CN104042928A - 一种治疗糖尿病的药物组合物及其制备方法和用途 - Google Patents

Abstract

本发明提供了一种治疗糖尿病的药物组合物，它是由如下重量配比的原料制备而成的制剂：石斛40-60份、葫芦巴5-15份。本发明还提供给了该药物组合物的制备方法和用途。本发明药物组合物可以有效降低患者血糖、血脂水平，具有良好的清除自由基作用以及对胰岛B细胞的保护作用，为临床治疗糖尿病、高血脂和抗氧化提供了新的用药选择。

Description

一种治疗糖尿病的药物组合物及其制备方法和用途

技术领域

本发明涉及一种新的药物组合物及其制备方法和用途。

背景技术

糖尿病（diabetes）是由遗传因素、免疫功能紊乱、微生物感染及其毒素、自由基毒素、精神因素等等各种致病因子作用于机体导致胰岛功能减退、胰岛素抵抗等而引发的糖、蛋白质、脂肪、水和电解质等一系列代谢紊乱综合征，临床上以高血糖为主要特点，典型病例可出现多尿、多饮、多食、消瘦等表现，即“三多一少”症状，糖尿病（血糖）一旦控制不好会引发并发症，导致肾、眼、足等部位的衰竭病变，且无法治愈。它是需要健管家进行慢性病健康管理的主要病种之一。根据国际糖尿病联盟(IDF)统计，在2000年全球有糖尿病患者1.51亿，而目前全球有糖尿病患者2.85亿，按目前速度增长的话，估计到2030年全球将有近5亿人患糖尿病。中国是世界上人口最多的国家，2008年的调查结果显示，在20岁以上的成人中，年龄标化的糖尿病患病率为9.7％，而糖尿病前期的比例更高达15.5％。国外给它的别名叫“沉默的杀手”（Silent Killer），特别是“成人型糖尿病”。四十岁以上的中年人染患率特别高，在日本，四十岁以上的人口中占10%，即十人当中就有一位糖尿病患者。一旦患上糖尿病，将减少寿命十年之多，可能发生的并发症遍及全身。糖尿病分1型糖尿病、2型糖尿病、妊娠糖尿病及其他特殊类型的糖尿病。糖尿病的发病率逐年递增，已成为继心血管疾病、癌症之后严重威胁人类健康的第三大疾病。中药治疗糖尿病有极大的优势和潜力。糖尿病的治疗形势十分严峻。西医目前的主要治疗方法为饮食、运动控制的基础上加用口服药物或胰岛素，但是各有其适应症及不良反应。中医药治疗糖尿病注重整体调理、辨证论治，具有改善症状明显，治疗手段多样，对慢性并发症疗效显著等优势。

中药石斛(D一endrobium nobil Lindl)为兰科石斛属多年生草本植物，其入药始载于《神农本草经》，其味甘、性微寒、归胃、肾经，具有益胃生津、滋阴清热、润肺止咳、明目强身等功效。文献报道石斛属植物具有降低血糖、保护和修复胰腺组织的结构和功能的作用。生物碱是石斛药材中最重要的活性成分之一，也是最早分离并进行结构确认的化合物。金钗石斛中总生物碱的含量较高为0.4％，为其特征性成分之一。

葫芦巴(Trigonelafoenum—graecum L.)，又名芸香草、香苜蓿，系豆科蝶形花亚科一年生草本植物，目前我国不少省区均有栽培或野生资源分布。我国历代编修的本草著作均收载有葫芦巴条目，以种子入药，入肝、肾二经，味苦，性温，无毒，补肾阳，祛寒湿，属于常用中药材之一，目前我国中医常将其用来补肾、祛(肠)风和健胃，临床主治肠道疾病、痛风、外伤及炎症、高血脂和糖尿病。其在临床中的降血糖作用可能源于胶黏性纤维对葡萄糖吸收的抑制作用，文献报道，接受葫芦巴的患者每天摄取约80g纤维，也观察到葫芦巴在外周组织中对葡萄糖吸收和利用的影响。

陈爱君等采用四氧嘧啶糖尿病小鼠模型观察铁皮石斛膏的降糖作用,并观察其对糖耐量的影响。结果铁皮石斛膏3g(生药)/kg剂量灌胃给药可降低四氧嘧啶所致糖尿病模型小鼠的血糖值,并明显改善该模型小鼠的糖耐量,减少其血糖曲线下面积;6g(生药)/kg剂量对正常小鼠糖耐量也有一定改善作用。张捷平等选取120例T2DM患者按空腹血糖、糖化血红蛋白、胰岛素水平分层后,分为对照组30例,治疗组90例,对照组服西药加四君子汤,治疗组服西药加复方石斛合剂,2组疗程均为90d,结果治疗组的FBG、2hBG、HbA1c、HOMA-IR、TC、TG指标较对照组均有显著改善（P〈0.05）。罗傲霜等采用尾静脉注射四氧嘧啶造成高血糖动物模型，按高剂量(300mg/kg)、中剂量(100mg/kg)和低剂量(30mg/kg)的迭鞘石斛多糖分别灌胃给药，同时设阳性对照组和阴性对照组，测定血糖水平.结果表明，迭鞘石斛多糖能显著降低四氧嘧啶高血糖小鼠空腹血糖的量。阮耀，黄川锋采用链脲佐菌素腹腔注射建立糖尿病大鼠模型，观察葫芦巴对糖尿病大鼠血糖、肾功能、ET,TXB2的影响。结果葫芦巴能明显降低糖尿病大鼠血糖、尿蛋白、ET、TxB2(P<0.05).周玖瑶等通过观察葫芦巴对链佐霉素(STZ)所致1型糖尿病(IDDM)大鼠的药理作用，发现葫芦巴明显降低IDDN大鼠血糖水平，水平明显降低TG、HDL—C、TC，血清明显升高SOD、NO水平。

通过文献查询，石斛与其他药物配伍运用较多，而葫芦巴在治疗糖尿病时全是单用，两者在治疗糖尿病方面都有较好的疗效，但是关于两者配伍应用的文献还没有。

发明内容

本发明的目的在于提供一种新的治疗糖尿病药物组合物及其制备方法和用途。

本发明提供了一种治疗糖尿病的药物组合物，它是由如下重量配比的原料制备而成的制剂：

葫芦巴40-60份、石斛5-15份。

其中，它是由如下重量配比的原料制备而成的制剂：

葫芦巴50-55份、石斛8-12份。

进一步地，它是由如下重量配比的原料制备而成的制剂：

葫芦巴52份、石斛10份。

其中，所述制剂是由原料的药粉、或原料的水或/和乙醇提取物，加上药学上常用的辅料制备而成的制剂。

中药水煎液入药，是中药的传统使用方式，水提后，将有效成分溶出，使药物更容易被人体吸收，起效更快，例如汤剂等给药形式。而以原粉入药，药粉的表面积较大，有利于药材中有效成分在体内的吸收，但药材未经提取，有效成分仍需在体内溶出再吸收，其起效相对水提物较慢，但也同时削弱了药材中有害成分对人体造成的毒副反应，适合于长期服用，如将原粉制备成丸剂等给药形式。采用乙醇提取，它能够提取得到较多的有效成分，而减少某些水溶性杂质的溶出，可以提高有效成分浓度，减少出膏率，更便于制剂，是工业化大生产中替代水提最为常见的溶剂提取方式。在上述药物组合物水煎具有生物活性的基础上，可以根据实际需要，采用水提物、醇提物、原粉等中的任意一种或两种以上的组合进行制剂使用，而不局限于某一种制备方法。

其中，所述制剂为口服制剂。

进一步地，所述口服制剂为颗粒剂、片剂、丸剂、散剂、胶囊剂、口服液。

本发明还提供了上述药物组合物的制备方法，它包括如下操作步骤：

（1）按重量配比称取原料；

（2）取石斛、葫芦巴，加水提取，合并提取液，制剂即得。

本发明还提供了上述药物组合物在制备治疗糖尿病的药物中的用途。

进一步地，所述药物是治疗1型糖尿病或2型糖尿病的药物。

本发明还提供了上述药物组合物在制备保护胰岛B细胞的药物中的用途。

本发明还提供了上述药物组合物在制备降血脂的药物中的用途。

本发明还提供了上述药物组合物在制备抗氧化药物中的用途。

进一步地，所述药物是自由基清除剂。

本发明药物组合物可以有效降低患者血糖、血脂水平，具有良好的清除自由基作用以及对胰岛B细胞的保护作用，为临床治疗糖尿病、高血脂和抗氧化提供了新的用药选择。

具体实施方式

本发明所述石斛，为兰科植物金钗石斛Dendrobium nobile Lindl.、鼓槌石斛Dendrobium chrysotoxum Lindl.或流苏石斛Dendrobium fimbriatum Hook.的栽培品及其同属植物近似种的新鲜或干燥茎，符合《中国药典》2010版第一部中“石斛”项下的相关规定。

实施例1本发明药物组合物

取石斛100g、葫芦巴520g，每次加10倍量水，煎煮3次，合并水煎液，浓缩后，加入适量淀粉制粒，即得颗粒剂。

实施例2本发明药物组合物

取石斛5g、葫芦巴60g，每次加12倍量水，煎煮2次，合并水煎液，浓缩后，加入适量淀粉制粒，压片，即得片剂。

实施例3本发明药物组合物

取石斛15g、葫芦巴40g，粉碎后，混匀，过筛，加入适量微晶纤维素，装胶囊，即得胶囊剂。

实施例4本发明药物组合物

取石斛100g、葫芦巴520g，粉碎后，分别加75～80%v/v乙醇回流提取，药渣再加水煎煮2次，乙醇提取液回收乙醇后，与水煎液合并，浓缩，加入适量微晶纤维素，制粒，即得颗粒剂。

以下通过试验例具体说明本发明的有益效果。

试验例1本发明药物组合物的药效试验

1、实验材料

1.1药品与试剂

（1）葫芦巴提取液：取葫芦巴打碎加水煎煮3次,每次加10量水，合并煎液,过滤,滤液浓缩至每100mL相当于原生药50g,置于冰箱备用,临用时稀释成所需浓度。

（2）石斛提取液：石斛煎煮2次。第一次加10倍量水，第二次加8倍量水，每次1.5h。浓缩至浸膏，用时配到相应浓度即可。

（3）石斛+葫芦巴合煎液：取葫芦巴粉与石斛按52：10的重量比混合，每次加10倍量水，煎煮3次，浓缩，置于冰箱备用。

（4）其他试剂：链佐霉素（STZ），美国Sigma产品，实验前用生理盐水新鲜配制浓度为1.5％。盐酸肾上腺素注射液，上海禾丰制药有限公司，批号030102；四氧嘧啶，Sigma公司；盐酸二甲双胍片，上海医药集团有限公司信宜制药总厂，批号020602。甲醛溶液。

本发明中，中药材给药剂量均以生药量计。

1.2实验仪器

美国雅培Precision Q.I.D型血糖仪，型号：q7708—0119；Precision PlusElectro—des Blood Glucose Electrodes(血糖试纸)，美国雅培制药有限公司，注册号：国药管械(进)2001第2400934号。GSH、SOD、NO；TG、TC、HDLC试剂测试盒，购自南京建成生物工程研究所。手术器械5套，移液枪3把，离心机，EP管若干

1.3实验动物

KM小鼠，雄性，体重19～22g，由成都达硕生物科技有限公司提供，实验动物质量合格证号：scxkc(111)2012-24。

SD大鼠，雄性，180-220g，由成都达硕生物科技有限公司提供，实验动物质量合格证号：scxkc(111)2008-24。

2、实验方法

2.1肾上腺素致小鼠高血糖模型

取雄性KM小鼠70只，体重为19—22g，按体重随机分为7组，每组10只，分别为：正常组，模型组，阳性药组（盐酸二甲双胍片125mg/kg），石斛组（100mg/kg），葫芦巴组(520mg/kg)，石斛+葫芦巴组（石斛100mg/Kg+葫芦巴520mg/Kg），合煎组（310mg/kg），模型组和空白组灌等体积的纯净水。其他组按剂量每天给药1次，连续给药7d。于末次禁食12h后灌药，灌药后90min，除空白组外每鼠迅速腹腔注射肾上腺素240ug/kg，空白组注射同体积生理盐水。给肾上腺素30min后，立即小鼠摘眼球取血，分离血清，测血糖值。

2.2四氧嘧啶致大鼠糖尿病模型

取雄性SD大鼠70只，适应性喂养1周，随机分为空白组、模型组、阳性药组（盐酸二甲双胍片75mg/kg），石斛组（80mg/kg），葫芦巴组(320mg/kg)，石斛+葫芦巴组（80mg+320mg），合煎组（200mg/kg）每组l0只。治疗组灌胃给予相应药物，空白及模型组给予等体积蒸馏水，每天1次，除空白组外于给药第7天禁食8h后腹腔注射四氧嘧啶(175mg/kg)一次，继续灌胃给药，3天后剪尾取血测定空腹血糖，分离血清，全自动生化分析仪测血糖。处死大鼠取胰腺行组织形态观察。胰腺标本以10％甲醛溶液固定，石蜡包埋切片做HE染色观察其形态学变化。

2.3链佐霉素致大鼠糖尿病模型

（1）糖尿病模型复制方法：取雄性SD大鼠80只，链佐霉素按50mg/kg体重剂量，用0.1mmol pH4.5的柠檬酸缓冲液溶解后作一次性腹腔注射。注射4天后，禁食8h后检测血糖(注，以下实验中测定动物血糖前，动物均禁食8h)

（2）实验分组及给药：选取高血糖合格模型大鼠(血糖大于8.0mmol/L)60只按体重进行随机分为：模型组、阳性药组（盐酸二甲双胍片75mg/kg），石斛组（80mg/kg），葫芦巴组(320mg/kg)，石斛+葫芦巴组（80mg+320mg），合煎组（200mg/kg），另选10只未造模的同批大鼠为空白组。连续灌胃给药20天，正常对照组、模型组动物给予等体积纯净水。

（3）指标检测：于给药7、14、20天分别取血测定空腹血糖。实验结束，从眼球取血，分离血清，测定SOD、NO、TG、TC、HDL—C。处死动物，测定肝GSH含量。

3、结果：

3.1肾上腺素致小鼠高血糖模型

表1肾上腺素致小鼠高血糖模型血糖变化

组别	剂量mg/kg	血糖mmol/l
			正常组	——	4.363±0.876
模型组	——	15.258±2.451※
			阳性组	125	10.354±2.210#
石斛组	100	11.281±2.981#
			葫芦巴组	520	12.327±2.159#
石斛+葫芦巴组	100+520	7.234±1.964#▲
			合煎组	310	7.034±1.987#▲

注：与正常组比较，※P<0.05；与模型组比较，#P<0.05。合用组与单用组比较，▲P<0.05

与空白组比，模型组血糖显著升高(P<0.05)，说明造高血糖模型成功。与模型组比，其他给药组可显著降低血糖浓度(P<0.05)。石斛+葫芦巴组与葫芦巴组和石斛组比较有显著性差异。石斛+葫芦巴组与合煎组比较无显著性差异。其中，合煎组内石斛和葫芦巴的生药量均为两药单用时的一半，但是，其药效作用却明显优于两药单用，表明两者配伍后发挥了协同增效作用。

3.2四氧嘧啶致小鼠糖尿病模型

表2四氧嘧啶致小鼠糖尿病模型血糖变化

组别	动物数（只）	剂量mg/kg	血糖mmol/l
				正常组	10	——	6.24±1.56
模型组	10	——	20.32±2.49※
				阳性组	10	75	15.354±2.21#
石斛组	10	80	15.281±2.18#
				葫芦巴组	10	320	16.327±2.15#
石斛+葫芦巴组	10	80+320	10.534±1.93#▲
				合煎组	10	200	10.047±1.89#▲

注：与正常组比较，※P<0.05；与模型组比较，#P<0.05；合煎组，石斛+葫芦巴组与单用组比较，▲P<0.05

腹腔注射四氧嘧啶3日后，模型组血糖较空白组明显升高；其他给药组与模型组比较血糖明显降低（P<0.05），且石斛+葫芦巴合用组比二者单用效果好；石斛+葫芦巴组与合煎组比较无显著性差异。大鼠胰腺组织形态学改变，空白组胰岛呈团索状，境界清晰，胰岛数量及岛内细胞数均较多；模型组胰岛萎缩，胰岛数量明显减少，岛内细胞数减少；石斛与葫芦巴组与模型组比较，胰岛数量较多，体积较大，岛内细胞数较多；二甲双胍组胰岛萎缩、数量减少，岛内细胞数减少。其中，合煎组内石斛和葫芦巴的生药量均为两药单用时的一半，但是，其药效作用却明显优于两药单用，表明两者配伍后发挥了协同增效作用。

3.3链佐霉素致大鼠糖尿病模型

表3链佐霉素致大鼠糖尿病模型大鼠血脂影响

组别	动物数（只）	剂量mg/kg	TG	HDL-C	TC
						正常组	10	——	1.66±0.56	1.96±0.62	2.61±0.81
模型组	10	——	2.67±.052※	3.85±0.55※	4.15±0.65※
						阳性组	10	75	2.01±0.35#	4.01±0.431#	3.84±0.76#
石斛组	10	80	1.94±0.36#	4.21±0.54#	3.45±0.58#
						葫芦巴组	10	320	1.90±0.41#	4.76±0.64#	3.31±0.65#
石斛+葫芦巴组	10	80+320	1.74±0.50#▲	4.85±0.68##▲	2.89±0.64##▲
						合煎组	10	200	1.70±0.52#▲	4.97±0.65##▲	2.84±0.65##▲

注：与正常组比较，※P<0.05；与模型组比较，#P<0.05,##P<0.01。合煎组，石斛+葫芦巴组与单用组比较，▲P<0.05

表4链佐霉素致大鼠糖尿病模型大鼠SOD,NO影响

组别	动物数（只）	剂量mg/kg	血清SOD(U/ml)	血清NO(umol/l)
					正常组	10	——	366.5±20.62	49.3±2.61
模型组	10	——	268.4±18.55※	28.6±3.65※
					阳性组	10	75	299.3±20.37#	36.4±4.36#
石斛组	10	80	315.6±24.54#	38.9±4.38#
					葫芦巴组	10	320	324.7±20.64#	37.4±3.65#
石斛+葫芦巴组	10	80+320	338.7±20.68##▲	40.9±2.64##▲
					合煎组	10	200	340.3±20.61##▲	40.7±2.84##▲

注：与正常组比较，※P<0.01；与模型组比较，#P<0.05,##P<0.01。合煎组，石斛+葫芦巴组与单用组比较，▲P<0.05

大鼠注射STZ50mg/kg4天后，血糖含量显著升高，于药后7天、药后14天、药后20天模型组大鼠血糖明显升高，与正常组比较，P<0.01，有显著性差异，说明STZ致糖尿病模型成功，并在实验期高血糖持续。于药后7天、药后14天、药后20天葫芦巴组、石斛组大鼠血糖开始下降，与模型组比较为P<0.05，石斛+葫芦巴组与模型组比较P<0.01，有显著性差异。STZ模型组大鼠血清TG、HDL—C、TC明显升高，与正常对照组比较，为P<0.05，有显著性差异。经药物治疗后的各组大鼠血清TG、TC明显降低与模型组比较P<0.05，有显著性差异,HDL—C继续升高。模型组大鼠血清SOD、NO含量明显降低，与正常对照组比较，为P<0.05，有显著性差异。葫芦巴组、石斛组大鼠血清SOD、NO含量明显升高，与模型组比较为P<0.05，石斛+葫芦巴组、阳性药组与模型组比较P<0.01，有显著性差异。石斛+葫芦巴组与单用的石斛组，葫芦巴组比较P<0.05有显著性差异，石斛+葫芦巴组与合煎组比较无显著性差异。结果提示，石斛，葫芦巴均有具有降血糖，明显改善高血糖大鼠的血脂代谢，改善高血糖大鼠的SOD和NO水平的作用，且二者配伍药效更佳。其中，合煎组内石斛和葫芦巴的生药量均为两药单用时的一半，但是，其药效作用却明显优于两药单用，表明两者配伍后发挥了协同增效作用。

4、结论：

石斛，葫芦巴对于3种糖尿病动物模型均有治疗效果，而石斛与葫芦巴的配伍后的治疗效果比两者单用效果更好。

5、讨论：

糖尿病是一类因胰岛素分泌不足、胰岛素作用低下或胰岛素抵抗所引起的糖代谢紊乱，继发脂肪和蛋白质代谢障碍的疾病。高血糖可降低细胞的趋化功能、黏附功能和吞噬作用，干扰线粒体的代谢途径，使机体的免疫功能降低。糖尿病的急性并发症一般包括：糖尿病酮症酸中毒、非酮症性高渗性昏迷、糖尿病乳酸性酸中毒等。严重高血糖可使细胞内严重脱水，导致癫痫样抽搐、意识障碍、颅内出血和中枢性高热等神经系统损伤。本实验结果显示：石斛葫芦巴提取物能显著降低血糖值，且具有吸收速度快、降糖作用强、应用范围广等优点。

链佐霉素具有致糖尿病活性，原理是该化合物对胰腺B细胞具有特效的毒性作用，可模拟人类的1型糖尿病模型，已经成为许多研究者在糖尿病研究中使用的有价值的工具。研究结果表明，IDDM模型建立，给药第7天开始葫芦巴+石斛即显示出明显地治疗STZ诱导的大鼠IDDM作用，20天后葫芦巴+石斛治疗组TG和TC均有明显的降低，说明本品对1型糖尿病大鼠脂代谢紊乱有明显的调节作用。SOD是催化超氧阴离子自由基分解的酶，其活性与超氧阴离子自由基清除能力有关。治疗组和正常组超氧化物歧化酶(SOD)活力明显高于模型组。给药组SOD活力明显提高，有利于超氧阴离子自由基的清除，增强机体的抗氧化能力，促进疾病的恢复，说明石斛+葫芦巴有清除自由基的作用。

四氧嘧啶通过选择性损伤大鼠胰岛B细胞，使胰岛素分泌减少从而引起血糖升高。在本研究中，采用腹腔注射四氧嘧啶3日后，大鼠血糖明显升高。同时，HE染色发现模型组大鼠胰岛萎缩、数量减少，且岛内细胞数减少，与文献报道一致，这表明本研究采用的模型是可靠的。实验发现配伍的药物对降低血糖有明显作用，而且胰岛细胞也受到一定的保护，说明其作用机制与对胰岛细胞的保护有关。

Claims (10)

1.一种治疗糖尿病的药物组合物，其特征在于：它是由如下重量配比的原料制备而成的制剂：

葫芦巴40-60份、石斛5-15份。

2.根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于：它是由如下重量配比的原料制备而成的制剂：

葫芦巴50-55份、石斛8-12份。

3.根据权利要求2所述的药物组合物，其特征在于：它是由如下重量配比的原料制备而成的制剂：

葫芦巴52份、石斛10份。

4.根据权利要求1-3任意一项所述的药物组合物，其特征在于：所述制剂为口服制剂。

5.权利要求1-4任意一项所述的药物组合物的制备方法，其特征在于：它包括如下操作步骤：

（1）按重量配比称取原料；

（2）取石斛、葫芦巴，加水提取，合并提取液，制剂即得。

6.权利要求1-4任意一项所述药物组合物在制备治疗1型糖尿病或2型糖尿病的药物中的用途。

7.权利要求1-4任意一项所述药物组合物在制备保护胰岛B细胞的药物中的用途。

8.权利要求1-4任意一项所述药物组合物在制备降血脂的药物中的用途。

9.权利要求1-4任意一项所述药物组合物在制备抗氧化药物中的用途。

10.根据权利要求9所述的用途，其特征在于：所述药物是自由基清除剂。