CN104163818A

CN104163818A - 2-氨基噁唑类化合物及其制备方法和用途

Info

Publication number: CN104163818A
Application number: CN201410335767.XA
Authority: CN
Inventors: 熊远珍; 何小兵; 周颖; 柴星星
Original assignee: Nanchang University
Current assignee: Nanchang University
Priority date: 2014-07-15
Filing date: 2014-07-15
Publication date: 2014-11-26

Abstract

本法属于医药化合物合成领域，涉及一种Src/Abl激酶双抑制剂药物2-氨基噁唑类化合物及其制备方法和用途。本发明提供了一种新的药物，具有广阔的市场前景。

Description

2-氨基噁唑类化合物及其制备方法和用途

技术领域

本发明属于化学合成领域，具体涉及一种Src/Abl激酶双抑制剂药物合成。

背景技术

慢性髓系白血病（CML）是首个被发现有固定细胞遗传学异常的恶性肿瘤，全球年发病率为1.6～2/10万人，它的主要病因是由于9号和22号染色体相互易位后，致癌基因Abl转移到长臂断裂点区域形成Bcr-Abl融合基因，其产物之一是一种异常的酪氨酸激酶(tyrosine protein kinase, TPK)受体蛋白P210 ^Bcr-Abl，此蛋白不需要与相应的配体结合即可自身磷酸化，并同时引起许多重要的底物蛋白磷酸化，从而激活多条信号（包括Src家族成员）转导途径，使细胞增殖过度、分化异常和凋亡受阻。目前的研究一致认为，Bcr-Abl蛋白异常增高的TPK活性是导致CML发生的主要原因。

发明内容

本发明的目的在于提供一种Src/Abl激酶双抑制剂药物2-氨基噁唑类化合物及其制备方法与用途。

该2-氨基噁唑类化合物结构式为：

，

其中R＝H，C_1-5的烷基, 卤素；R₁＝H，C_1-5的烷基, 卤素,CN；X=N, CH, R₃=H, CH₃, 卤素, CN, NO₂; R₄=H, CH₃, 卤素, CN, NO₂;

R₂ 为羟乙基哌嗪，羟乙基哌啶，哌嗪乙胺基，吗啉乙胺基，哌啶乙胺基

哌嗪甲胺基，吗啉甲胺基，哌啶甲胺基，羟乙基哌嗪甲胺基，羟乙基哌啶甲胺基， C_1-5的烷胺基。

本发明还提供了前述2-氨基噁唑类化合物的制备方法，技术路线图如图1：

包括如下步骤：

取代芳胺，在吡啶和四氢呋喃中与E-3-乙氧基丙烯酰氯反应得E-N-芳基-3-乙氧基丙烯酰胺；E-N-芳基-3-乙氧基丙烯酰胺与NBS发生加成反应后，立即与尿素缩合关环，得化合物式（4a-c）；化合物式（4a-c）通过再分别与二氯嘧啶或二氯吡啶，以及羟乙基哌嗪分别反生亲核取代得到最终目标产物；或者化合物式（4a-c）通过与芳酰氯或烷基酰氯反应，得到最终目标产物。

本发明的有益效果是：提供了一种新型的Src/Abl激酶双抑制剂及其制备方法，其抑制K562细胞活性抑制率高、效果好。

附图说明

图1 本发明2-氨基噁唑类化合物合成路线图。

具体实施方式

下面根据图1的合成路线图，对本发明做进一步的说明。

实施例1 2-氨基噁唑类化合物制备

E-N-对甲苯基-3-乙氧基丙烯酰胺(3a): 取对甲苯胺（3.0g，28mmol），吡啶（3.2mL，40mmol）和四氢呋喃（40mL）加入反应瓶中，冰浴，向其中缓慢滴加E-3-乙氧基丙烯酰氯(2)（3.6mL，30mmol），滴完室温反应2h；

在0-5 ℃加入1mol/L的HCl（7.0mL）,再向其中加入40mL水，减压浓缩，向浓缩液中加入30mL甲苯，冰浴搅拌10min，抽虑，滤渣用20mL水洗涤，真空干燥得淡白色产物5.0g，产率87.0%，¹H-NMR(600 MHz, DMSO-d6)δ : 1.27 (t,3H, J =7.0Hz)、2.16 ( s, 3H )、3.94 (q,2H, J=7.0 Hz)、5.58 ( d, 1H, J=12.4 Hz )、7.18 -7.23 (m, 2H, J=7.5Hz)、7.32(d, 1H, J=7.5 Hz)、7.46 (d,1H, J=12.4 Hz)、9.29 (s, 1H) 。IR(KBrcm-1): 3257，1662，1622，1508，1292，1161；

2-氨基-N-对甲苯基-5-噁唑甲酰胺(5a)：在150mL三口瓶中，加入40mL水，40mL二氧六环和E-N-对甲苯基-3-乙氧基丙烯酰胺(3a)（5.0g，25mmol），冰浴，向反应瓶中加入NBS（4.4g，25mmol），此温下保持1h，再室温反应2h；

向反应瓶中加入尿素（1.7g，29mmol），室温反应0.5h，再60℃反应3h，80℃反应1h，冷却至室温，加入浓氨水调PH 8～9，浓缩，抽虑，滤饼水洗，真空干燥，得黄色产物2.5g，产率45.7%，m.p.271-272 °C。¹H-NMR (600 MHz, DMSO-d6 ) δ: 2.26(s, 3H )、7.12( d, 2H, J= 8.4 Hz)、7.30( s, 2H)、7.53 ( d, 2H, J=8.4 H z)、7.61(s, 1H )、9.70 (s, 1H )，¹³C-NMR (DMSO-d6, 400 MHz) δ(ppm): 20.97, 42.11, 120.76, 120.76, 127.41, 128.50, 128.96, 128.96, 129.59, 129.59, 129.80, 129.80, 133.22, 135.14, 136.59, 140.73, 159.74, 161.43, 170.28;Mass Spectra (m/z) [M + H]⁺ ：217.49; IR(KBrcm-1): 3304，3103，1663，1633，1607，1574，1529，1286，1173；

N-对甲苯基-2-苯甲酰胺-5-噁唑甲酰胺(6d)：取苯甲酸和5mL二氯甲烷置于50mL单口瓶中，冰浴，向其中滴加（0.5mL，6.95mmol）二氯亚砜，之后缓缓升温至75℃，至无气体逸出，减压抽除溶剂和过量二氯亚砜。向其中加入5mL四氢呋喃，转移至滴液漏斗中；

于50mL单口瓶中，加入2-氨基-N-对甲苯基-5-噻唑甲酰胺(4a)（0.5g，2.15mmol），5mL四氢呋喃和(0.7mL、4.99mmol)三乙胺，冰浴，缓缓滴加前面制备的苯甲酰氯，滴完，继续反应1h，再室温反应2h。减压蒸除溶剂，向其中加入5mL二氯甲烷和20mL水，搅拌5min，抽滤，滤渣用1mL二氯甲烷和5mL水洗涤，丙酮重结晶，得白色固体0.62g，产率86.1%，¹H-NMR (600 MHz, DMSO-d6 ) δ: 2.29(s, 3H )、7.17( d, 2H, J=8.4H z)、7.57(t, 2H, J=7.8H z)、7.61( d, 2H, J=8.4H z)、7.67(t, 1H, J=7.2H z)、8.13(d, 2H, J=7.2H z)、8.40( s, 1H)、10.17(s, 1H )、12.93 (s, 1H ) ，¹³C-NMR (DMSO-d6, 400 MHz) δ(ppm): 20.97, 42.11,120.76, 120.76, 127.41, 128.50, 128.96, 128.96, 129.59, 129.59, 129.80, 129.80, 133.22, 135.14, 136.59, 140.73, 159.74, 161.43, 170.28;Mass Spectra(m/z) [M + H]⁺ 337.87、[M + Na]⁺ 359.9; IR(KBrcm-1):3454，3136，1676，1634，1514，1298，1182。

实施例2

4a-c 类化合物的制备如实施例1所示；

2-(6-氯-2-甲基嘧啶-4-氨基)-N-取代苯基-5-噁唑甲酰胺的合成

化合物4a-c（41 mmol）, 4 ,6-二氯-2-甲基吡啶(8.0 g, 41mmol)和THF（105 ml)加至250 mL三颈瓶中，冰盐浴冷却至-10-~5 ℃，加入新鲜制备的叔丁醇钠（25.8 g, 250 mmol), -10 ℃搅拌反应1.5 h。加入2 mol/L的盐酸调至中性，0 ℃搅拌1.5h,过滤，滤饼用少量水洗涤，干燥，得淡黄色固体6（15g, 88%) mp>300℃；

4 N-取代苯基-2-[ 6-[4-(3-羟乙基)-1-哌嗪基]-2-甲基-4-嘧啶基氨基]-5- 噁唑甲酰胺的合成

将上述化合物 (8.16 mmol)溶于30 mL N,N-二甲基甲酰胺中, 加入1-( 2-羟乙基)哌嗪(3.2 g, 21 mmol)及三乙胺(1.6 g, 16 mmol), 加热至80 ℃, 搅拌4 h。冷却至室温, 将其缓慢倒入100 m L 水中, 搅拌10 m in, 抽滤, 将滤饼加入20 mL体积分数为80% 的乙醇水溶液中, 加热至80 ℃, 搅拌5min, 再缓慢滴加5mL水,冷却至室温,抽滤, 干燥得白色固体3.5 g, 收率85%。

实施例3 本发明2-氨基噁唑类化合物对人CML细胞K562细胞抑制活性测试

方法描述如下：使本发明2-氨基噁唑类化合物在K562细胞中，于不同时间，用MTT法测定使50％的未感染细胞发生细胞病变的浓度IC₅₀；

材料与方法：各化合物的抑制K562细胞活性由药物引起的细胞病变的抑制作用效率来监控；

具体操作如下：在CO₂孵箱，细胞在含10%灭活的小牛血清的RPMI1640的培养基中培养传代。将对数生长期的细胞离心后配成1*10⁵的混悬液，接种于含10%新生牛血清的RPMI-1640中，按10000个/孔接种于96孔板，每孔加100ul含不同浓度的药物及相应溶剂的新鲜培养基，加入0.4%的Trypan blue，用血球计数板分别计数4个大方格细胞存活、死亡数，计算存活率；

需要强调的是，当化合物水溶性较差，需要用DMSO才能溶解时， DMSO在MT-4细胞培养介质中最终浓度小于2％。因为DMSO能影响测试化合物的抗细胞活性，对含有相同浓度DMSO溶液抗细胞活性对比空白实验也应该平行进行。本发明采用临床用药达沙替尼作对照品，部分目标化合物对K562细胞的抑制活性结果见表1：

表1.化合物抑制K562细胞活性

实验结果表明，化学结构通式中所包含的化合物普遍具有较强的抑制K562细胞活性,其中化合物4b和6c与达沙替尼活性相当。

Claims

1.2-氨基噁唑类化合物，其结构式为：

，其中

R＝H，C_1-5的烷基，卤素； R₁＝H，C_1-5的烷基，卤素，CN；

X=N，CH；

R₃=H，CH₃，卤素， CN，NO₂；

R₄=H，CH₃，卤素，CN，NO₂；

R₂为羟乙基哌嗪，羟乙基哌啶，哌嗪乙胺基，吗啉乙胺基，哌啶乙胺基，

哌嗪甲胺基，吗啉甲胺基，哌啶甲胺基，羟乙基哌嗪甲胺基，羟乙基哌啶甲胺基，或C_1-5的烷胺基。

2.权利要求1所述2-氨基噁唑类化合物的制备方法，其特征在于包括如下步骤：取代芳胺，在吡啶和四氢呋喃中与E-3-乙氧基丙烯酰氯反应得E-N-芳基-3-乙氧基丙烯酰胺；E-N-芳基-3-乙氧基丙烯酰胺与NBS发生加成反应后，立即与尿素缩合关环，得式（4a-c）化合物；式（4a-c）化合物通过再分别与二氯嘧啶或二氯吡啶，以及羟乙基哌嗪分别反生亲核取代得到最终目标产物；或者式（4a-c）化合物通过与芳酰氯或烷基酰氯反应，得到最终目标产物。

3.权利要求1所述2-氨基噁唑类化合物在制备抑制K562细胞活性药物中的应用。