BRPI0708019A2 - ajuste do ph em um método de sepração de sangue total - Google Patents

Abstract

AJUSTE DO PH EM UM METODO DE SEPAR.AçAO DE SANGUE TOTAL. Esta invenção é dirigida a um método de coleta e à separação do sangue total em componentes. O método inclui as etapas de adição de um anticoagulante que possui um pH ácido a uma bolsa para a coleta e/ou separação do sangue total, coleta do sangue total na bolsa, carga da bolsa contendo sangue total anticoagulado em um rotor, rotação da bolsa no rotor para separar o sangue total em pelo menos um componente; e compressão da bolsa no rotor para impulsionar o componente da bolsa de separação para dentro de pelo menos uma bolsa satélite.

Description

AJUSTE DO PH EM UM MÉTODO DE SEPARAÇÃO DE SANGUE TOTALREFERÊNCIA CRUZADA COM PEDIDOS RELACIONADOS

Este pedido reivindica benefícios sob 35 U.S.C. 119(e)do Pedido Provisório de Patente U.S. N0 60/766.586,depositado em 30 de janeiro de 2006.

FUNDAMENTOS DA INVENÇÃO

Para transfusões de sangue e de componentessangüíneos, o sangue total é tipicamente separado em trêscomponentes: plasma, hemácias e plaquetas.

Tradicionalmente, há duas formas para se obter essescomponentes sangüíneos. Uma forma é a coleta de sanguetotal de doadores/pacientes e separá-lo em componentesmanualmente, em algum período de tempo após a coleta dosangue total. Utilizando-se esse método, o sangue total écoletado em recipientes aprovados pelo FDA (Food and DrugAdministra.tion: agência governamental americana que regulae fiscaliza a fabricação de comestíveis, drogas ecosméticos) que não contêm pirogênio e são estéreis, econtêm anticoagulante suficiente para a quantidade desangue a ser coletada. 0 sangue total que é coletado dessaforma é separado em componentes manualmente em umlaboratório por um técnico, e a separação tipicamenteocorre entre cerca de 2 e 8 horas após a coleta nos EstadosUnidos, e entre cerca de 2 a 24 horas na Europa.

Outra forma de separar o sangue total em componentes éa utilização de aférese ou dispositivos automatizados deseparação de células. Dispositivos de aférese separam osangue total em componentes automaticamente, e retornamtodos os componentes sangüíneos não coletados ao doadordurante o procedimento de coleta.Uma alternativa ao processamento manual de sanguetotal descrito acima é o processamento automático do sanguetotal coletado previamente com o uso de um dispositivoautomatizado de processamento de sangue total como, porexemplo, a máquina Atreus, fabricada por Gambro BCT, Inc.(Lakewood, CO, EUA).

No processamento do sangue total, (seja ele manual oupor uma máquina automatizada) e na aférese, a adição deanticoagulante ao sangue é necessária para evitar aformação de coágulos sangüíneos. No processamento manual dosangue total, o sangue é coletado de um doador/pacientediretamente em uma bolsa que contém uma soluçãoanticoagulante-conservante aprovada projetada tanto paraevitar a coagulação quanto para manter a viabilidade e afunção das células durante estocagem. No processamentomanual do sangue total, o sangue total é coletado emanticoagulante CPD (citrato-fosfato-dextrose).

No processamento de aférese, o anticoagulante ACDA(ácido-citrato-dextrose fórmula A) é adicionado ao sangueretirado de um doador/paciente no começo do procedimento decoleta.

A presente invenção se destina à coleta ótima deplaquetas e à leucorredução ótima de hemácias do sanguetotal processado em um dispositivo automatizado deprocessamento de sangue.

BREVE SUMÁRIO DA INVENÇÃO

Esta invenção se destina a um método de coleta eseparação do sangue total em componentes. 0 método incluias etapas de adição de um anticoagulante que possui um pHácido a uma bolsa para a coleta e/ou separação do sanguetotal, coleta do sangue total na bolsa, carga da bolsacontendo sangue total anticoagulado em um rotor, rotação dabolsa no rotor para separar o sangue total nos componentesdesejados; e compressão da bolsa no rotor para empurrar oscomponentes desejados da bolsa de separação para dentro dasbolsas satélites.

Esta invenção também inclui um método de leucorreduçãode hemácias separadas do sangue total coletado e estocadopreviamente. As etapas incluem a coleta do sangue total emanticoagulante CPD, a estocagem do sangue totalanticoagulado de um dia para o outro, a carga do sanguetotal anticoagulado em um rotor, a rotação do rotor paraseparar o sangue total estocado em pelo menos um componentede hemácias, e a compressão do sangue no rotor paraempurrar pelo menos o componente de hemácias para dentro deuma bolsa satélite, o aumento do pH do componente dehemácias separado na bolsa satélite, e a leucorredução docomponente de hemácias.

BREVE DESCRIÇÃO DOS DESENHOS

A Figura 1 é uma visão esquemática de um conjunto debolsas de separação e de coleta projetadas para cooperaçãocom um aparelho automatizado de separação de sangue total.

A Figura 2 é uma visão esquemática, parcialmente emcorte transversal, de um aparelho de separação de sanguetotal que pode ser usado com a presente invenção.

A Figura 3 é uma visão esquemática, parcialmente emcorte transversal, de um aparelho de separação de sanguetotal que pode ser usado com a presente invenção.

A Figura 4 é uma visão esquemática de outro conjuntode bolsas de separação e de coleta projetadas paracooperação com outro aparelho automatizado de separação desangue total.

A Figura 5 é uma visão esquemática, parcialmente emcorte transversal, de um aparelho de separação de sanguetotal que pode ser usado com a presente invenção.

A Figura 6 é uma visão superior do rotor do aparelhode separação da Fig. 5.

A Figura 7 é uma visão esquemática, em cortetransversal ao longo de um plano radial, de uma célula deseparação do aparelho de separação das Figs. 5-7.

DESCRIÇÃO DETALHADA DA INVENÇÃO

Esta invenção deve ser utilizada com dispositivosautomatizados de separação do sangue para a separação desangue total coletado em componentes. 0 sangue total podeser separado em componentes imediatamente após a coleta deum doador, ou pode ser separado em componentes do sanguetotal que foi previamente coletado de um doador."Previamente coletado" significa que o sangue total foicoletado de um doador algum período de tempo antes de osangue ser separado no dispositivo automatizado deseparação do sangue.

A FIG. 1 mostra um exemplo de um conjunto de bolsasadaptadas para a separação de sangue total em um componenteplasmático que compreende essencialmente plasma, umprimeiro componente de células sangüíneas compostoessencialmente por células mononucleares e plaquetas, e umsegundo componente de células sangüíneas compostoessencialmente por hemácias. Esse conjunto de bolsascompreende uma bolsa de separação flexível 1 e três bolsasde produto flexíveis 2, 3, 4 nela conectadas. A bolsa deseparação 1 compreende uma câmara de separação anular 5 quepossui uma borda externa substancialmente circular 6 e umaborda interna circular 7. A borda externa circular 6 e aborda interna circular 7 da câmara de separação 5 sãosubstancialmente concêntricas. A bolsa de separação 1 aindacompreende um elemento de conexão em forma de discosemiflexível 9 que está conectado à borda interna 7 dacâmara anular 5. O elemento de conexão em forma de disco 9compreende um canal de distribuição 10 nele incrustado, quese comunica através de uma passagem 11 com a câmara anular5. O canal de distribuição 10 se estende substancialmenteao longo de um arco de circulo. 0 elemento de conexão emforma de disco 9 compreende uma série de orifícios 12 parafixar a bolsa de separação 1 do rotor de uma centrifuga.

A primeira bolsa satélite 2 possui duas finalidades eé usada sucessivamente tanto como uma bolsa de coleta desangue quanto como uma bolsa do componente de célulasmononucleares/plaquetas. A primeira bolsa satélite sedestina a receber inicialmente um volume de sangue total deum doador (normalmente cerca de 450 ml) , antes do processode separação, e o componente de células

mononucleares/plaquetas durante o processo de separação. Aprimeira bolsa satélite 2 é plana, substancialmenteretangular, e compreende duas orelhas reforçadas em seuscantos superiores que possuem orifícios 13 para pendurar abolsa. Ela é conectada à bolsa de separação 1 por umprimeiro tubo de transferência 14, adaptado com umabraçadeira 15. O primeiro tubo de transferência 14 possuiuma primeira extremidade conectada à borda superior daprimeira bolsa satélite 2 e uma segunda extremidadeconectada a uma primeira extremidade do canal dedistribuição 10.

0 anticoagulante é adicionado à primeira bolsasatélite 2. Tipicamente, cerca de 63 ml de soluçãoanticoagulante são adicionados em uma doação de sangue decerca de 450 ml. 0 anticoagulante pode ser adicionado àprimeira bolsa satélite 2 antes de o sangue ser adicionado,ou pode ser acrescentado após o sangue ser adicionado. Umplugue 16 removível de dentro da primeira bolsa satélite 2(denominado "pino quebrável", por exemplo) bloqueia o fluxode líquido através do primeiro tubo de transferência 14, eevita que a solução anticoagulante flua da primeira bolsasatélite 2 para dentro da bolsa de separação 1.

Um tubo de coleta 17 é conectado em uma extremidade àborda superior da primeira bolsa satélite 2 e compreende,na outra extremidade, uma agulha protegida por uma bainha18. Um pino quebrável 19 removível de dentro da primeirabolsa satélite 2 obstrui a extremidade abaixo do tubo decoleta 17 e evita que a solução anticoagulante flua parafora da primeira bolsa satélite 2 através do tubo de coleta17 .

A segunda bolsa satélite 3 se destina a receber umcomponente plasmático. Ela é plana, substancialmenteretangular, e compreende duas orelhas reforçadas em seuscantos superiores com orifícios 13 para pendurar a bolsa.Ela é conectada por um segundo tubo de transferência 20 àbolsa de separação 1. O segundo tubo de transferência 20,que é adaptado com uma braçadeira 15, possui uma primeiraextremidade conectada à borda superior da segunda bolsasatélite 3 e uma segunda extremidade conectada a umasegunda extremidade do canal de distribuição 10.

A terceira bolsa satélite 4 se destina a receber umcomponente de hemácias. Ela é plana, substancialmenteretangular, e compreende duas orelhas reforçadas em seuscantos superiores com orifícios 13 para pendurar a bolsa.Ela é conectada por um terceiro tubo de transferência 21 àbolsa de separação 1. O terceiro tubo de transferência 21possui uma primeira extremidade conectada à borda superiorda terceira bolsa satélite 4 e uma segunda extremidade queé conectada ao canal de distribuição 10 para ficar voltadapara passagem 11 entre o canal de distribuição 10 e acâmara de separação 5. Ela compreende dois segmentosconectados respectivamente à entrada e à saída de um filtrode leucorredução 22. O segmento do tubo conectado à bolsade separação 1 está adaptado com uma braçadeira 15. Ofiltro 22 pode ser, por exemplo, um filtro do tipo RC2Dfabricado por Pall Corporation. Esse filtro compreende uminvólucro em forma de disco ao qual os acessos radiais deentrada e de saída são conectados, em oposição diametral. Aterceira bolsa satélite 4 contém um volume de solução deestocagem para hemácias. A solução de estocagem pode seradicionada à terceira bolsa satélite 4, antes ou depois deas células serem adicionadas. Um plugue 23 removível dedentro da terceira bolsa satélite 4 (denominado "pinoquebrável", por exemplo) bloqueia o fluxo de líquidoatravés do terceiro tubo de transferência 21 e evita que asolução de estocagem flua da terceira bolsa satélite 4 paradentro da bolsa de separação 1.

As FIGS. 2 e 3 mostram uma modalidade de um aparelhopara a separação de um volume de líquido composto porcentrifugação. O aparelho compreende uma centrífugaadaptada para receber as bolsas de separação mostrada nasfiguras, e um meio de transferência de componentes paraefetuar a transferência dos componentes separados para asbolsas satélites.

A centrífuga compreende um rotor que é apoiado por ummancai 3 0 que permite que o rotor gire em torno de um eixocentral vertical 31. O rotor compreende:

- uma haste cilíndrica do rotor 32, 33;

- um compartimento central 34 para conter as bolsassatélites, que está conectado à haste do rotor 32, 33 naextremidade superior deste;

- um membro de suporte 87 (não mostrado nas figuras 3e 4) para apoiar pelo menos uma bolsa satélite em umaposição determinada dentro do compartimento central 34; e

- uma plataforma giratória circular 35 para apoiar umabolsa de separação, que está conectada ao compartimento 34na extremidade superior deste, os eixos centrais da hastedo rotor 31, 32, o compartimento 34 e a plataformagiratória 35 coincidindo com o eixo de rotação 31.

A haste do rotor compreende uma primeira porçãosuperior 32 e uma segunda porção inferior 33. A porçãosuperior 32 da haste se estende, em parte, através domancai 30. Uma polia 36 está conectada à extremidadeinferior da porção superior 32 da haste.

A centrífuga ainda compreende um motor 40 acoplado aorotor por uma correia 41 engrenada em um sulco da polia 3 6a fim de girar o rotor em torno do eixo central vertical31.

O aparelho de separação ainda compreende uma primeira,segunda e terceira válvulas de estrangulamento 42, 43, 44(veja a FIG. 1) que são montadas no rotor para bloquear oupermitir seletivamente ou um fluxo de líquido através de umtubo plástico flexível, e lacram e cortam seletivamente umtubo plástico. Cada válvula de estrangulamento 42, 43, 44compreende um corpo cilíndrico alongado e um cabeçote quepossui um sulco que é definido por um mordente superiorfixo e um mordente inferior móvel entre uma posição abertae fechada, o sulco sendo dimensionado de forma que um dostubos de transferência 14, 20, 21 do conjunto de bolsasmostrado na FIG. 1 possa ser nele encaixado firmementequando o mordente inferior estiver na posição aberta. 0corpo alongado contém um mecanismo para movimentação domordente inferior e está conectado e um gerador deradiofreqüência que fornece a energia necessária paralacrar e cortar um tubo plástico. As válvulas deestrangulamento 42, 43, 44 são montadas na periferia docompartimento central 34 de modo que seus eixoslongitudinais estejam paralelos ao eixo central 31 dorotor, e seus cabeçotes façam protrusão acima da borda docompartimento 34. A posição das válvulas de estrangulamento42, 43, 44 com relação à bolsa de separação 1 e aos tubosde transferência 14, 20 a eles conectados quando a bolsa deseparação 1 está montada na plataforma giratória 35 émostrada nas linhas pontilhadas na FIG. 1. Energia elétricaé fornecida às válvulas de estrangulamento 42, 43, 44através de um anel de contato 45 que é montado em torno daporção inferior 33 da haste do rotor.

A plataforma giratória 35 compreende uma porçãotroncocônica central 46, cuja borda menor, superior, estáconectada à borda do compartimento 34, uma porção anularplana 4 7 conectada à borda maior, inferior, da porçãotroncocônica 46, e um rebordo externo cilíndrico 4 8 que seestende para cima a partir da periferia externa da porçãoanular 47. A plataforma giratória 35 ainda compreende atampa circular em abóbada 49 que é fixada ao rebordo 4 8 poruma dobradiça de forma a girar em torno de um eixo entreuma posição aberta e fechada. A tampa 49 é adaptada com umatrava 51 pela qual ela pode ser bloqueada na posiçãofechada. A tampa 49 compreende um grande recorte na suaparte superior que dá acesso ao compartimento central 34 dorotor. A tampa 49 possui uma superfície interior anular quetem um formato que, quando a tampa 49 está na posiçãofechada, ela define com a porção troncocônica 4 6 e com aporção anular plana 47 da plataforma giratória 38, umcompartimento anular troncocônico 53 que possui um cortetransversal radial que tem praticamente o formato de umparalelogramo. O compartimento anular troncocônico 53,daqui em diante o "compartimento de separação", se destinaa conter a bolsa de separação 1.

O meio de transferência de componentes compreende umsistema de compressão para comprimir a bolsa de separaçãodentro do compartimento de separação 53 e produzir atransferência de componentes separados para dentro dasbolsas satélites. O sistema de compressão compreende umdiafragma anular flexível 54 que possui um formato adequadopara se alinhar à porção troncocônica 46 e à porção anularplana 47 da plataforma giratória 35, à qual é fixado aolongo de suas bordas menores e maiores. O sistema decompressão ainda compreende a estação de bombeamentohidráulico 60 para bombear um líquido hidráulico paradentro e para fora de uma câmara hidráulica expansível 55definida entre o diafragma flexível 54 e a plataformagiratória 35, por meio de um duto 37 que se estende atravésdo rotor da extremidade inferior da porção inferior 33 dahaste do rotor até a plataforma giratória 35. A estação debombeamento 60 compreende uma bomba de pistão que possui umpistão 61 móvel em um cilindro hidráulico 62 conectado deforma fluida através de um acoplamento rotatório de fluido38 ao duto do rotor 37. O pistão 61 é acionado por um motorde passo 63 que move um parafuso de avanço 64 ligado àhaste do pistão. O cilindro hidráulico 62 também estáconectado a um reservatório de líquido hidráulico 65 quepossui um acesso controlado por uma válvula 66 parapermitir seletivamente a introdução ou a remoção de líquidohidráulico para dentro e de um circuito hidráulico queinclui o cilindro hidráulico 62, o duto do rotor 37 e acâmara hidráulica expansível 55. Um medidor de pressão 67está conectado ao circuito hidráulico para medir a pressãohidráulica no seu interior.

O aparelho de separação ainda compreende três sensores56, 57, 58 para detecção das características do processo deseparação que ocorre dentro de uma bolsa de separaçãoquando o aparelho funciona. Os três sensores 56, 57, 58estão embutidos na tampa 49 em distâncias diferentes doeixo de rotação do rotor, um primeiro sensor 56 sendo omais distante do eixo de rotação, um terceiro sensor 58sendo o mais próximo ao eixo de rotação, e um segundosensor 57 ocupando uma posição intermediária. Quando atampa 49 é fechada, os três sensores 56, 57, 58 ficamvoltados para a bolsa de separação 1, como mostrado na FIG.1. O primeiro sensor 56 (daqui em diante "sensor da bolsa")está embutido na tampa 49 de modo a ficar posicionado sobrea câmara de separação 5, a cerca de um terço da largura dacâmara de separação da borda interna 6 desta, e estádeslocado com relação à passagem 11 entre a câmara deseparação 5 e o canal de distribuição 10. O sensor da bolsa56 é capaz de detectar a presença ou ausência de um líquidona câmara de separação 5, além de hemácias em um líquido. Osegundo sensor 57 (daqui em diante o "sensor docompartimento") está embutido na tampa 49 de modo a ficarposicionado sobre a passagem 11 entre a câmara de separação5 e o canal de distribuição 10. O sensor do compartimento57 está no caminho de qualquer componente que flui dacâmara de separação 5 para dentro das três bolsas satélites2,3, 4. O sensor do compartimento 57 é capaz de detectar apresença ou ausência de um líquido no canal de distribuição10, além de detectar hemácias em um líquido. O terceirosensor 58 (daqui em diante o "sensor do canal") estáembutido na tampa 49 de modo a ficar posicionado sobre ocanal de distribuição 10. O sensor do canal 58 está nocaminho de qualquer componente que flui da câmara deseparação 5 para dentro da segunda bolsa satélite 3. Osensor do canal 58 é capaz de detectar a presença ouausência de um líquido no canal de distribuição 10, além dedetectar hemácias em um líquido. Cada sensor 56, 57, 58pode compreender uma fotocélula que inclui um LEDinfravermelho e um fotodetector. A energia elétrica éfornecida aos sensores 56, 57, 58 através do anel decontato 45.O aparelho de separação ainda compreende umcontrolador 7 0 que inclui uma unidade de controle(microprocessador) e uma memória para abastecer omicroprocessador com informações e instruções programadasem relação aos vários protocolos de separação e à operaçãodo aparelho de acordo com esses protocolos de separação. Emparticular, o microprocessador é programado para receberinformações relativas à(s) velocidade(s) de centrifugaçãona qual o rotor deve girar durante os vários estágios de umprocesso de separação, e informações relativas às váriastaxas de fluxo de transferência nas quais os componentesseparados devem ser transferidos da bolsa de separação 1para dentro das bolsas satélites 2, 3, 4. As informaçõesrelativas às várias taxas de fluxo de transferência podemser expressas, por exemplo, como taxas de fluxo de líquidohidráulico no circuito hidráulico, ou como velocidades derotação do motor de passo 63 da estação de bombeamentohidráulico 60. O microprocessador é ainda programado parareceber, diretamente ou através da memória, informações domedidor de pressão 67 e das fotocélulas 56, 57, 58 e para ocontrole do motor da centrífuga 40, do motor de passo 63 edas válvulas de estrangulamento 42, 43, 44 de modo a fazercom que o aparelho de separação opere junto com umprotocolo de separação selecionado.

Um exemplo de um primeiro protocolo de separaçãodestinado à preparação de três componentes sangüíneos,especificamente um componente plasmático, um primeirocomponente de células sangüíneas composto essencialmentepor plaquetas, e um segundo componente de célulassangüíneas composto essencialmente por hemácias, seráexplicado abaixo. Esse primeiro protocolo de separação nãonecessita do uso do sensor do canal 58. A operação doaparelho de separação ao longo do primeiro protocolo deseparação é a seguinte:

No primeiro estágio de separação, um conjunto debolsas, como mostrado na FIG. 1, no qual uma bolsa satélitecontém um volume de sangue total, é colocado no rotor deuma centrífuga (como mostrado nas FIGS. 2 e 3) .

No início do primeiro estágio, a primeira bolsasatélite 2 do conjunto de bolsas da FIG. 1 contém um volumede sangue total anticoagulado (normalmente cerca de 500ml). 0 tubo de coleta 17 foi lacrado e cortado. Asbraçadeiras 15 nos tubos de transferência 14, 20, 21 queconectam as bolsas satélites 2, 3, 4 à bolsa de separação 1são fechadas. 0 pino quebrável 16 que bloqueia acomunicação entre a primeira bolsa satélite 2 e a bolsa deseparação 1 é quebrado, bem como o pino quebrável 23 quebloqueia a comunicação entre a terceira bolsa satélite 4 ea bolsa de separação 1. A primeira bolsa satélite 2 e a asterceiras bolsas satélites 4 são encaixadas no primeiro parde ganchos de um suporte de bolsas (não mostrado), aprimeira bolsa satélite 2 sendo encaixada em primeirolugar. A segunda bolsa satélite 3 é encaixada no segundopar de ganchos (não mostrados). 0 suporte de bolsas émontado em um suporte (não mostrado) e, conseqüentemente, aprimeira bolsa satélite 2 é adjacente à superfície internado suporte. 0 suporte é então totalmente inserido nocompartimento central 34 da centrífuga. As bolsas satélites2, 3, 4 estão, então, substancialmente localizadas em umlado de um plano que contém o eixo de rotação do rotor 31.A bolsa de coleta 1 é colocada sobre a plataforma giratória35, e os pinos no revestimento do rebordo do rotor sãoengrenados nos orifícios 12 do elemento de conexão em formade disco 9 da bolsa de separação 1. 0 primeiro tubo detransferência 14 que conecta a primeira bolsa satélite 2 àbolsa de separação 1 é encaixado na primeira válvula deestrangulamento 42, o segundo tubo de transferência 20 queconecta a segunda bolsa satélite 3 à bolsa de separação 1 éencaixado na terceira válvula de estrangulamento 44, e oterceiro tubo de transferência 21 que conecta a terceirabolsa satélite 4 à bolsa de separação 1 é encaixado nasegunda válvula de estrangulamento 43. As braçadeiras 15nos tubos de transferência 14, 20, 21 que conectam asbolsas satélites 2, 3, 4 à bolsa de separação 1 sãoabertas. A tampa 49 do rotor é fechada.

No segundo estágio, o sangue total anticoaguladocontido na primeira bolsa satélite 2 é transferido paradentro da bolsa de separação 1.

No início do segundo estágio, a primeira válvula deestrangulamento 42 está aberta, e a segunda e a terceiraválvulas de estrangulamento 43, 44 estão fechadas. 0 rotoré acionado pelo motor da centrífuga 40, e sua velocidade derotação aumenta progressivamente até alcançar uma primeiravelocidade de centrifugação (por exemplo, cerca de 1.500RPM) que é selecionada para ser:

- suficientemente alta para efetuar a transferência,sob forças centrífugas, do conteúdo da primeira bolsasatélite 2 para dentro da bolsa de separação 1;

- suficientemente alta para fazer com que ocorra atransferência total no período de tempo mais curto;enquanto, ao mesmo tempo,

suficientemente baixa para não produzir pressãodentro da primeira bolsa satélite 2, para não excedersubstancialmente um limiar de pressão determinado acima doqual ocorreria hemólise;

- ser suficientemente baixa para não gerar força decisalhamento no fluxo de sangue que entra na bolsa deseparação 1 que poderia causar hemólise.

Foi determinado que o limiar de pressão acima do qualocorreria hemólise na bolsa satélite 2 é de cerca de 68,95kPa, e que a velocidade de rotação máxima na qual esselimiar de pressão não é alcançado e a força de cisalhamentono fluxo do sangue que entra na bolsa de separação nãocausa hemólise é de cerca de 1.800 RPM. Em uma velocidadede rotação de cerca de 1.500 RPM, leva cerca de um minutopara transferir cerca de 500 ml de sangue anticoagulado dabolsa satélite 2 para dentro da bolsa de separação 1.

Se a célula da bolsa 56 não detectar hemácias em umperíodo de tempo predeterminado após o início do processode centrifugação, a unidade de controle 70 faz com que orotor seja parado e um alarme pode ser emitido. Issoaconteceria em particular se o pino quebrável 16 não tiversido quebrado ou se a braçadeira 15 no primeiro tubo detransferência 14 não tiver sido aberta.

No terceiro estágio, o sangue dentro da câmara deseparação é sedimentado até um nível desejado.

No início desse estágio, as válvulas deestrangulamento 42, 43, 44 estão fechadas. O rotor gira emuma segunda velocidade de centrifugação elevada (porexemplo, cerca de 3.200 RPM) por um período de tempopredeterminado (por exemplo, cerca de 22 0 segundos) que éselecionado de tal forma que, independentemente dohematócrito do sangue total transferido inicialmente nabolsa de separação 1, os sedimentos sangüíneos nelacontidos ao final do período predeterminado até um ponto emque o hematócrito da camada anular externa de hemáciassejam de cerca de 90 e a camada anular interna de plasmaseja substancialmente desprovida de células. Em maisdetalhe, ao final desse estágio de sedimentação, a bolsa deseparação 1 exibe quatro camadas: uma primeira camadainterna que compreende principalmente plasma, uma segundacamada intermediária que compreende principalmenteplaquetas, uma terceira camada intermediária que compreendeprincipalmente células mononucleares (linfócitos emonócitos), e uma quarta camada externa que compreendeprincipalmente hemácias (os granulócitos permanecemembebidos na camada mais interna de hemácias).

No quarto estágio, um componente plasmático étransferido para dentro da primeira bolsa satélite.

No início desse estágio, as válvulas deestrangulamento 42, 43, 44 estão fechadas. 0 rotor gira namesma velocidade de centrifugação elevada usada no estágiode sedimentação. Após um período de tempo predeterminadoapós o sensor da bolsa 56 ter interrompido a detecção dehemácias, o que pode ocorrer antes do final do período desedimentação predeterminado, a terceira válvula deestrangulamento 44 que controla o acesso à segunda bolsasatélite 3 é aberta, e a estação de bombeamento 60 éacionada a fim de bombear líquido hidráulico em uma taxa defluxo constante (por exemplo, cerca de 220 ml/min) paradentro da câmara hidráulica 55. A câmara hidráulica emexpansão 55 comprime a bolsa de separação 1 e causa atransferência de plasma para dentro da segunda bolsasatélite 3. A estação de bombeamento 60 é interrompida, e aterceira válvula de estrangulamento 44 é fechada após terdecorrido um período de tempo predeterminado após adetecção de hemácias pelo sensor do compartimento 57. Umpequeno volume de plasma (por exemplo, cerca de 5 ml)permanece na bolsa de separação 1.

A taxa de fluxo de transferência do componenteplasmático (que está diretamente relacionada à taxa defluxo do fluido hidráulico) é selecionada para ser a maisalta possível sem alterar a camada de plaquetas a fim deevitar contaminação do componente plasmático com plaquetas.

No quinto estágio, um componente de plaquetas/célulasmononucleares é transferido para dentro da primeira bolsasatélite 2.

0 quinto estágio pode começar logo que a terceiraválvula de estrangulamento 44 é fechada ao final do quartoestágio. No início desse quinto estágio, as válvulas deestrangulamento 42, 43, 44 são fechadas. 0 rotor gira namesma velocidade de centrifugação elevada como previamente.A primeira válvula de estrangulamento 42 que controla oacesso à primeira bolsa satélite 2 é aberta, e a estação debombeamento 60 é acionada a fim de bombear líquidohidráulico em uma taxa de fluxo constante (por exemplo,cerca de 140 ml/min) para dentro da câmara hidráulica 55. Acâmara hidráulica em expansão 55 comprime a bolsa deseparação 1 e causa a transferência, para dentro daprimeira bolsa satélite 2, de um componente deplaquetas/células mononucleares que compreende o volume deplasma residual, as plaquetas, os linfócitos, monócitos euma pequena quantidade de hemácias. A estação debombeamento 60 é interrompida, e a primeira válvula deestrangulamento 42 é fechada após um volume predeterminadoter sido transferido para dentro da primeira bolsa satélite2, o que também ocorre após ter decorrido uma quantidade detempo predeterminada para certa taxa de fluxo de liquidohidráulico. Esse volume predeterminado de componente deplaquetas/células mononucleares depende, em parte, daquantidade residual de plasma na bolsa de separação 1 aofinal do quarto estágio. Por exemplo, quando o volume deplasma residual na bolsa de separação 1 é determinado pelosensor do compartimento 57, o volume predeterminado docomponente de plaquetas/células mononucleares pode serajustado entre aproximadamente 10 e 15 ml, incluindo cercade 5 ml de plasma e cerca de 5 ml de hemácias.

No sexto estágio, a solução de estocagem para hemáciascontida na terceira bolsa satélite 4 é transferida paradentro da bolsa de separação 1.

0 sexto estágio pode começar logo que a terceiraválvula de estrangulamento 42 seja fechada ao final doquinto estágio. No início desse quinto estágio, as válvulasde estrangulamento 42, 43, 44 são fechadas. 0 rotor gira namesma velocidade de centrifugação elevada como previamente.A segunda válvula de estrangulamento 43 que controla oacesso à terceira bolsa satélite 4 é aberta, permitindo quea solução de estocagem contida na terceira bolsa satélite 4flua, sob forças centrífugas, da terceira bolsa satélite 4para dentro da bolsa de separação 1, através do filtro 22.Após ter decorrido um período de tempo predeterminado apósa abertura da segunda válvula de estrangulamento 43, orotor é freado bruscamente a fim de que sua velocidade derotação diminua rapidamente até uma terceira velocidade,reduzida (por exemplo, 1.500 RPM), a fim produzir umasuspensão das hemácias contidas na bolsa de separação nasolução de estocagem e diminuir a viscosidade desta.

No sétimo estágio, um componente de hemácias étransferido para dentro da terceira bolsa satélite 4.

O sétimo estágio pode começar após ter decorrido umperíodo de tempo predeterminado depois de o rotor girar naterceira velocidade de rotação. No início desse estágio, asegunda válvula de estrangulamento 43 que controla o acessoà terceira bolsa satélite 4 é aberta, e as válvulas deestrangulamento 42, 44 são fechadas. O rotor gira naterceira velocidade de rotação. A estação de bombeamento 60é acionada a fim de bombear líquido hidráulico em umaprimeira taxa de fluxo para dentro da câmara hidráulica 55e, conseqüentemente, comprimir a bolsa de separação 1 deforma a efetuar a transferência, através do filtro 22, deum componente de hemácias para dentro da terceira bolsasatélite 4. A primeira taxa de fluxo de transferência docomponente de hemácias (que está diretamente relacionada àtaxa de fluxo do fluido hidráulico) é selecionada para sera mais alta possível, sem danificar as hemácias (hemólise).Quando a pressão do líquido hidráulico, medida pelo medidorde pressão 67, alcança um primeiro limiar de pressãoelevado, a taxa de fluxo do líquido hidráulico é diminuídada primeira taxa de fluxo para uma segunda taxa de fluxo.Quando a pressão do líquido hidráulico, medida pelo medidorde pressão 67, alcança um segundo limiar de pressãoelevado, a taxa de fluxo do líquido hidráulico é diminuídaainda mais da segunda taxa de fluxo até uma terceira taxade fluxo. A segunda e a terceira taxas de fluxo detransferência do componente de hemácias são selecionadas demodo que uma porção máxima do componente de hemácias sejatransferida para dentro da terceira bolsa satélite 4. Osleucócitos (granulócitos e monócitos e linfócitosresiduais) são capturados pelo filtro 22, de modo que ocomponente compactado final de hemácias na terceira bolsasatélite 4 seja substancialmente desprovido de leucócitos.

No oitavo estágio, o processo de centrifugação éfinalizado.

Após ter decorrido um período de tempo predeterminado(por exemplo, cerca de 3 0 segundos) depois de a pressão dolíquido hidráulico ter alcançado o segundo limiar depressão, a velocidade de rotação do rotor é diminuída atéque o rotor pare, a estação de bombeamento 60 é acionada afim de bombear o líquido hidráulico da câmara hidráulica 55em uma taxa de fluxo elevada (por exemplo, cerca de 800ml/min) até que a câmara hidráulica 55 esteja vazia, e astrês válvulas de estrangulamento 42, 43, 44 são acionadas afim de lacrar e cortar os tubos 14, 20, 21.

Outro sistema automático de processamento do sanguetotal com o qual a presente invenção pode ser usada émostrado nas FIGS. 4 a 7.

A FIG. 4 mostra um exemplo de um conjunto de bolsasadaptadas para a separação de um líquido composto (porexemplo, sangue total) em um primeiro componente (porexemplo, um componente plasmático), um componenteintermediário (por exemplo, um componente de plaquetas) eum segundo componente (por exemplo, um componente dehemácias). Esse conjunto de bolsas compreende uma bolsa deseparação flexível 1.000 e três bolsas satélites flexíveis200, 300, 150 nela conectadas.

Quando o líquido composto é sangue total, a bolsa deseparação 1.000 possui duas finalidades, e é usadasucessivamente como uma bolsa de coleta e como uma bolsa deseparação. Ela se destina a receber inicialmente um volumedistinto de sangue total de um doador (normalmente cerca de450 ml) e será usada posteriormente como uma câmara deseparação em um aparelho de separação. A bolsa de separação1.000 é plana e geralmente retangular. È feita de duasfolhas retangulares de material plástico que são soldadasjuntas de modo a definir entre elas um espaço interior quepossui uma porção principal retangular conectado a umaporção superior triangular. Um primeiro tubo 400 éconectado à ponta da porção triangular, e um segundo e umterceiro tubos 500, 600 são conectados a uma das bordaslaterais da porção triangular, respectivamente. Asextremidades proximais dos três tubos 400, 500, 600 estãoembutidas entre as duas folhas de material plástico deforma paralela. A bolsa de separação 1.000 ainda compreendeum orifício 800 em cada um de seus cantos que estãoadjacentes aos três tubos 400, 500, 600. Os orifícios 800são usados para fixar a bolsa de separação e uma célula deseparação, como será descrito posteriormente.

Um volume de anticoagulante (tipicamente cerca de 63ml para uma doação de sangue de cerca de 4 50 ml) éadicionado inicialmente à bolsa de separação, e o primeiroe o terceiro tubos 400, 600 são adaptados em suaextremidade proximal com uma tampa quebrável 90, 100,respectivamente, que bloqueia o fluxo de líquido que passaatravés deles.

O segundo tubo 500 é um tubo de coleta que possui umaagulha 120 conectada à sua extremidade distai. No começo deuma doação de sangue, uma agulha 120 é inserida na veia dodoador e o sangue flui para dentro da bolsa de coleta(separação) 1.000. Após um volume de sangue desejado tersido coletado na bolsa de coleta (separação) 1.000, o tubode coleta 500 é lacrado e cortado.

A primeira bolsa satélite 200 se destina a receber umcomponente plasmático. Ela é plana e substancialmenteretangular. Está conectada à extremidade distai do primeirotubo 400.

A segunda bolsa satélite 300 se destina a receber umcomponente de hemácias. Ela é plana e substancialmenteretangular. Está conectada à extremidade distai do terceirotubo 600. O terceiro tubo 600 compreende dois segmentosconectados respectivamente à entrada e à saída de um filtrode leucorredução 130. A segunda bolsa satélite 300 contémum volume de solução de estocagem para hemácias, e oterceiro tubo 600 é adaptado em sua extremidade distai comuma tampa quebrável 140 que bloqueia o fluxo de líquido quepassa através dele.

A terceira bolsa satélite 150 se destina a receber umcomponente de plaquetas. Como a primeira e a segunda bolsassatélites 200, 300, a terceira bolsa satélite 150 é plana esubstancialmente retangular.

O conjunto de bolsas também contém um conector de trêsvias em forma de "T" 160 que tem sua perna conectada peloprimeiro tubo 400 ã bolsa de separação 1.000, um primeirobraço conectado por um quarto tubo 17 0 à primeira bolsasatélite 200 (bolsa do componente plasmático), e um segundobraço conectado por um quinto tubo 180 à terceira bolsasatélite 150 (bolsa do componente de plaquetas).

As FIGS. 5, 6, 7 mostram uma primeira modalidade de umaparelho para separar por centrifugação simultaneamentequatro volumes distintos de um liquido composto. 0 aparelhocompreende:

uma centrífuga adaptada para receber quatroconjuntos de bolsas mostrados na FIG. 4, com os quatrovolumes distintos de um líquido composto contido nas quatrobolsas de separação;

- um meio de transferência de componentes para atransferência de pelo menos um componente separado de cadabolsa de separação para dentro de uma bolsa satélite a elaconectada;

um primeiro meio de equilíbrio para equilibrarinicialmente o rotor quando os pesos das quatro bolsas deseparação são diferentes; e

- um segundo meio de equilíbrio para equilibrar orotor quando os pesos dos componentes separadostransferidos para dentro das bolsas satélites causarem umdesequilíbrio do rotor.

A centrífuga compreende um rotor que é apoiado por ummancai 3.000 que permite que o rotor gire em torno de umeixo de rotação 310. 0 rotor compreende:

- uma haste cilíndrica do rotor 32 0 à qual uma polia33 0 é conectada;- um meio de estocagem que compreende um recipientecilíndrico central 340 para conter as bolsas satélites, queestá conectado à haste do rotor 32 0 na extremidade superiordeste, de modo que o eixo longitudinal da haste do rotor

320 e o eixo longitudinal do recipiente 340 coincidam com oeixo de rotação 310, e

- uma plataforma giratória troncocônica 350 conectadaà parte superior do recipiente central 340, de modo que seueixo central coincida com o eixo de rotação 310. Aplataforma giratória troncocônica 350 se alarga abaixo deuma abertura do recipiente 340. Quatro células de separação4.000 idênticas são montadas na plataforma giratória 350 demodo a formar um arranjo simétrico com relação ao eixo derotação 310.

A centrífuga ainda compreende um motor 360 acoplado aorotor por uma correia 37 0 engrenada em um sulco da polia330 a fim de girar o rotor em torno do eixo de rotação 310.

Cada célula de separação 4.000 compreende umrecipiente 410 que possui o formato geral de umparalelepípedo retangular. As células de separação 4.000são montadas na plataforma giratória 350, de modo que seusrespectivos eixos longitudinais médios 420 intersectem oeixo de rotação 310, de modo que estejam localizadassubstancialmente na mesma distância do eixo de rotação 310,e de modo que os ângulos entre seus eixos longitudinaismédios 420 sejam substancialmente iguais (ou seja, 90graus). A posição exata das células de separação 4.000 naplataforma giratória 350 é ajustada de modo que o pesosobre a plataforma giratória seja distribuído igualmentequando as células de separação 4.000 estiverem vazias, ouseja, de modo que o rotor esteja equilibrado. Isso ocorreem conseqüência do arranjo das células de separação 4.000sobre a plataforma giratória 350 em que as células deseparação 4.000 estão inclinadas com relação ao eixo derotação 310 em um ângulo agudo igual ao ângulo do tronco deum cone que define geometricamente a plataforma giratória350 .

Cada recipiente 410 compreende uma cavidade 430 quetem forma e dimensão adequadas para acomodar uma bolsa deseparação 1.000 cheia de líquido, do tipo mostrada na FIG.4. A cavidade 430 (que também será citada a seguir como o"compartimento de separação") é definida por uma parede defundo, que é a mais distante do eixo de rotação 310, umaparede inferior, que é a mais próxima da plataformagiratória 350, uma parede superior oposta à paredeinferior, e duas paredes laterais. A cavidade 430compreende uma parte principal que se estende da parede defundo, que possui substancialmente o formato de umparalelepípedo retangular com ângulos arredondados, e umaparte superior que tem praticamente o formato de um prismacom bases triangulares convergentes. Em outras palavras, aparte superior da cavidade 430 é definida por dois pares deparedes opostas que convergem em direção ao eixo centralmédio 420 da cavidade 430.

Um fato interessante desse design é que ele produz umadilatação radial da camada fina de um componente menor deum fluido composto (por exemplo, as plaquetas no sanguetotal) após separação por centrifugação, e o torna maisfacilmente detectável na parte superior de uma bolsa deseparação. Como mostrado na FIG. 5, os dois pares deparedes opostas da parte superior da célula de separação4.000 convergem em direção a três canais cilíndricosparalelos 440, 450, 460, que se abrem no topo do recipiente410, e nos quais, quando uma bolsa de separação 1.000 écolocada no recipiente 410, os três tubos 400, 500, 600 seestendem.

O recipiente 410 também compreende uma tampa lateralbasculante 47 0 (veja a FIG. 7) , que é composta por umaporção superior da parede externa do recipiente 410, ouseja, a parede oposta à plataforma giratória 350. A tampa470 é dimensionada de forma a permitir, quando aberta, umacarga fácil de uma bolsa de separação 1.000 cheia delíquido dentro da célula de separação 4.000. O recipiente410 compreende um meio de travamento rápido (não mostrado)pelo qual a tampa 47 0 pode ser travada na parte restante dorecipiente 410.

O recipiente 410 também compreende um meio de fixaçãopara fixar uma bolsa de separação 1.000 dentro da célula deseparação 4.000. O meio de fixação da bolsa compreende doispinos 480 que sobressaem na superfície interna da tampa47 0, próximo ao topo da célula de separação 4.000, e doisrecessos correspondentes 490 na parte superior dorecipiente 410. Os dois pinos 480 são afastados edimensionados de forma a se ajustarem nos dois orifícios800 no canto superior de uma bolsa de separação 1.000.

O aparelho de separação ainda compreende um meio detransferência de componentes para a transferência de pelomenos um componente separado de cada bolsa de separaçãopara dentro de uma bolsa satélite nela conectada. O meio detransferência de componentes compreende um sistema decompressão para compressão das bolsas de separação 1.000dentro dos compartimentos de separação 430 e que efetua atransferência de componentes separados para dentro dasbolsas satélites 200, 300, 150.

O sistema de compressão compreende um diafragmaflexível 500 que é fixado a cada recipiente 410 de modo adefinir uma câmara expansível 510 na cavidade deste. Maisespecificamente, o diafragma 500 é dimensionado de modo ase alinhar à parede de fundo da cavidade 43 0 e a uma grandeporção da parede inferior da cavidade 430, que é a maispróxima à plataforma giratória 350.

0 sistema de compressão ainda compreende um coletorcircular periférico 52 0 que forma um anel dentro daplataforma giratória 350 que se estende próximo à periferiada plataforma giratória 350. Cada câmara de expansão 510está conectada ao coletor 520 por um canal de abastecimento53 0 que se estende através da parede do respectivorecipiente 410, próximo ao fundo deste.

O sistema de compressão ainda compreende uma estaçãode bombeamento hidráulico 6.000 para bombear um líquidohidráulico para dentro e para fora das câmaras expansíveis510 dentro das células de separação 4.000. O líquidohidráulico é selecionado de modo a ter uma densidadeligeiramente maior do que a densidade do mais denso doscomponentes no líquido composto a ser separado (porexemplo, as hemácias, quando o líquido composto forsangue). Como resultado, durante a centrifugação, o líquidohidráulico dentro das câmaras expansíveis 510,independentemente do volume deste, geralmente permanecerána parte mais externa das células de separação 4.000. Aestação de bombeamento 6.000 é conectada às câmarasexpansíveis 510, através de uma vedação rotativa 690, porum duto 560 que se estende através da haste do rotor 320,da parede de fundo e lateral do recipiente central 340, eda borda do recipiente central 340, radialmente através daplataforma giratória 350, onde se conecta ao coletor 520.

Como mostrado na FIG. 5, a estação de bombeamento6.000 compreende uma bomba de pistão que possui um pistão610 móvel em um cilindro hidráulico 620 conectado de formafluida através de um acoplamento rotatório de fluido aoduto do rotor 540. O pistão 610 é acionado por um motor depasso 640 que move um parafuso de avanço 650 ligado à hastedo pistão. O cilindro hidráulico 620 também está conectadoa um reservatório de líquido hidráulico 660 que possui umacesso controlado por uma válvula 67 0 para permitirseletivamente a introdução ou a remoção de líquidohidráulico para dentro e para fora de um circuitohidráulico que inclui o cilindro hidráulico 62 0, o duto dorotor 560 e as câmaras hidráulicas expansíveis 510. Ummedidor de pressão 680 está conectado ao circuitohidráulico para a medida da pressão hidráulica nelepresente.

O aparelho de separação ainda compreende quatro paresde uma primeira e uma segunda válvulas de estrangulamento700, 710 que são montadas no rotor em torno de uma aberturado recipiente central 340. Cada par de válvulas deestrangulamento 700, 710 está voltado para uma célula deseparação 4.000, com a qual está associado. As válvulas deestrangulamento 700, 710 são projetadas para bloquear oupermitir seletivamente o fluxo de um líquido através de umtubo plástico flexível, e lacrar e cortar seletivamente umtubo plástico. Cada válvula de estrangulamento 700, 710compreende um corpo cilíndrico alongado e um cabeçote quepossui um sulco 720 que é definido por um mordenteestacionário superior e um mordente inferior móvel entreuma posição aberta e fechada. O sulco 720 é dimensionado deforma que um dos tubos 400, 170, 180 do conjunto de bolsasmostrado na FIG. 4 possa ser nele encaixado firmementequando o mordente inferior estiver na posição aberta. Ocorpo alongado contém um mecanismo para movimentação domordente inferior e está conectado e um gerador deradiofreqüência que fornece a energia necessária paralacrar e cortar um tubo plástico. As válvulas deestrangulamento 700, 710 são montadas dentro do recipientecentral 340, adjacente à superfície interior deste, de modoque seus eixos longitudinais estejam paralelos ao eixo derotação 310 e seus cabeçotes façam protrusão acima da bordado recipiente 340. A posição de um par de válvulas deestrangulamento 700, 710 com relação a uma bolsa deseparação 1.000 e aos tubos 400, 170, 180 nela conectadosquando a bolsa de separação 1.000 está na célula deseparação 4.000 associada a esse par de válvulas deestrangulamento 700, 710 é mostrada em linhas pontilhadasna FIG. 4. A energia elétrica é fornecida às válvulas deestrangulamento 700, 710 através de um anel de contato queé montado em torno de uma porção inferior da haste do rotor320.

O aparelho de separação ainda compreende quatro paresde sensores 73 0, 740 (vejas as FIGS. 6 e 7) paramonitoramento da separação dos vários componentes queocorrem dentro de cada bolsa de separação quando o aparelhoopera. Cada par de sensores 730, 740 está embutido na tampa470 do recipiente 410 de cada célula de separação 4.000 aolongo do eixo longitudinal médio 420 do recipiente 410, umprimeiro sensor 730 sendo localizado mais distante e umsegundo sensor 740 sendo colocado mais próximo ao eixo derotação 310. Quando uma bolsa de separação 1.000 está norecipiente 410 e a tampa 470 é fechada, o primeiro sensor730 (daqui em diante o "sensor da bolsa") está voltado paraa parte superior triangular da bolsa de separação 1.000, eo segundo sensor 740 (daqui a diante o "sensor do tubo")está voltado para a extremidade proximal do primeiro tubo400. O sensor da bolsa 730 é capaz de detectar célulassangüíneas em um líquido. O sensor do tubo 740 é capaz dedetectar a presença ou ausência de líquido no tubo 400,além de detectar células sangüíneas em um líquido. Cadasensor 730, 740 pode compreender uma fotocélula que incluium LED infravermelho e um fotodetector. A energia elétricaé fornecida aos sensores 730, 740 através do anel decontato que é montado em torno da porção inferior da hastedo rotor 320.

O aparelho de separação ainda compreende um primeiromeio de equilíbrio para equilibrar inicialmente o rotorquando os pesos das quatro bolsas de separação 1.000contidas nas células de separação 4.000 forem diferentes. Oprimeiro meio de equilíbrio substancialmente compreende osmesmos elementos estruturais que os elementos do meio detransferência de componentes descrito acima,especificamente: quatro câmaras hidráulicas expansíveis 510interconectadas por um coletor circular periférico 520 euma estação de bombeamento de líquido hidráulico 6.000 parabombear líquido hidráulico para dentro das câmarashidráulicas 510 através de um duto do rotor 560, que estáconectado ao coletor circular 520. A fim de equilibrarinicialmente o rotor, cujas quatro células de separação4.000 contêm quatro volumes distintos de um líquidocomposto que podem ter ou não o mesmo peso (pois os quatrovolumes podem não ser iguais e/ou a densidade do líquidopode diferir ligeiramente de um volume para outro) , aestação de bombeamento 6.000 é controlada de forma abombear dentro das câmaras hidráulicas interconectadas 510,no início de um processo de separação, um volumepredeterminado de líquido hidráulico que é selecionado demodo a equilibrar o rotor na situação mais desequilibrada.Para sangue total, a determinação desse volume deequilíbrio leva em conta a diferença máxima de volume entreduas doações de sangue, e a diferença máxima de hematócrito(ou seja, de densidade) entre duas doações de sangue. Sobforças centrífugas, o líquido hidráulico irá se distribuirigualmente nas quatro células de separação 4.000,dependendo da diferença de peso das bolsas de separação1.000 e do equilíbrio do rotor. A fim de se obter umequilíbrio inicial ideal, o volume da cavidade 430 dascélulas de separação 4.000 deve ser selecionado de talforma que as cavidades 430, independentemente do volume dasbolsas de separação 1.000 nelas contidas, não estejamcheias após uma quantidade determinada de líquidohidráulico ter sido bombeada dentro das câmaras de expansãointerconectadas 510.

O aparelho de separação ainda compreende um segundomeio de equilíbrio, para equilíbrio do rotor, quando ospesos dos componentes transferidos para dentro das bolsassatélites 200, 300, 150 no recipiente central 340 foremdiferentes. Por exemplo, quando duas doações de sanguepossuem o mesmo hematócrito e volumes diferentes, osvolumes de plasma extraídos de cada doação são diferentes,e o mesmo ocorre quando duas doações de sangue possuem omesmo volume e hematócritos diferentes. Como mostrado nasFIGS. 5 e 6, o segundo meio de equilíbrio compreende quatrobolsas retangulares flexíveis 810, 820, 830, 840 que estãointerconectadas por quatro seções do tubo (não mostradas) ,cada seção do tubo conectando duas bolsas adjacentes pelofundo destas. As bolsas 810, 820, 830, 840 contêm um volumede um líquido de equilíbrio que possui uma densidadepróxima à densidade do líquido composto. 0 volume dolíquido de equilíbrio é selecionado de forma a equilibrar orotor na situação de maior desequilíbrio. As quatro bolsas810, 820, 830, 840 são dimensionadas para que se alinhem àsuperfície interna do recipiente central 340 e que tenhamum volume interno maior do que o volume de líquido deequilíbrio, de tal forma que o líquido de equilíbrio possase expandir livremente em qualquer uma das bolsas 810, 820,830, 840. Em operação, se, por exemplo, quatro bolsassatélites 200 respectivamente adjacentes ás quatro bolsas810, 820, 830, 840 receberem volumes diferentes de umcomponente plasmático, as quatro bolsas satélites 200 irãocomprimir de forma desigual, sob forças centrífugas, asquatro bolsas 810, 820, 830, 840, o que fará com que olíquido de equilíbrio se distribua de forma desigual nasquatro bolsas 810, 820, 830, 840, compensando a diferençade peso nas bolsas satélites 200.

O aparelho de separação ainda compreende umcontrolador 900 que inclui uma unidade de controle (porexemplo, um microprocessador) e uma unidade de memória parafornecer ao microprocessador informações e instruçõesprogramadas em relação aos vários protocolos de separação(por exemplo, um protocolo para a separação de umcomponente plasmático e um componente de célulassangüíneas, ou um protocolo para a separação de umcomponente plasmático, um componente de plaquetas e umcomponente de hemácias) e para a operação do aparelho deacordo com esses protocolos de separação. Em particular, omicroprocessador é programado para receber informaçõesrelativas à(s) velocidade(s) de centrifugação na qual omotor deve girar durante os vários estágios de um processode separação (por exemplo, estágio de separação decomponentes, estágio de expressão de um componenteplasmático, estágio de suspensão de plaquetas em uma fraçãode plasma, estágio de expressão de um componente deplaquetas etc.), e informações relativas às várias taxas defluxo de transferência nas quais os componentes separadosdevem ser transferidos da bolsa de separação 1.000 paradentro das bolsas satélites 200, 300, 150. As informaçõesrelativas às várias taxas de fluxo de transferência podemser expressas, por exemplo, como taxas de fluxo de líquidohidráulico no circuito hidráulico, ou como velocidades derotação do motor de passo 640 da estação de bombeamentohidráulico 6.000. O microprocessador é ainda programadopara receber, diretamente ou através da memória,informações do medidor de pressão 680 e dos quatro pares defotocélulas 730, 740 e para o controle do motor dacentrífuga 360, do motor de passo 640 da estação debombeamento 6.000 e dos quatro pares de válvulas deestrangulamento 700, 710, de modo a fazer com que oaparelho de separação opere junto com um protocolo deseparação selecionado.

De acordo com um primeiro protocolo de separação, sãoseparados quatro volumes distintos de sangue em umcomponente plasmático, um primeiro componente celular quecompreende plaquetas, leucócitos, algumas hemácias e umpequeno volume de plasma (daqui em diante, o componente da"capa de leucócitos") e um segundo componente celular quecompreende principalmente hemácias. Cada volume de sangueestá contido em uma bolsa de separação 1.000 de um conjuntode bolsas representado na FIG. 4, nas quais foi coletadopreviamente de um doador com a utilização do tubo de coleta500. Após a coleta de sangue, o tubo de coleta 500 foilacrado e cortado próximo à bolsa de separação.Tipicamente, os volumes de sangue não são iguais nas quatrobolsas de separação 1.000, e o hematócrito varia de umabolsa de separação 1.000 para outra. Conseqüentemente, asbolsas de separação 1.000 possuem pesos ligeiramentediferentes.

O primeiro estágio começa com a carga dos quatroconjuntos de bolsas nas quatro células de separação 4.000.As tampas 470 são fechadas e travadas e, com isso, asbolsas de separação 1.000 são fixadas por sua bordasuperior aos recipientes 410 (os pinos 480 do meio defixação passam então através dos orifícios 800 no cantosuperior das bolsas de separação 1.000 e se encaixam nosrecessos 490 ou no meio de fixação).

Os tubos 170 que conectam as bolsas de separações1.000 às bolsas do componente plasmático 200, através dosconectores em "T" 160, são inseridos no sulco 720 daprimeira válvula de estrangulamento 700. Os tubos 180 queconectam as bolsas de separações 1.000 às bolsas docomponente de capa de leucócitos 150, através do conectorem "T" 160, são inseridos no sulco 720 da segunda válvulade estrangulamento 710. As quatro bolsas do componenteplasmático 200, as quatro bolsas do componente de capa deleucócitos 150, as quatro bolsas do componente de hemácias300 e os quatro filtros de leucorredução 130 são inseridosno compartimento central 340 do rotor. As quatro bolsas docomponente plasmático 200 são colocadas respectivamente emcontato direto com as bolsas 810 a 840 do segundo meio deequilíbrio. As válvulas de estrangulamento 700, 710 sãofechadas, e as tampas quebráveis 90 nos tubos 400 queconectam as bolsas de separação 1.000 aos conectores em "T"100 são quebradas manualmente.

No segundo estágio, o rotor é equilibrado a fim decompensar a diferença de peso das bolsas de separação.

No início do segundo estágio, todas as válvulas deestrangulamento 700, 710 são fechadas. O rotor é acionadopelo motor da centrífuga 360, e sua velocidade de rotaçãoaumenta progressivamente até que ele gire em uma primeiravelocidade de centrifugação. A estação de bombeamento 6.000é acionada a fim de bombear um volume global predeterminadode líquido hidráulico para dentro das quatro câmarashidráulicas 510, em uma taxa de fluxo constante. Essevolume global de líquido é predeterminado levando-se emconta a variação de peso máxima entre doações de sangue, deforma que, ao final do segundo estágio, os pesos das váriascélulas de separação 400 sejam substancialmente iguais, e orotor esteja substancialmente equilibrado,

independentemente dos pesos específicos das bolsas deseparação 1.000 que são carregadas nas células de separação4.000. Observe que isso não implica em que a cavidadeinterna 430 das células de separação 4.000 deva estartotalmente preenchida ao final do estágio de equilíbrio. Afim de equilibrar o rotor, é suficiente que haja umaquantidade suficiente de líquido hidráulico nas células deseparação 4.000 para equilibrar os pesos nelas contidos, enão importa se permanece um espaço vazio em cada célula deseparação 4.000 (o tamanho desse espaço vazio dependebasicamente do volume da cavidade interna 43 0 de uma célulade separação 4.000 e do volume médio de uma doação desangue) . Como as câmaras hidráulicas 510 estãointerconectadas, a distribuição do volume global de líquidohidráulico entre as câmaras de separações 4.000 resultasimplesmente da rotação do rotor. Quando os pesos dasbolsas de separação 1.000 são iguais, a distribuição dolíquido hidráulico é igual. Quando eles não são, adistribuição do líquido hidráulico é desigual, e quantomenor o peso de uma bolsa de separação específica 1.000,maior o volume do fluido hidráulico na câmara hidráulicaassociada 510.

No terceiro estágio, o sangue dentro da bolsa deseparação 1.000 é sedimentado até um nível desejado.

No início desse estágio, todas as válvulas deestrangulamento 7 00, 710 são fechadas. O rotor gira em umasegunda velocidade de centrifugação (velocidade elevada desedimentação ou "giro rápido") por um período de tempopredeterminado que é selecionado de forma que,independentemente do hematócrito do sangue na bolsa deseparação 1.000, os sedimentos sangüíneos em cada da bolsade separação 1.000 ao final do período selecionado até umponto em que o hematócrito da camada externa de hemáciassejam de cerca de 90, e a camada interna de plasma nãocontenha substancialmente mais nenhuma célula, com asplaquetas e os leucócitos formando então uma camadaintermediária entre a camada de hemácias e a camadaplasmática.

No quarto estágio, um componente plasmático étransferido para dentro da bolsa do componente plasmático200.

No início desse estágio, a velocidade de rotação édiminuída até uma terceira velocidade de centrifugação, asquatro primeiras válvulas de estrangulamento 7 00controlando o acesso à bolsa do componente plasmático 200são abertas, e a estação de bombeamento 6.000 é acionada afim de bombear líquido hidráulico em uma primeira taxa defluxo constante para dentro das câmaras hidráulicas 510 e,conseqüentemente, comprimir a bolsa de separação 1.000 eproduzir a transferência de plasma para dentro das bolsasdo componente plasmático 200.

Quando são detectadas células sangüíneas pelo sensorda bolsa 730 na célula de separação 4.000 na qual essadetecção ocorre em primeiro lugar, a estação de bombeamento6.000 é interrompida e a primeira válvula deestrangulamento 700 correspondente é fechada, imediatamenteou depois de decorrida uma quantidade de tempopredeterminada selecionada ã luz do volume de plasmadesejável no componente de capa de leucócitos a serexpresso em um estágio seguinte.

Após o fechamento da primeira (primeira) válvula deestrangulamento 700 (ou seja, a primeira válvula deestrangulamento do grupo de primeiras válvulas deestrangulamento 700), a estação de bombeamento 6.000 éacionada novamente a fim de bombear liquido hidráulico emuma segunda taxa de fluxo, menor, para dentro das câmarashidráulicas 510 e, conseqüentemente, comprimir as trêsbolsas de separação 1.000 cujas saídas não estão fechadaspelas primeiras válvulas de estrangulamento 700correspondentes.

Quando são detectadas células sangüíneas pelo sensorda bolsa 730 na célula de separação 4.000 na qual essadetecção ocorre em segundo lugar, a estação de bombeamento6.000 é interrompida e a primeira válvula deestrangulamento 700 correspondente é fechada (no mesmotempo decorrido para que ocorra o fechamento da primeira(primeira) válvula de estrangulamento).

Após o fechamento da segunda (primeira) válvula deestrangulamento 700, a estação de bombeamento 6.000 éacionada novamente a fim de bombear líquido hidráulico nasegunda taxa de fluxo para dentro das câmaras hidráulicas510 e, conseqüentemente, comprimir as duas bolsas deseparação 1.000 cujas saídas não estão fechadas pelasprimeiras válvulas de estrangulamento 700 correspondentes.

Quando são detectadas células sangüíneas pelo sensorda bolsa 730 na célula de separação 4.000 na qual essadetecção ocorre em terceiro lugar, a estação de bombeamento6.000 é interrompida, e a primeira válvula deestrangulamento 7 00 correspondente é fechada (no mesmotempo decorrido para que ocorra o fechamento da primeira(primeira) válvula de estrangulamento).

Após o fechamento da terceira (primeira) válvula deestrangulamento 7 00, a estação de bombeamento 600 éacionada novamente a fim de bombear líquido hidráulico nasegunda taxa de fluxo para dentro das câmaras hidráulicas510 e, conseqüentemente, comprimir a bolsa de separação1.000 cuja saída ainda não está fechada pela primeiraválvula de estrangulamento 700 correspondente.

Quando são detectadas células sangüíneas pelo sensorda bolsa 730 na célula de separação 4.000 na qual essadetecção ocorre por último, a estação de bombeamento 6.000é interrompida, e a primeira válvula de estrangulamento 7 00correspondente é fechada (no mesmo tempo decorrido para queocorra o fechamento da primeira válvula deestrangulamento).

No processo de transferência do componente plasmáticodescrito acima, a transferência dos quatro componentesplasmáticos começa ao mesmo tempo, é executada, em parte,simultaneamente, e é interrompida independentemente entreelas com a ocorrência de um evento específico em cada bolsade separação (detecção de células sangüíneas pelo sensor dabolsa).

O quarto estágio termina quando as quatro primeirasválvulas de estrangulamento 700 são fechadas.

No quinto estágio, um componente de capa de leucócitosé transferido para dentro das bolsas do componente de capade leucócitos 150.

A unidade de controle 900 é programada para começar oquinto estágio após as quatro primeiras válvulas deestrangulamento 7 00 estarem fechadas, mediante orecebimento de informações do último sensor da bolsa 730para detectar células sangüíneas.

No início desse estágio, a velocidade de rotaçãopermanece a mesma (terceira velocidade de centrifugação) ,uma primeira das quatro segundas válvulas deestrangulamento 710 controlando o acesso às bolsas docomponente de capa de leucócitos 150 é aberta, e a estaçãode bombeamento 6.000 é acionada a fim de bombear líquidohidráulico em uma terceira taxa de fluxo constante paradentro das câmaras hidráulicas 510 e, conseqüentemente,comprimir a bolsa de separação 1.000 na célula de separação4.000 associada às segundas válvulas de estrangulamento 710abertas, e efetuar a transferência do componente de capa deleucócitos para dentro da bolsa do componente de capa deleucócitos 200 conectada a essa bolsa de separação 1.000.

Após um período de tempo predeterminado depois de ascélulas sangüíneas serem detectadas pelo sensor do tubo 740na célula de separação 4.000 associada à segunda válvula deestrangulamento 710 aberta, a estação de bombeamento 6.000é interrompida e a segunda válvula de estrangulamento 710 éfechada.

Após a primeira (segunda) válvula de estrangulamento710 ter sido fechada (ou seja, a primeira válvula deestrangulamento do grupo de segundas válvulas deestrangulamento 710), uma segunda (segunda) válvula deestrangulamento 710 é aberta, e um segundo componente decapa de leucócitos é transferido para dentro de uma bolsade componente de capa de leucócitos 200, da mesma formadescrita acima.

O mesmo processo é realizado sucessivamente paratransferência do componente de capa de leucócitos das duasbolsas de separação 1.000 restantes para a bolsa docomponente de capa de leucócitos 200 a elas conectada.

No processo de transferência do componente de capa deleucócitos descrito acima, as transferências dos quatrocomponentes de capa de leucócitos são sucessivas, e a ordemde sucessão é predeterminada. No entanto, cada uma dasegunda, terceira e quarta transferências começa após aocorrência de um evento específico ao final datransferência prévia (detecção de células sangüíneas pelosensor do tubo 740 ou fechamento da segunda válvula 710).

O quinto estágio termina quando as quatro segundasválvulas de estrangulamento 710 são fechadas.

No sexto estágio, o processo de centrifugação éfinalizado.

A unidade de controle 900 é programada para iniciar osexto estágio após as quatro (segundas) válvulas deestrangulamento 710 serem fechadas, mediante recebimento deinformações do último sensor do tubo 740 para detectarcélulas sangüíneas.

A velocidade de rotação do rotor é diminuída até que orotor pare, a estação de bombeamento 6.000 é acionada a fimde bombear o líquido hidráulico das câmaras hidráulicas 510em uma taxa de fluxo elevada, até que as câmarashidráulicas 510 estejam vazias, e a primeira e a segundaválvulas de estrangulamento 700, 710 são acionadas a fim delacrar e cortar os tubos 17 0, 180. As hemácias permanecemna bolsa de separação 1.000.

Quando o quinto estágio estiver terminado, os quatroconjuntos de bolsas serão removidos do aparelho deseparação, e cada conjunto de bolsas será manipuladoseparadamente de forma manual.

A tampa quebrável 100 que bloqueia a comunicação entrea bolsa de separação 1.000 e o tubo 600 nela conectado équebrada, bem como a tampa quebrável 140 que bloqueia acomunicação entre a segunda bolsa satélite 300 e o tubo600. Permite-se que a solução de estocagem contida nasegunda bolsa satélite 300 flua por gravidade através dofiltro de leucorredução 130 e para dentro da bolsa deseparação 1.000, onde é misturada com as hemácias, a fim dereduzir a viscosidade desta. Permite-se então que oconteúdo da bolsa de separação 1.000 flua por gravidadeatravés do filtro 130 e para dentro da segunda bolsasatélite 300. Os leucócitos são capturados pelo filtro 130,de modo que sejam coletadas substancialmente apenashemácias para dentro da segunda bolsa satélite 300.

Com o uso de qualquer um dos dispositivos deprocessamento do sangue total como aqueles descritos acima,foi observado que, se o sangue total for processado nomesmo dia que foi coletado, as plaquetas se aglomeram ouagregam junto e recobrem a bolsa de separação de sangue.Isso leva a uma redução significativa do rendimento deplaquetas e diminui a qualidade do componente de plaquetas.Uma observação adicional é que o agrupamento/agregação deplaquetas não ocorre se o sangue total não for processadono mesmo dia que a coleta, mas sim for estocado eprocessado no dia seguinte após ser coletado.

Observa-se ainda que, quando se separa o sangue emcomponentes com o uso de um dispositivo automatizado deprocessamento de sangue total, os procedimentos deleucorredução para a remoção de leucócitos das hemácias sãomais eficientes em sangue recém-coletado do que no sanguemais velho.

A partir dessas observações, parece que, nosprocedimentos para a separação de componentes sangüíneos dosangue total com o uso de um dispositivo automatizado deprocessamento de sangue total, a coleta ideal de plaquetase a leucorredução ideal de hemácias possuem requisitosdiferentes.

As máquinas descritas acima são usadas para separarsangue total coletado previamente em componentes. 0 sanguetotal coletado previamente poderia ser separado emcomponentes no mesmo dia da coleta ou no dia seguinte apósa coleta. A eficiência da separação do sangue totalcoletado previamente depende, no entanto, de vários fatorescomo, por exemplo, o tipo de anticoagulante usadoinicialmente durante a coleta do sangue total e do pH departida do sangue total a ser separado. Como discutidoacima, a separação de plaquetas do sangue total no mesmodia em que o sangue é coletado não é tão eficiente quanto aseparação de plaquetas do sangue que foi coletado no diaanterior. Sangue do "mesmo dia" é definido como o sangueque foi separado em componentes no mesmo dia que foicoletado de um doador. Sangue do "dia seguinte" é definidocomo o sangue que foi separado em componentes no diaseguinte após a coleta.No sangue do mesmo dia, é maior a probabilidade de queas plaquetas se agreguem e/ou grudem à bolsa durante oprocesso de separação, comparado com o sangue do diaseguinte. No entanto, a redução da quantidade de leucócitosnos hemácias através da leucorredução é mais eficiente nosangue do mesmo dia, comparado com o sangue que foicoletado previamente, resfriado e estocado. Além disso,muitos filtros de leucorredução disponíveis comercialmenteno mercado são indicados para uso em temperatura ambiente,que é a temperatura do sangue do mesmo dia. Há maiorprobabilidade de que os filtros se entupam durante afiltração de leucócitos com o sangue resfriado do diaseguinte.

O sangue do mesmo dia tem um pH médio entre cerca de7,1 e 7,2. 0 sangue do dia seguinte possui um pH entrecerca de 6,8 a 6,9 a 37°C.

Para atender aos requisitos aparentemente antagônicospara a coleta de plaquetas e leucorredução de hemácias, opH do sangue total recém-coletado pode ser modificado parapermitir a separação imediata nos componentes desejados,especialmente plaquetas. Isso poderia ser feito alterando-se o pH do anticoagulante usado na coleta do sangue totalpara torná-lo mais ácido. 0 termo pH ácido significa que oanticoagulante é tamponado suficientemente, de tal formaque a mistura resultante de sangue total e anticoagulantetenha um pH em torno de 6,8.

Exemplos

Após a invenção ter sido descrita de forma geral, amesma será mais facilmente compreendida por referência aosexemplos seguintes, os quais são fornecidos como forma deilustração, e não têm a intenção de limitar a invenção.

Exemplo 1

Como discutido acima, CPD é o anticoagulante usadoatualmente na coleta do sangue total. CPD tem um pH médiode aproximadamente 7,0. O pH do CPD poderia ser diminuídopara evitar que as plaquetas se agreguem e grudem na bolsa.Um ácido, por exemplo, ácido cítrico, poderia seradicionado ao CPD para reduzir o pH resultante do sanguecom CPD até em torno de 6,8. Isso teria o mesmo efeito queestocar o sangue de um dia para o outro, o que, comomencionado acima, também reduz o pH do sangue. No entanto,o efeito seria imediato, permitindo, dessa forma, que osangue total recém-coletado fosse separado e as hemáciasfossem submetidas à leucorredução eficientemente no mesmodia que a coleta, ao mesmo tempo em que evitaria que asplaquetas se agrupassem e/ou grudassem na bolsa.

0 sangue total com CPD foi acidificado pela adição de60 g de ácido cítrico isotônico a 1.000 ml de água. Foramadicionados 4-5 g desta a 450 ml de sangue total coletadoem 63 ml de CPD.

A solução acidificante poderia ser adicionadadiretamente ao sangue total e ao anticoagulante contidos nabolsa 2 (veja a FIG. 1) ou na bolsa 1.000 (veja a FIG. 4),ou poderia ser adicionada ao sangue total e aoanticoagulante na bolsa de separação 5 (veja a FIG. 1) . Asolução acidificante também poderia ser adicionada aoanticoagulante antes de ele ser misturado com o sanguetotal coletado.

Em outra modalidade, o pH do anticoagulante poderiaser reduzido por adição de CO2 ao anticoagulante. O CO2poderia ser adicionado antes de o anticoagulante seradicionado ao sangue total, ou poderia ser adicionado apóso sangue total ser misturado com o anticoagulante. O CO2poderia ser borbulhado através do líquido com o uso de ummeio normalmente disponível.

Exemplo 2

Alternativamente, poderia ser utilizado umanticoagulante que tenha um pH inicial menor (seja maisácido) do que o CPD. Um anticoagulante desse tipo é o ACDA,que tem um pH médio de aproximadamente 6,8. ACDA poderiasubstituir o CPD.

O Exemplo 2 mostra os resultados da coleta deplaquetas obtidos de unidades de sangue total separado nomesmo dia que a coleta com o uso de um dos aparelhos deseparação de sangue total descritos acima. As unidades desangue total foram coletadas em ACDA ou em CPD. Asplaquetas foram contadas no momento 0 após a coleta (T =0) , 1 hora (T=I hora) e 24 horas (T = 24 horas) após acoleta. Como pode ser observado a partir da tabela, asunidades coletadas inicialmente em ACDA produziram umrendimento de plaquetas superior (ou contagem de células) ebem menos agregação (recuperação de plaquetas) do que asunidades coletadas inicialmente em CPD.

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Como pode ser observado a partir dos Exemplos 1 e 2,alterando-se o pH do anticoagulante usado, as plaquetasirão se agregar e/ou grudar na bolsa bem menos do que sefor usado o anticoagulante que possui um pH maior. Pode serextrapolado a partir desses dados que a leucorredução serámais eficiente, porque o sangue total é separado emcomponentes no mesmo dia que foi coletado. Esse princípio émostrado no Exemplo 3 abaixo.

Exemplo 3

No Exemplo 3, o sangue total foi coletado em ACDA eseparado no dia seguinte após estocagem no frio de um diapara o outro. As hemácias separadas foram então submetidasà leucorredução (mostrados como estocagem P0ST-0/N natabela abaixo). Esses resultados foram comparados com osangue total coletado em ACDA e separado e submetido àleucorredução no mesmo dia que a coleta (mostrados comoestocagem PRE-O/N). Como observado abaixo, a leucorreduçãodo sangue do dia seguinte coletado em ACDA não foicomprometida. Os dados mostrados representam a média de 6amostras.<table>table see original document page 50</column></row><table>

Exemplo 4

Se sangue do dia seguinte tiver que ser separado esubmetido à leucorredução, em outra modalidade, pode seradicionada uma solução de tamponamento para aumentar o pHdas hemácias separadas às hemácias separadas, antes daleucorredução, para permitir uma filtração mais eficiente.

Poderia ser adicionada uma solução que aumentasse o pHdas hemácias separadas do sangue do dia seguinte à bolsa deseparação 5 (veja a FIG. 1) ou à bolsa 1.000 (veja a FIG.4) . Após o pH das hemácias separadas alcançar um pH deaproximadamente 6,8, as hemácias poderiam então sersubmetidas à leucorredução. Exemplos de soluções, queaumentam o pH incluem tampões como, por exemplo, tampões defosfato, que aumentariam o pH da solução até entreaproximadamente 6,7 a 7,0.

Em outra modalidade, o pH de qualquer soluçãonormalmente usada para estocar hemácias poderia seraumentado para fornecer um pH mais adequado para aleucorredução das hemácias. Uma solução de estocagem quepossua um pH aumentado poderia ter um pH em torno de 6,7 a7,0. Uma solução de estocagem que possui um pH aumentadopoderia estar na bolsa 4 (veja a FIG. 1) ou na bolsa 300(veja a FIG. 4).

Para as finalidades desta especificação, entende-seque podem ser feitas várias alterações e modificações àinvenção que estarão incluídas no escopo da invenção. Podemser feitas várias outras alterações que serão evidentespara aqueles habilitados na técnica e que são englobadaspelo conceito inventivo dos métodos aqui revelados.

Claims (23)

1. Método de coleta e separação do sangue total empelo menos um componente, caracterizado por compreender asetapas de:- adição de um anticoagulante que possui um pH ácido auma bolsa para a coleta e/ou separação do sangue total;- coleta do sangue total na bolsa;- carga da bolsa contendo sangue total anticoaguladoem um rotor;- rotação da bolsa no rotor para separar o sanguetotal em pelo menos um componente; e- compressão da bolsa no rotor para transferir o pelomenos um componente da bolsa de separação para dentro deuma bolsa satélite.

2. Método, de acordo com a reivindicação 1,caracterizado pelo fato de que a etapa de adição de umanticoagulante ainda compreende a adição de ACDA.

3. Método, de acordo com a reivindicação 1,caracterizado pelo fato de que a etapa de adição de umanticoagulante ainda compreende a adição de CPD acidifiçadocom ácido cítrico.

4. Método, de acordo com a reivindicação 1,caracterizado pelo fato de que a etapa de adição de umanticoagulante ainda compreende a adição de CPD acidificadocom dióxido de carbono.

5. Método, de acordo com a reivindicação 1,caracterizado pelo fato de que o sangue total anticoaguladopossui um pH médio entre 6,7 e 7,0.

6. Método, de acordo com a reivindicação 1,caracterizado pelo fato de que o sangue total anticoaguladopossui um pH médio de aproximadamente 6,8.

7. Método, de acordo com a reivindicação 1,caracterizado pelo fato de que a etapa de separação dosangue total em pelo menos um componente ainda compreende aseparação de um componente de hemácias.

8. Método, de acordo com a reivindicação 7,caracterizado pelo fato de que a etapa de separação aindacompreende a leucorredução do componente de hemáciasseparado.

9. Método, de acordo com a reivindicação 1,caracterizado pelo fato de que a etapa de separação aindacompreende a separação do sangue total no mesmo dia em queo sangue foi coletado.

10. Método, de acordo com a reivindicação 1,caracterizado pelo fato de que a etapa de separação aindacompreende a separação do sangue total no dia seguinte apóso sangue ter sido coletado.

11. Método de separação de hemácias do sangue totalcoletado e estocado previamente, caracterizado porcompreender as etapas de:- coleta do sangue total no anticoagulante CPD;- estocagem do sangue total anticoagulado de um diapara o outro;- carga do sangue total anticoagulado em um rotor;- a rotação do rotor para separar o sangue total empelo menos um componente de hemácias;- a compressão do sangue no rotor para transferir pelomenos o componente de hemácias para dentro de uma bolsasatélite; e- aumento do pH do componente de hemácias separado nabolsa satélite.

12. Método, de acordo com a reivindicação 11,caracterizado por ainda compreender a etapa deleucorredução do componente de hemácias que possui pHaumentado.

13. Método, de acordo com a reivindicação 11,caracterizado pelo fato de que a etapa de aumento do pH docomponente de hemácias separado ainda compreende a adiçãode um tampão de fosfato.

14. Método, de acordo com a reivindicação 11,caracterizado pelo fato de que a etapa de aumento do pH docomponente de hemácias separado ainda compreende a adiçãode uma solução de estocagem de hemácias que possui um pHaumentado.

15. Método para a separação do sangue total emcomponentes, caracterizado por compreender as etapas de:- coleta do sangue total para dentro de uma bolsa quecontém um anticoagulante que possui um pH ácido;carga da bolsa que contém o anticoagulante e osangue total em um rotor;- a rotação do rotor para separar o sangue total em umcomponente plasmático, um componente de plaquetas e umcomponente de hemácias;compressão da bolsa no rotor para transferir ocomponente plasmático em uma primeira bolsa satélite;compressão da bolsa no rotor para transferir ocomponente de plaquetas em uma segunda bolsa satélite; ecompressão da bolsa no rotor para transferir ocomponente de hemácias em uma terceira bolsa satélite.

16. Método, de acordo com a reivindicação 15,caracterizado por ainda incluir a etapa de aumento do pH docomponente de hemácias.

17. Método, de acordo com a reivindicação 16,caracterizado pelo fato de que a etapa de aumento do pH docomponente de hemácias ainda compreende a adição de umasolução de estocagem de hemácias que possui um pH aumentadopara aumentar o pH das hemácias.

18. Método, de acordo com a reivindicação 15,caracterizado ainda por compreender uma etapa que consisteno fluxo do componente de hemácias através de um filtro deleucorredução.

19. Método, de acordo com a reivindicação 15,caracterizado ainda por compreender uma etapa de estocagemdo sangue total coletado e do anticoagulante de um dia parao outro, antes da etapa de separação.

20. Conjunto de bolsa pré-conectada e solução,caracterizado por compreender:uma bolsa de coleta que contém soluçãoanticoagulante que possui um pH ácido;- uma bolsa de separação pré-conectada através detubos de transferência à bolsa de coleta; e- pelo menos uma bolsa satélite pré-conectada atravésde tubos de transferência à bolsa de separação.

21. Bolsa pré-conectada e conjunto de coleta, dareivindicação 20, caracterizado ainda por compreenderdiversas bolsas satélites pré-conectadas à bolsa deseparação através de tubos de transferência.

22. Conjunto de bolsa pré-conectada e solução,caracterizado por compreender:- uma bolsa de separação que contém soluçãoanticoagulante que possui um pH ácido; e- pelo menos uma bolsa satélite pré-conectada atravésde tubos à bolsa de separação.

23. Bolsa pré-conectada e conjunto de separação, deacordo com a reivindicação 22, caracterizado ainda porcompreender diversas bolsas satélites pré-conectadasatravés de tubos ã bolsa de separação.