Relatório Descritivo da Patente de Invenção para COMPOTO OU UM SAL FARMACEUTICAMENTE ACEITAVEL DO MESMO E COMPOSIÇÃO FARMACEUTICA.
[001] A presente invenção refere-se a derivados de amida espirocíclica, um processo para sua preparação, composições farmacêuticas contendo-os, um processo para a preparação de tais composições farmacêuticas, seu uso em terapia, e intermediários para uso em sua preparação.
[002] Tratamento de primeira linha para uma variedade de distúrbios pulmonares incluindo doença pulmonar obstrutiva crônica (COPD) e asma é por meio do uso de broncodilatadores. antagonistas de receptor muscarínico (anti-colinérgicos) são broncodilatadores que exercem sua eficácia reduzindo o tônus colinérgico vagal, o principal componente reversível de constrição das vias aéreas em COPD. Agonistas β-adrenoceptores são também broncodilatadores devido a sua capacidade de funcionalmente antagonizar as respostas broncoconstritoras a uma faixa de mediadores, incluindo acetilcolina.
[003] Além de melhorar a função pulmonar, estes agentes melhoram a dispneia (ofegância), qualidade de vida, tolerância a exercício e reduzem exacerbações. Diversos estudos clínicos demonstraram que a administração combinada de um agonista anticolinérgico e um agonista e2-receptor é mais eficaz do que qualquer dos componentes individuais (van Noord, J.A., Aumann, J-L., Janssens, E., Smeets, J.J., Verhaert, J., Disse, B., Mueller, A. & Cornelissen, P.J.G., 2005. Comparison of tiotropium once daily, formoterol twice daily and both combined once daily in patients com COPD, Eur. Respir. J., vol 26, pp. 214222.). Uma única molécula possuindo atividades em receptores muscarínicos e β2 (MABAs) pode fornecer benefícios adicionais para os pacientes de COPD em termos de eficácia e perfil de efeito colateral sobre qualquer agente individual. Além disso, uma molécula possuindo
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2/638 atividade dual pode também oferecer benefícios em termos de facilidade de uso e aceitação do paciente sobre a coadministração das terapias individuais. Um único agente pode também ser benéfico a partir da perspectiva de formulação em comparação aos dois compostos separados, também oferecendo o potencial, se combinado com outro terapêutico, para terapias de tripla ação.
[004] De acordo com um primeiro aspecto da invenção é fornecido agora um composto de fórmula I
(I) [005] em que Ar representa um grupo de ligação β-adrenoceptor;
[006] L representa um ligante compreendendo uma cadeia hidro carbila linear ou ramificada de até 15 átomos de carbono;
[007] em que até três dos átomos de carbono na cadeia são opcionalmente substituídos por até quatro substituintes independentemente selecionados de halogênio, S(O)o-2R56, NR57R58, S(O)2NR59R60, C(O)NR61R62, C(O)OR63, NR64S(O)2R65, NR66C(O)R67, NR68C(O)OR69, NR70C(O)NR71R72, OR73, Ci-6 alquila e C3-6 cicloalquila, e em que C1-6 alquila e C3-6 cicloalquila podem ser opcionalmente substituídas por até três substituintes independentemente selecionados de halogênio, hidroxila e C1-6 alcóxi;
[008] em que até cinco átomos de carbono da cadeia podem ser substituídos por grupos independentemente selecionados de O, NR45, S, S(O), S(O)2, C(O)O, OC(O), NR46C(O), C(O)NR47, NR48S(O)2, S(O)2NR49, NR50C(O)NR51, NR52S(O)2NR53, OC(O)NR54, NR55C(O)O, contanto que quaisquer tais grupos na cadeia são separados por pelo menos 2 átomos de carbono; e [009] em que até seis átomos de carbono da cadeia podem fazer
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3/638 parte de um anel mono- ou bicíclico alifático, heteroalifático, aromático ou heteroaromático tendo até quatro heteroátomos independentemente selecionados de N, O ou S, o referido anel compreendendo até 10 átomos de anel, e em que o anel é opcionalmente substituído por até três substituintes independentemente selecionados de halogênio, S(O)o-2R56, NR57R58, S(O)2NR59R60, C(O)NR61R62, C(O)OR63,
NR64S(O)2R65, NR66C(O)R67, NR68C(O)OR69, NR70C(O)NR71R72, OR73, C1-6 alquila e C3-6 cicloalquila, e em que C1-6 alquila e C3-6 cicloalquila podem ser opcionalmente substituídas por até três substituintes independentemente selecionados de halogênio, hidroxila e C1-6 alcóxi;
[0010] e a cadeia pode compreender até três de tais anéis cada qual independentemente selecionado;
[0011] em que R56, R65 e R69 cada qual independentemente representa C1-6 alquila ou C3-6 cicloalquila em que as C1-6 alquila e C3-6 ci cloalquila podem ser opcionalmente substituídas por até três substituintes independentemente selecionados de halogênio, hidroxila,
C1-6 alcóxi; e [0012] R45 R46 R47 R48 R49 R50 R51 R52 R53 R54 R55 R57 R58
R59, R60, R61, R62, R63, R64, R66, R67, R68 , R70, R71, R72 e R73 cada qual independentemente representa hidrogênio, C1-6 alquila ou
C3-6 cicloalquila, em que as C1-6 alquila e C3-6 cicloalquila podem ser opcionalmente substituídas por até três substituintes independentemente selecionados de halogênio, hidroxila, C1-6 alcóxi; ou qualquer de R57 e R58, R59 e R60, R61 e R62 ou R71 e R72, juntamente com o átomo de nitrogênio ao qual eles são ambos ligados, podem formar um anel heterocíclico alifático de 4 a 8 membros, em que o anel heterocíclico po de compreender até três heteroátomos independentemente selecionados de N, O e S, em que o anel pode ser opcionalmente substituído por até três substituintes independentemente selecionados de halogênio, hidroxila, C1-6 alquila ou C3-6 cicloalquila, em que as C1-6 alquila e
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C3-6 cicloalquila podem ser opcionalmente substituídas por até três substituintes independentemente selecionados de halogênio, hidroxila e C1-6 alcóxi; e [0013] em que a cadeia pode adicionalmente compreender até três ligações duplas de carbono-carbono;
[0014] em que a cadeia pode adicionalmente compreender até três ligações triplas de carbono-carbono;
[0015] L1 e L2 independentemente representam hidrogênio, C1-6 alquila ou C3-6 cicloalquila;
[0016] L3 e L4 independentemente representam hidrogênio, C1-6 alquila ou C3-6 cicloalquila, em que a C1-6 alquila e C3-6 cicloalquila podem ser opcionalmente substituídas por até três substituintes independentemente selecionados de halogênio, hidroxila e C1-6 alcóxi;
[0017] Além disso, L1 e/ou L3 podem ser ligados a átomos de carbono da cadeia hidrocarbila no ligante L para formar anéis alifáticos de até 6 átomos de anel, em que cada anel pode compreender até três heteroátomos independentemente selecionados de N, O e S;
[0018] R1 representa um anel fenila, um anel heteroalifático de 4 a membros, um anel alifático de 3 a 8 membros ou um anel heteroarila de 5 a 6 membros cada qual tendo até quatro heteroátomos independentemente selecionados de N, O ou S, em cada dos quais o anel pode ser opcionalmente substituído por até três substituintes independentemente selecionados de halogênio, ciano, nitro, SH, S(O)0-2R5, NR6R7, S(O)2NR8R9, C(O)NR10R11, C(O)OR12, NR13S(O)2R14,
NR15C(O)R16, NR17C(O)OR18, NR19C(O)NR20R21, OR22, C1-7 alquila ou C3-8 cicloalquila (em cada dos quais as C1-7 alquila e C3-8 cicloalquila podem ser opcionalmente substituídas por até seis substituintes independentemente selecionados de halogênio, ciano, nitro, SH, S(O)0-2R5, NR6R7, S(O)2NR8R9, C(O)NR10R11, C(O)OR12, NR13S(O)2R14,
NR15C(O)R16, NR17C(O)OR18, NR19C(O)NR20R21, OR22), um anel fenila,
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5/638 um anel heteroalifático de 4 a 8 membros, um anel heteroarila de 5 a 6 membros, cada qual tendo até quatro heteroátomos independentemente selecionados de N, O ou S, cada de cujo anel fenila, anel heteroalifático de 4 a 8 membros, anel alifático de 3 a 8 membros ou anel heteroarila de 5 a 6 membros pode ser opcionalmente substituída por até três substituintes independentemente selecionados de halogênio, ciano, nitro, SH, S(O)o-2R5, S(O)2NR8R9, C(O)NR10R11, C(O)OR12, OR22, C1-6 alquila ou C3-6 cicloalquila em que as C1-6 alquila e C3-6 cicloalquila podem ser opcionalmente substituídas por até três substituintes independentemente selecionados de halogênio, hidroxila, C1-6 alcóxi, ciano, nitro, NH2, NH(Ci-6 alquila) e N(Ci-6 alquila)2;
[0019] ou R1 representa um anel alifático fundido, heteroalifático fundido, aromático fundido ou heteroarila fundido de até 10 átomos e tendo até quatro heteroátomos independentemente selecionados de N, O ou S, em cada dos quais o anel pode ser opcionalmente substituído por até três substituintes independentemente selecionados de halogênio, ciano, nitro, SH, S(O)o-2R5, NR6R7, S(O)2NR8R9, C(O)NR10R11, C(O)OR12, NR13S(O)2R14, NR15C(O)R16, NR17C(O)OR18,
NR19C(O)NR20R21, OR22, C1-6 alquila ou C3-6 cicloalquila em que as C1-6 alquila e C3-6 cicloalquila podem ser opcionalmente substituídas por até três substituintes independentemente selecionados de halogênio, hidroxila, C1-6 alcóxi, NH2, NH(Ci-6 alquila) e N(Ci-6 alquila)2;
[0020] ou R1 também representa uma cadeia C1-6 alquila em que um ou dois dos átomos de carbono podem ser substituídos por O, S ou N e [0021] em que R1 pode ser substituído por até três cadeias C1-3 alquila e duas tais cadeias podem ser ligadas para formar uma C3-8 cicloalquila em que as cadeias C1-3 alquila e C3-8 cicloalquila podem ser opcionalmente substituídas até três substituintes independentemente selecionados de halogênio, ciano, nitro, SH, S(O)0-2R5, NR6R7,
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S(O)2NR8R9, C(O)NR10R11, C(O)OR12, NR13S(O)2R14, NR15C(O)R16, NR17C(O)OR18, NR19C(O)NR20R21, OR22, e [0022] em que a cadeia C1-6 alquila é também opcionalmente substituída por até três substituintes independentemente selecionados de halogênio, ciano, nitro, SH, S(O)0-2R5, NR6R7, S(O)2NR8R9, C(O)NR10R11, C(O)OR12, NR13S(O)2R14, NR15C(O)R16, NR17C(O)OR18, NR19C(O)NR20R21, OR22, um anel fenila, um anel heteroalifático de 4 a 8 membros, a anel alifático de 3 a 8 membros, um anel heteroarila de 5 a 6 membros cada qual tendo até quatro heteroátomos independentemente selecionados de N, O ou S, e em que cada anel é opcionalmente substituído por até três substituintes independentemente selecionados de halogênio, ciano, nitro, S(O)0-2R5, S(O)2NR8R9, C(O)NR10R11, C(O)OR12, OR22, C1-7 alquila ou C3-7 cicloalquila (em cada dos quais a C1-7 alquila e C3-7 cicloalquila pode ser opcionalmente substituída por até seis substituintes independentemente selecionados de halogênio, ciano, nitro, SH, S(O)0-2R5, NR6R7, S(O)2NR8R9, C(O)NR10R11, C(O)OR12, NR13S(O)2R14, NR15C(O)R16, NR17C(O)OR18, NR19C(O)NR20R21, OR22), um anel fenila, um anel heteroalifático de 4 a 8 membros, um anel alifático de 3 a 8 membros, um anel heteroarila de 5 a 6 membros cada qual tendo até quatro heteroátomos independentemente selecionados de N, O ou S, cada de cujo anel fenila, anel heteroalifático de 4 a 8 membros, anel alifático de 3 a 8 membros, ou anel heteroarila de 5 a 6 membros pode ser opcionalmente substituída por até três substituintes independentemente selecionados de halogênio, ciano, nitro, S(O)0-2R5, S(O)2NR8R9, C(O)NR10R11, C(O)OR12, OR22, C1-6 alquila ou C3-6 cicloalquila, em que C1-6 alquila e C3-6 cicloalquila podem cada qual ser opcionalmente substituídas por até três substituintes independentemente selecionados de halogênio, hidroxila, C1-6 alcóxi, NH2, NH(Ci-6 alquila) e N(Ci-6 alquila)2;
[0023] ou uma cadeia C1-6 alquila pode ser substituído por um anel
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7/638 alifático fundido, heteroalifático fundido, aromático fundido ou heteroarila fundido de até 10 átomos e tendo até quatro heteroátomos independentemente selecionados de N, O ou S, em cada dos quais o anel pode ser opcionalmente substituído por até três substituintes independentemente selecionados de halogênio, ciano, nitro, SH, S(O)o-2R5, NR6R7, S(O)2NR8R9, C(O)NR10R11, C(O)OR12, NR13S(O)2R14,
NR15C(O)R16, NR17C(O)OR18, NR19C(O)NR20R21, OR22, C1-6 alquila ou C3-6 cicloalquila em que as C1-6 alquila e C3-6cicloalquila podem ser opcionalmente substituídas por até três substituintes independentemente selecionados de halogênio, hidroxila, C1-6 alcóxi, NH2, NH(C1-6 alquila) e N(Ci-6 alquila)2;
[0024] R5, R14 e R18 independentemente representam C1-6 alquila ou C3-6 cicloalquila, em que as C1-6 alquila e C3-6 cicloalquila podem ser opcionalmente substituídas por um ou mais substituintes independentemente selecionados de halogênio, hidroxila, C1-6 alcóxi, NH2,
NH(Ci-6 alquila) e N(Ci-6 alquila)2; e [0025] R6, R7, R8, R9, R10, R11, R12, R13, R15, R16, R17, R19, R20, R21 e R22 cada qual independentemente representa hidrogênio, C1-6 alquila ou C3-6 cicloalquila, em que a C1-6 alquila ou C3-6 cicloalquila pode ser opcionalmente substituída por um ou mais substituintes independentemente selecionados de halogênio, hidroxila, C1-6 alcóxi, NH2, NH(Ci-6 alquila) e N(Ci-6 alquila)2; ou qualquer de R6 e R7, R8 e R9, R10 e R11, ou R20 e R21 juntamente com o átomo de nitrogênio ao qual eles são ambos ligados, podem formar um anel heterocíclico alifático de 4 a membros, em que o anel heterocíclico pode ser opcionalmente substituído por um ou mais substituintes independentemente selecionados de halogênio, hidroxila, C1-6 alquila, C1-6 cicloalquila e C1-6 alcóxi, em que a C1-6 alquila, C1-6 cicloalquila ou C1-6 alcóxi pode ser opcionalmen te substituído por um ou mais substituintes independentemente selecionados de halogênio, hidroxila e C1-6 alcóxi, NH2, NH(Ci-6 alquila) e
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X representa O, S, S(O)o ou CR25R26;
m = 0, 1,2 ou 3;
n = 1, 2, 3 ou 4; contanto que m + n seja maior do que ou o = 1, 2;
W representa CR27R28CR29R30 ou CR31R32CR33R34CR35R36;
V e Z independentemente representam uma ligação,
Y representa CO, CONR43, SO2 ou SO2NR44;
r25 r26 r27 r28 r29 r30 r31 r32 r33 r34 r35 r36 r37
N(Ci-6 alquila)2;
[OO26] [OO27] [OO28] igual a 2 [OO29] [OO3O] [0031]
CR37R38 ou CR39R40CR41R42, contanto que quando X representar O, S, ou S(O)o então m, V e Z sejam tais que todos os heteroátomos nos anéis sejam separados por pelo menos dois átomos de carbono (por exemplo, quando V é uma ligação então m não é 0, Z não é uma ligação);
[OO32] [OO33]
R38 R39, R40, R41, R42, cada qual independentemente representa hidrogênio, flúor ou C1-6 alquila ou C3-6 cicloalquila; e quando eles não representam hidrogênio ou flúor R25 e R26, R27 e R28, R29 e R30, R31 e R32, R33 e R34, R35 e R36, R37 e R38, R39 e R40 ou R41 e R42 juntamente com o átomo de carbono ao qual eles são ambos ligados, podem adicionalmente formar um anel alifático de 3 a 6 membros;
[OO34] R43 e R44 cada qual independentemente representa hidrogênio, C1-6 alquila ou C3-6 cicloalquila [OO35] e sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos.
[OO36] Por grupo de ligação β-adrenoceptor entendemos um grupo capaz de ligar-se a um receptor β-adrenérgico; tal como por exemplo, como delineado no artigo de recapitulação β-adrenergic receptors in Comprehensive Medicinal Chemistry, 1990, B.E. Main, p187 (Pergamon Press). Tais grupos são também conhecidos de, por exemplo, nos WO/2OO5O92841, US/20050215542, WO/2OO5O7O872,
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WO/2006023460,
WO/2006032627.
WO/2006051373,
WO/2006087315, [0037] Exemplos de grupos de ligação de β-adrenoceptor convenientes incluem [0038]
OCH2;
[0039]
M1 é S, C(O), NA5, CA6A7, CH2CH2, CH=CH, CH2O ou
M2 é S, C(O), NA5, CA6A7, CH2CH2, CH=CH, CH2O ou
OCH2;
[0040] A1, A2, A3 e A4 são, independentemente, hidrogênio, halogênio, trifluorometila, ciano, carbóxi, hidróxi, nitro, S(O)2A8,
NA9S(O)2A10, C(O)NA11A12, NA13C(O)A14, C1-6 alquila, C1-6 alcóxi,
C(O)(Ci-6 alquila) ou C(O)OCi-6 alquila;
[0041] A3 pode também ser CH2OH, NHCHO, NHS(O)2NA15A16 ou
NHSO2A17;
[0042] A5, A6, A7, A9, A11, A12, A13, A14, A15 ou A16 são, independentemente, hidrogênio ou C1-6 alquila;
[0043] A8, A10 e A17 são, independentemente, C1-6 alquila;
[0044] Mais convenientemente o grupo Ar de ligação de receptor β-adrenérgico é selecionado de
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[0045] em que [0046] M1 é S, CH=CH, CH2O ou OCH2;
[0047] M2 é S, CH=CH, CH2O ou OCH2;
[0048] A1, A2, e A4 são, independentemente, hidrogênio, halogê nio, C1-6 alquila, C1-6 alcóxi;
[0049] A3 pode também ser CH2OH, NHCHO, NHS(O)2NA15A16 ou
NHSO2A17;
[0050] A15 ou A16 são independentemente selecionados de hidrogênio, C1-6 alquila ou C3-6 cicloalquila;
[0051] A17 é C1-6 alquila ou C3-6 cicloalquila;
[0052] Exemplos de C1-6 alquila incluem C1-4 alquila e C1-2 alquila.
[0053] Exemplos de C3-6 ciclolalquila incluem C3-5 ciclolalquila e C34 ciclolalquila.
[0054] Exemplos de C1-6 alcóxi incluem C1-4 alcóxi e C1-2 alcóxi.
[0055] Mais convenientemente, o grupo Ar de ligação de receptor β-adrenérgico é selecionado de:
[0056] em que A1, A2 e A4 são todos hidrogênio, A3 é CH2OH,
NHCHO, M1 é S, CH=CH, ou OCH2; M2 é S, CH=CH, ou OCH2.
[0057] Mais convenientemente, o grupo Ar de ligação de receptor β-adrenérgico é selecionado de:
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[0058] Convenientemente, L representa um ligante compreenden do uma cadeia hidrocarbila linear ou ramificada de até 12 átomos de carbono ou de até 10 átomos de carbono ou de até 8 átomos de car bono;
[0059] em que até dois dos átomos de carbono na cadeia são opcionalmente substituídos por até quatro substituintes independentemente selecionados de halogênio, S(O)0-2R56, NR57R58, S(O)2NR59R60, C(O)NR61R62, C(O)OR63, NR64S(O)2R65, NR66C(O)R67, NR68C(O)OR69, NR70C(O)NR71R72, OR73, C1-6 alquila e C3-6 cicloalquila, e em que C1-6 alquila e C3-6 cicloalquila podem ser opcionalmente substituídas por até três substituintes independentemente selecionados de halogênio, hidroxila e C1-6 alcóxi;
[0060] Convenientemente até dois átomos de carbono da cadeia podem ser substituídos por grupos independentemente selecionados de O, NR45, S, S(O), S(O)2, C(O)O, OC(O), NR46C(O), C(O)NR47, NR48S(O)2, S(O)2NR49, NR50C(O)NR51, NR52S(O)2NR53; ou independentemente selecionados de O, S, S(O), S(O)2, NR46C(O), C(O)NR47; contanto que em cada caso quaisquer tais grupos na cadeia são separados por pelo menos 2 átomos de carbono;
[0061] Convenientemente até quatro átomos de carbono da cadeia podem fazer parte de um anel mono- ou bicíclico alifático, heteroalifático, aromático ou heteroaromático tendo até três heteroátomos independentemente selecionados de N, O ou S, o referido anel compreendendo até 10 átomos de anel, e em que o anel é opcionalmente substituído por até três substituintes independentemente selecionados de halogênio, S(O)0-2R56, NR57R58, S(O)2NR59R60, C(O)NR61R62,
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C(O)OR63, NR64S(O)2R65, NR66C(O)R67, NR68C(O)OR69,
NR70C(O)NR71R72, OR73, C1-6 alquila e C3-6 cicloalquila, e em que C1-6 alquila e C3-6 cicloalquila podem ser opcionalmente substituídas por até três substituintes independentemente selecionados de halogênio, hidroxila e C1-6 alcóxi;
[0062] Convenientemente, a cadeia pode compreender até dois, ou um de tais anéis cada qual independentemente selecionado;
[0063] Convenientemente, R56, R65 e R69 cada qual independentemente representa C1-4 alquila ou C3-6 cicloalquila em que as C1-4 alquila e C3-6 cicloalquila podem ser opcionalmente substituídas por até três substituintes independentemente selecionados de halogênio, hidroxila, C1-4 alcóxi; e [0064] Convenientemente, R45, R46, R47, R48, R49, R50, R51, R52, R53 R54 R55 R57 R58 R59 R60 R61 R62 R63 R64 R66 R67 R68 R70
R71, R72 e R73 cada qual independentemente representa hidrogênio, C1-4 alquila ou C3-6 cicloalquila, em que as C1-4 alquila e C3-6 cicloalquila podem ser opcionalmente substituídas por até três substituintes inde pendentemente selecionados de halogênio, hidroxila, C1-4 alcóxi; ou qualquer de R57 e R58, R59 e R60, R61 e R62 ou R71 e R72, juntamente com o átomo de nitrogênio ao qual eles são ambos ligados, podem formar um anel heterocíclico alifático de 4 a 8 membros, em que o anel heterocíclico pode ser opcionalmente substituído por até três substituintes independentemente selecionados de halogênio, hidroxila e C1-4 alquila ou C3-6 cicloalquila, em que as C1-4 alquila e C3-6 cicloalquila po dem ser opcionalmente substituídas por até três substituintes independentemente selecionados de halogênio, hidroxila e C1-4 alcóxi;
[0065] Exemplos de sistemas de anel convenientes que podem estar presentes como parte do ligante de hidrocarbila includem
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[0066] em que o anel heterociclila é não substituído ou substituído por 1 ou 2 substituintes independentemente selecionados de halogênio, C1-4 alquila (opcionalmente substituídos por OR121, NR122R123 ou NR124C(O)R125), OR126, NR127R128, C(O)NR129R130, NR131C(O)R132, CN, S(O)2R133 ou S(O)2NR134R135;
[0067] R133 representa C1-6 alquila ou C3-6 cicloalquila, em que as
C1-6 alquila e C3-6 cicloalquila podem ser opcionalmente substituídas por até três substituintes independentemente selecionados de halogê nio, hidroxila, C1-6 alcóxi; e [0068] R121 R122 R123 R124 R125 R126 R127 R128 R129 R130 R131
R132, r134, r135 e r136 cada qual independentemente representa hidro gênio, C1-6 alquila ou C3-6 cicloalquila, em que as C1-6 alquila e C3-6 ci cloalquila podem ser opcionalmente substituídas por até três substituintes independentemente selecionados de halogênio, hidroxila, C1-6 alcóxi; ou qualquer de R122 e R123, R127 e R128, R129 e R130 ou R134 e R135, juntamente com o átomo de nitrogênio ao qual eles são ambos ligados, podem formar um anel heterocíclico alifático de 4 a 8 mem bros, em que o anel heterocíclico pode ser opcionalmente substituído por até três substituintes independentemente selecionados de halogê nio, hidroxila, C1-6 alquila ou C3-6 cicloalquila, em que as C1-6 alquila e
C3-6 cicloalquila podem ser opcionalmente substituídas por até três substituintes independentemente selecionados de halogênio e hidroxi la;
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14/638 [0069] Convenientemente, a cadeia pode adicionalmente compreender até duas ligações duplas de carbono-carbono ou uma única ligação dupla de carbono-carbono.
[0070] Convenientemente, a cadeia pode adicionalmente compreender até duas ligações triplas de carbono-carbono ou uma única ligação tripla de carbono-carbono.
[0071] Convenientemente, cada qual de L1, L2, L3 e L4 representam independentemente hidrogênio, um grupo C1-4 alquila ou C3-6 cicloalquila, em que as C1-4 alquila e C3-6 cicloalquila podem ser opcionalmente substituídas por até três substituintes independentemente selecionados de halogênio e hidroxila; além disso L1 e/ou L3 podem ser ligados a um átomo de carbono da cadeia hidrocarbila no ligante L para formar um anel alifático de até 6 átomos de anel, em que o anel pode compreender até dois heteroátomos independentemente selecionados de N, O e S.
[0072] Onde quatro átomos de carbono da cadeia fazem parte de um anel mono- ou bicíclico alifático, heteroalifático, aromático ou heteroaromático tendo até três heteroátomos independentemente selecionados de N, O ou S, o referido anel pode, se um sistema de anel alifático, compreender até 10, 9, 8, 7, 6, 5, 4 ou 3 átomos de anel; se um sistema de anel aromático, então pode compreender 10, 9, 6 ou 5 átomos de anel; cada qual independentemente selecionado;
[0073] R1 representa um anel fenila ou um anel heteroarila de 5 a membros cada qual tendo até três heteroátomos independentemente selecionados de N, O ou S, ou R1 representa um anel alifático fundido, heteroalifático fundido, aromático fundido ou heteroarila fundido de até 10 átomos e tendo até três heteroátomos independentemente selecionados de N, O ou S, [0074] em que cada anel pode ser opcionalmente substituído por até três substituintes independentemente selecionados de halogênio,
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15/638 ciano, nitro, SH, S(O)o-2R5, NR6R7, S(O)2NR8R9, C(O)NR10R11, C(O)OR12, NR13S(O)2R14, NR15C(O)R16, NR17C(O)OR18,
NR19C(O)NR20R21, OR22, C1-7 alquila ou C3-8 cicloalquila (em cada dos quais as C1-7 alquila e C3-8 cicloalquila podem ser opcionalmente substituídas por até seis substituintes independentemente selecionados de halogênio, ciano, nitro, SH, S(O)0-2R5, NR6R7, S(O)2NR8R9,
C(O)NR10R11, C(O)OR12, NR13S(O)2R14, NR15C(O)R16, NR17C(O)OR18, NR19C(O)NR20R21, OR22), um anel fenila, optionalmente substituídos por até três substituintes independentemente selecionados de halogênio, ciano, nitro, SH, S(O)0-2R5, S(O)2NR8R9, C(O)NR10R11, C(O)OR12, OR22, C1-6 alquila ou C3-6 cicloalquila em que as C1-6 alquila e C3-6 cicloalquila podem ser opcionalmente substituídas por até três substituintes independentemente selecionados de halogênio, hidroxila, C1-6 alcóxi, ciano, nitro, NH2, NH(Ci-6 alquila) e N(Ci-6 alquila)2;
[0075] R5, R14, e R18, representam C1-6 alquila ou C3-6 cicloalquila optionalmente substituídos por até três substituintes independentemente selecionados de halogênio, hidroxila ou C1-6 alcóxi;
[0076] R8, R9, R10, R11, R12 e R22 cada qual independentemente representa hidrogênio ou C1-6 alquila ou C3-6 cicloalquila, em que as C16 alquila e C3-6 cicloalquila podem ser opcionalmente substituídas por até três substituintes independentemente selecionados de halogênio, hidroxila, C1-6 alcóxi; ou qualquer de R8 e R9, ou R10 e R11 juntamente com o átomo de nitrogênio ao qual eles são ambos ligados, podem formar um anel heterocíclico alifático de 4 a 6 membros, em que o anel heterocíclico pode ser opcionalmente substituído por até três substituintes independentemente selecionados de halogênio, hidroxila, C1-6 alcóxi e C1-6 alquila;
[0077] X representa O, S, ou S(O)2.
[0078] m = 0, 1, 2 ou 3;
[0079] n = 1, 2 ou 3;
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16/638 [0080] W representa CR27R28CR29R30 ou CR31 R32CR33R34CR35R36.
[0081] V e Z independentemente representam uma ligação,
CR37R38 ou CR39R40CR41R42.
Y representa CO, CONR43, SO2.
R27 R28 R29 R30 R31 R32 R33 R34 R35 R36 R37 R38 R39 [0082] Quando X representa O, S, ou S(O)2 então m, V e Z sejam tais que todos os heteroátomos nos anéis sejam separados por pelo menos dois átomos de carbono (por exemplo, quando V é uma ligação então m não é 0, Z não é uma ligação).
[0083] [0084]
R40, R41 e R42 cada qual independentemente representa hidrogênio, flúor, C1-6 alquila ou C3-6 cicloalquila.
[0085] Quando eles não representam hidrogênio ou flúor R27 e R28,
R29 e R30, R31 e R32, R33 e R34, R35 e R36, R37 e R38, R39 e R40 ou R41 e R42 juntamente com o átomo de carbono ao qual eles são ambos ligados, podem formar um anel alifático de 3 a 6 membros; e [0086] R43 cada qual independentemente representa hidrogênio,
C1-6 alquila ou C3-6 cicloalquila [0087] Mais convenientemente:
[0088] L representa um ligante compreendendo uma cadeia hidrocarbila linear ou ramificada de até 8 átomos de carbono tal como de até 7, 6, 5, ou 4 átomos de carbono. Exemplos de tais cadeias incluem aquelas de 4-7, 4-6, 4-5, 5-7, 6-7, e 5-6 átomos de carbono.
[0089] L representa uma cadeia C4-8 alquila opcionalmente substituída por até quatro (tal como até três, dois ou um) grupos de flúor ou metila;
[0090] Convenientemente, até dois átomos de carbono da cadeia podem ser substituídos por grupos independentemente selecionados de O, S, S(O)2, NR46C(O), C(O)NR47, NR48S(O)2, S(O)2NR49 contanto que em cada caso quaisquer tais grupos na cadeia são separados por pelo menos 2 átomos de carbono;
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17/638 [0091] Convenientemente até quatro átomos de carbono, tal como até três ou até dois átomos de carbono da cadeia podem fazer parte de um anel aromático ou heteroaromático mono- ou bicíclico tendo até três heteroátomos independentemente selecionados de N, O ou S, o referido anel compreendendo até 10 átomos de anel, e em que o anel é opcionalmente substituído por até três substituintes independentemente selecionados de halogênio, S(O)0-2R56, S(O)2NR59R60, C(O)NR61R62, OR73, C1-6 alquila e C3-6 cicloalquila, e em que C1-6 alquila e C3-6 cicloalquila podem ser opcionalmente substituídas por até três substituintes independentemente selecionados de halogênio, hidroxila e C1-6 alcóxi;
[0092] Convenientemente, a cadeia pode compreender um de tal anel;
[0093] Convenientemente, R56 representa C1-4 alquila ou
C3-6 cicloalquila em que as C1-4 alquila e C3-6 cicloalquila podem ser opcionalmente substituídas por até três substituintes independentemente selecionados de halogênio, hidroxila, C1-4 alcóxi; e [0094] Convenientemente, R46, R47, R48, R49, R59, R60, R61, R62 e
R73 cada qual independentemente representa hidrogênio, C1-4 alquila ou C3-6 cicloalquila, em que as C1-4 alquila e C3-6 cicloalquila podem ser opcionalmente substituídas por até três substituintes independentemente selecionados de halogênio, hidroxila, C1-4 alcóxi; ou qualquer de R59 e R60, ou R61 e R62, juntamente com o átomo de nitrogênio ao qual eles são ambos ligados, podem formar um anel heterocíclico alifático de 4 a 6 membros, em que o anel heterocíclico pode ser opcionalmente substituído por até dois substituintes independentemente selecionados de halogênio, hidroxila e C1-4 alquila ou C3-6 cicloalquila, em que as C1-4 alquila e C3-6 cicloalquila podem ser opcionalmente substituídas por um substituinte independentemente selecionado de halogênio, hidroxila e C1-4 alcóxi;
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18/638 [0095] L1, L2, L3 e L4 independentemente representam hidrogênio or metila;
[0096] R1 representa fenila ou um anel heteroarila de 5 a 6 membros tendo até três heteroátomos independentemente selecionados de N, O ou S, em cada dos quais o anel pode ser opcionalmente substituído por até três substituintes independentemente selecionados de halogênio, ciano, nitro, C(O)OR12, OR22, C1-7 alquila ou C3-8 cicloalquila, em que as C1-7 alquila e C3-8 cicloalquila podem ser opcionalmente substituídas por até três substituintes independentemente selecionados de halogênio, ciano, hidroxila ou C1-3 alcóxi;
[0097] ou R1 representa um anel aromático fundido ou heteroarila fundido de até 10 átomos tendo até três heteroátomos independentemente selecionados de N, O ou S, em cada dos quais o anel pode ser opcionalmente substituído por até três substituintes independentemente selecionados de halogênio, ciano, nitro, C(O)OR12, OR22, C1-6 alquila ou C3-6 cicloalquila, em que as C1-6 alquila e C3-6 cicloalquila podem ser opcionalmente substituídas por até três substituintes independentemente selecionados de halogênio, ciano, hidroxila ou C1-3 alcóxi; R12 e R22 cada qual independentemente representa hidrogênio, C1-6 alquila ou C3-6 cicloalquila, em que uma C1-6 alquila ou C3-6 cicloalquila pode ser opcionalmente substituída por um substituinte selecionado de halogênio, hidroxila ou C1-3 alcóxi;
[0098] Substituintes de anel mais convenientes incluem halogênio, por exemplo, flúor e por exemplo, cloro.
[0099] Mais convenientemente, a espécie -L- é representada por [00100] em que o anel D representa um anel fenila, tiofeno, furano ou tiazol;
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19/638 [00101] R representa até três substituintes de anel cada qual independentemente selecionado de H, F, Cl, C1-4 alquila, e CF3; t= 0 ou 1; G=O, CR43R44 ou S; quando G=O ou S então v = 1 ou 2; quando G=C então v = 0 , 1 ou 2, e em que a espécie -L- é ligada a átomos adjacentes em qualquer orientação.
[00102] Mais convenientemente, a espécie -L- é selecionada de -(fen-1,4-ileno)OCH2-, em que a fenila é opcionalmente substituída por 3, 2 ou 1 grupo metila;
-(fen-1,4-ileno)OCH2CH2-;
-CH2(fen-1,4-ileno)OCH2- em que a fenila é opcionalmente substituída por 3, 2 ou 1 de Cl ou F (selecionado independentemente);
-CH2(fen-1,4-ileno)-;
CH2(fen-1,4-ileno)CH2-;
-(CH2)7-;
-CH2(fen-1,3-ileno) - em que o anel fenila é opcionalmente substituído por até três de C1-3 alquila, F, Cl, e CF3 (selecionado independentemente);
-CH2(tien-2,5-ileno)CH2-;
-CH2(tien-2,5-ileno)-;
-CH2(tien-3,5-ileno)-;
-CH2(tien-2,4-ileno)-;
-CH2O(fen-1,3-ileno)-; e -CH2S(fen-1,3-ileno)-.
[00103] Outros ligantes convenientes incluem:
-(naft-1,5-ileno)-C(CH3)2-(fenil-1,3-ileno)-(fen-1,3-ileno)OCH2CH2-(fen-1,3-ileno)
-C(CH3)2-(CH2)4-C(CH3)2-(CH2)6Petição 870190058499, de 25/06/2019, pág. 25/650
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|
-CH2(fen-1,3-ileno)OCH2-;
-CH2S(CH2)5-; |
[00104] |
Cada dos ligantes acima empregados sozinhos represen- |
tam um aspecto independente da invenção.
[00105] |
Mais convenientemente a espécie -L- é selecionada de: -CH2(tien-2,5-ileno)-;
-CH2(fen-1,3-ileno)- em que a fenila pode ser mono- |
substituída por F;
[00106]
[00107] |
-CH2(tien-2,4-ileno)-; e
-CH2(tien-3,5-ileno)-;
Mais convenientemente, L1, L2, L3, e L4 = H
Mais convenientemente, R1 é selecionado de qualquer uma |
das espécies individuais como fornecido nos exemplos a seguir.
[00108]
[00109]
[00110]
[00111]
[00112] CR37R38. |
X representa O ou S.
m = 1 ou 2;
n = 1 ou 2;
W representa CR27R28CR29R30 ou CR31R32CR33R34CR35R36.
V e Z independentemente representam uma ligação ou |
[00113] |
V e Z são tal que todos os heteroátomos nos anéis sejam |
separados por pelo menos dois átomos de carbono (por exemplo, quando V é uma ligação então Z é CR37R38).
[00114] |
Y representa CO, CONR43, SO2; tal como CO ou SO2, por |
exemplo, CO.
[00115] |
R27, R28, R29, R30, R31, R32, R33, R34, R35, R36, R37 e R38 cada |
qual independentemente representa hidrogênio, flúor ou C1-3 alquila ou C3 cicloalquila.
[00116] |
Quando eles não representam hidrogênio ou flúor R27 e R28, |
R29 e R30, R31 e R32, R33 e R34, R35 e R36, ou R37 e R38 juntamente com o átomo de carbono ao qual eles são ambos ligados, podem formar
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21/638 um anel alifático de 3 a 6 membros.
[00117] R43 cada qual independentemente representa hidrogênio ou
C1-3 alquila ou C3 cicloalquila.
[00118] Mais convenientemente o espirociclo abrangido pelo sistema de anel bicíclico compreendendo -N-(A)m-C-V-X-W-N(Y-R1)-Z-(C)(A)n- é em que:
(i) m e n = 2, v = ligação, Z = CH2, X = O e W = CH2CH2 (ii) m e n = 2, v = ligação, Z = CH2, X = O e W = CF2CH2 (iii) m e n = 1, v = ligação, Z = CH2, X = O e W = CH2CH2 (iv) m e n = 2, v = ligação, Z = CH2CH2, X = O e W = CH2CH2 [00119] Mais convenientemente, o espirociclo é selecionado de (i) e (ii) acima.
[00120] Mais convenientemente, R1 é selecionado de tiofeno ou tiazol ou benzofurano cada qual opcionalmente substituído por um ou dois substituintes. Um dos substituintes opcionais é convenientemente selecionado de H, Cl, F e C1-3 alquila. O outro substituinte opcional é selecionado de metila, etila, propila, butila, CF3, CH2CF3, CH(CH3)2, CH(CH2CH3)2, CH(CH3)CH2,CH3, CH2CH(CH3)2, C(CH3)3, ciclopropila, ciclobutila e ciclopentila;
[00121] Cada composto da invenção exemplificado representa um aspecto particular e independente da invenção.
[00122] Compostos da invenção convenientes incluem os compostos de exemplos 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 11, 12, 14, 15, 19, 22, 23, 25, 26, 27, 28, 29, 36, 37, 38, 40, 42, 44, 45, 47, 48, 52, 56, 57, 58, 66, 67, 70, 71, 75, 76, 82, 83, 84, 86, 87, 88, 91, 93, 99, 105, 109, 111, 115, 265, 266, 278 e 280.
[00123] Compostos da invenção convenientes incluem os compostos de exemplos 22, 23, 36, 40, 42, 44, 47, 48, 57, 66, 82, 83, 84, 86, 87, 99, 265 e 266.
[00124] Compostos da invenção convenientes incluem os compos
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22/638 tos de exemplos 40, 42, 47, 48, 82, 84, 99 e 278.
[00125] Será entendido que certos compostos da presente invenção podem existir em formas solvatadas, por exemplo, hidratadas, bem como não solvatadas. Deve ser entendido que a presente invenção abrange todas tas tais formas solvatadas. Certas Compostos de fórmula (I) são capazes de existir em formas estereoisoméricas. Será entendido que a invenção abrange todos os isômeros geométricos e óticos dos compostos de fórmula (I) e misturas dos mesmos incluindo racematos. Tautômeros e misturas dos mesmos também formam um aspecto da presente invenção.
[00126] Convenientemente, o centro quiral no átomo de carbono substituído por hidróxi adjacente ao grupo de ligação de βadrenoceptor tem estereoquímica R.
[00127] Deve também ser entendido que a presente invenção abrange a substituição de qualquer carbono quaternário, mais especificamente o carbono quaternário presente no sistema espirocíclico, por um átomo de silício, por exemplo, como descrito em Silicon switches of Marketed Drugs: Mini-reviews in Med. Chem., 2006, 6, 1169-1177.
[00128] No contexto da presente relatório o termo ‘heteroaromático’ denota um grupo ou parte de um grupo compreendendo uma porção orgânica monocíclica ou multicíclica aromática opcionalmente substituída de 5 a 14 átomos de anel, preferivelmente de 5 a 10 átomos de anel, em que até quatro dos átomos de anel é/são elemento(s) exceto carbono, por exemplo, nitrogênio, oxigênio ou enxofre. Exemplos de tais grupos incluem grupos benzimidazolila, benzoxazolila, benzotiazolila, benzofuranila, benzotienila, furila, imidazolila, indolila, indolizinila, isoxazolila, isoquinolinila, isotiazolila, oxazolila, oxadiazolila, pirazinila, piridazinila, pirazolila, piridila, pirimidinila, pirrolila, quinazolinila, quinolinila, tetrazolila, 1,3,4-tiadiazolila, tiazolila, tienila e triazolila. O grupo heteroarila pode ser substituído por um ou mais grupos substi
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23/638 tuintes. O grupo heteroarila pode ser ligado ao restante do composto da invenção por qualquer átomo de carbono ou nitrogênio disponível. [00129] O termo ‘anel heterocíclico alifático’ denota anéis não aromáticos compreendendo pelo menos um heteroátomo selecionado do grupo consistindo em nitrogênio, oxigênio e enxofre. Exemplos de anéis heterocíclicos alifáticos de 4 a 8 membros de acordo com a presente invenção incluem pirrolidinila, piperidinila, piperazinila, morfolinila, homopiperazinila, homopiperidinila e azetidinila.
[00130] A menos que de outro modo estabelecido, no contexto da presente relatório porções e grupos alquila podem ser de cadeia linear ou ramificada e incluem, por exemplo, metila, etila, n-propila, isopropila, n-butila, iso-butila or terc-butila. Grupos cicloalquila são monocíclicos, por exemplo, ciclopentila ou Ciclo-hexila. Halogênio é por exemplo, fluoreto, cloreto ou brometo.
[00131] No contexto do presente relatório, onde é estabelecido que um grupo pode ser opcionalmente substituído com até três substituintes, o grupo pode ser não substituído ou substituído; quando substituído o grupo geralmente será substituído com um, dois or três substituintes. Em geral, uma porção hidroxila não será ligada a um átomo de carbono que é adjacente a um átomo de nitrogênio, outro átomo de oxigênio ou um átomo de enxofre.
[00132] A invenção também fornece um processo para a preparação de um composto de fórmula (I) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo como definido acima que compreende:
(a) quando L1 representa hidrogênio, reagir um composto de fórmula (II), ou um sal adequado do mesmo,
(II) [00133] em que LG1 representa um grupo de saída (por exemplo,
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24/638 cloreto, brometo, iodeto, metanossulfonato ou para-toluenossulfonato) e L, L2, L3, L4, R1, m, n, V, W, X, Y e Z são como definidos na fórmula (I), com um composto de fórmula (III), ou um sal adequado do mesmo (por exemplo, bromidrato, acetato ou cloridrato),
NH2
P1 Ar (III) [00134] em que Ar é como definido na fórmula (I) e P1 é hidrogênio ou um grupo protetor (por exemplo, terc-butildimetil silila) na presença de uma base (por exemplo, carbonato de potássio, trietilamina ou diisopropiletilamina), seguido pela remoção do grupo protetor (por exemplo, usando o complexo de ácido fluorídrico-piridina); ou (b) quando L1 representa hidrogênio, reagir um composto de fórmula (IV), ou um sal adequado do mesmo,
(IV) [00135] em que L, L2, L3, L4, R1, m, n, V, W, X, Y e Z são como defi nidos na fórmula (I), com um composto de fórmula (III) ou um sal ade quado do mesmo na presença de um agente de redução adequado (por exemplo, cianoboroidreto de sódio, triacetoxiboroidreto de sódio, ou hidrogênio na presença de um catalisador de paládio sobre carbono ou óxido de platina adequado); ou (c) reagir um composto de fórmula (V), ou um sal adequado do mes- mo,
(V)
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25/638 [00136] em que L, L1, L2, L3, L4, R1, m, n, V, W, X, Y e Z são como definidos na fórmula (I), P3 representa hidrogênio ou um grupo de ativação (por exemplo, 3-nitrofenilsulfonila) com um composto de fórmula (VI), ou um sal adequado do mesmo,
Ar (VI) [00137] em que Ar é como definido na fórmula (I), LG2 representa um grupo de saída (por exemplo, cloreto, brometo, iodeto, metanossulfonato ou para-toluenossulfonato) e P1 é como definido na fórmula (III) na presença de uma base (por exemplo, quando P3 é hidrogênio, carbonato de potássio, trietilamina, di-isopropiletilamina e, quando P3 é 3nitrofenilsulfonila, hidreto de sódio ou di-/so-propilamida de lítio), seguido pela remoção dos grupos protetores (por exemplo, usando o complexo de ácido fluorídrico-piridina, tiofenol, ácido tioacético); ou [00138] com um composto de fórmula (VII), ou um sal adequado do mesmo, Ar (VII) [00139] em que Ar é como definido na fórmula (I) na presença de uma base (por exemplo, quando P3 é hidrogênio, carbonato de potássio, trietilamina, di-isopropiletilamina e, quando P3 é 3nitrofenilsulfonila, hidreto de sódio ou di-/so-propilamida de lítio), seguido pela remoção dos grupos protetores (por exemplo, ácido trifluoroacético, tiofenol, ácido tioacético); ou [00140] com um composto de fórmula (VIII), ou um sal adequado do mesmo,
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[00141] em que Ar é como definido na fórmula (I), LG2 representa um grupo de saída (por exemplo, cloreto, brometo, iodeto, metanossulfonato ou para-toluenossulfonato) na presença de uma base (por exemplo, quando P3 é hidrogênio, carbonato de potássio, trietilamina, di-isopropiletilamina e, quando P3 é 3-nitrofenilsulfonila, hidreto de sódio ou di-/so-propilamida de lítio), seguido pela redução da cetona (por exemplo, usando boroidreto de sódio ou um complexo de borano/catalisador quiral), seguido pela remoção dos grupos protetores (por exemplo, ácido trifluoroacético, tiofenol, ácido tioacético); ou (d) quando L3 e L4 cada qual representa hidrogênio, reagir um composto de fórmula (IX), ou um sal adequado do mesmo,
(IX) [00142] em que Ar, L, L1 e L2 são como definidos na fórmula (I), P1 é como definido na fórmula (III), P3 representa um grupo protetor (por exemplo, terc-butilcarbamato ou 3-nitrofenilsulfonila) com um composto de fórmula (X), ou um sal adequado do mesmo,
(X) [00143] em que R1, m, n, V, W, X, Y e Z são como definidos na fór mula (I), na presença de um agente de redução adequado (por exemplo, cianoboroidreto de sódio, triacetoxiboroidreto de sódio, ou hidroPetição 870190058499, de 25/06/2019, pág. 32/650
27/638 gênio na presença de um catalisador de paládio sobre carbono ou óxido de platina adequado), seguido pela remoção dos grupos protetores (por exemplo, tratamento com tiofenol de ácido trifluoroacético ou clorídrico, ácido tioacético); ou (e) quando um ou ambos de L3 e L4 representa hidrogênio, reagir um composto de fórmula (XI), ou um sal adequado do mesmo,
LG3
(XI) [00144] em que Ar, L, L1 e L2 são como definidos na fórmula (I), P1 é como definido na fórmula (III), P3 representa um grupo protetor (por exemplo, terc-butilcarbonila ou 3-nitrofenilsulfonoíla), LG3 representa um grupo de saída (por exemplo, cloreto, brometo, iodeto, metanossulfonato ou para-toluenossulfonato), com um composto de fórmula (X) ou um sal adequado do mesmo, na presença de uma base (por exemplo, carbonato de potássio, trietilamina, di-isopropiletilamina), seguido pela remoção dos grupos protetores (por exemplo, ácido trifluoroacético, tiofenol, ácido tioacético); ou (f) quando L1 e L2 cada qual representa hidrogênio, reagir um composto de fórmula (XII), ou um sal adequado do mesmo,
(XII) [00145] em que Ar, L, L3, L4, m, n, V, W, X, Y e Z são como defini dos na fórmula (I) e P1 é como definido na fórmula (III) e P4 é um grupo pro
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28/638 tetor de nitrogênio adequado (por exemplo, terc-butilcarbonato) com um agente de redução adequado (por exemplo, complexo de borano-tetrahidrofurano), seguido pela remoção do grupo protetor (por exemplo, usando o complexo de ácido fluorídrico-piridina) e reação com um composto de fórmula (XIII), ou um sal adequado do mesmo,
LG— Y \ 1 R (XIII) [00146] em que R1 e Y são como definidos na fórmula (I) e LG4 representa hidroxila ou um grupo de saída (por exemplo, haleto, cloreto), ou um sal adequado do mesmo, seguido pela remoção dos grupos protetores (por exemplo, usando o complexo de ácido fluorídricopiridina, ácido clorídrico ou ácido trifluoroacético).
[00147] Quando LG4 representa hidroxila, a reação é convenientemente realizada na presença de um reagente de ativação, por exemplo, carbonildiimidazol, anidrido cíclico de ácido 1-propanofosfônico (T3P) ou O-(7-azabenzotnazol-1-il)-M,M,M’,V-tetrametilurôniohexafluorofosfato (HATU), em um solvente orgânico, por exemplo, V,V-dimetilformamida ou diclorometano, opcionalmente na presença de uma base (por exemplo, trietilamina), em uma temperatura, por exemplo, na faixa de 0 a 60 °C.
[00148] Quando LG4 representa um haleto (por exemplo, cloreto), a reação é convenientemente realizada na presença de uma base, por exemplo, trietilamina, di-isopropiletilamina ou piridina em um solvente orgânico, por exemplo, diclorometano ou tetra-hidrofurano em uma temperatura, por exemplo, na faixa de 0 a 25 °C; e [00149] opcionalmente após (a), (b), (c), (d), (e) ou (f) realizar um ou mais dos seguintes:
[00150] converter o composto obtido em um outro composto da invenção [00151] formar um sal farmaceuticamente aceitável do composto.
[00152] Nos processos (a), (c) e (e), a reação pode conveniente
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29/638 mente ser realizada em um solvente orgânico tal como N,Ndimetilformamida, etanol, n-butanol ou sulfóxido de dimetila, em uma temperatura, por exemplo, na faixa de 50 a 140 °C.
[00153] Nos processos (b) e (d), a reação pode convenientemente ser realizada eml um solvente orgânico tal como metanol, etanol, diclorometano, Nmetilpirrolidinona de ácido acético, ou N,Ndimetilformamida, contendo até 10% em peso de água e ácido acético.
[00154] No processo (f), a reação pode convenientemente ser realizada em um solvente orgânico tal como tetra-hidrofurano, em uma temperatura, por exemplo, na faixa de 0 a 80°C.
[00155] Alternativamente, os compostos de fórmula I (representados nos esquemas abaixo como fórmulas A, B e C) podem ser preparados como a seguir:
Rotina A
Carbonilação redutiva
Et3SiH, CO, Pd-116 qi G1 Base de Hunnig, THF g1
Reação Wittig
Ph3P=CHOR200 R2°'O'!^^x^Brou
G’ = Hou - f nBuU, iprMgCl A
R20°=alquila Geometria E ou Z N-formil morfolina
Animação redutiva
NMP, NaBH(OAc),
Ácido fórmico
Animação redutiva
NH,
R1
NMPou MeOH, NaCNBH
B ou
NMP, NaBH(OAc)3
P17 é H ou um grupo de proteção adequado que é removido após a aminação redutiva
Método alternativo para preparar o composto A
Reação Heck
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Catalisador de paládio adequado
Método alternativo para preparar o composto B
LG9 = Grupo de saída adequado tal como Br, Cl, OMs, OTs
HO
R1
Oxidação
Reagente Dess-Martin,
TFA, DCM
Método alternativo para preparar o composto B
R1______________________
G1 = Hou F
R200 = alquila
Geometria E ou Z
R201 = alquila ácido
B
Método para preparar o composto C onde LG9 é Cl ou Br
NBSou NCS
LG9 = Br, Cl
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Rotina B
A
P15 é um grupo de proteção adequado tal como CF3C(O)
Animação redutiva
Ácido Fórmico
Ar
NMPou MeOH, NaCNBH3 ou
NMP, NaBH(OAc)3
P17 é H ou um grupo de proteção adequado
P15
P16 é um grupo de proteção adequado tal como BOC
Remoção de P15
Para P15 = CF3C(O) amônia
1) R1CO2H,
Reagente de acoplamento (por exemplo HATU)
2) Remoção de P16 por exemplo, para BOC usa TFA e remoção de P17 (quando um grupo de proteção) por exemplo para tBuMe2Si usa Et3N.3HF
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Rotina C
LG10
R1
LG10 é um grupo de saída adequado tal como halogênio OMs ou OTs
1)
P17
I
2) Remoção de P17 (quando um grupo de proteção) por exemplo, para tBuMe2Si usa NEt3.3HF
P17 é H ou um grupo de proteção adequado [00156] Compostos de fórmula (II) podem ser preparados reagindose um composto de fórmula (XIV), ou um sal adequado do mesmo,
(XIV) [00157] em que L, L3, L4, R1, m, n, V, W, X, Y e Z são como defini dos na fórmula (II), com um composto de fórmula (XV) l_—Mt (XV) [00158] em que L2 é como definido na fórmula (II) e Mt representa um metal tal como lítio ou magnésio, ou alumínio ou boro (por exemplo, metil lítio, brometo de magnésio de metila, hidreto de alumínio de lítio, boroidreto de sódio) em um solvente orgânico, por exemplo, tetrahidrofurano ou éter, em uma temperatura, por exemplo, na faixa de 0 a 60°C, seguido por conversão do grupo hidroxila resultante em um grupo de saída adequado (por exemplo, cloreto, brometo, iodeto, metanossulfonato ou para-toluenossulfonato).
[00159] Compostos de fórmula (IV) podem ser preparados reagindo-se um composto de fórmula (XIV) com um composto de fórmula (XV) em um solvente orgânico, por exemplo, tetra-hidrofurano ou éter, em uma temperatura, por exemplo, na faixa de -10 a 60°C, seguido
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33/638 por oxidação do grupo hidroxila resultante com um agente oxidante adequado (por exemplo, reagente Swern, reagente Dess-Martin ou clorocromato de piridínio) em um solvente orgânico tal como diclorometano, N,N-dimetilformamida ou dimetilsulfóxido em uma temperatura, por exemplo, na faixa de -78 a 60 °C.
[00160] Compostos de fórmula (V) em que L1 representa hidrogênio e L, L2, L3, L4, P3, R1, m, n, V, W, X, Y e Z como definido na fórmula (V) podem ser preparados por
a) reação de um composto de fórmula (II) com azida de sódio, em um solvente orgânico por exemplo, tetra-hidrofurano, N,Ndimetilformamida ou dimetilsulfóxido em uma temperatura, por exemplo, na faixa de 25 a 85 °C, seguido por redução do composto azido resultante usando um agente de redução adequado (por exemplo, trifenilfosfina) em um solvente orgânico por exemplo, tetra-hidrofurano e água, e eventualmente seguido por proteção da amina resultante (por exemplo, tratamento com cloreto de 3-nitrofenilsulfonila na presença de uma base tal como piridina); ou,
b) reação de um composto de fórmula (IV) com uma amina (por exemplo, benzilamina, α-metil benzilamina, 4-metoxibenzilamina ou 2,4-metoxibenzilamina) seguido por redução da imina resultante usando um agente de redução adequado (por exemplo, cianoboroidreto de sódio ou triacetoxiboroidreto de sódio) em um solvente orgânico tal como metanol, etanol, diclorometano, ácido acético, Nmetilpirrolidinona ou N,N-dimetilformamida contendo até 10% em peso de água e ácido acético, seguido por remoção do grupo protetor de benzila resultante usando o reagente apropriado (por exemplo, hidrogênio e um catalisador adequado (paládio sobre carbono ou hidróxido de paládio), 2,3-dicloro-5,6-dicianobenzoquinona (DDQ), ou nitrato de cério de amônio (CAN)) em um solvente orgânico, por exemplo, etanol, metanol, tetra-hidrofurano, diclorometano, acetonitrila, água, ou uma
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34/638 mistura dos mesmos, em uma temperatura variando de 25 a 80 °C, e eventualmente seguido por proteção da amina resultante (por exemplo, tratamento com cloreto de 3-nitrofenilsulfonila na presença de uma base tal como piridina);
[00161] Compostos de fórmula (V) em que L, L1, L2, L3, L4, P3, R1, m, n, V , W, X, Y e Z são como definidos na fórmula (V) podem ser preparados reagindo-se um composto de fórmula (XVI), ou um sal adequado do mesmo, (XVI) [00162] em que LG5 é um grupo de saída (por exemplo, hidroxila ou cloro), L, L1, L2, L3, L4, R1, m, n, V, W, X, Y e Z são como definidos na fórmula (V), com reagentes tal como, quando LG5 é hidroxila, azida difenilfosfônica, na presença de uma amina (por exemplo, trietilamina), em um solvente orgânico, por exemplo, terc-butanol, tetra-hidrofurano, diclorometano, água, ou uma mistura dos mesmos, em uma temperatura variando de 25 a 100 °C, ou quando LG5 é cloro, azida de sódio, em um solvente orgânico, por exemplo, éter, terc-butanol, tetrahidrofurano, água, ou uma mistura dos mesmos, em uma temperatura variando de 25 a 100°C (Angewandte Chemie, 2005, 54, 5188), eventualmente seguido por proteção da amina resultante (por exemplo, tratamento com cloreto de 3-nitrofenilsulfonila na presença de uma base tal como piridina).
[00163] Compostos de fórmula (III), (VI), (VII), (VIII), (XIII) e (XV) são conhecidos na literatura ou podem ser preparados usando técnicas conhecidas.
[00164] Compostos de fórmula (IX) podem ser preparados por
a) reação de um composto de fórmula (XVII), ou um sal adequado do
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35/638 mesmo,
[00165] em que P5 é hidrogênio ou um grupo protetor (por exemplo, terc-butildimetilsilila, tetra-hidropirano) e P3, L, L1 e L2 são como defini dos na fórmula (IX), com um composto de fórmula (VI), (VII) ou (VIII), ou um sal adequado do mesmo, na presença de uma base (por exemplo, carbonato de potássio, trietilamina ou di-isopropiletilamina quando P3 é hidrogênio e hidreto de sódio ou di-/so-propilamida de lítio quando P3 é 3-nitrofenilsulfonila) em um solvente orgânico tal como N,N dimetilformamida, N-metilpirrolidinona, tetra-hidrofurano, etanol, nbutanol ou sulfóxido de dimetila, em uma temperatura, por exemplo, na faixa de 50 a 140 °C. Quando a reação é realizada com o composto de fórmula (VIII), uma segunda etapa envolvendo a redução da cetona (por exemplo, usando boroidreto de sódio ou um complexo de borano/catalisador quiral) é requerida. Remoção seletiva apropriada do grupo protetor (por exemplo, complexo de ácido fluorídrico-piridina, fluoreto de tetrabutilamônio, ácido clorídrico diluído ou resina Amber lyst-15 em metanol) e oxidação do álcool resultante no aldeído correspondente com um agente oxidante adequado (clorocromato de piridínio, reagente Dess-Martin ou reagente Swern) resultam no composto de fórmula (IX); ou,
b) reação de um composto de fórmula (XVIII), ou um sal adequado do mesmo,
(XVIII) [00166] em que P6 e P7 representam um grupo protetor de carbonila
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36/638 acíclico ou cíclico (por exemplo, dimetóxi ou dietóxi acetal, 1,3dioxolano ou 1,3-dioxano) e L, L1, L2, e P3 são como definidos na fórmula (IX), com um composto de fórmula (VI), (VII) ou (VIII), ou um sal adequado do mesmo, na presença de uma base (por exemplo, carbonato de potássio, trietilamina ou di-isopropiletilamina quando P3 é hidrogênio e hidreto de sódio ou di-/so-propilamida de lítio quando P3 é
3-nitrofenilsulfonila) em um solvente orgânico tal como N,Ndimetilformamida, N-metilpirrolidinona, tetra-hidrofurano, etanol, nbutanol ou sulfóxido de dimetila, em uma temperatura, por exemplo, na faixa de 50 a 140 °C. Quando reagindo com um composto de fórmula (VIII), esta é seguida pela redução da cetona (por exemplo, usando boroidreto de sódio ou um complexo de borano/catalisador quiral). A remoção do grupo protetor (por exemplo, ácido clorídrico diluído ou resina Amberlyst-15 em metanol) resulta em um composto de fórmula (IX); ou,
c) quando L1 representa hidrogênio, reação de um composto de fórmula (XIX), ou um sal adequado do mesmo,
-P5 (XIX) [00167] em que P5 é hidrogênio ou um grupo protetor (por exemplo, terc-butildimetilsilila, tetra-hidropirano) e, L e L2 são como definidos na fórmula (IX), com um composto de fórmula (III), ou um sal adequado do mesmo, na presença de um agente de redução adequado (por exemplo, cianoboroidreto de sódio, triacetoxiboroidreto de sódio, ou hidrogênio na presença de um catalisador de paládio sobre carbono ou óxido de platina adequado) em um solvente orgânico tal como metanol, etanol, diclorometano, ácido acético, N-metilpirrolidinona ou N,Ndimetilformamida, contendo até 10% em peso de água e ácido acético, seguido por remoção seletiva apropriada do grupo protetor (por exem
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37/638 plo, complexo de ácido fluorídrico-piridina, fluoreto de tetrabutilamônio, ácido clorídrico diluído ou resina Amberlyst-15 em metanol) e oxidação do álcool resultante no aldeído correspondente com um agente oxidante adequado (clorocromato de piridínio, reagente Dess-Martin ou reagente Swern); ou
d) quando L1 representa hidrogênio, reação de um composto de fórmula (XX), ou um sal adequado do mesmo,
[00168] em que P6 e P7 representam um grupo protetor de carbonila acíclico ou cíclico (por exemplo, dimetóxi ou dietóxi acetal, 1,3dioxolano ou 1,3-dioxano) e, L e L2 são como definidos na fórmula (IX), com um composto de fórmula (III), ou um sal adequado do mesmo, na presença de um agente de redução adequado (por exemplo, cianoboroidreto de sódio, triacetoxiboroidreto de sódio, ou hidrogênio na pre sença de um catalisador de paládio sobre carbono ou óxido de platina adequado) em um solvente orgânico, tal como metanol, etanol, diclorometano, ácido acético, M-metipirrolidinona ou N,M-dimetilformamida, contendo até 10% em peso de água e ácido acético, seguido pela remoção do grupo protetor (por exemplo, ácido clorídrico diluído ou resi na Amberlyst-15 em metanol).
[00169] Compostos de fórmula (XI) podem ser preparados convertendo-se um composto de fórmula (IX), ou um precursor no composto de fórmula (IX) como descrito acima, escolhendo uma sequência apropriada de reações, por exemplo, redução de um aldeído em um álcool (por exemplo, boroidreto de sódio), remoção seletiva apropriada do grupo protetor (por exemplo, complexo de ácido fluorídrico-piridina, fluoreto de tetrabutilamônio, ácido clorídrico diluído ou resina Amber lyst-15 em metanol) e conversão de um álcool em um grupo de saída
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38/638 adequado (por exemplo, cloreto, brometo, iodeto, metanossulfonato ou para-toluenossulfonato); ou [00170] Compostos de fórmula (XII) podem ser preparados reagindo um composto de fórmula (XXI), ou um sal adequado do mesmo,
O,
LG6 (XXI) [00171] em que L, L3, L4, P4, m, n, V, W, X e Z são como definidos na fórmula (XII), e LG6 representa hidroxila ou um grupo de saída (por exemplo, cloro) com um composto de fórmula (III), ou um sal adequado do mesmo;
[00172] quando LG6 representa hidroxila, a reação é convenientemente realizada na presença de um reagente de ativação, por exemplo, carbonildiimidazol, anidrido cíclico de ácido 1-propanofosfônico (T3P) ou O-(7-azabenzotriazol-1-il)-M,M,M’,M-tetrametilurôniohexafluorofosfato (HATU), em um solvente orgânico, por exemplo, Μ,Μ-dimetilformamida ou diclorometano, opcionalmente na presença de uma base (por exemplo, trietilamina), em uma temperatura, por exemplo, na faixa de 0 a 60 °C, quando LG6 representa cloro, a reação é convenientemente realizada na presença de uma base, por exemplo, trietilamina ou di-isopropiletilamina em um solvente orgânico, por exemplo, diclorometano ou tetra-hidrofurano em uma temperatura, por exemplo, na faixa de 0 a 25 °C.
[00173] Compostos de fórmula (V), (X), (XIV), (XVI), e (XXI) podem ser acessados através de uma reação de acoplamento geral de um composto de fórmula (XIII) em que R1, Y são como definidos na fórmula (I) e LG4 representa hidroxila ou um grupo de saída (por exemplo, haleto, cloreto), ou um sal adequado do mesmo, [00174] quando LG4 representa hidroxila, a reação é convenientemente realizada na presença de um reagente de ativação, por exemPetição 870190058499, de 25/06/2019, pág. 44/650
39/638 plo, carbonildiimidazol, anidrido cíclico de ácido 1-propanofosfônico (T3P) ou O-(7-azabenzotriazol-1-il)-M,M,M’,M-tetrametilurôniohexafluorofosfato (HATU), em um solvente orgânico, por exemplo, Μ,Μ-dimetilformamida ou diclorometano, opcionalmente na presença de uma base (por exemplo, trietilamina), em uma temperatura, por exemplo, na faixa de 0 a 60 °C, ou [00175] quando LG4 representa um haleto (por exemplo, cloreto), a reação é convenientemente realizada na presença de uma base, por exemplo, trietilamina, di-isopropiletilamina ou piridina em um solvente orgânico, por exemplo, diclorometano ou tetra-hidrofurano em uma temperatura, por exemplo, na faixa de 0 a 25 °C, com um composto de fórmula geral (XXII), ou um sal adequado do mesmo,
(XXII) [00176] em que m, n, V, W, X, Y e Z são como definidos na fórmula (I) e,
- para compostos de fórmula (V), P9 representa
H-N L 4
I3 L
P3 [00177] em que L, L1, L2, L3, L4 e P3 são como definidos na fórmula (V);
- para compostos de fórmula (X), P9 representa um grupo de proteção de nitrogênio apropriado, tal como terc-butoxicarbonila, ou
- para compostos de fórmula (XIV), P9 representa
L3
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40/638 [00178] em que L, L3 e L4 são como definidos na fórmula (XIV), em que P11 e P12 representam um grupo protetor de carbonila acíclico ou cíclico (por exemplo, dimetóxi ou dietóxi acetal, 1,3-dioxolano ou 1,3dioxano), seguido por desproteção adequada (por exemplo, ácido clorídrico diluído ou resina Amberlyst-15 em metanol);
- para compostos de fórmula (XVI), P9 representa l1 L2 L3 .
P14O
L4 [00179] em que L, L1, L2, L3, e L4 são como definidos na fórmula (XVI), em que P14 representa um grupo protetor ácido (por exemplo, metila, etila ou terc-butila), seguido por desproteção adequada (por exemplo, hidróxido de lítio ou hidróxido de sódio, ácido trifluoroacético, ácido clorídrico);
- para compostos de fórmula (XXI), P9 representa I 3
O L .
O,
P14O
L4 [00180] em que L, L3 e L4 são como definidos na fórmula (XXI), em que P14 representa um grupo protetor ácido (por exemplo, terc-butila), seguido por desproteção adequada (por exemplo, ácido trifluoroacético, ácido clorídrico);
[00181] Um composto de fórmula geral (XXII), em que V representa uma ligação, X representa O, W representa CR27R28CR29R30, Z representa CR37R38, R27, R28, R29, R30, R37, R38 cada qual representa hidrogênio, e P9 representa um grupo de proteção de nitrogênio apropriado tal como terc-butoxicarbonila, pode ser preparado de um composto de fórmula (XXIII)
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H ^^NH (xxiii) [00182] em que P9, m e n são como definidos no composto de fórmula (XXII), por tratamento com um agente de redução adequado tal como complexo de borano-THF em um solvente adequado tal como tetrahidrofurano a 30 a 70oC com o complexo de boro resultante decomposto com uma amina adequada tal como M,M2-dimetilenoamina-1,2-diamina em metanol a 60 a 90oC [00183] Um composto de fórmula (XXIII) pode ser preparado de um composto de fórmula (XXIV)
P9—N
(XXIV) [00184] em que LG7 é um grupo de saída adequado tal como halo gênio ou tosilato e P9, m e n são como definido no composto de fórmu la (XXIII), por tratamento com uma base adequada tal como tercbutóxido de potássio em um solvente adequado tal como tetrahidrofurano a 50 a 90oC.
[00185] Um composto de fórmula (XXIV) pode ser preparado reagindo um composto de fórmula (XXV) com um composto de fórmula (XXVI)
LG7 /4” 0H \^0 'N Nh / <T 2 (XXV) LG8 (XXVI) [00186] em que LG8 representa um grupo hidroxila ou halogênio tal como cloreto e P9, m, n e LG7 são como definido no composto de fór mula (XXIV);
[00187] Para o caso onde LG8 representa hidroxila, a reação é conPetição 870190058499, de 25/06/2019, pág. 47/650
42/638 venientemente realizada na presença de um reagente de ativação, por exemplo, carbonildiimidazol, anidrido cíclico de ácido 1propanofosfônico (T3P) ou O-(7-azabenzotriazol-1-il)-M,M,M’,Mtetrametilurônioexafluorofosfato (HATU), em um solvente orgânico, por exemplo, Μ,Μ-dimetilformamida ou diclorometano, opcionalmente na presença de uma base (por exemplo, trietilamina), em uma temperatura, por exemplo, na faixa de 0 a 60 °C;
[00188] Para o caso onde LG8 representa cloreto, a reação é Convenientemente realizada na presença de uma base, por exemplo, trietilamina ou di-isopropiletilamina em um solvente orgânico, por exemplo, diclorometano ou tetra-hidrofurano em uma temperatura, por exemplo, na faixa de 0 a 25 °C;
[00189] Um composto de fórmula (XXV) pode ser preparado reagindo um composto de fórmula (XXVII)
(XXVII) [00190] em que P9, m e n são como definido no composto de fórmu la (XXV), com amônia em um solvente adequado tal como metanol em uma temperatura na faixa de 20-60oC;
[00191] Um composto de fórmula (XXVII) pode ser preparado reagindo um composto de fórmula (XXVIII) (x)m P9--N /=O
r)n (XXVIII) [00192] em que P9, m e n são como definido no composto de fórmu la (XXVII), com iodeto de trimetil sulfoxônio na presença de uma base adequada tal como hidreto de sódio ou terc-butóxido de potássio em um solvente adequado tal como dimetilsufóxido a uma temperatura na faica de 0 a 20oC;
[00193] Além do processo acima referir-se às etapas de oxidação e
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43/638 redução simples, estas são realizadas sob condições padrão bem estabelecidas na literatura (por exemplo, Dess-Martin, Swern, clorocromato de piridínio, oxidações de complexo de trióxido de enxofre de piridínio). Eles podem ser convenientemente realizados em um solvente orgânico tal como diclorometano, em uma faixa de temperatura de -78 a 50 °C (Annual Reports on the Progress of Chemistry, Seção B: Organic Chemistry, 2004, 700, 51-70).
[00194] Um composto de fórmula geral (XXII), em que V representa uma ligação, X representa O, W representa CR27R28CR29R30, Z representa CR37R38, R27, R28, R29, R30, R37 R38 cada qual representa hidrogênio, e P9 representa um grupo de proteção de nitrogênio apropriado, pode ser preparado de um composto de fórmula (XXIX) sob condições de reação adequadas tal como em ácido forte
OH
P9--N X / ^^NH (XXIX) [00195] Um composto de fórmula geral (XXIX) pode ser preparado reagindo um composto de fórmula (XXVII) com etanolamina.
[00196] Um composto de fórmula geral (XXII), em que V representa uma ligação, X representa O, W representa CR27R28CR29R30, Z representa CR37R38, R27, R28, R29, R30, R37, R38 cada qual representa hidrogênio, e P9 representa um grupo de proteção de nitrogênio apropriado podem ser preparado de um composto de fórmula (XXX) onde LG11 é um grupo de saída adequado tal como halogênio, OMs ou OTs.
LG11
P9—N
(XXX) [00197]
Um composto de fórmula geral (XXX) pode ser formado de
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44/638 um composto de fórmula (XXIX) sob condições apropriadas.
[00198] Um composto de fórmula (XIV) pode ser preparado de um composto de fórmula (XXXI) onde CH2L5 é L e R200 é alquila ou alquila substituída com dialquilamina por tratamento sob condições acídicas tal como ácido fórmico.
(XXXI) [00199] Um composto de fórmula (XXX1) pode ser preparado de um composto de fórmula (XXXII) por meio de tratamento com um composto de fórmula (XXXIII).
(XXXII)
PPh3=CHOR200 (XXXIII) [00200] Um composto de fórmula (IV) ou (XIV) pode ser preparado de um composto de fórmula (XXXII) por oxidação do álcool sob condições adequadas tal como usando o reagente Dess-Martin em um sol vente adequado tal como diclorometano contendo ácido trifluoroacético.
HO
L
R [00201] Um composto de fórmula (XXXII) pode ser preparado reagindo um composto de fórmula (XXXIII) onde P18 é a hidrogênio ou um grupo de proteção adequado e LG12 representa um grupo de saída (por exemplo, cloreto, brometo, iodeto, metanossulfonato ou paratoluenossulfonato), com um composto de fórmula (X) ou um sal adePetição 870190058499, de 25/06/2019, pág. 50/650
45/638 quado do mesmo, na presença de uma base (por exemplo, carbonato de potássio, trietilamina, di-isopropiletilamina), seguido pela remoção dos grupos protetores (por exemplo, ácido trifluoroacético, tiofenol, ácido tioacético);
LG12
(XXXIII) [00202] Um composto de fórmula (XXXII) pode ser preparado reagindo um composto de fórmula (XXXIV) onde P18 representa hidrogênio ou um grupo protetor adequado com um composto de fórmula (X), ou um sal adequado do mesmo, na presença de um agente de redução adequado (por exemplo, cianoboroidreto de sódio, triacetoxiboroidreto de sódio, ou hidrogênio na presença de um catalisador de paládio sobre carbono ou óxido de platina adequado), seguido pela remoção dos grupos protetores (por exemplo, tratamento com tiofenol de ácido trifluoroacético ou clorídrico, ácido tioacético);
[00203] Um composto de fórmula (XXXI) pode ser preparado reagindo um composto de fórmula (XXXV) onde CH2L5 é L e R200 é alquila ou alquila substituída com dialquilamina e LG13 representa um grupo de saída (por exemplo, cloreto, brometo, iodeto, metanossulfonato ou para-toluenossulfonato), com um composto de fórmula (X) ou um sal adequado do mesmo, na presença de uma base (por exemplo, carbonato de potássio, trietilamina, di-isopropiletilamina), seguido pela remoção dos grupos protetores (por exemplo, ácido trifluoroacético, tiofenol, ácido tioacético);
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LG13
(XXXV) [00204] Um composto de fórmula (XXXI) pode ser preparado reagindo um composto de fórmula (XXXVI) onde CH2L5 é L e R200 é alquila ou alquila substituída com dialquilamina com um composto de fórmula (X), ou um sal adequado do mesmo, na presença de um agente de redução adequado (por exemplo, cianoboroidreto de sódio, triacetoxiboroidreto de sódio, ou hidrogênio na presença de um catalisador de paládio sobre carbono ou óxido de platina adequado), seguido pela remoção dos grupos protetores (por exemplo, tratamento com tiofenol de ácido trifluoroacético ou clorídrico, ácido tioacético);
(XXXVI) [00205] Compostos conveniente de fórmula (IV) incluem aqueles onde m e n = 2, V = ligação, Z = CH2, X = O e W = CH2CH2, Y = CO, R1 é 4-tiazol opcionalmente substituído na posição 2 do tiazol por metila, etila, propila, butila, CF3, CH2CF3, CH(CH3)2, CH(CH2CH3)2, CH(CH3)CH2,CH3, CH2CH(CH3)2, C(CH3)3, ciclopropila, ciclobutila e ciclopentila; ou R1 é 3-tiofeno opcionalmente substituído na posição 5 do tiofeno por metila, etila, propila, butila, CF3, CH2CF3, CH(CH3)2, CH(CH2CH3)2, CH(CH3)CH2,CH3, CH2CH(CH3)2, C(CH3)3, ciclopropila, ciclobutila e ciclopentila;
(XXXVII) representam R1 = 4-tiazol e 3-tiofeno
(XXXVII)
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47/638 [00206] Compostos conveniente de fórmula (X) e análogos de nitrogênio adequadamente protegidos incluem aqueles onde m e n = 2, V = ligação, Z = CH2, X = O e W = CH2CH2, Y = CO, R1 é 4-tiazol opcionalmente substituído na posição 2 do tiazol por metila, etila, propila, butila, CF3, CH2CF3, CH(CH3)2, CH(CH2CH3)2, CH(CH3)CH2,CH3, CH2CH(CH3)2, C(CH3)3, ciclopropila, ciclobutila e ciclopentila; ou R1 é
3-tiofeno opcionalmente substituído na posição 5 do tiofeno por metila, etila, propila, butila, CF3, CH2CF3, CH(CH3)2, CH(CH2CH3)2, CH(CH3)CH2,CH3, CH2CH(CH3)2, C(CH3)3, ciclopropila, ciclobutila e ciclopentila;
[00207] R1 = 4-tiazol e 3-tiofeno são como representado na fórmula (XXXVII) [00208] Compostos convenientes de fórmula (XIV) incluem aqueles onde m e n = 2, V = ligação, Z = CH2, X = O e W = CH2CH2, Y = CO, R1 é 4-tiazol opcionalmente substituído na posição 2 do tiazol por metila, etila, propila, butila, CF3, CH2CF3, CH(CH3)2, CH(CH2CH3)2, CH(CH3)CH2,CH3, CH2CH(CH3)2, C(CH3)3, ciclopropila, ciclobutila e ciclopentila; ou R1 é 3-tiofeno opcionalmente substituído na posição 5 do tiofeno por metila, etila, propila, butila, CF3, CH2CF3, CH(CH3)2, CH(CH2CH3)2, CH(CH3)CH2,CH3, CH2CH(CH3)2, C(CH3)3, ciclopropila, ciclobutila e ciclopentila;
[00209] R1 = 4-tiazol e 3-tiofeno são como representado na fórmula (XXXVII).
[00210] Compostos conveniente de fórmula (XXXI) incluem aqueles onde m e n = 2, V = ligação, Z = CH2, X = O e W = CH2CH2, Y = CO, R1 é 4-tiazol opcionalmente substituído na posição 2 do tiazol por metila, etila, propila, butila, CF3, CH2CF3, CH(CH3)2, CH(CH2CH3)2, CH(CH3)CH2,CH3, CH2CH(CH3)2, C(CH3)3, ciclopropila, ciclobutila e ciclopentila; ou R1 é 3-tiofeno opcionalmente substituído na posição 5 do tiofeno por metila, etila, propila, butila, CF3, CH2CF3, CH(CH3)2,
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CH(CH2CH3)2, CH(CH3)CH2,CH3, CH2CH(CH3)2, C(CH3)3, ciclopropila, ciclobutila e ciclopentila;
[00211] R1 = 4-tiazol e 3-tiofeno são como representado na fórmula (XXXVII) [00212] Compostos convenientes de fórmula (XXXII) incluem aqueles onde m e n = 2, V = ligação, Z = CH2, X = O e W = CH2CH2, Y = CO, R1 é 4-tiazol opcionalmente substituído na posição 2 do tiazol por metila, etila, propila, butila, CF3, CH2CF3, CH(CH3)2, CH(CH2CH3)2, CH(CH3)CH2,CH3, CH2CH(CH3)2, C(CH3)3, ciclopropila, ciclobutila e ciclopentila; ou R1 é 3-tiofeno opcionalmente substituído na posição 5 do tiofeno por metila, etila, propila, butila, CF3, CH2CF3, CH(CH3)2, CH(CH2CH3)2, CH(CH3)CH2,CH3, CH2CH(CH3)2, C(CH3)3, ciclopropila, ciclobutila e ciclopentila;
[00213] R1 = 4-tiazol e 3-tiofeno são como representados na fórmula (XXXVII).
[00214] Compostos de fórmula (VI), (VII), (VIII), (XIII), (XV), (XVII), (XVIII), (XIX), (XX), (XXVI) e (XXVIII) são ou comercialmente disponíveis, conhecidos na literatura, ou podem ser facilmente preparados por aqueles versados na técnica usando um dos processos descritos acima ou usando técnicas conhecidas.
[00215] Outros compostos intermediários são novos e representam aspectos independentes da invenção. Em particular, diversos dos novos compostos intermediários descritos aqui são os compostos que são capazes de causar o bloqueio em receptores muscarínicos de M3. Os compostos intermediários da presente invenção tendo atividade como antagonistas muscarínicos incluem:
[00216] (9-(2-(4-(Hidroximetil)fenóxi)etil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-4-il)(2-metiltiazol-4-il)metanona;
[00217] (9-(9-Hidroxinonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4il)(2-metiltiazol-4-il)metanona;
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49/638 [00218] (9-(2-(4-(2-Hidroxietil)fenóxi)etil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-4-il)(2-metiltiazol-4-il)metanona;
[00219] (9-(2-(5-(2-Hidroxietil)tiofen-2-il)etil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-4-il)(2-metiltiazol-4-il)metanona;
[00220] (9-(4-(2-Hidroxietil)fenetil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-4-il)(2-metiltiazol-4-il)metanona;
[00221] 9-(3-(2-Hidroxietil)benzil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-4-il)(2-metiltiazol-4-il)metanona;
[00222] (9-(3-(2-Hidroxietil)benzil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-4-il)(5-metiltiofen-2-il)metanona;
[00223] e sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos.
[00224] Será apreciado por aqueles versados na técnica que nos processos da presente invenção certos grupos funcionais tais como grupos hidroxila ou amino nos reagentes podem necessitar ser protegidos por grupos de proteção. Desse modo, a preparação dos compostos de fórmula (I) pode envolver, em um estágio apropriado, a adição ou remoção de um ou mais grupos de proteção.
[00225] A proteção e desproteção de grupos funcionais são descritas em 'Protective Groups in Organic Chemistry', editado por J.W.F. McOmie, Plenum Press (1973) e 'Protective Groups in Organic Synthesis', 3a edição, T.W. Greene e P.G.M. Wuts, Wiley-Interscience (1999).
[00226] Compostos de fórmula (I) podem ser convertidos em outros compostos de fórmula (I) usando procedimentos padrão.
[00227] Os compostos de fórmula I têm atividade como produtos farmacêuticos, em particular como agonistas de receptor β adrenérgico duais e agentes anticolinérgicos incluindo antagonistas de receptor muscarínico (M1, M2, e M3), em particular antagonistas M3. Doenças e condições que podem ser tratadas com os compostos de fórmula (I) e seus sais farmaceuticamente aceitáveis incluem:
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50/638 [00228] 1. trato respiratório: doenças obstrutivas das vias aéreas incluindo: asma, incluindo asma brônquica, alérgica, intrínseca, extrínseca, induzida por exercício, induzida por fármaco (incluindo induzida por aspirina e NSAID) e induzida por poeira, tanto intermitente quanto persistente e de todas severidades, e outras causas de hiperresponsividade das vias aéreas; doença pulmonar obstrutiva crônica (COPD); bronquite, incluindo bronquite infecciosa e eosinofílica; enfisema; bronquiectasia; fibrose cística; sarcoidose; pulmão de fazendeiro e doenças relacionadas; pneumonite por hipersensibilidade; fibrose pulmonar, incluindo alveolíte fibrosante criptogênica, pneumonias intersticiais idiopáticas, terapia antineoplásica complicando com fibrose e infecção crônica, incluindo tuberculose e aspergilose e outras infecções fúngicas; complicações de transplante de pulmão; distúrbios vasculíticos e trombóticos da vasculatura pulmonar, e hipertensão pulmonar; atividade antitussígena incluindo tratamento de tosse crônica associada com condições inflamatórias e secretórias das vias aéreas, e tosse iatrogênica; rinite aguda e crônica incluindo rinite medicamentosa, e rinite vasomotora; rinite alérgica perene e sazonal incluindo rinite nervosa (febre do feno); polipose nasal; infecção viral aguda incluindo o resfriado comum, e infecção devido ao vírus sincicial respiratório, influenza, coronavírus (incluindo SARS) ou adenovírus; ou esofagite eosinofílica;
[00229] 2. osso e articulações: artrites associadas com ou incluindo osteoartrite/osteoartrose, tanto primária quanto secundária a, por exemplo, displasia de quadril congênita; espondilite cervical e lombar, e dor de pescoço e dorso inferior; osteoporose; artrite reumatoide e doença de Still; espondiloartropatias soronegativas incluindo espondilite anquilosante, artrite psoriática, artrite reativa e espondartropatia indiferenciada; artrite séptica e outras artropatias relacionadas à infecção e distúrbios ósseos tais como tuberculose, incluindo doença de
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Potts e síndrome de Poncet; sinovite induzida por cristal aguda e crônica incluindo gota por urato, doença de deposição de pirofosfato de cálcio, e inflamação de tendão, bursal e sinovial relacionada a apatita de cálcio; doença de Behcet; síndrome de Sjogren primária e secundária; esclerose sistêmica e esclerodermia limitada; lúpus eritematoso sistêmico, doença de tecido conjuntivo mista, e doença de tecido conjuntivo indiferenciada; miopatias inflamatórias incluindo dermatomiosite e polimiosite; polimalgia reumática; artrite juvenil incluindo artrites inflamatórias idiopáticas de qualquer que seja a distribuição da articulação e síndromes associadas, e febre reumática e suas complicações sistêmicas; vasculites incluindo arterite de célula gigante, arterite de Takayasu, síndrome Churg-Strauss, poliarterite nodosa, poliarterite microscópica, e vasculites associadas com infecção viral, reações de hipersensibilidade, crioglobulinas, e paraproteínas; dor de dorso inferior; febre do mediterrâneo familiar, síndrome Muckle-Wells, e febre hiberniana familiar, doença Kikuchi; artralgias induzidas por fármaco, tendinites, e miopatias;
[00230] 3. dor e remodelagem de tecido conjuntivo de distúrbios musculoesqueléticos devido a injúria [por exemplo, injúria por esportes] ou doença: artrites (por exemplo, artrite reumatoide, osteoartrite, gota ou artropatia por cristal), outra doença articular (tal como degeneração de disco intervertebral ou degeneração de articulação temporomandibular), doença por remodelagem óssea (tal como osteoporose, doença de Paget ou osteonecrose), policondrites, esclerodermia, distúrbio de tecido conjuntivo misto, espondiloartropatias ou doença periodontal (tal como periodontite);
[00231] 4. pele: psoríase, dermatite atópica, dermatite de contato ou outras dermatoses eczematosas, e reações de hipersensibilidade tipo retardada; fito- e fotodermatite; dermatite seborreica, dermatite herpetiforme, líquen plano, líquen escleroso e atrófico, piodermatite gangre
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52/638 nosa, sarcoide de pele, lúpus eritematoso discoide, pênfigo, penfigoide, epidermólise bolhosa, urticária, angioedema, vasculites, eritemas tóxicos, eosinofilias cutâneas, alopécia areata, calvície de padrão masculino, síndrome de Sweet, síndrome de Weber-Christian, eritema multiforme; celulite, tanto infecciosa quanto não infecciosa; paniculite; linfomas cutâneos, câncer de pele não melanoma e outras lesões displásicas; distúrbios induzidos por fármaco incluindo erupções por fármaco fixas;
[00232] 5. olhos: blefarite; conjuntivite, incluindo conjuntivite alérgica perene e vernal; irite; uveíte anterior e posterior; coroidite; autoimune; distúrbios degenerativos ou inflamatórios que afetam a retina; oftalmite incluindo oftalmite simpática; sarcoidose; infecções incluindo viral, fúngica, e bacteriana;
[00233] 6. trato gastrointestinal: glossite, gengivite, periodontite;
esofagite, incluindo refluxo; gastroenterite eosinofílica, mastocitose, doença de Crohn, colite incluindo colite ulcerativa, proctite, prurido anal; doença celíaca, síndrome do intestino irritável, e alergias relacionadas à alimentação que podem ter efeitos distantes do intestino (por exemplo, hemicrânia, rinite ou eczema);
[00234] 7. abdominal: hepatite, incluindo autoimune, alcoólica e viral; fibrose e cirrose do fígado; colecistite; pancreatite, tanto aguda quanto crônica;
[00235] 8. genitourinário: nefrite incluindo intersticial e glomerulonefrite; síndrome nefrótica; cistite incluindo cistite aguda e crônica (intersticial) e úlcera de Hunner; uretrite aguda e crônica, prostatite, epididimite, ooforite e salpingite; vulvovaginite; doença de Peyronie; disfunção erétil (tanto masculina quanto feminina);
[00236] 9. rejeição de aloenxerto: aguda e crônica seguindo, por exemplo, transplante de rim, coração, fígado, pulmão, medula óssea, pele ou córnea ou seguindo transfusão de sangue; ou doença de en
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53/638 xerto versus hospedeiro crônico;
[00237] 10. CNS: doença de Alzheimer e outros distúrbios demenciais incluindo CJD e nvCJD; amiloidose; esclerose múltipla e outras síndromes desmielinizantes; aterosclerose cerebral e vasculite; arterite temporal; miastenia grave; dor aguda e crônica (aguda, intermitente ou persistente, seja de origem central ou periférica) incluindo dor visceral, cefaleia, hemicrânia, neuralgia trigeminal, dor facial atípica, dor articular e óssea, dor originando de invasão de tumor e câncer, síndromes de dor neuropática incluindo neuropatias diabética, pós-herpética, e associada a HIV; neurossarcoidose; complicações do sistema nervoso central e periférico de processos malignos, infecciosos ou autoimunes;
[00238] 11. outros distúrbios autoimunes e alérgicos incluindo tiroidite de Hashimoto, doença de Graves, doença de Addison, diabetes melito, púrpura trombocitopênica idiopática, fasciíte eosinofílica, síndrome de hiper-IgE, síndrome antifosfolipídica;
[00239] 12. outros distúrbios com um componente inflamatório ou imunológico; incluindo síndrome da imunodeficiência adquirida (AIDS), lepra, síndrome Sezary, e síndromes paraneoplásicas;
[00240] 13. cardiovascular: aterosclerose, afetando a circulação coronariana e periférica; pericardite; miocardite, cardiomiopatias inflamatórias e autoimunes incluindo sarcoide miocárdico; danos de reperfusão isquêmicos; endocardite, valvulite, e aortite incluindo infecciosa (por exemplo, sifilítica); vasculites; distúrbios das veias proximais e periféricas incluindo flebite e trombose, incluindo trombose de veia profunda e complicações de veias varicosas;
[00241] 14. oncologia: tratamento de cânceres comuns incluindo próstata, mama, pulmão, ovário, pancreático, intestino e cólon, tumores de estômago, pele e cérebro e malignidades afetando a medula óssea (incluindo as leucemias) e sistemas linfoproliferativos, tais como linfoma de Hodgkin e não Hodgkin; incluindo a prevenção e tratamento
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54/638 de doença metastática e recorrências de tumor, e síndromes paraneoplásicas; e, [00242] 15. trato gastrointestinal: doença celíaca, proctite, gastroenterite eosinofílica, mastocitose, doença de Crohn, colite ulcerativa, colite microscópica, colite indeterminante, distúrbio do intestino irritável, síndrome do intestino irritável, diarreia não inflamatória, alergias relacionadas à alimentação que têm efeitos distantes do intestino, por exemplo, hemicrânia, rinite e eczema.
[00243] Desse modo, a presente invenção fornece um composto de fórmula (I) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo como anteriormente definido para uso em terapia.
[00244] Em um outro aspecto, a presente invenção fornece o uso de um composto de fórmula (I) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo como anteriormente definido na fabricação de um medicamento para uso em terapia.
[00245] No contexto da presente relatório, o termo terapia também inclui profilaxia a menos que existam indicações específicas ao contrário. Os termos terapêutico e terapeuticamente devem ser construídos desta maneira.
[00246] Profilaxia é esperada ser particularmente relevante ao tratamento de pessoas que sofreram um episódio prévio de, ou são de outra maneira consideradas estar em risco aumentado de, a doença ou condição em questão. Pessoas em risco de desenvolver uma doença ou condição particular geralmente incluem aquelas tendo uma história familiar da doença ou condição, ou aquelas que foram identificadas por avaliação ou testagem genética ser particularmente suscetíveis a desenvolver a doença ou condição.
[00247] A invenção ainda também fornece um método de tratar, ou reduzir o risco de, uma doença ou condição inflamatória (incluindo uma doença ou condição das vias aéreas obstrutivas reversíveis) que
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55/638 compreende administrar a um paciente em necessidade do mesmo uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto de fórmula (I) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo como anteriormente definido.
[00248] Em particular, os compostos desta invenção podem ser usados no tratamento de síndrome da angústia respiratória do adulto (ARDS), enfisema pulmonar, bronquite, bronquiectasia, doença pulmonar obstrutiva crônica (COPD), asma e rinite.
[00249] Para os usos terapêuticos mencionados acima a dosagem administrada, de fato, variará com o composto empregado, o modo de administração, o tratamento desejado e o distúrbio indicado. Por exemplo, a dosagem diária do composto da invenção, se inalada, pode ser na faixa de 0,05 micrograma por quilograma de peso corporal (pg/kg) a 100 microgramas por quilograma de peso corporal (pg/kg). Alternativamente, se o composto for administrado oralmente, então a dosagem diária do composto da invenção pode ser na faixa de 0,01 micrograma por quilograma de peso corporal (pg/kg) a 100 miligramas por quilograma de peso corporal (mg/kg).
[00250] Os compostos de fórmula (I) e sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos podem ser usados por si próprios, porém geralmente serão administrados na forma de uma composição farmacêutica em que o composto/sal (ingrediente ativo) de fórmula (I) está em associação com um adjuvante, diluente ou veículo farmaceuticamente aceitável. Procedimentos convencionais para a seleção e preparação de formulações farmacêuticas adequadas são descritos em, por exemplo, Pharmaceuticals - The Science of Dosage Form Designs, M. E. Aulton, Churchill Livingstone, 1988.
[00251] Dependendo do modo de administração, a composição farmacêutica preferivelmente compreenderá de 0,05 a 99 % em peso (por cento em peso), mais preferivelmente de 0,05 a 80 % em peso,
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56/638 ainda mais preferivelmente de 0,10 a 70 % em peso, e mesmo mais preferivelmente de 0,10 a 50 % em peso, de ingrediente ativo, todas as porcentagens por peso sendo baseadas na composição total.
[00252] A presente invenção também fornece uma composição farmacêutica compreendendo um composto de fórmula (I) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo como anteriormente definido, em associação com um adjuvante, diluente ou veículo farmaceuticamente aceitável.
[00253] A invenção também fornece um processo para a preparação de uma composição farmacêutica da invenção que compreende misturar um composto de fórmula (I) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo como anteriormente definido com um adjuvante, diluente ou veículo farmaceuticamente aceitável.
[00254] As composições farmacêuticas podem ser administradas topicamente (por exemplo, à pele ou ao pulmão e/ou vias aéreas) na forma, por exemplo, de cremes, soluções, suspensões, aerossóis de hidrofluoroalcano (HFA) e formulações de pó seco, por exemplo, formulações no dispositivo inalador conhecido como o Turbuhaler®; ou sistemicamente, por exemplo, por administração oral na forma de comprimidos, cápsulas, xaropes, pós ou grânulos; ou por administração parenteral na forma de soluções ou suspensões; ou por administração subcutânea; ou por administração retal na forma de supositórios; ou transdermicamente.
[00255] Formulações em pó seco e aerossóis de HFA pressurizados dos compostos da invenção podem ser administrados por inalação oral ou nasal. Para inalação, o composto é desejavelmente bem dividido. O composto bem dividido preferivelmente tem um diâmetro médio de massa de menos do que 10 pm, e pode ser suspenso em uma mistura propelente com a assistência de um dispersante, tal como um C8C20 ácido graxo ou sal do mesmo, (por exemplo, ácido oleico), um sal
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57/638 biliar, um fosfolipídeo, um sacarídeo de alquila, um tensoativo perfluorinado ou polietoxilado, ou outro dispersante farmaceuticamente aceitável.
[00256] Os compostos da invenção podem também ser administrados por meio de um inalador de pó seco. O inalador pode ser um inalador de dose única ou múltiplas doses, e pode ser um inalador de pó seco acionado pela respiração.
[00257] Uma possibilidade é misturar o composto bem dividido da invenção com uma substância portadora, por exemplo, um mono-, diou polissacarídeo, um álcool de açúcar, ou outro poliol. Veículos adequados são açúcares, por exemplo, lactose, glicose, rafinose, melezitose, lactitol, maltitol, trealose, sacarose, manitol; e amido. Alternativamente o composto bem dividido pode ser revestido por outra substância. A mistura em pó pode também ser dispensada em cápsulas de gelatina dura, cada qual contendo a dose desejada do composto ativo.
[00258] Outra possibilidade é processar o pó bem dividido em esferas que se fragmentam durante o procedimento de inalação. Este pó esferonizado pode ser carregado no reservatório de fármaco de um inalador de múltiplas doses, por exemplo, aquele conhecido como o Turbuhaler® em que uma unidade de dosagem mede a dose desejada que é em seguida inalada pelo paciente. Com este sistema o ingrediente ativo, com ou sem uma substância portadora, é distribuído ao paciente.
[00259] Para administração oral o composto da invenção pode ser misturado com um adjuvante ou um veículo, por exemplo, lactose, sacarose, sorbitol, manitol; um amido, por exemplo, amido de batata, amido de milho ou amilopectina; um derivado de celulose; um aglutinante, por exemplo, gelatina ou polivinilpirrolidona; e/ou um lubrificante, por exemplo, estearato de magnésio, estearato de cálcio, polietileno glicol, uma cera, parafina, e similares, e em seguida prensado em
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58/638 comprimidos. Se comprimidos revestidos forem requeridos, os núcleos, preparados como descrito acima, podem ser revestidos com uma solução de açúcar concentrada que pode conter, por exemplo, goma arábica, gelatina, talco e dióxido de titânio. Alternativamente, o comprimido pode ser revestido com um polímero adequado dissolvido em um solvente orgânico facilmente volátil.
[00260] Para a preparação de cápsulas de gelatina macia, o composto da invenção pode ser misturado com, por exemplo, um óleo vegetal ou polietileno glicol. Cápsulas de gelatina duras podem conter grânulos do composto usando qualquer um dos excipientes mencionados acima para comprimidos. Também formulações líquidas ou semissólidas do composto da invenção podem ser carregadas em cápsulas de gelatina duras.
[00261] Preparações líquidas para aplicação oral podem ser na forma de xaropes ou suspensões, por exemplo, soluções contendo o composto da invenção, o equilíbrio sendo açúcar e uma mistura de etanol, água, glicerol e propileno glicol. Opcionalmente tais preparações líquidas podem conter agentes colorantes, agentes aromatizantes, sacarina e/ou carboximetilcelulose como um agente espessante ou outros excipientes conhecidos por aqueles versados na técnica.
[00262] Em particular, os compostos da presente invenção e sais dos mesmos podem ser usados no tratamento das doenças inflamatórias tais como (porém não restritas a) artrite reumatoide, osteoartrite, asma, rinite alérgica, doença pulmonar obstrutiva crônica (COPD), psoríase, e doença do intestino inflamatória, os compostos da invenção podem ser combinados com os seguintes agentes: agentes antiinflamatórios não esteroidais (a seguir NSAIDs) incluindo inibidores de ciclo-oxigenase COX-1 / COX-2 não seletivos quer aplicados topicamente ou sistemicamente (tal como piroxicam, diclofenaco, ácidos propiônicos tais como naproxeno, flurbiprofeno, fenoprofeno, cetopro
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59/638 feno e ibuprofeno, fenamatos tais como ácido mefenâmico, indometacina, sulindac, azapropazona, pirazolonas tal como fenilbutazona, salicilatos tal como aspirina); inibidores de COX-2 seletivos (tais como meloxicam, celecoxib, rofecoxib, valdecoxib, lumarocoxib, parecoxib e etoricoxib); doadores de óxido nítrico de inibição de ciclo-oxigenase (CINODs); glicocorticosteroides (quer administrados por rotinas tópicas, orais, intramusculares, intravenosas, ou intra-articulares); metotrexato; leflunomida; hidroxicloroquina; d-penicilamina; auranofina ou outras preparações ouro parenterais ou orais; analgésicos; diacereína; terapias intra-articulares tais como derivados de ácido hialurônico; e suplementos nutricionais tal como glicosamina.
[00263] Os compostos da invenção podem também ser administrados em conjunção com outros compostos usados para o tratamento das condições acima.
[00264] A invenção, portanto, também refere-se a terapias de combinação em que um composto da invenção, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, ou uma composição ou formulação farmacêutica compreendendo um composto da invenção, é administrado concomitantemente ou sequencialmente ou como uma preparação combinada com outro agente ou agentes terapêuticos, para o tratamento de uma ou mais das condições listadas acima.
[00265] A presente invenção ainda também refere-se à combinação de um composto da invenção, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, juntamente com uma citocina ou agonista ou antagonista de função de citocina, (incluindo agentes que agem sobre as trilhas de sinalização de citocina tais como moduladores do sistema SOCS) incluindo alfa-, beta-, e gama-interferons; fator de crescimento semelhante à insulina tipo I (IGF-1); interleucinas (IL) incluindo IL1 a 17, e antagonistas ou inibidores de interleucina tal como anaquinra; inibidores de fator de necrose de tumor alfa (TNF- ) tais como anticorpos
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60/638 monoclonais anti-TNF (por exemplo infliximab; adalimumab, e CDP870) e antagonistas de receptor de TNF incluindo moléculas de imunoglobulina (tal como etanercept) e agentes de baixo peso molecular tal como pentoxifilina.
[00266] Além disso, a invenção refere-se a uma combinação de um composto da invenção, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, com um anticorpo monoclonal alvejando linfócitos B (tal como CD20 (rituximab), MRA-aILl6R) ou linfócitos T (CTLA4-Ig, HuMax Il15).
[00267] A presente invenção ainda também refere-se à combinação de um composto da invenção, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, com um modulador de função de receptor de quimiocina tal como um antagonista de CCR1, CCR2, CCR2A, CCR2B, CCR3, CCR4, CCR5, CCR6, CCR7, CCR8, CCR9, CCR10 e CCR11 (para a família C-C); CXCR1, CXCR2, CXCR3, CXCR4 e CXCR5 (para a família C-X-C) e CX3CR1 para a família C-X3-C.
[00268] A presente invenção também refere-se à combinação de um composto da invenção, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, com um inibidor de metaloprotease matriz (MMPs), isto é, a estromelisinas, as colagenases, e as gelatinases, bem como agrecanase; especialmente colagenase-1 (MMP-1), colagenase-2 (MMP-8), colagenase-3 (MMP-13), estromelisina-1 (MMP-3), estromelisina-2 (MMP-10), e estromelisina-3 (MMP-11) e MMP-9 e MMP-12, incluindo agentes tal como doxiciclina.
[00269] A presente invenção ainda também refere-se à combinação de um composto da invenção, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, e um inibidor de biossíntese de leucotrieno, inibidor de 5lipoxigenase (5-LO) ou antagonista de proteína de ativação de 5lipoxigenase (FLAP) tal como zileutona; ABT-761; fenleutona; tepoxalina; Abbott-79175; Abbott-85761; um N-(5-substituído)-tiofeno-2
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61/638 alquilsulfonamida; 2,6-di-terc-butilfenolhidrazonas; uns metoxitetrahidropiranos tal como Zeneca ZD-2138; o composto SB-210661; um composto 2-cianonaftaleno piridinil-substituído tal como L-739.010; um composto 2-cianoquinolina tal como L-746.530; ou um composto indol ou quinolina tal como MK-591, MK-886, e BAY x 1005.
[00270] A presente invenção também refere-se à combinação de um composto da invenção, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, e um antagonista de receptor para leucotrienos (LT) B4, LTC4, LTD4, e LTE4 selecionado do grupo consistindo nas fenotiazin-
3-as tal como L-651.392; compostos amidino tal como CGS-25019c; benzoxalaminas tal como ontazolast; benzenocarboximidamidas tal como BIIL 284/260; e compostos tais como zafirlucaste, ablucaste, montelucaste, pranlucaste, verlucaste (MK-679), RG-12525, Ro-
245913, iralucaste (CGP 45715A), e BAY x 7195.
[00271] A presente invenção ainda também refere-se à combinação de um composto da invenção, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, e um inibidor de fosfodiesterase (PDE) tal como um metilxantanina incluindo teofilina e aminofilina; um inibidor de isoenzima PDE seletivo incluindo um inibidor de PDE4, um inibidor da isoforma PDE4D, ou um inibidor de PDE5.
[00272] A presente invenção também refere-se à combinação de um composto da invenção, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, e um antagonista de receptor de histamina tipo 1 tal como cetirizina, loratadina, desloratadina, fexofenadina, acrivastina, terfenadina, astemizol, azelastina, levocabastina, clorfeniramina, prometazina, ciclizina, ou mizolastina; aplicado oralmente, topicamente ou parenteralmente.
[00273] A presente invenção ainda também refere-se à combinação de um composto da invenção, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, e um inibidor de bomba de próton (tal como omeprazol) ou
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62/638 um antagonista de receptor de histamina tipo 2 gastroprotetor.
[00274] A presente invenção também refere-se à combinação de um composto da invenção, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, e um antagonista do receptor de histamina tipo 4.
[00275] A presente invenção ainda também refere-se à combinação de um composto da invenção, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, e um agente simpatomimético vasoconstritor agonista de adrenoceptor alfa-1/alfa-2, tal como propilhexedrina, fenilefrina, fenilpropanolamina, efedrina, pseudoefedrina, cloridrato de nafazolina, cloridrato de oximetazolina, cloridrato de tetra-hidrozolina, cloridrato de xilometazolina, cloridrato de tramazolina ou cloridrato de etilnorepinefrina.
[00276] A presente invenção também refere-se à combinação de um composto da invenção, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, e uma cromona, tal como cromoglicato de sódio ou nedocromil sódico.
[00277] A presente invenção ainda também refere-se à combinação de um composto da invenção, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, com um glicocorticoide, tal como flunisolida, acetonida de triancinolona, dipropionato de beclometasona, budesonida, propionato de fluticasona, ciclesonida ou furoato de mometasona.
[00278] A presente invenção também refere-se à combinação de um composto da invenção, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, com um agente que modula um receptor hormonal nuclear tal como PPARs.
[00279] A presente invenção ainda também refere-se à combinação de um composto da invenção, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, juntamente com uma imunoglobulina (Ig) ou preparação de Ig ou um antagonista ou anticorpo modulando a função de Ig tal como anti-IgE (por exemplo omalizumab).
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63/638 [00280] A presente invenção também refere-se à combinação de um composto da invenção, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, e outro agente anti-inflamatório aplicado topicamente ou sistêmico, tal como talidomida ou um derivado do mesmo, um retinoide, ditranol ou calcipotriol.
[00281] A presente invenção ainda também refere-se à combinação de um composto da invenção, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, e combinações de aminossalicilatos e sulfapiridina tais como sulfasalazina, mesalazina, balsalazida, e olsalazina; e agentes imunomodulatórios tais como as tiopurinas, e corticosteroides tal como budesonida.
[00282] A presente invenção também refere-se à combinação de um composto da invenção, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, juntamente com um agente antibacteriano tal como um derivado de penicilina, uma tetraciclina, um macrolídeo, um beta-lactama, uma fluoroquinolona, metronidazol, um aminoglicosídeo inalado; um agente antiviral incluindo aciclovir, fanciclovir, valaciclovir, ganciclovir, cidofovir, amantadina, rimantadina, ribavirina, zanamavir e oseltamavir; um inibidor de protease tal como indinavir, nelfinavir, ritonavir, e saquinavir; um inibidor de transcriptase reversa de nucleosídeo tal como didanosina, lamivudina, estavudina, zalcitabina ou zidovudina; ou um inibidor de transcriptase reversa de não nucleosídeo tal como nevirapina ou efavirenz.
[00283] A presente invenção ainda também refere-se à combinação de um composto da invenção, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, e um agente cardiovascular tal como um bloqueador de canal de cálcio, um bloqueador de beta-adrenoceptor, um inibidor de enzima de conversão de angiotensina (ACE), um antagonista de receptor de angiotensina 2; um agente de redução de lipídeo tal como uma estatina ou um fibrato; um modulador de morfologia de célula
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64/638 sanguínea tal como pentoxifilina; trombolítico, ou um anticoagulante tal como um inibidor de agregação de plaqueta.
[00284] A presente invenção também refere-se à combinação de um composto da invenção, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, e um agente de CNS tal como um antidepressivo (tal como sertralina), um fármaco antiparkinsoniano (tal como deprenil, L-dopa, ropinirol, pramipexol, um inibidor de MAOB tal como selegina e rasagilina, um inibidor de comP tal como tasmar, um inibidor de A-2, um inibidor de recaptação de dopamina, um antagonista de NMDA, um agonista de nicotina, um agonista de dopamina ou um inibidor de óxido nítrico sintase neuronal), ou um fármaco anti-Alzheimer tal como donepezil, rivastigmina, tacrina, um inibidor de COX-2, propentofilina ou metrifonato.
[00285] A presente invenção ainda também refere-se à combinação de um composto da invenção, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, e um agente para o tratamento de dor aguda ou crônica, tal como um analgésico de ação central ou periférica (por exemplo um opioide ou derivado do mesmo), carbamazepina, fenitoína, valproato de sódio, amitriptilina ou outros agentes antidepressivos, paracetamol, ou um agente anti-inflamatório não esteroidal.
[00286] A presente invenção também refere-se à combinação de um composto da invenção, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, juntamente com um agente anestésico local parenteralmente ou topicamente aplicado (incluindo inalado) tal como lignocaína ou um derivado do mesmo.
[00287] Um composto da presente invenção, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, pode também ser usado em combinação com um agente antiosteoporose incluindo um agente hormonal tal como raloxifeno, ou um bifosfonato tal como alendronato.
[00288] A presente invenção ainda também refere-se à combinação
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65/638 de um composto da invenção, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, juntamente com um: (i) inibidor de triptase; (ii) antagonista de fator de ativação de plaqueta (PAF); (iii) inibidor de enzima de conversão de interleucina (ICE); (iv) inibidor de IMPDH; (v) inibidores de molécula de adesão incluindo antagonista de VLA-4; (vi) catepsina; (vii) inibidor de quinase tal como um inibidor de tirosina quinase (tal como Btk, Itk, Jak3 ou MAP, por exemplo, mesilato de Imatinib ou Gefitinib), uma serina / treonina quinase (tal como um inibidor de uma MAP quinase tal como p38, JNK, proteína quinase A, B ou C, ou IKK), ou uma quinase envolvida em regulação do ciclo celular (tal como uma quinase dependente de ciclina); (viii) inibidor de glicose-6 fosfato desidrogenase; (ix) antagonista de receptor de cinina-B.sub1. ou B.sub2.; (x) agente antigota, por exemplo colchicina; (xi) inibidor de xantina oxidase, por exemplo alopurinol; (xii) agente uricosúrico, por exemplo probenecid, sulfinpirazona ou benzbromarona; (xiii) secretagogo de hormônio de crescimento; (xiv) fator de crescimento de transformação (TGFp); (xv) fator de crescimento derivado de plaqueta (PDGF); (xvi) fator de crescimento de fibroblasto por exemplo fator de crescimento de fibroblasto básico (bFGF); (xvii) fator estimulante de colônia de macrófago e granulócito (GM-CSF); (xviii) creme de capsaicina; (xix) antagonista de receptor de taquicinina NK.sub1. ou NK.sub3. tal como NKP-608C, SB-233412 (talnetant) ou D-4418; (xx) inibidor de elastase tal como UT-77 ou ZD-0892; (xxi) inibidor de enzima de conversão de TNF-alfa (TACE); (xxii) inibidor de óxido nítrico sintase induzido (iNOS); (xxiii) molécula homóloga ao receptor quimioatrativo expressa em células TH2, (tal como um antagonista de CRTH2); (xxiv) inibidor de P38; (xxv) agente que modula a função de receptores semelhantes a Toll (TLR), (xxvi) agente que modula a atividade de receptores purinérgicos tal como P2X7; (xxvii) inibidor de ativação de fator de transcrição tal como NFkB, API ou STATS; ou (xxviii) um agonista de recep
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66/638 tor de glicocorticoide (receptor de GR).
[00289] Em um outro aspecto, a presente invenção fornece uma combinação (por exemplo, para o tratamento de COPD, asma ou rinite alérgica) de um composto de fórmula (I) e um ou mais agentes selecionados da lista compreendendo:
• um agonista de receptor de glicocorticoide não esteroidal (receptor de GR);
• um inibidor de PDE4 incluindo um inibidor da isoforma PDE4D;
• um modulador de função de receptor de quimiocina (tal como um antagonista de receptor CCR1);
• um esteroide (tal como budesonida); e • um inibidor de função de p38 quinase.
[00290] Um composto da invenção, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, pode também ser usado em combinação com um agente terapêutico existente para o tratamento de câncer, por exemplo, agentes adequados incluem:
[00291] (i) um fármaco antiproliferativo/antineoplásico ou uma combinação do mesmo, como usado em oncologia médica, tal como um agente de alquilação (por exemplo, cisplatina, carboplatina, ciclofosfamida, mostarda de nitrogênio, melfalano, clorambucil, bussulfano ou uma nitrosoureia); um antimetabólito (por exemplo, um antifolato tal como uma fluoropirimidina como 5-fluorouracila ou tegafur, raltitrexado, metotrexato, citosina arabinosídeo, hidroxiureia, gencitabina ou paclitaxel); um antibiótico antitumor (por exemplo, uma antraciclina tal como adriamicina, bleomicina, doxorubicina, daunomicina, epirubicina, idarubicina, mitomicina-C, dactinomicina ou mitramicina); um agente antimitótico (por exemplo, um alcaloide vinca tal como vincristina, vinblastina, vindesina ou vinorelbina, ou um taxoide tal como taxol ou taxotero); ou um inibidor de topoisomerase (por exemplo, uma epipodofi
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67/638 lotoxina tal como etoposídeo, teniposídeo, ansacrina, topotecano ou uma camptotecina);
[00292] (ii) um agente citostático tal como um antiestrogênio (por exemplo, tamoxifeno, toremifeno, raloxifeno, droloxifeno ou iodoxifeno), um subregulador de receptor de estrogênio (por exemplo, fulvestrante), um antiandrogênio (por exemplo, bicalutamida, flutamida, nilutamida ou acetato de ciproterona), um antagonista de LHRH ou agonista de LHRH (por exemplo, goserelina, leuprorelina ou buserelina), um progestogênio (por exemplo, acetato de megestrol), um inibidor de aromatase (por exemplo, como anastrozol, letrozol, vorazol ou exemestano) ou um inibidor de 5a-redutase tal como finasterida;
[00293] (iii) um agente que inibe a invasão de célula de câncer (por exemplo, um inibidor de metaloproteinase como marimastat ou um inibidor de função de receptor ativador de plasminogênio de uroquinase); [00294] (iv) um inibidor de função de fator de crescimento, por exemplo: um anticorpo de fator de crescimento (por exemplo, o anticorpo anti-erbb2 trastuzumab, ou o anticorpo anti-erbb1 cetuximab [C225]), um inibidor de farnesil transferase, um inibidor de tirosina quinase ou um inibidor de serina/treonina quinase, um inibidor da família do fator de crescimento epidérmico (por exemplo, um inibidor de tirosina quinase da família EGFR tal como N-(3-cloro-4-fluorofenil)-7metóxi-6-(3-morfolinopropóxi)quinazolin-4-amina (gefitinib, AZD1839), N-(3-etinilfenil)-6,7-bis(2-metoxietóxi)quinazolin-4-amina (erlotinib,
OSI-774) ou 6-acrilamido-N-(3-cloro-4-fluorofenil)-7-(3morfolinopropóxi)quinazolin-4-amina (CI 1033)), um inibidor da família do fator de crescimento derivado de plaqueta, ou um inibidor da família do fator de crescimento de hepatócito;
[00295] (v) um agente antiangiogênico tal como um que inibe os efeitos do fator de crescimento endotelial vascular (por exemplo, o anticorpo de fator de crescimento de célula endotelial antivascular be
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68/638 vacizumab, um composto descrito no WO 97/22596, WO 97/30035, WO 97/32856 ou WO 98/13354), ou um composto que funciona por outro mecanismo (por exemplo linomida, um inibidor de função de integrina avp3 ou uma angiostatina);
[00296] (vi) um agente de dano vascular tal como combretastatina A4, ou um composto descrito no WO 99/02166, WO 00/40529, WO 00/41669, WO 01/92224, WO 02/04434 ou WO 02/08213;
[00297] (vii) um agente usado em terapia antissentido, por exemplo, um direcionado a um dos alvos listados acima, tal como ISIS 2503, um antissentido anti-ras;
[00298] (viii) um agente usado em um método de terapia de gene, por exemplo, métodos para substituir genes aberrantes tal como p53 aberrante ou BRCA1 ou BRCA2 aberrante, métodos de GDEPT (terapia de profármaco de enzima direcionada ao gene) tais como aqueles usando citosina desaminase, timidina quinase ou uma enzima nitroredutase bacteriana e métodos para aumentar a tolerância do paciente à quimioterapia ou radioterapia tal como terapia de gene de resistência a múltiplos fármacos; ou [00299] (ix) um agente usado em um método imunoterapêutico, por exemplo, métodos ex vivo e in vivo para aumentar a imunogenicidade de células de tumor do paciente, tal como transfecção com citocinas tal como interleucina 2, interleucina 4 ou fator de estimulação de colônia de granulócito-macrófago, métodos para diminuir a anergia de célula T, métodos usando células imunes transfectadas tais como células dendríticas transfectadas com citocina, métodos usando linhagens de célula de tumor transfectadas com citocina e métodos usando anticorpos anti-idiotípicos.
[00300] Os compostos de fórmula (I) acima podem ser convertidos em um sal farmaceuticamente aceitável dos mesmos, por exemplo, um sal de adição de ácido tal como um cloridrato (por exemplo, um diclori
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69/638 drato), bromidrato (por exemplo, um di-hidrobrometo), trifluoroacetato (por exemplo, um di-trifluoroacetato), sulfato, fosfato, acetato, fumarato, maleato, tartarato, lactato, citrato, piruvato, succinato, oxalato, metanossulfonato ou p-toluenossulfonato.
[00301] A invenção agora será ilustrada, porém não limitada por referência aos seguintes exemplos em que os seguintes métodos gerais foram usados:
Métodos Gerais [00302] Espectros de 1H RMN foram registrados em um instrumento Varian Inova 400 MHz ou Varian Mercury-VX 300 MHz. Os picos centrais de clorofórmio-d (ôh 7,27 ppm), dimetilsulfóxido-de (ôh 2,50 ppm), acetonitrila-d3 (ôh 1,95 ppm) ou metanol-d4 (ôh 3,31 ppm) foram usados como referências internas. Cromatografia de coluna foi realizada usando sílica-gel: sílica 60A Fisher Scientific, tamanho de partícula 3570 mícrons, Davisil® ou 0,040-0,63 mm, cartuchos biotage KP-Sil préempacotados. A menos que relatado de outra maneira, materiais de partida foram comercialmente disponíveis. Todos os solventes e reagentes comerciais foram de grau de laboratório e foram usados como recebidos.
[00303] O seguinte método foi usado para análise de LC/MS:
[00304] instrumento Agilent 1100; coluna Waters Symmetry Ci8, 2,1 x 50 mm; massa APCI ou multimodo (APCl + ESI; taxa de fluxo de 1 mL/min; comprimento de onda de 220 nm; Solvente A: água + TFA a 0,1%; Solvente B: acetonitrila + TFA a 0,1%; Gradiente de 5 a 95%/B durante 8 min.
[00305] A purificação por HPLC preparativa de fase reversa foi realizada usando um gradiente de acetonitrila ou metanol em solução de TFA aquoso a 0,2% ou ácido fórmico aquoso a 0,1% usando uma coluna SunFire® prep C8 OBD™ 5 pm 30 x 100 mm (Waters Corporation) em uma taxa de fluxo de 35 mL/min ou um gradiente de acetoni
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70/638 trila ou metanol em solução de acetato de amônio aquoso a 0,1% ou ácido fórmico aquoso a 0,1% usando uma coluna Xbridge® 50 x 19 mm (Waters Corporation) em uma taxa de fluxo de 18,5 mL/min.
Métodos Gerais para os Exemplos 101-115 e 279-285 [00306] O seguinte método foi usado para análise de LC/MS: [00307] os compostos finais foram analisados usando MS3 e intermediários usando MS4 [00308] MS3: Instrumento espectrômetro de massa de quadrupolo Waters Micromass ZQ ligado a um sistema de LC Hewlett Packard HP1100. A injeção da amostra é feita por um autoamostrador Gilson 215. O espectrômetro tem uma fonte de eletrovaporização operando em modo de íon positivo e negativo. A detecção adicional é obtida usando um detector de dispersão de luz evaporativa Sedex 55. Taxa de fluxo de 1 ml/min; comprimento de onda de 254 nm; Solvente A: água + ácido fórmico a 0,1%; Solvente B: acetonitrila + ácido fórmico a 0,1%; Gradiente de 5 a 95%B durante 20 min.
[00309] MS4: Instrumento espectrômetro de massa de quadrupolo simples Finnigan AQA ligado a um sistema de LC Hewlett Packard 1050 com detector de disposição de diodo UV e autoamostrador. O espectrômetro tem uma fonte de eletrovaporização operando em modo de íon positivo. Detecção adicional é obtida usando um detector de dispersão de luz evaporativa Sedex 65. Taxa de fluxo de 1 ml/min; comprimento de onda de 254 nm; Solvente A: água + ácido fórmico a 0,1%; Solvente B: acetonitrila + ácido fórmico a 0,1%; Gradiente de 5 a 95%B durante 5 min.
[00310] Espectros de RMN foram registrados em um de três instrumentos:
[00311] Um espectrômetro Varian Unity Inova 400 operando em 400 MHz para 1H equipado com uma sonda de ressonância tripla de detecção inversa de 5 mm para detecção de 1H, 13C, 31P com o campo
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71/638 magnético fornecido por um magneto de supercondução 9,4 Tesla Oxford instruments e a estação de trabalho Sun Microsystems SunBlade 1000 como hospedeiro.
[00312] Um espectrômetro Bruker Avance DRX 400 operando em 400 MHz para 1H equipado com uma sonda TXI de ressonância tripla de detecção inversa de 5 mm para detecção de 1H, 13C, 15N com o campo magnético fornecido por um magneto de supercondução 9,4 Tesla Oxford instruments e uma estação de trabalho HP wx5000 operando sob Windows XP com o software WIN-RMN como computador hospedeiro.
[00313] Um espectrômetro Bruker Avance DPX 300 operando em 300 MHz para H1 equipado com uma sonda de frequência dual de 5 mm padrão para detecção de H1 e C13 com o campo magnético fornecido por um magneto de supercondução 7,05 Tesla Bruker e uma estação de trabalho HP operando sob Windows 2000 com o software Bruker XWIN-RMN como hospedeiro.
[00314] A cromatografia de coluna foi realizada usando sílica-gel: sílica-gel 60 Fluka, tamanho de partícula de 35-70 mícrons, cartuchos Teledyne Isco, Inc. RediSep®Rf pré-empacotados ou cartuchos Isolute Rápida Si II SPE pré-empacotados. Todos os solventes e reagentes comerciais foram de grau de laboratório e foram usados como recebidos.
[00315] A purificação por HPLC preparativa de fase reversa foi realizada usando um gradiente de acetonitrila em solução de TFA aquosa a 0,1% ou ácido fórmico aquoso a 0,1% usando uma coluna Phenomenex Gemini® C18 (250 x 21,2 mm, 5 mícrons) como fase estacionária em uma taxa de fluxo de 18 mL/min.
[00316] As abreviações ou termos usados nos exemplos têm os seguintes significados:
SCX: Permuta de cátio forte - extração de fase sólida com
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72/638 base em silica com um sorvente de ácido sulfônico.
HPLC: Cromatografia líquida de alto desempenho
DCM: Diclorometano
DMF: M,M-Dimetilformamida
NMP: 1-Metilpirrolidin-2-ona
THF: tetra-hidrofurano
TFA: ácido trifluoroacético
DMSO: dimetilsulfóxido aq: aquoso h: horas min: minutos g: gramas mL: mililitros
RT: temperatura ambiente
MP-TsOH65: resina de troca de íon de ligação de polímero macroporoso fornecida por Biotage.
HATU hexafluorofosfato de O-(7-Azabenzotriazol-1-il)M,M,M',M'-tetrametilurônio
NBS M-bromossuccinimida
T3P Anidrido de ácido fosfônico de propano
TBAF fluoreto de tetrabutilamônio
CDI 1,1’-Carbonildiimidazol
MTBE terc-butila éter de metila
MCPBA ácido meta-cloroperbenzoico [00317] Cartucho de NH2 de eluição de ligação: troca de ânion forte. Extração de fase sólida com base em sílica com um sorvente NH2. [00318] Sal de cloridrato de 1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecano-9carboxilato de terc-butila foi adquirido de WuXi Pharma Tech.
[00319] Acetato de 7-[(1R)-2-amino-1-hidróxi-etil]-4-hidróxi-3Hbenzotiazol-2-ona ou sal de HCl (WO2007027134, exemplo 1, etapa d)
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73/638 é 86 a 94% ee.
[00320] (R)-5-(2-amino-1-(terc-butildimetilsililóxi)etil)-8hidroxiquinolin-2(1H)-ona (WO2004106333) é 92 a 96% ee.
Pacote de denominação para os compostos título/subtítulo:
[00321] Struct=Name 9,0,7 de CambridgeSoft Corporation
Exemplo 1 ditrifluoroacetato de (R)-4-hidróxi-7-(1-hidróxi-2-(4-(2-(4-(2metiltiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9il)etóxi)benzilamino)etil)benzo[d]tiazol-2(3H)-ona
a) 7-(2-Cloro-acetil)-4-hidróxi-3H-benzotiazol-2-ona
[00322] Etanol (1500 mL) foi adicionado a uma mistura de 7-acetil-
4-hidróxi-3H-benzotiazol-2-ona (150 g) (WO2004/016578) e dicloroiodato de benziltrimetilamônio (374 g) em um frasco equipado com um agitador aéreo. A mistura foi aquecida para 78°C durante 1 hora e deixada resfriar para a temperatura ambiente durante a noite. A mistura foi vertida em água (2 L), e o precipitado coletado por filtração, lavado com água, filtrado até próximo à secura, e suspenso em etila acetato. A mistura foi aquecida até o refluxo e deixada resfriar para temperatura ambiente com agitação. O sólido foi coletado por filtração, lavado com acetato de etila frio (200 mL) em seguida ressuspenso em dietil éter (1 L). O sólido foi coletado, filtrado novamente e lavado com éter (200 mL) e secado em vácuo para fornecer o composto do subtítulo.
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Produção 164 g.
[00323] m/z 244 (M+H)+ (APCI)
b) 7-(2-Azido-acetil)-4-hidróxi-3H-benzotiazol-2-ona
O
Ho [00324] 7-(2-Cloro-acetil)-4-hidróxi-3H-benzotiazol-2-ona (exemplo
1, etapa a) (331 g) foi dissolvida em M,M-dimetilformamida (1800 mL) e agitado em um banho de gelo durante 10 minutos. Azida de sódio (88,3 g) foi adicionada porção a porção durante 15 minutos. A reação foi agitada durante 72 horas e em seguida a mistura reacional foi dividida em 3 porções iguais e cada uma extinta separadamente em gelo e água (2,5 L). O sólido foi filtrado e lavado com água (1 L) e ressuspenso em acetonitrila (1,5 L). O solvente foi evaporado e uma outra porção de acetonitrila (1 L) adicionada e solvente evaporado novamente para secar o produto. Dietil éter (1,5 L) foi adicionado e a mistura agitada para obter uma suspensão homogênea. O sólido foi coletado e secado em vácuo a 35°C durante 24 horas para fornecer o composto do subtítulo. Produção 285 g.
[00325] m/z 251 (M+H)+ (APCI)
c) 7-[(1 R)-2-Azido-1 -hidróxi-etil]-4-hidróxi-3H-benzotiazol-2-ona
O
HN
HO [00326] (1R,2S)-(+)-c/s-1-Amino-2-indanol (149 g) foi adicionado porção a porção ao complexo de borano-tetra-hidrofurano (1M em tetra-hidrofurano, 2997 mL) durante 25 minutos mantendo uma temperatura de 20 - 25°C. A mistura foi agitada a 20°C durante mais 30 minutos, resfriada para 0°C e 7-(2-azido-acetil)-4-hidróxi-3H-benzotiazol-2ona (exemplo 1, etapa b) (250 g) adicionado porção a porção manten
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75/638 do a temperatura 0 - 5°C. A mistura reacional foi agitada durante mais 1 hora a 0°C e em seguida extinta gota a gota com metanol (350 g, 442 mL) (cuidado efervescência!). Uma exoterma trouxe a temperatura para 17 °C. A reação foi evaporada para uma espuma marrom e novamente dissolvida em acetato de etila (1,2 L). Ácido clorídrico aquoso (87 mL de HCl conc. em 1,2 L de água) foi adicionado e a mistura agitada vigorosamente durante 30 minutos. A camada aquosa foi separada e lavada com acetato de etila fresco (2 x 600 mL). A solução orgânica combinada foi lavada com água (1,2 L). A camada aquosa foi filtrada por meio de Celite e extraída com acetato de etila (600 mL). As soluções de acetato de etila foram combinadas, secadas sobre Na2SÜ4, filtradas e evaporadas. O sólido resultante foi suspenso em 5% etanol/diclorometano (2 L), agitado durante 3 horas, filtrado e secado em vácuo para fornecer o composto do subtítulo. Produção 213 g.
[00327] m/z 253 (M+H)+ (APCI)
d) 7-[(1R)-2-Amino-1-hidróxi-etil]-4-hidróxi-3H-benzotiazol-2-ona, sal de acetato
[00328] 5% Paládio sobre carbono tipo 87L pasta (22 g) foi adicionado a 7-[(1R)-2-azido-1-hidróxi-etil]-4-hidróxi-3H-benzotiazol-2-ona (exemplo 1, etapa c) (225 g) dissolvido em etanol (3 L). A reação foi agitada sob hidrogênio (3 bar) durante 48 horas. Um adicional de 10 g do catalisador foi adicionado e a hidrogenação continuada durante mais 5 dias. A mistura reacional foi filtrada e o sólido (produto + catalisador) suspenso em etanol (2,5 L) em seguida ácido acético (150 mL) foi adicionado e o todo agitado durante a noite. A mistura foi filtrada novamente para remover o catalisador de paládio sobre carbono. A
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76/638 solução foi evaporada até a secura e azeotropada com tolueno (2 x 1 L). O sólido foi suspenso em tetra-hidrofurano (1 L) durante 4 horas, filtrado e secado a 40°C em vácuo para fornecer o composto do subtítulo. Produção 57 g.
[00329] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO) δ 6,85 (d, 1H), 6,69 (d, 1H),
4,54 (dd, 1H), 2,78-2,67 (m, 2H) + 5 prótons trocáveis
e) terc-butila 4-(2-metiltiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9- diazaespiro[5,5] undecano-9-carboxilato [00330] anidrido cíclico de ácido 1-propanofosfônico (1,57M solução em THF, 4,18 mL) foi adicionado à solução de cloridrato de 1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecano-9-carboxilato de terc-butila (WuXi PharmaTech) (1,92 g), ácido 2-metiltiazol-4-carboxílico (0,94 g) e trietilamina (5,48 mL) em DMF (70 mL) e a mistura resultante agitada durante 16 horas. A mistura reacional foi vertida em água (500 mL) e extraída com acetato de etila (3 x 200 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água (2 x 100 mL) e salmoura (100 mL), secadas sobre sulfato de magnésio, filtradas e evaporadas em vácuo. A purificação foi por cromatografia de sílica-gel eluindo com acetato de etila para fornecer o composto do subtítulo como um óleo claro. Produção de 2,30 g.
[00331] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO, 90°C) δ 7,95 (s, 1H), 3,80-
3,45 (m, 8H), 3,18-2,96 (m, 2H), 2,67 (s, 3H), 1,77-1,62 (m, 2H), 1,43-
1,31 (m, 11H)
f) cloridrato de (2-metiltiazol-4-il)(1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5] undecan-4-il)metanona
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77/638 [00332]
Ácido trifluoroacético (10 mL) foi adicionado à solução de 4(2-metiltiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecano-9carboxilato de terc-butila (exemplo 1, etapa e) (2,3 g) in DCM (50 mL) a 0°C e a mistura resultante foi agitada durante 16 horas. O solvente foi evaporado em vácuo. Tolueno (50 mL) foi adicionado e a mistura evaporada em vácuo. O resíduo foi dissolvido em metanol (20 mL) e aplicado a um cartucho SCX pré-umedecido com metanol. O cartucho foi lavado com metanol (250 mL) e eluído com amônia a 3M em solução de metanol (150 mL). O eluente foi evaporado em vácuo e o resíduo, dissolvido em MeCN (100 mL). HCl (1M solução em dietil éter, 10 mL) foi adicionado e O solvente foi evaporado em vácuo para fornecer o composto do subtítulo como um sólido amarelo. Produção 1,90 g. [00333] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO, 90°C) δ 9,16 (s, 2H), 7,92 (s,
1H), 4,25 (s, 4H), 3,66-3,58 (m, 2H), 3,12-2,90 (m, 4H), 2,69 (s, 3H), 2,01-1,89 (m, 2H), 1,85-1,73 (m, 2H).
g) [4-(2,2-Dietóxi-etóxi)-fenil]-metanol
[00334] Carbonato de césio (39,4 g) foi adicionado à solução de 4 hidroximetil-fenol (10 g) e 2-bromo-1,1-dietoxietano (12,73 mL) em
DMF (200 mL) e a mistura resultante agitada a 90°C durante 16 horas.
A reação foi vertida em água (500 mL) e extraída com acetato de etila (3 x 250 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com
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78/638 água (250 mL) e salmoura (250 mL), em seguida secadas sobre sulfato de sódio, filtradas e evaporadas em vácuo. A purificação foi por cromatografia de sílica-gel eluindo com um gradiente de isso-hexano para dietil éter para fornecer o composto do subtítulo como um óleo amarelo. Produção 9,5 g.
[00335] 1H RMN (400 MHz, CDCh) δ 7,29-7,25 (m, 2H), 6,93-6,88 (m, 2H), 4,83 (t, J = 5,2Hz, 1H), 4,61 (s, 2H), 4,00 (d, J = 5,2Hz, 2H), 3,81-3,72 (m, 2H), 3,68-3,58 (m, 2H), 1,25 (t, J = 7,0Hz, 6H). Um próton trocável não observado.
h) 2-(4-(Hidroximetil)fenóxi)acetaldeído
OH
O [00336] HCl a 2M (4 mL) foi adicionado à solução de (4-(2,2dietoxietóxi)fenil)metanol (exemplo 1, etapa g) (0,9 g) em acetona (20 mL) e a mistura resultante foi agitada durante 16 horas em temperatura ambiente. A reação foi concentrada em vácuo e a solução aquosa resultante extraída com acetato de etila (3 x 20 mL). As camadas orgânicas combinadas foram secadas sobre sulfato de magnésio, filtradas e evaporadas em vácuo para fornecer o composto do subtítulo como uma goma clara, que foi usada diretamente na etapa seguinte. Produção 0,50 g.
i) (9-(2-(4-(Hidroximetil)fenóxi)etil)-1 -oxa-4,9-diazaespiro[5,5] undecan-4-il)(2-metiltiazol-4-il)metanona [00337] Cloridrato
HO de (2-metiltiazol-4-il)(1-oxa-4,9Petição 870190058499, de 25/06/2019, pág. 84/650
79/638 diazaespiro[5,5]unde-can-4-il)metanona (exemplo 1, etapa f) (0,38 g) foi adicionado à solução de 2-(4-(hidroximetil)fenóxi)acetaldeído (exemplo 1, etapa h) (0,17 g) em NMP (10 mL) e ácido acético (0,06 mL). A mistura resultante foi agitada durante 30 minutos em seguida resfriada em um banho de gelo. Triacetoxiboroidreto de sódio (0,32 g) foi em seguida adicionado e a reação deixada aquecer para temperatura ambiente e agitada durante 16 horas. A reação foi diluída com metanol (30 mL) e aplicada a um cartucho SCX pré-umedecido com metanol. O cartucho foi lavado com metanol (250 mL) e eluído com amônia a 3M em solução de metanol (150 mL). O eluente foi evaporado em vácuo e o resíduo purificado por cromatografia de coluna eluindo com 95:5 de acetato etila: trietilamina para fornecer o composto do subtítulo como uma goma. Produção 0,32 g.
[00338] 1H RMN (300 MHz, D6-DMSO) δ 7,86 (s, 1H), 7,23-7,16 (m,
2H), 6,85 (dt, J = 8,7, 1,1 Hz, 2H), 4,72-4,62 (m, 1H), 4,44-4,38 (m, 2H), 4,10-3,99 (m, 2H), 3,66 (d, J = 6,7 Hz, 4H), 3,61-3,55 (m, 2H), 2,71-2,64 (m, 5H), 2,47-2,42 (m, 4H), 1,76-1,64 (m, 2H), 1,59-1,45 (m, 2H).
j) 4-(2-(4-(2-Metiltiazol-4-carbonil)-1 -oxa-4,9-diazaespiro[5,5] undecan-9-il)etóxi)benzaldeído [00339] Dióxido de manganes (0,65 g) foi adicionado à solução de (9-(2-(4-(hidroximetil)fenóxi)etil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4il)(2-metiltiazol-4-il)metanona (0,32 g) (exemplo 1, etapa i) em DCM (20 mL) e a suspensão preta resultante aquecida sob refluxo durante 1 hora. Após resfriamento a mistura reacional foi passada através de um tampão de celite. O tampão foi lavado com DCM (2 x 30 mL) e o filtra
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80/638 do combinado e lavagens evaporaram em vácuo para fornecer o composto do subtítulo como uma goma. Produção 0,25 g.
[00340] m/z 430 (M+H)+ (APCI) [00341] 1H RMN (300 MHz, D6-DMSO) δ 9,86 (s, 1H), 7,96 (s, 1H),
7,88-7,83 (m, 2H), 7,13 (d, J = 8,5 Hz, 2H), 4,26-4,11 (m, 2H), 3,77-
3,46 (m, 6H), 2,78 - 2,65 (m, 5H), 2,48-2,34 (m, 4H), 1,76-1,36 (m, 4H).
k) Ditrifluoroacetato de (R)-4-hidróxi-7-(1-hidróxi-2-(4-(2-(4-(2metiltiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9il)etóxi)benzilamino)etil)benzo[d]tiazol-2(3H)-ona
HO
OH [00342] HCl (solução em éter a 2M, 0,29 mL) foi adicionado à solução de acetato de (R)-7-(2-amino-1-hidroxietil)-4-hidroxibenzo[d]tiazol2(3H)-ona (exemplo 1, etapa d) (0,17 g) em NMP (1 mL) e a mistura agitada durante 10 min. A solução resultante foi adicionada à solução de 4-(2-(4-(2-metiltiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan9-il)etóxi)benzaldeído (exemplo 1, etapa j) (0,25 g) em NMP (4 mL) e agitada durante 1 hora. A reação foi resfriada para 0°C e triacetoxiboroidreto de sódio (0,19 g) foi adicionado porção a porção. A mistura resultante foi deixada aquecer para temperatura ambiente e agitada durante 16 horas. A reação foi dividida entre tampão de fosfato de ph
7,2 (50 mL) e acetato de etila (50 mL). As camadas foram separadas e a aquosa extraída com acetato de etila (2 x 50 mL). A fase aquosa foi basificada com bicarbonato de sódio e extraída com acetato de etila (3 x 50 mL). As camadas orgânicas combinadas foram evaporadas em vácuo. O resíduo foi redissolvido em acetonitrila (50 mL) e acidificado com ácido trifluoroacético (1 mL). Tolueno (50 mL) foi adicionado e a mistura evaporada em vácuo. A goma resultante foi dissolvida em uma
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81/638 mistura de acetonitrila e água (1:1, 10 mL) e filtrada. A purificação foi por HPLC preparativa (Sunfire®, Gradiente: 5-30% de acetonitrila em TFA aquosa a 0,2%). As frações contendo o produto foram combinadas, evaporadas e o resíduo triturado com éter e evaporado em vácuo para fornecer o composto do título como um sólido branco. Produção 0,35 g.
[00343] m/z 640 (M+H)+ (APCI) [00344] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO, 90°C) δ 11,26 (s, 1H), 7,91 (s, 1H), 7,46 (d, J = 8,5 Hz, 2H), 7,03 (d, J = 8,5 Hz, 2H), 6,89 (d, J =
8,5 Hz, 1H), 6,75 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 4,93 - 4,87 (m, 1H), 4,40 - 4,35 (m, 2H), 4,19 - 4,13 (m, 2H), 3,76 - 3,63 (m, 6H), 3,58 - 3,51 (m, 2H),
3,43 - 3,35 (m, 2H), 3,30 - 3,14 (m, 2H), 3,03 - 2,96 (m, 2H), 2,68 (s, 3H), 2,11 - 1,99 (m, 2H), 1,92 - 1,78 (m, 2H). Cinco prótons trocáveis não observadoss.
Exemplo 2
Ditrifluoroacetato de (R)-4-hidróxi-7-(1-hidróxi-2-(9-(4-(2metiltiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9il)nonilamino)etil)benzo[d]tiazol-2(3H)-ona
HO
OH
a) (9-(9-Hidroxinonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4-il)(2metiltiazol-4-il)metanona [00345] 9-Bromononan-1-ol (0,29 g) foi adicionado a uma suspensão de cloridrato de (2-metiltiazol-4-il)(1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-4-il)metanona (exemplo 1, etapa f) (0,4 g) em uma mistura de trietilamina (0,41 mL) e acetonitrila (10 mL). A mistura
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82/638 resultante foi agitada durante 16 horas a 50°C. O solvente foi evaporado em vácuo e o resíduo dividido entre acetato de etila (30 mL) e solução de bicarbonato de sódio saturada (30 mL). As camadas foram separadas e a aquosa extraída com acetato de etila (2 x 30 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (30 mL), secadas sobre sulfato de sódio, filtradas e evaporadas em vácuo. O resíduo foi dissolvido em metanol (10 mL) e aplicado a um cartucho SCX pré-umedecido com metanol. O cartucho foi lavado com metanol (10 mL) e eluído com amônia a 3M em solução de metanol (100 mL). O eluente foi evaporado em vácuo para fornecer o composto do subtítulo como um óleo amarelo. Produção 0,32 g.
[00346] 1H RMN (300 MHz, D6-DMSO) δ 7,95 (s, 1H), 4,30 (t, J =
5,1Hz, 1H), 3,78-3,44 (m, 8H), 3,42-3,33 (m, 2H), 2,69 (s, 3H), 2,35-
2,14 (m, 8H), 1,71-1,57 (m, 2H), 1,55-1,19 (m, 12H).
b) 9-(4-(2-Metiltiazol-4-carbonil)-1 -oxa-4,9-diazaespiro[5,5] undecan-9-il)nonanal
H [00347] DMSO (0,32 mL) e trietilamina (0,32 mL) foram adicionados a uma solução de (9-(9-hidroxinonil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-4-il)(2-metiltiazol-4-il)metanona (exemplo 2, etapa a) (0,32 g) em diclorometano (5 mL). A mistura foi resfriada em um banho de gelo-sal e trióxido de enxofre de piridina (0,36 g) foi adicionada. A reação foi agitada a -10°C durante 1 hora, em seguida deixada aquecer para temperatura ambiente e agitada durante mais 3 horas. A reação foi diluída com DCM (20 mL) em seguida vertida em salmoura (20 mL). As camadas foram separadas e a camada orgânica lavada com salmoura (20 mL), secada sobre sulfato de sódio, filtrada e evaporada em vácuo. A purificação foi por cromatografia de sílica-gel
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83/638 eluindo com gradiente 47,5:47,5:5 de isso-hexano:acetato de etila: trietilamina para 95:5 de acetato etila:trietilamina para fornecer o composto do subtítulo como um óleo amarelo. Produção 0,25 g.
[00348] 1H RMN (300 MHz, D6-DMSO) δ 9,66 (t, J = 1,6 Hz, 1H),
7,95 (s, 1H), 3,72-3,46 (m, 8H), 3,31 (s, 2H), 2,69 (s, 3H), 2,44-2,18 (m, 8H), 1,73-1,14 (m, 12H)
c) Ditrifluoroacetato de (R)-4-hidróxi-7-(1-hidróxi-2-(9-(4-(2- metiltiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9il)nonilamino)etil)benzo[d]tiazol-2(3H)-ona
HO,
OH [00349] Cloridrato de (R)-7-(2-amino-1-hidroxietil)-4-hidroxibenzo[d] tiazol-2(3H)-ona (WO2007027134, exemplo 1, etapa d) (0,17 g) foi adicionado à solução de 9-(4-(2-metiltiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5] undecan-9-il)nonanal (exemplo 2, etapa b) (0,23 g) e ácido acético (0,03 mL) em metanol (15 mL). A mistura resultante foi agitada durante 10 minutos e resfriada para 0°C. Triacetoxiboroidreto de sódio (0,17 g) foi em seguida adicionado e a mistura agitada durante 16 horas. A reação foi concentrada em vácuo e o resíduo dissolvido em uma mistura de água e acetonitrila (1:1,5 mL). A purificação foi por HPLC preparativa (Sunfire®, Gradiente: 5-30% de acetonitrila em TFA aquosa a 0,2%). As frações contendo o produto foram combinadas e evaporadas em vácuo. O resíduo foi triturado com éter e evaporado para fornecer o composto do título como um sólido branco. Produção 0,15 g.
[00350] m/z 632 (M+H)+ (APCI) [00351] 1H RMN (300 MHz, D6-DMSO, 90°C) δ 11,42 (s, 1H), 10,75 (s, 1H), 9,01 (s, 1H), 8,72 (s, 1H), 7,92 (s, 1H), 6,94 (d, J = 8,5 Hz, 1H),
6,78 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 5,02-4,93 (m, 1H), 3,78-3,56 (m, 6H), 3,33-
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3,23 (m, 1H), 3,07-2,88 (m, 8H), 2,69 (s, 3H), 2,07-1,89 (m, 4H), 1,75-
1,62 (m, 4H), 1,3 -1,24 (m, 10H) + 1 próton obscurecido pelo pico de solvente.
Exemplo 3
Dicloridrato de (R)-4-hidróxi-7-(1 -hidróxi-2-(4-(2-(4-(2-metiltiazol-4carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9il)etóxi)fenetilamino)etil)benzo[d]tiazol-2(3H)-ona
HO.
OH
a) 2-(4-(2,2-Dietoxietóxi)fenil)etanol
HO [00352] Carbonato de césio (28,3 g) foi adicionado à solução de 4(2-hidroxietil)fenol (10 g) e 2-bromo-1,1-dietoxietano (11,79 mL) em DMF (150 mL). A suspensão resultante foi aquecida a 90°C durante 16 horas. A reação foi vertida em água (500 mL). A fase aquosa foi extraída com acetato de etila (3 x 200 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água (200 mL) e salmoura (200 mL), em seguida secadas sobre sulfato de magnésio, filtradas e evaporadas em vácuo. A purificação foi por cromatografia de sílica-gel eluindo com iso-hexano para 1:1 de gradiente de acetato de etila:iso-hexano para fornecer o composto do subtítulo como um óleo amarelo. Produção 10 g.
[00353] 1H RMN (300 MHz, CDCh) δ 7,14 (d, J = 6,9 Hz, 2H), 6,88
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85/638 (d, J = 6,9 Hz, 2H), 4,83 (t, J = 5,0 Hz, 1H), 4,00 (d, J = 5,0 Hz, 2H),
3,87-3,70 (m, 4H), 3,70-3,56 (m, 2H), 2,81 (t, J = 6,4 Hz, 2H), 1,25 (t, J = 6,9 Hz, 6H). OH não observado.
b) 2-(4-(2-Hidroxietil)fenóxi)acetaldeído
HO [00354] Ácido clorídrico concentrado (5 mL) foi adicionado à solução de 2-(4-(2,2-dietoxietóxi)fenil)etanol (exemplo 3, etapa a) (0,76 g) em 1,4-dioxano (10 mL) e a mistura resultante foi agitada durante 1 hora. A reação foi diluída com água (50 mL) e extraída com acetato de etila (3 x 50 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água (50 mL) e salmoura (50 mL), em seguida secadas sobre sulfato de sódio, filtradas e evaporadas em vácuo para fornecer o composto do subtítulo, que foi usado diretamente. Produção 0,35 g.
c) (9-(2-(4-(2-Hidroxietil)fenóxi)etil)-1 -oxa-4,9-diazaespiro[5,5] undecan-4-il)(2-metiltiazol-4-il)metanona
HO [00355] Cloridrato de (2-metiltiazol-4-il)(1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5] undecan-4-il)metanona (exemplo 1, etapa f) (0,63 g) foi adicionado à solução de 2-(4-(2-hidroxietil)fenóxi)acetaldeído (exemplo 3, etapa b) (0,541 g) em uma mistura de NMP (10 mL) e ácido acético (0,11 mL). A mistura resultante foi agitada à temperatura ambiente durante 30 minutos em seguida resfriada em um banho de gelo. Triacetoxiboroidreto de sódio (0,64 g) foi em seguida adicionado e a reação foi deixa
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86/638 da aquecer para temperatura ambiente e agitada durante 16 horas. A reação foi diluída com metanol (30 mL) e aplicada a um cartucho SCX pré-umedecido com metanol. O cartucho foi lavado com metanol (100 mL) e eluído com amônia a 3M em solução de metanol (100 mL). O eluente foi evaporado em vácuo e o resíduo purificado por cromatografia de sílica-gel, eluindo com 95:5 de acetato de etila:trietilamina para fornecer o composto do subtítulo como um óleo marrom. Produção 0,74 g.
[00356] 1H RMN (300 MHz, D6-DMSO) δ 7,86 (s, 1H), 7,09 (d, J =
8,4 Hz, 2H), 6,84-6,77 (m, 2H), 4,24-4,15 (m, 1H), 4,02 (t, J = 6,0 Hz, 2H), 3,68-3,54 (m, 8H), 3,00 (s, 2H), 2,71 - 2,61 (m, 5H), 2,51-2,42 (m, 4H), 1,75-1,65 (m, 2H), 1,59-1,45 (m, 2H).
d) 2-(4-(2-(4-(2-Metiltiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5] undecan-9-il)etóxi)fenil)acetaldeído [00357] Ácido trifluoroacético (0,04 mL) foi adicionado à solução de 9-(2-(4-(2-hidroxietil)fenóxi)etil)-4-(2-metiltiazol-4-carbonil)-1-oxa-4-aza-9azoniaespiro[5,5]undecano (exemplo 3, etapa c) (0,22 g) em DCM (3 mL) e a mistura resultante foi agitada durante 5 min. Periodinano Dess-Martin (0,31 g) foi em seguida adicionado e a mistura resultante agitada durante 5 minutos. Uma mistura de solução de tiossulfato de sódio saturada (0,5 mL), solução de bicarbonato de sódio (0,5 mL) e éter (5 mL) foi em seguida adicionada e a mistura resultante agitada durante 5 minutos. A camada orgânica foi separada e lavada com solução de bicarbonato de sódio (1 mL) e água (1 mL), em seguida secada sobre sulfato de sódio, filtrada e evaporada em vácuo para fornecer o composto do subtítulo como um óleo claro que foi usado imediatamente. Produção 0,19 g.
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e) Dicloridrato de (R)-4-hidróxi-7-(1-hidróxi-2-(4-(2-(4-(2-metiltiazol-
4-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9il)etóxi)fenetilamino)etil)benzo[d]tiazol-2(3H)-ona
HO,
OH [00358] Cloridrato de (R)-7-(2-amino-1-hidroxietil)-4-hidroxibenzo[d] tiazol-2(3H)-ona (WO2007027134, exemplo 1, etapa d) (0,10 g) foi adicionado à solução de 2-(4-(2-(4-(2-metiltiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9-il)etóxi)fenil)acetaldeído (exemplo 3, etapa d) (0,14 g) e ácido acético (0,02 mL) em metanol (1 mL) e a mistura resultante agitada durante 5 minutos. Triacetoxiboroidreto de sódio (0,103 g) foi em seguida adicionado, a reação foi agitada durante 10 minutos e evaporada em vácuo. O resíduo foi dissolvido em uma mistura de acetonitrila e água (1:1, 5 mL). A purificação foi por HPLC preparativa (Sunfire®, Gradiente: 5-50% de acetonitrila em TFA aquosa a 0,2%). As frações contendo o produto foram combinadas e evaporadas em vácuo. O resíduo foi dissolvido em acetonitrila (5 mL) e HCl em éter (1M, 2 mL) foi adicionado, em seguida o solvente foi evaporado em vácuo. O resíduo foi triturado com éter e evaporado em vácuo para fornecer o composto do título como um sólido branco. Produção 0,075 g.
[00359] m/z 654 (M+H)+ (APCI) [00360] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO) δ 11,50-11,14 (m, 2H), 9,22 (s, 1H), 8,87 (s, 1H), 7,91 (s, 1H), 7,20 (d, J = 8,5 Hz, 2H), 6,98-6,92 (m, 3H), 6,78 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 5,0 -4,96 (m, 1H), 4,42 (t, J = 5,1 Hz, 2H), 3,83 - 3,55 (m, 5H), 3,52-3,43 (m, 5H), 3,22-3,04 (m, 4H), 3,01-
2,93 (m, 2H), 2,69 (s, 3H), 2,11-1,93 (m, 4H) + 2 prótons obscurecido
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88/638 pelo solvente.
Exemplo 4
Ditrifluoroacetato de (R)-4-hidróxi-7-(1 -hidróxi-2-(2-(5-(2-(4-(2metiltiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9il)etil)tiofen-2-il)etilamino)etil)benzo[d]tiazol-2(3H)-ona
a) terc-butildimetil(2-(tiofen-2-il)etóxi)silano
[00361] Cloreto de terc-butildimetilsilila (12,66 g) foi adicionado porção a porção a 2-(2-tienil)etanol (9,0 g) e imidazol (5,7 g) em DMF (35 mL). A solução resultante foi agitada durante 18 horas. A mistura reacional foi dividida entre acetato de etila e água. A camada orgânica foi lavada com água, secada sobre sulfato de sódio e os solventes evaporados em vácuo. A purificação foi por cromatografia de sílica-gel, eluindo com 99:1 a 96:4 de acetato de etila:iso-hexano para fornecer o composto do subtítulo como um óleo claro. Produção 16 g.
[00362] 1H RMN (400 MHz, CDCh) δ 7,13 (d, 1H), 6,92 (dd, J = 5,0,
3,2 Hz, 1H), 6,83-6,82 (m, 1H), 3,82 (t, J = 6,7 Hz, 2H), 3,03 (t, J = 6,8 Hz, 2H), 0,97 (s, 9H), 0,03 (s, 6H).
b) 5-(2-(terc-butildimetilsililóxi)etil)tiofeno-2-carbaldeído
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89/638 )U-0
[00363] n-Butil lítio (2,5M em hexanos, 30 mL) foi adicionado gota a gota a uma solução de terc-butildimetil(2-(tiofen-2-il)etóxi)silano (exemplo 4, etapa a) (16 g) em tetra-hidrofurano (250 mL) a -78°C. A mistura reacional foi deixada aquecer para 0°C e agitada durante 1 hora. A reação foi em seguida resfriada para -78°C e DMF (34 mL) foi adicionado durante 10 minutos. A mistura reacional foi deixada aquecer para temperatura ambiente e agitada durante 18 horas. A mistura reacional foi dividida entre água e acetato de etila. A camada orgânica foi separada, lavada com água, secada sobre sulfato de sódio, filtrada e o solvente evaporado em vácuo. A purificação foi por cromatografia de sílica-gel, eluindo com 93:7 de iso-hexano:acetato de etila para fornecer o composto do subtítulo como um óleo incolor. Produção 15,4 g. [00364] 1H RMN (400 MHz, CDCb) δ 9,83 (s, 1H), 7,61 (d, J = 3,6
Hz, 1H), 6,96 (d, 1H), 3,86 (t, J = 6,3 Hz, 2H), 3,06 (td, J = 6,1,0,1 Hz, 2H), 0,88 (t, J = 2,9 Hz, 9H), 0,02 (s, 6H).
c) (5-(2-(terc-butildimetilsililóxi)etil)tiofen-2-il)metanol
Si-0
HO [00365] Boroidreto de sódio (1,74 g) foi adicionado à solução de 5(2-(terc-butildimetilsililóxi)etil)tiofeno-2-carbaldeído (12,4 g) (exemplo 4, etapa b) em etanol (120 mL) a 0°C. A solução resultante foi agitada a 0°C durante 1 hora. A mistura reacional foi dividida entre salmoura e acetato de etila. A camada orgânica foi separada, secada sobre sulfato
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90/638 de sódio, filtrada e o solvente evaporado em vácuo para fornecer o composto do subtítulo. Produção 12,1 g.
[00366] 1H RMN (400 MHz, CDCh) δ 6,82 (d, J = 3,6 Hz, 1H), 6,69 (d, J = 3,3 Hz, 1H), 4,75 (d, J = 4,9 Hz, 2H), 3,81 (t, J = 6,7 Hz, 2H), 2,99 (t, J = 6,8 Hz, 2H), 1,65 (t, J = 5,5 Hz, 1H), 0,89 (d, J = 2,8 Hz, 9H), 0,03 (d, J = 3,1 Hz, 6H).
d) 2-(5-(2-(terc-butildimetilsililóxi)etil)tiofen-2-il)acetonitrila
[00367] Trifenilfosfina (13,04 g) e tetrabrometo de carbono (15,71 g) foram adicionados em uma porção a uma solução de (5-(2-(tercbutildimetilsililóxi)etil)tiofen-2-il)metanol (exemplo 4, etapa c) (10,94 g) em DCM (20 mL) a 0°C. A solução resultante foi agitada à temperatura ambiente durante 1 hora. A mistura reacional foi resfriada para 0°C e cianeto de tetraetilamônio (8,96 g) foi adicionado. A mistura foi diluída com diclorometano (10 mL) e agitada à temperatura ambiente durante 40 minutos. A mistura reacional foi dividida entre diclorometano e salmoura. A camada orgânica foi separada, secada sobre sulfato de sódio, filtrada e o solvente evaporado em vácuo. A purificação foi por cromatografia de sílica-gel, eluindo com 95:5 a 94:6 de gradiente isohexano:acetato de etila para fornecer o composto do subtítulo como um óleo amarelo. Produção 7,6 g.
[00368] 1H RMN (400 MHz, CDCh) δ 6,87-6,84 (m, 1H), 6,70-6,68 (m, 1H), 3,84 (d, J = 0,8 Hz, 2H), 3,80 (t, J = 6,4 Hz, 2H), 2,97 (t, J =
6,5 Hz, 2H), 0,89 (s, 9H), 0,03 (s, 6H).
e) ácido 2-(5-(2-Hidroxietil)tiofen-2-il)acético
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HO
O [00369] A solução de 2-(5-(2-(terc-butildimetilsililóxi)etil)tiofen-2il)acetonitrila (exemplo 4, etapa d) (3 g) em etanol (30 mL) foi adicionada a uma solução agitada de hidróxido de potássio (1,20 g) em água (30 mL). A mistura resultante foi agitada a 100°C durante 4 horas. A reação foi concentrada em vácuo e a mistura resultante foi dividida entre salmoura e acetato de etila. A camada aquosa foi resfriada com gelo, acidificada por adição gota a gota de ácido clorídrico concentrado e extraída com acetato de etila três vezes. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secadas sobre sulfato de sódio, filtradas e o solvente evaporado em vácuo para fornecer o composto do subtítulo como um sólido amarelo. Produção 1,75 g.
[00370] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO) δ 12,44 (s, 1H), 6,72 (d, J =
3,3 Hz, 1H), 6,67 (d, J = 3,3 Hz, 1H), 4,76 (s, 1H), 3,71 (s, 2H), 3,61 -
3,55 (m, 2H), 2,86 (t, J = 6,8 Hz, 2H).
f) 2-(5-(2-(terc-butildimetilsililóxi)etil)tiofen-2-il)etanol
[00371] Cloreto de terc-butildimetilsilila (6,63 g) foi adicionado porção a porção a uma solução de imidazol (2,99 g) e ácido 2-(5-(2hidroxietil)tiofen-2-il)acético (3,9 g) (exemplo 4, etapa e) em DMF (50 mL) durante 20 minutos. A solução resultante foi agitada durante 1 hora. THF (50 mL) foi em seguida adicionado e a reação resfriada em um banho de gelo. Uma solução de carbonato de potássio (4,05 g) em água (50 mL) foi em seguida adicionada e a mistura agitada durante 20 minutos. A reação foi dividida entre acetato de etila e salmoura. A camada orgânica foi separada e lavada duas vezes com salmoura, se
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92/638 cada sobre sulfato de sódio, filtrada e o solvente evaporado em vácuo. O resíduo foi dissolvido em THF (80 mL) e complexo de tetrahidrofurano de borano (solução a 1M em THF, 62,8 mL) foi adicionado gota a gota. A solução resultante foi agitada durante 2 horas e extinta por adição gota a gota de metanol (30 mL). Os solventes foram em seguida evaporados em vácuo. A purificação foi por cromatografia de sílica-gel, eluindo com 83:17 de iso-hexano:acetato de etila para fornecer o composto do subtítulo como um líquido amarelo. Produção 4,6 g.
[00372] 1H RMN (300 MHz, CDCh) δ 6,69-6,63 (m, 2H), 3,87-3,75 (m, 4H), 3,05-2,91 (m, 4H), 0,89 (s, 9H), 0,03 (s, 6H) + prótons trocáveis
g) 2-(5-(2-(terc-butildimetilsililóxi)etil)tiofen-2-il)acetaldeído
O [00373] Periodinano Dess-Martin (0,38 g) foi adicionado à solução de 2-(5-(2-(terc-butildimetilsililóxi)etil)tiofen-2-il)etanol (exemplo 4, etapa f) (0,22 g) em diclorometano (5 mL) e a mistura resultante agitada durante 30 minutos. Uma mistura de solução de tiossulfato de sódio saturada (5 mL), solução de bicarbonato de sódio saturada (5 mL) e acetato de etila (25 mL) foi adicionada e a mistura resultante agitada durante 10 minutos. A camada orgânica foi separada e lavada com uma solução de solução de bicarbonato de sódio saturada (10 mL), e salmoura (10 mL), em seguida secada sobre sulfato de sódio, filtrada e evaporada em vácuo para fornecer o composto do subtítulo como um óleo claro que foi usado imediatamente. Produção 0,21 g.
[00374] 1H RMN (400 MHz, CDCh) δ 9,70 (t, J = 2,2 Hz, 1H), 6,73
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93/638 (s, 2H), 3,83-3,78 (m, 4H), 2,98 (t, J = 6,7 Hz, 2H), 0,89 (s, 9H), 0,02 (s, 6H)
h) Trifluoroacetato de (2-metiltiazol-4-il)(1-oxa-4,9- diazaespiro[5,5]undecan-4-il)metanona
HN [00375] Anidrido cíclico de ácido 1-propanofosfônico (solução a 1,57M em THF, 2,49 mL) foi adicionado à solução de cloridrato de 1oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecano-9-carboxilato de terc-butila (WuXi PharmaTech) (1 g), ácido 2-metiltiazol-4-carboxílico (0,56 g) e trietilamina (3,26 mL) em DMF (30 mL) e a mistura resultante agitada durante 16 horas em temperatura ambiente. A reação foi dividida entre água (500 mL) e acetato de etila (200 mL). As camadas foram separadas e a camada aquosa extraída com acetato de etila (2 x 150 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água (2 x 100 mL), e salmoura (100 mL), em seguida secadas sobre sulfato de magnésio, filtradas e evaporadas em vácuo. A purificação foi por cromatografia de sílica-gel eluindo com acetato de etila. O óleo resultante foi dissolvido em diclorometano (30 mL) e ácido trifluoroacético (3 mL) foi adicionado gota a gota. Este foi em seguida agitado durante 1 hora e concentrado em vácuo. O resíduo foi azeotropado duas vezes com tolueno (20 mL). A goma resultante foi triturada com éter para fornecer o composto do subtítulo como um sólido branco. Produção 1,20 g.
[00376] m/z 282 (M+H)+ (APCI) [00377] 1H RMN (300 MHz, D6-DMSO) δ 8,59-8,18 (m, 2H), 8,00 (s,
1H), 3,86-3,49 (m, 6H), 3,22-2,86 (m, 4H), 2,69 (s, 3H), 2,00-1,90 (m, 2H), 1,74-1,58 (m, 2H).
i) (9-(2-(5-(2-(terc-butildimetilsililóxi)etil)tiofen-2-il)etil)-1-oxa-4,9-
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djazaespjro[5,5]undecan-4-jl)(2-metjltjazol-4-jl)metanona
de [00378] Trifluoroacetato (2-metiltiazol-4-il)(1-oxa-4,9diazaespiro[5,5] undecan-4-il)metanona (exemplo 4, etapa h) (0,25 g) foi adicionado à solução de 2-(5-(2-(terc-butildimetilsililóxi)etil)tiofen-2il)acetaldeído (0,2 g) (exemplo 4, etapa g) em uma mistura de NMP (5 mL) e ácido acético (0,04 mL). A mistura resultante foi agitada durante 5 minutos em seguida triacetoxiboroidreto de sódio (0,22 g) foi adicionado. A mistura foi agitada durante 1 hora e vertida em tampão de pH
7,2 (50 mL). A fase aquosa foi extraída com acetato de etila (3 x 50 mL). Os orgânicos combinados foram lavados com tampão de pH 7,2 (50 mL) e salmoura (50 mL), em seguida secados sobre sulfato de sódio, filtrados e evaporados em vácuo. A purificação foi por cromatografia de sílica-gel eluindo com 4:1:0,05 de iso-hexano: acetato de eti- la:trietilamina a 95:5 de acetato de etila:trietilamina para fornecer o composto do subtítulo como um óleo amarelo. Produção 0,23 g. [00379] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO) δ 7,86 (s, 1H), 6,62 (s, 2H),
3,76 (t, J = 6,5 Hz, 2H), 3,70-3,57 (m, 6H), 3,30 (t, J = 7,0 Hz, 2H),
2,91-2,81 (m, 4H), 2,68 (s, 3H), 2,44-2,37 (m, 4H), 1,74-1,66 (m, 2H),
1,58-1,49 (m, 2H), 0,88-0,84 (m, 9H), 0,01-0,00 (m, 6H).
j) (9-(2-(5-(2-Hjdroxjetjl)tjofen-2-jl)etjl)-1 -oxa-4,9djazaespjro[5,5]undecan-4-jl)(2-metjltjazol-4-jl)metanona
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[00380] Ácido clorídrico concentrado (0,5 mL) foi adicionado à solução de (9-(2-(5-(2-(terc-butildimetilsililóxi)etil)tiofen-2-il)etil)-1-oxa-4,9diazaespiro [5,5]undecan-4-il)(2-metiltiazol-4-il)metanona (exemplo 4, etapa i) (0,235 g) em metanol (5 mL) e a solução resultante agitada durante 1 hora. O solvente foi evaporado em vácuo e o resíduo azeotropado com tolueno e novamente dissolvido em metanol (~2 mL). O resíduo foi dissolvido em metanol (10 mL) e aplicado a um cartucho SCX pré-umedecido com metanol. O cartucho foi lavado com metanol (100 mL) e eluído com amônia a 1M em solução de metanol (100 mL). O eluente foi evaporado em vácuo para fornecer o composto do subtítulo como um óleo amarelo. Produção 0,12 g.
[00381] 1H RMN (300 MHz, D6-DMSO) δ 7,87 (s, 1H), 6,64 (s, 2H),
4,38 (t, J = 4,9 Hz, 1H), 3,70-3,51 (m, 8H), 2,84 (t, J = 6,7 Hz, 4H),
2,68 (s, 3H), 2,60-2,52 (m, 2H), 2,4 -2,38 (m, 4H), 1,76-1,65 (m, 2H), 1,60-1,49 (m, 2H).
k) Ditrifluoroacetato de (R)-4-hidróxi-7-(1-hidróxi-2-(2-(5-(2-(4-(2metiltiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9il)etil)tiofen-2-il)etilamino)etil)benzo[d]tiazol-2(3H)-ona
OH
[00382]
Ácido trifluoroacético(0,02 mL) foi adicionado à solução de (9-(2-(5-(2-hidroxietil)tiofen-2-il)etil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-4-il)(2-metiltiazol-4-il)metanona (exemplo 4,
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96/638 etapa j) (0,128 g) em DCM (5 mL) a 0°C e a mistura resultante agitada durante 5 minutos. Periodinano Dess-Martin (0,15 g) foi em seguida adicionado e a mistura agitada durante 10 minutos. Uma mistura de solução de tiossulfato de sódio saturada (5 mL), solução de bicarbonato de sódio saturada (5 mL) e acetato de etila (25 mL) foi adicionada e a mistura agitada durante 10 minutos. A fase aquosa foi separada e extraída com acetato de etila (20 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com uma solução saturada de solução de bicarbonato de sódio (10 mL), e salmoura (10 mL), em seguida secada sobre sulfato de sódio, filtradas e evaporadas em vácuo. O resíduo foi redissolvido em MeOH (1 mL). Ácido acético (0,04 mL) foi adicionado seguido por cloridrato de (R)-7-(2-amino-1-hidroxietil)-4hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona (WO2007 027134, exemplo 1, etapa d) (0,19 g) e a mistura foi resfriada para 0°C. Triacetoxiboroidreto de sódio (0,157 g) foi adicionado e a mistura resultante agitada durante 1 hora em seguida concentrada em vácuo. O resíduo foi dissolvido em uma mistura de acetonitrila e água (1:1, 5 mL). A purificação foi por HPLC preparativa (Sunfire®, Gradiente: 5-50% de acetonitrila em TFA aquosa a 0,2%). As frações contendo o produto foram combinadas, evaporadas em vácuo e o resíduo triturado com éter e evaporado em vácuo para fornecer o composto do título como um sólido branco. Produção 0,04 g.
[00383] m/z 644 (M+H)+ (APCI) [00384] 1H RMN (300 MHz, D6-DMSO, 90°C) δ 7,92 (s, 1H), 6,93 (d,
J = 8,5 Hz, 1H), 6,84-6,73 (m, 3H), 4,89 (dd, J = 7,9, 5,4 Hz, 1H), 3,74-
3,62 (m, 6H), 3,44-3,07 (m, 14H), 2,68 (s, 3H), 2,11-1,93 (m, 2H), 1,89-
1,72 (m, 2H). Seis prótons trocáveis não observados.
Exemplo 5
Ditrifluoroacetato de (R)-4-hidróxi-7-(1-hidróxi-2-(4-(2-(4-(2metiltiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9Petição 870190058499, de 25/06/2019, pág. 102/650
97/638 il)etil)fenetilamino)etil)benzo[d]tiazol-2(3H)-ona
a) 2,2'-(1,4-Fenileno)dietanol
HO
OH [00385] Complexo de borano- sulfeto de metila (solução a 2M em tetra-hidrofurano, 80 mL) foi adicionado durante 20 minutos a uma solução agitada de ácido 2,2'-(1,4-fenileno)diacético (10,20 g) em tetrahidrofurano (100 mL) resfriado em um banho de gelo. Após 16 horas, a mistura reacional foi cuidadosamente extinta com metanol (40 mL). A solução foi evaporada em vácuo e a goma resultante foi dividida entre acetato de etila e cloreto de amônio aquoso saturado. A solução de acetato de etila foi separada, secada sobre sulfato de magnésio, filtrada e evaporada em vácuo para fornecer o composto do subtítulo como goma. Produção 8,64 g.
[00386] 1H RMN (300 MHz, CDCh) δ 7,18 (s, 4H), 3,86 (t, 4H), 2,85 (t, 4H) + 2 prótons trocáveis.
b) 2-{4-[2-(terc-butil-dimetil-silanilóxi)-etil]-fenil}-etanol
HO \ /=\
Si— [00387] terc-butildimetilclorossilano (9,68 mL) foi adicionado à solução de 2,2'-(1,4-fenileno)dietanol (exemplo 5, etapa a) (8,64 g) e imidazol (10,21 g) em DMF seco (100 mL) resfriado em um banho de gelo. Após 45 minutos, a mistura reacional foi diluída com acetato de eti
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98/638 la, lavada três vezes com água e evaporada em vácuo. A purificação foi por cromatografia de sílica-gel, eluindo com 5:1 de isohexano:acetato de etila para fornecer o composto do subtítulo como um óleo incolor. Produção 6,20 g.
[00388] 1H RMN (300 MHz, CDCh) δ 7,21-7,13 (m, 4H), 3,92-3,76 (m, 4H), 2,92-2,76 (m, 4H), 0,89 (s, 9H), 0,02 (s, 6H)
c) 2-(4-(2-(terc-butildimetilsililóxi)etil)fenil)acetaldeído [00389] Periodinano Dess-Martin (0,38 g) foi adicionado à solução de 2-(4-(2-(terc-butildimetilsililóxi)etil)fenil)etanol (exemplo 5, etapa b) (0,21 g) em diclorometano (5 mL) e a mistura resultante agitada durante 30 minutos. Uma mistura de solução de tiossulfato de sódio saturada (5 mL), solução de bicarbonato de sódio saturada (5 mL) e acetato de etila (25 mL) foi adicionada e a mistura resultante agitada durante 10 minutos. A fase orgânica foi separada e lavada com solução de bicarbonato de sódio saturada (2 x 10 mL) e salmoura (10 mL), em seguida secada sobre sulfato de sódio, filtrada e evaporada para fornecer o composto do subtítulo como um óleo claro que foi usado imediatamente. Produção 0,20 g.
[00390] 1H RMN (300 MHz, CDCh) δ 9,74 (t, J = 2,4 Hz, 1H), 7,23 (d, J = 8,2 Hz, 2H), 7,15 (d, J = 8,2 Hz, 2H), 3,82 (t, J = 7,1 Hz, 2H),
3,67 (d, J = 2,6 Hz, 2H), 2,83 (t, J = 7,1 Hz, 2H), 0,88 (s, 9H), 0,00 (s, 6H).
d) (9-(4-(2-(terc-butildimetilsililóxi)etil)fenetil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-4-il)(2-metiltiazol-4-il)metanona
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[00391] Trifluoroacetato de (2-Metiltiazol-4-il)(1-oxa-4,9-diazaespiro [5,5]undecan-4-il)metanona (exemplo 4, etapa h) (0,26 g) foi adicionado à solução de 2-(4-(2-(terc-butildimetilsililóxi)etil)fenil)acetaldeído (exemplo 5, etapa c) (0,2 g) e ácido acético (0,04 mL) em NMP (5 mL). A mistura resultante foi agitada durante 5 minutos em seguida triacetoxiboroidreto de sódio (0,23 g) foi adicionado. A mistura foi agitada durante 1 hora, vertida em tampão de pH 7,2 (50 mL) e extraída com acetato de etila (3 x 50 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com tampão de pH 7,2 (50 mL) e salmoura (50 mL), em seguida secadas sobre sulfato de sódio, filtradas e evaporadas em vácuo. A purificação foi por cromatografia de sílica-gel eluindo com 80:15:5 de iso-hexano: acetato de etila:trietilamina a 95:5 de acetato de etila:trietilamina para fornecer o composto do subtítulo como um óleo amarelo. Produção 0,30 g.
[00392] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO, 90°C) δ 7,90 (s, 1H), 7,12 (s,
4H), 3,80 (t, J = 6,8 Hz, 2H), 3,71-3,60 (m, 6H), 2,77-2,67 (m, 7H), 2,46-2,41 (m, 2H), 1,76-1,67 (m, 2H), 1,61-1,51 (m, 2H), 0,87 (s, 9H), 0,02 (s, 6H) + 4 prótons obscurecido por picos de solvente.
e) (9-(4-(2-Hidroxietil)fenetil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4il)(2-metiltiazol-4-il)metanona
[00393] Ácido clorídrico concentrado (0,5 mL) foi adicionado à solução de (9-(4-(2-(terc-butildimetilsililóxi)etil)fenetil)-1-oxa-4,9
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100/638 diazaespiro[5,5] undecan-4-il)(2-metiltiazol-4-il)metanona (exemplo 5, etapa d) (0,3 g) em metanol (5 mL) e a solução resultante agitada durante 1 hora. O solvente foi evaporado em vácuo e o resíduo azeotropado com tolueno e redissolvido em metanol (~2 mL). O resíduo foi diluído com metanol (10 mL) e aplicado a um cartucho SCX préumedecido com metanol. O cartucho foi lavado com metanol (100 mL) e eluído com amônia a 1M em solução de metanol (100 mL). O eluente foi evaporado em vácuo para fornecer o composto do subtítulo como um óleo claro. Produção 0,2 g.
[00394] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO) δ 7,86 (s, 1H), 7,09 (s, 4H),
4,24 (t, J = 5,0 Hz, 1H), 3,69-3,55 (m, 8H), 2,68 (s, 3H), 2,45-2,38 (m, 4H), 1,74-1,65 (m, 2H), 1,57-1,48 (m, 2H) + 6 prótons obscurecido por picos de solvente.
f) Ditrifluoroacetato de (R)-4-hidróxi-7-(1-hidróxi-2-(4-(2-(4-(2metiltiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9il)etil)fenetilamino)etil)benzo[d]tiazol-2(3H)-ona
HO.
OH [00395] Ácido trifluoroacético (0,04 mL) foi adicionado à solução de (9-(4-(2-hidroxietil)fenetil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4-il)(2metiltiazol-4-il)metanona (exemplo 5, etapa e) (0,21 g) em DCM (5 mL) a 0°C e a mistura resultante agitada durante 5 minutos. Periodinano Dess-Martin (0,25 g) foi em seguida adicionado e a mistura agitada durante 10 minutos. Uma mistura de solução de tiossulfato de sódio saturada (5 mL), solução de bicarbonato de sódio saturada (5 mL) e acetato de etila (25 mL) foram adicionados e a mistura agitada durante
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101/638 minutos. A aquosa foi separada e extraída com acetato de etila (20 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com solução de bicarbonato de sódio saturada (10 mL) e salmoura (10 mL), em seguida secadas sobre sulfato de sódio, filtradas e evaporadas em vácuo. O resíduo foi redissolvido em MeOH (1 mL). Ácido acético (0,04 mL) foi adicionado, seguido por cloridrato de (R)-7-(2-amino-1hidroxietil)-4-hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona (WO2007027134, exemplo 1, etapa d) (0,19 g) e a mistura foi resfriada para 0°C. Triacetoxiboroidreto de sódio (0,157 g) foi adicionado e a mistura resultante agitada durante 1 hora em seguida concentrada em vácuo. O resíduo foi dissolvido em uma mistura de acetonitrila e água (1:1, 5 mL). A purificação foi por HPLC preparativa (Sunfire®, Gradiente: 5-50% de acetonitrila em TFA aquosa a 0,2%). As frações contendo o produto foram combinadas, evaporadas em vácuo e o resíduo triturado com éter e evaporado em vácuo para fornecer o composto do título como um sólido branco. Produção 0,17 g.
[00396] m/z 638 (M+H)+ (APCI) [00397] 1H RMN (300 MHz, D6-DMSO) δ 7,92 (s, 1H), 7,26-7,18 (m,
4H), 6,93 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 6,77 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 4,96-4,87 (m, 1H), 3,76-2,90 (m, 20H), 2,68 (s, 3H), 2,14-1,75 (m, 4H). Seis prótons trocáveis não observados.
Exemplo 6
Ditrifluoroacetato de (R)-4-hidróxi-7-(1 -hidróxi-2-(3-((4-(2metiltiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9il)metil)fenetilamino)etil)benzo[d]tiazol-2(3H)-ona
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OH
HO
S
N H
a) 2-(3-(Bromometil)fenil)etanol
Br
HO [00398] Complexo de borano-dimeltilsulfeto (solução a 2M em THF,
5,78 mL) foi adicionado gota a gota a uma solução de ácido 2-(3 (bromometil)fenil)acético (1,06 g) em THF (10 mL) a 0°C e a mistura resultante agitada durante 10 minutos. A reação foi em seguida deixa da aquecer para temperatura ambiente e agitada durante a noite. Metanol (5 mL) foi em seguida adicionado e a mistura concentrada em vácuo. A purificação foi por cromatografia de sílica-gel eluindo com gradiente iso-hexano para dietil éter para fornecer o composto do subtítulo como um sólido branco. Produção 1 g.
[00399] 1H RMN (300 MHz, CDCb) δ 7,34-7,24 (m, 3H), 7,22-7,12 (m, 1H), 4,48 (s, 2H), 3,87 (t, J = 6,5 Hz, 2H), 2,87 (t, J = 6,5 Hz, 2H), OH não observado.
b) 9-(3-(2-Hidroxietil)benzil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4il)(2-metiltiazol-4-il)metanona
[00400] 2-(3-(Bromometil)fenil)etanol (exemplo 6, etapa a) (0,11 g) foi adicionado à solução de trifluoroacetato de (2-Metiltiazol-4-il)(1-oxaPetição 870190058499, de 25/06/2019, pág. 108/650
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4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4-il)metanona (exemplo 4, etapa h) (0,2 g) e trietilamina (0,17 mL) em acetonitrila (5 mL) e a mistura resultante agitada durante a noite em temperatura ambiente. O solvente foi evaporado em vácuo, e o resíduo dividido entre acetato de etila (25 mL) e solução de bicarbonato de sódio saturada (25 mL). A camada aquosa foi separada e extraída com acetato de etila (2 x 25 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (25 mL), secadas sobre sulfato de sódio, filtradas e evaporadas em vácuo. A purificação foi por cromatografia de sílica-gel eluindo com 80:15:5 de gradiente de iso-hexano: acetato de etila:trietilamina a 95:5 de acetato de etila:trietilamina para fornecer o composto do subtítulo como um óleo amarelo. Produção 0,15 g.
[00401] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO) δ 7,85 (s, 1H), 7,18 (t, J =
7,4 Hz, 1H), 7,12-7,04 (m, 3H), 4,24 (t, J = 5,1 Hz, 1H), 3,71-3,54 (m, 8H), 3,42 (s, 2H), 2,71 (t, J = 6,9 Hz, 2H), 2,68 (s, 3H), 2,38-2,27 (m, 4H), 1,74-1,64 (m, 2H), 1,57-1,47 (m, 2H).
c) Ditrifluoroacetato de (R)-4-hidróxi-7-(1-hidróxi-2-(3-((4-(2- metiltiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9il)metil)fenetilamino)etil)benzo[d]tiazol-2(3H)-ona
N H
OH
N H S
[00402]
Ácido trifluoroacético (0,03 mL) foi adicionado à solução de (9-(3-(2-hidroxietil)benzil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4-il)(2 metiltiazol-4-il)metanona (exemplo 6, etapa b) (0,17 g) em DCM (5 mL) a 0°C e a mistura resultante agitada durante 5 minutos. Periodinano
Dess-Martin (0,21 g) foi em seguida adicionado e a mistura agitada durante 10 minutos. Uma mistura de solução de tiossulfato de sódio
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104/638 saturada (5 mL), solução de bicarbonato de sódio saturada (5 mL) e acetato de etila (25 mL) foi adicionada e a mistura agitada durante 10 minutos. A fase aquosa foi separada e extraída com acetato de etila (20 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com solução de bicarbonato de sódio saturada (10 mL), e salmoura (10 mL), em seguida secadas sobre sulfato de sódio, filtradas e evaporadas. O resíduo foi redissolvido em metanol (25 mL). Ácido acético (0,04 mL) foi adicionado seguido por cloridrato de (R)-7-(2-amino-1-hidroxietil)-4hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona (WO2007027134, exemplo 1, etapa d) (0,16 g) e a mistura resfriada para 0°C em um banho de gelo antes da adição de triacetoxiboroidreto de sódio (0,16 g). A mistura resultante foi agitada durante 1 hora e concentrada. O resíduo foi dissolvido em uma mistura de acetonitrila e água (1:1, 5 mL). A purificação foi por HPLC preparativa (Sunfire®, Gradiente: 5-50% de acetonitrila em TFA aquosa a 0,2%). As frações contendo o produto foram combinadas, evaporadas em vácuo e o resíduo triturado com éter e evaporado em vácuo para fornecer o composto do título como um sólido branco. Produção 0,125 g.
[00403] m/z 624 (M+H)+ (APCI) [00404] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO, 90°C) δ 11,27 (s, 1H), 7,90 (s, 1H), 7,45-7,31 (m, 4H), 6,93 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 6,77 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 4,92 (dd, J = 7,9, 5,1 Hz, 1H), 4,30 (s, 2H), 3,74-3,58 (m, 6H), 3,29-2,97 (m, 10H), 2,67 (s, 3H), 2,13-1,95 (m, 2H), 1,88-1,70 (m, 2H). Cinco prótons trocáveis não observados.
Exemplo 7
Ditrifluoroacetato de (R)-8-hidróxi-5-(1-hidróxi-2-(3-((4-(2metiltiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9il)metil)fenetilamino)etil)quinolin-2(1H)-ona
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[00405]
Ácido trifluoroacético (0,02 mL) foi adicionado à solução de (9-(3-(2-hidroxietil)benzil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4-il)(2 metiltiazol-4-il)metanona (exemplo 6, etapa b) (0,11 g) em DCM (5 mL) a 0°C e a mistura resultante agitada durante 5 minutos. Periodinano
Dess-Martin (0,14 g) foi em seguida adicionado e a mistura agitada durante 10 minutos. Uma mistura de solução de tiossulfato de sódio saturada (5 mL), solução de bicarbonato de sódio saturada (5 mL) e acetato de etila (25 mL) foi adicionada e a mistura foi agitada durante 10 minutos. A camada aquosa foi separada e extraída com acetato de etila (20 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com solução de bicarbonato de sódio saturada (10 mL), salmoura (10 mL), secadas sobre sulfato de sódio, filtradas e evaporadas em vácuo. O resíduo foi redissolvido em metanol (25 mL). Ácido acético (0,02 mL) foi adicionado seguido por (R)-5-(2-amino-1-(tercbutildimetilsililóxi)etil)-8-hidroxiquinolin-2(1 H)-ona (WO2004106333) (0,09 g) e a mistura resfriada para 0°C em um banho de gelo antes da adição de triacetoxiboroidreto de sódio (0,08 g). A mistura resultante foi agitada durante 1 hora e concentrada em vácuo. O resíduo foi dividido entre acetato de etila (50 mL) e tampão de pH 7,2 (50 mL). A aquosa foi separada e extraída com acetato de etila (2 x 50 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (20 mL), secadas sobre sulfato de sódio, filtradas e evaporadas. A purificação foi por cromatografia de sílica-gel eluindo com 95:5:0,5 a 92:8:0,8 de gradiente de DCM:metanol: amônia aquosa ’880’. As frações contendo
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106/638 o produto foram combinadas, evaporadas e dissolvidas em THF (1 mL). Tri-hidrofluoreto de trietilamina (0,05 mL) foi adicionado e a mistura agitada durante a noite. O solvente foi evaporado em vácuo e o resíduo foi dissolvido em uma mistura de acetonitrila e água (1:1, 5 mL). A purificação foi por HPLC preparativa (Sunfire®, Gradiente: 5-50% de acetonitrila em TFA aquosa a 0,2%). As frações contendo o produto foram combinadas, evaporadas em vácuo e o resíduo triturado com éter e evaporado em vácuo para fornecer o composto do título como um sólido branco. Produção 0,06 g.
[00406] m/z 618 (M+H)+ (APCI) [00407] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO) δ 8,16 (d, J = 10,0 Hz, 1H),
7,90 (s, 1H), 7,47-7,30 (m, 4H), 7,13 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 6,99 (d, J =
8,2 Hz, 1H), 6,54 (d, J = 10,0 Hz, 1H), 5,35 (dd, J = 8,5, 4,1 Hz, 1H),
4,30 (s, 2H), 3,74-3,57 (m, 4H), 3,32-2,98 (m, 12H), 2,67 (s, 3H), 2,12-
1,92 (m, 2H), 1,87-1,67 (m, 2H). Seis prótons trocáveis não observados.
Exemplo 8
Ditrifluoroacetato de (R)-4-hidróxi-7-(1-hidróxi-2-(4-(3-(4-(2metiltiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9il)propóxi)benzilamino)etil)benzo[d]tiazol-2(3H)-ona
HO
OH
a) 4-(3-Bromopropóxi)benzaldeído
Br [00408] 1,3-dibromopropano (20,0 g) foi adicionado a uma suspensão agitada de 4-hidroxibenzaldeído (4,0 g) e carbonato de potássio (7,0 g) em acetona (80 mL). Após 16 horas, a mistura foi aquecida sob
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107/638 refluxo durante mais 2 horas, resfriada, filtrada para remover os inorgânicos, e a solução foi evaporada em vácuo. A purificação foi por cromatografia de sílica-gel eluindo com iso-hexano para remover o
1,3-dibromopropano e em seguida diclorometano:iso-hexano, 2:1 para coletar o composto de subtítulo. Produção 3,45 g.
[00409] 1H RMN (300 MHz, CDCh) δ 9,89 (s, 1H), 7,84 (d, J = 9,2
Hz, 2H), 7,01 (d, J = 9,2 Hz, 2H), 4,21 (t, J = 5,6 Hz, 2H), 3,62 (t, J = 6,0 Hz, 2H), 2,36 (quinteto, J = 6,1 Hz, 2H)
b) 4-(3-(4-(2-Metiltiazol-4-carbonil)-1 -oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9-il)propóxi)benzaldeído
[00410] Uma mistura de trifluoroacetato de (2-metiltiazol-4-il)(1-oxa-
4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4-il)metanona (exemplo 4, etapa h) (0,244 g), 4-(3-bromopropóxi)benzaldeído (exemplo 8, etapa a) (0,15 g) e trietilamina (0,344 mL) em MeCN (2 mL) foi aquecida a 60°C. Após 16 horas, a mistura reacional foi evaporada em vácuo. A purificação foi por cromatografia de sílica-gel eluindo com acetato de etila:trietilamina, 10:1 para fornecer o composto do subtítulo como um óleo. Produção 0,24 g.
[00411] m/z 444 (M+H)+ (APCI)
c) Ditrifluoroacetato de (R)-4-hidróxi-7-(1-hidróxi-2-(4-(3-(4-(2metiltiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9il)propóxi)benzilamino)etil)benzo[d]tiazol-2(3H)-ona
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OH [00412] Cloreto de hidrogênio (0,4 mL de uma solução a 1M em dietil éter) foi adicionado a uma solução agitada de 4-(3-(4-(2-metiltiazol-
4-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)propóxi)benzaldeído (exemplo 8, etapa b) (0,15 g) e acetato de (R)-7-(2-amino-1hidroxietil)-4-hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona (exemplo 1, etapa d) (0,15 g) em MeOH (15 mL). Após 5 minutos cianoboroidreto de sódio (0,05 g) foi adicionado. Após 16 horas a solução foi concentrada a ~2 mL e em seguida dividida entre acetato de etila e tampão de fosfato de ph 7,2 (20 mL). A solução de acetato de etila foi lavada com salmoura, secada sobre sulfato de sódio, filtrada e evaporada em vácuo. O resíduo foi dissolvido em uma mistura de acetonitrila e água (1:1, 5 mL). A purificação foi por HPLC preparativa (Sunfire®, Gradiente: 5-35% de acetonitrila em TFA aquosa a 0,2%). As frações contendo o produto foram combinadas, evaporadas em vácuo e o resíduo triturado com éter e evaporado em vácuo para fornecer o composto do título como um sólido branco. Produção 0,045 g.
[00413] m/z 654 (M+H)+ (APCI) [00414] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO) δ 7,92 (s, 1H), 7,42 (d, J =
8,7 Hz, 2H), 6,98 (d, J = 8,7 Hz, 2H), 6,89 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 6,75 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 4,91 - 4,84 (m, 1H), 4,18 - 4,04 (m, 4H), 3,78 - 2,94 (m, 14H), 2,71 (s, 3H), 2,19 - 2,00 (m, 4H), 1,85 - 1,66 (m, 2H). Seis prótons trocáveis não observados.
Exemplo 9
Ditrifluoracetato de (R)-8-hidróxi-5-(1-hidróxi-2-(3-((4-(5metiltiofeno-2-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9il)metil)fenetilamino)etil)quinolin-2(1H)-ona
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a) 4-(5-metiltiofeno-2-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecano9-carboxilato de terc-butila
[00415] Anidrido cíclico de ácido 1-propanofosfônico (solução a 1,57M em THF, 0,64 mL) foi adicionado à solução de cloridrato de 1oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecano-9-carboxilato de terc-butila (WuXi PharmaTech) (0,26 g), ácido 5-metiltiofeno-2-carboxílico (0,142 g) e trietilamina (0,84 mL) em DMF (8 mL) e a mistura resultante agitada durante 16 horas. A mistura reacional foi vertida em água (100 mL) e extraída com acetato de etila (3 x 200 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água (2 x 100 mL) e salmoura (100 mL), em seguida secadas sobre sulfato de magnésio, filtradas e evaporadas em vácuo. A purificação foi por cromatografia de sílica-gel eluindo com acetato de etila:iso-hexano, 1:1 para fornecer o composto do subtítulo como um óleo claro. Produção 0,32 g.
[00416] 1H RMN (400 MHz, CDCh) δ 7,11 (d, J = 3,6 Hz, 1H), 6,72-
6,69 (m, 1H), 3,78 - 3,67 (m, 8H), 3,60 - 3,51 (m, 2H), 3,19 - 3,10 (m, 2H), 2,51 (s, 3H), 1,86 - 1,79 (m, 2H), 1,45 (s, 9H).
b) Trifluoroacetato de (5-metiltiofen-2-il)(1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5] undecan-4-il)metanona
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[00417] 4-(5-metiltiofeno-2-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5] undecano-9-carboxilato de terc-butila (exemplo 9, etapa a) (0,32 g) em DCM (3 mL) foi tratada com ácido trifluoroacético (1,0 g). Após 2 horas, a mistura reacional foi evaporada em vácuo e azeotropada duas vezes com tolueno para produzir o composto do subtítulo que foi usado diretamente. Produção 0,32 g.
c) (9-(3-(2-Hidroxietil)benzil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4il)(5-metiltiofen-2-il)metanona
[00418] 2-(3-(Bromometil)fenil)etanol (exemplo 6, etapa a) (0,136 g) foi adicionado a uma solução agitada de trifluoroacetato de (5metiltiofen-2-il)(1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4-il)metanona (exemplo 9, etapa b) (0,250 g) e trietilamina (0,278 mL) em MeCN (5 mL). Após 1 hora, a mistura reacional foi concentrada e aplicada a uma coluna de sílica-gel eluindo com acetato de etila:trietilamina, 95:5 para fornecer o composto do subtítulo. Produção 0,24 g.
[00419] 1H RMN (400 MHz, CDCh) δ 7,28-7,24 (m, 2H), 7,18-7,15 (m, 1H), 7,11-7,08 (m, 2H), 6,70-6,67 (m, 1H), 3,86 (t, J = 6,6 Hz, 2H), 3,77-3,69 (m, 4H), 3,56 (s, 2H), 3,48 (s, 2H), 2,86 (t, J = 7,0 Hz, 2H), 2,55-2,48 (m, 5H), 2,40-2,32 (m, 2H), 1,89-1,82 (m, 2H), 1,70-1,50 (2Hs sob pico de água). Um próton trocável não observado.
d) 2-(3-((4-(5-Metiltiofeno-2-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5] undecan-9-il)metil)fenil)acetaldeído
[00420] Periodinano Dess-Martin (0,16 g) foi adicionado a uma soPetição 870190058499, de 25/06/2019, pág. 116/650
111/638 lução agitada de (9-(3-(2-hidroxietil)benzil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-4-il)(5-metiltiofen-2-il)metanona (0,13 g) (exemplo 9, etapa c) e ácido trifluoroacético (0,036 g) em DCM (4 mL) sob nitrogênio. Após 0,5 hora, solução de tiossulfato de sódio saturada (5 mL) e solução de bicarbonato de sódio saturada (5 mL) foram adicionadas e a mistura reacional extraída duas vezes com acetato de etila. Os extratos orgânicos combinados foram lavados com bicarbonato de sódio saturado e salmoura, secados sobre sulfato de sódio, filtrados e evaporados em vácuo para fornecer o composto do subtítulo. Produção 0,13 g. Usado diretamente.
e) Ditrifluoroacetato de (R)-8-hidróxi-5-(1-hidróxi-2-(3-((4-(5- metiltiofeno-2-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9il)metil)fenetilamino)etil)quinolin-2(1H)-ona
[00421] (R)-5-(2-Amino-1-(terc-butildimetilsililóxi)etil)-8hidroxiquinolin-2(1H)-ona (WO2004106333) (0,179 g) foi adicionado a uma solução agitada de 2-(3-((4-(5-metiltiofeno-2-carbonil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil)fenil)acetaldeído (exemplo 9, etapa d) (0,13 g) e ácido acético (0,031 mL) em MeOH (5 mL). Após 5 minutos, triacetoxiboroidreto de sódio (0,114 g) foi adicionado. Após mais 15 minutos. Acetato de etila (30 mL) foi adicionado e a mistura reacional foi lavada com tampão de pH 7 (30 mL) e evaporada em vácuo. A purificação foi por cromatografia de sílica-gel eluindo com 92:7:1, DCM:MeOH:amônia aquosa ‘880’ para fornecer o intermediário sililado. Este intermediário foi dissolvido em THF (2 mL) e tri-hidrofluoreto
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112/638 de trietilamina (0,062 mL) adicionado. Após 16 horas, a reação foi evaporada em vácuo, tolueno (150 mL) adicionado e a mistura evaporada em vácuo. O resíduo foi dissolvido em uma mistura de acetonitrila e água (1:1, 5 mL). A purificação foi por HPLC preparativa (Sunfire®, Gradiente: 5-50% de acetonitrila em TFA aquosa a 0,2%). As frações contendo o produto foram combinadas, evaporadas em vácuo e o resíduo triturado com dietil éter e evaporado em vácuo para fornecer o composto do título como um sólido branco. Produção 0,05 g.
[00422] m/z 617 (M+H)+ (APCI) [00423] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO) δ 10,55-10,45 (m, 2H), 9,95-
9,84 (m, 0,2H), 9,68-9,57 (m, 0,8H)(rotômeros), 8,97-8,74 (m, 2H),
8,16 (d, J = 9,5 Hz, 1H), 7,49-7,33 (m, 4H), 7,29-7,26 (m, 0,2H), 7,25-
7,21 (m, 0,8H))(rotômeros), 7,15 (d, J = 9,5 Hz, 1H), 6,99 (d, J = 9,5 Hz, 1H), 6,86-6,81 (m, 1H), 6,58 (d, J = 10,1 Hz, 1H), 6,27-6,18 (m, 1H), 5,37-5,30 (m, 2H), 4,44-4,40 (m, 0,5H), 4,35-4,29 (m, 1,5H), 3,73-
3,63 (m, 4H), 3,51-3,46 (m, 2H), 3,31-2,94 (m, 8H), 2,46 (s, 3H), 2,122,00 (m, 2H), 1,70-1,58 (m, 2H). Um próton trocável não observado.
Exemplo 10
Ditrifluoroacetato de (R)-4-hidróxi-7-(1-hidróxi-2-(3-(2-(4-(2metiltiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9il)etóxi)benzilamino)etil)benzo[d]tiazol-2(3H)-ona
HO
OH
a) Metanossulfonato de 2-(3-formilfenóxi)etila [00424] 2-Bromoetanol (10,23 g) e carbonato de potássio (11,32 g)
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113/638 foram adicionados a uma solução de 3-hidroxibenzaldeído (5 g) em acetonitrila (100 mL) e a mistura resultante agitada até o refluxo durante 72 horas. A mistura reacional foi resfriada e dividida entre acetato de etila e hidróxido de sódio aquoso diluído gelado. A camada orgânica foi separada, lavada com salmoura, secada sobre sulfato de sódio, filtrada e o solvente removido em vácuo. O resíduo foi dissolvido em DCM (30 mL) e trietilamina (3,44 mL) foi adicionada. A solução foi resfriada para 0°C e tratada gota a gota com cloreto de metanossulfonila (1,89 mL). A mistura reacional foi agitada a 0°C durante 10 minutos e em seguida deixada aquecer para temperatura ambiente e agitada durante 1 hora. A mistura foi lavada duas vezes com salmoura, secada sobre sulfato de sódio, filtrada e o solvente evaporado em vácuo. A purificação foi por cromatografia de sílica-gel eluindo com 6:4 acetato de etila:iso-hexano. Frações puras foram evaporadas em vácuo para fornecer o composto do subtítulo como um óleo incolor. Produção 3,50 g.
[00425] 1H RMN (400 MHz, CDCh) δ 9,98 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,53-
7,46 (m, 2H), 7,41-7,39 (m, 1H), 7,22-7,19 (m, 1H), 4,62-4,59 (m, 2H), 4,34-4,30 (m, 2H), 3,10 (s, 3H).
b) 3-(2-(4-(2-Metiltiazol-4-carbonil)-1 -oxa-4,9-diazaespiro[5,5] undecan-9-il)etóxi)benzaldeído
[00426] Metanossulfonato de 2-(3-Formilfenóxi)etila (exemplo 10, etapa a) (0,38 g) foi adicionado à solução de trifluoroacetato de (2 metiltiazol-4-il)(1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4-il)metanona (exemplo 4, etapa h) (0,62 g) e trietilamina (0,55 mL) em acetonitrila (5 mL) e a mistura resultante agitada durante 16 horas a 65°C. O solvente foi evaporado em vácuo e o resíduo dividido entre acetato de etila
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114/638 (25 mL) e solução de bicarbonate de sódio saturada (25 mL). A fase aquosa foi separada e extraída com acetato de etila (2 x 25 mL). As fases orgânicas foram combinadas, lavadas com salmoura (25 mL), secadas sobre sulfato de sódio, filtradas e evaporadas em vácuo. A purificação foi por cromatografia de sílica-gel eluindo com 47,5:47:5:5 de gradiente de iso-hexano: acetato de etila:trietilamina para 95:5 de acetato de etila:trietilamina para fornecer o composto do subtítulo como um óleo amarelo. Produção 0,48 g.
[00427] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO) δ Π9.97 (s, 1H), 7,96 (s,1H),
7,56 - 7,40 (m, 3H), 7,32 - 7,25 (m, 1H), 4,14 (s, 2H), 3,75 - 3,47 (m, 6H), 2,80 - 2,62 (m, 5H), 2,55 - 2,37 (m, 4H), 1,74 - 1,40 (m, 4H).
c) Ditrifluoroacetato de (R)-4-hidróxi-7-(1-hidróxi-2-(3-(2-(4-(2metiltiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)etóxi) benzilamino)etil)benzo[d]tiazol-2(3H)-ona
HO
OH [00428] 3-(2-(4-(2-Metiltiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5] undecan-9-il)etóxi)benzaldeído (exemplo 10, etapa b) (0,24 g) foi adicionado a uma mistura de cloridrato de (R)-7-(2-amino-1-hidroxietil)-4hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona (WO2007027134, exemplo 1, etapa d) (0,15 g) e ácido acético (0,032 mL) em metanol (2 mL). A mistura foi agitada durante 30 minutos em seguida resfriada em um banho de gelo. Triacetoxiboroidreto de sódio (0,18 g) foi em seguida adicionado e a mistura agitada durante 2 horas. O solvente foi evaporado em vácuo e o resíduo dividido entre acetato de etila (50 mL) e tampão de fosfato de ph 7,2 (50 mL). A fase aquosa foi separada e extraída com acetato de etila (2 x 50 mL). As fases orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (20 mL), secadas sobre sulfato de sódio, filtradas e
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115/638 evaporadas em vácuo. A purificação foi por HPLC preparativa (Sunfire®, Gradiente: 5-50% de acetonitrila em TFA aquosa a 0,2%). As frações contendo o produto foram combinadas, evaporadas em vácuo e o resíduo triturado com éter e evaporado em vácuo para fornecer o composto do título como um sólido branco. Produção 0,21 g.
[00429] m/z 640 (M+H)+ (APCI) [00430] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO, 90°C) δ 11,27 (s, 1H), 7,92 (s, 1H), 7,37 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 7,19-7,12 (m, 2H), 7,05 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 6,90 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 6,76 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 4,92 (t, J = 6,5 Hz, 1H), 4,45-4,31 (m, 2H), 4,26-4,12 (m, 2H), 3,76-3,53 (m, 8H), 3,45-
3,36 (m, 2H), 3,31-3,20 (m, 2H), 3,06-3,00 (m, 2H), 2,68 (s, 3H), 2,1 1,97 (m, 2H), 1,92-1,80 (m, 2H). Cinco prótons trocáveis não observados.
Exemplo 11
Ditrifluoroacetato de 5-hidróxi-8-(1 -hidróxi-2-(3-((4-(2-metiltiazol-4carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9il)metil)fenetilamino)etil)-2H-benzo[b][1,4]oxazin-3(4H)-ona, Isômero 1
a) 1-(2,4-Di-hidroóxi-3-nitrofenil)etanona
O .O'·
HO OH no2 [00431] 2-Nitrobenzeno-1,3-diol (24,5 g) foi adicionado porção a porção durante 15 minutos a uma solução de cloreto de alumínio agitada vigorosamente (46,3 g) em nitrobenzeno (325 mL). Anidrido acé
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116/638 tico (15,7 mL) foi em seguida adicionado gota a gota a uma mistura durante mais 15 minutos e a mistura em seguida aquecida a 100°C durante 5 horas. A reação foi resfriada para temperatura ambiente e cuidadosamente extinta com ácido clorídrico gelado a 2M (300 mL). A mistura foi extraída com dietil éter (2 x 500 mL) e os extratos de dietil éter combinados em seguida extraídos com hidróxido de sódio aquoso a 2M (2 x 400 mL). Os extratos básicos combinados foram lavados com dietil éter (4 x 500 mL) e em seguida acidificados para pH 1 com ácido clorídrico a 2M (700 mL). O precipitado resultante foi filtrado, lavado com água, e secado sob vácuo a 40°C para fornecer o composto do subtítulo como um sólido marrom amarelado. Produção 29,5 g.
[00432] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO) δ 13,32 (s, 1H), 12,31 (s,
1H), 7,98 (d, J = 9,2 Hz, 1H), 6,63 (d, J = 28,2 Hz, 1H), 2,59 (s, 3H).
b) 1 -(4-(Benzilóxi)-2-hidróxi-3-nitrofenil)etanona
O [00433] Terc-butóxido de lítio (4,06 g) foi adicionado a uma solução agitada de 1-(2,4-di-hidróxi-3-nitrofenil)etanona (exemplo 11, etapa a) (10 g) em DMF (100 mL), sob nitrogênio, embora mantendo a temperatura interna abaixo 30°C. Após agitar durante mais 10 minutos em temperatura ambiente, brometo de benzila (6,03 mL) foi adicionado e a mistura agitada durante mais 20 horas. Mais brometo de benzila (3 mL) foi adicionado e a mistura agitada durante 24 horas. A reação foi extinta com água (300 mL), hidróxido de sódio aquoso a 1M (50 mL) foi adicionado e a mistura foi lavada com dietil éter (2 x 300 mL), filtrando através de celite para auxiliar a separação. A solução básica foi filtrada em gelo/água, acidificada com ácido clorídrico gelado a 2M (200 mL) e o precipitado resultante filtrado, lavado com água e secado para fornecer um sólido marrom-claro. O sólido foi suspenso com eta
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117/638 nol (100 mL) durante 1 hora e o sólido filtrado, lavado com etanol gelado (20 mL), e secado sob vácuo a 40°C para fornecer o composto do subtítulo como um sólido marrom-claro. Produção 6,8 g.
[00434] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO) δ 13,04 (s, 1H), 8,14 (d, J =
9,2 Hz, 1H), 7,45 - 7,32 (m, 5H), 7,01 (d, J = 9,2 Hz, 1H), 5,42 (s, 2H),
2,64 (s, 3H) + 3 prótons trocáveis não observados.
c) 1 -(3-Amino-4-(benzilóxi)-2-hidroxifenil)etanona
O [00435] Pó de zinco (5,5 g) foi adicionado porção a porção a uma suspensão de 1-(4-(benzilóxi)-2-hidróxi-3-nitrofenil)etanona (exemplo 11, etapa b) (5,5 g) em ácido acético (55 mL) durante 15 minutos, embora mantendo a temperatura interna abaixo de 40°C com um banho de gelo. A mistura foi deixada atingir a temperatura ambiente e agitada durante 2 horas. A mistura foi filtrada através de celite (Cuidado: quente - não permite secar), lavada com ácido acético, e o filtrado vertido sobre gelo/água (500 mL). O precipitado resultante foi filtrado, lavado com água, e secado sob vácuo a 40°C para fornecer o composto do subtítulo como um sólido marrom-claro. Produção 4,8 g.
[00436] 1H RMN (300 MHz, D6-DMSO) δ 7,53 (m, 2H), 7,48 - 7,33 (m, 3H), 7,28 (d, J = 9,0 Hz, 1H), 6,72 (d, J = 9,0 Hz, 1H), 5,29 (s, 2H),
2,59 (s, 3H).
d) 8-Acetil-5-(benzilóxi)-2H-benzo[b][1,4]oxazin-3(4H)-ona
O
O [00437] Cloreto de 2-cloroacetila (1,8 mL) foi adicionado gota a gota a uma mistura agitada de 1-(3-amino-4-(benzilóxi)-2
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118/638 hidroxifenil)etanona (exemplo 11, etapa c) (5,2 g) e hidrogênio carbonato de sódio (3,74 g) em DMF (30 mL) e em seguida agitada durante 2 horas. Carbonato de Césio (7,90 g) foi adicionado e a mistura aquecida a 100°C durante 20 horas. A mistura foi resfriada para temperatura ambiente, extinta com água (500 mL), extraída com acetato de etila (2 x 200 mL), lavada com água (3 x 300 mL) e salmoura, secada sobre sulfato de sódio anidroso, filtrada e evaporada sob vácuo. O resíduo sólido foi tratado com dietil éter, filtrado e secado para fornecer o composto do subtítulo como um sólido bege. Produção 5,7 g.
[00438] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO) δ 10,33 (s, 1H), 7,55 (m,
2H), 7,39 (m, 2H), 7,34 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 7,33 (m, 1H), 6,89 (d, J =
9,2 Hz, 1H), 5,27 (s, 2H), 4,67 (s, 2H), 3,32 (s, 3H).
e) 5-(Benzilóxi)-8-(2-cloroacetil)-2H-benzo[b][1,4]oxazin-3(4H)-ona
O
Cl
O [00439] Dicloroiodato de benziltrimetilamônio (14,17 g) foi adicionado a uma solução agitada de 8-acetil-5-(benzilóxi)-2Hbenzo[b][1,4]oxazin-3(4H)-ona (exemplo 11, etapa d) (5,5 g) em uma mistura de diclorometano (100 mL), ácido acético (33 mL) e água (5,5 mL) e a mistura reacional agitada a 65°C durante 20 horas. A reação foi resfriada para temperatura ambiente, tratada com bissulfito de sódio aquoso (5,78 g em 100 mL) e agitada durante mais 30 minutos. A mistura foi diluída com dietil éter (200 mL) e o sólido resultante coletado por filtração, lavado com água e dietil éter, e secado sob vácuo a 40°C para fornecer o composto do subtítulo como um sólido marromclaro. Produção 5,6 g.
[00440] 1H RMN (300 MHz, D6-DMSO) δ 10,41 (s, 1H), 7,55 (m,
2H), 7,44 (d, J = 9,4 Hz, 1H), 7,39 (m, 2H), 7,32 (m, 1H), 6,95 (d, J =
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9,4 Hz, 1H), 5,30 (s, 2H), 4,96 (s, 2H), 4,69 (s, 2H).
f) 8-(2-Azidoacetil)-5-(benzilóxi)-2H-benzo[b][1,4]oxazin-3(4H)-ona
O
O [00441] Azida de sódio (1,176 g) foi adicionada a uma suspensão de 5-(benzilóxi)-8-(2-cloroacetil)-2H-benzo[b][1,4]oxazin-3(4H)-ona (exemplo 11, etapa e) (4,8 g) em DMF (50 mL) e agitada durante 2 horas. A mistura foi vertida sobre gelo/água e o sólido resultante coletado por filtração, lavado com água e secado sob vácuo a 40°C para fornecer o composto do subtítulo como um sólido marrom-claro. Produção
4,6 g.
[00442] 1H RMN (300 MHz, D6-DMSO) δ 10,42 (s, 1H), 7,55 (m,
2H), 7,48 (m, 1H), 7,43 - 7,29 (m, 3H), 6,97 (m, 1H), 5,31 (s, 2H), 4,69 (s, 2H), 4,63 (s, 2H).
g) 8-(2-Azido-1 -hidroxietil)-5-(benzilóxi)-2H-benzo[b][1,4]oxazin3(4H)-ona, isômero 1 [00443] Uma suspensão de 8-(2-azidoacetil)-5-(benzilóxi)-2Hbenzo[b][1,4]oxazin-3(4H)-ona (exemplo 11, etapa f) (2 g) em etanol (80 mL) foi tratada com boroidreto de sódio (0,224 g) e a mistura resultante agitada a 20°C durante 1,5 horas. A mistura foi dividida entre acetato de etila e salmoura, a camada orgânica foi secada sobre sulfato de sódio, filtrada e o solvente evaporado sob pressão reduzida. O sólido bruto foi triturado com acetona (20 mL) para fornecer 1,6 g de produto racêmico.
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Separação de mistura racêmica:
[00444] 8-(2-azido-1-hidroxietil)-5-(benzilóxi)-2Hbenzo[b][1,4]oxazin-3(4H)-ona racêmico (2,5 g) foi dissolvido em metanol a uma concentração de 10 mg/mL e separado por HPLC quiral usando uma coluna ChiralpakDAS (250 x 50 mm ID, 20 gm tamanho da partícula) eluída com etanol. Frações contendo o primeiro isômero de diluição foram combinadas e concentradas em vácuo para fornecer o composto do subtítulo. Produção 0,67 g.
[00445] m/z 339 (M-H)- (APCI)
h) Acetato de 8-(2-amino-1-hidroxietil)-5-hidróxi-2H-benzo[b][1,4] oxazin-3(4H)-ona,
Isômero 1
OH [00446] Uma mistura de 8-(2-azido-1-hidroxietil)-5-(benzilóxi)-2Hbenzo[b][1,4]oxazin-3(4H)-ona, isômero 1 (exemplo 11, etapa g) (0,67 g) em etanol (30 mL) com 10% de catalisador de paládio sobre carbono (0,210 g) foi agitada vigorosamente sob pressão de 4 bar de hidrogênio durante 18 horas. O catalisador foi filtrado e o solvente evaporado sob pressão reduzida. O resíduo foi dissolvido em ácido acético (15 mL) e etanol (15 mL) e a mistura agitada com 10% de catalisador de paládio sobre carbono (0,210 g) sob 4 bar de pressão de hidrogênio durante 18 horas. A mistura foi filtrada e 10% de catalisador de paládio sobre carbono fresco (0,210 g) foram adicionados e a agitação sob 400KPa(4 bar) de pressão de hidrogênio foi continuada durante 18 horas. A mistura foi filtrada e 10% de catalisador de paládio sobre carbono fresco (0,210 g) adicionados e a agitação sob 400KPa(4 bar) de pressão de hidrogênio foi continuada durante 18 horas. A mistura foi
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121/638 filtrada e o solvente removido sob pressão reduzida. O resíduo foi triturado com acetonitrila (30 mL) para fornecer o composto do subtítulo. Produção 0,33 g.
[00447] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO) δ 6,85 (d, 1H), 6,50 (d, 1H),
4,74 - 4,69 (m, 1H), 4,52 - 4,42 (m, 2H), 2,74 - 2,50 (m, 2H), 1,83 (s, 3H). Seis prótons trocáveis não observados.
i) Ditrifluoroacetato de 5-hidróxi-8-(1-hidróxi-2-(3-((4-(2-metiltiazol4-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil) fenetilamino)etil)-2H-benzo[b][1,4]oxazin-3(4H)-ona, isômero 1
[00448] A solução de (9-(3-(2-hidroxietil)benzil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-4-il)(2-metiltiazol-4-il)metanona (exemplo 6, etapa b) (0,198 g) em DCM (7 mL) foi filtrada em um banho de gelo e tratada com ácido trifluoroacético (0,037 mL) seguida por periodinano Dess-Martin (303 mg). A mistura foi agitada a 20°C durante 30 minutos. Mais periodinano Dess-Martin (303 mg) foi adicionado e a agitação continuada durante mais 30 minutos. A mistura foi tratada com solução de tiossulfato de sódio saturada (7 mL) e solução de bicarbonato de sódio saturada (7 mL) e o todo agitado vigorosamente durante 10 minutos. A mistura foi extraída duas vezes com acetato de etila, os orgânicos combinados foram lavados com solução de bicarbonato de sódio saturada, secados sobre sulfato de sódio, filtrados e o solvente evaporado sob pressão reduzida. O resíduo foi dissolvido em metanol (2 mL) e adicionado gota a gota a uma solução de acetato de 8-(2amino-1-hidroxietil)-5-hidróxi-2H-benzo[b][1,4]oxazin-3(4H)-ona, isômero 1 (exemplo 11, etapa h) (110 mg) em metanol (5 mL) que foi resfriado para 0°C e tratado com ácido acético (0,022 mL) seguido por
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HCl (1M em éter, 0,387 mL) e em seguida cianoboroidreto de sódio (37 mg). A mistura reacional foi agitada a 20°C durante 2 horas. A mistura foi evaporada até um volume de 3 mL e dividida entre acetato de etila (30 mL) e tampão de fosfato aquoso (pH = 7,2) (50 mL). A camada aquosa foi acidificada por adição de ácido acético e passada através de um cartucho SCX de 10 g. A coluna foi lavada com água e em seguida estimulada com amônia a 7N em metanol para eluir o produto. O solvente foi evaporado sob pressão reduzida. O produto bruto foi dissolvido em metanol, tratado com ácido acético (0,5 mL) e os solventes removidos sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por HPLC preparativa (Sunfire®, Gradiente: 5-35% de acetonitrila em TFA aquosa a 0,2%). As frações contendo o composto desejado foram evaporadas até a secura para fornecer o composto do título. Produção 0,059 g.
[00449] m/z 622 (M+H)+ (APCI) [00450] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO, 90°C) δ 9,46 (s, 1H), 7,90 (s,
1H), 7,46 - 7,30 (m, 4H), 6,93 - 6,89 (m, 1H), 6,58 - 6,55 (m, 1H), 5,13 5,05 (m, 1H), 4,52 (s, 2H), 4,28 (s, 2H), 3,70 (s, 4H), 3,63 (s, 2H), 3,29 - 2,98 (m, 10H), 2,68 (s, 3H), 2,09 - 1,95 (m, 2H), 1,85 - 1,70 (m, 2H). Cinco prótons trocáveis não observados.
Exemplo 12
Ditrifluoroacetato de (R)-5-(2-(3-((4-(5-etiltiofeno-2-carbonil)-1 -oxa-
4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil)fenetilamino)-1-hidroxietil)-
8-hidroxiquinolin-2(1H)-ona
OH
HO
a) 3-Oxo-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecano-9-carboxilato de tercbutila
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O
[00451] Cloreto de cloroacetila (4,88 mL) foi adicionado gota a gota a uma mistura agitada vigorosamente a 0°C de carbonato de potássio (17,43 g) em água (78 mL) e 4-(aminometil)-4-hidroxipiperidina-1carboxilato de terc-butila (10,4 g) em acetato de etila (92 mL). Após 30 minutos a 0°C a mistura foi extraída com acetato de etila e a camada orgânica secada sobre sulfato de sódio, filtrada e o solvente evaporado sob pressão reduzida. O resíduo foi dissolvido em THF (200 mL) e adicionado gota a gota durante 3 horas a uma solução agitada sob nitrogênio e aquecida ao refluxo de terc-butóxido de potássio (1M em terc-butanol, 75 mL) e THF (250 mL). A mistura foi resfriada para temperatura ambiente e deixada agitar durante 18 horas. Mais do solvente foi removido sob pressão reduzida e o resíduo dividido entre acetato de etila e salmoura, a camada aquosa foi reextraída com acetato de etila e os orgânicos combinados foram secados sobre sulfato de sódio, filtrados e o solvente removido sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por trituração com uma mistura de éter (30 mL) e iso-hexano (20 mL) para fornecer o produto subtítulo. Produção 8,20 g.
[00452] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO) δ 7,95 (s, 1H), 3,97 (s, 2H),
3,72 - 3,62 (m, 2H), 3,10 (d, 2H), 3,05 - 2,93 (m, 2H), 1,77 - 1,69 (m, 2H), 1,53 - 1,43 (m, 2H), 1,40 (s, 9H).
b) 1-Oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecano-9-carboxilato de terc-butila
I o [00453] A solução de 3-Oxo-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecano-9carboxilato de terc-butila (exemplo 12, etapa a) (8,2 g) em THF (100
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124/638 mL) foi tratada gota a gota com complexo de borano-THF (1M em THF, 91 mL) e a mistura resultante aquecida a 55°C durante 2 horas. Complexo de borano-dimetilsulfeto (2M em THF, 15,17 mL) foi adicionado e a mistura resultante aquecida a 55°C durante 2 horas. A mistura foi resfriada para temperatura ambiente e extinta com metanol, em seguida os solventes foram evaporados sob pressão reduzida. O resíduo foi dissolvido em metanol (250 mL) e a solução tratada com W,V2-dimetiletano-1,2-diamina (10 g) e a mistura resultante foi aquecida ao refluxo durante 6 horas. Mais W,V2-dimetiletano-1,2-diamina (3 g) foi adicionado e aquecido ao refluxo continuado durante 6 horas. A mistura foi resfriada para temperatura ambiente e os solventes evaporados sob pressão reduzida, o resíduo foi purificado por cromatografia de sílica rápida eluindo com 1% de trietilamina e 5% de metanol em diclorometano. As frações puras foram evaporadas até a secura para fornecer o composto do subtítulo. Produção 7,40 g.
[00454] 1H RMN (400 MHz, CDCh) δ 3,72 (s, 2H), 3,68 - 3,64 (m,
2H), 3,14 (t, J = 20 Hz, 2H), 2,87 - 2,81 (m, 2H), 2,68 (s, 2H), 1,97 -
1,88 (m, 2H), 1,46 (s, 9H), 1,44 - 1,36 (m, 2H). Um próton trocável não observado.
c) 4-(2,2,2-Trifluoroacetil)-1 -oxa-4,9-diazaespiro[5,5] undecano-9carboxilato de terc-butila
F
F
F [00455] A solução de trifluoroanidrido acético (0,496 mL) dissolvida em DCM (3 mL) foi adicionada gota a gota a uma solução agitada de trietilamina (0,538 mL) e 1-Oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecano-9carboxilato de terc-butila (exemplo 12, etapa b) (0,9 g) em DCM (20 mL) a 0°C, durante um período de 5 minutos sob nitrogênio. A solução
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125/638 resultante foi agitada a 0°C durante 30 minutos. Água (20 mL) foi adicionada e a mistura agitada vigorosamente durante 10 minutos. A camada orgânica foi separada, secada sobre sulfato de sódio, filtrada e o solvente evaporado sob pressão reduzida. O produto bruto foi purificado por cromatografia de sílica rápida eluindo com 40% de acetato de etila em iso-hexano. As frações puras foram evaporadas até a secura para fornecer o composto do subtítulo. Produção 1 g. Usado diretamente sem purificação.
d) Trifluoroacetato de 2,2,2-trifluoro-1-(1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5] undecan-4-il)etanona
HN [00456] Ácido trifluoroacético (15 mL) foi adicionado a uma solução agitada de 4-(2,2,2-trifluoroacetil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecano9-carboxilato de terc-butila (exemplo 12, etapa c) (1 g) em DCM (15 mL) a 20°C. A solução resultante foi agitada a 20°C durante 10 minutos. Tolueno (50 mL) foi adicionado e os solventes foram evaporados sob pressão reduzida para fornecer o composto do subtítulo. Produção
1,4 g.
[00457] m/z 253 (M+H)+ (APCI)
e) 2,2,2-Trifluoro-1 -(9-(3-(2-hidroxietil)benzil)-1 -oxa-4,9-diazaespiro [5,5]undecan-4-il)etanona
HO [00458] A solução de 2-(3-(bromometil)fenil)etanol (exemplo 6, etapa a) (0,223 g) dissolvida em acetonitrila (1 mL) foi adicionada gota a
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126/638 gota a uma solução agitada de trietilamina (0,318 mL) e trifluoroacetato de 2,2,2-trifluoro-1-(1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4-il)etanona (exemplo 12, etapa d) (0,38 g) em acetonitrila (2 mL) a 20°C, durante um período de 2 minutos. A mistura resultante foi agitada a 20°C durante 3 horas. O solvente foi evaporado e o resíduo dividido entre diclorometano e água, a camada aquosa foi reextraída duas vezes com DCM e os orgânicos combinados foram secados sobre sulfato de sódio, filtrado e o solvente evaporado sob pressão reduzida. O produto bruto foi purificado por cromatografia de sílica rápida eluindo com 6% de metanol e 1% de trietilamina em diclorometano. As frações puras foram evaporadas até a secura para fornecer o composto do subtítulo. Produção 0,260 g.
[00459] m/z 387 (M+H)+ (APCI)
f) (R)-5-(1 -(terc-butildimetilsililóxi)-2-(3-((4-(2,2,2-trifluoroacetil)-1 oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil)fenetilamino)etil)-8hidroxiquinolin-2(1 H)-ona
HO [00460] Ácido trifluoroacético(0,052 mL) foi adicionado à solução de
2,2,2-trifluoro-1-(9-(3-(2-hidroxietil)benzil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-4-il)etanona (exemplo 12, etapa e) (0,26 g) em diclorometano (7,0 mL) a 20°C. A mistura foi tratada com periodinano Dess-Martin (0,428 g) e agitada durante 30 minutos a 20°C. A mistura foi tratada com solução de tiossulfato de sódio saturada (7,0 mL) e solução de bicarbonato de sódio saturada (7,0 mL) e a mistura agitada vigorosamente durante 10 minutos. A mistura foi extraída duas
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127/638 vezes com acetato de etila, as fases orgânicas combinadas foram lavadas com solução de bicarbonato de sódio saturada, secadas sobre sulfato de sódio, filtradas e o solvente evaporado sob pressão reduzida. O resíduo foi dissolvido em metanol (7,0 mL), e (R)-5-(2-amino-1(terc-butildimetilsililóxi)etil)-8-hidroxiquinolin-2(1H)-ona (WO2004106333) (0,225 g) e ácido acético (0,039 mL) foram adicionados a uma mistura resfriada a 0°C. Triacetoxiboroidreto de sódio (0,214 g) foi adicionado e a mistura resultante foi agitada a 20°C durante 90 minutos. A maior parte do metanol foi evaporada e o restante dividido entre acetato de etila e tampão de fosfato aquoso (pH = 7,2), a camada orgânica foi secada sobre sulfato de sódio, filtrada e o solvente evaporado sob pressão reduzida. O produto bruto foi purificado por cromatografia de sílica rápida eluindo com amônia aquosa concentrada a 1% e 10% de metanol em diclorometano. As frações puras foram evaporadas até a secura para fornecer o composto do subtítulo. Produção 0,144 g.
[00461] m/z 703 (M+H)+ (APCI)
g) 2-Hidróxi-2-(8-hidróxi-2-oxo-1,2-di-hidroquinolin-5-il)etil(3-((4(2,2,2-trifluoroacetil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9il)metil)fenetil)carbamato de (R)-terc-butila
HO [00462] Uma solução de tri-hidrofluoreto de trietilamina (0,044 mL) dissolvida em metanol (1 mL) foi adicionada a uma solução agitada de (R)-5-(1-(terc-butildimetilsililóxi)-2-(3-((4-(2,2,2-trifluoroacetil)-1-oxa-
4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil)fenetilamino)etil)-8
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128/638 hidroxiquinolin-2(1H)-ona (exemplo 12, etapa f) (0,140 g), em THF (4 mL) a 20°C. A solução resultante foi agitada a 20°C durante 18 horas. A mistura reacional foi tratada com trietilamina (0,111 mL) seguida por uma solução de dicarbonato de di-terc-butila (0,048 mL) em metanol (1 mL). A mistura foi agitada a 20°C durante 3 horas e os solventes em seguida evaporados sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia de sílica rápida eluindo com amônia aquosa 880 a 1% e 10% de metanol em diclorometano. As frações puras foram evaporadas até a secura para fornecer o composto do subtítulo. Produção 0,100 g.
[00463] m/z 689 (M+H)+ (APCI)
h) 3-(1-Oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-ilmetil)fenetil(2-hidróxi-
2-(8-hidróxi-2-oxo-1,2-di-hidroquinolin-5-il)etil)carbamato de (R)terc-butila
HO
O [00464] Uma solução de 2-hidróxi-2-(8-hidróxi-2-oxo-1,2-dihidroquinolin-5-il)etil(3-((4-(2,2,2-trifluoroacetil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5] undecan-9-il)metil)fenetil)carbamato de (R)-terc-butila (exemplo 12, etapa g) (0,100 g) em metanol (5,0 mL) foi tratada com uma solução de carbonato de potássio (0,035 g) em água (5,0 mL) e a mistura resultante agitada a 20°C durante 5 horas. O metanol foi evaporado sob uma corrente de nitrogênio e mais água (5,0 mL) foi adicionada. A solução foi acidificada por adição de ácido acético e em seguida passada através de um cartucho de 10 g de C18 sílica. O cartucho foi lavado com água e em seguida estimulado com metanol para fornecer o produto. O solvente foi evaporado sob pressão reduzida pa
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129/638 ra produção de 0,090 g do sal de ácido acético. Este sólido foi dissolvido em metanol (2 mL) e passado através de 0,700 g de resina VARIAN Bond Elut NH2 e o solvente foi evaporado sob pressão reduzida para fornecer o composto do subtítulo. Produção 0,074 g.
[00465] m/z 593 (M+H)+ (APCI)
i) Ditrifluoroacetato de (R)-5-(2-(3-((4-(5-etiltiofeno-2-carbonil)-1oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil)fenetilamino)-1hidroxietil)-8-hidroxiquinolin-2(1H)-ona
[00466] Uma solução de 3-(1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9ilmetil)fenetil(2-hidróxi-2-(8-hidróxi-2-oxo-1,2-di-hidroquinolin-5il)etil)carbamato de (R)-terc-butila (exemplo 12, etapa h) (0,068 g) em DMF (2,0 mL) foi tratada com trietilamina (0,048 mL) seguida por ácido
5-etiltiofeno-2-carboxílico (0,018 g) e em seguida HATU (0,057 g). A mistura foi agitada a 20°C durante 2 horas. Amônia aquosa 880 (4 gotas) foi adicionada e a agitação continuada durante 1 hora. A mistura foi dividida entre acetato de etila e salmoura, a camada orgânica foi lavada com salmoura, secada sobre sulfato de sódio, filtrada, e o solvente evaporado sob pressão reduzida. O resíduo foi dissolvido em diclorometano (1 mL) e a solução tratada com ácido trifluoroacético (1 mL). A solução foi deixada descansar a 20°C durante 10 minutos, tolueno (20 mL) foi adicionado e os solventes foram evaporados sob pressão reduzida, O resíduo foi azeotropado duas vezes com acetonitrila. O produto bruto foi purificado por HPLC preparativa (Sunfire®, Gradiente: 10-40% de acetonitrila em TFA aquosa a 0,2%). As frações contendo o composto desejado foram evaporadas até a secura para fornecer o composto do título. Produção 0,039 g.
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130/638 [00467] m/z 631 (M+H)+ (APCI) [00468] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO, 90°C) δ 8,18 (d, J = 10,0 Hz,
1H), 7,46 - 7,33 (m, 4H), 7,23 (d, 1H), 7,14 (d, 1H), 7,00 (d, 1H), 6,84 (d, 1H), 6,55 (d, 1H), 5,39 - 5,33 (m, 1H), 4,29 (s, 2H), 3,74 - 3,63 (m, 4H), 3,54 (s, 2H), 3,29 (t, 2H), 3,21 - 3,00 (m, 8H), 2,83 (q, 2H), 2,10 -
1,96 (m, 2H), 1,84 - 1,69 (m, 2H), 1,26 (td, 3H). Seis prótons trocáveis não observados.
Exemplo 13
Ditrifluoroacetato de 5-hjdróxj-8-(1 -hidróxi-2-(3-((4-(2-metiltiazol-4carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil) fenetilamino)etil)-2H-benzo[b][1,4]oxazin-3(4H)-ona, isômero 2
OH
HO
a) 8-(2-Azido-1 -hidroxietil)-5-(benzilóxi)-2H-benzo[b][1,4]oxazin-
3(4H)-ona, isômero 2 [00469] Isômero 2 foi obtido com o segundo isômero de eluição da separação de HPLC quiral detalhada no exemplo 11, etapa g. As frações contendo o segundo isômero de eluição foram combinadas e concentradas em vácuo para fornecer o composto do subtítulo. Produção 0,72 g.
[00470] m/z 339 (M-H)- (APCI)
b) Acetato de (S)-8-(2-amino-1-hidroxietil)-5-hidróxi-2H-benzo[b] [1,4]oxazin-3(4H)-ona, isômero 2
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[00471] Uma solução de 8-(2-azido-1-hidroxietil)-5-(benzilóxi)-2Hbenzo[b][1,4]oxazin-3(4H)-ona, isômero 2 (exemplo 13, etapa a) (0,72 g) em uma mistura de ácido acético (10 mL) e etanol (10 mL) foi agitada vigorosamente com 10% de catalisador de paládio sobre carbono (0,225 g) sob 400KPa(4 bar) de pressão de hidrogênio durante 18 horas. A mistura foi filtrada e 10% de catalisador de paládio sobre carbono fresco (0,225 g) adicionado e a agitação sob 400KPa(4 bar) de pressão de hidrogênio foi continuada durante 18 horas. A mistura foi filtrada e 10% de catalisador de paládio sobre carbono fresco (0,225 g) adicionado e a agitação sob 4 bar de pressão de hidrogênio foi continuada durante 18 horas. A mistura foi filtrada e o solvente removido sob pressão reduzida. O resíduo foi triturado com acetonitrila (30 mL) para fornecer o composto do subtítulo. Produção 0,28 g.
[00472] m/z 222 (M-H)- (APCI)
c) Ditrifluoroacetato de 5-hidróxi-8-(1-hidróxi-2-(3-((4-(2-metiltiazol -4-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil) fenetilamino)etil)-2H-benzo[b][1,4]oxazin-3(4H)-ona, isômero 2
[00473] Uma solução de (9-(3-(2-hidroxietil)benzil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-4-il)(2-metiltiazol-4-il)metanona (exemplo 6, etapa b) (0,163 g) em DCM (7,0 mL) foi filtrada em um banho de gelo e tratada com ácido trifluoroacético (0,030 mL) seguido por periodinano Dess-Martin (0,246 g). A mistura foi agitada a 20°C durante 30 minuPetição 870190058499, de 25/06/2019, pág. 137/650
132/638 tos, tratada com mais periodinano Dess-Martin (0,246 g), e agitada durante mais 30 minutos a 20°C. A mistura foi tratada com solução de tiossulfato de sódio saturada (7,0 mL) e solução de bicarbonato de sódio saturada (7,0 mL) e agitada vigorosamente durante 10 minutos. A mistura foi extraída duas vezes com acetato de etila, os orgânicos combinados foram lavados com solução de bicarbonato de sódio saturada, secados sobre sulfato de sódio, filtrados e o solvente evaporado sob pressão reduzida. O resíduo foi dissolvido em metanol (2,0 mL) e adicionado gota a gota a uma solução de acetato de 8-(2-amino-1hidroxietil)-5-hidróxi-2H-benzo[b][1,4]oxazin-3(4H)-ona, isômero 2 (exemplo 13, etapa b) (0,090 g) em metanol (5,0 mL) que foi resfriado para 0°C e tratado com ácido acético (0,018 mL) seguido por HCl (1M em éter, 0,32 mL) e em seguida cianoboroidreto de sódio (0,030 g). A mistura foi agitada a 20°C durante 2 horas. A mistura foi evaporada até um volume de 3 mL e dividida entre acetato de etila (30 mL) e tampão de fosfato aquoso (pH = 7,2) (50 mL). A camada aquosa foi acidificada por adição de ácido acético e passada através de um cartucho SCX de 10 g. A coluna foi lavada com água e em seguida estimulada com amônia a 7N em metanol para eluir o produto. O solvente foi evaporado sob pressão reduzida. O produto bruto foi dissolvido em metanol, tratado com ácido acético (0,5 mL) e os solventes removidos sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por HPLC preparativa (Sunfire®, Gradiente: 5-35% de acetonitrila em TFA aquosa a 0,2%). As frações contendo o produto desejado foram evaporadas até a secura para fornecer o composto do título. Produção 0,053 g.
[00474] m/z 622 (M+H)+ (APCI) [00475] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO, 90°C) δ 9,45 (s, 1H), 7,90 (d,
J = 4,6 Hz, 1H), 7,45 - 7,31 (m, 4H), 6,95 - 6,88 (m, 1H), 6,60 - 6,54 (m, 1H), 5,14 - 5,07 (m, 1H), 4,54 (s, 2H), 4,30 (s, 2H), 3,70 (s, 4H),
3,64 (s, 2H), 3,28 - 2,98 (m, 10H), 2,68 (s, 3H), 2,08 - 1,97 (m, 2H),
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1,88 - 1,71 (m, 2H). Cinco prótons trocáveis não observados.
Exemplo 14
Ditrifluoroacetato de (R)-8-hidróxi-5-(1 -hidróxi-2-(2-(5-((4-(2metiltiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il) metil)tiofen-2-il)etilamino)etil)quinolin-2(1H)-ona
HO
O
a) 5-(2-(terc-butildimetilsililóxi)etil)tiofeno-2-carbaldeído [00476] terc-butildimetilsililcloreto (2,82 g) foi adicionado porção a porção a uma solução agitada de 2-(tiofen-2-il)etanol (2 g) e imidazol (1,275 g) em DMF (20 mL) a 20°C durante um período de 20 minutos. A mistura foi agitada a 20°C durante 18 horas e em seguida dividida entre acetato de etila e água, a camada orgânica foi lavada com água, secada sobre sulfato de sódio, filtrada e o solvente evaporado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia de sílica rápida, gradiente de eluição 1-4% de acetato de etila em iso-hexano. O resíduo (2,7 g) foi dissolvido em THF (50 mL) e a solução resfriada para -78°C, n-butil lítio (2,5M em hexanos, 5,06 mL) foi adicionado gota a gota durante 10 minutos e a mistura resultante agitada a 0°C durante 1 hora. A mistura reacional foi resfriada para -78°C e DMF (5,7 mL) foi adicionado gota a gota durante 5 minutos. A mistura foi agitada a 20°C durante 3 horas. A mistura reacional foi dividida entre água e acetato de etila, a camada orgânica foi lavada com água, secada sobre sulfato de sódio e o solvente removido sob pressão reduzida. O produto bruto foi purificado por cromatografia de sílica rápida, eluindo com 7% de
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134/638 acetato de etila em iso-hexano. As frações puras foram evaporadas até a secura para fornecer o composto do subtítulo. Produção 2,3 g.
[00477] 1H RMN (400 MHz, CDCh) δ 9,83 (s, 1H), 7,61 (d, 1H), 6,96 (d, 1H), 3,86 (t, 2H), 3,07 (t, 2H), 0,88 (s, 9H), 0,02 (s, 6H).
b) (9-((5-(2-(terc-butildimetilsililóxi)etil)tiofen-2-il)metil)-1-oxa-4,9- diazaespiro[5,5]undecan-4-il)(2-metiltiazol-4-il)metanona [00478] Uma solução de trifluoroacetato de (2-Metiltiazol-4-il)(1-oxa-
4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4-il)metanona (exemplo 4, etapa h) (0,25 g) e 5-(2-(terc-butildimetilsililóxi)etil)tiofeno-2-carbaldeído (exemplo 14, etapa a) (0,171 g) em NMP (5 mL) com ácido acético (0,036 mL) foi tratada com triacetoxiboroidreto de sódio (0,201 g) e a mistura resultante agitada a 20°C durante 18 horas. A mistura foi dividida entre acetato de etila e solução de bicarbonato de sódio saturada, a camada orgânica foi lavada com salmoura, secada sobre sulfato de sódio, filtrada e o solvente evaporado sob pressão reduzida para fornecer o composto do subtítulo. Produção 0,3 g.
[00479] m/z 536 (M+H)+ (APCI)
c) (9-((5-(2-Hidroxietil)tiofen-2-il)metil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5] undecan-4-il)(2-metiltiazol-4-il)metanona
HO [00480] Uma solução de (9-((5-(2-(terc-butildimetilsililóxi)etil)tiofen-
2-il)metil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4-il)(2-metiltiazol-4il)metanona (exemplo 14, etapa b) (0,3 g) em THF (5 mL) foi tratada gota a gota com uma solução de fluoreto de tetrabutilamônio(1M em THF, 0,672 mL). A mistura foi deixada descansar a 20°C durante 30
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135/638 minutos. Os solventes foram evaporados usando uma corrente de nitrogênio e o resíduo foi purificado por cromatografia de sílica rápida, gradiente de eluição 1% de trietilamina e 2,5% de metanol em diclorometano. As frações puras foram evaporadas até a secura para fornecer o composto do subtítulo. Produção 0,187 g.
[00481] m/z 422 (M+H)+ (APCI)
d) (R)-5-(1-(terc-butildimetilsililóxi)-2-(2-(5-((4-(2-metiltiazol-4- carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil)tiofen-2il)etilamino)etil)-8-hidroxiquinolin-2(1H)-ona
HO
O [00482] Uma solução de (9-((5-(2-hidroxietil)tiofen-2-il)metil)-1-oxa-
4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4-il)(2-metiltiazol-4-il)metanona (exemplo 14, etapa c) (0,18 g) em diclorometano (10 mL) a 20°C foi tratada com ácido trifluoroacético (0,033 mL) seguido por periodinano Dess-Martin (0,254 g) e a mistura agitada a 20°C durante 90 minutos. A mistura foi em seguida tratada com solução de tiossulfato de sódio saturada (10 mL) e solução de bicarbonato de sódio saturada (10 mL) e agitada vigorosamente durante 10 minutos. A mistura foi extraída duas vezes com acetato de etila, os orgânicos combinados foram lavados com solução de bicarbonato de sódio saturada, secados sobre sulfato de sódio, filtrados e o solvente evaporado sob pressão reduzida. O resíduo foi dissolvido em metanol (2 mL) e adicionado a uma solução de (R)-5(2-amino-1-(terc-butildimetilsililóxi)etil)-8-hidroxiquinolin-2(1H)-ona (WO2004106333) (0,143 g) e ácido acético (0,024 mL) em metanol (7 mL). A mistura foi resfriada em um banho de gelo e triacetoxiboroidreto de sódio (0,136 g) foi adicionado. O banho de gelo foi removido e a
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136/638 mistura agitada em temperatura ambiente durante 1 hora. A maior parte do metanol foi evaporada e o resíduo dividido entre acetato de etila e solução de bicarbonato de sódio saturada, a camada orgânica foi secada sobre sulfato de sódio, filtrada e o solvente evaporado sob pressão reduzida. O produto bruto foi purificado por cromatografia de sílica rápida eluindo com 9% de metanol e amônia aquosa ‘880’ a 1% em diclorometano. As frações puras foram evaporadas até a secura para fornecer o composto do subtítulo. Produção 0,078 g.
[00483] m/z 738 (M+H)+ (APCI)
e) Ditrifluoroacetato de (R)-8-hidróxi-5-(1-hidróxi-2-(2-(5-((4-(2metiltiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9il)metil)tiofen-2-il)etilamino)etil)quinolin-2(1H)-ona
[00484] Uma solução de (R)-5-(1-(terc-butildimetilsililóxi)-2-(2-(5-((4(2-metiltiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9il)metil)tiofen-2-il)etilamino)etil)-8-hidroxiquinolin-2(1H)-ona (exemplo
14, etapa d) (0,078 g) em uma mistura de THF (4 mL) e metanol (1 mL) foi tratada com tri-hidrofluoreto de trietilamina (0,022 mL) e a mistura deixada descansar a 20°C durante 18 horas. Os solventes foram evaporados sob pressão reduzida e o resíduo azeotropado com tolueno. O produto bruto foi purificado por HPLC preparativa (Sunfire®, Gradiente: 10-30% de acetonitrila em TFA aquosa a 0,2%). As frações contendo o produto desejado foram evaporadas até a secura para fornecer o composto do título. Produção 0,021 g.
[00485] m/z 624 (M+H)+ (APCI) [00486] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO) δ 10,50 (s, 2H), 10,15 - 9,84 (m, 1H), 8,91 (s, 1H), 8,80 (s, 1H), 8,16 (d, J = 10,0 Hz, 1H), 8,00 (s,
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1H), 7,26 - 7,12 (m, 2H), 7,02 - 6,94 (m, 2H), 6,58 (d, J = 9,7 Hz, 1H),
6,21 (s, 1H), 5,36 - 5,31 (m, 1H), 4,53 (s, 2H), 3,83 - 3,48 (m, 6H), 3,33 - 2,93 (m, 10H), 2,68 (s, 3H), 2,16 - 2,04 (m, 2H), 1,79 - 1,59 (m, 2H).
Exemplo 15 trifluoroacetato de (R)-4-Hidróxi-7-(1-hidróxi-2-(3-((4-(5- metiltiofeno-2-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil) fenetilamino)etil)benzo[d]tiazol-2(3H)-ona
HO.
OH [00487] Cloreto de hidrogênio (2M em dietil éter, 0,504 mL) foi adicionado a uma solução agitada de acetato de (R)-7-(2-amino-1hidroxietil)-4-hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona (exemplo 1, etapa d) (0,222 g) e 2-(3-((4-(5-metiltiofeno-2-carbonil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil)fenil)acetaldeído (exemplo 9, etapa d) (0,320 g) em metanol (10 mL). Após 5 minutos, cianoboroidreto de sódio (0,100 g) foi adicionado e a mistura reacional agitada durante a noite. A solução foi concentrada para 3 mL e dividida entre tampão de pH 7,2 (80 mL) e acetato de etila. Solução de bicarbonato de sódio saturada foi adicionada à camada aquosa que foi em seguida extraída com acetato de etila. As soluções de acetato de etila foram combinadas, secadas sobre sulfato de sódio, filtradas e evaporadas até secura. A purificação foi por HPLC preparativa (Sunfire®, Gradiente: 25-65% de acetonitrila em TFA aquosa a 0,2%). As frações contendo o produto foram combinadas e evaporadas até a secura em vácuo. Acetonitrila foi adicionada, a solução foi evaporada em vácuo, e este processo foi repetido. Dietil éter foi adicionado e a goma triturada para fornecer o
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138/638 composto do título como um sólido. Produção 0,017 g.
[00488] m/z 623 (M+H)+ (APCI) [00489] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO) δ 11,67 (s, 1H), 10,25 (s,
1H), 9,73 - 9,63 (m, 1H), 8,99 - 8,89 (m, 1H), 8,85 - 8,76 (m, 1H), 7,46 -
7,32 (m, 3H), 7,30 - 7,20 (m, 1H), 6,93 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 6,86 -6,81 (m, 1H), 6,77 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 6,53 - 6,45 (m, 1H), 4,93 - 4,86 (m,
1H), 4,45 - 4,39 (m, 0,4H), 4,35 - 4,28 (m, 1,6H), 3,74 - 3,60 (m,4H),
3,49 (s, 2H), 3,27 - 3,14 (m, 4H), 3,13 - 2,89 (m, 6H), 2,46 (s, 3H),2,12
- 2,03 (m, 2H), 1,70 - 1,59 (m, 2H). Um próton trocável não observado.
Exemplo 16
Ditrifluoroacetato de (R)-4-hidróxi-7-(1-hidróxi-2-(4-((4-(2- metiltiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil) fenetilamino)etil)benzo[d]tiazol-2(3H)-ona
HO
OH
a) 2-(4-(Bromometil)fenil)etanol
Br [00490] Complexo de borano-dimeltilsulfeto (2M em THF, 4,37 mL) foi adicionado gota a gota a uma solução de ácido 2-(4(bromometil)fenil)acético (1,0 g) em THF (20 mL) a 20°C e a mistura agitada durante 1 hora. Metanol foi adicionado gota a gota até o borbulhamento cessar e o solvente evaporado em vácuo. A purificação foi por cromatografia de sílica-gel eluindo com 30% de acetato de etila em iso-hexano. As frações contendo o produto foram combinadas e evaporadas em vácuo para fornecer o composto do subtítulo como um sólido cristalino branco. Produção 0,86 g.
[00491] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO) δ 7,36 - 7,32 (m, 2H), 7,20
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139/638 (d, J = 8,2 Hz, 2H), 4,68 (s, 2H), 4,64 (t, J = 5,1 Hz, 1H), 3,64 - 3,55 (m, 2H), 2,75 - 2,67 (m, 2H).
b) (9-(4-(2-Hidroxietil)benzil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4il)(2-metiltiazol-4-il)metanona
HO [00492] A uma solução de trifluoroacetato de (2-Metiltiazol-4-il)(1oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4-il)metanona (exemplo 4, etapa h) (0,791 g) e trietilamina (0,697 mL) em acetonitrila (10 mL) foi adicionado 2-(4-(bromometil)fenil)etanol (exemplo 16 , etapa a) e a mistura resultante agitada durante a noite. O solvente foi evaporado em vácuo. O resíduo foi dividido entre acetato de etila (25 mL) e solução de bicarbonato de sódio saturada (25 mL). A fase aquosa foi separada e extraída com acetato de etila (2 x 25 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (25 mL), secadas sobre sulfato de sódio, filtradas e evaporadas em vácuo para fornecer o composto do subtítulo como um óleo amarelo. Produção 0,76 g.
[00493] m/z 416 (M+H)+ (APCI)
c) 2-(4-((4-(2-Metiltiazol-4-carbonil)-1 -oxa-4,9-diazaespiro[5,5] undecan-9-il)metil)fenil)acetaldeído [00494] TFA (0,030 mL) foi adicionado à solução de (9-(4-(2hidroxietil)benzil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4-il)(2-metiltiazol-
4-il)metanona (exemplo 16, etapa b) (0,16 g) em DCM (5 mL) a 0°C e a mistura resultante agitada durante 5 minutos. Periodinano DessMartin (0,245 g) foi adicionado e a mistura deixada aquecer para temperatura ambiente e agitada durante 45 minutos. Uma mistura de solução de tiossulfato de sódio saturada (5 mL), solução de bicabornato de
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140/638 sódio saturada (5 mL) e acetato de etila (20 mL) foi em seguida adicionadas e a mistura resultante agitada durante 10 minutos. A fase aquosa foi separada e extraída com acetato de etila (20 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura. AcOH (0,1 mL) foi em seguida adicionado e a mistura secada sobre sulfato de sódio, filtrada e evaporada em vácuo para fornecer o composto do subtítulo como um óleo claro que foi usado imediatamente. Produção 0,16 g.
d) Ditrifluoroacetato de (R)-4-hidróxi-7-(1-hidróxi-2-(4-((4-(2- metiltiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il) metil)fenetilamino)etil)benzo[d]tiazol-2(3H)-ona
HO
OH [00495] Uma solução de 2-(4-((4-(2-metiltiazol-4-carbonil)-1-oxa-
4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil)fenil)acetaldeído (exemplo 16, etapa c) (0,08 g) em metanol (2 mL) foi adicionada a uma mistura de cloridrato de (R)-7-(2-amino-1-hidroxietil)-4-hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)ona (WO2007027134, exemplo 1, etapa d) (0,076 g) e ácido acético (0,017 mL) em metanol (0,5 mL). A mistura resultante foi agitada durante 5 minutos em seguida resfriada para 0°C. Cianoboroidreto de sódio (0,012 g) foi em seguida adicionado e a mistura deixada aquecer para temperatura ambiente e agitada durante 2 horas. A mistura reacional foi aplicada um cartucho C18 (Varian 10 g). O cartucho foi lavado com água (50 mL) e eluído com metanol (50 mL). A purificação foi por HPLC preparativa (Sunfire®, Gradiente: 5-50% de acetonitrila em TFA aquosa a 0,2%). As frações contendo o produto foram combinadas, evaporadas em vácuo e o resíduo triturado com éter para fornecer o composto do título como um sólido branco. Produção 0,66 g.
[00496] m/z 624 (M+H)+ (APCI)
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141/638 [00497] 1H RMN (300 MHz, D6-DMSO, 90°C) δ 11,28 (s, 1H), 7,90 (s, 1H), 7,48 (d, J = 7,1 Hz, 2H), 7,34 (d, J = 7,3 Hz, 2H), 6,94 (d, J =
8,1 Hz, 1H), 6,78 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 4,99 - 4,88 (m, 1H), 4,31 (s, 2H),
3,76 - 3,55 (m, 6H), 3,32 - 2,91 (m, 10H), 2,67 (s, 3H), 2,10 - 1,67 (m, 4H). Cinco prótons trocáveis não observados.
Exemplo 17
Ditrifluoroacetato de (R)-8-hidróxi-5-(1-hidróxi-2-(4-((4-(2- metiltiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil) fenetilamino)etil)quinolin-2(1H)-ona
HO
OH [00498] Uma solução de 2-(4-((4-(2-metiltiazol-4-carbonil)-1-oxa-
4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil)fenil)acetaldeído (exemplo 16, etapa c) (0,08 g) em metanol (2 mL) foi adicionada a uma mistura de (R)-5-(2-amino-1-(terc-butildimetilsililóxi)etil)-8-hidroxiquinolin-2(1H)ona (WO02004106333) (0,097 g) e ácido acético (0,017 mL) em metanol (0,5 mL). A mistura resultante foi agitada durante 5 minutos em seguida resfriada para 0°C. Cianoboroidreto de sódio (0,018 g) foi em seguida adicionado e a mistura deixada aquecer para temperatura ambiente e agitada durante 2 horas. A mistura reacional foi aplicada um cartucho C18 (Varian 10 g). O cartucho foi lavado com água (50 mL) e eluído com metanol (50 mL). As frações foram combinadas, evaporadas e purificadas por cromatografia de sílica-gel eluindo com 95:5:0,5 a 89:10:1 de DCM:metanol:solução de amônia ’880’. O resíduo foi dissolvido em THF (2 mL), tri-hidrofluoreto de trietilamina (0,047 mL) foi adicionado e a mistura agitada durante a noite. A purificação foi por HPLC preparativa (Sunfire®, Gradiente: 5-50% de acetonitrila em TFA aquosa a 0,2%). As frações contendo o produto foram
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142/638 combinadas, evaporadas em vácuo e o resíduo triturado com éter para fornecer os compostos títulos como um sólido branco. Produção 0,07g. [00499] m/z 618 (M+H)+ (APCI) [00500] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO, 90°C) δ 8,18 (d, J = 9,7 Hz,
1H), 7,90 (s, 1H), 7,48 (d, J = 7,7 Hz, 2H), 7,34 (d, J = 7,9 Hz, 2H),
7,14 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,00 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 6,54 (d, J = 10,0 Hz,
1H), 5,36 (dd, J = 8,6, 4,0 Hz, 1H), 4,31 (s, 2H), 3,75 - 3,58 (m, 6H),
3,33 - 2,97 (m, 10H), 2,67 (s, 3H), 2,11 - 1,67 (m, 4H). Seis prótons trocáveis não observados.
Exemplo 18
Ditrifluoroacetato de (R)-7-(2-(2,5-dimetil-4-(2-(4-(2-metiltiazol-4carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)etóxi) benzilamino)-1-hidroxietil)-4-hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona
HO
OH
a) Ácido 4-hidróxi-2,5-dimetilbenzoico
HO
OH [00501] Solução de tribrometo de boro (1M em DCM, 7,21 mL) foi adicionada gota a gota a suspensão de ácido 4-metóxi-2,5dimetilbenzoico (1 g) em DCM (5 mL) a -78°C. A reação foi deixada aquecer para TA e agitada durante a noite. A reação foi resfriada para -78°C, e a solução de tribrometo de boro (1M em DCM, 7,21 mL) foi adicionada. A reação foi deixada aquecer para TA e agitada durante a noite. A reação foi cautelosamente vertida sobre gelo (~50 mL). A solução aquosa resultante foi extraída com DCM (5 x 50 mL). As solu
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143/638 ções orgânicas foram combinadas, lavadas com salmoura (50 mL), secadas sobre sulfato de magnésio, filtradas e evaporadas para fornecer o composto do subtítulo como um sólido castanho. Produção 0,75g.
[00502] 1H RMN (300 MHz, D6-DMSO) δ 12,19 (s, 1H), 9,91 (s, 1H),
7,64 (s, 1H), 6,65 (s, 1H), 2,43 (s, 3H), 2,09 (s, 3H).
b) 4-Hidróxi-2,5-dimetilbenzoato de metila
O I
OH [00503] cloreto de acetila (0,107 mL) foi adicionado gota a gota a uma solução de ácido 4-hidróxi-2,5-dimetilbenzoico (exemplo 18, etapa a) (0,249 g) em metanol (15 mL) e a mistura resultante agitada à temperatura ambiente durante 72 horas. Cloreto de acetila (0,107 mL) foi em seguida adicionado e a reação aquecida para 50°C e agitada a esta temperatura durante a noite. A reação foi concentrada e o resíduo purificado por cromatografia de sílica-gel eluindo com 1:1 de gradiente de iso-hexano:acetato de etila a 100% de acetato de etila. As frações contendo o produto foram combinadas e evaporadas em vácuo para fornecer o composto do subtítulo como um sólido branco. Produção 0,25 g.
[00504] 1H RMN (300 MHz, D6-DMSO) δ 10,04 (s, 1H), 7,64 (s, 1H),
6,67 (s, 1H), 3,74 (s, 3H), 2,42 (s, 3H), 2,09 (s, 3H).
c) 4-(2,2-Dietoxietóxi)-2,5-dimetilbenzoato de metila
O I [00505] 2-Bromo-1,1-dietoxietano (0,31 mL) foi adicionado a uma mistura de 4-hidróxi-2,5-dimetilbenzoato de metila (exemplo 18, etapa
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b) (0,25 g) e carbonato de césio (0,68 g) em DMF (20 mL). A mistura resultante foi agitada a 85°C durante 16 horas. A reação foi dividida entre água (200 mL) e acetato de etila (100 mL). A fase aquosa foi separada e extraída com acetato de etila (2 x 100 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água (2 x 100 mL) e salmoura (100 mL), secadas sobre sulfato de magnésio, filtradas e evaporadas. O resíduo foi purificado por cromatografia de sílica-gel eluindo com iso-hexano para 10:1 de gradiente de iso-hexano:acetato de etila. As frações contendo o produto foram combinadas e evaporadas em vácuo para fornecer o composto do subtítulo como um óleo claro. Produção 0,26 g.
[00506] 1H RMN (300 MHz, CDCh) δ 7,75 (s, 1H), 6,64 (s, 1H), 4,86 (t, J = 5,2 Hz, 1H), 4,04 (d, J = 5,4 Hz, 2H), 3,88 - 3,58 (m, 7H), 2,58 (s, 3H), 2,20 (s, 3H), 1,25 (t, J = 7,0 Hz, 6H).
d) (4-(2,2-Dietoxietóxi)-2,5-dimetilfenil)metanol
HO [00507] Solução de hidreto de alumínio de lítio (1M em THF, 1,17 mL) foi adicionada gota a gota a uma solução de 4-(2,2-dietoxietóxi)2,5-dimetilbenzoato de metila (exemplo 18, etapa c) (0,231 g) em THF (20 mL) a 0°C. A mistura resultante foi deixada aquecer para TA e agitada durante 1 hora. Etanol (0,5 mL) foi cautelosamente adicionado e a reação concentrada. O resíduo foi dividido entre NaOH a 1M (50 mL) e acetato de etila (100 mL). A aquosa foi separada e extraída com acetato de etila (2 x 50 mL). Os orgânicos combinados foram lavados com salmoura (50 mL), secados sobre sulfato de magnésio, filtrados e evaporados para fornecer o composto do subtítulo como um óleo claro. Produção 0,20 g.
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145/638 [00508] 1H RMN (300 MHz, CDCI3) δ 7,08 (s, 1H), 6,66 (s, 1H),
4,85 (t, J = 5,3 Hz, 1H), 4,60 (s, 2H), 4,00 (d, J = 5,2 Hz, 2H), 3,84 3,58 (m, 4H), 2,33 (s, 3H), 2,20 (s, 3H), 1,25 (t, J = 7,0 Hz, 6H). Um próton trocável não observado.
e) (9-(2-(4-(Hidroximetil)-2,5-dimetilfenóxi)etil)-1 -oxa-4,9- diazaespiro[5,5]undecan-4-il)(2-metiltiazol-4-il)metanona
HO [00509] Uma solução de (4-(2,2-dietoxietóxi)-2,5dimetilfenil)metanol (exemplo 18, etapa d) (0,2 g) em uma mistura de ácido acético (5 mL) e água (5 mL) foi aquecida a 65°C durante 1 hora e deixada resfriar para TA. A mistura reacional foi vertida em solução de bicarbonato de sódio saturada (50 mL) e extraída com acetato de etila (3 x 25 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (25 mL), secadas sobre sulfato de sódio, filtradas e evaporadas. O resíduo foi redissolvido em metanol (5 mL), ácido acético (5 mL) foi adicionado seguido por trifluoroacetato de (2-Metiltiazol4-il)(1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4-il)metanona (exemplo 4, etapa h) (0,35 g). A mistura resultante foi agitada durante 15 minutos em seguida cianoboroidreto de sódio (0,07 g) foi adicionado e a mistura agitada durante a noite. O solvente foi evaporado e o resíduo dividido entre acetato de etila (50 mL) e solução de bicarbonato de sódio saturada (20 mL). As camadas foram separadas e a fase aquosa foi extraída com acetato de etila (2 x 30 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (20 mL), secadas sobre sulfato de sódio, filtradas e evaporadas. O resíduo foi purificado por cromatografia de sílica-gel eluindo com 47,5:47,5:5 de acetato de gradiente de etila:iso-hexano:trietilamina para 95:5 de acetato de etila:trietilamina.
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As frações contendo o produto foram combinadas e evaporadas em vácuo para fornecer o composto do subtítulo como um óleo amarelo. Produção 0,12 g.
[00510] m/z 460 (M+H)+ (APCI)
f) 2,5-Dimetil-4-(2-(4-(2-metiltiazol-4-carbonil)-1 -oxa-4,9- diazaespiro[5,5]undecan-9-il)etóxi)benzaldeído [00511] Dióxido de manganês (0,32 g) foi adicionado à solução de (9-(2-(4-(hidroximetil)-2,5-dimetilfenóxi)etil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-4-il)(2-metiltiazol-4-il)metanona (exemplo 18, etapa e) (0,17 g) em DCM (10 mL). A mistura resultante foi aquecida ao refluxo durante 4 horas. A reação foi filtrada através de celite e o tampão filtrante lavado com DCM (2 x 50 mL). Os licores-mãe e as lavagens foram combinados e evaporados para fornecer o composto do subtítulo como uma goma amarela. Produção 0,17 g.
[00512] m/z 458 (M+H)+ (APCI)
g) Ditrifluoroacetato de (R)-7-(2-(2,5-dimetil-4-(2-(4-(2-metiltiazol-4carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)etóxi) benzilamino)-1-hidroxietil)-4-hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona
HO
OH [00513] 2,5-Dimetil-4-(2-(4-(2-metiltiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9-il)etóxi)benzaldeído (exemplo 18, etapa f) (0,08 g) foi adicionado a uma mistura de cloridrato de (R)-7-(2-aminoPetição 870190058499, de 25/06/2019, pág. 152/650
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-hidroxietil)-4-hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona (WO2007027134, exemplo 1, etapa d) (0,07 g) e ácido acético (0,010 mL) em metanol (2 mL). A mistura foi agitada durante 30 minutos em seguida resfriada em um banho de gelo. Cianoboroidreto de sódio (0,016 g) foi em seguida adicionado e a mistura agitada durante 2 horas. O solvente foi evaporado em vácuo e o resíduo dividido entre acetato de etila (50 mL) e tampão de fosfato de ph 7,2 (50 mL). A aquosa foi separada e extraída com acetato de etila (2 x 50 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (20 mL), secadas sobre sulfato de sódio, filtradas e evaporadas em vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de sílica-gel eluindo com gradiente 95:5:0,5 para 92:8:0,8 de DCM:metanol:amônia aquosa ‘880’. As frações contendo o produto foram combinadas e evaporadas em vácuo. Mais purificação foi por HPLC preparativa (Sunfire®, Gradiente: 5-50% de acetonitrila em TFA aquosa a 0,2%). As frações contendo o produto foram combinadas, evaporadas em vácuo e o resíduo triturado com éter para fornecer o composto do título como um sólido branco. Produção 0,069 g.
[00514] m/z 668 (M+H)+ (APCI) [00515] 1H RMN (400 MHz, Ü6-DMSO, 90°C) δ 11,34 - 11,14 (m,
1H), 7,92 (s, 1H), 7,26 (s, 1H), 6,93 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 6,86 (s, 1H),
6,76 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 4,94 (t, J = 6,5 Hz, 1H), 4,39 - 4,31 (m, 2H),
4,23 - 4,09 (m, 2H), 3,78 - 3,63 (m, 6H), 3,61 - 3,55 (m, 2H), 3,49 -
3,20 (m, 4H), 3,13 - 3,03 (m, 2H), 2,68 (s, 3H), 2,33 (s, 3H), 2,21 - 2,01 (m, 5H), 1,94 - 1,78 (m, 2H). Cinco prótons trocáveis não observados. Exemplo 19
Ditrifluoroacetato de (R)-7-(2-(3-fluoro-5-((4-(2-metiltiazol-4carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil) fenetilamino)-1-hidroxietil)-4-hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona
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OH
a) Ácido 2-(3-(bromometil)-5-fluorofenjl)acétjco
F
HO
Br [00516] Peróxido de benzoila (0,05 g) foi adicionado a uma mistura de ácido 2-(3-fluoro-5-metilfenil)acético (0,518 g) e Nbromossuccinimida (0,6 g) em DCM (10 mL). A reação foi aquecida ao refluxo durante 1 hora. DCM (10 mL) e água (20 mL) foram adicionadas e a fase orgânica separada. A camada orgânica foi lavada com salmoura (20 mL), secada sobre sulfato de sódio, filtrada e evaporada em vácuo. O resíduo foi triturado com tolueno e o sólido branco resul tante removido por filtração. Os líquidos mãe foram evaporados em vácuo para fornecer o composto do subtítulo como um sólido branco que foi usado na próxima etapa sem outra purificação. Produção 0,38g.
b) (9-(3-Fluoro-5-(2-hidroxjetjl)benzil)-1-oxa-4,9-djazaespjro[5,5] undecan-4-jl)(2-metiltiazol-4-jl)metanona
[00517]
Uma solução de complexo de borano-dimetilsulfeto (2M em
THF, 3,85 mL) foi adicionada gota a gota a uma solução de ácido 2-(3 (bromometil)-5-fluorofenil)acético (exemplo 19, etapa a) (0,38 g) em THF (10 mL) a 0°C. A mistura resultante foi deixada aquecer para TA e agitada durante 1 hora. A reação foi resfriada para 0°C e metanol (1
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149/638 mL) foi adicionado gota a gota até o borbulhamento cessar. O solvente foi evaporado em vácuo e o resíduo redissolvido em MeCN (10 mL).
Trifluoroacetato de (2-metiltiazol-4-il)(1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-4-il)metanona (exemplo 4, etapa h) (0,61 g) foi em seguida adicionado seguido por trietilamina (0,54 mL) e a mistura resultante agitada durante 70 horas. O solvente foi em seguida evaporado em vácuo. A purificação foi por cromatografia de sílica-gel eluindo com gradiente 99:1:0,1 a 94,5:5:0,5 de DCM:metanol:amônia aquosa ‘880’. As frações contendo o produto foram combinadas e evaporadas em vácuo para fornecer o composto do subtítulo como uma espuma amarela. Produção 0,57 g.
[00518] m/z 434 (M+H)+ (APCI)
c) 2-(3-Fluoro-5-((4-(2-metiltiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro [5,5]undecan-9-il)metil)fenil)acetaldeído [00519] TFA (0,08 mL) foi adicionado à solução de (9-(3-fluoro-5-(2hidroxietil)benzil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4-il)(2-metiltiazol4-il)metanona (exemplo 19, etapa b) (0,46 g) em DCM (5 mL) a 0°C e a mistura resultante agitada durante 5 minutos. Periodinano DessMartin (0,68 g) foi em seguida adicionado e a mistura agitada à TA durante 45 minutos. Solução de tiossulfato de sódio saturada (5 mL), solução de bicabornato de sódio saturada (5 mL) e acetato de etila (20 mL) foram em seguida adicionados e a mistura agitada durante 10 minutos. A fase aquosa foi separada e extraída com acetato de etila (20 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, acidificadas com ácido acético (0,1 mL), secadas sobre sulfato de sódio, filtradas e evaporadas em vácuo para fornecer o composto do subtítulo como uma goma amarela. Produção 0,4 g.
[00520] m/z 432 (M+H)+ (APCI)
Petição 870190058499, de 25/06/2019, pág. 155/650
150/638
d) Ditrifluoroacetato de (R)-7-(2-(3-fluoro-5-((4-(2-metiltiazol-4- carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9il)metil)fenetilamino)-1-hidroxietil)-4-hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)ona
HO
OH [00521] Uma solução de 2-(3-fluoro-5-((4-(2-metiltiazol-4-carbonil)-
1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil)fenil)acetaldeído (exemplo 19, etapa c) (0,2 g) em metanol (3 mL) foi adicionada a uma mistura de cloridrato de (R)-7-(2-amino-1-hidroxietil)-4-hidroxibenzo[d]tiazol2(3H)-ona (WO2007027134, exemplo 1, etapa d) (0,18 g) e ácido acético (0,04 mL) em metanol (0,5 mL). A mistura resultante foi agitada durante 5 minutos em seguida resfriada para 0°C. Cianoboroidreto de sódio (0,03 g) foi em seguida adicionado e a mistura deixada aquecer para TA e agitada durante 2 horas. O solvente foi evaporado em vácuo e a purificação foi por cromatografia de sílica-gel eluindo com 95:5:0,5 a 89:10:1 de DCM de gradiente:metanol:amônia aquosa ‘880’. As frações contendo o produto foram combinadas, evaporadas em vácuo e purificadas por HPLC preparativa (Sunfire®, Gradiente: 5-50% de acetonitrila em TFA aquosa a 0,2%). As frações contendo o produto foram combinadas, evaporadas em vácuo e o resíduo triturado com éter para fornecer o composto do título como um sólido branco. Produção 0,018g.
[00522] m/z 642 (M+H)+ (APCI) [00523] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO, 90°C) δ 7,89 (s, 1H), 7,26 -
7,12 (m, 3H), 6,93 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 6,77 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 4,94 -
4,85 (m, 1H), 4,26 - 4,13 (m, 2H), 3,74 - 3,59 (m, 6H), 3,35 - 2,94 (m,
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10H), 2,67 (s, 3H), 2,06 - 1,91 (m, 2H), 1,83 - 1,68 (m, 2H). Seis prótons trocáveis não observados.
Exemplo 20
Ditrifluoroacetato de (R)-4-hidróxi-7-(1-hidróxi-2-(3-(2-(4-(5- metiltiofeno-2-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)etil) benzilamino)etil)benzo[d]tiazol-2(3H)-ona
HO,
OH
a) 2-(3-(Hidroximetil)fenil)etanol
HO,
OH [00524] Hidreto de alumínio de lítio (1M em dietil éter, 5,55 mL) foi adicionado gota a gota durante 5 minutos a uma solução agitada de 3(2-hidroxietil)benzoato de metila (1,0 g) em tetra-hidrofurano (15 mL) resfriado em um banho de gelo. Após 1 hora, a mistura reacional foi extinta com metanol e evaporada em vácuo. A purificação foi por cromatografia de sílica-gel eluindo com acetato de etila:iso-hexano, 2:1, em seguida acetato de etila para fornecer o composto do subtítulo como uma goma. Produção 0,5 g.
[00525] 1H RMN (300 MHz, CDCh) δ 7,31 (t, J = 7,7 Hz, 1H), 7,26 -
7,20 (m, 2H), 7,16 (d, J = 7,7 Hz, 1H), 4,67 (s, 2H), 3,86 (t, J = 6,9 Hz, 2H), 2,87 (t, J = 6,9 Hz, 2H). Dois prótons trocáveis não observados.
b) 3-(2-Hidroxietil)benzaldeído
HO
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152/638 [00526] Dióxido de manganês (IV) (2,0 g) foi adicionado a uma solução agitada de 2-(3-(hidroximetil)fenil)etanol (exemplo 20, etapa a) (0,50 g) em DCM (10 mL) em temperatura ambiente. Após 6 horas, a mistura reacional foi filtrada através de celite eluindo com DCM. A solução foi evaporada em vácuo para fornecer o composto do subtítulo como uma goma. Usado diretamente. Produção 0,46 g.
c) 2-(3-(Dietoximetil)fenil)etanol
HO [00527] Cloreto de amônio (0,08 g) foi adicionado à solução de 3-(2hidroxietil)benzaldeído (exemplo 20, etapa b) (0,45 g) e trietoximetano (0,55 g) em EtOH (8 mL) e a mistura reacional aquecida a 70°C durante 3 hora. Após resfriar, a mistura reacional foi dividida entre acetato de etila e solução de bicarbonato de sódio saturada. A solução de acetato de etila foi secada sobre sulfato de sódio, filtrada e evaporada em vácuo para fornecer o composto do subtítulo como uma goma. Produção 0,24 g.
[00528] 1H RMN (300 MHz, CDCh) δ 7,38 - 7,25 (m, 3H), 7,22 -
7,16 (m, 1H), 5,50 - 5,47 (m, 1H), 3,93 - 3,82 (m, 2H), 3,71 - 3,47 (m, 4H), 2,94 - 2,86 (m, 2H), 1,29 - 1,21 (m, 6H). Um próton trocável não observado.
d) metanossulfonato de 3-(Dietoximetil)fenetila [00529] Cloreto de metanossulfonila (0,18 g) em diclorometano (0,2 mL) foi adicionado a uma solução agitada de 2-(3(dietoximetil)fenil)etanol (exemplo 20, etapa c) (0,23 g) e trietilamina
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153/638 (0,429 mL) em diclorometano (2,5 mL) resfriada em um banho de gelo. Após 1 hora, a mistura reacional foi dividida entre acetato de etila e solução de bicarbonato de sódio saturada. A camada de acetato de etila foi lavada com solução de bicarbonato de sódio saturada e salmoura, secada sobre sulfato de sódio, filtrada e evaporada em vácuo para fornecer o composto do subtítulo como uma goma. Produção 0,28 g.
[00530] 1H RMN (300 MHz, CDCh) δ 7,40 - 7,29 (m, 3H), 7,19 (d, J = 7,4 Hz, 1H), 5,47 (s, 1H), 4,42 (t, J = 6,9 Hz, 2H), 3,67 - 3,48 (m, 4H), 3,07 (t, J = 6,9 Hz, 2H), 2,86 (s, 3H), 1,24 (t, J = 6,8 Hz, 6H).
e) (9-(3-(Dietoximetil)fenetil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4il)(5-metiltiofen-2-il)metanona [00531] Metanossulfonato de 3-(dietoximetil)fenetila (exemplo 20, etapa d) (0,30 g) em acetontrila (1,5 mL) foi adicionado a uma solução agitada de trifluoroacetato de (5-metiltiofen-2-il)(1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-4-il)metanona (exemplo 9, etapa b) (0,391 g) e trietilamina (0,415 mL) em acetonitrila (1,5 mL) e a solução aquecida a 70°C durante 48 horas. Após resfriar, a solução foi evaporada em vácuo e aplicada a uma coluna de sílica-gel para purificação, eluindo com acetato de etila:iso-hexano:trietilamina, 60:40:5 fornecendo o composto do subtítulo como uma goma. Produção 0,2 g.
[00532] 1H RMN (400 MHz, CDCh) δ 7,30 - 7,24 (m, 3H), 7,14 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 7,11 (d, J = 3,7 Hz, 1H), 6,69 (dd, J = 3,7 Hz, 1,1Hz, 1H), 5,46 (s, 1H), 3,78 - 3,71 (m, 4H), 3,65 - 3,49 (m, 6H), 2,82 - 2,77 (m, 2H), 2,65 - 2,57 (m, 4H), 2,50 (s, 3H), 2,48 - 2,39 (m, 2H), 1,94 -
1,86 (m, 2H), 1,67 - 1,56 (m, 2H), 1,23 (t, J = 7,2 Hz, 6H).
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f) 3-(2-(4-(5-Metiltiofeno-2-carbonil)-1 -oxa-4,9-diazaespiro[5,5] undecan-9-il)etil)benzaldeído
[00533] Ácido fórmico (2 mL) foi adicionado a uma solução agitada de (9-(3-(dietoximetil)fenetil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4-il)(5metiltiofen-2-il)metanona (exemplo 20, etapa e) (0,20 g) em tetrahidrofurano (3 mL) e água (1 mL) resfriada em um banho de gelo. Após 10 minutos, a mistura reacional foi evaporada em vácuo, tolueno foi adicionado e a mistura reacional foi evaporada em vácuo. O resíduo foi dissolvido em acetonitrila e em seguida evaporado em vácuo, e este processo foi repetido para fornecer o composto do subtítulo como um óleo que foi usado diretamente. Produção 0,16 g.
[00534] m/z 413 (M+H)+ (APCI)
g) Ditrifluoroacetato de (R)-4-hidróxi-7-(1-hidróxi-2-(3-(2-(4-(5- metiltiofeno-2-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9il)etil)benzilamino)etil)benzo[d]tiazol-2(3H)-ona
OH
O
[00535] Ácido acético (0,033 mL) foi adicionado a uma solução agitada de 3-(2-(4-(5-metiltiofeno-2-carbonil)-1 -oxa-4,9-diazaespiro [5,5]undecan-9-il)etil)benzaldeído (exemplo 20, etapa f) (0,17 g) e cloridrato de (R)-7-(2-amino-1-hidroxietil)-4-hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona (WO2007027134, exemplo 1, etapa d) (0,15 g) em metanol (10 mL). Após 2
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155/638 minutos, cianoboroidreto de sódio (0,10 g) foi adicionado e a mistura reacional agitada em temperatura ambiente durante a noite. A solução de metanol foi concentrada para ~3 mL e diluída com acetato de etila. Um precipitado gomoso formou-se. O acetato de etila foi decantado e lavado com solução de bicarbonato de sódio saturada e salmoura e secado sobre sulfato de sódio. A goma foi dissolvida em uma pequena quantidade de metanol e adicionada ao acetato de etila. O acetato de etila foi filtrado e evaporado em vácuo para fornecer um sólido branco. O sólido foi dissolvido em metanol e purificado por HPLC preparativa (Sunfire®, Gradiente: 15-50% de acetonitrila em TFA aquosa a 0,2%). As frações contendo produto puro foram combinadas e evaporadas até a secura. Trituração com dietil éter forneceu o composto do título como um sólido branco. Produção 0,11 g.
[00536] m/z 623 (M+H)+ (APCI) [00537] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO, 90°C) δ 11,67 (s, 1H), 10,23 (s, 1H), 9,85 - 9,75 e 9,61 - 9,50 (m, total 1H), 9,18 - 8,98 (m, 2H), 7,45 - 7,31 (m, 4H), 7,29 - 7,24 (m, 1H), 6,89 (d, J = 7,4 Hz, 1H), 6,86 - 6,83 (m, 1H), 6,75 (d, J = 7,4 Hz, 1H), 6,48 - 6,44 (m, 1H), 4,93 - 4,85 (m, 1H), 4,21 - 4,14 (m, 2H), 3,74 - 3,64 (m, 4H), 3,53 (s, 2H), 3,48 - 3,40 (m, 2H), 3,36 - 3,27 (m, 2H), 3,08 - 2,92 (m, 6H), 2,47 (s, 3H), 2,16 2,08 (m, 2H), 1,74 - 1,61 (m, 2H).
Exemplo 21
Ditrifluoroacetato de (R)-4-Hidróxi-7-(1 -hidróxi-2-((5-(2-(4-(2metiltiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)etil) tiofen-2-il)metilamino)etil)benzo[d]tiazol-2(3H)-ona
HO
a) 5-(2-(terc-butildimetilsililóxi)etil)tiofeno-2-carbaldeído
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156/638 .// xl / /-----/5 o / S'O [00538] terc-butildimetilsililcloreto (2,82 g) foi adicionado porção a porção a uma solução agitada de 2-(tiofen-2-il)etanol (2 g) e imidazol (1,275 g) em DMF (20 mL) a 20°C durante um período de 20 minutos. A mistura foi agitada a 20°C durante 18 horas e em seguida dividida entre acetato de etila e água, a camada orgânica foi lavada com água, secada sobre sulfato de sódio, filtrada e o solvente evaporado sob pressão reduzida. o resíduo foi purificado por cromatografia de sílica rápida, gradiente de eluição 1-4% de acetato de etila em iso-hexano. O resíduo (2,7 g) foi dissolvido em THF (50 mL) e a solução resfriada para -78°C, n-butil lítio (2,5M em hexanos, 5,06 mL) foi adicionado gota a gota durante 10 minutos e a mistura resultante agitada a 0°C durante 1 hora. A mistura reacional foi resfriada para -78°C, e DMF (5,7 mL) foi adicionada gota a gota durante 5 minutos. A mistura foi agitada a 20°C durante 3 horas. A mistura reacional foi dividida entre água e acetato de etila, a camada orgânica foi lavada com água, secada sobre sulfato de sódio e o solvente removido sob pressão reduzida. O produto bruto foi purificado por cromatografia de sílica rápida, eluindo com 7% de acetato de etila em iso-hexano. As frações puras foram evaporadas até a secura para fornecer o composto do subtítulo. Produção 2,3 g.
[00539] 1H RMN (400 MHz, CDCh) δ 9,83 (s, 1H), 7,61 (d, 1H), 6,96 (d, 1H), 3,86 (t, 2H), 3,07 (t, 2H), 0,88 (s, 9H), 0,02 (s, 6H).
b) 2-(5-(Dietoximetil)tiofen-2-il)etanol
[00540]
Uma mistura de 5-(2-(terc-butildimetilsililóxi)etil)tiofeno-2 carbaldeído (exemplo 21, etapa a) (1,37 g) e amônio cloreto (0,135 g) e ortoformiato de trietila (0,928 mL) em etanol (15 mL) foi aquecida ao
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157/638 refluxo sob nitrogênio durante 3 horas. A maior parte do etanol foi removido sob pressão reduzida e a mistura restante foi dividida entre acetato de etila e solução de bicarbonato de sódio saturada, a camada orgânica foi secada sobre sulfato de sódio, filtrada e o solvente removido sob pressão reduzida. O resíduo foi dissolvido em THF (20 mL) e fluoreto de tetrabutilamônio (1M em THF, 5,07 mL) foi adicionado gota a gota durante 1 minuto. A mistura foi deixada descansar em temperatura ambiente durante 30 minutos. O solvente foi removido sob pressão reduzida e o resíduo foi purificado por cromatografia de sílica rápida eluindo com 25% de acetato de etila em iso-hexano. As frações puras foram evaporadas até a secura para fornecer o composto do subtítulo. Produção 0,940 g.
[00541] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO) δ 6,85 (d, 1H), 6,73 (d, 1H),
5,64 (s, 1H), 4,79 - 4,74 (m, 1H), 3,62 - 3,43 (m, 6H), 2,87 (t, 2H), 1,13 (t, 6H).
c) 5-(2-(4-(2-Metiltjazol-4-carbonjl)-1 -oxa-4,9-diazaespiro[5,5] undecan-9-jl)etjl)tjofeno-2-carbaldeído [00542] Uma solução de 2-(5-(dietoximetil)tiofen-2-il)etanol (exemplo 21, etapa b) (0,54 g) em diclorometano (20 mL) foi tratada com trietilamina (0,359 mL) e a mistura resfriada em um banho de gelo. Uma solução de cloreto de metanossulfonila (0,183 mL) em diclorometano (3 mL) foi em seguida adicionada gota a gota durante 2 minutos e a mistura reacional agitada a 0°C durante 1 hora. A mistura foi lavada com água e a camada orgânica secada sobre sulfato de sódio, filtrada e o solvente evaporado sob pressão reduzida. O resíduo foi dissolvido em uma mistura de acetonitrila (7 mL) e DMF (1 mL) e trietilamina (0,654 mL) foi adicionada seguida por trifluoroacetato de (2-metiltiazolPetição 870190058499, de 25/06/2019, pág. 163/650
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4-il)(1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4-il)metanona (exemplo 4, etapa h) (0,5 g) e aquecida a 70°C durante 10 horas. A mistura foi dividida entre acetato de etila e solução de bicarbonato de sódio saturada, a camada orgânica foi secada sobre sulfato de sódio, filtrada e o solvente evaporado sob pressão reduzida. O resíduo foi dissolvido em THF (5 mL) e resfriado em um banho de gelo, ácido fórmico (4 mL) foi adicionado seguido por água (1 mL). A mistura foi deixada descansar a 0°C durante 10 minutos. O solvente foi removido sob pressão reduzida e o resíduo azeotropado duas vezes com tolueno e duas vezes com acetonitrila. O produto bruto foi purificado por cromatografia de sílica rápida usando 1% de trietilamina e 2% de metanol em diclorometano como solvente. As frações puras foram evaporadas até a secura para fornecer o composto do subtítulo. Produção 0,52 g.
[00543] m/z 420 (M+H)+ (APCI)
d) Ditrifluoroacetato de (R)-4-hidróxi-7-(1 -hidróxi-2-((5-(2-(4-(2- metiltiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)etil) tiofen-2-il)metilamino)etil)benzo[d]tiazol-2(3H)-ona
HO [00544] Uma solução de cloridrato de (R)-7-(2-amino-1-hidroxietil)4-hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona (WO2007027134, exemplo 1, etapa d) (0,22 g) em metanol (8 mL) foi tratada com ácido acético (0,041 mL) seguida por uma solução de 5-(2-(4-(2-metiltiazol-4-carbonil)-1-oxa-
4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)etil)tiofeno-2-carbaldeído (exemplo
21, etapa c) (0,3 g) em metanol (2 mL). A mistura foi resfriada em um banho de gelo e tratada com cianoboroidreto de sódio (0,067 g). A mistura foi em seguida agitada em temperatura ambiente durante 18 horas. A maior parte do metanol foi evaporada sob pressão reduzida e
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159/638 o restante dividido entre THF (50 mL), salmoura (10 mL) e solução de bicarbonate de sódio saturada (1 mL). A camada orgânica foi secada sobre sulfato de sódio, filtrada e o solvente removido sob pressão reduzida. O produto bruto foi purificado por HPLC preparativa (Sunfire®, Gradiente: 10-40% de acetonitrila em TFA aquosa a 0,2%). As frações contendo o produto desejado foram evaporadas até a secura para fornecer o composto do título. Produção 0,08 g.
[00545] m/z 630 (M+H)+ (APCI) [00546] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO, 90°C) δ 11,27 (s, 1H), 7,92 (s, 1H), 7,14 (d, 1H), 6,94 - 6,88 (m, 2H), 6,76 (d, 1H), 4,91 - 4,85 (m, 1H), 4,37 (s, 2H), 3,70 (s, 4H), 3,66 (s, 2H), 3,40 - 3,30 (m, 4H), 3,26 3,07 (m, 4H), 3,04 - 3,02 (m, 2H), 2,68 (s, 3H), 2,09 - 1,99 (m, 2H),
1,87 - 1,73 (m, 2H). Cinco prótons trocáveis não observados.
Exemplo 22
Ditrifluoroacetato de (R)-4-Hidróxi-7-(1 -hidróxi-2-(3-((4-(2isopropiltiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9il)metil)fenetilamino)etil)benzo[d]tiazol-2(3H)-ona
OH
HO
a) terc-butila 4-(2-isopropiltiazol-4-carbonil)-1 -oxa-4,9-diazaespiro [5,5]undecano-9-carboxilato [00547] Uma solução de ácido 2-isopropiltiazol-4-carboxílico (1 g) e cloridrato de 1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecano-9-carboxilato de terc
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160/638 butila (WuXi PharmaTech) (1,71 g) em DMF (30 mL) foi filtrada em um banho de gelo e tratada com trietilamina (2,442 mL) seguido por HATU (2,89 g). O banho de gelo foi removido e a mistura foi agitada a 20°C durante 1 hora. A mistura foi dividida entre acetato de etila e salmoura, a camada orgânica foi lavada duas vezes com salmoura, secada sobre sulfato de sódio, filtrada e o solvente evaporado sob pressão reduzida. O produto bruto foi purificado por cromatografia de sílica rápida usando 70% de acetato de etila em iso-hexano como solvente. As frações puras foram evaporadas até a secura para fornecer o composto do subtítulo. Produção 2 g.
[00548] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO, 90°C) δ 7,93 (s, 1H), 3,71 -
3,63 (m, 6H), 3,51 - 3,44 (m, 2H), 3,35 - 3,26 (m, 1H), 3,18 - 3,10 (m, 2H), 1,74 - 1,67 (m, 2H), 1,49 - 1,41 (m, 2H), 1,39 (s, 9H), 1,34 (d, J =
7,6 Hz, 6H).
b) Trifluoroacetato de (2-jsopropjltjazol-4-jl)(1-oxa-4,9-djazaespjro [5,5]undecan-4-il)metanona
HN [00549] Uma solução de 4-(2-isopropiltiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecano-9-carboxilato de terc-butila (exemplo 22, etapa a) (2,3 g) em uma mistura de diclorometano (40 mL) e ácido trifluoroacético (10 mL) foi deixada descansar a 20°C durante 30 minutos. Tolueno (50 mL) foi adicionado e os solventes foram evaporados, em seguida este processo foi repetido com mais tolueno (50 mL). O resíduo foi triturado com éter. A goma foi em seguida dissolvida em acetonitrila e o solvente evaporado para fornecer o composto do subtítulo. Produção 1,64 g.
[00550] m/z 310 (M+H)+ (APCI)
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c) (9-(3-(2-Hidroxietil)benzil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4il)(2-isopropiltiazol-4-il)metanona
HO [00551] Uma mistura de trifluoroacetato de (2-isopropiltiazol-4-il)(1oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4-il)metanona (exemplo 22, etapa b) (0,85 g) e 2-(3-(bromometil)fenil)etanol (exemplo 6, etapa a) (0,432 g) em acetonitrila (10 mL) a 20°C foi tratada com trietilamina (0,616 mL) e em seguida agitada durante 2 horas. O solvente foi evaporado sob pressão reduzida e o resíduo dividido entre acetato de etila e salmoura, a camada orgânica foi secada sobre sulfato de sódio, filtrada e o solvente evaporado sob pressão reduzida. O produto bruto foi purificado por cromatografia de sílica rápida, gradiente de eluição 1% de trietilamina e 3% de metanol em diclorometano. As frações puras foram evaporadas até a secura para fornecer o composto do subtítulo. Produção 0,71 g.
[00552] m/z 444 (M+H)+ (APCI)
d) Ditrifluoroacetato de (R)-4-hidróxi-7-(1-hidróxi-2-(3-((4-(2- isopropiltiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9il)metil)fenetilamino)etil)benzo[d]tiazol-2(3H)-ona
OH ,,
HO [00553] Uma solução de (9-(3-(2-hidroxietil)benzil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-4-il)(2-isopropiltiazol-4-il)metanona (exemplo 22, etapa c) (0,3 g) em diclorometano (10 mL) foi tratada com ácido
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162/638 trifluoroacético (0,052 mL) seguido por periodinano Dess-Martin (0,402 g) e a mistura resultante agitada a 20°C durante 1 hora. A mistura reacional foi tratada com solução de tiossulfato de sódio saturada (10 mL) e solução de bicarbonato de sódio saturada (10 mL) e acetato de etila (10 mL) e agitada vigorosamente durante 5 minutos. A mistura foi extraída duas vezes com acetato de etila, os orgânicos combinados foram lavados com solução de bicarbonato de sódio saturado, secados sobre sulfato de sódio, filtrados, tratados com ácido acético (0,039 mL) e o solvente evaporado sob pressão reduzida. O resíduo foi dissolvido em metanol (2 mL) e adicionado à solução a 0°C de cloridrato de (R)7-(2-amino-1-hidroxietil)-4-hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona (WO2007 027134, exemplo 1, etapa d) (0,2 g) e ácido acético (0,039 mL) em metanol (10 mL). Cianoboroidreto de sódio (0,064 g) foi adicionado e a mistura agitada à temperatura ambiente durante 18 horas. A maior parte do metanol foi evaporada sob pressão reduzida e o restante dividida entre THF (50 mL), salmoura (10 mL) e solução de bicarbonato de sódio saturada (1 mL). A camada orgânica foi secada sobre sulfato de sódio, filtrada e o solvente removido sob pressão reduzida. O produto bruto foi purificado por HPLC preparativa (Sunfire®, Gradiente: 1040% de acetonitrila em TFA aquosa a 0,2%). As frações contendo o produto desejado foram evaporadas até a secura para fornecer o composto do título. Produção 0,170 g.
[00554] m/z 652 (M+H)+ (APCI) [00555] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO, 90°C) δ 11,27 (s, 1H), 7,94 (s, 1H), 7,45 - 7,31 (m, 4H), 6,93 (d, J = 31,1 Hz, 1H), 6,77 (d, J = 24,6 Hz, 1H), 4,96 - 4,87 (m, 1H), 4,27 (s, 2H), 3,70 (s, 4H), 3,65 (s, 2H),
3,35 - 2,97 (m, 11H), 2,08 - 1,96 (m, 2H), 1,84 - 1,67 (m, 2H), 1,35 (d, J = 20,7 Hz, 6H). Cinco prótons trocáveis não observados.
Exemplo 23
Dirifluoroacetato de (R)-8-hidróxi-5-(1-hidróxi-2-(3-((4-(2- isopropilPetição 870190058499, de 25/06/2019, pág. 168/650
163/638 tiazol-4-carbonjl)-1-oxa-4,9-djazaespjro[5,5]undecan-9-jl)metil) fenetilamino)etil)quinolin-2(1H)-ona
a) (R)-5-(1 -(terc-butjldjmetjlsjljlóxj)-2-(3-((4-(2-jsopropjltiazol-4- carbonil)-1-oxa-4,9-djazaespjro[5,5]undecan-9-jl)metjl)fenetjlamjno)etil)-8hidroxjquinoljn-2(1H)-ona
[00556] Uma solução de (9-(3-(2-hidroxietil)benzil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-4-il)(2-isopropiltiazol-4-il)metanona (exemplo 22, etapa c) (0,159 g) em DCM (10 mL) foi tratada com ácido trifluoroacético (0,028 mL) seguido por periodinano Dess-Martin (0,213 g) e a mistura resultante agitada a 20°C durante 1 hora. A mistura reacional foi tratada com solução de tiossulfato de sódio saturada (10 mL) e solução de bicarbonato de sódio saturada (10 mL) e acetato de etila (10 mL) e agitada vigorosamente durante 5 minutos. A mistura foi extraída duas vezes com acetato de etila, os orgânicos combinados foram lavados com solução de bicarbonato de sódio saturada, secados sobre sulfato de sódio, filtrados, tratados com ácido acético (0,039 mL) e o solvente evaporado sob pressão reduzida. O resíduo foi dissolvido em metanol (2 mL) e adicionado a uma solução de (R)-5-(2-amino-1-(tercbutildimetilsililóxi)etil)-8-hidroxiquinolin-2(1 H)-ona (WO2004106333) (0,12 g) e ácido acético (0,021 mL) em metanol (10 mL). A mistura foi
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164/638 resfriada em um banho de gelo e tratada com triacetoxiboroidreto de sódio (0,114 g), em seguida a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 18 horas. O metanol foi removido sob pressão reduzida e o resíduo foi dividido entre solução de bicarbonato de sódio saturada e acetato de etila, a camada orgânica foi secada sobre sulfato de sódio, filtrada e o solvente removido sob pressão reduzida. O produto bruto foi purificado por cromatografia de sílica rápida usando amônia aquosa ‘880’ a 1% e 8% de metanol em diclorometano como solvente. As frações puras foram evaporadas até a secura para fornecer o composto do subtítulo. Produção 0,127 g.
[00557] m/z 760 (M+H)+ (APCI)
b) Ditrifluoroacetato de (R)-8-hidróxi-5-(1-hidróxi-2-(3-((4-(2- isopropiltiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9il)metil)fenetilamino)etil)quinolin-2(1H)-ona
OH
HO [00558] Uma solução de (R)-5-(1-(terc-butildimetilsililóxi)-2-(3-((4-(2isopropiltiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9il)metil)fenetilamino)etil)-8-hidroxiquinolin-2(1H)-ona (exemplo 23, etapa a) (0,127 g) em THF (4 mL) foi tratada com uma solução de trihidrofluoreto de trietilamina (0,035 mL) em metanol (1 mL) e a mistura resultante foi deixada descansar a 20°C durante 18 horas. Os solventes foram removidos sob pressão reduzida e o produto bruto foi purificado por HPLC preparativa (Sunfire®, Gradiente: 10-40% de acetonitrila em TFA aquosa a 0,2%). As frações contendo o composto desejado foram evaporadas até a secura para fornecer o composto do título. Produção 0,085 g.
[00559] m/z 646 (M+H)+ (APCI)
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165/638 [00560] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO, 90°C) δ 8,16 (d, J = 36,5 Hz,
1H), 7,94 (s, 1H), 7,45 - 7,33 (m, 4H), 7,13 (d, J = 26,1 Hz, 1H), 6,99 (d, J = 24,2 Hz, 1H), 6,54 (d, J = 24,2 Hz, 1H), 5,38 - 5,32 (m, 1H),
4,29 (s, 2H), 3,70 (s, 4H), 3,64 (s, 2H), 3,32 - 3,24 (m, 3H), 3,21 - 3,00 (m, 8H), 2,08 - 1,97 (m, 2H), 1,82 - 1,68 (m, 2H), 1,34 (d, J = 25,7 Hz, 6H). Seis prótons trocáveis não observados.
Exemplo 24
Ditrifluoroacetato de (R)-4-hidróxi-7-(1-hidróxi-2-(3-(2-(4-(2metiltiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9il)etóxi)fenetilamino)etil)benzo[d]tiazol-2(3H)-ona
a) 2-(3-(2,2-Dietoxietóxi)fenil)etanol
O
[00561] Carbonato de césio (8,84 g) foi adicionado à solução de 3(2-hidroxietil)fenol (2,5 g) e 2-bromo-1,1-dietoxietano (3,74 g) em DMF (50 mL), e a mistura resultante foi agitada a 90°C durante a noite, em seguida deixada resfriar. A mistura foi vertida em água e extraída três vezes com acetato de etila. Os extratos combinados foram lavados com água e salmoura, em seguida secados sobre sulfato de sódio anidroso e purificado por cromatografia rápida em sílica eluído com um gradiente de dietil éter em iso-hexano para fornecer o composto do subtítulo como um óleo amarelo pálido. Produção 3,0 g.
[00562] 1H RMN (400 MHz, CDCh) δ 7,21 - 7,16 (m, 1H), 6,82 -
6,72 (m, 3H), 4,80 (t, J = 5,3 Hz, 1H), 3,97 (d, J = 5,1 Hz, 2H), 3,81 (t, J = 6,5 Hz, 2H), 3,78 - 3,69 (m, 2H), 3,65 - 3,56 (m, 2H), 2,80 (t, J = 6,5 Hz, 2H), 1,21 (t, J = 6,9 Hz, 6H). Um próton trocável não observado.
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166/638
b) 2-(3-(2-Hidroxietil)fenóxi)acetaldeído
[00563] Ácido clorídrico concentrado (1,5 mL) foi adicionado à solução de 2-(3-(2,2-dietoxietóxi)fenil)etanol (exemplo 24 etapa a) (0,256 g) em 1,4-dioxano (3 mL) e a mistura resultante foi agitada à temperatura ambiente durante 1,5 hora. A solução foi em seguida diluída com água e extraída duas vezes com acetato de etila. Os extratos combinados foram lavados com salmoura, secados sobre sulfato de magnésio anidroso e concentrados em vácuo para fornecer o composto do subtítulo como uma espuma branca. Produção 0,150 g.
[00564] 1H RMN (400 MHz, CDCh) δ 9,86 (s, 1H), 7,28 - 7,13 (m,
1H), 6,92 - 6,66 (m, 3H), 4,57 (s, 2H), 3,87 (t, J = 6,5 Hz, 2H), 2,86 (t, J = 6,5 Hz, 2H). Um próton trocável não observado.
c) (9-(2-(3-(2-Hidroxietil)fenóxi)etil)-1 -oxa-4,9-diazaespiro[5,5] undecan-4-il)(2-metiltiazol-4-il)metanona
HO
S [00565] Uma suspensão de 2-(3-(2-hidroxietil)fenóxi)acetaldeído (exemplo 24, etapa b) (0,143 g) e trifluoroacetato de (2-metiltiazol-4il)(1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4-il)metanona (exemplo 4, etapa h) (0,314 g) em metanol (10 mL) foi tratada com ácido acético (0,045 mL) e agitada à temperatura ambiente durante 30 minutos. A mistura foi resfriada em gelo-água, tratada com triacetoxiboroidreto de sódio (0,254 g) e agitada durante 3 dias, permitindo o banho de gelo expirar. A solução resultante foi purificada por cromatografia rápida em sílica eluída com 1:15:84 trietilamina:metanol:diclorometano para fornecer o produto bruto (0,243 g). Uma segunda purificação por cromatografia rápida em sílica eluída com 1:5:94 de trietilamina:metanol:diclorometano forneceu o composto do subtítulo ligeira
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167/638 mente impuro como uma goma marrom. Produção 0,122 g.
[00566] m/z 446 (M+H)+ (APCI)
d) 2-(3-(2-(4-(2-Metiltiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5] undecan-9-il)etóxi)fenil)acetaldeído [00567] Uma solução de (9-(2-(3-(2-hidroxietil)fenóxi)etil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-4-il)(2-metiltiazol-4-il)metanona (exemplo 24, etapa c) (0,152 g) em DCM (5 mL) foi filtrada em gelo-água e tratada com ácido trifluoroacético (0,039 mL) e agitada durante 5 minutos. Periodinano Dess-Martin (0,221 g) foi adicionado e a mistura foi removida do banho de resfriamento e agitada à temperatura ambiente durante 25 minutos. A reação foi extinta pela adição de solução de tiossulfato de sódio saturada (5 mL), solução de bicarbonato de sódio saturada (5 mL) e acetato de etila (5 mL), e a mistura de duas fases resultante foi agitada durante 10 minutos. A mistura foi em seguida extraída duas vezes com acetato de etila, e os extratos orgânicos combinados lavados com salmoura. Ácido acético (0,1 mL) foi adicionado, e em seguida os extratos acidificados foram secados sobre sulfato de magnésio anidroso e concentrados em vácuo para fornecer o composto do subtítulo como uma goma marrom. Produção 0,118 g.
[00568] m/z 444 (M+H)+ (APCI)
e) Ditrifluoroacetato de (R)-4-hidróxi-7-(1-hidróxi-2-(3-(2-(4-(2metiltiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il) etóxi)fenetilamino)etil)benzo[d]tiazol-2(3H)-ona
OH
HO [00569] Uma solução de cloridrato de (R)-7-(2-amino-1-hidroxietil)
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4-hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona (WO2007027134, exemplo 1, etapa d) (0,105 g) em metanol (2 mL) foi tratada com ácido acético (0,023 mL) e agitada durante 5 minutos. Uma solução de 2-(3-(2-(4-(2metiltiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9il)etóxi)fenil)acetaldeído (exemplo 24, etapa d) (0,117 g) em metanol (3 mL) foi em seguida adicionada e a mistura resultante foi agitada à temperatura ambiente durante 1 hora, antes do resfriamento em geloágua e tratada com triacetoxiboroidreto de sódio (0,085 g). A mistura foi agitada em gelo durante 1 hora, e em seguida mais triacetoxiboroidreto de sódio (0,086 g) foi adicionado. A mistura foi agitada em gelo durante 1 hora, em seguida mais triacetoxiboroidreto de sódio (0,169 g) foi adicionado e a mistura foi agitada durante 1 hora. Mais triacetoxiboroidreto de sódio (0,506 g) foi adicionado e a mistura foi agitada durante a noite, deixando-a lentamente aquecer para temperatura ambiente. No dia seguinte, a mistura foi resfriada novamente em geloágua, e tratada com triacetoxiboroidreto de sódio (0,254 g) e agitada em gelo-água durante 45 minutos em seguida concentrada em vácuo. O resíduo foi dissolvido em uma mistura de acetonitrila (3 mL) e água (1,5 mL) e purificado por HPLC preparativa (Sunfire®, Gradiente: 550% de acetonitrila em TFA aquosa a 0,2%). As frações contendo o produto foram concentradas em vácuo e coevaporadas de acetonitrila duas vezes para fornecer O resíduo incolor. O resíduo foi triturado com dietil éter para fornecer um sólido, que foi coletado por filtração, lavado com dietil éter e secado em vácuo a temperatura ambiente para fornecer o composto do título como um sólido branco. Produção 0,011 g. [00570] m/z 654 (M+H)+ (APCI) [00571] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO) δ 11,68 (br s, 1H), 10,22 (br s, 1H), 8,00 (s, 1H), 7,29 (t, J = 7,9 Hz, 1H), 6,96 - 6,84 (m, 4H), 6,77 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 6,48 (br s, 1H), 4,93 - 4,85 (m, 1H), 4,36 - 4,27 (m, 2H), 3,83 - 3,61 (m, 6H), 3,60 - 3,51 (m, 2H), 3,50 - 3,42 (m, 2H), 3,24 Petição 870190058499, de 25/06/2019, pág. 174/650
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3,02 (m, 6H), 3,02 - 2,84 (m, 2H), 2,69 (s, 3H), 2,15 - 2,06 (m, 2H),
1,88 - 1,67 (m, 2H). Três prótons trocáveis não observados.
Exemplo 25
DitrÍfluoroacetato de (R)-8-hidróxi-5-(1-hidróxi-2-(3-((4-(2(trifluorometil)tiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil)fenetilamino)etil)quinolin-2(1H)ona
a) Trifluoroacetato de 1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4-il(2(trifluorometil)tiazol-4-il)metanona [00572] Uma
de
1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecano-9-carboxilato de terc-butila (WuXi PharmaTech) (0,594 g) e ácido 2-(trifluorometil)tiazol-4-carboxílico (0,4 g) em
DMF (10 mL) foi tratada com trietilamina (0,848 mL) e resfriada para 0°C. HATU (1,003 g) foi adicionado e a mistura agitada a 20°C durante horas. A mistura foi dividida entre acetato de etila e salmoura, a ca mada orgânica foi lavada duas vezes com salmoura, secada sobre sulfato de sódio, filtrada e o solvente evaporado sob pressão reduzida. O produto bruto foi purificado por cromatografia de sílica rápida eluindo com 40% de acetato de etila em iso-hexano para produzir o produto como a base livre. Este foi dissolvido em diclorometano (40 mL) e tratado com ácido trifluoroacético (10 mL) e em seguida a mistura foi deiPetição 870190058499, de 25/06/2019, pág. 175/650
170/638 xada descansar a 20°C durante 1 hora. Tolueno (60 mL) foi adicionado e o solvente removido sob pressão reduzida para fornecer o composto do subtítulo. Produção 0,740 g.
[00573] m/z 336 (M+H)+ (APCI)
b) (9-(3-(2-Hidroxietil)benzil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4il)(2-(trifluorometil)tiazol-4-il)metanona
HO [00574] 2-(3-(Bromometil)fenil)etanol (exemplo 6, etapa a) (0,354 g) foi adicionado à solução de trifluoroacetato de 1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-4-il(2-(trifluorometil)tiazol-4-il)metanona (exemplo 25, etapa a) (0,74 g) e trietilamina (0,689 mL) em acetonitrila (15 mL) e a mistura agitada a 20°C durante 2 horas. O solvente foi evaporado sob pressão reduzida e o resíduo dividido entre acetato de etila e solução de bicarbonato de sódio saturada, a camada orgânica foi secada sobre sulfato de sódio, filtrada e o solvente evaporado sob pressão reduzida. O produto bruto foi purificado por cromatografia de sílica rápida usando 1% de trietilamina e 3% de metanol em diclorometano como solvente. As frações puras foram evaporadas até a secura para fornecer o composto do subtítulo. Produção 0,640 g.
[00575] m/z 470 (M+H)+ (APCI)
c) (R)-5-(1-(terc-butildimetilsililóxi)-2-(3-((4-(2-(trifluorometil)tiazol4-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil) fenetilamino)etil)-8-hidroxiquinolin-2(1H)-ona
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171/638
[00576] Uma solução de (9-(3-(2-hidroxietil)benzil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-4-il)(2-(trifluorometil)tiazol-4-il)metanona (exemplo 25, etapa b) (0,211 g) em diclorometano (10 mL) foi tratada com ácido trifluoroacético (0,035 mL) seguido por periodinano DessMartin (0,266 g) e a mistura resultante agitada a 20°C durante 1 hora. A mistura reacional foi tratada com solução de tiossulfato de sódio saturada (10 mL) e solução de bicarbonato de sódio saturada (10 mL) e acetato de etila (10 mL) e agitada vigorosamente durante 5 minutos. A mistura foi extraída duas vezes com acetato de etila, os orgânicos combinados foram lavados com solução de bicarbonato de sódio saturada, secados sobre sulfato de sódio, filtrados, tratados com ácido acético (0,026 mL) e o solvente evaporado sob pressão reduzida. O resíduo foi dissolvido em metanol (2 mL) e adicionado a uma solução de (R)-5-(2-amino-1-(terc-butildimetilsililóxi)etil)-8-hidroxiquinolin-2(1H)ona (WO2004106333) (0,150 g) e ácido acético (0,026 mL) em metanol (10 mL). A mistura foi resfriada em um banho de gelo e tratada com triacetoxiboroidreto de sódio (0,143 g) e em seguida a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 18 horas. O metanol foi removido sob pressão reduzida e o resíduo foi dividido entre solução de bicarbonato de sódio saturada e acetato de etila, a camada orgânica foi secada sobre sulfato de sódio, filtrada e o solvente removido sob pressão reduzida. O produto bruto foi purificado por cromatografia de sílica rápida usando amônia aquosa ‘880’ a 1% e 8% de metanol em diclorometano como solvente. As frações puras foram evaporadas até a
Petição 870190058499, de 25/06/2019, pág. 177/650
172/638 secura para fornecer o composto do subtítulo. Produção 0,11 g.
[00577] m/z 786 (M+H)+ (APCI)
d) Ditrifluoroacetato de (R)-8-hidróxi-5-(1-hidróxi-2-(3-((4-(2(trifluorometil)tiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5] undecan-9-il)metil)fenetilamino)etil)quinolin-2(1H)-ona
[00578] tri-hidrofluoreto de trietilamina (0,030 mL) em metanol (1 mL) foi adicionado à solução de (R)-5-(1-(terc-butildimetilsililóxi)-2-(3((4-(2-(trifluorometil)tiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil)fenetilamino)etil)-8-hidroxiquinolin2(1H)-ona (exemplo 25, etapa c) (0,11 g) em THF (4 mL) e a solução resultante deixada descansar a 20°C durante 18 horas. Os solventes foram removidos sob pressão reduzida e o produto bruto foi purificado por HPLC preparativa (Sunfire®, Gradiente: 10-40% de acetonitrila em TFA aquosa a 0,2%). As frações contendo o composto desejado foram evaporadas até a secura para fornecer o composto do título 0,075 g. [00579] m/z 672 (M+H)+ (APCI) [00580] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO, 90°C) δ 8,78 (s, 1H), 8,52 (s,
1H), 8,18 (d, J = 49,2 Hz, 1H), 7,45 - 7,33 (m, 4H), 7,14 (d, J = 21,8 Hz, 1H), 7,00 (d, J = 19,8 Hz, 1H), 6,54 (d, J = 21,9 Hz, 1H), 5,39 -
5,33 (m, 1H), 4,29 (s, 2H), 3,75 - 3,63 (m, 4H), 3,59 (s, 2H), 3,28 (t, J =
8,1 Hz, 2H), 3,21 - 3,00 (m, 8H), 2,10 - 1,97 (m, 2H), 1,84 - 1,67 (m, 2H). Cinco prótons trocáveis não observados.
Exemplo 26
Ditrifluoroacetato (R)-4-hidróxi-7-(1 -hidróxi-2-(3-((4-(2- (trifluorometil)tiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il) metil)fenetilamino)etil)benzo[d]tiazol-2(3H)-ona
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[00581] Uma solução de (9-(3-(2-hidroxietil)benzil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-4-il)(2-(trifluorometil)tiazol-4-il)metanona (exemplo 25, etapa b) (0,268 g) em diclorometano (10 mL) foi tratada com ácido trifluoroacético (0,044 mL) seguido por periodinano DessMartin (0,339 g) e a mistura resultante agitada a 20°C durante 1 hora. A mistura reacional foi tratada com solução de tiossulfato de sódio saturada (10 mL) e solução de bicarbonato de sódio saturada (10 mL) e acetato de etila (10 mL) e agitada vigorosamente durante 5 minutos. A mistura foi extraída duas vezes com acetato de etila, os orgânicos combinados foram lavados com solução de bicarbonato de sódio saturada, secados sobre sulfato de sódio, filtrados, tratados com ácido acético (0,033 mL) e o solvente evaporado sob pressão reduzida. O resíduo foi dissolvido em metanol (2 mL) e adicionado à solução a 0°C de cloridrato de (R)-7-(2-amino-1-hidroxietil)-4-hidroxibenzo[d]tiazol2(3H)-ona (WO2007027134, exemplo 1, etapa d) (0,15 g) e ácido acético (0,033 mL) em metanol (10 mL). Cianoboroidreto de sódio (0,054 g) foi adicionado e a mistura agitada à temperatura ambiente durante 18 horas. A maior parte do metanol foi evaporada sob pressão reduzida e o restante dividido entre THF (50 mL), salmoura (10 mL) e solução de bicarbonato de sódio saturada (1 mL). A camada orgânica foi secada sobre sulfato de sódio, filtrada e o solvente removido sob pressão reduzida. O produto bruto foi purificado por HPLC preparativa (Sunfire®, Gradiente: 10-40% de acetonitrila em TFA aquosa a 0,2%). As frações contendo o composto desejado foram evaporadas até a secura para fornecer o composto do título. Produção 0,13 g.
[00582] m/z 678 (M+H)+ (APCI)
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174/638 [00583] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO, 90°C) δ 11,27 (s, 1H), 8,74 (s, 1H), 8,52 (s, 1H), 7,45 - 7,31 (m, 4H), 6,93 (d, J = 41,1 Hz, 1H),
6,77 (d, J = 36,9 Hz, 1H), 4,97 - 4,87 (m, 1H), 4,27 (s, 2H), 3,74 - 3,69 (m, 2H), 3,69 - 3,64 (m, 2H), 3,59 (s, 2H), 3,25 (t, J = 14,5 Hz, 2H),
3,19 - 2,99 (m, 8H), 2,09 - 1,97 (m, 2H), 1,84 - 1,69 (m, 2H). Quatro prótons trocáveis não observads.
Exemplo 27
Ditrifluoroacetato de (R)-4-hidróxi-7-(1 -hidróxi-2-(2-(5-((4-(5metiltiofeno-2-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il) metil)tiofen-3-il)etilamino)etil)benzo[d]tiazol-2(3H)-ona
HO.
OH
a) terc-butildimetil(2-(tiofen-3-il)etóxi)silano [00584] terc-butilclorodimetilsilano (3,88 g) foi adicionado a uma solução agitada de 2-(tiofen-3-il)etanol (3,00 g) e 1H-imidazol (4,78 g) em DMF (30 mL) resfriado em banho de gelo. Após 16 horas, a mistura reacional foi diluída com acetato de etila (300 mL), lavada com água (3 x 150 mL) e evaporada em vácuo. A purificação foi por cromatografia de sílica-gel eluindo com iso-hexano e em seguida 1:5 de acetato de etila:iso-hexano, para coletar o composto do subtítulo como um óleo. Produção 5,2 g.
[00585] 1H RMN (300 MHz, CDCh) δ 7,23 (dd, J= 2,9, 4,9 Hz, 1H),
7,01 - 6,99 (m, 1H), 6,97 (dd, J=1,3, 4,9Hz, 1H), 3,80 (t, J = 6,8 Hz,
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2H), 2,85 (t, J = 6,8 Hz, 2H), 0,88 (s, 9H), 0,01 (s, 6H).
b) Mistura de 4-(2-(terc-butildimetilsililóxi)etil)tiofeno-2- carbaldeído com 3-(2-(terc-butildimetilsililóxi)etil)tiofeno-2-carbaldeído [00586] n-Butillítio (1,6M em hexanos, 7 mL) foi adicionado gota a gota a solução agitada de terc-butildimetil(2-(tiofen-3-il)etóxi)silano (exemplo 27, etapa a) (2,210 g) em tetra-hidrofurano (60 mL) resfriado a -78°C. Após a adição, a mistura reacional foi agitada em um banho de gelo durante 1 hora e em seguida resfriada para -78°C. N,Ndimetilformamida (9,00 g) foi adicionada gota a gota durante 5 minutos e após mais 10 minutos o banho de resfriamento foi removido. Após 1 hora, a mistura reacional foi dividida entre água e acetato de etila e a solução de acetato de etila lavada duas vezes com água, uma vez com salmoura, secada sobre sulfato de sódio, filtrada e evaporada em vácuo. Purificação por cromatografia de sílica-gel eluindo com 1:20 de acetato de etila:iso-hexano, forneceu uma mistura de 4:1 de 4-(2-(tercbutildimetilsililóxi)etil)tiofeno-2-carbaldeído e 3-(2-(tercbutildimetilsililóxi)etil)tiofeno-2-carbaldeído por 1H RMN como um óleo. Produção 1,3 g.
[00587] 4-(2-(terc-butildimetilsililóxi)etil)tiofeno-2-carbaldeído:
[00588] 1H RMN (400 MHz, CDCh) δ 9,93 (d, J = 1,2 Hz, 1H), 7,71 (d, J = 1,5 Hz, 1H), 7,52 (s, 1H), 3,92 - 3,84 (m, 2H), 2,91 (t, J = 6,5 Hz, 2H), 0,92 (s, 9H), 0,04 (s, 6H).
[00589] 3-(2-(terc-butildimetilsililóxi)etil)tiofeno-2-carbaldeído:
[00590] 1H RMN (400 MHz, CDCh) δ 10,08 (s, 1H), 7,69 (d, J = 5,0
Hz, 1H), 7,09 (d, J = 5,0 Hz, 1H), 3,92 - 3,84 (m, 2H), 3,22 (t, J = 6,5 Hz, 2H), 0,89 (s, 9H), -0,01 (s, 6H).
c) (9-((4-(2-(terc-butildimetilsililóxi)etil)tiofen-2-il)metil)-1-oxa-4,9-
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176/638 djazaespjro[5,5]undecan-4-jl)(5-metjltjofen-2-jl)metanona
[00591] Trifluoroacetato de (5-metiltiofen-2-il)(1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-4-il)metanona (exemplo 9, etapa b) (0,230 g) foi adicionado a uma solução agitada de uma mistura de 4:1 de 4-(2(terc-butildimetilsililóxi)etil)tiofeno-2-carbaldeído e 3-(2-(tercbutildimetilsililóxi)etil)tiofeno-2-carbaldeído (exemplo 27, etapa b) (0,20 g) e AcOH (0,033 mL) em M-metil-2-pirrolidinona (3 mL). Após 5 minutos, triacetoxiboroidreto de sódio (0,35 g) foi adicionado. Após 16 horas água foi adicionada e a mistura extraída com acetato de etila. A camada de acetato de etila foi lavada três vezes com água e evaporada em vácuo. Purificação por cromatografia de sílica-gel eluindo com 20:80:5 de acetato de etila:iso-hexano:trietilamina, separou os dois produtos isoméricos e fornece o composto do subtítulo como uma goma. Produção 0,21 g.
[00592] 1H RMN (400 MHz, CDCh) δ 7,09 (d, J = 3,8 Hz, 1H), 6,86 (s, 1H), 6,75 (s, 1H), 6,69 (d, J = 3,8 Hz, 1H), 3,78 (t, J = 6,6 Hz, 2H), 3,76 - 3,69 (m, 4H), 3,64 (s, 2H), 3,56 (s, 2H), 2,76 (t, J = 7,1 Hz, 2H),
2,62 - 2,54 (m, 2H), 2,50 (s, 3H), 2,41 - 2,32 (m, 2H), 1,90 - 1,82 (m, 2H), 1,63 - 1,52 (m, 2H), 0,88 (s, 9H), 0,01 (s, 6H).
d) (9-((4-(2-Hjdroxjetjl)tjofen-2-jl)metjl)-1-oxa-4,9-djazaespjro[5,5] undecan-4-jl)(5-metjltjofen-2-jl)metanona
[00593] Fluoreto de tetrabutilamônio (1M em tetra-hidrofurano, 2 mL) foi adicionado à solução de (9-((4-(2-(tercbutildimetilsililóxi)etil)tiofen-2-il)metil)-1-oxa-4,9Petição 870190058499, de 25/06/2019, pág. 182/650
177/638 diazaespiro[5,5]undecan-4-il)(5-metiltiofen-2-il)metanona (exemplo 27, etapa c) (0,65 g) em tetra-hidrofurano (7 mL). Após 1 hora, a solução foi evaporada em vácuo. Purificação por cromatografia de sílica-gel, eluindo com 20:1 de acetato de etila:trietilamina, fornece o composto do subtítulo como uma goma. Produção 0,45 g.
[00594] 1H RMN (400 MHz, CDCh) δ 7,09 (d, J = 3,7 Hz, 1H), 6,92 (s, 1H), 6,77 (s, 1H), 6,69 (dd, J = 1,0, 3,7 Hz, 1H), 3,83 (t, J = 6,4 Hz, 2H), 3,76 - 3,70 (m, 4H), 3,66 (s, 2H), 3,56 (s, 2H), 2,82 (t, J = 6,4 Hz, 2H), 2,62 - 2,55 (m, 2H), 2,50 (s, 3H), 2,43 - 2,33 (m, 2H), 1,91 - 1,82 (m, 2H), 1,65 - 1,50 (m, 2H). Um próton trocável não observado.
e) 2-(5-((4-(5-Metiltiofeno-2-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5] undecan-9-il)metil)tiofen-3-il)acetaldeído [00595] Periodinano Dess-Martin (0,35 g) foi adicionado a uma solução agitada de (9-((4-(2-hidroxietil)tiofen-2-il)metil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-4-il)(5-metiltiofen-2-il)metanona (exemplo 27, etapa d) (0,19 g) e ácido trifluoroacético (0,052 mL) em DCM (5 mL). Após 1 hora, acetato de etila (30 mL) foi adicionado seguido por uma mistura de solução de tiossulfato de sódio saturada (5 mL) e solução de bicarbonato de sódio saturada (5 mL). A mistura reacional foi bem agitada e separada. A solução de acetato de etila foi lavada com solução de bicarbonato de sódio saturada, água e salmoura. Ácido acético (0,07 mL) foi adicionado, a solução secada sobre sulfato de sódio, filtrada e evaporada em vácuo (temperatura de banho de ~30°C) para fornecer o composto do subtítulo como uma goma. Produção 0,19 g. Usado diretamente.
f) Ditrifluoroacetato de (R)-4-hidróxi-7-(1-hidróxi-2-(2-(5-((4-(5- metiltiofeno-2-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il) metil)tiofen-3-il)etilamino)etil)benzo[d]tiazol-2(3H)-ona
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OH [00596] Ácido acético (0,039 g) foi adicionado a uma solução agitada de cloridrato de (R)-7-(2-amino-1-hidroxietil)-4-hidroxibenzo[d]tiazol2(3H)-ona (WO2007027134, exemplo 1, etapa d) (0,17 g) e 2-(5-((4-(5metiltiofeno-2-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9il)metil)tiofen-3-il)acetaldeído (exemplo 27, etapa e) (0,19 g) em MeOH (10 mL). Após 1 minuto, cianoboroidreto de sódio (0,10 g) foi adicionado. Após 3 horas, a mistura reacional foi concentrada em vácuo para ~2 mL, THF (20 mL) foi adicionado e a solução lavada com uma mistura de salmoura (10 mL) e solução de bicarbonato de sódio saturada (2 mL). A solução orgânica foi secada sobre sulfato de sódio, filtrada e evaporada em vácuo. O sólido foi dissolvido em metanol e purificado por HPLC preparativa (Sunfire®, Gradiente: 10-40% de acetonitrila em TFA aquosa a 0,2%). As frações contendo o produto foram combinadas e evaporadas até a secura em vácuo. Acetonitrila foi adicionada e a solução evaporada em vácuo, e este processo foi repetido. Dietil éter foi adicionado e a goma triturada para fornecer o composto do título como um sólido. Produção 0,097 g.
[00597] m/z 629 (M+H)+ (APCI) [00598] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO) δ 11,67 (s, 1H), 10,23 (s,
1H), 9,82 - 9,67 (m, 1H), 8,93 - 8,67 (m, 2H), 7,46 (s, 1H), 7,25 - 7,22 (m, 1H), 7,17 (s, 1H), 6,93 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 6,77 (d, J = 8,8 Hz, 1H),
6,60 - 6,46 (m, 1H), 6,51 - 6,46 (m, 1H), 4,92 - 4,86 (m, 1H), 4,68 4,51 (m, 2H), 3,74 - 2,88 (m, 16H), 2,46 (s, 3H), 2,15 - 2,04 (m, 2H),
1,69 - 1,56 (m, 2H).
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Exemplo 28
Ditrifluoroacetato de (R)-5-(2-(3-fluoro-5-((4-(2-metiltiazol-4- carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil) fenetilamino)-
1-hidroxietil)-8-hidroxiquinolin-2(1H)-ona
HO.
OH [00599] Uma solução de 2-(3-fluoro-5-((4-(2-metiltiazol-4-carbonil)-
1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil)fenil)acetaldeído (exemplo 19, etapa c) (0,2 g) em metanol (3 mL) foi adicionada a uma mistura de (R)-5-(2-amino-1-(terc-butildimetilsililóxi)etil)-8-hidroxiquinolin2(1H)-ona (WO2004106333) (0,23 g) e ácido acético (0,027 mL) em metanol (3 mL). A mistura resultante foi agitada durante 5 minutos em seguida resfriada para 0°C. Cianoboroidreto de sódio (0,044 g) foi em seguida adicionado e a mistura deixada aquecer para TA e agitada durante 2 horas. O solvente foi evaporado em vácuo e a purificação foi por cromatografia de sílica-gel eluindo com 95:5:0,5 a 89:10:1 de gradiente DCM:metanol:amônia aquosa de ‘880’. As frações contendo o produto foram combinadas e evaporadas em vácuo. O resíduo foi dissolvido em THF (3 mL), tri-hidrofluoreto de trietilamina (0,11 mL) foi adicionado e a mistura agitada durante a noite. A reação foi concentrada em vácuo. A purificação foi por HPLC preparativa (Sunfire®, Gradiente: 5-50% de acetonitrila em TFA aquosa a 0,2%). As frações contendo o produto foram combinadas e evaporadas para fornecer o composto do título como um sólido branco. Produção 0,021 g.
[00600] m/z 636 (M+H)+ (APCI) [00601] 1H RMN (400 MHz, Ü6-DMSO, 90°C) δ 8,15 (d, J = 10,0 Hz,
1H), 7,90 (s, 1H), 7,29 - 7,17 (m, 3H), 7,13 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 6,99 (d,
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J = 8,2 Hz, 1H), 6,55 (d, J = 9,7 Hz, 1H), 5,37 - 5,29 (m, 1H), 4,35 -
4,19 (m, 2H), 3,75 - 3,59 (m, 6H), 3,34 - 2,98 (m, 10H), 2,67 (s, 3H), 2,06 - 1,93 (m, 2H), 1,83 - 1,69 (m, 2H). Seis prótons trocáveis não observados.
Exemplo 29
Ditrifluoroacetato de (R)-7-(2-(4-fluoro-3-((4-(5-metiltiofeno-2carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil) fenetilamino)-1-hidroxietil)-4-hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona
HO.
OH
a) Ácido 2-(4-fluoro-3-metilfenil)acético
HO.
[00602] 2-(4-Fluoro-3-metilfenil)acetonitrila (1 g) e hidróxido de sódio (0,8 g) foram combinados em uma mistura de metanol (10 mL) e água (3 mL). A mistura resultante foi em seguida aquecida ao refluxo durante a noite. A reação foi concentrada em vácuo e o resíduo dissolvido em água (25 mL). A fase aquosa foi lavada com éter (2 x 25 mL), acidificada com ácido clorídrico concentrado e extraída com éter (3 x 25 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secadas sobre sulfato de sódio, filtradas e evaporadas em vácuo para fornecer o composto do subtítulo como um sólido branco. Produção 1,1 g.
[00603] 1H RMN (300 MHz, D6-DMSO) δ 12,31 (s, 1H), 7,20 - 6,99 (m, 3H), 3,52 (s, 2H), 2,21 (s, 3H).
b) (9-(2-Fluoro-5-(2-hidroxietil)benzil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5] undecan-4-il)(5-metiltiofen-2-il)metanona
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[00604] Peróxido de benzoila (0,058 g) foi adicionado a uma mistura de ácido 2-(4-fluoro-3-metilfenil)acético (0,6 g) (exemplo 29, etapa a) e M-bromossuccinimida (0,7 g) em DCM (10 mL). A mistura resultante foi aquecida ao refluxo durante 4 horas. DCM (10 mL) e água (20 mL) foram adicionadas e a fase orgânica separada. A fase orgânica foi lavada com salmoura (20 mL), secada sobre sulfato de sódio, filtrada e evaporada em vácuo. O resíduo foi redissolvido em THF (10 mL) e resfriado em um banho de gelo. Uma solução de sulfeto de dimetil borano (2M em THF, 4,46 mL) foi adicionada gota a gota e a mistura agitada durante 1 hora. Metanol (2 mL) foi cautelosamente adicionado, e uma vez que o borbulhamento cessou, o solvente foi evaporado em vácuo. O resíduo foi redissolvido em acetonitrila (10 mL) e trifluoroacetato de (5-metiltiofen-2-il)(1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4il)metanona (exemplo 9, etapa b) (0,7 g) foi adicionado, seguido por trietilamina (1,49 mL). A mistura resultante foi agitada durante a noite e em seguida concentrada em vácuo. A purificação foi por cromatografia de sílica-gel eluindo com de 99:1:0,1 a 97:3:0,3 de gradiente de DCM:metanol:amônia aquosa ‘880’. As frações contendo o produto foram combinadas e evaporadas para fornecer o composto do subtítulo como uma espuma. Produção 0,46 g.
[00605] m/z 433 (M+H)+ (APCI) [00606] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO) δ 7,22 - 7,16 (m, 2H), 7,14 7,07 (m, 1H), 6,97 (dd, J = 10,0, 8,5 Hz, 1H), 6,80 - 6,76 (m, 1H), 3,67 -
3,57 (m, 6H), 3,50 - 3,45 (m, 4H), 2,70 (t, J = 6,8 Hz, 2H), 2,46 (s, 3H),
2,41 - 2,35 (m, 4H), 1,76 - 1,67 (m, 2H), 1,55 - 1,45 (m, 2H). Um próton trocável não observado.
c) Ditrifluoroacetato de (R)-7-(2-(4-fluoro-3-((4-(5-metiltiofeno-2carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil) fenetilami-
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182/638 no)-1-hjdroxjetjl)-4-hjdroxjbenzo[d]tjazol-2(3H)-ona
OH [00607] TFA (0,032 mL) foi adicionado à solução de (9-(2-fluoro-5(2-hidroxietil)benzil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4-il)(5metiltiofen-2-il)metanona (exemplo 29, etapa b) (0,18 g) em DCM (5 mL) a 0°C. A mistura foi agitada durante 5 minutos em seguida periodinano Dess-Martin (0,27 g) foi adicionado. A solução amarela resultante foi deixada aquecer para TA e agitada durante 1 hora. Uma mistura de solução de tiossulfato de sódio saturada (5 mL), solução de bicarbonato de sódio saturada (5 mL) e acetato de etila (25 mL) foi em seguida adicionada e a mistura resultante agitada vigorosamente durante 10 minutos. A fase aquosa foi separada e extraída com acetato de etila (25 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, acidificadas com algumas gotas de ácido acético, secadas sobre sulfato de sódio, filtradas e evaporadas em vácuo. O resíduo foi dissolvido em metanol (5 mL), ácido acético (0,012 mL) e cloridrato de (R)-7-(2-amino-1-hidroxietil)-4-hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona (WO2007027134, exemplo 1, etapa d) (0,17 g) foi em seguida adicio nado e a mistura agitada durante 5 minutos antes do resfriamento em um banho de gelo. Cianoboroidreto de sódio (0,039 g) foi em seguida adicionado, a mistura deixada aquecer para TA e agitada durante a noite. O solvente foi evaporado em vácuo. A purificação foi por cromatografia de sílica-gel eluindo com 94,5:5:0,5 a 89:10:1 de gradiente de DCM:metanol:amônia aquosa ‘880’. As frações contendo o produto foram combinadas, evaporadas em vácuo. Além disso, purificação foi por HPLC preparativa (Sunfire®, Gradiente: 5-30% de acetonitrila em
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TFA aquosa a 0,2%). As frações contendo o produto foram combinadas, evaporadas em vácuo e o resíduo triturado com dietil éter para fornecer o composto do título como um sólido branco. Produção 0,11 g.
[00608] m/z 641 (M+H)+ (APCI) [00609] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO, 90°C) δ 7,47 - 7,35 (m, 2H),
7,29 - 7,17 (m, 2H), 6,93 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 6,82 - 6,75 (m, 2H), 4,91 (dd, J = 8,1, 5,3 Hz, 1H), 4,32 - 4,20 (m, 2H), 3,74 - 3,61 (m, 4H), 3,53 (s, 2H), 3,28 - 2,93 (m, 10H), 2,46 (s, 3H), 2,05 - 1,97 (m, 2H), 1,82 -
1,74 (m, 2H). Seis prótons trocáveis não observados.
Exemplo 30
Ditrifluoroacetato de 5-(9-(3-(2-(2-hidróxi-2-(4-hidróxi-2-oxo-2,3-dihidrobenzo[d]tiazol-7-il)etilamino)etil)benzil)-1-oxa-4,9-diazaespiro [5,5]undecano-4-carbonil)tiofeno-2-carboxilato de (R)-metila
a) 4-(5-(metoxicarbonil)tiofeno-2-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro [5,5]undecano-9-carboxilato de terc-butila [00610] Uma
de
1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecano-9-carboxilato de terc-butila (WuXi PharmaTech) (0,6 g) e ácido tiofeno-2,5-dicarboxílico(1,7 g) em DMF (10 mL) foi tratada com trietilamina (2,75 mL) e resfriada para 0°C. HATU (1,013 g) foi adicionado e a mistura agitada a 20°C durante 2 horas. A mistura foi dividida entre acetato de etila e salmoura contendo ácido
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184/638 acético (2 mL), a camada orgânica foi lavada duas vezes com salmoura, secada sobre sulfato de sódio, filtrada e o solvente evaporado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia de sílica rápida usando 1% de ácido acético em acetato de etila como solvente. Este material foi dissolvido em THF (30 mL), tratado com carbonildiimidazol (0,332 g) e a mistura foi deixada descansar a 45°C durante 1 hora. Metanol (20 mL) foi adicionado e a reação aquecida a 50°C durante 30 minutos. O solvente foi removido sob pressão reduzida e o resíduo foi dividido entre acetato de etila e salmoura. A camada orgânica foi secada sobre sulfato de sódio, filtrada e o solvente evaporado sob pressão reduzida. O produto bruto foi purificado por cromatografia de sílica rápida usando 40% de acetato de etila em iso-hexano como solvente. As frações puras foram evaporadas até a secura para fornecer o composto do subtítulo. Produção 0,45 g.
[00611] 1H RMN (400 MHz, Ü6-DMSO, 90°C) δ 7,72 (d, J = 3,8 Hz,
1H), 7,40 (d, J = 3,8 Hz, 1H), 3,85 (s, 3H), 3,72 - 3,68 (m, 2H), 3,63 3,59 (m, 2H), 3,58 - 3,51 (m, 2H), 3,49 (s, 2H), 3,12 - 3,04 (m, 2H),
1,77 - 1,70 (m, 2H), 1,46 - 1,40 (m, 2H), 1,39 (s, 9H).
b) Trifluoroacetato de 5-(1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecano-4carbonil)tiofeno-2-carboxilato de metila
HN [00612] Ácido trifluoroacético(10 mL) foi adicionado à solução de 4(5-(metoxicarbonil)tiofeno-2-carbonil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecano-9-carboxilato de terc-butila (exemplo 30, etapa a) (0,45 g) em diclorometano (40 mL) e a mistura resultante foi deixada descansar a 20°C durante 1 hora. Tolueno (50 mL) foi adicionado e os solventes removidos sob pressão reduzida para fornecer o composto do subtítulo. Produção 0,46 g.
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185/638 [00613] m/z 325 (M+H)+ (APCI)
c) 5-(9-(3-(2-Hidroxietil)benzil)-1 -oxa-4,9-diazaespiro[5,5] undecano-4-carbonil)tiofeno-2-carboxilato de metila
[00614] Uma solução de trifluoroacetato de 5-(1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecano-4-carbonil)tiofeno-2-carboxilato de metila (exemplo 30, etapa b) (0,46 g) e 2-(3-(bromometil)fenil)etanol (exemplo 6, etapa a) (0,226 g) em acetonitrila (10 mL) foi tratada com trietilamina (0,44 mL) e a mistura agitada a 20°C durante 2 horas. O solvente foi evaporado sob pressão reduzida e o resíduo dividido entre acetato de etila e solução de bicarbonato de sódio saturada. A camada orgânica foi secada sobre sulfato de sódio, filtrada e o solvente evaporado sob pressão reduzida. O produto bruto foi purificado por cromatografia de sílica rápida usando 1% de trietilamina e 3% de metanol em diclorometano como solvente. As frações puras foram evaporadas até a secura para fornecer o composto do subtítulo. Produção 0,41 g.
[00615] m/z 459 (M+H)+ (APCI)
d) Ditrifluoroacetato de 5-(9-(3-(2-(2-Hidróxi-2-(4-hidróxi-2-oxo-2,3di-hidrobenzo[d]tiazol-7-il)etilamino)etil)benzil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecano-4-carbonil)tiofeno-2-carboxilato de (R)metila
[00616] Uma solução de 5-(9-(3-(2-hidroxietil)benzil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecano-4-carbonil)tiofeno-2-carboxilato de metila (exemplo 30, etapa c) (0,262 g) em diclorometano (10 mL) foi tratada
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186/638 com ácido trifluoroacético (0,044 mL) seguida por Periodinano DessMartin (0,339 g) e a mistura resultante agitada a 20°C durante 1 hora. A mistura reacional foi tratada com solução de tiossulfato de sódio saturada (10 mL) e solução de bicarbonato de sódio saturada (10 mL) e acetato de etila (10 mL) e agitada vigorosamente durante 5 minutos. A mistura foi extraída duas vezes com acetato de etila, os orgânicos combinados foram lavados com solução de bicarbonato de sódio saturada, secados sobre sulfato de sódio, filtrados, tratados com ácido acético (0,033 mL) e o solvente evaporado sob pressão reduzida. O resíduo foi dissolvido em metanol (2 mL) e adicionado à solução a 0°C de cloridrato de (R)-7-(2-amino-1-hidroxietil)-4-hidroxibenzo[d]tiazol2(3H)-ona (WO2007027134, exemplo 1, etapa d) (0,15 g) e ácido acético (0,033 mL) em metanol (10 mL). Cianoboroidreto de sódio (0,054 g) foi adicionado e a mistura agitada à temperatura ambiente durante 18 horas. A maioria do metanol foi evaporada sob pressão reduzida e o restante dividido entre THF (50 mL), salmoura (10 mL) e solução de bicarbonato de sódio saturada (1 mL). A camada orgânica foi secada sobre sulfato de sódio, filtrada e o solvente removido sob pressão reduzida. O produto bruto foi purificado por HPLC preparativa (Sunfire®, Gradiente: 10-40% de acetonitrila em 0,2% de TFA aquoso). As frações contendo o composto desejado foram evaporadas até a secura para fornecer o composto do título. Produção 0,175 g.
[00617] m/z 667 (M+H)+ (APCI) [00618] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO, 90°C) δ 11,27 (s, 1H),7,72 (d, J = 3,8 Hz, 1H), 7,44 - 7,33 (m, 5H), 6,93 (d, J = 8,5 Hz, 1H),6,77 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 4,95 - 4,89 (m, 1H), 4,30 (s, 2H), 3,85 (s, 3H),3,74
- 3,69 (m, 2H), 3,66 - 3,61 (m, 2H), 3,53 (s, 2H), 3,28 - 2,98 (m, 10H),
2,09 - 1,99 (m, 2H), 1,77 (s, 2H). Cinco prótons trocáveis não observados.
Exemplo 31
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187/638
Ditrifluoroacetato de 5-(9-(3-(2-(2-hidróxi-2-(8-hidróxi-2-oxo-1,2-dihidroquinolin-5-il)etilamino)etil)benzil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5] undecano-4-carbonil)tiofeno-2-carboxilato de (R)-metila
a) 5-(9-(3-(2-(2-(terc-butildimetilsililóxi)-2-(8-hidróxi-2-oxo-1,2-di- hidroquinolin-5-il)etilamino)etil)benzil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5] undecano-4-carbonil)tiofeno-2-carboxilato de (R)-metila
[00619] Uma solução de 5-(9-(3-(2-hidroxietil)benzil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecano-4-carbonil)tiofeno-2-carboxilato de metila (exemplo 30, etapa c) (0,137 g) em diclorometano (10 mL) foi tratada com ácido trifluoroacético (0,023 mL) seguida por periodinano DessMartin (0,178 g) e a mistura resultante agitada a 20°C durante 1 hora. A mistura reacional foi tratada com solução de tiossulfato de sódio saturada (10 mL) e solução de bicarbonato de sódio saturada (10 mL) e acetato de etila (10 mL) e agitada vigorosamente durante 5 minutos. A mistura foi extraída duas vezes com acetato de etila, os orgânicos combinados foram lavados com solução de bicarbonato de sódio saturada, secados sobre sulfato de sódio, filtrados, tratados com ácido acético (0,017 mL) e o solvente evaporado sob pressão reduzida para produzir o aldeído intermediário cru (0,13 g). O aldeído foi dissolvido em metanol (2 mL) e adicionado a uma solução de (R)-5-(2-amino-1Petição 870190058499, de 25/06/2019, pág. 193/650
188/638 (terc-butildimetilsililóxi)etil)-8-hidroxiquinolin-2(1H)-ona (WO2004106333) (0,10 g) e ácido acético (0,017 mL) em metanol (10 mL). A mistura foi resfriada em um banho de gelo e tratada com triacetoxiboroidreto de sódio (0,095 g) e em seguida a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 18 horas. O metanol foi removido sob pressão reduzida e o resíduo foi dividido entre solução de bicarbonato de sódio saturada e acetato de etila, a camada orgânica foi secada sobre sulfato de sódio, filtrada e o solvente removido sob pressão reduzida. O produto bruto foi purificado por cromatografia de sílica rápida usando 1% amônia aquosa‘880’ e 9% de metanol em diclorometano como solvente. Frações puras foram evaporadas até a secura para fornecer o composto do subtítulo. Produção 0,108 g.
[00620] m/z 775 (M+H)+ (APCI)
b) ditrifluoroacetato de 5-(9-(3-(2-(2-hidróxi-2-(8-hidróxi-2-oxo-1,2di-hidroquinolin-5-il)etilamino)etil)benzil)-1-oxa-4,9-diazaespiro [5,5]undecano-4-carbonil)tiofeno-2-carboxilato de (R)-metila
OH
HO [00621] 5-(9-(3-(2-(2-(terc-butildimetilsililóxi)-2-(8-hidróxi-2-oxo-1,2di-hidroquinolin-5-il)etilamino)etil)benzil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecano-4-carbonil)tiofeno-2-carboxilato de (R)metila (exemplo 31, etapa a) (0,108 g) em THF (4 mL) foi tratado com tri-hidrofluoreto de trietilamina (0,029 mL) em metanol (1 mL) e a solução deixada descansar a 20°C durante 18 horas. Os solventes foram removidos sob pressão reduzida e o produto bruto foi purificado por HPLC preparativa (Sunfire®, gradiente: 10-40% de acetonitrila em 0,2% de TFA aquoso). As frações contendo o composto desejado foram evaporadas até a secura para fornecer o composto do título. Pro
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189/638 dução 0,055 g.
[00622] m/z 661 (M+H)+ (APCI) [00623] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO, 90°C) δ 8,18 (d, J = 9,7 Hz,
1H), 7,72 (d, J = 3,8 Hz, 1H), 7,45 - 7,32 (m, 5H), 7,14 (d, J = 8,2 Hz,
1H), 7,00 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 6,54 (d, J = 9,7 Hz, 1H), 5,40 - 5,34 (m,
1H), 4,30 (s, 2H), 3,85 (s, 3H), 3,75 - 3,70 (m, 2H), 3,66 - 3,61 (m, 2H),
3,53 (s, 2H), 3,29 (t, J = 8,1 Hz, 2H), 3,22 - 3,01 (m, 8H), 2,10 - 1,99 (m, 2H), 1,78 (s, 2H). Seis prótons trocáveis não observados.
Exemplo 32
Ditrifluoroacetato de (R)-7-(2-(3,4-difluoro-5-((4-(5-metiltiofeno-2carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil) fenetilamino)-1-hidroxietil)-4-hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona
F
HO^J ÍX >o
N I H
OH
a) 2-(3,4-Difluorofenil)etanol
HO—
F [00624] Uma solução de dissulfeto de dimetila de borano (2M em THF, 18,30 mL) foi adicionada cautelosamente a uma solução de ácido 2-(3,4-difluorofenil)acético (2,1 g) em THF (20 mL) a 0°C. A mistura resultante foi deixada aquecer para TA e agitada durante 1 hora. A reação foi resfriada em um banho de gelo e metanol (5 mL) foi adicionado gota a gota. A reação foi agitada até o borbulhamento cessar e o solvente evaporado em vácuo. A purificação foi por cromatografia de sílica-gel eluindo com iso-hexano para 4:1 de iso-hexano:acetato de etila. As frações contendo produto foram combinadas e evaporadas
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190/638 em vácuo para fornecer o composto do subtítulo como um óleo claro. Produção 1,92 g.
[00625] H RMN (300 MHz, CDC1s) δ 7,14 - 7,00 (m, 2H), 6,98 -
6,90 (m, 1H), 3,85 (t, J = 6,4 Hz, 2H), 2,82 (t, J = 6,4 Hz, 2H). Um próton trocável não observado.
b) 2,3-Difluoro-5-(2-hidroxietil)benzaldeído
H
HO
F [00626] 2,2,6,6-Tetrametilpiperidina (6,15 mL) foi adicionado à solução de n-butil lítio em hexanos (1,6M, 22,8 mL) a -70°C. Uma solução de 2-(3,4-difluorofenil)etanol (exemplo 32, etapa a) (1,92 g) em THF (25 mL) foi adicionada gota a gota. THF (25 mL) foi adicionado e a mistura agitada a -70°C durante 6 horas. DMF (4,7 mL) foi em seguida adicionado e a mistura agitada durante 1 hora a -70°C. A mistura foi em seguida deixada aquecer para TA e agitada durante 70 horas. Solução de HCl aquosa (2M, 10 mL) foi adicionada seguida por acetato de etila (20 mL) e as camadas separadas. A fase aquosa foi extraída com acetato de etila (2 x 20 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (20 mL), secadas sobre sulfato de magnésio, filtradas e evaporadas em vácuo. A purificação foi por cromatografia de sílica-gel eluindo com 4:1 a 2:1 de gradiente de isohexano:dietil éter. As frações contendo produto foram combinadas e evaporadas em vácuo para fornecer o composto do subtítulo como um óleo amarelo. Produção 1,9 g.
[00627] 1H RMN (400 MHz, CDC13) δ 10,33 (s, 1H), 7,54 - 7,47 (m,
1H), 7,39 - 7,32 (m, 1H), 3,92 - 3,86 (m, 2H), 2,88 (t, J = 6,3 Hz, 2H). Um próton trocável não observado.
c) (9-(2,3-Difluoro-5-(2-hidroxietil)benzil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5] undecan-4-il)(5-metiltiofen-2-il)metanona
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HO
F
O
N [00628] Trifluoroacetato de (5-metiltiofen-2-il)(1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-4-il)metanona (exemplo 9, etapa b) (0,53 g) foi adicionado à solução de 2,3-difluoro-5-(2-hidroxietil)benzaldeído (exemplo 32, etapa b) (0,25 g) e ácido acético (0,08 mL) em metanol (5 mL). A reação foi agitada durante 30 min e resfriada em um banho de gelo. Cianoboroidreto de sódio (0,13 g) foi em seguida adicionado, a mistura deixada aquecer para TA e agitada durante 18 horas. A reação foi concentrada em vácuo. A purificação foi por cromatografia de sílica-gel eluindo com 99:1:0,1 a 97:3:0,3 de gradiente de DCM:metanol: amônia aquosa ’880’. As frações contendo produto foram combinadas e evaporadas em vácuo para fornecer o composto do subtítulo como uma goma. Produção 0,08 g.
[00629] m/z 451 (M+H)+ (APCI) [00630] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO, 90°C) δ 7,18 (d, J = 3,6 Hz,
1H), 7,14 - 7,06 (m, 1H), 7,04 - 6,99 (m, 1H), 6,80 - 6,77 (m, 1H), 4,34 -
4,29 (m, 1H), 3,68 - 3,57 (m, 6H), 3,53 - 3,46 (m, 4H), 2,70 (t, J = 6,7 Hz, 2H), 2,47 - 2,34 (m, 7H), 1,77 - 1,67 (m, 2H), 1,55 - 1,45 (m, 2H).
d) ditrifluoroacetato de (R)-7-(2-(3,4-difluoro-5-((4-(5-metiltiofeno-
2-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil) fenetilamino)-1-hidroxietil)-4-hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona
HO.
OH [00631] TFA (0,013 mL) foi adicionado à solução de (9-(2,3-difluoro
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5-(2-hidroxietil)benzil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4-il)(5metiltiofen-2-il)metanona (exemplo 32, etapa c) (0,077 g) em DCM (2 mL) a 0°C. A mistura foi agitada durante 5 minutos em seguida periodinano Dess-Martin (0,11 g) foi adicionado. A solução amarela resultante foi deixada aquecer para TA e agitada durante 1 hora. Uma mistura de solução de tiossulfato de sódio saturada (1 mL), solução de bicarbonato de sódio saturada (1 mL) e acetato de etila (5 mL) foi em seguida adicionada e a mistura resultante agitada vigorosamente durante 10 minutos. A fase aquosa foi separada e extraída com acetato de etila (25 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, acidificadas com algumas gotas de ácido acético, secadas sobre sulfato de sódio, filtradas e evaporadas em vácuo. O resíduo foi dissolvido em metanol (5 mL), ácido acético (0,005 mL) e cloridrato de (R)-7-(2-amino-1-hidroxietil)-4-hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona (WO2007027134, exemplo 1, etapa d) (0,045 g) foram em seguida adicionados e a mistura agitada durante 5 minutos antes do resfriamento em um banho de gelo. Cianoboroidreto de sódio (0,016 g) foi em seguida adicionado, a mistura deixada aquecer para TA e agitada durante a noite. O solvente foi evaporado em vácuo. A purificação foi por cromatografia de sílica-gel eluindo com 94,5:5:0,5 a 89:10:1 de gradiente de DCM:metanol:amônia aquosa ‘880’. As frações contendo produto foram combinadas e evaporadas em vácuo. Além disso, a purificação foi por HPLC preparativa (Sunfire®, gradiente: 5-30% de acetonitrila em 0,2% de TFA aquoso). As frações contendo produto foram combinadas, evaporadas em vácuo e o resíduo triturado com éter para fornecer o composto do título como um sólido branco. Produção 0,052g.
[00632] m/z 659 (M+H)+ (APCI) [00633] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO, 90°C) δ 11,27 (s, 1H), 7,46 -
7,37 (m, 1H), 7,28 - 7,23 (m, 1H), 7,20 (d, J = 3,6 Hz, 1H), 6,93 (d, J =
Petição 870190058499, de 25/06/2019, pág. 198/650
193/638
8,2 Hz, 1H), 6,81 - 6,74 (m, 2H), 4,91 (dd, J = 8,1, 5,0 Hz, 1H), 4,28 -
4,19 (m, 2H), 3,74 - 3,62 (m, 4H), 3,53 (s, 2H), 3,25 (t, J = 7,9 Hz, 2H),
3,15 - 2,95 (m, 8H), 2,46 (s, 3H), 2,01 - 1,93 (m, 2H), 1,80 - 1,67 (m, 2H). Cinco prótons trocáveis não observados.
Exemplo 33
Ditrifluoroacetato de (R)-4-hidróxi-7-(1 -hidróxi-2-(3-((8-(5metiltiofeno-2-carbonil)-5-oxa-2,8-diazaespiro[3,5]nonan-2-il)metil) fenetilamino)etil)benzo[d]tiazol-2(3H)-ona
a) 1-Benzidrilazetidin-3-ona
[00634] Trietilamina (24,7 mL) foi adicionada à solução de 1benzidrilazetidin-3-ol (5 g) em DMSO (25 mL). Uma solução de trióxido de enxofre de piridina (18 g) em DMSO (65 mL) foi adicionada gota a gota e a mistura agitada a 20°C durante 90 minutos. A mistura foi vertida em gelo/água e extraída duas vezes com acetato de etila, os orgânicos combinados foram lavados três vezes com salmoura antes de ser secados sobre sulfato de sódio, filtrados e o solvente removido sob pressão reduzida. O produto bruto foi purificado por cromatografia de sílica rápida usando 2% de trietilamina em iso-hexano como solvente. Frações puras foram evaporadas até a secura para fornecer o composto do subtítulo. Produção 2,9 g.
[00635] 1H RMN (400 MHz, CDCh) δ 7,50 - 7,46 (m, 4H), 7,30 (t, J =
11,4 Hz, 4H), 7,24 - 7,19 (m, 2H), 4,59 (s, 1H), 4,00 (s, 4H).
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b) 1 -Benzidril-3-(trimetilsililóxi)azetidina-3-carbonitrila
[00636] Cianeto de tetrabutilamônio (0,283 g) em diclorometano (50 mL) foi adicionado gota a gota durante 15 minutos a uma solução agitada de 1-benzidrilazetidin-3-ona (exemplo 33, etapa a) (2,5 g) e cianeto de trimetilsilila (2,82 mL) em diclorometano (50 mL) a 20°C sob nitrogênio. A mistura foi agitada a 20°C durante 1 hora. A mistura reacional foi lavada com água, a camada orgânica foi secada sobre sulfato de sódio, filtrada e o solvente evaporado sob pressão reduzida para fornecer o composto do subtítulo. Produção 3,5 g. Usado diretamente sem purificação.
c) 3-(Aminometil)-1 -benzidrilazetidin-3-ol
[00637] Uma solução de 1-benzidril-3-(trimetilsililóxi)azetidina-3carbonitrila (exemplo 33, etapa b) (3,5 g) em THF (50 mL) foi tratada com complexo de borano metilsulfeto (2M em THF, 20,8 mL) e a mistura resultante aquecida a 70°C durante 1 hora sob nitrogênio. A mistura foi resfriada para temperatura ambiente e extinta cuidadosamente com metanol (50 mL) seguida por tratamento com etilenodiamina (2,81 mL). Esta mistura foi agitada a 20°C durante 1 hora e em seguida a 55°C durante 1 hora. A mistura foi resfriada para temperatura ambiente e tratada com fluoreto de tetrabutilamônio (1M em THF, 15,6 mL), em seguida agitada em temperatura ambiente durante 40 minutos. Solventes foram evaporados sob pressão reduzida e o resíduo dividido entre acetato de etila e salmoura. A camada orgânica foi secada sobre sulfa
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195/638 to de sódio, filtrada e o solvente evaporado sob pressão reduzida. O produto bruto foi purificado por cromatografia de sílica rápida, gradiente de eluição de 6 a 7% de metanol em diclorometano com 1% de trietilamina. Frações puras foram evaporadas até a secura para fornecer o composto do subtítulo. Produção 1,95 g.
[00638] m/z 269 (M+H)+ (APCI)
d) N-((1-Benzidril-3-hidroxiazetidin-3-il)metil)-2-cloroacetamida [00639] Cloreto de cloroacetila (0,846 mL) foi adicionado gota a gota durante 30 minutos a uma mistura vigorosamente agitada de 3(aminometil)-1-benzidrilazetidin-3-ol (exemplo 33, etapa c) (2,1 g) em acetato de etila (100 mL) e carbonato de potássio (3,03 g) em água (100 mL) a 0°C. A mistura foi agitada durante mais 30 minutos a 0°C e em seguida extraída com acetato de etila, a camada orgânica foi secada sobre sulfato de sódio, filtrada e o solvente evaporado sob pressão reduzida para fornecer o composto do subtítulo. Produção 2,6 g.
[00640] m/z 345 (M+H)+ (APCI)
e) 2-Benzidril-5-oxa-2,8-diazaespiro[3,5]nonan-7-ona [00641] V-((1-Benzidril-3-hidroxiazetidin-3-il)metil)-2-cloroacetamida (exemplo 33, etapa d) (2,6 g) em THF (50 mL) foi adicionado gota a gota durante 90 minutos a uma solução vigorosamente agitada a 75°C de terc-butóxido de potássio (1M em terc-butanol, 15,08 mL) e THF (150 mL) sob nitrogênio. Após a adição ser concluída a mistura foi agitada a 75°C durante 10 minutos e em seguida resfriada para tempera
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196/638 tura ambiente. Os solventes foram removidos sob pressão reduzida e o resíduo foi dividido entre acetato de etila e salmoura. A camada orgânica foi secada sobre sulfato de sódio, filtrada e o solvente removido sob pressão reduzida para fornecer o composto do subtítulo. Produção 2,05 g.
[00642] m/z 309 (M+H)+ (APCI)
f) 2-Benzidril-5-oxa-2,8-diazaespiro[3,5]nonano [00643] Complexo de borano-sulfeto de metila (2M em THF, 10,7 mL) foi adicionado à solução de 2-benzidril-5-oxa-2,8diazaespiro[3,5]nonan-7-ona (exemplo 33, etapa e) (2 g) em THF seco (40 mL) e a solução resultante foi agitada a 70°C sob nitrogênio durante 50 minutos. A mistura foi resfriada para temperatura ambiente e tratada gota a gota com metanol (40 mL) seguida por N1,N2dimetiletano-1,2-diamina (3,43 g). A mistura foi aquecida a 70°C durante 6 horas. O solvente foi removido sob pressão reduzida e o resíduo dividido entre acetato de etila e salmoura. A camada orgânica foi secada sobre sulfato de sódio, filtrada e o solvente evaporado sob pressão reduzida. O produto bruto foi purificado por cromatografia de sílica rápida usando 1% de trietilamina e 5% de metanol em diclorometano como solvente. Frações puras foram evaporadas até a secura para fornecer o composto do subtítulo. Produção 1,35 g.
[00644] m/z 295 (M+H)+ (APCI)
g) (2-Benzidril-5-oxa-2,8-diazaespiro[3,5]nonan-8-il)(5-metiltiofen-
2-il)metanona
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[00645] HATU (2,267 g) foi adicionado em uma porção a uma solução de ácido 5-metiltiofeno-2-carboxílico (0,652 g) e 2-benzidril-5-oxa-
2,8-diazaespiro[3,5]nonano (exemplo 33, etapa f) (1,35 g) e trietilamina (1,917 mL) em DMF (20 mL) a 0°C. O banho de resfriamento foi removido e a mistura agitada em temperatura ambiente durante 2 horas. A mistura foi dividida entre acetato de etila e salmoura, a camada orgânica foi lavada duas vezes com salmoura antes de ser secada sobre sulfato de sódio, filtrada e o solvente removido sob pressão reduzida. O produto bruto foi purificado por cromatografia de sílica rápida, gradiente de eluição 0,4 a 5% de metanol em diclorometano. Frações puras foram evaporadas até a secura para fornecer o composto do subtítulo. Produção 1,5 g.
[00646] m/z 419 (M+H)+ (APCI)
h) cloridrato de (5-metiltiofen-2-il)(5-oxa-2,8-diazaespiro[3,5] nonan-8-il)metanona
HN [00647] Cloroformiato de 1-cloroetila (0,508 mL) foi adicionado gota a gota a uma solução de (2-benzidril-5-oxa-2,8-diazaespiro[3,5]nonan-
8-il)(5-metiltiofen-2-il)metanona (exemplo 33, etapa g) (1,5 g) em acetonitrila (30 mL) a 0°C. A mistura foi em seguida aquecida ao refluxo durante 1 hora sob nitrogênio. O solvente foi removido sob pressão reduzida e o resíduo dissolvido em metanol (50 mL). Esta solução foi aquecida ao refluxo sob nitrogênio durante 30 minutos. O solvente foi removido sob pressão reduzida e o resíduo triturado com acetato de
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198/638 etila (40 mL) e em seguida com acetonitrila (7 mL) para produzir o composto do subtítulo. Produção 0,29 g.
[00648] m/z 253 (M+H)+ (APCI)
i) (2-(3-(2-Hidroxietil)benzil)-5-oxa-2,8-diazaespiro[3,5]nonan-8-il) (5-metiltiofen-2-il)metanona
[00649] 2-(3-(Bromometil)fenil)etanol (exemplo 6, etapa a) (0,281 g) foi adicionado à solução de cloridrato de (5-metiltiofen-2-il)(5-oxa-2,8diazaespiro[3,5]nonan-8-il)metanona (exemplo 33, etapa h) (0,29 g) e trietilamina (0,42 mL) em acetonitrila (15 mL) a 20°C e a mistura resultante agitada durante 3 horas a 20°C. O solvente foi removido sob pressão reduzida e o resíduo dividido entre acetato de etila e salmoura. A camada orgânica foi secada sobre sulfato de sódio, filtrada e o solvente removido sob pressão reduzida. O produto bruto foi purificado por cromatografia de sílica rápida usando 3% de metanol em diclorometano com 1% de trietilamina como solvente. Frações puras foram evaporadas até a secura para fornecer o composto do subtítulo. Produção 0,32 g.
[00650] m/z 387 (M+H)+ (APCI)
j) Ditrifluoroacetato de (R)-4-hidróxi-7-(1-hidróxi-2-(3-((8-(5- metiltiofeno-2-carbonil)-5-oxa-2,8-diazaespiro[3,5]nonan-2-il)metil) fenetilamino)etil)benzo[d]tiazol-2(3H)-ona
[00651]
Uma solução de (2-(3-(2-hidroxietil)benzil)-5-oxa-2,8Petição 870190058499, de 25/06/2019, pág. 204/650
199/638 diazaespiro[3,5]nonan-8-il)(5-metiltiofen-2-il)metanona (exemplo 33, etapa i) (0,16 g) em diclorometano (10 mL) foi tratada com ácido trifluoroacético (0,032 mL) seguida por periodinano Dess-Martin (0,246 g) e a mistura resultante agitada a 20°C durante 1 hora. A mistura reacional foi tratada com solução de tiossulfato de sódio saturada (10 mL) e solução de bicarbonato de sódio saturada (10 mL) e acetato de etila (10 mL) e agitada vigorosamente durante 5 minutos. A mistura foi extraída duas vezes com acetato de etila, os orgânicos combinados foram lavados com solução de bicarbonato de sódio saturada, secados sobre sulfato de sódio, filtrados, tratados com ácido acético (0,024 mL) e o solvente evaporado sob pressão reduzida. O resíduo foi dissolvido em metanol (2 mL) e adicionado à solução a 0°C de cloridrato de (R)-7-(2amino-1-hidroxietil)-4-hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona (WO2007027134, exemplo 1, etapa d) (0,15 g) e ácido acético (0,024 mL) em metanol (10 mL). Cianoboroidreto de sódio (0,039 g) foi adicionado e a mistura agitada à temperatura ambiente durante 18 horas. A maioria do metanol foi evaporada sob pressão reduzida e o restante dividido entre THF (50 mL), salmoura (10 mL) e solução de bicarbonato de sódio saturada (1 mL). A camada orgânica foi secada sobre sulfato de sódio, filtrada e o solvente removido sob pressão reduzida. O produto bruto foi purificado por HPLC preparativa (Sunfire®, gradiente: 10-40% de acetonitrila em 0,2% de TFA aquoso). As frações contendo o composto desejado foram evaporadas até a secura para fornecer o composto do título. Produção 0,13 g.
[00652] m/z 595 (M+H)+ (APCI) [00653] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO, 90°C) δ 11,26 (s, 1H), 7,42 -
7,29 (m, 4H), 7,24 (d, J = 3,6 Hz, 1H), 6,93 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 6,82 -
6,75 (m, 2H), 4,95 - 4,88 (m, 1H), 4,36 (s, 2H), 4,09 - 3,97 (m, 4H), 3,87 (s, 2H), 3,73 - 3,69 (m, 2H), 3,66 - 3,62 (m, 2H), 3,24 (t, J = 8,1 Hz, 2H), 3,15 - 2,97 (m, 4H), 2,46 (s, 3H). Cinco prótons trocáveis não
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200/638 observados.
Exemplo 34
Ditrifluoroacetato de (R)-7-(2-(2,6-difluoro-3-((4-(5-metiltiofeno-2carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil) fenetilamino)-1-hidroxietil)-4-hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona
HO.
OH
a) (9-(2,4-Difluoro-3-(2-hidroxietil)benzil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5] undecan-4-il)(5-metiltiofen-2-il)metanona
HO [00654] Peróxido de dibenzoíla (0,03 g) foi adicionado a uma mistura de NBS (0,53 g) e ácido 2-(2,6-difluoro-3-metilfenil)acético (0,5 g) em DCM (10 mL). A reação foi aquecida ao refluxo durante 4 horas. DCM (10 mL) e água (20 mL) foram adicionados e a fase orgânica separada. A fase orgânica foi lavada com salmoura (20 mL), secada sobre sulfato de sódio, filtrada e evaporada. O resíduo foi novamente dissolvido em THF (10 mL) e resfriado em um banho de gelo. Uma solução de complexo de borano-sulfeto de dimetila (2M em THF, 4 mL) foi adicionada gota a gota e a mistura agitada durante 1 hora. Metanol (2 mL) foi cautelosamente adicionado gota a gota e uma vez que o borbulhamento cessou o solvente foi evaporado. O resíduo foi novamente dissolvido em acetonitrila (10 mL) e trifluoroacetato de (5metiltiofen-2-il)(1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4-il)metanona (exemplo 9, etapa b) (0,8 g) foi adicionado seguido por trietilamina (1,12 mL). A mistura resultante foi agitada durante a noite, evaporada e purificada por cromatografia de sílica-gel eluindo com 99:1:0,1 a 97:3:0,3 de gradiente de DCM:metanol:amônia aquosa ‘880’ para for
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201/638 necer o composto do subtítulo como uma espuma clara. Produção 0,37 g.
[00655] m/z 451(M+H)+ (APCI)
b) 2-(2,6-Difluoro-3-((4-(5-metiltiofeno-2-carbonil)-1 -oxa-4,9- diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil)fenil)acetaldeído [00656] TFA (0,05 mL) foi adicionado à solução de (9-(2,4-difluoro-
3-(2-hidroxietil)benzil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4-il)(5metiltiofen-2-il)metanona (exemplo 34, etapa a) (0,27 g) em DCM (5 mL) a 0°C e a mistura resultante agitada durante 5 minutos. Periodinano Dess-Martin (0,38 g) foi em seguida adicionado e a mistura agitada a TA durante 45 minutos. Solução de tiossulfato de sódio saturada (5 mL), solução de bicarbonato de sódio saturada (5 mL) e acetato de etila (20 mL) foram em seguida adicionados e a mistura agitada vigorosamente durante 10 minutos. A fase aquosa foi separada e extraída com acetato de etila (20 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (20 mL), acidificadas com algumas gotas de ácido acético, secadas sobre sulfato de sódio, filtradas e evaporadas para fornecer o composto do subtítulo como uma goma clara. Produção 0,27 g.
[00657] m/z 449 (M+H)+ (APCI)
c) ditrifluoroacetato de (R)-7-(2-(2,6-difluoro-3-((4-(5-metiltiofeno-2carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil) fenetilamino)-1-hidroxietil)-4-hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona
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F.
HO^/\ h
OH [00658] Uma solução de 2-(2,6-difluoro-3-((4-(5-metiltiofeno-2carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil)fenil)acetaldeído (exemplo 34, etapa b) (0,135 g) em metanol (3 mL) foi adicionada a uma mistura de cloridrato de (R)-7-(2-amino-1-hidroxietil)-4hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona (WO2007027134, exemplo 1, etapa d) (0,11 g) e ácido acético (0,015 mL) em metanol (0,5 mL). A mistura resultante foi agitada durante 5 minutos em seguida resfriada para 0°C. Cianoboroidreto de sódio (0,025 g) foi em seguida adicionado e a mistura deixada aquecer para TA e agitada durante 2 horas. A reação foi concentrada e purificada por cromatografia de sílica-gel eluindo com 95:5:0,5 a 89:10:1 de gradiente de DCM:metanol:amônia aquosa ‘880’. As frações contendo produto foram combinadas, evaporadas e purificadas por HPLC preparativa (Sunfire®, gradiente: 5-50% de acetonitrila em 0,2% de TFA aquoso) para fornecer o composto do título como um sólido branco. Produção 0,1 g.
[00659] m/z 659 (M+H)+ (APCI) [00660] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO, 90°C) δ 11,27 (s, 1H), 7,64 -
7,50 (m, 1H), 7,26 - 7,12 (m, 2H), 6,93 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 6,84 - 6,69 (m, 2H), 4,91 (dd, J = 8,5, 4,9 Hz, 1H), 4,30 (s, 2H), 3,77 - 3,47 (m,
6H), 3,29 - 2,99 (m, 10H), 2,46 (s, 3H), 2,10 - 1,90 (m, 2H), 1,88 - 1,68 (m, 2H). Cinco prótons trocáveis não observados.
Exemplo 35
Ditrifluoroacetato de (R)-5-(2-(2,6-difluoro-3-((4-(5-metiltiofeno-2carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil) fenetilamino)-1 -hidroxietil)-8-hidroxiquinolin-2(1 H)-ona
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[00661] Uma solução de 2-(2,6-difluoro-3-((4-(5-metiltiofeno-2carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil)fenil)acetaldeído (exemplo 34, etapa b) (0,135 g) em metanol (3 mL) foi adicionada a uma mistura de (R)-5-(2-amino-1-(terc-butildimetilsililóxi)etil)-8hidroxiquinolin-2(1H)-ona (WO2004106333) (0,12 g) e ácido acético (0,017 mL) em metanol (3 mL). A mistura resultante foi agitada durante 5 minutos em seguida resfriada para 0°C. Cianoboroidreto de sódio (0,028 g) foi em seguida adicionado e a mistura deixada aquecer para TA e agitada durante 2 horas. A reação foi concentrada e o resíduo purificado por cromatografia de sílica-gel eluindo com 95:5:0,5 a 89:10:1 de gradiente de DCM:metanol:amônia aquosa ‘880’ . As frações contendo produto foram combinadas, evaporadas e o resíduo foi dissolvido em THF (3 mL), tri-hidrofluoreto de trietilamina (0,074 mL) foi adicionado e a mistura agitada durante a noite. A reação foi concentrada e o resíduo purificado por HPLC preparativa (Sunfire®, gradiente: 5-50% de acetonitrila em 0,2% de TFA aquoso). As frações contendo produto foram combinadas e evaporadas para fornecer o composto do título como um sólido branco. Produção 0,12 g.
[00662] m/z 653 (M+H)+ (APCI) [00663] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO, 90°C) δ 8,18 (d, J = 9,7 Hz,
1H), 7,64 - 7,51 (m, 1H), 7,22 - 7,10 (m, 3H), 7,00 (d, J = 8,2 Hz, 1H),
6,80 (d, J = 3,3 Hz, 1H), 6,54 (d, J = 10,0 Hz, 1H), 5,36 (dd, J = 8,7, 4,1 Hz, 1H), 4,34 (s, 2H), 3,76 - 3,46 (m, 6H), 3,33 - 3,03 (m, 10H), 2,46 (s, 3H), 2,09 - 1,95 (m, 2H), 1,87 - 1,66 (m, 2H). Seis prótons trocáveis não observados.
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204/638
Exemplo 36
Ditrifluoroacetato de (R)-4-hidróxi-7-(1 -hidróxi-2-(2-(5-((4-(2isopropiltiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9il)metil)tiofen-3-il)etilamino)etil)benzo[d]tiazol-2(3H)-ona
OH
a) (9-((4-(2-(terc-butildimetilsililóxi)etil)tiofen-2-il)metil)-1-oxa-4,9- diazaespiro[5,5]undecan-4-il)(2-isopropiltiazol-4-il)metanona
[00664] Trifluoroacetato de (2-isopropiltiazol-4-il)(1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-4-il)metanona (exemplo 22, etapa b) (0,50 g) foi adicionado a uma solução agitada de uma mistura 4:1 de 4-(2-(tercbutildimetilsililóxi)etil)tiofeno-2-carbaldeído e 3-(2-(tercbutildimetilsililóxi)etil)tiofeno-2-carbaldeído (exemplo 27, etapa b) (0,40 g) e AcOH (0,085 mL) em V-metil-2-pirrolidinona (6 mL). Após 5 min, triacetoxiboroidreto de sódio (0,48 g) foi adicionado. Após 16 horas, água foi adicionada e a mistura foi extraída com acetato de etila. A camada de acetato de etila foi lavada três vezes com água e evaporada em vácuo. Purificação por cromatografia de sílica-gel eluindo com acetato de etila:iso-hexano:trietilamina, 20:80:5 separou os dois produtos isoméricos e forneceu o composto do subtítulo como uma goma. Produção 0,27 g.
[00665] 1H RMN (400 MHz, CDCh) δ 7,81 (s, 1H), 6,86 (s, 1H), 6,75
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205/638 (s, 1H), 3,99 - 3,91 (m, 1H), 3,88 - 3,82 (m, 1H), 3,81 - 3,72 (m, 5H),
3,69 - 3,58 (m, 3H), 3,37 - 3,25 (m, 1H), 2,76 (t, J = 7,1 Hz, 2H), 2,59 -
2,44 (m, 3H), 2,41 - 2,29 (m, 1H), 1,89 - 1,81 (m, 2H), 1,78 - 1,67 (m, 1H),1,56-1,50 (m, 1H) 1,46 - 1,34 (m, 6H), 0,87 (s, 9H), 0,00 (s, 6H).
b) (9-((4-(2-Hidroxietil)tiofen-2-il)metil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5] undecan-4-il)(2-isopropiltiazol-4-il)metanona
HO [00666] Fluoreto de tetrabutilamônio (1M em tetra-hidrofurano, 2 mL) foi adicionado à solução de (9-((4-(2-(tercbutildimetilsililóxi)etil)tiofen-2-il)metil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-4-il)(2-isopropiltiazol-4-il)metanona (exemplo 36, etapa a) (0,27 g) em tetra-hidrofurano (4 mL). Após 1 hora, a solução foi evaporada em vácuo. Purificação por cromatografia de sílicagel eluindo com acetato de etila:trietilamina, 20:1 forneceu o composto do subtítulo como uma goma. Produção 0,18 g.
[00667] 1H RMN (400 MHz, CDCh) δ 7,81 (s, 1H), 6,91 (s, 1H), 6,77 (s, 1H), 4,00 - 3,90 (m, 1H), 3,87 - 3,80 (m, 3H), 3,79 - 3,72 (m, 3H),
3,71 - 3,60 (m, 3H), 3,36 - 3,25 (m, 1H), 2,82 (t, J = 6,6 Hz, 3H), 2,61 -
2,42 (m, 3H), 2,42 - 2,30 (m, 1H), 1,90 - 1,82 (m, 2H), 1,78 - 1,67 (m, 1H), 1,67 - 1,58 (m, 1H), 1,44 - 1,36 (m, 6H).
c) 2-(5-((4-(2-Isopropiltiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5] undecan-9-il)metil)tiofen-3-il)acetaldeído [00668] Periodinano Dess-Martin (0,25 g) foi adicionado a uma solução agitada de (9-((4-(2-hidroxietil)tiofen-2-il)metil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-4-il)(2-isopropiltiazol-4-il)metanona (exemplo 36, etapa b) (0,17 g) e ácido trifluoroacético (0,07 mL) em DCM (5 mL).
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206/638
Após 1 hora, acetato de etila (30 mL) foi adicionado seguido por uma mistura de solução de tiossulfato de sódio saturada (5 mL) e solução de bicarbonato de sódio saturada (5 mL). A mistura reacional foi bem agitada e separada. A solução de acetato de etila foi lavada com solução de bicarbonato de sódio saturada, água e salmoura. Ácido acético (0,07 mL) foi adicionado, a solução secada sobre sulfato de sódio, filtrada e evaporada em vácuo (temperatura de banho de ~30°C) para fornecer o composto do subtítulo como uma goma. Produção 0,19 g. Usado diretamente.
d) Ditrifluoroacetato de (R)-4-hidróxi-7-(1 -hidróxi-2-(2-(5-((4-(2- isopropiltiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9il)metil)tiofen-3-il)etilamino)etil)benzo[d]tiazol-2(3H)-ona
HO.
OH [00669] Ácido acético (0,037 mL) foi adicionado a uma solução agitada de cloridrato de (R)-7-(2-amino-1-hidroxietil)-4- hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona (WO2007027134, exemplo 1, etapa d) (0,170 g) e 2-(5-((4-(2-isopropiltiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5] undecan-9-il)metil)tiofen-3-il)acetaldeído (exemplo 36, etapa c) (0,170 g) em metanol (8 mL). Após 1 minuto, cianoboroidreto de sódio (0,08 g) foi adicionado. Após 3 horas, a mistura reacional foi concentrada em vácuo para ~2 mL, THF (20 mL) adicionado e a solução lavada com uma mistura de salmoura (10 mL) e solução de bicarbonato de sódio saturada (2 mL). A solução orgânica foi secada sobre sulfato de sódio, filtrada e evaporada em vácuo. O sólido foi dissolvido em metanol e purificado por HPLC preparativa (Sunfire®, gradiente: 10-40% de ace
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207/638 tonitrila em 0,2% de TFA aquoso). As frações contendo pure produto foram combinadas e evaporadas até a secura. Trituração com dietil éter forneceu o composto do título como um sólido branco. Produção 0,026 g.
[00670] m/z 658 (M+H)+ (APCI) [00671] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO) δ 11,67 (s, 1H), 10,24 (s,
1H), 10,09 - 9,78 (m, 1H), 8,91 - 8,68 (m, 2H), 8,03 (s, 1H), 7,46 (s, 1H), 7,17 (s, 1H), 6,93 (d, J = 8,9 Hz, 1H), 6,77 (d, J = 8,9 Hz, 1H),
6,51 - 6,46 (m, 1H), 4,93 - 4,85 (m, 1H), 4,67 - 4,51 (m, 2H), 3,85 -
2,88 (m, 17H), 2,14 - 2,05 (m, 2H), 1,82 - 1,58 (m, 2H), 1,34 (d, J = 6,8 Hz, 6H).
Exemplo 37
Ditrifluoroacetato de (R)-5-(2-(3-((2,2-difluoro-4-(5-metiltiofeno-2carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil) fenetilamino)-1 -hidroxietil)-8-hidroxiquinolin-2(1 H)-ona
OH
HO
a) 4-((2-Bromo-2,2-difluoroacetamido)metil)-4-hidroxipiperidina-1carboxilato de terc-butila
Br [00672] Uma solução de 4-(aminometil)-4-hidroxipiperidina-1carboxilato de terc-butila (1,702 g) em DMF (20 mL) a 20°C foi tratada com 2-bromo-2,2-difluoroacetato de etila (1,5 g) e a mistura agitada durante 90 minutos a 20°C sob nitrogênio. A mistura foi dividida entre acetato de etila e salmoura, a camada orgânica foi lavada duas vezes com salmoura, secada sobre sulfato de sódio, filtrada e o solvente
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208/638 evaporado sob pressão reduzida para fornecer o composto do subtítulo. Produção 2,5 g.
[00673] m/z 385/387 (M-H)- (APCI)
b) 2,2-Difluoro-3-oxo-1 -oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecano-9- car- boxilato de terc-butila [00674] Uma solução de 4-((2-bromo-2,2-difluoroacetamido)metil)-
4-hidroxipiperidina-1-carboxilato de terc-butila (exemplo 37, etapa a) (3,2 g) em THF (40 mL) foi adicionada gota a gota durante 15 minutos a uma solução agitada de terc-butóxido de potássio (1M em t-butanol,
16,53 mL) e THF (60 mL) a 70°C sob nitrogênio. Ao término da adição a mistura foi aquecida durante mais 10 minutos e em seguida resfriada para temperatura ambiente. A mistura foi dividida entre acetato de etila e salmoura, a camada orgânica foi secada sobre sulfato de sódio, filtrada e o solvente evaporado sob pressão reduzida. O produto bruto foi purificado por cromatografia de sílica rápida usando 30% de isohexano em acetato de etila. Frações puras foram evaporadas até a secura para fornecer o composto do subtítulo. Produção 0,55 g.
[00675] m/z 305 (M-H)- (APCI) [00676] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO) δ 8,98 (s, 1H), 3,74 (d, J =
13,3 Hz, 2H), 3,43 (d, J = 2,8 Hz, 2H), 3,05 (s, 2H), 1,81 - 1,73 (m, 2H),
1,70 - 1,61 (m, 2H), 1,40 (s, 9H).
c) 2,2-Difluoro-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecano-9-carboxilato de terc-butila [00677] Complexo de borano-sulfeto de metila (2M em THF, 2,69 mL) foi adicionado gota a gota a uma solução de 2,2-difluoro-3-oxo-1
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209/638 oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecano-9-carboxilato de terc-butila (exemplo 37, etapa b) (0,55 g) em THF (15 mL). A mistura reacional foi aquecida a 55°C sob nitrogênio durante 25 minutos e em seguida resfriada para temperatura ambiente. A mistura foi extinta por cuidadosa adição gota a gota de metanol (5 mL). M7,M2-dimetiletano-1,2-diamina (0,633 g) foi em seguida adicionado e a mistura aquecida a 70°C durante 40 minutos. Os solventes foram removidos sob pressão reduzida e o resíduo foi purificado por cromatografia de sílica rápida usando 4% de metanol em diclorometano com 1% de trietilamina como solvente. Frações puras foram evaporadas até a secura para fornecer o composto do subtítulo. Produção 0,32 g. Usado diretamente.
d) 2,2-Difluoro-4-(5-metiltiofeno-2-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro [5,5]undecano-9-carboxilato de terc-butila [00678] HATU (0,541 g) foi adicionado em uma porção a uma solução agitada a 0°C de 2,2-difluoro-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecano-
9-carboxilato de terc-butila (exemplo 37, etapa c) (0,32 g) e ácido 5metiltiofeno-2-carboxílico (0,171 g) e trietilamina (0,458 mL) em DMF (20 mL). A mistura foi em seguida agitada a 20°C durante 7 horas. A mistura foi dividida entre acetato de etila e salmoura, a camada orgânica foi lavada duas vezes com salmoura, secada sobre sulfato de sódio, filtrada e o solvente evaporado sob pressão reduzida. O produto bruto foi purificado por cromatografia de sílica rápida, gradiente de eluição 0,5 a 5% de metanol em diclorometano. Frações puras foram evaporadas até a secura para fornecer o composto do subtítulo. Produção 0,4 g.
[00679] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO, 90°C) δ 7,29 (d, J = 3,6 Hz,
1H), 6,84 (dd, J = 3,6, 1,0 Hz, 1H), 4,08 (t, J = 8,8 Hz, 2H), 3,79 (s,
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2H), 3,65 - 3,58 (m, 2H), 3,21 - 3,11 (m, 2H), 1,81 - 1,73 (m, 2H), 1,66 -
1,56 (m, 2H), 1,39 (s, 9H) + 3H (metila) não observados (sob solvente).
e) Trifluoroacetato de (2,2-djfluoro-1-oxa-4,9-djazaespjro[5,5] undecan-4-il)(5-metiltiofen-2-il)metanona
HN [00680] Ácido trifluoroacético (5 mL) foi adicionado à solução de
2,2-difluoro-4-(5-metiltiofeno-2-carbonil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecano-9-carboxilato de terc-butila (exemplo 37, etapa d) (0,4 g) em diclorometano (20 mL) a 20°C. A solução foi deixada descansar a 20°C durante 25 minutos. Tolueno (40 mL) foi adicionado e os solventes foram removidos sob pressão reduzida. O resíduo foi evaporado duas vezes com acetonitrila. A goma resultante foi triturada com éter para fornecer o composto do subtítulo. Produção 0,39 g.
[00681] m/z 317 (M+H)+ (APCI) [00682] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO, 90°C) δ 8,53 (s, 2H), 7,31 (d,
J = 3,8 Hz, 1H), 6,88 - 6,85 (m, 1H), 4,14 (t, J = 8,8 Hz, 2H), 3,84 (s, 2H), 3,27 - 3,21 (m, 2H), 3,13 - 3,04 (m, 2H), 2,05 - 1,98 (m, 2H), 1,91 -
1,81 (m, 2H). Prótons de metila não observados (sob solvente).
f) (2,2-Difluoro-9-(3-(2-hidroxietil)benzil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5] undecan-4-il)(5-metiltiofen-2-il)metanona
HO [00683] 2-(3-(Bromometil)fenil)etanol (exemplo 6, etapa a) (0,095 g) foi adicionado à solução de trifluoroacetato de (2,2-difluoro-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-4-il)(5-metiltiofen-2-il)metanona (exemplo 37,
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211/638 etapa e) (0,19 g) e trietilamina (0,185 mL) em acetonitrila (10 mL) e a mistura reacional agitada a 20°C durante 3 horas. O solvente foi evaporado sob pressão reduzida e o resíduo dividido entre acetato de etila e salmoura, a camada orgânica foi secada sobre sulfato de sódio, filtrada e o solvente evaporado sob pressão reduzida. O produto bruto foi purificado por cromatografia de sílica rápida usando 2,5% de metanol em diclorometano com 1% de trietilamina como solvente. Frações puras foram evaporadas até a secura para fornecer o composto do subtítulo. Produção 0,188 g.
[00684] m/z 451 (M+H)+ (APCI)
g) (R)-5-(1 -(terc-butildimetilsililóxi)-2-(3-((2,2-Difluoro-4-(5- metiltiofeno-2-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil) fe- netilamino)etil)-8-hidroxiquinolin-2(1H)-ona
HO [00685] Uma solução de (2,2-difluoro-9-(3-(2-hidroxietil)benzil)-1oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4-il)(5-metiltiofen-2-il)metanona (exemplo 37, etapa f) (0,188 g) em diclorometano (10 mL) foi tratada com ácido trifluoroacético (0,032 mL) seguida por periodinano DessMartin (0,248 g) e a mistura resultante agitada a 20°C durante 1 hora. A mistura reacional foi tratada com solução de tiossulfato de sódio saturada (10 mL) e solução de bicarbonato de sódio saturada (10 mL) e acetato de etila (10 mL) e agitada vigorosamente durante 5 minutos. A mistura foi extraída duas vezes com acetato de etila, os orgânicos combinados foram lavados com solução de bicarbonato de sódio saturada, secados sobre sulfato de sódio, filtrados, tratados com ácido
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212/638 acético (0,024 mL) e o solvente evaporado sob pressão reduzida. O resíduo foi dissolvido em metanol (2 mL) e adicionado a uma solução de (R)-5-(2-amino-1-(terc-butildimetilsililóxi)etil)-8-hidroxiquinolin-2(1H)ona (WO2004106333) (0,14 g) e ácido acético (0,024 mL) em metanol (10 mL). A mistura foi resfriada em um banho de gelo e tratada com triacetoxiboroidreto de sódio (0,133 g), e agitada em temperatura ambiente durante 18 horas. O metanol foi removido sob pressão reduzida e o resíduo foi dividido entre solução de bicarbonato de sódio saturada e acetato de etila, a camada orgânica foi secada sobre sulfato de sódio, filtrada e o solvente removido sob pressão reduzida. O produto bruto foi purificado por cromatografia de sílica rápida usando 1% de amônia aquosa ‘880’ e 8% de metanol em diclorometano. Frações puras foram evaporadas até a secura para fornecer o composto do subtítulo. Produção 0,114 g.
[00686] m/z 767 (M+H)+ (APCI)
h) DiTrifluoroacetato de (R)-5-(2-(3-((2,2-difluoro-4-(5-metiltiofeno-
2-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil) fenetilamino)-1 -hidroxietil)-8-hidroxiquinolin-2(1H)-ona
OH
HO [00687] tri-hidrofluoreto de trietilamina (0,03 mL) em metanol (1 mL) foi adicionado à solução de (R)-5-(1-(terc-butildimetilsililóxi)-2-(3-((2,2Difluoro-4-(5-metiltiofeno-2-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5] undecan-9-il)metil)fenetilamino)etil)-8-hidroxiquinolin-2(1H)-ona (exemplo 37, etapa g) (0,114 g) em THF (4 mL), e a solução resultante foi deixada descansar a 20°C durante 18 horas. Os solventes foram removidos sob pressão reduzida, o produto bruto foi purificado por HPLC preparativa (Sunfire®, gradiente: 10-40% de acetonitrila em 0,2% de TFA
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213/638 aquoso). As frações contendo o composto desejado foram evaporadas até a secura para fornecer o composto do título. Produção 0,080 g.
[00688] m/z 653 (M+H)+ (APCI) [00689] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO, 90°C) δ 8,16 (d, J = 9,7 Hz,
1H), 7,46 - 7,26 (m, 5H), 7,14 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 6,99 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 6,86 - 6,83 (m, 1H), 6,57 - 6,52 (m, 1H), 5,37 - 5,31 (m, 1H), 4,25 (s, 2H), 4,13 (t, J = 8,8 Hz, 2H), 3,82 (s, 2H), 3,30 - 2,99 (m, 10H), 2,10 - 1,88 (m, 4H). Seis prótons trocáveis não observados. Prótons de metila não observados (sob solvente).
Exemplo 38
DiTrifluoroacetato de (R)-4-hidróxi-7-(1 -hidróxi-2-(2-(3-((4-(5metiltiofeno-2-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9il)metil)fenóxi)etilamino)etil)benzo[d]tiazol-2(3H)-ona
a) (3-(2,2-Dietoxietóxi)fenil)metanol
[00690] Carbonato de césio (7,87 g) foi adicionado à solução de 3(hidroximetil)fenol (2,5 g) e 2-bromo-1,1-dietoxietano (3,97 g) em DMF (40 mL) e a mistura resultante foi aquecida a 90°C durante 18 horas. A mistura foi resfriada para temperatura ambiente e dividida entre acetato de etila e salmoura, a camada orgânica foi lavada duas vezes com salmoura, secada sobre sulfato de sódio, filtrada e o solvente evaporado sob pressão reduzida. O produto bruto foi purificado por cromatografia de sílica rápida usando 30% de acetato de etila em iso-hexano como solvente. Frações puras foram evaporadas até a secura para
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214/638 fornecer o composto do subtítulo. Produção 1,9 g.
[00691] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO) δ 7,21 (t, J = 7,9 Hz, 1H),
6,91 - 6,86 (m, 2H), 6,82 - 6,78 (m, 1H), 5,14 (t, J = 5,9 Hz, 1H), 4,79 (t, J = 5,1 Hz, 1H), 4,46 (d, J = 5,9 Hz, 2H), 3,93 (d, J = 5,1 Hz, 2H),
3,71 - 3,63 (m, 2H), 3,61 - 3,52 (m, 2H), 1,14 (t, J = 7,0 Hz, 6H).
b) (9-(3-(2,2-Dietoxietóxi)benzil)-1 -oxa-4,9-diazaespiro[5,5] undecan-4-il)(5-metiltiofen-2-il)metanona
[00692] Cloreto de metanossulfonila (0,1 mL) foi adicionado gota a gota a uma solução agitada a 0°C de (3-(2,2-dietoxietóxi)fenil)metanol (exemplo 38, etapa a) (0,307 g) e trietilamina (0,178 mL) em diclorometano (30 mL). A mistura resultante foi agitada a 20°C durante 1 hora. A mistura foi lavada com água e a camada orgânica foi secada sobre sulfato de sódio, filtrada e o solvente evaporado sob pressão reduzida. O resíduo foi dissolvido em acetonitrila (30 mL) e tratado com trietilamina (1 mL) seguida por trifluoroacetato de (5-metiltiofen-2-il)(1oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4-il)metanona (exemplo 9, etapa b) (0,42 g). A mistura foi agitada a 20°C durante 2 horas. O solvente foi removido sob pressão reduzida e o resíduo dividido entre acetato de etila e salmoura, a camada orgânica foi secada sobre sulfato de sódio, filtrada e o solvente removido sob pressão reduzida. O produto bruto foi purificado por cromatografia de sílica rápida usando 3% de metanol em diclorometano com 1% de trietilamina como solvente. Frações puras foram evaporadas até a secura para fornecer o composto do subtítulo. Produção 0,45 g.
[00693] m/z 503 (M+H)+ (APCI)
c) 2-(3-((4-(5-Metiltiofeno-2-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]
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215/638 undecan-9-jl)metjl)fenóxj)acetaldeído
[00694] Uma solução de (9-(3-(2,2-dietoxietóxi)benzil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-4-il)(5-metiltiofen-2-il)metanona (exemplo 38, etapa b) (0,45 g) em uma mistura de ácido acético (25 mL) e água (25 mL) foi aquecida a 65°C sob nitrogênio durante 16 horas. A maioria dos solventes foi removida sob pressão reduzida e o resíduo dividido entre acetato de etila e excesso de solução de bicarbonato de sódio saturada. A camada orgânica foi secada sobre sulfato de sódio e filtrada, ácido acético (0,051 mL) foi adicionado e o solvente removido sob pressão reduzida para fornecer o composto do subtítulo. Produção 0,38 g. Usado diretamente.
d) DiTrifluoroacetato de (R)-4-hjdróxj-7-(1-hjdróxj-2-(2-(3-((4-(5- metjltjofeno-2-carbonjl)-1-oxa-4,9-djazaespjro[5,5]undecan-9jl)metjl)fenóxj)etjlamjno)etjl)benzo[d]tjazol-2(3H)-ona
[00695] Cianoboroidreto de sódio (0,084 g) foi adicionado a uma solução agitada a 20°C de cloridrato de (R)-7-(2-amino-1-hidroxietil)-4 hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona (WO2007027134, exemplo 1, etapa d) (0,303 g) e 2-(3-((4-(5-metiltiofeno-2-carbonil)-1-oxa-4,9 diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil)fenóxi)acetaldeído (exemplo 38, etapa c) (0,38 g) e ácido acético (0,051 mL) em metanol (12 mL). A mistura reacional foi agitada a 20°C durante 5 horas. A mistura reacional foi evaporada sob pressão reduzida para um volume de 3 mL e em seguida dividida entre acetato de etila (20 mL) e água (20 mL). A ca
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216/638 mada aquosa foi tratada com solução de bicarbonate de sódio saturada (3 mL). A mistura aquosa foi em seguida tratada com cloreto de sódio sólido para fornecer uma solução saturada, que foi extraída com THF (20 mL). A camada de THF foi secada sobre sulfato de sódio, filtrada e o solvente evaporado sob pressão reduzida. O produto bruto foi purificado por HPLC preparativa (Sunfire®, gradiente: 10-40% de acetonitrila em 0,2% de TFA aquoso). As frações contendo o composto desejado foram evaporadas até a secura para fornecer o composto do título. Produção 0,1 g.
[00696] m/z 639 (M+H)+ (APCI) [00697] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO, 90°C) δ 11,28 (s, 1H), 7,43 -
7,36 (m, 1H), 7,21 (s, 1H), 7,14 (s, 2H), 7,07 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 6,95 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 6,82 - 6,76 (m, 2H), 5,00 - 4,91 (m, 1H), 4,36 - 4,28 (m, 4H), 3,73 - 3,69 (m, 2H), 3,68 - 3,63 (m, 2H), 3,54 (s, 2H), 3,45 (s, 2H), 3,25 - 3,04 (m, 6H), 2,46 (s, 3H), 2,09 - 1,98 (m, 2H), 1,87 - 1,72 (m, 2H). Cinco prótons trocáveis não observados.
Exemplo 39
DiTrifluoroacetato de 7-((1R)-2-(2-fluoro-2-(3-((4-(2-isopropiltiazol4-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil)fenil) etilamino)-1-hidroxietil)-4-hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona
HO
OH
a) 2-(3-Bromofenil)-2-fluoroacetato de etila
EtO
Br [00698] Uma solução de 2-(3-bromofenil)acetato de etila (1,00 g) e
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217/638 terc-butildimetilclorossilano (0,749 g) em THF (4 mL) foi resfriada para -78°C sob uma atmosfera de nitrogênio e tratada com bis(trimetilsilil)amida de lítio (1M em THF, 4,6 mL), adicionada gota a gota durante 10 minutos. A solução foi agitada a -78°C durante 5 minutos, em seguida removida do banho de resfriamento e deixada aquecer para temperatura ambiente durante 30 minutos. A solução foi concentrada em vácuo e o resíduo suspenso em iso-hexano e filtrado para remover cloreto de lítio precipitado. O filtrado foi concentrado em vácuo para fornecer um óleo (1,49 g), que foi dissolvido em acetonitrila (2 mL) e adicionado gota a gota a uma suspensão agitada de reagente de fluoração Selectfluor® (1,93 g) em acetonitrila (17 mL) em temperatura ambiente, completando a adição com acetonitrila (3 x 1 mL). A mistura resultante foi agitada durante 1,5 horas, em seguida concentrada em sílica e purificada por cromatografia rápida em sílica eluída com 10% de dietil éter em iso-hexano, para fornecer o composto do subtítulo contaminado com material de partida como um óleo incolor. Produção 0,884 g.
[00699] 1H RMN (400 MHz, CDCh) δ 7,63 (s, 1H), 7,53 (d, J = 7,9
Hz, 1H), 7,28 (t, J = 8,0 Hz, 2H), 5,73 (d, J = 47,7 Hz, 1H), 4,33 - 4,19 (m, 2H), 1,28 (t, J = 7,1 Hz, 3H).
b) 2-(3-Bromofenil)-2-fluoroetanol
HO
Br
F [00700] Hidreto de alumínio de lítio (1M em THF, 13,0 mL) foi adicionado porção a porção durante 7 minutos a uma solução de 2-(3bromofenil)-2-fluoroacetato de etila (exemplo 39, etapa a) (2,94 g) em THF (35 mL), pré-resfriada em gelo-água. A mistura resultante foi agitada em gelo-água durante 30 minutos, em seguida extinta pela cuidadosa adição de metanol (5 mL), adicionado porção a porção durante 30 minutos. A mistura foi vertida em 2 molares de HCl aquoso e extra
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218/638 ída três vezes com acetato de etila. Os extratos orgânicos combinados foram lavados com salmoura, secados sobre sulfato de magnésio anidroso e purificados por cromatografia rápida em sílica eluída com 25% de dietil éter em iso-hexano para fornecer o composto do subtítulo como óleo incolor. Produção 1,39 g.
[00701] 1H RMN (400 MHz, CDCh) δ 7,53 - 7,46 (m, 2H), 7,30 -
7,24 (m, 2H), 5,53 (ddd, J = 48,2, 7,2, 3,3 Hz, 1H), 3,97 - 3,77 (m, 2H),
1,95 (dd, J = 8,2, 5,1 Hz, 1H).
c) (2-(3-Bromofenil)-2-fluoroetóxi)(terc-butil)dimetilsilano
[00702] Uma solução de 2-(3-bromofenil)-2-fluoroetanol (exemplo 39, etapa b) (1,38 g) e imidazol (1,29 g) em DMF (14 mL) foi resfriada em gelo-água, tratada com terc-butildimetilclorossilano (1,049 g), em seguida removida do banho de resfriamento e agitada em temperatura ambiente durante a noite. A solução foi vertida em água e extraída duas vezes com dietil éter. Os extratos orgânicos combinados foram lavados duas vezes com água, uma vez com salmoura, em seguida secados sobre sulfato de magnésio anidroso e purificados por cromatografia rápida em sílica eluída com 10% de diclorometano em isohexano para fornecer o composto do subtítulo como um óleo incolor. Produção 1,94 g.
[00703] 1H RMN (400 MHz, CDCh) δ 7,51 - 7,49 (m, 1H), 7,46 (dt, J = 7,0, 2,0 Hz, 1H), 7,28 - 7,21 (m, 2H), 5,43 (ddd, J = 47,5, 6,5, 3,8 Hz, 1H), 3,95 - 3,76 (m, 2H), 0,88 (s, 9H), 0,03 (d, J = 4,6 Hz, 6H).
d) 3-(2-(terc-butildimetilsililóxi)-1 -fluoroetil)benzaldeído
[00704]
Uma solução de (2-(3-bromofenil)-2-fluoroetóxi)(tercPetição 870190058499, de 25/06/2019, pág. 224/650
219/638 butil)dimetilsilano (exemplo 39, etapa c) (1,8 g) em THF (36 mL) foi resfriada para -78°C sob uma atmosfera de nitrogênio e tratada com butil lítio (1,8M em hexanos, 3,3 mL), adicionado gota a gota durante 5 minutos. A solução foi agitada a -78°C durante 30 minutos, tratada com M,M-dimetilformamida (0,63 mL), agitada a -78°C durante mais 30 minutos, em seguida removida do banho de resfriamento e deixada aquecer para temperatura ambiente durante 140 minutos. A solução foi extinta pela adição de 10% de cloreto de amônio aquoso, e a mistura resultante foi extraída duas vezes com dietil éter. As fases orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secadas sobre sulfato de magnésio anidroso e purificadas por cromatografia rápida em sílica eluída com 50% de diclorometano em iso-hexano para fornecer o composto do subtítulo como um óleo incolor. Produção 1,26 g.
[00705] 1H RMN (400 MHz, CDCh) δ 10,04 (s, 1H), 7,88 - 7,84 (m,
2H), 7,63 (d, J = 7,4 Hz, 1H), 7,56 (t, J = 7,4 Hz, 1H), 5,55 (ddd, J =
47,3, 6,2, 4,0 Hz, 1H), 4,00 - 3,83 (m, 2H), 0,87 (s, 9H), 0,02 (d, J = 3,9 Hz, 6H).
e) (9-(3-(2-(terc-butildimetilsililóxi)-1 -fluoroetil)benzil)-1 -oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-4-il)(2-isopropiltiazol-4-il)metanona
[00706] Uma solução de 3-(2-(terc-butildimetilsililóxi)-1 fluoroetil)benzaldeído (exemplo 39, etapa d) (0,329 g) em MeOH (4 mL) foi tratada com ácido acético (0,055 mL) seguido por trifluoroacetato de (2-isopropiltiazol-4-il)(1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4il)metanona (exemplo 22, etapa b) (0,408 g) e agitada em temperatura ambiente durante 5 minutos. A solução foi resfriada em um banho de gelo-água, tratada com triacetoxiboroidreto de sódio (0,309 g), agitada em gelo-água durante 135 minutos, em seguida removida do banho de
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220/638 resfriamento e agitada em temperatura ambiente durante mais 65 minutos. A solução foi resfriada novamente em gelo-água, tratada com mais triacetoxiboroidreto de sódio (0,310 g) e agitada em gelo-água durante 75 minutos. Mais triacetoxiboroidreto de sódio (0,312 g) foi adicionado e a mistura foi agitada durante 70 minutos. Mais triacetoxiboroidreto de sódio (0,619 g) foi adicionado e a mistura foi agitada durante a noite, permitindo o banho de resfriamento lentamente expirar. No próximo dia, mais triacetoxiboroidreto de sódio (0,307 g) foi adicionado e a mistura foi agitada durante 70 minutos. Mais ácido acético (0,055 mL) foi adicionado e a mistura foi agitada durante 80 minutos. A mistura foi aquecida para 40°C e agitada naquela temperatura durante 25 minutos, em seguida ela foi concentrada em sílica rápida em vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia rápida em sílica eluída com 5% de metanol em diclorometano para fornecer o composto do subtítulo como um sólido branco pegajoso. Produção 0,344 g.
[00707] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO, 90°C) δ 7,93 (s, 1H), 7,57 -
7,11 (m, 4H), 5,64 - 5,43 (m, 1H), 4,00 - 3,81 (m, 2H), 3,77 - 3,55 (m, 6H), 3,31 (septeto, J = 6,8 Hz, 1H), 3,13 - 2,88 (m, 2H), 2,57 - 2,35 (m, 4H), 2,16 - 1,94 (m, 2H), 1,74 - 1,54 (m, 2H), 1,36 (d, J = 6,7 Hz, 6H), 0,84 (s, 9H), 0,01 (s, 6H).
f) (9-(3-(1 -Fluoro-2-hidroxietil)benzil)-1 -oxa-4,9-diazaespiro[5,5] undecan-4-il)(2-isopropiltiazol-4-il)metanona
[00708]
Uma solução de (9-(3-(2-(terc-butildimetilsililóxi)-1 fluoroetil)benzil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4-il)(2isopropiltiazol-4-il)metanona (exemplo 39, etapa e) (0,33 g) em THF (5 mL) foi tratada com fluoreto de tetrabutilamônio (1M em THF, 0,69 mL) e agitada em temperatura ambiente durante 50 minutos. Mais fluoreto
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221/638 de tetrabutilamônio (1M em THF, 0,69 mL) foi adicionado e a mistura foi agitada durante mais 80 minutos. A solução foi em seguida concentrada em sílica rápida e o resíduo foi purificado por cromatografia rápida em sílica eluída com 7,5% de metanol em diclorometano para fornecer o composto do subtítulo como uma espuma branca. Produção 0,221 g.
[00709] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO, 90°C) δ 7,91 (d, J = 1,5 Hz,
1H), 7,36 - 7,19 (m, 4H), 5,45 (ddd, J = 48,5, 6,6, 3,7 Hz, 1H), 4,86 -
4,76 (m, 1H), 3,80 - 3,58 (m, 9H), 3,58 - 3,44 (m, 1H), 3,31 (septet, J =
6,8 Hz, 1H), 2,46 - 2,28 (m, 4H), 1,79 - 1,67 (m, 2H), 1,66 - 1,50 (m, 2H), 1,36 (d, J = 6,9 Hz, 6H).
g) 2-Fluoro-2-(3-((4-(2-isopropiltiazol-4-carbonil)-1 -oxa-4,9- diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil)fenil)acetaldeído [00710] Uma solução de (9-(3-(1-fluoro-2-hidroxietil)benzil)-1-oxa-
4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4-il)(2-isopropiltiazol-4-il)metanona (exemplo 39, etapa f) (0,213 g) em DCM (5 mL) foi resfriada em geloágua e tratada com ácido trifluoroacético (0,053 mL) e agitada durante 5 minutos. Periodinano Dess-Martin (0,296 g) foi adicionado e a mistura foi removida do banho de resfriamento e agitada em temperatura ambiente durante 20 minutos. Mais periodinano Dess-Martin (0,295 g) foi adicionado e a mistura foi agitada em temperatura ambiente durante mais 30 minutos. A reação foi em seguida extinta pela adição de solução de tiossulfato de sódio saturada (5 mL), solução de bicarbonato de sódio saturada (5 mL) e acetato de etila (5 mL), e a mistura de duas fases resultantes foi agitada durante 10 minutos. A mistura foi em seguida extraída duas vezes com acetato de etila, e os extratos orgânicos combinados lavados com salmoura. Ácido acético (0,1 mL) foi
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222/638 adicionado, em seguida os extratos acidificados foram secados sobre sulfato de magnésio anidroso e concentrados em vácuo para fornecer o produto subtítulo bruto como uma espuma não totalmente branca. Produção 0,240 g.
[00711] m/z 460 (M+H)+ (APCI)
h) DiTrifluoroacetato de 7-((1 R)-2-(2-fluoro-2-(3-((4-(2- isopropiltiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil) fenil)etilamino)-1-hidroxietil)-4-hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona
HO
OH [00712] Uma solução de cloridrato de (R)-7-(2-amino-1-hidroxietil)4-hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona (WO2007027134, exemplo 1 etapa d) (0,182 g) em metanol (3 mL) foi tratada com ácido acético (0,039 mL) e agitada durante 5 minutos. Uma solução de 2-fluoro-2-(3-((4-(2isopropiltiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9il)metil)fenil)acetaldeído (exemplo 39, etapa g) (0,239 g) em metanol (4 mL) foi em seguida adicionada e a mistura resultante foi agitada em temperatura ambiente durante 5 minutos, antes do resfriamento em gelo-água e tratamento com triacetoxiboroidreto de sódio (0,146 g). A mistura foi agitada em gelo durante 25 minutos, em seguida mais triacetoxiboroidreto de sódio (0,444 g) foi adicionado. A mistura foi em seguida agitada durante o final de semana, permitindo-a lentamente aquecer para temperatura ambiente. Na segunda-feira seguinte, a mistura foi concentrada em vácuo. O resíduo foi dissolvido em uma mistura de metanol (3 mL) e água (1,5 mL) e purificado por HPLC preparativa (Sunfire®, gradiente: 15-50% de acetonitrila em 0,2% de TFA aquo
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223/638 so). Frações contendo produto foram concentradas em vácuo e coevaporadas de acetonitrila três vezes para fornecer um resíduo incolor. O resíduo foi triturado com dietil éter para fornecer um sólido, que foi removido por filtração, lavado com dietil éter e secado em vácuo em temperatura ambiente para fornecer o produto título como um sólido branco (0,03 g).
[00713] m/z 670 (M+H)+ (APCI) [00714] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO, 90°C) δ 7,94 (s, 1H), 7,60 -
7,45 (m, 4H), 6,93 (dd, J = 8,2, 2,3 Hz, 1H), 6,77 (d, J = 7,9 Hz, 1H),
5,97 (dt, J = 49,2, 9,7 Hz, 1H), 4,99 - 4,89 (m, 1H), 4,36 - 4,17 (m, 2H),
3,75 - 3,62 (m, 6H), 3,60 - 2,90 (m, 9H), 2,08 - 1,92 (m, 2H), 1,81 -
1,64 (m, 2H), 1,35 (d, J = 6,9 Hz, 6H). Seis prótons trocáveis não observados.
Exemplo 40
DiTrifluoroacetato de (R)-7-(2-(4-fluoro-3-((4-(2-isopropiltiazol-4carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil) fenetilamino)-1-hidroxietil)-4-hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona
a) 2-Fluoro-5-(2-hidroxietil)benzaldeído
F^Y [00715] 2,2,6,6-Tetrametilpiperidina (3,0 g) foi adicionado gota a gota a uma solução agitada de n-butil lítio (1,6M em hexanos, 13 mL) em tetra-hidrofurano seco (12 mL) a -78°C. Após 10 min, 2-(4fluorofenil)etanol (1,00 g) foi adicionado gota a gota. A mistura reacio
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224/638 nal foi agitada a -78°C durante 5 horas e em seguida DMF seco (3,18 mL) foi adicionado gota a gota durante 5 minutos. O banho de resfriamento foi removido e a mistura reacional deixada aquecer para temperatura ambiente durante a noite. Acetato de etila e HCl aquoso (2M) foram adicionados e a solução separada. A camada de acetato de etila foi lavada com água, salmoura, secada sobre sulfato de sódio, filtrada e evaporada em vácuo. A purificação foi por cromatografia de sílica-gel eluindo com acetato de etila:iso-hexano, 1:1 para fornecer o composto do subtítulo como um óleo. Produção 0,43 g.
[00716] 1H RMN (300 MHz, CDCh) δ 10,35 (s, 1H), 7,73 (dd, J = 6,4 & 2,0 Hz, 1H), 7,52 - 7,46 (m, 1H), 7,12 (dd, J = 10,0 & 8,4 Hz, 1H),
3,88 (t, J = 6,5 Hz, 2H), 2,90 (t, J = 6,5 Hz, 2H). Um próton trocável não observado.
b) (9-(2-Fluoro-5-(2-hidroxietil)benzil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5] undecan-4-il)(2-isopropiltiazol-4-il)metanona
[00717] Triacetoxiboroidreto de sódio (0,339 g) foi adicionado a uma solução agitada de 2-fluoro-5-(2-hidroxietil)benzaldeído (exemplo 40, etapa a) (0,135 g), trifluoroacetato de (2-isopropiltiazol-4-il)(1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-4-il)metanona (exemplo 22, etapa b) (0,339 g) e ácido acético (0,046 mL) em NMP (7 mL). Após 16 horas, mais 2fluoro-5-(2-hidroxietil)benzaldeído (exemplo 40, etapa a) (0,135 g) foi adicionado seguido por triacetoxiboroidreto de sódio (0,339 g). Após 2 horas, a mistura reacional foi diluída com acetato de etila (60 mL) e lavada com solução de bicarbonato de sódio saturada (30 mL). A camada aquosa foi extraída com acetato de etila. A solução de acetato de etila combinada foi evaporada em vácuo. A purificação foi por croPetição 870190058499, de 25/06/2019, pág. 230/650
225/638 matografia de sílica-gel eluindo com acetato de etila:trietilamina, 10:1 para fornecer o composto do subtítulo como uma goma que continha NMP. O NMP foi removido aplicando a goma em um cartucho SCX de 10 g eluindo primeiro com metanol e em seguida 20% de amônia aquosa ‘880’ em metanol para coletar o composto do subtítulo. A solução foi evaporada até a secura e a goma resultante aplicada a uma coluna de sílica-gel eluindo com acetato de etila:trietilamina, 10:1 para fornecer o composto do subtítulo como uma goma. Produção 0,31 g. [00718] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO, 90°C) δ 7,90 (s, 1H), 7,19 (d,
J = 7,3 Hz, 1H), 7,13 - 7,07 (m, 1H), 6,97 (t, J = 9,3 Hz, 1H), 4,28 -
4,24 (m, 1H), 3,71 - 3,55 (m, 6H), 3,46 (s, 2H), 3,35 - 3,26 (m, 1H), 3,00 (s, 2H), 2,70 (t, J = 6,7 Hz, 2H), 2,45 - 2,26 (m, 4H), 1,74 - 1,65 (m, 2H), 1,59 - 1,49 (m, 2H), 1,36 (d, J = 7,0 Hz, 6H).
c) 2-(4-Fluoro-3-((4-(2-isopropiltiazol-4-carbonil)-1 -oxa-4,9- diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil)fenil)acetaldeído
[00719] Periodinano Dess-Martin (0,284 g) foi adicionado a uma solução agitada de (9-(2-fluoro-5-(2-hidroxietil)benzil)-1-oxa-4,9 diazaespiro[5,5] undecan-4-il)(2-isopropiltiazol-4-il)metanona (exemplo 40, etapa b) (0,21 g) e ácido trifluoroacético (0,046 mL) em DCM (5 mL). Após 1 hora, acetato de etila (30 mL) foi adicionado seguido por uma mistura de solução de tiossulfato de sódio saturada (5 mL) e solução de bicarbonato de sódio saturada (5 mL). A mistura reacional foi bem agitada e separada. A solução de acetato de etila foi lavada com solução de bicarbonato de sódio saturada, água e salmoura. Ácido acético (0,07 mL) foi adicionado, a solução secada sobre sulfato de sódio, filtrada e evaporada em vácuo (temperatura de banho de
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226/638 ~30°C) para fornecer o composto do subtítulo como uma goma. Produção 0,2 g. Usado diretamente.
[00720] m/z 460 (M+H)+ (APCI)
d) DiTrifluoroacetato de (R)-7-(2-(4-fluoro-3-((4-(2-isopropiltiazol-4carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil) fenetilamino)-1-hidroxietil)-4-hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona
[00721] Ácido acético (0,037 mL) foi adicionado a uma solução agitada de cloridrato de (R)-7-(2-amino-1-hidroxietil)-4hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona (WO2007027134, exemplo 1, etapa d) (0,17 g) e 2-(4-fluoro-3-((4-(2-isopropiltiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil)fenil)acetaldeído (exemplo 40, etapa
c) (0,20 g) em metanol (8 mL). Após 1 minuto, cianoboroidreto de sódio (0,10 g) foi adicionado. Após 3 horas, a mistura reacional foi concentrada em vácuo para ~2 mL, THF (20 mL) foi adicionado e a solução lavada com uma mistura de salmoura (10 mL) e solução de bicarbonato de sódio saturada (2 mL). A camada aquosa foi extraída com acetato de etila. As soluções de THF e de acetato de etila foram combinadas e evaporadas em vácuo. A goma foi dissolvida em metanol e purificada por HPLC preparativa (Sunfire®, gradiente: 10-35% de acetonitrila em 0,2% de TFA aquoso). As frações contendo produto puro foram combinadas e evaporadas até a secura. Trituração com dietil éter forneceu o composto do título como um sólido branco. Produção 0,126 g.
[00722] m/z 670 (M+H)+ (APCI) [00723] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO, 90°C) δ 11,33 - 11,22 (m,
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1H), 7,94 (s, 1H), 7,46 - 7,36 (m, 2H), 7,25 (t, J = 9,0 Hz, 1H), 6,93 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 6,77 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 4,93 - 4,88 (m, 1H), 4,30 -
4,20 (m, 2H), 3,70 (s, 4H), 3,66 (s, 2H), 3,35 - 2,93 (m, 11H), 2,05 -
1,95 (m, 2H), 1,83 - 1,67 (m, 2H), 1,35 (d, J = 7,0 Hz, 6H). Cinco prótons trocáveis não observados.
Exemplo 41
Ditrifluoroacetato de (R)-7-(2-(3-fluoro-5-((4-(2-feniltiazol-4- carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil) fenetilamino)-1hidroxietil)-4-hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona
OH
HO
a) Ácido 2-(3-(bromometil)-5-fluorofenil)acético
HC
Br [00724] Peróxido de benzoíla (0,5 g) foi adicionado a uma mistura agitada de ácido 2-(3-fluoro-5-metilfenil)acético (5,19 g) e NBS (6,04 g) em diclorometano (100 mL). A mistura resultante foi aquecida ao refluxo durante 5 horas. A mistura reacional foi resfriada para temperatura ambiente e em seguida lavada duas vezes com água, a camada orgânica foi secada sobre sulfato de sódio, filtrada e o solvente evaporado sob pressão reduzida. O produto bruto foi purificado por cromatografia de sílica rápida usando 1% de ácido acético e 17% de acetato de etila em iso-hexano como solvente. Frações puras foram evaporadas até a secura para fornecer o composto do subtítulo. Produção 4,3 g.
[00725] 1H RMN (400 MHz, Ü6-DMSC) δ 7,22 - 7,17 (m, 2H), 7,09 7,05 (m, 1H), 4,68 (s, 2H), 3,61 (s, 2H). Um próton trocável não observado.
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b) 2-(3-(Bromometil)-5-fluorofenil)etanol
HO
Br
F [00726] Complexo de borano-sulfeto de metila (2M em THF, 17,4 mL) foi adicionado gota a gota durante 10 minutos a uma solução de ácido 2-(3-(bromometil)-5-fluorofenil)acético (exemplo 41, etapa a) (4,3 g) em THF (60 mL) a 0°C. A mistura foi agitada a 0°C durante 10 minutos e em seguida a 20°C durante 1 hora. A mistura reacional foi extinta pela adição gota a gota de metanol e os solventes foram removidos sob pressão reduzida. O produto bruto foi purificado por cromatografia de sílica rápida usando 30% de acetato de etila em iso-hexano como solvente. Frações puras foram evaporadas até a secura para fornecer o composto do subtítulo. Produção 3,7 g.
[00727] 1H RMN (400 MHz, Ü6-DMSO) δ 7,15 (s, 1H), 7,14 - 7,09 (m, 1H), 7,05 - 6,99 (m, 1H), 4,66 (s, 2H), 3,61 (t, J = 6,8 Hz, 2H), 2,72 (t, J = 6,7 Hz, 2H). Um próton trocável não observado.
c) 2,2,2-Trifluoro-1 -(9-(3-fluoro-5-(2-hidroxietil)benzil)-1 -oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-4-il)etanona
HO [00728] Uma solução de 2-(3-(bromometil)-5-fluorofenil)etanol (exemplo 41, etapa b) (3,6 g) e trifluoroacetato de 2,2,2-trifluoro-1-(1oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4-il)etanona (exemplo 12, etapa d) (5,66 g) em acetonitrila (80 mL) foi tratada com trietilamina (5,38 mL) e a mistura agitada a 20°C durante 20 horas. O solvente foi evaporado sob pressão reduzida e o resíduo dividido entre acetato de etila e salmoura. A camada orgânica foi secada sobre sulfato de sódio, filtrada e o solvente removido sob pressão reduzida. O produto bruto foi purifi
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229/638 cado por cromatografia de sílica rápida usando 2,5% de metanol em diclorometano com 1% de trietilamina como solvente. Frações puras foram evaporadas até a secura para fornecer o composto do subtítulo. Produção 4,9 g.
[00729] m/z 405 (M+H)+ (APCI)
d) (9-(3-Fluoro-5-(2-hidroxietil)benzil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5] undecan-4-il)(2-feniltiazol-4-il)metanona
HO [00730] Uma solução de 2,2,2-trifluoro-1-(9-(3-fluoro-5-(2hidroxietil)benzil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4-il)etanona (exemplo 41, etapa c) (0,21 g) em metanol (3 mL) foi adicionada a amônia (35% de solução aquosa, 15 mL) e a mistura reacional agitada a 20°C durante 1 hora. A mistura foi evaporada até a secura sob pressão reduzida e o resíduo azeotropado três vezes com acetonitrila. O resíduo foi dissolvido em DMF (7 mL) e tratado com ácido 2-feniltiazol4-carboxílico (0,117 g) seguido por trietilamina (0,29 mL) e em seguida HATU (0,257 g) e a mistura resultante agitada a 20°C durante 1 hora. A mistura foi dividida entre acetato de etila e salmoura, a camada orgânica foi lavada duas vezes com salmoura, secada sobre sulfato de sódio, filtrada e o solvente evaporado sob pressão reduzida para fornecer o composto do subtítulo. Produção 0,27 g.
[00731] m/z 496 (M+H)+ (APCI)
e) DiTrifluoroacetato de (R)-7-(2-(3-Fluoro-5-((4-(2-feniltiazol-4carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil) fenetilamino)-1-hidroxietil)-4-hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona
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[00732] Uma solução de (9-(3-fluoro-5-(2-hidroxietil)benzil)-1-oxa-
4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4-il)(2-feniltiazol-4-il)metanona (exemplo 41, etapa d) (0,25 g) em diclorometano (20 mL) foi tratada com ácido trifluoroacético (0,039 mL) seguido por periodinano Dess-Martin (0,278 g) e a mistura resultante agitada a 20°C durante 40 minutos. A mistura reacional foi tratada com solução de tiossulfato de sódio saturada (20 mL) e solução de bicarbonato de sódio saturada (20 mL) e acetato de etila (30 mL) e agitada vigorosamente durante 5 minutos. A mistura foi extraída duas vezes com acetato de etila, os orgânicos combinados foram lavados com solução de bicarbonato de sódio saturada, secados sobre sulfato de sódio e filtrados. Ácido acético (0,029 mL) foi adicionado a esta solução e o solvente em seguida removido sob pressão reduzida. O resíduo foi dissolvido em metanol (3 mL) e adicionado a uma solução de cloridrato de (R)-7-(2-amino-1-hidroxietil)-4hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona (WO2007027134, exemplo 1, etapa d) (0,199 g) e ácido acético (0,029 mL) em metanol (15 mL). A mistura foi resfriada em um banho de gelo e tratada com cianoboroidreto de sódio (0,063 g). O banho de resfriamento foi removido e a mistura agitada a 20°C durante 3 horas. O solvente foi evaporado sob pressão reduzida para um volume de 3 mL e THF (20 mL) foi adicionado. A mistura foi lavada com uma mistura de salmoura (10 mL) e solução de bicarbonato de sódio saturada (1 mL). A camada orgânica foi secada sobre sulfato de sódio, filtrada e o solvente removido sob pressão reduzida. O resíduo foi azeotropado duas vezes com acetonitrila. O produto bruto foi purificado por HPLC preparativa (Sunfire®, gradiente: 10-40% de acetonitrila em 0,2% de TFA aquoso). As frações contendo o compos
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231/638 to desejado foram evaporadas até a secura para fornecer o composto do título. Produção 0,19 g.
[00733] m/z 704 (M+H)+ (APCI) [00734] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO, 90°C) δ 11,28 (s, 1H), 8,14 (s, 1H), 7,96 - 7,91 (m, 2H), 7,54 - 7,49 (m, 3H), 7,28 - 7,18 (m,3H),
6,93 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 6,77 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 4,94 - 4,87 (m,1H),
4,28 (s, 2H), 3,83 - 3,66 (m, 6H), 3,26 (t, J = 7,9 Hz, 2H), 3,21 -2,99 (m, 8H), 2,10 - 2,00 (m, 2H), 1,84 - 1,69 (m, 2H). Cinco prótons trocáveis não observados.
Exemplo 42
DiTrifluoroacetato de (R)-7-(2-(3-Fluoro-5-((4-(2-isopropiltiazol-4carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil) fenetilamino)-1-hidroxietil)-4-hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona
a) (9-(3-Fluoro-5-(2-hidroxietil)benzil)-1 -oxa-4,9-diazaespiro[5,5] undecan-4-il)(2-isopropiltiazol-4-il)metanona
[00735] Uma solução de 2,2,2-trifluoro-1-(9-(3-fluoro-5-(2hidroxietil)benzil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4-il)etanona (exemplo 41, etapa d) (0,21 g) em metanol (3 mL) foi adicionada a amônia (35% de solução aquosa, 15 mL) e a mistura reacional agitada a 20°C durante 1 hora. A mistura foi evaporada até a secura sob pressão reduzida e o resíduo azeotropado três vezes com acetonitrila. O
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232/638 resíduo foi dissolvido em DMF (7 mL) e tratado com ácido 2isopropiltiazol-4-carboxílico (0,098 g) seguido por trietilamina (0,290 mL) e em seguida HATU (0,257 g) e a mistura resultante agitada a 20°C durante 1 hora. A mistura foi dividida entre acetato de etila e salmoura, a camada orgânica foi lavada duas vezes com salmoura, secada sobre sulfato de sódio, filtrada e o solvente evaporado sob pressão reduzida para fornecer o composto do subtítulo. Produção 0,25 g.
[00736] m/z 462 (M+H)+ (APCI)
b) DiTrifluoroacetato de (R)-7-(2-(3-Fluoro-5-((4-(2-isopropiltiazol4-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil) fenetilamino)-1-hidroxietil)-4-hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona
[00737] Uma solução de (9-(3-fluoro-5-(2-hidroxietil)benzil)-1-oxa-
4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4-il)(2-isopropiltiazol-4-il)metanona (exemplo 42, etapa a) (0,23 g) em DCM (20 mL) foi tratada com ácido trifluoroacético (0,038 mL) seguida por periodinano Dess-Martin (0,275 g) e a mistura resultante agitada a 20°C durante 40 minutos. A mistura reacional foi tratada com solução de tiossulfato de sódio saturada (20 mL) e solução de bicarbonato de sódio saturada (20 mL) e acetato de etila (30 mL) e agitada vigorosamente durante 5 minutos. A mistura foi extraída duas vezes com acetato de etila, os orgânicos combinados foram lavados com solução de bicarbonato de sódio saturada, secados sobre sulfato de sódio e filtrados. Ácido acético (0,029 mL) foi adicionado a esta solução e o solvente em seguida removido sob pressão reduzida. O resíduo foi dissolvido em metanol (3 mL) e adicionado a uma solução de cloridrato de (R)-7-(2-amino-1-hidroxietil)-4
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233/638 hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona (WO2007027134, exemplo 1, etapa d) (0,196 g) e ácido acético (0,029 mL) em metanol (15 mL). A mistura foi resfriada em um banho de gelo e tratada com cianoboroidreto de sódio (0,063 g). O banho de resfriamento foi removido e a mistura agitada a 20°C durante 3 horas. O solvente foi evaporado sob pressão reduzida para um volume de 3 mL e THF (20 mL) foi adicionado. A mistura foi lavada com uma mistura de salmoura saturada (10 mL) e solução de bicarbonato de sódio saturada (1 mL). A camada orgânica foi secada sobre sulfato de sódio, filtrada e o solvente removido sob pressão reduzida. O resíduo foi azeotropado duas vezes com acetonitrila. O produto bruto foi purificado por HPLC preparativa (Sunfire®, gradiente: 1040% de acetonitrila em 0,2% de TFA aquoso). As frações contendo o composto desejado foram evaporadas até a secura para fornecer o composto do título. Produção 0,15 g.
[00738] m/z 670 (M+H)+ (APCI) [00739] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO, 90°C) δ 11,27 (s, 1H), 7,94 (s, 1H), 7,28 - 7,16 (m, 3H), 6,93 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 6,77 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 4,94 - 4,88 (m, 1H), 4,27 (s, 2H), 3,70 (s, 4H), 3,66 (s, 2H),
3,32 - 3,23 (m, 3H), 3,17 - 2,99 (m, 8H), 2,07 - 1,96 (m, 2H), 1,81 -
1,69 (m, 2H), 1,35 (d, 6H). Cinco prótons trocáveis não observados. Exemplo 43
Ditrifluoroacetato de (R)-7-(2-(2-(5-((4-(2-terc-butiltiazol-4carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil)tiofen-3il)etilamino)-1-hidroxietil)-4-hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona
a) 1 -(9-((4-(2-(terc-butildimetilsililóxi)etil)tiofen-2-il)metil)-1 -oxa-4,9-
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234/638 diazaespiro[5,5]undecan-4-il)-2,2,2-trifluoroetanona
[00740] Trifluoroacetato de 2,2,2-Trifluoro-1-(1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-4-il)etanona (exemplo 12, etapa d) (1,084 g) foi adicionado a uma solução agitada de uma mistura 4:1 de 4-(2-(tercbutildimetilsililóxi)etil)tiofeno-2-carbaldeído e 3-(2-(tercbutildimetilsililóxi)etil)tiofeno-2-carbaldeído (exemplo 27, etapa b) (1,0 g), e AcOH (0,16 mL) em M-metil-2-pirrolidinona (15 mL). Após 5 minutos, triacetoxiboroidreto de sódio (1,57 g) foi adicionado. Após 16 horas, água foi adicionada e a mistura extraída com acetato de etila. A camada de acetato de etila foi lavada três vezes com água e evaporada em vácuo. Purificação por cromatografia de sílica-gel eluindo com acetato de etila:iso-hexano:trietilamina, 1:20:1 separou os dois produtos isoméricos e forneceu o composto do subtítulo como um óleo. Produção 1,04 g.
[00741] 1H RMN (400 MHz, CDCh) δ 6,87 (s, 1H), 6,75 (d, J = 3,7
Hz, 1H), 3,79 - 3,72 (m, 4H), 3,65 (s, 3H), 3,59 - 3,55 (m, 1H), 3,52 (s, 1H), 3,37 (s, 1H), 2,76 (t, J = 6,9 Hz, 2H), 2,68 - 2,61 (m, 1H), 2,57 2,50 (m, 1H), 2,46 - 2,38 (m, 1H), 2,31 (t, J = 11,5 Hz, 1H), 1,89 - 1,75 (m, 2H), 1,68 - 1,52 (m, 2H), 0,87 (s, 9H), 0,00 (s, 6H).
b) 9-((4-(2-(terc-butildimetilsililóxi)etil)tiofen-2-il)metil)-1-oxa-4,9- diazaespiro[5,5]undecano
[00742] Amônia aquosa ‘880’ (1,5 mL) foi adicionada a uma solução agitada de 1-(9-((4-(2-(terc-butildimetilsililóxi)etil)tiofen-2-il)metil)-1-oxa-
4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4-il)-2,2,2-trifluoroetanona (exemplo 43, etapa a) (1,0 g) em metanol (5 mL). Após 16 horas a mistura reacional
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235/638 foi evaporada até a secura. Acetonitrila foi adicionada, a solução evaporada até a secura em vácuo, e este processo foi repetido três vezes para fornecer o composto do subtítulo como um sólido branco. Produção 0,78 g.
[00743] 1H RMN (400 MHz, CDCh) δ 6,94 (s, 1H), 6,87 (s, 1H), 3,91
- 3,85 (m, 2H), 3,78 (t, J = 7,1 Hz, 2H), 3,72 - 3,68 (m, 2H), 2,93 - 2,82 (m, 4H), 2,80 - 2,73 (m, 4H), 2,62 - 2,53 (m, 2H), 2,11 - 2,01 (m, 2H),
1,76 - 1,64 (m, 2H), 0,87 (s, 9H), 0,00 (s, 6H) + 1 próton trocável não observado.
c) (9-((4-(2-(terc-butildimetilsililóxi)etil)tiofen-2-il)metil)-1-oxa-4,9- diazaespiro[5,5]undecan-4-il)(2-terc-butiltiazol-4-il)metanona [00744] HATU (0,306 g) foi adicionado uma solução agitada de ácido 2-terc-butiltiazol-4-carboxílico (0,16 g), 9-((4-(2-(tercbutildimetilsililóxi)etil)tiofen-2-il)metil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecano (exemplo 43, etapa b) (0,300 g) e trietilamina (0,41 mL) em DMF (3 mL). Após 1 hora, a mistura reacional foi dividida entre água e acetato de etila. A camada de acetato de etila foi lavada duas vezes com água e salmoura, secada sobre sulfato de magnésio, filtrada e evaporada em vácuo. Purificação por cromatografia de sílica-gel eluindo com acetato de etila:iso-hexano:trietilamina, 12:90:10 forneceu o composto do subtítulo como uma goma. Produção 0,3 g.
[00745] 1H RMN (300 MHz, CDCh) δ 7,82 (s, 1H), 6,85 (s, 1H), 6,74 (s, 1H), 4,01 - 3,92 (m, 1H), 3,92 - 3,84 (m, 1H), 3,82 - 3,71 (m, 7H),
3,69 - 3,58 (m, 3H), 2,79 - 2,71 (m, 2H), 2,60 - 2,28 (m, 4H), 1,93 -
1,79 (m, 2H), 1,44 (s, 9H), 0,87 (s, 9H), -0,01 (s, 6H).
d) (2-terc-butiltiazol-4-il)(9-((4-(2-hidroxietil)tiofen-2-il)metil)-1-oxa-
4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4-il)metanona
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[00746] TBAF (1,5 mL de uma solução a 1 M em THF) foi adicionado a uma solução agitada de (9-((4-(2-(terc-butildimetilsililóxi)etil)tiofen-
2-il)metil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4-il)(2-terc-butiltiazol-4il)metanona (exemplo 43, etapa c) (0,300 g) em THF (3 mL). Após 1 hora, a reação foi evaporada para uma goma. Purificação por cromatografia de sílica-gel eluindo com acetato de etila:trietilamina, 20:1 forneceu o composto do subtítulo como uma goma. Produção 0,22 g.
[00747] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO) δ 8,00 (s, 1H), 7,01 (s, 1H),
6,84 - 6,73 (m, 1H), 4,59 (t, J = 5,3 Hz, 1H), 3,77 - 3,48 (m, 10H), 2,64 (t, J = 7,0 Hz, 2H), 2,54 - 2,16 (m, 4H), 1,74 - 1,63 (m, 2H), 1,58 - 1,43 (m, 2H), 1,41 (s, 9H).
e) 2-(5-((4-(2-terc-butiltiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5] undecan-9-il)metil)tiofen-3-il)acetaldeído
[00748] Periodinano Dess-Martin (0,316 g) foi adicionado a uma solução agitada de (2-terc-butiltiazol-4-il)(9-((4-(2-hidroxietil)tiofen-2il)metil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4-il)metanona (exemplo 43, etapa d) (0,23 g) e TFA (0,05 mL) em DCM (5 mL). Após 40 minutos a mistura reacional foi tratada com solução aquosa de tiossulfato de sódio saturada (5 mL), solução de bicarbonato de sódio saturada (5 mL) e acetato de etila (30 mL). A mistura foi extraída duas vezes com acetato de etila, os orgânicos combinados foram lavados com solução de bicarbonato de sódio saturada, ácido acético (0,08 mL) foi adicionado, em seguida a solução foi secada sobre sulfato de sódio, filtrada, e em
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237/638 seguida evaporada em vácuo para fornecer o composto do subtítulo. Produção 0,23 g. Usado diretamente.
[00749] m/z 462 (M+H)+ (APCI)
f) Ditrifluoroacetato de (R)-7-(2-(2-(5-((4-(2-terc-butiltiazol-4- carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil)tiofen-3il)etilamino)-1-hidroxietil)-4-hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona
HO
OH [00750] Ácido acético (0,039 mL) foi adicionado a uma solução agitada de cloridrato de (R)-7-(2-amino-1-hidroxietil)-4hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona (WO2007027134, exemplo 1, etapa d) (0,180 g) e 2-(5-((4-(2-terc-butiltiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil)tiofen-3-il)acetaldeído (exemplo 43, etapa e) (0,230 g) em MeOH (8 mL). Após 1 minuto, cianoboroidreto de sódio (0,125 g) foi adicionado. Após 3 horas, a mistura reacional foi filtrada e purificada por HPLC preparativa (Sunfire®, gradiente: 10-35% de acetonitrila em 0,2% de TFA aquoso). As frações contendo produto puro foram combinadas e evaporadas até a secura. Trituração com dietil éter forneceu o composto do título como um sólido branco. Produção 0,14 g.
[00751] m/z 672 (M+H)+ (APCI) [00752] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO) δ 11,67 (s, 1H), 10,24 (s,
1H), 8,91 - 8,71 (m, 2H), 8,04 (s, 1H), 7,46 (s, 1H), 7,18 (s, 1H), 6,93 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 6,77 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 6,54 - 6,44 (m, 1H), 4,93 4,86 (m, 1H), 4,68 - 4,51 (m, 2H), 3,82 - 3,47 (m, 8H), 3,32 - 3,15 (m, 4H), 3,12 - 2,87 (m, 5H), 2,15 - 2,07 (m, 2H), 1,83 - 1,54 (m, 2H), 1,39 (s, 9H).
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Exemplo 44
Ditrifluoroacetato de (R)-5-(2-(3-((2,2-Difluoro-4-(2-isopropiltiazol4-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil) fenetilamino)-1 -hidroxietil)-8-hidroxiquinolin-2(1H)-ona
OH
HO
a) 2,2-Difluoro-4-(2-isopropiltiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro [5,5]undecano-9-carboxilato de terc-butila [00753] HATU (1,184 g) foi adicionado à solução de 2,2-difluoro-1oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecano-9-carboxilato de terc-butila (exemplo 37, etapa c) (0,7 g) e ácido 2-isopropiltiazol-4-carboxílico (0,41 g) e trietilamina (1 mL) em DMF (12 mL) a 20°C e a mistura resultante agitada durante 1 hora. A mistura foi dividida entre acetato de etila e salmoura, a camada orgânica foi lavada duas vezes com salmoura, secada sobre sulfato de sódio, filtrada e o solvente evaporado sob pressão reduzida. O produto bruto foi purificado por cromatografia de sílica rápida usando 30% de acetato de etila em iso-hexano como solvente. Frações puras foram evaporadas até a secura para fornecer o composto do subtítulo. Produção 0,78 g.
[00754] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO, 90°C) δ 8,11 (s, 1H), 4,29 -
4,20 (m, 2H), 4,03 - 3,98 (m, 2H), 3,58 - 3,51 (m, 2H), 3,37 - 3,30 (m, 1H), 3,26 - 3,17 (m, 2H), 1,81 - 1,74 (m, 2H), 1,66 - 1,57 (m, 2H), 1,40 (s, 9H), 1,35 (d, 6H)
b) Trifluoroacetato de (2,2-Difluoro-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5] un-
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239/638 decan-4-jl)(2-jsopropjltjazol-4-jl)metanona
[00755] Uma solução de terc-butil-2,2-Difluoro-4-(2-isopropiltiazol-4carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecano-9-carboxilato (exemplo 44, etapa a) (0,78 g) em DCM (20 mL) foi tratada com ácido trifluoroacético (5 mL) e a mistura reacional deixada descansar a 20°C durante 30 minutos. Tolueno (40 mL) foi adicionado e os solventes evaporados sob pressão reduzida. O resíduo foi azeotropado duas vezes com acetonitrila para fornecer o composto do subtítulo. Produção 0,8 g.
[00756] m/z 346 (M+H)+ (APCI) [00757] 1H RMN (300 MHz, D6-DMSO, 90°C) δ 8,57 (s, 2H), 8,16 (s,
1H), 4,39 - 4,22 (m, 2H), 4,04 (s, 2H), 3,39 - 3,28 (m, 1H), 3,27 - 3,19 (m, 2H), 3,16 - 3,04 (m, 2H), 2,07 - 1,97 (m, 2H), 1,93 - 1,80 (m, 2H),
1,37 (d, 6H).
c) (2,2-Djfluoro-9-(3-(2-hjdroxjetjl)benzjl)-1-oxa-4,9-djazaespjro[5,5] undecan-4-jl)(2-jsopropjltjazol-4-jl)metanona
[00758] 2-(3-(Bromometil)fenil)etanol (exemplo 6, etapa a) (0,21 g) foi adicionado a uma mistura de trifluoroacetato de (2,2-difluoro-1-oxa-
4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4-il)(2-isopropiltiazol-4-il)metanona (exemplo 44, etapa b) (0,40 g) e trietilamina (0,37 mL) em acetonitrila (15 mL). A mistura reacional foi agitada a 20°C durante 2 horas. O solvente foi evaporado sob pressão reduzida e o resíduo dividido entre acetato de etila e salmoura, a camada orgânica foi secada sobre sulfato de sódio, filtrada e o solvente evaporado sob pressão reduzida. O
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240/638 produto bruto foi purificado por cromatografia de sílica rápida usando 2,5% de metanol em diclorometano com 1% de trietilamina como solvente. Frações puras foram evaporadas até a secura para fornecer o composto do subtítulo. Produção 0,40 g.
[00759] m/z 480 (M+H)+ (APCI)
d) (R)-5-(1 -(terc-butildimetilsililóxi)-2-(3-((2,2-Difluoro-4-(2- isopropiltiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil) fenetilamino)etil)-8-hidroxiquinolin-2(1H)-ona
HO [00760] Uma solução de (2,2-Difluoro-9-(3-(2-hidroxietil)benzil)-1oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4-il)(2-isopropiltiazol-4-il)metanona (exemplo 44, etapa c) (0,38 g) em DCM (20 mL) foi tratada com ácido trifluoroacético (0,061 mL) seguida por periodinano Dess-Martin (0,437 g) e a mistura resultante agitada a 20°C durante 40 minutos. A mistura reacional foi tratada com solução de tiossulfato de sódio saturada (20 mL) e solução de bicarbonato de sódio saturada (20 mL) e acetato de etila (30 mL) e agitada vigorosamente durante 5 minutos. A mistura foi extraída duas vezes com acetato de etila, os orgânicos combinados foram lavados com solução de bicarbonato de sódio saturada, secados sobre sulfato de sódio e filtrados. Ácido acético (0,045 mL) foi adicionado a esta solução e o solvente em seguida removido sob pressão reduzida. O resíduo foi dissolvido em metanol (3 mL) e adicionado a uma solução de (R)-5-(2-amino-1-(terc-butildimetilsililóxi)etil)-8hidroxiquinolin-2(1H)-ona (WO2004106333) (0,345 g) em metanol (15 mL). A mistura foi resfriada para 0°C e triacetoxiboroidreto de sódio
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241/638 (0,252 g) foi adicionado em uma porção. A mistura reacional foi agitada a 20°C durante 3 horas. O solvente foi removido sob pressão reduzida e o resíduo dividido entre acetato de etila e solução de bicarbonato de sódio saturada, a camada orgânica foi secada sobre sulfato de sódio, filtrada e o solvente removido sob pressão reduzida. O produto bruto foi purificado por cromatografia de sílica rápida usando 10% de metanol em diclorometano com 1% de amônia aquosa 880 como solvente. Frações puras foram evaporadas até a secura para fornecer o composto do subtítulo. Produção 0,32 g.
[00761] m/z 796 (M+H)+ (APCI)
e) Ditrifluoroacetato de (R)-5-(2-(3-((2,2-Difluoro-4-(2- isopropiltiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil) fenetilamino)-1 -hidroxietil)-8-hidroxiquinolin-2(1H)-ona
[00762] tri-hidrofluoreto de trietilamina (0,082 mL) em metanol (2 mL) foi adicionado à solução de (R)-5-(1-(terc-butildimetilsililóxi)-2-(3((2,2-Difluoro-4-(2-isopropiltiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil)fenetilamino)etil)-8-hidroxiquinolin2(1H)-ona (exemplo 44, etapa d) (0,32 g) em THF (8 mL) e a mistura reacional deixada descansar a 20°C durante 18 horas. O solvente foi removido sob pressão reduzida e o produto bruto foi purificado por HPLC preparativa (Sunfire®, gradiente: 10-40% de acetonitrila em 0,2% de TFA aquoso). As frações contendo o composto desejado foram evaporadas até a secura para fornecer o composto do título. Produção 0,21 g.
[00763] m/z 682 (M+H)+ (APCI) [00764] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO, 90°C) δ 8,18 - 8,11 (m, 2H),
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7,44 - 7,31 (m, 4H), 7,14 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 6,99 (d, J = 7,9 Hz, 1H),
6,55 (d, J = 10,0 Hz, 1H), 5,37 - 5,31 (m, 1H), 4,31 (s, 2H), 4,23 (s, 2H), 4,01 (s, 2H), 3,40 - 2,98 (m, 11H), 2,08 - 1,99 (m, 2H), 1,98 - 1,88 (m, 2H), 1,36 (d, 6H). Seis prótons trocáveis não observados.
Exemplo 45
Ditrifluoroacetato de (R)-7-(2-(2,6-Difluoro-3-((4-(2-isopropiltiazol4-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil) fenetilamino)-1-hidroxietil)-4-hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona
HO
OH
a) 2-(2,6-Difluorofenil)etanol
HO [00765] Uma solução de complexo de borano-sulfeto de dimetila (2M em THF, 26 mL) foi adicionado cautelosamente a uma solução de ácido 2-(2,6-Difluorofenil)acético (3 g) em THF (50 mL) a 0°C. A reação foi em seguida deixada aquecer para TA e agitada durante 3 horas. A reação foi resfriada em um banho de gelo e cautelosamente extinta com metanol (10 mL). O solvente foi evaporado e o resíduo purificado por cromatografia de sílica-gel eluindo com 9:1 a 4:1 de gradiente de iso-hexano:acetato de etila. As frações contendo produto foram combinadas e evaporadas para fornecer o composto do subtítulo como um óleo claro. Produção 2,2 g.
[00766] 1H RMN (400 MHz, CDC1s) δ 7,20 - 7,13 (m, 1H), 6,94 -
6,82 (m, 2H), 3,85 (t, J = 6,8 Hz, 2H), 2,97 (t, J = 6,7 Hz, 2H). Um próton trocável não observado.
b) 2,4-Difluoro-3-(2-hidroxietil)benzaldeído
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F H
HO
F
O [00767] 2,2,6,6-Tetrametilpiperidina (5 mL) foi adicionado à solução de butil lítio (1,6M em hexanos, 19 mL) em THF (25 mL) a -70°C. Uma solução de 2-(2,6-Difluorofenil)etanol (exemplo 45, etapa a) (1,6 g) em THF (25 mL) foi adicionada gota a gota e a mistura resultante agitada durante 2 horas. DMF (3,9 mL) foi em seguida adicionada e a mistura agitada durante 1 hora a -70°C. A mistura foi em seguida deixada aquecer para TA e agitada durante 70 horas. A reação foi extinta com solução de HCl (2M, 50 mL), diluída com acetato de etila (100 mL) e as camadas separadas. A fase aquosa foi extraída com acetato de etila (2 x 50 mL). Os orgânicos combinados foram lavados com salmoura (100 mL), secados sobre sulfato de magnésio, filtrados e evaporados. O resíduo foi purificado por cromatografia de sílica-gel eluindo com 4:1 a 2:1 de gradiente de iso-hexano:éter. As frações contendo produto foram combinadas e evaporadas. O óleo resultante foi dissolvido em acetato de etila (50 mL) e lavado com solução de HCl (2M, 30 mL), salmoura (30 mL), secado sobre sulfato de magnésio, filtrado e evaporado para fornecer o composto do subtítulo como um óleo claro. Produção 1,1 g.
[00768] 1H RMN (300 MHz, CDCU) δ 10,28 (s, 1H), 7,84 - 7,74 (m,
1H), 7,05 - 6,95 (m, 1H), 3,89 (t, J = 6,6 Hz, 2H), 3,01 (t, J = 6,6 Hz, 2H). Um próton trocável não observado.
c) (9-(2,4-Difluoro-3-(2-hidroxietil)benzil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5] undecan-4-il)(2-isopropiltiazol-4-il)metanona
HO [00769] 2,4-Difluoro-3-(2-hidroxietil)benzaldeído (exemplo 45, etapa
b) (0,35 g) foi adicionado à solução de trifluoroacetato de (2
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244/638 isopropiltiazol-4-il)(1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4-il)metanona (exemplo 22, etapa b) (0,67 g) e ácido acético (0,09 mL) em M-metil-2pirrolidinona (1 mL). A mistura resultante foi agitada durante 1 hora em seguida extinta pela adição porção a porção de triacetoxiboroidreto de sódio (0,335 g) durante 5 minutos. A mistura resultante foi agitada durante a noite, diluída com acetonitrila (20 mL) e aplicada a um cartucho SCX (Varian 10 g, pré-umedecido com acetonitrila, (50 mL)). O cartucho foi lavado com acetonitrila (50 mL) e eluído com 10% de amônia aquosa ‘880’ em solução de acetonitrila (50 mL). O eluente foi evaporado, azeotropado com tolueno e purificado por cromatografia de sílica-gel eluindo com gradiente de 77,5:17,5:5 de iso-hexano:acetato de etila:trietilamina a 95:5 de acetato de etila:trietilamina para fornecer o composto do subtítulo como uma goma amarela. Produção 0,74 g. [00770] m/z 480 (M+H)+ (APCI) [00771] 1H RMN (300 MHz, D6-DMSO) δ 8,00 (s, 1H), 7,32 - 7,16 (m, 1H), 7,00 (t, J = 8,7 Hz, 1H), 4,80 (t, J = 5,5 Hz, 1H), 3,78 - 3,38 (m, 11H), 2,77 (t, J = 7,0 Hz, 2H), 2,46 - 2,26 (m, 4H), 1,76 - 1,40 (m, 4H), 1,35 (d, J = 6,9 Hz, 6H).
d) 2-(2,6-Difluoro-3-((4-(2-isopropiltiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9- diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil)fenil)acetaldeído [00772] TFA (0,11 mL) foi adicionado à solução de (9-(2,4-Difluoro-
3-(2-hidroxietil)benzil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4-il)(2isopropiltiazol-4-il)metanona (exemplo 45, etapa c) (0,7 g) em DCM (5 mL) a 0°C e a mistura resultante agitada durante 5 minutos. Periodinano Dess-Martin (0,93 g) foi em seguida adicionado e a mistura agitada a TA durante 45 minutos. Solução de tiossulfato de sódio saturada (5 mL), solução de bicarbonato de sódio saturada (5 mL) e acetato de
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245/638 etila (20 mL) foram em seguida adicionados e a mistura agitada durante 10 minutos. A camada aquosa foi separada e extraída com acetato de etila (20 mL). Os orgânicos combinados foram lavados com salmoura, acidificados com algumas gotas de ácido acético, a mistura secada sobre sulfato de sódio, filtrada e evaporada para fornecer o composto do subtítulo como uma goma clara. Produção 0,64 g.
[00773] m/z 478 (M+H)+ (APCI)
e) Ditrifluoroacetato de (R)-7-(2-(2,6-Difluoro-3-((4-(2- isopropiltiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil) fenetilamino)-1-hidroxietil)-4-hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona
HO
OH [00774] Uma solução de 2-(2,6-Difluoro-3-((4-(2-isopropiltiazol-4carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil)fenil)acetaldeído (exemplo 45, etapa d) (0,323 g) em metanol (3 mL) foi adicionada a uma mistura de cloridrato de (R)-7-(2-amino-1-hidroxietil)-4hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona (WO2007027134, exemplo 1, etapa d) (0,23 g) e ácido acético (0,034 mL) em metanol (2 mL). A mistura resultante foi agitada durante 5 minutos em seguida resfriada para 0°C. Cianoboroidreto de sódio (0,057 g) foi adicionado e a mistura deixada aquecer para TA e agitada durante 2 horas. Os solventes foram evaporados e o resíduo purificado por cromatografia de sílica-gel eluindo com 95:5:0,5 a 89:10:1 de gradiente de DCM:metanol:amônia aquosa ‘880’. As frações contendo produto foram combinadas, evaporadas e purificadas por HPLC preparativa (Sunfire®, gradiente: 5-50% de acetonitrila em 0,2% de TFA aquoso). As frações contendo produto foram combinadas, evaporadas e trituradas com éter para fornecer o com
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246/638 posto do título como um sólido branco. Produção 0,21 g.
[00775] m/z 688 (M+H)+ (APCI) [00776] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO, 90°C) δ 11,27 (s, 1H), 7,94 (s, 1H), 7,62 - 7,53 (m, 1H), 7,23 - 7,14 (m, 1H), 6,93 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 6,78 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 4,92 (dd, J = 8,1, 4,7 Hz, 1H), 4,31 (s, 2H), 3,75 - 3,61 (m, 6H), 3,34 - 3,02 (m, 11H), 2,10 - 1,95 (m, 2H), 1,86 - 1,71 (m, 2H), 1,34 (d, J = 6,7 Hz, 6H). Cinco prótons trocáveis não observados.
Exemplo 46
Ditrifluoroacetato de (R)-5-(2-(2,6-Difluoro-3-((4-(2-isopropiltiazol4-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil) fenetilamino)-1 -hidroxietil)-8-hidroxiquinolin-2(1H)-ona
HO
OH [00777] Uma solução de 2-(2,6-Difluoro-3-((4-(2-isopropiltiazol-4carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil)fenil)acetaldeído (exemplo 45, etapa d) (0,29 g) em metanol (3 mL) foi adicionada a uma mistura de (R)-5-(2-amino-1-(terc-butildimetilsililóxi)etil)-8hidroxiquinolin-2(1H)-ona (WO2004106333) (0,20 g) e ácido acético (0,034 mL) em metanol (3 mL). A mistura resultante foi agitada durante 5 minutos em seguida resfriada para 0°C. Cianoboroidreto de sódio (0,057 g) foi em seguida adicionado e a mistura deixada aquecer para TA e agitada durante 2 horas. O solvente foi evaporado e o resíduo purificado por cromatografia de sílica-gel eluindo com 95:5:0,5 a 89:10:1 de gradiente de DCM:metanol:amônia aquosa ‘880’. As frações contendo produto foram combinadas e evaporadas. O resíduo foi dissolvido em THF (3 mL), tri-hidrofluoreto de trietilamina (0,29 mL) foi
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247/638 adicionado e a mistura agitada durante a noite. A reação foi concentrada e o resíduo purificado por HPLC preparativa (Sunfire®, gradiente:
5-50% de acetonitrila em 0,2% de TFA aquoso). As frações contendo produto foram combinadas, evaporadas e trituradas com dietiléter para fornecer o composto do título como um sólido branco. Produção 0,23 g.
[00778] m/z 682 (M+H)+ (APCI) [00779] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO, 90°C) δ 8,19 (d, J = 10,0 Hz,
1H), 7,94 (s, 1H), 7,65 - 7,51 (m, 1H), 7,24 - 7,10 (m, 2H), 7,01 (d, J =
7,9 Hz, 1H), 6,53 (d, J = 10,0 Hz, 1H), 5,37 (dd, J = 8,6, 4,0 Hz, 1H),
4,34 (s, 2H), 3,75 - 3,59 (m, 6H), 3,34 - 3,03 (m, 11H), 2,11 - 1,95 (m, 2H), 1,88 - 1,72 (m, 2H), 1,34 (d, J = 6,9 Hz, 6H). Seis prótons trocáveis não observados.
Exemplo 47
DitrÍfluoroacetato de (R)-7-(2-(2-Fluoro-5-((4-(2-isopropiltiazol-4carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil) fenetilamino)-1-hidroxietil)-4-hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona
HO
OH
a) 2-(5-(Bromometil)-2-fluorofenil)etanol
HO,
Br [00780] Peróxido de dibenzoíla (0,14 g) foi adicionado à solução de
NBS (1,53 g) e ácido 2-(2-fluoro-5-metilfenil)acético (1,45 g) em DCM (50 mL) e a mistura resultante foi aquecida ao refluxo durante 12 ho
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248/638 ras. O solvente foi evaporado e o sólido branco dividido entre acetato de etila (100 mL) e 10% de solução de cloreto de sódio (50 mL). As camadas foram separadas e a fase orgânica lavada com 10% de solução de cloreto de sódio (50 mL), secada sobre sulfato de sódio, filtrada e evaporada. O sólido branco obtido foi novamente dissolvido em tetra-hidrofurano (25 mL) e resfriado em um banho de gelo. Uma solução de complexo de borano-sulfeto de dimetila (2M em THF, 13 mL) foi adicionada cautelosamente e a mistura foi em seguida deixada aquecer para TA e agitada durante 2 horas. A reação foi resfriada em um banho de gelo e cautelosamente extinta com metanol. Uma vez que borbulhamento cessou, o solvente foi evaporado e o resíduo purificado por cromatografia de sílica-gel eluindo com 9:1 a 4:1 de gradiente de acetato de etila:iso-hexano para fornecer o composto do subtítulo como um óleo claro. Produção 1,35 g.
[00781] 1H RMN (300 MHz, CDC1s) δ 7,32 - 7,21 (m, 2H), 7,04 -
6,97 (m, 1H), 4,46 (s, 2H), 3,87 (t, J = 6,5 Hz, 2H), 2,93 - 2,87 (m, 2H). Um próton trocável não observado.
b) (9-(4-Fluoro-3-(2-hidroxietil)benzil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5] undecan-4-il)(2-isopropiltiazol-4-il)metanona
HO [00782] 2-(5-(Bromometil)-2-fluorofenil)etanol (exemplo 47, etapa a) (0,16 g) foi adicionado à solução de trifluoroacetato de (2isopropiltiazol-4-il)(1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4-il)metanona (exemplo 22, etapa b) (0,3 g) e trietilamina (0,3 mL) em acetonitrila (10 mL). A mistura resultante foi agitada durante a noite, diluída com acetonitrila (20 mL) e aplicada a um cartucho SCX (10 g de Varian, préumedecido com acetonitrila (50 mL)). O cartucho foi lavado com acetonitrila (50 mL) e eluído com 10% de amônia aquosa ‘880’ em solução de acetonitrila (50 mL). O eluente foi evaporado, azeotropado com to
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249/638 lueno e purificado por cromatografia de sílica-gel eluindo com gradiente de 77,5:17,5:5 de iso-hexano:acetato de etila:trietilamina a 95:5 de acetato de etila:trietilamina. As frações contendo produto foram combinadas e evaporadas para fornecer o composto do subtítulo como uma goma amarela. Produção 0,22 g.
[00783] m/z 462 (M+H)+ (APCI) [00784] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO, 90°C) δ 7,91 (s, 1H), 7,22 -
7,14 (m, 1H), 7,14 - 7,06 (m, 1H), 7,00 (dd, J = 10,0, 8,3 Hz, 1H), 4,40 (t, J = 5,3 Hz, 1H), 3,72 - 3,52 (m, 8H), 3,43 - 3,23 (m, 3H), 2,74 (t, J = 7,0 Hz, 2H), 2,42 - 2,23 (m, 4H), 1,75 - 1,65 (m, 2H), 1,59 - 1,47 (m, 2H), 1,36 (d, J = 6,9 Hz, 6H).
c) Ditrifluoroacetato de (R)-7-(2-(2-Fluoro-5-((4-(2-isopropiltiazol-4carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil) fenetilamino)-1-hidroxietil)-4-hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona
HO.
OH [00785] Ácido trifluoroacético (0,033 mL) foi adicionado à solução de (9-(4-fluoro-3-(2-hidroxietil)benzil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5] undecan-4-il)(2-isopropiltiazol-4-il)metanona (exemplo 47, etapa b) (0,2 g) em DCM (5 mL) a 0°C. A mistura foi agitada durante 5 minutos em seguida periodinano Dess-Martin (0,28 g) foi adicionado. A solução amarela resultante foi deixada aquecer para TA e agitada durante 1 hora. Uma mistura de solução de tiossulfato de sódio saturada (1 mL), solução de bicarbonato de sódio saturada (1 mL) e acetato de etila (5 mL) foi em seguida adicionada e a mistura resultante agitada vigorosamente durante 10 minutos. A fase aquosa foi separada e extraída com ace
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250/638 tato de etila (5 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (5 mL), acidificadas com algumas gotas de ácido acético, secadas sobre sulfato de sódio, filtradas e evaporadas em vácuo. O resíduo foi dissolvido em metanol (2 mL), ácido acético (0,025 mL) e cloridrato de (R)-7-(2-amino-1-hidroxietil)-4-hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)ona (WO2007027134, exemplo 1, etapa d) (0,17 g) foram em seguida adicionados e a mistura agitada durante 5 minutos antes do resfriamento em um banho de gelo. Cianoboroidreto de sódio (0,04 g) foi em seguida adicionado, a mistura deixada aquecer para TA e agitada durante a noite. O solvente foi evaporado em vácuo. A purificação foi por cromatografia de sílica-gel eluindo com 94,5:5:0,5 a 89:10:1 de gradiente de DCM:metanol:amônia aquosa ‘880’. As frações contendo produto foram combinadas e evaporadas em vácuo. Outra purificação foi por HPLC preparativa (Sunfire®, gradiente: 5-30% de acetonitrila em 0,2% de TFA aquoso). As frações contendo produto foram combinadas, evaporadas em vácuo e o resíduo triturado com dietiléter para fornecer o composto do título como um sólido branco. Produção 0,14g. [00786] m/z 670 (M+H)+ (APCI) [00787] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO, 90°C) δ 11,27 (s, 1H), 7,94 (s, 1H), 7,52 - 7,42 (m, 2H), 7,25 (t, J = 9,2 Hz, 1H), 6,94 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 6,78 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 4,93 (dd, J = 7,9, 4,6 Hz, 1H), 4,29 (s, 2H), 3,80 - 3,58 (m, 6H), 3,34 - 2,95 (m, 11H), 2,11 - 1,95 (m, 2H), 1,87 - 1,64 (m, 2H), 1,34 (d, J = 6,7 Hz, 6H). Cinco prótons trocáveis não observados.
Exemplo 47A (R)-7-(2-(2-fluoro-5-((4-(2-isopropiltiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil)fenetilamino)-1-hidroxietil)-4hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona
a) 2-(5-(Bromometil)-2-fluorofenil)etanol
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HO
Br
F [00788] Peróxido de dibenzoíla (1 g) foi adicionado à solução de NBS (10,6 g) e ácido 2-(2-fluoro-5-metilfenil)acético (10 g) em DCM (250 mL) e a mistura resultante foi aquecida sob refluxo durante 12 horas. O solvente foi evaporado e o sólido branco dividido entre acetato de etila (250 mL) e 10% de solução de cloreto de sódio (500 mL). As camadas foram separadas e a fase orgânica lavada com 10% de solução de cloreto de sódio (500 mL), secada sobre sulfato de magnésio, filtrada e evaporada. O sólido branco obtido foi novamente dissolvido em tetra-hidrofurano (150 mL) e resfriado em um banho de gelo. Uma solução de complexo de borano-sulfeto de dimetila (2M em THF, 89 mL) foi adicionada cautelosamente e a mistura foi em seguida deixada aquecer para TA e agitada durante a noite. A reação foi resfriada em um banho de gelo e cautelosamente extinta com metanol. Uma vez que o borbulhamento cessou, o solvente foi evaporado e o resíduo foi triturado com uma mistura 4:1 de /so-hexanos e éter. A purificação foi por cromatografia de sílica-gel eluindo com 9:1 a 4:1 de gradiente de acetato de etila:iso-hexano para fornecer o composto do subtítulo como um óleo claro. Produção 6,5 g.
[00789] 1H RMN (300 MHz, CDCh) δ 7,32 - 7,21 (m, 2H), 7,04 -
6,97 (m, 1H), 4,46 (s, 2H), 3,87 (t, J = 6,5 Hz, 2H), 2,93 - 2,87 (m, 2H). Um próton trocável não observado.
b) (9-(4-Fluoro-3-(2-hidroxietil)benzil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5] undecan-4-il)(2-isopropiltiazol-4-il)metanona
HO [00790] 2-(5-(Bromometil)-2-fluorofenil)etanol (exemplo 47A, etapa
a) (5,2 g) foi adicionado a uma suspensão de trifluoroacetato de (2
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252/638 isopropiltiazol-4-il)(1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4-il)metanona (exemplo 22, etapa b) (9,4 g) e carbonato de potássio (6,8 g) em etanol (75 mL). A mistura resultante foi agitada durante a noite e filtrada. A massa filtrante foi lavada com etanol (50 mL) e o filtrado combinado e as lavagens foram evaporadas. O resíduo foi dividido entre água (100 mL) e acetato de etila (250 mL), as camadas foram separadas e o orgânico lavado com salmoura (100 mL), secado sobre sulfato de sódio, filtrado e evaporado. A purificação foi por cromatografia de sílicagel eluindo com 95:5 de gradiente de acetato de etila:trietilamina. As frações contendo produto foram combinadas e evaporadas para fornecer o composto do subtítulo como uma goma amarela. Produção 7,9 g. [00791] m/z 462 (M+H)+ (APCI) [00792] 1H RMN (400 MHz, Ü6-DMSO, 90°C) δ 7,91 (s, 1H), 7,22 -
7,14 (m, 1H), 7,14 - 7,06 (m, 1H), 7,00 (dd, J = 10,0, 8,3 Hz, 1H), 4,40 (t, J = 5,3 Hz, 1H), 3,72 - 3,52 (m, 8H), 3,43 - 3,23 (m, 3H), 2,74 (t, J = 7,0 Hz, 2H), 2,42 - 2,23 (m, 4H), 1,75 - 1,65 (m, 2H), 1,59 - 1,47 (m, 2H), 1,36 (d, J = 6,9 Hz, 6H).
c) (R)-7-(2-(2-fluoro-5-((4-(2-isopropiltiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9- diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil)fenetilamino)-1-hidroxietil)-4hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona [00793] Ácido trifluoroacético (1,32 mL) foi adicionado à solução de (9-(4-fluoro-3-(2-hidroxietil)benzil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-
4-il)(2-isopropiltiazol-4-il)metanona (exemplo 47A, etapa b) (7,9 g) em DCM (200 mL) a 0°C. A mistura foi agitada durante 5 minutos em seguida periodinano Dess-Martin (12,3 g) foi adicionado. A solução amarela resultante foi deixada aquecer para TA e agitada durante 1 hora. Uma mistura de solução de tiossulfato de sódio saturada (100 mL), solução de bicarbonato de sódio saturada (100 mL) e acetato de etila (500 mL) foi em seguida adicionada e a mistura resultante agitada vigorosamente durante 10 minutos. A fase aquosa foi separada e extraí
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253/638 da com acetato de etila (100 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (100 mL), acidificadas com ácido acético (2 mL), secadas sobre sulfato de sódio, filtradas e evaporadas em vácuo. O resíduo foi dissolvido em metanol (140 mL) e cloridrato de (R)7-(2-amino-1-hidroxietil)-4-hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona (WO2007027134, exemplo 1, etapa d) (4,5 g) foi em seguida adicionado e a mistura agitada durante 5 minutos antes do resfriamento em um banho de gelo. Cianoboroidreto de sódio (1,6 g) foi em seguida adicionado, a mistura deixada aquecer para TA e agitada durante a noite. A mistura reacional foi concentrada em vácuo e dividida entre THF (100 mL) e uma mistura de salmoura e solução de bicarbonato de sódio saturada (10:1, 100 mL). As camadas foram separadas e a camada orgânica foi secada sobre sulfato de sódio, filtrada, evaporada e o resíduo azeotropado com acetonitrila. A purificação foi por cromatografia de sílica-gel eluindo com 94,5:5:0,5 a 89:10:1 de gradiente de DCM:metanol:amônia aquosa ‘880’ . As frações contendo o produto foram combinadas e evaporadas em vácuo para fornecer o composto do título como um sólido branco. Produção 4,1 g [00794] m/z 670 (M+H)+ (APCI) [00795] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO, 90°C) δ 11,27 (s, 1H), 7,94 (s, 1H), 7,52 - 7,42 (m, 2H), 7,25 (t, J = 9,2 Hz, 1H), 6,94 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 6,78 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 4,93 (dd, J = 7,9, 4,6 Hz, 1H), 4,29 (s, 2H), 3,80 - 3,58 (m, 6H), 3,34 - 2,95 (m, 11H), 2,11 - 1,95 (m, 2H), 1,87 - 1,64 (m, 2H), 1,34 (d, J = 6,7 Hz, 6H). Cinco prótons trocáveis não observados.
Exemplo 47B sal de ácido (R)-7-(2-(2-fluoro-5-((4-(2-isopropiltiazol-4-carbonil)-1oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil)fenetilamino)-1hidroxietil)-4-hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona di(1S)-(+)-10canforsulfônico
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254/638 [00796] Ácido 1S-(+)-canforsulfônico (41mg) foi adicionado à solução de (R)-7-(2-(2-fluoro-5-((4-(2-isopropiltiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil)fenetilamino)-1-hidroxietil)-4hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona (exemplo 47A) (59mg) em etanol (5mL) e a solução clara resultante evaporada até a secura para fornecer sal de ácido dicanforsulfônico de (R)-7-(2-(2-fluoro-5-((4-(2isopropiltiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9il)metil)fenetilamino)-1-hidroxietil)-4-hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona como um sólido branco amorfo. Produção 0,1 g.
[00797] /so-propanol (1mL) foi adicionado a sal de ácido dicanforsulfônico de (R)-7-(2-(2-fluoro-5-((4-(2-isopropiltiazol-4-carbonil)-1-oxa-
4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil)fenetilamino)-1-hidroxietil)-4hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona (20 mg) e a solução clara resultante foi agitada 2 dias. Um sólido branco foi formado e a suspensão foi agitada durante mais 5 dias. O sólido foi isolado por filtração centrífuga e secado sob vácuo elevado para fornecer sal de ácido dicanforsulfônico de (R)-7-(2-(2-fluoro-5-((4-(2-isopropiltiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9- diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil)fenetilamino)-1-hidroxietil)-4hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona como um sólido cristalino branco. Produção 5 mg.
[00798] Uma mistura de (R)-7-(2-(2-fluoro-5-((4-(2-isopropiltiazol-4carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil)fenetilamino)-1hidroxietil)-4-hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona (4,3 g, 6,42 mmols) (exemplo 47A), ácido (1S)-(+)-10-canforsulfônico (2,98 g, 12,84 mmols) e /so-propanol (300 mL) foi aquecida a 50°C até uma solução clara formar-se, ser semeada, e deixada resfriar para TA e agitada durante 4 dias. O sólido foi isolado por filtração, lavado com /so-propanol (100 mL), éter (2x200 mL) e secado por sugamento para fornecer o composto do título como um sólido cristalino branco. Produção 5,1 g [00799] O excesso enantiomérico do composto do título é maior que
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255/638 o composto obtido no exemplo 47A. (exemplo 47A = 86% ee, composto do título >96% ee) [00800] Método quiral analítico: Chiralcel OJ-H 4,6x250 mm, 80:20 iso-hexano:etanol + 0,1% de etilenodiamina, 1 ml/min, 35C, 225 +-10 nm durante 30 minutos.
[00801] Tempo de retenção para o enatiômero R = 15,91 min [00802] Tempo de retenção para o enantiômero S = 22,85 min [00803] 1H RMN (300 MHz, DMSO, 90°C) δ 11,42 (s, 1H), 9,95 (s,
1H), 8,89 (s, 2H), 7,95 (s, 1H), 7,61 - 7,54 (m, 1H), 7,53 - 7,46 (m, 1H),
7,27 (t, J = 9,2 Hz, 1H), 6,94 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 6,77 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 4,97 - 4,90 (m, 1H), 4,30 (s, 2H), 3,74 - 3,59 (m, 6H), 3,35 -3,02 (m, 9H), 2,93 (d, J = 14,6 Hz, 2H), 2,76 - 2,61 (m, 2H), 2,44 (d, J =14,6
Hz, 2H), 2,29 - 2,23 (m, 2H), 2,22 - 2,16 (m, 2H), 2,13 - 2,00 (m,2H),
1,96 - 1,68 (m, 6H), 1,34 (d, J = 6,9 Hz, 6H), 1,32 - 1,20 (m, 4H),1,06 (s, 6H), 0,76 (s, 6H) dois prótons trocáveis não observados.
[00804] Um padrão XRPD de modificação A de sal de ácido di(1S)(+)-10-canforsulfônico é apresentado na Figura 1.
[00805] Alguns picos característicos para modificação A
Pos. [2 teta] |
Espaçamento d [A] |
4,9 |
18,1 |
9,8 |
9,1 |
12,5 |
7,1 |
16,1 |
5,5 |
17,3 |
5,1 |
Exemplo 47C fumarato de (R)-7-(2-(2-fluoro-5-((4-(2-isopropiltiazol-4-carbonil)-1 oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil)fenetilamino)-1hidroxietil)-4-hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona
Modificação A [00806] Uma solução de (R)-7-(2-(2-fluoro-5-((4-(2-isopropiltiazol-4Petição 870190058499, de 25/06/2019, pág. 261/650
256/638 carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil)fenetilamino)-1hidroxietil)-4-hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona (13 mg) (exemplo 47D, etapa a) e ácido fumárico (2 mg) em metanol (0,75 mL) foi agitada a TA durante 7 dias. O sólido branco resultante formado foi isolado por filtração e secado sob vácuo elevado para fornecer o composto do título como um sólido branco. Produção 5 mg.
[00807] m/z 670 (M+H)+ (APCI) [00808] Um padrão XRPD de modificação A de sal de fumarato é apresentado na Figura 2.
[00809] Alguns picos característicos para a modificação A de sal de fumarato
Pos. [2 teta] |
Espaçamento d [A] |
6,1 |
14,4 |
8,9 |
9,9 |
13,8 |
6,4 |
21,5 |
4,1 |
23,5 |
3,8 |
Exemplo 47D
Modificação B de monofumarato de (R)-7-(2-(2-fluoro-5-((4-(2isopropiltiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9il)metil)fenetilamino)-1-hidroxietil)-4-hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)ona
a) (R)-7-(2-(2-fluoro-5-((4-(2-isopropiltiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil)fenetilamino)-1-hidroxietil)-4hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona [00810] Sal de ácido di(1S)-(+)-10-canforsulfônico de (R)-7-(2-(2fluoro-5-((4-(2-isopropiltiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil)fenetilamino)-1-hidroxietil)-4hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona (Exemplo 47B) (4,1g) foi dividido entre 2-metil-THF recentemente destilado (100 mL) e solução de bicarbonaPetição 870190058499, de 25/06/2019, pág. 262/650
257/638 to de sódio saturada (100 mL). As camadas foram separadas e a camada orgânica lavada com solução de bicarbonato de sódio saturada (100 mL), salmoura (100 mL), secada sobre sulfato de sódio, filtrada e evaporada em vácuo. O sólido vítreo resultante foi triturado três vezes com éter para fornecer o composto do subtítulo como um sólido branco. Produção 2,6 g.
b) modificação B de mono fumarato de (R)-7-(2-(2-fluoro-5-((4-(2isopropiltiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9il)metil)fenetilamino)-1-hidroxietil)-4-hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)ona [00811] (R)-7-(2-(2-Fluoro-5-((4-(2-isopropiltiazol-4-carbonil)-1-oxa-
4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil)fenetilamino)-1-hidroxietil)-4hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona (2,4 g) foi dissolvido em etanol (240 mL) a 50 °C. Ácido fumárico (0,416g) foi adicionado e a mistura aquecida sob refluxo até uma solução clara formar-se. A solução resultante foi deixada resfriar para 60°C e semeada com forma A (exemplo 47C) (50 mg). A mistura resultante foi agitada durante a noite a 50°C e em seguida deixada resfriar para TA durante 3 horas. O sólido branco resultante foi isolado por filtração, lavado com etanol (50 mL), éter (2x200 mL) e secado por sugamento para fornecer o composto do título como um sólido branco. Produção 2,3 g.
[00812] m/z 670 (M+H)+ (APCI) [00813] 1H RMN (400 MHz, DMSO, 90oC) δ 7,89 (s, 1H), 7,19 7,09 (m, 2H), 7,01 (dd, J = 9,9, 8,3 Hz, 1H), 6,86 (d, J = 8,2 Hz, 1H),
6,69 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 6,59 (d, J = 1,0 Hz, 2H), 4,65 - 4,59 (m, 1H),
3,73 - 3,56 (m, 6H), 3,41 (s, 2H), 3,30 (septet, J = 3,3 Hz, 1H), 2,90 -
2,71 (m, 6H), 2,42 - 2,26 (m, 4H), 1,75 - 1,64 (m, 2H), 1,59 - 1,48 (m, 2H), 1,35 (dd, J = 6,8, 1,2 Hz, 6H) + 6 trocáveis não observados [00814] Um padrão XRPD de modificação B de sal de fumarato é apresentado na Figura 3.
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258/638 [00815] Alguns picos característicos para a modificação B de sal de fumarato
Pos. [2 teta] |
Espaçamento d [A] |
14,3 |
6,2 |
16,3 |
5,4 |
18,0 |
4,9 |
19,6 |
4,5 |
23,0 |
3,9 |
26,1 |
3,4 |
XRPD - PANalytical CubiX PRO [00816] Dados XRPD foram coletados com uma máquina PANalytical CubiX PRO em configuração θ - 2Θ em um faixa de varredura de 2° a 40° 2θcom exposição de 100 segundos por 0,02° incremento. Os raios X foram gerados por um tubo de foco fino longo de cobre operado a 45kV e 40 mA. O comprimento de onda de raios X de cibre foi de 1,5418 A . Os dados foram coletados em portadores de base zero nos quais ~ 2 mg do composto foram colocados. O portador foi preparado de um único cristal de silício, que foi cortado ao longo de um plano de não difração e em seguida polido em um acabamento oticamente plano. Os raios-X incidentes sobre esta superfície foram negativados por extinção Bragg.
Exemplo 47E (R)-7-(2-(2-Fluoro-5-((4-(2-isopropiltiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil)fenetilamino)-1-hidroxietil)-4hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona
a) 4-(2-isopropiltiazol-4-carbonil)-1 -oxa-4,9-diazaespiro[5,5] undecano-9-carboxilato de terc-butila
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[00817] Uma mistura de cloridrato de 1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecano-9-carboxilato de terc-butila (reagente limitante) e ácido 2-isopropiltiazol-4-carboxílico (1,1 molar equivalentes) foi suspensa em 2-MeTHF (10 volumes) e resfriada para 10-15°C. Trietilamina (7,2 molares equivalentes) foi adicionado em porções a 1015°C. A suspensão espessa foi resfriada para 5-10 °C e T3P (1,3 molar equivalentes de uma solução a 1,57 M em THF) foi adicionado gota a gota a 5-10 °C durante 0,5 hora. A mistura reacional foi deixada aquecer para temperatura ambiente (35 min) e agitada durante 2,5 horas. A mistura foi diluída com água (10 volumes, exoterma de 5°C) e a mistura vigorosamente agitada; o aquoso (pH 10) foi separado e extraído com 2-MeTHF (2x2 volumes). Os orgânicos combinados foram lavados com solução de bicarbonato de sódio aquosa saturada (2 volumes) e água (2x2 volumes). A fase orgânica foi evaporada e azeotropada com MeCN (2x2 volumes) para fornecer uma goma marrom, que foi secada a 35°C em vácuo durante 24 horas. Produção: 89% de teórico.
[00818] 1H RMN (300 MHz, DMSO) δ 8,03 (s, 1H), 3,76 - 3,44 (m,
8H), 3,37 - 3,25 (m, 3H), 3,16 - 3,00 (m, 2H), 1,76 - 1,66 (m, 2H), 1,39 (s, 9H), 1,33 (d, J = 6,9 Hz, 6H)
b) (2-Isopropiltiazol-4-il)(1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4-il) metanona, Sal de trifluoroacetato
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260/638 [00819] A uma solução de 4-(2-isopropiltiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecano-9-carboxilato de terc-butila (reagente limitante) (etapa a) em DCM (5 volumes) foi adicionado ácido trifluoroacético (13,4 molares equivalentes) em porções a 10-15 °C. A solução foi deixada aquecer para a temperatura ambiente e agitada durante 16 horas. Solvente foi evaporado e o resíduo foi dissolvido em dietil éter (10 volumes). A solução foi resfriada em gelo e raspada para fornecer precipitação; a suspensão foi agitada a 0°-10°C durante 0,5 hora em seguida filtrada fria. A massa foi lavada com dietil éter (5 volumes) e secada em vácuo a 35°C para fornecer um pó de cor bege. Produção: 91% de teórico.
[00820] 1H RMN (300 MHz, DMSO) δ 8,70 - 8,37 (m, 2H), 8,05 (s,
1H), 3,82 - 3,52 (m, 6H), 3,42 - 3,25 (m, 1H), 3,19 - 3,07 (m, 2H), 3,05 -
2,90 (m, 2H), 2,02 - 1,91 (m, 2H), 1,74 - 1,54 (m, 2H), 1,35 (d, J = 6,7 Hz, 6H)
c) 4-Bromo-1-fluoro-2-(2-metoxivinil)benzeno (mistura de isômeros cis e trans)
[00821] Terc-butóxido de potássio (1,2 molar equivalentes) foi adicionado porção a porção, durante 30 minutos, a uma suspensão agitada de cloreto de (metoximetil)trifenilfosfônio (1,3 molar equivalentes) em THF (2,5 volumes) a -3oC (+ ou - 2oC). Uma cor vermelho profundo desenvolvida. A temperatura foi elevada para 18oC durante 0,5 hora e a reação agitada durante mais 1,5 hora. 5-Bromo-2fluorobenzaldeído (reagente limitante) como uma solução em THF (5 volumes) foi em seguida adicionado durante 90 minutos, tal que a temperatura da reação não excedeu 24oC. A reação foi em seguida agitada durante 2 horas em temperatura ambiente. A mistura reacional
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261/638 foi vertida em solução de cloreto de amônio aquosa saturada (10 volumes) e extraída com t-BME (2x 2,5 volumes). Os extratos combinados foram lavados com salmoura (3x 2 volumes), secados (Na2SO4), filtrados e evaporados em vácuo. O resíduo oleoso foi extraído com iso-hexano (8x 0,5 volumes). Extratos de iso-hexano combinados foram filtrados, em seguida lavados com ácido acético glacial (2 volumes) e 50% de ácido acético glacial em água (2 volumes). Após secar (Na2SO4) e filtrar, o solvente foi removido em um evaporador rotatório para fornecer um óleo laranja pálido. Produção foi de 90% de teórico. [00822] Isômero Cis: 1H RMN (300 MHz, D6-DMSO) δ 8,07 (d, J =
9,4 Hz, 1H), 7,41 - 7,39 (m, 1H), 7,13 (q, J = 1,8 Hz, 1H), 6,54 (d, J =
7,1 Hz, 1H), 5,31 (d, J = 7,1 Hz, 1H), 3,83 (s, 3H) [00823] Isômero trans: 1H RMN (300 MHz, D6-DMSO) δ 7,73 - 7,68 (m, 1H), 7,44 (d, J = 12,9 Hz, 1H), 7,41 - 7,39 (m, 1H), 7,18 - 7,09 (m, 1H), 5,79 (d, J = 12,9 Hz, 1H), 3,67 (s, 3H)
d) 4-Fluoro-3-(2-metoxivinil)benzaldeído
Fx. /Tx [00824] 4-Bromo-1-fluoro-2-(2-metoxivinil)benzeno (reagente limitante) (etapa c) foi dissolvido em 2-metiltetra-hidrofurano (5 volumes) e a solução resfriada para -10oC. Cloreto de /so-propilmagnésio (0,37 molar equivalentes de uma solução a 2 M em THF) foi adicionado gota a gota, mantendo a temperatura a -7oC (+ ou - 2oC), durante cerca de 30 minutos, seguido por butil lítio (0,74 molar equivalentes de uma solução a 1,5 M em hexano), controlando a temperatura a -6oC (+ ou - 2 oC), durante cerca de 1 hora. Agitado durante 45 minutos em seguida adicionado a uma solução de 4-formilmorfolina (2 molares equivalentes) em 2-metiltetra-hidrofurano (7 volumes) a -5oC. Esta adição levou
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262/638 cerca de 90 minutos. A reação foi em seguida agitada durante 1 hora, tempo durante o qual a temperatura interna elevou-se para 5oC. A mistura reacional foi vertida em solução de cloreto de amônio aquosa saturada (10 volumes) e extraída com t-BME (2x 3 volumes). Extratos combinados foram lavados com cloreto de amônio aquoso saturado (até o pH da lavagem ser de aproximadamente 6) (2x 3 volumes), água (5 volumes), secados (Na2SO4), filtrados e evaporados para fornecer um óleo laranja móvel.
[00825] O óleo foi cromatografado em sílica usando 5% de acetato de etila em iso-hexano como eluente. Produção foi de 80% de teórico. [00826] Isômero trans: 1H RMN (400 MHz, CDCL3) δ 9,93 (s,1H),
7,83 (d, J = 9,5 Hz, 1H), 7,66 - 7,61 (m, 1H), 7,25 (d, J = 13,1 Hz,1H),
7,17 (d, J = 10,3 Hz, 1H), 5,87 (d, J = 13,1 Hz, 1H), 3,74 (s, 3H) [00827] Isômero Cis: 1H RMN (400 MHz, CDCL3) δ 9,95 (s,1H),
8,57 (d, J = 9,5 Hz, 1H), 7,70 - 7,66 (m, 1H), 7,12 (d, J = 11,5 Hz,1H),
6,34 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 5,48 (d, J = 6,9 Hz, 1H), 3,86 (s, 3H)
e) (9-(4-Fluoro-3-(2-metoxivinil)benzil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5] undecan-4-il)(2-isopropiltiazol-4-il)metanona
[00828] A uma suspensão de 4-fluoro-3-(2-metoxivinil)benzaldeído (reagente limitante) (etapa d) e trifluoroacetato de (2-isopropiltiazol-4il)(1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4-il)metanona (1,05 molar equivalentes) (etapa b) em 2-metiltetra-hidrofurano (25 volumes) foi adicionado trietilamina (1,73 molar equivalente) em uma porção (exoterma de 4°C). A mistura foi agitada durante 0,5 hora; triacetoxiboroidreto de sódio (1,5 molar equivalente) foi em seguida adicionado em uma porção (nenhuma exoterma) e a solução resultante foi agitada durante 16
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263/638 horas.
[00829] NaHCO3 aquoso saturado (25 volumes) foi adicionado e a mistura vigorosamente agitada. A fase orgânica foi separada e o aquoso (pH8) foi extraído com 2-MeTHF (100 mL); os orgânicos combinados foram lavados com água (2x50 mL) e secados (Na2SO4), filtrados e evaporados para fornecer um óleo escuro. Produção: 78% de teórico.
[00830] 1H RMN (300 MHz, D6-DMSO) mistura de isômeros cis e trans : δ 7,97 (s, 1H), 7,86 - 7,79 (m, 0,5H), 7,34 - 7,20 (m, 1H), 7,07 -
6,98 (m, 2H), 6,41 (d, J = 7,1 Hz, 0,5H), 5,82 (d, J = 12,9 Hz, 0,5H),
5,32 (d, J = 6,9 Hz, 0,5H), 3,77 (s, 0,5H), 3,66 (s, 2,5H), 3,42 - 3,19 (m, 7H), 2,41 - 2,26 (m, 4H), 1,76 - 1,63 (m, 3H), 1,59 - 1,45 (m, 3H), 1,35 (d, J = 6,7 Hz, 6H)
f) (R)-7-(2-(2-Fluoro-5-((4-(2-isopropiltiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9- diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil)fenetilamino)-1-hidroxietil)-4hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona
OH [00831] Uma solução de (9-(4-fluoro-3-(2-metoxivinil)benzil)-1-oxa-
4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4-il)(2-isopropiltiazol-4-il)metanona (reagente limitante) (etapa e) em THF (5 volumes) foi tratada com água (2,5 volumes) seguida por ácido clorídrico concentrado (6 molares equivalentes). A solução foi aquecida a 55-60 °C durante 1,5 hora; a solução foi resfriada para a temperatura ambiente e diluída com água (2,5 volumes). O THF foi removido por evaporação e o resíduo aquoso foi adicionado a uma mistura agitada de bicarbonato de sódio (7 molares equivalentes), água (5 volumes) e DCM (10 volumes).
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264/638 [00832] O orgânico foi separado e o aquoso (pH8) foi extraído com DCM (5 volumes). O orgânico combinado foi lavado com solução de NaHCO3 aquosa saturada (5 volumes), água (2x5 volumes), secado (sulfato de sódio) e filtrado. O filtrado foi diluído com MeOH (10 volumes) e o DCM evaporado a 35°C/40,5KPa(405mbar). A solução de metanol de aldeído foi tratada com ácido acético (2 molares equivalentes) e adicionada a cloridrato de (R)-7-(2-amino-1-hidroxietil)-4hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona (1 molar equivalente) em uma porção; a mistura foi resfriada para 0-5°C e agitada durante 5 minutos para fornecer uma solução. A isto foi adicionado cianoboroidreto de sódio (1,5 molar equivalentes) em uma porção e a mistura foi agitada a 5°C durante 0,5 hora em seguida aquecida para temperatura ambiente e agitada durante 0,5 hora. Solvente foi evaporado e o resíduo foi dividido entre 2-MeTHF (10 volumes) e solução de NaHCO3 saturada (5 volumes); os orgânicos foram lavados com 20% de solução de salmoura (5 volumes), secados (Na2SO4), filtrados e evaporados. Forneceram uma espuma amarela que foi suspensa em acetato de etila (13 volumes) e o sólido resultante foi coletado por filtração e secado em vácuo. Forneceu um sólido amarelo pálido que foi purificado em sílica (20 vezes o peso da mistura reacional crua), eluente DCM/10-15% de MeOH/1-1,5% de amônia.
[00833] Produção: 29% de teórico.
[00834] m/z 670 (M+H)+ (APCI) [00835] 1H RMN (300 MHz, D6-DMSO) δ 7,99 (s, 1H), 7,23 - 7,02 (m, 3H), 6,84 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 6,69 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 4,58 (q, J =
4,1 Hz, 1H), 3,75 - 3,24 (br m, 10H), 2,80 - 2,59 (m, 6H), 2,41 - 2,11 (m, 7H), 1,76 - 1,41 (m, 4H), 1,34 (d, J = 6,9 Hz, 6H)
Exemplo 48
Ditrifluoroacetato de (R)-7-(2-(2-Fluoro-3-((4-(2-isopropiltiazol-4carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9Petição 870190058499, de 25/06/2019, pág. 270/650
265/638 il)metil)fenetilamino)-1-hidroxietil)-4-hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)ona
HO
OH
a) 2-Fluoro-3-(2-hidroxietil)benzaldeído
F H
HO [00836] 2,2,6,6-Tetrametilpiperidina (10,8 mL) foi adicionado à solução de butil lítio (1,6M em hexanos, 40,1 mL) em THF (40 mL) a -70°C. Uma solução de 2-(2-fluorofenil)etanol (3 g) em THF (40 mL) foi adicionada gota a gota e a mistura resultante agitada durante 6 horas a 70°C. DMF (8,29 mL) foi em seguida adicionado e a mistura agitada durante 1 hora a -70°C. A mistura foi em seguida deixada aquecer para TA e agitada durante 70 horas. A reação foi extinta com Solução de HCl (2M, 50 mL), diluída com acetato de etila (100 mL) e as camadas separadas. A fase aquosa foi extraída com acetato de etila (2 x 100 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com solução de HCl (2M, 50 mL), salmoura (20 mL), secadas sobre sulfato de magnésio, filtradas e evaporadas. O resíduo foi purificado por cromatografia de sílica-gel eluindo com 4:1 a 2:1 de gradiente de isohexano:acetato de etila. As frações contendo produto foram combinadas e evaporadas para fornecer o composto do subtítulo como um óleo amarelo. Produção 1,2 g.
[00837] 1H RMN (300 MHz, CDCh) δ 10,37 (s, 1H), 7,80 - 7,71 (m,
1H), 7,54 (td, J = 7,4, 1,9 Hz, 1H), 7,22 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 3,96 - 3,87 (m, 2H), 2,99 (td, J = 6,5, 1,2 Hz, 2H), 1,53 (t, J = 5,6 Hz, 1H).
b) (9-(2-Fluoro-3-(2-hidroxietil)benzil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]
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266/638 undecan-4-jl)(2-jsopropjltjazol-4-jl)metanona
F [00838] 2-Fluoro-3-(2-hidroxietil)benzaldeído (exemplo 48, etapa a) (0,19 g) foi adicionado à solução de trifluoroacetato de (2isopropiltiazol-4-il)(1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4-il)metanona (exemplo 22, etapa b) (0,32 g) e ácido acético (0,043 mL) em M-metil-
2-pirrolidinona (5 mL). A mistura resultante foi agitada durante 1 hora em seguida triacetoxiboroidreto de sódio (0,24 g) foi adicionado porção a porção durante 5 minutos. A mistura resultante foi agitada durante a noite, diluída com acetonitrila (20 mL) e aplicada a um cartucho SCX (10 g de Varian, pré-umedecido com acetonitrila (50 mL)). O cartucho foi lavado com acetonitrila (50 mL) e eluído com 10% de amônia aquosa ‘880’ em solução de acetonitrila (50 mL). O eluente foi evaporado, azeotropado com tolueno e purificado por cromatografia de sílica-gel eluindo com gradiente de 77,5:17,5:5 de iso-hexano:acetato de etila:trietilamina a 95:5 de acetato de etila:trietilamina. As frações contendo produto foram combinadas e evaporadas para fornecer o composto do subtítulo como uma goma amarela. Produção 0,33 g.
[00839] m/z 462 (M+H)+ (APCI) [00840] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO, 90°C) δ 7,91 (s, 1H), 7,23 -
7,13 (m, 2H), 7,03 (t, J = 7,5 Hz, 1H), 4,40 (t, J = 5,3 Hz, 1H), 3,72 -
3,56 (m, 9H), 3,48 (s, 2H), 2,75 (t, J = 6,9 Hz, 2H), 2,46 - 2,26 (m, 4H),
1,75 - 1,63 (m, 2H), 1,59 - 1,46 (m, 2H), 1,35 (d, J = 6,9 Hz, 6H).
c) Djtrjfluoroacetato de (R)-7-(2-(2-Fluoro-3-((4-(2-jsopropjltjazol-4carbonjl)-1-oxa-4,9-djazaespjro[5,5]undecan-9-jl)metjl) fenetjlamjno)-1-hjdroxjetjl)-4-hjdroxjbenzo[d]tjazol-2(3H)-ona
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S
[00841] TFA (0,044 mL) foi adicionado à solução de (9-(2-fluoro-3(2-hidroxietil)benzil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4-il)(2isopropiltiazol-4-il)metanona (exemplo 48, etapa b) (0,3 g) em DCM (5 mL) a 0°C. A mistura foi agitada durante 5 minutos em seguida periodinano Dess-Martin (0,37 g) foi adicionado. A solução amarela resultante foi deixada aquecer para TA e agitada durante 1 hora. Uma mistura de solução de tiossulfato de sódio saturada (5 mL), solução de bicarbonato de sódio saturada (5 mL) e acetato de etila (20 mL) foi em seguida adicionada e a mistura resultante agitada vigorosamente durante 10 minutos. A fase aquosa foi separada e extraída com acetato de etila (5 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (20 mL), acidificadas com algumas gotas de ácido acético, secadas sobre sulfato de sódio, filtradas e evaporadas em vácuo. O resíduo foi dissolvido em metanol (2 mL), ácido acético (0,033 mL) e cloridrato de (R)-7-(2-amino-1-hidroxietil)-4-hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)ona (WO2007027134, exemplo 1, etapa d) (0,28 g) foram em seguida adicionados e a mistura agitada durante 5 minutos antes do resfriamento em um banho de gelo. Cianoboroidreto de sódio (0,054 g) foi em seguida adicionado e a mistura deixada aquecer para TA e agitada durante a noite. O Solvente foi evaporado em vácuo. A purificação foi por cromatografia de sílica-gel eluindo com 94,5:5:0,5 a 89:10:1 de gradiente de DCM:metanol:amônia aquosa ‘880’. As frações contendo produto foram combinadas e evaporadas em vácuo. Além disso, a purificação foi por HPLC preparativa (Sunfire®, gradiente: 5-30% de acetonitrila em 0,2% de TFA aquoso). As frações contendo produto foram
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268/638 combinadas, evaporadas em vácuo e o resíduo triturado com éter para fornecer o composto do título como um sólido branco. Produção 0,14g. [00842] m/z 670 (M+H)+ (APCI) [00843] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO, 90°C) δ 11,27 (s, 1H), 7,94 (s, 1H), 7,51 (t, J = 6,9 Hz, 1H), 7,44 (t, J = 7,0 Hz, 1H), 7,25 (t, J = 7,7 Hz, 1H), 6,94 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 6,78 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 4,93 (dd, J =
8,3, 4,7 Hz, 1H), 4,34 (s, 2H), 3,77 - 3,60 (m, 6H), 3,36 - 3,04 (m, 11H), 2,09 - 1,97 (m, 2H), 1,87 - 1,72 (m, 2H), 1,35 (d, J = 6,9 Hz, 6H). Cinco prótons trocáveis não observados.
Exemplo 49
Ditrifluoroacetato de (R)-4-hidróxi-7-(1 -hidróxi-2-(2-(5-((4-(2metilbenzo[d]tiazol-5-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-
9-il)metil)tiofen-3-il)etilamino)etil)benzo[d]tiazol-2(3H)-ona
HO,
OH
a) (9-((4-(2-(terc-butildimetilsililóxi)etil)tiofen-2-il)metil)-1-oxa-4,9- diazaespiro[5,5]undecan-4-il)(2-metilbenzo[d]tiazol-5-il)metanona [00844] HATU (0,333 g) foi adicionado uma solução agitada de ácido 2-metilbenzo[d]tiazol-5-carboxílico (0,17 g), 9-((4-(2-(tercbutildimetilsililóxi)etil)tiofen-2-il)metil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecano (exemplo 43, etapa b) (0,3 g) e trietilamina
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269/638 (0,407 mL) em DMF (3 mL). Após 1 hora, a mistura reacional foi dividida entre água e acetato de etila. A camada de acetato de etila foi lavada duas vezes com água, uma vez com salmoura, secada sobre sulfato de magnésio, filtrada e evaporada em vácuo. Purificação por cromatografia de sílica-gel eluindo com acetato de etila:isohexano:trietilamina, 2:8:1 forneceu o composto do subtítulo como uma goma. Produção 0,36 g.
[00845] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO, 90°C) δ 8,06 (d, J = 8,3 Hz,
1H), 7,38 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,87 (s, 1H), 6,96 (s, 1H), 6,78 (s, 1H),
3,77 (t, J = 6,7 Hz, 2H), 3,68 - 3,63 (m, 2H), 3,58 (s, 2H), 3,53 - 3,46 (m, 2H), 3,42 - 3,36 (m, 2H), 2,82 (s, 3H), 2,70 (t, J = 6,8 Hz, 2H), 2,42 - 2,31 (m, 4H), 1,81 - 1,72 (m, 2H), 1,52 - 1,41 (m, 2H), 0,86 (s, 9H), 0,00 (s, 6H).
b) (9-((4-(2-Hidroxietil)tiofen-2-il)metil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5] undecan-4-il)(2-metilbenzo[d]tiazol-5-il)metanona
HO [00846] TBAF (solução a 1M em THF, 1,5 mL) foi adicionado a uma solução agitada de (9-((4-(2-(terc-butildimetilsililóxi)etil)tiofen-2-il)metil)-
1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4-il)(2-metilbenzo[d]tiazol-5il)metanona (exemplo 49, etapa a) (0,36 g) em THF (2 mL). Após 1 hora, a reação foi evaporada para uma goma. Purificação por cromatografia de sílica-gel eluindo com acetato de etila:trietilamina, 20:1 forneceu o composto do subtítulo como uma goma. Produção 0,2 g.
[00847] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO, 90°C) δ 8,05 (d, J = 7,5 Hz,
1H), 7,37 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 7,86 (s, 1H), 6,94 (s, 1H), 6,76 (s, 1H),
4,30 - 4,23 (m, 1H), 3,68 - 3,54 (m, 6H), 3,54 - 3,44 (m, 2H), 3,43 -
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3,33 (m, 2H), 2,81 (s, 3H), 2,71 - 2,62 (m, 2H), 2,47 - 2,29 (m, 4H),
1,81 - 1,71 (m, 2H), 1,55 - 1,40 (m, 2H).
c) 2-(5-((4-(2-Metilbenzo[d]tiazol-5-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro [5,5]undecan-9-il)metil)tiofen-3-il)acetaldeído [00848] Periodinano Dess-Martin (0,27 g) foi adicionado a uma solução agitada de (9-((4-(2-hidroxietil)tiofen-2-il)metil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-4-il)(2-metilbenzo[d]tiazol-5-il)metanona (exemplo 49, etapa b) (0,20 g) e ácido trifluoroacético (0,033 mL) em DCM (5 mL). Após 40 minutos, a mistura reacional foi tratada com solução aquosa de tiossulfato de sódio saturada (5 mL), solução de bicarbonato de sódio saturada (5 mL) e acetato de etila (30 mL). A mistura foi extraída duas vezes com acetato de etila, os orgânicos combinados foram lavados com solução de bicarbonato de sódio saturada, ácido acético (0,08 mL) foi adicionado, em seguida a solução foi secada sobre sulfato de sódio, filtrada, e evaporada em vácuo. Produção 0,2 g. Usada diretamente na próxima etapa.
[00849] m/z 470 (M+H)+ (APCI)
d) Ditrifluoroacetato de (R)-4-hidróxi-7-(1-hidróxi-2-(2-(5-((4-(2metilbenzo[d]tiazol-5-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan9-il)metil)tiofen-3-il)etilamino)etil)benzo[d]tiazol-2(3H)-ona
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[00850] Ácido acético (0,037 mL) foi adicionado a uma solução agitada de cloridrato de (R)-7-(2-amino-1-hidroxietil)-4hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona (WO2007027134, exemplo 1, etapa d) (0,168 g) e 2-(5-((4-(2-metilbenzo[d]tiazol-5-carbonil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil)tiofen-3-il)acetaldeído (exemplo 49, etapa c) (0,200 g) em MeOH (8 mL). Após 1 minuto, cianoboroidreto de sódio (0,107 g) foi adicionado. Após 3 horas, a mistura reacional foi filtrada e purificada por HPLC preparativa (Sunfire®, gradiente: 10-35% de acetonitrila em 0,2% de TFA aquoso). As frações contendo produto puro foram combinadas e evaporadas até a secura. Trituração com dietil éter forneceu o composto do título como um sólido branco. Produção 0,15 g.
[00851] m/z 680 (M+H)+ (APCI) [00852] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO, 90°C) δ 11,29 (s, 1H), 8,07 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,90 (s, 1H), 7,42 - 7,37 (m, 2H), 7,15 (s, 1H), 6,93 (d, J = 8,7 Hz, 1H), 6,77 (d, J = 8,7 Hz, 1H), 4,94 - 4,86 (m, 1H), 4,50 -
4,41 (m, 2H), 3,73 - 3,63 (m, 2H), 3,58 - 3,33 (m, 4H), 3,29 - 2,90 (m, 10H), 2,81 (s, 3H), 2,16 - 2,00 (m, 2H), 1,78 - 1,62 (m, 2H). 4 prótons trocáveis não observados.
Exemplo 50
Ditrifluoroacetato de (R)-7-(2-(3-((4-(2-terc-butiltiazol-4-carbonil)-1 oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil)-5-fluorofenetilamino)1-hidroxietil)-4-hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona
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a) (2-terc-butiltiazol-4-il)(9-(3-fluoro-5-(2-hidroxietil)benzil)-1-oxa4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4-il)metanona
[00853] Uma solução de 2,2,2-trifluoro-1-(9-(3-fluoro-5-(2hidroxietil)benzil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4-il)etanona (exemplo 41, etapa d) (0,21 g) em metanol (3 mL) foi adicionada a amônia (35% de solução aquosa, 15 mL) e a mistura reacional agitada a 20°C durante 1 hora. A mistura foi evaporada até a secura sob pressão reduzida e o resíduo azeotropado três vezes com acetonitrila. O resíduo foi dissolvido em DMF (7 mL) e tratado com ácido 2-tercbutiltiazol-4-carboxílico (0,096 g) seguido por trietilamina (0,290 mL) e em seguida HATU (0,257 g) e a mistura resultante agitada a 20°C durante 1 hora. A mistura foi dividida entre acetato de etila e salmoura, a camada orgânica foi lavada duas vezes com salmoura, secada sobre sulfato de sódio, filtrada e o solvente evaporado sob pressão reduzida para fornecer o composto do subtítulo. Produção 0,22 g.
[00854] m/z 476 (M+H)+ (APCI)
b) Ditrifluoroacetato de (R)-7-(2-(3-((4-(2-terc-butiltiazol-4- carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil)-5fluorofenetilamino)-1-hidroxietil)-4-hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona
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[00855] Uma solução de (2-terc-butiltiazol-4-il)(9-(3-fluoro-5-(2hidroxietil)benzil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4-il)metanona (exemplo 50, etapa a) (0,22 g) em DCM (20 mL) foi tratada com ácido trifluoroacético (0,036 mL) seguida por periodinano Dess-Martin (0,255 g) e a mistura resultante agitada a 20°C durante 40 minutos. A mistura reacional foi tratada com solução de tiossulfato de sódio saturada (20 mL) e solução de bicarbonato de sódio saturada (20 mL) e acetato de etila (30 mL) e agitada vigorosamente durante 5 minutos. A mistura foi extraída duas vezes com acetato de etila, os orgânicos combinados foram lavados com solução de bicarbonato de sódio saturada, secados sobre sulfato de sódio e filtrados. Ácido acético (0,026 mL) foi adicionado a esta solução e o solvente em seguida removido sob pressão reduzida. O resíduo foi dissolvido em metanol (3 mL) e adicionado a uma solução de cloridrato de (R)-7-(2-amino-1-hidroxietil)-4hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona (WO2007027134, exemplo 1, etapa d) (0,182 g) e ácido acético (0,026 mL) em metanol (15 mL). A mistura foi resfriada em um banho de gelo e tratada com cianoboroidreto de sódio (0,058 g). O banho de resfriamento foi removido e a mistura agitada a 20°C durante 3 horas. O solvente foi evaporado para um volume de 3 mL sob pressão reduzida e THF (20 mL) foi adicionado. A mistura foi lavada com uma mistura de salmoura saturada (10 mL) e solução de bicarbonato de sódio saturada (1 mL). A camada orgânica foi secada sobre sulfato de sódio, filtrada e o solvente removido sob pressão reduzida. O resíduo foi azeotropado duas vezes com acetonitrila. O produto bruto foi purificado por HPLC preparativa (Sunfire®, gradiente: 1040% de acetonitrila em 0,2% de TFA aquoso). As frações contendo o
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274/638 composto desejado foram evaporadas até a secura para fornecer o composto do título. Produção 0,135 g.
[00856] m/z 684 (M+H)+ (APCI) [00857] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO, 90°C) δ 7,95 (s, 1H), 7,27 -
7,16 (m, 3H), 6,93 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 6,77 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 4,94 -
4,88 (m, 1H), 4,21 (s, 2H), 3,71 (s, 4H), 3,66 (s, 2H), 3,26 (t, J = 7,9 Hz, 2H), 3,15 - 2,98 (m, 8H), 2,06 - 1,95 (m, 2H), 1,79 - 1,67 (m, 2H),
1,41 (s, 9H). Seis prótons trocáveis não observados.
Exemplo 51
Ditrifluoroacetato de (R)-5-(2-(2-(5-((2,2-Difluoro-4-(2- isopropiltiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil) tiofen-3-il)etilamino)-1-hidroxietil)-8-hidroxiquinolin-2(1H)-ona
a) (9-((4-(2-(terc-butildimetilsililóxi)etil)tiofen-2-il)metil)-2,2-
Difluoro-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4-il)(2-isopropiltiazol-4il)metanona
[00858] Trifluoroacetato de (2,2-Difluoro-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-4-il)(2-isopropiltiazol-4-il)metanona (exemplo 44, etapa b) (0,40 g) foi adicionado a uma solução agitada de uma mistura 4:1 de 4-(2-(terc-butildimetilsililóxi)etil)tiofeno-2-carbaldeído e
3-(2-(terc-butildimetilsililóxi)etil)tiofeno-2-carbaldeído (exemplo 27, eta
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275/638 pa b) (0,36 g) e AcOH (0,05 mL) em M-metil-2-pirrolidinona (5 mL). Após 5 minutos, triacetoxiboroidreto de sódio (0,28 g) foi adicionado. Após 16 horas, água foi adicionada e a mistura extraída com acetato de etila. A camada de acetato de etila foi lavada três vezes com água e evaporada em vácuo. Purificação por cromatografia de sílica-gel eluindo com 20:80:5 de acetato de etila:iso-hexano:trietilamina separou os dois produtos isoméricos e forneceu o composto do subtítulo como uma goma. Produção 0,24 g.
[00859] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO, 90°C) δ 8,11 (s, 1H), 7,00 (s,
1H), 6,82 (s, 1H), 4,28 - 4,16 (m, 2H), 4,05 - 3,95 (m, 2H), 3,78 (t, J =
6,6 Hz, 2H), 3,64 (s, 2H), 3,40 - 3,31 (m, 1H), 2,71 (t, J = 6,6 Hz, 2H),
1,85 - 1,77 (m, 2H), 1,74 - 1,64 (m, 2H), 1,39 (d, J = 6,8 Hz, 6H), 0,86 (s, 9H), 0,86 (s, 6H), 4 prótons sob picos de solvente.
b) (2,2-Difluoro-9-((4-(2-hidroxietil)tiofen-2-il)metil)-1-oxa-4,9- diazaespiro[5,5]undecan-4-il)(2-isopropiltiazol-4-il)metanona
HO [00860] TBAF (1M em THF, 1,5 mL) foi adicionado a uma solução agitada de (9-((4-(2-(terc-butildimetilsililóxi)etil)tiofen-2-il)metil)-2,2difluoro-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4-il)(2-isopropiltiazol-4il)metanona (exemplo 51, etapa a) (0,30 g) em THF (3 mL). Após 1 hora, a reação foi evaporada em vácuo para uma goma. Purificação por cromatografia de sílica-gel eluindo com acetato de etila:trietilamina, 20:1 forneceu o composto do subtítulo como uma goma. Produção 0,2g.
[00861] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO) δ 8,19 (s, 1H), 7,02 (s, 1H),
6,81 (s, 1H), 4,60 (t, J = 5,3 Hz, 1H), 4,54 - 4,39 (m, 1H), 4,20 - 3,98 (m, 3H), 3,88 - 3,75 (m, 1H), 3,66 - 3,53 (m, 5H), 2,65 (t, J = 7,0 Hz, 3H), 1,81 - 1,73 (m, 2H), 1,72 - 1,60 (m, 2H), 1,36 (d, J = 6,4 Hz, 6H). 2
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276/638 prótons obscurecidos por picos de solvente.
c) 2-(5-((2,2-Difluoro-4-(2-isopropiltiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9- diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil)tiofen-3-il)acetaldeído [00862] Periodinano Dess-Martin (0,20 g) foi adicionado uma solução agitada de (2,2-difluoro-9-((4-(2-hidroxietil)tiofen-2-il)metil)-1-oxa-
4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4-il)(2-isopropiltiazol-4-il)metanona (exemplo 51, etapa b) (0,15 g) e ácido trifluoroacético (0,031 mL) em DCM (4 mL). Após 40 minutos, a mistura reacional foi tratada com solução aquosa de tiossulfato de sódio saturada (5 mL), solução de bicarbonato de sódio saturada (5 mL) e acetato de etila (30 mL). A mistura foi extraída duas vezes com acetato de etila, os orgânicos combinados foram lavados com solução de bicarbonato de sódio saturada, ácido acético (0,08 mL) foi adicionado, em seguida o solvente foi secado sobre sulfato de sódio, filtrado, e evaporado em vácuo. Produção 0,19 g. Usado diretamente.
[00863] m/z 484 (M+H)+ (APCI)
d) Ditrifluoroacetato de (R)-5-(2-(2-(5-((2,2-Difluoro-4-(2- isopropiltiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil) tiofen-3-il)etilamino)-1-hidroxietil)-8-hidroxiquinolin-2(1H)-ona
HO.
OH [00864] (R)-5-(2-Amino-1-(terc-butildimetilsililóxi)etil)-8hidroxiquinolin-2(1H)-ona (WO2004106333) (0,156 g) foi adicionado a
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277/638 uma solução agitada de 2-(5-((2,2-difluoro-4-(2-isopropiltiazol-4carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil)tiofen-3il)acetaldeído (exemplo 51, etapa c) (0,15 g) e ácido acético (0,027 mL) em metanol (8 mL). Após 5 minutos, cianoboroidreto de sódio (0,078 g) foi adicionado. Após 3 horas, a mistura reacional foi evaporada em vácuo para ~3 mL e dividida entre acetato de etila e bicarbonato de sódio saturado. A solução de acetato de etila foi lavada com salmoura, secada sobre sulfato de sódio, filtrada e evaporada em vácuo. A goma resultante foi dissolvida em THF (2 mL) e tri-hidrofluoreto de trietilamina (0,064 g) adicionado. Após 16 horas, tolueno foi adicionado e a solução evaporada em vácuo. Purificação por HPLC preparativa (Sunfire®, gradiente: 10-35% de acetonitrila em 0,2% de TFA aquoso). As frações contendo produto foram combinadas e evaporadas até a secura, azeotropadas com MeCN em seguida trituradas com dietil éter para fornecer o composto do título como sólido. Produção 0,14 g.
[00865] m/z 688 (M+H)+ (APCI) [00866] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO) δ 10,52 - 10,47 (m, 2H), 8,85
- 8,70 (m, 2H), 8,22 (s, 1H), 8,15 (d, J = 9,6 Hz, 1H), 7,49 - 7,43 (m,
1H), 7,21 - 7,12 (m, 1H), 7,15 (d, J = 6,9 Hz, 1H), 6,99 (d, J = 8,1 Hz,
1H), 6,58 (d, J = 10,6 Hz, 1H), 6,24 - 6,17 (m, 1H), 5,33 (d, J = 8,9 Hz,
1H), 4,66 - 4,51 (m, 2H), 3,44 - 2,91 (m, 10H), 2,15 - 2,03 (m, 2H), 1,95
- 1,77 (m, 2H), 1,35 (d, J = 6,9 Hz, 6H). 6 prótons obscurecidos por picos de solvente.
Exemplo 52
Ditrifluoroacetato de (R)-7-(2-(3-Cloro-5-((4-(2-isopropiltiazol-4carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil) fenetilamino)-1-hidroxietil)-4-hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona
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Cl
HO
HN
S
OH
N H
a) Ácido 2-(3-(bromometil)-5-clorofenil)acético
Cl
[00867] Peróxido de benzoíla (0,112 g) foi adicionado a uma suspensão de ácido 2-(3-cloro-5-metilfenil)acético (0,752 g) e Nbromosuccinimida (0,801 g) em DCM (15 mL), e a mistura resultante foi aquecida a 50°C sob nitrogênio durante a noite. A mistura foi concentrada em vácuo para remover o diclorometano e o resíduo foi dissolvido em acetato de etila (10 mL). A solução foi aquecida a 85°C sob nitrogênio durante 4 horas, em seguida resfriada. A solução foi lavada três vezes com água e uma vez com salmoura, em seguida secada sobre sulfato de magnésio anidroso e purificada por cromatografia rápida em sílica eluída com 1:20:79 de ácido acético:acetato de etila:isohexano para fornecer o composto do subtítulo cru como um sólido amarelo pálido. Produção 0,735 g.
[00868] 1H RMN (400 MHz, CDCh) δ 7,33 - 7,31 (m, 1H), 7,24 -
7,22 (m, 1H), 7,21 - 7,18 (m, 1H), 4,41 (s, 2H), 3,64 (s, 2H). Um próton trocável não observado.
b) 2-(3-(Bromometil)-5-clorofenil)etanol
[00869] Uma solução de complexo de borano-sulfeto de metila (2 M em THF, 2,8 mL) foi adicionada porção a porção durante 5 minutos a
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279/638 uma solução de ácido 2-(3-(bromometil)-5-clorofenil)acético (exemplo 52, etapa a) (0,73 g) em THF seco (10 mL) em temperatura ambiente. A solução efervescente resultante foi agitada durante 1 hora, em seguida resfriada em gelo-água e extinta pela adição porção a porção de metanol (3 mL) durante 5 minutos. A solução foi agitada em temperatura ambiente durante mais 20 minutos e em seguida concentrada em vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia rápida em sílica eluída com 25% de acetato de etila em iso-hexano para fornecer o composto do subtítulo cru como um sólido branco. Produção 0,46 g.
[00870] 1H RMN (400 MHz, CDCh) δ 7,29 - 7,24 (m, 1H), 7,19 -
7,13 (m, 2H), 4,41 (s, 2H), 3,87 (t, J = 6,5 Hz, 2H), 2,84 (t, J = 6,4 Hz, 2H). Um próton trocável não observado.
c) (9-(3-Cloro-5-(2-hidroxietil)benzil)-1 -oxa-4,9-diazaespiro[5,5] undecan-4-il)(2-isopropiltiazol-4-il)metanona
[00871] Trietilamina (0,18 mL) foi adicionado a uma suspensão de trifluoroacetato de (2-isopropiltiazol-4-il)(1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-4-il)metanona (exemplo 22, etapa b) (0,217 g) e 2-(3-(bromometil)-5-clorofenil)etanol (exemplo 52, etapa b) (0,160 g) em acetonitrila (5 mL) e a solução resultante foi agitada em temperatura ambiente durante a noite. A solução foi em seguida purificada por cromatografia rápida em sílica eluída com 1:5:94 de trietilamina:metanol:diclorometano para fornecer uma goma. A goma foi dissolvida em diclorometano e a solução foi lavada três vezes com água, secada sobre sulfato de magnésio anidroso e concentrada em vácuo para fornecer o composto do subtítulo como uma espuma amarela pálida. Produção 0,254 g.
[00872] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO, 90°C) δ 7,90 (s, 1H), 7,21 -
6,92 (m, 3H), 4,31 (t, J = 5,3 Hz, 1H), 3,79 - 3,49 (m, 8H), 3,42 (s, 2H),
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3,31 (septet, J = 6,8 Hz, 1H), 2,71 (t, J = 6,7 Hz, 2H), 2,43 - 2,22 (m, 4H), 1,77 - 1,65 (m, 2H), 1,60 - 1,48 (m, 2H), 1,36 (d, J = 6,9 Hz, 6H).
d) 2-(3-Cloro-5-((4-(2-isopropiltiazol-4-carbonil)-1 -oxa-4,9- diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil)fenil)acetaldeído
Cl [00873] Uma solução de (9-(3-cloro-5-(2-hidroxietil)benzil)-1-oxa-
4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4-il)(2-isopropiltiazol-4-il)metanona (exemplo 52, etapa c) (0,242 g) em DCM (5 mL) foi resfriada em geloágua, tratada com ácido trifluoroacético (0,059 mL) e agitada durante 5 minutos. Periodinano Dess-Martin (0,323 g) foi adicionado, em seguida a mistura foi removida do banho de resfriamento e agitada em temperatura ambiente durante 30 minutos. A solução foi diluída com solução de tiossulfato de sódio saturada (5 mL), solução de bicarbonato de sódio saturada (5 mL) e acetato de etila (5 mL) e a mistura resultante foi agitada vigorosamente durante 10 minutos. A mistura foi em seguida extraída duas vezes com acetato de etila, as fases orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, acidificadas com ácido acético (0,1 mL), secadas sobre sulfato de magnésio anidroso e concentradas em vácuo para fornecer o composto do subtítulo cru como uma espuma amarela. Produção 0,297 g.
[00874] m/z 476 (M+H)+ (APCI)
e) Ditrifluoroacetato de (R)-7-(2-(3-Cloro-5-((4-(2-isopropiltiazol-4carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil) fenetilamino)-1-hidroxietil)-4-hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona
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281/638
HO^J f X >O \X^N
I H OH [00875] Uma solução de cloridrato de (R)-7-(2-amino-1-hidroxietil)-
4-hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona (WO2007027134, exemplo 1, etapa
d) (0,220 g) em metanol (3 mL) foi tratada com ácido acético (0,047 mL) e agitada durante 5 minutos. Uma solução de 2-(3-cloro-5-((4-(2isopropiltiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9il)metil)fenil)acetaldeído (exemplo 52, etapa d) (0,296 g) em metanol (4 mL) foi em seguida adicionada, e a mistura resultante foi agitada em temperatura ambiente durante 5 minutos, antes do resfriamento em gelo-água e tratamento com triacetoxiboroidreto de sódio (0,181 g). A mistura foi agitada em gelo-água durante 10 minutos e em seguida em temperatura ambiente durante 45 minutos, antes do resfriamento em gelo-água e tratamento com mais triacetoxiboroidreto de sódio (0,533 g). A mistura foi em seguida agitada durante a noite, permitindo-a lentamente aquecer para temperatura ambiente. Na manhã seguinte, a mistura foi concentrada em vácuo. O resíduo foi dissolvido em uma mistura de metanol (1,5 mL), acetonitrila (1,5 mL) e água (1,5 mL) e purificado por HPLC preparativa (Sunfire®, gradiente: 5-50% de acetonitrila em 0,2% de TFA aquoso). Frações contendo produto foram concentradas em vácuo e coevaporadas de acetonitrila três vezes para fornecer um resíduo incolor. O resíduo foi triturado com dietil éter para fornecer um sólido, que foi removido por filtração, lavado com dietil éter e secado em vácuo em temperatura ambiente para fornecer o composto do título como um sólido branco. Produção 0,092 g.
[00876] m/z 686 (M+H)+ (APCI)
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282/638 [00877] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO, 90°C) δ 7,94 (s, 1H), 7,50 -
7,44 (m, 1H), 7,44 - 7,37 (m, 1H), 7,34 - 7,26 (m, 1H), 6,93 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 6,77 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 4,90 (dd, J = 7,9, 5,4 Hz, 1H), 4,26 4,08 (m, 2H), 3,77 - 3,59 (m, 6H), 3,35 - 3,21 (m, 3H), 3,16 - 2,91 (m, 8H), 2,06 - 1,90 (m, 2H), 1,81 - 1,63 (m, 2H), 1,35 (d, J = 6,9 Hz, 6H). Seis prótons trocáveis não observados.
Exemplo 53
Ditrifluoroacetato de (R)-7-(2-(3-Fluoro-5-((4-(4-isopropiltiazol-2carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil) fenetilamino)-1-hidroxietil)-4-hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona
OH
HO
a) 4-Isopropiltiazol-2-carboxilato de etila [00878] 1-Bromo-3-metilbutan-2-ona (3,72 g) em etanol (15 mL) foi adicionado gota a gota durante 15 minutos a uma solução em refluxo de 2-amino-2-tioxoacetato de etila (3 g) em etanol (120 mL). A mistura foi aquecida ao refluxo durante 2 horas e em seguida resfriada para temperatura ambiente. O solvente foi evaporado sob pressão reduzida para um volume de 30 mL, esta solução foi adicionada a gelo/ água (200 mL) e a mistura neutralizada pela adição gota a gota de amônia aquosa concentrada ‘880’. A mistura foi extraída duas vezes com acetato de etila, os orgânicos combinados foram lavados com salmoura, secados sobre sulfato de sódio, filtrados e o solvente evaporado sob pressão reduzida. O produto bruto foi purificado por cromatografia de sílica rápida eluindo com 20% de acetato de etila em iso-hexano. Fra
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283/638 ções puras foram evaporadas até a secura para fornecer o composto do subtítulo. Produção 2,2 g.
[00879] m/z 200 (M+H)+ (APCI)
b) ácido 4-isopropiltiazol-2-carboxílico
OH [00880] Uma solução de 4-isopropiltiazol-2-carboxilato de etila (exemplo 53, etapa a) (2,2 g) em uma mistura de metanol (10 mL) e THF (20 mL) foi tratada com uma solução de hidróxido de lítio (0,264 g) em água (20 mL). A mistura reacional foi agitada a 20°C durante 24 horas. O solvente orgânico foi removido sob pressão reduzida e a mistura aquosa restante foi dividida entre acetato de etila e água. A camada aquosa foi acidificada com ácido clorídrico a 2 M e extraída duas vezes com acetato de etila, os orgânicos combinados foram lavados com salmoura, secados sobre sulfato de sódio, filtrados e o solvente evaporado sob pressão reduzida. O produto bruto foi triturado com ciclo-hexano para fornecer o composto do subtítulo. Produção 0,93 g.
[00881] m/z 170 (M-H)- (APCI) [00882] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO) δ 7,67 (s, 1H), 3,16 - 3,05 (m, 1H), 1,26 (d, 6H). Um próton trocável não observado.
c) (9-(3-Fluoro-5-(2-hidroxietil)benzil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5] undecan-4-il)(4-isopropiltiazol-2-il)metanona
HO [00883] Uma solução de 2,2,2-trifluoro-1-(9-(3-fluoro-5-(2hidroxietil)benzil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4-il)etanona (exemplo 41, etapa d) (0,21 g) em metanol (3 mL) foi adicionada a amônia (35% de solução aquosa, 15 mL) e a mistura reacional agitada
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284/638 a 20°C durante 1 hora. A mistura foi evaporada até a secura sob pressão reduzida e o resíduo azeotropado três vezes com acetonitrila. O resíduo foi dissolvido em DMF (7 mL) e tratado com ácido 4isopropiltiazol-2-carboxílico (exemplo 53, etapa b) (0,089 g) seguido por trietilamina (0,290 mL) e em seguida HATU (0,257 g) e a mistura resultante agitada a 20°C durante 1 hora. A mistura foi dividida entre acetato de etila e salmoura, a camada orgânica foi lavada duas vezes com salmoura, secada sobre sulfato de sódio, filtrada e o solvente evaporado sob pressão reduzida para fornecer o composto do subtítulo. Produção 0,325 g.
[00884] m/z 462 (M+H)+ (APCI)
d) Ditrifluoroacetato de (R)-7-(2-(3-Fluoro-5-((4-(4-isopropiltiazol-2carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil) fenetilamino)-1-hidroxietil)-4-hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona
OH
HO [00885] Uma solução de (9-(3-fluoro-5-(2-hidroxietil)benzil)-1-oxa-
4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4-il)(4-isopropiltiazol-2-il)metanona (exemplo 53, etapa c) (0,23 g) em DCM (20 mL) foi tratada com ácido trifluoroacético (0,038 mL) seguida por periodinano Dess-Martin (0,275 g) e a mistura resultante agitada a 20°C durante 40 minutos. A mistura reacional foi tratada com solução de tiossulfato de sódio saturada (20 mL) e solução de bicarbonato de sódio saturada (20 mL) e acetato de etila (30 mL) e agitada vigorosamente durante 5 minutos. A mistura foi extraída duas vezes com acetato de etila, os orgânicos combinados foram lavados com solução de bicarbonato de sódio saturada, secados sobre sulfato de sódio e filtrados. Ácido acético (0,029 mL) foi adicionado a esta solução e o solvente em seguida removido sob pressão
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285/638 reduzida. O resíduo foi dissolvido em metanol (3 mL) e adicionado a uma solução de cloridrato de (R)-7-(2-amino-1-hidroxietil)-4hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona (WO2007027134, exemplo 1, etapa d) (0,196 g) e ácido acético (0,029 mL) em metanol (15 mL). A mistura foi resfriada em um banho de gelo e tratada com cianoboroidreto de sódio (0,063 g). O banho de resfriamento foi removido e a mistura agitada a 20°C durante 3 horas. O solvente foi evaporado para um volume de 3 mL sob pressão reduzida e THF (20 mL) foi adicionado. A mistura foi lavada com uma mistura de salmoura saturada (10 mL) e solução de bicarbonato de sódio saturada (1 mL). A camada orgânica foi secada sobre sulfato de sódio, filtrada e o solvente removido sob pressão reduzida. O resíduo foi azeotropado duas vezes com acetonitrila. O produto bruto foi purificado por HPLC preparativa (Sunfire®, gradiente: 1040% de acetonitrila em 0,2% de TFA aquoso). As frações contendo o composto desejado foram evaporadas até a secura para fornecer o composto do título. Produção 0,140 g.
[00886] m/z 670 (M+H)+ (APCI) [00887] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO, 90°C) δ 11,27 (s, 1H), 7,51 (s, 1H), 7,28 - 7,16 (m, 3H), 6,93 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 6,77 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 4,95 - 4,88 (m, 1H), 4,26 (s, 2H), 4,19 - 3,82 (m, 4H), 3,80 -
3,74 (m, 2H), 3,27 (t, J = 7,9 Hz, 2H), 3,19 - 2,98 (m, 9H), 2,09 - 1,98 (m, 2H), 1,85 - 1,73 (m, 2H), 1,27 (d, J = 7,1 Hz, 6H). Cinco prótons trocáveis não observados.
Exemplo 54
Ditrifluoroacetato de (R)-7-(2-(3-Fluoro-5-((4-(5-isopropiltiazol-2carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil) fenetilamino)-1-hidroxietil)-4-hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona
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a) 5-isopropiltiazol-2-carboxilato de etila
[00888] Uma solução de bromo (0,162 mL) em uma mistura de DCM (1,2 mL) e dioxano (0,3 mL) foi adicionada lentamente gota a gota, a uma solução resfriada a 0°C de 3-metilbutanal (0,272 g) em uma mistura de DCM (1,6 mL) e dioxano (0,4 mL). A mistura foi agitada a 5°C durante 2 horas. A mistura reacional foi resfriada para 0°C e os solventes foram removidos sob uma corrente de gás de nitrogênio. O resíduo, ainda a 0°C foi tratado porção a porção com 2-amino-2tioxoacetato de etila (0,42 g). A mistura resultante foi aquecida sob nitrogênio de 0°C a 70°C durante um período de 15 minutos. Ao final deste tempo, a mistura foi resfriada em um banho de gelo e tratada com acetato de etila e solução de bicarbonato de sódio saturada, a camada orgânica foi secada sobre sulfato de sódio, filtrada e o solvente removido sob pressão reduzida. O produto bruto foi purificado por cromatografia de sílica rápida usando 30% de acetato de etila em isohexano como solvente. Frações puras foram evaporadas até a secura para fornecer o composto do subtítulo. Produção 0,105 g.
[00889] m/z 200 (M+H)+ (APCI)
b) ácido 5-isopropiltiazol-2-carboxílico
OH
[00890] Uma solução de 5-isopropiltiazol-2-carboxilato de etila (exemplo 54, etapa a) (0,105 g) em metanol (5 mL) foi tratada com
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287/638 uma solução de hidróxido de lítio (0,025 g) em água (3 mL) e a mistura resultante foi agitada vigorosamente a 20°C durante 2 horas. O metanol foi evaporado sob pressão reduzida e a solução aquosa residual foi diluída com salmoura (10 mL). A camada aquosa foi lavada com éter, em seguida resfriada em um banho de gelo e acidificada pela adição gota a gota de ácido clorídrico aquoso concentrado. A mistura foi extraída duas vezes com acetato de etila. As camadas de acetato de etila combinadas foram lavadas com salmoura, secadas sobre sulfato de sódio, filtradas e o solvente evaporado sob pressão reduzida para fornecer o composto do subtítulo. Produção 0,048 g.
[00891] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO) δ 7,84 (s, 1H), 3,34 - 3,26 (m, 1H), 1,31 (d, J = 6,9 Hz, 6H). Um próton trocável não observado.
c) (9-(3-Fluoro-5-(2-hidroxietil)benzil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5] undecan-4-il)(5-isopropiltiazol-2-il)metanona
HO [00892] Uma solução de 2,2,2-trifluoro-1-(9-(3-fluoro-5-(2hidroxietil)benzil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4-il)etanona (exemplo 41, etapa d) (0,113 g) em metanol (3 mL) foi adicionada a amônia (35% de solução aquosa, 15 mL) e a mistura reacional agitada a 20°C durante 1 hora. A mistura foi evaporada até a secura sob pressão reduzida e o resíduo azeotropado três vezes com acetonitrila. O resíduo foi dissolvido em DMF (7 mL) e tratado com ácido 5isopropiltiazol-2-carboxílico (exemplo 54, etapa b) (0,048 g) seguido por trietilamina (0,156 mL) e em seguida HATU (0,139 g) e a mistura resultante agitada a 20°C durante 1 hora. A mistura foi dividida entre acetato de etila e salmoura, a camada orgânica foi lavada duas vezes com salmoura, secada sobre sulfato de sódio, filtrada e o solvente
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288/638 evaporado sob pressão reduzida. O produto bruto foi purificado por cromatografia de sílica rápida usando 2,5% de metanol em diclorometano com 1% de trietilamina como solvente. Frações puras foram evaporadas até a secura para fornecer o composto do subtítulo. Produção 104 mg.
[00893] m/z 462 (M+H)+ (APCI)
d) Ditrifluoroacetato de (R)-7-(2-(3-Fluoro-5-((4-(5-isopropiltiazol-2carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil) fenetilamino)-1-hidroxietil)-4-hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona
[00894] Uma solução de (9-(3-fluoro-5-(2-hidroxietil)benzil)-1-oxa-
4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4-il)(5-isopropiltiazol-2-il)metanona (exemplo 54, etapa c) (0,104 g) em DCM (20 mL) foi tratada com ácido trifluoroacético (0,017 mL) seguida por periodinano Dess-Martin (0,124 g) e a mistura resultante agitada a 20°C durante 40 minutos. A mistura reacional foi tratada com solução de tiossulfato de sódio saturada (20 mL) e solução de bicarbonato de sódio saturada (20 mL) e acetato de etila (30 mL) e agitada vigorosamente durante 5 minutos. A mistura foi extraída duas vezes com acetato de etila, os orgânicos combinados foram lavados com solução de bicarbonato de sódio saturada, secados sobre sulfato de sódio e filtrados. Ácido acético (0,013 mL) foi adicionado a esta solução e o solvente em seguida removido sob pressão reduzida. O resíduo foi dissolvido em metanol (3 mL) e adicionado a uma solução de cloridrato de (R)-7-(2-amino-1-hidroxietil)-4hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona (WO2007027134, exemplo 1, etapa d) (0,089 g) e ácido acético (0,013 mL) em metanol (15 mL). A mistura foi resfriada em um banho de gelo e tratada com cianoboroidreto de sódio
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289/638 (0,028 g). O banho de resfriamento foi removido e a mistura agitada a 20°C durante 3 horas. O solvente foi evaporado para um volume de 3 mL sob pressão reduzida e THF (20 mL) foi adicionado. A mistura foi lavada com uma mistura de salmoura saturada (10 mL) e solução de bicarbonato de sódio saturada (1 mL). A camada orgânica foi secada sobre sulfato de sódio, filtrada e o solvente removido sob pressão reduzida. O resíduo foi azeotropado duas vezes com acetonitrila. O produto bruto foi purificado por HPLC preparativa (Sunfire®, gradiente: 1040% de acetonitrila em 0,2% de TFA aquoso). As frações contendo o composto desejado foram evaporadas até a secura para fornecer o composto do título. Produção 0,045 mg.
[00895] m/z 670 (M+H)+ (APCI) [00896] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO, 90°C) δ 7,67 (s, 1H), 7,28 -
7,16 (m, 3H), 6,93 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 6,77 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 4,94 -
4,89 (m, 1H), 4,26 (s, 2H), 4,11 - 3,79 (m, 4H), 3,78 - 3,73 (m, 2H),
3,31 - 3,24 (m, 2H), 3,18 - 2,99 (m, 9H), 2,06 - 1,97 (m, 2H), 1,85 -
1,74 (m, 2H), 1,31 (d, J = 7,0 Hz, 6H). Seis prótons trocáveis não observados.
Exemplo 55
Ditrifluoroacetato de (R)-7-(2-(3-Fluoro-5-((4-(2-isopropiltiazol-5carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil) fenetilamino)-1-hidroxietil)-4-hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona
OH
HO
a) 2-isopropiltiazol-5-carboxilato de etila
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290/638 [00897] Uma mistura de 2-metilpropanotioamida (3,3 g) e 2-cloro-3oxopropanoato de etila (4,82 g) em acetona (50 mL) foi aquecida ao refluxo sob nitrogênio durante 3 horas. A mistura foi resfriada para temperatura ambiente e o solvente removido sob pressão reduzida. O produto bruto foi purificado por cromatografia de sílica rápida usando 12% de acetato de etila em iso-hexano como solvente. Frações puras foram evaporadas até a secura para fornecer o composto do subtítulo. Produção 1,6 g.
[00898] m/z 200 (M+H)+ (APCI)
b) ácido 2-jsopropjltiazol-5-carboxíljco
OH [00899] Uma solução de 2-isopropiltiazol-5-carboxilato de etila (exemplo 55, etapa a) (0,33 g) em metanol (6 mL) foi tratada com uma solução de hidróxido de lítio (0,079 g) em água (3 mL) e a mistura resultante agitada durante 2 horas a 20°C. O metanol foi evaporado sob pressão reduzida e o resíduo dividido entre éter e salmoura. A camada aquosa foi acidificada pela adição gota a gota de ácido clorídrico diluído e a mistura extraída com acetato de etila. A camada orgânica foi lavada com salmoura, secada sobre sulfato de sódio, filtrada e o solvente evaporado sob pressão reduzida para fornecer o composto do subtítulo. Produção 0,185 g.
[00900] m/z 172 (M+H)+ (APCI) [00901] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO) δ 13,38 (s, 1H), 8,22 (s, 1H),
3,35 - 3,26 (m, 1H), 1,34 (d, J = 6,8 Hz, 6H).
c) 2-(3-(1-Oxa-4,9-diazaespjro[5,5]undecan-9-jlmetjl)-5-fluorofenjl) etanol
NH
HO
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291/638 [00902] Solução de amônia ‘880’ (5 mL) foi adicionada à solução de
2,2,2-trifluoro-1-(9-(3-fluoro-5-(2-hidroxietil)benzil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-4-il)etanona (exemplo 41, etapa d) (2,2 g) em metanol (25 mL). A mistura resultante foi agitada durante 90 minutos e o solvente evaporado. O resíduo foi azeotropado três vezes com acetonitrila e concentrado para fornecer o composto do subtítulo como uma goma clara. Produção 1,96 g.
[00903] m/z 309 (M+H)+ (APCI) [00904] 1H RMN (300 MHz, D6-DMSO) δ 6,97 (s, 1H), 6,94 (s, 1H),
6,91 (s, 1H), 3,65 - 3,56 (m, 4H), 3,49 - 3,39 (m, 2H), 2,85 - 2,78 (m, 2H), 2,76 - 2,68 (m, 4H), 2,48 - 2,39 (m, 2H), 2,32 - 2,21 (m, 2H), 1,89 -
1,77 (m, 2H), 1,58 - 1,44 (m, 2H). Dois prótons trocáveis não observados.
d) (9-(3-Fluoro-5-(2-hidroxietil)benzil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5] undecan-4-il)(2-isopropiltiazol-5-il)metanona
HO [00905] Uma solução de 2-(3-(1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9ilmetil)-5-fluorofenil)etanol (exemplo 55, etapa c) (0,153 g) em DMF (7 mL) foi tratada com trietilamina (0,208 mL) seguida por ácido 2isopropiltiazol-5-carboxílico (exemplo 55, etapa b) (0,085 g). A mistura foi resfriada para 0°C e HATU (0,245 g) foi adicionado. A mistura reacional foi agitada durante 2 horas a 20°C. A mistura foi dividida entre acetato de etila e salmoura, a camada orgânica foi lavada duas vezes com salmoura, secada sobre sulfato de sódio, filtrada e o solvente evaporado sob pressão reduzida. O produto bruto foi purificado por cromatografia de sílica rápida usando 2,5% de metanol em diclorometano com 1% de trietilamina como solvente. Frações puras foram eva
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292/638 poradas até a secura para fornecer o composto do subtítulo. Produção
0,130 g.
[00906] m/z 462 (M+H)+ (APCI)
e) Ditrifluoroacetato de (R)-7-(2-(3-Fluoro-5-((4-(2-isopropiltiazol-5carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil) fenetilamino)-1-hidroxietil)-4-hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona
[00907] Uma solução de (9-(3-fluoro-5-(2-hidroxietil)benzil)-1-oxa-
4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4-il)(2-isopropiltiazol-5-il)metanona (exemplo 55, etapa d) (0,13 g) em DCM (20 mL) foi tratada com ácido trifluoroacético (0,022 mL) seguida por periodinano Dess-Martin (0,155 g) e a mistura resultante agitada a 20°C durante 40 minutos. A mistura reacional foi tratada com solução de tiossulfato de sódio saturada (20 mL) e solução de bicarbonato de sódio saturada (20 mL) e acetato de etila (30 mL) e agitada vigorosamente durante 5 minutos. A mistura foi extraída duas vezes com acetato de etila, os orgânicos combinados foram lavados com solução de bicarbonato de sódio saturada, secados sobre sulfato de sódio e filtrados. Ácido acético (0,016 mL) foi adicionado a esta solução e o solvente em seguida removido sob pressão reduzida. O resíduo foi dissolvido em metanol (3 mL) e adicionado a uma solução de cloridrato de (R)-7-(2-amino-1-hidroxietil)-4hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona (WO2007027134, exemplo 1, etapa d) (0,111 g) e ácido acético (0,016 mL) em metanol (15 mL). A mistura foi resfriada em um banho de gelo e tratada com cianoboroidreto de sódio (0,035 g). O banho de resfriamento foi removido e a mistura agitada a 20°C durante 3 horas. O solvente foi evaporado para um volume de 3 mL sob pressão reduzida e THF (20 mL) foi adicionado. A mistura foi
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293/638 lavada com uma mistura de salmoura saturada (10 mL) e solução de bicarbonate de sódio saturada (1 mL). A camada orgânica foi secada sobre sulfato de sódio, filtrada e o solvente removido sob pressão reduzida. O resíduo foi azeotropado duas vezes com acetonitrila. O produto bruto foi purificado por HPLC preparativa (Sunfire®, gradiente:
10-40% de acetonitrila em 0,2% de TFA aquoso). As frações contendo o composto desejado foram evaporadas até a secura para fornecer o composto do título. Produção 0,1 g.
[00908] m/z 670 (M+H)+ (APCI) [00909] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO, 90°C) δ 11,27 (s, 1H), 7,92 (s, 1H), 7,30 - 7,18 (m, 3H), 6,93 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 6,77 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 4,95 - 4,89 (m, 1H), 4,30 (s, 2H), 3,75 - 3,70 (m, 2H), 3,68 -
3,63 (m, 2H), 3,54 (s, 2H), 3,33 - 3,24 (m, 3H), 3,22 - 3,00 (m, 8H), 2,07 - 1,98 (m, 2H), 1,84 - 1,72 (m, 2H), 1,35 (d, J = 6,9 Hz, 6H). Cinco prótons trocáveis não observados.
Exemplo 56
Ditrifluoroacetato de (R)-7-(2-(3-Fluoro-5-((4-(2-propiltiazol-4carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil) fenetilamino)-1-hidroxietil)-4-hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona
HO
OH
a) 2-butiramido-3-mercaptopropanoato de etila
HS [00910] Trietilamina (4,5 mL) foi adicionado a uma suspensão de
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294/638 cloridrato de 2-amino-3-mercaptopropanoato de etila (5 g) em DCM (50 mL). A mistura resultante foi resfriada em um banho de gelo/sal e cloreto de butirila (3,3 mL) foi adicionado gota a gota. A mistura resultante foi deixada aquecer para TA e agitada durante a noite. A reação foi extinta com solução de bicarbonato de sódio saturada (50 mL) e as camadas separadas. A fase aquosa foi extraída com DCM (2 x 100 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (100 mL), secadas sobre sulfato de sódio, filtradas e evaporadas. O sólido branco resultante foi purificado por cromatografia de sílica-gel eluindo com 4:1 a 1:1 de gradiente de iso-hexano:acetato de etila. As frações contendo produto foram combinadas e evaporadas para fornecer o composto do subtítulo como um sólido branco. Produção 3 g. [00911] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO) δ 8,21 (d, J = 7,7 Hz, 1H),
4,43 - 4,37 (m, 1H), 4,13 - 4,06 (m, 2H), 2,88 - 2,80 (m, 1H), 2,78 -
2,69 (m, 1H), 2,12 (t, J = 7,2 Hz, 2H), 1,60 - 1,47 (m, 2H), 1,22 - 1,14 (m, 3H), 0,90 - 0,81 (m, 3H). Um próton trocável não observado. [00912] m/z 218 (M-H)- (APCI)
b) 2-propiltiazol-4-carboxilato de etila i o [00913] Uma solução de HCl (4M em 1,4-dioxano, 20 mL) foi adicionada à solução de 2-butiramido-3-mercaptopropanoato de etila (exemplo 56, etapa a) (3 g) em etanol (20 mL) e a mistura resultante agitada durante a noite. o solvente foi evaporado e o resíduo azeotropado duas vezes com tolueno. o resíduo foi novamente dissolvido em acetonitrila (50 mL), dióxido de manganês (11,9 g) foi adicionado e a mistura aquecida ao refluxo durante a noite. A reação foi filtrada através de uma almofada de celite. A almofada filtrante foi lavada com MeCN (3 x 100 mL). o filtrado combinado e lavagens foram evaporados e o resíduo foi purificado por cromatografia de sílica-gel eluindo
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295/638 com 9:1 de iso-hexano:acetato de etila. O produto contendo frações foram combinados e evaporados para fornecer o composto do subtítulo como um óleo claro. Produção 0,24 g.
[00914] 1H RMN (400 MHz, CDC1s) δ 8,05 (s, 1H), 4,42 (q, J = 7,1
Hz, 2H), 3,04 (t, J = 7,7 Hz, 2H), 1,89 - 1,77 (m, 2H), 1,40 (t, J = 7,0 Hz, 3H), 1,02 (t, J = 7,4 Hz, 3H).
c) ácido 2-propiltiazol-4-carboxílico
O
HO [00915] Monoidrato de hidróxido de lítio (0,2 g) foi adicionado à solução de 2-propiltiazol-4-carboxilato de etila (exemplo 56, etapa b) (0,24 g) em uma mistura de THF (4 mL) e água (1 mL). A suspensão resultante foi agitada durante a noite em TA. A reação foi acidificada com solução de HCl aquosa (2M, 3 mL) e evaporada. O resíduo foi dividido entre salmoura (5 mL) e acetato de etila (20 mL). As camadas foram separadas e a fase aquosa extraída com acetato de etila (2 x 20 mL). As camadas orgânicas combinadas foram secadas sobre sulfato de sódio, filtradas e evaporadas para fornecer o composto do subtítulo como um sólido branco. Produção 0,17 g.
[00916] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO) δ 12,91 (s, 1H), 8,31 (s, 1H),
2,96 (t, J = 7,4 Hz, 2H), 1,79 - 1,68 (m, 2H), 0,95 (t, J = 7,4 Hz, 3H).
d) (9-(3-Fluoro-5-(2-hidroxietil)benzil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5] undecan-4-il)(2-propiltiazol-4-il)metanona
F [00917] Hexafluorofosfato de O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N’,Ntetrametilurônio (0,25 g) foi adicionado à solução de 2-(3-(1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9-ilmetil)-5-fluorofenil)etanol (exemplo 55,
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296/638 etapa c) (0,16 g), ácido 2-propiltiazol-4-carboxílico (exemplo 56, etapa
c) (0,09 g) e trietilamina (0,29 mL) em DMF (7 mL) e a solução amarela resultante foi agitada durante 30 min. A mistura foi dividida entre acetato de etila (100 mL) e salmoura (100 mL). A fase orgânica foi separada, lavada com salmoura (2 x 100 mL), secada sobre sulfato de sódio, filtrada e o solvente evaporado. A goma resultante foi purificada por cromatografia de sílica-gel eluindo com gradiente de 47,5:47,5:5 iso-hexano:acetato de etila:trietilamina a 95:5 de acetato de etila:trietilamina. As frações contendo produto foram combinadas, tolueno (200 mL) foi adicionado, e a mistura evaporada para fornecer o composto do subtítulo como uma goma clara. Produção 0,14 g.
[00918] m/z 462 (M+H)+ (APCI) [00919] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO, 90°C) δ 7,89 (s, 1H), 6,95 (s,
1H), 6,89 (s, 1H), 6,86 (s, 1H), 4,31 (t, J = 4,7 Hz, 1H), 3,69 - 3,59 (m, 8H), 3,44 (s, 2H), 2,98 (t, J = 7,2 Hz, 2H), 2,72 (t, J = 6,8 Hz, 2H), 2,43 - 2,28 (m, 4H), 1,82 - 1,66 (m, 4H), 1,59 - 1,50 (m, 2H), 0,97 (t, J = 7,3 Hz, 3H).
e) Ditrifluoroacetato de (R)-7-(2-(3-Fluoro-5-((4-(2-propiltiazol-4carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil) fenetilamino)-1-hidroxietil)-4-hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona
HO
OH [00920] TFA (0,023 mL) foi adicionado a (9-(3-fluoro-5-(2hidroxietil)benzil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4-il)(2propiltiazol-4-il)metanona (exemplo 56, etapa d) (0,14 g) em DCM (5 mL) a 0°C. A mistura foi agitada durante 5 minutos em seguida perio
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297/638 dinano Dess-Martin (0,19 g) foi adicionado. A solução amarela resultante foi deixada aquecer para TA e agitada durante 1 hora. Uma mistura de solução de tiossulfato de sódio saturada (5 mL), solução de bicarbonato de sódio saturada (5 mL) e acetato de etila (20 mL) foi em seguida adicionada e a mistura resultante agitada vigorosamente durante 10 minutos. A fase aquosa foi separada e extraída com acetato de etila (20 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (20 mL), acidificadas com algumas gotas de ácido acético, secadas sobre sulfato de sódio, filtradas e evaporadas em vácuo. O resíduo foi dissolvido em metanol (5 mL), ácido acético (0,017 mL) e cloridrato de (R)-7-(2-amino-1-hidroxietil)-4-hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)ona (WO2007027134, exemplo 1, etapa d) (0,12 g) foram em seguida adicionados e a mistura agitada durante 5 minutos antes do resfriamento em um banho de gelo. Cianoboroidreto de sódio (0,029 g) foi em seguida adicionado, a mistura deixada aquecer para TA e agitada durante a noite. O solvente foi evaporado em vácuo. A purificação foi por cromatografia de sílica-gel eluindo com 94,5:5:0,5 a 89:10:1 de gradiente de DCM:metanol:amônia aquosa ‘880’. As frações contendo produto foram combinadas e evaporadas em vácuo. Além disso, a purificação foi por HPLC preparativa (Sunfire®, gradiente: 5-30% de acetonitrila em 0,2% de TFA aquoso). As frações contendo produto foram combinadas, evaporadas em vácuo e o resíduo triturado com dietiléter para fornecer o composto do título como um sólido branco. Produção 0,077 g.
[00921] m/z 670 (M+H)+ (APCI) [00922] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO, 90°C) δ 11,27 (s, 1H), 7,93 (s, 1H), 7,29 - 7,15 (m, 3H), 6,93 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 6,77 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 4,95 - 4,88 (m, 1H), 4,28 - 4,21 (m, 2H), 3,73 - 3,61 (m, 6H),
3,27 (t, J = 7,9 Hz, 2H), 3,16 - 2,93 (m, 10H), 2,05 - 1,95 (m, 2H), 1,83 - 1,70 (m, 4H), 0,96 (t, J = 7,3 Hz, 3H). Cinco prótons trocáveis não
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298/638 observados.
Exemplo 57
Ditrifluoroacetato de (/?)-7-(2-(3-((4-(2-Cyclopropiltiazol-4carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil)-5fluorofenetilamino)-1-hidroxietil)-4-hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona
HO.
OH
a) 2-(ciclopropanocarboxamido)-3-mercaptopropanoato de etila
HS [00923] Cloreto de ciclopropanocarbonila (3,1 mL) foi adicionado a uma suspensão de trietilamina (4,68 mL) e cloridrato de 2-amino-3mercaptopropanoato de etila (5,2 g) em DCM (200 mL) a 0°C. A mistura resultante foi deixada aquecer para TA e agitada durante a noite. A reação foi extinta com etanol e o solvente evaporado. O resíduo foi suspenso em acetato de etila (200 mL) e lavado com solução de bicarbonate de sódio saturada (2 x 150 mL), solução de HCI aquosa (2M, 2 x 150 mL) e salmoura (150 mL), em seguida secado sobre sulfato de magnésio, filtrado e evaporado. O sólido branco resultante foi purificado por cromatografia de sílica-gel eluindo com 4:1 de isohexano:acetato de etila para fornecer o composto do subtítulo como um sólido branco. Produção 5 g.
[00924] 1H RMN (300 MHz, D6-DMSO) δ 8,51 (d, J = 7,7 Hz, 1H),
4,44 (td, J = 7,5, 5,3 Hz, 1H), 4,17 - 4,05 (m, 2H), 2,91 - 2,67 (m, 2H), 2,53- 2,52 (m, 1H), 1,78 - 1,60 (m, 1H), 1,19 (t, J = 6,8 Hz, 3H), 0,71 -
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0,66 (m, 4H).
b) 2-ciclopropiltiazol-4-carboxilato de etila
S [00925] Uma solução de 2-(ciclopropanocarboxamido)-3mercaptopropanoato de etila (exemplo 57, etapa a) (5 g) e ácido tósico (0,875 g) em tolueno (100 mL) foi aquecida ao refluxo sob condições Dean e Stark durante a noite. A reação foi deixada resfriar e a solução de tolueno foi lavada com solução de hidrogeno carbonato de sódio saturada (3 x 100 mL), secada sobre sulfato de sódio, filtrada e evaporada. A goma marrom resultante foi novamente dissolvida em acetonitrila (100 mL). Dióxido de manganês (40 g) foi adicionado e a mistura aquecida ao refluxo durante a noite. A reação foi filtrada através de celite e a almofada filtrante lavada com MeCN (3 x 100 mL). O filtrado combinado e lavagens foram evaporados e o resíduo purificado por cromatografia de sílica-gel eluindo com 9:1 a 4:1 de gradiente de isohexano:acetato de etila. As frações contendo produto foram combinadas e evaporadas para fornecer o composto do subtítulo como um óleo claro. Produção 0,15 g.
[00926] 1H RMN (400 MHz, CDCh) δ 7,94 (s, 1H), 4,40 (q, J = 7,1
Hz, 2H), 2,45 - 2,37 (m, 1H), 1,39 (t, J = 7,2 Hz, 3H), 1,20 - 1,04 (m, 4H).
c) ácido 2-ciclopropiltiazol-4-carboxílico
O h^ynw
S [00927] Monoidrato de hidróxido de lítio (0,13 g) foi adicionado à solução de 2-ciclopropiltiazol-4-carboxilato de etila (exemplo 57, etapa
b) (0,15 g) em uma mistura de THF (8 mL) e água (2 mL) e a mistura resultante foi agitada durante a noite. A reação foi acidificada com HCl
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300/638 aquoso (2M, 3 mL) e o solvente evaporado. O resíduo foi dividido entre salmoura (20 mL) e acetato de etila (30 mL). As camadas foram separadas e a fase aquosa extraída com acetato de etila (2 x 30 mL). As camadas orgânicas combinadas foram secadas sobre sulfato de sódio, filtradas e evaporadas para fornecer o composto do subtítulo como um sólido não totalmente branco. Produção 0,12 g.
[00928] 1H RMN (300 MHz, D6-DMSO) δ 12,88 (s, 1H), 8,19 (s, 1H),
2,48 - 2,37 (m, 1H), 1,18 - 1,09 (m, 2H), 1,01 - 0,94 (m, 2H).
d) (2-Ciclopropiltiazol-4-il)(9-(3-fluoro-5-(2-hidroxietil)benzil)-1-oxa-
4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4-il)metanona
HO [00929] Hexafluorofosfato de O-(7-Azabenzotriazol-1-il)-N,N,N’,Ntetrametilurônio (0,34 g) foi adicionado à solução de 2-(3-(1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9-ilmetil)-5-fluorofenil)etanol (exemplo 55, etapa c) (0,21 g), ácido 2-ciclopropiltiazol-4-carboxílico (exemplo 57, etapa c) (0,12 g) e trietilamina (0,38 mL) em DMF (7 mL) e a solução amarela resultante foi agitada durante 30 min. A mistura foi dividida entre acetato de etila e salmoura (100 mL), a camada orgânica foi lavada com salmoura (2 x 100 mL), secada sobre sulfato de sódio, filtrada e o solvente evaporado. A goma resultante foi purificada por cromatografia de sílica-gel eluindo com gradiente de 47,5:47,5:5 de isohexano:acetato de etila:trietilamina a 95:5 de acetato de etila:trietilamina. As frações contendo produto foram combinadas, tolueno (200 mL) foi adicionado e o solvente evaporado sob pressão reduzida para fornecer o composto do subtítulo como uma goma clara. Produção 0,15 g.
[00930] m/z 460 (M+H)+ (APCI) [00931] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO, 90°C) δ 7,79 (s, 1H), 6,96 (s,
1H), 6,90 (s, 1H), 6,86 (s, 1H), 4,35 (s, 1H), 3,67 - 3,56 (m, 8H), 3,44
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301/638 (s, 2H), 2,72 (t, J = 6,7 Hz, 2H), 2,46 - 2,30 (m, 5H), 1,75 - 1,66 (m, 2H), 1,58 - 1,47 (m, 2H), 1,17 - 1,10 (m, 2H), 1,01 - 0,94 (m, 2H).
e) Ditrifluoroacetato de (R)-7-(2-(3-((4-(2-Ciclopropiltiazol-4- carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil)-5fluorofenetilamino)-1-hidroxietil)-4-hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona
HO.
OH [00932] Ácido trifluoroacético (0,025 mL) foi adicionado a (2ciclopropiltiazol-4-il)(9-(3-fluoro-5-(2-hidroxietil)benzil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-4-il)metanona (exemplo 57, etapa d) (0,15 g) em DCM (5 mL) a 0°C. A mistura foi agitada durante 5 minutos em seguida periodinano Dess-Martin (0,21 g) foi adicionado. A solução amarela resultante foi deixada aquecer para TA e agitada durante 1 hora. Uma mistura de solução de tiossulfato de sódio saturada (5 mL), solução de bicarbonato de sódio saturada (5 mL) e acetato de etila (20 mL) foi em seguida adicionada e a mistura resultante agitada vigorosamente durante 10 minutos. A fase aquosa foi separada e extraída com acetato de etila (20 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (20 mL), acidificadas com algumas gotas de ácido acético, secadas sobre sulfato de sódio, filtradas e evaporadas em vácuo. O resíduo foi dissolvido em metanol (5 mL), ácido acético (0,019 mL) e cloridrato de (R)-7-(2-amino-1-hidroxietil)-4-hidroxibenzo[d]tiazol2(3H)-ona (WO2007027134, exemplo 1, etapa d) (0,13 g) foram em seguida adicionados e a mistura agitada durante 5 minutos antes do resfriamento em um banho de gelo. Cianoboroidreto de sódio (0,031 g) foi em seguida adicionado, a mistura deixada aquecer para TA e agi
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302/638 tada durante a noite. O solvente foi evaporado em vácuo. A purificação foi por cromatografia de sílica-gel eluindo com 94,5:5:0,5 a 89:10:1 de gradiente de DCM:metanol:amônia aquosa ‘880’ . As frações contendo produto foram combinadas e evaporadas em vácuo. Além disso, a purificação foi por HPLC preparativa (Sunfire®, gradiente: 5-30% de acetonitrila em 0,2% de TFA aquoso). As frações contendo produto foram combinadas, evaporadas em vácuo e o resíduo triturado com dietiléter para fornecer o composto do título como um sólido branco. Produção 0,085 g.
[00933] m/z 668 (M+H)+ (APCI) [00934] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO, 90°C) δ 7,81 (s, 1H), 7,28 -
7,16 (m, 3H), 6,93 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 6,77 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 4,97 -
4,86 (m, 1H), 4,26 (s, 2H), 3,72 - 3,58 (m, 6H), 3,31 - 2,99 (m, 10H), 2,06 - 1,92 (m, 2H), 1,82 - 1,68 (m, 2H), 1,19 - 0,90 (m, 4H). Um próton obscurecido por DMSO e seis prótons trocáveis não observados.
Exemplo 58
Ditrifluoroacetato de (R)-7-(2-(3-((4-(2-Ciclobutiltiazol-4-carbonil)1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil)-5- fluorofenetilamino)-1-hidroxietil)-4-hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona
HO.
OH
a) 2-(ciclobutanecarboxamido)-3-mercaptopropanoato de etila
HS [00935] Trietilamina (15 mL) foi adicionado a uma suspensão de
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303/638 ácido ciclobutanecarboxílico (2,57 mL) e cloridrato de 2-amino-3mercaptopropanoato de etila (5 g) em DMF (40 mL). A mistura resultante foi resfriada em um banho de gelo e uma solução de T3P (1,57M em THF, 20,6 mL) foi adicionada gota a gota. A mistura resultante foi deixada aquecer para TA e agitada durante a noite. A reação foi extinta com solução de bicarbonato de sódio saturada (50 mL) e as camadas separadas. A fase aquosa foi extraída com DCM (2 x 100 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (100 mL), secadas sobre sulfato de sódio, filtradas e evaporadas. O sólido branco resultante foi purificado por cromatografia de sílica-gel eluindo com 4:1 a 1:1 de gradiente de iso-hexano:acetato de etila. As frações contendo produto foram combinadas e evaporadas para fornecer o composto do subtítulo como um óleo claro. Produção 3,20 g.
[00936] m/z 230 (M-H)- (APCI) [00937] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO) δ 8,05 (d, J = 7,9 Hz, 1H),
4,41 - 4,32 (m, 1H), 4,14 - 4,05 (m, 2H), 2,89 - 2,68 (m, 2H), 2,21 -
1,70 (m, 7H), 1,18 (t, J = 7,1 Hz, 3H). Um próton trocável não observado.
b) 2-ciclobutiltiazol-4-carboxilato de etila i O [00938] Uma solução de HCl (4M em 1,4-dioxano, 3,46 mL) foi adicionada à solução de 2-(ciclobutanocarboxamido)-3mercaptopropanoato de etila (exemplo 58, etapa a) (3,2 g) em etanol (20 mL) e a mistura resultante agitada durante a noite. O solvente foi evaporado e o resíduo azeotropado duas vezes com tolueno. O resíduo foi novamente dissolvido em acetonitrila (50 mL), dióxido de manganês (12 g) foi adicionado e a mistura aquecida ao refluxo durante a noite. A reação foi filtrada através de uma almofada de celite que foi
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304/638 em seguida lavada com MeCN (3 x 100 mL). O filtrado combinado e lavagens foram evaporados e o resíduo foi purificado por cromatografia de sílica-gel eluindo com 9:1 de iso-hexano:acetato de etila. As frações contendo produto foram combinadas e evaporadas para fornecer o composto do subtítulo como um óleo claro. Produção 0,48 g.
[00939] 1H RMN (400 MHz, CDCU) δ 8,06 (s, 1H), 4,42 (q, J = 7,1
Hz, 2H), 4,00 - 3,89 (m, 1H), 2,56 - 2,45 (m, 2H), 2,41 - 2,29 (m, 2H),
2,16 - 1,90 (m, 2H), 1,40 (t, J = 7,0 Hz, 3H).
c) ácido 2-ciclobutiltiazol-4-carboxílico
O
S [00940] Monoidrato de hidróxido de lítio (0,38 g) foi adicionado à solução de 2-ciclobutiltiazol-4-carboxilato de etila (exemplo 58, etapa b) (0,48 g) em uma mistura de THF (8 mL) e água (2 mL). A suspensão resultante foi agitada durante a noite em TA. A reação foi acidificada com solução de HCl aquosa (2M, 5 mL) e evaporada até a secura. O resíduo foi dividido entre salmoura (5 mL) e acetato de etila (20 mL). As camadas foram separadas e a fase aquosa extraída com acetato de etila (2 x 20 mL). As camadas orgânicas combinadas foram secadas sobre sulfato de sódio, filtradas e evaporadas para fornecer o composto do subtítulo como um sólido branco. Produção 0,38 g.
[00941] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO) δ 12,91 (s, 1H), 8,32 (s, 1H),
3,94 - 3,83 (m, 1H), 2,46 - 2,35 (m, 2H), 2,32 - 2,21 (m, 2H), 2,09 1,97 (m, 1H), 1,94 - 1,81 (m, 1H).
d) (2-ciclobutiltiazol-4-il)(9-(3-fluoro-5-(2-hidroxietil)benzil)-1-oxa-
4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4-il)metanona
[00942]
Hexafluorofosfato de O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N’,NPetição 870190058499, de 25/06/2019, pág. 310/650
305/638 tetrametilurônio (0,32 g) foi adicionado à solução de 2-(3-(1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9-ilmetil)-5-fluorofenil)etanol (exemplo 55, etapa c) (0,2 g), ácido 2-ciclobutiltiazol-4-carboxílico (exemplo 58, etapa c) (0,12 g) e trietilamina (0,36 mL) em DMF (7 mL) e a solução amarela resultante foi agitada durante 30 minutos. A mistura foi dividida entre acetato de etila e salmoura (100 mL) e as camadas separadas. A fase orgânica foi lavada com salmoura (2 x 100 mL), secada sobre sulfato de sódio, filtrada e o solvente evaporado. A goma resultante foi purificada por cromatografia de sílica-gel eluindo com gradiente de 47,5:47,5:5 de iso-hexano:acetato de etila:trietilamina a 95:5 de acetato de etila:trietilamina . As frações contendo produto foram combinadas, tolueno (200 mL) foi adicionado e o solvente evaporado para fornecer o composto do subtítulo como um óleo claro. Produção 0,18 g.
[00943] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO, 90°C) δ 7,91 (s, 1H), 6,95 (s,
1H), 6,89 (s, 1H), 6,86 (s, 1H), 4,36 - 4,25 (m, 1H), 3,87 (q, J = 8,3 Hz, 1H), 3,70 - 3,57 (m, 8H), 3,43 (s, 2H), 2,72 (t, J = 6,7 Hz, 2H), 2,46 2,26 (m, 8H), 2,11 - 1,91 (m, 2H), 1,76 - 1,66 (m, 2H), 1,60 - 1,51 (m, 2H).
e) Ditrifluoroacetato de (R)-7-(2-(3-((4-(2-ciclobutiltiazol-4- carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil)-5fluorofenetilamino)-1-hidroxietil)-4-hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona
HO,
OH [00944] TFA (0,026 mL) foi adicionado à solução de (2ciclobutiltiazol-4-il)(9-(3-fluoro-5-(2-hidroxietil)benzil)-1-oxa-4,9
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306/638 diazaespiro[5,5]undecan-4-il)metanona (exemplo 58, etapa d) (0,16 g) em DCM (5 mL) a 0°C. A mistura foi agitada durante 5 minutos em seguida periodinano Dess-Martin (0,22 g) foi adicionado. A solução amarela resultante foi deixada aquecer para TA e agitada durante 1 hora. Uma mistura de solução de tiossulfato de sódio saturada (5 mL), solução de bicarbonato de sódio saturada (5 mL) e acetato de etila (20 mL) foi em seguida adicionada e a mistura resultante agitada vigorosamente durante 10 minutos. A fase aquosa foi separada e extraída com acetato de etila (20 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (20 mL), acidificadas com algumas gotas de ácido acético, secadas sobre sulfato de sódio, filtradas e evaporadas em vácuo. O resíduo foi dissolvido em metanol (5 mL), ácido acético (0,019 mL) e cloridrato de (R)-7-(2-amino-1-hidroxietil)-4-hidroxibenzo[d]tiazol2(3H)-ona (WO2007027134, exemplo 1, etapa d) (0,13 g) foram em seguida adicionados e a mistura agitada durante 5 minutos antes do resfriamento em um banho de gelo. Cianoboroidreto de sódio (0,032 g) foi em seguida adicionado, a mistura deixada aquecer para TA e agitada durante a noite. O solvente foi evaporado em vácuo. A purificação foi por cromatografia de sílica-gel eluindo com 94,5:5:0,5 a 89:10:1 de gradiente de DCM:metanol:amônia aquosa ‘880’ . As frações contendo produto foram combinadas e evaporadas em vácuo. Além disso, a purificação foi por HPLC preparativa (Sunfire®, gradiente: 5-30% de acetonitrila em 0,2% de TFA aquoso). As frações contendo produto foram combinadas, evaporadas em vácuo e o resíduo triturado com dietiléter para fornecer o composto do título como um sólido branco. Produção 0,12 g.
[00945] m/z 682 (M+H)+ (APCI) [00946] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO, 90°C) δ 11,26 (s, 1H), 7,94 (s, 1H), 7,30 - 7,17 (m, 3H), 6,93 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 6,78 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 4,99 - 4,89 (m, 1H), 4,35 - 4,25 (m, 2H), 3,93 - 3,81 (m, 1H),
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307/638
3,75 - 3,62 (m, 6H), 3,32 - 2,99 (m, 10H), 2,47 - 2,39 (m, 2H), 2,31 -
2,20 (m, 2H), 2,10 - 1,72 (m, 6H). Cinco prótons trocáveis não observados.
Exemplo 59
Ditrifluoroacetato de (R)-7-(2-(3-((4-(2-ciclopentiltiazol-4-carbonil)1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil)-5- fluorofenetilamino)-1-hidroxietil)-4-hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona
HO
OH
a) 2-(ciclopentanocarboxamido)-3-mercaptopropanoato de etila
HS [00947] CDI (8,5 g) foi adicionado à solução de ácido ciclopentanocarboxílico (5,2 mL) em DMF (40 mL). A mistura resultante foi agitada durante 1 hora e resfriada em um banho de gelo. Cloridrato de 2-amino-3-mercaptopropanoato de etila (8,88 g) foi adicionado, seguido por trietilamina (10 mL). A mistura resultante foi deixada aquecer para TA e agitada durante a noite. A reação foi extinta com solução de bicarbonato de sódio saturada (50 mL) e as camadas separadas. O aquoso foi extraído com DCM (2 x 100 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (100 mL), secadas sobre sulfato de sódio, filtradas e evaporadas. O sólido resultante foi purificado por cromatografia de sílica-gel eluindo com 4:1 a 1:1 de gradiente de iso-hexano:acetato de etila . As frações contendo produto foram combinadas e evaporadas para fornecer o composto do subtítu
Petição 870190058499, de 25/06/2019, pág. 313/650
308/638 lo como um sólido branco. Produção 7,7 g.
[00948] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO) δ 8,15 (d, J = 7,7 Hz, 1H),
4,41 - 4,34 (m, 1H), 4,14 - 4,05 (m, 2H), 2,89 - 2,61 (m, 3H), 1,81 -
1,45 (m, 9H), 1,18 (t, J = 7,0 Hz, 3H).
b) 2-ciclopentil-4,5-di-hidrotiazol-4-carboxilato de etila [00949] Monoidrato de ácido tósico (0,78 g) foi adicionado à solução de 2-(ciclopentanocarboxamido)-3-mercaptopropanoato de etila (exemplo 59, etapa a) (5 g) em tolueno (40 mL). A mistura resultante foi aquecida ao refluxo sob condições Dean e Stark durante 6 horas. A reação foi deixada resfriar, em seguida a solução de tolueno foi lavada com solução de bicarbonato de sódio saturada (20 mL) e o solvente evaporado. O resíduo foi azeotropado com tolueno. O sólido branco resultante foi purificado por cromatografia de sílica-gel eluindo com 9:1 de iso-hexano:acetato de etila. As frações contendo produto foram combinadas e evaporadas para fornecer o composto do subtítulo como um óleo claro. Produção 3,2 g.
[00950] 1H RMN (400 MHz, CDC1s) δ 5,08 - 4,99 (m, 1H), 4,26 (q, J = 7,2 Hz, 2H), 3,56 - 3,44 (m, 2H), 3,08 - 2,99 (m, 1H), 2,03 - 1,93 (m, 2H), 1,83 - 1,70 (m, 4H), 1,64 - 1,59 (m, 2H), 1,31 (t, J = 7,2 Hz, 3H).
c) 2-ciclopentiltiazol-4-carboxilato de etila [00951] Dióxido de manganês (24 g) foi adicionado à solução de 2ciclopentil-4,5-di-hidrotiazol-4-carboxilato de etila (exemplo 59, etapa b) (3,2 g) em acetonitrila (100 mL) e a mistura resultante aquecida ao refluxo durante a noite. A reação foi deixada resfriar e filtrada através de uma almofada de celite. A almofada filtrante foi lavada com acetonitrila (2 x 100 mL) e o filtrado combinado e lavagens evaporados. O re
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309/638 síduo foi purificado por cromatografia de sílica-gel eluindo com 9:1 de iso-hexano:acetato de etila. As frações contendo produto foram combinadas, evaporadas e novamente dissolvidas em etanol (20 mL). Uma suspensão de paládio sobre carbono (5%, 0,66 g) em água (0,5 mL) foi adicionada e a suspensão resultante agitada sob uma atmosfera de hidrogênio a 500KPa(5 bar) de pressão durante 2 horas. A mistura foi filtrada através de uma almofada de celite que foi lavada com etanol (3 x 50 mL). O filtrado combinado e lavagens foram evaporados para fornecer o composto do subtítulo como um óleo claro. Produção 0,9 g.
[00952] 1H RMN (400 MHz, CDC1s) δ 8,04 (s, 1H), 4,41 (q, J = 7,2
Hz, 2H), 3,60 - 3,48 (m, 1H), 2,29 - 2,18 (m, 2H), 1,89 - 1,67 (m, 6H), 1,40 (t, J = 7,0 Hz, 3H).
d) ácido 2-ciclopentiltiazol-4-carboxílico
O
HO [00953] Monoidrato de hidróxido de lítio (0,67 g) foi adicionado a uma solução de 2-ciclopentiltiazol-4-carboxilato de etila (exemplo 59, etapa c) (0,9 g) em uma mistura de THF (40 mL) e água (10 mL). A mistura resultante foi agitada durante a noite. A reação foi acidificada com solução de HCl aquosa (2M, 10 mL) e o solvente evaporado. O resíduo foi dividido entre salmoura (50 mL) e acetato de etila (50 mL) e as camadas separadas. A fase aquosa foi extraída com acetato de etila (2 x 50 mL). As camadas orgânicas combinadas foram secadas sobre sulfato de sódio, filtradas e evaporadas para fornecer o composto do subtítulo como um sólido amarelo pálido. Produção 0,77 g.
[00954] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO) δ 12,89 (s, 1H), 8,30 (s, 1H),
3,51 - 3,41 (m, 1H), 2,17 - 2,07 (m, 2H), 1,82 - 1,59 (m, 6H).
e) (2-ciclopentiltiazol-4-il)(9-(3-fluoro-5-(2-hidroxietil)benzil)-1-oxa-
4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4-il)metanona
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310/638
F
[00955] Hexafluorofosfato de O-(7-azabenzotnazo\-1-'\\)-N,N,N’,N’tetrametilurônio (0,33 g) foi adicionado à solução de 2-(3-(1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9-ilmetil)-5-fluorofenil)etanol (exemplo 55, etapa c) (0,21 g), ácido 2-ciclopentiltiazol-4-carboxílico (exemplo 59, etapa d) (0,13 g) e trietilamina (0,38 mL) em DMF (7 mL) e a solução amarela resultante foi agitada durante 30 minutos. A mistura foi dividida entre acetato de etila e salmoura (100 mL), a fase orgânica foi lavada com salmoura (2 x 100 mL), secada sobre sulfato de sódio, filtrada e o solvente evaporado. A goma resultante foi purificada por cromatografia de sílica-gel eluindo com gradiente de 47,5:47,5:5 de isohexano:acetato de etila:trietilamina a 95:5 de acetato de etila:trietilamina. As frações contendo produto foram combinadas, tolueno (200 mL) foi adicionado e o solvente evaporado sob pressão reduzida para fornecer o composto do subtítulo como uma goma clara. Produção 0,19 g.
[00956] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO, 90°C) δ 7,89 (s, 1H), 6,95 (s,
1H), 6,88 (s, 1H), 6,86 (s, 1H), 4,30 (t, J = 5,1 Hz, 1H), 3,69 - 3,61 (m, 8H), 3,43 (s, 2H), 2,76 - 2,69 (m, 3H), 2,42 - 2,28 (m, 4H), 2,18 - 2,06 (m, 2H), 1,86 - 1,64 (m, 8H), 1,60 - 1,49 (m, 2H).
f) Ditrifluoroacetato de (R)-7-(2-(3-((4-(2-ciclopentiltiazol-4- carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil)-5fluorofenetilamino)-1-hidroxietil)-4-hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona
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311/638 [00957]
F
HO
HN
S
OH
N H
Ácido trifluoroacético (0,028 mL) foi adicionado à solução de (2-ciclopentiltiazol-4-il)(9-(3-fluoro-5-(2-hidroxietil)benzil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-4-il)metanona (exemplo 59, etapa e) (0,18 g) em DCM (5 mL) a 0°C. A mistura foi agitada durante 5 minutos em seguida periodinano Dess-Martin (0,23 g) foi adicionado. A solução amarela resultante foi deixada aquecer para TA e agitada durante 1 hora. Uma mistura de solução de tiossulfato de sódio saturada (5 mL), solução de bicarbonato de sódio saturada (5 mL) e acetato de etila (20 mL) foi em seguida adicionada e a mistura resultante agitada vigorosamente durante 10 minutos. A fase aquosa foi separada e extraída com acetato de etila (20 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (20 mL), acidificadas com algumas gotas de ácido acético, secadas sobre sulfato de sódio, filtradas e evaporadas em vácuo. O resíduo foi dissolvido em metanol (5 mL), ácido acético (0,021 mL) e cloridrato de (R)-7-(2-amino-1-hidroxietil)-4-hidroxibenzo[d]tiazol2(3H)-ona (WO2007027134, exemplo 1, etapa d) (0,14 g) foram em seguida adicionados e a mistura agitada durante 5 minutos antes do resfriamento em um banho de gelo. Cianoboroidreto de sódio (0,034 g) foi em seguida adicionado, a mistura deixada aquecer para TA e agitada durante a noite. O solvente foi evaporado em vácuo. A purificação foi por cromatografia de sílica-gel eluindo com 94,5:5:0,5 a 89:10:1 de gradiente de DCM:metanol:amônia aquosa ‘880’ . As frações contendo produto foram combinadas e evaporadas em vácuo. Além disso, a purificação foi por HPLC preparativa (Sunfire®, gradiente: 5-30% de ace
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312/638 tonitrila em 0,2% de TFA aquoso). As frações contendo produto foram combinadas, evaporadas em vácuo e o resíduo triturado com dietiléter para fornecer o composto do título como um sólido branco. Produção 0,7 g.
[00958] m/z 696 (M+H)+ (APCI) [00959] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO, 90°C) δ 7,92 (s, 1H), 7,28 -
7,15 (m, 3H), 6,93 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 6,77 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 4,97 -
4,86 (m, 1H), 4,30 - 4,20 (m, 2H), 3,74 - 3,58 (m, 6H), 3,52 - 3,42 (m, 1H), 3,27 (t, J = 7,9 Hz, 2H), 3,19 - 2,96 (m, 8H), 2,18 - 1,93 (m, 4H),
1,84 - 1,59 (m, 8H). Seis prótons trocáveis não observados.
Exemplo 60
Ditrifluoroacetato de (R)-7-(2-(3-Fluoro-5-((4-(4-metiltiofeno-2carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil) fenetilamino)-1-hidroxietil)-4-hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona
a) (9-(3-Fluoro-5-(2-hidroxietil)benzil)-1-oxa-4,9- diazaespi- ro[5,5]undecan-4-il)(4-metiltiofen-2-il)metanona
[00960] Uma solução de 2,2,2-trifluoro-1-(9-(3-fluoro-5-(2hidroxietil)benzil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4-il)etanona (exemplo 41, etapa d) (0,17 g) em metanol (3 mL) foi adicionada a amônia (35% de solução aquosa, 15 mL) e a mistura reacional agitada a 20°C durante 1 hora. A mistura foi evaporada até a secura sob pres
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313/638 são reduzida e o resíduo azeotropado três vezes com acetonitrila. O resíduo foi dissolvido em DMF (6 mL) e tratado com ácido 4metiltiofeno-2-carboxílico (0,060 g) seguido por trietilamina (0,176 mL) e em seguida HATU (0,208 g) e a mistura resultante agitada a 20°C durante 1 hora. A mistura foi dividida entre acetato de etila e salmoura, a camada orgânica foi lavada duas vezes com salmoura, secada sobre sulfato de sódio, filtrada e o solvente evaporado sob pressão reduzida. O produto bruto foi purificado por cromatografia de sílica rápida usando 2,5% de metanol em diclorometano com 1% de trietilamina como solvente. Frações puras foram evaporadas até a secura para fornecer o composto do subtítulo. Produção 0,120 g.
[00961] m/z 433 (M+H)+ (APCI)
b) Ditrifluoroacetato de (R)-7-(2-(3-Fluoro-5-((4-(4-metiltiofeno-2carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil) fenetilamino)-1-hidroxietil)-4-hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona
OH
HO [00962] Uma solução de (9-(3-fluoro-5-(2-hidroxietil)benzil)-1-oxa-
4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4-il)(4-metiltiofen-2-il)metanona (exemplo 60, etapa a) (0,120 g) em DCM (20 mL) foi tratada com ácido trifluoroacético (0,021 ml) seguida por periodinano Dess Martin (0,153 g) e a mistura resultante agitada a 20°C durante 40 minutos. A mistura reacional foi tratada com solução de tiossulfato de sódio saturada (20 mL) e solução de bicarbonato de sódio saturada (20 mL) e acetato de etila (30 mL) e agitada vigorosamente durante 5 minutos. A mistura foi extraída duas vezes com acetato de etila, os orgânicos combinados foram lavados com solução de bicarbonato de sódio saturada, secados
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314/638 sobre sulfato de sódio e filtrados. Ácido acético (0,016 ml) foi adicionado a esta solução e o solvente em seguida removido sob pressão reduzida. O resíduo foi dissolvido em metanol (3 mL) e adicionado a uma solução de cloridrato de (R)-7-(2-amino-1-hidroxietil)-4hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona (WO2007027134, exemplo 1, etapa d) (0,109 g) e ácido acético (0,016 ml) em metanol (15 mL). A mistura foi resfriada em um banho de gelo e tratada com cianoboroidreto de sódio (0,035 g). O banho de resfriamento foi removido e a mistura agitada a 20°C durante 3 horas. O solvente foi evaporado para um volume de 3 mL sob pressão reduzida e THF (20 mL) foi adicionado. A mistura foi lavada com uma mistura de salmoura saturada (10 mL) e solução de bicarbonato de sódio saturada (1 mL). A camada orgânica foi secada sobre sulfato de sódio, filtrada e o solvente removido sob pressão reduzida. O resíduo foi azeotropado duas vezes com acetonitrila. O produto bruto foi purificado por HPLC preparativa (Sunfire®, gradiente: 1040% de acetonitrila em 0,2% de TFA aquoso). As frações contendo o composto desejado foram evaporadas até a secura para fornecer o composto do título. Produção 0,075 g.
[00963] m/z 641 (M+H)+ (APCI) [00964] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO, 90°C) δ 7,30 - 7,17 (m, 5H),
6,93 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 6,77 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 4,94 - 4,89 (m, 1H),
4,27 (s, 2H), 3,73 - 3,69 (m, 2H), 3,67 - 3,63 (m, 2H), 3,54 (s, 2H), 3,27 (t, J = 7,9 Hz, 2H), 3,19 - 2,99 (m, 8H), 2,22 (s, 3H), 2,05 - 1,97 (m, 2H), 1,82 - 1,71 (m, 2H). Seis prótons trocáveis não observados.
Exemplo 61
Ditrifluoroacetato de (R)-7-(2-(4-Cloro-3-((4-(2-isopropiltiazol-4carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil) fenetilamino)-1-hidroxietil)-4-hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona
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315/638
HN
S
N
H
OH
a) ácido 5-(carboximetil)-2-clorobenzoico
Cl
S
HO
OH
O [00965] Hidróxido de potássio (0,969 g) em água (10 mL) foi adicionado à solução de ácido 2-cloro-5-(cianometil)benzoico (1,25 g) em etanol (10 mL) e a mistura resultante foi aquecida ao refluxo durante
2,25 horas, em seguida deixada resfriar. A mistura foi concentrada em vácuo para remover o etanol e em seguida diluída com água e lavada duas vezes com acetato de etila. As fases orgânicas foram descartadas, embora a fase aquosa seja acidificada para pH 1 com ácido clorídrico concentrado e extraída duas vezes com acetato de etila. Os ex tratos combinados foram secados sobre sulfato de magnésio anidroso e concentrados em vácuo para fornecer o composto do subtítulo como uma goma marrom. Produção 1,38 g.
[00966] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO) δ 12,93 (br s, 2H), 7,69 (d, J = 2,1 Hz, 1H), 7,48 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,42 (dd, J = 8,3, 2,2 Hz, 1H),
3,66 (s, 2H).
b) 2-(4-Cloro-3-(hidroximetil)fenil)etanol
Cl
OH
HO [00967] Uma solução de complexo de borano-sulfeto de metila (2M em THF, 6,50 mL) foi adicionada porção a porção durante 5 minutos a uma solução de ácido 5-(carboximetil)-2-clorobenzoico (exemplo 61, etapa a) (1,37 g) em THF seco (20 mL) em temperatura ambiente. A
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316/638 solução efervescente resultante foi agitada em temperatura ambiente durante 1,5 horas, em seguida aquecida ao refluxo durante 1 hora. A mistura resfriada foi extinta pela adição porção a porção de metanol (5 mL) durante 5 minutos. A solução foi agitada em temperatura ambiente durante 2 horas e em seguida purificada por cromatografia rápida em sílica eluída com 5% de metanol em diclorometano para fornecer o composto do subtítulo como um óleo incolor. Produção 0,933 g.
[00968] 1H RMN (400 MHz, CDCh) δ 7,36 (d, J = 2,1 Hz, 1H), 7,30 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 7,11 (dd, J = 8,1, 2,2 Hz, 1H), 4,77 (s, 2H), 3,87 (t, J = 6,5 Hz, 2H), 2,86 (t, J = 6,5 Hz, 2H). Dois prótons trocáveis não observados.
c) 2-Cloro-5-(2-hidroxietil)benzaldeído
Cl
HO [00969] Dióxido de manganês (IV) (1,00 g) foi adicionado à solução de 2-(4-cloro-3-(hidroximetil)fenil)etanol (exemplo 61, etapa b) (0,200 g) em DCM (5 mL), e a suspensão resultante foi agitada em temperatura ambiente durante a noite. A mistura foi em seguida filtrada através de celite, lavando bem o resíduo com DCM. O filtrado e lavagens foram concentrados em vácuo para fornecer o composto do subtítulo como um óleo incolor. Produção 0,197 g.
[00970] 1H RMN (400 MHz, CDCh) δ 10,47 (s, 1H), 7,80 (d, J = 2,1
Hz, 1H), 7,42 (d, J = 2,1 Hz, 1H), 7,41 (s, 1H), 3,89 (br t, J = 5,9 Hz, 2H), 2,90 (t, J = 6,4 Hz, 2H), 1,42 (br s, 1H).
d) (9-(2-Cloro-5-(2-hidroxietil)benzil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5] undecan-4-il)(2-isopropiltiazol-4-il)metanona
HO [00971] Uma solução de trifluoroacetato de (2-isopropiltiazol-4-il)(1oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4-il)metanona (exemplo 22, etapa b)
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317/638 (0,294 g) em NMP (2 mL) foi tratada com ácido acético (0,039 mL) e agitada durante 5 minutos. Uma solução de 2-cloro-5-(2hidroxietil)benzaldeído (exemplo 61, etapa c) (0,189 g) em NMP (3 mL) foi em seguida adicionada, a solução resultante foi agitada durante 1 hora e foi em seguida tratada com triacetoxiboroidreto de sódio (0,217 g). A mistura foi agitada durante a noite em temperatura ambiente, em seguida vertida em bicarbonato de sódio saturado e extraída duas vezes com acetato de etila. Os extratos combinados foram lavados três vezes com água, uma vez com salmoura, em seguida secados sobre sulfato de magnésio anidroso e purificados por cromatografia rápida em sílica eluída com 1:2:97 de trietilamina:metanol:diclorometano para fornecer o composto do subtítulo como uma goma incolor. Produção 0,238 g.
[00972] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO, 90°C) δ 7,91 (s, 1H), 7,29 (d,
J = 1,8 Hz, 1H), 7,25 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,09 (dd, J = 8,2, 2,1 Hz, 1H),
4,29 (t, J = 5,1 Hz, 1H), 3,70 - 3,59 (m, 8H), 3,51 (s, 2H), 3,32 (septet, J = 6,9 Hz, 1H), 2,71 (t, J = 6,8 Hz, 2H), 2,45 - 2,29 (m, 4H), 1,75 -
1,66 (m, 2H), 1,60 - 1,51 (m, 2H), 1,36 (d, J = 6,7 Hz, 6H).
e) 2-(4-Cloro-3-((4-(2-isopropiltiazol-4-carbonil)-1 -oxa-4,9- diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil)fenil)acetaldeído [00973] Uma solução de (9-(2-cloro-5-(2-hidroxietil)benzil)-1-oxa-
4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4-il)(2-isopropiltiazol-4-il)metanona (exemplo 61, etapa d) (0,230 g) em DCM (5 mL) foi resfriada em geloágua, tratada com ácido trifluoroacético (0,074 mL) e agitada durante 5 minutos. Periodinano Dess-Martin (0,313 g) foi adicionado, em seguida a mistura foi removida do banho de resfriamento e agitada em temperatura ambiente durante 40 minutos. A solução foi diluída com solução de tiossulfato de sódio saturada (5 mL), solução de bicarbonato de só
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318/638 dio saturada (5 mL) e acetato de etila (5 mL) e a mistura resultante foi agitada vigorosamente durante 10 minutos. A mistura foi em seguida extraída duas vezes com acetato de etila, as fases orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, acidificadas com ácido acético (0,1 mL), secadas sobre sulfato de magnésio anidroso e concentradas em vácuo para fornecer o composto do subtítulo cru como uma espuma amarela. Produção 0,274 g.
[00974] m/z 476 (M+H)+ (APCI)
f) Ditrifluoroacetato de (R)-7-(2-(4-cloro-3-((4-(2-isopropiltiazol-4carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil) fenetilamino)-1-hidroxietil)-4-hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona
HO
OH [00975] Uma solução de cloridrato de (R)-7-(2-amino-1-hidroxietil)4-hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona (WO2007027134, exemplo 1, etapa
d) (0,225 g) em metanol (3 mL) foi tratada com ácido acético (0,029 mL) e agitada durante 5 minutos. Uma solução de 2-(4-cloro-3-((4-(2isopropiltiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9il)metil)fenil)acetaldeído (exemplo 61, etapa e) (0,274 g) em metanol (4 mL) foi em seguida adicionada, e a mistura resultante foi agitada em temperatura ambiente durante 5 minutos, antes do resfriamento em gelo-água e tratamento com cianoboroidreto de sódio (0,051 g). O banho de resfriamento foi removido e a mistura foi agitada em temperatura ambiente durante 140 minutos, antes de tratamento com mais cianoboroidreto de sódio (0,055 g). A mistura foi em seguida agitada durante a noite. Na manhã seguinte a mistura foi concentrada em vácuo.
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O resíduo foi dissolvido em uma mistura de metanol (1,5 mL), acetonitrila (1,5 mL) e água (1,5 mL) e purificado por HPLC preparativa (Sunfire®, gradiente: 5-50% de acetonitrila em 0,2% de TFA aquoso). Frações contendo produto foram concentradas em vácuo e coevaporadas de acetonitrila três vezes para fornecer um resíduo incolor. O resíduo foi triturado com dietil éter para fornecer um sólido, que foi coletado por filtração, lavado com dietil éter e secado em vácuo em temperatura ambiente para fornecer o composto do título como um sólido branco. Produção 0,062 g.
[00976] m/z 686 (M+H)+ (APCI) [00977] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO, 90°C) δ 7,93 (s, 1H), 7,52 -
7,43 (m, 2H), 7,35 - 7,26 (m, 1H), 6,93 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 6,77 (d, J =
8,5 Hz, 1H), 4,89 (dd, J = 7,8, 5,5 Hz, 1H), 3,76 - 3,60 (m, 6H), 3,36 -
3,16 (m, 3H), 3,15 - 2,83 (m, 8H), 2,02 - 1,84 (m, 2H), 1,80 - 1,63 (m, 2H), 1,35 (d, J = 6,9 Hz, 6H). Um metileno (dois prótons) muito amplo e seis prótons trocáveis não observados.
Exemplo 62
Ditrifluoroacetato de (R)-4-hidróxi-7-(1-hidróxi-2-((5-((4-(2isopropiltiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9il)metil)naftalen-1-il)metilamino)etil)benzo[d]tiazol-2(3H)-ona
HO.
OH
a) (9-((5-(Bromometil)naftalen-1 -il)metil)-1 -oxa-4,9-diazaespiro[5,5] undecan-4-il)(2-isopropiltiazol-4-il)metanona
Br [00978] Trietilamina (0,185 mL) foi adicionado a uma suspensão de
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320/638 trifluoroacetato de (2-isopropiltiazol-4-il)(1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-4-il)metanona (exemplo 22, etapa b) (0,225 g) em acetonitrila (5 mL) para fornecer uma solução incolor que foi agitada em temperatura ambiente durante a noite, em seguida concentrada em vácuo. O resíduo foi dissolvido em NMP (5 mL) e tratado com mais trietilamina (0,111 mL). Enquanto isso, uma suspensão de 1,5bis(bromometil)naftaleno (0,500 g) em acetonitrila (5 mL) e NMP (5 mL) foi agitada em temperatura ambiente durante a noite, em seguida concentrada em vácuo para remover a acetonitrila para fornecer uma solução. A solução de amina do acima foi em seguida adicionada gota a gota durante 35 minutos, completando a adição com mais NMP (1 mL). A solução resultante foi agitada durante 75 minutos, em seguida vertida em água e extraída três vezes com dietil éter. Os extratos combinados foram lavados três vezes com água, e uma vez com salmoura, em seguida secados sobre sulfato de magnésio anidroso e purificados por cromatografia rápida em sílica eluída com trietilamina:diclorometano:acetato de etila (1:49:50) para fornecer o composto do subtítulo como uma espuma branca. Produção 0,132 g.
[00979] m/z 542/544 (M+H)+ (APCI)
b) Ditrifluoroacetato de (R)-4-hidróxi-7-(1-hidróxi-2-((5-((4-(2- isopropiltiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9il)metil)naftalen-1-il)metilamino)etil)benzo[d]tiazol-2(3H)-ona
HO,
OH [00980] Trietilamina (0,16 mL) foi adicionado à solução de cloridrato de (R)-7-(2-amino-1-hidroxietil)-4-hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona (WO2007027134, exemplo 1, etapa d) (0,188 g) em metanol (5 mL) para fornecer uma suspensão, que foi concentrada em vácuo e nova
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321/638 mente dissolvida em NMP (4 mL). Mais trietilamina (0,16 mL) foi adicionado, junto com uma solução de (9-((5-(bromometil)naftalen-1il)metil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4-il)(2-isopropiltiazol-4il)metanona (exemplo 62, etapa a) (0,126 g) em NMP (3 mL), adicionada gota a gota durante 30 minutos, completando a adição com mais NMP (1 mL). A solução resultante foi agitada em temperatura ambiente durante a noite. A solução foi em seguida filtrada, acidificada com ácido trifluoroacético (0,27 mL) e purificada por HPLC preparativa (Sunfire®, gradiente: 5-50% de acetonitrila em 0,2% de TFA aquoso). Frações contendo produto foram concentradas em vácuo e coevaporadas de acetonitrila uma vez e metanol duas vezes. O resíduo foi triturado com dietil éter para fornecer um sólido, que foi removido por filtração, lavado com dietil éter e secado em vácuo em temperatura ambiente para fornecer o composto do título como um sólido amarelo pálido. Produção 0,056 g.
[00981] m/z 688 (M+H)+ (APCI) [00982] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO, 90°C) δ 8,42 (d, J = 8,2 Hz,
1H), 8,31 (br d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,93 (s, 1H), 7,87 - 7,61 (m, 4H),6,93 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 6,76 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 5,00 - 4,94 (m, 1H),4,75 (dd, J = 23,6, 14,1 Hz, 2H), 3,80 - 3,56 (m, 6H), 3,45 - 2,99 (m,9H),
2,08 - 1,87 (m, 2H), 1,81 - 1,58 (m, 2H), 1,35 (d, J = 6,9 Hz, 6H).Seis prótons trocáveis não observados.
Exemplo 63
Ditrifluoroacetato de (R)-7-(2-(3-Fluoro-5-((4-(5-metiltiofen-2ilsulfonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil) fenetilamino)-1-hidroxietil)-4-hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona
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OH
a) 2-(3-Fluoro-5-((4-(5-metiltiofen-2-ilsulfonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro [5,5]undecan-9-il)metil)fenil)etanol
[00983] Uma solução de cloreto de 5-metiltiofeno-2-sulfonila (0,15 g) em DCM (3 mL) foi adicionada gota a gota a uma solução de 2-(3(1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-ilmetil)-5-fluorofenil)etanol (exemplo 55, etapa c) (0,21 g) e M-etil-M-isopropilpropan-2-amina (0,14 mL) em DCM (20 mL). A mistura resultante foi agitada durante 1 hora e o solvente evaporado. O resíduo foi dividido entre acetato de etila (50 mL) e solução de hidrogeno carbonato de sódio saturada (50 mL). As camadas foram separadas e o aquoso extraído com acetato de etila (2 x 50 mL). Os orgânicos combinados foram lavados com salmoura (50 mL), secados sobre sulfato de sódio, filtrados e evaporados. O resíduo foi purificado por cromatografia de sílica-gel eluindo com gradiente de 47,5:47,5:5 de acetato de etila:iso-hexano:trietilamina a 95:5 de acetato de etila:trietilamina. As frações contendo produto foram combinadas e evaporadas para fornecer o composto do subtítulo como uma goma amarela. Produção 0,21 g.
[00984] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO, 90°C) δ 7,46 (d, J = 3,6 Hz,
1H), 7,02 (dd, J = 3,6, 1,0 Hz, 1H), 6,97 (s, 1H), 6,94 (s, 1H), 6,91 (s, 1H), 4,64 (t, J = 5,1 Hz, 1H), 3,73 - 3,67 (m, 2H), 3,63 - 3,57 (m, 2H),
3,44 (s, 2H), 2,88 - 2,83 (m, 2H), 2,74 - 2,69 (m, 4H), 2,53 (s, 3H), 2,44
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- 2,35 (m, 2H), 2,31 - 2,22 (m, 2H), 1,80 - 1,72 (m, 2H), 1,60 - 1,51 (m, 2H)
b) Ditrifluoroacetato de (R)-7-(2-(3-fluoro-5-((4-(5-metiltiofen-2ilsulfonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil) fenetilamino)-1-hidroxietil)-4-hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona
OH [00985] TFA (0,033 mL) foi adicionado à solução de 2-(3-fluoro-5((4-(5-metiltiofen-2-ilsulfonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9il)metil)fenil)etanol (exemplo 63, etapa a) (0,2 g) em DCM (5 mL) a 0°C. A mistura foi agitada durante 5 minutos em seguida periodinano Dess-Martin (0,27 g) foi adicionado. A solução amarela resultante foi deixada aquecer para TA e agitada durante 1 hora. Uma mistura de solução de tiossulfato de sódio saturada (5 mL), solução de bicarbonate de sódio saturada (5 mL) e acetato de etila (20 mL) foi em seguida adicionada e a mistura resultante agitada vigorosamente durante 10 minutos. A fase aquosa foi separada e extraída com acetato de etila (20 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (20 mL), acidificadas com algumas gotas de ácido acético, secadas sobre sulfato de sódio, filtradas e evaporadas em vácuo. O resíduo foi dissolvido em metanol (5 mL), ácido acético (0,024 mL) e cloridrato de (R)-7-(2-amino-1-hidroxietil)-4-hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona (WO2007027134, exemplo 1, etapa d) (0,17 g) foram em seguida adicionados e a mistura agitada durante 5 minutos antes do resfriamento em um banho de gelo. Cianoboroidreto de sódio (0,04 g) foi em seguida adicionado, a mistura deixada aquecer para TA e agitada durante a
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324/638 noite. O solvente foi evaporado em vácuo. A purificação foi por cromatografia de sílica-gel eluindo com 94,5:5:0,5 a 89:10:1 de gradiente de DCM:metanol:amônia aquosa ‘880’. As frações contendo produto foram combinadas e evaporadas em vácuo. Além disso, a purificação foi por HPLC preparativa (Sunfire®, gradiente: 5-30% de acetonitrila em 0,2% de TFA aquoso). As frações contendo produto foram combinadas, evaporadas em vácuo e o resíduo triturado com dietiléter para fornecer o composto do título como um sólido branco. Produção 0,7 g. [00986] m/z 677 (M+H)+ (APCI) [00987] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO, 90°C) δ 7,43 (d, J = 3,7 Hz,
1H), 7,30 - 7,16 (m, 3H), 7,00 - 6,96 (m, 1H), 6,93 (d, J = 8,5 Hz, 1H),
6.78 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 4,92 (dd, J = 7,9, 5,4 Hz, 1H), 4,29 (s, 2H),
3.79 - 3,71 (m, 2H), 3,32 - 3,23 (m, 2H), 3,17 - 2,93 (m, 10H), 2,85 (s, 2H), 2,53 (s, 3H), 2,13 - 2,02 (m, 2H), 1,90 - 1,74 (m, 2H). Seis prótons trocáveis não observados.
Exemplo 64
Ditrifluoroacetato de (R)-4-hidróxi-7-(1 -hidróxi-2-(2-(3-((4-(2isopropiltiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9il)metil)fenóxi)etilamino)etil)benzo[d]tiazol-2(3H)-ona
OH
HO
a) (9-(3-(2,2-Dietoxietóxi)benzil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan4-il)(2-isopropiltiazol-4-il)metanona
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[00988] Cloreto de metanossulfonila (0,110 mL) foi adicionado gota a gota a uma solução agitada a 0°C de (3-(2,2 dietoxietóxi)fenil)metanol (exemplo 38, etapa a) (0,307 g) e trietilamina (0,196 mL) em DCM (30 mL). A mistura resultante foi agitada a 20°C durante 1 hora. A mistura foi lavada com água e a camada orgânica foi secada sobre sulfato de sódio, filtrada e o solvente evaporado sob pressão reduzida. O resíduo foi dissolvido em acetonitrila (30 mL) e tratado com trietilamina (1 mL) seguido por trifluoroacetato de (2 isopropiltiazol-4-il)(1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4-il)metanona (exemplo 22, etapa b) (0,400 g). A mistura foi agitada a 20°C durante 2 horas. O solvente foi removido sob pressão reduzida e o resíduo dividido entre acetato de etila e salmoura. A camada orgânica foi secada sobre sulfato de sódio, filtrada e o solvente removido sob pressão reduzida. O produto bruto foi purificado por cromatografia de sílica rápida usando 2,5% de metanol em diclorometano com 1% de trietilamina como solvente. Frações puras foram evaporadas até a secura para fornecer o composto do subtítulo. Produção 0,360 g.
[00989] m/z 532 (M+H)+ (APCI)
b) 2-(3-((4-(2-isopropiltiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5] undecan-9-il)metil)fenóxi)acetaldeído
[00990] Uma solução de (9-(3-(2,2-dietoxietóxi)benzil)-1-oxa-4,9 diazaespiro[5,5]undecan-4-il)(2-isopropiltiazol-4-il)metanona (exemplo
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64, etapa a) (0,36 g) em ácido acético (20 mL) foi tratada com água (20 mL) e a mistura reacional em seguida aquecida a 65°C durante 18 horas sob nitrogênio. Os solventes foram evaporados sob pressão reduzida e o resíduo foi azeotropado com tolueno para fornecer o composto do subtítulo. Produção 0,31 g. Usado diretamente.
c) Ditrifluoroacetato de (R)-4-hidróxi-7-(1 -hidróxi-2-(2-(3-((4-(2- isopropiltiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9il)metil)fenóxi)etilamino)etil)benzo[d]tiazol-2(3H)-ona
OH
HO [00991] Uma solução de 2-(3-((4-(2-isopropiltiazol-4-carbonil)-1-oxa-
4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil)fenóxi)acetaldeído (exemplo 64, etapa b) (0,31 g) em metanol (10 mL) foi tratada com cloridrato de (R)7-(2-amino-1-hidroxietil)-4-hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona (WO2007027134, exemplo 1, etapa d) (0,267 g) seguido por ácido acético (0,039 mL) e a mistura resfriada em um banho de gelo. Cianoboroidreto de sódio (0,085 g) foi adicionado e a mistura agitada em temperatura ambiente durante 4 horas. O solvente foi evaporado para um volume de 3 mL sob pressão reduzida e THF (20 mL) foi adicionado. A mistura foi lavada com uma mistura de salmoura saturada (10 mL) e solução de bicarbonato de sódio saturada (1 mL). A camada orgânica foi secada sobre sulfato de sódio, filtrada e o solvente removido sob pressão reduzida. O resíduo foi azeotropado duas vezes com acetonitrila. O produto bruto foi purificado por HPLC preparativa (Sunfire®, gradiente: 10-40% de acetonitrila em 0,2% de TFA aquoso). As frações contendo o composto desejado foram evaporadas até a secura para fornecer o composto do título. Produção 0,2 g.
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327/638 [00992] m/z 668 (M+H)+ (APCI) [00993] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO, 90°C) δ 11,27 (s, 1H), 7,94 (s, 1H), 7,39 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 7,16 - 7,13 (m, 2H), 7,09 - 7,05 (m, 1H), 6,94 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 6,78 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 4,98 - 4,93 (m, 1H), 4,36 - 4,28 (m, 4H), 3,70 (s, 4H), 3,65 (s, 2H), 3,47 - 3,42 (m, 2H),
3,34 - 3,26 (m, 1H), 3,23 - 3,05 (m, 6H), 2,09 - 1,98 (m, 2H), 1,84 -
1,71 (m, 2H), 1,35 (d, J = 7,1 Hz, 6H). Cinco prótons trocáveis não observados.
Exemplo 65
Ditrifluoroacetato de (R)-4-hidróxi-7-(1 -hidróxi-2-(2-(3-((4-(2isopropiltiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9il)metil)feniltio)etilamino)etil)benzo[d]tiazol-2(3H)-ona
HO,
OH
a) ácido 3-(2-(terc-butildimetilsililóxi)etiltio)benzoico
HO [00994] (2-Bromoetóxi)(terc-butil)dimetilsilano (1,48 mL) foi adicionado gota a gota a uma suspensão de ácido 3-mercaptobenzoico (1,07 g) e carbonato de potássio (1,91 g) em DMF (15 mL). A suspensão resultante foi agitada durante 2 horas. A reação foi cuidadosamente acidificada pela adição gota a gota de solução de HCl aquosa (2M, 10 mL) e vertida em água (100 mL). O aquoso resultante foi extraído com acetato de etila (3 x 100 mL). Os orgânicos combinados foram lavados com salmoura (50 mL), secados sobre sulfato de sódio, filtrados e evaporados para fornecer o composto do subtítulo como um óleo claro. Produção 2,8 g.
[00995] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO) δ 13,11 (s, 1H), 7,89 (t, J =
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1,7 Hz, 1H), 7,79 - 7,74 (m, 1H), 7,66 - 7,61 (m, 1H), 7,47 (t, J = 7,7 Hz, 1H), 3,82 (t, J = 6,4 Hz, 2H), 3,19 (t, J = 6,4 Hz, 2H), 0,87 (s, 9H), 0,05 (s, 6H).
b) 2-(3-(Hidroximetil)feniltio)etanol
[00996] Complexo de borano-sulfeto de dimetila (2M em THF, 17,3 mL) foi adicionado gota a gota a uma solução gelada de ácido 3-(2(terc-butildimetilsililóxi)etiltio)benzoico (exemplo 65, etapa a) (2,16 g) em THF (50 mL). A reação foi deixada aquecer para TA, em seguida aquecida ao refluxo durante 2 horas. A reação foi resfriada em um banho de gelo e solução de HCl aquosa (2M, 50 mL) foi adicionada gota a gota. A mistura resultante foi agitada durante a noite. A reação foi concentrada para metade de seu volume original e o aquoso resultante extraído com DCM (3 x 100 mL). Os orgânicos combinados foram lavados com salmoura (100 mL), secados sobre sulfato de sódio, filtrados e evaporados. O resíduo foi purificado por cromatografia de sílicagel eluindo com gradiente de 4:1 de iso-hexano:acetato de etila a 100% de acetato de etila . As frações contendo produto foram combinadas e evaporadas para fornecer o composto do subtítulo como um óleo claro. Produção 0,77 g.
[00997] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO) δ 7,29 - 7,23 (m, 2H), 7,21 -
7,17 (m, 1H), 7,13 - 7,09 (m, 1H), 5,20 (t, J = 5,8 Hz, 1H), 4,92 (t, J =
5,6 Hz, 1H), 4,47 (d, J = 5,9 Hz, 2H), 3,59 - 3,53 (m, 2H), 3,02 (t, J =
6,9 Hz, 2H).
c) 3-(2-Hidroxietiltio)benzaldeído .OH [00998] Dióxido de manganês (1,36 g) foi adicionado à solução de
2-(3-(hidroximetil)feniltio)etanol (exemplo 65, etapa b) (0,29 g) em
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DCM (10 mL). A mistura resultante foi aquecida ao refluxo durante 4 horas, resfriada e filtrada através de celite. A almofada filtrante foi lavada com DCM (3 x 20 mL). O filtrado e lavagem foram combinados e evaporados para fornecer o composto do subtítulo como uma goma amarela. Produção 0,2 g.
[00999] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO) δ 9,99 (s, 1H), 7,84 (s, 1H),
7,71 - 7,64 (m, 2H), 7,54 (t, J = 7,7 Hz, 1H), 4,99 (t, J = 5,6 Hz, 1H),
3,64 - 3,57 (m, 2H), 3,13 (t, J = 6,7 Hz, 2H).
d) (9-(3-(2-hidroxietiltio)benzil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan4-il)(2-isopropiltiazol-4-il)metanona
HO [001000] 3-(2-Hidroxietiltio)benzaldeído (exemplo 65, etapa c) (0,16 g) foi adicionado à solução de trifluoroacetato de (2-isopropiltiazol-4il)(1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4-il)metanona (exemplo 22, etapa b) (0,25 g) e ácido acético (0,046 mL) em M-metil-2-pirrolidinona (5 mL) e a mistura resultante foi agitada durante 1 hora e resfriada em um banho de gelo. Triacetoxiboroidreto de sódio (0,26 g) foi em seguida adicionado e a mistura deixada aquecer para TA e agitada durante a noite. A reação foi vertida em uma mistura de solução de bicarbonato de sódio (20 mL) e água (80 mL). A fase aquosa foi extraída com éter (3 x 100 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (100 mL), secadas sobre sulfato de sódio, filtradas e evaporadas. O produto bruto foi purificado por cromatografia de sílicagel eluindo com 95:5 de acetato de etila:trietilamina. As frações contendo produto foram combinadas e evaporadas para fornecer o composto do subtítulo como um óleo amarelo. Produção 0,22 g.
[001001] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO, 90°C) δ 7,94 - 7,83 (m, 1H),
7,28 - 7,18 (m, 3H), 7,12 - 7,05 (m, 1H), 4,61 - 4,53 (m, 1H), 3,70 3,54 (m, 8H), 3,47 - 3,39 (m, 2H), 3,37 - 3,27 (m, 1H), 3,06 - 2,96 (m,
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2H), 2,42 - 2,25 (m, 4H), 1,75 - 1,65 (m, 2H), 1,59 - 1,50 (m, 2H), 1,41 -
1,32 (m, 6H).
e) Ditrifluoroacetato de (R)-4-hidróxi-7-(1-hidróxi-2-(2-(3-((4-(2- isopropiltiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9il)metil)feniltio)etilamino)etil)benzo[d]tiazol-2(3H)-ona
HO,
OH [001002] Ácido trifluoroacético (0,033 mL) foi adicionado à solução de (9-(3-(2-hidroxietiltio)benzil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4il)(2-isopropiltiazol-4-il)metanona (exemplo 65, etapa d) (0,22 g) em DCM (5 mL) a 0°C. A mistura foi agitada durante 5 minutos em seguida periodinano Dess-Martin (0,29 g) foi adicionado. A solução amarela resultante foi deixada aquecer para TA e agitada durante 1 hora. Uma mistura de solução de tiossulfato de sódio saturada (5 mL), solução de bicarbonato de sódio saturada (5 mL) e acetato de etila (20 mL) foi em seguida adicionada e a mistura resultante agitada vigorosamente durante 10 minutos. A fase aquosa foi separada e extraída com acetato de etila (20 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (20 mL), acidificadas com algumas gotas de ácido acético, secadas sobre sulfato de sódio, filtradas e evaporadas em vácuo. O resíduo foi dissolvido em metanol (5 mL), ácido acético (0,026 mL) e cloridrato de (R)-7-(2-amino-1-hidroxietil)-4-hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)ona (WO2007027134, exemplo 1, etapa d) (0,15 g) foram em seguida adicionados e a mistura agitada durante 5 minutos antes do resfriamento em um banho de gelo. Cianoboroidreto de sódio (0,044 g) foi em seguida adicionado, a mistura deixada aquecer para TA e agitada durante a noite. O solvente foi evaporado em vácuo. A purificação foi por cromatografia de sílica-gel eluindo com 94,5:5:0,5 a 89:10:1 de gradiente de DCM:metanol:amônia aquosa ‘880’. As frações contendo
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331/638 produto foram combinadas e evaporadas em vácuo. Além disso, a purificação foi por HPLC preparativa (Sunfire®, gradiente: 5-30% de acetonitrila em 0,2% de TFA aquoso). As frações contendo produto foram combinadas, evaporadas em vácuo e o resíduo triturado com dietiléter para fornecer o composto do título como um sólido branco. Produção 0,54 g.
[001003] m/z 684 (M+H)+ (APCI) [001004] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO, 90°C) δ 7,94 (s, 1H), 7,54 -
7,34 (m, 4H), 6,91 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 6,76 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 4,88 (dd, J = 8,7, 4,6 Hz, 1H), 4,24 (s, 2H), 3,74 - 3,61 (m, 6H), 3,38 - 2,95 (m, 11H), 2,08 - 1,94 (m, 2H), 1,82 - 1,68 (m, 2H), 1,35 (d, J = 6,9 Hz, 6H). Seis prótons trocáveis não observados.
Exemplo 66
Ditrifluoroacetato de (R)-4-hidróxi-7-(1 -hidróxi-2-(3-((4-(4isopropiltiazol-2-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9il)metil)fenetilamino)etil)benzo[d]tiazol-2(3H)-ona
OH
HO
a) 4-(4-isopropiltiazol-2-carbonil)-1 -oxa-4,9-diazaespiro[5,5] undecano-9-carboxilato de terc-butila [001005] HATU (0,924 g) foi adicionado em uma porção a uma solução agitada a 0°C de ácido 4-isopropiltiazol-2-carboxílico (0,32 g) e 1oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecano-9-carboxilato de terc-butila (exemplo 12, etapa b) (0,547 g) e trietilamina (0,781 mL) em DMF (12 mL). A mistura reacional foi agitada em temperatura ambiente durante 2 ho
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332/638 ras. A mistura foi dividida entre acetato de etila e salmoura, a camada orgânica foi lavada duas vezes com salmoura, secada sobre sulfato de sódio, filtrada e o solvente evaporado sob pressão reduzida. O produto bruto foi purificado por cromatografia de sílica rápida usando 30% de acetato de etila em iso-hexano como solvente. Frações puras foram evaporadas até a secura para fornecer o composto do subtítulo. Produção 0,54 g.
[001006] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO, 90°C) δ 7,50 (s, 1H), 3,77 -
3,72 (m, 2H), 3,52 - 3,45 (m, 2H), 3,21 - 3,13 (m, 2H), 3,12 - 3,04 (m, 1H), 3,00 (s, 4H), 1,74 - 1,67 (m, 2H), 1,52 - 1,43 (m, 2H), 1,39 (s, 9H),
1,26 (d, J = 6,8 Hz, 6H).
b) (4-isopropiltiazol-2-il)(1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4-il) metanona
HN [001007] Uma solução de 4-(4-isopropiltiazol-2-carbonil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecano-9-carboxilato de terc-butila (exemplo 66, etapa a) (0,54 g) em DCM (20 mL) foi tratada com ácido trifluoroacético (5 mL) e a mistura reacional deixada descansar a 20°C durante 20 minutos. Tolueno (40 mL) foi adicionado e os solventes removidos sob pressão reduzida. O resíduo foi azeotropado duas vezes com acetonitrila para fornecer o composto do subtítulo. Produção 0,56 g.
[001008] m/z 310 (M+H)+ (APCI)
c) (9-(3-(2-Hidroxietil)benzil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4il)(4-isopropiltiazol-2-il)metanona
HO
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333/638 [001009] Uma solução de (4-isopropiltiazol-2-il)(1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-4-il)metanona (exemplo 66, etapa b) (0,28 g) e 2-(3-(bromometil)fenil)etanol (exemplo 6, etapa a) (0,171 g) em acetonitrila (20 mL) foi tratada com trietilamina (0,276 mL) e a mistura reacional agitada durante 2 horas a 20°C. O solvente foi evaporado sob pressão reduzida e o resíduo dividido entre acetato de etila e solução de bicarbonato de sódio saturada. A camada orgânica foi secada sobre sulfato de sódio, filtrada e o solvente removido sob pressão reduzida. O produto bruto foi purificado por cromatografia de sílica rápida usando 2,5% de metanol em diclorometano com 1% de trietilamina como solvente para fornecer o composto do subtítulo. Produção 0,25g. [001010] m/z 444 (M+H)+ (APCI)
d) Ditrifluoroacetato de (R)-4-hidrôxi-7-(1-hidrôxi-2-(3-((4-(4- isopropiltiazol-2-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9il)metil)fenetilamino)etil)benzo[d]tiazol-2(3H)-ona
OH ,,
HO [001011] Uma solução de (9-(3-(2-hidroxietil)benzil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-4-il)(4-isopropiltiazol-2-il)metanona (exemplo 66, etapa c) (0,25 g) em DCM (20 mL) foi tratada com ácido trifluoroacético (0,043 mL) seguido por periodinano Dess-Martin (0,311 g) e a mistura resultante agitada a 20°C durante 40 minutos. A mistura reacional foi tratada com solução de tiossulfato de sódio saturada (20 mL) e solução de bicarbonato de sódio saturada (20 mL) e acetato de etila (30 mL) e agitada vigorosamente durante 5 minutos. A mistura foi extraída duas vezes com acetato de etila, os orgânicos combinados foram lavados com solução de bicarbonato de sódio saturada, secados sobre sulfato de sódio e filtrados. Ácido acético (0,032 mL) foi adicio
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334/638 nado a esta solução e o solvente em seguida removido sob pressão reduzida. O resíduo foi dissolvido em metanol (3 mL) e adicionado a uma solução de cloridrato de (R)-7-(2-amino-1-hidroxietil)-4hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona (WO2007027134, exemplo 1, etapa d) (0,222 g) e ácido acético (0,032 mL) em metanol (20 mL). A mistura foi resfriada em um banho de gelo e tratada com cianoboroidreto de sódio (0,071 g). O banho de resfriamento foi removido e a mistura agitada a 20°C durante 3 horas. O solvente foi evaporado para um volume de 3 mL sob pressão reduzida e THF (20 mL) foi adicionado. A mistura foi lavada com uma mistura de salmoura saturada (10 mL) e solução de bicarbonato de sódio saturada (1 mL). A camada orgânica foi secada sobre sulfato de sódio, filtrada e o solvente removido sob pressão reduzida. O resíduo foi azeotropado duas vezes com acetonitrila. O produto bruto foi purificado por HPLC preparativa (Sunfire®, gradiente: 1040% de acetonitrila em 0,2% de TFA aquoso). As frações contendo o produto desejado foram evaporadas até a secura para fornecer o composto do título. Produção 0,18 g [001012] m/z 652 (M+H)+ (APCI) [001013] 1H RMN (300 MHz, D6-DMSO, 90°C) δ 11,35 (s, 1H), 7,53 (s, 1H), 7,43 - 7,32 (m, 4H), 6,93 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 6,78 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 4,97 - 4,89 (m, 1H), 4,29 (s, 2H), 3,76 (s, 2H), 4,17 - 3,30 (m, 4H), 3,28 - 3,15 (m, 4H), 3,14 - 2,98 (m, 7H), 2,10 - 1,97 (m, 2H), 1,87 -
1,70 (m, 2H), 1,26 (d, J = 7,1 Hz, 6H). Cinco prótons trocáveis não observados.
Exemplo 67
Ditrifluoroacetato de (R)-7-(2-(2-fluoro-3-((4-(2-(2,2,2-trifluoroetil) tiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil) fenetilamino)-1-hidroxietil)-4-hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona
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a) 3,3,3-Trifluoropropanamida
F
F
O [001014] Uma solução de ácido 3,3,3-trifluoropropanoico (4 g) em éter (150 mL) a 0°C foi tratada em uma porção com pentacloreto de fósforo (6,06 g). A mistura foi aquecida ao refluxo sob nitrogênio du rante 2,5 horas. A mistura reacional foi resfriada para temperatura ambiente. Mais éter (100 mL) foi adicionado e a mistura resfriada em um banho de gelo. Gás de amônia foi borbulhado através da mistura agitada durante 30 minutos. O solvente foi removido sob pressão reduzida e o resíduo foi dividido entre solução de bicarbonato de sódio saturada e acetato de etila. A camada aquosa foi novamente extraída duas vezes com acetato de etila, os orgânicos combinados foram secados sobre sulfato de sódio, filtrados e o solvente foi removido sob pressão reduzida para fornecer o composto do subtítulo. Produção 3,9 g. Usa do diretamente.
b) 3,3,3-Trifluoropropanotioamida
F f H'· f
S [001015] Pentassulfeto de fósforo (1,603 g) foi adicionado em uma porção a uma solução de 3,3,3-trifluoropropanamida (exemplo 67, etapa a) (3,9 g) em MTBE (150 mL). A mistura reacional foi agitada a 20°C durante 20 horas. A mistura foi filtrada e o solvente foi evaporado sob pressão reduzida para fornecer o composto do subtítulo. Produção 4 g. O produto foi usado diretamente na próxima etapa.
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c) 2-(2,2,2-trifluoroetil)tiazol-4-carboxilato de etila [001016] Uma solução de 3,3,3-trifluoropropanotioamida (exemplo 67, etapa b) (4 g) e 3-bromo-2-oxopropanoato de etila (5,45 g) em THF (120 mL) foi aquecida ao refluxo durante 2 horas. O solvente foi removido sob pressão reduzida e o resíduo foi dividido entre acetato de etila e solução de bicarbonato de sódio saturada. A camada orgânica foi secada sobre sulfato de sódio, filtrada e o solvente evaporado sob pressão reduzida. O produto bruto foi purificado por cromatografia de sílica rápida usando 17% de acetato de etila em iso-hexano como solvente. Frações puras foram evaporadas até a secura para fornecer o composto do subtítulo. Produção 1,9 g.
[001017] m/z 240 (M+H)+ (APCI) [001018] 1H RMN (400 MHz, CDCh) δ 8,23 (s, 1H), 4,45 (q, J = 7,1
Hz, 2H), 3,94 (q, J = 10,2 Hz, 2H), 1,42 (t, J = 7,0 Hz, 3H).
d) ácido 2-(2,2,2-trifluoroetil)tiazol-4-carboxílico
OH F p [001019] Uma mistura de 2-(2,2,2-trifluoroetil)tiazol-4-carboxilato de etila (exemplo 67, etapa c) (0,3 g) em ácido clorídrico concentrado (7 mL) e água (7 mL) foi aquecida a 80°C durante 5 horas sob nitrogênio. O solvente foi evaporado sob uma corrente de nitrogênio e o resíduo dividido entre acetato de etila (40 mL) e salmoura (3 mL). A camada orgânica foi secada sobre sulfato de sódio, filtrada e o solvente evaporado sob pressão reduzida para fornecer o composto do subtítulo. Produção 0,23 g.
[001020] m/z 210 (M-H)- (APCI) [001021] 1H RMN (300 MHz, CDCh) δ 8,36 (s, 1H), 3,95 (q, J = 10,0
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Hz, 2H). Um próton trocável não observado.
e) 2,2,2-trifluoro-1 -(9-(2-fluoro-3-(2-hidroxietil)benzil)-1 -oxa-4,9- diazaespiro[5,5]undecan-4-il)etanona
HO
F [001022] 2-Fluoro-3-(2-hidroxietil)benzaldeído (exemplo 48, etapa a) (1,05 g) foi adicionado à solução de trifluoroacetato de 2,2,2-trifluoro-1(1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4-il)etanona (exemplo 12, etapa d) (2,08 g) e ácido acético (0,33 mL) em V-metil-2-pirrolidinona (10 mL).
A mistura resultante foi agitada durante 15 minutos em seguida resfriada em um banho de gelo. Triacetoxiboroidreto de sódio (1,81 g) foi em seguida adicionado e a mistura agitada durante a noite. A reação foi vertida em uma mistura de solução de hidrogeno carbonato de sódio saturada (20 mL) e água (100 mL). O aquoso foi extraído com acetato de etila (3 x 100 mL). Os orgânicos combinados foram lavados com água (50 mL) e salmoura (100 mL), secados sobre sulfato de sódio, filtrados e evaporados. O resíduo foi purificado por cromatografia de sílica-gel eluindo com gradiente de 4:1 de iso-hexano:acetato de etila + 5% de trietilamina a acetato de etila + 5% de trietilamina. As fra ções contendo produto foram combinadas e evaporadas para fornecer o composto do subtítulo como um óleo claro. Produção 1,9 g. Usado imediatamente.
f) 2-(3-(1-Oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-ilmetil)-2-fluorofenil) etanol
[001023] Solução de amônia aquosa ‘880’ (5 mL) foi adicionada à solução de 2,2,2-trifluoro-1-(9-(2-fluoro-3-(2-hidroxietil)benzil)-1-oxaPetição 870190058499, de 25/06/2019, pág. 343/650
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4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4-il)etanona (exemplo 67, etapa e) (1,9 g) em metanol (25 mL). A mistura resultante foi agitada durante 90 minutos e o solvente evaporado. O resíduo foi purificado por cromatografia de sílica-gel eluindo com gradiente de 94,5:5:0,5 a 89:10:1 de DCM:metanol:amônia ‘880’. As frações contendo produto foram combinadas e evaporadas para fornecer uma goma que solidificou-se em repouso. O sólido branco foi triturado com iso-hexano e secado sobre sulfato de sódio para fornecer o composto do subtítulo como um sólido branco. Produção 1 g.
[001024] m/z 309 (M+H)+ (APCI) [001025] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO) δ 7,24 - 7,15 (m, 2H), 7,06 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 4,69 (t, J = 5,3 Hz, 1H), 3,64 - 3,54 (m, 2H), 3,53 -
3,43 (m, 4H), 2,74 (t, J = 7,0 Hz, 2H), 2,60 (t, J = 4,9 Hz, 2H), 2,45 -
2,35 (m, 2H), 2,34 - 2,24 (m, 2H), 1,83 - 1,74 (m, 2H), 1,47 - 1,36 (m, 2H). Dois prótons obscurecidos por picos de solvente e um próton trocável não observado.
g) (9-(2-fluoro-3-(2-hidroxietil)benzil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5] undecan-4-il)(2-(2,2,2-trifluoroetil)tiazol-4-il)metanona
HO.
[001026] HATU (0,181 g) foi adicionado em uma porção a uma solução agitada a 0°C de ácido 2-(2,2,2-trifluoroetil)tiazol-4-carboxílico (exemplo 67, etapa d) (0,077 g) e 2-(3-(1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9-ilmetil)-2-fluorofenil)etanol (exemplo 67, etapa f) (0,113 g) e trietilamina (0,153 mL) em DMF (5 mL). A mistura reacional foi agitada em temperatura ambiente durante 2 horas. A mistura foi dividida entre acetato de etila e salmoura, a camada orgânica foi lavada duas vezes com salmoura, secada sobre sulfato de sódio, filtrada e o solvente evaporado sob pressão reduzida para fornecer o
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339/638 composto do subtítulo. Produção 0,180 g.
[001027] m/z 502 (M+H)+ (APCI)
h) Ditrifluoroacetato de (R)-7-(2-(2-fluoro-3-((4-(2-(2,2,2- trifluoroetil)tiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9il)metil)fenetilamino)-1-hidroxietil)-4-hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)ona
HO' [001028] Uma solução de (9-(2-fluoro-3-(2-hidroxietil)benzil)-1-oxa-
4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4-il)(2-(2,2,2-trifluoroetil)tiazol-4il)metanona (exemplo 67, etapa g) (0,18 g) em DCM (15 mL) foi tratada com ácido trifluoroacético (0,028 mL) seguida por periodinano Dess-Martin (0,198 g) e a mistura resultante agitada a 20°C durante 40 minutos. A mistura reacional foi tratada com solução de tiossulfato de sódio saturada (20 mL) e solução de bicarbonato de sódio saturada (20 mL) e acetato de etila (30 mL) e agitada vigorosamente durante 5 minutos. A mistura foi extraída duas vezes com acetato de etila, os orgânicos combinados foram lavados com solução de bicarbonato de sódio saturada, secados sobre sulfato de sódio e filtrados. Ácido acético (0,021 mL) foi adicionado a esta solução e o solvente em seguida removido sob pressão reduzida. O resíduo foi dissolvido em metanol (3 mL) e adicionado a uma solução de cloridrato de (R)-7-(2-amino-1hidroxietil)-4-hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona (WO2007027134, exemplo 1, etapa d) (0,141 g) e ácido acético (0,021 mL) em metanol (15,0 mL). A mistura foi resfriada em um banho de gelo e tratada com cianoboroidreto de sódio (0,045 g). O banho de resfriamento foi removido e a mistura agitada a 20°C durante 3 horas. O solvente foi evaporado para um volume de 3 mL sob pressão reduzida e THF (20 mL) foi adicionado. A mistura foi lavada com uma mistura de salmoura saturada
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340/638 (10 mL) e solução de bicarbonato de sódio saturada (1 mL). A camada orgânica foi secada sobre sulfato de sódio, filtrada e o solvente removido sob pressão reduzida. O resíduo foi azeotropado duas vezes com acetonitrila. O produto bruto foi purificado por HPLC preparativa (Sunfire®, gradiente: 10-40% de acetonitrila em 0,2% de TFA aquoso). As frações contendo o composto desejado foram evaporadas até a secura para fornecer o composto do título. Produção 0,091 g.
[001029] m/z 710 (M+H)+ (APCI) [001030] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO, 90°C) δ 8,15 (s, 1H), 7,52 7,40 (m, 2H), 7,25 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 6,94 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 6,77 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 4,94 - 4,89 (m, 1H), 4,29 (s, 2H), 4,20 (q, J = 11,0 Hz, 2H), 3,74 - 3,61 (m, 6H), 3,28 - 3,02 (m, 10H), 2,06 - 1,96 (m, 2H), 1,85 - 1,72 (m, 2H). Seis prótons trocáveis não observados.
Exemplo 68
Ditrifluoroacetato de (R)-7-(2-(3-((4-(benzo[b]tiofeno-5-carbonil)-1 oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil)-2-fluorofenetilamino)1-hidroxietil)-4-hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona
OH H F .
a) Benzo[b]tiofen-5-il(9-(2-fluoro-3-(2-hidroxietil)benzil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-4-il)metanona
HO
O
S
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341/638 [001031] HATU (0,181 g) foi adicionado em uma porção a uma solução agitada a 0°C de ácido benzo[b]tiofeno-5-carboxílico (0,065 g) e 2(3-(1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-ilmetil)-2-fluorofenil)etanol (exemplo 67, etapa f) (0,113 g) e trietilamina (0,153 mL) em DMF (5 mL). A mistura reacional foi agitada em temperatura ambiente durante 2 horas. A mistura foi dividida entre acetato de etila e salmoura, a camada orgânica foi lavada duas vezes com salmoura, secada sobre sulfato de sódio, filtrada e o solvente evaporado sob pressão reduzida para fornecer o composto do subtítulo. Produção 0,160 g.
[001032] m/z 469 (M+H)+ (APCI)
b) Ditrifluoroacetato de (R)-7-(2-(3-((4-(benzo[b]tiofeno-5-carbonil)1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil)-2- fluorofenetilamino)-1-hidroxietil)-4-hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona
HO [001033] Uma solução de benzo[b]tiofen-5-il(9-(2-fluoro-3-(2hidroxietil)benzil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4-il)metanona (exemplo 68, etapa a) (0,160 g) em DCM (15 mL) foi tratada com ácido trifluoroacético (0,026 mL) seguida por periodinano Dess-Martin (0,188 g) e a mistura resultante agitada a 20°C durante 40 minutos. A mistura reacional foi tratada com solução de tiossulfato de sódio saturada (20 mL) e solução de bicarbonato de sódio saturada (20 mL) e acetato de etila (30 mL) e agitada vigorosamente durante 5 minutos. A mistura foi extraída duas vezes com acetato de etila, os orgânicos combinados foram lavados com solução de bicarbonato de sódio saturada, secados sobre sulfato de sódio e filtrados. Ácido acético (0,02 mL) foi adicionado a esta solução e o solvente em seguida removido sob pressão rePetição 870190058499, de 25/06/2019, pág. 347/650
342/638 duzida. O resíduo foi dissolvido em metanol (3 mL) e adicionado a uma solução de cloridrato de (R)-7-(2-amino-1-hidroxietil)-4hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona (WO2007027134, exemplo 1, etapa d) (0,135 g) e ácido acético (0,02 mL) em metanol (15 mL). A mistura foi resfriada em um banho de gelo e tratada com cianoboroidreto de sódio (0,043 mg). O banho de resfriamento foi removido e a mistura agitada a 20°C durante 3 horas. O solvente foi evaporado para um volume de 3 mL sob pressão reduzida e THF (20 mL) foi adicionado. A mistura foi lavada com uma mistura de salmoura saturada (10 mL) e solução de bicarbonato de sódio saturada (1 mL). A camada orgânica foi secada sobre sulfato de sódio, filtrada e o solvente removido sob pressão reduzida. O resíduo foi azeotropado duas vezes com acetonitrila. O produto bruto foi purificado por HPLC preparativa (Sunfire®, gradiente: 10-40% de acetonitrila em 0,2% de TFA aquoso). As frações contendo o composto desejado foram evaporadas até a secura para fornecer o composto do título. Produção 0,116 g.
[001034] m/z 677 (M+H)+ (APCI) [001035] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO, 90°C) δ 11,28 (s, 1H), 8,04 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,91 (s, 1H), 7,80 (d, J = 5,4 Hz, 1H), 7,52 - 7,42 (m, 3H), 7,38 - 7,35 (m, 1H), 7,25 (t, J = 7,7 Hz, 1H), 6,94 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 6,78 (t, J = 4,1 Hz, 1H), 4,95 - 4,90 (m, 1H), 4,35 (s, 2H), 3,69 (t, J = 5,0 Hz, 2H), 3,53 - 3,44 (m, 4H), 3,28 - 3,19 (m, 4H), 3,16 - 3,04 (m, 6H), 2,11 - 2,03 (m, 2H), 1,80 - 1,68 (m, 2H). Cinco prótons trocáveis não observados.
Exemplo 69
Ditrifluoroacetato de (R)-7-(2-(2-fluoro-3-((4-(2-isopropil-5metiltiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9il)metil)fenetilamino)-1-hidroxietil)-4-hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona
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a) 2-isopropil-5-metiltiazol-4-carboxilato de metila
Ό
[001036] Uma mistura de 3-bromo-2-oxobutanoato de metila (4,6 g) e
2-metilpropanotioamida (2,5 g) em THF (100 mL) foi aquecida ao refluxo durante 18 horas. O solvente foi evaporado sob pressão reduzida. O resíduo foi dividido entre acetato de etila e solução de bicarbonato de sódio saturada e a camada orgânica foi secada sobre sulfato de sódio, filtrada e o solvente evaporado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia de sílica rápida usando 17% de acetato de etila em iso-hexano como solvente. Frações puras foram evaporadas até a secura para fornecer o composto do subtítulo. Produção 1,7g.
[001037] m/z 200 (M+H)+ (APCI)
b) ácido 2-isopropil-5-metiltiazol-4-carboxílico
OH
[001038] Uma solução de monoidrato de hidróxido de lítio (0,2 g) em água (3 mL) foi adicionada à solução de 2-isopropil-5-metiltiazol-4carboxilato de metila (exemplo 69, etapa a) (0,5 g) em metanol (7 mL) e a mistura reacional foi agitada a 20°C durante 3 horas. O metanol foi removido sob pressão reduzida e a solução aquosa restante foi lavada com acetato de etila. A camada aquosa foi acidificada pela adição gota a gota de HCl aquoso concentrado e esta mistura foi extraída com
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344/638 acetato de etila. A camada orgânica foi secada sobre sulfato de sódio, filtrada e o solvente foi removido sob pressão reduzida. A goma resultante cristalizou-se em repouso. Trituração com uma mistura de isohexano (4 mL) e éter (1 mL) forneceu o composto do subtítulo. Produção 0,160 g.
[001039] 1H RMN (400 MHz, CDCh) δ 3,29 - 3,18 (m, 1H), 2,78 (s,
3H), 1,38 (d, J = 7,1 Hz, 6H). Um próton trocável não observado.
c) (9-(2-fluoro-3-(2-hidroxietil)benzil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5] undecan-4-il)(2-isopropil-5-metiltiazol-4-il)metanona
HO [001040] HATU (0,175 g) foi adicionado em uma porção a uma solução agitada a 0°C de ácido 2-isopropil-5-metiltiazol-4-carboxílico (exemplo 69, etapa b) (0,066 mg) e 2-(3-(1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9-ilmetil)-2-fluorofenil)etanol (exemplo 67, etapa f) (0,109 g) e trietilamina (0,148 mL) em DMF (5 mL). A mistura reacional foi agitada em temperatura ambiente durante 2 horas. A mistura foi dividida entre acetato de etila e salmoura, a camada orgânica foi lavada duas vezes com salmoura, secada sobre sulfato de sódio, filtrada e o solvente evaporado sob pressão reduzida para fornecer o composto do subtítulo. Produção 0,155 mg.
[001041] m/z 476 (M+H)+ (APCI)
d) Ditrifluoroacetato de (R)-7-(2-(2-fluoro-3-((4-(2-isopropil-5- metiltiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9il)metil)fenetilamino)-1-hidroxietil)-4-hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)ona
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[001042] Uma solução de (9-(2-fluoro-3-(2-hidroxietil)benzil)-1-oxa-
4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4-il)(2-isopropil-5-metiltiazol-4il)metanona (exemplo 69, etapa c) (0,155 g) em DCM (15 mL) foi tratada com ácido trifluoroacético (0,025 mL) seguido por periodinano Dess-Martin (0,180 g) e a mistura resultante agitada a 20°C durante 40 minutos. A mistura reacional foi tratada com solução de tiossulfato de sódio saturada (20 mL) e solução de bicarbonato de sódio saturada (20 mL) e acetato de etila (30 mL) e agitada vigorosamente durante 5 minutos. A mistura foi extraída duas vezes com acetato de etila, os orgânicos combinados foram lavados com solução de bicarbonato de sódio saturada, secados sobre sulfato de sódio e filtrados. Ácido acético (0,019 mL) foi adicionado a esta solução e o solvente em seguida removido sob pressão reduzida. O resíduo foi dissolvido em metanol (3 mL) e adicionado a uma solução de cloridrato de (R)-7-(2-amino-1hidroxietil)-4-hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona (WO2007027134, exemplo 1, etapa d) (0,128 g) e ácido acético (0,019 mL) em metanol (15,00 mL). A mistura foi resfriada em um banho de gelo e tratada com cianoboroidreto de sódio (41 mg). O banho de resfriamento foi removido e a mistura agitada a 20°C durante 3 horas. O solvente foi evaporado para um volume de 3 mL sob pressão reduzida e THF (20 mL) foi adicionado. A mistura foi lavada com uma mistura de salmoura saturada (10 mL) e solução de bicarbonato de sódio saturada (1 mL). A camada orgânica foi secada sobre sulfato de sódio, filtrada e o solvente removido sob pressão reduzida. O resíduo foi azeotropado duas vezes com acetonitrila. O produto bruto foi purificado por HPLC preparativa (Sunfire®,
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346/638 gradiente: 10-40% de acetonitrila em 0,2% de TFA aquoso). As frações contendo o composto desejado foram evaporadas até a secura para fornecer o composto do título. Produção 0,12 g.
[001043] m/z 684 (M+H)+ (APCI) [001044] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO, 90°C) δ 11,28 (s, 1H), 7,50 -
7,39 (m, 2H), 7,28 - 7,22 (m, 1H), 6,93 (d, J = 24,1 Hz, 1H), 6,77 (d, J =
26,1 Hz, 1H), 4,93 - 4,88 (m, 1H), 4,26 (s, 2H), 3,67 (s, 2H), 3,58 - 3,43 (m, 4H), 3,26 - 3,00 (m, 11H), 2,43 (s, 3H), 2,03 - 1,94 (m, 2H), 1,81 -
1,65 (m, 2H), 1,30 (d, J = 6,8 Hz, 6H). Cinco prótons trocáveis não ob- servados.
Exemplo 70
Ditrifluoroacetato de (R)-7-(2-(2-fluoro-3-((4-(5-isopropiltiofeno-3carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9il)metil)fenetilamino)-1-hidroxietil)-4-hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)ona
HO
a) (9-(2-fluoro-3-(2-hidroxietil)benzil)-1 -oxa-4,9-diazaespiro[5,5] undecan-4-il)(5-isopropiltiofen-3-il)metanona
HO [001045] HATU (0,183 g) foi adicionado em uma porção a uma solução agitada a 0°C de ácido 5-isopropiltiofeno-3-carboxílico (0,063 g) e 2-(3-(1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-ilmetil)-2-fluorofenil)etanol (exemplo 67, etapa f) (0,114 g) e trietilamina (0,155 mL) em DMF (5 mL). A mistura reacional foi agitada em temperatura ambiente durante
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347/638 horas. A mistura foi dividida entre acetato de etila e salmoura, a camada orgânica foi lavada duas vezes com salmoura, secada sobre sulfato de sódio, filtrada e o solvente evaporado sob pressão reduzida. O produto bruto foi purificado por cromatografia de sílica rápida usando 2,5% de metanol em diclorometano com 1% de trietilamina como solvente. Frações puras foram evaporadas até a secura para fornecer o composto do subtítulo. Produção 0,100 g.
[001046] m/z 461 (M+H)+ (APCI)
b) Ditrifluoroacetato de (R)-7-(2-(2-fluoro-3-((4-(5-isopropiltiofeno-
3-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil) fenetilamino)-1-hidroxietil)-4-hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona
[001047] Uma solução de (9-(2-fluoro-3-(2-hidroxietil)benzil)-1-oxa-
4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4-il)(5-isopropiltiofen-3-il)metanona (exemplo 70, etapa a) (0,100 g) em DCM (15 mL) foi tratada com ácido trifluoroacético (0,017 mL) seguido por periodinano Dess-Martin (0,120 g) e a mistura resultante agitada a 20°C durante 40 minutos. A mistura reacional foi tratada com solução de tiossulfato de sódio saturada (20 mL) e solução de bicarbonato de sódio saturada (20 mL) e acetato de etila (30 mL) e agitada vigorosamente durante 5 minutos. A mistura foi extraída duas vezes com acetato de etila, os orgânicos combinados foram lavados com solução de bicarbonato de sódio saturada, secados sobre sulfato de sódio e filtrados. Ácido acético (0,012 mL) foi adicionado a esta solução e o solvente em seguida removido sob pressão reduzida. O resíduo foi dissolvido em metanol (3 mL) e adicionado a uma solução de cloridrato de (R)-7-(2-amino-1-hidroxietil)-4hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona (WO2007027134, exemplo 1, etapa d)
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348/638 (0,086 g) e ácido acético (0,012 mL) em metanol (15,00 mL). A mistura foi resfriada em um banho de gelo e tratada com cianoboroidreto de sódio (0,027 g). O banho de resfriamento foi removido e a mistura agitada a 20°C durante 3 horas. O solvente foi evaporado para um volume de 3 mL sob pressão reduzida e THF (20 mL) foi adicionado. A mistura foi lavada com uma mistura de salmoura saturada (10 mL) e solução de bicarbonato de sódio saturada (1 mL). A camada orgânica foi secada sobre sulfato de sódio, filtrada e o solvente removido sob pressão reduzida. O resíduo foi azeotropado duas vezes com acetonitrila. O produto bruto foi purificado por HPLC preparativa (Sunfire®, gradiente: 10-40% de acetonitrila em 0,2% de TFA aquoso). As frações contendo o composto desejado foram evaporadas até a secura para fornecer o composto do título. Produção 0,052 mg.
[001048] m/z 669 (M+H)+ (APCI) [001049] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO, 90°C) δ 7,51 - 7,46 (m, 2H),
7,43 (t, J = 7,5 Hz, 1H), 7,25 (t, J = 7,7 Hz, 1H), 6,95 - 6,89 (m, 2H),
6,77 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 4,95 - 4,90 (m, 1H), 4,30 (s, 2H), 3,69 - 3,65 (m, 2H), 3,55 - 3,51 (m, 2H), 3,45 (s, 2H), 3,24 (t, J = 8,1 Hz, 2H), 3,20 - 3,03 (m, 9H), 2,05 - 1,97 (m, 2H), 1,79 - 1,69 (m, 2H), 1,28 (d, J = 6,8 Hz, 6H). Seis prótons trocáveis não observados.
Exemplo 71
Ditrifluoroacetato de (R)-7-(2-(2-fluoro-3-((4-(2-(pentan-3-il)tiazol-4carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil) fenetilamino)-1-hidroxietil)-4-hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona
HO,
OH
a) 2-etilbutanamida
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349/638
HN [001050] Cloreto de 2-etilbutanoíla (5 g) foi cautelosamente adicionado gota a gota a amônia aquosa a 35 % gelada (50 mL) e a suspensão resultante agitada durante 1 hora. A mistura reacional foi extraída com DCM (3 x 100 mL). Os orgânicos combinados foram lavados com salmoura (100 mL), secados sobre sulfato de sódio, filtrados e evaporados para fornecer o composto do subtítulo como um sólido branco. Produção 3,4 g.
[001051] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO) δ 7,23 (s, 1H), 6,71 (s, 1H),
1,98 - 1,88 (m, 1H), 1,50 - 1,27 (m, 4H), 0,81 (t, J = 7,4 Hz, 6H).
b) 2-etilbutanotioamida [001052] Pentassulfeto de fósforo (1,54 g) foi adicionado à solução de 2-etilbutanamida (exemplo 71, etapa a) (3,4 g) em MTBE (300 mL) e a mistura resultante agitada durante 3 horas. A reação foi filtrada através de celite e a almofada filtrante lavada com MTBE (100 mL). O filtrado combinado e lavagens foram evaporados para fornecer o composto do subtítulo como um óleo amarelo. Produção 3,8 g. Usado diretamente.
c) 2-(pentan-3-il)tiazol-4-carboxilato de etila o r' [001053] 3-Bromo-2-oxopropanoato de etila (2,5 mL) foi adicionado gota a gota a uma solução de 2-etilbutanotioamida (exemplo 71, etapa b) (3,8 g) em etanol (100 mL) e a mistura resultante aquecida ao refluxo durante a noite. O solvente foi evaporado e o resíduo dividido entre acetato de etila (100 mL) e solução de hidrogeno carbonato de sódio saturada (100 mL). As camadas foram separadas e a fase aquosa exPetição 870190058499, de 25/06/2019, pág. 355/650
350/638 traída com acetato de etila (2 x 100 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (100 mL), secadas sobre sulfato de sódio, filtradas e evaporadas. O resíduo foi purificado por cromatografia de sílica-gel eluindo com 20:1 de iso-hexano:acetato de etila. As frações contendo produto foram combinadas e evaporadas para fornecer o composto do subtítulo como um óleo amarelo. Produção 2,8 g. [001054] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO) δ 8,42 (s, 1H), 4,29 (q, J =
7,1 Hz, 2H), 2,99 - 2,89 (m, 1H), 1,82 - 1,58 (m, 4H), 1,30 (t, J = 7,0 Hz, 3H), 0,81 (t, J = 7,4 Hz, 6H).
d) ácido 2-(pentan-3-il)tiazol-4-carboxílico
[001055] Monoidrato de hidróxido de lítio (2,07 g) foi adicionado à solução de 2-(pentan-3-il)tiazol-4-carboxilato de etila (exemplo 71, etapa c) (2,8 g) em uma mistura de THF (80 mL) e água (20 mL). A mistura resultante foi agitada durante a noite. A reação foi acidificada com ácido clorídrico concentrado (6 mL) e os voláteis evaporados. A mistura aquosa resultante foi saturada com cloreto de sódio e extraída com acetato de etila (3 x 100 mL). As camadas orgânicas combinadas foram secadas sobre sulfato de sódio, filtradas e evaporadas para fornecer o composto do subtítulo como um sólido branco. Produção 2,3 g [001056] 1H RMN (300 MHz, D6-DMSO) δ 12,91 (s, 1H), 8,34 (s, 1H),
2,98 - 2,86 (m, 1H), 1,84 - 1,56 (m, 4H), 0,81 (t, J = 7,3 Hz, 6H).
e) (9-(2-fluoro-3-(2-hidroxietil)benzil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5] undecan-4-il)(2-(pentan-3-il)tiazol-4-il)metanona
[001057] Hexafluorofosfato de O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N’,N tetrametilurônio (0,2 g) foi adicionado à solução de 2-(3-(1-oxa-4,9
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351/638 diazaespiro[5,5]undecan-9-ilmetil)-2-fluorofenil)etanol (exemplo 67, etapa f) (0,13 g), ácido 2-(pentan-3-il)tiazol-4-carboxílico (exemplo 71, etapa d) (0,081 g) e trietilamina (0,23 mL) em DMF (7 mL) a 0°C. A solução amarela resultante foi deixada aquecer para TA e foi agitada durante 2 horas. A mistura foi dividida entre acetato de etila e salmoura (100 mL), a fase orgânica foi lavada com salmoura (2 x 100 mL), secada sobre sulfato de sódio, filtrada e em seguida evaporada. A goma resultante foi purificada por cromatografia de sílica-gel eluindo com gradiente de 47,5:47,5:5 de iso-hexano:acetato de etila:trietilamina a 95:5 de acetato de etila:trietilamina. As frações contendo produto foram combinadas, tolueno (200 mL) foi adicionado, e o solvente evaporado sob pressão reduzida para fornecer o composto do subtítulo como uma goma clara. Produção 0,25 g.
[001058] m/z 490 (M+H)+ (APCI) [001059] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO, 90°C) δ 7,93 (s, 1H), 7,22 -
7,14 (m, 2H), 7,03 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 4,39 - 4,32 (m, 1H), 3,69 - 3,58 (m, 6H), 3,52 - 3,46 (m, 2H), 2,97 - 2,90 (m, 1H), 2,75 (t, J = 7,3 Hz, 2H), 2,70 (s, 2H), 2,46 - 2,29 (m, 4H), 1,82 - 1,66 (m, 6H), 1,58 - 1,47 (m, 2H), 0,85 (t, J = 7,3 Hz, 6H).
f) Ditrifluoroacetato de (R)-7-(2-(2-fluoro-3-((4-(2-(pentan-3-il)tiazol-
4-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9il)metil)fenetilamino)-1-hidroxietil)-4-hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)ona
HO,
OH [001060] Ácido trifluoroacético (0,031 mL) foi adicionado à solução de (9-(2-fluoro-3-(2-hidroxietil)benzil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5] unde
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352/638 can-4-il)(2-(pentan-3-il)tiazol-4-il)metanona (exemplo 71, etapa e) (0,2 g) em DCM (5 mL) a 0°C. A mistura foi agitada durante 5 minutos em seguida periodinano Dess-Martin (0,25 g) foi adicionado. A solução amarela resultante foi deixada aquecer para TA e agitada durante 1 hora. Uma mistura de solução de tiossulfato de sódio saturada (5 mL), solução de bicarbonato de sódio saturada (5 mL) e acetato de etila (20 mL) foi em seguida adicionada e a mistura resultante agitada vigorosamente durante 10 minutos. A fase aquosa foi separada e extraída com acetato de etila (20 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (20 mL), acidificadas com algumas gotas de ácido acético, secadas sobre sulfato de sódio, filtradas e evaporadas em vácuo. O resíduo foi dissolvido em metanol (5 mL), ácido acético (0,023 mL) e cloridrato de (R)-7-(2-amino-1-hidroxietil)-4hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona (WO2007027134, exemplo 1, etapa d) (0,13 g) foram em seguida adicionados e a mistura agitada durante 5 minutos antes do resfriamento em um banho de gelo. Cianoboroidreto de sódio (0,038 g) foi em seguida adicionado, a mistura deixada aquecer para TA e agitada durante a noite. O solvente foi evaporado em vácuo. A purificação foi por cromatografia de sílica-gel eluindo com 94,5:5:0,5 a 89:10:1 de gradiente de DCM:metanol:amônia aquosa ‘880’. As frações contendo produto foram combinadas e evaporadas em vácuo. Além disso, a purificação foi por HPLC preparativa (Sunfire®, gradiente: 10-35% de acetonitrila em 0,2% de TFA aquoso). As frações contendo produto foram combinadas, evaporadas em vácuo e o resíduo triturado com dietiléter para fornecer o composto do título como um sólido branco. Produção 0,17 g.
[001061] m/z 698 (M+H)+ (APCI) [001062] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO, 90°C) δ 11,26 (s, 1H), 8,01 7,83 (m, 1H), 7,56 - 7,38 (m, 2H), 7,30 - 7,19 (m, 1H), 7,01 - 6,89 (m, 1H), 6,83 - 6,71 (m, 1H), 4,99 - 4,88 (m, 1H), 4,38 - 4,23 (m, 2H), 3,78 Petição 870190058499, de 25/06/2019, pág. 358/650
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3,57 (m, 6H), 3,33 - 2,86 (m, 11H), 2,10 - 1,97 (m, 2H), 1,87 - 1,61 (m, 6H), 0,91 - 0,76 (m, 6H). Cinco prótons trocáveis não observados. Exemplo 72
Ditrifluoroacetato de (R)-7-(2-(2-fluoro-3-((4-(2-isobutiltiazol-4carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil) fenetilamino)-1-hidroxietil)-4-hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona
HO,
OH
a) 3-Metilbutanamida [001063] Cloreto de 3-metilbutanoíla (10 mL) foi cautelosamente adicionado gota a gota a amônia aquosa a 35 % gelada (50 mL) e a suspensão resultante agitada durante 1 hora. A mistura reacional foi extraída com DCM (3 x 100 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (100 mL), secadas sobre sulfato de sódio, filtradas e evaporadas para fornecer o composto do subtítulo como um sólido branco. Produção 5,6 g.
[001064] 1H RMN (300 MHz, D6-DMSO) δ 7,20 (s, 1H), 6,67 (s, 1H),
1,99 - 1,88 (m, 3H), 0,87 (d, J = 6,4 Hz, 6H).
b) 3-Metilbutanotioamida [001065] Pentassulfeto de fósforo (2,9 g) foi adicionado a uma suspensão de 3-metilbutanamida (exemplo 72, etapa a) (5,6 g) em MTBE (300 mL) e a mistura resultante agitada durante 3 horas. A reação foi filtrada através de celite e a almofada filtrante lavada com MTBE (100 mL). O filtrado combinado e lavagens foram evaporados para fornecer
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354/638 o composto do subtítulo como um óleo amarelo. Produção 5,6 g. [001066] 1H RMN (300 MHz, D6-DMSO) δ 9,32 (s, 1H), 9,10 (s, 1H),
2,33 (d, J = 7,3 Hz, 2H), 2,22 - 2,07 (m, 1H), 0,88 (d, J = 6,4 Hz, 6H).
c) 2-isobutiltiazol-4-carboxilato de etila
O [001067] A uma solução de 3-metilbutanotioamida (exemplo 72, etapa b) (5,6 g) em etanol (100 mL) foi adicionado 3-bromo-2oxopropanoato de etila (6,7 mL). A mistura resultante foi agitada durante a noite em RT, em seguida aquecida ao refluxo durante 5 horas. O solvente foi evaporado e o resíduo foi dividido entre acetato de etila (250 mL) e solução de hidrogeno carbonato de sódio saturada (100 mL). As camadas foram separadas e a fase orgânica foi lavada com salmoura (100 mL), secada sobre sulfato de magnésio, filtrada e evaporada. O resíduo foi purificado por cromatografia de sílica-gel eluindo com gradiente de 20:1 a 10:1 de iso-hexano:acetato de etila. As frações contendo produto foram combinadas e evaporadas para fornecer o composto do subtítulo como um óleo amarelo. Produção 5,2 g.
[001068] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO) δ 8,39 (s, 1H), 4,29 (q, J =
7.1 Hz, 2H), 2,88 (d, J = 7,2 Hz, 2H), 2,10 - 1,97 (m, 1H), 1,30 (t, J =
7.2 Hz, 3H), 0,93 (d, J = 6,7 Hz, 6H).
d) ácido 2-isobutiltiazol-4-carboxílico
O
HO [001069] Monoidrato de hidróxido de lítio (4,1 g) foi adicionado à solução de 2-isobutiltiazol-4-carboxilato de etila (exemplo 72, etapa c) (5,2 g) em uma mistura de THF (80 mL) e água (20 mL). A mistura resultante foi agitada durante a noite. A reação foi cuidadosamente acidificada com ácido clorídrico concentrado (10 mL) e os voláteis evaporados. A mistura aquosa resultante foi vertida em salmoura (50 mL) e
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355/638 extraída com acetato de etila (3 x 100 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (50 mL), secadas sobre sulfato de sódio, filtradas e evaporadas para fornecer o composto do subtítulo como um sólido branco. Produção 3,8 g.
[001070] 1H RMN (300 MHz, D6-DMSO) δ 12,90 (s, 1H), 8,32 (s, 1H),
2,87 (d, J = 7,1 Hz, 2H), 2,11 - 1,96 (m, 1H), 0,94 (d, J = 6,7 Hz, 6H).
e) (9-(2-fluoro-3-(2-hidroxietil)benzil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5] undecan-4-il)(2-isobutiltiazol-4-il)metanona
HO [001071] Hexafluorofosfato de O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N’,Ntetrametilurônio (0,2 g) foi adicionado à solução de 2-(3-(1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9-ilmetil)-2-fluorofenil)etanol (exemplo 67, etapa f) (0,13 g), ácido 2-isobutiltiazol-4-carboxílico (exemplo 72, etapa d) (0,08 g) e trietilamina (0,23 mL) em DMF (7 mL) a 0°C e a solução amarela resultante deixada aquecer para TA e foi agitada durante 2 horas. A mistura foi dividida entre acetato de etila e salmoura (100 mL), a fase orgânica foi lavada com salmoura (2 x 100 mL), secada sobre sulfato de sódio, filtrada e em seguida evaporada. A goma resultante foi purificada por cromatografia de sílica-gel eluindo com gradiente de 47,5:47,5:5 de iso-hexano:acetato de etila:trietilamina a 95:5 de acetato de etila:trietilamina. As frações contendo produto foram combinadas, tolueno (200 mL) foi adicionado, e o solvente evaporado sob pressão reduzida para fornecer o composto do subtítulo como uma goma clara. Produção 0,24 g.
[001072] m/z 476 (M+H)+ (APCI) [001073] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO, 90°C) δ 7,90 (s, 1H), 7,22 -
7,14 (m, 2H), 7,03 (t, J = 7,4 Hz, 1H), 4,35 (t, J = 4,7 Hz, 1H), 3,68 -
3,57 (m, 6H), 3,52 - 3,42 (m, 2H), 2,89 (d, J = 6,9 Hz, 2H), 2,76 (t, J =
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7,5 Hz, 2H), 2,70 (s, 2H), 2,45 - 2,28 (m, 4H), 2,12 - 2,03 (m, 1H), 1,74 - 1,65 (m, 2H), 1,57 - 1,48 (m, 2H), 0,96 (d, J = 6,7 Hz, 6H).
f) Ditrifluoroacetato de (R)-7-(2-(2-fluoro-3-((4-(2-isobutiltiazol-4carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil) fenetilamino)-1-hidroxietil)-4-hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona
HO.
OH [001074] Ácido trifluoroacético (0,031 mL) foi adicionado à solução de (9-(2-fluoro-3-(2-hidroxietil)benzil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5] undecan-4-il)(2-isobutiltiazol-4-il)metanona (exemplo 72, etapa e) (0,19 g) em DCM (5 mL) a 0°C. A mistura foi agitada durante 5 minutos em seguida periodinano Dess-Martin (0,25 g) foi adicionado. A solução amarela resultante foi deixada aquecer para TA e agitada durante 1 hora. Uma mistura de solução de tiossulfato de sódio saturada (5 mL), solução de bicarbonato de sódio saturada (5 mL) e acetato de etila (20 mL) foi em seguida adicionada e a mistura resultante agitada vigorosamente durante 10 minutos. A fase aquosa foi separada e extraída com acetato de etila (20 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (20 mL), acidificadas com algumas gotas de ácido acético, secadas sobre sulfato de sódio, filtradas e evaporadas em vácuo. O resíduo foi dissolvido em metanol (5 mL), ácido acético (0,023 mL) e cloridrato de (R)-7-(2-amino-1-hidroxietil)-4-hidroxibenzo[d]tiazol2(3H)-ona (WO2007027134, exemplo 1, etapa d) (0,13 g) foram em seguida adicionados e a mistura agitada durante 5 minutos antes do resfriamento em um banho de gelo. Cianoboroidreto de sódio (0,038 g) foi em seguida adicionado, a mistura deixada aquecer para TA e agitada durante a noite. O solvente foi evaporado em vácuo. A purificação
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357/638 foi por cromatografia de sílica-gel eluindo com 94,5:5:0,5 a 89:10:1 de gradiente de DCM:metanol:amônia aquosa ‘880’ . As frações contendo produto foram combinadas e evaporadas em vácuo. Além disso, a purificação foi por HPLC preparativa (Sunfire®, gradiente: 10-35% de acetonitrila em 0,2% de TFA aquoso). As frações contendo produto foram combinadas, evaporadas em vácuo e o resíduo triturado com dietiléter para fornecer o composto do título como um sólido branco. Produção 0,10 g.
[001075] m/z 684 (M+H)+ (APCI) [001076] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO, 90°C) δ 11,39 - 11,19 (m,
1H), 7,94 (s, 1H), 7,53 - 7,40 (m, 2H), 7,25 (t, J = 7,7 Hz, 1H), 6,93 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 6,77 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 4,92 (dd, J = 8,5, 4,9 Hz, 1H),
4,33 - 4,26 (m, 2H), 3,72 - 3,59 (m, 6H), 3,28 - 3,01 (m, 10H), 2,88 (d, J = 6,9 Hz, 2H), 2,11 - 1,95 (m, 3H), 1,84 - 1,69 (m, 2H), 0,95 (d, J = 6,7 Hz, 6H). Cinco prótons trocáveis não observados.
Exemplo 73
Ditrifluoroacetato de (R)-7-(2-(2-fluoro-3-((4-(5-isopropiltiofeno-2carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil) fenetilamino)-1-hidroxietil)-4-hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona
HO.
OH
a) (9-(2-fluoro-3-(2-hidroxietil)benzil)-1 -oxa-4,9-diazaespiro[5,5] undecan-4-il)(5-isopropiltiofen-2-il)metanona
HO [001077] Hexafluorofosfato de O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N’,N
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358/638 tetrametilurônio (0,2 g) foi adicionado à solução de 2-(3-(1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9-ilmetil)-2-fluorofenil)etanol (exemplo 67, etapa f) (0,13 g), ácido 5-isopropiltiofeno-2-carboxílico (0,07 g) e trietilamina (0,23 mL) em DMF (7 mL) a 0°C. A solução amarela resultante foi deixada aquecer para TA e foi agitada durante 2 horas. A mistura foi dividida entre acetato de etila (100 mL) e salmoura (100 mL), a fase orgânica foi lavada com salmoura (2 x 100 mL), secada sobre sulfato de sódio, filtrada e o solvente evaporado. A goma resultante foi purificada por cromatografia de sílica-gel eluindo com gradiente de 47,5:47,5:5 de iso-hexano:acetato de etila:trietilamina a 95:5 de acetato de etila:trietilamina. As frações contendo produto foram combinadas, tolueno (200 mL) foi adicionado, e o solvente evaporado para fornecer o composto do subtítulo como uma goma clara. Produção 0,23 g. [001078] m/z 461 (M+H)+ (APCI) [001079] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO, 90°C) δ 7,22 - 7,15 (m, 3H),
7,03 (t, J = 7,4 Hz, 1H), 6,83 (d, J = 3,6 Hz, 1H), 4,35 (t, J = 5,0 Hz, 1H), 3,69 - 3,58 (m, 6H), 3,49 (s, 2H), 3,21 - 3,13 (m, 1H), 2,76 (t, J = 8,4 Hz, 2H), 2,70 (s, 2H), 2,42 - 2,36 (m, 4H), 1,75 - 1,68 (m, 2H), 1,56 - 1,46 (m, 2H), 1,29 (d, J = 6,7 Hz, 6H)
b) Ditrifluoroacetato de (R)-7-(2-(2-fluoro-3-((4-(5-isopropiltiofeno2-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil) fenetilamino)-1-hidroxietil)-4-hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona [001080] Ácido trifluoroacético (0,031 mL) foi adicionado à solução de (9-(2-fluoro-3-(2-hidroxietil)benzil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5] undePetição 870190058499, de 25/06/2019, pág. 364/650
359/638 can-4-il)(5-isopropiltiofen-2-il)metanona (exemplo 73, etapa a) (0,18 g) em DCM (5 mL) a 0°C. A mistura foi agitada durante 5 minutos em seguida periodinano Dess-Martin (0,25 g) foi adicionado. A solução amarela resultante foi deixada aquecer para TA e agitada durante 1 hora. Uma mistura de solução de tiossulfato de sódio saturada (5 mL), solução de bicarbonato de sódio saturada (5 mL) e acetato de etila (20 mL) foi em seguida adicionada e a mistura resultante agitada vigorosamente durante 10 minutos. A fase aquosa foi separada e extraída com acetato de etila (20 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (20 mL), acidificadas com algumas gotas de ácido acético, secadas sobre sulfato de sódio, filtradas e evaporadas em vácuo. O resíduo foi dissolvido em metanol (5 mL), ácido acético (0,023 mL) e cloridrato de (R)-7-(2-amino-1-hidroxietil)-4-hidroxibenzo[d]tiazol2(3H)-ona (WO2007027134, exemplo 1, etapa d) (0,13 g) foram em seguida adicionados e a mistura agitada durante 5 minutos antes do resfriamento em um banho de gelo. Cianoboroidreto de sódio (0,025 g) foi em seguida adicionado, a mistura deixada aquecer para TA e agitada durante a noite. O solvente foi evaporado em vácuo. A purificação foi por cromatografia de sílica-gel eluindo com 94,5:5:0,5 a 89:10:1 de gradiente de DCM:metanol:amônia aquosa ‘880’. As frações contendo produto foram combinadas e evaporadas em vácuo. Além disso, a purificação foi por HPLC preparativa (Sunfire®, gradiente: 10-40% de acetonitrila em 0,2% de TFA aquoso). As frações contendo produto foram combinadas, evaporadas em vácuo e o resíduo triturado com dieltiléter para fornecer o composto do título como um sólido branco. Produção 0,12 g.
[001081] m/z 669 (M+H)+ (APCI) [001082] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO, 90°C) δ 11,26 (s, 1H), 7,54 -
7,40 (m, 2H), 7,28 - 7,21 (m, 2H), 6,94 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 6,84 (dd, J = 3,6, 0,8 Hz, 1H), 6,78 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 4,93 (dd, J = 8,5, 4,9 Hz,
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1H), 4,34 (s, 2H), 3,73 - 3,64 (m, 4H), 3,54 (s, 2H), 3,29 - 3,03 (m, 11H), 2,07 - 1,98 (m, 2H), 1,85 - 1,73 (m, 2H), 1,29 (d, J = 6,9 Hz, 6H). Cinco prótons trocáveis não observados.
Exemplo 74
Ditrifluoroacetato de (R)-7-(2-(2-fluoro-3-((4-(4-isopropiltiofeno-2carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil) fenetilamino)-1-hidroxietil)-4-hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona
HO.
OH
a) 1 -(4-isopropiltiofen-2-il)etanona [001083] 1-(Tiofen-2-il)etanona (5,4 mL) foi adicionada a uma suspensão gelada de cloreto de alumínio (33 g) em clorofórmio seco (100 mL). 2-Bromopropano (5,2 mL) foi em seguida adicionado gota a gota durante 5 minutos. A reação foi deixada aquecer para TA e agitada durante a noite. A suspensão escura foi cautelosamente vertida em gelo e a mistura agitada durante 10 minutos. As camadas foram separadas e a fase aquosa extraída com DCM (100 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com solução de hidróxido de sódio (2M, 200 mL) e água (200 mL), secadas sobre sulfato de sódio, filtradas e evaporadas. O resíduo foi purificado por cromatografia de sílicagel eluindo com 2% de acetato de etila em iso-hexano. As frações contendo produto foram combinadas e evaporadas para fornecer o composto do subtítulo como um óleo amarelo-claro. Produção 5,4 g.
[001084] 1H RMN (400 MHz, CDC1s) δ 7,58 (d, J = 1,3 Hz, 1H), 3,01
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- 2,92 (m, 1H), 2,55 (s, 3H), 1,27 (d, J = 6,9 Hz, 6H). Um próton de tiofeno obscurecido por sinal de CDCl3 ~7,26.
b) ácido 4-isopropiltiofeno-2-carboxílico
HO [001085] Uma solução de 1-(4-isopropiltiofen-2-il)etanona (exemplo 74, etapa a) (1 g) em 1,4-dioxano (10 mL) foi cautelosamente adicionada a uma solução de hidróxido de sódio (1,19 g) em hipoclorito de sódio aquoso (8%, 50 mL) a 60°C. A mistura resultante foi aquecida para 75°C e agitada durante 1 hora. A reação foi deixada resfriar e a fase aquosa lavada com DCM (50 mL). A fase aquosa foi tratada com solução de bissulfito de sódio aquosa (10%, 20 mL) e cuidadosamente acidificada com ácido clorídrico concentrado. A mistura resultante foi extraída com DCM (3 x 50 mL). As camadas orgânicas combinadas foram secadas sobre sulfato de sódio, filtradas e evaporadas para fornecer um óleo amarelo. A purificação foi por HPLC preparativa (Sunfire®, gradiente: 5-95% de acetonitrila em 0,2% de TFA aquoso). As frações contendo produto foram combinadas, evaporadas e secadas sob vácuo elevado para fornecer o composto do subtítulo como um sólido branco. Produção 0,5 g.
[001086] 1H RMN (300 MHz, D6-DMSO) δ 12,95 (s, 1H), 7,65 (d, J =
1,5 Hz, 1H), 7,51 - 7,49 (m, 1H), 2,94 (septet, J = 6,9 Hz, 1H), 1,20 (d, J = 6,9 Hz, 6H).
c) (9-(2-fluoro-3-(2-hidroxietil)benzil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5] undecan-4-il)(4-isopropiltiofen-2-il)metanona
HO
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362/638 [001087] Hexafluorofosfato de O-(7-azabenzotnazo\-1-'\\)-N,N,N’,N’tetrametilurônio (0,2 g) foi adicionado à solução de 2-(3-(1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9-ilmetil)-2-fluorofenil)etanol (exemplo 67, etapa f) (0,13 g), ácido 4-isopropiltiofeno-2-carboxílico (exemplo 74, etapa b) (0,07 g) e trietilamina (0,23 mL) em DMF (7 mL) a 0°C. A solução amarela resultante foi deixada aquecer para TA e foi agitada durante 2 horas. A mistura foi dividida entre acetato de etila (100 mL) e salmoura (100 mL), a camada orgânica foi lavada com salmoura (2 x 100 mL), secada sobre sulfato de sódio, filtrada e evaporada. A goma resultante foi purificada por cromatografia de sílica-gel eluindo com gradiente de 47,5:47,5:5 de iso-hexano:acetato de etila:trietilamina a 95:5 de acetato de etila:trietilamina. As frações contendo produto foram combinadas, tolueno (200 mL) foi adicionado, e o solvente evaporado sob pressão reduzida para fornecer o composto do subtítulo como uma goma clara. Produção 0,23 g.
[001088] m/z 461 (M+H)+ (APCI) [001089] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO, 90°C) δ 7,30 - 7,14 (m, 4H),
7,05 - 7,00 (m, 1H), 4,35 (s, 1H), 3,68 - 3,58 (m, 6H), 3,51 - 3,47 (m,
2H), 2,98 - 2,92 (m, 1H), 2,75 (t, J = 7,3 Hz, 2H), 2,70 (s, 2H), 2,41 -
2,34 (m, 4H), 1,75 - 1,68 (m, 2H), 1,56 - 1,47 (m, 2H), 1,21 (d, J = 6,9
Hz, 6H).
d) Ditrifluoroacetato de (R)-7-(2-(2-fluoro-3-((4-(4-isopropiltiofeno2-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil) fenetilamino)-1-hidroxietil)-4-hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona
HO.
OH [001090] Ácido trifluoroacético (0,031 mL) foi adicionado à solução
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363/638 de (9-(2-fluoro-3-(2-hidroxietil)benzil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-4-il)(4-isopropiltiofen-2-il)metanona (exemplo 74, etapa c) (0,18 g) em DCM (5 mL) a 0°C. A mistura foi agitada durante 5 minutos em seguida periodinano Dess-Martin (0,25 g) foi adicionado. A solução amarela resultante foi deixada aquecer para TA e agitada durante 1 hora. Uma mistura de solução de tiossulfato de sódio saturada (5 mL), solução de bicarbonato de sódio saturada (5 mL) e acetato de etila (20 mL) foi em seguida adicionada e a mistura resultante agitada vigorosamente durante 10 minutos. A fase aquosa foi separada e extraída com acetato de etila (20 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (20 mL), acidificadas com algumas gotas de ácido acético, secadas sobre sulfato de sódio, filtradas e evaporadas em vácuo. O resíduo foi dissolvido em metanol (5 mL), ácido acético (0,023 mL) e cloridrato de (R)-7-(2-amino-1hidroxietil)-4-hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona (WO2007027134, exemplo 1, etapa d) (0,13 g) foram em seguida adicionados e a mistura agitada durante 5 minutos antes do resfriamento em um banho de gelo. Cianoboroidreto de sódio (0,025 g) foi em seguida adicionado, a mistura deixada aquecer para TA e agitada durante a noite. O solvente foi evaporado em vácuo. A purificação foi por cromatografia de sílica-gel eluindo com 94,5:5:0,5 a 89:10:1 de gradiente de DCM:metanol:amônia aquosa ‘880’ . As frações contendo produto foram combinadas e evaporadas em vácuo. Além disso, a purificação foi por HPLC preparativa (Sunfire®, gradiente: 10-40% de acetonitrila em 0,2% de TFA aquoso). As frações contendo produto foram combinadas, evaporadas em vácuo e o resíduo triturado com dietiléter para fornecer o composto do título como um sólido branco. Produção 0,13g. [001091] m/z 669 (M+H)+ (APCI) [001092] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO, 90°C) δ 11,26 (s, 1H), 7,53 -
7,47 (m, 1H), 7,47 - 7,41 (m, 1H), 7,31 (s, 1H), 7,29 (s, 1H), 7,25 (t, J =
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7,6 Hz, 1H), 6,94 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 6,78 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 4,93 (dd, J = 8,3, 4,7 Hz, 1H), 4,35 - 4,31 (m, 2H), 3,73 - 3,62 (m, 4H), 3,54 (s, 2H), 3,26 - 3,03 (m, 10H), 2,94 (septet, J = 7 Hz, 1H), 2,08 - 1,98 (m, 2H), 1,85 - 1,71 (m, 2H), 1,21 (d, J = 6,9 Hz, 6H). Cinco prótons trocáveis não observados.
Exemplo 75
Ditrifluoroacetato de (R)-7-(2-(2-Cloro-5-((4-(2-isopropiltiazol-4carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil) fenetilamino)-1-hidroxietil)-4-hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona
HO
OH
a) ácido 3-(carboximetil)-4-clorobenzoico
Ck
HO
OH [001093] Hidróxido de potássio (1,549 g) em água (15 mL) foi adicionado a uma suspensão de ácido 4-cloro-3-(cianometil)benzoico (2,07 g) em etanol (15 mL) e a solução resultante foi aquecida ao refluxo durante 4 horas, em seguida deixada resfriar. A mistura foi concentrada em vácuo para remover o etanol e em seguida diluída com água e lavada duas vezes com acetato de etila. As fases orgânicas foram descartadas, embora a fase aquosa fosse acidificada para pH 1 com ácido clorídrico concentrado e extraída duas vezes com acetato de etila. Os extratos combinados foram lavados com salmoura, secados sobre sulfato de magnésio anidroso e concentrados em vácuo para fornecer o composto do subtítulo como um sólido marrom pálido. Produção 2,06g.
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365/638 [001094] m/z 214 (M+) (EI)
b) 2-(2-Cloro-5-(hidroximetil)fenil)etanol
HO
Cl
OH [001095] Uma solução de complexo de borano-sulfeto de metila (2M em THF, 12,0 mL) foi adicionada porção a porção durante 3 minutos a uma suspensão de ácido 3-(carboximetil)-4-clorobenzoico (exemplo 75, etapa a) (2,06 g) em THF seco (30 mL) em temperatura ambiente. A suspensão densa efervescente resultante foi agitada em temperatura ambiente durante 1 hora, em seguida aquecida ao refluxo durante 1 hora. A mistura resfriada foi extinta pela adição porção a porção de metanol (10 mL) durante 2 minutos. A solução foi agitada em temperatura ambiente durante 30 minutos e em seguida concentrada em sílica e purificada por cromatografia rápida em sílica eluída com 5% de metanol em diclorometano para fornecer o composto do subtítulo como um sólido branco. Produção 0,983 g.
[001096] 1H RMN (400 MHz, CDCh) δ 7,35 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,28 (d, J = 2,1 Hz, 1H), 7,18 (dd, J = 8,2, 2,1 Hz, 1H), 4,65 (s, 2H), 3,89 (t, J = 6,7 Hz, 2H), 3,02 (t, J = 6,5 Hz, 2H). Dois prótons trocáveis não observados.
c) 4-Cloro-3-(2-hidroxietil)benzaldeído ck
HO [001097] Dióxido de manganês (IV) (1,00 g) foi adicionado à solução de 2-(2-cloro-5-(hidroximetil)fenil)etanol (exemplo 75, etapa b) (0,205 g) em DCM (10 mL), e a suspensão resultante foi agitada em temperatura ambiente durante a noite. A mistura foi em seguida filtrada através de celite, lavando bem a almofada filtrante com DCM. O filtrado e lavagens foram concentrados em vácuo para fornecer o composto do subtítulo como um óleo incolor. Produção 0,159 g.
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366/638 [001098] 1H RMN (400 MHz, CDCI3) δ 9,97 (s, 1H), 7,81 (d, J = 2,0, 1H), 7,70 (dd, J = 2,0, 8,2, 1H), 7,53 (t, J = 6,7, 1H), 3,94 (dd, J = 6,4, 11,6, 2H), 3,10 (t, J = 6,6, 2H), 1,46 (t, J = 5,2, 1H).
d) (9-(4-Cloro-3-(2-hidroxietil)benzil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5] undecan-4-il)(2-isopropiltiazol-4-il)metanona
HO [001099] Uma solução de trifluoroacetato de (2-isopropiltiazol-4-il)(1oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4-il)metanona (exemplo 22, etapa b) (0,178 g) em NMP (2 mL) foi tratada com ácido acético (0,032 mL) e agitada durante 5 minutos. Uma solução de 4-cloro-3-(2hidroxietil)benzaldeído (exemplo 75, etapa c) (0,154 g) em NMP (3 mL) foi em seguida adicionada, a solução resultante foi agitada durante 1 hora e foi em seguida tratada com triacetoxiboroidreto de sódio (0,181 g) e agitada durante a noite em temperatura ambiente. Mais triacetoxiboroidreto de sódio (0,404 g) foi adicionado e a mistura foi agitada durante mais 6 horas, em seguida vertida em bicarbonato de sódio saturado e extraída duas vezes com acetato de etila. Os extratos combinados foram lavados três vezes com água, uma vez com salmoura, em seguida secados sobre sulfato de magnésio anidroso e purificados por cromatografia rápida em sílica eluída com 1:2:97 de trietilamina:metanol:diclorometano para fornecer o composto do subtítulo como uma goma incolor. Produção 0,157 g.
[001100] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO, 90°C) δ 7,90 (s, 1H), 7,29 (d,
J = 8,2 Hz, 1H), 7,24 (d, J = 1,4 Hz, 1H), 7,11 (dd, J = 8,2, 1,8 Hz, 1H),
4,37 (t, J = 5,3 Hz, 1H), 3,73 - 3,56 (m, 8H), 3,41 (s, 2H), 3,35 - 3,28 (m, 1H), 2,85 (t, J = 6,9 Hz, 2H), 2,41 - 2,10 (m, 4H), 1,75 - 1,62 (m, 2H), 1,60 - 1,46 (m, 2H), 1,36 (d, J = 6,7 Hz, 6H).
e) 2-(2-Cloro-5-((4-(2-isopropiltiazol-4-carbonil)-1 -oxa-4,9- diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil)fenil)acetaldeído
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367/638
Cl [001101] Uma solução de (9-(4-cloro-3-(2-hidroxietil)benzil)-1-oxa-
4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4-il)(2-isopropiltiazol-4-il)metanona (exemplo 75, etapa d) (0,152 g) em DCM (5 mL) foi resfriada em geloágua, tratada com ácido trifluoroacético (0,049 mL) e agitada durante 5 minutos. Periodinano Dess-Martin (0,205 g) foi adicionado, em seguida a mistura foi removida do banho de resfriamento e agitada em temperatura ambiente durante 30 minutos. A solução foi diluída com solução de tiossulfato de sódio saturada (5 mL), solução de bicarbonato de sódio saturada (5 mL) e acetato de etila (5 mL) e a mistura resultante foi agitada vigorosamente durante 10 minutos. A mistura foi em seguida extraída duas vezes com acetato de etila, as fases orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, acidificadas com ácido acético (0,1 mL), secadas sobre sulfato de magnésio anidroso e concentradas em vácuo para fornecer o composto do subtítulo bruto como uma goma amarela. Produção 0,197 g.
[001102] m/z 476 (M+H)+ (APCI)
f) Ditrifluoroacetato de (R)-7-(2-(2-Cloro-5-((4-(2-isopropiltiazol-4carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil) fenetilamino)-1-hidroxietil)-4-hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona
HO.
OH [001103] Uma solução de cloridrato de (R)-7-(2-amino-1-hidroxietil)4-hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona (WO2007027134, exemplo 1, etapa
d) (0,145 g) em metanol (2 mL) foi tratada com ácido acético (0,024
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368/638 mL) e agitada durante 5 minutos. Uma solução de 2-(2-cloro-5-((4-(2isopropiltiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9il)metil)fenil)acetaldeído (exemplo 75, etapa e) (0,197 g) em metanol (3 mL) foi em seguida adicionada, e a mistura resultante foi agitada em temperatura ambiente durante 5 minutos, antes do resfriamento em gelo-água e tratamento com cianoboroidreto de sódio (0,039 g). O banho de resfriamento foi removido e a mistura foi agitada em temperatura ambiente durante 140 minutos, antes de tratamento com mais cianoboroidreto de sódio (0,040 g). A mistura foi em seguida agitada durante a noite. Na manhã seguinte, a mistura foi extinta com uma gota de água e a solução foi filtrada e purificada por HPLC preparativa (Sunfire®, gradiente: 15-35% de acetonitrila em 0,2% de TFA aquoso). Frações contendo produto foram concentradas em vácuo e coevaporadas de acetonitrila três vezes para fornecer um resíduo incolor. O resíduo foi triturado com dietil éter para fornecer um sólido, que foi coletado por filtração, lavado com dietil éter e secado em vácuo em temperatura ambiente para fornecer o composto do título como um sólido branco. Produção 0,077 g.
[001104] m/z 686/688 (M+H)+ (APCI) [001105] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO, 90°C) δ 7,94 (s, 1H), 7,53 (d,
J = 8,2 Hz, 1H), 7,48 - 7,39 (m, 2H), 6,94 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 6,77 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 4,91 (dd, J = 8,5, 4,9 Hz, 1H), 4,22 (s, 2H), 3,75 - 3,60 (m, 6H), 3,52 - 2,96 (m, 11H), 2,09 - 1,90 (m, 2H), 1,83 - 1,62 (m, 2H),
1,35 (d, J = 6,9 Hz, 6H). Seis prótons trocáveis não observados.
Exemplo 76
Ditrifluoroacetato de (R)-8-hidróxi-5-(1 -hidróxi-2-(3-((4-(4isopropiltiazol-2-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9il)metil)fenetilamino)etil)quinolin-2(1H)-ona
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a) (R)-5-(1-(terc-butjldjmetjlsj|jlóxj)-2-(3-((4-(4-jsopropjltjazol-2- carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil)fenetilamino)etil)8-hidroxiquinolin-2(1 H)-ona
[001106] Uma solução de (9-(3-(2-hidroxietil)benzil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-4-il)(4-isopropiltiazol-2-il)metanona (exemplo 66, etapa c) (0,195 g) em DCM (20 mL) foi tratada com ácido trifluoroacético (0,034 ml) seguida por periodinano Dess-Martin (0,242 g) e a mistura resultante agitada a 20°C durante 40 minutos. A mistura reacional foi tratada com solução de tiossulfato de sódio saturada (20 mL) e solução de bicarbonato de sódio saturada (20 mL) e acetato de etila (30 mL) e agitada vigorosamente durante 5 minutos. A mistura foi extraída duas vezes com acetato de etila, os orgânicos combinados foram lavados com solução de bicarbonato de sódio saturada, secados sobre sulfato de sódio e filtrados. Ácido acético (0,025 ml) foi adicionado a esta solução e o solvente em seguida removido sob pressão reduzida. O resíduo foi dissolvido em metanol (3 mL) e adicionado a uma solução de (R)-5-(2-amino-1-(terc-butildimetilsililóxi)etil)-8hidroxiquinolin-2(1H)-ona (WO2004106333) (191 mg) em metanol (15 mL). A mistura foi resfriada para 0°C e triacetoxiboroidreto de sódio (0,140 g) foi adicionado em uma porção. A mistura reacional foi agita
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370/638 da a 20°C durante 3 horas. O solvente foi removido sob pressão reduzida e o resíduo dividido entre acetato de etila e solução de bicarbonato de sódio saturada. A camada orgânica foi secada sobre sulfato de sódio, filtrada e o solvente removido sob pressão reduzida. O produto bruto foi purificado por cromatografia de sílica rápida usando 9% de metanol em diclorometano com 1% de amônia aquosa ‘880’ como solvente. Frações puras foram evaporadas até a secura para fornecer o composto do subtítulo. Produção 0,133 g.
[001107] m/z 760 (M+H)+ (APCI)
b) Ditrifluoroacetato de (R)-8-hidróxi-5-(1-hidróxi-2-(3-((4-(4- isopropiltiazol-2-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9il)metil)fenetilamino)etil)quinolin-2(1H)-ona
OH
HO [001108] tri-hidrofluoreto de trietilamina (0,034 mL) em metanol (1 mL) foi adicionado à solução de (R)-5-(1-(terc-butildimetilsililóxi)-2-(3-((4-(4isopropiltiazol-2-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9il)metil)fenetilamino)etil)-8-hidroxiquinolin-2(1H)-ona (exemplo 76, etapa a) (0,133 g) em THF (4 mL) e a mistura reacional deixada descansar a 20°C durante 18 horas. O solvente foi removido sob pressão reduzida e o produto bruto foi purificado por HPLC preparativa (Sunfire®, gradiente: 10-40% de acetonitrila em 0,2% de TFA aquoso). As frações contendo o composto desejado foram evaporadas até a secura para fornecer o composto do título. Produção 0,090 g.
[001109] m/z 646 (M+H)+ (APCI) [001110] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO, 90°C) δ 8,17 (d, J = 10,0 Hz,
1H), 7,51 (s, 1H), 7,44 - 7,33 (m, 4H), 7,14 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,00 (d,
J = 8,2 Hz, 1H), 6,54 (d, J = 10,0 Hz, 1H), 5,38 - 5,33 (m, 1H), 4,28 (s,
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2H), 3,78 - 3,74 (m, 2H), 4,13 - 3,47 (m, 4H), 3,28 (t, J = 8,2 Hz, 2H),
3,21 - 3,00 (m, 9H), 2,09 - 1,99 (m, 2H), 1,84 - 1,72 (m, 2H), 1,26 (d, J = 6,8 Hz, 6H). Seis prótons trocáveis não observados.
Exemplo 77
Ditrifluoroacetato de (R)-5-(2-(2,3-Difluoro-4-(2-(4-(2- isopropiltiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)etóxi) fenetilamino)-1 -hidroxietil)-8-hidroxiquinolin-2(1H)-ona
a) ácido 2-(2,3-difluoro-4-hidroxifenil)acético
OF F
[001111] Uma solução de tribrometo de boro (1M em DCM, 13,4 mL) foi adicionada gota a gota à suspensão de ácido 2-(2,3-difluoro-4metoxifenil)acético (1,18 g) em DCM (5 mL) a -78°C. A reação foi deixada aquecer para TA e agitada durante a noite. A reação foi resfriada para -78°C e uma solução de tribrometo de boro (1M em DCM, 13,4 mL) foi adicionada. A reação foi deixada aquecer para TA e agitada durante 1 hora. A reação foi vertida em gelo. A solução resultante aquosa foi extraída com DCM (5 x 50 mL). A fase aquosa foi em seguida extraída com acetato de etila (3 x 100 mL). As soluções de orgânico foram combinadas, lavadas com salmoura (50 mL), secadas sobre sulfato de magnésio, filtradas e evaporadas para fornecer o composto do subtítulo como um sólido castanho. Produção 1,09 g.
[001112] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO) δ 12,43 (s, 1H), 10,24 (s, 1H), 6,91 (td, J = 8,3, 2,1 Hz, 1H), 6,72 (td, J = 8,3, 1,8 Hz, 1H), 3,54
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372/638 (s, 2H).
b) 2,3-difluoro-4-(2-hidroxietil)fenol
HO λ /) OH [001113] Uma solução de complexo de borano-dimetilsulfeto (2M em THF, 14,4 mL) foi adicionada gota a gota a uma solução de ácido 2(2,3-difluoro-4-hidroxifenil)acético (exemplo 77, etapa a) (1,08 g) em tetra-hidrofurano (25 mL) a 0°C e a mistura resultante foi deixada aquecer para TA e agitada durante a noite. A reação foi extinta com metanol e quando borbulhamento cessou o solvente foi evaporado. O resíduo foi purificado por cromatografia de sílica-gel eluindo com gradiente de 4:1 de iso-hexano:acetato de etila a acetato de etila. As frações contendo produto foram combinadas e evaporadas para fornecer o composto do subtítulo como sólido branco. Produção 0,95 g.
[001114] 1H RMN (300 MHz, Ü6-DMSO) δ 10,08 (s, 1H), 6,87 (td, J =
8,3, 2,2 Hz, 1H), 6,69 (td, J = 8,4, 1,9 Hz, 1H), 4,68 (t, J = 5,3 Hz, 1H),
3,58 - 3,49 (m, 2H), 2,66 (t, J = 7,0 Hz, 2H).
c) 2-(4-(2,2-Dietoxietóxi)-2,3-difluorofenil)etanol
F F /
HO [001115] Carbonato de césio (0,99 g) foi adicionado à solução de
2,3-difluoro-4-(2-hidroxietil)fenol (exemplo 77, etapa b) (0,44 g) e 2bromo-1,1-dietoxietano (0,4 mL) em DMF (10 mL). A suspensão resultante foi aquecida a 90°C durante 18 horas. A reação foi deixada resfriar e vertida em água (100 mL). A mistura aquosa foi extraída com dietiléter (3 x 100 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água (200 mL) e salmoura (200 mL), secadas sobre sulfato de magnésio, filtradas e evaporadas. O material brutofoi purificado por cromatografia de sílica-gel eluindo com gradiente de iso-hexano a 1:1
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373/638 de acetato de etila:iso-hexano. As frações contendo produto foram combinadas e evaporadas para fornecer o composto do subtítulo como um óleo amarelo. Produção 0,49 g.
[001116] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO) δ 7,06 - 6,93 (m, 2H), 4,81 (t, J = 5,1 Hz, 1H), 4,70 (t, J = 5,3 Hz, 1H), 4,02 (d, J = 5,4 Hz, 2H),
3,73 - 3,62 (m, 2H), 3,61 - 3,50 (m, 4H), 2,71 (t, J = 6,9 Hz, 2H), 1,13 (t, J = 7,0 Hz, 6H).
d) 2-(2,3-difluoro-4-(2-hidroxietil)fenóxi)acetaldeído
F F
HO [001117] Ácido clorídrico concentrado (5 mL) foi adicionado à solução de 2-(4-(2,2-dietoxietóxi)-2,3-difluorofenil)etanol (exemplo 77, etapa c) (0,49 g) em 1,4-dioxano (10 mL) e a mistura resultante foi agitada durante 1 hora. A mistura foi cuidadosamente diluída com água (50 mL) e extraída com acetato de etila (3 x 50 mL). Os orgânicos combinados foram lavados com água (50 mL) e salmoura (50 mL), secados sobre sulfato de sódio, filtrados e evaporados para fornecer o composto do subtítulo, que foi usado diretamente. Produção 0,31 g.
e) (9-(2-(2,3-difluoro-4-(2-hidroxietil)fenóxi)etil)-1-oxa-4,9- diazaespiro[5,5]undecan-4-il)(2-isopropiltiazol-4-il)metanona
HO [001118] Trifluoroacetato de (2-isopropiltiazol-4-il)(1-oxa-4,9diazaespiro [5,5]undecan-4-il)metanona (exemplo 22, etapa b) (0,5 g) foi adicionado à solução de 2-(2,3-difluoro-4-(2
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374/638 hidroxietil)fenóxi)acetaldeído (exemplo 77, etapa d) (0,31 g) em Nmetil-2-pirrolidinona (10 mL) e ácido acético (0,07 mL). A mistura resultante foi agitada durante 30 minutos em seguida resfriada em um banho de gelo. Triacetoxiboroidreto de sódio (0,38 g) foi em seguida adicionado e a reação foi deixada aquecer para TA e agitada durante a noite. A mistura reacional foi dividida entre acetato de etila (100 mL) e água (100 mL). A fase aquosa foi basificada com solução de hidrogeno carbonato de sódio saturada e as camadas separadas. A fase aquosa foi extraída com acetato de etila (2 x 100 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água (100 mL) e salmoura (100 mL), secadas sobre sulfato de sódio, filtradas e evaporadas. O resíduo foi purificado por cromatografia de sílica-gel, eluindo com 47,5:47,5:5 de iso-hexano:etilacetato:trietilamina a 5% de trietilamina em acetato de etila. As frações contendo produto foram combinadas e evaporadas para fornecer o composto do subtítulo como uma goma clara. Produção 0,41 g.
[001119] m/z 510 (M+H)+ (APCI) [001120] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO, 90°C) δ 7,93 (s, 1H), 7,06 -
6,85 (m, 2H), 4,58 - 4,36 (m, 1H), 4,13 (t, J = 5,7 Hz, 2H), 3,73 - 3,51 (m, 8H), 3,36 - 3,23 (m, 1H), 2,76 - 2,63 (m, 4H), 1,76 - 1,45 (m, 4H),
1,35 (d, J = 6,9 Hz, 6H) + 4 prótons obscurecidos por pico de DMSO.
f) Ditrifluoroacetato de (R)-5-(2-(2,3-difluoro-4-(2-(4-(2- isopropiltiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9il)etóxi)fenetilamino)-1-hidroxietil)-8-hidroxiquinolin-2(1H)-ona
HO [001121] Ácido trifluoroacético (0,03 mL) foi adicionado à solução de
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375/638 (9-(2-(2,3-difluoro-4-(2-hidroxietil)fenóxi)etil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-4-il)(2-isopropiltiazol-4-il)metanona (exemplo 77, etapa e) (0,18 g) em DCM (5 mL) a 0°C. A reação foi agitada durante 5 minutos, em seguida periodinano Dess-Martin (0,225 g) foi adicionado. A mistura foi deixada aquecer para TA e agitada durante 1 hora. Solução de tiossulfato de sódio saturada (5 mL), solução de bicarbonate de sódio saturada (5 mL) e acetato de etila (20 mL) foram adicionados e a mistura agitada vigorosamente durante 5 minutos. As camadas foram separadas e o aquoso extraído com acetato de etila (20 mL). Os orgânicos combinados foram lavados com salmoura (20 mL), acidificados com algumas gotas de ácido acético, secados sobre sulfato de sódio, filtrados e evaporados. O resíduo foi novamente dissolvido em metanol (5 mL), ácido acético (0,02 mL) e (R)-5-(2-amino-1(terc-butildimetilsililóxi)etil)-8-hidroxiquinolin-2(1H)-ona (WO2004106333) (0,12 g) foram adicionados, a mistura foi agitada durante 5 minutos e resfriada em um banho de gelo. Cianoboroidreto de sódio (0,033 g) foi em seguida adicionado, a reação foi deixada aquecer para TA e agitada durante a noite. A reação foi concentrada e purificada por cromatografia de sílica-gel eluindo com gradiente de 94,5:5:0,5 a 89:10:1 de DCM:metanol:amônia ‘880’ . As frações contendo produto foram combinadas e evaporadas. O resíduo foi dissolvido em THF (5 mL), tri-hidrofluoreto de trietilamina (0,17 mL) foi adicionado e a mistura agitada durante a noite. O solvente foi evaporado e o resíduo azeotropado duas vezes com tolueno. A purificação foi por HPLC preparativa (Sunfire®, gradiente: 10 a 30 % de acetonitrila em 0,2% de TFA aquoso). As frações contendo produto foram combinadas, evaporadas e trituradas com éter para fornecer o composto do título como um sólido branco. Produção 0,11 g.
[001122] m/z 712 (M+H)+ (APCI) [001123] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO, 90°C) δ 8,18 (d, J = 9,7 Hz,
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1H), 7,96 (s, 1H), 7,18 - 6,96 (m, 4H), 6,54 (d, J = 10,0 Hz, 1H), 5,36 (dd, J = 8,7, 4,1 Hz, 1H), 4,50 - 4,42 (m, 2H), 3,76 - 3,65 (m, 6H), 3,62 - 3,54 (m, 2H), 3,44 - 2,98 (m, 11H), 2,12 - 2,01 (m, 2H), 1,90 - 1,75 (m, 2H), 1,35 (d, J = 6,7 Hz, 6H). Seis prótons trocáveis não observados.
Exemplo 78
Ditrifluoroacetato de (R)-7-(2-(3-((4-(2-butiltiazol-4-carbonil)-1 -oxa-
4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil)-2-fluorofenetilamino)-1hidroxietil)-4-hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona
HO
OH
a) terc-butil(2-fluorofenetóxi)dimetilsilano
F [001124] Cloreto de terc-butildimetilsilila (6,45 g) foi adicionado a uma solução agitada de 2-(2-fluorofenil)etanol (5,00 g) e 1H-imidazol (7,29 g) em DMF seco (30 mL) resfriado em um banho de gelo. Após 45 minutos, a mistura reacional foi diluída com acetato de etila, lavada três vezes com água e evaporada em vácuo. A goma resultante foi dissolvida em iso-hexano e aplicada a uma coluna de sílica-gel eluindo com iso-hexano seguida por 1:3 de acetato de etila:iso-hexano para coletar o produto como um óleo. Produção 9,0 g.
[001125] 1H RMN (400 MHz , CDCh) δ 7,28-7,18 (m, 2H), 7,13-7,00 (m, 2H), 3,84 (t, J=6,8Hz, 2H), 2,89 (t, J=7,2Hz, 2H), 0,89 (s, 9H), 0,008 (s, 6H).
b) 3-(2-(terc-butildimetilsililóxi)etil)-2-fluorobenzaldeído
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F O [001126] terc-Butil(2-fluorofenetóxi)dimetilsilano (exemplo 78, etapa a) (5,00 g) foi adicionado durante 5 minutos a uma solução agitada de sec-butil lítio (1,4 molar de solução em ciclo-hexano, 14,0 mL) e N1-(2(dimetilamino)etil)-N1,N2,N2-trimetiletano-1,2-diamina (4,10 mL) em THF (25 mL) resfriado para -78°C. Após 2 horas, N,Ndimetilformamida (10,06 g) foi adicionado, a mistura reacional foi agitada a -78°C durante 1 hora, e em seguida o banho de resfriamento foi removido. Após mais 0,5 hora, a reação foi extinta com água. Acetato de etila (300 mL) foi adicionado e a mistura reacional lavada com água (3 x 150 mL), HCl a 2 M (2 x 50 mL), água (2 x 50 mL), salmoura em seguida secada sobre sulfato de sódio, filtrada e evaporada em vácuo para fornecer o composto do subtítulo como um óleo. Produção 5,3 g.
[001127] 1H RMN (400 MHz, CDCh) δ 10,40 (s, 1H), 7,76 (dt, J= 2,0 e 6,8 Hz, 1H), 7,54 (dt, J= 1,6 e 7,2Hz, 1H), 7,21 (t, J=7,2 Hz, 1H),
3,88 (t, J= 5,2Hz, 2H), 2,95 (dt, J= 1,2 e 6,4Hz, 2H), 0,88 (s, 9H), 0,008 (s, 6H).
c) 1 -(9-(3-(2-(terc-butildimetilsililóxi)etil)-2-fluorobenzil)-1 -oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-4-il)-2,2,2-trifluoroetanona
[001128]
3-(2-(terc-Butildimetilsililóxi)etil)-2-fluorobenzaldeído (exem plo 78, etapa b) (2,159 g) foi adicionado uma solução agitada de triflu oroacetato de 2,2,2-trifluoro-1-(1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4 il)etanona (exemplo 12, etapa d) (2,80 g) e ácido acético (0,438 mL) em NMP (25 mL). Após 5 minutos, triacetoxiboroidreto de sódio (3,24
g) foi adicionado. Após 16 horas, água foi adicionada e a mistura dividida entre água (250 mL) e acetato de etila (250 mL). A solução de
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378/638 acetato de etila foi lavada com água (3 x 250 mL) e salmoura, em seguida evaporada até a secura. Purificação por cromatografia de sílicagel eluindo com 20:1:1,de iso-hexano:acetato de etila:trietilamina forneceu o composto do subtítulo como uma goma. Produção 2,5 g.
[001129] 1H RMN (400 MHz, CDCh) δ 7,27 - 7,20 (m, 1H), 7,20 -
7,13 (m, 1H), 7,08 - 7,01 (m, 1H), 3,84 (t, J = 7,2 Hz, 3H), 3,80 - 3,77 (m, 2H), 3,71 - 3,67 (m, 1H), 3,64 - 3,58 (m, 3H), 3,56 (s, 1H), 3,41 (s, 1H), 2,90 (q, J = 6,4 Hz, 2H), 2,69 - 2,62 (m, 1H), 2,52 - 2,44 (m, 1H),
2,43 - 2,35 (m, 1H), 1,92 - 1,80 (m, 2H), 1,72 - 1,60 (m, 2H), 0,89 (s, 9H), 0,00 (s, 6H).
d) 9-(3-(2-(terc-butildimetilsililóxi)etil)-2-fluorobenzil)-1-oxa-4,9- diazaespiro[5,5]undecano
NH [001130] Amônia aquosa ‘880’ (3,0 mL) foi adicionada a uma solução agitada de 1 -(9-(3-(2-(terc-butildimetilsililóxi)etil)-2-fluorobenzil)-1-oxa-
4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4-il)-2,2,2-trifluoroetanona (exemplo 78, etapa c) (2,5 g) em MeOH (10 mL). Após 1 hora, a mistura reacional foi evaporada até a secura. Acetonitrila foi adicionado, a solução foi evaporada até a secura em vácuo, e o processo repetido três vezes para fornecer o composto do subtítulo como um óleo. Produção 2,07 g. Usado diretamente.
[001131] m/z 423 (M+H)+ (APCI)
e) Pentanotioamida nh2 [001132] Pentassulfeto de fósforo (5,56 g) foi adicionado a uma suspensão agitada de pentanamida (10,0 g) em metil terc-butil éter (300 mL). Após 16 horas, a mistura foi filtrada através de celite e evaporada em vácuo para fornecer o composto do subtítulo como um óleo ama
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379/638 relo. Produção 11,4 g.
[001133] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO) δ 9,35-9,23 (br s, 1H), 9,159,05 (br s, 1H), 2,52-2,42 (m, 2H), 1,68-1,55 (m, 2H), 1,35-1,22 (m, 2H), 0,87 (t, J = 7,6Hz, 3H).
f) 2-butiltiazol-4-carboxilato de etila [001134] 3-Bromo-2-oxopropanoato de etila (6,76 mL) foi adicionado muito cuidadosamente a uma solução agitada de pentanotioamida (exemplo 78, etapa e) (6,30 g) em etanol (100 mL). A solução foi em seguida aquecida ao refluxo durante 16 horas. Após resfriamento, a mistura reacional foi diluída com acetato de etila, lavada com solução de bicarbonato de sódio saturada e evaporada em vácuo. Purificação por cromatografia de sílica-gel eluindo com 1:6 de acetato de etila: isohexano forneceu o composto do subtítulo como um óleo amarelo. Produção 6,5 g.
[001135] 1H RMN (400 MHz, CDCh) δ 8,05 (s, 1H), 4,42 (q, J=7,1Hz,
2H), 3,02-3,05 (m, 2H), 1,85-1,75 (m, 2H), 1,50-1,38 (m, 5H), 0,95 (t, J=7,1Hz, 3H).
g) ácido 2-butiltiazol-4-carboxílico
OH [001136] Hidróxido de lítio (5,00 g) foi adicionado a uma mistura agitada de 2-butiltiazol-4-carboxilato de etila (exemplo 78, etapa f) (6,50 g) em THF (80 mL) e água (20 mL). Após 16 horas, ácido clorídrico concentrado (10 mL) foi adicionado e a solução concentrada para ~40 mL. A mistura reacional foi dividida entre acetato de etila e salmoura. A camada aquosa foi extraída três vezes com acetato de etila. As camadas orgânicas combinadas foram secadas sobre sulfato de magnésio,
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380/638 filtradas e evaporadas em vácuo para fornecer o composto do subtítulo como um sólido não totalmente branco. Produção 4,6 g.
[001137] 1H RMN (300 MHz, CDCh) δ 8,18 (s, 1H), 3,11-3,03 (m,
2H), 1,88-1,78 (m, 2H), 1,52-1,38 (m, 2H), 0,97 (t, J=7,2Hz, 3H). Um próton trocável não observado.
h) (9-(3-(2-(terc-butildimetilsililóxi)etil)-2-fluorobenzil)-1-oxa-4,9- diazaespiro[5,5]undecan-4-il)(2-butiltiazol-4-il)metanona [001138] Hexafluorofosfato de 2-(3H-[1,2,3]triazolo[4,5-b]piridin-3-il)-
1,1,3,3-tetrametilisourônio (V) (0,378 g) foi adicionado a uma solução agitada de ácido 2-butiltiazol-4-carboxílico (exemplo 78, etapa g) (0,193 g), 9-(3-(2-(terc-butildimetilsililóxi)etil)-2-fluorobenzil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecano (exemplo 78, etapa d) (0,4 g), e trietilamina (0,383 g) em DMF (4 mL). Após 1 hora, a mistura reacional foi dividida entre água e acetato de etila. A camada de acetato de etila foi lavada duas vezes com água e salmoura, secada sobre sulfato de magnésio, filtrada e evaporada em vácuo. Purificação por cromatografia de sílicagel eluindo com 7:1:0,5, de iso-hexano:acetato de etila:trietilamina forneceu o composto do subtítulo como uma goma. Produção 0,35 g.
[001139] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO, 90°C) δ 7,94 (s, 1H), 7,30 -
7,16 (m, 2H), 7,13 - 7,05 (m, 1H), 3,88 - 3,80 (m, 2H), 3,74 - 3,62 (m,
6H), 3,55 - 3,49 (m, 2H), 3,09 - 3,00 (m, 2H sob pico de água), 2,87 -
2,79 (m, 2H), 2,49 - 2,32 (m, 4H), 1,84 - 1,68 (m, 4H), 1,62 - 1,51 (m,
2H), 1,50 - 1,39 (m, 2H), 0,97 (t, J = 7,9 Hz, 3H), 0,87 (s, 9H), 0,00 (s,
6H).
i) (2-butiltiazol-4-il)(9-(2-fluoro-3-(2-hidroxietil)benzil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-4-il)metanona
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381/638
HO
N
F [001140] TBAF (solução a 1M em THF, 2,0 mL) foi adicionado à solução de (9-(3-(2-(terc-butildimetilsililóxi)etil)-2-fluorobenzil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-4-il)(2-butiltiazol-4-il)metanona (exemplo 78, etapa h) (0,350 g) em THF (4 mL). Após 0,5 hora, a solução foi concentrada. Purificação por cromatografia de sílica-gel eluindo com 10:1 de acetato de etila; trietilamina forneceu o composto do subtítulo como uma goma. Produção 0,24 g.
[001141] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO, 90°C) δ 7,88 (s, 1H), 7,22 -
7,13 (m, 2H), 7,03 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 4,35 (t, J = 5,2 Hz, 1H), 3,68 -
3,56 (m, 12H), 3,48 (s, 2H), 3,00 (t, J = 7,5 Hz, 2H), 2,75 (t, J = 7,5 Hz, 2H), 2,44 - 2,28 (m, 4H), 1,78 - 1,65 (m, 2H), 1,45 - 1,33 (m, 2H), 0,91 (t, J = 7,5 Hz, 3H).
j) 2-(3-((4-(2-butiltiazol-4-carbonil)-1 -oxa-4,9-diazaespiro[5,5] undecan-9-il)metil)-2-fluorofenil)acetaldeído [001142] Periodinano Dess-Martin (0,278 g) foi adicionado a uma solução agitada de (2-butiltiazol-4-il)(9-(2-fluoro-3-(2-hidroxietil)benzil)-
1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4-il)metanona (exemplo 78, etapa i) (0,240 g) e ácido trifluoroacético (0,058 mL) em DCM (5 mL). Após 1 hora, acetato de etila (30 mL) foi adicionado seguido por uma mistura de solução de tiossulfato de sódio saturada (5 mL) e solução de bicarbonato de sódio saturada (5 mL). A mistura reacional foi bem agitada e separada. A solução de acetato de etila foi lavada com solução de bicarbonato de sódio saturada, água e salmoura. Ácido acético (0,08 mL) foi adicionado, a solução foi secada sobre sulfato de sódio, filtrada
Petição 870190058499, de 25/06/2019, pág. 387/650
382/638 e evaporada em vácuo (temperatura de banho de ~30°C) para fornecer o composto do subtítulo como uma goma. Produção 0,24 g. Usado diretamente.
[001143] m/z 474 (M+H)+ (APCI)
k) Ditrifluoroacetato de (R)-7-(2-(3-((4-(2-butiltiazol-4-carbonil)-1oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil)-2-fluorofenetilamino)1-hidroxietil)-4-hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona
[001144] Ácido acético (0,044 mL) foi adicionado a uma solução agitada de cloridrato de (R)-7-(2-amino-1-hidroxietil)-4hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona (WO2007027134, exemplo 1, etapa d) (0,200 g) e 2-(3-((4-(2-butiltiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil)-2-fluorofenil)acetaldeído (exemplo 78, etapa j) (0,240 g) em MeOH (10 mL). Após 1 minuto, cianoboroidreto de sódio (0,064 g) foi adicionado. Após 1,5 hora, a mistura reacional foi filtrada e purificada por HPLC preparativa (Sunfire®, gradiente: 10-40% de acetonitrila em 0,2% de TFA aquoso). As frações contendo o produto puro foram combinadas e evaporadas em vácuo. Acetonitrila (200 mL) foi adicionado e a solução foi evaporada em vácuo para uma goma. Este processo foi repetido duas vezes. Dietil éter foi adicionado e o composto do título coletado como um sólido. Produção 0,15 g. [001145] m/z 684 (M+H)+ (APCI) [001146] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO, 90°C) δ 11,28 (br s, 1H),
7,92 (s, 1H), 7,52 - 7,37 (m, 2H), 7,25 (t, J = 8,4 Hz, 1H), 6,93 (d, J =
8,3 Hz, 1H), 6,77 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 4,94 - 4,87 (m, 1H), 4,30 (s, 2H),
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383/638
3,70 (br s, 6H), 3,63 (s, 2H), 3,28 - 2,92 (m, 10H), 2,06 - 1,94 (m, 2H),
1,82 - 1,66 (m, 4H), 1,43 - 1,31 (m, 2H), 0,90 (t, J = 7,6 Hz, 3H). Cinco prótons trocáveis não observados.
Exemplo 79
Ditrifluoroacetato de (R)-7-(2-(3-((4-(benzo[b]tiofeno-2-carbonil)-1 oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil)-2-fluorofenetilamino)1-hidroxietil)-4-hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona
HO.
OH
a) Benzo[b]tiofen-2-il(9-(3-(2-(terc-butildimetilsililóxi)etil)-2fluorobenzil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4-il)metanona
F [001147] Hexafluorofosfato de 2-(3H-[1,2,3]triazolo[4,5-b]piridin-3-il)-
1,1,3,3-tetrametilisourônio (V) (0,378 g) foi adicionado a uma solução agitada de ácido benzo[b]tiofeno-2-carboxílico (0,186 g), 9-(3-(2-(tercbutildimetilsililóxi)etil)-2-fluorobenzil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecano (exemplo 78, etapa d) (0,40 g), e trietilamina (0,383 g) em DMF (4 mL). Após 1 hora, a mistura reacional foi dividida entre água e acetato de etila. A camada de acetato de etila foi lavada duas vezes com água e uma vez com salmoura, secada sobre sulfato de magnésio, filtrada e evaporada em vácuo. Purificação por cromatografia de sílica-gel eluindo com 7:1:0,5, de iso-hexano:acetato de etila:trietilamina forneceu o composto do subtítulo como uma goma. Produção 0,38 g.
Petição 870190058499, de 25/06/2019, pág. 389/650
384/638 [001148] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO) δ 8,14 - 8,08 (m, 1H), 8,05 -
7,99 (m, 1H), 7,82 (s, 1H), 7,57 - 7,51 (m, 2H), 7,33 - 7,23 (m, 2H),
7,14 (t, J = 8,1 Hz, 1H), 3,86 (t, J = 7,3 Hz, 2H), 3,81 - 3,72 (m, 4H),
3,63 (s, 2H), 3,56 (s, 2H), 3,38 (s, 2H), 2,86 (t, J = 7,4 Hz, 2H), 2,46 -
2,34 (m, 2H), 1,89 - 1,81 (m, 2H), 1,66 - 1,52 (m, 2H), 0,88 (s, 9H), 0,00 (s, 6H).
b) Benzo[b]tiofen-2-il(9-(2-fluoro-3-(2-hidroxietil)benzil)-1-oxa-4,9- diazaespiro[5,5]undecan-4-il)metanona
HO [001149] TBAF (solução a 1M em THF, 2 mL) foi adicionado à solução de benzo[b]tiofen-2-il(9-(3-(2-(terc-butildimetilsililóxi)etil)-2fluorobenzil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4-il)metanona (exemplo 79, etapa a) (0,370 g) em THF (4 mL). Após 0,5 hora, a solução foi concentrada. Purificação por cromatografia de sílica-gel eluindo com 10:1 de acetato de etila:trietilamina forneceu o composto do subtítulo como uma goma. Produção 0,26 g.
[001150] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO, 90°C) δ 7,99 - 7,95 (m, 1H),
7,93 - 7,88 (m, 1H), 7,67 (s, 1H), 7,46 - 7,39 (m, 2H), 7,17 (q, J = 7,5 Hz, 2H), 7,01 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 4,39 - 4,33 (m, 1H), 3,72 - 3,57 (m, 4H), 3,54 (s, 2H), 3,48 (s, 2H), 2,99 (s, 2H), 2,75 (t, J = 7,6 Hz, 2H),
2,46 - 2,32 (m, 4H), 1,80 - 1,71 (m, 2H), 1,58 - 1,48 (m, 2H).
c) 2-(3-((4-(benzo[b]tiofeno-2-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5] undecan-9-il)metil)-2-fluorofenil)acetaldeído [001151] Periodinano Dess-Martin (0,282 g) foi adicionado a uma solução agitada de benzo[b]tiofen-2-il(9-(2-fluoro-3-(2
Petição 870190058499, de 25/06/2019, pág. 390/650
385/638 hidroxietil)benzil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4-il)metanona (exemplo 79, etapa b) (0,240 g) e ácido trifluoroacético (0,059 mL) em DCM (5 mL). Após 1 hora, acetato de etila (30 mL) foi adicionado seguido por uma mistura de solução de tiossulfato de sódio saturada (5 mL) e solução de bicarbonato de sódio saturada (5 mL). A mistura reacional foi bem agitada e separada. A solução de acetato de etila foi lavada com solução de bicarbonato de sódio saturada, água e salmoura. Ácido acético (0,08 mL) foi adicionado, em seguida a solução foi secada sobre sulfato de sódio, filtrada e evaporada em vácuo (temperatura de banho de ~30oC) para fornecer o composto do subtítulo como uma goma. Produção 0,24 g. Usado diretamente.
[001152] m/z 467 (M+H)+ (APCI)
d) Ditrifluoroacetato de (R)-7-(2-(3-((4-(benzo[b]tiofeno-2-carbonil)1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil)-2-fluorofenetilamino) -1-hidroxietil)-4-hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona
[001153] Ácido acético (0,044 mL) foi adicionado a uma solução agitada de cloridrato de (R)-7-(2-amino-1-hidroxietil)-4hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona (WO2007027134, exemplo 1, etapa d) (0,203 g) e 2-(3-((4-(benzo[b]tiofeno-2-carbonil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil)-2-fluorofenil)acetaldeído (exemplo 79, etapa c) (0,240 g) em MeOH (10 mL). Após 1 minuto, cianoboroidreto de sódio (0,081 g) foi adicionado. Após 1,5 hora, a mistura reacional foi filtrada e purificada por HPLC preparativa (Sunfire®, gradiente: 10-40% de acetonitrila em 0,2% de TFA aquoso). As frações contendo
Petição 870190058499, de 25/06/2019, pág. 391/650
386/638 o produto puro foram combinadas e evaporadas em vácuo. Acetonitrila (200 mL) foi adicionado e a solução foi evaporada em vácuo para uma goma. Este processo foi repetido duas vezes. Dietil éter foi adicionado e o composto do título coletado como um sólido. Produção 0,19 g. [001154] m/z 677 (M+H)+ (APCI) [001155] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO, 90°C) δ 11,28 (s, 1H), 8,00 -
7,95 (m, 1H), 7,92 - 7,88 (m, 1H), 7,69 (s, 1H), 7,50 - 7,38 (m, 4H), 7,25 (t, J = 7,5 Hz, 1H), 6,94 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 6,77 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 4,90 (dd, J = 4,2 e 8,56 Hz, 1H), 4,35 - 4,19 (m, 2H), 3,76 - 3,68 (m, 4H), 3,59 (s, 2H), 3,27 - 2,99 (m, 10H), 2,09 - 1,99 (m, 2H), 1,82 -
1,70 (m, 2H). Cinco prótons trocáveis não observados.
Exemplo 80
Ditrifluoroacetato de (R)-7-(2-(2-Cloro-3-((4-(2-isopropiltiazol-4carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil) fenetilamino)-1-hidroxietil)-4-hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona
HO
OH
a) ácido 2-cloro-3-(cianometil)benzoico
OH [001156] Uma solução de ácido 3-(bromometil)-2-clorobenzoico (6,39 g) em DMF (75 mL) foi tratada com uma solução de cianeto de potássio (3,34 g) em água (25 mL) e a solução resultante foi agitada em temperatura ambiente durante a noite. A mistura foi diluída com água e extraída duas vezes com acetato de etila. As fases orgânicas foram descartadas, embora a fase aquosa foi cuidadosamente acidificada
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387/638 com ácido clorídrico concentrado (25 mL), dando vazão a qualquer HCN liberado através de uma solução de branqueamento por meio de uma corrente de nitrogênio. Após ser agitada durante 2 horas, a fase aquosa foi extraída duas vezes mais com acetato de etila. As fases orgânicas combinadas foram lavadas três vezes com água, uma vez com salmoura, em seguida secadas sobre sulfato de magnésio anidroso e concentradas em vácuo para fornecer o composto do subtítulo cru como um sólido marrom pálido. Produção 4,12 g.
[001157] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO) δ 7,73 (dd, J = 7,7, 1,5 Hz, 1H), 7,69 (dd, J = 7,8, 1,7 Hz, 1H), 7,48 (t, J = 7,7 Hz, 1H), 4,16 (s, 2H) + 1 próton trocável não observado.
b) ácido 3-(carboximetil)-2-clorobenzoico
OH
OH [001158] Hidróxido de potássio (2,976 g) em água (30 mL) foi adicionado a uma suspensão de ácido 2-cloro-3-(cianometil)benzoico (exemplo 80, etapa a) (4,12 g) em etanol (30 mL) e a solução resultante foi aquecida ao refluxo durante 2 horas, em seguida deixada resfriar durante a noite. A mistura foi concentrada em vácuo para remover o etanol e em seguida diluída com água e lavada duas vezes com acetato de etila. As fases orgânicas foram descartadas, embora a fase aquosa foi acidificada para pH 1 com ácido clorídrico concentrado e extraída três vezes com acetato de etila. Os extratos combinados foram secados sobre sulfato de magnésio anidroso e concentrados em vácuo para fornecer o composto do subtítulo cru como um sólido amarelo. Produção 4,11 g. Usado diretamente.
c) 2-(2-Cloro-3-(hidroxjmetjl)fenjl)etanol
HO
OH
Cl [001159] Uma solução de complexo de borano-sulfeto de metila (2M
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388/638 em THF, 20 mL) foi adicionada porção a porção durante 5 minutos a uma suspensão de ácido 3-(carboximetil)-2-clorobenzoico (exemplo 80, etapa b) (4,11 g) em THF seco (100 mL) em temperatura ambiente. A suspensão efervescente resultante foi agitada em temperatura ambiente durante 30 minutos, em seguida aquecida ao refluxo durante 60 minutos, e deixada resfriar para temperatura ambiente durante a noite. A mistura foi extinta pela adição porção a porção de metanol (15 mL) durante 15 minutos. A mistura foi diluída novamente com metanol para fornecer uma solução, que foi em seguida concentrada em vácuo para fornecer um xarope. O xarope foi purificado por cromatografia rápida em sílica eluída com 2% de metanol em diclorometano para fornecer o composto do subtítulo cru como um sólido branco. Produção
1,44 g.
[001160] m/z 186 (M+) (EI)
d) 2-Cloro-3-(2-hidroxietil)benzaldeído
HO
Cl [001161] Dióxido de manganês (IV) (1,599 g) foi adicionado à solução de 2-(2-cloro-3-(hidroximetil)fenil)etanol (exemplo 80, etapa c) (0,342 g) em DCM (20 mL), e a suspensão resultante foi agitada em temperatura ambiente durante a noite. A mistura foi em seguida concentrada em sílica e purificada por cromatografia rápida em sílica eluída com 25% de acetato de etila em iso-hexano para fornecer o composto do subtítulo como um sólido cristalino branco. Produção 0,223 g. [001162] 1H RMN (400 MHz, CDCh) δ 10,54 (d, J = 0,8 Hz, 1H), 7,83 (dd, J = 7,7, 1,5 Hz, 1H), 7,55 (dd, J = 7,7, 1,8 Hz, 1H), 7,35 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 3,94 (dd, J = 11,0, 6,4 Hz, 2H), 3,11 (t, J = 6,6 Hz, 2H), 1,46 (t, J = 4,9 Hz, 1H).
e) (9-(2-Cloro-3-(2-hidroxietil)benzil)-1 -oxa-4,9-diazaespiro[5,5] undecan-4-il)(2-isopropiltiazol-4-il)metanona
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[001163] Uma solução de trifluoroacetato de (2-isopropiltiazol-4-il)(1 oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4-il)metanona (exemplo 22, etapa b) (0,325 g) em NMP (3 mL) foi tratada com ácido acético (0,067 mL) e agitada durante 5 minutos. Uma solução de 2-cloro-3-(2 hidroxietil)benzaldeído (exemplo 80, etapa d) (0,217 g) em NMP (4 mL) foi em seguida adicionada, a solução resultante foi agitada durante 1 hora e em seguida tratada com triacetoxiboroidreto de sódio (1,025 g). A mistura foi agitada durante a noite em temperatura ambiente, em seguida vertida em bicarbonato de sódio saturado e extraída duas vezes com acetato de etila. Os extratos combinados foram lava dos três vezes com água, uma vez com salmoura, em seguida secados sobre sulfato de magnésio anidroso e purificados por cromatografia rápida em sílica eluída com 1:2:97 de trietilamina:metanol:diclorometano para fornecer o composto do subtítulo como uma goma incolor. Produção 0,411 g.
[001164] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO, 90°C) δ 7,91 (d, J = 1,3 Hz, 1H), 7,30 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 7,24 - 7,16 (m, 2H), 4,36 (t, J = 5,1 Hz, 1H), 3,73 - 3,59 (m, 8H), 3,55 (s, 2H), 3,32 (septet, J = 6,8 Hz, 1H),
2,89 (t, J = 7,0 Hz, 2H), 2,46 - 2,40 (m, 1H), 2,40 - 2,28 (m, 1H), 2,17 (t, J = 8,1 Hz, 1H), 1,91 (quintet, J = 7,5 Hz, 1H), 1,77 - 1,65 (m, 2H),
1,62 - 1,50 (m, 2H), 1,36 (d, J = 6,5 Hz, 6H).
f) 2-(2-Cloro-3-((4-(2-isopropiltiazol-4-carbonil)-1 -oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil)fenil)acetaldeído
[001165]
Uma solução de (9-(2-cloro-3-(2-hidroxietil)benzil)-1-oxaPetição 870190058499, de 25/06/2019, pág. 395/650
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4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4-il)(2-isopropiltiazol-4-il)metanona (exemplo 80, etapa e) (0,386 g) em DCM (5 mL) foi resfriada em geloágua, tratada com ácido trifluoroacético (0,125 mL) e agitada durante 5 minutos. Periodinano Dess-Martin (0,519 g) foi adicionado, em seguida a mistura foi removida do banho de resfriamento e agitada em temperatura ambiente durante 35 minutos. A solução foi diluída com solução de tiossulfato de sódio saturada (5 mL), solução de bicarbonato de sódio saturada (5 mL) e acetato de etila (5 mL) e a mistura resultante foi agitada vigorosamente durante 10 minutos. A mistura foi em seguida extraída duas vezes com acetato de etila, as fases orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, acidificadas com ácido acético (0,1 mL), secadas sobre sulfato de magnésio anidroso e concentradas em vácuo para fornecer o composto do subtítulo cru como uma goma amarelo pálido. Produção 0,494 g.
[001166] m/z 476 (M+H)+ (APCI)
g) Ditrifluoroacetato de (R)-7-(2-(2-Cloro-3-((4-(2-isopropiltiazol-4carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil) fenetilamino)-1-hidroxietil)-4-hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona
HO
OH [001167] Uma solução de cloridrato de (R)-7-(2-amino-1-hidroxietil)-
4-hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona (WO2007027134, exemplo 1, etapa d) (0,181 g) em metanol (2 mL) foi tratada com ácido acético (0,030 mL) e agitada durante 10 minutos. Uma solução de 2-(2-cloro-3-((4-(2isopropiltiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9il)metil)fenil)acetaldeído (exemplo 80, etapa f) (0,247 g) em metanol (3
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391/638 mL) foi em seguida adicionada, e a mistura resultante foi agitada em temperatura ambiente durante 10 minutos, antes do resfriamento em gelo-água e tratamento com cianoboroidreto de sódio (0,102 g). O banho de resfriamento foi removido e a mistura foi agitada em temperatura ambiente durante a noite. No próximo dia, mais cianoboroidreto de sódio (0,099 g) foi adicionado, e a mistura foi agitada durante mais 4 horas. A solução foi extinta pela adição de uma gota de água, filtrada, e purificada por HPLC preparativa (Sunfire®, gradiente: 5-50% de acetonitrila em 0,2% de TFA aquoso). Frações contendo produto foram concentradas em vácuo e coevaporadas de acetonitrila três vezes para fornecer um resíduo incolor. O resíduo foi triturado com dietil éter para fornecer um sólido, que foi coletado por filtração, lavado com dietil éter e secado em vácuo em temperatura ambiente para fornecer o composto do título como um sólido branco. Produção 0,053 g.
[001168] m/z 686/688 (M+H)+ (APCI) [001169] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO) δ 11,68 (s, 1H), 10,23 (s, 1H), 8,91 (br d, J = 26,7 Hz, 2H), 8,03 (s, 1H), 7,68 - 7,56 (m, 1H), 7,54 - 7,40 (m, 2H), 6,93 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 6,78 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 6,56 -
6,43 (m, 1H), 4,91 (br d, J = 8,5 Hz, 1H), 4,57 - 4,43 (m, 2H), 3,90 -
3,42 (m, 6H), 3,38 - 3,25 (m, 4H), 3,24 - 3,02 (m, 7H), 2,08 (br d, J =
13,3 Hz, 2H), 1,92 - 1,54 (m, 2H), 1,34 (d, J = 6,7 Hz, 6H). Um próton trocável não observado.
Exemplo 81
Ditrifluoroacetato de (R)-5-(2-(2-Cloro-3-((4-(2-isopropiltiazol-4carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil) fenetilamino)-1 -hidroxietil)-8-hidroxiquinolin-2(1 H)-ona
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392/638
a) (R)-5-(1 -(terc-butildimetilsililóxi)-2-(2-cloro-3-((4-(2- isopropil- tiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil) fenetilamino)etil)-8-hidroxiquinolin-2(1H)-ona
solução de
[001170] Uma (R)-5-(2-amino-1-(tercbutildimetilsililóxi)etil)-8-hidroxiquinolin-2(1 H)-ona (WO2004106333) (0,261 g) em metanol (2 mL) foi tratada com ácido acético (0,030 mL) e agitada durante 10 minutos. Uma solução de 2-(2-cloro-3-((4-(2 isopropiltiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9il)metil)fenil)acetaldeído (exemplo 80, etapa f) (0,247 g) em metanol (3 mL) foi em seguida adicionada, e a mistura resultante foi agitada em temperatura ambiente durante 10 minutos, antes do resfriamento em gelo-água e tratamento com cianoboroidreto de sódio (0,102 g). O banho de resfriamento foi removido e a mistura foi agitada em temperatura ambiente durante a noite. Mais cianoboroidreto de sódio (0,101 g) foi adicionado, e a mistura foi agitada durante uma segunda noite. A solução foi em seguida concentrada em sílica rápida em vácuo, e o pó resultante foi purificado por cromatografia rápida em sílica eluída com 1:3:96 a 1:5:94 de trietilamina:metanol:diclorometano para fornecer o
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393/638 composto do subtítulo como um óleo amarelo. Produção 0,130 g. [001171] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO, 90°C) δ 8,40 (d, J = 9,7 Hz,
1H), 8,10 (s, 1H), 7,48 (dd, J = 7,3, 2,1 Hz, 1H), 7,38 - 7,30 (m, 2H),
7,17 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,09 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 6,65 (d, J = 9,7 Hz, 1H), 5,26 (dd, J = 7,6, 5,0 Hz, 1H), 3,91 - 3,78 (m, 6H), 3,72 (s, 2H),
3,55 - 3,46 (m, 1H), 3,10 - 3,03 (m, 1H), 2,99 (s, 4H), 2,93 - 2,86 (m, 1H), 2,68 - 2,47 (m, 4H), 1,94 - 1,84 (m, 2H), 1,80 - 1,68 (m, 2H), 1,55 (d, J = 7,0 Hz, 6H), 0,99 (s, 9H), 0,18 (d, J = 4,6 Hz, 6H). Três prótons trocáveis não observados.
b) Ditrifluoroacetato de (R)-5-(2-(2-Cloro-3-((4-(2-isopropiltiazol-4carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9il)metil)fenetilamino)-1-hidroxietil)-8-hidroxiquinolin-2(1H)-ona
HO
OH [001172] Uma solução de (R)-5-(1-(terc-butildimetilsililóxi)-2-(2-cloro-
3-((4-(2-isopropiltiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan9-il)metil)fenetilamino)etil)-8-hidroxiquinolin-2(1H)-ona (exemplo 81, etapa a) (0,124 g) e tri-hidrofluoreto de trietilamina (0,051 mL) em THF (5 mL) foi agitada em temperatura ambiente durante a noite em seguida concentrada em vácuo. O resíduo foi dissolvido em metanol (4 mL) e a solução resultante foi filtrada e purificada por HPLC preparativa (Sunfire®, gradiente: 10 a 30 % de acetonitrila em 0,2% de TFA aquoso). Frações contendo produto foram concentradas em vácuo e coevaporadas de acetonitrila três vezes para fornecer um resíduo incolor. O resíduo foi triturado com dietil éter para fornecer um sólido, que foi coletado por filtração, lavado com dietil éter e secado em vácuo em
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394/638 temperatura ambiente para fornecer o composto do título como um pó branco. Produção 0,076 g.
[001173] m/z 680/682 (M+H)+ (APCI) [001174] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO, 90°C) δ 8,17 (d, J = 10,0 Hz,
1H), 7,94 (s, 1H), 7,55 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 7,47 - 7,34 (m, 2H), 7,14 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 6,99 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 6,55 (d, J = 10,0 Hz, 1H), 5,34 (dd, J = 9,1, 4,0 Hz, 1H), 4,33 - 4,09 (br m, 2H), 3,77 - 3,60 (m, 6H),
3,44 - 2,87 (m, 11H), 2,02 - 1,87 (m, 2H), 1,81 - 1,65 (m, 2H), 1,35 (d, J = 6,9 Hz, 6H). Seis prótons trocáveis não observados.
Exemplo 82
Ditrifluoroacetato de (R)-4-hidróxi-7-(1 -hidróxi-2-(3-((4-(5isopropiltiofeno-3-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9il)metil)fenetilamino)etil)benzo[d]tiazol-2(3H)-ona
OH
a) 2-(3-(1-Oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-ilmetil)fenil)etanol
[001175] Solução de amônia ‘880’ (5 mL) foi adicionada à solução de
2,2,2-trifluoro-1-(9-(3-(2-hidroxietil)benzil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-4-il)etanona (exemplo 12, etapa e) (2,02 g) em metanol (25 mL). A mistura resultante foi agitada durante 90 minutos e o solvente evaporado. O resíduo foi purificado por cromatografia de sílica-gel eluindo com 94,5:5:0,5 a 89:10:1 de gradiente de DCM:metanol:amônia aquosa ‘880’. As frações contendo produto foram combinadas e evaporadas para fornecer o composto do subtítulo como um óleo claro. Produção 1,44 g.
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395/638 [001176] m/z 291 (M+H)+ (APCI) [001177] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO, 90°C) δ 7,18 (t, J = 7,4 Hz,
1H), 7,13 - 7,02 (m, 3H), 4,34 (s, 1H), 3,61 (t, J = 6,9 Hz, 2H), 3,51 -
3,45 (m, 2H), 3,41 (s, 2H), 2,71 (t, J = 6,9 Hz, 2H), 2,62 (t, J = 4,9 Hz, 2H), 2,52 (s, 2H), 2,42 - 2,23 (m, 4H), 1,82 - 1,72 (m, 2H), 1,53 - 1,38 (m, 2H). Um próton trocável não observado.
b) (9-(3-(2-Hidroxietil)benzil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4il)(5-isopropiltiofen-3-il)metanona
HO [001178] Hexafluorofosfato de O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N’,Ntetrametilurônio (0,55 g) foi adicionado à solução de 2-(3-(1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9-ilmetil)fenil)etanol (exemplo 82, etapa a) (0,32 g), ácido 5-isopropiltiofeno-3-carboxílico (0,19 g) e trietilamina (0,61 mL) em DMF (7 mL) a 0°C. A solução amarela resultante foi deixada aquecer para TA e foi agitada durante 2 horas. A mistura foi dividida entre acetato de etila (100 mL) e salmoura (100 mL), a fase orgânica foi lavada com salmoura (2 x 100 mL), secada sobre sulfato de sódio, filtrada e o solvente evaporado. A goma resultante foi purificada por cromatografia de sílica-gel eluindo com gradiente de 47,5:47,5:5 de iso-hexano:acetato de etila:trietilamina a 95:5 de acetato de etila:trietilamina. As frações contendo produto foram combinadas, tolueno (200 mL) foi adicionado, e o solvente evaporado sob pressão reduzida para fornecer o composto do subtítulo como uma goma clara. Produção 0,4 g.
[001179] m/z 443 (M+H)+ (APCI)
c) Ditrifluoroacetato de (R)-4-hidróxi-7-(1-hidróxi-2-(3-((4-(5- isopropiltiofeno-3-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9il)metil)fenetilamino)etil)benzo[d]tiazol-2(3H)-ona
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396/638
OH [001180] Ácido trifluoroacético (0,035 mL) foi adicionado a solução de (9-(3-(2-hidroxietil)benzil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4-il)(5isopropiltiofen-3-il)metanona (exemplo 82, etapa b) (0,2 g) em DCM (5 mL) a 0°C. A mistura foi agitada durante 5 minutos em seguida periodinano Dess-Martin (0,29 g) foi adicionado. A solução amarela resultante foi deixada aquecer para TA e agitada durante 1 hora. Uma mistura de solução de tiossulfato de sódio saturada (5 mL), solução de bicarbonato de sódio saturada (5 mL) e acetato de etila (20 mL) foi em seguida adicionada e a mistura resultante agitada vigorosamente durante 10 minutos. A fase aquosa foi separada e extraída com acetato de etila (20 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (20 mL), acidificadas com algumas gotas de ácido acético, secadas sobre sulfato de sódio, filtradas e evaporadas em vácuo. O resíduo foi dissolvido em metanol (5 mL), ácido acético (0,026 mL) e cloridrato de (R)-7-(2-amino-1-hidroxietil)-4-hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)ona (WO2007027134, exemplo 1, etapa d) (0,14 g) foram em seguida adicionados e a mistura agitada durante 5 minutos antes do resfriamento em um banho de gelo. Cianoboroidreto de sódio (0,043 g) foi em seguida adicionado, a mistura deixada aquecer para TA e agitada durante a noite. O solvente foi evaporado em vácuo. A purificação foi por cromatografia de sílica-gel eluindo com 94,5:5:0,5 a 89:10:1 de gradiente de DCM:metanol:amônia aquosa ‘880’. As frações contendo produto foram combinadas e evaporadas em vácuo. Além disso, a purificação foi por HPLC preparativa (Sunfire®, gradiente: 10-40% de acetonitrila em 0,2% de TFA aquoso). As frações contendo produto foram
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397/638 combinadas, evaporadas em vácuo e o resíduo triturado com dietiléter para fornecer o composto do título como um sólido branco. Produção 0,07 g.
[001181] m/z 651 (M+H)+ (APCI) [001182] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO, 90°C) δ 7,50 - 7,32 (m, 5H),
6,96 - 6,88 (m, 2H), 6,77 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 4,98 - 4,88 (m, 1H), 4,28 (s, 2H), 3,72 - 3,63 (m, 2H), 3,59 - 3,34 (m, 4H), 3,29 - 2,97 (m, 11H),
2,11 - 1,93 (m, 2H), 1,86 - 1,68 (m, 2H), 1,28 (d, J = 6,7 Hz, 6H). Seis prótons trocáveis não observados.
Exemplo 83
DitrÍfluoroacetato de (R)-8-hidróxi-5-(1 -hidróxi-2-(3-((4-(5isopropiltiofeno-3-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9il)metil)fenetilamino)etil)quinolin-2(1H)-ona
HO
OH [001183] TFA (0,04 mL) foi adicionado a solução de (9-(3-(2hidroxietil)benzil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4-il)(5isopropiltiofen-3-il)metanona (exemplo 82, etapa b) (0,2 g) em DCM (5 mL) a 0°C. A reação foi agitada durante 5 minutos em seguida periodinano Dess-Martin (0,29 g) foi adicionado. A mistura foi deixada aquecer para TA e agitada durante 1 hora. Solução de tiossulfato de sódio saturada (5 mL), solução de bicarbonato de sódio saturada (5 mL) e acetato de etila (20 mL) foram adicionados e a mistura agitada vigorosamente durante 5 minutos. As camadas foram separadas e o aquoso extraído com acetato de etila (20 mL). Os orgânicos combinados foram lavados com salmoura (20 mL), acidificados com algumas gotas de ácido acético, secados sobre sulfato de sódio, filtrados e evaporados. O resíduo foi novamente dissolvido em metanol (5 mL), ácido acético
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398/638 (0,03 mL) e (R)-5-(2-amino-1-(terc-butildimetilsililóxi)etil)-8hidroxiquinolin-2(1H)-ona (WO2004106333) (0,15 g) foram adicionados, em seguida a mistura foi agitada durante 5 minutos e resfriada em um banho de gelo. Cianoboroidreto de sódio (0,043 g) foi em seguida adicionado, a reação foi deixada aquecer para TA e agitada durante a noite. A reação foi concentrada e purificada por cromatografia de sílica-gel eluindo com gradiente de 94,5:5:0,5 a 89:10:1 de DCM:metanol:amônia ‘880’. As frações contendo produto foram combinadas e evaporadas. O resíduo foi dissolvido em THF (5 mL), trihidrofluoreto de trietilamina (0,22 mL) foi adicionado e a mistura agitada durante a noite. O solvente foi evaporado e o resíduo azeotropado duas vezes com tolueno. A purificação foi por HPLC preparativa (Sunfire®, gradiente: 10 a 30 % de acetonitrila em 0,2% de TFA aquoso). As frações contendo produto foram combinadas, evaporadas e trituradas com dieltiléter para fornecer o composto do título como um sólido branco. Produção 0,06 g.
[001184] m/z 645 (M+H)+ (APCI) [001185] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO, 90°C) δ 8,17 (d, J = 9,7 Hz,
1H), 7,48 (s, 1H), 7,45 - 7,33 (m, 4H), 7,14 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,00 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 6,90 (s, 1H), 6,54 (d, J = 10,0 Hz, 1H), 5,36 (dd, J =
8,5, 4,1 Hz, 1H), 4,29 (s, 2H), 3,72 - 3,63 (m, 2H), 3,57 - 3,38 (m, 4H),
3,28 (t, J = 8,1 Hz, 2H), 3,22 - 2,98 (m, 9H), 2,10 - 1,95 (m, 2H), 1,81 -
1,62 (m, 2H), 1,28 (d, J = 6,7 Hz, 6H). Seis prótons trocáveis não ob- servados.
Exemplo 84
Ditrifluoroacetato de (R)-4-hidróxi-7-(1 -hidróxi-2-(3-((4-(2isobutiltiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9il)metil)fenetilamino)etil)benzo[d]tiazol-2(3H)-ona
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399/638
OH
a) (9-(3-(2-Hidroxietil)benzil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4- il)(2-isobutiltiazol-4-il)metanona
[001186] Hexafluorofosfato de O-(7-azabenzotnazo\-1-'\\)-N,N,N’,N’tetrametilurônio (0,34 g) foi adicionado à solução de 2-(3-(1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9-ilmetil)fenil)etanol (exemplo 82, etapa a) (0,2 g), ácido 2-isobutiltiazol-4-carboxílico (0,13 g) e trietilamina (0,38 mL) em DMF (7 mL) a 0°C. A solução amarela resultante foi deixada aquecer para TA e foi agitada durante 2 horas. A mistura foi dividida entre acetato de etila (100 mL) e salmoura (100 mL), a fase orgânica foi lavada com salmoura (2 x 100 mL), secada sobre sulfato de sódio, filtrada e o solvente evaporado. A goma resultante foi purificada por cromatografia de sílica-gel eluindo com gradiente de 47,5:47,5:5 de iso-hexano:acetato de etila:trietilamina a 95:5 de acetato de eti la:trietilamina. As frações contendo produto foram combinadas, tolueno (200 mL) foi adicionado, e o solvente evaporado sob pressão reduzida para fornecer o composto do subtítulo como uma goma clara. Produção 0,2 g.
[001187] m/z 458 (M+H)+ (APCI) [001188] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO, 90°C) δ 7,99 (s, 1H), 7,26 7,03 (m, 4H), 4,60 (t, J = 5,3 Hz, 1H), 3,72 - 3,50 (m, 8H), 3,46 - 3,34 (m, 2H), 2,94 - 2,84 (m, 2H), 2,71 (t, J = 7,1 Hz, 2H), 2,43 - 2,01 (m, 5H), 1,74 - 1,37 (m, 4H), 1,01 - 0,90 (m, 6H)
b) Ditrifluoroacetato de (R)-4-hidróxi-7-(1-hidróxi-2-(3-((4-(2
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400/638 isobutiltiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9il)metil)fenetilamino)etil)benzo[d]tiazol-2(3H)-ona
HO
OH [001189] Ácido trifluoroacético (0,032 mL) foi adicionado a (9-(3-(2hidroxietil)benzil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4-il)(2isobutiltiazol-4-il)metanona (exemplo 84, etapa a) (0,19 g) em DCM (5 mL) a 0°C. A mistura foi agitada durante 5 minutos em seguida periodinano Dess-Martin (0,26 g) foi adicionado. A solução amarela resultante foi deixada aquecer para TA e agitada durante 1 hora. Uma mistura de solução de tiossulfato de sódio saturada (5 mL), solução de bicarbonato de sódio saturada (5 mL) e acetato de etila (20 mL) foi em seguida adicionada e a mistura resultante agitada vigorosamente durante 10 minutos. A fase aquosa foi separada e extraída com acetato de etila (20 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (20 mL), acidificadas com algumas gotas de ácido acético, secadas sobre sulfato de sódio, filtradas e evaporadas em vácuo. O resíduo foi dissolvido em metanol (5 mL), ácido acético (0,024 mL) e cloridrato de (R)-7-(2-amino-1-hidroxietil)-4-hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)ona (WO2007027134, exemplo 1, etapa d) (0,11 g) foram em seguida adicionados e a mistura foi agitada durante 5 minutos antes do resfriamento em um banho de gelo. Cianoboroidreto de sódio (0,04 g) foi em seguida adicionado, a mistura foi deixada aquecer para TA e agitada durante a noite. O solvente foi evaporado em vácuo. A purificação foi por cromatografia de sílica-gel eluindo com 94,5:5:0,5 a 89:10:1 de gradiente de DCM:metanol:amônia aquosa ‘880’. As frações contendo produto foram combinadas e evaporadas em vácuo. Além disso, a pu
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401/638 rificação foi por HPLC preparativa (Sunfire®, gradiente: 10-35% de acetonitrila em 0,2% de TFA aquoso). As frações contendo produto foram combinadas, evaporadas em vácuo e o resíduo triturado com dietiléter para fornecer o composto do título como um sólido branco. Produção 0,1 g.
[001190] m/z 666 (M+H)+ (APCI) [001191] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO, 90°C) δ 11,27 (s, 1H), 7,93 (s, 1H), 7,44 - 7,33 (m, 4H), 6,93 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 6,77 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 4,92 (dd, J = 7,9, 5,1 Hz, 1H), 4,34 - 4,21 (m, 2H), 3,73 - 3,60 (m, 6H), 3,28 - 2,96 (m, 10H), 2,88 (d, J = 6,9 Hz, 2H), 2,11 - 1,95 (m, 3H), 1,84 - 1,64 (m, 2H), 0,95 (d, J = 6,7 Hz, 6H). Cinco prótons trocáveis não observados.
Exemplo 85
Ditrifluoroacetato de (R)-7-(2-(2-fluoro-3-((4-(6-isopropilpicolinoil)1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil)fenetilamino)-1hidroxietil)-4-hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona
HO
OH
a) 2-isopropilpiridina [001192] Uma solução de butil lítio (1,6M em hexanos, 50 mL) foi adicionada gota a gota durante 20 minutos a uma solução de 2etilpiridina (9,34 mL) em tetra-hidrofurano (50 mL) a -70°C. A mistura foi agitada durante 2 horas em seguida iodeto de metila (5 mL) foi adicionado gota a gota durante 15 minutos. A suspensão laranja resultante foi deixada aquecer para TA e agitada durante a noite. O solvente
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402/638 foi evaporado e o resíduo diluído com dietiléter (100 mL). A camada orgânica foi lavada com água (2 x 100 mL) e salmoura (100 mL), em seguida secada sobre sulfato de sódio, filtrada e evaporada para fornecer o composto do subtítulo como um óleo amarelo. Produção 9,1 g. [001193] m/z 122 (M+H)+ (APCI) [001194] 1H RMN (300 MHz, CDCU) δ 8,56 - 8,52 (m, 1H), 7,60 (td,
J = 7,7, 2,1 Hz, 1H), 7,19 - 7,15 (m, 1H), 7,09 (ddd, J = 7,4, 4,9, 1,2 Hz, 1H), 3,06 (septet, J = 6,9 Hz, 1H), 1,31 (d, J = 6,9 Hz, 6H).
b) 1-óxido de 2-isopropjlpjridjna [001195] MCPBA (22,0 g) foi adicionado à solução de 2isopropilpiridina (exemplo 85, etapa a) (9,1 g) em DCM (250 mL) e a mistura resultante agitada durante 3 horas. A mistura reacional foi lavada com solução de bicarbonato de sódio saturada (4 x 100 mL) e salmoura (100 mL), em seguida secada sobre sulfato de sódio, filtrada e evaporada. A purificação foi por cromatografia de sílica-gel eluindo com gradiente de acetato de etila a 10% de metanol em acetato de etila. As frações contendo produto foram combinadas e evaporadas para fornecer o composto do subtítulo como um óleo amarelo. Produção 3,9 g.
[001196] m/z 138 (M+H)+ (APCI) [001197] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO) δ 8,23 (dd, J = 6,2, 1,5 Hz,
1H), 7,41 (dd, J = 7,7, 2,3 Hz, 1H), 7,35 - 7,24 (m, 2H), 3,56 (septet, J = 7 Hz, 1H), 1,20 (d, J = 7 Hz, 6H).
c) 6-isopropilpicolinonitrila [001198] Cianeto de trimetilsilila (1,53 mL) foi adicionado à solução
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403/638 de 1-óxido de 2-isopropilpiridina (exemplo 85, etapa b) (1,3 g) em DCM (40 mL) e a mistura resultante foi agitada durante 5 minutos. Cloreto de dietilcarbamoíla (1,2 mL) foi adicionado e a mistura agitada durante 3 dias. Uma solução aquosa de carbonato de potássio (10%, 40 mL) foi adicionada e a mistura agitada durante 10 minutos. As camadas foram separadas e a fase aquosa extraída com DCM (2 x 40 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (40 mL), secadas sobre sulfato de sódio, filtradas e evaporadas. A purificação foi por cromatografia de sílica-gel eluindo com 3:1 de isohexano:acetato de etila. As frações contendo produto foram combinadas e evaporadas para fornecer o composto do subtítulo como um óleo claro. Produção 1,23 g.
[001199] m/z 147 (M+H)+ (APCI) [001200] 1H RMN (300 MHz, CDC1s) δ 7,74 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 7,51 (dd, J = 7,6, 0,9 Hz, 1H), 7,39 (dd, J = 8,1, 0,9 Hz, 1H), 3,11 (septet, J = 6,7 Hz, 1H), 1,31 (d, J = 6,7 Hz, 6H).
d) ácido 6-isopropilpicolínico
HO [001201] Ácido clorídrico concentrado (15 mL) foi adicionado à solução de 6-isopropilpicolinonitrila (exemplo 85, etapa c) (1,23 g) em metanol (30 mL). A mistura resultante foi aquecida ao refluxo durante 17 horas e deixada resfriar para TA. A mistura foi cautelosamente vertida em solução de hidróxido de sódio (10M, 50 mL) e agitada a TA durante a noite. A reação foi concentrada e o pH ajustado para 5 usando Solução de HCl a 2 M. A mistura aquosa foi extraída com clorofórmio (3 x 100 mL). As soluções de orgânico foram combinadas, lavadas com salmoura (100 mL), secadas sobre sulfato de sódio, filtradas e evaporadas para fornecer o composto do subtítulo como um óleo amarelo. Produção 0,94 g.
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404/638 [001202] m/z 166 (M+H)+ (APCI) [001203] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO) δ 7,89 - 7,81 (m, 2H), 7,48 (dd, J = 7,2, 1,3 Hz, 1H), 3,05 (septet, J = 6,9 Hz, 1H), 1,22 (d, J = 6,9 Hz, 6H). Um próton trocável não observado.
e) (9-(2-fluoro-3-(2-hidroxietil)benzil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5] undecan-4-il)(6-isopropilpiridin-2-il)metanona
HO [001204] Hexafluorofosfato de O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N’,Ntetrametilurônio (0,20 g) foi adicionado à solução de 9-(3-(2-(tercbutildimetilsililóxi)etil)-2-fluorobenzil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecano (exemplo 78, etapa d) (0,17 g), ácido 6isopropilpicolínico (exemplo 85, etapa d) (0,07 g) e trietilamina (0,22 mL) em DMF (7 mL) a 0°C. A solução amarela resultante foi deixada aquecer para TA e foi agitada durante 2 horas. A mistura foi dividida entre acetato de etila (100 mL) e salmoura (100 mL). A fase orgânica foi separada, lavada com salmoura (2 x 100 mL), secada sobre sulfato de sódio, filtrada e o solvente evaporado. O resíduo foi dissolvido em THF (10 mL) e uma solução de TBAF em THF (1M, 0,8 mL) foi adicionada. A mistura resultante foi agitada durante 2 horas e o solvente evaporado. A purificação foi por cromatografia de sílica-gel eluindo com gradiente de 47,5:47,5:5 de iso-hexano:acetato de etila:trietilamina a 95:5 de acetato de etila:trietilamina. As frações contendo produto foram combinadas, tolueno (50 mL) foi adicionado e o solvente evaporado sob pressão reduzida para fornecer o composto do subtítulo como uma goma clara. Produção 0,2 g.
[001205] m/z 456 (M+H)+ (APCI)
f) Ditrifluoroacetato de (R)-7-(2-(2-fluoro-3-((4-(6- isopropilpicolinoil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil)
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405/638 fenetjlamjno)-1-hjdroxjetjl)-4-hjdroxjbenzo[d]tjazol-2(3H)-ona
HO
OH [001206] TFA (0,034 mL) foi adicionado à solução de (9-(2-fluoro-3(2-hidroxietil)benzil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4-il)(6isopropilpiridin-2-il)metanona (exemplo 85, etapa e) (0,2 g) em DCM (5 mL) a 0°C. A mistura foi agitada durante 5 minutos em seguida periodinano Dess-Martin (0,28 g) foi adicionado. A solução amarela resultante foi deixada aquecer para TA e agitada durante 1 hora. Uma mistura de solução de tiossulfato de sódio saturada (5 mL), solução de bicarbonato de sódio saturada (5 mL) e acetato de etila (20 mL) foi em seguida adicionada e a mistura resultante agitada vigorosamente durante 10 minutos. A fase aquosa foi separada e extraída com acetato de etila (20 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (20 mL), acidificadas com algumas gotas de ácido acético, secadas sobre sulfato de sódio, filtradas e evaporadas em vácuo. O resíduo foi dissolvido em metanol (5 mL), ácido acético (0,025 mL) e cloridrato de (R)-7-(2-amino-1-hidroxietil)-4-hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)ona (WO2007027134, exemplo 1, etapa d) (0,12 g) foram em seguida adicionados e a mistura agitada durante 5 minutos antes do resfriamento em um banho de gelo. Cianoboroidreto de sódio (0,04 g) foi em seguida adicionado, a mistura deixada aquecer para TA e agitada durante a noite. O solvente foi evaporado em vácuo. A purificação foi por cromatografia de sílica-gel eluindo com 94,5:5:0,5 a 89:10:1 de gradiente de DCM:metanol:amônia aquosa ‘880’. As frações contendo produto foram combinadas e evaporadas em vácuo. Além disso, a purificação foi por HPLC preparativa (Sunfire®, gradiente: 10-35% de aceto
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406/638 nitrila em 0,2% de TFA aquoso). As frações contendo produto foram combinadas, evaporadas em vácuo e o resíduo triturado com dietiléter para fornecer o composto do título como um sólido branco. Produção 0,057 g.
[001207] m/z 664 (M+H)+ (APCI) [001208] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO, 90°C) δ 11,27 (s, 1H), 7,81 (t, J = 7,7 Hz, 1H), 7,54 - 7,21 (m, 5H), 6,94 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 6,77 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 4,97 - 4,82 (m, 1H), 4,40 - 4,25 (m, 2H), 3,77 - 3,47 (m, 6H), 3,29 - 2,99 (m, 11H), 2,11 - 1,62 (m, 4H), 1,24 (d, J = 6,9 Hz, 6H). Cinco prótons trocáveis não observados.
Exemplo 86
Ditrifluoroacetato de (R)-7-(2-(3-((4-(5-etiltiofeno-3-carbonil)-1 -oxa-
4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil)fenetilamino)-1-hidroxietil)4-hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona
HO
OH
a) (5-etiltiofen-3-il)(9-(3-(2-hidroxietil)benzil)-1-oxa-4,9-diazaespiro [5,5]undecan-4-il)metanona
HO [001209] HATU (0,209 g) foi adicionado a uma solução agitada de ácido 5-etiltiofeno-3-carboxílico (0,086 g), 2-(3-(1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9-ilmetil)fenil)etanol (exemplo 82, etapa a) (0,160 g), e trietilamina (0,3 mL) em DMF (2 mL). Após 1 hora, a mistura reacional foi diluída com acetato de etila (25 mL) e lavada com sal
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407/638 moura (2 x 25 mL). A camada de acetato de etila foi evaporada em vácuo. Purificação por cromatografia de sílica-gel eluindo com 10:1, de acetato de etila:trietilamina forneceu o composto do subtítulo como uma goma. Produção 0,18 g.
[001210] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO, 90°C) δ 7,52 (s, 1H), 7,20 (t,
J = 7,4 Hz, 1H), 7,13 - 7,05 (m, 3H), 6,90 (s, 1H), 4,60 (t, J = 5,3 Hz, 1H), 3,64 - 3,55 (m, 4H), 3,53 - 3,46 (m, 2H), 3,31 (s, 4H), 2,81 (q, J =
7,3 Hz, 2H), 2,74 - 2,66 (m, 2H), 2,37 - 2,23 (m, 4H), 1,75 - 1,65 (m, 2H), 1,56 - 1,35 (m, 2H), 1,24 (t, J = 7,7 Hz, 3H).
b) 2-(3-((4-(5-etiltiofeno-3-carbonil)-1 -oxa-4,9-diazaespiro[5,5] undecan-9-il)metil)fenil)acetaldeído [001211] Periodinano Dess-Martin (0,232 g) foi adicionado a uma solução agitada de (5-etiltiofen-3-il)(9-(3-(2-hidroxietil)benzil)-1-oxa-
4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4-il)metanona (exemplo 86, etapa a) (0,180 g) e ácido trifluoroacético (0,042 mL) em DCM (5 mL). Após 1 hora, acetato de etila (30 mL) foi adicionado seguido por uma mistura de solução de tiossulfato de sódio saturada (5 mL) e solução de bicarbonato de sódio saturada (5 mL). A mistura reacional foi bem agitada e separada. A solução de acetato de etila foi lavada com solução de bicarbonato de sódio saturada, água e salmoura. Ácido acético (0,08 mL) foi adicionado, a solução foi secada sobre sulfato de sódio, filtrada e evaporada em vácuo (temperatura de banho de ~30°C) para fornecer o composto do subtítulo como uma goma. Produção 0,17 g. Usado diretamente.
[001212] m/z 427 (M+H)+ (APCI)
c) Ditrifluoroacetato de (R)-7-(2-(3-((4-(5-etiltiofeno-3-carbonil)-1oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil)fenetilamino)-1hidroxietil)-4-hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona
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OH [001213] Ácido acético (0,036 mL) foi adicionado a uma solução agitada de cloridrato de (R)-7-(2-amino-1-hidroxietil)-4hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona (WO2007027134, exemplo 1, etapa d) (0,166 g) e 2-(3-((4-(5-etiltiofeno-3-carbonil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil)fenil)acetaldeído (exemplo 86, etapa b) (0,180 g) em metanol (8 mL). Após 1 minuto, cianoboroidreto de sódio (0,080 g) foi adicionado. Após 1,5 hora, a mistura reacional foi filtrada e purificada por HPLC preparativa (Sunfire®, gradiente: 10-40% de acetonitrila em 0,2% de TFA aquoso. As frações contendo o produto puro foram combinadas e evaporadas em vácuo. Acetonitrila (200 mL) foi adicionado e a solução foi evaporada em vácuo para fornecer uma goma. Este processo foi repetido duas vezes. Dietil éter foi adicionado e o composto do título coletado como um sólido branco. Produção 0,13 g.
[001214] m/z 637 (M+H)+ (APCI) [001215] 1H RMN (300 MHz, D6-DMSO, 90°C) δ 11,37 (s, 1H), 7,51 -
7,30 (m, 5H), 6,93 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 6,77 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 6,91 -
6,86 (m, 1H), 4,94 - 4,86 (m, 1H), 4,29 (s, 2H), 3,71 - 3,31 (m, 8H),
3,29 - 2,93 (m, 8H), 2,81 (q, J = 7,9 Hz, 2H), 2,15 - 1,91 (m, 2H), 1,75 -
1,51 (m, 2H), 1,25 (t, J = 7,6 Hz, 3H). 5 prótons trocáveis não observados.
Exemplo 87
Ditrifluoroacetato de (R)-4-hidróxi-7-(1 -hidróxi-2-(3-((4-(2propiltiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9Petição 870190058499, de 25/06/2019, pág. 414/650
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il)metil)fenetilamino)etil)benzo[d]tiazol-2(3H)-ona
OH
a) Butanotioamida
[001216] Pentassulfeto de fósforo (3 g) foi adicionado a uma suspen são de butiramida (5 g) em MTBE (300 mL) e a mistura resultante agitada durante 3 horas. A reação foi filtrada através de celite e a almofada filtrante lavada com MTBE (100 mL). O filtrado combinado e lava gens foram evaporados para fornecer o composto do subtítulo como um óleo amarelo. Produção 5,2 g.
[001217] 1H RMN (300 MHz, D6-DMSO) δ 9,32 (s, 1H), 9,12 (s, 1H),
2,43 (t, J = 7,4 Hz, 2H), 1,72 - 1,59 (m, 2H), 0,86 (t, J = 7,4 Hz, 3H).
b) 2-propiltiazol-4-carboxilato de etila
O
[001218] 3-Bromo-2-oxopropanoato de etila (6,32 mL) foi adicionado à solução de butanotioamida (exemplo 87, etapa a) (5,2 g) em etanol (100 mL) e a mistura resultante aquecida ao refluxo durante a noite. O solvente foi evaporado e o resíduo dividido entre acetato de etila (100 mL) e solução de hidrogeno carbonato de sódio saturada (100 mL). As camadas foram separadas e a fase aquosa extraída com acetato de etila (2 x 100 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (100 mL) secadas sobre sulfato de sódio, filtradas e evaporadas. A purificação foi por cromatografia de sílica-gel eluindo com 10:1 de iso-hexano:acetato de etila. As frações contendo produto
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410/638 foram combinadas e evaporadas para fornecer o composto do subtítulo como um óleo amarelo. Produção 5,24 g.
[001219] m/z 200 (M+H)+ (APCI) [001220] 1H RMN (400 MHz, CDC1s) δ 8,05 (s, 1H), 4,42 (q, J = 7,2 Hz, 2H), 3,04 (t, J = 7,7 Hz, 2H), 1,89 - 1,78 (m, 2H), 1,40 (t, J = 7,2 Hz, 3H), 1,02 (t, J = 7,2 Hz, 3H).
c) ácido 2-propiltiazol-4-carboxílico
O
HO [001221] Monoidrato de hidróxido de lítio (4,4 g) foi adicionado à solução de 2-propiltiazol-4-carboxilato de etila (exemplo 87, etapa b) (5,24 g) em uma mistura de THF (80 mL) e água (20 mL). A mistura resultante foi agitada durante a noite. A reação foi acidificada com ácido clorídrico concentrado e os voláteis evaporados. A mistura aquosa resultante foi saturada com cloreto de sódio e extraída com acetato de etila (3 x 100 mL). As camadas orgânicas combinadas foram secadas sobre sulfato de sódio, filtradas e evaporadas para fornecer o composto do subtítulo como um sólido branco. Produção 2,5 g.
[001222] 1H RMN (300 MHz, D6-DMSO) δ 12,91 (s, 1H), 8,31 (s, 1H),
2,97 (t, J = 7,5 Hz, 2H), 1,81 - 1,67 (m, 2H), 0,95 (t, J = 7,3 Hz, 3H).
d) (9-(3-(2-Hidroxietil)benzil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4il)(2-propiltiazol-4-il)metanona
HO [001223] Hexafluorofosfato de O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N’,Ntetrametilurônio (0,24 g) foi adicionado à solução de 2-(3-(1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9-ilmetil)fenil)etanol (exemplo 82, etapa a) (0,14 g), ácido 2-propiltiazol-4-carboxílico (exemplo 87, etapa c) (0,084 g) e trietilamina (0,27 mL) em DMF (7 mL) a 0°C. A solução amarela resultante foi deixada aquecer para TA e foi agitada durante 2 horas. A
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411/638 mistura foi dividida entre acetato de etila (100 mL) e salmoura (100 mL), a fase orgânica foi lavada com salmoura (2 x 100 mL), secada sobre sulfato de sódio, filtrada e o solvente evaporado. A goma resultante foi purificada por cromatografia de sílica-gel eluindo com gradiente de 47,5:47,5:5 de iso-hexano:acetato de etila:trietilamina a 95:5 de acetato de etila:trietilamina . As frações contendo produto foram combinadas, tolueno (200 mL) foi adicionado e o solvente evaporado sob pressão reduzida para fornecer o composto do subtítulo como uma goma clara. Produção 0,14 g.
[001224] m/z 444 (M+H)+ (APCI) [001225] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO, 90°C) δ 7,91 (s, 1H), 7,18 (t,
J = 7,4 Hz, 1H), 7,12 - 7,04 (m, 3H), 4,37 - 4,30 (m, 1H), 3,69 - 3,57 (m, 8H), 3,41 (s, 2H), 2,98 (t, J = 7,3 Hz, 2H), 2,71 (t, J = 7,1 Hz, 2H),
2,40 - 2,23 (m, 4H), 1,82 - 1,64 (m, 4H), 1,59 - 1,46 (m, 2H), 0,97 (t, J =
7,4 Hz, 3H).
e) Ditrifluoroacetato de (R)-4-hidróxi-7-(1-hidróxi-2-(3-((4-(2- propiltiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9il)metil)fenetilamino)etil)benzo[d]tiazol-2(3H)-ona
[001226] TFA (0,023 mL) foi adicionado à solução de (9-(3-(2hidroxietil)benzil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4-il)(2propiltiazol-4-il)metanona (exemplo 87, etapa d) (0,13 g) em DCM (5 mL) a 0°C. A mistura foi agitada durante 5 minutos em seguida periodinano Dess-Martin (0,19 g) foi adicionado. A solução amarela resultante foi deixada aquecer para TA e agitada durante 1 hora. Uma mistura de solução de tiossulfato de sódio saturada (5 mL), solução de
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412/638 bicarbonato de sódio saturada (5 mL) e acetato de etila (20 mL) foi em seguida adicionada e a mistura resultante agitada vigorosamente durante 10 minutos. A fase aquosa foi separada e extraída com acetato de etila (20 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (20 mL), acidificadas com algumas gotas de ácido acético, secadas sobre sulfato de sódio, filtradas e evaporadas em vácuo. O resíduo foi dissolvido em metanol (5 mL), ácido acético (0,017 mL) e cloridrato de (R)-7-(2-amino-1-hidroxietil)-4-hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)ona (WO2007027134, exemplo 1, etapa d) (0,077 g) foram em seguida adicionados e a mistura agitada durante 5 minutos antes do resfriamento em um banho de gelo. Cianoboroidreto de sódio (0,028 g) foi em seguida adicionado, a mistura deixada aquecer para TA e agitada durante a noite. O solvente foi evaporado em vácuo. A purificação foi por cromatografia de sílica-gel eluindo com 94,5:5:0,5 a 89:10:1 de gradiente de DCM:metanol:amônia aquosa ‘880’. As frações contendo produto foram combinadas, evaporadas em vácuo. Além disso, a purificação foi por HPLC preparativa (Sunfire®, gradiente: 10-35% de acetonitrila em 0,2% de TFA aquoso). As frações contendo produto foram combinadas, evaporadas em vácuo e o resíduo triturado com dietiléter para fornecer o composto do título como um sólido branco. Produção 0,09 g.
[001227] m/z 652 (M+H)+ (APCI) [001228] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO, 90°C) δ 11,29 (s, 1H), 7,96 -
7,92 (m, 1H), 7,46 - 7,32 (m, 4H), 6,98 - 6,92 (m, 1H), 6,81 - 6,75 (m, 1H), 4,98 - 4,90 (m, 1H), 4,34 - 4,27 (m, 2H), 3,76 - 3,62 (m, 6H), 3,30 -
2,94 (m, 12H), 2,08 - 1,98 (m, 2H), 1,85 - 1,70 (m, 4H), 1,01 - 0,92 (m, 3H). Cinco prótons trocáveis não observados.
Exemplo 88
Ditrifluoroacetato de (R)-7-(2-(3-(2-fluoro-3-((4-(2-isopropiltiazol-4carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil)fenil) propiPetição 870190058499, de 25/06/2019, pág. 418/650
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lamjno)-1-hjdroxjetjl)-4-hjdroxjbenzo[d]tjazol-2(3H)-ona
a) 3-(2-fluorofenjl)propan-1-ol
[001229] Uma solução de complexo de borano-dimetilsulfeto (2M em
THF, 27,6 mL) foi adicionada gota a gota a uma solução de ácido 3-(2 fluorofenil)propanoico (3,09 g) em tetra-hidrofurano (25 mL) e a mistu ra resultante foi deixada aquecer para TA e agitada durante a noite. A reação foi extinta com metanol e, quando borbulhamento cessou, evaporada. A purificação foi por cromatografia de sílica-gel eluindo com 4:1 a 1:1 de gradiente de iso-hexano:acetato de etila . As frações contendo produto foram combinadas e evaporadas em vácuo para fornecer o composto do subtítulo como um óleo claro. Produção 2,72 g. [001230] 1H RMN (300 MHz, CDC1s) δ 7,24 - 7,13 (m, 2H), 7,09 -
6,97 (m, 2H), 3,67 (t, J = 6,3 Hz, 2H), 2,74 (t, J = 7,6 Hz, 2H), 1,95 -
1,83 (m, 2H). Um próton trocável não observado.
b) terc-butjl(3-(2-fluorofenjl)propóxj)djmetjlsjlano
[001231] Cloreto de terc-butildimetilsilila (3,19 g) foi adicionado à solução de imidazol (3,6 g) e 3-(2-fluorofenil)propan-1-ol (exemplo 88, etapa a) (2,72 g) em DMF seco (30 mL) resfriada em um banho de gelo. Após 45 minutos, a mistura reacional foi diluída com acetato de etila (100 mL), lavada com água (3 x 100 mL) e evaporada. A goma resul tante foi purificada por cromatografia de sílica-gel eluindo com isoPetição 870190058499, de 25/06/2019, pág. 419/650
414/638 hexano. As frações contendo produto foram combinadas e evaporadas para fornecer o composto do subtítulo como um óleo claro. Produção
4,4 g.
[001232] 1H RMN (300 MHz, CDCU) δ 7,23 - 7,09 (m, 2H), 7,09 -
6,94 (m, 2H), 3,64 (t, J = 6,3 Hz, 2H), 2,75 - 2,66 (m, 2H), 1,89 - 1,76 (m, 2H), 0,91 (s, 9H), 0,05 (s, 6H).
c) 3-(3-(terc-butildimetilsililóxi)propil)-2-fluorobenzaldeído [001233] terc-Butil(3-(2-fluorofenil)propóxi)dimetilsilano (exemplo 88, etapa b) (4,4 g) foi adicionado gota a gota durante 5 minutos a uma solução de sec-butil lítio (1,4M em ciclo-hexano, 11,7 mL) e 1,1,4,7,7pentametildietilenotriamina (3,4 mL) em THF (25 mL) a -78°C. A mistura resultante foi agitada durante 2 horas, em seguida DMF (6,4 mL) foi cautelosamente adicionado e a mistura resultante deixada aquecer para TA e agitada durante a noite. A reação foi extinta com água (100 mL) e em seguida acetato de etila (250 mL) foi adicionado. As fases foram separadas e a fase orgânica lavada com água (2 x 100 mL), solução de HCl a 2 M (2 x 50 mL), e salmoura (100 mL), em seguida secada sobre sulfato de magnésio, filtrada e evaporada. A purificação foi por cromatografia de sílica-gel eluindo com gradiente de iso-hexano a 10% de éter em iso-hexano. O produto contendo frações foram combinadas e evaporadas para fornecer o composto do subtítulo como um óleo claro. Produção 1 g.
[001234] 1H RMN (400 MHz, CDCU) δ 10,38 (s, 1H), 7,73 - 7,67 (m, 1H), 7,48 (td, J = 7,4, 1,8 Hz, 1H), 7,18 (t, J = 7,7 Hz, 1H), 3,66 (t, J = 6,0 Hz, 2H), 2,82 - 2,75 (m, 2H), 1,90 - 1,80 (m, 2H), 0,91 (s, 9H), 0,06 (s, 6H).
d) (9-(2-fluoro-3-(3-hidroxipropil)benzil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5] undecan-4-il)(2-isopropiltiazol-4-il)metanona
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[001235] 3-(3-(terc-Butildimetilsililóxi)propil)-2-fluorobenzaldeído (exemplo 88, etapa c) (0,15 g) foi adicionado à solução de trifluoroacetato de (2-isopropiltiazol-4-il)(1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4il)metanona (exemplo 22, etapa b) (0,19 g) e ácido acético (0,03 mL) em M-metil-2-pirrolidinona (10 mL). A mistura resultante foi agitada durante 15 minutos em seguida resfriada em um banho de gelo. Triacetoxiboroidreto de sódio (0,16 g) foi em seguida adicionado e a mistura agitada durante a noite. A reação foi vertida em uma mistura de solução de hidrogeno carbonato de sódio saturada (20 mL) e água (100 mL). O aquoso foi extraído com acetato de etila (3 x 100 mL). Os orgânicos combinados foram lavados com água (50 mL) e salmoura (100 mL), secados sobre sulfato de sódio, filtrados e evaporados. O resíduo foi novamente dissolvido em THF (10 mL) e uma solução de TBAF (1M em THF, 1,52 mL) foi adicionada. A mistura resultante foi agitada durante 2 horas e o solvente evaporado. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna eluindo com gradiente de 4:1 de isohexano:acetato de etila + 5% de trietilamina a acetato de etila + 5% de trietilamina. As frações contendo produto foram combinadas e evaporadas para fornecer o composto do subtítulo como um óleo claro. Produção 0,22 g.
[001236] m/z 476 (M+H)+ (APCI) [001237] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO, 90°C) δ 7,99 (s, 1H), 7,24 -
7,12 (m, 2H), 7,08 - 7,01 (m, 1H), 4,48 (t, J = 5,1 Hz, 1H), 3,74 - 3,38 (m, 10H), 2,62 (t, J = 7,7 Hz, 2H), 2,46 - 2,13 (m, 4H), 1,74 - 1,44 (m, 6H), 1,35 (d, J = 6,4 Hz, 6H). Um próton obscurecido por pico de água.
e) Ditrifluoroacetato de (R)-7-(2-(3-(2-fluoro-3-((4-(2-isopropiltiazol-
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4-carbonjl)-1-oxa-4,9-djazaespjro[5,5]undecan-9-jl)metjl) fenjl)propjlamjno)-1-hjdroxjetjl)-4-hjdroxjbenzo[d]tjazol-2(3H)-ona
HO
OH [001238] Ácido trifluoroacético (0,032 mL) foi adicionado à solução de (9-(2-fluoro-3-(3-hidroxipropil)benzil)-1-oxa-4,9- diazaespiro[5,5]undecan-4-il)(2-isopropiltiazol-4-il)metanona (exemplo 88, etapa d) (0,2 g) em DCM (5 mL) a 0°C. A mistura foi agitada durante 5 minutos em seguida periodinano Dess-Martin (0,27 g) foi adicionado. A solução amarela resultante foi deixada aquecer para TA e agitada durante 1 hora. Uma mistura de solução de tiossulfato de sódio saturada (5 mL), solução de bicarbonato de sódio saturada (5 mL) e acetato de etila (20 mL) foi em seguida adicionada e a mistura resultante agitada vigorosamente durante 10 minutos. A fase aquosa foi separada e extraída com acetato de etila (20 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (20 mL), acidificadas com algumas gotas de ácido acético, secadas sobre sulfato de sódio, filtradas e evaporadas em vácuo. O resíduo foi dissolvido em metanol (5 mL), ácido acético (0,024 mL) e cloridrato de (R)-7-(2-amino-1-hidroxietil)-4hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona (WO2007027134, exemplo 1, etapa d) (0,11 g) foram em seguida adicionados e a mistura agitada durante 5 minutos antes do resfriamento em um banho de gelo. Cianoboroidreto de sódio (0,040 g) foi em seguida adicionado, a mistura deixada aquecer para TA e agitada durante a noite. O solvente foi evaporado em vácuo. A purificação foi por cromatografia de sílica-gel eluindo com 94,5:5:0,5 a 89:10:1 de gradiente de DCM:metanol:amônia aquosa ‘880’. As frações contendo produto foram combinadas e evaporadas em vácuo. Além disso, a purificação foi por HPLC preparativa (Sun
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417/638 fire®, gradiente: 10-35% de acetonitrila em 0,2% de TFA aquoso). As frações contendo produto foram combinadas, evaporadas em vácuo e o resíduo triturado com dietiléter para fornecer o composto do título como um sólido branco. Produção 0,14 g.
[001239] m/z 684 (M+H)+ (APCI) [001240] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO, 90oC) δ 11,25 (s, 1H), 7,98 -
7,89 (m, 1H), 7,52 - 7,35 (m, 2H), 7,28 - 7,16 (m, 1H), 6,98 - 6,86 (m, 1H), 6,82 - 6,70 (m, 1H), 4,96 - 4,84 (m, 1H), 4,39 - 4,24 (m, 2H), 3,77 -
3,58 (m, 6H), 3,34 - 2,94 (m, 9H), 2,80 - 2,66 (m, 2H), 2,10 - 1,70 (m, 6H), 1,41 - 1,27 (m, 6H) e 5 trocáveis não observados
Exemplo 89
Ditrifluoroacetato de (R)-4-hidróxi-7-(1-hidróxi-2-(3-((10-(2metiltiazol-4-carbonil)-7-oxa-3,10-diazaespiro[5,6]dodecan-3-il)metil) fenetilamino)etil)benzo[d]tiazol-2(3H)-ona
HO
a) 4-(cianometil)-4-hidroxipiperidina-1-carboxilato de terc-butila
O [001241] Uma solução de 1-oxa-6-azaespiro[2,5]octano-6-carboxilato de terc-butila (2 g) em DMF (20 mL) foi tratada com cianeto de potássio (0,672 g) e a mistura resultante agitada a 20°C durante 4 dias. A mistura foi dividida entre acetato de etila e salmoura, a camada orgânica foi lavada duas vezes com salmoura, secada sobre sulfato de sódio, filtrada e o solvente evaporado sob pressão reduzida. O produto bruto foi purificado por cromatografia de sílica rápida usando 60% de acetato de etila em iso-hexano como solvente. Frações puras foram
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418/638 evaporadas até a secura para fornecer o composto do subtítulo. Produção 1,18 g.
[001242] 1H RMN (400 MHz, CDCh) δ 3,95 - 3,85 (m, 2H), 3,19 -
3,10 (m, 2H), 2,54 (s, 2H), 1,86 (s, 1H), 1,76 - 1,61 (m, 4H), 1,46 (s,
9H).
b) 4-(2-aminoetil)-4-hidroxipiperidina-1-carboxilato de terc-butila
[001243] Uma solução de 4-(cianometil)-4-hidroxipiperidina-1 carboxilato de terc-butila (exemplo 89, etapa a) (1,4 g) em uma mistura de etanol (20 mL) e ácido acético (20 mL) foi hidrogenada em pressão de 4 atmosferas de hidrogênio na presença de óxido de platina (IV) (0,25 g) durante 4 horas. O catalisador foi filtrado e os solventes removidos sob pressão reduzida. O resíduo foi dividido entre NaOH aquoso diluído e acetato de etila e a camada orgânica secada sobre sulfato de sódio, filtrada e o solvente evaporado sob pressão reduzida para fornecer o composto do subtítulo. Produção 1,1 g. Usado diretamente.
c) 4-(2-(2-cloroacetamido)etil)-4-hidroxipiperidina-1 -carboxilato de terc-butila
[001244] Cloreto de cloroacetila (0,483 mL) foi adicionado gota a gota durante 10 minutos a uma mistura vigorosamente agitada a 0°C de
4-(2-aminoetil)-4-hidroxipiperidina-1-carboxilato de terc-butila (exemplo 89, etapa b) (1,1 g) em acetato de etila (25 mL) e carbonato de potássio (1,77 g) dissolvido em água (20 mL). A mistura foi em seguida agitada a 0°C durante 45 minutos antes de ser extraída com acetato de etila. A camada orgânica foi secada sobre sulfato de sódio, filtrada e o solvente evaporado sob pressão reduzida. O produto bruto foi purificado por cromatografia de sílica rápida eluindo com acetato de etila. Fra
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419/638 ções puras foram evaporadas até a secura para fornecer o composto do subtítulo. Produção 0,9 g.
[001245] m/z 319 (M-H)- (APCI)
d) 9-oxo-7-oxa-3,10-diazaespiro[5,6]dodecano-3-carboxilato de terc-butila
O [001246] Uma solução de 4-(2-(2-cloroacetamido)etil)-4hidroxipiperidina-1-carboxilato de terc-butila (exemplo 89, etapa c) (0,3 g) em THF seco (18 mL) foi adicionada gota a gota durante 6 horas a uma mistura em refluxo de terc-butóxido de potássio (1M em tercbutanol, 3 mL) e THF seco (60 mL). Ao término da adição a mistura foi aquecida ao refluxo durante mais 15 minutos e em seguida resfriada para temperatura ambiente. A mistura foi dividida entre acetato de etila e salmoura. A camada orgânica foi secada sobre sulfato de sódio, filtrada e o solvente evaporado sob pressão reduzida. Trituração com dietiléter forneceu o composto do subtítulo. Produção 0,117 g.
[001247] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO) δ 7,67 (s, 1H), 4,01 (s, 2H),
3,57 (d, J = 13,1 Hz, 2H), 3,11 (dd, J = 9,6, 4,2 Hz, 2H), 3,05 - 2,95 (m, 2H), 1,85 - 1,76 (m, 4H), 1,38 (s, 9H), 1,37 - 1,32 (m, 2H).
e) 7-oxa-3,10-diazaespiro[5,6]dodecano-3-carboxilato de terc- butila
NH [001248] Complexo de borano-sulfeto de metila (2M em THF, 2,88 mL) foi adicionado à solução de 9-oxo-7-oxa-3,10diazaespiro[5,6]dodecano-3-carboxilato de terc-butila (exemplo 89, etapa d) (0,41 g) em THF seco (40 mL) e a mistura reacional em seguida aquecida a 70°C durante 30 minutos sob nitrogênio. A mistura foi resfriada para temperatura ambiente e extinta com metanol. Os sol
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420/638 ventes foram removidos sob pressão reduzida e o resíduo dissolvido em metanol (100 mL). M7,M2-dimetiletano-1,2-diamina (1,0 g) foi adicionado e a mistura aquecida ao refluxo sob nitrogênio durante 16 horas. Mais M7,M2-dimetiletano-1,2-diamina (1,0 g) foi adicionado e refluxo continuado durante 16 horas. Os solventes foram evaporados sob pressão reduzida e o resíduo azeotropado com tolueno. O produto bruto foi purificado por cromatografia de sílica rápida usando 6% de metanol em diclorometano com 1% de trietilamina como solvente. Frações puras foram evaporadas até a secura para fornecer o composto do subtítulo. Produção 0,176 g.
[001249] m/z 271 (M+H)+ (APCI)
f) 10-(2-metiltiazol-4-carbonil)-7-oxa-3,10-diazaespiro[5,6] dodecano-3-carboxilato de terc-butila
O
O [001250] HATU (0,322 g) foi adicionado em uma porção a uma solução a 0°C de 7-oxa-3,10-diazaespiro[5,6]dodecano-3-carboxilato de terc-butila (exemplo 89, etapa e) (0,176 g) e ácido 2-metiltiazol-4carboxílico (0,093 g) e trietilamina (0,36 mL) em DMF (10 mL). A mistura foi em seguida agitada a 20°C durante 1 hora. A mistura reacional foi dividida entre acetato de etila e salmoura. A camada orgânica foi lavada duas vezes com salmoura, secada sobre sulfato de sódio, filtrada e o solvente evaporado sob pressão reduzida. O produto bruto foi purificado por cromatografia de sílica rápida eluindo com acetato de etila. Frações puras foram evaporadas até a secura para fornecer o composto do subtítulo. Produção 210 mg.
[001251] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO, 90°C) δ 7,78 (s, 1H), 3,69 (s,
4H), 3,65 - 3,62 (m, 2H), 3,59 - 3,53 (m, 2H), 3,11 - 3,03 (m, 2H), 2,66 (s, 3H), 1,85 - 1,81 (m, 2H), 1,74 - 1,67 (m, 2H), 1,39 (s, 9H), 1,38 Petição 870190058499, de 25/06/2019, pág. 426/650
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1,33 (m, 2H).
g) Trifluoroacetato de (2-Metjltjazol-4-jl)(7-oxa-3,10-djazaespjro [5,6]dodecan-10-il)metanona
HN [001252] Uma solução de 10-(2-metiltiazol-4-carbonil)-7-oxa-3,10diazaespiro[5,6]dodecano-3-carboxilato de terc-butila (exemplo 89, etapa f) (0,21 g) em DCM (10 mL) foi tratada com ácido trifluoroacético (10 mL) e a solução deixada descansar a 20°C durante 25 minutos. Tolueno (40 mL) foi adicionado e os solventes evaporados sob pressão reduzida. O resíduo foi azeotropado com acetonitrila para fornecer o composto do subtítulo. Produção 0,21 g.
[001253] m/z 296 (M+H)+ (APCI)
h) (3-(3-(2-Hjdroxjetjl)benzjl)-7-oxa-3,10-djazaespjro[5,6]dodecan-
10-jl)(2-metjltjazol-4-jl)metanona
HO
O [001254] Uma solução de trifluoroacetato de (2-metiltiazol-4-il)(7-oxa-
3,10-diazaespiro[5,6]dodecan-10-il)metanona (exemplo 89, etapa g) (0,21 g) em acetonitrila (15 mL) foi tratada com trietilamina (0,214 mL) seguida por 2-(3-(bromometil)fenil)etanol (exemplo 6, etapa a) (0,121 g). A mistura reacional foi agitada durante 3 horas a 20°C. O solvente foi evaporado sob pressão reduzida e o resíduo foi dividido entre DCM e solução de bicarbonato de sódio saturada. A camada aquosa foi novamente extraída duas vezes com DCM e os orgânicos combinados foram secados sobre sulfato de sódio, filtrados e o solvente removido sob pressão reduzida. O produto bruto foi purificado por cromatografia de sílica rápida usando 6% de metanol em diclorometano com 1% de
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422/638 trietilamina como solvente. Frações puras foram evaporadas até a secura para fornecer o composto do subtítulo. Produção 0,21 g.
[001255] m/z 430 (M+H)+ (APCI)
i) Ditrifluoroacetato de (R)-4-hidrôxi-7-(1-hidrôxi-2-(3-((10-(2- metiltiazol-4-carbonil)-7-oxa-3,10-diazaespiro[5,6]dodecan-3il)metil)fenetilamino)etil)benzo[d]tiazol-2(3H)-ona
HO [001256] Uma solução de (3-(3-(2-hidroxietil)benzil)-7-oxa-3,10diazaespiro[5,6]dodecan-10-il)(2-metiltiazol-4-il)metanona (exemplo 89, etapa h) (0,21 g) em DCM (15 mL) foi tratada com ácido trifluoroacético (0,038 mL) seguida por periodinano Dess-Martin (0,311 g) e a mistura resultante agitada a 20°C durante 40 minutos. A mistura reacional foi tratada com solução de tiossulfato de sódio saturada (20 mL) e solução de bicarbonato de sódio saturada (20 mL) e acetato de etila (30 mL) e agitada vigorosamente durante 5 minutos. A mistura foi extraída duas vezes com acetato de etila, os orgânicos combinados foram lavados com solução de bicarbonato de sódio saturada, secados sobre sulfato de sódio e filtrados. Ácido acético (0,028 mL) foi adicionado a esta solução e o solvente em seguida removido sob pressão reduzida. O resíduo foi dissolvido em metanol (3 mL) e adicionado a uma solução de cloridrato de (R)-7-(2-amino-1-hidroxietil)-4hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona (WO2007027134, exemplo 1, etapa d) (0,193 g) e ácido acético (0,028 mL) em metanol (15 mL). A mistura foi resfriada em um banho de gelo e tratada com cianoboroidreto de sódio (0,061 g). O banho de resfriamento foi removido e a mistura agitada a 20°C durante 3 horas. O solvente foi evaporado para um volume de 3 mL sob pressão reduzida e THF (20 mL) foi adicionado. A mistura foi
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423/638 lavada com uma mistura de salmoura saturada (10 mL) e solução de bicarbonate de sódio saturada (1 mL). A camada orgânica foi secada sobre sulfato de sódio, filtrada e o solvente removido sob pressão reduzida. O resíduo foi azeotropado duas vezes com acetonitrila. O produto bruto foi purificado por HPLC preparativa (Sunfire®, gradiente: 1040% de acetonitrila em 0,2% de TFA aquoso). As frações contendo o composto desejado foram evaporadas até a secura para fornecer o composto do título. Produção 0,145 g.
[001257] m/z 638 (M+H)+ (APCI) [001258] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO, 90°C) δ 11,27 (s, 1H), 7,79 (s, 1H), 7,44 - 7,32 (m, 4H), 6,93 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 6,77 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 4,94 - 4,89 (m, 1H), 4,28 (s, 2H), 3,71 (s, 4H), 3,68 - 3,64 (m, 2H), 3,25 (t, J = 8,1 Hz, 2H), 3,20 - 2,99 (m, 8H), 2,66 (s, 3H), 2,04 -
1,95 (m, 2H), 1,91 - 1,83 (m, 2H), 1,78 - 1,67 (m, 2H). Cinco prótons trocáveis não observados.
Exemplo 90
Ditrifluoroacetato de (R)-7-(2-(2-(2-fluoro-3-((4-(2-isopropiltiazol-4carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil)fenil)-2metilpropilamino)-1-hidroxietil)-4-hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona
HO
a) 2-(2-fluorofenil)acetato de metila [001259] Uma solução de ácido 2-(2-fluorofenil)acético (9,6 g) em metanol (200 mL) foi tratada com cloreto de trimetilsilila (10 mL) e a mistura aquecida ao refluxo durante 2 horas. O solvente foi removido
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424/638 sob pressão reduzida e o resíduo dividido entre acetato de etila e solução de bicarbonato de sódio saturada, a camada orgânica foi secada sobre sulfato de sódio, filtrada e o solvente removido sob pressão reduzida para fornecer o composto do subtítulo. Produção 9,7 g.
[001260] 1H RMN (400 MHz, CDCh) δ 7,29 - 7,23 (m, 2H), 7,13 7,03 (m, 2H), 3,71 (s, 3H), 3,68 (s, 2H).
b) 2-(2-fluorofenil)-2-metilpropanoato de metila [001261] A uma solução de iodometano (3,2 mL) em DMF seco (80 mL) a 0°C foi adicionado hidreto de sódio (60% de suspensão, 2 g) seguido por 2-(2-fluorofenil)acetato de metila (exemplo 90, etapa a) (2,75 g). A mistura foi deixada lentamente aquecer para temperatura ambiente e em seguida agitada em temperatura ambiente durante 5 horas. A reação foi extinta pela cuidadosa adição de cloreto de amônio aquoso saturado (120 mL). A mistura foi extraída três vezes com acetato de etila, os orgânicos combinados foram lavados com salmoura, secados sobre sulfato de sódio, filtrados e o solvente removido sob pressão reduzida. O produto bruto foi purificado por cromatografia de sílica rápida usando 8% de acetato de etila em iso-hexano como solvente. Frações puras foram evaporadas até a secura para fornecer o composto do subtítulo. Produção 2,6 g.
[001262] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO) δ 7,46 - 7,40 (m, 1H), 7,35 -
7,29 (m, 1H), 7,22 - 7,11 (m, 2H), 3,58 (s, 3H), 1,48 (s, 6H).
c) ácido 2-(2-fluorofenil)-2-metilpropanoico
F
HO [001263] Uma solução de hidróxido de sódio (1 g) em água (50 mL) foi adicionada à solução de 2-(2-fluorofenil)-2-metilpropanoato de metila (exemplo 90, etapa b) (2,6 g) em metanol (50 mL) e THF (50 mL). A
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425/638 mistura reacional foi aquecida a 40°C durante 40 horas. Os orgânicos foram removidos sob pressão reduzida e a solução aquosa restante lavada com acetato de etila. A camada aquosa foi resfriada e acidificada pela adição de HCl concentrado. A mistura foi extraída com acetato de etila e a camada orgânica lavada com salmoura antes de ser secada sobre sulfato de sódio, filtrada e o solvente removido sob pressão reduzida para fornecer o composto do subtítulo. Produção 1,5 g. [001264] m/z 181 (M-H)- (APCI)
d) 2-(2-fluorofenil)-2-metilpropan-1 -ol
HO [001265] Borano-sulfeto de metila (2M em THF, 12,35 mL) foi adicionado gota a gota a uma solução de ácido 2-(2-fluorofenil)-2-metilpropanoico (exemplo 90, etapa c) (1,5 g) em THF (30 mL). A mistura reacional foi agitada a 20°C durante 8 horas. A mistura foi extinta pela cuidadosa adição de metanol até a evolução de gás cessar. Os solventes foram removidos sob pressão reduzida e o resíduo azeotropado com tolueno. O produto bruto foi purificado por cromatografia de sílica rápida usando 30% de acetato de etila em iso-hexano como solvente. Frações puras foram evaporadas até a secura para fornecer o composto do subtítulo. Produção 1,3 g.
[001266] 1H RMN (400 MHz, CDCh) δ 7,36 - 7,31 (m, 1H), 7,25 7,19 (m, 1H), 7,13 - 7,08 (m, 1H), 7,04 - 6,99 (m, 1H), 3,79 (dd, J = 6,4, 1,0 Hz, 2H), 1,39 (d, J = 1,0 Hz, 6H). Um próton trocável não observado.
e) terc-butil(2-(2-fluorofenil)-2-metilpropóxi)dimetilsilano [001267] Cloreto de terc-butildimetilsilila (1,4 g) foi adicionado porção a porção a uma solução agitada de 2-(2-fluorofenil)-2-metilpropan-1-ol (exemplo 90, etapa d) (1,3 g) e imidazol (0,631 g) em DMF (7 mL) a 20°C. A mistura reacional foi agitada durante 3 horas em temperatura
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426/638 ambiente e em seguida dividida entre acetato de etila e salmoura. A camada orgânica foi lavada duas vezes com salmoura, secada sobre sulfato de sódio, filtrada e o solvente evaporado sob pressão reduzida. O produto bruto foi purificado por cromatografia de sílica rápida, gradiente de eluição 100% de iso-hexano a 1% de dietil éter em iso-hexano. Frações puras foram evaporadas até a secura para fornecer o composto do subtítulo. Produção 1,4 g.
[001268] 1H RMN (400 MHz, CDCh) δ 7,34-7,29 (m, 1H), 7,20-7,14 (m, 1H), 7,08-7,03 (m, 1H), 7,00-6,94 (m, 1H), 3,71 (s, 2H), 1,35 (s, 6H), 0,80 (s, 9H), -0,06 (s, 6H).
f) 3-(1 -(terc-butildimetilsililóxi)-2-metilpropan-2-il)-2- fluorobenzaldeído [001269] sec-Butil lítio (1,4M in ciclo-hexano, 3,54 mL) foi adicionado a tetra-hidrofurano seco (10 mL) sob nitrogênio e a solução resfriada para -78°C. M7-(2-(dimetilamino)etil)-M7,M2,M2-trimetiletano-1,2diamina (0,859 g) foi adicionado lentamente gota a gota. Uma solução de terc-butil(2-(2-fluorofenil)-2-metilpropóxi)dimetilsilano (exemplo 90, etapa e) (1,4 g) em tetra-hidrofurano seco (3 mL) foi em seguida adicionada gota a gota durante 5 minutos. A mistura reacional foi agitada durante 2 horas a -78°C. DMF (2,69 mL) foi adicionado gota a gota durante 5 minutos e a mistura agitada a -78°C durante 1 hora seguida por temperatura ambiente durante 45 minutos. A mistura reacional foi extinta pela adição de água. Acetato de etila (200 mL) foi adicionado e o orgânico lavado três vezes com água seguida por duas vezes com HCl a 2 M e duas vezes com água, em seguida salmoura e secado sobre sulfato de sódio, filtrado e o solvente evaporado sob pressão reduzida. O produto bruto foi purificado por cromatografia de sílica rápida, gradiente de eluição 1 a 5% de acetato de etila em iso-hexano.
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Frações puras foram evaporadas até a secura para fornecer o composto do subtítulo. Produção 0,98 g.
[001270] 1H RMN (400 MHz, CDCh) δ 10,39 (s, 1H), 7,75-7,70 (m,
1H), 7,63-7,58 (m, 1H), 7,19 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 3,74 (s, 2H), 1,39 (d, J = 1,3 Hz, 6H), 0,79 (s, 9H), -0,05 (s, 6H).
g) (9-(2-fluoro-3-(1 -hidróxi-2-metilpropan-2-il)benzil)-1 -oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-4-il)(2-isopropiltiazol-4-il)metanona
[001271] Triacetoxiboroidreto de sódio (0,502 g) foi adicionado a uma solução agitada a 0°C de trifluoroacetato de (2-isopropiltiazol-4-il)(1oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4-il)metanona (exemplo 22, etapa b) (0,668 g) e 3-(1-(terc-butildimetilsililóxi)-2-metilpropan-2-il)-2fluorobenzaldeído (exemplo 90, etapa f) (0,49 g) e ácido acético (0,090 mL) em NMP (20 mL). A mistura reacional foi em seguida agitada a 20°C durante 18 horas. A mistura foi dividida entre acetato de etila e solução de bicarbonato de sódio saturada, a camada orgânica foi lavada duas vezes com salmoura, secada sobre sulfato de sódio, filtrada e o solvente evaporado sob pressão reduzida. A goma resultante foi dissolvida em THF (20 mL) e tratada com fluoreto de tetrabutilamônio (1M em THF, 3,16 mL). A solução foi deixada descansar a 20°C durante 8 horas. O solvente foi evaporado sob pressão reduzida e o produto bruto foi purificado por cromatografia de sílica rápida, gradiente de eluição 0 a 1% de metanol em diclorometano com 1% de trietilamina. Frações puras foram evaporadas até a secura para fornecer o composto do subtítulo. Produção 0,63 g.
[001272] m/z 490 (M+H)+ (APCI)
h) Ditrifluoroacetato de (R)-7-(2-(2-(2-fluoro-3-((4-(2-isopropiltiazol-
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4-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil)fenil)-2metilpropilamino)-1-hidroxietil)-4-hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona
[001273] Uma solução de (9-(2-fluoro-3-(1-hidróxi-2-metilpropan-2il)benzil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4-il)(2-isopropiltiazol-4il)metanona (exemplo 90, etapa g) (0,21 g) em DCM (15 mL) foi tratada com ácido trifluoroacético (0,033 mL) seguida por periodinano Dess-Martin (0,273 g) e a mistura resultante agitada a 20°C durante 40 minutos. A mistura reacional foi tratada com solução de tiossulfato de sódio saturada (20 mL) e solução de bicarbonato de sódio saturada (20 mL) e acetato de etila (30 mL) e agitada vigorosamente durante 5 minutos. A mistura foi extraída duas vezes com acetato de etila, os orgânicos combinados foram lavados com solução de bicarbonato de sódio saturada, secados sobre sulfato de sódio e filtrados. Ácido acético (0,025 mL) foi adicionado a esta solução e o solvente em seguida removido sob pressão reduzida. O resíduo foi dissolvido em metanol (3 mL) e adicionado a uma solução de cloridrato de (R)-7-(2-amino-1hidroxietil)-4-hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona (WO2007027134, exemplo 1, etapa d) (0,169 g) e ácido acético (0,025 mL) em metanol (15 mL). A mistura foi resfriada em um banho de gelo e tratada com cianoboroidreto de sódio (0,054 g). O banho de resfriamento foi removido e a mistura agitada a 20°C durante 3 horas. O solvente foi evaporado para um volume de 3 mL sob pressão reduzida e THF (20 mL) foi adicionado. A mistura foi lavada com uma mistura de salmoura saturada (10 mL) e solução de bicarbonato de sódio saturada (1 mL). A camada orgânica foi secada sobre sulfato de sódio, filtrada e o solvente removido sob pressão reduzida. O resíduo foi azeotropado duas vezes com
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429/638 acetonitrila. O produto bruto foi purificado por HPLC preparativa (Sunfire®, gradiente: 10-40% de acetonitrila em 0,2% de TFA aquoso). As frações contendo o composto desejado foram evaporadas até a secura para fornecer o composto do título. Produção 0,125 g.
[001274] m/z 698 (M+H)+ (APCI) [001275] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO, 90°C) δ 11,25 (s, 1H), 7,93 (s, 1H), 7,56 - 7,46 (m, 2H), 7,31 - 7,25 (m, 1H), 6,89 (d, J = 8,5 Hz,
1H), 6,75 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 4,97 - 4,91 (m, 1H), 4,31 (s, 2H), 3,70 (s,
4H), 3,65 (s, 2H), 3,50 - 3,37 (m, 2H), 3,33 - 3,26 (m, 1H), 3,23 - 3,15 (m, 2H), 3,12 - 3,02 (m, 4H), 2,06 - 1,97 (m, 2H), 1,83 - 1,72 (m, 2H),
1,50 (s, 6H), 1,34 (d, J = 6,8 Hz, 6H). Cinco prótons trocáveis não observados.
Exemplo 91
Ditrifluoroacetato de (R)-7-(2-(3-((4-(5-etiltiofeno-3-carbonil)-1 -oxa-
4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil)-2-fluorofenetilamino)-1hidroxietil)-4-hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona
OH H F .
a) (5-etiltiofen-3-il)(9-(2-fluoro-3-(2-hidroxietil)benzil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-4-il)metanona
HO [001276] HATU (0,316 g) foi adicionado em uma porção a uma solução a 0°C de 9-(3-(2-(terc-butildimetilsililóxi)etil)-2-fluorobenzil)-1-oxa-
4,9-diazaespiro[5,5]undecano (exemplo 78, etapa d) (0,271 g) e ácido
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5-etiltiofeno-3-carboxílico (0,1 g) e trietilamina (0,36 mL) em DMF (10 mL). A mistura foi em seguida agitada a 20°C durante 1 hora. A mistura reacional foi dividida entre acetato de etila e salmoura, a camada orgânica foi lavada duas vezes com salmoura, secada sobre sulfato de sódio, filtrada e o solvente evaporado sob pressão reduzida. O resíduo foi dissolvido em THF (20 mL) e tratado com fluoreto de tetrabutilamônio (1M em THF, 1,921 mL). A mistura reacional foi deixada descansar a 20°C durante 18 horas e o solvente foi em seguida removido sob pressão reduzida. O produto bruto foi purificado por cromatografia de sílica rápida usando 2% de metanol em diclorometano com 1% de trietilamina como solvente. Frações puras foram evaporadas até a secura para fornecer o composto do subtítulo. Produção 0,12 g.
[001277] m/z 447 (M+H)+ (APCI)
b) Ditrifluoroacetato de (R)-7-(2-(3-((4-(5-etiltiofeno-3-carbonil)-1oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil)-2-fluorofenetilamino)1-hidroxietil)-4-hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona
OH H F .
HO [001278] Uma solução de (5-etiltiofen-3-il)(9-(2-fluoro-3-(2hidroxietil)benzil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4-il)metanona (exemplo 91, etapa a) (0,12 g) em DCM (15 mL) foi tratada com ácido trifluoroacético (0,021 mL) seguido por periodinano Dess-Martin (0,171 g) e a mistura resultante agitada a 20°C durante 40 minutos. A mistura reacional foi tratada com solução de tiossulfato de sódio saturada (20 mL) e solução de bicarbonato de sódio saturada (20 mL) e acetato de etila (30 mL) e agitada vigorosamente durante 5 minutos. A mistura foi extraída duas vezes com acetato de etila, os orgânicos combinados foram lavados com solução de bicarbonato de sódio saturada, secados
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431/638 sobre sulfato de sódio e filtrados. Ácido acético (0,015 mL) foi adicionado a esta solução e o solvente em seguida removido sob pressão reduzida. O resíduo foi dissolvido em metanol (3 mL) e adicionado a uma solução de cloridrato de (R)-7-(2-amino-1-hidroxietil)-4hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona (WO2007027134, exemplo 1, etapa d) (0,106 g) e ácido acético (0,015 mL) em metanol (15 mL). A mistura foi resfriada em um banho de gelo e tratada com cianoboroidreto de sódio (0,034 g). O banho de resfriamento foi removido e a mistura agitada a 20°C durante 3 horas. O solvente foi evaporado para um volume de 3 mL sob pressão reduzida e THF (20 mL) foi adicionado. A mistura foi lavada com uma mistura de salmoura saturada (10 mL) e solução de bicarbonato de sódio saturada (1 mL). A camada orgânica foi secada sobre sulfato de sódio, filtrada e o solvente removido sob pressão reduzida. O resíduo foi azeotropado duas vezes com acetonitrila. O produto bruto foi purificado por HPLC preparativa (Sunfire®, gradiente: 1040% de acetonitrila em 0,2% de TFA aquoso). As frações contendo o composto desejado foram evaporadas até a secura para fornecer o composto do título. Produção 0,095 g.
[001279] m/z 655 (M+H)+ (APCI) [001280] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO, 90°C) δ 11,27 (s, 1H), 7,52 -
7,41 (m, 3H), 7,25 (t, J = 7,7 Hz, 1H), 6,94 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 6,89 (s, 1H), 6,77 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 4,95 - 4,89 (m, 1H), 4,30 (s, 2H), 3,67 (t, J = 5,0 Hz, 2H), 3,53 (t, J = 5,0 Hz, 2H), 3,45 (s, 2H), 3,24 (t, J = 7,9 Hz, 2H), 3,18 - 3,03 (m, 8H), 2,81 (q, J = 7,5 Hz, 2H), 2,05 - 1,97 (m, 2H), 1,79 - 1,68 (m, 2H), 1,25 (t, J = 7,6 Hz, 3H). Cinco prótons trocáveis não observados.
Exemplo 92
Ditrifluoroacetato de (R)-5-(2-(2-(2-fluoro-3-((4-(2-isopropiltiazol-4carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil)fenil)-2metilpropilamino)-1 -hidroxietil)-8-hidroxiquinolin-2(1H)-ona
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a) (R)-5-(1-(terc-butildimetilsililóxi)-2-(2-(2-fluoro-3-((4-(2- isopropiltiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9il)metil)fenil)-2-metilpropilamino)etil)-8-hidroxiquinolin-2(1H)-ona
[001281] Uma solução de (9-(2-fluoro-3-(1-hidróxi-2-metilpropan-2il)benzil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4-il)(2-isopropiltiazol-4il)metanona (exemplo 90, etapa g) (0,21 g) em DCM (20 mL) foi tratada com ácido trifluoroacético (0,033 mL) seguido por periodinano Dess-Martin (0,236 g) e a mistura resultante agitada a 20°C durante 40 minutos. A mistura reacional foi tratada com solução de tiossulfato de sódio saturada (20 mL) e solução de bicarbonato de sódio saturada (20 mL) e acetato de etila (30 mL) e agitada vigorosamente durante 5 minutos. A mistura foi extraída duas vezes com acetato de etila, os orgânicos combinados foram lavados com solução de bicarbonato de sódio saturada, secados sobre sulfato de sódio e filtrados. Ácido acético (0,025 ml) foi adicionado a esta solução e o solvente em seguida removido sob pressão reduzida. O resíduo foi dissolvido em metanol (3 mL) e adicionado a uma solução de (R)-5-(2-amino-1-(tercbutildimetilsililóxi)etil)-8-hidroxiquinolin-2(1 H)-ona (WO2004106333) (0,186 g) em metanol (15 mL). A mistura foi resfriada para 0°C e triacetoxiboroidreto de sódio (0,136 g) foi adicionado em uma porção. A mis
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433/638 tura reacional foi agitada a 20°C durante 3 horas. O solvente foi removido sob pressão reduzida e o resíduo dividido entre acetato de etila e solução de bicarbonato de sódio saturada, a camada orgânica foi secada sobre sulfato de sódio, filtrada e o solvente removido sob pressão reduzida. O produto bruto foi purificado por cromatografia de sílica rápida usando 9% de metanol em diclorometano com 1% de amônia aquosa ‘880’ como solvente. Frações puras foram evaporadas até a secura para fornecer o composto do subtítulo. Produção 0,28 g. [001282] m/z 806 (M+H)+ (APCI)
b) Ditrifluoroacetato de (R)-5-(2-(2-(2-fluoro-3-((4-(2-isopropiltiazol4-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil)fenil)-2metilpropilamino)-1 -hidroxietil)-8-hidroxiquinolin-2(1H)-ona
HO [001283] tri-hidrofluoreto de trietilamina (0,074 mL) em metanol (2 mL) foi adicionado à solução de (R)-5-(1-(terc-butildimetilsililóxi)-2-(2(2-fluoro-3-((4-(2-isopropiltiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil)fenil)-2-metilpropilamino)etil)-8hidroxiquinolin-2(1H)-ona (exemplo 92, etapa a) (0,28 g) em THF (8 mL) e a mistura reacional deixada descansar a 20°C durante 18 horas. Os solventes foram removidos sob pressão reduzida e o produto bruto foi purificado por HPLC preparativa (Sunfire®, gradiente: 10-40% de acetonitrila em 0,2% de TFA aquoso). As frações contendo o composto desejado foram evaporadas até a secura para fornecer o composto do título. Produção 0,175 g.
[001284] m/z 692 (M+H)+ (APCI) [001285] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO, 90°C) δ 8,14 (d, J = 10,0 Hz, 1H), 7,93 (s, 1H), 7,57 - 7,50 (m, 2H), 7,29 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 7,08 (d,
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J = 8,2 Hz, 1H), 6,98 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 6,52 (d, J = 10,0 Hz, 1H), 5,40 - 5,34 (m, 1H), 4,34 (s, 2H), 3,69 (s, 4H), 3,65 (s, 2H), 3,56 - 3,43 (m, 2H), 3,33 - 3,18 (m, 3H), 3,15 - 3,06 (m, 4H), 2,06 - 1,98 (m, 2H), 1,83 -
1,72 (m, 2H), 1,52 (s, 6H), 1,34 (d, J = 7,8 Hz, 6H). Seis prótons trocáveis não observados.
Exemplo 93
Ditrifluoroacetato de (R)-7-(2-(3-((4-(5-etiltiofeno-3-carbonil)-1 -oxa-
4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil)-5-fluorofenetilamino)-1hidroxietil)-4-hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona
a) (5-etiltiofen-3-il)(9-(3-fluoro-5-(2-hidroxietil)benzil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-4-il)metanona
[001286] HATU (0,449 g) foi adicionado em uma porção a uma solução a 0°C de 2-(3-(1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-ilmetil)-5fluorofenil)etanol (exemplo 55, etapa c) (0,28 g) e ácido 5-etiltiofeno-3carboxílico (0,142 g) e trietilamina (0,506 mL) em DMF (10 mL). A mistura foi em seguida agitada a 20°C durante 1 hora. A mistura reacional foi dividida entre acetato de etila e salmoura, a camada orgânica foi lavada duas vezes com salmoura, secada sobre sulfato de sódio, filtrada e o solvente evaporado sob pressão reduzida. O produto bruto foi purificado por cromatografia de sílica rápida usando 2% de metanol em diclorometano com 1% de trietilamina como solvente. Frações puras foram evaporadas até a secura para fornecer o composto do subtíPetição 870190058499, de 25/06/2019, pág. 440/650
435/638 tulo. Produção 0,21 g.
[001287] m/z 447 (M+H)+ (APCI)
b) Ditrifluoroacetato de (R)-7-(2-(3-((4-(5-etiltiofeno-3-carbonil)-1oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil)-5-fluorofenetilamino)1-hidroxietil)-4-hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona
[001288] Uma solução de (5-etiltiofen-3-il)(9-(3-fluoro-5-(2hidroxietil)benzil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4-il)metanona (exemplo 93, etapa a) (0,21 g) em DCM (15 mL) foi tratada com ácido trifluoroacético (0,036 mL) seguido por periodinano Dess-Martin (0,299 g) e a mistura resultante agitada a 20°C durante 40 minutos. A mistura reacional foi tratada com solução de tiossulfato de sódio saturada (20 mL) e solução de bicarbonato de sódio saturada (20 mL) e acetato de etila (30 mL) e agitada vigorosamente durante 5 minutos. A mistura foi extraída duas vezes com acetato de etila, os orgânicos combinados foram lavados com solução de bicarbonato de sódio saturada, secados sobre sulfato de sódio e filtrados. Ácido acético (0,027 mL) foi adicionado a esta solução e o solvente em seguida removido sob pressão reduzida. O resíduo foi dissolvido em metanol (3 mL) e adicionado a uma solução de cloridrato de (R)-7-(2-amino-1-hidroxietil)-4hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona (WO2007027134, exemplo 1, etapa d) (0,185 g) e ácido acético (0,027 mL) em metanol (15 mL). A mistura foi resfriada em um banho de gelo e tratada com cianoboroidreto de sódio (0,059 g). O banho de resfriamento foi removido e a mistura agitada a 20°C durante 3 horas. O solvente foi evaporado para um volume de 3 mL sob pressão reduzida e THF (20 mL) foi adicionado. A mistura foi lavada com uma mistura de salmoura saturada (10 mL) e solução de
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436/638 bicarbonato de sódio saturada (1 mL). A camada orgânica foi secada sobre sulfato de sódio, filtrada e o solvente removido sob pressão reduzida. O resíduo foi azeotropado duas vezes com acetonitrila. O produto bruto foi purificado por HPLC preparativa (Sunfire®, gradiente: 1040% de acetonitrila em 0,2% de TFA aquoso). As frações contendo o composto desejado foram evaporadas até a secura para fornecer o composto do título. Produção 0,115 g.
[001289] m/z 655 (M+H)+ (APCI) [001290] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO, 90°C) δ 11,26 (s, 1H), 7,47 (s, 1H), 7,28 - 7,17 (m, 3H), 6,93 (d, J = 8,7 Hz, 1H), 6,89 (s, 1H), 6,77 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 4,95 - 4,90 (m, 1H), 4,28 (s, 2H), 3,67 (t, J = 5,0 Hz, 2H), 3,53 (t, J = 4,9 Hz, 2H), 3,45 (s, 2H), 3,27 (t, J = 7,9 Hz, 2H), 3,19 - 3,00 (m, 8H), 2,81 (q, J = 7,6 Hz, 2H), 2,07 - 1,99 (m, 2H), 1,80 - 1,68 (m, 2H), 1,25 (t, J = 7,4 Hz, 3H). Cinco prótons trocáveis não observados.
Exemplo 94
Ditrifluoroacetato de (R)-8-hidróxi-5-(1-hidróxi-2-(3-(2-(4-(2- metiltiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)etóxi) benzilamino)etil)quinolin-2(1H)-ona
HO
HN
OH [001291] 3-(2-(4-(2-Metiltiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9-il)etóxi)benzaldeído (exemplo 10, etapa b) (0,24 g) foi adicionado a uma mistura de (R)-5-(2-amino-1-(tercbutildimetilsililóxi)etil)-8-hidroxiquinolin-2(1 H)-ona (WO2004106333) (0,187 g) e ácido acético (0,032 mL) em metanol (2 mL). A mistura foi agitada durante 30 minutos em seguida resfriada em um banho de gelo. Triacetoxiboroidreto de sódio (0,178 g) foi em seguida adicionado e
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437/638 a mistura agitada durante 2 horas e concentrada em vácuo. O resíduo foi dividido entre acetato de etila (50 mL) e tampão de pH 7,2 (50 mL). O aquoso foi separado e extraído com acetato de etila (2 x 50 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (20 mL), secadas sobre sulfato de sódio, filtradas e evaporadas. A purificação foi por cromatografia de sílica-gel eluindo com 95:5:0,5 a 92:8:0,8 de gradiente de DCM:metanol:amônia aquosa ‘880’. As frações contendo produto foram combinadas, evaporadas em vácuo e dissolvidas em tetra-hidrofurano (5 mL). tri-hidrofluoreto de trietilamina (0,091 mL) foi adicionado e a mistura agitada durante a noite. O solvente foi evaporado em vácuo e resíduo dissolvido em uma mistura de acetonitrila e água (1:1, 5 mL). A purificação foi por HPLC preparativa (Sunfire®, gradiente: 5-50% de acetonitrila em 0,2% de TFA aquoso). As frações contendo produto foram combinadas e evaporadas em vácuo e o resíduo triturado com dietiléter para fornecer os compostos títulos como um sólido branco. Produção 0,15 g.
[001292] m/z 634 (M+H)+ (APCI) [001293] 1H RMN (300 MHz, D6-DMSO, 90°C) δ 8,09 (d, J = 10,0 Hz,
1H), 7,92 (s, 1H), 7,37 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 7,20 - 6,94 (m, 5H), 6,50 (d, J = 10,0 Hz, 1H), 5,37 (dd, J = 8,2, 4,5 Hz, 1H), 4,37 (t, J = 5,0 Hz, 2H),
4,30 - 4,16 (m, 2H), 3,76 - 3,62 (m, 6H), 3,61 - 3,54 (m, 2H), 3,46 -
3,35 (m, 2H), 3,31 - 3,17 (m, 2H), 3,11 - 3,01 (m, 2H), 2,68 (s, 3H),
2,11 - 1,98 (m, 2H), 1,94 - 1,78 (m, 2H). Seis prótons trocáveis não observados.
Exemplo 95
Ditrifluoroacetato de (R)-8-hidróxi-5-(1-hidróxi-2-(3-(3-(4-(2metiltiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il) propóxi)benzilamino)etil)quinolin-2(1H)-ona
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438/638
a) metanossulfonato de 3-(3-formjlfenóxj)propjla
H [001294] 3-Bromo-1-propanol (3,94 mL) e carbonato de potássio (6,22 g) foram adicionados a 3-hidroxibenzaldeído (5 g) em acetonitrila (100 mL). A mistura resultante foi agitada ao refluxo durante 5 horas sob nitrogênio. A mistura reacional foi resfriada para temperatura ambiente e dividida entre acetato de etila e hidróxido de sódio aquoso diluído gelado. A camada orgânica foi lavada com salmoura, secada sobre sulfato de sódio, filtrada e o solvente removido sob pressão reduzida. O resíduo foi dissolvido em DCM (30 mL) e tratado com trietilamina (5,7 mL). A solução foi resfriada para 0°C e tratada gota a gota com cloreto de metanossulfonila (3,2 mL). A mistura reacional foi agitada a 0°C durante 10 minutos e em seguida em temperatura ambiente durante 1 hora. A mistura foi lavada duas vezes com salmoura, secada sobre sulfato de sódio, filtrada e o solvente evaporado sob pressão reduzida. O produto bruto foi purificado por cromatografia de sílica rápida usando 33% de acetato de etila em iso-hexano como solvente. Frações puras foram evaporadas até a secura para fornecer o composto do subtítulo. Produção 5,20 g.
[001295] 1H RMN (400 MHz, CDCh) δ 9,98 (s, 1H), 7,50 - 7,43 (m, 2H), 7,40 - 7,39 (m, 1H), 7,20 - 7,16 (m, 1H), 4,46 (t, J = 6,2 Hz, 2H),
4,17 (t, J = 5,9 Hz, 2H), 3,01 (s, 3H), 2,30 - 2,23 (m, 2H).
b) 3-(3-(4-(2-Metiltjazol-4-carbonjl)-1 -oxa-4,9-djazaespjro[5,5] undecan-9-jl)propóxj)benzaldeído
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439/638
[001296]
Uma
solução de metanossulfonato de 3-(3formilfenóxi)propila (exemplo 95, etapa a) (0,209 g) e trifluoroacetato de (2-metiltiazol-4-il)(1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4-il)metanona (exemplo 4, etapa h) (0,32 g) e trietilamina (0,282 mL) em acetonitrila (10 mL) foi aquecida a 65°C durante 18 horas. O solvente foi evaporado sob pressão reduzida e o resíduo dividido entre acetato de etila e salmoura. A camada orgânica foi secada sobre sulfato de sódio, filtrada e o solvente evaporado sob pressão reduzida. O produto bruto foi purificado por cromatografia de sílica rápida usando 2% de metanol e 1% de trietilamina em diclorometano. Frações puras foram evaporadas até a secura para fornecer o composto do subtítulo. Produção 0,157 g. [001297] m/z 444 (M+H)+ (APCI)
c) (R)-5-(1-(terc-butildimetilsililóxi)-2-(3-(3-(4-(2-metiltiazol-4- carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)propóxi) benzilamino)etil)-8-hidroxiquinolin-2(1H)-ona
[001298] Triacetoxiboroidreto de sódio (0,113 g) foi adicionado em uma porção a uma solução agitada a 0°C de 3-(3-(4-(2-metiltiazol-4carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)propóxi)benzaldeído (exemplo 95, etapa b) (0,157 g), (R)-5-(2-amino-1-(tercPetição 870190058499, de 25/06/2019, pág. 445/650
440/638 butildimetilsililóxi)etil)-8-hidroxiquinolin-2(1 H)-ona (WO2004106333) (0,118 g) e ácido acético (0,020 mL) em metanol (7 mL). A mistura resultante foi agitada a 20°C durante 2 horas. A maioria do metanol foi evaporada sob pressão reduzida e o resíduo foi dividido entre acetato de etila e tampão de fosfato aquoso (pH = 7,2), a camada orgânica foi secada sobre sulfato de sódio, filtrada e o solvente evaporado sob pressão reduzida. O produto bruto foi purificado por cromatografia de sílica rápida usando 8% de metanol e 1% de amônia aquosa ‘880’ em diclorometano como solvente. Frações puras foram evaporadas até a secura para fornecer o composto do subtítulo. Produção 0,160 g. [001299] m/z 762 (M+H)+ (APCI)
d) Ditrifluoroacetato de (R)-8-hidróxi-5-(1-hidróxi-2-(3-(3-(4-(2- metiltiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9il)propóxi)benzilamino)etil)quinolin-2(1H)-ona [001300] Uma solução de (R)-5-(1-(terc-butildimetilsililóxi)-2-(3-(3-(4(2-metiltiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9il)propóxi)benzilamino)etil)-8-hidroxiquinolin-2(1H)-ona (exemplo 95, etapa c) (0,160 g) em THF (2 mL) foi tratada com tri-hidrofluoreto de trietilamina (0,041 mL) e a mistura resultante agitada durante 18 horas a 20°C. O solvente foi evaporado e o produto bruto foi purificado por HPLC preparativa (Sunfire®, gradiente: 5-35% de acetonitrila em 0,2% de TFA aquoso). As frações contendo o composto desejado foram evaporadas até a secura para fornecer o composto do título. Produção 0,081 mg.
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441/638 [001301] m/z 648 (M+H)+ (APCI) [001302] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO) δ 10,75 - 10,43 (m, 2H),
10,00 - 9,74 (m, 1H), 9,30 (s, 1H), 9,10 (s, 1H), 8,07 (d, J = 9,7 Hz, 1H), 8,01 (s, 1H), 7,36 (t, J = 7,9 Hz, 1H), 7,16 - 7,09 (m, 3H), 7,01 6,94 (m, 2H), 6,54 (d, J = 9,7 Hz, 1H), 5,35 (d, J = 9,5 Hz, 1H), 4,21 (s, 2H), 4,07 - 4,00 (m, 2H), 3,83 - 3,16 (m, 10H), 3,08 - 2,90 (m, 4H), 2,70 (s, 3H), 2,18 - 2,04 (m, 4H), 1,83 - 1,66 (m, 2H). Um próton trocável não observado.
Exemplo 96
Ditrifluoroacetato de (R)-8-hidróxi-5-(1 -hidróxi-2-(3-((4-(2metiltiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9il)metil)benzilamino)etil)quinolin-2(1H)-ona
HO
OH
a) 3-((4-(2-Metiltiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan9-il)metil)benzaldeído [001303] Uma solução de trifluoroacetato de (2-metiltiazol-4-il)(1-oxa-
4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4-il)metanona (exemplo 4, etapa h) (0,408 g), 3-(bromometil)benzaldeído (0,205 g) e trietilamina (0,36 mL) em acetonitrila (10 mL) foi agitada em temperatura ambiente durante a noite. A solução foi concentrada em vácuo e o resíduo dividido entre acetato de etila e bicarbonato de sódio saturado. A fase orgânica foi lavada duas vezes com água, uma vez com salmoura, em seguida secada sobre sulfato de magnésio anidroso e purificada por cromatografia rápida em sílica eluída com 5% de metanol em diclorometano para
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442/638 fornecer o composto do subtítulo como uma goma amarela. Produção 0,325 g.
[001304] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO, 90°C) δ 10,01 (s, 1H), 7,85 (d, J = 0,8 Hz, 1H), 7,80 (s, 1H), 7,76 (d, J = 7,4 Hz, 1H), 7,61 (d, J =
7,4 Hz, 1H), 7,52 (t, J = 7,4 Hz, 1H), 3,71 - 3,46 (m, 8H), 2,68 (s, 3H),
2,44 - 2,29 (m, 4H), 1,78 - 1,65 (m, 2H), 1,61 - 1,46 (m, 2H).
b) (R)-5-(1-(terc-butildimetilsililóxi)-2-(3-((4-(2-metiltiazol-4carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil) benzilamino)etil)-8-hidroxiquinolin-2(1H)-ona
OH [001305] Uma solução de 3-((4-(2-metiltiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil)benzaldeído (exemplo 96, etapa a) (0,303 g), (R)-5-(2-amino-1-(terc-butildimetilsililóxi)etil)-8hidroxiquinolin-2(1H)-ona (WO2004106333) (0,330 g) e ácido acético (0,043 mL) em metanol (5 mL) foi agitada em temperatura ambiente durante 30 minutos, em seguida resfriada em um banho de gelo-água sob nitrogênio e tratada com triacetoxiboroidreto de sódio (0,243 g) em uma porção. A mistura foi agitada em gelo-água durante 2 horas, em seguida concentrada em vácuo. O resíduo foi dividido entre acetato de etila e solução de bicarbonato de sódio saturada, as fases foram separadas, e a fase aquosa foi extraída duas vezes mais com acetato de etila. Quaisquer resíduos gomosos insolúveis foram dissolvidos em metanol. As fases de acetato de etila combinadas foram lavadas com salmoura, secadas sobre sulfato de magnésio e combinadas com a solução de metanol. O todo foi purificado por cromatografia rápida em sílica eluída com 1:7:92 de trietilamina:metanol:diclorometano para
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443/638 fornecer o produto subtítulo levemente impuro como uma espuma amarela. Produção 0,324 g.
[001306] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO, 90°C ) δ 8,35 (d, J = 10,0
Hz, 1H), 8,01 (s, 1H), 7,40 - 7,30 (m, 2H), 7,30 - 7,23 (m, 2H), 7,17 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,08 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 6,59 (d, J = 10,0 Hz, 1H), 5,30 (dd, J = 7,3, 4,7 Hz, 1H), 3,91 - 3,70 (m, 8H), 3,57 (s, 2H), 3,02 (dd, J =
12,3, 7,4 Hz, 1H), 2,91 - 2,77 (m, 4H), 2,56 - 2,43 (m, 4H), 1,90 - 1,80 (m, 2H), 1,74 - 1,62 (m, 2H), 0,99 (s, 9H), 0,19 (s, 3H), 0,00 (s, 3H). Três prótons trocáveis não observados.
c) Ditrifluoroacetato de (R)-8-hidróxi-5-(1-hidróxi-2-(3-((4-(2- metiltiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9il)metil)benzilamino)etil)quinolin-2(1H)-ona /x. zx. /x. zx O
HO
OH [001307] Uma solução de (R)-5-(1-(terc-butildimetilsililóxi)-2-(3-((4-(2metiltiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9il)metil)benzilamino)etil)-8-hidroxiquinolin-2(1H)-ona (exemplo 96, etapa b) (0,320 g) e tri-hidrofluoreto de trietilamina (0,15 mL) em THF (5 mL) foi agitada em temperatura ambiente durante a noite em seguida concentrada em vácuo. O resíduo foi dissolvido em uma mistura de acetonitrila (3 ml) e água (1 ml) e a solução resultante purificada por HPLC preparativa (Sunfire®, gradiente: 5-50% de acetonitrila em 0,2% de TFA aquoso). Frações contendo produto foram concentradas em vácuo e coevaporadas de acetonitrila três vezes para fornecer uma espuma branca. A espuma foi triturada com dietil éter para fornecer um sólido, que foi removido por filtração, lavado com dietil éter e secado em vácuo em temperatura ambiente para fornecer o composto do título como um pó branco. Produção 0,264 g.
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444/638 [001308] m/z 604 (M+H)+ (APCI) [001309] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO, 90°C) δ 8,08 (d, J = 9,7 Hz,
1H), 7,90 (s, 1H), 7,65 - 7,49 (m, 4H), 7,10 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 6,97 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 6,52 (d, J = 10,0 Hz, 1H), 5,35 (dd, J = 8,6, 4,2 Hz, 1H), 4,35 - 4,21 (m, 4H), 3,74 - 3,57 (m, 6H), 3,23 - 2,98 (m, 6H), 2,67 (s, 3H), 2,06 - 1,91 (m, 2H), 1,85 - 1,65 (m, 2H). Seis prótons trocáveis não observados.
Exemplo 97
Ditrifluoroacetato de (R)-5-(2-(2,5-Dimetil-4-(2-(4-(2-metiltiazol-4carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)etóxi) benzilamino)-1 -hidroxietil)-8-hidroxiquinolin-2(1 H)-ona
HO
OH [001310] 2,5-Dimetil-4-(2-(4-(2-metiltiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9-il)etóxi)benzaldeído (exemplo 18, etapa f) (0,08 g) foi adicionado a uma mistura de (R)-5-(2-amino-1-(tercbutildimetilsililóxi)etil)-8-hidroxiquinolin-2(1 H)-ona (WO2004106333) (0,088 g) e ácido acético (0,010 mL) em metanol (2 mL). A mistura foi agitada durante 30 minutos em seguida resfriada em um banho de gelo. Cianoboroidreto de sódio (0,016 g) foi em seguida adicionado e a mistura agitada durante 2 horas. O solvente foi removido em vácuo e o resíduo foi purificado por cromatografia de sílica-gel eluindo com 95:5:0,5 a 92:8:0,8 de gradiente de DCM:metanol:amônia aquosa ‘880’. As frações contendo produto foram combinadas e evaporadas em vácuo. O resíduo foi novamente dissolvido em tetra-hidrofurano (5 mL), tri-hidrofluoreto de trietilamina (0,028 mL) foi adicionado e a mistura agitada durante a noite. O solvente foi evaporado em vácuo. A
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445/638 purificação foi por HPLC preparativa (Sunfire®, gradiente: 5-50% de acetonitrila em 0,2% de TFA aquoso). As frações contendo produto foram combinadas, evaporadas em vácuo e o resíduo triturado com dietil éter para fornecer o composto do título como um sólido branco. Produção 0,07 g.
[001311] m/z 662 (M+H)+ (APCI) [001312] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO, 90°C) δ 8,12 (d, J = 10,0 Hz,
1H), 7,92 (s, 1H), 7,27 (s, 1H), 7,12 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 6,99 (d, J =8,2
Hz, 1H), 6,86 (s, 1H), 6,51 (d, J = 9,7 Hz, 1H), 5,38 (dd, J = 8,2,4,6
Hz, 1H), 4,35 (t, J = 4,9 Hz, 2H), 4,25 - 4,13 (m, 2H), 3,76 - 3,64(m,
6H), 3,61 - 3,53 (m, 2H), 3,46 - 3,36 (m, 2H), 3,33 - 3,20 (m, 2H), 3,19 -
3,10 (m, 2H), 2,68 (s, 3H), 2,33 (s, 3H), 2,15 (s, 3H), 2,12 - 2,01 (m, 2H), 1,95 - 1,79 (m, 2H). Seis prótons trocáveis não observados.
Exemplo 98
Ditrifluoroacetato de (R)-8-hidróxi-5-(1 -hidróxi-2-((5-(2-(4-(2metiltiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9il)etil)tiofen-2-il)metilamino)etil)quinolin-2(1H)-ona
HO
O
a) Ditrifluoroacetato de (R)-5-(1-(terc-butildimetilsililóxi)-2-((5-(2-(4- (2-metiltiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9il)etil)tiofen-2-il)metilamino)etil)-8-hidroxiquinolin-2(1H)-ona
HO
O
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446/638 [001313] Uma solução de 5-(2-(4-(2-metiltiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9-il)etil)tiofeno-2-carbaldeído (exemplo 21, etapa c) (0,188 g) e (R)-5-(2-amino-1-(terc-butildimetilsililóxi)etil)-8hidroxiquinolin-2(1H)-ona (WO2004106333) (0,150 g) em metanol (10 mL) foi tratada com ácido acético (0,026 mL) seguido por triacetoxiboroidreto de sódio (0,143 g). A mistura foi agitada a 20°C durante 18 horas. Mais triacetoxiboroidreto de sódio (0,143 g) foi adicionado e agitação a 20°C foi continuada durante 2 horas. Mais triacetoxiboroidreto de sódio (143 mg) foi adicionado e agitação continuada durante 2 horas. O metanol foi removido sob pressão reduzida e o resíduo foi dividido entre solução de bicarbonato de sódio saturada e acetato de etila. A camada orgânica foi secada sobre sulfato de sódio, filtrada e o solvente removido sob pressão reduzida. O produto bruto foi purificado por cromatografia de sílica rápida usando 1% de amônia aquosa concentrada e 8% de metanol em diclorometano como solvente. Frações puras foram evaporadas até a secura para fornecer o composto do subtítulo. Produção 0,122 g.
[001314] m/z 738 (M+H)+ (APCI)
b) Ditrifluoroacetato de (R)-8-hidróxi-5-(1 -hidróxi-2-((5-(2-(4-(2- metiltiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9il)etil)tiofen-2-il)metilamino)etil)quinolin-2(1H)-ona
HO
O [001315] Uma solução de (R)-5-(1-(terc-butildimetilsililóxi)-2-((5-(2-(4(2-metiltiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9il)etil)tiofen-2-il)metilamino)etil)-8-hidroxiquinolin-2(1H)-ona (exemplo
98, etapa a) (0,122 g) em THF (4 mL) foi tratada com uma solução de
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447/638 tri-hidrofluoreto de trietilamina (0,035 mL) em metanol (1 mL) e a mistura resultante foi deixada descansar a 20°C durante 18 horas. Os solventes foram removidos sob pressão reduzida e o produto bruto foi purificado por HPLC preparativa (Sunfire®, gradiente: 10-40% de acetonitrila em 0,2% de TFA aquoso). As frações contendo o composto desejado foram evaporadas até a secura para fornecer o composto do título. Produção 0,085 g.
[001316] m/z 624 (M+H)+ (APCI) [001317] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO, 90°C) δ 8,10 (d, J = 31,8 Hz,
1H), 7,93 (s, 1H), 7,15 (d, J = 12,5 Hz, 1H), 7,10 (d, J = 15,7 Hz, 1H),
6,98 (d, J = 22,6 Hz, 1H), 6,92 (d, J = 11,2 Hz, 1H), 6,53 (d, J = 30,4 Hz, 1H), 5,37 - 5,31 (m, 1H), 4,41 (dd, J = 17,7, 14,4 Hz, 2H), 3,71 (s, 4H), 3,66 (s, 2H), 3,42 - 3,33 (m, 4H), 3,27 - 3,06 (m, 6H), 2,68 (s, 3H),
2,10 - 1,98 (m, 2H), 1,88 - 1,75 (m, 2H). Seis prótons trocáveis não observados.
Exemplo 99
Ditrifluoroacetato de (R)-7-(2-(5-((4-(5-etiltiofeno-3-carbonil)-1 -oxa-
4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil)-2-fluorofenetilamino)-1hidroxietil)-4-hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona
a) Trifluoroacetato de (5-etiltiofen-3-il)(1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5] undecan-4-il)metanona
[001318] HATU (1,15 g) foi adicionado em uma porção a uma solução a 0°C de cloridrato de 1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecano-9
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448/638 carboxilato de terc-butila (WuXi PharmaTech) (0,682 g) e ácido 5etiltiofeno-3-carboxílico (0,364 g) e trietilamina (1,3 mL) em DMF (10 mL). A mistura foi em seguida agitada a 20°C durante 1 hora. A mistura reacional foi dividida entre acetato de etila e salmoura, a camada orgânica foi lavada duas vezes com salmoura, secada sobre sulfato de sódio, filtrada e o solvente evaporado sob pressão reduzida. O produto bruto foi purificado por cromatografia de sílica rápida usando 50% de acetato de etila em iso-hexano. Frações puras foram evaporadas até a secura para fornecer o intermediário protegido por ‘BOC’. DCM (10 mL) foi adicionado seguido por ácido trifluoroacético (10 mL) e a solução resultante deixada descansar a 20°C durante 25 minutos. Tolueno (30 mL) foi adicionado e os solventes evaporados sob pressão reduzida. O resíduo foi azeotropado duas vezes com acetonitrila para produzir o composto do subtítulo. Produção 0,950 g.
[001319] m/z 295 (M+H)+ (APCI)
b) (5-etiltiofen-3-il)(9-(4-fluoro-3-(2-hidroxietil)benzil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-4-il)metanona [001320] 2-(5-(Bromometil)-2-fluorofenil)etanol (exemplo 47, etapa a) (0,171 g) foi adicionado à solução de trifluoroacetato de (5-etiltiofen-3il)(1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4-il)metanona (exemplo 99, etapa a) (0,3 g) e trietilamina (0,410 ml) em acetonitrila (15 mL) e a mistura agitada a 20°C durante 2 horas. O solvente foi evaporado sob pressão reduzida e o resíduo dividido entre acetato de etila e solução de bicarbonato de sódio saturada. A camada orgânica foi secada sobre sulfato de sódio, filtrada e o solvente evaporado sob pressão reduzida.
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449/638
O produto bruto foi purificado por cromatografia de sílica rápida usando 1% de trietilamina e 2% de metanol em diclorometano como solvente. Frações puras foram evaporadas até a secura para fornecer o composto do subtítulo. Produção 0,2 g.
[001321] m/z 447 (M+H)+ (APCI)
c) Ditrifluoroacetato de (R)-7-(2-(5-((4-(5-etiltiofeno-3-carbonil)-1oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil)-2-fluorofenetilamino)1-hidroxietil)-4-hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona
[001322] Uma solução de (5-etiltiofen-3-il)(9-(4-fluoro-3-(2hidroxietil)benzil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4-il)metanona (exemplo 99, etapa b) (0,2 g) em DCM (15 mL) foi tratada com ácido trifluoroacético (0,035 ml) seguido por periodinano Dess-Martin (0,285 g) e a mistura resultante agitada a 20°C durante 40 minutos. A mistura reacional foi tratada com solução de tiossulfato de sódio saturada (20 mL) e solução de bicarbonato de sódio saturada (20 mL) e acetato de etila (30 mL) e agitada vigorosamente durante 5 minutos. A mistura foi extraída duas vezes com acetato de etila, os orgânicos combinados foram lavados com solução de bicarbonato de sódio saturada, secados sobre sulfato de sódio e filtrados. Ácido acético (0,026 ml) foi adicionado a esta solução e o solvente em seguida removido sob pressão reduzida. O resíduo foi dissolvido em metanol (3 mL) e adicionado a uma solução de cloridrato de (R)-7-(2-amino-1-hidroxietil)-4hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona (WO2007027134, exemplo 1, etapa d) (0,176 g) e ácido acético (0,026 ml) em metanol (15 mL). A mistura foi resfriada em um banho de gelo e tratada com cianoboroidreto de sódio (0,056 g). O banho de resfriamento foi removido e a mistura agitada a
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20°C durante 3 horas. O solvente foi evaporado para um volume de 3 mL sob pressão reduzida e THF (20 mL) foi adicionado. A mistura foi lavada com uma mistura de salmoura saturada (10 mL) e solução de bicarbonato de sódio saturada (1 mL). A camada orgânica foi secada sobre sulfato de sódio, filtrada e o solvente removido sob pressão reduzida. O resíduo foi azeotropado duas vezes com acetonitrila. O produto bruto foi purificado por HPLC preparativa (Sunfire®, gradiente: 10-40% de acetonitrila em 0,2% de TFA aquoso). As frações contendo o composto desejado foram evaporadas até a secura para fornecer o composto do título. Produção 0,14 g.
[001323] (M+H)+ 655 (APCI) [001324] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO, 90°C) δ 11,27 (s, 1H), 7,49 -
7,44 (m, 3H), 7,29 - 7,23 (m, 1H), 6,94 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 6,89 (s, 1H),
6,77 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 4,94 - 4,89 (m, 1H), 4,26 (s, 2H), 3,67 (t, J = 5,0 Hz, 2H), 3,53 (t, J = 5,0 Hz, 2H), 3,45 (s, 2H), 3,24 (t, J = 8,1 Hz, 2H), 3,18 - 3,02 (m, 8H), 2,81 (q, J = 7,5 Hz, 2H), 2,07 - 1,98 (m, 2H),
1,79 - 1,67 (m, 2H), 1,25 (t, J = 7,4 Hz, 3H). Cinco prótons trocáveis não observados.
Exemplo 100
Ditrifluoroacetato de (R)-7-(2-(3-((4-(5-etiltiofeno-3-carbonil)-1 -oxa-
4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil)-4-fluorofenetilamino)-1hidroxietil)-4-hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona
OH
HO
a) terc-butil(4-fluorofenetóxi)dimetilsilano [001325] Cloreto de terc-butildimetilsilila (0,903 g) foi adicionado por
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451/638 ção a porção a uma solução agitada de 2-(4-fluorofenil)etanol (0,7 g) e imidazol (0,408 g) em DMF (20 mL) a 20°C. A mistura reacional foi agitada durante 3 horas em temperatura ambiente e em seguida dividida entre acetato de etila e salmoura. A camada orgânica foi lavada duas vezes com salmoura, secada sobre sulfato de sódio, filtrada e o solvente evaporado sob pressão reduzida. O produto bruto foi purificado por cromatografia de sílica rápida usando 2% de acetato de etila em iso-hexano como solvente. Frações puras foram evaporadas até a secura para fornecer o composto do subtítulo. Produção 0,99 g.
[001326] 1H RMN (400 MHz, CDCh) δ 7,18-7,13 (m, 2H), 6,99-6,93 (m, 2H), 3,77 (t, J = 6,9 Hz, 2H), 2,78 (t, J = 6,8 Hz, 2H), 0,86 (s, 9H), 0,03 (s, 6H)
b) 5-(2-(terc-butildimetilsililóxi)etil)-2-fluorobenzaldeído o x / [001327] sec-Butil lítio (1,4M em ciclo-hexano, 2,78 ml) foi adicionado a tetra-hidrofurano seco (10 mL) sob nitrogênio e a solução resfriada para -78°C. M7-(2-(dimetilamino)etil)-M7,M2,M2-trimetiletano-1,2diamina (0,674 g) foi adicionado lentamente gota a gota. Uma solução de terc-butil(4-fluorofenetóxi)dimetilsilano (exemplo 100, etapa a) (0,99 g) em tetra-hidrofurano seco (3 mL) foi em seguida adicionada gota a gota durante 5 minutos. Mistura reacional agitada durante 2 horas a 78°C. DMF (2,1 ml) foi adicionado gota a gota durante 5 minutos e a mistura agitada a -78°C durante 1 hora seguida por temperatura ambiente durante 45 minutos. A mistura reacional foi extinta pela adição de água. Acetato de etila (200 mL) foi adicionado e o orgânico lavado três vezes com água, seguido por duas vezes com HCl a 2 M e em seguida duas vezes com água. A solução orgânica foi lavada com salmoura, secada sobre sulfato de sódio, filtrada e evaporada sob pressão reduzida. O produto bruto foi purificado por cromatografia de sílica rápida
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452/638 usando 2% de acetato de etila em iso-hexano como solvente. Frações puras foram evaporadas até a secura para fornecer o composto do subtítulo. Produção 0,5 g.
[001328] 1H RMN (400 MHz, CDCh) δ 10,36 (s, 1H), 7,72-7,69 (m,
1H), 7,48-7,43 (m, 1H), 7,11-7,06 (m, 1H), 3,80 (t, J = 6,5 Hz, 2H), 2,83 (t, J = 6,4 Hz, 2H), 0,85 (s, 9H), 0,04 (s, 6H).
c) (5-etiltiofen-3-il)(9-(2-fluoro-5-(2-hidroxietil)benzil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-4-il)metanona
[001329] Triacetoxiboroidreto de sódio (0,225 g) foi adicionado a uma solução agitada a 0°C de trifluoroacetato de (5-etiltiofen-3-il)(1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-4-il)metanona (exemplo 99, etapa a) (0,289 g) e 5-(2-(terc-butildimetilsililóxi)etil)-2-fluorobenzaldeído (exemplo 100, etapa b) (0,2 g) e ácido acético (0,041 ml) em NMP (20 mL). A mistura reacional foi em seguida agitada a 20°C durante 18 horas. Mais triacetoxiboroidreto de sódio (0,150 g) foi adicionado e agitação continuada durante 4 horas. A mistura foi dividida entre acetato de etila e solução de bicarbonato de sódio saturada, a camada orgânica foi lavada duas vezes com salmoura, secada sobre sulfato de sódio, filtrada e o solvente evaporado sob pressão reduzida. A goma resultante foi dissolvida em THF (20 mL) e tratada com TBAF (1M em THF, 1,4 ml). A solução foi deixada descansar a 20°C durante 8 horas. O solvente foi evaporado sob pressão reduzida e o produto bruto foi purificado por cromatografia de sílica rápida usando 2% de metanol em diclorometano com 1% de trietilamina como solvente. Frações puras foram evaporadas até a secura para fornecer o composto do subtítulo. Produção 0,18 g.
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453/638 [001330] m/z 447 (M+H)+ (APCI)
d) Ditrifluoroacetato de (R)-7-(2-(3-((4-(5-etiltiofeno-3-carbonil)-1oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil)-4-fluorofenetilamino)1-hidroxietil)-4-hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona
hidroxietil)benzil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4-il)metanona (exemplo 100, etapa c) (0,18 g) em DCM (15 mL) foi tratada com ácido trifluoroacético (0,031 ml) seguido por periodinano Dess-Martin (0,256 g) e a mistura resultante agitada a 20°C durante 40 minutos. A mistura reacional foi tratada com solução de tiossulfato de sódio saturada (20 mL) e solução de bicarbonato de sódio saturada (20 mL) e acetato de etila (30 mL) e agitada vigorosamente durante 5 minutos. A mistura foi extraída duas vezes com acetato de etila, os orgânicos combinados foram lavados com solução de bicarbonato de sódio saturada, secados sobre sulfato de sódio e filtrados. Ácido acético (0,023 ml) foi adicionado a esta solução e o solvente em seguida removido sob pressão reduzida. O resíduo foi dissolvido em metanol (3 mL) e adicionado a uma solução de cloridrato de (R)-7-(2-amino-1-hidroxietil)-4hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona (WO2007027134, exemplo 1, etapa d) (0,159 g) e ácido acético (0,023 ml) em metanol (15 mL). A mistura foi resfriada em um banho de gelo e tratada com cianoboroidreto de sódio (0,051 g). O banho de resfriamento foi removido e a mistura agitada a 20°C durante 3 horas. O solvente foi evaporado para um volume de 3 mL sob pressão reduzida e THF (20 mL) foi adicionado. A mistura foi lavada com uma mistura de salmoura saturada (10 mL) e solução de bicarbonato de sódio saturada (1 mL). A camada orgânica foi secada
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454/638 sobre sulfato de sódio, filtrada e o solvente removido sob pressão reduzida. O resíduo foi azeotropado duas vezes com acetonitrila. O produto bruto foi purificado por HPLC preparativa (Sunfire®, gradiente: 10-40% de acetonitrila em 0,2% de TFA aquoso). As frações contendo o composto desejado foram evaporadas até a secura para fornecer o composto do título. Produção 0,14 g.
[001332] m/z 655 (M+H)+ (APCI) [001333] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO, 90°C) δ 11,27 (s, 1H), 7,48 -
7,43 (m, 2H), 7,42 - 7,37 (m, 1H), 7,25 (t, J = 9,1 Hz, 1H), 6,93 (d, J =
8,1 Hz, 1H), 6,89 (s, 1H), 6,77 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 4,94 - 4,88 (m, 1H),
4,27 (s, 2H), 3,67 (t, J = 5,0 Hz, 2H), 3,53 (t, J = 5,0 Hz, 2H), 3,45 (s, 2H), 3,23 (t, J = 8,2 Hz, 2H), 3,18 - 2,97 (m, 8H), 2,81 (q, J = 7,8 Hz, 2H), 2,04 - 1,98 (m, 2H), 1,79 - 1,69 (m, 2H), 1,25 (t, J = 7,6 Hz, 3H). Cinco prótons trocáveis não observados.
Exemplo 101
Formiato de (R)-4-hidróxi-7-(1 -hidróxi-2-(2-(6-(4-(2-isopropiltiazol4-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)hexiltio) etilamino)etil)benzo[d]tiazol-2(3H)-ona
HN
HO v
a) 6-(2,2-Dimetoxietiltio)hexan-1 -ol
HO
O [001334] A uma solução de 6-mercapto-hexan-1-ol (2,5 mL) em MeCN (30 mL) a 0°C foi adicionado hidreto de sódio (60% de suspensão em óleo mineral, 0,81 g). A mistura foi agitada a 0°C durante 1 hora em seguida 2-bromo-1,1-dimetóxi-etano (2,4 mL) foi adicionado. A mistura resultante foi agitada a TA durante 20 horas, em seguida foi
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455/638 extinta pela adição de solução de bicarbonato de sódio saturada. A mistura foi extraída com acetato de etila (χ 3), em seguida os orgânicos combinados foram lavados com solução de bicarbonato de sódio saturada, em seguida com salmoura, secados sobre sulfato de sódio, filtrados e evaporados em vácuo. A purificação foi por cromatografia de sílica-gel eluindo com 25% de acetato de etila em ciclo-hexano para fornecer o composto do subtítulo como um líquido incolor. Produção 1,85 g.
[001335] 1H RMN (400 MHz, Ü4-MeOH) δ 4,49 (t, J = 5,5Hz, 1H),
3,64 (t, J = 6,6Hz, 2H), 3,37 (s, 6H), 2,69 (d, J = 5,5Hz, 2H), 2,59 (t, J = 7,4Hz, 2H), 1,66-1,52 (m, 4H), 1,46-1,32 (m, 4H). Um próton trocável não observado.
b) 2-(6-Bromoexjltjo)acetaldeído [001336] A uma solução de 6-(2,2-dimetoxietiltio)hexan-1-ol (exemplo 101, etapa a) (1,85 g) em DCM (75 mL) a 0°C sob N2 foi adicionado tetrabrometo de carbono (3,31 g) seguido por trifenilfosfina (2,62 g) porção a porção. A mistura resultante foi agitada a TA durante 1,25 hora em seguida concentrada em vácuo. A purificação foi por cromatografia de sílica-gel eluindo com 0-50% de acetato de etila em ciclohexano para fornecer o composto do subtítulo como um líquido amarelo. Produção 1,31 g.
[001337] 1H RMN (400MHz, CDCh) δ 9,47 (t, J = 3,5Hz, 1H), 3,43-
3,36 (m, 2H), 3,18 (d, J = 3,5Hz, 2H), 2,44 (t, J = 7,3Hz, 2H), 1,91-1,81 (m, 2H), 1,64-1,53 (m, 2H), 1,49-1,36 (m, 4H).
c) 2-(6-Bromoexjltjo)etjl(2-hjdróxj-2-(4-hjdróxj-2-oxo-2,3-djhjdrobenzo[d]tjazol-7-jl)etjl)carbamato de (R)-terc-butjla
Petição 870190058499, de 25/06/2019, pág. 461/650
456/638
[001338] A uma solução de 2-(6-bromoexiltio)acetaldeído (exemplo 101, etapa b) (1,2 g) em DMF (20 mL) com ácido acético (0,287 mL) e peneiras moleculares de 3Â a 0°C sob N2 foi adicionado cloridrato de (R)-7-(2-amino-1-hidroxietil)-4-hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona (WO2007027134, exemplo 1, etapa d) (1,45 g). A mistura resultante foi agitada a 0°C durante 1 hora, em seguida triacetoxiboroidreto de sódio (1,6 g) foi adicionado e a mistura agitada a TA durante 2 horas. Dicarbonato de di-terc-butila (1,1 g) foi adicionado e agitação foi continuada durante 20 horas. A mistura reacional foi extinta pela adição de solução de bicarbonato de sódio saturada (40 mL), em seguida a solução foi extraída com acetato de etila (χ 3). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secadas sobre sulfato de sódio, filtradas e evaporadas em vácuo. A purificação foi por cromatografia de sílica-gel eluindo com 0-100% de acetato de etila em ciclo-hexano para fornecer o composto do subtítulo como um óleo amarelo. Produção 0,56 g.
[001339] 1H RMN (300 MHz, D4-MeOH) δ 6,89 (dd, J = 18,6, 8,3Hz,
1H), 6,72 (d, J = 8,2Hz, 1H), 4,87 (s, 1H), 3,59-3,39 (m, 4H), 3,33-3,29 (m, 2H), 2,64-2,41 (m, 4H), 1,89-1,80 (m, 2H), 1,66-1,32 (m, 15H). Três prótons trocáveis não observados.
d) 4-(2,2,2-trifluoroacetil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecano-9carboxilato de terc-butila
[001340] Uma solução de anidrido trifluoroacético (2,2 mL) em DCM
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457/638 (14 mL) foi adicionada gota a gota durante 20 minutos a uma solução de cloridrato de 1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecano-9-carboxilato de terc-butila (WuXi PharmaTech) (4,7 g) e trietilamina (4,9 mL) em DCM (90 mL) a 0oC. A mistura foi agitada a 0oC durante 45 minutos e em seguida em RT durante 2 horas. Água (90 mL) foi adicionada e a mistura foi vigorosamente agitada durante 10 minutos. As camadas foram separadas e a camada aquosa foi extraída com DCM (50 mL). As camadas orgânicas combinadas foram secadas sobre sulfato de sódio e evaporadas em vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de sílica-gel eluindo com 40-50% de EtOAc em éter de petróleo (40-60oC) para fornecer o composto do subtítulo como um óleo amarelo. Produção 2,73 g.
[001341] 1H RMN (400 MHz, CDCh) δ 3,86 (d, J = 13,3 Hz, 1H), 3,77 (t, J = 4,9Hz, 2 H), 3,74-3,64 (m, 2H), 3,61 (t, J = 4,8 Hz, 1H), 3,52 (s, 1H), 3,23-3,15 (m, 1H), 3,07 (t, J = 11,4 Hz, 1H), 1,85 (d, J = 13,8 Hz, 1H), 1,77 (d, J = 13,9 Hz, 1H), 1,52-1,37 (m, 12H).
e) Trifluoroacetato de 2,2,2-trifluoro-1-(1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5] undecan-4-il)etanona
HN [001342] Ácido trifluoroacético (66 mL) foi adicionado à solução de 4(2,2,2-trifluoroacetil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecano-9-carboxilato de terc-butila (exemplo 101, etapa d) (4,33 g) em DCM (66 mL) e a mistura resultante foi agitada a TA durante 20 minutos. Tolueno (50 mL) foi adicionado e a mistura foi evaporada em vácuo (x 3) para fornecer o composto do subtítulo. Produção 5,52 g.
[001343] 1H RMN (400 MHz, CDCh) δ 8,73 (br s, 2H), 3,77 (d, J = 5,1
Hz, 2H), 3,72 (d, J = 5,3 Hz, 1H), 3,65 (d, J = 5,0 Hz, 1H), 3,58 (s, 1H),
3,48 (s, 1H), 3,33 (s, 2H), 3,24 (s, 2H), 2,08 (t, J = 14,6 Hz, 2H), 1,93-
1,75 (m, 2H).
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f) 2-hidróxi-2-(4-hidróxi-2-oxo-2,3-di-hidrobenzo[d]tiazol-7-il)etil(2(6-(4-(2,2,2-trifluoroacetil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9il)hexiltio)etil)carbamato de (R)-terc-butila
[001344] 2-(6-Bromo-hexiltio)etil(2-hidróxi-2-(4-hidróxi-2-oxo-2,3-di hidrobenzo[d]tiazol-7-il)etil)carbamato de (R)-terc-butila (exemplo 101, etapa c) (0,55 g) foi combinado com sal de ácido trifluoroacético 2,2,2 trifluoro-1-(1-oxa-4,9-diaza-spiro[5,5]undec-4-il)-etanona (exemplo 101, etapa e) (0,25 g) e trietilamina (0,26 mL) em acetonitrila (20 mL) e aquecida a 80°C durante 48 horas. Os voláteis foram evaporados em vácuo. Purificação foi ativada por cromatografia de sílica-gel eluindo com 10% de MeOH em DCM para fornecer o composto do subtítulo como uma goma amarela. Produção 0,10 g e 0,074 g (menos puro). [001345] m/z 721 (M+H)+ [001346] 1H RMN (400 MHz, D4-MeOH) δ 6,81 (s, 1 H), 6,69 (d, J =
8,21 Hz, 1 H), 3,80-3,74 (m, 2H), 3,65 (s, 2H), 3,58-3,54 (m, 1H), 3,52-
3,47 (m, 1H), 3,11-2,94 (m, 4H), 2,51-2,41 (m, 6H), 2,05-1,95 (m, 2H), 1,80-1,59 (m, 8H), 1,50 (s, 9H), 1,46-1,25 (m, 6H). Um próton obscurecido por pico de solvente e três prótons trocáveis não observados.
g) 2-(6-(1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)hexiltio)etil(2- hidróxi-2-(4-hidróxi-2-oxo-2,3-di-hidrobenzo[d]tiazol-7il)etil)carbamato de (R)-terc-butila
[001347]
A uma solução em agitação de 2-hidróxi-2-(4-hidróxi-2-oxo-
2,3-di-hidrobenzo[d]tiazol-7-il)etil(2-(6-(4-(2,2,2-trifluoroacetil)-1-oxa-
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4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)hexiltio)etil)carbamato de (R)-tercbutila (exemplo 101, etapa f) (0,18 g) em metanol (10 mL) foi adicionada uma solução de carbonato de potássio (0,06 g) em água (10 mL). A mistura foi agitada a TA durante 17 horas em seguida o metanol foi removido sob uma corrente de nitrogênio. A solução foi diluída com salmoura, extraída com acetato de etila (χ 3) e secada sobre sulfato de sódio, filtrada e evaporada em vácuo. O resíduo foi dissolvido em metanol e evaporado em vácuo para fornecer o composto do subtítulo como um vidro marrom. Produção 0,15 g.
[001348] m/z 625 (M+H)+ [001349] 1H RMN (300 MHz, D4-MeOH) δ 6,94-6,82 (m, 1H), 6,73 (d,
J = 2,0Hz, 1H), 3,66-3,59 (m, 2H), 3,51-3,40 (m, 2H), 2,80-2,69 (m, 4H), 2,66-2,62 (m, 2H), 2,55-2,40 (m, 8H), 2,04-1,94 (m, 2H), 1,62-1,56 (m, 8H), 1,55-1,21 (m, 13H). Um próton obscurecido por pico de solvente e quatro prótons trocáveis não observados.
h) Formiato de (R)-4-hidróxi-7-(1-hidróxi-2-(2-(6-(4-(2- isopropiltiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)hexiltio) etilamino)etil)benzo[d]tiazol-2(3H)-ona
HN
HO [001350] A uma solução de 2-(6-(1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan9-il)hexiltio)etil(2-hidróxi-2-(4-hidróxi-2-oxo-2,3-di-hidrobenzo[d]tiazol-7il)etil)carbamato de (R)-terc-butila (exemplo 101, etapa g) (0,093 g) em DMF (3 mL) foram adicionados trietilamina (0,062 mL) e ácido 2isopropil-tiazol-4-carboxílico (0,025 g) seguidos por hexafluorofosfato de O-(7-azabenzotriazol-1-il)-M,M,M’,V-tetrametilurônio (0,079 g). A mistura resultante foi agitada a TA durante 4 horas em seguida 4 gotas de amônia aquosa ‘880’ foram adicionadas e a mistura foi agitada du
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460/638 rante 15 minutos. Salmoura e acetato de etila foram adicionados a uma solução e as fases foram separadas, em seguida a fase orgânica foi extraída com acetato de etila (χ 2). A fase orgânica combinada foi secada sobre sulfato de sódio, filtrada e evaporada em vácuo. O resíduo foi dissolvido em DCM (2 mL) em seguida ácido trifluoroacético (1 mL) foi adicionado. A solução foi deixada descansar em RT durante 40 minutos em seguida tolueno (20 mL) foi adicionado e a mistura foi concentrada em vácuo. Outra quantidade de tolueno foi adicionada e a mistura concentrada novamente antes do material ser azeotropado com acetonitrila. A purificação foi por HPLC preparativa (Phenomenex Gemini®, gradiente: 10-40% de acetonitrila em 0,1% de ácido fórmico aquoso). As frações contendo produto foram combinadas e secadas por congelamento para fornecer o composto do título como um sólido incolor. Produção 0,016 g.
[001351] m/z 678 (M+H)+ [001352] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO, 80oC) δ 8,18 (s, 1H), 7,91 (d,
J = 0,7Hz, 1H), 6,90 (d, J = 8,3Hz, 1H), 6,72 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 4,64-
4,58 (m, 1H), 3,72-3,62 (m, 2H), 3,62-3,58 (m, 6H), 3,38- 3. 28 (m, 1H), 2,84-2,74 (m, 6H), 2,62-2,58 (m, 2H), 2,47-2,31 (m, 6H), 1,78-1,69 (m, 2H), 1,60-1,50 (m, 4H), 1,45-1,41 (m, 2H), 1,38 (d, J = 6,6Hz, 6H), 1,32-1,26 (m, 2H). Cinco prótons trocáveis não observados.
Exemplo 102
Formiato de (R)-4-hidróxi-7-(1 -hidróxi-2-(7-(4-(2-isopropiltiazol-4carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)-2,2dimetilheptilamino)etil)benzo[d]tiazol-2(3H)-ona
HO
a) 7-bromo-2,2-dimetilheptanoato de etila
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[001353] A uma solução de di-isopropilamina (5,82 mL) em THF (30 mL) foi adicionado n-butil lítio (2,5M em hexanos, 16,4 mL) a 0°C e a mistura foi agitada durante 30 minutos nesta temperatura antes de ser resfriada para -78°C. Isobutirato de etila (5 mL) foi adicionado gota a gota e a mistura resultante foi agitada a -78°C durante 1 hora antes da adição de 1,5-dibromopentano (5,61 mL). A mistura reacional foi agitada a -78°C durante 1 hora em seguida em RT durante 2,5 horas antes de ser vertida em solução de cloreto de amônio saturada. A solução foi extraída com acetato de etila (χ 2), em seguida os orgânicos combinados foram lavados com água e secados sobre sulfato de sódio, filtrados e evaporados em vácuo. A purificação foi por cromatografia de sílica-gel eluindo com 0-25% de acetato de etila em ciclo-hexano para fornecer o composto do subtítulo como um líquido amarelo. Produção
4,45 g.
[001354] 1H RMN (400 MHz, CDCh) δ 4,08 (q, J = 7,1Hz, 2H), 3,41-
3,33 (m, 2H), 1,91-1,77 (m, 2H), 1,61-1,44 (m, 2H), 1,52-1,24 (m, 2H),
1,21 (t, J = 7,1Hz, 5H), 1,12 (s, 6H).
b) 7-Bromo-2,2-dimetilheptan-1 -ol
[001355] A uma solução de 7-bromo-2,2-dimetilheptanoato de etila (exemplo 102, etapa a) (1,5 g) em dietil éter seco (50 mL) a 0°C sob N2 foi adicionado hidreto de di-isobutilalumínio (1M em tolueno, 12,5 mL) gota a gota. A mistura reacional foi agitada a 0°C durante 1 hora em seguida extinta pela adição de tartrato de sódio de potássio saturado (150 mL). A mistura foi agitada durante 1 hora em seguida extraída com acetato de etila (χ 3). Os orgânicos combinados foram lavados com salmoura e secados sobre sulfato de sódio, filtrados e evaporados em vácuo. A purificação foi por cromatografia de sílica-gel eluindo com
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0-25% de acetato de etila em ciclo-hexano para fornecer o composto do subtítulo como um líquido incolor. Produção 1,16 g.
[001356] 1H RMN (400 MHz, CDCh) δ 3,41 (t, J = 6,8Hz, 2H), 3,32 (d, J = 5,8Hz, 2H), 1,93-1,82 (m, 2H), 1,47-1,37 (m, 2H), 1,35-1,20 (m, 4H), 0,91-0,81 (m, 6H). Um próton trocável não observado.
c) (9-(7-hidróxi-6,6-dimetilheptil)-1 -oxa-4,9-diazaespiro[5,5] undecan-4-il)(2-isopropiltiazol-4-il)metanona
HO [001357] Trifluoroacetato de (2-isopropiltiazol-4-il)(1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-4-il)metanona (exemplo 22, etapa b) (0,5 g) foi dissolvido em metanol e aplicado a um cartucho SCX préumedecido com metanol. O cartucho foi lavado com metanol e eluído com amônia a 2 M em solução de metanol. O eluente foi evaporado em vácuo para fornecer o material como a base livre (0,29 g). A este material foi adicionado 7-bromo-2,2-dimetilheptan-1-ol (exemplo 102, etapa b) (0,26 g) em acetonitrila (10 mL), em seguida trietilamina (0,27 mL), e a mistura resultante foi aquecida a 60°C durante 17 horas. Os voláteis foram evaporados em vácuo e o produto bruto foi purificado por cromatografia de sílica-gel eluindo com 0% em seguida 5% em seguida 10% de metanol em DCM para fornecer o composto do subtítulo como uma goma incolor. Produção 0,29 g.
[001358] m/z 452 (M+H)+ [001359] 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 7,87 (s, 1H), 4,01-3,95 (m, 2H), 3,80-3,62 (m, 2H), 3,49 (s, 1H), 3,34-3,28 (m, 2H), 3,16-3,09 (m, 1H), 2,98-2,75 (m, 3H), 2,42-2,20 (m, 2H), 2,09 (br m, 2H), 1,95-1,82 (m, 2H), 1,47-1,40 (m, 8H), 1,34-1,21 (m, 8H), 0,85 (s, 6H). Um próton trocável não observado.
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d) 7-(4-(2-isopropiltiazol-4-carbonil)-1 -oxa-4,9-diazaespiro[5,5] undecan-9-il)-2,2-dimetilheptanal [001360] Ácido trifluoroacético (0,048 mL) foi adicionado à solução de (9-(7-hidróxi-6,6-dimetilheptil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4il)(2-isopropiltiazol-4-il)metanona (exemplo 102, etapa c) (0,28 g) em DCM (15 mL) a 0°C sob argônio e a mistura agitada durante 5 minutos antes da adição de periodinano Dess-Martin (0,39 g). A mistura reacional foi agitada a TA durante 1 hora em seguida foi extinta pela adição de solução de bissulfito de sódio saturada (10 mL) e solução de bicarbonato de sódio saturada (10 mL) em seguida acetato de etila foi adicionado e a mistura agitada durante 5 minutos. As camadas foram separadas e a solução aquosa foi extraída com acetato de etila (χ 2). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com solução de bicarbonate de sódio saturada. Ácido acético (0,053 mL) foi adicionado a a fase orgânica que foi em seguida secada sobre sulfato de sódio, filtrada e evaporada em vácuo para fornecer o composto do subtítulo cru como um óleo amarelo. Produção 0,33 g.
[001361] m/z 450 (M+H)+ [001362] 1H RMN (300 MHz, CDCh) δ 9,43 (s, 1 H), 7,86 (s, 1 H), 4,02-3,86 (m, 3 H), 3,82-3,67 (m, 4H), 3,36-3,26 (m, 2 H), 3,24-2,97 (m, 2H), 2,85-2,66 (m, 4H), 2,03 (d, J = 8,4Hz, 2H), 1,79-1,60 (s, 2H), 1,48-1,35 (m, 8H), 1,34-1,19 (m, 4H), 1,06 (s, 6H).
e) Formiato de (R)-4-hidróxi-7-(1-hidróxi-2-(7-(4-(2-isopropiltiazol4-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)-2,2- dimetilheptilamino)etil)benzo[d]tiazol-2(3H)-ona
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Ácido acético (0,053 mL) foi adicionado a uma mistura de 7 (4-(2-isopropiltiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9il)-2,2-dimetilheptanal (exemplo 102, etapa d) (0,33 g) e cloridrato de (R)-7-(2-amino-1-hidroxietil)-4-hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona (WO2007027134, exemplo 1, etapa d) (0,25 g) com peneiras moleculares de 3Á em metanol anidroso (10 mL). A mistura foi agitada durante 5 minutos em seguida resfriada para 0°C. Triacetoxiboroidreto de sódio (0,13 g) foi adicionado e a mistura resultante agitada a TA durante 16,5 horas. A solução foi filtrada em seguida concentrada em vácuo. O resíduo foi dissolvido em uma mistura de acetonitrila e água e purificado por HPLC preparativa (Phenomenex Gemini®, gradiente: 10-40% de acetonitrila em 0,1% de ácido fórmico aquoso). As frações conten do produto foram combinadas e secadas por congelamento para fornecer o composto do título como um sólido branco. Produção 0,1 g. [001364] m/z 660 (M+H)+ [001365] 1H RMN (400 MHz, Ü4-MeOH) δ 8,50 (s, 1H), 7,89 (s, 1H),
6,93 (d, J = 8,3Hz, 1H), 6,71 (d, J = 8,3Hz, 1H), 4,93 (dd, J = 9,5,
4,1Hz, 1H), 3,92-3,56 (m, 6H), 3,37-3,26 (m, 1H), 3,10-2,66 (m, 10H),
2,11-1,96 (m , 2H), 1,84-1,57 (m, 4H), 1,38 (d, J = 6,9Hz, 6H), 1,29 (s, 6H), 0,96 (s, 6H). Cinco prótons trocáveis não observados.
Exemplo 103
Formiato de (R)-4-hidróxi-7-(1 -hidróxi-2-(9-(4-(2-isopropiltiazol-4carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)-2,2 dimetilnonilamino)etil)benzo[d]tiazol-2(3H)-ona
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a) 9-bromo-2,2-dimetilnonanoato de etila
O [001366] A uma solução de di-isopropilamina (5,82 mL) em THF (30 mL) foi adicionado n-butil lítio (2,5M em hexanos, 16,4 mL) a 0°C e a mistura foi agitada durante 30 minutos nesta temperatura antes de ser resfriada para -78°C. Isobutirato de etila (5 mL) foi adicionado gota a gota e a mistura resultante foi agitada a -78°C durante 1 hora antes da adição de 1,7-dibromo-heptano (6,4 mL). A mistura reacional foi agitada a -78°C durante 1 hora em seguida em RT durante 2 horas antes de ser vertida em solução de cloreto de amônio saturada. A solução foi extraída com acetato de etila (χ 2) em seguida os orgânicos combinados foram lavados com salmoura, secados sobre sulfato de sódio, fil trados e evaporados em vácuo. A purificação foi por cromatografia de sílica-gel eluindo com 0-10% de acetato de etila em ciclo-hexano para fornecer o composto do subtítulo como um líquido incolor. Produção
1,27 g.
[001367] 1H RMN (400 MHz, CDCh) δ 4,11 (q, J = 7,1Hz, 2H), 3,43-
3,37 (m, 2H), 1,91-1,80 (m, 2H), 1,56-1,36 (m, 4H), 1,39-1,21 (m, 9H),
1,15 (s, 6H).
b) 9-Bromo-2,2-dimetilnonan-1-ol
[001368] A uma solução de 9-bromo-2,2-dimetilnonanoato de etila (exemplo 103, etapa a) (1,27 g) em dietil éter seco (40 mL) a 0°C sob
N2 foi adicionado hidreto de di-isobutilalumínio (1M em tolueno, 9,5 mL) gota a gota. A mistura reacional foi agitada a 0°C durante 1,25 ho
Petição 870190058499, de 25/06/2019, pág. 471/650
466/638 ra em seguida extinta pela adição de solução de tartrato de sódio de potássio saturada (150 mL). A mistura foi agitada durante 15 minutos em seguida extraída com acetato de etila (χ 3) em seguida os orgânicos combinados foram lavados com salmoura, secados sobre sulfato de sódio, filtrados e evaporados em vácuo. A purificação foi por cromatografia de sílica-gel eluindo com 0-25% de acetato de etila em ciclohexano para fornecer o composto do subtítulo como um líquido incolor. Produção 0,56 g.
[001369] 1H RMN (400 MHz, CDCb) δ 3,41 (t, J = 6,9Hz, 2H), 3,31 (d, J = 5,2Hz, 2H), 1,91-1,79 (m, 2H), 1,47-1,39 (m, 2H), 1,34-1,21 (m, 8H), 0,86 (s, 6H). Um próton trocável não observado.
c) (9-(9-hidróxi-8,8-dimetilnonil)-1 -oxa-4,9-diazaespiro[5,5] undecan-4-il)(2-isopropiltiazol-4-il)metanona
HO [001370] Trifluoroacetato de 2-isopropiltiazol-4-il)(1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-4-il)metanona (exemplo 22, etapa b) (0,5 g) foi dissolvido em metanol e aplicado a um cartucho SCX préumedecido com metanol. O cartucho foi lavado com metanol e eluído com amônia a 2 M em solução de metanol. O eluente foi evaporado em vácuo para fornecer o material como a base livre (0,26 g). A este material foi adicionado 9-bromo-2,2-dimetilnonan-1-ol (exemplo 103, etapa b) (0,25 g) em acetonitrila (10 mL) e trietilamina (0,23 mL) e a mistura resultante foi aquecida a 60°C durante 15 horas. Os voláteis foram evaporados em vácuo e o produto bruto purificado por cromatografia de sílica-gel eluindo com 0-10% de metanol em DCM para fornecer composto do subtítulo impuro como uma goma incolor que foi novamente purificada por cromatografia de sílica-gel eluindo com 0
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10% de metanol em DCM para fornecer o composto do subtítulo como um sólido não totalmente branco. Produção 0,37 g.
[001371] m/z 480 (M+H)+ [001372] 1H RMN (400 MHz, CDCh) δ 7,87 (s, 1H), 4,08-3,91 (m,
1H), 3,80-3,75 (m, 3H), 3,45-3,32 (m, 2H), 3,35-3,30 (m, 2H), 3,06-2,84 (m, 3H), 2,48-2,31 (m, 2H), 2,17-2,03 (m, 2H), 1,96-1,83 (m, 2H), 1,66-
1,51 (m, 4H), 1,43 (d, J = 6,9Hz, 6H), 1,39-1,31 (m, 4H), 1,30-1,16 (m, 6H), 0,86 (s, 6H). Um próton trocável não observado.
d) 9-(4-(2-isopropiltiazol-4-carbonil)-1 -oxa-4,9-diazaespiro[5,5] undecan-9-il)-2,2-dimetilnonanal [001373] Ácido trifluoroacético (0,059 mL) foi adicionado à solução de (9-(9-hidróxi-8,8-dimetilnonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4il)(2-isopropiltiazol-4-il)metanona (exemplo 103, etapa c) (0,37 g) em DCM (20 mL) a 0°C sob argônio e a mistura agitada durante 5 minutos antes da adição de periodinano Dess-Martin (0,49 g). A mistura reacional foi agitada a TA durante 1,25 hora em seguida foi extinta pela adição de solução de tiossulfato de sódio saturada (20 mL) e solução de bicarbonato de sódio saturada (20 mL) em seguida acetato de etila foi adicionado e a mistura agitada durante 5 minutos. As fases foram separadas e a camada aquosa foi extraída com acetato de etila (χ 2). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com solução de bicarbonate de sódio saturada. Ácido acético (0,066 mL) foi adicionado a a fase orgânica que foi em seguida secada sobre sulfato de sódio, filtrada e evaporada em vácuo para fornecer o composto do subtítulo cru como um óleo amarelo. Produção 0,40 g.
[001374] m/z 478 (M+H)+
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468/638 [001375] 1H RMN (400 MHz, CDCI3) δ 9,46-9,41 (s, 1H), 7,87 (s, 1H),
4,05-3,89 (m, 3H), 3,82-3,67 (m, 5H), 3,36-3,26 (m, 3H), 2,87-2,79 (m, 4H), 2,09-2,02 (m, 2H), 1,77-1,65 (m, 2H), 1,47-1,36 (m, 10H), 1,32-
1,13 (m, 6H), 1,03 (s, 6H).
e) Formiato de (R)-4-hidróxi-7-(1-hidróxi-2-(9-(4-(2-isopropiltiazol4-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)-2,2- dimetilnonilamino)etil)benzo[d]tiazol-2(3H)-ona
[001376] Ácido acético (0,066 mL) foi adicionado a uma mistura de 9(4-(2-isopropiltiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9il)-2,2-dimetilnonanal [001377] (exemplo 103, etapa d) (0,4 g) e cloridrato de (R)-7-(2amino-1-hidroxietil)-4-hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona (WO2007027134, exemplo 1, etapa d) (0,3 g) com peneiras moleculares de 3Â em metanol anidroso (10 mL). A mistura foi agitada durante 5 minutos em seguida resfriada para 0°C. Triacetoxiboroidreto de sódio (0,16 g) foi adicionado e a mistura resultante agitada a TA durante
16,5 horas. A solução foi filtrada em seguida concentrada em vácuo. O resíduo foi dissolvido em uma mistura de acetonitrila e água e purificado por HPLC preparativa (Phenomenex Gemini®, gradiente: 10-40% de acetonitrila em 0,1% de ácido fórmico aquoso). As frações contendo produto foram combinadas e secadas por congelamento para fornecer o composto do título como um sólido branco. Produção 0,10 g.
[001378] m/z 688 (M+H)+ [001379] 1H RMN (400MHz, D4-MeOH) δ 8,51 (s, 1H), 7,88 (s, 1H),
6,92 (d, J = 8,3Hz, 1H), 6,70 (d, J = 8,3Hz, 1H), 4,93-4,88 (m, 1H),
3,92-3,53 (m, 6H), 3,32-3,25 (m, 1H), 3,11-2,52 (m, 10H), 1,98 (s, 2H),
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1,82-1,48 (br m, 3H), 1,37 (d, J = 6,9Hz, 6H), 1,38-1,31 (m, 5H), 1,30-
1,22 (m, 6H), 0,91 (s, 6H). Cinco prótons trocáveis não observados.
Exemplo 104
Formiato de (R)-4-hidróxi-7-(1 -hidróxi-2-(4-(2-(4-(5-metiltiofeno-3carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9il)etóxi)benzilamino)etil)benzo[d]tiazol-2(3H)-ona
HO^Xs n-7 o
a) 4-(5-metiltiofeno-3-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecano9-carboxilato de terc-butila [001380] Hexafluorofosfato de O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N’,Ntetrametilurônio (0,91 g) foi adicionado à solução de cloridrato de 1oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecano-9-carboxilato de terc-butila (WuXi PharmaTech) (0,5 g), ácido 5-metil-tiofeno-3-carboxílico (0,243 g) e trietilamina (0,95 mL) em DMF (10 mL) e a mistura resultante agitada durante 16 horas. A mistura reacional foi vertida em salmoura (40 mL) e extraída com acetato de etila (3 x 50 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água (150 mL), salmoura (150 mL), secadas sobre sulfato de sódio, filtradas e evaporadas em vácuo. A purificação foi por cromatografia de sílica-gel eluindo com 0-10% de metanol em diclorometano para fornecer o composto do subtítulo como um óleo claro. Produção 0,34 g.
[001381] 1H RMN (400 MHz, CDCh) δ 7,23 (s, 1H), 6,81 (s, 1H), 3,72 (s, 6H), 3,46 (s, 3H), 3,15 (s, 3H), 2,49 (d, J = 1,1Hz, 3H), 1,82 (br d, J = 13,5Hz, 2H), 1,45 (s, 9H).
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b) (5-Metiltiofen-3-il)(1 -oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4il)metanona
HN [001382] Ácido trifluoroacético (2,5 mL) foi adicionado à solução de 4-(5-metiltiofeno-3-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecano-9carboxilato de terc-butila (exemplo 104 , etapa a) (0,34 g) em DCM (10 mL) e a mistura resultante foi agitada durante 45 minutos e deixada descansar durante a noite. O solvente foi evaporado em vácuo. Tolueno (3 x 25 mL) foi adicionado e a mistura evaporada em vácuo. O resíduo foi dissolvido em metanol (20 mL) e aplicado a um cartucho SCX pré-umedecido com metanol. O cartucho foi lavado com metanol (40 mL) e eluído com amônia a 2 M em solução de metanol (20 mL). O eluente foi evaporado em vácuo para fornecer o composto do subtítulo como um óleo incolor. Produção 0,25 g.
[001383] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO) δ 7,50 (s, 1H), 6,88 (s, 1H),
3,67-3,57 (m, 2H), 3,49 (s, 2H), 3,38 (s, 4H), 2,68 (s, 2H), 2,45 (d, J = 1,1Hz, 3H), 1,57 (s, 2H), 1,37 (s, 2H). Um próton trocável não observado.
c) 2-hidróxi-2-(4-hidróxi-2-oxo-2,3-di-hidrobenzo[d]tiazol-7-il)etil(4(2-(4-(5-metiltiofeno-3-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5] undecan-9-il)etóxi)benzil)carbamato de (R)-terc-butila
HO [001384] Trietilamina (0,25 mL) foi adicionado à solução de (5metiltiofen-3-il)(1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4-il)metanona (exemplo 104, etapa b) (0,195 g) em acetonitrila (2,5 mL). Esta solu
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471/638 ção foi adicionada à solução de metanossulfonato de (R)-2-(4-((tercbutoxicarbonil(2-hidróxi-2-(4-hidróxi-2-oxo-2,3-di-hidrobenzo[d]tiazol-7il)etil)amino)metil)fenóxi)etila (exemplo 108, etapa c) (0,5 g) em acetonitrila (2,5 mL). A mistura resultante foi aquecida a 80°C durante 48 horas. A mistura reacional foi evaporada em vácuo. A purificação foi por cromatografia de sílica-gel eluindo com 0-10% de metanol em diclorometano para fornecer o composto do subtítulo como um sólido creme. Produção 0,33 g.
[001385] 1H RMN (300 MHz, D4-MeOH) δ 7,42 (s, 1H), 7,07 (d, J =
6,7Hz, 2H), 6,85 (d, J = 13,0Hz, 4H), 6,70 (d, J = 8,2Hz, 1H), 4,28 (s, 1H), 4,12 (s, 2H), 3,71 (s, 2H), 3,66-3,48 (m, 5H), 3,38-3,29 (m, 5H),
2,90 (s, 2H), 2,80-2,55 (m, 4H), 2,48 (s, 3H), 1,94-1,89 (m, 1 H), 1,44 (s, 4H), 1,37 (s, 6H). Três prótons trocáveis não observados.
d) Formiato de (R)-4-hidróxi-7-(1-hidróxi-2-(4-(2-(4-(5-metiltiofeno-
3-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)etóxi) benzilamino)etil)benzo[d]tiazol-2(3H)-ona
HO [001386] Ácido trifluoroacético (1,2 mL) foi adicionado à solução de
2-hidróxi-2-(4-hidróxi-2-oxo-2,3-di-hidrobenzo[d]tiazol-7-il)etil(4-(2-(4(5-metiltiofeno-3-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9il)etóxi)benzil)carbamato de (R)-terc-butila (exemplo 104, etapa c) (0,33 g) em DCM (5 mL) e a mistura resultante agitada durante 10 minutos. Tolueno (20 mL) foi adicionado e a mistura foi evaporada em vácuo. O resíduo foi azeotropado com tolueno (3 x 20 mL). A purificação foi por HPLC preparativa (Phenomenex Gemini®, gradiente: 5-40% de acetonitrila em 0,1% de ácido fórmico aquoso). As frações contendo produto foram combinadas e secadas por congelamento para for
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472/638 necer o composto do título como um sólido branco. Produção 0,12 g. [001387] m/z 639 (M+H)+ [001388] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO) δ 8,13 (s, 1H), 7,45 (s, 1H),
7,22 (d, J = 8,34Hz, 2H), 6,88-6,78 (m, 4H), 6,66 (d, J = 8,27 Hz, 1H),
4,65 (m, 1H), 4,09-4,00 (m, 2H), 3,85-3,77 (m, 3H), 3,67-3,60 (m, 4H), 3,56-3,47 (m, 2H), 2,81-2,63 (m, 5H), 2,49-2,36 (m, 5H), 1,77-1,67 (m, 2H), 1,59-1,37 (m, 2H). Cinco prótons trocáveis não observados.
Exemplo 105
Formiato de (R)-4-hidróxi-7-(1 -hidróxi-2-(9-(4-(5-metiltiofeno-3carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)nonilamino)etil) benzo[d]tiazol-2(3H)-ona
HO
a) (9-(9-Hidroxinonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4-il)(5metiltiofen-3-il)metanona [001389] Uma solução de 9-bromo-1-nonanol (0,335 g) em acetonitrila (3 mL) foi adicionada à solução de (5-metiltiofen-3-il)(1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-4-il)metanona (exemplo 104, etapa b) (0,28 g) e trietilamina (0,278 mL) em acetonitrila (7 mL). A mistura resultante foi agitada a 60°C durante a noite. A mistura reacional foi evaporada em vácuo e o resíduo foi apreendido em DCM (30 mL), lavado com salmoura (2 x 15 mL), secado sobre sulfato de sódio, filtrado e evaporado em vácuo. A purificação foi por cromatografia de sílica-gel eluindo com 0-10% de metanol em diclorometano para fornecer o composto do subtítulo como um sólido branco. Produção 0,3 g.
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473/638 [001390] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO) δ 7,54 (s, 1H), 6,91 (s, 1H),
4,32 (t, J = 5,1Hz, 1H), 3,66 (s, 2H), 3,52 (s, 2H), 3,41-3,33 (m, 3H),
2,95 (s, 4H), 2,45 (d, J = 1,1Hz, 3H), 2,02 (s, 3H), 1,64 (s, 4H), 1,40 (t, J = 6,8Hz, 2H), 1,26 (s, 11H). Um próton trocável não observado.
b) Formiato de (R)-4-hidróxi-7-(1-hidróxi-2-(9-(4-(5-metiltiofeno-3carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)nonilamino)etil) benzo[d]tiazol-2(3H)-ona
O |
N
O [001391] Ácido trifluoroacético (0,055 mL) foi adicionado à solução de (9-(9-hidroxinonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4-il)(5 metiltiofen-3-il)metanona (exemplo 105, etapa a) (0,3 g) em DCM (15 mL) a 0°C sob argônio. A mistura resultante foi agitada durante 5 minu tos e em seguida periodinano Dess-Martin (0,45 g) foi adicionado. A mistura foi agitada em temperatura ambiente durante 1 hora em seguida extinta pela adição de solução de tiossulfato de sódio saturada (14 mL) e solução de bicarbonato de sódio saturada (14 mL) em seguida acetato de etila (30 mL) foi adicionado e a mistura agitada durante 5 minutos. As camadas foram separadas e a camada aquosa foi extraída com acetato de etila (2 x 40 mL). Ácido acético (0,159 mL) foi adicionado às camadas orgânicas combinadas foram secadas sobre sulfato de magnésio, filtradas e evaporadas em vácuo. O óleo amarelo foi dis solvido em metanol seco (15 mL). cloridrato de (R)-7-(2-amino-1hidroxietil)-4-hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona (WO2007027134, exemplo 1, etapa d) (0,28 g) foi adicionado, seguido por ácido acético (0,061 mL) e peneiras moleculares de 3Â. Após agitação durante 5 minutos em temperatura ambiente, a mistura reacional foi resfriada para 0°C. Triacetoxiboroidreto de sódio (0,15 g) foi adicionado e a mistura agita
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474/638 da em temperatura ambiente durante 18 horas. A mistura reacional foi filtrada e o solvente foi evaporado em vácuo. O resíduo foi purificado por HPLC preparativa (Phenomenex Gemini®, gradiente: 5-40% de acetonitrila em 0,1% de ácido fórmico aquoso). As frações contendo produto foram combinadas e secadas por congelamento para fornecer o composto do título como um sólido branco. Produção 0,07 g. [001392] m/z 631 (M+H)+ [001393] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO) δ 8,24 (s, 1H), 7,45 (s, 1H),
6,85-6,80 (m, 2H), 6,67 (d, J = 8,3Hz, 1H), 4,67 (t, J = 6,5Hz, 1H),
3,63-3,21 (m, 6H), 2,75 (d, J = 6,5Hz, 2H), 2,63 (t, J = 7,3Hz, 2H), 2,40 (d, J = 1,1Hz, 3H), 2,38-2,16 (m, 6H), 1,70-1,61 (m, 2H), 1,47-1,29 (m, 6H), 1,19 (s, 10H). Cinco prótons trocáveis não observados.
Exemplo 106
Formiato de (R)-7-(2-(4-(2-(4-(benzo[d]tiazol-2-carbonil)-1 -oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9-il)etóxi)benzilamino)-1-hidroxietil)-4hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona
a) 4-(benzo[d]tiazol-2-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecano9-carboxilato de terc-butila [001394] Hexafluorofosfato de O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N’,Ntetrametilurônio (1,45 g) foi adicionado à solução de cloridrato de 1oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecano-9-carboxilato de terc-butila (WuXi PharmaTech) (0,8 g), ácido 1,3-benzotiazol-2-carboxílico (0,588 g) e trietilamina (1,51 mL) em DMF (15 mL) e a mistura resultante agitada
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475/638 durante 16 horas. O volume de DMF foi reduzido em vácuo e a mistura reacional foi dividida entre água (30 mL) e acetato de etila (30 mL). A camada orgânica foi lavada com água (30 mL) e salmoura (30 mL), secada sobre sulfato de magnésio, filtrada e evaporada em vácuo. A purificação foi por cromatografia de sílica-gel eluindo com 0-10% de metanol em diclorometano para fornecer o composto do subtítulo como um óleo amarelo. Produção 0,83 g.
[001395] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO) δ 8,23-8,09 (m, 2H), 7,63-
7,52 (m, 2H), 4,34 (s, 1H), 4,20 (s, 1H), 3,78 (s, 2H), 3,71 (s, 1H), 3,643,51 (m, 3H), 3,08 (s, 2H), 1,76 (d, J = 13,7Hz, 2H), 1,55-1,34 (m, 11H).
b) Benzo[d]tiazol-2-il(1 -oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4il)metanona
[001396] Ácido trifluoroacético (5 mL) foi adicionado à solução de 4(benzo[d]tiazol-2-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecano-9carboxilato de terc-butila (exemplo 106, etapa a) (0,83 g) em DCM (15 mL) e a mistura resultante foi agitada durante 25 minutos. O solvente foi evaporado em vácuo. O resíduo foi dissolvido em DCM:metanol (1:1) (5 mL) e aplicado a um cartucho SCX pré-umedecido com
DCM:metanol (1:1). O cartucho foi lavado com metanol (60 mL) e eluído com amônia a 2 M em solução de metanol (40 mL). O eluente foi evaporado em vácuo para fornecer o composto do subtítulo como um óleo incolor. Produção 0,57 g.
[001397] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO) δ 8,18-8,13 (m, 1H), 8,108,07 (m, 1H), 7,60-7,50 (m, 2H), 4,25 (t, J = 4,8Hz, 1H), 4,17 (s, 1H), 4,04 (s, 1H), 3,70 (s, 2H), 3,65 (d, J = 5,5Hz, 1H), 3,56 (s, 1H), 2,73-
2,46 (m, 4H), 1,62-1,54 (m, 2H), 1,50-1,36 (m, 2H).
c) 4-(2-(4-(benzo[d]tiazol-2-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]
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476/638 undecan-9-jl)etóxj)benzil(2-hjdróxj-2-(4-hjdróxj-2-oxo-2,3-djhidrobenzo[d]tiazol-7-il)etil)carbamato de (R)-terc-butila
HO [001398] Trietilamina (0,25 mL) foi adicionado à solução de benzo[d]tiazol-2-il(1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4-il)metanona (exemplo 106, etapa b) (0,22 g) em acetonitrila (2,5 mL). Esta solução foi adicionada à solução de metanossulfonato de (R)-2-(4-((tercbutoxicarbonil(2-hidróxi-2-(4-hidróxi-2-oxo-2,3-di-hidrobenzo[d]tiazol-7il)etil)amino)metil)fenóxi)etila (exemplo 108, etapa c) (0,5 g) em acetonitrila (2,5 mL). A mistura resultante foi aquecida a 80°C durante 48 horas. A mistura reacional foi evaporada em vácuo. A purificação foi por cromatografia de sílica-gel eluindo com 0-10% de metanol em diclorometano para fornecer o composto do subtítulo como uma espuma creme. Produção 0,34 g.
[001399] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO) δ 11,49 (s, 1H), 9,93 (s, 1H),
8,21 (d, J = 7,5Hz, 1H), 8,14 (d, J = 7,7Hz, 1H), 7,64-7,56 (m, 2H), 7,07 (s, 2H), 6,93-6,79 (m, 2H), 6,78-6,67 (m, 2H), 5,68 (s, 1H), 4,73 (s, 1H), 4,35-4,22 (m, 3H), 4,07 (s, 4H), 3,76 (s, 2H), 3,70 (s, 1H), 3,62 (s, 1H), 3,17 (s, 6H), 2,67 (s, 2H), 1,77 (s, 1H), 1,62 (s, 1H), 1,35 (s, 3H), 1,27 (s, 6H). Um próton trocável não observado.
d) Formiato de (R)-7-(2-(4-(2-(4-(benzo[d]tiazol-2-carbonil)-1-oxa-
4,9-djazaespjro[5,5]undecan-9-jl)etóxj)benzilamjno)-1-hjdroxjetjl)-
4-hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona
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[001400] Ácido trifluoroacético (1,25 mL) foi adicionado à solução de 4-(2-(4-(benzo[d]tiazol-2-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan9-il)etóxi)benzil(2-hidróxi-2-(4-hidróxi-2-oxo-2,3-di-hidrobenzo[d]tiazol7-il)etil)carbamato de (R)-terc-butila (exemplo 106, etapa c) (0,33 g) em DCM (4 mL) e a mistura resultante agitada durante 10 minutos. Tolueno (20 mL) foi adicionado e a mistura foi evaporada em vácuo. O resíduo foi azeotropado com tolueno (3 x 20 mL). A purificação foi por HPLC preparativa (Phenomenex Gemini®, gradiente: 5-40% de acetonitrila em 0,1% de ácido fórmico aquoso). As frações contendo produto foram combinadas e secadas por congelamento para fornecer o composto do título como um sólido branco. Produção 0,096 g.
[001401] m/z 676 (M+H)+ [001402] 1H RMN (400 MHz, D4-MeOH) δ 8,44 (s, 1H); 8,09-8,00 (m,
2H); 7,58-7,48 (m, 2H); 7,37 (t, J = 6,6Hz, 2H); 7,00 (t, J = 9,4Hz, 2H);
6,91 (d, J = 8,3Hz, 1H); 6,71 (d, J = 8,3Hz, 1H); 4,93-4,88 (m, 1H);
4,43-3,38 (m, 1H); 4,37-4,34 (s, 1H); 4,27-4,20 (m, 2H); 4,14 (s, 2H);
3,87-3,82 (m, 2H); 3,81-3,76 (m, 1H); 3,71 (s, 1H); 3,20-3,11 (m, 2H);
3,12-3,01 (m, 4H); 2,96-2,82 (m, 2H); 2,10-2,01 (m, 2H); 1,88-1,76 (m, 2H). Cinco prótons trocáveis não observados.
Exemplo 107
Formiato de (R)-7-(2-(9-(4-(benzo[d]tiazol-2-carbonil)-1 -oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9-il)nonilamino)-1-hidroxietil)-4hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona
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a) Benzo[d]tiazol-2-il(9-(9-hidroxinonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5] undecan-4-il)metanona
[001403] Uma solução de 9-bromo-1-nonanol (0,335 g) em acetonitrila (3 mL) foi adicionada à solução de benzo[d]tiazol-2-il(1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-4-il)metanona (exemplo 106, etapa b) (0,34 g) e trietilamina (0,278 mL) em acetonitrila (7 mL). A mistura resultante foi agitada a 60°C durante a noite. A mistura reacional foi evaporada em vácuo e o resíduo foi apreendido em DCM (30 mL), lavado com salmoura (2 x 15 mL), secado sobre sulfato de sódio, filtrado e evaporado em vácuo. A purificação foi por cromatografia de sílica-gel eluindo com 0-10% de metanol em diclorometano para fornecer o composto do subtítulo como um sólido branco. Produção 0,34 g.
[001404] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO) δ 8,22 (d, J = 7,7Hz, 1H),
8,14 (d, J = 7,9Hz, 1H), 7,65-7,56 (m, 2H), 4,37 (s, 1H), 4,31 (t, J = 5,1Hz, 1H), 4,27 (s, 1H), 3,80 (s, 2H), 3,72 (s, 1H), 3,63 (s, 1H), 3,41-
3,33 (m, 2H), 2,99 (s, 4H), 2,10 (s, 2H), 1,86 (s, 2H), 1,64 (s, 2H), 1,40 (s, 3H), 1,27 (s, 11H).
b) Formiato de (R)-7-(2-(9-(4-(benzo[d]tiazol-2-carbonil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9-il)nonilamino)-1-hidroxietil)-4hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona
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[001405] Ácido trifluoroacético (0,056 mL) foi adicionado à solução de benzo[d]tiazol-2-il(9-(9-hidroxinonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5] undecan-4-il)metanona (exemplo 107, etapa a) (0,33 g) em DCM (15 mL) a 0°C sob argônio. A mistura resultante foi agitada durante 5 minutos e em seguida periodinano Dess-Martin (0,46 g) foi adicionado. A mistura foi agitada em temperatura ambiente durante 1 hora. Solução de tiossulfato de sódio saturada (14 mL), solução de bicarbonato de sódio saturada (14 mL) e EtOAc (30 mL) foram adicionados e a mistura foi agitada durante 5 minutos. As camadas foram separadas e a camada aquosa foi extraída com EtOAc (2 x 40 mL). Ácido acético (0,159 mL) foi adicionado a as camadas orgânicas combinadas foram secadas sobre sulfato de magnésio, filtradas e evaporadas em vácuo. O óleo amarelo foi dissolvido em MeOH seco (15 mL). Cloridrato de (R)-7-(2 amino-1-hidroxietil)-4-hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona (WO2007027134, exemplo 1, etapa d) (0,28 g) foi adicionado, seguido por ácido acético (0,062 mL) e peneiras moleculares de 3Â. Após agitação durante 5 minutos em temperatura ambiente, a mistura reacional foi resfriada para 0°C. Triacetoxiboroidreto de sódio (0,15 g) foi adicio nado e a mistura foi agitada em temperatura ambiente durante 18 horas. A mistura reacional foi filtrada e o solvente foi evaporado em vácuo. O resíduo foi purificado por HPLC preparativa (Phenomenex Gemini®, gradiente: 5-40% de acetonitrila em 0,1% de ácido fórmico aquoso). As frações contendo produto foram combinadas e secadas por congelamento para fornecer o composto do subtítulo como um sólido branco. Produção 0,14 g.
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480/638 [001406] m/z 668 (M+H)+ [001407] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO) δ 8,23 (s, 1H), 8,17-8,14 (m,
1H), 8,09 (d, J = 7,9Hz, 1H), 7,60-7,49 (m, 2H), 6,84 (d, J = 8,3Hz, 1H),
6,68 (d, J = 8,29Hz, 1H), 4,74-4,64 (m, 1H), 4,29-4,24 (m, 1H), 4,20 (s, 1H), 3,72-3,62 (m, 3H), 3,56 (s, 1H), 2,79 (d, J = 5,5Hz, 2H), 2,69-2,62 (m, 2H), 2,42-2,13 (m, 6H), 1,74-1,64 (m, 2H), 1,63-1,30 (m, 6H), 1,19 (d, J = 9,6Hz, 10H). Cinco prótons trocáveis não observados.
Exemplo 108
Formiato de (R)-4-hidróxi-7-(1 -hidróxi-2-(4-(2-(4-(2-isopropiltiazol
4-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9il)etóxi)benzilamino)etil)benzo[d]tiazol-2(3H)-ona
a) 4-(2-Hidroxietóxi)benzaldeído
O
OH [001408] 2-Bromoetanol (5,8 mL) e carbonato de potássio (11,3 g) foram sucessivamente adicionados a uma solução de 4 hidroxibenzaldeído (5,0 g) em MeCN (100 mL). A mistura resultante foi agitada e aquecida ao refluxo durante 3 dias sob argônio. A mistura reacional foi resfriada para TA e dividida entre EtOAc (100 mL) e solu ção de NaOH aquosa a 1M (100 mL). A camada orgânica foi lavada com salmoura (100 mL). As camadas aquosas foram combinadas e extraídas com EtOAc (50 mL). As camadas orgânicas foram combina das, secadas sobre sulfato de sódio, filtradas e evaporadas em vácuo para fornecer o composto do subtítulo como um óleo amarelo. Produ ção 6,4 g.
[001409] 1H RMN (400 MHz, CDCh) δ 9,90 (s, 1H), 7,87-7,81 (m,
2H), 7,06-6,98 (m, 2H), 4,18 (dd, J = 5,0, 4,0 Hz, 2H), 4,04-3,97 (m,
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2H), 2,18-1,96 (m, 1H).
b) metanossulfonato de 2-(4-formilfenóxj)etjla o
[001410] Metanossulfonilcloreto (3,3 mL) foi adicionado gota a gota durante 5 minutos a uma solução de 4-(2-hidroxietóxi)benzaldeído (exemplo 108, etapa a) (6,4 g) e trietilamina (6,4 mL) em DCM (30 mL) a 0°C sob argônio. A mistura resultante foi agitada a 0°C durante 10 minutos e em seguida em TA durante 1 hora. A mistura reacional foi lavada com salmoura (2 x 30 mL), secada sobre sulfato de sódio, filtrada e evaporada em vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de sílica-gel eluindo com 40-50% de EtOAc em éter de petróleo (40-60°C) para fornecer o composto do subtítulo como um óleo amarelo viscoso. Produção 8,87 g.
[001411] 1H RMN (400 MHz, CDCh) δ 9,92-9,87 (m, 1H), 7,89-7,81 (m, 2H), 7,05-6,98 (m, 2H), 4,62-4,58 (m, 2H), 4,36-4,32 (m, 2H), 3,10 (s, 3H).
c) metanossulfonato de (/?)-2-(4-((terc-butoxicarbonil(2-hidróxi-2(4-hidróxi-2-oxo-2,3-di-hidrobenzo[d]tiazol-7-il)etil)amino)metil) fenóxi)etila
HO [001412] Uma mistura de metanossulfonato de 2-(4-formilfenóxi)etila (exemplo 108, etapa b) (1,7 g), cloridrato de (R)-7-(2-amino-1hidroxietil)-4-hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona (W02007027134, exemplo 1, etapa d) (2,0 g) e ácido acético (0,44 mL) em DMF seco (40 mL) foi agitada a TA durante 15 minutos na presença de peneiras moleculares de 4A. A mistura reacional foi resfriada para 0°C e triacetoxibo
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482/638 roidreto de sódio (2,2 g) foi adicionado em 4 porções em intervalos de 2 minutos. A mistura resultante foi agitada a TA durante 1 hora. Dicarbonato de di-terc-butila (1,8 g) foi adicionado à mistura reacional que foi agitada durante 2 horas. Solução de bicarbonato de sódio saturada (100 mL) e EtOAc (100 mL) foram adicionados e a mistura foi agitada durante 5 minutos. As camadas foram separadas e a camada aquosa foi extraída com EtOAc (x 4). As camadas orgânicas combinadas foram secadas sobre sulfato de sódio, filtradas e evaporadas em vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de sílica-gel eluindo com 080% de EtOAc em éter de petróleo (40-60°C) para fornecer o composto do subtítulo como um óleo amarelo. Produção 2,25 g.
[001413] 1H RMN (400 MHz, CDCb) δ 7,05 (d, J = 7,6Hz, 2H), 6,80 (d, J = 8,0Hz, 3H), 6,70 (d, J = 8,0Hz,1H), 4,81 (bs, 1H), 4,54 (t, J = 4,3Hz, 2H), 4,34-4,26 (m, 1H), 4,24-4,08 (m, 3H), 3,57-3,42 (m, 1H), 3,33-3,23 (m, 1H), 3,07 (s, 3H), 1,49 (s, 9H). Três prótons trocáveis não observados.
d) 2-hidróxi-2-(4-hidróxi-2-oxo-2,3-di-hidrobenzo[d]tiazol-7-il)etil(4(2-(4-(2-isopropiltiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5] un- decan-9-il)etóxi)benzil)carbamato de (R)-terc-butila
HO [001414] Uma solução de metanossulfonato de (R)-2-(4-((tercbutoxicarbonil(2-hidróxi-2-(4-hidróxi-2-oxo-2,3-di-hidrobenzo[d]tiazol-7il)etil)amino)metil)fenóxi)etila (exemplo 108, etapa c) (0,295 g) em MeCN (1,1 mL) foi adicionada gota a gota a uma solução de trifluoroacetato de (2-isopropiltiazol-4-il)(1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4il)metanona (exemplo 22, etapa b) (0,150 g) e trietilamina (0,11 mL)
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483/638 em MeCN (1,1 mL) em RT sob argônio. A mistura resultante foi agitada a 60°C sob argônio durante 34 horas. Após resfriamento para TA, o solvente foi removido em vácuo. O resíduo foi apreendido em DCM, lavado com salmoura (x 2), secado sobre sulfato de sódio, filtrado e evaporado em vácuo. O sólido amarelo foi purificado por cromatografia de sílica-gel eluindo com 0-5% de MeOH em DCM para fornecer o composto do subtítulo como um sólido verde. Produção 0,135 g. [001415] m/z 768 (M+H)+ [001416] 1H RMN (400 MHz, CDCh) δ 7,86 (s, 1H), 6,83 (br s, 2H), 6,71-6,46 (m, 4H), 4,78 (br s, 1H), 4,46-2,51 (m, 19H), 1,90 (br s, 4H),
1,53 (s, 9H), 1,39 (s, 3H), 1,29 (s, 3H). Três prótons trocáveis não observados.
e) Formiato de (R)-4-hidróxi-7-(1-hidróxi-2-(4-(2-(4-(2- isopropiltiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9il)etóxi)benzilamino)etil)benzo[d]tiazol-2(3H)-ona
HO [001417] Ácido trifluoroacético (0,7 mL) foi adicionado à solução de 2-hidróxi-2-(4-hidróxi-2-oxo-2,3-di-hidrobenzo[d]tiazol-7-il)etil(4-(2-(4(2-isopropiltiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9il)etóxi)benzil)carbamato de (R)-terc-butila (exemplo 108, etapa d) (0,122 g) em DCM (1,5 mL). A mistura resultante foi agitada a TA durante 10 minutos. Tolueno (15 mL) foi adicionado e a mistura reacional foi evaporada em vácuo. O resíduo foi azeotropado duas vezes com MeCN. O resíduo amarelo viscoso foi purificado por HPLC (Phenomenex Gemini®, gradiente: 5-40% de acetonitrila em 0,1% de ácido fórmico aquoso). As frações contendo produto foram combinadas e secadas por congelamento para fornecer o composto do título como um sólido branco. Produção 0,052 g.
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484/638 [001418] m/z 668 (M+H)+ [001419] 1H RMN (400 MHz, D4-MeOH) δ 8,47 (s, 1H), 7,87 (s, 1H),
7,36 (d, J = 8,19 Hz, 2H), 6,98 (s, 2H), 6,91 (d, J = 8,36 Hz, 1H), 6,71 (d, J = 8,30 Hz, 1H), 4,90 (dd, J = 9,4, 4,1 Hz, 1H), 4,18 (s, 2H), 4,11 (s, 2H), 3,75 (s, 5H), 3,63 (s, 1H), 3,40 (m, 1H), 3,19-2,80 (m, 8H), 1,95 (s, 2H), 1,75 (s, 1H), 1,65 (s, 1H), 1,38 (d, J = 6,9 Hz, 6H). Cinco prótons trocáveis não observados.
Exemplo 109
Formiato de (R)-4-hidróxi-7-(1 -hidróxi-2-(9-(4-(2-isopropiltiazol-4carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)nonilamino)etil) benzo[d]tiazol-2(3H)-ona
HO
a) (9-(9-Hidroxinonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4-il)(2isopropiltiazol-4-il)metanona [001420] Uma solução de 9-bromo-1-nonanol (0,316 g) em MeCN (3 mL) foi adicionada a uma solução de trifluoroacetato de (2isopropiltiazol-4-il)(1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4-il)metanona (exemplo 22, etapa b) (0,40 g) e trietilamina (0,395 mL) em MeCN (7 mL). A mistura resultante foi agitada a 60°C sob argônio durante 16 horas. Após resfriamento para TA o solvente foi removido em vácuo. O resíduo foi apreendido em DCM, lavado com salmoura (x 2), secado sobre sulfato de sódio, filtrado e evaporado em vácuo. O sólido laranja foi purificado por cromatografia de sílica-gel eluindo com 0-10% de MeOH em DCM para fornecer o composto do subtítulo como um sólido
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485/638 não totalmente branco. Produção 0,325 g.
[001421] 1H RMN (400 MHz, CDCh) δ 7,87 (s, 1H), 3,97 (s, 2H), 3,76 (s, 3H), 3,63 (t, J = 6,6Hz, 2H), 3,36 (s, 3H), 2,92 (s, 4H), 2,25 (s, 2H), 2,14-2,03 (m, 2 H), 1,84 (s, 2H), 1,63 (s, 2H), 1,60-1,50 (m, 2H), 1,42 (d, J = 6,8Hz, 6 H), 1,42-1,21 (m, 10 H).
b) Formiato de (R)-4-hidróxi-7-(1-hidróxi-2-(9-(4-(2-isopropiltiazol4-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)nonilamino)etil) benzo[d]tiazol-2(3H)-ona
[001422] Ácido trifluoroacético (0,027 mL) foi adicionado à solução de (9-(9-hidroxinonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4-il)(2isopropiltiazol-4-il)metanona [001423] (exemplo 109, etapa a) (0,16 g) em DCM (6,3 mL) a 0°C. A mistura resultante foi agitada durante 5 minutos e em seguida periodinano Dess-Martin (0,225 g) foi adicionado. A mistura foi agitada a TA durante 45 minutos. Solução de tiossulfato de sódio saturada (6 mL), solução de bicarbonato de sódio saturada (6 mL) e EtOAc (36 mL) foram adicionados e a mistura foi agitada durante 5 minutos. As camadas foram separadas e a camada aquosa foi extraída com EtOAc (2 x 40 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com solução de bicarbonato de sódio saturada (40 mL), tratadas com ácido acético (0,067 mL), secadas sobre sulfato de sódio, filtradas e evaporadas em vácuo. O óleo laranja viscoso foi dissolvido em MeOH seco (6,6 mL) e cloridrato de (R)-7-(2-amino-1-hidroxietil)-4hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona (WO2007027134, exemplo 1, etapa d) (0,138 g) foi adicionado, seguido por ácido acético (0,03 mL) e penei
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486/638 ras moleculares de 3A. Após agitação durante 5 minutos em RT, a mistura reacional foi resfriada para 0°C e triacetoxiboroidreto de sódio (0,075 g) foi adicionado. A mistura foi agitada a TA durante 1 hora em seguida outra porção de triacetoxiboroidreto de sódio (0,075 g) foi adicionada e a mistura foi agitada à TA durante mais 16 horas. A mistura reacional foi filtrada e o solvente foi evaporado em vácuo. O resíduo foi purificado por HPLC (Phenomenex Gemini®, gradiente: 5-40% de acetonitrila em 0,1% de ácido fórmico aquoso). As frações contendo produto foram combinadas e secadas por congelamento para fornecer o composto do título como um sólido branco. Produção 0,060 g. [001424] m/z 660 (M+H)+ [001425] 1H RMN (400 MHz, D4-MeOH) δ 8,52 (s, 1H), 7,86 (s, 1H),
6,94 (d, J = 8,4Hz, 1H), 6,52 (d, J = 8,3Hz, 1H), 4,98-4,89 (m, 1H), 3,90-3,58 (m, 6H), 3,37-3,25 (m, 1H), 3,15-3,02 (m, 3H), 3,01-2,93 (m, 3H), 2,91-2,65 (m, 4H), 2,10-1,96 (m, 2H), 1,83-1,54 (m, 6H), 1,41-1,28 (m, 16H). Cinco prótons trocáveis não observados.
Exemplo 110
Formiato de (R)-4-hidróxi-7-(1 -hidróxi-2-(4-(2-(4-(5-metiltiofeno-2carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)etóxi) benzilamino)etil)benzo[d]tiazol-2(3H)-ona
HO
a) 2-hidróxi-2-(4-hidróxi-2-oxo-2,3-di-hidrobenzo[d]tiazol-7-il)etil(4(2-(4-(5-metiltiofeno-2-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9il)etóxi)benzil)carbamato de (R)-terc-butila
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[001426] Uma solução de metanossulfonato de (R)-2-(4-((tercbutoxicarbonil(2-hidróxi-2-(4-hidróxi-2-oxo-2,3-di-hidrobenzo[d]tiazol-7il)etil)amino)metil)fenóxi)etila (exemplo 108, etapa c) (0,426 g) em MeCN (2 mL) foi adicionada gota a gota a uma solução de trifluoroacetato de (5-metiltiofen-2-il)(1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4 il)metanona (exemplo 9, etapa b) (0,154 g) e trietilamina (0,15 mL) em
MeCN (5 mL) em TA sob argônio. A mistura resultante foi agitada a 60°C sob argônio durante 16 horas, e em seguida a 80°C durante mais horas. Após resfriamento para TA o solvente foi removido em vácuo.
O resíduo foi apreendido em DCM, lavado com salmoura e água (x 2), secado sobre sulfato de sódio, filtrado e evaporado em vácuo. O sólido marrom foi purificado por cromatografia de sílica-gel eluindo com 010% de MeOH em DCM para fornecer o composto do subtítulo como um sólido amarelo. Produção 0,246 g.
[001427] 1H RMN (400 MHz, CDCh) δ 7,11 (d, J = 3,6Hz, 1H), 6,89 (s, 2H), 6,70-6,59 (m, 4H), 6,51 (d, J = 8,2Hz, 1H), 4,76 (s, 1H), 4,20-
4,10 (m, 4H), 3,74 (s, 4H), 3,59-3,44 (m, 4H), 2,93-2,77 (m, 4H), 2,61 (s, 2H), 2,47 (s, 3H), 1,93-1,84 (m, 2H), 1,74-1,60 (m, 2H), 1,52 (s, 9H). Três prótons trocáveis não observados.
b) Formiato de (R)-4-hidróxi-7-(1-hidróxi-2-(4-(2-(4-(5-metiltiofeno2-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)etóxi) benzila mino)etil)benzo[d]tiazol-2(3H)-ona
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HO
[001428] Ácido trifluoroacético (0,75 mL) foi adicionado à solução de metanossulfonato de (R)-2-(4-((terc-butoxicarbonil(2-hidróxi-2-(4hidróxi-2-oxo-2,3-di-hidrobenzo[d]tiazol-7-il)etil)amino)metil)fenóxi)etila (exemplo 110, etapa a) (0,243 g) em DCM (3 mL). A mistura resultante foi agitada à TA durante 10 minutos. Tolueno (30 mL) foi adicionado e a mistura reacional foi evaporada em vácuo (x 3). O resíduo foi purificado por HPLC (Phenomenex Gemini®, gradiente: 5-40% de acetonitrila em 0,1% de ácido fórmico aquoso). As frações contendo produto foram combinadas, e secadas por congelamento para fornecer o composto do título como um sólido branco. Produção 0,65 g.
[001429] m/z 639 (M+H)+ [001430] 1H RMN (400 MHz, D4-MeOH) δ 8,44 (s, 1 H), 7,40-7,35 (m,
H), 7,19 (d, J = 3,7Hz, 1 H), 7,02-6,97 (m, 2 H), 6,92 (d, J = 8,36 Hz, 1 H), 6,78-6.,76 (m, 1 H), 6,71 (d, J = 8,30 Hz, 1 H), 4,93-4,88 (m, 1 H),
4,21 (t, J = 5,17 Hz, 2 H), 4,13 (s, 2 H), 3,76-3,70 (m, 4 H), 3,61 (s, 2 H), 3,11-3,07 (m, 2 H), 3,07-3,01 (m, 2 H), 3,03-2,91 (m, 2 H), 2,88-
2,76 (m, 2 H), 2,47 (d, J = 1,0Hz, 3 H), 2,02-1,93 (m, 2 H), 1,74-1,61 (m, 2 H). Cinco prótons trocáveis não observados.
Exemplo 111
Formiato de (R)-4-hidróxi-7-(1 -hidróxi-2-(9-(4-(5-metiltiofeno-2carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)nonilamino)etil) benzo[d]tiazol-2(3H)-ona
HO
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489/638
a) (9-(9-Hidroxinonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4-il)(5metiltiofen-2-il)metanona [001431] Uma solução de 9-bromo-1-nonanol (0,314 g) em MeCN (3 mL) foi adicionada a uma solução de trifluoroacetato de (5-metiltiofen2-il)(1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4-il)metanona (exemplo 9, etapa b) (0,263 g) e trietilamina (0,261 mL) em MeCN (7 mL). A mistura resultante foi agitada a 60°C sob argônio durante 16 horas. Após resfriamento para TA o solvente foi removido em vácuo. O resíduo foi apreendido em DCM, lavado com salmoura (x 2), secado sobre sulfato de sódio, filtrado e evaporado em vácuo. O sólido branco foi purificado por cromatografia de sílica-gel eluindo com 0-10% de MeOH em DCM para fornecer o composto do subtítulo como um sólido branco. Produção 0,352 g.
[001432] 1H RMN (400 MHz, CDCh) δ 7,10 (d, J = 3,6Hz, 1H), 6,71 (dd, J = 3,6, 1,2Hz, 1H), 3,73 (s, 4H), 3,66-3,60 (m, 4H), 3,22 (s, 2H),
2,84 (s, 3H), 2,50 (d, J = 1,0Hz, 3H), 2,15 (s, 1H), 2,11-1,97 (m, 2H), 1,83 (s, 2H), 1,61-1,50 (m, 3H), 1,32 (s, 11H). Um próton trocável não observado.
b) Formiato de (R)-4-hidróxi-7-(1-hidróxi-2-(9-(4-(5-metiltiofeno-2carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)nonilamino)etil) benzo[d]tiazol-2(3H)-ona
HO^^s
N < h o [001433] Ácido trifluoroacético (0,064 mL) foi adicionado à solução de (9-(9-hidroxinonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4-il)(5Petição 870190058499, de 25/06/2019, pág. 495/650
490/638 metiltiofen-2-il)metanona (exemplo 111, etapa a) (0,350 g) em DCM (15 mL) a 0°C. A mistura resultante foi agitada durante 5 minutos e em seguida periodinano Dess-Martin (0,527 g) foi adicionado. A mistura foi agitada à TA durante 1 hora. Solução de tiossulfato de sódio saturada (14 mL), solução de bicarbonato de sódio saturada (14 mL) e EtOAc (30 mL) foram adicionados e a mistura foi agitada durante 5 minutos. As camadas foram separadas e a camada aquosa foi extraída com EtOAc (2 x 40 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com solução de bicarbonato de sódio saturada (40 mL), tratadas com ácido acético (0,159 mL), secadas sobre sulfato de sódio, filtradas e evaporadas em vácuo. O óleo amarelo foi dissolvido em MeOH seco (15,6 mL) e cloridrato de (R)-7-(2-amino-1-hidroxietil)-4hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona (WO2007027134, exemplo 1, etapa d) (0,327 g) foi adicionado, seguido por ácido acético (0,071 mL) e peneiras moleculares de 3Â. Após agitação durante 5 minutos em TA, a mistura reacional foi resfriada para 0°C e triacetoxiboroidreto de sódio (0,176 g) foi adicionado e a mistura foi agitada a TA durante 1 hora. Outra porção de triacetoxiboroidreto de sódio (0,075 g) foi adicionada e a mistura foi agitada à TA durante 17 horas. A mistura reacional foi filtrada e o solvente foi evaporado em vácuo. O resíduo foi purificado por HPLC (Phenomenex Gemini®, gradiente: 5-40% de acetonitrila em 0,1% de ácido fórmico aquoso). As frações contendo produto foram combinadas e secadas por congelamento para fornecer o composto do título como um sólido branco. Produção 0,127 g.
[001434] m/z 631 (M+H)+ [001435] 1H RMN (400 MHz, D4-MeOH) δ 8,49 (s, 1H), 7,20 (d, J = 3,7Hz, 1H), 6,95 (d, J = 8,3Hz, 1H), 6,79-6,76 (m, 1H), 6,73 (d, J = 8,3Hz, 1H), 4,97-4,91 (m, 1H), 3,76-3,72 (m, 4H), 3,62 (s, 2H), 3,203,04 (m, 4H), 3,03-2,93 (m, 3H), 2,95-2,84 (m, 3H), 2,47 (d, J = 1,0Hz, 3H), 2,11-2,01 (m, 2H), 1,80-1,62 (m, 6H), 1,40-1,31 (m, 10H). Cinco
Petição 870190058499, de 25/06/2019, pág. 496/650
491/638 prótons trocáveis não observados.
Exemplo 112
Ditrifluoroacetato de (R)-4-hidróxi-7-(1-hidróxi-2-(4-(2-(4-(2feniltiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9il)etóxi)benzilamino)etil)benzo[d]tiazol-2(3H)-ona
HO
a) 4-(2-feniltiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecano-9carboxilato de terc-butila [001436] Uma solução de cloridrato de 1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecano-9-carboxilato de terc-butila (WuXi PharmaTech) (0,60 g) em DMF (11 mL) foi tratada com trietilamina (1,1 mL), seguida por ácido 2-fenil-1,3-tiazol-4-carboxílico (0,421 g) e em seguida hexafluorofosfato de O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N’,Ntetrametilurônio (1,09 g). A mistura resultante foi agitada a TA durante 7 horas. DMF foi removido em vácuo. O resíduo foi apreendido em EtOAc (50 mL) e lavado com solução de bicarbonato de sódio saturada (2 x 30 mL), água (30 mL) e salmoura (30 mL), secado sobre sulfato de sódio, filtrado e evaporado em vácuo. O óleo marrom foi purificado por cromatografia de sílica-gel eluindo com 0-10% de MeOH em DCM para fornecer o composto do subtítulo como um sólido marrom. Produção 0,857 g.
[001437] 1H RMN (400 MHz, CDCh) δ 8,00 (s, 1H), 7,92 (s, 2H), 7,47 (d, J = 4,1Hz, 3H), 4,13-3,96 (m, 2H), 3,83 (s, 3H), 3,73 (s, 2H), 3,29-
3,13 (m, 2H), 1,94-1,83 (m, 2H), 1,62-1,51 (m, 3H), 1,45 (s, 9H).
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b) (2-Feniltiazol-4-il)(1 -oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4-il) metanona
HN [001438] Ácido trifluoroacético (3,8 mL) foi adicionado à solução de 4-(2-feniltiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecano-9carboxilato de terc-butila [001439] (exemplo 112, etapa a) (0,85 mg) em DCM (15,2 mL). A mistura resultante foi agitada a TA durante 1 hora. Tolueno (30 mL) foi adicionado e a mistura foi evaporada em vácuo. O resíduo amarelo foi dissolvido em MeOH e aplicado a um cartucho SCX pré-umedecido com MeOH. O cartucho foi lavado com MeOH e eluído com amônia a 2 M em MeOH. O eluente foi evaporado em vácuo para fornecer o composto do subtítulo como um óleo marrom. Produção 0,629 g.
[001440] 1H RMN (400 MHz, CDCI3) δ 7,98 (s, 1H), 7,95-7,90 (m, 2H), 7,49-7,44 (m, 3H), 4,07 (br s, 1H), 3,99 (br s, 1H), 3,88-3,79 (m, 3H), 3,70 (br s, 1H), 3,02-2,81 (m, 3H), 2,80-2,69 (m, 1H), 1,83 (d, J = 13,7Hz, 2H), 1,70-1,44 (m, 2H). Um próton trocável não observado.
c) 2-hidróxi-2-(4-hidróxi-2-oxo-2,3-di-hidrobenzo[d]tiazol-7-il)etil(4(2-(4-(2-feniltiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9il)etóxi)benzil)carbamato de (R)-terc-butila
HO [001441] Uma solução de metanossulfonato de (R)-2-(4-((tercbutoxicarbonil(2-hidróxi-2-(4-hidróxi-2-oxo-2,3-di-hidrobenzo[d]tiazol-7il)etil)amino)metil)fenóxi)etila (exemplo 108, etapa c) (0,619 g) em MeCN (3 mL) foi adicionada gota a gota a uma solução de (2Petição 870190058499, de 25/06/2019, pág. 498/650
493/638 feniltiazol-4-il)(1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4-il)metanona (exemplo 112, etapa b) (0,274 g) e trietilamina (0,22 mL) em MeCN (7,3 mL) em TA sob argônio. A mistura resultante foi agitada a 80°C sob argônio durante 16 horas. Após resfriamento para TA o solvente foi removido em vácuo. O resíduo foi apreendido em DCM, lavado com salmoura e água, secado sobre sulfato de sódio, filtrado e evaporado em vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de sílica-gel eluindo com 0-70% de EtOAc em éter de petróleo (40-60°C) para fornecer o composto do subtítulo como um sólido amarelo. Produção 0,42 g. [001442] 1H RMN (400 MHz, CDCh) δ 8,04-7,95 (m, 1H), 7,94-7,79 (m, 2H), 7,50-7,41 (m, 2H), 7,40-7,28 (m, 1H), 7,02-6,81 (m, 2H), 6,70-
6,37 (m, 3H), 4,84-4,70 (m, 1H), 4,25-3,92 (m, 6H), 3,87-3,75 (m, 3H),
3,74-3,58 (m, 2H), 3,57-3,36 (m, 2H), 2,99-2,77 (m, 3H), 2,76-2,43 (m, 3H), 2,01-1,86 (m, 2H), 1,84-1,58 (m, 2H), 1,52 (s, 9H). Três prótons trocáveis não observados.
d) Ditrifluoroacetato de (R)-4-hidróxi-7-(1-hidróxi-2-(4-(2-(4-(2feniltiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)etóxi) benzilamino)etil)benzo[d]tiazol-2(3H)-ona
HO [001443] Ácido trifluoroacético (1,2 mL) foi adicionado à solução de 2-hidróxi-2-(4-hidróxi-2-oxo-2,3-di-hidrobenzo[d]tiazol-7-il)etil(4-(2-(4(2-feniltiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9il)etóxi)benzil)carbamato de (R)-terc-butila (exemplo 112, etapa c) (0,415 g) em DCM (4,7 mL). A mistura resultante foi agitada a TA durante 15 minutos. Tolueno (40 mL) foi adicionado e a mistura reacional foi evaporada em vácuo (x 2). O resíduo foi purificado por HPLC (Phenomenex Gemini®, gradiente: 5-40% de acetonitrila em 0,1% de ácido
Petição 870190058499, de 25/06/2019, pág. 499/650
494/638 fórmico aquoso). As frações contendo produto foram combinadas, e secadas por congelamento para fornecer o composto do título como um sólido branco. Produção 0,176 g.
[001444] m/z 702 (M+H)+ [001445] 1H RMN (400 MHz, D4-MeOH) δ 8,07 (s, 1H), 7,94 (br s,
2H), 7,51-7,39 (m, 5H), 7,06 (br s, 2H), 6,93 (d, J = 8,4Hz, 1H), 6,71 (d, J = 8,4Hz, 1H), 4,92-4,88 (m, 1H), 4,38 (br s, 2H), 4,24-4,14 (m, 2H), 4,03-3,49 (m, 10H), 3,38-3,28 (m, 2H), 3,08-3,00 (m, 2H), 2,33-2,22 (m, 2H), 1,87 (br s, 2H). Seis prótons trocáveis não observados.
Exemplo 113
Formiato de (R)-4-hidróxi-7-(1-hidróxi-2-(9-(4-(2-feniltiazol-4carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)nonilamino)etil) benzo[d]tiazol-2(3H)-ona
HO
a) (9-(9-Hidroxinonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4-il)(2feniltiazol-4-il)metanona [001446] Uma solução de 9-bromo-1-nonanol (0,346 g) em MeCN (3 mL) foi adicionada a uma solução de (2-feniltiazol-4-il)(1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-4-il)metanona (exemplo 112, etapa b) (0,355 g) e trietilamina (0,288 mL) em MeCN (7 mL). A mistura resultante foi agitada a 60°C sob argônio durante 17 horas. Após resfriamento para
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495/638
TA, o solvente foi removido em vácuo. O resíduo foi apreendido em DCM, lavado com salmoura (x 2), secado sobre sulfato de sódio, filtrado e evaporado em vácuo. O óleo amarelo foi purificado por cromatografia de sílica-gel eluindo com 0-7% de MeOH em DCM para fornecer o composto do subtítulo como um sólido branco. Produção 0,378 g. [001447] 1H RMN (400 MHz, CDCh) δ 8,02 (s, 1H), 8,00-7,87 (m,
2H), 7,57 (s, 1H), 7,49-7,42 (m, 2H), 4,16-4,08 (m, 2H), 3,81 (s, 4H),
3,72 (br s, 1H), 3,63 (t, J = 6,6Hz, 2H), 3,33-2,64 (m, 6H), 2,25-2,04 (m, 3H), 1,79 (s, 3H), 1,61-1,50 (m, 3H), 1,39-1,25 (m, 9H).
b) Formiato de (R)-4-hidróxi-7-(1-hidróxi-2-(9-(4-(2-feniltiazol-4carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)nonilamino)etil) benzo[d]tiazol-2(3H)-ona
[001448] Ácido trifluoroacético (0,059 mL) foi adicionado à solução de (9-(9-hidroxinonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4-il)(2feniltiazol-4-il)metanona (exemplo 113, etapa a) (0,373 g) em DCM (14 mL) a 0°C. A mistura resultante foi agitada durante 5 minutos e em seguida periodinano Dess-Martin (0,489 g) foi adicionado. A mistura foi agitada a TA durante 1 hora. Solução de tiossulfato de sódio saturada (14 mL), solução de bicarbonato de sódio saturada (14 mL) e EtOAc (30 mL) foram adicionados e a mistura foi agitada durante 5 minutos. As camadas foram separadas e a camada aquosa foi extraída com EtOAc (2 x 30 mL). As camadas orgânicas combinadas foram tratadas com ácido acético (0,148 mL), secadas sobre sulfato de sódio, filtradas e evaporadas em vácuo. O óleo amarelo foi dissolvido em MeOH seco
Petição 870190058499, de 25/06/2019, pág. 501/650
496/638 (15 mL) e cloridrato de (R)-7-(2-amino-1-hidroxietil)-4hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona (WO2007027134, exemplo 1, etapa d) (0,303 g) foi adicionado, seguido por ácido acético (0,066 mL) e peneiras moleculares de 3A. Após agitação durante 5 minutos em TA, a mistura reacional foi resfriada para 0°C e triacetoxiboroidreto de sódio (0,163 g) foi adicionado e a mistura foi agitada a TA durante 18 horas. A mistura reacional foi filtrada e o solvente foi evaporado em vácuo. O resíduo foi purificado por HPLC (Phenomenex Gemini®, gradiente: 540% de acetonitrila em 0,1% de ácido fórmico aquoso). As frações contendo produto foram combinadas e secadas por congelamento para fornecer o composto do título como um sólido branco. Produção 0,118 g.
[001449] m/z 694 (M+H)+ [001450] 1H RMN (400 MHz, Ü4-MeOH) δ 8,31 (s, 1H), 7,97 (br s,
1H), 7,99-7,91 (m, 2H), 7,51-7,44 (m, 3H), 6,95 (d, J = 8,4Hz, 1H), 6,72 (d, J = 8,4Hz, 1H), 4,97-4,89 (m, 1H), 3,99-3,86 (m, 2H), 3,85-3,63 (m, 4H), 3,14-3,01 (m, 2H), 3,00-2,91 (m, 3H), 2,90-2,56 (m, 4H), 2,12-1,97 (m, 2H), 1,85-1,47 (m, 6H), 1,43-1,22 (m, 10H). Um próton obscurecido por solvente e cinco prótons trocáveis não observados.
Exemplo 114
Ditrifluoroacetato de (R)-4-hidróxi-7-(1-hidróxi-2-(4-(2-(4-(2isopropiltiazol-5-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9il)etóxi)benzilamino)etil)benzo[d]tiazol-2(3H)-ona
HO
a) 4-(2-isopropiltiazol-5-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecano9-carboxilato de terc-butila
Petição 870190058499, de 25/06/2019, pág. 502/650
497/638 [001451] Uma solução de cloridrato de 1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecano-9-carboxilato de terc-butila (WuXi PharmaTech) (0,694 g) em DMF (13 mL) foi tratada com trietilamina (1,3 mL), seguida por ácido 2-isopropiltiazol-5-carboxílico (exemplo 55, etapa b) (0,406 g) e em seguida hexafluorofosfato de O-(7-azabenzotriazol-1-il)Μ,Μ,Μ’,Μ-tetrametilurônio (1,26 g). A mistura resultante foi agitada à TA durante 16 horas. DMF foi removido em vácuo. O resíduo foi apreendido em EtOAc (40 mL) e lavado com solução de bicarbonato de sódio saturada (2 x 40 mL), água (40 mL) e salmoura (40 mL), secado sobre sulfato de sódio, filtrado e evaporado em vácuo. O óleo laranja viscoso foi purificado por cromatografia de sílica-gel eluindo com 0-7% de MeOH em DCM para fornecer o composto do subtítulo como um óleo laranja viscoso. Produção 0,765 g.
[001452] 1H RMN (400 MHz, CDCh) δ 7,80 (s, 1H), 3,75 (d, J = 3,2Hz, 6H), 3,55 (d, J = 4,3Hz, 2H), 3,36-3,28 (m, 1H), 3,15 (s, 2H),
1,89-1,78 (m, 2H), 1,58 (s, 2H), 1,45 (s, 9H), 1,42 (d, J = 6,9Hz, 6H).
b) (2-isopropiltiazol-5-il)(1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4il)metanona
HN [001453] Ácido trifluoroacético (3,9 mL) foi adicionado à solução de 4-(2-isopropiltiazol-5-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecano-9carboxilato de terc-butila (exemplo 113, etapa a) (0,765 g) em DCM (14,8 mL). A mistura resultante foi agitada a TA durante 1 hora. Tolueno (30 mL) foi adicionado e a mistura foi evaporada em vácuo. O resíduo amarelo foi dissolvido em MeOH e aplicado a um cartucho SCX pré-umedecido com MeOH. O cartucho foi lavado com MeOH e eluído
Petição 870190058499, de 25/06/2019, pág. 503/650
498/638 com amônia a 2 M em MeOH. O eluente foi evaporado em vácuo para fornecer o composto do subtítulo como um óleo amarelo. Produção 0,552 g.
[001454] 1H RMN (400 MHz, CDCh) δ 7,81 (s, 1H), 3,79-3,71 (m,
4H), 3,64-3,44 (m, 2H), 3,36-3,26 (m, 1H), 2,96-2,87 (m, 2H), 2,85-2,73 (m, 2H), 1,86-1,75 (m, 2H), 1,59 (s, 2H), 1,42 (d, J = 6,9Hz, 6H). Um próton trocável não observado.
c) 2-hidróxi-2-(4-hidróxi-2-oxo-2,3-di-hidrobenzo[d]tiazol-7-il)etil(4(2-(4-(2-isopropiltiazol-5-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5] undecan-9-il)etóxi)benzil)carbamato de (R)-terc-butila
HO [001455] Uma solução de metanossulfonato de (R)-2-(4-((tercbutoxicarbonil(2-hidróxi-2-(4-hidróxi-2-oxo-2,3-di-hidrobenzo[d]tiazol-7il)etil)amino)metil)fenóxi)etila (exemplo 108, etapa c) (0,575 g) em MeCN (3 mL) foi adicionada gota a gota a uma solução de (2isopropiltiazol-5-il)(1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4-il)metanona (exemplo 114, etapa b) (0,229 g) e trietilamina (0,21 mL) em MeCN (7,3 mL) em TA sob argônio. A mistura resultante foi agitada a 80°C sob argônio durante 16 horas. Após resfriamento para TA o solvente foi removido em vácuo. O resíduo foi apreendido em DCM (25 mL), lavado com salmoura (20 mL) e água (20 mL), secado sobre sulfato de sódio, filtrado e evaporado em vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de sílica-gel eluindo com 0-8% de MeOH em DCM para fornecer o composto do subtítulo como um sólido amarelo. Produção 0,395 g.
[001456] 1H RMN (400 MHz, CDCh) δ 7,69 (s, 1 H), 7,01-6,83 (s, 2
Petição 870190058499, de 25/06/2019, pág. 504/650
499/638
H), 6,70-6,62 (m, 3 H), 6,57-6,47 (m, 1 H), 4,79 (s, 1 H), 4,25-4,06 (m,
H), 3,77-3,63 (m, 4 H), 3,57-3,39 (m, 4H), 3,34-3,26 (m, 2H), 2,90 (s,
H), 2,61 (s, 2 H), 1,95-1,85 (m, 2 H), 1,63 (s, 2H), 1,51 (s, 9 H), 1,45-
1,37 (m, 6 H). Três prótons trocáveis não observados.
d) Ditrifluoroacetato de (R)-4-hidróxi-7-(1-hidróxi-2-(4-(2-(4-(2- isopropiltiazol-5-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9il)etóxi)benzilamino)etil)benzo[d]tiazol-2(3H)-ona
HO [001457] Ácido trifluoroacético (1,2 mL) foi adicionado à solução de 2-hidróxi-2-(4-hidróxi-2-oxo-2,3-di-hidrobenzo[d]tiazol-7-il)etil(4-(2-(4(2-isopropiltiazol-5-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9il)etóxi)benzil)carbamato de (R)-terc-butila (exemplo 114, etapa c) (0,39 g) em DCM (4,7 mL). A mistura resultante foi agitada a TA durante 15 minutos. Tolueno (30 mL) foi adicionado e a mistura reacional foi evaporada em vácuo (x 3). O resíduo foi purificado por HPLC (Phenomenex Gemini®, gradiente: 5-40% de acetonitrila em 0,1% de ácido trifluoroacético aquoso). As frações contendo produto foram combinadas, e secadas por congelamento para fornecer o composto do título como um sólido branco. Produção 0,201 g.
[001458] m/z 668 (M+H)+ [001459] 1H RMN (400 MHz, D4-MeOH) δ 7,91 (s, 1H), 7,42 (d, J =
8,6Hz, 2H), 7,06 (d, J = 8,6Hz, 2H), 6,93 (d, J = 8,3Hz, 1H), 6,71 (d, J = 8,3Hz, 1H), 4,91-4,88 (m, 1H), 4,38 (t, J = 4,9Hz, 2H), 4,24-4,15 (m, 2H), 3,82-3,71 (m, 5H), 3,66-3,57 (m, 4H), 3,56-3,48 (m, 2H), 3,38-3,25 (m, 1H), 3,08-3,00 (m, 2H), 2,29-2,17 (m, 2H), 2,12-1,93 (br s, 1H),
1,88-1,73 (m, 2H), 1,38 (d, J = 6,7Hz , 6H). Seis prótons trocáveis não observados.
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500/638
Exemplo 115
Formiato de (R)-4-hidróxi-7-(1 -hidróxi-2-(9-(4-(2-isopropiltiazol-5carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)nonilamino)etil) benzo[d]tiazol-2(3H)-ona
a) (9-(9-Hidroxinonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4-il)(2isopropiltiazol-5-il)metanona
[001460] Uma solução de 9-bromo-1-nonanol (0,446 g) em MeCN (3,9 mL) foi adicionada a uma solução de (2-isopropiltiazol-5-il)(1-oxa-
4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4-il)metanona (exemplo 114, etapa b) (0,395 g) e trietilamina (0,36 mL) em MeCN (8,6 mL). A mistura resultante foi agitada a 60°C sob argônio durante 16 horas. Após resfriamento para TA, o solvente foi removido em vácuo. O resíduo foi apreendido em DCM (25 mL), lavado com salmoura (20 mL) e água (20 mL), secado sobre sulfato de sódio, filtrado e evaporado em vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de sílica-gel eluindo com 010% de MeOH em DCM para fornecer o composto do subtítulo como um sólido branco. Produção 0,329 g.
[001461] 1H RMN (400 MHz, CDCh) δ 7,81 (s, 1H), 3,74 (s, 4H), 3,63 (t, J = 6,6 Hz, 2H), 3,59 (s, 2H), 3,36-3,26 (m, 1H), 3,10-2,49 (m, 5H), 2,03-1,91 (m, 3H), 1,68 (s, 2H), 1,61-1,50 (m, 3H), 1,43 (d, J = 6,9 Hz, 6H), 1,36-1,29 (m, 11H). Um próton trocável não observado.
b) Formiato de (R)-4-hidróxi-7-(1-hidróxi-2-(9-(4-(2-isopropiltiazolPetição 870190058499, de 25/06/2019, pág. 506/650
501/638
5-carbonjl)-1-oxa-4,9-djazaespjro[5,5]undecan-9-jl)nonjlamjno) etil)benzo[d]tiazol-2(3H)-ona
[001462] Ácido trifluoroacético (0,055 mL) foi adicionado à solução de (9-(9-hidroxinonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4-il)(2isopropiltiazol-5-il)metanona (exemplo 115, etapa a) (0,325 g) em DCM (13 mL) a 0°C sob argônio. A mistura resultante foi agitada durante 5 minutos e em seguida periodinano Dess-Martin (0,458 g) foi adicionado. A mistura foi agitada a TA durante 1,5 hora. Solução de tiossulfato de sódio saturada (14 mL), solução de bicarbonato de sódio saturada (14 mL) e EtOAc (28 mL) foram adicionados e a mistura foi agitada durante 10 minutos. As camadas foram separadas e a camada aquosa foi extraída com EtOAc (2 x 20 mL). A camada orgânica combinada foi tratada com ácido acético (0,16 mL), secada sobre sulfato de sódio, filtrada e evaporada em vácuo. O óleo amarelo foi dissolvido em MeOH seco (15 mL) e cloridrato de (R)-7-(2-amino-1-hidroxietil)-4hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona (WO2007027134, exemplo 1, etapa d) (0,284 g) foi adicionado, seguido por ácido acético (0,062 mL) e peneiras moleculares de 3Â. Após agitação durante 5 minutos em RT, a mistura reacional foi resfriada para 0°C e triacetoxiboroidreto de sódio (0,153 g) foi adicionado e a mistura foi agitada a TA durante 16 horas. A mistura reacional foi filtrada e o solvente foi evaporado em vácuo. O resíduo foi purificado por HPLC (Phenomenex Gemini®, gradiente: 540% de acetonitrila em 0,1% de ácido fórmico aquoso). As frações contendo produto foram combinadas e secadas por congelamento para fornecer o composto do título como um sólido branco. Produção
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502/638
0,090 mg.
[001463] m/z 660 (M+H)+ [001464] 1H RMN (400 MHz, D4-MeOH) δ 8,50 (s, 1H), 7,90 (s, 1H),
6,95 (d, J = 8,5Hz, 1H), 6,73 (d, J = 8,5Hz, 1H), 4,96-4,90 (m, 1H), 3,79-3,68 (m, 4H), 3,64-3,55 (m, 2H), 3,38-3,26 (m, 1H), 3,11-3,05 (m, 2H), 3,04-2,92 (m, 4H), 2,86-2,69 (m, 4H), 2,07-2,04 (m, 2H), 1,76-1,55 (m, 6H), 1,39-1,36 (m, 7H), 1,36-1,31 (m, 9H). Cinco prótons trocáveis não observados.
[001465] PEC50 e Atividade Intrínseca. Atividade intrínseca é expressa como uma fração relativa à atividade máxima determinada por formoterol em cada experimento.
Exemplos 116-182
OH
HO
R1
a) 3-fluoro-5-((4-(2,2,2-trifluoroacetil)-1 -oxa-4,9-diazaespiro[5,5] undecan-9-il)metil)fenetil(2-hidróxi-2-(4-hidróxi-2-oxo-2,3-di-hidrobenzo[d] tiazol-7-il)etil)carbamato de (Rj-terc-butila
HO [001466] Uma solução de 2,2,2-trifluoro-1-(9-(3-fluoro-5-(2hidroxietil)benzil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4-il)etanona (exemplo 41, etapa c) (0,8 g) em diclorometano (50 mL) a 20 °C foi tratada com ácido trifluoroacético (0,152 mL) seguido por periodinano Dess-Martin (1,091 g) e a mistura resultante agitada a 20 °C durante 40 minutos. A mistura reacional foi tratada com tiossulfato de sódio
Petição 870190058499, de 25/06/2019, pág. 508/650
503/638 aquoso saturado (20 mL), bicarbonato de sódio aquoso saturado (20 mL) e acetato de etila (30 mL) e agitada vigorosamente durante 5 minutos. A mistura foi extraída com acetato de etila (x2), os orgânicos combinados foram lavados com bicarbonato de sódio aquoso, secados sobre sulfato de sódio, filtrados, e o solvente removido sob pressão reduzida. O resíduo foi dissolvido em metanol (3 mL) e adicionado a uma solução de (R)-7-(2-amino-1-hidroxietil)-4-hidroxibenzo[d]tiazol2(3H)-ona, HCl (WO2007027134, exemplo 1, etapa d) (0,780 g) em metanol (20 mL) com ácido acético (0,113 mL). Esta mistura foi tratada com cianoboroidreto de sódio (0,186 g) e agitada durante 2 horas a 20 °C. Trietilamina (0,69 mL) foi adicionado seguido por di-tercbutildicarbonato (0,689 mL) e agitação continuada durante 2 horas a 20 °C. O solvente foi removido sob pressão reduzida e o resíduo dividido entre acetato de etila e salmoura. A camada orgânica foi secada sobre sulfato de sódio, filtrada e o solvente removido sob pressão reduzida. O produto bruto foi purificado por cromatografia de sílica-gel eluindo com 10% de metanol em diclorometano com 1% de amônia aquosa concentrada. Frações puras foram evaporadas até a secura para fornecer o composto do subtítulo. Produção 0,7 g.
[001467] m/z 713,3 (M+H)+
b) 3-(1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-ilmetil)-5-fluorofenetil(2hidróxi-2-(4-hidróxi-2-oxo-2,3-di-hidrobenzo[d]tiazol-7-il)etil) carbamato de (R)-terc-butila
HO [001468] Uma solução de 3-fluoro-5-((4-(2,2,2-trifluoroacetil)-1-oxa-
4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil)fenetil(2-hidróxi-2-(4-hidróxi-2-
Petição 870190058499, de 25/06/2019, pág. 509/650
504/638 oxo-2,3-di-hidrobenzo[d]tiazol-7-il)etil)carbamato de (R)-terc-butila (exemplos 116-182, etapa a) (0,7 g) em 35% de solução de amônia aquosa (15 mL) foi deixada descansar a 20 °C durante 40 minutos. A mistura reacional foi evaporada para metade do volume inicial sob pressão reduzida. Água (10 mL) foi adicionada e esta solução foi passada através de um cartucho de sílica C18 de 10 g que foi préumedecido com água. A coluna foi inundada com água (20 mL). A coluna foi em seguida inundada com metanol (50 mL) trazer o produto. O solvente foi evaporado sob pressão reduzida e o resíduo foi azeotropado com acetonitrila (x2) para fornecer o composto do subtítulo. Produção 0,580 g.
[001469] m/z 617 (M+H)+
c) Síntese Paralela - Preparação de Exemplos 116-182
[001470] Uma solução de 3-(1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9ilmetil)-5-fluorofenetil(2-hidróxi-2-(4-hidróxi-2-oxo-2,3-di-hidrobenzo[d]tiazol7-il)etil)carbamato de (R)-terc-butila (exemplos 116-182, etapa b) (496 mg) e trietilamina (244 mg) em NMP (2,4 mL) foi dispensada como alíquotas de 30 uL de volume total. Para cada alíquota foi adicionada uma solução do apropriado ácido (0,01 mmol) em NMP (80 uL) seguida por uma solução de HATU (4,9 mg) em NMP (30 uL). A mistura reacional foi deixada descansar em temperatura ambiente durante 18 horas. Acetonitrila (800 uL) foi adicionado e a solução passada através de resina ‘Tosic-65’ (350 mg). A resina foi lavada com acetonitrila (800 uL) e as lavagens combinadas coletadas e novamente passadas através da resina ‘Tosic-65’. A resina foi em seguida lavada com acetonitrila (3 mL). Uma solução de amônia em metanol (2,5 mL de uma solução a 3,5 M) foi passada através da resina e as lavagens resultantes evaporadas sob uma corrente de gás de nitrogênio. O resíduo foi dissolvido em ácido fórmico (250 uL) e a mistura deixada descansar em tempe
Petição 870190058499, de 25/06/2019, pág. 510/650
505/638 ratura ambiente durante 18 horas. Acetonitrila (600 uL) foi adicionado e a solução passada através de resina ‘Tosic-65’ (350 mg). A resina foi lavada com acetonitrila (800 uL) e as lavagens combinadas coletadas e novamente passadas através da resina ‘Tosic-65’. A resina foi em seguida lavada com acetonitrila (3 mL). Uma solução de amônia em metanol (2,5 mL de uma solução a 3,5 M) foi passada através da resina e as lavagens resultantes evaporadas sob uma corrente de gás de nitrogênio. DMSO (200 uL) foi adicionado ao resíduo e a solução resultante passada através de uma coluna C18 preparativa ‘Sunfire’ (19x50 mm) usando uma eluição gradiente de foco de acetonitrila vs TFA a 0,1% aquoso para purificação. As frações contendo produto foram evaporadas para produzir os compostos títulos.
Exemplo
N° |
NOME |
O
Ari |
MWt+1 observado |
Tempo de retenção* (min) |
116 |
(R)-7-(2-(3-((4-(3-(1Hbenzo[d]imidazol-2il)propanoil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9il)metil)-5fluorofenetilamino)-1hidroxietil)-4hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)ona |
*
^^j^NH |
689,4 |
0,97 |
117 |
(R)-7-(2-(3-fluoro-5-((4-(2(2-metoxifenil)acetil)-1-oxa4,9diazaespiro[5,5]undecan-9il)metil)fenetilamino)-1hidroxietil)-4hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)ona |
^O
Tji
o^ |
665,3 |
1,14 |
Petição 870190058499, de 25/06/2019, pág. 511/650
506/638
Exemplo
N° |
NOME |
O
AR1 |
MWt+1 observado |
Tempo de retenção* (min) |
118 |
(R)-7-(2-(3-fluoro-5-((4-(5metiltiofeno-2-carbonil)-1oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9il)metil)fenetilamino)-1hidroxietil)-4hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)ona |
o^jfT 7^S
* |
641,3 |
1,1 |
119 |
(R)-7-(2-(3-fluoro-5-((4-
(quinolina-2-carbonil)-1oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9il)metil)fenetilamino)-1hidroxietil)-4hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)ona |
O
*
kJ |
672,3 |
1,11 |
120 |
(R)-7-(2-(3-((4-(1H-indol-2carbonil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9il)metil)-5fluorofenetilamino)-1hidroxietil)-4hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)ona |
*
/V^° k/^NH |
660,3 |
1,19 |
121 |
(R)-7-(2-(3-fluoro-5-((4-(2metilbenzoil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9il)metil)fenetilamino)-1hidroxietil)-4hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)ona |
°/p |
635,3 |
1,07 |
122 |
(R)-7-(2-(3-fluoro-5-((4-(3metilbenzoil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9il)metil)fenetilamino)-1hidroxietil)-4hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)ona |
O |
635,3 |
1,1 |
Petição 870190058499, de 25/06/2019, pág. 512/650
507/638
Exemplo
N° |
NOME |
O
AR1 |
MWt+1 observado |
Tempo de retenção* (min) |
123 |
(R)-7-(2-(3-((4-(2-(bifenil-4il)acetil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9il)metil)-5fluorofenetilamino)-1hidroxietil)-4hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)ona |
|
711,4 |
1,25 |
124 |
(R)-7-(2-(3-((4-(5clorotiofeno-2-carbonil)-1oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9il)metil)-5fluorofenetilamino)-1hidroxietil)-4hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)ona |
°\
ci
* |
661,2 |
1,16 |
125 |
(R)-7-(2-(3-fluoro-5-((4-(3metiltiofeno-2-carbonil)-1oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9il)metil)fenetilamino)-1hidroxietil)-4hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)ona |
S
°=\
* |
641,3 |
1 |
126 |
(R)-7-(2-(3-fluoro-5-((4-(2(tiofen-3-il)acetil)-1-oxa4,9diazaespiro[5,5]undecan-9il)metil)fenetilamino)-1hidroxietil)-4hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)ona |
° _ |
641,3 |
0,98 |
Petição 870190058499, de 25/06/2019, pág. 513/650
508/638
Exemplo
N° |
NOME |
O
AR1 |
MWt+1 observado |
Tempo de retenção* (min) |
127 |
(R)-7-(2-(3-fluoro-5-((4-(3metilfuran-2-carbonil)-1oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9il)metil)fenetilamino)-1hidroxietil)-4hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)ona |
O 3]
oA
* |
625,3 |
1,1 |
128 |
(R)-7-(2-(3-((4-(3-(1H-indol3-il)propanoil)-1-oxa-4,9-
diazaespiro[5,5]undecan-9il)metil)-5fluorofenetilamino)-1hidroxietil)-4hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)ona |
H
íí^T^N
>%***** O |
688,4 |
1,03 |
129 |
(R)-7-(2-(3-fluoro-5-((4-(1fenilciclopentanocarbonil)1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9il)metil)fenetilamino)-1hidroxietil)-4hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)ona |
o=oOi |
689,5 |
1,1 |
130 |
(R)-7-(2-(3-((4-(3,3dimetilbutanoil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9il)metil)-5fluorofenetilamino)-1hidroxietil)-4hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)ona |
* |
615,4 |
1,1 |
Petição 870190058499, de 25/06/2019, pág. 514/650
509/638
Exemplo
N° |
NOME |
O
AR1 |
MWt+1 observado |
Tempo de retenção* (min) |
131 |
(R)-7-(2-(3-fluoro-5-((4-(2metilfuran-3-carbonil)-1oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9il)metil)fenetilamino)-1hidroxietil)-4hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)ona |
/^O
oA
* |
625,3 |
1,1 |
132 |
(R)-7-(2-(3-((4-
(benzo[d]tiazol-6-carbonil)1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9il)metil)-5fluorofenetilamino)-1hidroxietil)-4hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)ona |
O
N |
678,3 |
1,02 |
133 |
(R)-7-(2-(3-fluoro-5-((4-(5metilimidazo[1,2-a]piridina2-carbonil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9il)metil)fenetilamino)-1hidroxietil)-4hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)ona |
* |
675,3 |
0,98 |
134 |
(R)-7-(2-(3-fluoro-5-((4-(2-
(3-metil-1H-1,2,4-triazol-5il)acetil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9il)metil)fenetilamino)-1hidroxietil)-4hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)ona |
J j/Y
N
H |
640,4 |
0,9 |
Petição 870190058499, de 25/06/2019, pág. 515/650
510/638
Exemplo
N° |
NOME |
O
AR1 |
MWt+1 observado |
Tempo de retenção* (min) |
135 |
(R)-7-(2-(3-((4-(2-(3-etil-2oxo-2,3-di-hidro-1Hbenzo[d]imidazol-1il)acetil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9il)metil)-5fluorofenetilamino)-1hidroxietil)-4hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)ona |
o
Λ
Z'''x *
o |
719,4 |
1,16 |
136 |
(R)-7-(2-(3-((4-(2,5dimetoxibenzoil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9il)metil)-5fluorofenetilamino)-1hidroxietil)-4hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)ona |
O 1
/O * ΧΓ
1 |
681,3 |
1,11 |
137 |
(R)-7-(2-(3-((4-(1H-indol-3carbonil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9il)metil)-5fluorofenetilamino)-1hidroxietil)-4hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)ona |
H
y^N
O |
660,3 |
1,09 |
138 |
(R)-7-(2-(3-((4-(1H-indol-5carbonil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9il)metil)-5fluorofenetilamino)-1hidroxietil)-4hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)ona |
O
*
nh |
660,3 |
1,05 |
Petição 870190058499, de 25/06/2019, pág. 516/650
511/638
Exemplo
N° |
NOME |
O
AR1 |
MWt+1 observado |
Tempo de retenção* (min) |
139 |
(R)-7-(2-(3-fluoro-5-((4-(1metil-1H-indol-2-carbonil)1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9il)metil)fenetilamino)-1hidroxietil)-4hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)ona |
N^/
1 o |
674,3 |
1,09 |
140 |
(R)-7-(2-(3-((4-(1H-indol-6carbonil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9il)metil)-5fluorofenetilamino)-1hidroxietil)-4hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)ona |
O
H |
660,3 |
1,11 |
141 |
(R)-7-(2-(3-((4-(1H-indol-7carbonil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9il)metil)-5fluorofenetilamino)-1hidroxietil)-4hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)ona |
X^^N J H |
660,3 |
1,13 |
142 |
(R)-7-(2-(3-fluoro-5-((4-(1isopropil-1Hbenzo[d][1,2,3]triazol-5carbonil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9il)metil)fenetilamino)-1hidroxietil)-4hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)ona |
0
* —-—v
nCn /
N^X^ |
704,4 |
1,04 |
Petição 870190058499, de 25/06/2019, pág. 517/650
512/638
Exemplo
N° |
NOME |
O
AR1 |
MWt+1 observado |
Tempo de retenção* (min) |
143 |
(R)-7-(2-(3-((4-(2,6dimetilimidazo[1,2a]piridina-3-carbonil)-1-oxa-
4,9diazaespiro[5,5]undecan-9il)metil)-5fluorofenetilamino)-1hidroxietil)-4hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)ona |
^\^N
O |
689,4 |
0,82 |
144 |
(R)-7-(2-(3-((4-(2(benzo[d]isoxazol-3il)acetil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9il)metil)-5fluorofenetilamino)-1hidroxietil)-4hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)ona |
OX
O^Z
* |
676,3 |
1,01 |
145 |
(R)-7-(2-(3-((4-
(bifenilcarbonil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9il)metil)-5fluorofenetilamino)-1hidroxietil)-4hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)ona |
|
697,4 |
1,3 |
146 |
(R)-7-(2-(3-fluoro-5-((4-
(4,5,6,7-tetra-hidro-2Hindazol-3-carbonil)-1-oxa4,9diazaespiro[5,5]undecan-9-
il)metil)fenetilamino)-1hidroxietil)-4hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)ona |
L X- 'nh
O |
665,3 |
1,13 |
Petição 870190058499, de 25/06/2019, pág. 518/650
513/638
Exemplo
N° |
NOME |
O
AR1 |
MWt+1 observado |
Tempo de retenção* (min) |
147 |
(R)-7-(2-(3-fluoro-5-((4-(2metiltiofeno-3-carbonil)-1oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9il)metil)fenetilamino)-1hidroxietil)-4hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)ona |
oA
* |
641,3 |
1,11 |
148 |
(R)-7-(2-(3-((4-(4-(1Hpirazol-3-il)benzoil)-1-oxa4,9diazaespiro[5,5]undecan-9il)metil)-5fluorofenetilamino)-1hidroxietil)-4hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)ona |
O
N-N H |
687,4 |
1,07 |
149 |
(R)-7-(2-(3-((4-(2,3-dihidrobenzofuran-5carbonil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9il)metil)-5fluorofenetilamino)-1hidroxietil)-4hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)ona |
O
*λό
O |
663,3 |
1,07 |
150 |
(R)-7-(2-(3-((4-(2,5dimetiltiofeno-3-carbonil)-1oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9il)metil)-5fluorofenetilamino)-1hidroxietil)-4hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)ona |
/ S
O^\
* |
655,3 |
1,15 |
Petição 870190058499, de 25/06/2019, pág. 519/650
514/638
Exemplo
N° |
NOME |
O
AR1 |
MWt+1 observado |
Tempo de retenção* (min) |
151 |
(R)-7-(2-(3-fluoro-5-((4-(4metil-1,2,5-oxadiazol-3carbonil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9il)metil)fenetilamino)-1hidroxietil)-4hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)ona |
PN
O^\
* |
627,3 |
1,05 |
152 |
(R)-7-(2-(3-fluoro-5-((4-(2metilimidazo[1,2-a]piridina3-carbonil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9il)metil)fenetilamino)-1hidroxietil)-4hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)ona |
^x-N
^^N^T
O |
675,4 |
0,88 |
153 |
(R)-7-(2-(3-fluoro-5-((4-(2(3-metil-1H-pirazol-1il)acetil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9il)metil)fenetilamino)-1hidroxietil)-4hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)ona |
O _
N |
639,3 |
0,97 |
154 |
(R)-7-(2-(3-((4-(5-etóxi-2hidroxibenzoil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9il)metil)-5fluorofenetilamino)-1hidroxietil)-4hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)ona |
^O
* OH |
681,4 |
1,03 |
Petição 870190058499, de 25/06/2019, pág. 520/650
515/638
Exemplo
N° |
NOME |
O
Ari |
MWt+1 observado |
Tempo de retenção* (min) |
155 |
(R)-7-(2-(3-fluoro-5-((4-(3fenil-1H-pirazol-5-carbonil)1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9il)metil)fenetilamino)-1hidroxietil)-4hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)ona |
O
*—-Z'
HN 3
n |
687,3 |
1,11 |
156 |
(R)-7-(2-(3-((4-(4-(1Himidazol-1-il)benzoil)-1oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9il)metil)-5fluorofenetilamino)-1hidroxietil)-4hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)ona |
O
* Γ J1
Q |
687,4 |
0,81 |
157 |
(R)-7-(2-(3-fluoro-5-((4-(5metil-1H-indol-2-carbonil)1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9il)metil)fenetilamino)-1hidroxietil)-4hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)ona |
*
/^I^O
/^NH |
674,4 |
1,14 |
158 |
7-((R)-2-(3-fluoro-5-((4-
((S)-tetra-hidrofurano-2carbonil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9-
il)metil)fenetilamino)-1hidroxietil)-4hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)ona |
o^X3
* |
615,3 |
0,84 |
Petição 870190058499, de 25/06/2019, pág. 521/650
516/638
Exemplo
N° |
NOME |
O
AR1 |
MWt+1 observado |
Tempo de retenção* (min) |
159 |
(R)-7-(2-(3-fluoro-5-((4-(4(oxazol-5-il)benzoil)-1-oxa4,9diazaespiro[5,5]undecan-9il)metil)fenetilamino)-1hidroxietil)-4hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)ona |
O
l/> |
688,3 |
0,97 |
160 |
(R)-7-(2-(3-fluoro-5-((4-(1fenil-1H-pirazol-5-carbonil)1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9il)metil)fenetilamino)-1hidroxietil)-4hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)ona |
/^N
O^ kJ |
687,3 |
1,16 |
161 |
7-((1R)-2-(3-fluoro-5-((4-(3(3-metil-5-oxo-4,5-di-hidro1H-pirazol-4-il)propanoil)-1oxa-4,9-
diazaespiro[5,5]undecan-9il)metil)fenetilamino)-1hidroxietil)-4hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)ona |
*
O k
HN | |
669,4 |
0,97 |
162 |
(R)-7-(2-(3-((4-(1,2-dimetil1H-benzo[d]imidazol-5carbonil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9il)metil)-5fluorofenetilamino)-1hidroxietil)-4hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)ona |
*
^/^O
N
1 |
689,4 |
0,92 |
Petição 870190058499, de 25/06/2019, pág. 522/650
517/638
Exemplo
N° |
NOME |
O
Ari |
MWt+1 observado |
Tempo de retenção* (min) |
163 |
(R)-7-(2-(3-fluoro-5-((4-(2(4-metil-1,2,5-oxadiazol-3il)acetil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9il)metil)fenetilamino)-1hidroxietil)-4hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)ona |
°N
VÃ 0χ/ x
* |
641,3 |
1,02 |
164 |
(R)-7-(2-(3-((4-(3-(1H1,2,4-triazol-1-il)propanoil)1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9il)metil)-5fluorofenetilamino)-1hidroxietil)-4hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)ona |
O /=N
1 N
* |
640,3 |
0,88 |
165 |
(R)-7-(2-(3-((4-(1H-indol-4carbonil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9il)metil)-5fluorofenetilamino)-1hidroxietil)-4hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)ona |
H
^\^N |
660,4 |
1,03 |
166 |
(R)-7-(2-(3-fluoro-5-((4-(2(2-metiltiazol-4-il)acetil)-1oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9il)metil)fenetilamino)-1hidroxietil)-4hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)ona |
O Q |
656,3 |
0,93 |
Petição 870190058499, de 25/06/2019, pág. 523/650
518/638
Exemplo
N° |
NOME |
O
Ari |
MWt+1 observado |
Tempo de retenção* (min) |
167 |
(R)-7-(2-(3-((4-(2-(3,5dimetilisoxazol-4-il)acetil)1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9il)metil)-5fluorofenetilamino)-1hidroxietil)-4hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)ona |
___z°^N θχ/'^
* |
654,3 |
0,93 |
168 |
(R)-7-(2-(3-((4-(2-(7-cloro1H-indol-1-il)acetil)-1-oxa4,9diazaespiro[5,5]undecan-9il)metil)-5fluorofenetilamino)-1hidroxietil)-4hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)ona |
rn
\ 0 Cl 'f
* |
708,3 |
1,12 |
169 |
(R)-7-(2-(3-((4-
(bifenilcarbonil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9il)metil)-5fluorofenetilamino)-1hidroxietil)-4hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)ona |
°
% |
697,4 |
1,18 |
170 |
(R)-7-(2-(3-fluoro-5-((4-(5metil-2-fenil-2H-1,2,3triazol-4-carbonil)-1-oxa4,9diazaespiro[5,5]undecan-9il)metil)fenetilamino)-1hidroxietil)-4hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)ona |
°
í/
/^N
N Ό |
702,3 |
1,13 |
Petição 870190058499, de 25/06/2019, pág. 524/650
519/638
Exemplo
N° |
NOME |
O
Ari |
MWt+1 observado |
Tempo de retenção* (min) |
171 |
(R)-7-(2-(3-((4-
(bifenilcarbonil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9il)metil)-5fluorofenetilamino)-1hidroxietil)-4hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)ona |
T v |
697,4 |
1,34 |
172 |
(R)-7-(2-(3-fluoro-5-((4-
(quinolina-3-carbonil)-1oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9il)metil)fenetilamino)-1hidroxietil)-4hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)ona |
O |
672,3 |
1,05 |
173 |
(R)-7-(2-(3-((4-(benzofuran-
5-carbonil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9il)metil)-5fluorofenetilamino)-1hidroxietil)-4hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)ona |
O
* ςΊ
O |
661,3 |
1,12 |
174 |
(R)-7-(2-(3-fluoro-5-((4-(2fenetoxiacetil)-1 -oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9il)metil)fenetilamino)-1hidroxietil)-4hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)ona |
O
A
O
>0 |
679,4 |
1,22 |
Petição 870190058499, de 25/06/2019, pág. 525/650
520/638
Exemplo
N° |
NOME |
O
AR1 |
MWt+1 observado |
Tempo de retenção* (min) |
175 |
(R)-7-(2-(3-fluoro-5-((4-(2fenil-1H-imidazol-5carbonil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9il)metil)fenetilamino)-1hidroxietil)-4hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)ona |
O Z^N
* h 1 H |
687,4 |
1 |
176 |
(R)-7-(2-(3-fluoro-5-((4-(2metil-2-fenilpropanoil)-1oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9il)metil)fenetilamino)-1hidroxietil)-4hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)ona |
* |
663,4 |
1,23 |
177 |
(R)-7-(2-(3-fluoro-5-((4-(2(2-(trifluorometil)-1Hbenzo[d]imidazol-1il)acetil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9il)metil)fenetilamino)-1hidroxietil)-4hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)ona |
N F |
743,3 |
1,14 |
N J / F
f
o^\
* |
178 |
(R)-7-(2-(3-fluoro-5-((4-
(quinolina-7-carbonil)-1oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9il)metil)fenetilamino)-1hidroxietil)-4hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)ona |
O
u |
672,3 |
0,93 |
Petição 870190058499, de 25/06/2019, pág. 526/650
521/638
Exemplo
N° |
NOME |
O
Ari |
MWt+1 observado |
Tempo de retenção* (min) |
179 |
(R)-7-(2-(3-fluoro-5-((4-(5isopropilisoxazol-3carbonil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9il)metil)fenetilamino)-1hidroxietil)-4hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)ona |
o 1
* N-O |
654,4 |
1,13 |
180 |
(R)-7-(2-(3-((4-(4,5dimetilfuran-2-carbonil)-1oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9il)metil)-5fluorofenetilamino)-1hidroxietil)-4hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)ona |
0 /
O^/
* |
639,3 |
1,07 |
181 |
(R)-7-(2-(3-fluoro-5-((4-(2(4-hidroxifenóxi)acetil)-1oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9il)metil)fenetilamino)-1hidroxietil)-4hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)ona |
O
A
O^^x TI ^OH |
667,3 |
0,92 |
182 |
(R)-7-(2-(3-((4-(5clorobenzofuran-2carbonil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9il)metil)-5fluorofenetilamino)-1hidroxietil)-4hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)ona |
*
0^¼
Cl |
695,3 |
1,12 |
[001471] Condições de HPLC analíticas: coluna Sunfire® C18 2,5pm 4,6x30mm (Waters Corporation), MeCN/0,1% de TFA aquoso, gradiente de
5-95% de MeCN).
Petição 870190058499, de 25/06/2019, pág. 527/650
522/638
Tempo (min) |
% de aquoso |
% de MeCN |
Fluxo (ml/min) |
0,3 |
95 |
5 |
2,5 |
2,7 |
5 |
95 |
2,5 |
2,8 |
5 |
95 |
2,5 |
2,9 |
95 |
5 |
2,5 |
Exemplos 183-222
HO
HN
S
N H
OH
a) 9-Bromononanal o^^ 'Br [001472] M-etildi-isopropilamina (23mL) e DMSO (9,7mL) foram adicionados a uma solução de 9-bromo-1-nonanol (10,0g) em DCM seco (230 mL) em RT sob argônio. A mistura foi resfriada para -15oC e complexo de trióxido de enxofre-piridina (21,4g) foi adicionado em 4 porções em intervalos de 5 minutos. A mistura foi agitada durante 15 minutos após conclusão da adição em seguida água (200 mL) foi adicionada e as camadas foram separadas. A camada orgânica foi lavada com solução de bissulfato de sódio aquosa a 1M (4 x 250 mL), carbonato de potássio aquoso saturado (250 mL) e salmoura (2 x 200 mL), secada sobre sulfato de sódio, filtrada e evaporada em vácuo para fornecer o composto do subtítulo como um óleo laranja. Produção 9,02g.
[001473] 1H RMN (400 MHz, CDCh): δ 9,77 (t, J = 1,8 Hz, 1H), 3,40 (t, J = 6,8 Hz, 2H), 2,42 (td, J = 7,3, 1,8 Hz, 2H), 1,89-1,80 (m, 2H), 1,66-1,57 (m, 2H), 1,58-1,26 (m, 8 H).
b) 9-bromononil(2-hidróxi-2-(4-hidróxi-2-oxo-2,3-di-hidrobenzo [d]tiazol-7-il)etil)carbamato de fRJ-terc-butila
Petição 870190058499, de 25/06/2019, pág. 528/650
523/638
[001474] Uma solução de 9-bromononanal (exemplo 183-222, etapa a) (3,48g), cloridrato de (R)-7-(2-amino-1-hidroxietil)-4hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona (WO2007027134, exemplo 1 parte d) (4,54g) e ácido acético (0,99mL) em DMF seco (91mL) foi agitada à TA durante 30 minutos. A mistura reacional foi resfriada para 0°C e triacetoxiboroidreto de sódio (5,00g) foi adicionado em 4 porções em intervalos de 2 minutos. A mistura resultante foi agitada a 0°C durante 5 minutos e em seguida em RT durante 1 hora. Dicarbonato de di-tercbutila (4,12g) foi adicionado a a mistura reacional foi agitada durante
1,5 hora em seguida resfriada para 0°C e extinta com bicarbonato de sódio aquoso saturado (220 mL). Acetato de etila (200 mL) foi adicionado e a mistura foi agitada vigorosamente durante 15 minutos. As camadas foram separadas e a camada aquosa foi extraída com acetato de etila (3 x 150 mL). As camadas orgânicas combinadas foram secadas sobre sulfato de sódio, filtradas e evaporadas em vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de sílica-gel eluindo com 0-70% de EtOAc/éter de petróleo (40/60°C) para fornecer o composto do subtítulo como um óleo amarelo. Produção 1,68g.
[001475] m/z 532 (M+H)+ [001476] 1H RMN (400 MHz, CDCh): δ 7,02-6,90 (m, 1H); 6,78 (d, J =
8,4Hz, 1H), 4,92-4,87 (m, 1H), 3,63-3,27 (m, 5H), 3,20-3,04 (m, 1H),
1,89-1,79 (m, 2H), 1,71-1,17 (m, 21H) + 3 prótons trocáveis não observados.
c) 2-hidróxi-2-(4-hidróxi-2-oxo-2,3-di-hidrobenzo[d]tiazol-7-il)etil(9(4-(2,2,2-trifluoroacetil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9Petição 870190058499, de 25/06/2019, pág. 529/650
524/638 j|)nonjl)carbamato de (R)-terc-butjla
[001477] Uma solução de 9-bromononil(2-hidróxi-2-(4-hidróxi-2-oxo-
2,3-di-hidrobenzo[d]tiazol-7-il)etil)carbamato de (R)-terc-butila (exemplo 183-222, etapa b) (1,68g) em MeCN (8mL) foi adicionada gota a gota a uma solução de trifluoroacetato de 2,2,2-trifluoro-1-(1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-4-il)etanona (exemplo 12, etapa d) (1,18g) e trietilamina (0,81mL) em MeCN (8mL). A mistura resultante foi agitada a 80°C durante 18 horas. A reação foi deixada resfriar para TA e o sol vente foi removido em vácuo. O resíduo marrom foi apreendido em DCM e a camada orgânica foi lavada com água (x2) e salmoura, secada sobre sulfato de sódio, filtrada e evaporada em vácuo. A espuma marrom foi purificada por cromatografia de sílica-gel eluindo com 010% de MeOH/DCM para fornecer o composto do subtítulo como um sólido branco. Produção 500 mg.
[001478] 1H RMN (400 MHz, CDCh): δ 6,95 (s, 1H), 6,80 (dd, J = 8,3,
4,0 Hz, 1H), 4,93 (s, 1H), 3,79-3,26 (m, 10H), 3,03-2,64 (m, 6H), 2,10-
1,98 (m, 4H), 1,78-1,70 (m, 2H), 1,48 (s, 9H), 1,36-0,96 (m, 12H) mais 3 trocáveis não observados.
d) 9-(1-oxa-4,9-djazaespjro[5,5]undecan-9-jl)nonjl(2-hjdróxj-2-(4hjdróxj-2-oxo-2,3-dj-hjdrobenzo[d]tjazol-7-jl)etjl)carbamato de (R)terc-butjla
Petição 870190058499, de 25/06/2019, pág. 530/650
525/638
[001479] Uma solução de carbonato de potássio (165mg) em água (24mL) foi adicionada à solução de 2-hidróxi-2-(4-hidróxi-2-oxo-2,3-dihidrobenzo[d]tiazol-7-il)etil(9-(4-(2,2,2-trifluoroacetil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9-il)nonil)carbamato de (R)-terc-butila (exemplo 183-222, etapa c) (495mg) em MeOH (24mL). A mistura resultante foi agitada a TA durante 4 horas. Metanol foi removido por evaporação sob uma corrente de nitrogênio mantendo a mistura reacional a 30°C. Água (20 mL) e salmoura (80 mL) foram adicionadas e a mistura foi extraída com EtOAc (5 x 60 mL). As camadas orgânicas combinadas foram secadas sobre sulfato de sódio, filtradas e evaporadas em vácuo. O resíduo sólido marrom foi purificado por cromatografia de sílicagel eluindo com 0-20% de (NH3 a 2M em MeOH)/DCM para fornecer o composto do subtítulo como um sólido amarelo. Produção 323mg. [001480] m/z 607 (M+H)+ [001481] 1H RMN (400 MHz, DMSO): δ 6,80-6,68 (m, 1H), 6,65 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 5,58 (br s, 1H), 4,69-4,56 (m, 1H), 3,44 (t, J = 3,9Hz, 2H), 3,20-3,11 (m, 2H), 3,05-2,94 (m, 2H), 2,57 (t, J = 5,2 Hz, 2H), 2,50-2,46 (m, 2H), 2,40-2,31 (m, 2H), 2,25-2,13 (m, 4H), 1,77-1,68 (m, 2H), 1,45-1,02 (m, 25H) + 3 prótons trocáveis não observados.
e) Química Paralela - Preparação de exemplos 183-222
HO
HN
S
N H
OH
[001482] Uma solução de 9-(1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9Petição 870190058499, de 25/06/2019, pág. 531/650
526/638 il)nonil(2-hidróxi-2-(4-hidróxi-2-oxo-2,3-di-hidrobenzo[d]tiazol-7il)etil)carbamato de (R)-terc-butila (292 mg) e trietilamina (exemplos 183-222, etapa d) (0,20 mL) em NMP (1,14 mL) foi dispensada como alíquotas de 30 uL de volume total. Para cada alíquota foi adicionada uma solução do apropriado ácido (0,01 mmol) em NMP (80 uL) seguida por uma solução de HATU (4,0 mg) em NMP (30 uL). A mistura reacional foi deixada descansar em temperatura ambiente durante a noite. Acetonitrila (800 uL) foi adicionado e a solução passada através de resina ‘Tosic-65’ (350 mg). A resina foi lavada com acetonitrila (800 uL) e as lavagens combinadas coletadas e novamente passadas através da resina ‘Tosic-65’. A resina foi em seguida lavada com acetonitrila (3 mL). Amônia (3,5M em metanol, 2,4 mL) foi passada através da resina e as lavagens resultantes evaporadas sob uma corrente de gás de nitrogênio. O resíduo foi dissolvido em ácido fórmico (250 uL) e a mistura deixada descansar em temperatura ambiente durante a noite. Acetonitrila (600 uL) foi adicionado e a solução passada através de resina ‘Tosic-65’ (350 mg). A resina foi lavada com acetonitrila (800 uL) e as lavagens combinadas coletadas e novamente passadas através da resina ‘Tosic-65’. A resina foi em seguida lavada com acetonitrila (3 mL). Amônia (3,5M em metanol, 2,4 mL) foi passada através da resina e as lavagens resultantes evaporadas sob uma corrente de gás de nitrogênio. DMSO (360 uL) foi adicionado ao resíduo e a solução resultante passada através de uma coluna C18 preparativa ‘Sunfire’ (19 x 50 mm) usando uma eluição gradiente de foco de acetonitrila vs TFA a 0,1% aquoso para purificação. As frações contendo produto foram evaporadas para produzir os compostos títulos.
HO
HN
S
N H
OH
Petição 870190058499, de 25/06/2019, pág. 532/650
527/638
Exemplo N° |
NOME |
O
*^R1 |
MWt+1 observado |
Tempo de retenção* (min) |
183 |
(R)-4-hidróxi-7-(1-hidróxi-2-
(9-(4-(4-(tiofen-2-il)butanoil)1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9il)nonilamino)etil)benzo[d]tiaz ol-2(3H)-ona |
O
*
SX |
659,4 |
1,24 |
184 |
(R)-4-hidróxi-7-(1-hidróxi-2-
(9-(4-(1-metil-1H-pirrol-2carbonil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9il)nonilamino)etil)benzo[d]tiaz ol-2(3H)-ona |
r nx
O^\
* |
614,4 |
1,11 |
185 |
(R)-4-hidróxi-7-(1-hidróxi-2(9-(4-(2-(tiofen-2-il)acetil)-1oxa-4,9-
diazaespiro[5,5]undecan-9il)nonilamino)etil)benzo[d]tiaz ol-2(3H)-ona |
O
S |
631,3 |
1,11 |
186 |
(R)-4-hidróxi-7-(1-hidróxi-2(9- (4- (2-fenilacetil)-1 -oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9il)nonilamino)etil)benzo[d]tiaz ol-2(3H)-ona |
|
625,4 |
1,16 |
187 |
(R)-4-hidróxi-7-(1-hidróxi-2-
(9-(4-(3-fenilpropanoil)-1-oxa-
4,9-diazaespiro[5,5]undecan9-
il)nonilamino)etil)benzo[d]tiaz
ol-2(3H)-ona |
O |
639,4 |
1,2 |
188 |
(R)-4-hidróxi-7-(1-hidróxi-2-
(9-(4-(4-fenilbutanoil)-1-oxa-
4,9-diazaespiro[5,5]undecan9-
il)nonilamino)etil)benzo[d]tiaz
ol-2(3H)-ona |
|
653,4 |
1,25 |
189 |
(R)-4-hidróxi-7-(1-hidróxi-2-
(9-(4-(2-metil-2fenilpropanoil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9il)nonilamino)etil)benzo[d]tiaz ol-2(3H)-ona |
O^n |
653,4 |
1,25 |
Petição 870190058499, de 25/06/2019, pág. 533/650
528/638
Exemplo N° |
NOME |
O
*^R1 |
MWt+1 observado |
Tempo de retenção* (min) |
190 |
(R)-7-(2-(9-(4-(5-clorotiofeno2-carbonil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9-
il)nonilamino)-1-hidroxietil)-4hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)ona |
ox ,
x? s ' Cl
* |
651,3 |
1,21 |
191 |
(R)-4-hidróxi-7-(1-hidróxi-2-
(9-(4-(3-metiltiofeno-2carbonil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9il)nonilamino)etil)benzo[d]tiaz ol-2(3H)-ona |
s zx
O^\
* |
631,4 |
1,05 |
192 |
(R)-4-hidróxi-7-(1-hidróxi-2(9-(4-(2-(tiofen-3-il)acetil)-1oxa-4,9-
diazaespiro[5,5]undecan-9il)nonilamino)etil)benzo[d]tiaz ol-2(3H)-ona |
O _ |
631,3 |
1,14 |
193 |
(R)-4-hidróxi-7-(1-hidróxi-2(9-(4-(3-metilfuran-2carbonil)-1-oxa-4,9-
diazaespiro[5,5]undecan-9il)nonilamino)etil)benzo[d]tiaz ol-2(3H)-ona |
o
O^\
* |
615,4 |
1,12 |
194 |
(R)-7-(2-(9-(4-
(benzo[b]tiofeno-2-carbonil)1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9il)nonilamino)-1-hidroxietil)-4hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)ona |
*
Χί^Ο ^VS |
667,4 |
1,16 |
195 |
(R)-7-(2-(9-(4-(4,5dimetilfuran-2-carbonil)-1oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9il)nonilamino)-1-hidroxietil)-4hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)ona |
O^\
* |
629,4 |
1,17 |
196 |
(R)-4-hidróxi-7-(1-hidróxi-2-
(9-(4-(6-metilpicolinoil)-1-oxa-
4,9-diazaespiro[5,5]undecan9-
il)nonilamino)etil)benzo[d]tiaz
ol-2(3H)-ona |
O
* γΠ N<Y |
626,4 |
1,04 |
Petição 870190058499, de 25/06/2019, pág. 534/650
529/638
Exemplo N° |
NOME |
O
*^R1 |
MWt+1 observado |
Tempo de retenção* (min) |
197 |
(R)-4-hidróxi-7-(1-hidróxi-2(9-(4-(2-metilfuran-3carbonil)-1-oxa-4,9-
diazaespiro[5,5]undecan-9il)nonilamino)etil)benzo[d]tiaz ol-2(3H)-ona |
/O
O^X
* |
615,4 |
1,1 |
198 |
(R)-4-hidróxi-7-(1-hidróxi-2(9-(4-(5-metilfuran-2carbonil)-1-oxa-4,9-
diazaespiro[5,5]undecan-9il)nonilamino)etil)benzo[d]tiaz ol-2(3H)-ona |
O~/
O .A J
* |
615,4 |
1,11 |
199 |
(R)-4-hidróxi-7-(1-hidróxi-2-
(9-(4-(2-fenoxiacetil)-1-oxa4,9-diazaespiro[5,5]undecan9il)nonilamino)etil)benzo[d]tiaz ol-2(3H)-ona |
O
Λ
o^cz^ |
641,4 |
1,15 |
200 |
(R)-4-hidróxi-7-(1-hidróxi-2(9-(4-(2-(5-metil-1H-pirazol-1il)acetil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9il)nonilamino)etil)benzo[d]tiaz ol-2(3H)-ona |
O^J
* |
629,4 |
0,96 |
201 |
(R)-7-(2-(9-(4-(2,5dimetiltiazol-4-carbonil)-1oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9il)nonilamino)-1-hidroxietil)-4hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)ona |
)^S
N Ϊ
O^\
* |
646,4 |
1,08 |
202 |
(R)-7-(2-(9-(4-(2,5dimetiltiofeno-3-carbonil)-1oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9il)nonilamino)-1-hidroxietil)-4hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)ona |
S
O^X
* |
645,4 |
1,13 |
Petição 870190058499, de 25/06/2019, pág. 535/650
530/638
Exemplo N° |
NOME |
O
*^R1 |
MWt+1 observado |
Tempo de retenção* (min) |
203 |
(R)-7-(2-(9-(4-(2-
(benzilóxi)acetil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9il)nonilamino)-1-hidroxietil)-4hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)ona |
Ό |
655,4 |
1,18 |
204 |
(R)-4-hidróxi-7-(1-hidróxi-2(9-(4-(2-(3-metil-1H-pirazol-1il)acetil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9il)nonilamino)etil)benzo[d]tiaz ol-2(3H)-ona |
O _
N |
629,4 |
1,04 |
205 |
(R)-4-hidróxi-7-(1-hidróxi-2-
(9-(4-(2-metiltiofeno-3carbonil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9il)nonilamino)etil)benzo[d]tiaz ol-2(3H)-ona |
/^S
O^X
* |
631,4 |
1,12 |
206 |
(R)-4-hidróxi-7-(1-hidróxi-2-
(9-(4-(3-fenoxipropanoil)-1oxa-4,9-
diazaespiro[5,5]undecan-9il)nonilamino)etil)benzo[d]tiaz ol-2(3H)-ona |
*^o o^X^i |
655,4 |
1,22 |
207 |
(R)-4-hidróxi-7-(1-hidróxi-2(9-(4-(3-(tiofen-2-il)propanoil)1-oxa-4,9-
diazaespiro[5,5]undecan-9il)nonilamino)etil)benzo[d]tiaz ol-2(3H)-ona |
VxwD
* |
645,4 |
1,19 |
208 |
(R)-4-hidróxi-7-(1-hidróxi-2-
(9-(4-(2-(3-metilisoxazol-5il)acetil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9il)nonilamino)etil)benzo[d]tiaz ol-2(3H)-ona |
0 O-N |
630,4 |
1,05 |
Petição 870190058499, de 25/06/2019, pág. 536/650
531/638
Exemplo N° |
NOME |
O
*^R1 |
MWt+1 observado |
Tempo de retenção* (min) |
209 |
(R)-7-(2-(9-(4-(benzofuran-5carbonil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9il)nonilamino)-1-hidroxietil)-4hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)ona |
O
*q
O |
651,4 |
1,14 |
210 |
(R)-4-hidróxi-7-(1-hidróxi-2-
(9-(4-(2-(2-metiltiazol-4il)acetil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9il)nonilamino)etil)benzo[d]tiaz ol-2(3H)-ona |
O Q
/-X |
646,4 |
1,05 |
211 |
(R)-7-(2-(9-(4-(2-(2,4-
dimetiltiazol-5-il)acetil)-1-oxa4,9-diazaespiro[5,5]undecan9-il)nonilamino)-1-hidroxietil)4-hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)ona |
O^J^
* |
660,4 |
0,97 |
212 |
(R)-7-(2-(9-(4-(2-clorotiofeno3-carbonil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9-
il)nonilamino)-1-hidroxietil)-4hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)ona |
^'S
J^Cl O^\
* |
651,3 |
1,14 |
213 |
(R)-4-hidróxi-7-(1-hidróxi-2-
(9-(4-(4-metiltiofeno-2carbonil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9il)nonilamino)etil)benzo[d]tiaz ol-2(3H)-ona |
OxJTl
/^Sz
* |
631,4 |
1,15 |
214 |
(R)-4-hidróxi-7-(1-hidróxi-2-
(9-(4-(5-isopropilisoxazol-3carbonil)-1-oxa-4,9-
diazaespiro[5,5]undecan-9il)nonilamino)etil)benzo[d]tiaz ol-2(3H)-ona |
O 1
* N-O |
644,4 |
1,3 |
Petição 870190058499, de 25/06/2019, pág. 537/650
532/638
Exemplo N° |
NOME |
O
*^R1 |
MWt+1 observado |
Tempo de retenção* (min) |
215 |
(R)-4-hidróxi-7-(1-hidróxi-2(9-(4-(2-metilbenzo[d]tiazol-5carbonil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9il)nonilamino)etil)benzo[d]tiaz ol-2(3H)-ona |
O
* .
N^ |
682,4 |
1,13 |
216 |
(R)-7-(2-(9-(4-(2-tercbutiltiazol-4-carbonil)-1-oxa4,9-diazaespiro[5,5]undecan9-il)nonilamino)-1-hidroxietil)4-hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)ona |
S Λ
^^N |
674,4 |
1,26 |
217 |
(R)-4-hidróxi-7-(1-hidróxi-2(9-(4-(2-(trifluorometil)tiazol-4carbonil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9il)nonilamino)etil)benzo[d]tiaz ol-2(3H)-ona |
F F
S—Ó^F ^^N |
686,3 |
1,18 |
218 |
(R)-7-(2-(9-(4-(2ciclopropiltiazol-4-carbonil)-1oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9il)nonilamino)-1-hidroxietil)-4hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)ona |
r-S
* |
658,4 |
1,16 |
219 |
(R)-4-hidróxi-7-(1-hidróxi-2-
(9-(4-(2-propiltiazol-4carbonil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9il)nonilamino)etil)benzo[d]tiaz ol-2(3H)-ona |
/7“S
/Ή
* |
660,4 |
1,16 |
220 |
(R)-7-(2-(9-(4-(2ciclobutiltiazol-4-carbonil)-1oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9il)nonilamino)-1-hidroxietil)-4hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)ona |
.S Zx
oVn
* |
672,4 |
1,17 |
Petição 870190058499, de 25/06/2019, pág. 538/650
533/638
Exemplo N° |
NOME |
O
X^R1 |
MWt+1 observado |
Tempo de retenção* (min) |
221 |
(R)-7-(2-(9-(4-(2ciclopentiltiazol-4-carbonil)-1oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9il)nonilamino)-1-hidroxietil)-4hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)ona |
oZ
* |
686,4 |
1,23 |
222 |
(R)-7-(2-(9-(4-(4,5dimetiltiofeno-2-carbonil)-1oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9il)nonilamino)-1-hidroxietil)-4hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)ona |
ovUtX
* |
645,4 |
1,29 |
* Condições de HPLC analíticas: coluna Sunfire® C18
2,5pm 4,6x30mm (Waters Corporation), MeCN/0,1% de TFA aquoso, gradiente de 5-95% de MeCN).
Tempo (min) |
% de aquoso |
% de MeCN |
Fluxo (ml/min) |
0,3 |
95 |
5 |
2,5 |
2,7 |
5 |
95 |
2,5 |
2,8 |
5 |
95 |
2,5 |
2,9 |
95 |
5 |
2,5 |
Exemplos 223-263
R1
OH
a) 2-hidróxi-2-(4-hidróxi-2-oxo-2,3-di-hidrobenzo[d]tiazol-7-il)etil(4(2-(4-(2,2,2-trifluoroacetil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)etóxi) benzil)carbamato de (Rj-terc-butila
Petição 870190058499, de 25/06/2019, pág. 539/650
534/638
[001483]
Uma solução de metanossulfonato de (R)-2-(4-((terc butoxicarbonil(2-hidróxi-2-(4-hidróxi-2-oxo-2,3-di-hidrobenzo[d]tiazol-7il)etil)amino)metil)fenóxi)etila (exemplo 108, etapa c) (2,20g) em MeCN (8,5mL) foi adicionado gota a gota a uma solução de trifluoroacetato de 2,2,2-trifluoro-1-(1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4-il)etanona (exemplo 12, etapa d) (1,18g) e trietilamina (0,81mL) em MeCN (8,5mL) em TA sob argônio. A mistura resultante foi agitada a 60°C sob argônio durante 25 horas. Após resfriamento para TA o solvente foi removido em vácuo. O resíduo marrom foi apreendido em DCM (35mL), lavado com água (2 x 35mL), secado sobre sulfato de sódio, filtrado e evaporado em vácuo. O sólido amarelo foi purificado por cromatografia de sílica-gel eluindo com 0-10% de MeOH/DCM para fornecer o composto do subtítulo como um sólido amarelo. Produção 729mg.
[001484] 1H RMN (400 MHz, CDCh): δ 6,88-6,50 (m, 6H), 4,86-4,64 (br s, 1H), 4,34-4,15 (br s, 3H), 4,11-3,87 (m, 2H), 3,70-3,01 (m, 11H), 2,95-2,73 (br s, 2H), 2,04-1,81 (m, 2H), 1,56-1,37 (m, 11H) mais 3 trocáveis não observados.
b) 4-(2-(1 -oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)etóxi)benzil(2- hidróxi-2-(4-hidróxi-2-oxo-2,3-di-hidrobenzo[d]tiazol-7-il)etil) carbamato de (Rj-terc-butila
Petição 870190058499, de 25/06/2019, pág. 540/650
535/638 [001485]
Uma solução de carbonato de potássio (240mg) em água (35mL) foi adicionada à solução de 2-hidróxi-2-(4-hidróxi-2-oxo-2,3-di hidrobenzo[d]tiazol-7-il)etil(4-(2-(4-(2,2,2-trifluoroacetil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9-il)etóxi)benzil)carbamato de (R)-terc-butila (exemplos 223-263, etapa a) (725mg) em MeOH (35mL). A mistura resultante foi agitada à TA durante 5 horas. Metanol foi removido por evaporação sob uma corrente de nitrogênio mantendo a mistura reacional a 25°C. Água (20 mL) e salmoura (30 mL) foram adicionadas e a mistura foi extraída com acetato de etila (7 x 30 mL). As camadas orgânicas combinadas foram secadas sobre sulfato de sódio, filtradas e evaporadas em vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de sílica-gel eluindo com 0-20% de (NH3 a 2M em MeOH)/DCM para fornecer o composto do subtítulo como um sólido branco. Produção 385 mg.
[001486] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO): δ 7,06-6,97 (m, 2H), 6,83 (d, J = 8,6Hz, 2H), 6,78-6,62 (m, 2H), 5,64 (s, 1H), 4,68 (br s, 1H), 4,24 (s, 2H), 3,98 (t, J = 5,6Hz, 2H), 3,50 (t, 2H), 3,24-3,02 (m, 2H), 2,68-2,60 (m, 4H), 2,57 (s, 2H), 2,52-2,47 (m, 2H), 2,32 (td, J = 11,9, 3,0 Hz, 2H),
1,76 (d, J = 13,0 Hz, 2H), 1,43 (td, J = 10,8, 3,7 Hz, 2H), 1,31 (s, 3H),
1,22 (s, 6H) mais 3 trocáveis não observados.
c) Química Paralela - Preparação de Exemplos 223-263
Petição 870190058499, de 25/06/2019, pág. 541/650
536/638
R1
OH [001487] Uma solução de 4-(2-(1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9il)etóxi)benzil(2-hidróxi-2-(4-hidróxi-2-oxo-2,3-di-hidrobenzo[d]tiazol-7il)etil)carbamato de (R)-terc-butila (exemplo 223-263, etapa b)(297 mg) e trietilamina (0,20 mL) em NMP (1,24 mL) foi dispensada como alíquotas de 30 uL de volume total. Para cada alíquota foi adicionada uma solução do apropriado ácido (0,01 mmol) em NMP (80 uL) seguida por uma solução de HATU (4,0 mg) em NMP (30 uL). A mistura reacional foi deixada descansar em TA durante a noite. Acetonitrila (800 uL) foi adicionado e a solução passada através de resina ‘Tosic-65’ (350 mg). A resina foi lavada com acetonitrila (800 uL) e as lavagens combinadas coletadas e novamente passadas através da resina ‘Tosic-65’. A resina foi em seguida lavada com acetonitrila (3 mL). Amônia (3,5M em metanol, 2,4 mL) foi passada através da resina e as lavagens resultantes evaporadas sob uma corrente de gás de nitrogênio. O resíduo foi dissolvido em ácido fórmico (250 uL) e a mistura deixada descansar em temperatura ambiente durante a noite. Acetonitrila (600 uL) foi adicionado e a solução passada através de resina ‘Tosic-65’ (350 mg). A resina foi lavada com acetonitrila (800 uL) e as lavagens combinadas coletadas e novamente passadas através da resina ‘Tosic-65’. A resina foi em seguida lavada com acetonitrila (3 mL). Amônia (3,5M em metanol, 2,4 mL) foi passada através da resina e as lavagens resultantes evaporadas sob uma corrente de gás de nitrogênio. DMSO (360 uL) foi adicionado ao resíduo e a solução resultante passada através de uma coluna C18 preparativa ‘Sunfire’ (19 x 50 mm) usando uma eluição gradiente de foco de acetonitrila vs TFA a 0,1% aquoso para purificação. As frações contendo produto foram evaporadas para produzir os compostos títulos.
Petição 870190058499, de 25/06/2019, pág. 542/650
537/638
OH
Exemplo N° |
NOME |
O
AR1 |
MWt+1 observado |
Tempo de retenção* (min) |
223 |
(R)-7-(2-(4-(2-(4-benzoil-1-oxa-
4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9il)etóxi)benzilamino)-1hidroxietil)-4hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)ona |
O
AQ |
619,3 |
1,06 |
224 |
(R)-4-hidróxi-7-(1-hidróxi-2-(4(2-(4-(4-(tiofen-2-il)butanoil)-1oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9il)etóxi)benzilamino)etil)benzo[ d]tiazol-2(3H)-ona |
O
SX |
667,3 |
1,15 |
225 |
(R)-4-hidróxi-7-(1-hidróxi-2-(4-
(2-(4-(1-metil-1H-pirrol-2carbonil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9il)etóxi)benzilamino)etil)benzo[ d]tiazol-2(3H)-ona |
r N\
O^\
* |
622,3 |
1 |
226 |
(R)-4-hidróxi-7-(1-hidróxi-2-(4(2-(4-(2-(tiofen-2-il)acetil)-1oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9il)etóxi)benzilamino)etil)benzo[ d]tiazol-2(3H)-ona |
O
S |
639,3 |
1,01 |
227 |
(R)-4-hidróxi-7-(1-hidróxi-2-(4(2-(4-(2-fenilacetil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9il)etóxi)benzilamino)etil)benzo[ d]tiazol-2(3H)-ona |
|
633,3 |
1,04 |
Petição 870190058499, de 25/06/2019, pág. 543/650
538/638
Exemplo N° |
NOME |
O
A |
MWt+1 observado |
Tempo de retenção* (min) |
228 |
(R)-4-hidróxi-7-(1-hidróxi-2-(4-
(2-(4-(3-fenilpropanoil)-1-oxa4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9il)etóxi)benzilamino)etil)benzo[ d]tiazol-2(3H)-ona |
O
* 1 |
647,4 |
1,11 |
229 |
(R)-4-hidróxi-7-(1-hidróxi-2-(4(2-(4-(4-fenilbutanoil)-1-oxa4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9il)etóxi)benzilamino)etil)benzo[ d]tiazol-2(3H)-ona |
|
661,4 |
1,17 |
230 |
(R)-4-hidróxi-7-(1-hidróxi-2-(4(2-(4-(2-metil-2-fenilpropanoil)1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9il)etóxi)benzilamino)etil)benzo[ d]tiazol-2(3H)-ona |
Ο=(ΥΊ |
661,4 |
1,18 |
231 |
(R)-7-(2-(4-(2-(4-(5-
clorotiofeno-2-carbonil)-1-oxa4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9il)etóxi)benzilamino)-1hidroxietil)-4hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)ona |
o^jTL
y%^Cl
* |
659,2 |
1,1 |
232 |
(R)-4-hidróxi-7-(1-hidróxi-2-(4-
(2-(4-(3-metiltiofeno-2carbonil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9il)etóxi)benzilamino)etil)benzo[ d]tiazol-2(3H)-ona |
S X oX
* |
639,3 |
1,03 |
233 |
(R)-4-hidróxi-7-(1-hidróxi-2-(4(2-(4-(2-(tiofen-3-il)acetil)-1oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9il)etóxi)benzilamino)etil)benzo[ d]tiazol-2(3H)-ona |
O _ |
639,3 |
1 |
Petição 870190058499, de 25/06/2019, pág. 544/650
539/638
Exemplo N° |
NOME |
O
A |
MWt+1 observado |
Tempo de retenção* (min) |
234 |
(R)-4-hidróxi-7-(1-hidróxi-2-(4(2-(4-(3-metilfuran-2-carbonil)1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9il)etóxi)benzilamino)etil)benzo[ d]tiazol-2(3H)-ona |
o Z!
oA
* |
623,3 |
0,97 |
235 |
(R)-7-(2-(4-(2-(4(benzo[b]tiofeno-2-carbonil)-1oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9il)etóxi)benzilamino)-1hidroxietil)-4hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)ona |
*
O
/^Vs |
675,3 |
1,09 |
236 |
(R)-7-(2-(4-(2-(4-(4,5-
dimetilfuran-2-carbonil)-1-oxa4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9il)etóxi)benzilamino)-1hidroxietil)-4hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)ona |
o
* |
637,3 |
0,99 |
237 |
(R)-4-hidróxi-7-(1-hidróxi-2-(4-
(2-(4-(6-metilpicolinoil)-1-oxa4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9il)etóxi)benzilamino)etil)benzo[ d]tiazol-2(3H)-ona |
O
*^3 |
634,3 |
0,88 |
238 |
(R)-4-hidróxi-7-(1-hidróxi-2-(4(2-(4-(2-metilfuran-3-carbonil)1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9il)etóxi)benzilamino)etil)benzo[ d]tiazol-2(3H)-ona |
•/'Ό
θΑ
* |
623,3 |
0,91 |
239 |
(R)-4-hidróxi-7-(1-hidróxi-2-(4(2-(4-(5-metilfuran-2-carbonil)1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9il)etóxi)benzilamino)etil)benzo[ d]tiazol-2(3H)-ona |
0^ o^Ax?
* |
623,3 |
1,02 |
Petição 870190058499, de 25/06/2019, pág. 545/650
540/638
Exemplo N° |
NOME |
O
Ari |
MWt+1 observado |
Tempo de retenção* (min) |
240 |
(R)-4-hidróxi-7-(1-hidróxi-2-(4(2-(4-(2-fenoxiacetil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9il)etóxi)benzilamino)etil)benzo[ d]tiazol-2(3H)-ona |
O
A
O^x^X |
649,3 |
1,13 |
241 |
(R)-4-hidróxi-7-(1-hidróxi-2-(4(2-(4-(2-(5-metil-1H-pirazol-1il)acetil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9il)etóxi)benzilamino)etil)benzo[ d]tiazol-2(3H)-ona |
nQ
O ,N^
* |
637,4 |
0,96 |
242 |
(R)-7-(2-(4-(2-(4-(2,5dimetiltiazol-4-carbonil)-1-oxa4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9il)etóxi)benzilamino)-1hidroxietil)-4hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)ona |
N Ϊ
O^\
* |
654,3 |
0,92 |
243 |
(R)-7-(2-(4-(2-(4-(2,5dimetiltiofeno-3-carbonil)-1oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9il)etóxi)benzilamino)-1hidroxietil)-4hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)ona |
S
O^\
* |
653,3 |
1,11 |
244 |
(R)-7-(2-(4-(2-(4-(2-
(benzilóxi)acetil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9il)etóxi)benzilamino)-1hidroxietil)-4-
hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)ona |
^>O
Ό |
663,4 |
1,12 |
245 |
(R)-4-hidróxi-7-(1-hidróxi-2-(4(2-(4-(2-(3-metil-1H-pirazol-1il)acetil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9il)etóxi)benzilamino)etil)benzo[ d]tiazol-2(3H)-ona |
O _
N |
637,4 |
0,94 |
Petição 870190058499, de 25/06/2019, pág. 546/650
541/638
Exemplo N° |
NOME |
O
Ari |
MWt+1 observado |
Tempo de retenção* (min) |
246 |
(R)-4-hidróxi-7-(1-hidróxi-2-(4-
(2-(4-(2-metiltiofeno-3carbonil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9il)etóxi)benzilamino)etil)benzo[ d]tiazol-2(3H)-ona |
Z^S
O^\
* |
639,3 |
1,03 |
247 |
(R)-4-hidróxi-7-(1-hidróxi-2-(4-
(2-(4-(3-fenoxipropanoil)-1oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9il)etóxi)benzilamino)etil)benzo[ d]tiazol-2(3H)-ona |
*^O o^co |
663,3 |
1,11 |
248 |
(R)-4-hidróxi-7-(1-hidróxi-2-(4-
(2-(4-(3-(tiofen-2-il)propanoil)1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9il)etóxi)benzilamino)etil)benzo[ d]tiazol-2(3H)-ona |
Vvü ! s |
653,3 |
1,04 |
249 |
(R)-4-hidróxi-7-(1-hidróxi-2-(4-
(2-(4-(2-(3-metilisoxazol-5il)acetil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9il)etóxi)benzilamino)etil)benzo[ d]tiazol-2(3H)-ona |
O O-N |
638,3 |
0,9 |
250 |
(R)-7-(2-(4-(2-(4-(benzofuran-
5-carbonil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9il)etóxi)benzilamino)-1hidroxietil)-4hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)ona |
O
* 1Q
O |
659,3 |
1,08 |
251 |
(R)-4-hidróxi-7-(1-hidróxi-2-(4-
(2-(4-(2-(2-metiltiazol-4il)acetil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9il)etóxi)benzilamino)etil)benzo[ d]tiazol-2(3H)-ona |
O e |
654,3 |
0,88 |
Petição 870190058499, de 25/06/2019, pág. 547/650
542/638
Exemplo N° |
NOME |
O
A |
MWt+1 observado |
Tempo de retenção* (min) |
252 |
(R)-7-(2-(4-(2-(4-(2-(2,4dimetiltiazol-5-il)acetil)-1-oxa4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9il)etóxi)benzilamino)-1hidroxietil)-4hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)ona |
X^N s
* |
668,3 |
0,83 |
253 |
(R)-7-(2-(4-(2-(4-(2-
clorotiofeno-3-carbonil)-1-oxa4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9il)etóxi)benzilamino)-1hidroxietil)-4hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)ona |
j^ci
O^\
* |
659,2 |
0,96 |
254 |
(R)-4-hidróxi-7-(1-hidróxi-2-(4(2-(4-(4-metiltiofeno-2carbonil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9il)etóxi)benzilamino)etil)benzo[ d]tiazol-2(3H)-ona |
O\>O z^s7
* |
639,3 |
1,08 |
255 |
(R)-4-hidróxi-7-(1-hidróxi-2-(4(2-(4-(5-isopropilisoxazol-3carbonil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9il)etóxi)benzilamino)etil)benzo[ d]tiazol-2(3H)-ona |
O 1
* N-O |
652,4 |
1,02 |
256 |
(R)-4-hidróxi-7-(1-hidróxi-2-(4(2-(4-(2-metilbenzo[d]tiazol-5carbonil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9il)etóxi)benzilamino)etil)benzo[ d]tiazol-2(3H)-ona |
O
N^/ |
690,3 |
1,13 |
257 |
(R)-7-(2-(4-(2-(4-(2-tercbutiltiazol-4-carbonil)-1-oxa4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9il)etóxi)benzilamino)-1hidroxietil)-4hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)ona |
/S^
^^N |
682,4 |
1,23 |
Petição 870190058499, de 25/06/2019, pág. 548/650
543/638
Exemplo N° |
NOME |
O
Ari |
MWt+1 observado |
Tempo de retenção* (min) |
258 |
(R)-4-hidróxi-7-(1-hidróxi-2-(4(2-(4-(2-(trifluorometil)tiazol-4carbonil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9il)etóxi)benzilamino)etil)benzo[ d]tiazol-2(3H)-ona |
F F
S—ç^F X/N
V-* |
694,3 |
1,1 |
259 |
(R)-7-(2-(4-(2-(4-(2ciclopropiltiazol-4-carbonil)-1oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9il)etóxi)benzilamino)-1hidroxietil)-4hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)ona |
^S
^X^N
* |
666,3 |
1,05 |
260 |
(R)-4-hidróxi-7-(1-hidróxi-2-(4(2-(4-(2-propiltiazol-4-carbonil)1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9il)etóxi)benzilamino)etil)benzo[ d]tiazol-2(3H)-ona |
ítS o
/^N
* |
668,3 |
1,08 |
261 |
(R)-7-(2-(4-(2-(4-(2ciclobutiltiazol-4-carbonil)-1oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9il)etóxi)benzilamino)-1hidroxietil)-4hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)ona |
.S /X
O ,/ N
* |
680,3 |
1,12 |
262 |
(R)-7-(2-(4-(2-(4-(2ciclopentiltiazol-4-carbonil)-1oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9il)etóxi)benzilamino)-1hidroxietil)-4hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)ona |
O=/
* |
694,4 |
1,19 |
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544/638
Exemplo N° |
NOME |
O
Ari |
MWt+1 observado |
Tempo de retenção* (min) |
263 |
(R)-7-(2-(4-(2-(4-(4,5dimetiltiofeno-2-carbonil)-1oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9il)etóxi)benzilamino)-1hidroxietil)-4hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)ona |
OvJnC
* |
653,3 |
1,18 |
*Condições de HPLC analíticas: coluna Sunfire® C18 2,5pm
4,6x30mm (Waters Corporation), MeCN/0,1% de TFA aquoso, gradiente de
5-95% de MeCN,
Tempo (min) |
% de aquoso |
% de MeCN |
Fluxo (ml/min) |
0,3 |
95 |
5 |
2,5 |
2,7 |
5 |
95 |
2,5 |
2,8 |
5 |
95 |
2,5 |
2,9 |
95 |
5 |
2,5 |
trocável H não observado.
Exemplo 264
Ditrifluoroacetato de (R)-4-hidróxi-7-(1 -hidróxi-2-(2-(5-((4-(5 isopropiltiofeno-3-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9il)metil)tiofen-3-il)etilamino)etil)benzo[d]tiazol-2(3H)-ona
S >O
N
H
O
OH
a)
2,2,2-trifluoro-1-(9-((4-(2-hidroxietil)tiofen-2-il)metil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-4-il)etanona
O
HO [001488] TBAF (1M em THF, 2,96 mL) foi adicionado a uma solução
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545/638 agitada de 1 -(9-((4-(2-(terc-butildimetilsililóxi)etil)tiofen-2-il)metil)-1-oxa-
4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4-il)-2,2,2-trifluoroetanona (Exemplo 43, etapa a) (1,500 g, 2,96 mmols) em THF (5 mL). Após 1 hora, a solução foi evaporada para goma. Purificação por cromatografia de sílica-gel eluindo com acetato de etila:trietilamina, 10:1 forneceu o composto do subtítulo como uma goma. Produção 0,25g.
[001489] m/z 393 (M+H)+ (APCI+)
b) 2-(5-((4-(2,2,2-trifluoroacetil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan9-il)metil)tiofen-3-il)acetaldeído [001490] O composto do subtítulo foi preparado usando um método similar àquele descrito no exemplo 43 etapa (e) usando 2,2,2-trifluoro1 -(9-((4-(2-hidroxietil)tiofen-2-il)metil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-4-il)etanona (0,15g) (Exemplo 264, etapa a). Produção 0,15 g.
[001491] m/z 391 (M+H)+ (APCI+)
c) 2-hidróxi-2-(4-hidróxi-2-oxo-2,3-di-hidrobenzo[d]tiazol-7-il)etil(2(5-((4-(2,2,2-trifluoroacetil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9il)metil)tiofen-3-il)etil)carbamato de (R)-terc-butila
OH [001492] (R)-7-(2-Amino-1-hidroxietil)-4-hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)ona, HCl (1,020 g) (WO2007027134, exemplo 1, etapa d) foi adicionado a uma solução agitada de 2-(5-((4-(2,2,2-trifluoroacetil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil)tiofen-3-il)acetaldeído (Exemplo
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264, etapa b) (0,9 g) e ácido acético (0,198 mL) em MeOH (20 mL). Após 2 minutos, cianoboroidreto de sódio (0,290 g) foi adicionado. Após 2 horas, trietilamina (1,1 mL) e em seguida BOC-Anidrido (0,845 g) foram adicionados. Após 1 hora, mais BOC anidrido (0,4 g) e trietilamina (0,5 mL) foram adicionados. Após 2 horas, a solução foi concentrada para ~5 mL em seguida dividida entre acetato de etila e salmoura saturada. A camada de acetato de etila foi secada sobre sulfato de sódio, filtrada e evaporada em vácuo. Purificação por cromatografia de sílica-gel eluindo com metanol:diclorometano: amônia 880, 10:90:1 forneceu o composto do subtítulo como uma goma. Produção 0,32 g. [001493] m/z 701 (M+H)+ (APCI+)
d) 2-(5-(1 -oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-ilmetil)tiofen-3- il)etil(2-hidróxi-2-(4-hidróxi-2-oxo-2,3-di-hidrobenzo[d]tiazol-7il)etil)carbamato de (R)-terc-butila
NH
OH [001494] 35% de amônia aquosa (5mL) foram adicionados a 2hidróxi-2-(4-hidróxi-2-oxo-2,3-di-hidrobenzo[d]tiazol-7-il)etil(2-(5-((4(2,2,2-trifluoroacetil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9il)metil)tiofen-3-il)etil)carbamato de (R)-terc-butila (Exemplo 264, etapa c) (0,2 g). Após 40 minutos a 20 oC, a solução foi concentrada para ~1mL e a suspensão adicionada a um cartucho C18 (10 g) lavando com água (20 mL), em seguida eluindo o produto com metanol. As frações contendo produto foram combinadas e evaporadas em vácuo. O sólido resultante foi dissolvido em acetonitrila e evaporado em vácuo. Produção 0,11 g.
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547/638 [001495] m/z 605 (M+H)+ (APCI+)
e) Ditrifluoroacetato de (R)-4-hidróxi-7-(1-hidróxi-2-(2-(5-((4-(5- isopropiltiofeno-3-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9il)metil)tiofen-3-il)etilamino)etil)benzo[d]tiazol-2(3H)-ona
HO.
OH [001496] HATU (0,075 g)foi adicionado a uma solução agitada de 2(5-(1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-ilmetil)tiofen-3-il)etil(2-hidróxi2-(4-hidróxi-2-oxo-2,3-di-hidrobenzo[d]tiazol-7-il)etil)carbamato de (R)terc-butila (Exemplo 264, etapa d) (0,1 g), ácido 5-isopropiltiofeno-3carboxílico (0,028 g) e trietilamina (0,092 mL) em DMF (2 mL). Após 1 hora, a mistura reacional foi dividida entre água e acetato de etila. A camada de acetato de etila foi lavada com água (x 2) e salmoura, secada sobre sulfato de sódio, filtrada e evaporada em vácuo. A goma resultante foi dissolvida em ácido fórmico (2 mL). Após 16 horas, a solução foi evaporada em vácuo. Acetonitrila foi adicionado e a mistura evaporada em vácuo (x 2). Tolueno foi adicionado e a mistura evaporada em vácuo. A mistura foi dissolvida em metanol, filtrada e purificada por HPLC preparativa (Sunfire®, gradiente: 10-40% de acetonitrila em 0,2% de TFA aquoso). As frações contendo o produto puro foram combinadas e evaporadas em vácuo. Acetonitrila (200 mL) foi adicionado e a solução foi evaporada em vácuo para uma goma. Este processo foi repetido duas vezes. Dietil éter foi adicionado e o composto do título coletado como um sólido. Produção 0,05 g.
[001497] m/z 657 (M+H)+ (Multimodo+) [001498] 1H RMN (400 MHz, DMSO, 90oC) δ 11,29 (s, 1H), 7,49 (s,
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1H), 7,41 (s, 1H), 7,16 (s, 1H), 6,96 - 6,88 (m, 2H), 6,76 (d, J = 10,5 Hz, 1H), 4,94 - 4,86 (m, 1H), 4,47 (s, 2H), 3,71 - 3,62 (m, 2H), 3,57 -
3,48 (m, 2H), 3,48 - 3,40 (m, 2H), 3,31 - 2,91 (m, 11H), 2,11 - 1,95 (m, 2H), 1,80 - 1,63 (m, 2H), 1,28 (d, J = 6,6 Hz, 6H) mais 5 prótons trocáveis ausentes.
Exemplo 265
Ditrifluoroacetato de (R)-4-hidróxi-7-(1 -hidróxi-2-(3-((4-(2-(pentan-
3-il)tiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9il)metil)fenetilamino)etil)benzo[d]tiazol-2(3H)-ona
a) (9-(3-(2-Hidroxietil)benzil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4il)(2-(pentan-3-il)tiazol-4-il)metanona
[001499] O composto do subtítulo foi preparado usando um método similar àquele descrito no exemplo 82 etapa (b) usando ácido 2(pentan-3-il)tiazol-4-carboxílico (0,12 g) (Exemplo 71, etapa d). Produção 0,18 g.
[001500] 1H RMN (400 MHz, DMSO, 90oC) δ 7,92 (s, 1H), 7,18 (t, J =
7,6 Hz, 1H), 7,11 - 7,04 (m, 3H), 4,24 (dd, J = 5,3, 3,5 Hz, 1H), 3,72 -
3,57 (m, 8H), 3,41 (s, 2H), 2,71 (t, J = 6,9 Hz, 2H), 2,41 - 2,24 (m, 4H),
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1,82 - 1,66 (m, 4H), 1,59 - 1,47 (m, 2H), 0,86 (t, J = 7,3 Hz, 6H) + 3H obscurecidos por pico de água.
b) Ditrifluoroacetato de (R)-4-hidróxi-7-(1-hidróxi-2-(3-((4-(2(pentan-3-il)tiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9il)metil)fenetilamino)etil)benzo[d]tiazol-2(3H)-ona
HO
OH [001501] O composto do título foi preparado usando um método similar àquele descrito no exemplo 82 etapa (c) usando (9-(3-(2hidroxietil)benzil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4-il)(2-(pentan-3il)tiazol-4-il)metanona (0,18g) (Exemplo 265, etapa a). O aldeído cru foi dissolvido em DCM em vez de metanol. Produção 0,09 g.
[001502] m/z 680 (M+H)+ (Multimodo+) [001503] 1H RMN (400 MHz, DMSO, 90oC) δ 11,36 (s, 1H), 7,98 (s,
1H), 7,44 - 7,32 (m, 4H), 6,93 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 6,77 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 4,94 - 4,86 (m, 1H), 4,34 - 4,24 (m, 2H), 3,75 - 2,88 (m, 17H), 2,13 - 1,96 (m, 2H), 1,79 - 1,59 (m, 6H), 0,83 (t, J = 7,3 Hz, 6H) + 5 trocáveis não observados.
Exemplo 266 ácido ditrifluoroacético de (R)-7-(2-(3-((4-(benzofuran-5-carbonil)1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil)fenetilamino)-1hidroxietil)-4-hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona
Petição 870190058499, de 25/06/2019, pág. 555/650
550/638
a) Benzofuran-5-il(9-(3-(2-hidroxietil)benzil)-1-oxa-4,9-diazaespiro [5,5]undecan-4-il)metanona
[001504] O composto do subtítulo foi preparado usando um método similar àquele descrito no exemplo 82 etapa (b) usando ácido benzofuran-5-carboxílico (0,1 g). Produção 0,16 g.
[001505] 1H RMN (400 MHz, DMSO, 90oC) δ 7,99 (d, J = 2,1 Hz, 1H),
7,67 (s, 1H), 7,60 (d, J = 7,7 Hz, 1H), 7,31 (dd, J = 8,6, 1,7 Hz, 1H),
7,16 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 7,10 - 7,02 (m, 3H), 6,97 (t, J = 1,2 Hz, 1H),
4,24 (t, J = 5,3 Hz, 1H), 3,68 - 3,58 (m, 4H), 3,52 - 3,34 (m, 6H), 2,70 (t, J = 6,9 Hz, 2H), 2,38 - 2,27 (m, 4H), 1,81 - 1,68 (m, 2H), 1,55 - 1,42 (m, 2H)
b) ácido ditrifluoroacético de (R)-7-(2-(3-((4-(benzofuran-5carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil) fenetilamino)-1-hidroxietil)-4-hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona
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551/638
[001506] O composto do título foi preparado usando um método similar àquele descrito no exemplo 82 etapa (c) usando benzofuran-5-il(9(3-(2-hidroxietil)benzil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4il)metanona (0,15g) (Exemplo 266, etapa a). O aldeído cru foi dissolvido em DCM em vez de metanol. Produção 0,07 g.
[001507] m/z 643 (M+H)+ (Multimodo+) [001508] 1H RMN (300 MHz, DMSO, 90oC) δα 11,38 (s, 1H), 8,02 (d,
J = 2,1 Hz, 1H), 7,71 (s, 1H), 7,63 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,47 - 7,31 (m, 5H), 6,99 - 6,90 (m, 2H), 6,77 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 4,95 - 4,86 (m, 1H),
4,33 - 4,25 (m, 2H), 3,72 - 2,94 (m, 16H), 2,14 - 1,98 (m, 2H), 1,77 -
1,53 (m, 2H) + 5 trocáveis não observados.
Exemplo 267
Ditrifluoroacetato de (R)-4-hidróxi-7-(1 -hidróxi-2-(3-((4-(5propiltiofeno-3-carbonil)-1 -oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9il)metil)fenetilamino)etil)benzo[d]tiazol-2(3H)-ona
a) (9-(3-(2-Hidroxietil)benzil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4Petição 870190058499, de 25/06/2019, pág. 557/650
552/638 il)(5-propiltiofen-3-il)metanona
[001509] O composto do subtítulo foi preparado usando um método similar àquele descrito no exemplo 82 etapa (b) usando ácido 5propiltiofeno-3-carboxílico (0,1 g). Produção 0,15 g.
[001510] 1H RMN (400 MHz, DMSO, 90oC) δ 7,44 (d, J = 1,3 Hz, 1H),
7,18 (t, J = 7,4 Hz, 1H), 7,11 - 7,04 (m, 3H), 6,87 (d, J = 1,3 Hz, 1H),
4.24 (t, J = 5,1 Hz, 1H), 3,67 - 3,59 (m, 4H), 3,51 - 3,47 (m, 2H), 3,40 (s, 4H), 2,77 (dd, J = 14,7, 0,9 Hz, 2H), 2,71 (t, J = 7,0 Hz, 2H), 2,40 -
2.25 (m, 4H), 1,74 - 1,59 (m, 4H), 1,55 - 1,45 (m, 2H), 0,94 (t, J = 7,3
Hz, 3H).
b) Ditrifluoroacetato de (R)-4-hidróxi-7-(1-hidróxi-2-(3-((4-(5propiltiofeno-3-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9il)metil)fenetilamino)etil)benzo[d]tiazol-2(3H)-ona
hok/ k/' N
I H
OH [001511] O composto do título foi preparado usando um método similar àquele descrito no exemplo 82 etapa (c) usando (9-(3-(2hidroxietil)benzil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4-il)(5propiltiofen-3-il)metanona(0,15 g)(Exemplo 267, etapa a). O aldeído cru foi dissolvido em DCM em vez de metanol. Produção 0,9 g.
[001512] m/z 651 (M+H)+ (Multimodo+)
Petição 870190058499, de 25/06/2019, pág. 558/650
553/638 [001513] 1H RMN (300 MHz, DMSO, 90oC) δα 11,38 (s, 1H), 7,51 7,32 (m, 5H), 6,96 - 6,87 (m, 2H), 6,77 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 4,94 - 4,87 (m, 1H), 4,35 - 4,25 (m, 2H), 3,63 - 2,93 (m, 16H), 2,76 (t, J = 7,3 Hz, 2H), 2,14 - 1,98 (m, 2H), 1,72 - 1,56 (m, 4H), 0,93 (t, J = 7,3 Hz, 3H) + 5 trocáveis não observados.
Exemplo 268
Ditrifluoroacetato de (R)-4-hidróxi-7-(1-hidróxi-2-(3-((4-(5isopropiltiofeno-2-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9il)metil)fenetilamino)etil)benzo[d]tiazol-2(3H)-ona
HO
OH
a) (9-(3-(2-Hidroxietil)benzil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4il)(5-isopropiltiofen-2-il)metanona
HO [001514] O composto do subtítulo foi preparado usando um método similar àquele descrito no exemplo 82 etapa (b) usando ácido 5isopropiltiofeno-2-carboxílico (0,1 g). Produção 0,18 g.
[001515] 1H RMN (400 MHz, DMSO, 90oC) δ 7,23 - 7,15 (m, 2H),
7,13 - 7,04 (m, 3H), 6,84 (d, J = 3,6 Hz, 1H), 4,24 (t, J = 4,7 Hz, 1H),
3,69 - 3,58 (m, 6H), 3,50 (s, 2H), 3,41 (s, 2H), 3,17 (septet, J = 6,8 Hz, 1H), 2,71 (t, J = 6,9 Hz, 2H), 2,39 - 2,30 (m, 4H), 1,75 - 1,67 (m, 2H),
1,56 - 1,47 (m, 2H), 1,29 (d, J = 6,7 Hz, 6H).
b) Ditrifluoroacetato de (R)-4-hidróxi-7-(1-hidróxi-2-(3-((4-(5isopropiltiofeno-2-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9Petição 870190058499, de 25/06/2019, pág. 559/650
554/638 il)metil)fenetilamino)etil)benzo[d]tiazol-2(3H)-ona
[001516] O composto do título foi preparado usando um método similar àquele descrito no exemplo 82 etapa (c) usando (9-(3-(2hidroxietil)benzil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4-il)(5isopropiltiofen-2-il)metanona (0,18g) (Exemplo 268, etapa a). O aldeído bruto foi dissolvido em DCM em vez de metanol. Produção 0,09 g. [001517] m/z 651 (M+H)+ (Multimodo+) [001518] 1H RMN (300 MHz, DMSO, 90oC) δ 11,37 (s, 1H), 7,45 -
7,33 (m, 4H), 7,24 (d, J = 3,1 Hz, 1H), 6,93 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 6,85 (d, J = 3,7 Hz, 1H), 6,77 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 4,96 - 4,86 (m, 1H), 4,36 -
4,26 (m, 2H), 3,75 - 3,63 (m, 4H), 3,56 - 3,48 (m, 2H), 3,36 - 2,94 (m, 11H), 2,13 - 1,96 (m, 2H), 1,81 - 1,62 (m, 2H), 1,28 (d, J = 6,9 Hz, 6H) + 5 trocáveis não observados.
Exemplo 269
Ditrifluoroacetato de (R)-7-(2-(2,3-difluoro-4-(2-(4-(2isopropiltiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9il)etóxi)fenetilamino)-1-hidroxietil)-4-hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)ona
[001519] O composto do título foi preparado usando um método simiPetição 870190058499, de 25/06/2019, pág. 560/650
555/638 lar àquele descrito no exemplo 82 etapa (c) usando (9-(2-(2,3-difluoro4-(2-hidroxietil)fenóxi)etil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4-il)(2isopropiltiazol-4-il)metanona (0,22 g)(Exemplo 77, etapa e). O aldeído cru foi dissolvido em DCM em vez de metanol. Produção 0,13 g. [001520] m/z 718 (M+H)+ (Multimodo+) [001521] 1H RMN (300 MHz, DMSO, 90oC) δ 11,36 (s, 1H), 7,98 (d,
J = 0,8 Hz, 1H), 7,15 - 7,00 (m, 2H), 6,93 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 6,77 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 4,93 - 4,86 (m, 1H), 4,46 - 4,38 (m, 2H), 3,74 - 2,94 (m, 19H), 2,15 - 1,97 (m, 2H), 1,87 - 1,69 (m, 2H), 1,35 (d, J = 6,7 Hz, 6H) + 5 trocáveis não observados.
Exemplo 270
Ditrifluoroacetato de (R)-4-hidróxi-7-(1-hidróxi-2-(5-((4-(2isopropiltiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9il)metil)-2-(trifluorometil)fenetilamino)etil)benzo[d]tiazol-2(3H)-ona
HO.
OH
a) 2-(5-(Bromometil)-2-(trifluorometil)fenil)etanol
HO
Br [001522] Peróxido de benzoíla (0,085 g) foi adicionado a uma suspensão de ácido 2-(5-metil-2-(trifluorometil)fenil)acético (1,12 g) e Nbromossuccinimida (1,101 g) em clorobenzeno (18 mL), e a mistura resultante foi aquecida a 100 °C sob nitrogênio durante 80 minutos, em seguida deixada resfriar. A mistura resultante foi diluída com acetato de etila, lavada três vezes com água, uma vez com salmoura, em se
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556/638 guida secada (MgSÜ4), filtrada e concentrada em vácuo para fornecer um óleo amarelo. O óleo foi dissolvido em tetra-hidrofurano (11 mL) e tratado com 2 molares de solução de complexo de borano-sulfeto de metila em THF (5,1 mL), porção a porção durante 2 minutos. A mistura resultante foi agitada em temperatura ambiente durante a noite, em seguida resfriada em gelo-água e extinta pela adição de metanol. A mistura efervescente foi removida do banho de resfriamento, agitada em temperatura ambiente durante 70 minutos, em seguida concentrada em vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia rápida em sílica eluída com 15% de acetato de etila em iso-hexano para fornecer o produto bruto como um óleo amarelo. Produção 0,919 g.
b) (9-(3-(2-Hidroxietil)-4-(trifluorometil)benzil)-1 -oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-4-il)(2-isopropiltiazol-4-il)metanona
HO [001523] O composto do subtítulo foi preparado usando um método similar àquele descrito no exemplo 6 etapa (b) usando uma solução de 2-(5-(bromometil)-2-(trifluorometil)fenil)etanol (0,38 g) (Exemplo 270 etapa a) em acetonitrila que foi adicionada gota a gota durante 30 minutos a trifluoroacetato de (2-isopropiltiazol-4-il)(1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-4-il)metanona (Exemplo 22 etapa b). A purificação foi por cromatografia de sílica-gel eluindo 5% de trietilamina em acetato de etila. Produção 0,32 g.
[001524] 1H RMN (400 MHz, DMSO, 90°C) δ 7,90 (s, 1H), 7,56 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,39 (s, 1H), 7,29 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 4,44 (t, J = 5,3 Hz, 1H), 3,71 - 3,56 (m, 6H), 3,50 (s, 2H), 3,31 (septet, J = 6,9 Hz, 1H), 2,90 (t, J = 6,9 Hz, 2H), 2,57 - 2,25 (m, 4H), 1,81 - 1,66 (m, 4H), 1,62 -
1,49 (m, 2H), 1,36 (d, J = 6,9 Hz, 6H).
c) 2-(5-((4-(2-isopropiltiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5] undecan-9-il)metil)-2-(trifluorometil)fenil)acetaldeído
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F F
N
-S
N [001525] O composto do subtítulo foi preparado usando um método similar àquele descrito no exemplo 16 etapa c) usando (9-(3-(2hidroxietil)-4-(trifluorometil)benzil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan4-il)(2-isopropiltiazol-4-il)metanona (0,32g) (Exemplo 270, etapa b). A mistura foi agitada durante 90 minutos após a adição do periodinano Dess-Martin. Produção 0,38 g.
d) Ditrifluoroacetato de (R)-4-hidróxi-7-(1-hidróxi-2-(5-((4-(2isopropiltiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9il)metil)-2-(trifluorometil)fenetilamino)etil)benzo[d]tiazol-2(3H)-ona
HO
OH [001526] O composto do título foi preparado usando um método similar àquele descrito no exemplo 18 etapa g) usando uma solução de 2(5-((4-(2-isopropiltiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan9-il)metil)-2-(trifluorometil)fenil)acetaldeído (0,3g) (Exemplo 270, etapa
c) em metanol (3 mL). Após a adição de cianoboroidreto de sódio, a mistura foi agitada em temperatura ambiente durante 3,75 horas. A solução foi concentrada para um volume de ~ 3 mL, diluída com THF e lavada com uma mistura de salmoura e bicarbonato de sódio aquoso saturado. A fase orgânica foi secada sobre sulfato de magnésio anidroso e concentrada em vácuo. O resíduo foi coevaporado duas vezes de acetonitrila, em seguida dissolvido em acetonitrila: água (1:1), filtrado e purificado por HPLC preparativa (Sunfire, gradiente: 5-50% de
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558/638 acetonitrila em 0,2% de TFA aquoso). As frações contendo produto foram combinadas e concentradas em vácuo e coevaporadas de acetonitrila três vezes para fornecer um resíduo incolor. O resíduo foi triturado com dietil éter para fornecer um sólido, que foi removido por filtração, lavado com dietil éter e secado em vácuo em temperatura ambiente para fornecer o produto como um sólido branco. Produção 0,115 g.
[001527] m/z 720 (M+H)+ (APCI+) [001528] 1H RMN (400 MHz, DMSO, 90°C) δα 7,93 (s, 1H), 7,77 (d,
J = 8,2 Hz, 1H), 7,61 - 7,53 (m, 2H), 6,94 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 6,77 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 4,91 (dd, J = 8,6, 4,7 Hz, 1H), 4,27 - 4,08 (m, 2H), 3,76 -
3,59 (m, 6H), 3,48 - 2,85 (m, 11H), 2,03 - 1,88 (m, 2H), 1,78 - 1,63 (m, 2H), 1,35 (d, J = 6,9 Hz, 6H). Seis prótons trocáveis não observados.
Exemplo 271
Ditrifluoroacetato de (R)-7-(2-(3-((2,2-Dimetil-4-(2-metiltiazol-4carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil) fenetilamino)-1-hidroxietil)-4-hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona
HO
OH
a) 1 -Benzil-4-((2-metilallilamino)metil)piperidin-4-ol
H [001529] Uma mistura de 6-benzil-1-oxa-6-azaespiro[2,5]octano (2 g) e HCl de 2-metilprop-2-en-1-amina (2 g) e base de Hunig (3,44 mL) em etanol (30 mL) foi aquecida a 70°C durante 18 horas. A mistura foi res
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559/638 friada para temperatura ambiente e o solvente evaporado sob pressão reduzida. O resíduo foi dividido entre DCM e salmoura, a camada aquosa foi novamente extraída com DCM fresco e os orgânicos combinados secados sobre sulfato de sódio, filtrados e o solvente evaporado sob pressão reduzida para fornecer o composto do subtítulo. Produção 2,70 g.
[001530] m/z 275 (M+H)+ (APCI+)
b) 9-benzil-2,2-dimetil-1 -oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecano-4- carboxilato de terc-butila [001531] Ácido sulfúrico concentrado (12 ml) foi adicionado a 1benzil-4-((2-metilallilamino)metil)piperidin-4-ol (Exemplo 271, etapa a) (2,2 g) e a mistura foi deixada descansar durante 2 horas em temperatura ambiente. A mistura reacional foi tratada com gelo/ água (100 mL) seguida por bicarbonato de sódio sólido, porção a porção, até a mistura tornar-se básica. Acetonitrila (50 mL) foi adicionado seguido por BOC-anidrido (1,925 g) e a mistura reacional agitada em temperatura ambiente durante 18 horas. A mistura reacional foi extraída com acetato de etila (x 2) e os orgânicos combinados foram secados sobre sulfato de sódio, filtrados e o solvente evaporado sob pressão reduzida. O produto bruto foi purificado por cromatografia de sílica rápida, eluindo com 1% de metanol em diclorometano mudando para 1% de metanol em diclorometano com 1% de trietilamina. Frações puras foram evaporadas até a secura para fornecer o composto do subtítulo. Produção 0,8 g.
[001532] m/z 375 (M+H)+ (APCI+)
c) 2,2-dimetil-1 -oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecano-4-carboxilato de
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560/638 terc-butila
[001533] Uma mistura de 9-benzil-2,2-dimetil-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5] undecano-4-carboxilato de terc-butila (Exemplo 271, etapa b) (0,8 g) dissolvida em etanol (50 mL) e 10% de paládio sobre carbono (0,5 g) foi tratada com formiato de amônio (0,8 g) e a mistura reacional aquecida ao refluxo durante 30 minutos. A mistura foi resfriada para temperatura ambiente e filtrada através de terra diatomácea. O solvente foi evaporado e o resíduo azeotropado com acetonitrila (x 2) para fornecer o composto do subtítulo. Produção 0,55 g.
[001534] 1H RMN (400 MHz, DMSO, 90oC) δ 3,25 (s, 2H), 3,19 (s, 2H), 2,84 - 2,76 (m, 2H), 2,59 - 2,50 (m, 2H), 1,51 - 1,42 (m, 4H), 1,41 (s, 9H), 1,13 (s, 6H). 1 trocável não observado.
d) 9-(3-(2-hidroxietil)benzil)-2,2-dimetil-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5] undecano-4-carboxilato de terc-butila
[001535] 2-(3-(Bromometil)fenil)etanol (0,416 g) foi adicionado porção a porção durante 1 hora a uma solução de 2,2-dimetil-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecano-4-carboxilato de terc-butila (Exemplo 271, etapa c) (0,55 g) e trietilamina (0,809 mL) em acetonitrila (20 mL). A mistura foi agitada durante 2 horas a 20 °C. O solvente foi evaporado sob pressão reduzida e o resíduo dividido entre solução de bicarbonato de sódio saturada e DCM, a camada orgânica foi secada sobre sulfato de sódio, filtrada e o solvente evaporado sob pressão reduzida. O
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561/638 produto bruto foi purificado por cromatografia de sílica rápida, eluindo com 2% de metanol em diclorometano com 1% de trietilamina para fornecer o composto do subtítulo. Produção 0,78 g.
[001536] 1H RMN (400 MHz, DMSO, 90 oC) δ 7,21 - 7,04 (m, 4H), 4,24 (t, J = 5,5 Hz, 1H), 3,66 - 3,59 (m, 2H), 3,43 (s, 2H), 3,25 (s, 2H),
3,19 (s, 2H), 3,00 (s, 2H), 2,71 (t, J = 7,0 Hz, 2H), 2,32 - 2,24 (m, 2H),
1,64 - 1,50 (m, 4H), 1,40 (s, 9H), 1,13 (s, 6H).
e) 2-(3-((2,2-Dimetil-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil) fenil)etanol
OH [001537] Ácido trifluoroacético (5 mL) foi adicionado à solução de 9(3-(2-hidroxietil)benzil)-2,2-dimetil-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecano4-carboxilato de terc-butila (Exemplo 271, etapa d) (0,78 g) em DCM (20 mL) e a mistura reacional deixada descansar durante 30 minutos a 20 °C. Tolueno (40 mL) foi adicionado e os solventes evaporados sob pressão reduzida, o resíduo foi azeotropado com acetonitrila (x 2). O resíduo foi dissolvido em água (30 mL) e lavado com acetato de etila, a camada aquosa foi basificada pela adição de carbonato de sódio sólido e agitada durante 30 minutos a 20 °C. A mistura aquosa foi em seguida extraída com DCM (x 6), as camadas de DCM combinadas foram secadas sobre sulfato de sódio, filtradas e o solvente evaporado sob pressão reduzida para fornecer o composto do subtítulo. Produção 0,4 g.
[001538] m/z 319 (M+H)+ (APCI+)
f) (9-(3-(2-Hidroxietil)benzil)-2,2-dimetil-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5] undecan-4-il)(2-metiltiazol-4-il)metanona
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[001539] O composto do subtítulo foi preparado usando um método similar àquele descrito no exemplo 22 etapa (a) usando 2-(3-((2,2dimetil-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil)fenil)etanol (0,2g) (Exemplo 271, etapa e) e ácido 2-metiltiazol-4-carboxílico (0,09 g). A mistura reacional foi agitada durante 18 horas, e o solvente de eluição para a cromatografia foi de 2% de metanol em diclorometano com 1% de trietilamina. Produção 0,16 g.
[001540] m/z 444,1 (M+H)+ (APCI+)
g) Ditrifluoroacetato de (R)-7-(2-(3-((2,2-Dimetil-4-(2-metiltiazol-4carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil) fenetilamino)-1-hidroxietil)-4-hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona
O [001541] O composto do título foi preparado usando um método similar àquele descrito no exemplo 22 etapa (d) usando (9-(3-(2hidroxietil)benzil)-2,2-dimetil-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4-il)(2metiltiazol-4-il)metanona (0,15g) (Exemplo 271, etapa f). A mistura foi agitada durante 3 horas após a adição do cianoboroidreto de sódio, e 2-metiltetra-hidrofurano foi adicionado no lugar de THF. Produção 0,12g.
[001542] m/z 652 (M+H)+ (Multimodo+) [001543] 1H RMN (400 MHz, DMSO, 90 oC) δ 11,27 (s, 1H), 7,93 (s,
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1H), 7,43 - 7,32 (m, 4H), 6,93 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 6,77 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 4,94 - 4,89 (m, 1H), 4,29 (s, 2H), 3,68 (s, 2H), 3,62 (s, 2H), 3,28 -
3,10 (m, 8H), 3,06 - 2,97 (m, 2H), 2,67 (s, 3H), 1,95 - 1,73 (m, 4H),
1,19 (s, 6H). 5 trocáveis não observados.
Exemplo 272
Ditrifluoroacetato de (R)-5-(2-(3-((4-(5-etiltiofeno-3-carbonil)-2,2dimetil-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil)fenetilamino)1 -hidroxietil)-8-hidroxiquinolin-2(1 H)-ona
OH
a) (5-etiltiofen-3-il)(9-(3-(2-hidroxietil)benzil)-2,2-dimetil-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-4-il)metanona
[001544] O composto do subtítulo foi preparado usando um método similar àquele descrito no exemplo 271 etapa (f) usando 2-(3-((2,2dimetil-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil)fenil)etanol (0,2g) (Exemplo 271, etapa e) e ácido 5-etiltiofeno-3-carboxílico. Produção 0,22 g.
[001545] m/z 457,1 (M+H)+ (APCI+)
b) Ditrifluoroacetato de (R)-5-(2-(3-((4-(5-etiltiofeno-3-carbonil)-2,2dimetil-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil)fenetilamino)1 -hidroxietil)-8-hidroxiquinolin-2(1 H)-ona
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[001546] O composto do título foi preparado usando um método similar àquele descrito no exemplo 23 usando (5-etiltiofen-3-il)(9-(3-(2hidroxietil)benzil)-2,2-dimetil-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4il)metanona (0,22g) (Exemplo 272, etapa a). A mistura foi agitada durante 3 horas após a adição de triacetoxiboroidreto de sódio na etapa a). Produção 0,085 g.
[001547] m/z 659 (M+H)+ (Multimodo+) [001548] 1H RMN (400 MHz, DMSO, 90 oC) δ 8,16 (d, J = 10,0 Hz,
1H), 7,48 (d, J = 1,5 Hz, 1H), 7,44 - 7,29 (m, 4H), 7,13 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 6,99 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 6,91 (d, J = 1,0 Hz, 1H), 6,55 (d, J = 10,0 Hz, 1H), 5,37 - 5,32 (m, 1H), 4,24 (s, 2H), 3,52 - 3,40 (m, 4H), 3,28 (t, J = 8,3 Hz, 2H), 3,20 - 2,99 (m, 8H), 2,81 (q, J = 7,4 Hz, 2H), 1,93 - 1,65 (m, 4H), 1,25 (t, J = 7,4 Hz, 3H), 1,18 (s, 6H). 6 trocáveis não observados.
Exemplo 273
Ditrifluoroacetato de (R)-8-hidróxi-5-(1-hidróxi-2-(5-((4-(2isopropiltiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9il)metil)-2-(trifluorometil)fenetilamino)etil)quinolin-2(1H)-ona [001549] Uma
de
OH solução (R)-5-(2-amino-1-(tercPetição 870190058499, de 25/06/2019, pág. 570/650
565/638 butildimetilsililóxi)etil)-8-hidroxiquinolin-2(1H)-ona (0,15 g) (WO2004106333) em metanol (2 mL) foi tratada com ácido acético (0,021 mL) e agitada durante 10 minutos. Uma solução de 2-(5-((4-(2isopropiltiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5] undecan-9il)metil)-2-(trifluorometil)fenil)acetaldeído (Exemplo 270, etapa c) (0,190 g) em metanol (3 mL) foi em seguida adicionada, e a mistura resultante foi agitada em temperatura ambiente durante 10 minutos, antes do resfriamento em gelo-água e tratamento com cianoboroidreto de sódio (0,038 g). O banho de resfriamento foi removido e a mistura foi agitada em temperatura ambiente durante 2,75 horas. A solução foi concentrada para um volume de ~ 3 mL, diluída com THF (20 mL) e lavada com uma mistura de salmoura (10 mL) e bicarbonato de sódio aquoso saturado (1 mL). A fase orgânica foi secada sobre sulfato de magnésio anidroso e concentrada em vácuo. O resíduo foi coevaporado duas vezes de acetonitrila, parcialmente dissolvido em THF (10 mL), tratado com tri-hidrofluoreto de trietilamina (0,12 mL) e agitado em temperatura ambiente durante a noite. A mistura foi concentrada em vácuo e o resíduo dissolvido em acetonitrila: água (3:2, 10 mL), filtrado e purificado por HPLC preparativa (Sunfire, gradiente: 5-50% de acetonitrila em 0,2% de TFA aquoso). Frações contendo produto foram concentradas em vácuo e coevaporadas de acetonitrila três vezes para fornecer um resíduo incolor. O resíduo foi triturado com dietil éter para fornecer um sólido, que foi coletado por filtração, lavado com dietil éter e secado em vácuo em temperatura ambiente para fornecer o composto do título como um sólido branco. Produção 0,133 g. [001550] m/z 714 (M+H)+ (APCI+) [001551] 1H RMN (400 MHz, DMSO, 90 °C) δ 8,17 (d, J = 10,0 Hz, 1H), 7,93 (s, 1H), 7,77 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,62 - 7,53 (m, 2H), 7,14 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,00 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 6,55 (d, J = 10,0 Hz, 1H), 5,34 (dd, J = 9,1, 4,0 Hz, 1H), 4,29 - 4,10 (m, 2H), 3,76 - 3,59 (m, 6H), 3,49
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- 2,87 (m, 11H), 2,05 - 1,87 (m, 2H), 1,80 - 1,62 (m, 2H), 1,34 (d, J = 6,9 Hz, 6H). Seis prótons trocáveis não observados.
Exemplo 274
Ditrifluoroacetato de (R)-8-hidróxi-5-(1 -hidróxi-2-(3-((4-(2-(pentan-
3-il)tiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9il)metil)fenetilamino)etil)quinolin-2(1H)-ona
HO,
OH
a) 2-(3-((4-(2-(pentan-3-il)tiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro [5,5]undecan-9-il)metil)fenil)acetaldeído [001552] O composto do subtítulo foi preparado usando um método similar àquele descrito no exemplo 16 etapa c) usando (9-(3-(2hidroxietil)benzil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4-il)(2-(pentan-3il)tiazol-4-il)metanona (0,16g) (Exemplo 265, etapa a). Produção 0,24 g.
[001553] m/z 470 (M+H)+ (APCI+)
b) Ditrifluoroacetato de (R)-8-hidróxi-5-(1-hidróxi-2-(3-((4-(2(pentan-3-il)tiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9il)metil)fenetilamino)etil)quinolin-2(1H)-ona
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[001554] O composto do título foi preparado usando um método similar àquele descrito no exemplo 273 usando 2-(3-((4-(2-(pentan-3il)tiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9il)metil)fenil)acetaldeído (Exemplo 274, etapa a). Produção 0,097 g.
[001555] m/z 674 (M+H)+ (APCI+) [001556] 1H RMN (400 MHz, DMSO, 90 °C) δ 8,15 (d, J = 10,0 Hz,
1H), 7,95 (s, 1H), 7,47 - 7,28 (m, 4H), 7,13 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 6,99 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 6,55 (d, J = 9,7 Hz, 1H), 5,39 - 5,28 (m, 1H), 4,33 -
4,11 (m, 2H), 3,79 - 3,56 (m, 6H), 3,50 - 2,84 (m, 11H), 2,11 - 1,90 (m, 2H), 1,83 - 1,58 (m, 6H), 0,84 (t, J = 7,3 Hz, 6H). Seis prótons trocáveis não observados.
Exemplo 275
Ditrifluoroacetato de (R)-8-hidróxi-5-(1 -hidróxi-2-(1 -(3-((4-(5isopropiltiofeno-3-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9il)metil)fenil)-2-metilpropan-2-ilamino)etil)quinolin-2(1H)-ona
OH
a) ácido 3-(2-(terc-Butoxicarbonilamino)-2-metilpropil)benzoico
[001557] O composto do subtítulo foi preparado usando um método similar àquele descrito no exemplo 53, etapa b) usando 3-(2-(terc
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568/638 butoxicarbonilamino)-2-metilpropil)benzoato de metila. A mistura reacional foi agitada a 20 °C durante 18 horas, em seguida a 40 °C durante 10 horas. A mistura foi dividida entre água e dietil éter, e a trituração final não foi requerida.
[001558] m/z 292 (M-H)+ (APCI+)
b) 1-(3-(hidroximetil)fenil)-2-metilpropan-2-ilcarbamato de tercbutila
OH [001559] O composto do subtítulo foi preparado usando um método similar àquele descrito no exemplo 16, etapa a) usando ácido 3-(2(terc-butoxicarbonilamino)-2-metilpropil)benzoico (2,68g). A mistura reacional foi resfriada em um banho de gelo durante a adição, em seguida agitada a 20 °C durante 2 horas. Produção 2,5 g.
[001560] 1H RMN (400 MHz, DMSO) 8 7,23 - 7,13 (m, 2H), 7,06 (s,
1H), 6,98 (d, J = 7,4 Hz, 1H), 6,23 (s, 1H), 5,09 (t, J = 5,6 Hz, 1H), 4,45 (d, J = 5,6 Hz, 2H), 2,89 (s, 2H), 1,42 (s, 9H), 1,14 (s, 6H).
c) (3-(2-Amino-2-metilpropil)fenil)metanol
OH [001561] Ácido trifluoroacético (5 mL) foi adicionado à solução de 1(3-(hidroximetil)fenil)-2-metilpropan-2-ilcarbamato de terc-butila (Exemplo 275, etapa b) (0,7 g) em DCM (20 mL) e a solução resultante deixada descansar a 20 °C durante 30 minutos. Tolueno (40 mL) foi adicionado e os solventes evaporados sob pressão reduzida. O resíduo foi dividido entre DCM e hidróxido de sódio aquoso a 1M, e a camada aquosa foi extraída com DCM (x 2). Os orgânicos combinados foram secados sobre sulfato de sódio, filtrados e o solvente removido sob pressão reduzida para fornecer o composto do subtítulo. Produção 0,440 g.
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569/638 [001562] m/z 180 (M+H)+ (APCI+) [001563] 1H RMN (400 MHz, DMSO) δ 7,23 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 7,19 -
7,12 (m, 2H), 7,04 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 4,47 (s, 2H), 2,58 (s, 2H), 0,99 (s, 6H). 3 trocáveis não observados.
d) (R)-8-(benzilóxi)-5-(1 -(terc-butildimetilsililóxi)-2-(1 -(3- (hidroxi- metil)fenil)-2-metilpropan-2-ilamino)etil)quinolin-2(1H)-ona
OH
HN
N O H [001564] Uma mistura de (R)-8-(benzilóxi)-5-(2-bromo-1-(tercbutildimetilsililóxi)etil)quinolin-2(1H)-ona (0,518 g) e (3-(2-amino-2metilpropil)fenil)metanol (0,19 g) (exemplo 275, etapa c) e iodeto de sódio (0,159 g) e base de Hunig (0,555 mL) em acetonitrila (3 mL) foi aquecida ao refluxo sob nitrogênio durante 2 dias. Mais (3-(2-amino-2metilpropil)fenil)metanol (0,19 g,) e base de Hunig (0,185 mL) foram adicionados e aquecimento ao refluxo continuado durante 1 dia. A mistura reacional foi resfriada para temperatura ambiente e dividida entre acetato de etila e salmoura, a camada orgânica foi secada sobre sulfato de sódio, filtrada e o solvente evaporado sob pressão reduzida. O produto bruto foi purificado por cromatografia de sílica rápida eluindo com 3% de metanol e 1% de trietilamina em diclorometano. Frações puras foram evaporadas até a secura para fornecer o composto do subtítulo. Produção 0,44 g.
[001565] m/z 587 (M+H)+ (APCI+)
e) (R)-5-(1 -(terc-butildimetilsililóxi)-2-(1 -(3-(hidroximetil)fenil)-2metilpropan-2-ilamino)etil)-8-hidroxiquinolin-2(1H)-ona
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[001566] Uma mistura de (R)-8-(benzilóxi)-5-(1-(tercbutildimetilsililóxi)-2-(1-(3-(hidroximetil)fenil)-2-metilpropan-2ilamino)etil)quinolin-2(1H)-ona (Exemplo 275, etapa d) (0,44 g) e paládio sobre carbono (10%) (80 mg) em etanol (30 mL) foi agitada vigorosamente sob 500KPa(5 bar) de pressão de hidrogênio durante 3 horas. O catalisador foi filtrado e o solvente evaporado sob pressão reduzida para fornecer o composto do subtítulo. Produção 0,37 g. [001567] m/z 497 (M+H)+ (APCI+)
f) 5-(1 -(terc-butildimetilsililóxi)-2-(1 -(3-(hidroximetil)fenil)-2- metilpropan-2-ilamino)etil)-2-oxo-1,2-di-hidroquinolin-8-ilcarbonato de (R)-terc-butila
[001568] Uma solução de (R)-5-(1-(terc-butildimetilsililóxi)-2-(1-(3(hidroximetil)fenil)-2-metilpropan-2-ilamino)etil)-8-hidroxiquinolin-2(1H)ona (Exemplo 275, etapa e) (0,37 g) e BOC-anidrido (0,163 g) e trietilamina (0,208 mL) em etanol (20 mL) foi deixada descansar em temperatura ambiente durante 18 horas. O solvente foi removido sob pressão reduzida para fornecer o composto do subtítulo. Produção 0,44 g. [001569] m/z 597 (M+H)+ (APCI+)
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g) 5-(1-(terc-butildimetilsililóxi)-2-(1-(3-formilfenil)-2-metilpropan-2ilamino)etil)-2-oxo-1,2-di-hidroquinolin-8-ilcarbonato de (R)-tercbutila [001570] Dióxido de manganês (0,6 g) foi adicionado à solução de 5(1-(terc-butildimetilsililóxi)-2-(1-(3-(hidroximetil)fenil)-2-metilpropan-2ilamino)etil)-2-oxo-1,2-di-hidroquinolin-8-ilcarbonato de (R)-terc-butila (Exemplo 275, etapa f) (0,44 g) em diclorometano (30 mL) e a mistura agitada vigorosamente a 20 °C durante 3 horas. A mistura reacional foi filtrada através de terra diatomácea e o solvente removido sob pressão reduzida para fornecer o composto do subtítulo. Produção 0,42 g. [001571] m/z 595 (M+H)+ (APCI+)
h) (R)-3-(2-(2-(terc-butildimetilsililóxi)-2-(8-hidróxi-2-oxo-1,2-dihidroquinolin-5-il)etilamino)-2-metilpropil)benzaldeído
OH [001572] Uma solução de 5-(1-(terc-butildimetilsililóxi)-2-(1-(3formilfenil)-2-metilpropan-2-ilamino)etil)-2-oxo-1,2-di-hidroquinolin-8ilcarbonato de (R)-terc-butila (Exemplo 275, etapa g) (0,42 g) em metanol (15 mL) foi tratada com amônia (35% de aquoso) (2 mL). A mistura reacional foi deixada descansar durante 3 horas a 20 °C. O sol
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572/638 vente foi removido sob uma corrente de nitrogênio e o resíduo foi dividido entre acetato de etila e salmoura. A camada aquosa foi extraída com acetato de etila e os orgânicos combinados secados sobre sulfato de sódio, filtrados e o solvente evaporado sob pressão reduzida para fornecer o composto do subtítulo. Produção 0,34 g.
[001573] m/z 495 (M+H)+ (APCI+)
i) (5-isopropiltiofen-3-il)(1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4-il) metanona
HN [001574] O composto do subtítulo foi preparado usando um método similar àquele descrito no exemplo 22, etapas a) e b) usando ácido 5isopropiltiofeno-3-carboxílico. Na etapa b) o resíduo não foi purificado por cromatografia. O produto bruto foi azeotropado com acetonitrila (x 2). O resíduo foi dividido entre DCM e hidróxido de sódio aquoso a 1M, a camada aquosa foi extraída com DCM (x 3) e os orgânicos combinados secados sobre sulfato de sódio, filtrados e o solvente removido sob pressão reduzida para fornecer o composto do subtítulo. Produção 0,4 g.
[001575] m/z 309 (M+H)+ (APCI+)
j) (R)-5-(1 -(terc-butildimetilsililóxi)-2-(1 -(3-((4-(5-isopropiltiofeno-3carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil)fenil)-2metilpropan-2-ilamino)etil)-8-hidroxiquinolin-2(1H)-ona
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[001576] O composto do subtítulo foi preparado usando um método similar àquele descrito no exemplo 14, etapa b) usando (R)-3-(2-(2(terc-butildimetilsililóxi)-2-(8-hidróxi-2-oxo-1,2-di-hidroquinolin-5il)etilamino)-2-metilpropil)benzaldeído (0,32g)(Exemplo 275, etapa h) e (5-isopropiltiofen-3-il)(1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4il)metanona (0,21g) (Exemplo 275, etapa i)). O produto bruto foi purificado por cromatografia de sílica rápida, 8% de metanol em diclorometano com 1% de amônia aquosa 880. Frações puras foram evaporadas até a secura para fornecer o composto do subtítulo. Produção 0,31 g. [001577] m/z 787 (M+H)+ (APCI+)
k) Ditrifluoroacetato de (R)-8-hidróxi-5-(1-hidróxi-2-(1-(3-((4-(5- isopropiltiofeno-3-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9il)metil)fenil)-2-metilpropan-2-ilamino)etil)quinolin-2(1H)-ona
[001578] O composto do título foi preparado usando um método similar àquele descrito no exemplo 23, etapa b) usando (R)-5-(1-(tercbutildimetilsililóxi)-2-(1-(3-((4-(5-isopropiltiofeno-3-carbonil)-1-oxa-4,9
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574/638 diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil)fenil)-2-metilpropan-2-ilamino)etil)-8hidroxiquinolin-2(1H)-ona (0,31g)(Exemplo 275, etapa j). Produção 0,18 g.
[001579] m/z 673 (M+H)+ (Multimodo+) [001580] 1H RMN (400 MHz, DMSO, 90 oC) δ 9,98 (s, 1H), 8,14 (d,
J = 10,0 Hz, 1H), 7,47 (s, 1H), 7,44 - 7,40 (m, 2H), 7,36 - 7,30 (m, 2H),
7,20 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,01 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 6,89 (s, 1H), 6,58 (d, J = 9,7 Hz, 1H), 5,37 - 5,31 (m, 1H), 4,26 (s, 2H), 3,68 - 3,63 (m, 2H), 3,55 - 3,51 (m, 2H), 3,21 - 2,98 (m, 11H), 2,01 (s, 2H), 1,69 (s, 2H),
1,31 - 1,24 (m, 12H) mais 5 trocáveis não observados.
Exemplo 276
Ditrifluoroacetato de 8-hidróxi-5-((R)-1 -hidróxi-2-((R)-1 -(3-((4-(5isopropiltiofeno-3-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9il)metil)fenil)propan-2-ilamino)etil)quinolin-2(1H)-ona
HO
OH
a) 1-(3-((terc-butildimetilsililóxi)metil)fenil)propan-2-ona [001581] Uma mistura de (3-bromobenzilóxi)(terc-butil)dimetilsilano (16,72 g), acetato de isopropenila (9,2 mL), metóxido de tri-nbutilestanho (24 mL), acetato de paládio (II) (0,625 g) e tri(o-tolil)fosfina (1,70 g) em tolueno anidroso (65 mL) foi aquecida ao refluxo a 100 °C durante 5 horas e em seguida deixada resfriar durante a noite. A mistura foi diluída com acetato de etila (130 mL) e 4 molares de fluoreto
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575/638 de potássio aquoso (80 mL) e agitada vigorosamente durante 20 minutos. Terra diatomácea foi adicionada e a suspensão foi em seguida filtrada através de terra diatomácea, lavando bem o resíduo com acetato de etila. O filtrado combinado e lavagens foram secados sobre sulfato de magnésio anidroso e concentrados em vácuo e purificados por cromatografia rápida em sílica eluindo com iso-hexano, 10% de diclorometano em iso-hexano e 20% de dietil éter em iso-hexano para fornecer o composto do subtítulo como um óleo amarelo. Produção 13,71g.
[001582] 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 7,30 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 7,23 (d, J = 7,7 Hz, 1H), 7,16 (s, 1H), 7,09 (d, J = 7,4 Hz, 1H), 4,73 (s, 2H),
3,68 (s, 2H), 2,14 (s, 3H), 0,94 (s, 9H), 0,10 (s, 6H).
b) cloridrato de (3-((R)-2-((R)-1-feniletilamino)propil)fenil)metanol [001583] Uma
OH solução de
-(3-((tercbutildimetilsililóxi)metil)fenil)propan-2-ona (Exemplo 276, etapa a) (6,85
g) em diclorometano (240 mL) foi tratada com ácido acético (1,27 mL), (R)(+)-1-feniletilamina (2,83 mL) e triacetoxiboroidreto de sódio (7,09 g), e a suspensão resultante foi agitada em temperatura ambiente durante a noite. A mistura foi extinta pela adição porção a porção de bicarbonato de sódio aquoso saturado (120 mL) durante 5 minutos. A mistura de duas fases foi agitada vigorosamente durante 1,75 hora, em seguida separada. A fase aquosa foi extraída com mais diclorometano, e as fases orgânicas combinadas foram secadas (MgSO4), filtradas e concentradas para fornecer um óleo. O óleo foi purificado por cromatografia de sílica rápida eluindo com 10% de etanol em iso-hexano para fornecer o álcool sililado como um óleo amarelo (7,21 g). O óleo foi dissolvido em solução de HCl/metanol (1M, 20 mL), mantido em temperatura ambiente durante 25 minutos, em seguida concentrado em vácuo. A goma resultante foi triturada com metanol/dietil éter para fornecer uma suspensão cristalina que foi agitada durante 30 minutos. O sólido foi
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576/638 removido por filtração, bem lavado com dietil éter e recristalizado três vezes de metanol/dietil éter para fornecer o composto do subtítulo como cristais brancos. Produção 1,9 g.
[001584] m/z 270 (M+H)+ (APCI+) [001585] 1H RMN (400 MHz, DMSO) δ 9,84 (br s, 1H), 9,21 (br s, 1H), 7,69 (d, J = 6,9 Hz, 2H), 7,53 - 7,40 (m, 3H), 7,23 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 7,16 (d, J = 7,7 Hz, 1H), 6,98 (s, 1H), 6,88 (d, J = 7,4 Hz, 1H),
5,16 (t, J = 5,6 Hz, 1H), 4,69 - 4,55 (m, 1H), 4,43 (d, J = 5,4 Hz,2H),
3,42 - 3,30 (m, 1H), 3,04 - 2,91 (m, 1H), 2,61 - 2,47 (m, 1H), 1,63(d, J = 6,7 Hz, 3H), 1,10 (d, J = 6,7 Hz, 3H).
c) (R)-(3-(2-Aminopropil)fenil)metanol
OH [001586] Uma mistura de cloridrato de (3-((R)-2-((R)-1feniletilamino)propil)fenil)metanol (Exemplo 276, etapa b) (1,92g),
20% de hidróxido de paládio sobre carbono (0,757 g) e formiato de amônio (2,28 g) em etanol (30 mL) foi agitada a 75 °C durante 1,5 hora, em seguida deixada resfriar. A suspensão foi filtrada através de terra diatomácea, lavando bem o resíduo com etanol. O filtrado combinado e lavagens foram concentrados em vácuo para fornecer uma goma amarela pálida como uma mistura de produto desejado e análogo de desidróxi. Produção 1,54 g. Usado diretamente.
d) 1-(3-(hidroximetil)fenil)propan-2-ilcarbamato de (R)-terc-butila
OH [001587] Uma solução de dicarbonato de di-terc-butila (2,034 g) em THF (5 mL) foi adicionada gota a gota durante 20 minutos a uma solução do (R)-(3-(2-aminopropil)fenil)metanol impuro (Exemplo 276, etapa c) (1,54 g) em THF (10 mL) e água (10 mL). A mistura resultante foi agitada em temperatura ambiente durante um final de semana, em se
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577/638 guida trietilamina (3,90 mL) foi adicionado. Mais dicarbonato de di-tercbutila (2,013 g) em THF (5 mL) foi adicionado gota a gota durante 30 minutos. A mistura resultante foi agitada em temperatura ambiente durante a noite, em seguida concentrada em vácuo para remover THF. A fase aquosa oleosa resultante foi extraída duas vezes com acetato de etila e os extratos combinados secados (MgSO4), filtrados e concentrados em sílica rápida em vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia rápida em sílica eluindo com 35% de acetato de etila em isohexano para fornecer o composto do subtítulo como um sólido branco. Produção 0,9 g.
[001588] 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 7,29 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 7,25 -
7,17 (m, 2H), 7,11 (d, J = 7,4 Hz, 1H), 4,68 (s, 2H), 4,37 (br s, 1H),
3,91 (br s, 1H), 2,85 (dd, J = 12,7, 5,0 Hz, 1H), 2,66 (dd, J = 13,3, 7,4 Hz, 1H), 1,42 (s, 9H), 1,09 (d, J = 6,7 Hz, 3H). Um próton trocável não observado.
e) 8-(benzilóxi)-5-((R)-1 -(terc-butild imetilsililóxi)-2-((R)-1 -(3- (hidroximetil)fenil)propan-2-ilamino)etil)quinolin-2(1H)-ona
OH [001589] Uma solução de 1-(3-(hidroximetil)fenil)propan-2ilcarbamato de (R)-terc-butila (Exemplo 276, etapa d) (0,78 g) em diclorometano (20 mL) foi tratada com ácido trifluoroacético (5 mL) e agitada em temperatura ambiente durante 40 minutos. Tolueno foi adicionado e a solução foi concentrada em vácuo. O resíduo foi dividido entre NaOH aquoso a 1M e DCM e as fases separadas. A fase aquosa
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578/638 foi extraída duas vezes mais com DCM, em seguida os extratos orgânicos combinados foram secados (MgSO4) e concentrados em vácuo para fornecer (R)-(3-(2-aminopropil)fenil)metanol como um óleo incolor que lentamente cristalizou-se para um sólido branco em repouso (0,442 g). Uma mistura de (R)-(3-(2-aminopropil)fenil)metanol (0,223 g), (R)-8-(benzilóxi)-5-(2-bromo-1-(terc-butildimetilsililóxi)etil)quinolin2(1H)-ona (0,72 g), iodeto de sódio (0,219 g) e base de Hunig (0,77 mL) em acetonitrila (3 mL) foi aquecida ao refluxo sob nitrogênio durante a noite. Mais (R)-(3-(2-aminopropil)fenil)metanol (0,219 g), base de Hunig (0,51 mL) e acetonitrila (2 mL) foram adicionados e a mistura foi aquecida ao refluxo durante uma segunda noite. A mistura reacional resfriada foi diluída com acetato de etila, lavada duas vezes com água, uma vez com salmoura, em seguida secada (MgSO4) e concentrada em sílica rápida em vácuo. O pó resultante foi purificado por cromatografia rápida em sílica eluindo com 5% de trietilamina em acetato de etila para fornecer o composto do subtítulo como uma espuma amarela pálida. Produção 0,525 g.
[001590] 1H RMN (400 MHz, CDCh) δ 9,37 (br s, 1H), 8,46 (d, J = 9,7
Hz, 1H), 7,69 - 7,56 (m, 5H), 7,39 - 7,22 (m, 4H), 7,17 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,12 (d, J = 6,7 Hz, 1H), 6,82 (d, J = 10,0 Hz, 1H), 5,37 (d, J = 2,1 Hz, 2H), 5,26 (dd, J = 7,4, 5,6 Hz, 1H), 4,82 (s, 2H), 3,24 (dd, J = 11,4,
7,6 Hz, 1H), 3,05 (q, J = 6,5 Hz, 1H), 2,93 (dd, J = 11,4, 5,5 Hz, 1H),
2,84 (dd, J = 13,6, 7,0 Hz, 1H), 2,74 (dd, J = 13,2, 6,8 Hz, 1H), 1,25 (d, J = 6,2 Hz, 3H), 1,04 (s, 9H), 0,24 (s, 3H), 0,00 (s, 3H). Dois prótons trocáveis não observados.
f) 5-((R)-1 -(terc-butildimetilsililóxi)-2-((R)-1 -(3-(hidroximetil)fenil) propan-2-ilamino)etil)-8-hidroxiquinolin-2(1H)-ona
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579/638 [001591] Uma
butildimetilsililóxi)-2-((R)-1-(3-(hidroximetil)fenil)propan-2 ilamino)etil)quinolin-2(1H)-ona (Exemplo 276, etapa e) (0,52 g) e 10% de catalisador de paládio sobre carbono (0,102 g) em etanol (36 mL) foi hidrogenada em temperatura ambiente e em 5 bar de pressão de hidrogênio durante 1,5 hora, em seguida hidrogenada em temperatura ambiente e em 100KPa(1 bar) de pressão de hidrogênio durante a noite. A mistura foi filtrada através de terra diatomácea, lavando bem o catalisador com etanol, e o filtrado combinado e lavagens foram concentrados em vácuo para fornecer o composto do subtítulo. Produção 0,42 g. Material usado imediatamente na próxima etapa.
[001592] m/z 483 (M+H)+ (APCI+)
g) (R)-2-(8-(terc-butoxicarbonilóxi)-2-oxo-1,2-di-hidroquinolin-5-il)-
2-(terc-butildimetilsililóxi)etil((R)-1-(3-(hidroximetil)fenil)propan-2il)carbamato de terc-butila
[001593] 5-((R)-1-(terc-Butildimetilsililóxi)-2-((R)-1-(3- (hidroximetil)fenil)propan-2-ilamino)etil)-8-hidroxiquinolin-2(1H)-ona (Exemplo
276, etapa f) (0,42 g) foi dissolvido em etanol (25 mL), tratado com trietilamina (0,26 mL) e dicarbonato de di-terc-butila (0,201 g) e agitado
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580/638 em temperatura ambiente durante 1,5 hora. Mais dicarbonato de diterc-butila (0,203 g) e trietilamina (0,13 mL) foram adicionados e a mistura foi agitada em temperatura ambiente durante a noite, antes foi concentrada em vácuo para fornecer o composto do subtítulo. Produção 0,609 g. Material usado imediatamente na próxima etapa. [001594] m/z 683 (M+H)+ (APCI+)
h) (R)-2-(8-(terc-butoxicarbonilóxi)-2-oxo-1,2-di-hidroquinolin-5-il)2-(terc-butildimetilsililóxi)etil((R)-1-(3-formilfenil)propan-2-il) carbamato de terc-butila
[001595] (R)-2-(8-(terc-Butoxicarbonilóxi)-2-oxo-1,2-di-hidroquinolin-
5-il)-2-(terc-butildimetilsililóxi)etil((R)-1-(3-(hidroximetil)fenil)propan-2il)carbamato de terc-butila (Exemplo 276, etapa g) (0,609 g) foi dissolvido em diclorometano (30 mL), tratado com óxido de manganês (IV) (0,791 g) e a suspensão resultante agitada em temperatura ambiente durante um final de semana. Mais óxido de manganês (IV) (0,801 g) foi adicionado e a suspensão foi agitada durante mais 4 horas. A mistura foi filtrada através de terra diatomácea, lavando bem o resíduo com DCM, e o filtrado combinado e lavagens foram concentrados em vácuo para fornecer o composto do subtítulo. Produção 0,521 g. Material usado imediatamente na próxima etapa.
[001596] m/z 681 (M+H)+ (APCI+)
i) (R)-2-(terc-butildimetilsililóxi)-2-(8-hidróxi-2-oxo-1,2-di- hidroquinolin-5-il)etil((R)-1-(3-formilfenil)propan-2-il)carbamato de tercbutila
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581/638
[001597] (R)-2-(8-(terc-Butoxicarbonilóxi)-2-oxo-1,2-di-hidroquinolin-
5-il)-2-(terc-butildimetilsililóxi)etil((R)-1-(3-formilfenil)propan-2il)carbamato de terc-butila (Exemplo 276, etapa h) (0,521 g) foi suspenso em metanol (20 mL) e tratado com amônia aquosa ‘880’ (2,5 mL) para fornecer uma suspensão que foi agitada em temperatura ambiente durante 3 horas. A mistura foi concentrada soprando com uma corrente de nitrogênio, e o resíduo foi dividido entre acetato de etila, água e salmoura, e as fases separadas. A fase aquosa foi extraída com acetato de etila, e as fases orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secadas (MgSO4) e concentradas em vácuo para fornecer o composto do subtítulo. Produção 0,476 g. Material usado imediatamente na próxima etapa.
[001598] m/z 581 (M+H)+ (APCI+)
j) (R)-2-(terc-butildimetilsililóxi)-2-(8-hidróxi-2-oxo-1,2-di- hidroquinolin-5-il)etil((R)-1-(3-((4-(5-isopropiltiofeno-3-carbonil)-1-oxa-
4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil)fenil)propan-2-il)carbamato de terc- butila
[001599] (R)-2-(terc-Butildimetilsililóxi)-2-(8-hidróxi-2-oxo-1,2-dihidroquinolin-5-il)etil((R)-1-(3-formilfenil)propan-2-il)carbamato de tercbutila (Exemplo 276, etapa i) (0,476 g) foi tratado com (5
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582/638 isopropiltiofen-3-il)(1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4-il)metanona (Exemplo 275, etapa i) (0,296 g), N-metil-2-pirrolidinona (20 mL), ácido acético (0,052 mL) e triacetoxiboroidreto de sódio (0,294 g), e a mistura foi agitada em temperatura ambiente durante a noite. A solução foi vertida em uma mistura de solução de bicarbonato de sódio saturada e água e extraída três vezes com dietil éter. Os extratos combinados foram lavados com água e salmoura, secados (MgSO4) e concentrados em vácuo, em seguida purificados por cromatografia rápida em sílica eluída com 1:5:94 de NEt3:MeOH:DCM para fornecer o composto do subtítulo. Produção 0,471 g.
[001600] m/z 874 (M+H)+ (APCI+)
k) Ditrifluoroacetato de 8-hidróxi-5-((R)-1-hidróxi-2-((R)-1-(3-((4-(5isopropiltiofeno-3-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9il)metil)fenil)propan-2-ilamino)etil)quinolin-2(1H)-ona
HO.
OH [001601] Uma solução de (R)-2-(terc-butildimetilsililóxi)-2-(8-hidróxi2-oxo-1,2-di-hidroquinolin-5-il)etil((R)-1-(3-((4-(5-isopropiltiofeno-3carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil)fenil)propan-2il)carbamato de terc-butila (Exemplo 276, etapa j) (0,465 g) em ácido fórmico (25 mL) foi agitada em temperatura ambiente durante 4 horas, em seguida diluída com tolueno e concentrada em vácuo. O resíduo foi dissolvido em uma mistura de água e acetonitrila (11 mL), filtrado, e purificado por HPLC preparativa (Sunfire, gradiente: 5-50% de acetonitrila em 0,2% de TFA aquoso). Frações contendo produto foram concentradas em vácuo e coevaporadas de acetonitrila três vezes para fornecer um resíduo incolor. O resíduo foi triturado com dietil éter para
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583/638 fornecer um sólido, que foi coletado por filtração, lavado com dietil éter e secado em vácuo em temperatura ambiente para fornecer o composto do título como um sólido branco. Produção 0,234 g.
[001602] m/z 659 (M+H)+ (APCI+) [001603] 1H RMN (400 MHz, DMSO, 90 °C) δ 8,20 - 8,13 (m, 1H),
7,48 (d, J = 1,0 Hz, 1H), 7,46 - 7,31 (m, 4H), 7,20 - 7,13 (m, 1H), 7,00 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 6,90 (s, 1H), 6,56 (d, J = 9,7 Hz, 1H), 5,37 (t, J =
6,4 Hz, 1H), 4,29 (s, 2H), 3,70 - 3,62 (m, 2H), 3,62 - 3,50 (m, 3H), 3,49 - 3,36 (m, 2H), 3,30 - 2,98 (m, 8H), 2,81 - 2,71 (m, 1H), 2,12 - 1,93 (m, 2H), 1,81 - 1,60 (m, 2H), 1,28 (d, J = 6,7 Hz, 6H), 1,20 - 1,13 (m, 3H). Seis prótons trocáveis não observados.
Exemplo 277
Ditrifluoroacetato de (R)-N-ciclo-hexil-N-(2-(2-hidróxi-2-(4-hidróxi2-oxo-2,3-di-hidrobenzo[d]tiazol-7-il)etilamino)etil)-3-(3-((4-(2metiltiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9il)metil)fenetóxi)propanamida
HO
OH
a) 3-(3-((4-(2-metiltiazol-4-carbonil)-1 -oxa-4,9-diazaespiro[5,5] undecan-9-il)metil)fenetóxi)propanoato de terc-butila [001604] Triton-B (0,094 mL) foi adicionado à solução de (9-(3-(2hidroxietil)benzil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4-il)(2-metiltiazol4-il)metanona (Exemplo 6, etapa b) (1,72 g) em tolueno (30 mL). A
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584/638 mistura foi concentrada em vácuo e resfriada para 0 °C. Acrilato de terc-butila (0,671 mL) foi adicionado durante 1 minuto e a mistura foi agitada em temperatura ambiente durante 20 horas. A reação foi diluída com DCM (50 mL) e o orgânico lavado com solução de bicarbonato de sódio saturada (50 mL), salmoura (50 mL), secado sobre sulfato de sódio, filtrado e evaporado para fornecer o composto do subtítulo. Material usado diretamente na próxima etapa.
b) ácido 3-(3-((4-(2-Metiltiazol-4-carbonil)-1 -oxa-4,9-diazaespiro [5,5]undecan-9-il)metil)fenetóxi)propanoico
HO.
[001605] 3-(3-((4-(2-Metiltiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil)fenetóxi)propanoato de terc-butila (Exemplo 277, etapa a) foi dissolvido em DCM (10 mL) e TFA (2 mL) foi adicionado. A mistura resultante foi agitada durante 2 horas em seguida evaporada. O resíduo foi azeotropado com tolueno e novamente dissolvido em MeCN (10 mL). Isto foi aplicado a um cartucho SCX (50g, Varian) que foi pré-umedecido com MeCN. O cartucho foi lavado com MeCN (100 mL) e eluído com amônia aquosa 880 em MeCN (1:4, 100 mL). O eluente foi evaporado para fornecer o composto do subtítulo. Material usado diretamente na próxima etapa.
c) N-ciclo-hexil-N-(2,2-dimetoxietil)-3-(3-((4-(2-metiltiazol-4carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil) fenetóxi)propanamida [001606] Ácido
3-(3-((4-(2-Metiltiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9Petição 870190058499, de 25/06/2019, pág. 590/650
585/638 diazaespiro [5,5]undecan-9-il)metil)fenetóxi)propanoico (Exemplo 277, etapa b) foi dissolvido em DMF (10 mL), e N-(2,2-dimetoxietil)ciclo-hexanamina (WO2008075025) (0,93 g), trietilamina (2,88 mL) e T3P (3,95 mL) foram adicionados. A reação foi agitada durante a noite e dividida entre água (100 mL) e acetato de etila (100 mL). As camadas foram separadas e o aquoso extraído com acetato de etila (2 x 100 mL). Os orgânicos combinados foram lavados com solução de bicarbonato de sódio saturada (100 mL), salmoura (100 mL), secados sobre sulfato de sódio, filtrados e evaporados. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna de sílica rápida eluindo com gradiente de 47,5:47,5:5 de acetato de etila:i-hexano:trietilamina a 95:5 de acetato de etila:trietilamina para fornecer o composto do subtítulo como um óleo incolor. Produção 0,9 g.
[001607] 1H RMN (400 MHz, DMSO, 90oC) δ 7,85 (s, 1H), 7,26 - 7,05 (m, 4H), 4,46 - 4,37 (m, 1H), 3,68 - 3,55 (m, 11H), 3,43 (s, 2H), 3,33 -
3,22 (m, 8H), 2,77 (t, J = 6,9 Hz, 2H), 2,68 (s, 3H), 2,56 (t, J = 6,7 Hz, 2H), 2,38 - 2,32 (m, 4H), 1,78 - 1,65 (m, 4H), 1,63 - 1,42 (m, 6H), 1,33 -
1,19 (m, 2H), 1,15 - 1,00 (m, 2H).
d) N-ciclo-hexil-3-(3-((4-(2-metiltiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9- diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil)fenetóxi)-N-(2-oxoetil) propanamida [001608] Ácido tósico (1384 mg) foi adicionado à solução de N-ciclohexil-N-(2,2-dimetoxietil)-3-(3-((4-(2-metiltiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil)fenetóxi)propanamida (Exemplo
277, etapa c) (683 mg) em DCM (10 mL) e a mistura resultante agitada à temperatura ambiente durante 4 horas. Solução de bicarbonato de
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586/638 sódio (saturada, 10 mL) foi cautelosamente adicionada e a mistura agitada até o borbulhamento cessar (10 min). A reação foi diluída com DCM (50 mL) e o aquoso separado. O orgânico foi lavado com solução de bicarbonato de sódio saturada (2 x 20 mL), salmoura (2 0 mL), secado sobre sulfato de sódio, filtrado e evaporado para fornecer o composto do subtítulo.
[001609] m/z 611 (M+H)+ (APCI+)
e) Ditrifluoroacetato de (R)-N-ciclo-hexil-N-(2-(2-hidróxi-2-(4- hidróxi-2-oxo-2,3-di-hidrobenzo[d]tiazol-7-il)etilamino)etil)-3-(3-((4(2-metiltiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9il)metil)fenetóxi)propanamida
HO,
OH [001610] Uma solução de N-ciclo-hexil-3-(3-((4-(2-metiltiazol-4carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)metil)fenetóxi)-N-(2oxoetil)propanamida (Exemplo 277, etapa d) (0,122 g) em metanol (3 mL) foi adicionada a uma mistura de (R)-7-(2-amino-1-hidroxietil)-4hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona, HCl (WO2007027134, exemplo 1, etapa d) (0,079 g) e ácido acético (0,011 mL). A mistura resultante foi agitada durante 5 minutos em seguida resfriada para 0 °C. Cianoboroidreto de sódio (0,019 g) foi em seguida adicionado e a mistura deixada aquecer para temperatura ambiente e agitada durante 2 horas. solvente evaporado e o resíduo purificado por cromatografia de coluna de sílica rápida eluindo com 95:5:0,5 a 89:10:1 de DCM:MeOH: amônia aquosa 880. As frações contendo produto foram combinadas, evaporadas e purificadas por HPLC (Sunfire, gradiente: 5-40% de acetonitrila em 0,2% de TFA aquoso). As frações contendo produto foram combi
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587/638 nadas, evaporadas e trituradas com dietil éter para fornecer o composto do título como um sólido branco. Produção 0,085 g.
[001611] m/z 821 (M+H)+ (Multimodo+) [001612] 1H RMN (400 MHz, DMSO, 90oC) δ 11,26 (s, 1H), 7,90 (s,
1H), 7,41 - 7,28 (m, 4H), 6,93 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 6,77 (d, J = 8,2 Hz,
1H), 4,89 (dd, J = 8,7, 4,1 Hz, 1H), 4,29 (s, 2H), 3,74 - 3,43 (m, 13H),
3,29 - 2,98 (m, 8H), 2,83 (t, J = 6,7 Hz, 2H), 2,71 - 2,56 (m, 5H), 1,98 1,01 (m, 14H). 5 trocáveis não observados.
Exemplo 278
Ditrifluoroacetato de (R)-4-hidróxi-7-(1 -hidróxi-2-(2-(4-((4-(2isopropiltiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9il)metil)tiofen-2-il)etilamino)etil)benzo[d]tiazol-2(3H)-ona
HO
OH
a) terc-butil(2-(5-clorotiofen-2-il)etóxi)dimetilsilano
Cl [001613] M-Clorosuccinimida (0,83 g) foi adicionado porção a porção a uma solução de terc-butildimetil(2-(tiofen-2-il)etóxi)silano (1,5 g) (exemplo 4 etapa a) em clorofórmio (50 mL) e aquecido ao refluxo durante 3 dias. A solução amarela foi diluída com DCM (100 mL) e lavada com solução de bicarbonato de sódio saturada (2x100 mL), salmoura (100 mL), secada sobre sulfato de sódio, filtrada e evaporada em vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de sílica-gel eluindo com /so-hexano. As frações contendo produto foram combinadas e
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588/638 evaporadas em vácuo para fornecer o composto do subtítulo como um óleo claro. Produção 1 g.
[001614] 1H RMN (300 MHz, CDCh) δ 6,69 (d, J = 3,5 Hz, 1H), 6,57 -
6,54 (m, 1H), 3,75 (t, J = 6,5 Hz, 2H), 2,89 (t, J = 6,4 Hz, 2H), 0,87 (s, 9H), 0,01 (s, 6H)
b) 5-(2-(terc-butildimetilsililóxi)etil)-2-clorotiofeno-3-carbaldeído
[001615] terc-Butil(2-(5-clorotiofen-2-il)etóxi)dimetilsilano (0,8 g) (exemplo 278, etapa a) foi adicionado gota a gota durante 5 minutos a uma solução agitada de butil lítio (2,5M em hexanos 1,7 mL) e 2,2,6,6tetrametilpiperidina (0,73 mL) em THF (25 mL) a -78°C. A mistura resultante foi agitada durante 2 hrs e DMF (0,67 mL) foi adicionado. A mistura foi agitada durante mais 1 h e deixada aquecer para TA. A reação foi cautelosamente vertida em solução de HCl (0,5M, 200 mL) e extraída com acetato de etila (3x100 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água (2x100 mL), salmoura (100 mL), secadas sobre sulfato de sódio, filtradas e evaporadas em vácuo. O óleo resultante foi purificado por cromatografia de sílica-gel eluindo com gradiente de /so-hexano a 5% de éter em iso-hexano. As frações contendo produto foram combinadas e evaporadas em vácuo para fornecer o composto do subtítulo como um óleo claro. Produção (0,8 g).
[001616] 1H RMN (400 MHz, CDCh) δ 9,98 (s, 1H), 7,06 - 7,04 (m,
1H), 3,79 (t, J = 6,0 Hz, 2H), 2,95 - 2,85 (m, 2H), 0,90 (s, 9H), 0,05 (s, 6H)
c) 5-(2-(terc-butildimetilsililóxi)etil)tiofeno-3-carbaldeído
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589/638 [001617] 5-(2-(terc-Butildimetilsililóxi)etil)-2-clorotiofeno-3carbaldeído (0,8 g) (exemplo 278, etapa b) em uma mistura de etanol (50 mL) e trietilamina (0,91 mL) com 10% de catalisador de paládio sobre carbono (0,28 g) foi agitado vigorosamente sob 4 bar de pressão de hidrogênio durante 18 horas. A mistura foi filtrada através de celite e a almofada filtrante lavada com etanol (50 mL). O filtrado combinado e lavagens foram evaporados e azeotropados com tolueno (20 mL) para fornecer um óleo amarelo. O óleo foi dissolvido em DCM (100 mL), dióxido de manganês (2,3 g) foi adicionado e a suspensão resultante refluxada durante a noite. A mistura foi filtrada através de celite e a almofada filtrante lavada com DCM (50 mL). O filtrado combinado e lavagens foram evaporados em vácuo para fornecer o composto do subtítulo como um óleo amarelo. Produção 0,6 g.
[001618] 1H RMN (300 MHz, CDCh) δ 9,80 (s, 1H), 7,93 - 7,90 (m,
1H), 3,80 (t, J = 6,2 Hz, 2H), 2,99 (t, J = 5,9 Hz, 2H), 0,88 (s, 9H), 0,01 (s, 6H) + um H obscurecido por pico de solvente
d) (9-((5-(2-(terc-butildimetilsililóxi)etil)tiofen-3-il)metil)-1-oxa-4,9- diazaespiro[5,5]undecan-4-il)(2-isopropiltiazol-4-il)metanona
Si [001619] 5-(2-(terc-butildimetilsililóxi)etil)tiofeno-3-carbaldeído (0,6 g) (exemplo 278, etapa c) foi adicionado a (2-isopropiltiazol-4-il)(1-oxa-
4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4-il)metanona (0,94 g) (exemplo 22, eta
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590/638 pa b) em uma mistura de N-metil-2-pirrolidinona (5 mL) e ácido acético (0,13 mL) e agitada durante 30 minutos. Triacetoxiboroidreto de sódio (0,71 g) foi em seguida adicionado e a mistura agitada durante a noite. A reação foi vertida em água (100 mL), o pH foi ajustado para 8 usando solução de bicarbonato de sódio saturada e a solução resultante aquosa extraída com acetato de etila (3x100 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água (3x100 mL), salmoura (100 mL), secadas sobre sulfato de sódio, filtradas e evaporadas. O resíduo foi purificado por cromatografia de sílica-gel eluindo com 77,5:17,5:5 ihexano:acetato de etila:trietilamina para 47,5:47,5:5 de gradiente de ihexano:acetato de etila:trietilamina. As frações contendo o produto foram combinadas e evaporadas em vácuo para fornecer o composto do subtítulo como um óleo claro. Produção 0,8 g.
[001620] 564 (M+H)+ (APCI).
[001621] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSC, 90°C) 8 7,91 (s, 1H), 6,97 (s, 1H), 6,77 (s, 1H), 3,79 (t, J = 6,3 Hz, 2H), 3,69 - 3,55 (m, 4H), 3,41 -
3,27 (m, 3H), 2,92 (td, J = 6,3, 0,8 Hz, 2H), 2,42 - 2,23 (m, 6H), 1,75 -
1,64 (m, 2H), 1,59 - 1,47 (m, 2H), 1,37 (d, J = 6,9 Hz, 6H), 0,89 (s, 9H), 0 (s, 6H)
e) (9-((5-(2-hidroxietil)tiofen-3-il)metil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5] undecan-4-il)(2-isopropiltiazol-4-il)metanona
HC.
[001622] Tetrabutilamônio fluoreto (1M em tetra-hidrofurano, 2,1 mL) foi adicionado à solução de (9-((5-(2-(terc-butildimetilsililóxi)etil)tiofen-
3-il)metil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4-il)(2-isopropiltiazol-4il)metanona (exemplo 278, etapa d) (0,80 g) em tetra-hidrofurano (10
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591/638 mL). Após 2 horas, a solução foi evaporada em vácuo e o resíduo dividido entre solução de bicarbonato de sódio saturada (50 mL) e acetato de etila (50 mL). As camadas foram separadas e a fase aquosa extraída com acetato de etila (2x50 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (50 mL), secadas sobre sulfato de sódio, filtradas e evaporadas. O resíduo foi purificado por cromatografia de sílica-gel, eluindo com 20:1 acetato de etila:trietilamina. As frações contendo produto foram combinadas e evaporadas em vácuo para fornecer o composto do subtítulo como uma goma. Produção 0,61 g. [001623] 450 (M+H)+ (APCI) [001624] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO, 90°C) δ 7,90 (s, 1H), 6,94 (s,
1H), 6,74 (s, 1H), 4,41 (t, J = 5,1 Hz, 1H), 3,72 - 3,55 (m, 4H), 3,41 3,24 (m, 3H), 3,00 (s, 2H), 2,88 (t, J = 6,7 Hz, 2H), 2,43 - 2,26 (m, 6H),
1,75 - 1,30 (m, 10H)
f) Ditrifluoroacetato de (R)-4-hidróxi-7-(1-hidróxi-2-(2-(4-((4-(2- isopropiltiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9il)metil)tiofen-2-il)etilamino)etil)benzo[d]tiazol-2(3H)-ona.
HO
OH [001625] Uma solução de (9-((5-(2-hidroxietil)tiofen-3-il)metil)-1-oxa-
4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4-il)(2-isopropiltiazol-4-il)metanona [001626] (0,35 g) (exemplo 278, etapa e) em diclorometano (10 mL) foi tratada com ácido trifluoroacético (0,06 mL) seguido por periodinano Dess-Martin (0,56 g) e a mistura resultante agitada à TA durante 1 hora. A mistura reacional foi tratada com solução de tiossulfato de sóPetição 870190058499, de 25/06/2019, pág. 597/650
592/638 dio saturada (10 mL) e solução de bicarbonate de sódio saturada (10 mL) e acetato de etila (10 mL) e agitada vigorosamente durante 5 minutos. A mistura foi extraída com acetato de etila (2x30 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com solução de bicarbonato de sódio saturada, secadas sobre sulfato de sódio, filtrados, tratados com ácido acético (0,09 mL) e o solvente evaporado sob pressão reduzida. O resíduo foi dissolvido em metanol (5 mL) e cloridrato de (R)7-(2-amino-1-hidroxietil)-4-hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona (WO
2007027134, exemplo 1, etapa d) (0,15 g) foi em seguida adicionado e a mistura agitada durante 5 minutos antes do resfriamento em um banho de gelo. Cianoboroidreto de sódio (0,07 g) foi em seguida adicionado e a mistura deixada aquecer para TA e agitada durante a noite. O solvente foi evaporado em vácuo. A purificação foi por cromatografia de sílica-gel eluindo com 94,5:5:0,5 a 89:10:1 de gradiente de DCM:metanol:amônia aquosa ‘880’. As frações contendo produto foram combinadas e evaporadas em vácuo. Além disso, a purificação foi por HPLC preparativa (Sunfire®, gradiente: 10 a 30 % de acetonitrila em 0,2% de TFA aquoso). As frações contendo produto foram combinadas, evaporadas em vácuo, azeotropada com acetonitrila e o resíduo triturado com éter para fornecer o composto do título como um sólido branco. Produção 0,10 g.
[001627] m/z 658 (M+H)+ (Multimodo) [001628] 1H RMN (500 MHz, Ü6-DMSO) δ 11,68 (s, 1H), 10,42 10,01 (m, 2H), 9,06 (s, 1H), 8,86 (s, 1H), 8,04 (s, 1H), 7,59 (s, 1H), 7,03 (s, 1H), 6,92 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 6,79 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 6,52 (s, 1H), 4,94 - 4,86 (m, 1H), 4,42 - 4,23 (m, 2H), 3,82 - 3,48 (m, 6H), 3,34 -
2,91 (m, 11H), 2,14 - 2,02 (m, 2H), 1,83 - 1,59 (m, 2H), 1,33 (d, J = 6,8 Hz, 6H)
Exemplo 279
Formiato de (R)-4-hidróxi-7-(1 -hidróxi-2-(9-(4-(2-isopropiltiazol-4Petição 870190058499, de 25/06/2019, pág. 598/650
593/638 carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)-3,3dimetilnonilamino)etil)benzo[d]tiazol-2(3H)-ona.
S
N H
OH
N H
a) 8-(terc-Butildimetilsililóxi)-2,2-dimetiloctanoato de etila.
O [001629] n-Butil lítio (32,8 mL) foi adicionado à solução de diisopropilamina (1M em tolueno, 11,64 mL) em THF (60 mL) a 0°C a 5°C durante 15 minutos, e esta mistura foi agitada durante 30 minutos. A mistura reacional foi resfriada para -78°C em seguida etil éster de ácido isobutírico (10 mL) foi adicionado gota a gota durante 15 minutos. A mistura foi agitada a -78°C durante 1 hora, em seguida (6bromoexilóxi)-terc-butildimetilsilano (23 mL) foi adicionado gota a gota e a mistura reacional foi agitada a -78°C durante mais 60 minutos. O banho de resfriamento foi removido e a mistura agitada em temperatura ambiente durante a noite antes de ser vertida em uma solução aquosa saturada de amônio cloreto (300 mL) e extraída com acetato de etila (2 x 300 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água (250 mL), secadas sobre sulfato de magnésio, filtradas e evaporadas para fornecer o produto bruto. A purificação foi por cromatografia de sílica-gel eluindo com 0 a 40% de acetato de etila em ciclo-hexano para fornecer o composto do subtítulo como um líquido âmbar pálido. Produção 20 g.
[001630] 1H RMN (400 MHz, CDCh): δ 4,11 (q, J = 7,1 Hz, 2H); 3,59 (t, J = 6,6 Hz, 2H); 1,54-1,45 (m, 4H); 1,35-1,18 (m, 9H); 1,15 (s, 6H); 0,89 (s, 9H); 0,05-0,03 (m, 6H).
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b) 8-(terc-butildimetilsililóxi)-2,2-dimetiloctan-1 -ol
[001631] 8-(terc-Butildimetilsililóxi)-2,2-dimetiloctanoato de etila (exemplo 279, etapa a) (20 g) em éter seco sob nitrogênio (300 mL) foi resfriada para 0°C em um banho de gelo em seguida hidreto de diisobutilalumínio (1M em tolueno, 133 mL) foi adicionado gota a gota. A mistura reacional foi agitada a 0°C durante 1 hora em seguida extinta com tartarato de sódio de potássio aquosa saturado (sal de Rochelle, 400 mL) e agitado durante a noite. A mistura foi extraída com acetato de etila (3 x 300 mL) em seguida as camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secadas sobre sulfato de magnésio, filtradas e evaporadas. A purificação foi por cromatografia de sílica-gel eluindo com 0 a 20% de acetato de etila em ciclo-hexano para fornecer o composto do subtítulo como um líquido incolor. Produção 10,11 g.
[001632] 1H RMN (400 MHz, CDCh): δ 3,60 (t, J = 6,6 Hz, 2H); 3,31 (s, 2H); 1,56 - 1,46 (m, 2H); 1,38-1,18 (m, 8H); 0,89 (s, 9H); 0,86 (s, 6H); 0,06 - 0,03 (m, 6H) mais um trocável não observado.
c) Mistura de (E)-terc-butil(9-metóxi-7,7-dimetilnon-8- enilóxi)dimetilsilano e (Z)-terc-butil(9-metóxi-7,7-dimetilnon-8- enilóxi)dimetilsilano
[001633] Cloreto de oxalila (5,9 mL) foi adicionado a -70°C a uma solução de dimetilsulfóxido (4,98 mL) em diclorometano seco (60 mL) e a mistura agitada durante 1 hora. 8-(terc-butildimetilsililóxi)-2,2dimetiloctan-1-ol (exemplo 279, etapa b) (10,11 g), dissolvido em diclorometano (20 mL), foi adicionado gota a gota e a mistura deixada agitar durante 1 hora. Trietilamina (19,4 mL) foi em seguida adicionada e agitação continuada durante 1 hora. O banho de resfriamento foi re
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595/638 movido e a mistura deixada aquecer para temperatura ambiente, em cujo ponto DCM (15 mL) foi adicionado. HCl a 1N foi adicionado gota a gota para dissolver os sais presentes na mistura reacional e as camadas separadas. A camada aquosa foi extraída com DCM (2 x 250 mL) em seguida as camadas orgânicas combinadas foram lavadas com carbonato de sódio aquoso saturado (250 mL), secadas sobre sulfato de magnésio, filtradas e concentradas sob vácuo para fornecer um líquido laranja. O resíduo foi filtrado por meio de um tampão curto de sílica usando dietil éter como o eluente para fornecer 8-(terc-butildimetil-silanilóxi)-2,2-dimetil-octanal como um líquido amarelo que foi usado sem outra purificação.
[001634] Terc-butóxido de potássio (15,3 g) e cloreto de (metoximetil)trifenilfosfônio (48 g) em THF seco (350 mL) foram resfriados para 0°C e agitados durante 30 minutos. 8-(terc-butil-dimetil-silanilóxi)-2,2dimetil-octanal (10,03 g) foi dissolvido em THF seco (150 mL) e adicionado à mistura reacional, que foi em seguida agitada a 0 °C durante 1 hora. A mistura foi deixada aquecer para temperatura ambiente e agitada durante 30 minutos antes da adição de solução de bicarbonato de sódio saturada (300 mL) seguida por extração com dietil éter (3 x 300 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (300 mL), secadas sobre sulfato de magnésio, filtradas e evaporadas sob vácuo para fornecer o produto bruto.
[001635] Ciclo-hexano (300 mL) foi adicionado e a mistura agitada durante 5 minutos. O solvente foi decantado e este processo foi repetido. A evaporação da camada de ciclo-hexano forneceu um líquido amarelo com algum sóido branco presente. O sólido foi removido por filtração, em seguida o filtrado foi purificado por cromatografia de sílica-gel, eluindo com 0 a 40% de acetato de etila em ciclo-hexano. Outra purificação foi ativada dissolvendo-se o material (3,2 g) em acetona (50 mL), tratamento com iodeto de sódio (3,05 g) seguida por resina
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Merrifield (6,4 g) e agitando a mistura durante o final de semana. A resina foi filtrada e lavada com acetona (100 mL), DCM (50 mL) e metanol (50 mL). O filtrado foi evaporado e apreendido em DCM (200 mL), lavado com água (2 x 60 mL) e a camada orgânica secada sobre sulfato de magnésio e evaporada sob pressão reduzida para fornecer o produto subtítulo como um líquido amarelo pálido e como uma mistura de isômeros cis / trans. Produção de 2,6 g.
[001636] 1H RMN (400 MHz, CDCh): δ 6,16 (d, J = 12,9 Hz, 0,6H);
5,69 (d, J = 7,0 Hz, 0,4H); 4,73 (d, J = 12,9 Hz, 0,6H); 4,09 (d, J = 7,0 Hz, 0,4H); 3,61-3,56 (m, 2H); 3,53-3,47 (m, 3H); 1,56-1,45 (m, 2H); 1,38-1,16 (m, 8H); 1,05 (d, J = 10,1 Hz, 3H); 0,97 (s, 3H); 0,92-0,86 (m, 9H); 0,06-0,02 (m, 6H).
d) Uma mistura de (E)-9-metóxi-7,7-dimetilnon-8-en-1-ol e (Z)-9metóxi-7,7-dimetilnon-8-en-1-ol.
OH [001637] (E)-terc-butil(9-metóxi-7,7-dimetilnon-8-enilóxi)dimetilsilano (exemplo 279, etapa c) (2,57 g) foi dissolvido em tetra-hidrofurano (60 mL) e tetrabutilamônio fluoreto (16,4 mL) foi adicionado e a mistura reacional deixada agitar em temperatura ambiente durante 4 horas. A mistura reacional foi extinta com água (50 mL) e extraída com dietil éter (3 x 100 mL). A camada orgânica foi secada sobre sulfato de magnésio, filtrada e concentrada sob vácuo para fornecer o composto do subtítulo como um líquido amarelo pálido e como uma mistura de isômeros cis / trans, que foi usada sem outra purificação. Produção de
1,2 g.
[001638] 1H RMN (400 MHz, CDCh): δ 6,16 (d, J = 12,9 Hz, 0,5H);
5,70 (d, J = 7,0 Hz, 0,5H); 4,74 (d, J = 12,9 Hz, 0,5H); 4,11 (d, J = 7,0 Hz, 0,5H); 3,68-3,61 (m, 2H); 3,52 (s, 1,5H); 3,49 (s, 1,5H); 1,62-1,51 (m, 2H); 1,40-1,21 (m, 8H); 1,07 (s, 3H); 0,98(s, 3H) mais um trocável não observado.
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e) Metanossulfonato de 7,7-djmetjl-9-oxononjla.
[001639] Uma mistura de (E)-9-metóxi-7,7-dimetilnon-8-en-1-ol e (Z)9-metóxi-7,7-dimetilnon-8-en-1-ol (exemplo 279, etapa d) (1,6 g) foi dissolvida em diclorometano (15 mL) e trietilamina (1,33 mL) foi adicionada, em seguida a mistura foi resfriada para 0°C em um banho de gelo sob argônio. Cloreto de metanossulfonila (0,68 mL) foi adicionado gota a gota durante 5 minutos e a mistura reacional foi agitada a 0°C durante 15 minutos e em seguida em temperatura ambiente durante 1 hora. A mistura reacional foi lavada com salmoura (2 x 30 mL), secadas sobre sulfato de magnésio, filtradas e evaporadas sob vácuo para fornecer o produto bruto. A purificação foi por cromatografia de sílicagel, eluindo com 0 a 100% de acetato de etila em ciclo-hexano para fornecer o composto do subtítulo como um óleo incolor. Produção 1,2g.
[001640] 1H RMN (400 MHz, CDCh): δ 9,85-9,81 (m, 1H); 4,25-4,18 (m, 2H); 3,00 (s, 3H); 2,25 (m, 2H); 1,80-1,69 (m, 2H); 1,47-1,37 (m, 2H), 1,31 (s, 6H); 1,05-1,01 (m, 6H).
f) 9-(4-(2-jsopropjltjazol-4-carbonjl)-1 -oxa-4,9djazaespjro[5,5]undecan-9-jl)-3,3-djmetjlnonanal /s. O I [001641] (2-isopropil-tiazol-4-il)-(1-oxa-4,9-diaza-spiro[5,5]undec-4il)-metanona (0,262 g) (preparado do sal de trifluoroacetato como no exemplo 102, etapa c) foi dissolvido em acetonitrila (4 mL) e trietilamina (0,22 mL) foi adicionada. Esta solução foi em seguida adicionada a uma solução de metanossulfonato de 7,7-dimetil-9-oxononila (Exemplo 279, etapa e) (0,291 g) em acetonitrila (4 mL) e a mistura resultante
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598/638 aquecida a 80°C durante a noite. Os solventes foram removidos sob vácuo. A purificação foi por cromatografia de sílica-gel eluindo com 0 a 10% de metanol em DCM para fornecer o composto do subtítulo como um óleo incolor. Produção 0,361 g.
[001642] 1H RMN (400 MHz, CDCh): δ 9,80-9,77 (m, 1H); 7,81 (s,
1H); 4,12-3,80 (m, 2H); 3,73 (s, 3H); 3,68-3,58 (m, 1H); 3,34-3,22 (m, 1H); 2,90 - 2,33 (m, 6H); 2,21 (d, J = 3,17 Hz, 2H); 1,99-1,65 (m, 6H);
1,63-1,47 (m, 2H); 1,37 (d, J = 6,9Hz, 6H); 1,31-1,20 (m, 6H); 1,00 (s, 6H).
g) Formiato de (R)-4-hidróxi-7-(1-hidróxi-2-(9-(4-(2-isopropiltiazol-
4-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)-3,3dimetilnonilamino)etil)benzo[d]tiazol-2(3H)-ona.
S [001643] Ácido acético (0,035 mL) foi adicionado a uma solução agi tada de
9-(4-(2-isopropiltiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-9-il)-3,3-dimetilnonanal (exemplo 279, etapa f) (195 mg) e cloridrato de (R)-7-(2-amino-1-hidroxietil)-4hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona (WO2007027134, exemplo 1, etapa d) (161 mg) em metanol (10 mL) e após um minuto cianoboroidreto de sódio (51 mg) foi adicionado e a mistura reacional agitada em temperatura ambiente durante 1,5 hora. A mistura foi concentrada e em seguida dividida entre THF (12 mL) e uma mistura de salmoura e solução de bicarbonato de sódio saturada (10:1, 12 mL). As camadas foram separadas e a fase orgânica secada sobre sulfato de sódio, filtrada e evaporada. O material resultante foi purificado por HPLC preparativa (Phenomenex Gemini®, gradiente: 5 a 40% de acetonitrila em 0,1% de
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599/638 ácido fórmico aquoso). As frações contendo produto foram combinadas e secadas por congelamento para fornecer o composto do título como um sólido branco. Produção 0,038 g.
[001644] m/z 688 (M+H)+ [001645] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO, 80°C): δ 8,12 (s, 1,6H); 7,89 (s, 1H); 6,88 (d, J = 8,3 Hz, 1H); 6,70 (d, J = 8,3 Hz, 1H); 4,59 (t, J =
6,2 Hz, 1H); 3,64 (d, J = 9,5 Hz, 6H); 2,75 (d, J = 6,7 Hz, 2H); 2,61-
2,53 (m, 2H); 2,40 - 2,21 (m, 6H); 1,72-1,63 (m, 2H); 1,58-1,47 (m, 2H);
1,43-1,30 (m, 10H); 1,29-1,09 (m, 8H); 0,82 (s, 6H) mais um sinal obscurecido por solvente e quatro trocáveis não observados.
Exemplo 280
Formiato de (R)-4-hidróxi-7-(1-hidróxi-2-(10-(4-(2-isopropiltiazol-4carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)decan-2ilamino)etil)benzo[d]tiazol-2(3H)-ona.
HO. X
a) 10-Bromodecan-2-ol
OH
Br [001646] A uma solução de 9-bromo-nonanol (1,7 g) em DCM (100 mL) foi adicionado di-isopropiletilamina (3,91 mL) em seguida DMSO (1,62 mL) e a mistura resfriada para -14°C em seguida complexo de trióxido de enxofre - piridina (3,64 g) foi adicionado porção a porção. A mistura foi agitada durante 30 minutos em seguida deixada descansar durante a noite. Água foi adicionada e as fases separadas. A camada orgânica foi lavada com sulfato de hidrogênio de sódio a 1M (x3), solução de bicarbonato de sódio aquoso saturado e salmoura. A fase orgânica foi separada e secado usando uma frita hidrofóbica em seguida
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600/638 evaporada para fornecer o aldeído como um líquido amarelo (2,32 g). [001647] A uma solução do aldeído (750 mg) em éter seco (20 mL) a 0°C foi adicionado metil lítio (1,6 M em éter, 2,1 mL) gota a gota. Após 45 minutos a mistura foi vertida em ácido sulfúrico a 2M com agitação e as fases foram separadas. A camada orgânica foi lavada com solução de bicarbonato de sódio aquoso saturado em seguida secadas sobre sulfato de sódio, filtradas e evaporadas. A purificação foi por cromatografia de sílica-gel eluindo com 0 a 30% de acetato de etila em ciclo-hexano para fornecer o composto do título como um líquido de cor de palha. Produção de 0,286 g.
[001648] 1H RMN (400 MHz, CDCh): δ 3,83-3,75 (m, 1H); 3,41 (t, J =
6,9 Hz, 2H); 1,90-1,80 (m, 2H); 1,50 - 1,37 (m, 6H); 1,36-1,26 (s, 6H);
1,19 (d, J = 6,2 Hz, 3H) mais um trocável não observado.
b) (9-(9-Hidroxidecil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4-il)(2isopropiltiazol-4-il)metanona
OH 'S [001649] (2-isopropil-tiazol-4-il)-(1-oxa-4,9-diaza-spiro[5,5]undec-4il)-metanona Trifluoroacetato (exemplo 22, etapa b) (500 mg) foi aplicada a um cartucho SCX-2 umedecido com metanol, lavado com metanol em seguida eluído usando 2N de amônia em metanol e evaporada para fornecer a base livre (276 mg). Este material foi misturado com 10-bromodecan-2-ol (exemplo 280, etapa a, 280 mg) e trietilamina (0,247 mL) em acetonitrila (10 mL) e aquecida a 60°C durante 18 horas. O solvente foi removido por evaporação e o material cru purificada por cromatografia de sílica-gel eluindo com 0 a 20% de metanol em DCM para fornecer o composto do título. Produção de 0,298 g.
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601/638 [001650] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO): δ 8,99 (s, 1H); 8,00 (s, 1H);
4,23 (d, J = 4,7 Hz, 1H); 3,78-3,44 (m, 8H); 3,11-2,77 (m, 4H); 2,08-
1,92 (m, 2H); 1,76 - 1,48 (m, 4H); 1,30 (d, J = 6,9 Hz, 7H); 1,26-1,16 (m, 12H); 0,98 (d, J = 6,1 Hz, 3H).
c) 10-(4-(2-isopropiltiazol-4-carbonil)-1 -oxa-4,9-diazaespiro[5,5] undecan-9-il)decan-2-ona
O [001651] A uma solução de (9-(9-hidroxidecil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-4-il)(2-isopropiltiazol-4-il)metanona (exemplo 280, etapa b) (287 mg) em DCM (10 mL) a 0°C sob nitrogênio foi adicionado ácido trifluoroacético (0,048 mL). A mistura foi agitada durante 5 minutos em seguida periodinano Dess-Martin (392 mg) foi adicionado. A mistura reacional foi agitada em temperatura ambiente durante 5 horas em seguida outra quantidade de Periodinano Dess-Martin (392 mg) foi adicionado a 0°C em seguida agitada em temperatura ambiente durante 1,75 hora. Solução de tiossulfato de sódio saturada (20 mL), solução de bicarbonato de sódio aquoso saturado (20 mL) e acetato de etila foram adicionados e a mistura agitada em seguida as fases separadas. A camada aquosa foi extraída com acetato de etila (x 2) e os orgânicos combinados foram lavados com solução de bicarbonato de sódio aquoso saturado. Ácido acético (0,053 mL) foi adicionado em seguida o orgânicos foram secados sobre sulfato de sódio, filtrados e evaporados para fornecer o composto do título como uma goma amarela. Produção 0,338 g.
[001652] 1H RMN (400 MHz, CDCh): δ 7,85 (s, 1H); 4,07-3,72 (m,
5H); 3,36-3,21 (m, 2H); 2,96 - 2,82 (m, 3H); 2,47-2,37 (m, 4H); 2,12 (s,
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3H); 2,11-2,02 (m, 2H); 1,85-1,75 (m, 2H); 1,62-1,49 (m, 3H); 1,46-1,36 (m, 7H); 1,35-1,20 (m, 9H).
d) Formiato de (R)-4-hidróxi-7-(1-hidróxi-2-(10-(4-(2-isopropiltiazol4-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)decan-2ilamino)etil)benzo[d]tiazol-2(3H)-ona.
[001653] Ácido acético (0,053 mL) foi adicionado a uma mistura de 10-(4-(2-isopropiltiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan9-il)decan-2-ona (exemplo 280, etapa c) (335 mg) e cloridrato de (R)-7(2-amino-1-hidroxietil)-4-hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona (WO2007027134, exemplo 1, etapa d) (243 mg) em metanol seco com peneiras moleculares 3Â em temperatura ambiente sob nitrogênio e agitada durante 5 minutos. A mistura foi resfriada para 0°C e triacetoxiboroidreto de sódio (131 mg) foi adicionado. A mistura reacional foi agitada, aquecendo para a temperatura ambiente durante a noite. A mistura foi filtrada e evaporada. A purificação foi por HPLC preparativa (Phenomenex Gemini®, gradiente: 10 a 40% de acetonitrila em 0,1% de ácido fórmico aquoso). As frações contendo produto foram combinadas e secadas por congelamento para fornecer o composto do título como um sólido branco. Produção 0,032 g.
[001654] m/z 674 (M+H)+ [001655] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO, 80°C): δ 8,15 (s, 2H); 7,88 (s, 1H); 6,87 (d, J = 8,3 Hz, 1H); 6,69 (d, J = 8,3 Hz, 1H); 4,57-4,50 (m, 1H); 3,71-3,58 (m, 8H); 3,36 - 3,25 (m, 2H); 2,79-2,59 (m, 3H); 2,40-
2,31 (m, 2H); 2,32-2,22 (m, 4H); 1,73-1,63 (m, 2H); 1,59-1,48 (m, 2H);
1,44-1,32 (m, 8H); 1,31-1,16 (s, 10H); 0,99-0,93 (m, 2H) plus 4 trocá-
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603/638 veis não observados.
Exemplo 281
Formiato de (R)-4-hidróxi-7-(1 -hidróxi-2-(4-(3-(4-(2-isopropiltiazol4-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)propiltio) butilamino)etil)benzo[d]tiazol-2(3H)-ona.
OH
a) 4-(2-(1,3-Dioxolan-2-il)etiltio)butan-1 -ol
HO [001656] Uma solução de 4-mercaptobutanol (4,936 g) em acetonitrila seca sob argônio foi resfriada para 0 °C e hidreto de sódio (60% em óleo mineral, 2,044 g) foi adicionado porção a porção. A mistura foi agitada durante 1 hora a 0 °C em seguida 2-(2-bromoetil)-1,3dioxolano (9,26 g) foi adicionado e a suspensão cinza resultante foi aquecida para temperatura ambiente e agitada durante a noite. A reação foi extinta pela adição de solução de bicarbonato de sódio aquoso saturado (150 mL) e em seguida extraída com acetato de etila (3 x 150 mL). Os orgânicos foram combinados e lavados com salmoura (150 mL), secados sobre sulfato de sódio, filtrados e secados para fornecer o produto bruto. A purificação foi por cromatografia de sílica-gel eluindo com 0 a 50% de acetato de etila em ciclo-hexano para fornecer o composto do subtítulo como um óleo amarelo. Produção de 7,3 g.
[001657] 1H RMN (400 MHz, CDCh): δ 4,98-4,93 (m, 1H); 4,01-3,93 (m, 2H); 3,89-3,83 (m, 2H); 3,69 - 3,63 (m, 2H); 2,65-2,58 (m, 2H);
2,59-2,53 (m, 2H); 1,98-1,91 (m, 2H); 1,73-1,62 (m, 4H) mais um tro
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604/638 cável não observado.
b) (9-(3-(4-Hidroxibutiltio)propil)-1 -oxa-4,9-diazaespiro[5,5] undecan-4-il)(2-isopropiltiazol-4-il)metanona.
HO [001658] 4-(2-(1,3-Dioxolan-2-il)etiltio)butan-1-ol (exemplo 281, etapa a) (500 mg) foi dissolvido em uma solução de 80% ácido fórmico aquoso (6 mL) e a mistura reacional foi agitada em temperatura ambiente durante o final de semana. A mistura foi diluída com água (10 mL) e extraída com éter (3 x 10 mL) em seguida os orgânicos foram lavados com salmoura (10 mL), secados sobre sulfato de sódio, filtrados e evaporados para fornecer 3-(4-hidróxi-butilsulfanil)-propionaldeído como um óleo. Isto foi dissolvido em metanol seco e trifluoroacetato de (2-isopropil-tiazol-4-il)-(1-oxa-4,9-diaza-espiro[5,5]undec-4-il)metanona (Exemplo 22, etapa b) (606 mg) e peneiras moleculares 3Â foram adicionados. Ácido acético (0,2 mL) foi adicionado e a mistura agitada durante 5 minutos sob argônio antes do resfriamento para 0°C e adição de triacetoxiboroidreto de sódio (633 mg). O banho de resfriamento foi removido e a mistura reacional agitada em temperatura ambiente durante a noite. A mistura foi filtrada em seguida aplicada diretamente a um cartucho SCX-2 e lavada com metanol antes eluindo o produto com amônia a 2N em metanol. Além disso, a purificação foi por cromatografia de sílica-gel eluindo com 10% de metanol em DCM para fornecer o composto do subtítulo como um óleo verde pálido. Produção 0,37 g.
[001659] 1H RMN (400 MHz, CDCh): δ 7,85 (s, 1H); 4,02-3,87 (m,
2H); 3,80-3,73 (m, 3H); 3,69 - 3,63 (m, 3H); 3,39-3,23 (m, 5H); 2,86-
2,74 (m, 2H); 2,67-2,59 (m, 2H); 2,58-2,50 (m, 5H); 1,96-1,81 (m, 4H);
1,74-1,63 (m, 4H); 1,41 (d, J = 6,9 Hz, 6H).
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605/638
c) Formiato de (R)-4-hidróxi-7-(1-hidróxi-2-(4-(3-(4-(2isopropiltiazol-4-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9il)propiltio)butilamino)etil)benzo[d]tiazol-2(3H)-ona.
OH [001660] Cloreto de Oxalila (0,068 mL) foi dissolvido em DCM seco (2 mL) e a solução resfriada para -78°C. DMSO (0,12 mL) em DCM (0,03 mL) foi adicionado gota a gota e a mistura agitada. Após 15 minutos uma solução de (9-(3-(4-hidroxibutiltio)propil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-4-il)(2-isopropiltiazol-4-il)metanona (exemplo 281, etapa b) (290 mg) em DCM (1 mL) foi adicionado gota a gota e agitação continuada durante 15 minutos antes da adição gota a gota de trietilamina (0,44 mL). O banho de resfriamento foi removido e a reação deixada aquecer para temperatura ambiente. Após 1 hora a mistura reacional foi vertida em cloreto de amônio aquoso saturado (3 mL) e DCM (3 mL) adicionado. As camadas foram separadas e a fase aquosa foi extraída com DCM (2 x 5 mL). Os orgânicos foram combinados, lavados com salmoura (5 mL), secadas sobre sulfato de sódio e evaporada para fornecer o aldeído bruto.
[001661] O aldeído (195 mg) foi agitado com cloridrato de (R)-7-(2amino-1-hidroxietil)-4-hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona (WO2007027134, exemplo 1, etapa d) (170 mg) em metanol seco (8 mL) e peneiras moleculares 3Â e ácido acético (0,07 mL) foram adicionadas. Após agitação durante 5 minutos a mistura reacional foi resfriada para 0°C e triacetoxiboroidreto de sódio (200 mg) foi adicionado. O banho de resfriamento foi removido e a mistura reacional agitada em
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606/638 temperatura ambiente durante o final de semana. A mistura foi filtradas e evaporadas. A purificação foi por HPLC preparativa (Phenomenex Gemini®, gradiente: 5 a 40% de acetonitrila em 0,1% de ácido fórmico aquoso). As frações contendo produto foram combinadas e secadas por congelamento para fornecer o composto do título como um sólido branco. Produção de 0,006 g.
[001662] m/z 664 (M+H)+ [001663] 1H RMN (400 MHz, D4-MeOH): δ 8,48 (s, 1,8H); 7,88 (s, 1H); 6,95 (d, J = 8,3 Hz, 1H); 6,73 (d, J = 8,3 Hz, 1H); 4,97-4,90 (m, 1H); 3,89-3,56 (m, 6H); 3,38 - 3,24 (m, 1H); 3,13-3,04 (m, 2H); 3,04-
2,96 (m, 2H); 2,97-2,61 (m, 6H); 2,60-2,49 (m, 4H); 2,04-1,91 (m, 2H); 1,91-1,70 (m, 5H); 1,70-1,57 (m, 3H); 1,38 (d, J = 6,9 Hz, 6H) mais 4 trocáveis não observados.
Exemplo 282
Formiato de 4-hidróxi-7-((1 R)-1 -hidróxi-2-(4-(3-(4-(2-isopropiltiazol-
4-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)propilsulfinil) butilamino)etil)benzo[d]tiazol-2(3H)-ona.
OH [001664] Ácido trifluoroacético (0,06 mL) foi adicionado à solução de (9-(3-(4-hidroxibutiltio)propil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4il)(2-isopropiltiazol-4-il)metanona (Exemplo 281, etapa b) (360 mg) em DCM seco (14 mL) sob argônio. A solução foi resfriada para 0°C e deixada agitar durante 5 minutos antes da adição de Periodinano DessMartin (502 mg). A mistura reacional foi agitada em temperatura ambiente durante 1 hora em seguida extinta pela adição de tiossulfato de
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607/638 sódio saturado (14 mL) e solução de bicarbonate de sódio aquoso saturado (14 mL). Acetato de etila (30 mL) foi adicionado e a mistura agitada durante 5 minutos, em seguida as fases separadas. A camada aquosa foi extraída com acetato de etila (2 x 30 mL). Ácido acético (0,053 mL) foi adicionado a os orgânicos combinados, que foram em seguida secados sobre sulfato de sódio, filtrados e evaporados para fornecer o aldeído como um óleo. Isto foi dissolvido em metanol seco (15 mL) junto com cloridrato de (R)-7-(2-amino-1-hidroxietil)-4hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona (WO2007027134, exemplo 1, etapa d) (311 mg) e peneiras moleculares 3Â e ácido acético (0,07 mL) foram adicionados. Após agitação durante 5 minutos a mistura reacional foi resfriada para 0°C e triacetoxiboroidreto de sódio (200 mg) foi adicionado e agitação continuada em temperatura ambiente durante a noite. A mistura foi filtradas e evaporadas. A purificação foi por HPLC preparativa (Phenomenex Gemini®, gradiente: 5 a 40% de acetonitrila em 0,1% de ácido fórmico aquoso). As frações contendo produto foram combinadas e secadas por congelamento para fornecer o composto do título como um sólido branco. Produção de 0,018 g.
[001665] m/z 680 (M+H)+ [001666] 1H RMN (400 MHz, Ü4-MeOH): δ 8,40 (s, 2H); 7,88 (s, 1H);
6,96 (d, J = 8,3 Hz, 1H); 6,73 (d, J = 8,3 Hz, 1H); 4,98-4,92 (m, 1H);
3,90-3,56 (m, 6H); 3,36 - 3,24 (m, 1H); 3,19-3,03 (m, 4H); 3,04-2,67 (m, 10H); 2,15-1,95 (m, 4H); 1,93-1,56 (m, 6H); 1,38 (d, J = 6,9Hz, 6H) mais 4 trocáveis não observados.
Exemplo 283
Formiato de 4-hidróxi-7-((1 R)-1 -hidróxi-2-(9-(4-(2-isopropiltiazol-4carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)-2- metilnonilamino)etil)benzo[d]tiazol-2(3H)-ona.
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a) 9-Bromo-2-metilnonan-1-ol
[001667] A uma solução de di-isopropilamina (5,42 mL) em THF seco (30 mL) sob argônio a 0°C foi adicionado 2,5M n-butil lítio (15,5 mL) lentamente, mantendo a temperatura abaixo de 10°C. A solução foi agitada a 0°C durante 30 minutos antes do resfriamento para -78°C. Propionato de etila (4,01 mL) foi adicionado gota a gota e a solução agitada a -78°C durante 1 hora. 1,7-dibromoeptano (6,63 mL) foi adicionado e a agitação continuada a -78 °C durante 1 hora em seguida o banho de resfriamento foi removido e a mistura reacional foi agitada em temperatura ambiente durante a noite. Cloreto de amônio aquoso saturado (30 mL) foi adicionado a a reação seguida por acetato de etila (30 mL). As camadas foram separadas e a fase aquosa foi extraída com acetato de etila (2 x 30 mL). Os orgânicos foram combinados, lavados com solução de bicarbonato de sódio aquoso saturado (50 mL), salmoura (50 mL), secadas sobre sulfato de sódio e evaporadas. A purificação foi por cromatografia de sílica-gel eluindo com 1 a 5% de acetato de etila em éter de petróleo (40 a 60°C) para fornecer 9bromo-2-metilnonanoato de etila, que foi usado sem outra purificação.
[001668] Este material (0,84 g) foi dissolvido em éter seco (27 mL) e resfriada para 0°C sob argônio. Hidreto de di-isobutilalumínio (tolueno a 1M, 6,7 mL) foi adicionado gota a gota e a reação foi agitada a 0°C durante 1 hora 15 minutos. A reação foi extinta pela adição de tartarato de sódio de potássio aquoso saturado e a mistura resultante foi agitada durante 15 minutos. Acetato de etila (60 mL) e água (20 mL) foram
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609/638 adicionados e as fases separadas. A camada aquosa foi extraída com acetato de etila (3 x 30 mL) em seguida os orgânicos combinados foram lavados com salmoura, secados sobre sulfato de sódio, filtrados e evaporados. A purificação foi por cromatografia de sílica-gel eluindo com 0 a 10% de acetato de etila em ciclo-hexano para fornecer o composto do subtítulo como um óleo incolor. Produção 0,23 g.
[001669] 1H RMN (400 MHz, CDCh): δ 3,51 (dd, J = 10,5, 5,8 Hz,
1H); 3,46-3,38 (m, 3H); 1,90-1,80 (m, 2H); 1,66-1,55 (m, 2H); 1,47-1,22 (m, 9H); 0,92 (d, J = 6,7 Hz, 3H) mais um trocável não observado.
b) (9-(9-hidróxi-8-metilnonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4il)(2-isopropiltiazol-4-il)metanona
HO [001670] Ditrifluoroacetato de (2-isopropil-tiazol-4-il)-(1-oxa-4,9diaza-spiro[5,5]undec-4-il)-metanona (Exemplo 22, etapa b) (500 mg) foi aplicado a um cartucho SCX-2 umedecido a metanol, lavado com metanol em seguida eluído usando amônia a 2N em metanol e evaporada para fornecer a base livre (279 mg). Isto foi dissolvido em acetonitrila (10 mL) junto com 9-bromo-2-metilnonan-1-ol (exemplo 283, etapa a) (220 mg) e trietilamina (0,223 mL) foi adicionada. A mistura reacional foi aquecida para 60°C durante a noite e em seguida concentrada. A purificação foi por cromatografia de sílica-gel eluindo com 0 a 10% de metanol em DCM para fornecer o composto do subtítulo como um sólido marrom pálido. Produção 0,38 g.
[001671] 1H RMN (400 MHz, CDCh): δ 7,87 (s, 1H); 4,06-3,90 (m,
2H); 3,83-3,71 (s, 4H); 3,52-3,37 (m, 4H); 3,05-2,85 (m, 4H); 2,48-2,32 (m, 2H); 2,15-2,05 (m, 2H); 1,97-1,84 (m, 2H); 1,66-1,50 (m, 4H); 1,481,39 (m, 6H); 1,38-1,21 (m, 8H); 0,91 (d, J = 6,7 Hz, 3H) mais um trocável não observado.
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610/638
c) (9-(9-Bromo-8-metilnonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4il)(2-isopropiltiazol-4-il)metanona [001672] (9-(9-hidróxi-8-metilnonil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-4-il)(2-isopropiltiazol-4-il)metanona (exemplo 283, etapa b) (100 mg), tetrabrometo de carbono (143 mg) e imidazol (30 mg) foram dissolvidos em DCM (5 mL). A solução foi resfriada para 0°C e uma solução de trifenilfosfina (85 mg) em DCM (1 mL) foi adicionada gota a gota. A mistura reacional foi agitada nesta temperatura durante 1 hora em seguida em temperatura ambiente durante 2 horas. Outra quantidade de tetrabrometo de carbono (150 mg) foi adicionada, a mistura resfriada para 0°C e trifenilfosfina (114 mg) em DCM (1 mL) adicionada gota a gota, agitada em temperatura ambiente durante 1 hora, em seguida água foi adicionada e as fases separadas. A fase orgânica foi evaporada e o produto purificado por cromatografia de sílica-gel eluindo com 0 a 10% de metanol em DCM para fornecer o composto do subtítulo como uma goma laranja. Produção 0,088 g.
[001673] 1H RMN (400 MHz, CDCh): δ 7,87 (s, 1H); 4,03-3,91 (m,
2H); 3,81-3,70 (m, 4H); 3,43-3,313 (m, 4H); 3,06-2,86 (m, 4H); 2,49-
2,34 (m, 2H); 2,15-2,05 (m, 2H); 1,98-1,86 (m, 2H); 1,57-1,50 (m, 2H); 1,47-1,39 (m, 6H); 1,37-1,19 (m, 10H); 1,00 (d, J = 6,6 Hz, 3H).
d) Formiato de 4-hidróxi-7-((1R)-1-hidróxi-2-(9-(4-(2-isopropiltiazol4-carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)-2- metilnonilamino)etil)benzo[d]tiazol-2(3H)-ona
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[001674] Cloridrato de (R)-7-(2-amino-1-hidroxietil)-4-hidroxibenzo [d]tiazol-2(3H)-ona (WO2007027134, exemplo 1, etapa d) (263 mg) foi dissolvido em metanol (10 mL) e metóxido de sódio (54 mg) foi adicionado e a mistura agitada durante 25 minutos. O sólido foi coletado por filtração e lavado com metanol e secado por ar para fornecer a base livre (150 mg). Algum deste material (61 mg) foi dissolvido em DMF (3,5 mL) e foi misturado com (9-(9-Bromo-8-metilnonil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-4-il)(2-isopropiltiazol-4-il)metanona (exemplo 283, etapa c) (71 mg) e di-isopropiletilamina (0,023 mL). A mistura reacional foi aquecida para 50°C durante a noite em seguida resfriada e dividida entre acetato de etila (10 mL) e água (10 mL). O orgânicos foram secados sobre sulfato de sódio, filtrados e concentrados. A purificação foi por HPLC preparativa (Phenomenex Gemini®, gradiente: 5 a 40% de acetonitrila em 0,1% de ácido fórmico aquoso). As frações contendo produto foram combinadas e secadas por congelamento para fornecer o composto do título como um sólido branco. Produção 0,002 g.
[001675] m/z 674 (M+H)+ [001676] 1H RMN (400 MHz, D4-MeOH): δ 8,51 (s, 1H); 7,87 (s, 1H);
6,92 (d, J = 8,3 Hz, 1H); 6,70 (d, J = 8,3 Hz, 1H); 3,85-3,55 (s, 6H);
2,92-2,80 (m, 2H); 2,76-2,34 (m, 8H); 1,97-1,82 (m, 2H); 1,77-1,44 (m, 5H); 1,37 (d, J = 6. 9 Hz, 6H); 1,36-1,17 (m, 9H); 1,17-1,04 (m, 1H); 0,92 (dd, J = 6,6, 3,2 Hz, 3H) mais dois sinais obscurecidos por solvente e quatro trocáveis não observados.
Exemplo 284
Formiato de (R)-4-hidróxi-7-(1 -hidróxi-2-(7-(4-(5-isopropiltiofeno-3Petição 870190058499, de 25/06/2019, pág. 617/650
612/638 carbonjl)-1-oxa-4,9-djazaespjro[5,5]undecan-9-jl)heptjlamjno) etil)benzo[d]tiazol-2(3H)-ona.
a) (9-(7-Hjdroxjheptjl)-1-oxa-4,9-djazaespjro[5,5]undecan-4-jl)(5jsopropjltjofen-3-jl)metanona
[001677] Uma solução de 7-bromo-1-heptanol (380 mg) em acetonitrila (3,9 mL) foi adicionado à solução de (5-isopropiltiofen-3-il)(1-oxa-
4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4-il)metanona (Exemplo 275, etapa i) (400 mg) e trietilamina (0,361 mL) em acetonitrila (8,6 mL). A mistura resultante foi agitada a 60°C durante 16 horas. O solvente foi removido sob vácuo e o resíduo apreendido em DCM (25 mL) e lavado com salmoura (25 mL) e água (20 mL), em seguida secado sobre sulfato de sódio, filtrado e evaporado. A purificação foi por cromatografia de sílica-gel eluindo com 0 a 10% de metanol em DCM para fornecer o composto do subtítulo como um sólido marrom pálido. Produção 0,305 g.
[001678] 1H RMN (400 MHz, CDCh): δ 7,26 (s, 1H); 6,84 (s, 1H);
3,74-3,67 (m, 4H); 3,63 (t, J = 6,4 Hz, 2H); 3,57-3,48 (m, 2H); 3,35-
3,10 (m, 2H); 2,99 - 2,70 (m, 3H); 2,28-1,98 (m, 4H); 1,92-1,74 (m, 2H); 1,67-1,47 (m, 4H); 1,41-1,34 (m, 5H); 1,34 (d, J = 6,9 Hz, 6H); 1,28-
1,23 (m, 1H) mais um trocável não observado.
b) Formjato de (R)-4-hjdróxj-7-(1-hjdróxj-2-(7-(4-(5jsopropjltjofeno-3-carbonjl)-1-oxa-4,9-djazaespjro[5,5]undecan-9Petição 870190058499, de 25/06/2019, pág. 618/650
613/638 il)heptilamino)etil)benzo[d]tiazol-2(3H)-ona.
[001679] Ácido trifluoroacético (0,054 mL) foi adicionado à solução de (9-(7-hidroxiheptil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-4-il)(5isopropiltiofen-3-il)metanona (exemplo 284, etapa a) (295 mg) em DCM (7,5 mL). A mistura foi agitada durante 5 minutos em seguida periodinano Dess-Martin (503 mg) foi adicionado e a agitação continuada durante 1 hora e 50 minutos. A mistura reacional foi extinta pela adição de solução de tiossulfato de sódio saturada (4 mL) e solução de bicarbonato de sódio aquoso saturado (4 mL). Acetato de etila (25 mL) foi adicionado e a mistura vigorosamente agitada durante 5 minutos, em seguida as fases separadas. A camada aquosa foi extraída com acetato de etila (5 mL). Os orgânicos foram combinados, lavados com salmoura (5 mL) em seguida ácido acético (0,080 mL) foi adicionado e a solução secadas sobre sulfato de sódio, filtradas e evaporadas para fornecer o aldeído as um óleo (504 mg). Isto foi dissolvido em metanol seco (5 mL) em seguida cloridrato de (R)-7-(2-amino-1-hidroxietil)-4hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona (WO2007027134, exemplo 1, etapa d) (202 mg) foi adicionado e a mistura agitada durante 5 minutos. A mistura reacional foi resfriada para 0 °C e cianoboroidreto de sódio (66 mg) foi adicionado e agitação continuada a 0 °C durante 2 horas em seguida em temperatura ambiente durante a noite. A mistura foi concentrada sob vácuo e dividida entre THF (6 mL) e uma mistura de salmoura e solução de bicarbonato de sódio saturada (10:1, 6 mL). As camadas foram separadas e a fase orgânica secadas sobre sulfato de sódio, filtradas e evaporadas e o resíduo azeotropado com acetonitrila. A purificação foi por HPLC preparativa (Phenomenex Gemini®, gradi
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614/638 ente: 5 a 40% de acetonitrila em 0,1% de ácido fórmico aquoso). As frações contendo produto foram combinadas e secadas por congelamento para fornecer o composto do título como um sólido branco. Produção de 0,037 g.
[001680] m/z 631 (M+H)+ [001681] 1H RMN (400 MHz, D4-MeOH): δ 8,49 (s, 2H); 7,45 (s, 1H);
6,95 (d, J = 8,3 Hz, 1H); 6,91 (s, 1H); 6,73 (d, J = 8,3 Hz, 1H); 4,93 (dd, J = 9,1, 4,5 Hz, 1H); 3,79 -3,47 (m, 6H); 3,20-3,04 (m, 3H); 3,01 -2,94 (m, 3H); 2,92-2,70 (m, 4H); 2,08-1,97 (m, 2H); 1,75-1,56 (m, 6H); 1,43-
1,33 (m, 6H); 1,30 (d, J = 6,9 Hz, 6H) mais um sinal obscurecido por solvente e quatro trocáveis não observados.
Exemplo 285
Formiato de (R)-4-hidróxi-7-(1 -hidróxi-2-(9-(4-(2-isopropiltiazol-4carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)-4,4dimetilnonilamino)etil)benzo[d]tiazol-2(3H)-ona
HO^ ^x
a) 2-(5-Bromopentilóxi)tetra-hidro-2H-piran
Br [001682] A uma solução de 5-bromopentanol (10 g) em DCM (150 mL) foi adicionado p-toluenosulfonato de piridínio (1,5 g) seguido por 3,4-di-hidro-2H-pirano (8,1 mL) e a mistura reacional foi agitada em temperatura ambiente sob nitrogênio durante 21 horas. A solução foi diluída com éter e em seguida lavada com diluída salmoura (1:1 salmoura:água, 140 mL) antes dos orgânicos serem secados sobre sulfato de sódio, filtrados e evaporados. A purificação foi por cromatografia de sílica-gel eluindo com 0 a 50% de acetato de etila em ciclo-hexano
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615/638 para fornecer o composto do subtítulo como um líquido incolor. Produção de 14,14 g.
[001683] 1H RMN (400 MHz, CDCh): δ 4,59-4,56 (m, 1H); 3,91-3,82 (m, 1H); 3,79-3,71 (m, 1H); 3,57 -3,47 (m, 1H); 3,44-3,36 (m, 3H); 1,94-
1,76 (m, 3H); 1,76- 1,66 (m, 1H); 1,65-1,46 (m, 8H).
b) 2,2-dimetil-7-(tetra-hidro-2H-piran-2-ilóxi)heptanoato de etila.
[001684] Uma solução de di-isopropilamina (1,78 mL) em THF seco (10 mL) a 0 °C sob nitrogênio foi tratada gota a gota com n-butil lítio (2,5M em hexanos, 5,09 mL) para gerar uma solução amarelo claro que foi agitada a 0 °C durante 30 minutos e em seguida resfriada para -78 °C e tratada gota a gota com isobutirato de etila (1,55 mL). A solução foi agitada a -78 °C durante 45 minutos em seguida uma solução de 2-(5-bromopentilóxi)tetra-hidro-2H-pirano (exemplo 285, etapa a) (3,20 g) em THF seco (1 mL) foi adicionada gota a gota. A mistura reacional foi agitada a -78 °C durante 10 minutos em seguida foi deixada aquecer para a temperatura ambiente durante a noite. A mistura reacional foi resfriada para 0 °C em seguida tratados com solução de cloreto de amônio aquosa saturada (3 mL) e extraída com acetato de etila. A fase aquosa foi extraída com acetato de etila (x 2) e a fase orgânica combinada foi lavada com água, solução de bicarbonato de sódio aquoso saturado e salmoura em seguida secada sobre sulfato de sódio, filtrada e evaporada. A purificação foi por cromatografia de sílicagel eluindo com 0 a 5% de acetato de etila em ciclo-hexano para fornecer o composto do subtítulo como líquido incolor. Produção 2,22 g.
[001685] 1H RMN (400 MHz, CDCh): δ 4,59-4,55 (m, 1H); 4,11 (q, J =
7,1 Hz, 2H); 3,90-3,82 (m, 1H); 3,72 (dt, J = 9,6, 6,8 Hz, 1H); 3,53-3,45 (m, 1H); 3,37 (dt, J = 9,6, 6,6 Hz, 1H); 1,88-1,77 (m, 1H); 1,75-1,67 (m, 1H); 1,64-1,48 (m, 8H); 1,40-1,30 (m, 2H); 1,29-1,20 (m, 5H); 1,15 (s,
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6H).
c) 2,2-Dimetil-7-(tetra-hidro-2H-piran-2-ilóxi)heptan-1-ol
[001686] Uma solução de 2,2-dimetil-7-(tetra-hidro-2H-piran-2ilóxi)heptanoato de etila (exemplo 285, etapa b) (2,22 g) em éter seco(22 mL) a 0°C sob nitrogênio, foi tratada gota a gota durante 5 minutos com hidreto de di-isobutilalumínio (1M em tolueno, 17,1 mL). Após 1 hora a 0°C a mistura reacional foi tratada cautelosamente com tartarato de sódio de potássio aquoso, diluída com éter e a mistura resultante foi agitada vigorosamente durante 1,5 hora. As fases foram separadas e a fase aquosa foi extraída com éter (x 2). A fase orgânica combinada foi lavada com água e salmoura, secadas sobre sulfato de magnésio, filtradas e evaporadas. A purificação foi por cromatografia de sílica-gel eluindo com 0 a 50% de acetato de etila em ciclo-hexano para fornecer o composto do subtítulo como um óleo incolor. Produção de 1,83 g.
[001687] 1H RMN (400 MHz, CDCh): δ 4,58-4,55 (m, 1H); 3,91-3,83 (m, 1H); 3,77-3,69 (m, 1H); 3,53-3,46 (m, 1H); 3,39 (dt, J = 9,6, 6,6 Hz, 1H); 3,31 (d, J = 4,1 Hz, 2H); 1,90-1,78 (m, 1H); 1,76-1,64 (m, 1H);
1,64-1,48 (m, 4H); 1,40-1,20 (m, 8H); 0,86 (s, 6H) mais um trocável não observado.
d) 4,4-Dimetil-9-(tetra-hidro-2H-piran-2-ilóxi)non-2-enoato de (E)etila.
[001688] Uma solução de cloreto de oxalila (0,78 mL) em DCM seco (20 mL) a -78°C foi tratada gota a gota com uma solução de DMSO (1,26 mL) em DCM (0,3 mL). Após 15 minutos uma solução de 2,2dimetil-7-(tetra-hidro-2H-piran-2-ilóxi)heptan-1-ol (exemplo 285, etapa
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c) (1,73 g) em DCM (10 mL) foi adicionada gota a gota e a agitação continuada durante 15 minutos antes da adição de trietilamina (4,93 mL) gota a gota. O banho de resfriamento foi removido e a reação deixada aquecer para temperatura ambiente. Após 1 hora a mistura reacional foi tratada com solução de cloreto de amônio aquosa saturada e as camadas foram separadas. A fase aquosa foi extraída com DCM (x 2) e os orgânicos combinados foram lavados com salmoura, secadas sobre sulfato de magnésio, filtradas e evaporadas para fornecer o aldeído cru. Isto foi apreendido em DCM, lavado com água, secado sobre sulfato de magnésio, filtrado e evaporado para fornecer o aldeído como um óleo incolor, que foi usado diretamente.
[001689] Uma solução de fosfonoacetato de trietila (1,62 mL) em acetonitrila (8 mL) foi tratada com cloreto de lítio (0,43 g) e em seguida resfriada para 0 °C e trietilamina (1,23 mL) adicionado gota a gota como uma solução em acetonitrila (2,5 mL). A mistura reacional foi agitada a 0°C durante 15 minutos em seguida uma solução de 2,2-dimetil7-(tetra-hidro-piran-2-ilóxi)-heptanal (1,65 g) em acetonitrila (6 mL) foi adicionado. A mistura resultante foi deixada aquecer para temperatura ambiente e foi agitada durante 3 horas antes de tratamento com solução de cloreto de amônio aquoso saturada, éter e água. As camadas foram separadas e a fase aquosa foi extraída com éter (x 2) e os orgânicos combinados foram lavados com salmoura, secados sobre sulfato de magnésio, filtrados e evaporados para fornecer o produto bruto. A purificação foi por cromatografia de sílica-gel eluindo com 0 a 40% de acetato de etila em ciclo-hexano para fornecer o composto do subtítulo como um óleo incolor. Produção de 0,89 g.
[001690] 1H RMN (400 MHz, CDCh): δ 6,91 (d, J = 15,9 Hz, 1H); 5,71 (dd, J = 15,9, 1,9 Hz, 1H); 4,59-4,55 (m, 1H); 4,19 (q, J = 7,1 Hz, 2H);
3,90-3,82 (m, 1H); 3,76 - 3,68 (m, 1H); 3,53-3,46 (m, 1H); 3,40-3,33 (m, 1H); 1,89-1,77 (m, 1H); 1,76-1,66 (m, 1H); 1,64-1,48 (m, 6H); 1,39 -
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1,19 (m, 9H); 1,05-1,03 (m, 6H).
e) 4,4-Dimetil-9-(tetra-hidro-2H-piran-2-ilóxi)nonanoato de etila.
[001691] Uma solução de (E)-etil 4,4-dimetil-9-(tetra-hidro-2H-piran2-ilóxi)non-2-enoato de (E)-etila (exemplo 285, etapa d) (0,89 g) em IMS (álcool metilado industrial) (10 mL) foi tratada com paládio sobre carbono (spatula tip) sob nitrogênio, em seguida o frasco foi purgado com hidrogênio (x 3) e em seguida agitada sob uma atmosfera de hidrogênio durante a noite. Uma outra porção de paládio sobre carbono foi adicionada e hidrogenação reassumida durante mais 24 horas. O catalisador foi removido por filtração através de terra diatomácea e o filtrado foi evaporada para fornecer o composto do subtítulo como um óleo incolor. Produção de 0,86 g.
[001692] 1H RMN (400 MHz, CDCh): δ 4,59-4,56 (m, 1H); 4,12 (q, J =
7,1 Hz, 2H); 3,90-3,83 (m, 1H); 3,75 - 3,68 (m, 1H); 3,53-3,46 (m, 1H); 3,41-3,34 (m, 1H); 2,26-2,19 (m, 2H); 1,88 - 1,79 (m, 2H); 1,76-1,66 (m, 2H); 1,66-1,43 (m, 6H); 1,40-1,14 (m, 9H); 0,84 (s, 6H).
f) 9-Hidróxi-4,4-dimetilnonanoato de etila
OH
O [001693] A uma solução de 4,4-dimetil-9-(tetra-hidro-2H-piran-2ilóxi)nonanoato de etila (exemplo 285, etapa e) (0,86 g) em metanol (10 mL) foi adicionado monoidrato de ácido p-toluenossulfônico (52 mg) e a mistura reacional foi agitada em temperatura ambiente durante 2 horas. A mistura foi diluída com acetato de etila e água e as fases separadas. A camada aquosa foi extraída com acetato de etila (x 2) e a fase orgânica combinada foi lavada com ácido cítrico a 10%, solução de bicarbonato de sódio aquoso saturado e salmoura em seguida secada sobre sulfato de magnésio, filtrada e evaporada. A purificação foi
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619/638 por cromatografia de sílica-gel eluindo com 0-50% de acetato de etila em ciclo-hexano para fornecer o composto do subtítulo como óleo incolor. Produção de 0,44 g.
[001694] 1H RMN (400 MHz, CDCh): δ 4,12 (q, J = 7,1 Hz, 2H); 3,67-
3,61 (t, J = 6,4 Hz, 2H); 2,28-2,20 (m, 2H); 1,61-1,50 (m, 4H); 1,49-
1,37 (m, 1H); 1,38-1,22 (m, 7H); 1,21-1,12 (m, 2H); 0,85 (s, 6H).
g) 9-Bromo-4,4-dimetilnonanoato de etila
[001695] Uma solução de 9-hidróxi-4,4-dimetilnonanoato de etila (exemplo 285, etapa f) (0,44 g) em DCM (19 mL) a 0°C foi tratada com tetrabrometo de carbono (0,76 g) seguida por trifenilfosfina (0,60 g) e a mistura reacional foi agitada em temperatura ambiente durante a noite. Outras quantidades de tetrabrometo de carbono (0,76 g) e trifenilfosfina (0,60 g) foram adicionadas e a agitação continuada durante 3 horas. O solvente foi removido por evaporação em seguida a mistura foi triturado com ciclo-hexano e o sólido resultante removido por filtração. O sólido foi lavado com ciclo-hexano e o filtrado foi concentrado para cerca de 15 mL e deixado descansar durante a noite. O sólido que surgiu da solução foi removido por filtração, lavado com ciclo-hexano e o filtrado foi evaporado para fornecer o composto do subtítulo como um óleo marrom pálido. Produção 0,56 g.
[001696] 1H RMN (300 MHz, CDCh): δ 4,12 (q, J = 7,1 Hz, 2H); 3,41 (t, J = 6,8 Hz, 2H); 2,28-2,20 (m, 2H); 1,93-1,80 (m, 2H); 1,59-1,49 (m, 2H); 1,46-1,34 (m, 2H); 1,32-1,21 (m, 5H); 1,22-1,13 (m, 2H); 0,85 (s, 6H).
h) 9-Bromo-4,4-dimetilnonan-1-ol [001697] Uma solução de 9-bromo-4,4-dimetilnonanoato de etila (exemplo 285, etapa g) (0,56 g) em éter seco (19 mL) sob nitrogênio a
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0°C foi tratada com hidreto de di-isobutilalumínio (1M em tolueno, 4,20 mL) e a mistura reacional foi agitada a 0°C durante 1 hora e 15 minutos. A mistura reacional foi tratada cautelosamente com solução de tartarato de sódio de potássio aquosa e agitada durante 1 hora. As fases foram separadas e a camada aquosa foi extraída com éter (x 2), em seguida a fase orgânica combinada foi lavada com salmoura, secada sobre sulfato de magnésio, filtrada e evaporada para fornecer o composto do subtítulo como um óleo incolor. Produção de 0,42 g. [001698] 1H RMN (400 MHz, CDCh): δ 3,62 (t, J = 6,7 Hz, 2H); 3,41 (t, J = 6,9 Hz, 2H); 1,91 - 1,82 (m, 2H); 1,55-1,45 (m, 2H); 1,46-1,35 (m, 2H); 1,30-1,15 (m, 6H); 0,85 (s, 6H) mais um trocável não observado.
i) (9-(9-hidróxi-6,6-dimetilnonil)-1 -oxa-4,9-diazaespiro[5,5] undecan-4-il)(2-isopropiltiazol-4-il)metanona
HO [001699] Ditrifluoroacetato de (2-isopropil-tiazol-4-il)-(1-oxa-4,9diaza-spiro[5,5]undec-4-il)-metanona (Exemplo 22, etapa b) (0,40 g) foi aplicado a um cartucho SCX-2 umedecido com metanol, lavado com metanol, em seguida eluído usando amônia a 2N em metanol e evaporado para fornecer a base livre (227 mg). Este material foi tratado com 9-bromo-4,4-dimetilnonan-1-ol (exemplo 285, etapa h) (0,11 g) em acetonitrila (8,8 mL) seguida por trietilamina (0,20 mL). A mistura foi aquecida a 60°C durante 21 horas, em seguida o solvente foi removido por evaporação. A purificação foi por cromatografia de sílica-gel eluindo com 75% de acetato de etila em ciclo-hexano com 5% de trietilamina, até 100% de acetato de etila mais 5% de trietilamina para fornecer o composto do subtítulo como uma goma incolor. Produção de 0,295
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g.
[001700] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO): δ 8,00 (s, 1H); 4,35-4,30 (m,
1H); 3,76-3,45 (m, 6H); 3,37-3,28 (m, 1H); 2,41-2,03 (m, 6H); 1,72-1,58 (m, 2H); 1,57 - 1,44 (m, 2H); 1,43-1,28 (m, 10H); 1,27-1,05 (m, 9H); 0,81 (s, 6H) mais um trocável não observado.
j) Formiato de (R)-4-hidróxi-7-(1-hidróxi-2-(9-(4-(2-isopropiltiazol-4carbonil)-1-oxa-4,9-diazaespiro[5,5]undecan-9-il)-4,4- dimetilnonilamino)etil)benzo[d]tiazol-2(3H)-ona
[001701] Uma solução de (9-(9-hidróxi-6,6-dimetilnonil)-1-oxa-4,9diazaespiro[5,5]undecan-4-il)(2-isopropiltiazol-4-il)metanona (exemplo 285, etapa i) (0,255 g) em DCM (5,3 mL) a 0°C sob nitrogênio foi tratada com ácido trifluoroacético (0,04 mL) e agitada durante 5 minutos em seguida periodinano Dess-Martin (0,339 g) foi adicionado. A solução foi agitada em temperatura ambiente durante 1 hora em seguida outra quantidade de Periodinano Dess-Martin (0,113 g) foi adicionado e a agitação continuada durante 30 minutos. A mistura reacional foi tratada com solução de tiossulfato de sódio saturada e solução de bicarbonato de sódio aquoso saturado (1:1), diluída com DCM e agitada durante 10 minutos. Acetato de etila foi adicionado e as fases foram separadas. A camada aquosa foi extraída com acetato de etila (x 2). Os orgânicos foram combinados, lavados com solução de bicarbonato de sódio aquoso saturado, em seguida secados sobre sulfato de magnésio em seguida ácido acético (0,046 mL) foi adicionado e a solução evaporada para fornecer o aldeído (0,362g). Isto foi suspenso em metanol seco (9 mL) e tratado com cloridrato de (R)-7-(2-amino-1hidroxietil)-4-hidroxibenzo[d]tiazol-2(3H)-ona (WO 2007027134, exem
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622/638 plo 1, etapa d) (0,210 g), peneiras moleculares 3Â e ácido acético (0,046 mL) e a mistura agitada durante 5 minutos. A mistura reacional foi resfriada para 0°C e triacetoxiboroidreto de sódio (113 mg) foi adicionado e agitação continuada em temperatura ambiente durante 24 horas. A mistura foi filtrada, em seguida concentrada sob vácuo. A purificação foi por cromatografia de sílica-gel eluindo com 5, 6, 7, 8, 9, 10 e 12% de uma solução de amônia aquosa a 10% de metanol) em DCM seguida por HPLC preparativa (Phenomenex Gemini®, gradiente: 540% de acetonitrila em 0,1% de ácido fórmico aquoso). As frações contendo produto foram combinadas e secadas por congelamento para fornecer o composto do título como um sólido branco. Produção de 0,024 g.
[001702] m/z 688 (M+H)+ [001703] 1H RMN (400 MHz, D6-DMSO, 80°C): δ 8,26-8,13 (m, 1H);
7,89 (s, 1H); 6,87 (d, J = 8,3 Hz, 1H); 6,69 (d, J = 8,3 Hz, 1H); 4,61-
4,53 (m, 1H); 3,69 - 3,63 (m, 6H); 3,37-3,24 (m, 1H); 2,76-2,66 (m, 2H);
2,59-2,50 (m, 2H); 2,40-2,31 (m, 2H); 2,31-2,20 (m, 4H); 1,72-1,63 (m, 2H); 1,58-1,47 (m, 2H); 1,44-1,29 (m, 10H); 1,29-1,09 (m, 8H); 0,80 (s, 6H) mais quatro trocáveis não observados.
[001704] Os compostos da invenção podem ser testados quanto à atividade farmacêutica usando ensaios conhecidos na técnica, tal como por exemplo:
Ensaio para produção de cAMP mediado por 82 adrenérgico Preparação celular [001705] As células H292 são cultivadas em incubadora de frascos de 225 cm2 a 37°C, CO2 a 5% em meio de RPMI contendo FBS (soro bovino fetal) a 10% (v/v) e L-glutamina a 2 mM.
Método Experimental [001706] Células H292 aderentes são removidas de frascos de cultura de tecido por tratamento com solução de separação celular Accu
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623/638 tase® durante 15 minutos. Os frascos são incubados durante 15 minutos em uma incubadorda umidificada a 37°C, CO2 a 5%. As células separadas são ressuspensas em meios RPMI (contendo FBS a 10% (v/v) e L-glutamina a 2 mM) a 0,1 x 106 de células por mL. 10.000 células em 100 pL são adicionadas a cada cavidade de uma placa de 96 cavidades tratada com cultura de tecido e as células incubadas durante a noite em uma incubadora umidificada a 37°C, CO2 a 5%. Os meios de cultura são removidos e as células são lavadas duas vezes com 100 pL de tampão de ensaio e substituído com 50 pL de tampão de ensaio (solução de HBSS contendo HEPES a 10 mM pH 7,4 e glucose a 5 mM). As células são descansadas em temperatura ambiente durante 20 minutos após cujo tempo, são adicionados 25 pL de rolipram (1,2 mM preparados em tampão de ensaio contendo 2,4% (v/v) de dimetilsulfóxido). As células são incubadas com rolipram durante 10 minutos, após cujo tempo são adicionados os compostos de teste e as células são incubadas durante 60 minutos em temperatura ambiente. A concentração final de rolipram no ensaio é de 300 pM e a concentração final de veículo é de 1% (v/v) de dimetilsulfóxido. A reação é interrompida removendo-se os sobrenadantes, lavando uma vez com 100 pL de tampão de ensaio e substituindo com 50 pL de tampão de lise. A monocamada celular é congelada a -80°C durante 30 minutos (ou durante a noite).
Detecção de cAMP de AlphaScreen® [001707] A concentração de cAMP (monofosfato de adenosina cíclica) no lisado celular é determinada usando a metodologia AlphaScreen®. A placa celular congelada é descongelada durante 20 minutos sobre uma agitadora de placa, em seguida 10 pL do lisado celular são transferidos para uma placa branca de 96 cavidades. 40 pL de contas de detecção AlphaScreen® mistas pré-incubadas com cAMP biotinilado, são adicionados a cada cavidade e a placa incubada em tempera
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624/638 tura ambiente durante 3 horas no escuro. O sinal de AlphaScreen® é medido usando um espectrofotômetro EnVision (Perkin-Elmer Inc.) com os parâmetros do frabricante recomendados. As concentrações de cAMP são determinadas por referência a uma curva de calibração determinada no mesmo experimento usando concentrações de cAMP padrão. As curvas de resposta de concentração para agonistas são construídas e os dados são ajustados para uma equação logística de parâmetro quatro para determinar tanto a PEC50 quanto a Atividade Intrínsica. A atividade intrínsica é expressa como uma fração relativa à atividade máxima determinada para formoterol em cada experimento. Ensaio de ligação de receptor 3 muscarínico [001708] A afinidade (pIC50) de ligação de compostos ao receptor M3 é determinada por ligação de competição de escopolamina de [3H]Nmetila (NMS) às membranas de célula CHO-K1 (Ovário de Hamster Chinês) expressando o receptor M3 de acetilcolina muscarínico humano (M3-ACh) em um formato de ensaio de proximidade de cintilação (SPA).
[001709] As contas SPA são pré-revestidas com membranas e em seguida incubadas a 2 mg de contas por cavidade com diluições seriais de compostos da invenção, [3H]NMS a 0,1nM, um quarto de Kd (constante de dissociação experimentalmente determinada) e o tampão de ensaio (20 mM de HEPES pH 7,4 contendo 5 mM de MgCl2). O ensaio é conduzido em um volume final de 200 pL, na presença de 1% (v/v) sulfóxido de dimetila (DMSO). Ligação total de [3H]NMS é determinada na ausência de composto de competição e ligação não específica de [3H]NMS é determinada na presença de 1 μΙΜ atropina. As placas são incubadas durante 16 horas em temperatura ambiente e em seguida lidas em Wallac Microbeta® usando um protocolo 3H normalizado. A pIC50, definida como o logaritmo negativo da concentração molar de composto requerida para 50% de redução em ligação de [3H]Petição 870190058499, de 25/06/2019, pág. 630/650
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NMS específica, é determinada.
[001710] Os compostos da invenção foram testados nos ensaios acima e os seguintes resultados obtidos:
Exemplo n° |
B2 pECõü (atividade intrínsica) |
pIC50 de M3 |
1 |
7,2 (0,8) |
8,5 |
2 |
7,9 (0,8) |
9,5 |
3 |
8,1 (1,0) |
9 |
4 |
7,8 (0,9) |
8,9 |
5 |
7,1 (0,9) |
8,6 |
6 |
8,4 (0,9) |
9,5 |
7 |
8,2 (0,8) |
9,3 |
8 |
7,4 (1,0) |
8,4 |
9 |
8,3 (0,9) |
8,7 |
Exemplo número |
pEC50 β2 |
atividade intrínsica β2 |
pIC50 de M3 |
10 |
6,5 |
0,9 |
8,3 |
11 |
8,8 |
0,8 |
10 |
12 |
8 |
1 |
9 |
13 |
7,4 |
0,8 |
10,1 |
14 |
8,3 |
0,9 |
8,2 |
15 |
8,6 |
0,9 |
8,9 |
16 |
7,8 |
0,9 |
8,1 |
17 |
7,3 |
0,5 |
7,3 |
18 |
7,2 |
1 |
8,6 |
19 |
8,5 |
0,9 |
8,8 |
20 |
6,7 |
0,8 |
7,5 |
21 |
6,7 |
0,5 |
9 |
22 |
8 |
0,9 |
9,9 |
23 |
7,8 |
0,9 |
9,6 |
24 |
8,3 |
1 |
7,6 |
Petição 870190058499, de 25/06/2019, pág. 631/650
626/638
Exemplo número |
pECsü β2 |
atividade intrínsica β2 |
pIC50 de M3 |
25 |
7,8 |
0,8 |
9 |
26 |
7,9 |
0,8 |
9,2 |
27 |
8,9 |
1 |
8,6 |
28 |
8 |
1 |
8,6 |
29 |
8,8 |
1 |
8,4 |
30 |
8,6 |
0,9 |
7,8 |
31 |
8,3 |
0,9 |
7,2 |
32 |
8,5 |
1,1 |
7,4 |
33 |
8,2 |
1 |
7,9 |
34 |
8,5 |
1 |
7,7 |
35 |
7,9 |
1 |
7,6 |
36 |
8,2 |
1 |
9,3 |
37 |
8,5 |
0,9 |
8,5 |
38 |
7,7 |
0,8 |
8,6 |
39 |
7 |
0,9 |
9,5 |
40 |
7,9 |
1,1 |
9,4 |
41 |
8,2 |
1,1 |
6,9 |
42 |
8,1 |
1 |
9,2 |
43 |
8,3 |
0,8 |
7,4 |
44 |
8,6 |
1 |
8,5 |
45 |
8 |
0,8 |
8,3 |
46 |
7,1 |
1 |
8,2 |
47 |
7,8 |
0,9 |
9,3 |
48 |
8,3 |
0,9 |
9,1 |
49 |
8,1 |
0,9 |
7,4 |
50 |
8,1 |
0,9 |
7,4 |
51 |
8,5 |
0,9 |
7,8 |
52 |
8,3 |
0,9 |
8,1 |
53 |
8 |
1 |
7,9 |
Petição 870190058499, de 25/06/2019, pág. 632/650
627/638
Exemplo número |
pECsü β2 |
atividade intrínsica β2 |
pIC50 de M3 |
54 |
8,2 |
0,9 |
6,7 |
55 |
8,2 |
1 |
7,2 |
56 |
8,1 |
1 |
8,6 |
57 |
8,2 |
1,1 |
9,1 |
58 |
8 |
0,9 |
8,2 |
59 |
7,8 |
1 |
8,1 |
60 |
8,3 |
1 |
8,4 |
61 |
7,2 |
0,9 |
8,3 |
62 |
6,6 |
0,9 |
6,6 |
63 |
8,3 |
1 |
<6 |
64 |
7,3 |
0,9 |
9,7 |
65 |
7 |
0,9 |
9,2 |
66 |
7,8 |
0,9 |
9,1 |
67 |
7,8 |
0,9 |
8,5 |
68 |
8,2 |
0,8 |
7,6 |
69 |
7,8 |
0,9 |
7,7 |
70 |
8,1 |
0,8 |
8,5 |
71 |
7,7 |
0,8 |
8,3 |
72 |
8,1 |
0,8 |
8 |
73 |
8,1 |
0,9 |
8,1 |
74 |
7,9 |
0,9 |
7,7 |
75 |
7,6 |
0,8 |
8,7 |
76 |
7,5 |
0,9 |
8,7 |
77 |
7,1 |
1 |
8,6 |
78 |
7,8 |
0,9 |
8 |
79 |
8,2 |
0,9 |
6,9 |
80 |
8,2 |
0,8 |
8,3 |
81 |
8,1 |
0,7 |
8,2 |
82 |
8,4 |
0,9 |
9,4 |
Petição 870190058499, de 25/06/2019, pág. 633/650
628/638
Exemplo número |
pECsü β2 |
atividade intrínsica β2 |
pIC50 de M3 |
83 |
7,9 |
0,8 |
9,3 |
84 |
8,3 |
0,9 |
9,1 |
85 |
8,1 |
0,8 |
7,3 |
86 |
8,6 |
0,8 |
9,8 |
87 |
8,5 |
0,9 |
9,3 |
88 |
7,9 |
1 |
8,7 |
89 |
8,8 |
1 |
7,5 |
90 |
6,7 |
0,9 |
7,1 |
91 |
8,9 |
0,7 |
8,7 |
92 |
6,1 |
0,9 |
6,9 |
93 |
8,6 |
0,8 |
8,6 |
94 |
5,9 |
0,7 |
7,9 |
95 |
NV* |
NV* |
8,8 |
96 |
NV* |
NV* |
9,6 |
97 |
<5,5 |
1,5 |
8,2 |
98 |
5,7 |
0,4 |
8,9 |
99 |
8,1 |
0,8 |
8,8 |
100 |
8,3 |
0,9 |
8,8 |
101 |
6,8 |
1 |
9,5 |
102 |
6,7 |
0,9 |
9 |
103 |
6,6 |
1 |
9 |
104 |
7,1 |
0,9 |
8,5 |
105 |
7,8 |
0,8 |
9,9 |
106 |
7 |
0,8 |
6,7 |
107 |
7,4 |
0,9 |
8,2 |
108 |
6,9 |
0,9 |
8,4 |
109 |
8,1 |
0,9 |
9,7 |
110 |
7,2 |
0,8 |
7,7 |
111 |
7,5 |
0,8 |
9,1 |
Petição 870190058499, de 25/06/2019, pág. 634/650
629/638
Exemplo número |
pECsü β2 |
atividade intrínsica β2 |
pIC50 de M3 |
112 |
6,9 |
0,9 |
6,3 |
113 |
7,7 |
0,8 |
7,7 |
114 |
7,2 |
0,9 |
6,5 |
115 |
8,2 |
0,8 |
8,1 |
118 |
8,2 |
1 |
7,7 |
124 |
8,4 |
0,9 |
7,9 |
130 |
7,9 |
1 |
7,1 |
141 |
8,2 |
0,9 |
7,6 |
149 |
8,1 |
0,9 |
7,6 |
173 |
8,6 |
0,8 |
8,1 |
178 |
8,3 |
0,8 |
7,5 |
190 |
7,9 |
0,9 |
8,7 |
198 |
7,9 |
0,8 |
8,5 |
201 |
7,5 |
0,9 |
8,2 |
202 |
7,7 |
0,9 |
8,1 |
209 |
7,6 |
0,9 |
8,7 |
210 |
7,8 |
0,8 |
8,1 |
213 |
7,9 |
0,8 |
9,1 |
217 |
7,4 |
0,9 |
9,2 |
218 |
7,6 |
0,9 |
9,4 |
219 |
7,3 |
0,8 |
9 |
220 |
7,6 |
0,8 |
9,2 |
221 |
7,5 |
0,9 |
8,9 |
259 |
6,7 |
0,9 |
8,3 |
264 |
7,7 |
1 |
8,1 |
265 |
7,9 |
1 |
9,1 |
266 |
8,1 |
0,7 |
9,5 |
267 |
8 |
0,9 |
8,8 |
268 |
8 |
1 |
8,8 |
Petição 870190058499, de 25/06/2019, pág. 635/650
630/638
Exemplo número |
pEC50 β2 |
atividade intrínsica β2 |
pIC50 de M3 |
269 |
7,5 |
1,1 |
8,2 |
270 |
6,6 |
0,7 |
7,1 |
271 |
8,2 |
1 |
30% inibição a
1 liM |
272 |
8 |
1 |
6,1 |
273 |
6,4 |
0,5 |
7,1 |
274 |
7,6 |
1,0 |
8,6 |
275 |
7,3 |
1 |
8,8 |
276 |
7,4 |
1 |
8,7 |
277 |
7,5 |
0,9 |
10 |
278 |
8,4 |
1,0 |
9,4 |
279 |
6,5 |
0,9 |
8,1 |
280 |
8,3 |
1,2 |
9,1 |
281 |
7,5 |
0,8 |
8,8 |
282 |
7,3 |
1 |
7,7 |
283 |
7,1 |
1,1 |
8,9 |
284 |
7,9 |
0,9 |
8,7 |
285 |
7,8 |
1 |
8,4 |
NV* = inativo até uma concentração máxima de 3,2 μΜ de composto teste.
[001711] O seguinte procedimento experimental foi usado para medir o % de efeito de beta-2 a ^M para os compostos de exemplos 116 a 263.
Produção de cAMP mediada por β2 adrenérgico
Preparação celular [001712] Células H292 são cultivadas em incubadora de frascos de 225 cm2 a 37°C, CO2 a 5% em meio RPMI contendo FBS a 10% (v/v) (soro bovino fetal) e 2 mM de L-glutamina.
Método Experimental
Petição 870190058499, de 25/06/2019, pág. 636/650
631/638 [001713] Compostos foram preparados por uma primeira diluição inicial em DMSO para fornecer concentração de estoque a 1 mM. Isto foi seguido por uma diluição de 1 em 10 da concentração de estoque (10 μΙ de composto de estoque + 90 μΙ de DMSO) para fornecer o composto a 0,1 mM.
[001714] Uma placa de adição de composto foi preparada fazendose uma outra diluição de 1 em 25 em tampão de ensaio (solução de HBSS contendo HEPES a 10 mM, pH 7,4 e glicose a 5 mM) contendo dimetilsulfóxido a 4%. A concentração final do composto em ensaio é de 1 μM.
[001715] As células H292 aderentes são removidas dos frascos de cultura de tecido por tratamento com solução de separação celular AccutaseTM durante 15 minutos. Os frascos são incubados durante 15 minutos em uma incubadora umidificada a 37°C, CO2 a 5%. As células separadas são ressuspensas em meios RPMI (contendo FBS a 10% (v/v) e L-glutamina a 2 mM) a 0,1 x 106 células por mL. 10.000 células em 100 pL são adicionadas a cada cavidade de uma placa de 96 cavidades de cultura de tecido e as células incubadas durante a noite em uma incubdora umidificada a 37°C, CO2 a 5%. Os meios de cultura são removidos e as células são lavadas duas vezes com 100 pL de tampão de ensaio e substituídas com 50 pL de tampão de ensaio (solução HBSS contendo HEPES a 10 mM, pH7,4 e glicose a 5 mM). As células são descansadas em temperatura ambiente durante 20 minutos, tempo após o qual 25 pL de rolipram (1,2 mM preparados em tampão de ensaio) são adicionados. As células são incubadas com rolipram durante 10 minutos, tempo após o qual 25 μl de composto teste são adicionados e as células são incubadas durante 60 minutos em temperatura ambiente. A concentração final de rolipram no ensaio é de 300 pM e a concentração final de veículo é de 1% (v/v) de dimetilsulfóxido. A reação foi interrompida removendo-se os sobrenadantes, lavando-se
Petição 870190058499, de 25/06/2019, pág. 637/650
632/638 uma vez com 100 pL de tampão de ensaio e substituindo com 50 pL de tampão de lise. A monocamada celular é congelada a -80 °C durante 30 minutos (ou durante a noite).
Detecção de cAMP AlphaScreen® [001716] A concentração de cAMP (monofosfato de adenosina cíclica) no lisado celular é determinada usando metodologia AlphaScreen®. A placa congelada é descongelada durante 20 minutos em uma agitadora de placa, em seguida 10 pL do lisado celular são transferidos para uma placa branca de 96 cavidades. 40 pL de contas de detecção AlphaScreen® mistas contendo volumes iguais de contas doadoras (pré-incubadas com cAMP biotinilado no escuro durante 30 minutos) e contas aceptoras são adicionados a cada cavidade e a placa incubada em temperatura ambiente durante 3 horas no escuro. O sinal de AlphaScreen® é medido usando um espectrofotômetro EnVision (PerkinElmer Inc.) com os parâmetros do fabricante recomendados. A concentração de cAMP produzida por cavidade foi calculada com referência à curva-padrão de cAMP determinada no mesmo experimento e expressa como uma percentagem da resposta máxima gerada por 1E07M formoterol.
[001717] O seguinte procedimento experimental foi usado para determinar a inibição percentual de M3 a 1 μΜ dos compostos de Exemplos 116-263.
Ensaio de ligação de receptor 3 muscarínico [001718] A atividade (% ligação específica de inibição) de compostos - sobre o receptor M3 é determinada por ligação de competição de escopolamina de [3H]N-metila (NMS) às membranas de célula CHO-K1 (Ovário de Hamster Chinês) expressando o receptor M3 de acetilcolina muscarínico humano (M3-ACh) em um formato de ensaio de proximidade por cintilação (SPA).
[001719] As contas de SPA são pré-revestidas com membranas e
Petição 870190058499, de 25/06/2019, pág. 638/650
633/638 em seguida incubadas a 2 mg de contas por cavidade com 1 μΜ de composto da invenção, [3H]NMS a 0,1 nM, um quarto de Kd (constante de dissociação experimentalmente determinada) e tampão de ensaio (20 mM de HEPES pH 7,4 contendo 5 mM de MgCb). O ensaio é conduzido em um volume final de 200 μΐ, na presença de 1% (v/v) sulfóxido de dimetila (DMSO). Ligação total de [3H]NMS é determinada na ausência de composto de competição e ligação não específica de [3H]NMS é determinada na presença de 1 μΜ atropina. As placas são incubadas durante 16 horas em temperatura ambiente e em seguida lidas em Wallac Microbeta® usando um protocolo 3H normalizado. É determinada a atividade do composto a 1 μΜ, definida com o % de inibição da ligação específica de [3H]-NMS.
Exemplo n° |
M3 (% de inibição a 1 μΜ) |
β2 (% de efeito a 1 μΜ) |
116 |
3 |
111 |
117 |
22 |
101 |
118 |
95 |
101 |
119 |
60 |
100 |
120 |
82 |
101 |
121 |
28 |
85 |
122 |
86 |
82 |
123 |
62 |
97 |
124 |
97 |
100 |
125 |
52 |
97 |
126 |
50 |
98 |
127 |
78 |
97 |
128 |
14 |
112 |
129 |
20 |
90 |
130 |
90 |
109 |
131 |
41 |
95 |
132 |
85 |
92 |
133 |
56 |
110 |
Petição 870190058499, de 25/06/2019, pág. 639/650
634/638
Exemplo n° |
M3 (% de inibição a 1 μΜ) |
β2 (% de efeito a 1 μΜ) |
134 |
4 |
116 |
135 |
1 |
106 |
136 |
26 |
111 |
137 |
13 |
112 |
138 |
27 |
92 |
139 |
34 |
101 |
140 |
76 |
109 |
141 |
91 |
105 |
142 |
-3 |
100 |
143 |
2 |
108 |
144 |
35 |
101 |
145 |
7 |
53 |
146 |
41 |
96 |
147 |
66 |
102 |
148 |
4 |
104 |
149 |
92 |
113 |
150 |
91 |
100 |
151 |
71 |
98 |
152 |
13 |
110 |
153 |
67 |
98 |
154 |
28 |
102 |
155 |
4 |
101 |
156 |
3 |
106 |
157 |
13 |
102 |
158 |
72 |
95 |
159 |
3 |
90 |
160 |
5 |
91 |
161 |
42 |
87 |
162 |
8 |
91 |
163 |
25 |
95 |
Petição 870190058499, de 25/06/2019, pág. 640/650
635/638
Exemplo n° |
M3 (% de inibição a 1 μΜ) |
β2 (% de efeito a 1 μΜ) |
164 |
35 |
99 |
165 |
11 |
89 |
166 |
69 |
95 |
167 |
8 |
100 |
168 |
29 |
95 |
169 |
-2 |
92 |
170 |
42 |
102 |
171 |
11 |
86 |
172 |
19 |
98 |
173 |
99 |
93 |
174 |
41 |
89 |
175 |
3 |
94 |
176 |
16 |
87 |
177 |
1 |
78 |
178 |
89 |
94 |
179 |
66 |
95 |
180 |
51 |
92 |
181 |
10 |
86 |
182 |
16 |
88 |
183 |
97 |
91 |
184 |
96 |
89 |
185 |
95 |
81 |
186 |
95 |
86 |
187 |
84 |
92 |
188 |
96 |
93 |
189 |
96 |
93 |
190 |
99 |
77 |
191 |
94 |
82 |
192 |
96 |
88 |
193 |
99 |
91 |
Petição 870190058499, de 25/06/2019, pág. 641/650
636/638
Exemplo n° |
M3 (% de inibição a 1 μΜ) |
β2 (% de efeito a 1 μΜ) |
194 |
85 |
92 |
195 |
88 |
86 |
196 |
95 |
89 |
197 |
97 |
78 |
198 |
99 |
82 |
199 |
91 |
91 |
200 |
70 |
92 |
201 |
98 |
105 |
202 |
99 |
98 |
203 |
94 |
99 |
204 |
97 |
101 |
205 |
91 |
85 |
206 |
95 |
95 |
207 |
94 |
101 |
208 |
88 |
98 |
209 |
99 |
84 |
210 |
95 |
92 |
211 |
68 |
91 |
212 |
88 |
93 |
213 |
99 |
87 |
214 |
91 |
82 |
215 |
94 |
89 |
216 |
90 |
88 |
217 |
100 |
103 |
218 |
100 |
95 |
219 |
99 |
92 |
220 |
100 |
109 |
221 |
99 |
93 |
222 |
91 |
87 |
223 |
56 |
87 |
Petição 870190058499, de 25/06/2019, pág. 642/650
637/638
Exemplo n° |
M3 (% de inibição a 1 μΜ) |
β2 (% de efeito a 1 μΜ) |
224 |
70 |
89 |
225 |
60 |
74 |
226 |
53 |
76 |
227 |
48 |
80 |
228 |
22 |
67 |
229 |
67 |
83 |
230 |
31 |
70 |
231 |
91 |
53 |
232 |
56 |
83 |
233 |
51 |
82 |
234 |
80 |
78 |
235 |
29 |
97 |
236 |
30 |
73 |
237 |
46 |
62 |
238 |
57 |
73 |
239 |
90 |
76 |
240 |
34 |
92 |
241 |
11 |
85 |
242 |
83 |
43 |
243 |
78 |
84 |
244 |
48 |
60 |
245 |
51 |
76 |
246 |
38 |
72 |
247 |
60 |
75 |
248 |
44 |
70 |
249 |
31 |
76 |
250 |
91 |
77 |
251 |
51 |
68 |
252 |
10 |
88 |
253 |
35 |
73 |
Petição 870190058499, de 25/06/2019, pág. 643/650
638/638
Exemplo n° |
M3 (% de inibição a 1 μΜ) |
β2 (% de efeito a 1 μΜ) |
254 |
92 |
71 |
255 |
32 |
66 |
256 |
38 |
76 |
257 |
36 |
56 |
258 |
96 |
55 |
259 |
99 |
68 |
260 |
93 |
56 |
261 |
90 |
70 |
262 |
82 |
69 |
263 |
37 |
74 |
Descrição das Figuras [001720] Figura 1: Padrão de difração de pó de raio-X de padrão de modificação A de sal de ácido di(1S)-(+)-10-canforsulfônico - Exemplo 47B.
[001721] Figura 2: Padrão de difração de pó de raio X de modificação A de sal de fumarato - Exemplo 47C.
[001722] Figura 3: Padrão de difração de pó de raio-X de modificação B de sal de fumarato - Exemplo 47D.