人。在其他实施方案中，适于用本文所述的方法治疗的个体包括具有较低程度纤维化的患者，其包括具有早期纤维化(在METAVIR、Ludwig和Scheuer评分系统中为1和2期；或者在Ishak评分系统中为1、2或3期)的那些人。

合成

参照示出可制备本公开的化合物的方法的下列合成方案，将更好地理解本公开的化合物和方法。起始材料可以从商业资源获得或通过本领域技术人员已知的完整文献方法来制备。除非另外明确指出，变量如下所定义。

第I节

方案1

方案I：一般化合物I-M的合成

能够使用标准Suzuki型偶联条件，根据方案I偶联一般化合物I-G和一般化合物I-L以得到一般化合物I-M(例如、Angew Chem.Int.Ed.Engl 2001、40、4544)。能够分别根据方案I-A和I-B制备中间体I-G和I-L。

方案I-A

方案I-A：一般化合物I-G的合成

在一些实施方案中，当将I-A转化为I-C时使用的碱是DIEA的THF溶液。在一些实施方案中，将I-C转化为I-D的步骤是在甲苯中进行的。在一些实施方案中，将I-D转化为I-E的步骤使用的酸是HCl的甲醇溶液。在一些实施方案中，将I-E转化为I-F的步骤使用的羧酸为其可以根据下列反应形成：

在一些实施方案中，化合物I-G具有结构：

方案I-B

方案I-B：一般化合物I-L的合成

能够根据方案I-C合成苯并噻吩型的中间体I-H：

方案I-C

能够根据方案I-D合成吲哚型的中间体I-H。

方案I-D

能够根据方案I-E合成苯并咪唑型的中间体I-H。

方案I-E

能够通过适当修饰的第I节公开的方法来制备下列的化合物。通过使用适当的反应物、试剂和反应条件合成下列化合物对本领域技术人员来说是显而易见的。

化合物的制备：第I节

实施例I-I：化合物301和302的制备

方案I-I

方案I-Ia

一般步骤I-A

将1-溴-萘(I-Ia；2g,9.6mmol)和乙酰氯(0.84mL,11.6mmol)的1,2-二氯乙烷(30mL)溶液冷却至0℃并分批加入氯化铝(2.88g,21.6mmol)。在室温下搅拌混合物24小时。将反应混合物倒入冰水(100mL)。分离两层并用EtOAc(150mL×3)萃取水层。在硫酸镁上干燥混合的有机层，过滤并在减压下除去溶剂以得到橘黄色油状形式的化合物I-Ib(2.16g，产率91％)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.6(m,1H),8.3(m,1H),7.8(d,J＝8.0Hz,1H),7.66(d,J＝7.6Hz,1H),7.58(m,2H),2.63(s,3H).MS(ESI)m/z(M+H)⁺250。

方案I-Ib

一般步骤I-B

向化合物I-Ib(2g,8.1mmol)的甲苯(20mL)溶液中加入Na₂CO₃(0.86g,8.1mmol)和4-乙酰基苯基硼酸(I-IC；1.6g,9.7mmol)，用氮吹扫生成的混合物，然后加入Pd(PPh₃)₄(848mg,0.81mmol)。在80℃下，在氮保护下搅拌反应混合物过夜。TLC监测反应。反应完成后，将混合物倒入水中，用EtOAc(100mL×3)萃取，在Na₂SO₄上干燥混合的有机层，真空浓缩。通过色谱(PE:EA＝6:1)纯化残留物以得到化合物I-Id(2g,产率86％)。

方案I-Ic

一般步骤I-C

在60℃下，用CuBr₂(4.55g,20.7mmol)处理化合物I-Id(2g,6.9mmol)的CHCl₃(20mL)悬浮液。搅拌混合物过夜并通过过滤收集形成的沉淀，用EtOAc洗涤并且在减压下浓缩滤液以得到化合物I-Ie，将其直接用于下一步。

方案I-Id

一般步骤I-D

向化合物I-Ie(6.9mmol)的四氢呋喃(18mL)悬浮液中加入二异丙基乙胺(1.78g,13.8mmol)和N-Boc-脯氨酸(I-If；2.97g,13.8mmol)。随着固体溶解，搅拌所得的混合物1小时。通过加入13％的氯化钠水溶液(20mL)淬灭反应混合物。分离层并且用甲苯(50mL)混合有机层并浓缩至体积为40mL。将包含化合物I-Ig的溶液用于下一步。

方案I-Ie

一般步骤I-E

用醋酸铵(13.9g,181mmol)处理以前试验中获得的化合物I-Ig的溶液并加热至95-100℃过夜。浓缩并通过柱色谱(PE:EA＝1:1)纯化获得的残留物以获得化合物I-Ih(600mg，基于三步为13％)。MS(ESI)m/z(M+H)⁺675。

方案I-If

一般步骤I-F

向化合物I-Ih(600mg,0.89mmol)的甲醇(10mL)悬浮液中加入盐酸水溶液(6M,6.5mL)。在搅拌下将获得的混合物加热至50℃过夜并浓缩至干燥以得到HCl盐形式的为黄绿色固体的化合物I-Ii(380mg,产率90％).MS(ESI)m/z(M+H)⁺475.3。

方案I-Ig

一般步骤I-G

向化合物I-Ii(50mg,0.105mmol)的无水DCM(5mL)溶液中加入化合物VI-IIA(36.7mg,0.21mmol)和DIPEA(32.2mg,0.25mmol)，然后在N₂的保护下加入HATU(79.8mg,0.21mmol)。在室温下搅拌所得混合物过夜。TLC监测反应。反应完成后，将反应混合物倒入水(10mL)中，用CH₂Cl₂(30mL×3)萃取，在Na₂SO₄上干燥混合的有机层，真空浓缩。用制备-HPLC纯化残留物以得到白色固体形式的化合物301(21mg,产率24％).MS(ESI)m/z(M+H)⁺789.4。

方案I-Ih

一般步骤I-H

制备化合物302的步骤与在一般步骤I-G中描述的制备化合物301的步骤类似。120mg，产率40％，白色固体。MS(ESI)m/z(M+H)⁺697.5。13mg，产率19％，白色固体。MS(ESI)m/z(M+H)⁺711.2。

实施例I-II：化合物303和304的制备

方案I-II

方案I-IIa

一般步骤I-I

将5,6,7,8-四氢萘-1-醇(IIa；5g,33.74mmol)、CH₃I(4.8g,33.74mmol)和K₂CO₃(35mmol)的无水丙酮(20mL)混合物在回流下搅拌过夜。冷却至室温后，在减压下除去溶剂，并用乙酸乙酯(20mL×3)萃取残留物，用水(50mL)和盐水(50mL)洗涤。在无水Na₂SO₄上干燥混合的有机层并在减压下浓缩以得到粗产物，将其由柱色谱纯化以得到1,2,3,4-四氢-5-甲氧基萘(IIb；5.47g,产率:100％).MS(ESI)m/z(M+H)⁺163。

方案I-IIb

一般步骤I-J

向1,2,3,4-四氢-5-甲氧基萘(IIb；4.8g,29.6mmol)和无水AlCl₃(5.08g,38.5mmol)的100mL的1,2-二氯乙烷的溶液中分批加入乙酰氯(2.54g,32.6mmol,在30mL的1,2-二氯乙烷中)。在0℃搅拌反应混合物30分钟。然后将混合物倒入冰/水(200mL)。分离有机层，用盐水(20mL)洗涤，在无水Na₂SO₄上干燥并在减压下浓缩。用柱色谱纯化残留物以得到化合物I-IIc(4.08g,产率：80％)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ7.20(d,J＝8.8Hz,1H),6.83(d,J＝8.8Hz,1H),3.88(s,3H),2.96(t,2H),2.62(t,2H),2.48(s,3H),1.67(m,4H)；MS(ESI)m/z(M+H)⁺:205。

方案I-IIc

一般步骤I-K

向化合物I-IIc(4g,19.6mmol)的1,2-二氯乙烷(50mL)溶液中加入AlCl₃(3.9g,30mmol)，并在回流下搅拌反应混合物3小时。冷却至室温后，将混合物倒入100mL冰/水中。分离有机层，用盐水(20mL)洗涤，在硫酸钠上干燥并在减压下浓缩。用柱色谱纯化残留物以得到化合物I-IId(3g,80.6％产率)。¹H-NMR(400MHz,CDCl₃)δ7.46(d,J＝8.4Hz,1H),6.59(d,J＝8.4Hz,1H),2.96(m,2H),2.58(m,2H),2.48(s,3H),1.76(m,2H),1.67(m,2H)。

方案I-IId

一般步骤I-L

在0℃向化合物I-IId(2.2g,11.58mmol)的无水DCM(50mL)溶液加入三乙胺(2.34g,23.6mmol)。然后滴加三氟-甲磺酸酐(4.57g,16.21mmol)。在0℃搅拌反应混合物3小时。薄层色谱分析(TLC；石油醚:EtOAc＝5:1)显示起始材料已经完全消耗。用DCM(100mL)稀释反应混合物并用水(50mL×3)洗涤。分离有机层，在Na₂SO₄上干燥并在减压下浓缩以得到橘黄色油状形式的化合物I-IIe(2.5g,产率:97％)，将其直接用于下一步而不进行进一步纯化。

方案I-IIe

一般步骤I-M

向化合物I-IIe(2.5g,11.5mmol)的甲苯/水(50mL/5mL)溶液加入Na₂CO₃(2.41g,22.7mmol)和4-乙酰基苯基硼酸(2.85g,17.36mmol)，用氮吹扫所得混合物，然后加入Pd(PPh₃)₄(0.1g，催化量)。在80℃下，在氮保护下搅拌反应混合物过夜。在冷却至室温后，将混合物倒入水(100mL)中，用EtOAc(100mL×3)萃取，在Na₂SO₄上干燥混合的有机层，在减压下浓缩。通过色谱纯化残留物(用石油醚:EtOAc＝40:1至5:1洗脱)以得到白色固体形式的化合物I-IIf(3g,产率:91％)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.01(d,J＝8.0Hz,2H),7.49(d,J＝7.6Hz,1H),7.38(d,J＝8.4Hz,2H),7.08(d,J＝7.6Hz,1H),3.02(m,2H),2.65(s,3H),2.60(s,3H),2.56(m,2H),1.76(m,2H),1.70(m,2H)。

方案I-IIf

一般步骤I-N

向化合物I-IIf(3.2g,11mmol)的HOAc(50mL)悬浮液中滴加Br₂(3.51g,22mmol)的HOAc(10mL)溶液。在30℃搅拌反应混合物过夜。然后加入EtOAc(200mL)并用饱和aq.NaHCO₃(50mL×3)洗涤。分离有机层，在Na₂SO₄上干燥并在减压下浓缩以得到橘黄色油状形式的化合物I-IIg(3g,产率:61％)，将其直接用于下一步。

方案I-IIg

一般步骤I-O

向化合物I-IIg(0.2g,0.44mmol)和Cs₂CO₃(0.58g,1.78mmol)的DMF(10mL)悬浮液加入化合物I-IIh(0.48g,1.78mmol)。在室温下搅拌所得混合物过夜。然后用EtOAc(100mL)稀释反应混合物并用水(10mL×5)洗涤。在Na₂SO₄上干燥有机层并在减压下浓缩以得到粗产品，用制备-HPLC纯化以得到白色固体形式的化合物303(0.1g,产率:27％)。¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ7.94(d,J＝5.4Hz,2H),7.40(m,3H),7.07(d,J＝8.8Hz,1H),5.57(br,1H),5.32(m,4H),5.01(br,1H),4.70(m,2H),4.35(m,2H),3.75(m,10H),2.96(m,2H),2.56(m,2H),2.38(m,5H),2.12(m,5H),1.74(m,4H),1.01(m,12H).MS(ESI)m/z(M+H)⁺833.3。

方案I-IIh

一般步骤I-P

向化合物303(0.1g,0.12mmol)的无水甲苯(10mL)溶液中加入醋酸铵(0.1g,1.2mmol)。在回流下搅拌所得混合物过夜。冷却至室温后，用水(50mL)稀释混合物并用EtOAc(50mL×3)萃取。在Na₂SO₄上干燥混合的有机层，在减压下浓缩。用制备-HPLC纯化残留物以得到白色固体形式的化合物304(50mg,产率:50％)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ7.65(m,2H),7.23(m,4H),7.03(m,2H),5.65(m,2H),5.25(m,2H),4.32(m,2H),3.91(m,2H),3.69(m,10H),2.78(m,4H),2.60(s,2H),2.38(br,2H),2.20(br,2H),2.05(br,2H),1.98(br,2H),1.72(m,4H),0.89(s,12H).MS:(ESI)m/z(M+H)⁺793.3。

实施例I-IV:化合物307的制备

方案I-IV

方案I-IVa

一般步骤I-Z

在0℃下，在氩气下，向4-溴萘-1-胺(I-IVa)(5.00g,22.52mmol)的60mL浓HCl溶液加入NaNO₂(3.10g,44.92mmol)的10mL H₂O溶液。添加后，搅拌溶液0.5小时，然后在0℃下，在氩气下，加入碘化钾(KI)(7.43g,44.92mmol)的10mL H₂O溶液，继续搅拌过夜。用100mLAcOEt稀释溶液，然后用100mL H₂O稀释溶液。分离水层，并用EtOAc(100mL×3)萃取。混合有机层并用盐水洗涤，在Na₂SO₄上干燥并真空浓缩。用色谱在硅胶上纯化残留物以得到1-溴-4-碘代萘(I-IVb)(6g,产率83％)。

方案I-IVb

一般步骤I-AA

在氩气下，加热1-溴-4-碘代萘(I-IVb)(6.00g,18.01mmol)、4-甲氧基苯基硼酸(2.74g,18.01mmol)、Na₂CO₃(3.82g,36.02mmol)和Pd(dppf)Cl₂(658mg,0.90mmol)的50mLTHF和10mL H₂O的混合物至回流过夜。浓缩混合物，将残留物在H₂O和DCM之间分层，用DCM萃取水相。用盐水洗涤混合的有机层，在Na₂SO₄上干燥并浓缩。用色谱在硅胶上纯化残留物以得到1-溴-4-(4-甲氧基苯基)萘(I-IVd)(4.50g,产率63％)。

方案I-IVc

一般步骤I-AB

在-30℃下，在氩气下，向1-溴-4-(4-甲氧基苯基)萘(I-IVd)(3g,9.58mmol)的DCM搅拌溶液滴加BBr₃(4.79g,19.16mmol)。添加后，搅拌溶液0.5小时，然后将溶液缓慢升至室温，搅拌3小时。向溶液中加入60mL的H₂O。分离水层并用EtOAc(60mL×3)萃取。混合有机层并用盐水洗涤，在Na₂SO₄上干燥并真空浓缩。用色谱在硅胶上纯化残留物以得到4-(1-溴代萘-4-基)苯酚(I-IVd)(2.50g,产率78％).

方案I-IVd

一般步骤I-AC

在氩气下，加热4-(1-溴代萘-4-基)苯酚(I-IVd)(2.50g,8.36mmol)、双戊酰二硼(4.25g,16.73mmol)、AcOK(1.63g,16.73mmol)和Pd(dppf)Cl₂(305mg,0.48mmol)的40mL二噁烷的混合物至回流4小时。浓缩混合物，将残留物在H₂O和DCM间分层，用DCM萃取水相并用盐水洗涤混合的有机层，在Na₂SO₄上干燥并浓缩。用色谱在硅胶上纯化残留物以得到化合物I-IVf(2.53g,产率89％)。

方案I-IVe

一般步骤I-AD

在氩气下，加热化合物I-IVf(2.53g,7.31mmol)、I-IVg(2.31g,7.31mmol)、Na₂CO₃(1.55g,15.00mmol)和Pd(dppf)Cl₂(270mg,0.369mmol)的50mL THF和10mL H₂O的混合物至回流过夜。浓缩混合物，在H₂O和DCM之间分层残留物，用DCM萃取水相。用盐水洗涤混合的有机层，在Na₂SO₄上干燥浓缩。用色谱在硅胶上纯化残留物(PE:EA＝1:1)以得到化合物I-IVh(1.70g,产率45％)。MS(ESI)m/z(M+H)⁺456.4。

方案I-IVf

一般步骤I-AE

在-78℃下，在氩气下向化合物I-IVh(1.70g,3.73mmol)和TEA(0.57g,5.64mmol)的DCM的搅拌溶液滴加Tf₂O(1.26g,4.47mmol)。添加后，搅拌溶液0.5小时，然后将溶液缓慢升至室温，搅拌3小时。向溶液中加入50mL的H₂O。分离水层并用EA(60mL×3)萃取。混合有机层并用盐水洗涤，在Na₂SO₄上干燥并真空浓缩。用色谱在硅胶上纯化残留物以得到化合物I-IVi(1g,产率43％)。

方案I-IVg

一般步骤I-AF

在氩气下，加热化合物I-IVi(1.00g,1.70mmol)、双戊酰二硼(0.87g,3.40mmol)、AcOK(0.33g,3.40mmol)和Pd(dppf)Cl₂(62mg,0.08mmol)的40mL二噁烷的混合物至回流4小时。浓缩混合物，残留物在H₂O和DCM间分层，用DCM萃取水相，用盐水洗涤混合的有机层，在Na₂SO₄上干燥，浓缩。用色谱在硅胶上纯化残留物以得到化合物I-IVj(0.93g,产率87％)。

方案I-IVh

一般步骤I-AG

在氩气下，加热化合物I-IVj(0.93g,1.64mmol)、化合物I-IVk(0.57g,1.64mmol)、Na₂CO₃(0.35mg,3.28mmol)和Pd(dppf)Cl₂(60mg,0.08mmol)的50mL THF和10mL H₂O的混合物至回流过夜。浓缩混合物，残留物在H₂O和DCM间分层，用DCM萃取水相。用盐水洗涤混合的有机层，在Na₂SO₄上干燥，浓缩。用色谱在硅胶上纯化残留物(PE:EA＝1:1)以得到化合物I-IVl(600mg,产率72％).MS(ESI)m/z(M+H)⁺707。

方案I-IVi

一般步骤I-AH

将化合物I-IVl(600mg,0.848mmol)溶于20mL甲醇中。添加100mg的10％的Pd碳后，在室温下用氢气球氢化混合物4小时，使用硅藻土通过过滤除去催化剂，并且浓缩滤液以得到粗产物I-IVm(414mg,产率77％).MS(ESI)m/e(M+H)⁺:575.3。

方案I-IVj

一般步骤I-AI

向化合物I-IVm(207mg,0.361mmol)、化合物VI-IIa(63mg,0.361mmol)和DIPEA(93mg,0.361mmol)的DMF(3mL)混合物加入HATU(137mg,0.361mmol)。在室温下搅拌所得混合物。完成反应后，通过LCMS观察到化合物I-IVm消失，通过制备-HPLC纯化混合物以得到化合物I-IVn(72mg,产率37％).MS(ESI)m/e(M+H)⁺:732.7。

方案I-IVk

一般步骤I-AJ

将化合物I-IVn(72mg,0.11mmol)加入到HCl/CH₃OH(20mL,4M)中。然后在室温下搅拌混合物2-3小时。反应完成后，在真空下浓缩混合物以得到化合物I-IVo(62mg,产率92％).MS(ESI)m/e(M+H)⁺:632。

方案I-IVl

一般步骤I-AK

向化合物I-IVo(62mg,0.116mmol)、2-苯乙酸(13mg,0.116mmol)和DIPEA(43mg,0.116mmol)的DMF(3mL)混合物加入HATU(43mg,0.116mmol)。在室温下搅拌所得混合物直到由LCMS观察到反应完成。用制备-HPLC纯化粗产物以得到化合物307(18mg,产率53％).MS(ESI)m/e(M+H)⁺:750.6。

实施例I-V:化合物308的制备

方案I-V

方案I-Va

一般步骤I-AL

向化合物I-IVm(207mg,0.361mmol)、2-苯乙酸(49mg,0.361mmol)和DIPEA(93mg,0.361mmol)的DMF(3mL)混合物加入HATU(137mg,0.361mmol)。在室温下搅拌所得混合物直到通过LCMS观察到反应完成。用制备-HPLC纯化粗产物以得到化合物I-IVp(60mg,产率28％).MS(ESI)m/e(M+H)⁺:692。

方案I-Vb

一般步骤I-AM

将化合物I-IVp(60mg,0.09mmol)加入到HCl/CH₃OH(20mL,4M)中。然后在室温下搅拌混合物2-3小时。当反应完成时，在真空下浓缩混合物以得到化合物I-IVq(45mg,产率92％).MS(ESI)m/e(M+H)⁺:592。

方案I-Vc

一般步骤I-AN

向化合物I-IVq(45mg,0.08mmol)、化合物VI-IIa(14mg,0.08mmol)和DIPEA(29mg,0.08mmol)的DMF(3mL)混合物加入HATU(34mg,0.08mmol)。在室温下搅拌所得混合物直到通过LCMS观察到反应完成。用制备-HPLC纯化粗产物以得到308(20mg,产率57％).MS(ESI)m/e(M+H)⁺:750.6。

实施例I-VI:化合物309的制备

方案I-VI

方案I-VIa

一般步骤I-AO

向2-羟基-3-甲氧基苯甲醛(I-VIa)(15.2g,100mmol)的吡啶(50mL)溶液加入Ac₂O(11.2g,110mmol)，并在室温下搅拌反应混合物24小时。将反应混合物倒入水中并用DCM萃取，用aq.HCl(4.0M)和盐水洗涤。在无水硫酸钠上干燥有机层并在减压下除去溶剂以提供白色固体形式的化合物I-VIb(17.9g,产率93％)。

方案I-VIb

一般步骤I-AP

用干冰浴将化合物I-VIb(9.7g,50mmol)的H₂SO₄(15mL)溶液冷却至-40℃，向其中缓慢添加发烟HNO₃(10.0mL)。在相同温度下搅拌反应混合物5分钟，然后将反应混合物倒入冰水并用DCM萃取。用无水硫酸钠干燥有机层并真空除去。用柱色谱在硅胶上纯化残留物(洗脱剂PE:EtOAc＝9:1)以得到黄色固体形式的化合物I-VIc(7.8g,产率 63％)。¹H NMR(400MHz,CDCl3)δ9.92(s,1H),7.36-7.38(d,1H),7.19-7.21(d,1H),4.01(s,3H),2.10(s,3H)。

方案I-VIc

一般步骤I-AQ

向化合物I-VIc(10.0g,42.0mmol)的甲醇(150mL)混合物加入NaOH(6.8g,170.0mmol)、水(800mL)。搅拌混合物5分钟，然后加入AgNO₃(8.5g,50.0mmol)。添加后，将反应混合物的温度升至85℃，然后在相同温度下搅拌过夜。通过硅藻土过滤反应混合物并将滤液的pH值调节至2，用EtOAc萃取并用水和盐水洗涤。真空除去溶剂以得到黄色固体形式的化合物I-VId(5.1g,产率56％)。

方案I-VId

一般步骤I-AR

向化合物I-VId(5.1g,24.0mmol)的HOAc(60.0mL)溶液加入47％的aq.HBr(30.0mL)并回流反应混合物4小时。用TLC检测之后，在冰浴中冷却反应混合物，并出现黄色固体。通过过滤收集固体并用水洗涤并干燥以得到黄色固体形式的2,3-二羟基-4-硝基苯甲酸(I-VIe)(4.0g,产率83％)。

方案I-VIe

一般步骤I-AS

向2,3-二羟基-4-硝基苯甲酸(I-VIe)(4.0g,20.0mmol)的甲醇(100mL)溶液加入10％靶碳(0.5g)，并在室温下在40Psi的氢气压力下，氢化混合物。在氢气压力下观察到没有进一步改变之后，通过硅藻土过滤催化剂，并用甲醇洗涤。蒸发滤液至干燥以得到黄色固体形式的4-氨基-2,3-二羟基苯甲酸(I-VIf)(4.9g,产率98％)。

方案I-VIf

一般步骤I-AT

将4-氨基-2,3-二羟基苯甲酸(I-VIf)(4.9g,20.0mmol)倒入含48％aq.HBr(8.0mL)的水(30ml)中并冷却至0℃。缓慢加入NaNO₂(1.5g,22.0mmol)的水(10.0mL)溶液，并在0℃搅拌混合物2小时。在0℃向混合物滴加溴化亚铜(3.1g,22mmol)和氢溴酸(8mL)。在相同温度下搅拌混合物1小时，然后在室温下搅拌过夜。用乙酸乙酯萃取混合物并用盐水洗涤并在无水硫酸钠上干燥。除去溶剂以得到黄色固体形式的4-溴-2,3-二羟基苯甲酸(I-VIg)(3.3g,产率70％)。

方案I-VIg

一般步骤I-AU

向4-溴-2,3-二羟基苯甲酸(I-VIg)(3.3g,14.0mmol)的EtOH(100mL)溶液加入浓H₂SO₄(5.0mL)并回流混合物16小时。除去溶剂并将残留物溶于乙酸乙酯并用水、饱和aq.NaHCO₃和盐水洗涤。除去溶剂以得到黄色固体形式的4-溴-2,3-二羟基苯甲酸乙酯(I-VIh)(3.5g,产率95％)。¹H NMR(400MHz,CDCl3)δ11.14(s,1H),7.20(d,1H),6.96(d,1H),5.93(br,1H),4.34(q,2H),1.34(t,3H)。

方案I-VIh

一般步骤I-AV

向4-溴-2,3-二羟基苯甲酸乙酯(I-VIh)(3.5g,13.5mmol)的DMF(25.0mL)溶液加入Cs₂CO₃(9.7g,30.0mmol)，并在室温下搅拌混合物1小时。向混合物中加入1.2-二溴乙烷(3.1g,17.0mmol)，并在70℃搅拌混合物12小时。用乙酸乙酯稀释反应混合物并用水和盐水洗涤。除去溶剂并用柱色谱在硅胶上纯化残留物(洗脱剂:PE:EtOAc＝4:1)以得到黄色固体形式的化合物I-VIi(2.8g,产率71％)。¹H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.39(d,1H),7.11(d,1H),4.34-4.25(m,6H),1.31(t,3H)。

方案I-VIi

一般步骤I-AW

向化合物I-VIi(2.0g,7.0mmol)的甲苯(25.0mL)溶液加入EtOH(5.0mL)、Na₂CO₃水溶液(2.0M,4.0mL)以及4-(甲氧基羰基)苯基硼酸，并在氮气氛下搅拌混合物10分钟，然后加入Pd(Ph₃P)₄(400mg)，并交换氮气三次。在80℃搅拌混合物10小时并冷却至室温。用乙酸乙酯萃取反应混合物并用水和盐水洗涤。除去溶剂并用柱色谱在硅胶上纯化残留物(洗脱剂:PE:EtOAc＝6:1)以得到黄色固体形式的化合物I-VIj(1.5g,产率63％)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.09(d,1H),7.60(d,2H),7.46(d,1H),6.92(d,1H),4.41-4.34(m,6H),3.86(s,3H),1.39(t,3H)。

方案I-VIj

一般步骤I-AX

向化合物I-VIj(470mg,1.4mmol)的THF(8.0mL)溶液加入aq.LiOH(2.0M,5mL,10.0mmol)并在室温下搅拌混合物17小时。除去溶剂并用2.0M HCl将混合物的pH值调节至2。通过过滤收集固体并用水洗涤并干燥以提供白色固体形式的化合物I-VIk(340mg,产率80％)。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ13.0(brs,2H),8.05(d,2H),7.71(d,2H),7.37(d,1H),7.01(d,1H),4.35-4.41(dt,4H)。

方案I-VIk

一般步骤I-AY

回流化合物I-VIk(300mg,1.0mmol)和SOCl₂(5.0mL)的混合物2小时。在减压下除去多余的SOCl₂。用甲苯(5mL)三次共蒸发残留物以得到黄色固体形式的化合物I-VIm(336mg,产率99％)。

方案I-VIm

一般步骤I-AZ

将化合物I-VIm(336mg,1.0mmol)溶于DCM(10.0mL)中并在-10℃滴加至CH₂N₂(1.0M的乙醚中,6.0mL,6.0mmol)的DCM(10.0mL)溶液中。添加后，在0℃搅拌反应混合物1小时，然后在-10℃向该溶液中滴加47％HBr水溶液(1mL)，并在相同温度下搅拌混合物30分钟。将混合物升至室温并搅拌另外30分钟，并用乙酸乙酯稀释并用水、饱和NaHCO₃以及盐水洗涤。在无水硫酸钠上干燥溶剂并除去溶剂以提供黄色固体形式的化合物I-VIn(210mg,产率46％)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.02(dd,2H),7.61(dd,2H),7.43-7.41(d,1H),6.92(d,1H),4.53(s,2H),4.42(s,2H),4,38-4.36(m,2H),4.29-4.27(m,2H)。

方案I-VIn

一般步骤I-BA

向N-Boc-L-脯氨酸(I-If)(430mg,2.0mmol)的DMF(8.0mL)溶液中加入碳酸钾(276mg,2.0mmol)并在室温下搅拌混合物2小时。向该混合物滴加化合物I-VIn(180mg,0.40mmol)的DMF(2.0mL)溶液并在室温下搅拌所得混合物12小时。用乙酸乙酯稀释混合物并用水和盐水洗涤。蒸发溶剂以提供黄色固体形式的化合物I-VIo(150mg,产率52％)。MS(ESI)m/z(M+H)⁺723.3。

方案I-VIo

一般步骤I-BB

向化合物I-VIo(100mg,0.14mmol)的二甲苯(10.0mL)溶液加入NH₄OAc(3.0g,40.0mmol)，并回流混合物16小时。用乙酸乙酯稀释反应混合物并用水和盐水洗涤。除去溶剂并用柱色谱在硅胶上纯化残留物以得到黄色固体形式的化合物I-VIp(38mg,产率41％)。MS(ESI)m/z(M+H)⁺683.2。

方案I-VIp

一般步骤I-BC

向化合物I-VIp(38mg,0.058mmol)的甲醇(3.0mL)溶液中加入HCl的甲醇溶液(4.0M,2.0mL,8.0mmol)，并在室温下搅拌混合物4小时。除去溶剂以得到黄色固体形式的化合物I-VIq(33.7mg,96％的产率)。MS(ESI)m/z(M+H)⁺483。

方案I-VIq

一般步骤I-BD

向化合物I-VIq(32.5mg,0.05mmol)的DCM(8.0mL)悬浮液加入三乙胺(202mg,2.0mmol)，并在室温下搅拌混合物1小时，然后加入化合物VII-IIA(18.0mg,0.11mmol)、HATU(41mg,0.11mmol)，并在室温下搅拌混合物12小时。用DCM稀释混合物并用水和盐水洗涤。用硫酸钠干燥溶剂并除去以得到粗产物，用制备HPLC纯化以得到白色固体形式的化合物309(9.1mg,产率22％)。MS(ESI)m/z(M+H)⁺797.2。

实施例I-XI:化合物314的制备

方案I-XI

方案I-XIa

一般步骤I-CS

在室温下，搅拌4-溴-3-硝基苯甲醚(5g,21.6mmol)和Fe(9.7g,0.17mol)的30mL乙酸混合物2小时。在减压下除去溶剂之后，将褐色残留物倒入100mL水中并用10％的aq.K₂CO₃处理直至pH 10。用EtOAc(150mL×2)萃取混合物并分离混合的有机提取物，在MgSO₄上干燥并浓缩以得到化合物I-XIa.(3g,产率:52％)。MS(ESI)m/z(M+H)⁺203。

方案I-XIb

一般步骤I-CT

将3-硝基苯磺酸钠盐(3.3g,15mmol)加入到化合物I-XIa(3g,15mmol)和丙烷-1,2,3-三醇(3.6g,0.039mol)的混合物中。然后加入12mL的浓H₂SO₄并在140℃在N₂保护下搅拌反应混合物3小时。冷却至室温后，加入水(18g)并滤除浅灰色副产物。用aq.NaOH(20mL,50％)稀释滤液并用CH₂Cl₂(80mL)萃取。分离有机层，用盐水(20mL)洗涤，在MgSO₄上干燥并浓缩。通过柱色谱纯化残留物以得到化合物I-XIb(600mg,产率:19％)。MS(ESI)m/z(M+H)⁺238。

方案I-XIc

一般步骤I-CU

在-78℃下，向化合物I-XIb(600mg,2.6mmol)的10mL无水CH₂Cl₂混合物滴加BBr₃(1.3g,5.2mmol)。添加后，将反应混合物升至室温并搅拌5小时。然后加入水(10mL)并用EtOAc(100mL×3)萃取，分离有机层，干燥并在减压下浓缩。通过柱色谱纯化残留物以得到化合物I-XIc(60mg,产率:11％)。MS(ESI)m/z(M+H)⁺223。

方案I-XId

一般步骤I-CV

在80℃下，搅拌化合物I-XIc(2g,8mmol)、4-甲氧基-苯基硼酸(1.3g,8mmol)、Pd(dppf)₂Cl₂(0.3g,0.5mmol)和Na₂CO₃(1.8g,16mmol)的THF/H₂O(36mL/4mL)混合物过夜。在减压下浓缩后，用水稀释残留物并用EtOAc萃取。分离有机层，在Na₂SO₄上干燥并在减压下浓缩。通过柱色谱纯化残留物(用PE:EA＝6:1洗脱)以得到化合物I-XId(2.8g,产率:62.2％)。

方案I-XIe

一般步骤I-CW

在-78℃下，向化合物I-XId(900mg,3.58mmoL)的10mL无水CH₂Cl₂的混合物滴加BBr₃(1.8g,7.16mmoL)。添加后，将反应混合物升至室温并搅拌5小时。然后加入水(10mL)并用EtOAc(100mL×3)萃取，分离有机层，干燥并在减压下浓缩。通过柱色谱纯化残留物(DCM/MeOH＝8/1)以得到化合物I-XIe(600mg,产率:71％)。MS(ESI)m/z(M+H)⁺238。

方案I-XIf

一般步骤I-CX

在-20℃下，向化合物I-XIe(800mg,3.36mmoL)和TEA(2.26g,8.07mmol)的20mLDCM溶液滴加Tf₂O(2.26g,8.07mmol)。在-20℃搅拌反应混合物10分钟，然后在室温下搅拌30分钟。用30mL冰水(5mL)淬灭后，用DCM(20mL)萃取混合物，用盐水(10mL)洗涤，在Na₂SO₄上干燥并在减压下浓缩。通过柱色谱纯化残留物(用PE:EA＝5:1洗脱)以得到化合物I-XIf(0.7g,产率:42％)。MS(ESI)m/z(M+H)⁺502。

方案I-XIg

一般步骤I-CY

在回流下，搅拌化合物I-XIf(700mg,1.4mmol)、双戊酰二硼(851.7mg,3.35mmol)和KOAc(274.4mg,2.8mmol)以及Pd(dppf)₂Cl₂(70mg)的15mL二噁烷混合物过夜。然后浓缩并用盐水(10mL)稀释残留物，用DCM(50mL×3)萃取。在Na₂SO₄上干燥混合的有机层，并在减压下浓缩。通过柱色谱纯化残留物(用PE:EA＝10:1洗脱)以得到化合物I-XIg(250mg,产率:45.6％)。

方案I-XIh

一般步骤I-CZ

在回流下，搅拌化合物I-XIg(100mg,0.22mmol)、化合物I-VIIIn(164.4mg,0.52mmol)、Na₂CO₃(93.28mg,0.88mmol)和Pd(dppf)Cl₂(16.0mg,0.022mmol)的THF/H₂O(10mL/1mL)混合物过夜。在减压下浓缩后，用水稀释残留物，用EtOAc萃取。分离有机层，在Na₂SO₄上干燥并在减压下浓缩。通过制备HPLC纯化残留物以得到化合物I-XIh(95mg,产率:54.7％)。MS(ESI)m/z(M+H)⁺676。

方案I-XIi

一般步骤I-DA

在室温下搅拌化合物I-XIh(120mg,0.17mmol)的6mL 4M HCl/MeOH混合物1小时。然后在减压下浓缩混合物以得到化合物I-Xii，将其直接用于下一步而不进行进一步纯化。

方案I-XIj

一般步骤I-DA

方案I-XIj

一般步骤I-DA

将化合物I-XIi(87.3mg,0.504mmoL)溶于5mL CH₃CN，然后向上述溶液中加入HOBt(68.04mg,0.504mmol)，搅拌混合物约10分钟。然后向上述反应混合物中加入化合物VII-IIA(100mg,0.21mmol)、EDC(97mg,0.504mmol)和DIEA(65mg,0.504mmol)。在室温下搅拌反应混合物10小时。用水(5mL)稀释混合物后，用EtOAc(20mL)萃取混合物。分离有机层，用无水MgSO₄干燥并在减压下浓缩，通过制备HPLC纯化残留物以得到化合物314(18mg,产率:11％)。¹H NMR(300MHz,CDCl₃):δ8.86(s,1H),7.63(m,6H),7.33(m,1H),7.15(s,1H),5.37(m,2H),5.26(m,1H),5.22(m,1H),4.28(m,2H),3.81(m,2H),3.75(m,8H),2.96(s,2H),2.30(m,2H),2.20(m,2H),2.15(m,2H),1.93(m,2H),0.83(m,12H).MS(ESI)m/z(M+H)⁺79。

实施例I-XII:化合物315的制备

方案I-XII

方案I-XIIa

一般步骤I-DB

向5-溴喹啉-8-醇(8g,0.036mol)、碳酸钾(5.68g,0.04mol)的50mL DMF混合物加入CH₃I(5.68g,0.04mol)。在室温下搅拌反应混合物5小时，然后加入水并通过过滤收集沉淀以得到化合物I-XIIa(5.5g,64％)。MS(ESI)m/z(M+H)⁺238。

方案I-XIIb

一般步骤I-DC

在80℃下，搅拌化合物I-XIIa(3g,13mmol)、4-甲氧基-苯基硼酸(1.92g,13mmol)和Pd(dppf)₂Cl₂(0.475g,0.65mmol)和Na₂CO₃(2.75g,26mmol)的THF/H₂O(36mL/4mL)混合物过夜。在减压下浓缩后，用水稀释残留物并用EtOAc萃取。分离有机层，在Na₂SO₄上干燥并在减压下浓缩。通过柱色谱纯化残留物(用PE:EA＝6:1洗脱)以得到化合物I-XIIb(2.6g,产率:75％)。MS(ESI)m/z(M+H)⁺266。

方案I-XIIc

一般步骤I-DD

在-78℃下，向化合物I-XIIb(900mg,3.58mmoL)的10mL无水CH₂Cl₂混合物滴加BBr₃(1.8g,7.16mmoL)。添加后，将反应混合物升至室温并搅拌5小时。然后加入水(10mL)，并用EtOAc(100mL×3)萃取，分离有机层，干燥并在减压下浓缩。通过柱色谱纯化残留物(DCM/MeOH＝8/1)以得到化合物I-XIIc(0.68g,产率:76％)。MS(ESI)m/z(M+H)⁺238。

方案I-XIId

一般步骤I-DE

在-20℃下，向化合物I-XIIc(800mg,3.36mmoL)和TEA(2.26g,8.07mmol)的20mLDCM溶液滴加Tf₂O(2.26g,8.07mmol)。在-20℃搅拌反应混合物10分钟，然后在室温下搅拌30分钟。用30mL冰水(5mL)淬灭后，用DCM(20mL)萃取混合物，用盐水(10mL)洗涤，在Na₂SO₄上干燥并在减压下浓缩。通过柱色谱纯化残留物(用PE:EA＝5:1洗脱)以得到化合物I-XIId(0.7g,产率:42％)。MS(ESI)m/z(M+H)⁺502)。

方案I-XIIe

一般步骤I-DF

在回流下，搅拌化合物I-XIId(1g,1.99mmol)、双戊酰二硼(2g,7.87mmol)和KOAc(782mg,7.97mmol)和Pd(dppf)₂Cl₂(146mg)的15mL二噁烷混合物过夜。然后，浓缩并用盐水(10mL)稀释残留物，用DCM(50mL×3)萃取。在Na₂SO₄上干燥混合的有机层，并在减压下浓缩。通过柱色谱纯化残留物(用PE:EA＝10:1洗脱)以得到化合物I-XIIe(1.2g,产率:92％)。

方案I-XIIf

一般步骤I-DG

在回流下，搅拌化合物I-XIIe(500mg,1.09mmol)、化合物I-VIIIn(665mg,2.10mmol)、Na₂CO₃(463mg,4.37mmol)和Pd(dppf)₂Cl₂(80mg,0.11mmol)的THF/H₂O(10mL/1mL)过夜。在减压下浓缩后，用水稀释剩余的残留物，用EtOAc萃取。分离有机层，在Na₂SO₄上干燥并在减压下浓缩。通过制备HPLC纯化残留物以得到化合物I-XIIf(30mg,产率:6.5％)。MS(ESI)m/z(M+H)⁺676。

方案I-XIIg

一般步骤I-DH

在室温下，搅拌化合物I-XIIf(30mg,0.038mmol)的6mL 4M HCl/MeOH混合物1小时。然后在减压下浓缩混合物以得到化合物I-XIIg，将其直接用于下一步而不进行进一步纯化。

方案I-XIh

一般步骤I-DI

将化合物I-XIIg(23mg,0.048mmoL)溶于5mL CH₃CN，然后向上述溶液中加入HOBt(17mg,0.1151mmol)，搅拌混合物约10分钟。然后向上述反应混合物加入化合物VII-IIA(17mg,0.096mmol)、EDC(24mg,0.1151mmol)和DIEA(15mg,0.1151mmol)。在室温下搅拌反应混合物10小时。用水(5mL)稀释后，用EtOAc(20mL)萃取混合物。分离有机层，用无水MgSO₄干燥并在减压下浓缩，并通过制备HPLC纯化残留物以得到化合物315(8.3mg,产率:29.64％)。¹H NMR(300MHz,CDCl₃):δ9.01(d,J＝2.8Hz,1H),8.35(d,J＝8.4Hz,1H),8.22(d,J＝7.6Hz,1H),8.14(s,1H),7.82(d,J＝8.4Hz,1H),7.76(s,1H),7.63(d,J＝8Hz,1H),7.56(d,J＝7.6Hz,2H),7.13(m,1H),7.06(m,1H),5.38(m,2H),5.15(m,2H),4.14(m,2H),4.01(m,2H),3.96(m,2H),3.61(m,3H),3.55(m,3H),2.47(m,3H),2.05(m,3H),0.83(m,12H).MS(ESI)m/z(M+H)⁺790。

实施例I-XX:化合物324和325的制备

方案I-XXa

方案I-XX

一般步骤I-GA

向化合物I-Ii(80mg,0.169mmol)的无水DCM(5mL)溶液加入化合物I-XXa(59.2mg,0.338mmol)、HATU(128.4mg,0.338mmol)和DIEA(54.4mg,0.42mmol)。在室温下搅拌所得混合物过夜。反应完成后，通过TLC监测，将混合物倒入水(10mL)中，用CH₂Cl₂(30mL×3)萃取，在Na₂SO₄上干燥混合的有机层，真空浓缩。通过制备-HPLC纯化残留物以得到白色固体形式的化合物324(46mg,产率35％)。MS(ESI)m/z(M+H)⁺789.4。

方案I-XXb

一般步骤I-GB

向化合物I-Ii(80mg,0.169mmol)的无水DCM(5mL)溶液加入N-甲氧基羰基氨基乙酸(I-XXb；45.1mg,0.338mmol)、HATU(128.4mg,0.338mmol)和DIEA(54.4mg,0.42mmol)。在室温下搅拌所得混合物过夜。反应完成后，通过TLC监测，将反应混合物倒入水中(10mL)，用CH₂Cl₂(30mL×3)萃取，在Na₂SO₄上干燥混合的有机层并真空浓缩。通过制备-HPLC纯化残留物以得到白色固体形式的化合物325(32mg,产率27％)。MS(ESI)m/z(M+H)⁺705.3。

实施例I-XXI:化合物326的制备

方案I-XXI

方案I-XXIa

一般步骤I-GC

将L-脯氨酸甲酯(1g,5.2mmol)和苯基甲磺酰氯(0.87g,5.2mmol)溶于DCM(10mL)，在0℃向所得溶液加入TEA(1.58g,15.6mmol)，在室温下搅拌反应混合物1小时。然后用EtOAc(100mL)稀释混合物并用水洗涤，在Na₂SO₄上干燥，真空浓缩以得到化合物I-XXIa(1.5g,产率100％)，将其直接用于下一步而不进行进一步纯化。

方案I-XXIb

一般步骤I-GD

向化合物I-XXIa(0.8g,2.83mmol)的MeOH(20mL)溶液加入NaOH(0.8g,20mmol)，在0℃搅拌反应混合物1小时。然后用aq.HCl(1M)酸化混合物至pH＝4，并用EtOAc(50mL×3)萃取，用盐水洗涤，在Na₂SO₄上干燥并真空浓缩以得到化合物I-XXIb(0.7g,产率92％)，将其直接用于下一步而不进行进一步纯化。

方案I-XXIc

一般步骤I-GE

向化合物I-XXIc(0.3g,1.04mmol)的氯仿(15mL)和乙酸乙酯(5mL)溶液加入CuBr₂(573mg,2.6mmol)，回流反应混合物3小时。然后冷却混合物至室温，用EtOAc(100mL)稀释，用盐水洗涤，在Na₂SO₄上干燥并真空浓缩以得到化合物I-XXId(240mg,产率44％)，将其直接用于下一步而不进行进一步纯化。

方案I-XXId

一般步骤I-GF

向化合物I-XXId(240mg,0.538mmol)的DCM(20mL)溶液加入DIEA(206mg,1.6mmol)和化合物I-XXIb(288mg,1.03mmol)，在室温下搅拌反应混合物过夜。然后用EtOAc(100mL)稀释混合物，用盐水洗涤，在Na₂SO₄上干燥并真空浓缩。用快速色谱纯化残留物以得到化合物I-XXIe(200mg,产率25％)。MS(ESI)m/z(M+H)⁺823.1。

方案I-XXIe

一般步骤I-GG

向化合物I-XXIe(200mg,0.24mmol)的甲苯(5mL)混合物加入NH₄OAc(5g,65mmol)，然后加热反应混合物至回流过夜。然后冷却混合物至室温，用水(20mL)稀释，用EtOAc(30mL×3)萃取，用盐水洗涤，在Na₂SO₄上干燥，真空浓缩。用制备-HPLC纯化残留物以提供化合物326(29.3mg,产率15％)。MS(ESI)m/z(M+H)⁺783.1。

HCV复制子检验

在37℃下，将包含具有完整荧光素酶报道基因的HCV复制子的Huh7细胞保持在5％CO₂的含10％热灭活胎牛血清(FBS；Mediatech,Herndon,VA)、2mM L-谷氨酸盐(CambrexBioscience,Walkersville,MD)、1％非必需氨基酸(Lonza,Walkersville,MD)、50IU/mL青霉素(Mediatech,Herndon,VA)、50mg/mL链霉素(Mediatech,Herndon,VA)和0.5mg/mLG418(Promega,Madison,WI)的Dulbecco修饰的Eagle培养基(DMEM；Mediatech,Herndon,VA)中。每隔2-3天，按1:3或4来再分细胞。

在试验前24小时，收集包含子基因组HCV复制子的Huh7细胞，计数，并以5000细胞/孔，将其放置在Nunclon 96-孔组织培养板(ThermoFisher,Rochester,NY)中，用100mL标准维持培养基(上述)滴加上述培养板，并以上述条件孵育。为了开始试验，除去培养基并用90mL缺乏G418的维持培养液替换。在二甲亚砜(DMSO)中一式两行连续三倍稀释试验化合物以用于每一EC50测定。在缺乏血清和G418的DMEM中，将这些化合物溶液稀释十倍。向双份的组织培养板中加入10mL的这些化合物溶液的培养基。最终体积为100μL，DMSO浓度为1％。调节化合物浓度以适当确定剂量应答曲线。典型的稀释系列范围为100mM至1.69nM，最终浓度为1nM至16.9fM。在37℃孵育板约48小时。

孵育后，从两个相同板的一个中除去培养基，并使用Bright-Glo荧光素酶检验试剂盒(Promega,Madison,WI)，根据制造商的指示，测量复制子-报告荧光素酶活性。使用XLfit软件(IDBS Inc.,Guildford,UK)将荧光素酶活性与化合物浓度的对数的半对数曲线拟合为4-参数逻辑函数以测定EC₅₀。

表20:活性实例

化合物	EC₅₀nM
		301	C
302	C
		303	B
304	C
		305	A
306	C
		307	C
308	C
		309	C
310	C
		311	C
312	C
		314	C
315	C
		323	C
324	C
		325	C
326	A
		327	C
328	C
		329	C
330	C

A表示EC₅₀大于100nM

B表示EC₅₀为10nM至100nM

C表示EC₅₀小于10nM 。

Claims

1.具有下列结构的化合物或其药物可接受的盐：

2.药物组合物，其包含药物可接受的赋形剂和权利要求1所述的化合物或其药物可接受的盐。

3.权利要求1所述的化合物或其药物可接受的盐或权利要求2所述的组合物在制备治疗个体的HCV感染的药物、或在制备治疗个体肝纤维化药物、或在制备增加患有C型肝炎病毒感染的个体的肝功能的药物中的用途。