BR112018015191B1 - Compostos de 6,7-di-hidro-5h-pirazolo[5,1-b][1,3]oxazina-2-carboxamida, seu uso e composição farmacêutica que os compreende - Google Patents

Abstract

a presente invenção refere-se aos inibidores de pde4b de fórmula i: (i) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que os substituintes r1, r2, r3, e r4 são como definidos aqui. a invenção refere-se às composições farmacêuticas que compreendem compostos, métodos de tratamento usando os compostos, e métodos de preparação dos compostos.

Description

Campo da Invenção

[001] A presente invenção refere-se aos compostos de 6,7-di- hidro-5H-pirazolo[5,1-b][1,3]oxazina de fórmula I, que são inibidores de isozimas de PDE4, especialmente com uma afinidade de ligação para a isoforma de PDE4B, e ao uso de tais compostos em métodos para o tratamento de distúrbios ou doenças do sistema nervoso central (SNC), metabólicas, autoimunes e inflamatórias.

Antecedentes da Invenção

[002] As fosfodiesterases (PDEs) são uma classe de enzimas intracelulares que hidrolisam as moléculas de sinalização de segundo mensageiro, 3',5'-monofosfato de adenosina cíclico (cAMP) e 3‘,5‘- monofosfato de guanosina cíclico (cGMP) de guanisina, no 5’ - monofosfato de adenosina e 5’ - monofosfato de guanosina de não sinalização, respectivamente.

[003] O cAMP funciona como um segundo mensageiro que regula muitos processos intracelulares dentro do corpo. Um exemplo está nos neurônios do sistema nervosa central, onde a ativação de cinases dependentes de cAMP e a subsequente fosforilação de proteínas estão envolvidas na regulação aguda de transmissão sinápticas bem como diferenciação e sobrevivência neuronal. A complexidade da sinalização de nucleotídeo cíclico é indicada pela diversidade molecular das enximas envolvidas na síntese e degradação de cAMP. Existem pelo menos dez famílias de adenilil ciclases, e onze famílias de fosfodiesterases. Além disso, diferentes tipos de neurônios são conhecidos expresser múltiplas isozimas de cada uma destas classes, e existe boa evidência para compartimentalização e especificidade de função para diferentes isozimas dentro de um determinado neurônio.

[004] Um mecanismo principal para regular a sinalização de nucleotídeo cíclico é por meio de catabolismo de nucleotídeo cíclico catalisado por fosfodiesterase. As onze famílias conhecidas de PDEs são codificadas por 21 diferentes genes; cada gene tipicamente produz múltiplas de união que também contribuem para a diversidade de isozima. As famílias de PDE são distiguidas funcionalmente com base na especificidade de substrato de nucleotídeo cíclico, mecanismo(s) de regulação, e sensibilidade aos inibidores. Além disso, PDEs são diferencialmente expressas por todo o organismo, incluindo no sistema nervoso central. Como um resultado destas atividades enzimáticas distintas e localização, diferentes isozimas de PDEs podem exercer funções fisiológicas distintas. Além disso, compostos que podem seletivamente inibir distintas isozimas de PDE podem oferecer efeitos terapêuticos particulares, ou ambos (Deninno, M., Future Directions in Phosphodiesterase Drug Discovery. Bioorganic e Medicinal Chemistry Letters 2012, 22, 6794-6800).

[005] A presente invenção refere-se aos compostos tendo uma afinidade de ligação para a quarta família de PDEs (isto é, PDE4A, PDE4B, PDE4C, e PDE4D), e, em particular, uma afinidade de ligação para as isoformas PDE4A, PDE4B, e PDE4C.

[006] As isozimas de PDE4 realizam a degradação hidrolítica de afinidade elevada, seletiva do segundo mensageiro 3',5'-monofosfato de adenosina cíclico (cAMP), e são caracterizadas por sensibilidade à inibição por Rolipram™ (Schering AG); efeitos farmacológicos benéficos resultantes daquela inibição foram mostrados em uma variedade de modelos de doença. Diversos outros inibidores de PDE4 foram descobertos nos últimos anos. Por exemplo, Roflumilaste (Daliresp®), comercializado por AstraZenecais aprovado para doença pulmonar obstrutiva crônica severa (COPD) para diminuir o número de crises ou prevenir as exacerbações de sintomas de COPD. Apremilaste (Otezla®) foi aprovado pela U.S. Food and Drug Administration para o tratamento de adultos com artrite psoriática ativa.

[007] Enquanto a atividade farmacológica benéfica de inibidores de PDE4 foi mostrada, um efeito collateral comum destes tratamentos foi a indução de sintomas gastrointestinais tais como náusea, vômito e diarreia, que são hipotetizados estar associados com a inibição da isoforma PDE4D. Tentativas foram feitas para desenvolver compostos com uma afinidade para a isoforma de PDE4B maior do que a isoforma PDE4D (Veja: Donnell, A. F. et al., Identification of piridazino[4,5-b]indolizines as selective PDE4B inhibitors. Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters 2010, 20, 2163-7; e Naganuma, K. et al., Discovery of selective PDE4B inhibitors. Bioorganic and Medicinal Chemistry Letters 2009, 19, 3174-6). Entretanto, permanece uma necessidade de desenvolver inibidores de PDE4 seletivos, especialmente aqueles tendo uma afinidade para a isoforma de PDE4B. Em particular, compostos com afinidade de ligação realçada para a isoforma de PDE4B maior do que a isoforma PDE4D são anticipados ser úteis no tratamento de várias doenças e distúrbios do sistema nervosa central (SNC). A descoberta de compostos selecionados da presente invenção trata esta necessidade continuada, e fornece terapias adicionais para o tratamento de várias doenças e distúrbios do sistema nervosa central (SNC), bem como doenças ou distúrbios metabólicos, autoimunes e inflamatórios.

[008] O tratamento com os inibidores de PDE4B da presente invenção pode também induzir a um decréscimo nos efeitos colaterais gastrointestinais (por exemplo, nausea, vômito e diarreia) acreditados estarem associados com a inibição da isoforma PDE4D (Robichaud, A. et al., Deletion of Phosphodiesterase 4D in Mice Shortens Q2- Adrenoreceptor-Mediated Anesthesia, A Behavioral Correlate of Emesis. Journal of Clinical Investigation 2002, 110, 1045-1052).

Sumário da Invenção

[009] A presente invenção está direcionada aos compostos de fórmula I:

[0010] ou um sal farmaceuticamente aceitável dos mesmos, em que:

[0011] R1 é um substituinte selecionado do grupo que consiste em (C3-C8)cicloalquila, (de 4 a 10 membros)heterocicloalquila, (C6- C10)arila, e (de 5 a 10 membros)heteroarila, em que a (C3- C8)cicloalquila, (de 4 a 10 membros)heterocicloalquila, (C6-C10)arila e (de 5 a 10 membros)heteroarila são opcionalmente substituídas com um a cinco R5;

[0012] R2 e R3 são cada qual independentemente selecionados do grupo que consiste em hidrogênio, (C1-C6)alquila opcionalmente substituída, (C3-C8)cicloalquila, (de 4 a 10 membros)heterocicloalquila, (C6-C10)arila, e (de 5 a 10 membros)heteroarila, em que a (C3- C8)cicloalquila, (de 4 a 10 membros)heterocicloalquila, (C6-C10)arila, e (de 5 a 10 membros)heteroarila são opcionalmente substituídas com um a cinco R6; ou

[0013] R2 e R3 considerados juntamente com o nitrogênio ao qual eles são ligados formam uma (de 4 a 10 membros)heterocicloalquila ou uma (de 5 a 10 membros)heteroarila, em que a (de 4 a 10 membros)heterocicloalquila e (de 5 a 10 membros)heteroarila são opcionalmente substituídas com um a cinco R6;

[0014] quando presente, R4, em cada ocorrência, é independentemente selecionado do grupo que consiste em halogênio, ciano, hidróxi, -SF5, nitro, (C1-C6)alquila opcionalmente substituída, (C2-C6)alquenila opcionalmente substituída, (C2-C6)alquinila opcionalmente substituída, (C1-C6)alquiltio opcionalmente substituído, (C1-C6)alcóxi opcionalmente substituído, -N(R7)(R8), -N(R7)(C=(O)R8), -C(=O)N(R7)(R8), -O-C(=O)-N(R7)(R8), -C(=O)-R7, e -C(=O)-OR7;

[0015] quando presentes, R5 e R6, em cada ocorrência, são independentemente selecionados do grupo que consiste em halogênio, oxo, ciano, hidróxi, -SF5, nitro, (C1-C6)alquila opcionalmente substituída, (C2-C6)alquenila opcionalmente substituída, (C2- C6)alquinila opcionalmente substituída, (C1-C6)alquiltio opcionalmente substituído, (C1-C6)alcóxi opcionalmente substituído, -N(R7)(R8), - N(R7)(C=(O)R8), -C(=O)N(R7)(R8), -O-C(=O)-N(R7)(R8), -C(=O)-R7, e - C(=O)-OR7;

[0016] R7 e R8 em cada ocorrência são independentemente selecionados do grupo que consiste em hidrogênio e (C1-C6)alquila; e

[0017] a é representado por um número inteiro selecionado de 0, 1, 2 ou 3.

[0018] Os compostos da invenção incluem os Exemplos 1-64 ou um sal farmaceuticamente aceitável dos mesmos como descrito aqui.

[0019] Os compostos de fórmula I são inibidores da isoforma PDE4B.

[0020] Os compostos de fórmula I são úteis para o tratamento ou prevenção de doenças e/ou distúrbios do sistema nervoso central (SNC), dor, trauma, doenças ou distúrbios cardiológicos, trombóticos, metabólicos, autoimunes e inflamatórios, e distúrbios associados com a atividade endotelial realçada/função da barreira endotelial prejudicada.

[0021] A presente invenção está também direcionada ao uso dos compostos descritos aqui, ou um sal farmaceuticamente aceitável dos mesmos, na preparação de um medicamento para o tratamento ou prevenção de uma condição passível à modulação da família de gene PDE4B (isto é, enzimas de PDE4B).

[0022] A presente invenção está também direcionada às formulações farmaceuticamente aceitáveis contendo uma mistura de um composto(s) da presente invenção e pelo menos um excipiente formulado em uma forma de dosagem farmacêutica. Exemplos de tais formas de dosagem incluem comprimidos, cápsulas, supositórios, géis, cremes, unguentos, loções, soluções/suspensões para injeção (por exemplo, depósito), aerossóis para inalação e soluções/suspensões para ingestão oral.

Descrição Detalhada da Invenção

[0023] Os títulos neste documento estão sendo utilizados apenas para agilizar sua revisão pelo leitor. Eles não devem ser construídos como limitantes da invenção ou reivindicações, de modo algum.

Definições e Exemplificações

[0024] Como usado por todo este pedido, incluindo as reivindicações, os seguintes termos têm os significados definidos abaixo, a menos que especificamente indicado de outro modo. O plural e singular devem ser tratados como alternáveis, além da indicação de número.

[0025] Como usado aqui, o termo "membros de n" onde n é um número inteiro tipicamente descreve o número de átomos de formação de anel em uma porção, onde o número de átomos de formação de anel é n. Por exemplo, piridina é um exemplo de um anel heteroarila de 6 membros e tiazol é um exemplo de um grupo heteroarila de 5 membros.

[0026] Em vários lugares na presente especificação, os substituintes dos compostos da invenção são descritos em grupos ou em faixas. Especificamente, pretende-se que a invenção inclua cada e qualquer subcombinação dos membros de tais grupos e faixas. Por exemplo, o termo "(C1-C6)alquila" especificamente destina-se a incluir C1 alquil (metil), C2 alquil (etila), C3 alquila, C4 alquila, C5 alquila, e C6 alquila. Para outro exemplo, o termo "um grupo (de 5 a 10 membros)heterocicloalquila" especificamente destina-se a incluir qualquer grupo heterocicloalquila de 5-, 6-, 7-, 8-, 9-, e 10 membros.

[0027] O termo "(C1-C6)alquila", como usado aqui, refere-se a um grupo alquila de cadeia linear ou ramificada, saturada contendo de 1 a 6 átomos de carbono, tal como, porém não limitado a, metila, etila, n-propila, isopropila, n-butila, sec-butila, isobutila, terc-butila, n-pentila, isopentila, neopentila, e n-hexila.

[0028] O termo " (C1-C6)alquila opcionalmente substituída", como usado aqui, refere-se a uma (C1-C6)alquila como definido acima, em que um ou mais átomos de hidrogênio são substituídos por um substituinte selecionado do grupo que consiste em halogênio, oxo, ciano, hidróxi, -SF5, nitro, -N(R7)(R8), -N(R7)(C(=O)R8), -N(R7)C(=O)- OR8, -C(=O)-N(R7)(R8), -O-C(=O)-N(R7)(R8), -C(=O)-R7, -C(=O)-OR7, e (C3-C8)cicloalquila, em que R7 e R8 são cada qual independentemente hidrogênio ou (C1-C6)alquila opcionalmente substituída. Por exemplo, uma porção (C1-C6)alquila pode ser substituída com um ou mais átomos de halogênio para formar uma "halo(C1-C6)alquila". Exemplos representativos de uma halo(C1-C6)alquila incluem, porém não estão limitados a, fluorometila, 2-fluoroetila, difluorometila, trifluorometila, e pentafluoroetila.

[0029] O termo "(C2-C6)alquenila" refere-se a um hidrocarboneto alifático tendo de 2 a 6 átomos de carbono e tendo pelo menos uma ligação dupla de carbono-carbono, incluindo grupos de cadeia linear ou cadeia ramificada tendo pelo menos uma ligação dupla de carbono- carbono. Exemplos representativos incluem, porém não estão limitados a, etenila,1-propenila, 2-propenil (alila), isopropenila, 2-metil- 1-propenila, 1-butenila, 2-butenila, e similares. Quando os compostos da invenção contêm um grupo (C2-C6)alquenila, o composto pode existir como a forma E (entgegen) pura, a forma Z (zusammen) pura, ou qualquer mistura das mesmas.

[0030] O termo "(C2-C6)alquenila opcionalmente substituída" refere-se a uma (C2-C6)alquenila como definido acima, em que um ou mais átomos de hidrogênio são substituídos por um substituinte selecionado do grupo que consiste em halogênio, oxo, ciano, hidróxi, - SF5, nitro, -N(R7)(R8), -N(R7)(C(=O)R8), -N(R7)C(=O)-OR8, -C(=O)- N(R7)(R8), -O-C(=O)-N(R7)(R8), -C(=O)-R7, -C(=O)-OR7, e (C3-C8)cicloalquila, em que R7 e R8 são cada qual independentemente hidrogênio ou (C1-C6)alquila opcionalmente substituída.

[0031] O termo "(C2-C6)alquinila" refere-se a um hidrocarboneto alifático tendo dois a seis átomos de carbono e pelo menos uma ligação tripla de carbono-carbono, incluindo cadeias lineares e cadeias ramificadas tendo pelo menos uma ligação tripla de carbono-carbono. Exemplos representativos incluem, porém não estão limitados a, etinila, propinila, butinila, pentinila, e hexinila.

[0032] O termo "(C2-C6)alquinila opcionalmente substituída" refere- se a uma (C2-C6)alquinila como definido acima, em que um ou mais átomos de hidrogênio são substituídos por um substituinte selecionado do grupo que consiste em halogênio, oxo, ciano, hidróxi, -SF5, - N(R7)(R8), -N(R7)(C(=O)R8), -N(R7)C(=O)-OR8, -C(=O)-N(R7)(R8), -O- C(=O)-N(R7)(R8), -C(=O)-R7, -C(=O)-OR7, e (C3-C8)cicloalquila, em que R7 e R8 são cada qual independentemente hidrogênio ou (C1-C6)alquila opcionalmente substituída.

[0033] O termo "(C1-C6)alcóxi" como usado aqui, refere-se a um grupo (C1-C6)alquila, como definido acima, ligado à porção molecular origem através de um átomo de oxigênio. Exemplos representativos de um (C1-C6)alcóxi incluem, porém não estão limitados a, metóxi, etóxi, propóxi, 2-propóxi, butóxi, terc-butóxi, pentilóxi, e hexilóxi.

[0034] O termo "(C1-C6)alcóxi opcionalmente substituído" como usado aqui, refere-se a um grupo (C1-C6)alcóxi, como definido acima, em que um ou mais átomos de hidrogênio são substituídos por um substituinte selecionado do grupo que consiste em halogênio, oxo, ciano, hidróxi, -SF5, nitro, -N(R7)(R8), -N(R7)(C(=O)R8), -N(R7)C(=O)- OR8, -C(=O)-N(R7)(R8), -O-C(=O)-N(R7)(R8), -C(=O)-R7, -C(=O)-OR7, e (C3-C8)cicloalquila, em que R7 e R8 são cada qual independentemente hidrogênio ou (C1-C6)alquila opcionalmente substituída. Por exemplo, um (C1-C6)alcóxi pode ser substituído com um ou mais átomos de halogênio para formar um "halo(C1-C6)alcóxi". Exemplos representativos de um halo(C1-C6)alcóxi incluem, porém não estão limitados a, fluorometóxi, difluorometóxi, 2-fluoroetóxi, trifluorometóxi, e pentafluoroetóxi.

[0035] O termo "(C1-C6)alquiltio", como usado aqui, refere-se a um grupo (C1-C6)alquila, como definido acima, ligado à porção molecular origem através de um átomo de enxofre. Exemplos representativos de um (C1-C6)alquiltio incluem, porém não estão limitados a, metiltio, etiltio, propiltio, e similares.

[0036] O termo " (C1-C6)alquiltio opcionalmente substituído", como usado aqui, refere-se a um grupo (C1-C6)alquiltio, como definido acima, em que um ou mais átomos de hidrogênio são substituídos por um substituinte selecionado do grupo que consiste em halogênio, oxo, ciano, hidróxi, -SF5, nitro, -N(R7)(R8), -N(R7)(C(=O)R8), -N(R7)C(=O)- OR8, -C(=O)-N(R7)(R8), -O-C(=O)-N(R7)(R8), -C(=O)-R7, -C(=O)-OR7, e (C3-C8)cicloalquila, em que R7 e R8 são cada qual independentemente hidrogênio ou opcionalmente substituída (C1-C6)alquila.

[0037] Como usado aqui, o termo "(C3-C8)cicloalquila" refere-se a um substituinte carbocíclico obtido removendo o hidrogênio de uma molécula carbocíclica saturada, em que uma estrutura cíclica tem 3 a 8 carbonos. Uma "(C3-C6)cicloalquila" refere-se a um substituinte carbocíclico obtido removendo o hidrogênio de uma molécula carbocíclica saturada tendo de 3 a 6 átomos de carbono. Uma "cicloalquila’ pode ser um anel monocíclico, exemplos dos quais incluem ciclopropila, ciclobutila, ciclopentila, ciclo-hexila, ciclo-heptila, e ciclo-octila. Também incluídos na definição de cicloalquila são cicloalquilas não aromáticas insaturadas tais como, porém não limitadas à ciclo-hexenila, ciclo-hexadienila, ciclopentenila, ciclo- heptenila, e ciclo-octenila. Alternativamente, uma cicloalquila pode conter mais do que um anel tal como uma "(C4-C8)bicicloalquila". O termo "(C4-C8)bicicloalquila" refere-se a um sistema de anel bicíclico contendo de 4 a 8 átomos de carbono. A bicicloalquila pode ser fundida, tal como biciclo[1.1.0]butanila, biciclo[2.1.0]pentanila, biciclo[2.2.0]hexanila, biciclo[3.1.0]hexanila, biciclo[3.2.0]heptanila, e biciclo[3.3.0]-octanila. O termo "bicicloalquila" também inclui sistemas de bicicloalquila em pontes tais como, porém não limitados a, biciclo[2.2.1]heptanila e biciclo[1.1.1]pentanila.

[0038] O termo " "(C3-C8)cicloalquila opcionalmente substituída" refere-se a uma (C3-C8)cicloalquila, como definido acima, em que um ou mais átomos de hidrogênio são substituídos por um substituinte selecionado do grupo que consiste em halogênio, oxo, ciano, hidróxi, - SF5, nitro, (C1-C6)alquila opcionalmente substituída, (C1-C6)alcóxi opcionalmente substituído, (C1-C6)alquiltio opcionalmente substituído, - N(R7)(R8), -N(R7)(C(=O)R8), -N(R7)C(=O)-OR8, -C(=O)-N(R7)(R8), -O- C(=O)-N(R7)(R8), -C(=O)-R7, -C(=O)-OR7, e (C3-C8)cicloalquila, em que R7 e R8 são cada qual independentemente hidrogênio ou (C1-C6)alquila opcionalmente substituída.

[0039] Uma "heterocicloalquila", como usado aqui, refere-se a uma cicloalquila como definido acima, em que pelo menos um dos átomos de carbono de anel é substituído com um heteroátomo selecionado de nitrogênio, oxigênio ou enxofre. O termo "(de 4 a 6 membros)heterocicloalquila" significa que o substituinte de heterocicloalquila contém um total de 4 a 6 átomos de anel, pelo menos um dos quais é um heteroátomo. O termo "(de 4 a 8 membros)heterocicloalquila" significa que o substituinte de heterocicloalquila contém um total de 4 a 8 átomos de anel, pelo menos um dos quais é um heteroátomo. Uma "(de 4 a 10 membros)heterocicloalquila" significa que o substituinte de heterocicloalquila contém um total de 4 a 10 átomos de anel. A "(de 6 membros)heterocicloalquila" significa que o substituinte de heterocicloalquila contém um total de 6 átomos de anel, pelo menos um dos quais é um heteroátomo. A "(de 5 membros)heterocicloalquila" significa que o substituinte de heterocicloalquila contém um total de 5 átomos de anel pelo menos um dos quais é um heteroátomo. Uma heterocicloalquila pode ser um anel simples com até o 10 total de membros. Alternativamente, uma heterocicloalquila como definido acima pode compreender 2 ou 3 anéis fundidos juntamente, em que pelo menos um tal anel contém um heteroátomo como um átomo de anel (isto é, nitrogênio, oxigênio, ou enxofre). O substituinte de heterocicloalquila pode ser ligado ao núcleo pirazolo-oxazina dos compostos da presente invenção por meio de um átomo de nitrogênio tendo a valência apropriada, ou por meio de qualquer átomo de carbono de anel. O substituinte de heterocicloalquila pode também ser ligado ao nitrogênio da porção amida no núcleo pirazol-oxazina. A porção heterocicloalquila pode ser opcionalmente substituída com um ou mais substituintes em um átomo de nitrogênio tendo a valência apropriada, ou em qualquer átomo de carbono disponível.

[0040] Também incluídas na definição de "heterocicloalquila" estão heterocicloalquilas que são fundidas ao anel fenila ou naftila ou a um anel heteroarila tais como, porém não limitados a, um anel piridinila ou um anel pirimidinila.

[0041] Exemplos de anéis heterocicloalquila incluem, porém não estão limitados a, azetidinila, di-hidrofuranila, di-hidrotiofenila, tetra- hidrotiofenila, tetra-hidrofuranila, tetra-hidro-triazinila, tetra- hidropirazolila, tetra-hidro-oxazinila, tetra-hidropirimidinila, octa-hidro- benzofuranila, octa-hidrobenzimidazolila, octa-hidrobenzotiazolila, imidazolidinila, pirrolidinila, piperidinila, piperazinila, oxazolidinila, tiazolidinila, pirazolidinila, tiomorfolinila, tetra-hidropiranila, tetra- hidrotiazinila, tetra-hidrotiadiazinila, tetra-hidro-oxazolila, morfolinila, oxetanila, tetra-hidrodiazinila, oxazinila, oxatiazinila, quinuclidinila, cromanila, isocromanila, di-hidrobenzodioxinila, benzodioxolila, benzoxazinila, indolinila, di-hidrobenzofuranila, tetra-hidroquinolila, isocromila, di-hidro-1H-isoindolila, 2-azabiciclo[2.2.1]heptanonila, 3- azabiciclo[3.1.0]hexanila, 3-azabiciclo[4.1.0]heptanila e similares. Outros exemplos de anéis heterocicloalquila incluem tetra-hidrofuran- 2-ila, tetra-hidrofuran-3-ila, imidazolidin-1-ila, imidazolidin-2-ila, imidazolidin-4-ila, pirrolidin-1-ila, pirrolidin-2-ila, pirrolidin-3-ila, piperidin-1-ila, piperidin-2-ila, piperidin-3-ila, piperidin-4-ila, piperazin-1- ila, piperazin-2-ila, 1,3-oxazolidin-3-ila, 1,4-oxazepan-1-ila, isotiazolidinila, 1,3-tiazolidin-3-ila, 1,2-pirazolidin-2-ila, 1,2-tetra- hidrotiazin-2-ila, 1,3-tiazinan-3-ila, 1,2-tetra-hidrodiazin-2-ila, 1,3-tetra- hidrodiazin-1-ila, 1,4-oxazin-4-ila, oxazolidinonila, 2-oxo-piperidinila (por exemplo, 2-oxo-piperidin-1-ila), e similares.

[0042] O termo "heterocicloalquila opcionalmente substituída" [por exemplo, (de 4 a 10 membros)heterocicloalquila opcionalmente substituída refere-se a uma heterocicloalquila, como definido acima, em que um ou mais átomos de hidrogênio, onde quimicamente permissível, são substituídos por um substituinte selecionado do grupo que consiste em halogênio, oxo, ciano, hidróxi, -SF5, nitro, (C1- C6)alquila opcionalmente substituída, (C1-C6)alcóxi opcionalmente substituído, (C1-C6)alquiltio opcionalmente substituído, -N(R7)(R8), -N(R7)(C(=O)R8), -N(R7)C(=O)-OR8, -C(=O)-N(R7)(R8), -O-C(=O)- N(R7)(R8), -C(=O)-R7, -C(=O)-OR7, e (C3-C8)cicloalquila, em que R7 e R8 são cada qual independentemente hidrogênio ou (C1-C6)alquila opcionalmente substituída.

[0043] Uma "(C6-C10)arila" refere-se a um grupo aromático de anel fundido monocíclico ou policíclico de totalmente-carbono tendo um sistema pi-elétron conjugado contendo de 6 a 10 átomos de carbono, tal como fenila ou naftila.

[0044] O termo "(C6-C10)arila opcionalmente substituída" refere-se a uma (C6-C10)arila, como definido acima, em que um ou mais átomos de hidrogênio são substituídos por um substituinte selecionado do grupo que consiste em halogênio, oxo, ciano, hidróxi, -SF5, nitro, (C1-C6)alquila opcionalmente substituída, (C1-C6)alcóxi opcionalmente substituído, (C1-C6)alquiltio opcionalmente substituído,- N(R7)(R8),-N(R7)(C(=O)R8),-N(R7)C(=O)-OR8, -C(=O)-N(R7)(R8), -O- C(=O)-N(R7)(R8), -C(=O)-R7, -C(=O)-OR7, e (C3-C8)cicloalquila, em que R7 e R8 são cada qual independentemente hidrogênio ou (C1-C6)alquila opcionalmente substituída.

[0045] Como usado aqui, o termo "heteroarila" refere-se a grupos heterocíclicos aromático monocíclico ou policíclico de anel fundido com um ou mais membros de anel de heteroátomo (átomos de formação de anel) cada qual independentemente selecionado de oxigênio (O), enxofre (S) e nitrogênio (N) em pelo menos um anel. Um anel "(de 5 a 14 membros)heteroarila" refere-se a um anel heteroarila tendo de 5 a 14 átomos de anel, em que pelo menos um dos átomos de anel é um heteroátomo (isto é, oxigênio, nitrogênio, ou enxofre), com os átomos de anel restantes sendo independentemente selecionados do grupo que consiste em carbono, oxigênio, nitrogênio, e enxofre. Um anel "(de 5 a 10 membros)heteroarila" refere-se a um anel heteroarila tendo de 5 a 10 átomos de anel, em que pelo menos um dos átomos de anel é um heteroátomo (isto é, oxigênio, nitrogênio, ou enxofre), com os átomos de anel restantes sendo independentemente selecionados do grupo que consiste em carbono, oxigênio, nitrogênio, e enxofre. Um anel "heteroarila contendo nitrogênio (de 5 a 10 membros)" refere-se a um anel heteroarila tendo de 5 a 10 átomos de anel em que pelo menos um dos átomos de anel é nitrogênio, com os átomos de anel restantes sendo independentemente selecionados do grupo que consiste em carbon e nitrogênio. Uma "(de 5 a 6 membros)heteroarila" refere-se a um anel heteroarila tendo de 5 a 6 átomos de anel em que pelo menos um dos átomos de anel é um heteroátomo (isto é, oxigênio, nitrogênio, ou enxofre), com os átomos de anel restantes sendo independentemente selecionados do grupo que consiste em carbono, oxigênio, nitrogênio, e enxofre. Uma "heteroarila contendo nitrogênio (de 5 a 6 membros)" refere-se a um anel heteroarila tendo de 5 a 6 átomos de anel em que um dos heteroátomos no anel é um nitrogênio. Uma "heteroarila contendo nitrogênio (de 6 membros)" refere-se a um anel heteroarila tendo 6 átomos de anel em que um dos heteroatoms no anel é um nitrogênio. Uma "heteroarila contendo nitrogênio (de 5 membros)" refere-se a um anel heteroarila tendo 5 átomos de anel, em que um dos heteroátomos no anel é um nitrogênio. Uma heteroarila pode consistir em um anel simples ou 2 ou 3 anéis fundidos. Exemplos de heteroarilas incluem, porém não estão limitados a, substituintes de anel de 6 membros tais como piridinila, pirazinila, pirimidinila e piridazinila; heteroarilas de 5 membros tais como triazolila, imidazolila, furanila, isoxazolila, isotiazolila, 1,2,3-, 1,2,4, 1,2,5-, ou 1,3,4- oxadiazolila, oxazolila, tiofenila, tiazolila, isotiazolila, e pirazolila; substituintes de anel fundido de 6/5 membros tais como indolila, indazolila, benzofuranila, benzimidazolila, benzotienila, benzoxadiazolila, benzotiazolila, isobenzotiofuranila, benzotiofuranila, benzisoxazolila, benzoxazolila, benzodioxolila, furanopiridinila, purinila, imidazopiridinila, imidazopirimidinila, pirrolopiridinila, pirazolopiridinila, pirazolopirimidinila, tienopiridinila, triazolopirimidinila, triazolopiridinila (por exemplo, [1,2,4]triazolo[1,5-a]piridin-2-ila), e antranilila; e substituintes de anel fundido de 6/6 membros tais como quinolinila, isoquinolinila, cinolinila, quinazolinila, oxocromanila, e 1,4-benzoxazinila.

[0046] Deve-se entender que a heteroarila pode ser opcionalmente fundida a um grupo cicloalquila, ou a um grupo heterocicloalquila, como definido aqui.

[0047] O substituinte de heteroarila pode ser ligado ao núcleo pirazolo-oxazina dos compostos da presente invenção por meio de um átomo de nitrogênio tendo a valência apropriada, ou por meio de qualquer átomo de carbono de anel ou ao nitrogênio da porção amida no núcleo pirazol-oxazina. A porção heteroarila pode ser opcionalmente substituída com um ou mais substituintes em um átomo de nitrogênio tendo a valência apropriada, ou em qualquer átomo de carbono disponível.

[0048] Os termos " (de 5 a 14 membros)heteroarila opcionalmente substituída", " (de 5 a 6 membros)heteroarila opcionalmente substituída" e "heteroarila contendo nitrogênio (de 5 a 6 membros) opcionalmente substituída" referem-se a uma (de 5 a 14 membros)heteroarila, uma (de 5 a 6 membros)heteroarila, e uma heteroarila contendo nitrogênio (de 5 a 6 membros), como definido acima, em que um ou mais átomos de hidrogênio são substituídos, onde quimicamente permissível, por um substituinte selecionado do grupo que consiste em halogênio, oxo, ciano, hidróxi, -SF5, nitro, (C1-C6)alquila opcionalmente substituída, (C1-C6)alcóxi opcionalmente substituído, (C1-C6)alquiltio opcionalmente substituído, -N(R7)(R8), -N(R7)(C(=O)R8), -N(R7)C(=O)-OR8, -C(=O)-N(R7)(R8), -O-C(=O)- N(R7)(R8), -C(=O)-R7, -C(=O)-OR7, e (C3-C8)cicloalquila, em que R7 e R8 são cada qual independentemente hidrogênio ou (C1-C6)alquila opcionalmente substituída. O substituinte pode ser ligado à porção heteroarila em qualquer átomo de carbono disponível ou a um heteroátomo quando o heteroátomo é nitrogênio tendo a valência apropriada.

[0049] "halo" ou "halogênio", como usado aqui, refere-se a aum átomo de cloro, flúor, bromo ou iodo.

[0050] "hidróxi" ou "hidroxila", como usado aqui, significa que um grupo -OH.

[0051] "ciano", como usado aqui, significa que um grupo -CN, que também pode ser descrito: .

[0052] "nitro", como usado aqui, significa que um grupo -NO2.

[0053] "oxo", como usado aqui, significa que uma porção =O. Quando um oxo é substituído em um átomo de carbono, eles juntamente formam uma porção carbonila [-C(=O)-]. Quando um oxo é substituído em um átomo de enxofre, eles juntamente formam uma porção sulfóxido [-S(=O)-]; quando dois grupos oxo são substituídos em um átomo de enxofre, eles juntamente formam uma porção sulfonila [-S(=O)2-].

[0054] "Opcionalmente substituído", como usado aqui, significa que a substituição é opcional e, portanto, inclui tanto átomos e porções não substituídos quanto substituídos. Um átomo ou porção "substituído" indica que qualquer hidrogênio no átomo ou porção designado pode ser substituído com uma seleção do grupo substituinte indicado (até e incluindo que cada átomo de hidrogênio no átomo ou porção designado é substituído com uma seleção do grupo substituinte indicado), contanto que a valência normal do átomo ou porção designado não seja excedida, e que a substituição resulte em um composto estável. Por exemplo, Se um grupo metila (isto é, -CH3) for opcionalmente substituído, então até 3 átomos de hidrogênio no átomo de carbono poderão ser substituídos com grupos substituintes.

[0055] Como usado aqui, a menos que especificado, o ponto de ligação de um substituinte pode ser de qualquer posição adequada do substituinte. Por exemplo, piridinila (ou piridila) pode ser 2-piridinila (ou piridin-2-ila), 3-piridinila (ou piridin-3-ila), ou 4-piridinila (ou piridin-4-ila).

[0056] Quando uma ligação a um substituinte é mostrada atravessar uma ligação que conecta dois átomos em um anel, então tal substituinte pode ser ligado a qualquer um dos átomos de formação de anel naquele anel que são substituíveis (isto é, ligados a um ou mais átomos de hidrogênio). Por exemplo, como mostrado na fórmula I acima, R4 pode ser ligado a qualquer átomo de formação de anel do anel tetra-hidropirano que é substituível.

[0057] "Quantidade terapeuticamente eficaz" refere-se àquela quantidade do composto sendo administrada que aliviará, até certo ponto, um ou mais dos sintomas do distúrbio sendo tratdo.

[0058] "Paciente" refere-se a animais de sangue quente tais como, por exemplo, porcos, vacas, galinhas, cavalos, cobaias, camundongos, ratos, gerbils, gator, coelhos, cachorros, macacos, chimpanzés, e seres humanos.

[0059] "Tratando" ou "tratar", como usado aqui, a menos que de outro modo indicado, significa reverter, aliviar, inibir progresso de, ou prevenir o distúrbio ou coondição ao qual tal termo se aplica, ou um ou mais sintomas de tal distúrbio ou condição. O termo "tratamento", como usado aqui, a menos que de outro modo indicado, refere-se à ação de tratamento como "tratando" é definido imediatamente acim. O termo "tratamento" também inclui o tratamento adjuvante e neoadjuvante de um indivíduo.

[0060] "Farmaceuticamente aceitável" indica que a substância ou composição deve ser compatível, química e/ou toxicologicamente, com os outros ingredientes compreendendo uma formulação, e/ou o mamífero que está sendo tratada com ela.

[0061] "Isoforma" significa qualquer uma das diversas diferentes formas da mesma proteína.

[0062] "Isozima" ou "isoenzima" significa uma variante intimamente relacionado de enzima que difere na sequência de aminopacido, porém catalisa a mesma reação química.

[0063] "Isômer" significa "estereoisômero" e "isômero geométrico" como definido abaixo.

[0064] "Estereoisômero" refere-se aos compostos que possuem um ou mais centros quirais, que podem cada qual existir na configuração R ou S. Estereoisômeros incluem todas as formas diastereoméricas, enantioméricas e epiméricas, bem como racematos e misturas dos mesmos.

[0065] "Isômero geométrico" refere-se aos compostos que podem existir em formas cis, trans, anti, entgegen (E), e zusammen (Z), bem como misturas das mesmas.

[0066] Esta especificação usa os termos "substituinte", "radical", e "grupo" alternadamente.

[0067] Se os substituintes forem descritos como sendo "independentemente selecionados" de um grupo, cada caso de um substituinte é selecionado independentemente um do outro. Cada substituinte, portanto, pode ser idêntico a ou diferente do outro substituinte(s).

[0068] Como usado aqui o termo "FórmuIa I" pode ser aqui referido como um "composto(s) da invenção". Tais termos são também definidos incluir todas as formas do composto da invenção incluindo hidratos, solvatos, isômeros, formas cristalinas e não cristalinas, isomorfos, polimorfos, e metabólitos das mesmas. Por exemplo, os compostos da invenção, ou sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos, podem existir em formas não solvatadas e solvatadas. Quando o solvente ou água está fortemente ligado, o xcomplexo terá uma estequiometria bem definida independente de umidade. Quando, entretanto, o solvente ou água está fracamente ligado, como em solvatos de canal e compostos higroscópicos, o teor de água/solvente será dependente da umidade de condições de secagem. Em tais casos, a não estequiometria será a norma.

[0069] Os compostos da invenção podem existir como clatratos ou outros complexos. Incluídos no escopo da invenção são complexos tais como clatrates, complexos de inclusão de fármaco-hospedeiro, em que um fármaco e hospedeiro estão presentes em quantidades estequiométricas ou não estequiométricas. Também incluídos são os complexos dos compostos da invenção contendo dois ou mais componentes orgânicos e/ou inorgâgicos, que podem estar em quantidades estequiométricas ou não estequiométricas. Os complexos resultantes podem ser ionizados, parcialmente ionizados, ou não ionizados. Para uma revisão de tais complexos, veja J. Pharm. Sci., 64 (8), 1269-1288 por Haleblian (Agosto de 1975).

[0070] Alguns dos compostos da invenção têm átomos de carbono assimétricos. As ligações de carbono-carbono dos compostos da invenção podem ser descritos aqui usando uma linha sólida, uma cunha sólida , ou uma cunha pontilhada O uso de uma linha sólida para descrever as ligações aos átomos de carbono assimétricos destina-se a indicar que todos os possíveis estereoisômeros (por exemplo, enantiômeros específicos, misturas racêmicas, etc.) naquele átomo de carbono são incluídos. O uso de cunha sólida ou pontilhada para descrever ligações aos átomos de carbono assimétricos destinam-se a indicar que o estereoisômero mostrado está presente. Quando presentes em compostos racêmicos, as cunhas sólidas e pontilhadas são usadas para definir a estereoquímica relativa, em vez de estereoquímica absoluta. Compostos racêmicos possuindo tal estereoquímica relativa indicada são marcados (+/-). A menos que estabelecido de outro modo, pretende-se que os compostos da invenção possam existir como estereoisômeros, que incluem os isômeros cis e trans, isômeros óticos tais como enantiômeros R e S, diastereômeros, isômeros geométricos, isômeros conformacionais, atropisômeros, e misturas dos mesmos (tais como racematos e pares diastereoméricos). Os compostos da invenção podem exibir mais do que um tipo de isomerismo. Também incluídos são os sais de adição ácidos ou adição de sal, em que um contraíon é oticamente ativo, por exemplo, D-lactato ou L-lisina, ou racêmico, por exemplo, DL-tartarato ou DL-arginina.

[0071] Quando qualquer racemato de cristaliza, os cristais de dois tipos diferentes são possíveis. O primeiro tipo é o composto racêmico (racemato real) referido acima, em que uma forma homogênea de cristal é produzida contendo ambos enantiômeros em quantidades equimolares. O segundo tipo é a mistura racêmica ou conglomerato, em que duas formas de cristal são produzidas em quantidades equimolares, cada qual compreendendo um enantiômero simples.

[0072] Os compostos desta invenção podem ser usados na forma de sais derivados de ácidos inorgânicos ou orgânicos. Dependendo do composto particular, um sal do composto pode ser vantajoso devido a uma ou mais das propriedades físicas do sal, tais como estabilidade farmacêutica realçada em diferentes temperaturas e umidades, ou uma solubilidade desejável em água ou óleo. Em alguns casos, umsal de um composto também pode ser usado como um auxílio no isolamento, purificação, e/ou resolução do composto.

[0073] Onde um sal destina-se ser administrado a um paciente (como ao contrário de, por exemplo, ser usado em um contexto in vitro), o sal preferivelmente é farmaceuticamente aceitável. O termo "sal farmaceuticamente aceitável " refere-se a um sal preparado combinando um composto da presente invenção com um ácido cujo ânio, ou uma base cujo o cátion, é geralmente considerado adequado para consumo mamífero. Sais farmaceuticamente aceitáveis são particularmente úteis como produtos dos métodos da presente invenção por causa de sua grande solubilidade aquosa relativa ao composto origem.

[0074] Sais de adição ácidos farmaceuticamente aceitáveis adequados dos compostos da presente invenção, quando possível, incluem aqueles derivados de ácidos inorgânicos, tais como, porém não limitados aos ácidos clorídricos, bromídricos, fluorídricos, bóricos, fluorobóricos, fosfóricos, meta-fosfóricos, nítricos, carbônicos, sulfônicos, e enxofreicos, e ácidos orgânicos tais como ácidos acéticos, benzenossulfônicos, benzoicos, cítricos, etanossulfônicos, fumáricos, glucônicos, glicólicos, isotiônicos, lácticos, lactobiônicos, maleicos, málicos, metanossulfônicos, trifluorometanossulfônicos, succínicos, toluenossulfônicos, tartáricos, e trifluoroacéticos. Ácidos orgânicos adequados geralmente incluem, porém não estão limitados às classes alifáticas, cicloalifáticas, aromáticas, aralifáticas, heterocíclicas, carboxílicas, e sulfônicas de ácidos orgânicos.

[0075] Exemplos específicos de ácidos orgânicos adequados incluem, porém não são limirados ao acetato, trifluoroacetato, formiato, propionato, succinato, glicolato, gluconato, digluconato, lactato, malato, tartarato, citrato, ascorbato, glucuronato, maleato, fumarato, piruvato, aspartato, glutamato, benzoato, antranilato, stearato, salicilato, p-hidroxibenzoato, fenilacetato, mandelato, embonato (pamoato), metanossufonato, etanossufonato, benzenossulfonato, pantotenato, toluenossulfonato, 2-hidroxietanossulfonato, sufanilato, ciclo-hexilamino-etanossulfonato, ácido algênico, ácido β-hidroxibutirico, galactarato, galacturonato, adipato, alginato, butirato, canforato, canforsulfonato, ciclopentanopropionato, dodecilsulfato, glico-heptanoato, glicerofosfato, heptanoato, hexanoato, nicotinato, 2-naftaleno-sulfonato, oxalato, palmoato, pectinato, 3-fenilpropionato, picrato, pivalato, tiocianato, e undecanoato.

[0076] Além disso, onde os compostos da invenção transportam uma porção, sais farmaceuticamente aceitáveis adequados podem incluir podem incluir sais de metal de álcali, por exemplo, sais de sódio ou potássio; sais de metal alcalino terroso, por exemplo, sais de cálcio ou magnésio; e sais formados com ligantes orgânicos adequados, por exemplo, sais de amônio quaternários. Em outra modalidade, sais de base são formados de bases que formam sais não tóxicos, incluindo sais de alumínio, arginina, benzatina, colina, dietilamina, diolamina, glicina, lisina, meglumina (N-metilglucamina), olamina, trometamina e zinco.

[0077] Sais orgânicos podem ser deitos de sais de amina secundários, terciários ou quaternários, tais como trometamina, dietilamina, N,N’-dibenziletilenodiamina, cloroprocaína, colina, dietanolamina, etilenodiamina, meglumina, e procaína. Grupos contendo nitrogênio básicos podem ser quaternizados tais como haletos de alquila (C1-C6) inferior (por exemplo, cloretos, brometos e iodetos de metila, etila, propila, e butila), sulfatos de dialquila (por exemplo, sulfatos de dimetila, dietila, dibutila, e diamila), haletos de cadeia longa (por exemplo, cloretos, brometos e iodetos de decila, laurila, miristila e estearila), haletos de arilalquila (por exemplo, brometos de benzila e fenetila), e outros.

[0078] Em uma modalidade, hemissais de ácidos e bases podem ser formados, por exemplo, sais de hemissulfato e hemicálcio.

[0079] Certos compostos da invenção podem existir como isômeros geométricos. Os compostos da invenção podem possuir um ou mais centros assimétricos, desse modo existindo como duas ou mais formas estereoisoméricas. A presente invenção inclui todos os estereoisômeros individuais e geométricos dos compostos da invenção e misturas dos mesmos. Enantiômeros individuais podem ser obtidos por separação quiral ou usando o enantiômero relevante na síntese.

[0080] Além disso, os compostos da presente invenção podem existir em formas não solvatadas, bem como solvatadas com solventes farmaceuticamente aceitáveis tais como água, etanol e similares. Em geral, as formas solvatadas são consideradas equivalentes às formas não solvatadas para os propósitos da presente invenção. Os compostos podem também existir em um ou mais estados cristalinos, isto é, polimorfos, ou eles podem existir como sólidos amorfos. Todas as tais formas são abrangidas pelas reivindicações.

[0081] Também dentro do escopo da presente invenção estão assim chamados "profármacos" do composto da invenção. Desse modo, certos derivados do composto da invenção que podem ter pouca ou nenhuma atividade farmacólogica própria podem, quando administrados em ou sob o corpo, ser convertidos no composto da invenção tendo a atividade desejada, por exemplo, por clivagem hidrolítica. Tais derivados são referidos como "profármacos". Outra informação sobre o uso de profármacos podem ser encontrados em "Pro-drugs as Novel Delivery Systems, Vol. 14, ACS Symposium Series (T. Higuchi e W. Stella) e "Bioreversible Carriers in Drug Design", Pergamon Press, 1987 (ed. E. B. Roche, American Pharmaceutical Association). Profármacos de acordo com a invenção podem, por exemplo, ser produzidos substituindo funcionalidades apropriadas presentes nos compostos da presente invenção com certas porções conhecidas por aqueles versados na técnica como "pró-porções" como descrito, por exemplo, em "Design of Prodrugs" por H. Bundgaard (Elsevier, 1985).

[0082] Esta invenção também abrange os compostos da invenção contendo grupos protetores. Alguém versado na técnica também apreciará que os compostos da invenção podem também ser preparados com certos grupos de proteção que são úteis para purificação ou armazenagem e podem ser removidos antes da administração a um paciente. A proteção e desproteção de grupos funcionais é descrita em "Protective Groups in Organic Chemistry", editado por J. F. W. McOmie, Plenum Press (1973) and "Protective Groups in Organic Synthesis", 3a edição, T. W. Greene e P. G. M. Wuts, Wiley-Interscience (1999).

[0083] A presente invenção também inclui todos os compostos isotopicamente rotulados farmaceuticamente aceitáveis, que são idênticos àqueles relacionados aqui, em que um ou mais átomos são substituídos por um átomo tendo o mesmo número atômico, porém uma massa atômica ou número de massa diferente da massa atômica ou número de massa que predomina na natureza. Exemplos de isótopos adequados para inclusão nos compostos da presente invenção incluem, porém não estão limitados a, isótopos de hidrogênio, tal como 2H, 3H; carbono, tal como 11C, 13C, e 14C; cloro, tal como 36Cl; flúor, tal como 18F; iodo, tal como 123I e 125I; nitrogênio, tal como 13N e 15N; oxigênio, tal como 15O, 17O, e 18O; fósforo, tal como 32P; e enxofre, tal como 35S. Certos compostos isotopicamente rotulados da presente invenção, por exemplo, aqueles incorporando uma isótopo radioativo, são úteis em estudos de distribuição de tecido de fármaco e/ou substrato (por exemplo, ensaios). Os isótopos radioativos trício, isto é, 3H, e carbono-14, isto é, 14C, são particularmente úteis para este propósito em vista de sua facilidade de incorporação e métodos prontos de detecção. Substituição com isótopos mais pesados tal como deutério, isto é, 2H, pode fornecer certas vantagens terapêuticas resultantes de maior estabilidade metabólica, por exemplo, requisitos de dosagem reduzida ou vida de prateleira in vivo aumentada e, consequentemente, pode ser preferida em alguns casos. A substituição com isótopos de emissão de pósitron, tais como 11C, 15F, 18F, 15O e 13N, podem ser úteis nos estudos de tomografia de emissão de pósitron (PET) para exame de ocupância de receptor de substrato. Os compostos isotopicamente rotulados da presente invenção podem geralmente ser preparados por técnicas convencionais conhecidas por aqueles versados na técnica ou por processos análogos àqueles descritos nos Esquemas e/ou nos Exemplos e Preparações acompanhantes usando um reagente isotopicamente rotulados apropriados no lugar do reagente não rotulado anteriromente empregado. Solvatos farmaceuticamente aceitáveis de acordo com a invenção incluem aqueles em que um solvente de cristalização pode ser isotopicamente substituído, por exemplo, D2O, acetona-d6, ou DMSO-d6. Compostos da invenção, que incluem compostos exemplificados nos Exemplos 1 - 104 descritos abaixo, incluem versões isotopicamente rotuladas destes compostos, tais como, porém não limitados aos isótopos deuterados e triciados e todos os outros isótopos descritos acima.

Compostos

[0084] Os compostos de fórmula I, como descrito acima, contêm um núcleo 6,7-di-hidro-5H-pirazolo[5,1-b][1,3]oxazina, em que um núcleo é substituído na posição 3 por uma porção R1 que é opcionalmente substituída com um a três R5; opcionalmente substituído nas posições 5-, 6- e/ou 7 por uma porção R4; e o nitrogênio da porção amida ligado à posição 2 do núcleo 6,7-di-hidro- 5H-pirazolo[5,1-b][1,3]oxazina é substituído com R2 e R3.

[0085] Em uma modalidade, na fórmula I como descrito acima, R1 é uma (C3-C8)cicloalquila opcionalmente substituída. Quando R1 é uma (C3-C8)cicloalquila opcionalmente substituída, a cicloalquila é selecionada do grupo que consiste em ciclopropila, ciclobutila, ciclopentila, e ciclo-hexila.

[0086] Em outra modalidade, na fórmula I como descrito acima, R1 é uma (de 4 a 10 membros)heterocicloalquila opcionalmente substituída. Quando R1 é uma (de 4 a 10 membros)heterocicloalquila opcionalmente substituída, a heterocicloalquila é selecionada do grupo que consiste em azetidinila, di-hidrofuranila, di-hidrotiofenila, tetra- hidrotiofenila, tetra-hidrofuranila, tetra-hidrotriazinila, tetra- hidropirazolila, tetra-hidro-oxazinila, tetra-hidropirimidinila, octa- hidrobenzofuranila, octa-hidrobenzimidazolila, octa-hidrobenzotiazolila, imidazolidinila, pirrolidinila, piperidinila, piperazinila, oxazolidinila, isotiazolidinila, tiazolidinila, pirazolidinila, tiomorfolinila, tetra- hidropiranila, tetra-hidrotiazinila, tetra-hidrotiadiazinila, tetra-hidro- oxazolila, morfolinila, oxetanila, tetra-hidrodiazinila, di-hidro-oxazinila, oxatiazinila, quinuclidinila, cromanila, isocromanila, di- hidrobenzodioxinila, benzodioxolila, benzoxazinila, indolinila, di- hidrobenzofuranila, tetra-hidroquinolila, isocromanila, di-hidro-1H- isoindolila, 2-azabiciclo[2.2.1]heptanonila, 3-azabiciclo[3.1.0]hexanila, e 3-azabiciclo[4.1.0]heptanila.

[0087] Em outra modalidade, na fórmula I como descrito acima, R1 é uma (C6-C10)arila opcionalmente substituída selecionada de fenila ou naftila.

[0088] Em certas outras modalidades, quando R1 é uma (C6- C10)arila opcionalmente substituída, a arila é fenila.

[0089] Em outra modalidade, na fórmula I como descrito acima, R1 é uma (de 5 a 10 membros)heteroarila opcionalmente substituída.

[0090] Em certas modalidades, R1 é uma (de 5 a 10 membros) heteroarila opcionalmente substituída.

[0091] Em certas outras modalidades, R1 é uma (de 5 a 6 membros) heteroarila opcionalmente substituída.

[0092] Em certas modalidades, quando R1 é uma (de 5 a 10 membros)heteroarila opcionalmente substituída, a heteroarila é selecionada do grupo que consiste em triazolila, imidazolila, furanila, isoxazolila, isotiazolila, 1,2,3-, 1,2,4, 1,2,5-, ou 1,3,4-oxadiazolila, oxazolila, tiofenila, tiazolila, isotiazolila, pirazolila, piridinila, pirazinila, pirimidinila, piridazinila, indolila, indazolila, benzofuranila, benzimidazolila, benzotienila, benzoxadiazolila, benzotiazolila, isobenzotiofuranila, benzotiofuranila, benzisoxazolila, benzoxazolila, benzodioxolila, furanopiridinila, purinila, imidazopiridinila, imidazopirimidinila, pirrolopiridinila, pirazolopiridinila, pirazolopirimidinila, tienopiridinila, triazolopirimidinila, triazolopiridinila, quinolinila, isoquinolinila, cinolinila, quinazolinila, oxocromenila, e 1,4-benzoxazinila.

[0093] Em certas outras modalidades, quando R1 é uma heteroarila (de 5 a 10 membros) opcionalmente substituída, a heteroarila é selecionada do grupo que consiste em piridinila, triazolopiridinila, pirazolopiridinila, e benzo-oxazolila.

[0094] Em certas modalidades, quando R1 é uma (de 5 a 6 membros)heteroarila opcionalmente substituída, a heteroarila é uma heteroarila contendo nitrogênio (de 5 membros). Por exemplo, a heteroarila contendo nitrogênio (de 5 membros) é selecionado do grupo que consiste em pirazolila, imidazolila, e triazolila.

[0095] Em certas modalidades, quando R1 é uma (de 5 a 6 membros)heteroarila opcionalmente substituída, a heteroarila é uma heteroarila contendo nitrogênio (de 6 membros). Por exemplo, a heteroarila contendo nitrogênio (de 6 membros) é selecionada do grupo que consiste em piridinila, pirimidinila, pirazinila, e piridazinila. Em certas modalidades, a heteroarila contendo nitrogênio (de 6 membros) é piridinila.

[0096] Em qualquer uma das modalidades anteriores, onde quimicamente permissível, R1 é opcionalmente substituído com um a três R5, e cada R5 é independentemente selecionado do grupo que consiste em halogênio, ciano, (C1-C6)alquila opcionalmente substituída, e (C1-C6)alcóxi opcionalmente substituído.

[0097] Em certas modalidades, R5 é um halogênio selecionado de flúor ou cloro.

[0098] Em certas outras modalidades, R5 é uma (C1-C6)alquila opcionalmente substituída, e a alquila é selecionada de metila, etila ou propila, e a metila, etila e propila são opcionalmente substituídas com um a três átomos de flúor. Por exemplo, uma alquila opcionalmente substituída inclui, porém não está limitada a, fluorometila, difluorometila, trifluorometila, fluoroetila, difluoroetila, trifluoroetila, e similares.

[0099] Ainda em outra modalidade, R5 é um (C1-C6)alcóxi opcionalmente substituído, e o alcóxi é selecionado de metóxi, etóxi ou propóxi e o metóxi, etóxi e propóxi são opcionalmente substituídos com um a três átomos de flúor. Por exemplo, um alcóxi opcionalmente substituída inclui, porém não está limitado a, fluorometóxi, difluorometóxi, trifluorometóxi, fluoroetóxi, difluoroetóxi, trifluoroetóxi, e similares.

[00100] Deve-se entender que qualquer um dos subgêneros de R1 acima mencionados podem ser combinados juntamente com qualquer uma das modalidades para R2, R3 e R4 como descrito acima e aqui a seguir.

[00101] Em outra modalidade, na fórmula I como descrito acima, R2 e R3 são cada qual independentemente selecionados do grupo que consiste em hidrogênio, (C1-C6)alquila opcionalmente substituída, (C3- C8)cicloalquila, e (de 5 a 6 membros)heteroarila, e onde quimicamente permissível, a (C3-C8)cicloalquila, e (de 5 a 6 membros)heteroarila são opcionalmente substituídas com um a três R6.

[00102] Em certas modalidades, na fórmula I como descrito acima, um de R2 e R3 é hidrogênio e o outro é uma (C1-C6)alquila opcionalmente substituída.

[00103] Em certas modalidades, quando um de R2 e R3 é uma (C1- C6)alquila opcionalmente substituída, a alquila é selecionada do grupo que consiste em metila, etila, propila, isopropila, butila, terc-butila, pentila e hexila.

[00104] Em certas modalidades, quando um de R2 e R3 é uma (C1- C6)alquila opcionalmente substituída, a alquila é selecionada do grupo que consiste em metila, etila, propila, e isopropila.

[00105] Em outra modalidade, na Fórmula I como descrito acima, um de R2 e R3 é hidrogênio e o outro é (C3-C8)cicloalquila, em que a cicloalquila é opcionalmente substituída com um a três R6.

[00106] Em certas modalidades, quando um de R2 e R3 é uma (C3- C8)cicloalquila opcionalmente substituída, a cicloalquila é selecionada de ciclopropila, ciclobutila, ciclopentila, ciclo-hexila, ciclooctila ou biciclo[1,1,1]pentila.

[00107] Em certas modalidades, quando um de R2 e R3 é uma (C3- C8)cicloalquila opcionalmente substituída, a cicloalquila é selecionada de ciclopropila, ciclobutila, e ciclopentila.

[00108] Em certas modalidades, quando um de R2 e R3 é uma (C3- C8)cicloalquila opcionalmente substituída, a cicloalquila é ciclopropila.

[00109] Em outra modalidade, na Fórmula I como descrito acima, um de R2 e R3 é hidrogênio e o outro é (5 a 6 membros)heteroarila, em que a heteroarila é opcionalmente substituída com um a três R6.

[00110] Em certas modalidades, quando um de R2 e R3 é uma (5 a 6 membros)heteroarila opcionalmente substituída, a heteroarila é selecionada de triazolila, imidazolila, furanila, isoxazolila, isotiazolila, 1,2,3-, 1,2,4, 1,2,5-, ou 1,3,4-oxadiazolila, oxazolila, tiofnila, tiazolila, isotiazolila, pirazolila, piridinila, pirazinila, pirimidinila, ou piridazinila.

[00111] Em certas modalidades, quando um de R2 e R3 é uma (5 a 6 membros)heteroarila opcionalmente substituída, a heteroarila é uma heteroarila contendo (5 a 6 membros)nitrogênio.

[00112] Em certas modalidades, quando um de R2 e R3 é uma heteroarila contendo nitrogênio (de 5 a 6 membros) opcionalmente substituída, a heteroarila é selecionada de triazolila, imidazolila, pirazolila, piridinila, pirazinila, pirimidinila, ou piridazinila.

[00113] Em certas modalidades, quando um de R2 e R3 é uma heteroarila contendo nitrogênio (de 5 a 6 membros) opcionalmente substituída, a heteroarila é selecionada de triazolila, pirazolila, ou pirimidinila.

[00114] Em outra modalidade, na Fórmula I, como descrito acima, R2 e R3 considerados juntamente com o nitrogênio ao qual eles são ligados, formam uma (4 a 6 membros)heterocicloalquila opcionalmente substituída com um a três R6.

[00115] Em certas modalidades, quando R2 e R3 considerados juntamente com o nitrogênio ao qual eles são ligados, formam uma (4 a 6 membros)heterocicloalquila, a heterocicloalquila é selecionada fo grupo que consiste em azetidinila, tetra-hidropirazolila, tetra- hidrooxazinila, tetra-hidropirimidinila, imidazolidinila, piperidinila, piperazinila, oxazolidinila, e pirrolidinila.

[00116] Em certas modalidades, quando R2 e R3 considerados juntamente com o nitrogênio ao qual eles são ligados, formam uma (4 a 6 membros)heterocicloalquila, a heterocicloalquila é azetidinila.

[00117] Em qualquer uma das modalidades precedentes, quando um de R2 e R3 é uma (C3-C8)cicloalquila, ou (5 a 6 membros)heteroarila substituída com um a três R6, ou R2 e R3 considerados juntamente com o nitrogênio ao qual eles são ligados, formam uma (4 a 6 membros)heterocicloalquila opcionalmente substituída com um a três R6, R6 em cada ocorrência é independentemente selecionado do grupo que consiste em halogênio, oxo, ciano, hidróxi, (C1-C6)alquila opcionalmente substituída, e (C1- C6)alcóxi opcionalmente substituída.

[00118] Em certas modalidades, quando R6 é um halogênio, o halogênio é selecionado de flúor e cloro.

[00119] Em certas outras modalidades, quando R6 é uma (C1- C6)alquila opcionalmente substituída, a alquila é selecionada de metila, etila ou propila, e a metila, etila e propila são opcionalmente substituídas com um a três átomos de flúor. Por exemplo, uma alquila opcionalmente substituída inclui, porém não é limitada a, fluorometila, difluorometila, trifluorometila, fluoroetila, difluoroetila, trifluoroetila, e similares.

[00120] Em ainda outra modalidade, quando R6 é um (C1-C6)alcóxi opcionalmente substituída, o alcóxi é selecionado de metóxi, etóxi ou propóxi e o metóxi, etóxi e propóxi são opcionalmente substituídos com um a três átomos de flúor. Por exemplo, um alcóxi opcionalmente substituído inclui, porém não é limitado a, fluorometóxi, difluorometóxi, trifluorometóxi, fluoroetóxi, difluoroetóxi, trifluoroetóxi, e similares.

[00121] Deve-se entender que quaisquer subgêneros acima mencionados de R2 e R3 podem ser combinados juntamente com qualquer das modalidades, como descrito acima e a seguir.

[00122] Em outra modalidade, na Fórmula I, como descrito acima, cada R4, quando presente, é independentemente selecionado do grupo que consiste em halogênio, ciano, hidróxi, -SF5, nitro, (C1- C6)alquila opcionalmente substituída, e (C1-C6)alcóxi opcionalmente substituído.

[00123] Em certas modalidades, quando R4 é halogênio, o halogênio é selecionado de flúor ou cloro.

[00124] Em certas outras modalidades, quando R4 é uma (C1- C6)alquila opcionalmente substituída e/ou um (C1-C6)alcóxi opcionalmente substituído, a (C1-C6)alquila e o (C1-C6)alcóxi são como descritos acima em qualquer das modalidades precedentes.

[00125] Deve-se entender que qualquer dos subgêneros acima mencionados de R4 pode ser combinado juntamente com qualquer das modalidades para R1, R2 e R3, como descrito acima.

[00126] Em outra modalidade, na Fórmula I, como descrito acima, em qualquer das modalidades precedentes, a é um número inteiro selecionado de 0, 1 ou 2. Em certas modalidades, a é 0. Em certas outras modalidades, a é 1. Em certas outras modalidades, a é 2.

[00127] Em certas outras modalidades, a presente invenção é direcionada a um composto de Fórmula II:

[00128] ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmos, em que:

[00129] R2 e R3 são cada independentemente selecionados do grupo que consiste em hidrogênio, (C1-C6)alquila opcionalmente substituída, e (C3-C8)cicloalquila, em que a (C3-C8)cicloalquila é opcionalmente substituída com um a três R6; ou

[00130] R2 e R3 considerados juntamente com o nitrogênio ao qual eles são ligados, formam uma (4 a 6 membros)heterocicloalquila opcionalmente substituída com um a três R6;

[00131] quando presente, cada R4 é independentemente selecionado de halogênio ou opcionalmente (C1-C6)alquila substituída;

[00132] quando presentes, R5 e R6, em cada ocorrência, são independentemente selecionados do grupo que consiste em halogênio, ciano, (C1-C6)alquila opcionalmente substituída, e (C1- C6)alcóxi opcionalmente substituída; e

[00133] a é um número inteiro selecionado de 0, 1, ou 2.

[00134] Em certas modalidades, na Fórmula II, como descrito acima, um de R2 e R3 é hidrogênio e o outro é uma (C1-C6)alquila opcionalmente substituída. Por exemplo, a (C1-C6)alquila pode ser selecionada do grupo que consiste em metila, etila, propila, e isopropila.

[00135] Em certas outras modalidades, na Fórmula II, como descrito acima, um de R2 e R3 é hidrogênio e o outro é a (C3- C8)cicloalquila opcionalmente substituída com um a três R6. Por exemplo, a (C3-C8)cicloalquila pode ser selecionada do grupo que consiste em ciclopropila, ciclobutila, e ciclopentila. Em certas modalidades, a (C3-C8)cicloalquila é ciclopropila.

[00136] Em certas modalidades, na Fórmula II, como descrito acima, R2 e R3 considerados juntamente com o nitrogênio ao qual eles são ligados, formam uma (4 a 6 membros)heterocicloalquila opcionalmente substituída com um a três R6. Por exemplo, a (4 a 6 membros)heterocicloalquila é azetidinila.

[00137] Em outra modalidade, os compostos selecionados da presente invenção podem ser úteis para o tratamento de um distúrbio mediado por PDE4B, compreendendo a administração a um mamífero (preferivelmente um ser humano) com necessidade da mesma, uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto da invenção eficaz na inibição de atividade de PDE4B; mais preferivelmente, administração de uma quantidade de um composto da invenção tendo afinidade de ligação melhorada para PDE4B ao mesmo tempo em que possuindo menos atividade inibidora em relação a PDE4D.

[00138] Em certas outras modalidades, os compostos selecionados da presente invenção podem exibir uma afinidade de ligação para a isoforma de PDE4B.

[00139] Em certas modalidades, os compostos da presente invenção têm uma afinidade de ligação realçada com a isoforma de PDE4B em relação à isoforma de PDE4D de tal forma que os compostos apresentem uma afinidade de ligação de 2 vezes a cerca de 550 vezes com a isoforma de PDE4B em relação à isoforma de PDE4D. Em certas outras modalidades, os compostos da presente invenção apresentam afinidade de ligação de cerca de 2 vezes a cerca de 10 vezes com a isoforma de PDE4B em relação à isoforma de PDE4D. Em certas outras modalidades, os compostos da presente invenção apresentam afinidade de ligação de cerca de 11 vezes a cerca de 30 vezes com a isoforma de PDE4B em relação à isoforma de PDE4D. Em certas outras modalidades, os compostos da presente invenção apresentam uma afinidade de ligação de cerca de 31 vezes a cerca de 90 vezes com a isoforma de PDE4B em relação à isoforma de PDE4D. Em certas outras modalidades, os compostos da presente invenção apresentam uma afinidade de ligação de cerca de 91 vezes a cerca de 125 vezes com a isoforma de PDE4B em relação à isoforma de PDE4D. Em certas outras modalidades, os compostos da presente invenção apresentam uma afinidade de ligação de 126 vezes a cerca de 225 vezes com a isoforma de PDE4B em relação à isoforma de PDE4D. Em certas outras modalidades, os compostos da presente invenção apresentam cerca de uma afinidade de ligação de 226 vezes a cerca de 350 vezes com a isoforma de PDE4B em relação à isoforma de PDE4D. Em certas outras modalidades, os compostos da presente invenção apresentam afinidade de cerca de 351 vezes a cerca de 550 vezes com a isoforma de PDE4B em relação à isoforma de PDE4D. Em certas modalidades, os compostos da presente invenção apresentam afinidade de pelo menos cerca de 5 vezes com a isoforma de PDE4B em relação à isoforma de PDE4D. Em certas modalidades, os compostos da presente invenção apresentam afinidade de ligação de pelo menos 10 vezes com a isoforma de PDE4B em relação à isoforma de PDE4D. Em certas modalidades, os compostos da presente invenção apresentam afinidade de ligação de pelo menos cerca de 20 vezes com a isoforma de PDE4B em relação à isoforma de PDE4D. Em certas outras modalidades, os compostos da presente invenção apresentam afinidade de ligação de pelo menos cerca de 40 vezes com a isoforma de PDE4B em relação à isoforma de PDE4D. Em certas outras modalidades, os compostos da presente invenção apresentam afinidade de ligação de pelo menos cerca de 50 vezes com a isoforma de PDE4B em relação à isoforma de PDE4D. Em certas outras modalidades, os compostos da presente invenção apresentam afinidade de ligação de pelo menos cerca de 75 vezes com a isoforma de PDE4B em relação à isoforma de PDE4D. Em certas outras modalidades, os compostos da presente invenção apresentam afinidade de ligação de pelo menos cerca de 100 vezes com a isoforma de PDE4B em relação à isoforma de PDE4D. Em certas outras modalidades, os compostos da presente invenção apresentam afinidade de ligação de pelo menos cerca de 200 vezes com a isoforma de PDE4B em relação à isoforma de PDE4D. Em certas outras modalidades, os compostos da presente invenção apresentam afinidade de ligação de pelo menos cerca de 300 vezes com a isoforma de PDE4B em relação à isoforma de PDE4D. Em certas outras modalidades, os compostos da presente invenção apresentam afinidade de ligação de até cerca de 550 vezes com a isoforma de PDE4B em relação à isoforma de PDE4D. As afinidades de ligação dos compostos da presente invenção para as isoformas de PDE4B e PDE4D são mostradas na Tabela 9 da Seção Experimental abaixo.

[00140] Em outra modalidade, a presente invenção fornece uma composição farmacêutica compreendendo um composto da presente invenção, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em mistura com pelo menos um excipiente farmaceuticamente aceitável.

[00141] Em ainda outra modalidade, a administração dos compostos da presente invenção a um paciente com necessidade dos mesmos pode também levar a uma diminuição no desconforto gastrointestinal tais como êmese, diarreia, e náusea, que atualmente acredita-se estar associada com a administração de compostos tendo afinidade de ligação para outras isoformas de PDE4, especialmente a isoforma de PDE4D, resultando em um aumento na complacência do paciente bem como resultado geral do tratamento.

[00142] Em outra modalidade, a presente invenção fornece um método de tratamento do sistema nervoso central (CNS), doenças ou distúrbios neuroinflamatórios, metabólicos, autoimunes e inflamatórios compreendendo administração ao mamífero, particularmente um ser humano, com necessidade de tal tratamento, uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto da presente invenção, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

[00143] Em outra modalidade, a presente invenção fornece o uso de um composto da presente invenção, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, na fabricação de um medicamento para o tratamento do sistema nervoso central (CNS), doenças ou distúrbios neuroinflamatórios, autoimunes e inflamatórios.

Farmacologia

[00144] Os fosfodiésteres (PDEs) da família de PDE4 são caracterizados por degradação hidrolítica de alta afinidade, seletiva, do segundo nucleotídeo cíclico mensageiro, monofosfato de adenosina 3’,5’-cíclico (cAMP). Os subtipos de PDE4A, PDE4B e PDE4D são conhecidos por estarem amplamente expressos por todo o cérebro, com distribuição regional e intracelular para os subtipos de PDE4A, PDE4B e PDE4D sendo distintos, enquanto o subtipo de PDE4C é expresso em níveis inferiores por todo o sistema nervoso central (Veja: Siuciak, J. A. et al., Antipsychotic profile of rolipram: efficacy in rats and reduced sensitivity in mice deficient in the phosphodiesterase-4B (PDE4B) enzyme, Psychopharmacology (2007) 192:415-424). O local dos subtipos de PDE4 torna-os um alvo interessante para eplorar novos tratamentos para doenças e distúrbios do sistema nervoso central. Por exemplo, PDE4B foi identificado como um fator de suscetibilidade genética para esquizofrenia (Veja: Millar, J. K. et al., Disrupted in esquizofrenia 1 and phosphodiesterase 4B: towards an understanding of psychiatric illness, J. Physiol. 584 (2007) páginas 401 a 405).

[00145] O rolipram inibidor de PDE4 mostrou-se ser útil no tratamento e prevenção de déficit de memória induzido por Aβ por meio da atenuação de inflamação neuronal e sinalização de cAMP/CREB mediado por apoptose; desse modo PDE4 é um alvo potencial para o tratamento de déficit cognitivo associado com AD. (Veja: Wang, C. et al., The fosfodiesterase-4 inhibitor rolipram reverses Aβ-induced cognitive impairment and neuroinflammatory and apoptotic responses in rats, International Journal of Neuropsychopharmacology (2012), 15, 749-766).

[00146] Os inibidores de PDE4 podem também possuir efeitos antidepressivos normalizando-se a cascata de cAMP (Veja: Fujita, M. et al., Downregulation of Brain Fosfodiesterase Type IV Measured with 11C-(R)-Rolipram Positron Emission Tomography in Major Depressive Disorder, Biological Psychiatry, 72, 2012, 548-554).

[00147] Além disso, os inibidores de PDE4 mostraram possuir atividade terapêutica com implicações para o tratamento de esclerose múltipla (Veja: Sun, X. et al., Rolipram promotes remyelination possibly via MEK-ERK signal pathway in cuprizone-induced demyelination mouse, Experimental Neurology 2012; 237:304-311).

[00148] Em vista do acima exposto, em certas modalidades, os compostos da presente invenção têm uma ampla faixa de aplicações terapêuticas para o tratamento de condições ou doenças do sistema nervoso central que inclui distúrbios neurológicos, neurodegenerativos e/ou psiquiátricos. Os distúrbios neurológicos, neurodegenerativos e/ou psiquiátricos incluem, porém não são limitados a, (1) distúrbios [afetivos] do humor; (2) distúrbios neuróticos, relacionados ao estresse e somatoformes incluindo distúrbios de ansiedade; (3) distúrbios compreendendo o sintoma de deficiência cognitiva em um mamífero, incluindo um ser humano; (4) distúrbios compreendendo déficit de atenção, déficit de função executiva (déficit de memória de trabalho), disfunção do controle de impulso, sintomas extrapiramidais, distúrbios que são com base em uma mal função da gânglios basais; (5) transtornos comportamentais e emocionais com início geralmente ocorrendo na infância e adolescência; (6) distúrbios de desenvolvimento psicológico; (7) atrofias sistêmicas primariamente afetando o sistema nervoso central; (8) distúrbios extrapiramidais e de movimento; (9) síndromes comportamentais associados com distúrbios fisiológicos e fatores físicos; (10) transtornos de comportamento e personalidade em adulto; (11) esquizofrenia e outros distúrbios psicóticos; (12) transtornos comportamentais e mentais devido ao uso de substância psicoativa; (13) disfunção sexual compreedendo impulso sexual excessivo; (14) retardo mental; (15) transtornos factícios, por exemplo, mania alucinatória aguda; (16) distúrbios episódicos e paroxísticos, epilepsia; (17) narcolepsia; (18) demência, e (19) esclerose lateral amiotrófica.

[00149] Os exemplos de distúrbios [afetivos] do humor que podem ser tratados de acordo com a presente invenção incluem, porém não são limitados a, distúrbios bipolares I, hipomania (forma maníaca e mista), distúrbios bipolares II; transtornos depressivos tal como distúrbio depressivo maior recorrente ou depressivo de episódio único, depressão crônica, depressão psicológica, distúbio depressivo menor, distúrbio depressivo com início no pós-parto, transtornos depressivos com sintomas psicóticos; distúrbios [afetivos] do humor persistentes tais como ciclotimia, distimia, eutimia; síndrome pré-menstrual (PMS) e distúrbio disfórico pré-menstrual.

[00150] Os exemplos de distúrbios neuróticos, relacionados ao estresse e somatoformes que podem ser tratados de acordo com a presente invenção incluem, porém não são limitados a, distúrbios de ansiedade, distúrbio de ansiedade social, transtorno de ansiedade geral, distúrbio do pânico com ou sem agarofobia, fobia específica, fobia social, transtorno de ansiedade crônica; transtorno compulsivo obsessivo; reação a estresse severo e transtornos de adaptação, tal como transtorno de estresse pós-traumático (PTSD), transtorno de estresse agudo; outros distúrbios neuróticos tal como síndrome de despersonalização-desrealização.

[00151] A frase "deficiência cognitiva" como usada aqui em "distúrbios compreendendo o sintoma de deficiência cognitiva" refere- se a um funcionamento subnormal ou um funcionamento subótico em um ou mais aspectos cognitivos tal como memória, intelecto, capacidade de aprendizagem e lógica, ou atenção e função de execução (memória de trabalho) em um indivíduo particular em comparação a outros indivíduos dentro da mesma população de idade geral.

[00152] Os exemplos de "distúrbios compreendendo o sintoma de deficiência cognitiva" que podem ser tratados de acordo com a presente invenção incluem, porém não são limitados a, déficit cognitivo primariamente, porém não exclusivamente relacionado à amnésia, psicose (esquizofrenia), doença de Parkinson, doença de Alzheimer, demência por múltiplos infartos, demência sensível, demência do corpo de Lewis, acidente vascular cerebral, demência frontotemporal, paralisia supranuclear progressiva, doença de Huntington, doença de HIV (demência associada com HIV), trauma cerebral e abuso de fármaco; ADHD de distúrbio cognitivo suave, síndrome Asperger, e comprometimento da memória associada à idade; declínio cognitivo ou delírio pós-operativo ou em associação com terapia de cuidado intensivo.

[00153] Os exemplos de distúrbios geralmente primeiramente diagnosticado na primeira infância (infancy), infância (childhood) e adolescência que podem ser tratados de acordo com a presente invenção incluem, porém não são limitados a, distúrbios hipercinéticos incluindo transtorno de atividade e atenção, déficit de atenção/transtorno de atividade (ADHD), transtorno de conduta hipercinética; distúrbio de déficit de atenção (ADD); transtornos de conduta, incluindo porém não limitados a, transtorno de conduta depressiva; transtornos de tique incluindo transtorno de tique transitório, transtorno de toque vocal ou motor, trantorno de tique motor múltiplo e vocal combinados (síndrome de Gilles de la Tourette), transtornos de tique induzidos por substância; transtornos autistas; doença de Batten, masturbação excessiva, roer unhas, limpar nariz e chupar dedo.

[00154] Exemplos de distúrbios de desenvolvimento psicológico que podem ser tratados de acordo com a presente invenção incluem, porém não são limitados a, transtornos invasivos do desenvolvimento, incluindo, porém não limitado a, síndrome de Asperger e síndrome de Rett, transtornos autistas, autismo infantil e transtorno hiperativo associado com retardo mental e movimentos estereotipados, transtorno de desenvolvimento específico de função motor, transtorno de desenvolvimento específico de habilidades escolares.

[00155] Os exemplos de atrofias sistêmicas, primariamente afetando o sistema nervoso central, que podem ser tratadas de acordo com a presente invenção incluem, porém não são limitados a, esclerose múltipla atrofias sistêmicas primariamente afetando os gânglios basais incluindo doença de Huntington, e esclerose lateral amiotrófica.

[00156] Os exemplos de distúrbios extrapiramidais e de movimento com mal funcionamento e/ou degeneração de gânglios basais que podem ser tratados de acordo com a presente invenção incluem, porém não são limitados a, doença de Parkinson; parkinsonismo secundário tal como parkinsonismo pós-encefálico; parkinsonismo compreendido em comparação com parkinsonismo compreendido em outros distúrbios; doença de Niemann-Pick, doença de doença de corpos de Lewy; doenças degenerativas dos gânglios basais; outros distúrbios extrapiramidais e de movimento incluindo tremor, tremor essencial e tremor induzido por fármaco, mioclônus, coreia e coreia induzida por fármaco, tiques induzidos por fármaco e tiques de origem orgânica, distonia aguda induzida por fármaco, discinesia tardia induzida por fármaco, espasmos musculares e distúrbios associados com espasticidade muscular ou fraqueza incluindo tremores; deficiência mental (incluindo espasticidade, síndrome de Down e síndrome de X frágil), discinesia induzida por L-dopa; síndrome das pernas inquietas e síndrome do homem rígido.

[00157] Além disso, os exemplos de distúrbios do movimento com mal funcionamento e/ou degeneração das gânglios basais que podem ser tratados de acordo com a presente invenção incluem, porém não são limitados a, distonia incluindo, porém não limitada a, distonia focal, distonia segmental ou multifocal, distonia de torção, distonia tardia generalizada, hemisférica, (induzida por fármacos psicofarmacológicos). A distonia focal inclui distonia cervical (torcicolo), blefarospasmo (cãibra da pálpebra), distonia apendicular (cãibra nas extremidades, tipo a cãibra do escritor), ou distonia mandibular e disfonia espasmódica (cãibra da corda vocal); distúrbios do movimento induzidos por neurolépticos incluindo, porém não limitados a, síndrome maligna neuroléptica (NMS), parkinsonismo induzido por neurolépticos, discinesia aguda ou de início precoce induzida por neurolépticos, distonia aguda induzida por neurolépticos, acatisia aguda induzida por neurolépticos, discinesia tardia induzida por neurolépticos, e tremor induzido por neuroléptico.

[00158] Os exemplos de síndromes comportamentais associadas com distúrbios fisiológicos e faotores físicos de acordo com a presente invenção incluem, porém não são limitados a, distúrbios do sono não orgânicos, incluindo, porém não limitados a, hipersônia não orgânica, transtorno não orgânico do horário de sono-vigília (trantorno do sono do ritmo circadiano), insônia, parassonia e privação do sono; transtornos comportamentais e mentais associados com o puerpério incluindo depressão pós-natal e pós-parto; distúrbios alimentares, incluindo, porém não limitados a, anorexia nervosa, bulimia nervosa, transtorno de compulsão alimentar, hiperfagia, obesidade, distúrbios alimentares compulsivose pagofagia.

[00159] Os exemplos de transtornos de comportamento e personalidade em adulto que podem ser tratados de acordo com a presente invenção incluem, porém não são limitados a, transtornos de personalidade, incluindo, porém não limitados a, distúrbio de personalidade emocionalmente instável, limítrofe, compulsivo obsessivo, anancástico, dependente e passivo-agressivo; transtornos de hábito e impulso (distúrbio de controle de impulso) incluindo distúrbio explosivo intermitente, jogatina patológica, fixação patológica por fogo (piromania), roubo patológico (cleptomania), tricotilomania; síndrome de Munchausen.

[00160] Os exemplos de esquizofrenia e outros distúrbios psicóticos que podem ser tratados de acordo com a presente invenção incluem, porém não são limitados a, esquizofrenia contínua ou episódica de diferentes tipos (por exemplo, distúrbios paranoide, hebefrênico, catatônico, indiferenciados, residuais, e esquizofreniforme); transtornos esquizotípicos (tal como transtorno de personalidade limítrofe, latente, pré-psicótico, prodrômico, de esquizofrenia pseudopsicopática pseudoneurótica e de personalidade esquizotípica); transtornos delirantes persistentes; transtornos psicóticos persistentes e transitórios, agudos; transtornos delirantes induzidos; transtornos esquizoafetivos de tipo diferente (por exemplo, tipo maníaco depressivo ou misto); psicose puerperal e outra psicose não orgânica não especificada.

[00161] Os exemplos de transtornos comportamentais e mentais devido ao uso de substância psicoativa que podem ser tratadas de acordo com a presente invenção incluem, porém não são limitadas a, transtornos comportamentais e mentais devido ao uso de álcool, opioides, canabinoides, sedativos ou hipnóticos, cocaína; transtornos comportamentais e mentais devido ao uso de outros estimulantes, incluindo cafeína, transtornos comportamentais e mentais devido à dependência e abuso de fármaco (por exemplo, dependência de narcótico, alcoolismo, dependência de anfetamina e metanfetamina, dependência de opioide, vício em cocaína, dependência em nicotina, e sídromde de abstinência de droga, e prevenção de reincidênca), uso de halucinógenos, tabaco (nicotina), solventes voláteis e transtornos comportamentais e mentais devido ao uso de múltiplos fármacos e uso de outras substâncias psicoativas, incluindo os seguintes sintomas do subtipo: uso prejudicial, síndrome de dependência, estado de abstinência, e estado de abstinência com delírio.

[00162] Os exemplos de demência que podem ser tratados de acordo com a presente invenção incluem, porém não são limitados a, demência vascular, demência devido à doença de Creutzfeld-Jacob, HIV, trauma de cabeça, doença de Parkinson, Huntington, Pick, demência do tipo Alzheimer.

[00163] Em certas modalidades, a presente invenção é direcionada aos métodos para o tratamento de esquizofrenia pela administração de uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto da presente invenção a um paciente com necessidade do mesmo.

[00164] Em certas outras modalidades, a invenção é também direcionada a um método para o tratamento de comprometimento cognitivo associado com esquizofrenia pela administração de uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto da presente invenção a um paciente com necessidade do mesmo.

[00165] Além dos distúrbios do sistema nervoso central mencionados acima, há uma literatura extensa descrevendo os efeitos dos inibidores de PDE sobre várias respostas celulares inflamatórias e autoimunes, que, além do aumento de cAMP, incluem a inibição de produção de superóxido, desgranulação, quimiotaxia e a liberação de fator de necrose de tumor (TNF) em eosinófilos, neutrófilos e monócitos. Consequentemente, os compostos da presente invenção podem ser úteis para o tratamento de doenças inflamatórias e autoimunes (Veja: Schett, G. et al., Apremilast: A novel PDE4 Inhibitor no tratamento de Autoimmune e Inflammatory Diseases, Ther. Adv. Musculoskeletal Dis. 2010; 2(5):271-278). Por exemplo, os compostos da presente Invenção podem ser úteis para o tratamento de úlceras orais associadas com doença de Behçet. Os compostos da presente invenção podem também ser úteis para o tratamento de dor associado com artrite (Veja: Hess, A. et al., Blockade of TNF-α rapidly inhibits pain responses in the central nervous system, PNAS, volume 108, n° 9, 3731-3736 (2011) ou para o tratamento de psoríase ou artrite psoriática (Veja: Schafer, P., Apremilast mechanism of action and application to psoriase and psoriatic arthritis, Biochem. Pharmacol. (2012), 15;83(12):1583-90). Consequentemente, os compostos da presente invenção podem também ser úteis para o tratamento de espondilite ancilosante [veja: Patan, E. et al., Efficacy and safety of apremilast, an oral fosfodiesterase 4 inhibitor, in ankylosing spondylitis, Ann. Rheum. Dis. (Sep. 14, 2102)]. Outras condições tratáveis por administração dos compostos da presente invenção incluem, porém não são limitadas a, doenças agudas e crônicas das vias aéreas tais como, porém não limitadas a, asma, broncocronstrição crônica e aguda, bronquite crônica, bronquiectasia, obstrução das peqeunas vias aéreas, enfisema, doenças das vias aéreas obstrutivas e e inflamatórias, síndrome do estresse respiratório agudo (ARDS), COPD, pneumoconiose, rinite alérgica sazonal ou rinite alérgica perene ou sinusite, e lesão pulmonar aguda (ALI).

[00166] Em ainda outra modalidade, os compostos da presente invenção podem ser úteis para o tratamento de artrite reumatoide, gota, e febre, edema e dor associados com inflamação, distúrbios relacionados a eosinófilos, dermatite ou eczema, urticária, conjuntivite, uveíte, psoríase, doença inflamatória intestinal, sépsis, choque séptico, lesão hepática, hipertensão pulmonar, edema pulmonar, doença de perda óssea, e infecção.

[00167] Em ainda outra modalidade, os compostos da presente invenção podem ser úteis para o tratamento de câncer. Por exemplo, os compostos da presente invenção podem ser úteis para o tratamento de cancer cerebral (por exemplo, meduloblastoma) (Veja: Schmidt, A. L., BDNF and PDE4, but not GRPR, Regulate Viability of Human Meduloblastoma Cells, J. Mol. Neuroscience (2010) 40:303-310). Os compostos da presente invenção podem também ser úteis para o tratamento de melanoma (Veja: Marquette, A. et al., ERK e PDE4 cooperate to induce RAF isoform switching in melanoma, Nature Structural & Molecular Biology, volume 18, n° 5, 584-91, 2011). Em certas modalidades, os compostos da presente invenção podem ser úteis para tratamento de leucemia, por exemplo, leucemia linfocítica crônica, (Veja: Kim, D. H. et al., Type 4 Cyclic Adenosine Monophosphate Fosfodiesterase as a Therapeutic Target in Chronic Lymphocytic Leukemia, Blood Journal of The American Society of Hematology, October 1, 1998, volume 92, n° 7 2484-2494). Em outras modalidades, os compostos podem ser úteis para tratamento de tumores cerebrais ou oftamológicos.

[00168] Em certas outras modalidades, os compostos da presente invenção podem ser úteis para tratamento de diabetes ou doenças associadas com diabetes (Veja: Vollert, S. et al., The glucose-lowering effects of the PDE4 inhibitors roflumilast and roflumilast-N-oxide in db/db mice, Diabetologia (2012) 55:2779-2788. Wouters, E. F. M. et al., Effect of the Fosfodiesterase 4 Inhibitor Roflumilast on Glucose Metabolism in Patients with Treatment-Naive, Newly Diagnosed Type 2 Diabetes Mellitus, Journal of Clinical Endocrinology and Metabolism 2012, 97, 1720-1725). Outros exemplos incluem, porém não são limitados a, degeneração macular diabética, neuropatia diabética, obesidade, diabetes tipo 2 (diabetes dependente de não insulina), síndrome metabólica, intolerância à glicose, incontinência urinária (por exemplo, hiperatividade da bexiga), edema macular diabético, nefropatia e sintomas, distúrbios ou riscos para a saúde relacionados. Como tais, os compostos podem também ser usados para reduzir gordura corporal ou peso corporal de um indivíduo com excess de peso ou obeso.

[00169] Em certas outras modalidades, os compostos da presente invenção podem ser úteis na prevenção e tratamento de distúrbios associados com atividade endotelial realçada, função de barreira endotelial comprometida e/ou neoangiogênese realçada, tal como choque séptico; angioedema, edema periférico, hidrocefalia comunicante ou não comunicante, edema vascular, edema cerebral; patologia natriúria reduzida; doenças inflamatórias, incluindo asma, rinite, artrite e doenças reumatoides e doenças autoimunes; insuficiência hepática ou renal aguda, disfunção hepática; psoríase, Doença do Intestino Irritável (IBD), doença de Crohn, e neoplasia benigna/maligna.

[00170] Em certas outras modalidades, os compostos da presente invenção podem ser úteis para tratamento de doenças da medula espinhal e/ou sistema nervoso periférico, incluindo lesão da medula espinhal, edema da medula espinhal, tumores da medula espinhal, malformações ou anomalias vasculares da medula espinhal, siringomielia, e hidromielia.

[00171] Em certas outras modalidades, os compostos descritos aqui são também úteis na prevenção e tratamento de distúrbios associados com trombose, embolia, ou distúrbios isquêmicos incluindo, porém não limitados a, infarto do tecido induzido por trombose em doença da artéria coronária, em doença cerebrovascular (incluindo arteriosclerose cerebral, angiopatia amiloide cerebral, hemorragia cerebral hereditária, e hipóxia-isquemia cerebral) e/ou em doença vascular periférica; angina estável e instável, ataque isquêmico transitório, acidente vascular cerebral, aterosclerose, infarto do miocárdio, infarto cerebral, lesão de reperfusão (cerebral/cardíaca), lesão cerebral traumática, subdural, epidural ou hemorragia subaracnoide, migraína, cluster e encefaleias de tensão, insuficiência placentária, trombose após procedimentos cirúrgicos, tais como desvio, angioplastia, colocação de stent, e substituição valvular cardíaca.

[00172] Em certas outras modalidades, os compostos descritos aqui são também úteis para tratamento de condições e distúrbios de dor. Os exemplos de tais condições e distúrbios de dor incluem, porém não limitados a, dor inflamatória, hiperalgesia, hiperalgesia inflamatória, migraína, dor de câncer, dor de osteoartrite, dor pós-cirúrgica, dor não inflamatória, dor neuropática, subcategorias de dor neuropática incluindo síndromes de dor neuropática periférica, neuropatia induzida por quimioterapia, síndrome de dor regional complexa, neuropatia sensória de HIV, neuropatia secundária a infiltração de tumor, neuropatia diabética dolorosa, dor do membro-fantasma, neuralgia posterpética, dor pós-mastectomia, neuralgia trigeminal, síndromes de dor neuropática central, dor pós-acidente vascular cerebral central, dor de esclerose múltipla, dor de doença de Parkinson, e dor de lesão da medula espinhal.

[00173] Em certas outras modalidades, os compostos descritos aqui são também úteis para tratamento de feridas (ou promoção de cicatrização de ferida), queimaduras, cicatrizes, e condições relacionadas.

[00174] Em certas outras modalidades, os compostos descritos aqui são também úteis para tratamento de distúrbios de dano moral (incluindo dano ocular, retinopatia incluindo edema macular diabético ou degeneração macular do olho, tinido, perda e deficiência auditiva, e edema cerebral).

[00175] Em certas outras modalidades, os compostos descritos aqui são também úteis para tratamento de injeção de transplante, rejeição de aloenxerto, insulficiência renal e hepática, e síndrome das pernas inquietas.

Formulações

[00176] Os compostos da invenção podem ser administrados oralmente. A administração oral pode envolver deglutição, de modo que o composto entre no trato gastrointestinal, ou administração bucal ou sublingual pode ser empregada, de modo que o composto entre na corrente sanguínea diretamente a partir da boca.

[00177] Em outra modalidade, os compostos da invenção podem também ser administrados diretamente na corrente sanguínea, no músculo, ou em um órgão interno. Os meios adequados para administração parenteral incluem intravenosa, intra-arterial, intraperitoneal, intratecal, intraventricular, intrauretal, intrasternal, intracranial, intramuscular e subcutânea. Os dispositivos adequados para administração parenteral incluem agulha (incluindo microagulha) injetores, injetores livres de agulha e técnicas de infusão.

[00178] Em outra modalidade, os compostos da invenção podem também ser formulados de tal forma que a administração tópica à pele ou mucosa (isto é, dermicamente ou transdermicamente) leve à absorção sistêmica do composto. Em outra modalidade, os compostos da invenção podem também ser formulados de tal forma que a administração intranasalmente ou por inalação leve à absorção sistêmica do composto. Em outra modalidade, os compostos da invenção podem ser formulados de tal forma que a administração retalmente ou vaginalmente leve à absorção sistêmica do composto.

[00179] O regime de dosagem para os compostos e/ou composições contendo os compostos é com base em uma variedade de fatores, incluindo o tipo, idade, peso, sexo e condição médica do paciente; a gravidade da condição; a rotina de administração; e a atividade do composto particular empregada. Desse modo, o regime de dosagem pode variar amplamente. Os níveis de dosagem da ordem de cerca de 0,01 mg a cerca de 100 mg por quilograma de peso corporal por dia são úteis no tratamento das condições acima indicadas. Em uma modalidade, a dose diária total de um composto da invenção (administrado em doses únicas ou divididas) é tipicamente de cerca de 0,01 a cerca de 100 mg/kg. Em outra modalidade, a dose diária total do composto da invenção é de cerca de 0,1 a cerca de 50 mg/kg, e em outra modalidade, de cerca de 0,5 a cerca de 30 mg/kg (isto é, mg de composto da invenção por kg peso corporal). Em uma modalidade, a dosagem é de 0,01 a 10 mg/kg/dia. Em outra modalidade, a dosagem é de 0,1 a 1,0 mg/kg/dia. As composições de dosagem unitária podem conter tais quantidades ou submúltiplos das mesmas para preparer a dosagem diária. Em muitos exemplos, a administração do composto será repetida várias vezes em um dia (tipicamente não mais do que 4 vezes). Múltiplas doses por dia, tipicamente, podem ser usadas para aumentar a dose diária total, se desejado.

[00180] Para administração oral, as composições podem ser fornecidas na forma de comprimidos contendo 0,01, 0,05, 0,1, 0,5, 1,0, 2,5, 5,0, 10,0, 15,0, 25,0, 50,0, 75,0, 100, 125, 150, 175, 200, 250 e 500 miligramas do ingrediente ativo para o ajuste sintomático da dosagem ao paciente. Um medicamento tipicamente contém de cerca de 0,01 mg a cerca de 500 mg do ingrediente ativo, ou em outra modalidade, de cerca de 1 mg a cerca de 100 mg de ingrediente ativo. Intravenosamente, as doses podem variar de cerca de 0,1 a cerca de 10 mg/kg/minuto durante uma infusão de taxa constante.

[00181] Os indivíduos adequados de acordo com a presente invenção incluem indivíduos mamíferos. Os mamíferos de acordo com a presente invenção incluem, porém não são limitados a, caninos, felinos, bovinos, caprinos, equinos, ovinos, suínos, roedores, lagomorfos, primatas, e similares, e abrangem mamíferos no útero. Em uma modalidade, os seres humanos são indivíduos adequados. Os indivíduos humanos podem ser de cada gênero e estar em qualquer estágio de desenvolvimento.

[00182] Em outra modalidade, a invenção compreende o uso de um ou mais compostos da invenção para a preparação de um medicamento para o tratamento das condições recitadas aqui.

[00183] Para o tratamento das condições referidas acima, os compostos da invenção podem ser administrados como composto de per si. Alternativamente, os sais farmaceuticamente aceitáveis são adequados para aplicações médicas por causa de sua maior sulibilidade aquosa em relação ao composto de origem.

[00184] Em outra modalidade, a presente invenção compreende composições farmacêuticas. Tais composições farmacêuticas compreendem um composto da invenção apresentado com um veículo farmaceuticamente aceitável. O veículo pode ser um sólido, um líquido, ou ambos, e pode ser formulado com o composto como uma composição de dose única, por exemplo, um comprimido, que pode conter de 0,05% a 95% em peso dos compostos ativos. Um composto da invenção pode ser acoplado com polímeros adequados como veículos fármaco alvejáveis. Outras substâncias farmacologicamente ativas podem também estar presentes.

[00185] Os compostos da presente invenção podem ser administrados por qualquer rotina adequado, preferivelmente na forma de uma composição farmacêutica adaptada a tal rotina, e em uma dose efifaz para o tratamento destinado. Os compostos e composições ativas, por exemplo, podem ser administrados oralmente, retalmente, parenteralmente, ou topicamente (por exemplo, intranasal ou oftálmico).

[00186] A administração oral de uma forma de dose sólida pode ser, por exemplo, apresentada em unidades discretas, tal como cápsulas duras e macias, pílulas, selos, lozangos, ou comprimidos, cada contendo uma quantidade predeterminada de pelo menos um composto da presente invenção. Em outra modalidade, a administração oral pode ser em uma forma de pó ou grânulo. Em outra modalidade, a forma de dose oral é sublingual, tal como, por exemplo, um losango. Em tais formas de dosagem de sólido, os compostos da presente invenção são ordinariamente combinados com um ou mais adjuvantes. Tais cápsulas ou comprimidos podem conter uma formulação de liberação controlada. No caso de cápsulas, comprimidos, e pílulas, as formas de dosagem também compreendem agentes de tamponamento ou podem ser preparados com revestimentos entéricos.

[00187] Em outra modalidade, a administração oral pode ser em uma forma de dose líquida. As formas de dosagem líquida para administração oral incluem, por exemplo, emulsões, soluções, suspensões, xaropes, e elíxires farmaceuticamente aceitáveis contend diluentes inertes geralmente usados na técnica (por exemplo, água). Tais composições também podem compreender adjuvantes, tais como agentes umectantes, emulsificantes, de suspensão, aromatizantes (por exemplo, adoçantes), e/ou agentes perfumantes.

[00188] Em outra modalidade, a presente invenção compreende uma forma de dosagem parenteral. A "administração parenteral" inclui, por exemplo, injeções subcutâneas, injeções intravenosas, injeções intraperiotoneais, injeções intramusculares, injeção intrasternais, e infusões. As preparações injetáveis (isto é, suspensões oleagenosas ou aquosas injetáveis estéreis) podem ser formuladas de acordo com a técnica conhecida usando agentes de dispersão, umectantes, e/ou suspensão, e incluem formulações de depósito.

[00189] Em outra modalidade, a presente invenção compreende uma forma de dosagem tópica. A "administração tópica" inclui, por exemplo, administração trasndérmica, tal como por meio de emplastros transdérmicos ou desvios iontoforeses, administração intraocular, ou administração por inalação ou inalação. As composições para administração tópica também incluem, por exemplo, géis tópicos, sprays, unguentos, e cremes. Uma formulação tópica pode incluir um composto que realce a absorção ou penetração do ingrediente ativo através da pele ou outras áreas afetadas. Quando os compostos desta invenção forem administrados por um dispositivo transdérmico, a administração será realizada usando um emplastro do reservatório e tipo de membrana porosa ou de uma variedade de matriz sólida. As formulações típicas para este propósito incluem géis, hidrogéis, loções, soluções, cremes, unguentos, pós de varredura, curativos, espumas, películas, emplastros de pele, pastilhas, implantes, esponjas, fibras, bandagens e microemulsões. Os lipossomas podem também ser usados. Os veículos típicos incluem álcool, água, óleo mineral, petóleo líquido, petrolato branco, glicerina, polietileno glicol e propilene glicol. Os realçadores de penetração podem ser incorporados - veja, por exemplo, Finnin e Morgan, J. Pharm. Sci., 88 (10), 955-958 (1999).

[00190] As formulações adequadas para administração tópica ao olho incluem, por exemplo, colírios em que o composto desta invenção é dissolvido ou suspenso em um veículo adequado. Uma formulação típica adequada para administração ocular ou auditiva pode ser na forma de gotas de uma suspensão ou solução micronizada na salina estéril, ajustada ao pH, isotônica. Outras formulações adequadas para administração ocular ou auditive incluem pomadas, implantes biodegradáveis (por exemplo, esponjas de gel absorvíveis, colágeno) e não biodegradáveis (por exemplo, silicone), pastilhas, lentes e sistemas vesiculares ou particulados, tal como niossomas ou lipossomas. Um polímero tal como ácido poliacrílico reticulado, álcool polivinílico, ácido hialurônico, um polímero celulósico, por exemplo, hidroxipropilmetil celulose, hidroxietil celulose, ou metil celulose, ou um polímero heteropolissacarídeo, por exemplo, goma de gelano, pode ser incorporado juntamente com um preservativo, tal como cloreto de benzalcônio. Tais formulações podem também ser liberadas por iontoforese.

[00191] Para administração intranasal ou administração por inalação, os compostos ativos da invenção são convenientemente liberados na forma de uma solução ou suspensão de um recipiente de spray a bomba que é espremido ou bombeado pelo paciente ou como uma apresentação por spray de aerosol de um recipiente pressurizado ou um nebulizador, com o uso de um propelente adequado. As formulações adequadas para administração intranasal são tipicamente administradas na forma de um pó seco (sozinho; como uma mistura, por exemplo, em uma mistura seca com lactose; ou como uma partícula de componente misturado, por exemplo, misturado com fosfolipídeos, tal como fosfatidilcolina) a partir de um inalador de pó seco ou como um spray de aerossol a partir de um recipiente pressurizado, bomba, spray, vaporizador (preferivelmente um vaporizador usando eletroidrodinâmicos para produzir uma névoa fina), ou nebulizador, com ou sem o uso de um propelente adequado, tal como 1,1,1,2-tetrafluoroetano ou 1,1,1,2,3,3,3-heptafluoropropano. Para uso nasal, o pó pode compreender um agente bioadesivo, por exemplo, quitosana ou ciclodextrina.

[00192] Em outra modalidade, a presente invenção compreende uma forma de dose retal. Tal forma de dose retal pode ser na forma de, por exemplo, um supositório. A manteiga de cacau é uma base de supositório tradicional, porém várias alternativas podem ser usadas quando apropriadas.

[00193] Outros materiais veículo e modos de administração conhecidos na técnica farmacêutica podem também ser usados. As composições farmacêuticas da invenção podem ser preparadas por qualquer das técnicas bem conhecidas de farmácia, tais como procedimentos de formulação e administração eficazes. As considerações acima em relação a procedimentos de formulação e administração eficazes são bem conhecidas na técnica e são descritas em livros didáticos padrão. A formulação de fármacos é descrita em, por exemplo, Hoover, John E., Remington’s Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Co., Easton, Pennsylvania, 1975; Liberman et al., edições, Pharmaceutical Dosage Forms, Marcel Decker, Nova Iorque, N.Y., 1980; e Kibbe et al., edições, Handbook of Pharmaceutical Excipients (3a Edição.), American Pharmaceutical Association, Washington, 1999.

[00194] Os compostos da presente invenção podem ser usados, sozinhos ou em combinação com outros agentes terapêuticos, no tratamento de várias condições ou estados de doença. O(s) composto(s) da presente invenção e outro(s) agente(s) terapêutico(s) pode(m) ser administrado(s) simultaneamente (na mesma forma de dosagem ou em formas de dosagem separadas em formas de dosagem separadas) ou sequencialmente. Um agente terapêutico exemplar pode ser, por exemplo, um agonista receptor de glutamato metabotrópico.

[00195] A administração de dois ou mais compostos "em combinação" significa que os compostos são administrados próximos o suficiente, no tempo em que a presença de um altera os efeitos biológicos do outro. Os dois ou mais compostos podem ser administrados simultaneamente, concorrentemente ou sequencialmente. Além disso, a administração simultânea pode ser realizada misturando-se os compostos antes da administração ou administrando-se os compostos ao mesmo tempo, porém em sítios anatômicos diferentes ou usando rotinas diferentes de administração.

[00196] As expressões "administração concorrente", "co- administração", "administração simultânea", e "simultaneamente administrado" significa que os compostos são administrados em combinação.

[00197] A presente invenção inclui o uso de uma combinação de um composto inibidor de PDE4 da presente invenção e um ou mais agente(s) farmaceuticamente ativo(s). Se uma combinação de agentes ativos é administrada, em seguida eles podem ser administrados sequencialmente ou simultaneamente, em formas de dosagem separadas ou combinadas em uma forma de dosagem única. Consequentemente, a presente invenção também inclui composições farmacêuticas compreendendo uma quantidade de: (a) um primeiro agente compreendendo um composto da presente invenção ou um sal farmaceuticamente aceitável do composto; (b) um segundo agente farmaceuticamente ativo; e (c) um veículo (carrier), veículo (vehicle) ou diluente farmaceuticamente aceitável.

[00198] Vários agentes farmaceuticamente ativospodem ser selecionados para uso juntamente com os compostos da presente invenção, dependendo da doença, distúrbio, ou condição a ser tratada. Os agentes farmaceuticamente ativos que podem ser usados em combinação com as composições da presente invenção incluem, sem limitação:

[00199] (i) inibidores de acetilcolinesterase, tal como cloridrato de donepezila (ARICEPT, MEMAC), salicilato de fisostigmina (ANTILIRIUM), sulfato de fisostigmina (ESERINE), metrifonato, neostigmina, ganstigmina, piridostigmina (MESTINON), ambenônio (MYTELASE), demarcário, Debio 9902 (também conhecido como ZT- 1; Debiopharm), rivastigmina (EXELON), ladostigil, NP-0361, hidrobrometo de galantamina (RAZADYNE, RIMINYL, NIVALIN), tacrina (COGNEX), tolserina, maleato de velnacrina, memoquina, huperzina A (HUP-A; NeuroHitech), fenserina, edrofônio (ENLON, TENSILON), e INM-176;

[00200] (ii) amiloide-β (ou fragmentos do mesmo), tal como Aβi-15 conjugado com epítopo de ligação de pan HLA DR (PADRE), ACC-001 (Elan/Wyeth), ACI-01, ACI-24, AN-1792, Affitope AD-01, CAD106, e V950;

[00201] (iii) anticorpos para amiloide-β (ou fragmentos do mesmo), tal como ponezumabe, solanezumabe, bapineuzumabe (também conhecido como AAB-001), AAB-002 (Wyeth/Elan), ACI-01-Ab7, BAN- 2401, Ig intravenoso (GAMMAGARD), LY2062430 (m266 humanizado; Lilly), R1450 (Roche), ACU-5A5, huC091, e aqueles descritos nos pedidos de patente internacional nos WO04/032868, WO05/025616, WO06/036291, WO06/069081, WO06/118959, nos pedidos de patente US nos US2003/0073655, US2004/0192898, US2005/0048049, US2005/0019328, nos pedidos de patente europeias nos EP0994728 e 1257584, e na Patente US no 5,750,349;

[00202] (iv) agentes de inibição ou redução de amiloide (incluindo aqueles que reduzem produção de amiloide, acumulação e fibrilização) tal como dimebon, davunetida, eprodisato, leuprolida, SK-PC-B70M, celecoxibe, lovastatina, anapsos, oxiracetam, pramiracetam, vareniclina, nicergolina, colostrinina, bisnorcinserina (também conhecido como BNC), NIC5-15 (Humanetics), E-2012 (Eisai), pioglitazona, clioquinol (também conhecido como PBT1), PBT2 (Prana Biotechnology), flurbiprofeno (ANSAID, FROBEN) e seu R- enantiômero tarenflurbil (FLURIZAN), nitroflurbiprofeno, fenoprofeno (FENOPRON, NALFON), ibuprofeno (ADVIL, MOTRIN, NUROFEN), lisinato de ibuprofeno, ácido meclofenâmico, meclofenamato sódico (MECLOMEN), indometacina (INDOCIN), diclofenaco sódico (VOLTAREN), diclofenaco potássico, sulindaco (CLINORIL), sulfeto de sulindaco, diflunisal (DOLOBID), naproxeno (NAPROSYN), naproxeno sódico (ANAPROX, ALEVE), ARC031 (Archer Pharmaceuticals), CAD- 106 (Cytos), LY450139 (Lilly), enzima de degradação à insulina (também conhecido como insulisina), o extrato de gingko biloba EGb- 761 (ROKAN, TEBONIN), tramiprosato (CEREBRIL, ALZHEMED), eprodisato (FIBRILLEX, KIACTA), composto W [ácido 3,5-bis(4- nitrofenóxi)benzoico], NGX-96992, neprilisina (também conhecido como endopeptidase neutra (NEP)), cilo-inositol (também conhecido como cilitol), atorvastatina (LIPITOR), simvastatina (ZOCOR), KLVFF- (EEX)3, SKF-74652, mesilato de ibutamoreno, inibidores de BACE tais como ASP-1702, SCH-745966, JNJ-715754, AMG-0683, AZ- 12304146, BMS-782450, GSK-188909, NB-533, E2609 e TTP-854; moduladores de gama secretase tal como ELND-007; e inibidores de RAGE (receptor para produtos finais de glicação avançada), tais como TTP488 (Transtech) e TTP4000 (Transtech), e aqueles descritos na Patente US n° 7,285.293, incluindo PTI-777;

[00203] (v) agonistas de receptor alfa-adrenérgico, tal como guanfacina (INTUNIV, TENEX), clonidina (CATAPRES), metaraminol (ARAMINE), metildopa (ALDOMET, DOPAMET, NOVOMEDOPA), tizanidina (ZANAFLEX), fenilefrina (também conhecido como neosinefrina), metoxamina, cirazolina, guanfacina (INTUNIV), lofexidina, xilazina, modafinila (PROVIGIL), adrafinila, e armodafinila (NUVIGIL);

[00204] (vi) Agentes de bloqueio de receptor beta-adrenérgico (beta bloqueadores), tais como carteolol, esmolol (BREVIBLOC), labetalol (NORMODYNE, TRANDATE), oxprenolol (LARACOR, TRASACOR), pindolol (VISKEN), propanolol (INDERAL), sotalol (BETAPACE, SOTALEX, SOTACOR), timolol (BLOCADREN, TIMOPTIC), acebutolol (SECTRAL, PRENT), nadolol (CORGARD), tartrato de metoprolol (LOPRESSOR), succinato de metoprolol (TOPROL-XL), atenolol (TENORMIN), butoxamina, e SR 59230A (Sanofi);

[00205] (vii) anticolinérgicos, tais como amitriptilina (ELAVIL, ENDEP), butriptilina, mesilato de benztropina (COGENTIN), triexifenidila (ARTANE), difenidramina (BENADRYL), orfenadrina (NORFLEX), hiosciamina, atropina (ATROPEN), scopolamina (TRANSDERM-SCOP), metilbromida de escopolamina (PARMINE), dicicloverina (BENTYL, BYCLOMINE, DIBENT, DILOMINE), tolterodina (DETROL), oxibutinina (DITROPAN, LYRINEL XL, OXYTROL), brometo de pentienato, propantelina (PRO-BANTHINE), ciclizina, cloridrato de imipramina (TOFRANIL), maleato de imipramina (SURMONTIL), lofepramina, desipramina (NORPRAMIN), doxepina (SINEQUAN, ZONALON), trimipramina (SURMONTIL), e glicopirrolato (ROBINUL);

[00206] (viii) anticonvulsivos, tal como carbamazepina (TEGRETOL, CARBATROL), oxcarbazepina (TRILEPTAL), fenitoína sódica (PHENYTEK), fosfenitoína (CEREBYX, PRODILANTIN), divalproato de sódio (DEPAKOTE), gabapentina (NEURONTIN), pregabalina (LYRICA), topirimato (TOPAMAX), ácido valproico (DEPAKENE), valproato de sódio (DEPACON), 1-benzil-5-bromouracila, progabida, beclamida, zonisamida (TRERIEF, EXCEGRAN), CP-465022, retigabina, talampanel, e primidona (MYSOLINE);

[00207] (ix) antipsicóticos, tal como lurasidona (LATUDA, também conhecido como SM-13496; Dainippon Sumitomo), aripiprazol (ABILIFY), clorpromazina (THORAZINA), haloperidol (HALDOL), iloperidona (FANAPTA), decanoato de flupentixol (DEPIXOL, FLUANXOL), reserpina (SERPLAN), pimozida (ORAP), decanoato de fluphenazina, cloridrato de flufenazina, proclorperazina (COMPRO), asenapina (SAPHRIS), loxapina (LOXITANE), molindona (MOBAN), perfenazina, tioridazina, tiotixina, trifluoperazina (STELAZINE), ramelteona, clozapina (CLOZARIL), norclozapina (ACP-104), risperidona (RISPERDAL), paliperidona (INVEGA), melperona, olanzapina (ZYPREXA), quetiapina (SEROQUEL), talnetante, amisulprida, ziprasidona (GEODON), blonanserina (LONASEN), e ACP-103 (Acadia Pharmaceuticals);

[00208] (x) bloqueadores de canal de cálcio tais como lomerizina, ziconotida, nilvadipina (ESCOR, NIVADIL), diperdipina, amlodipina (NORVASC, ISTIN, AMLODIN), felodipina (PLENDIL), nicardipina (CARDENE), nifedipina (ADALAT, PROCARDIA), MEM 1003 e seu nimodipina de composto origem (NIMOTOP), nisoldipina (SULAR), nitrendipina, lacidipina (LACIPIL, MOTENS), lercanidipina (ZANIDIP), lifarizina, diltiazem (CARDIZEM), verapamila (CALAN, VERELAN), AR- R 18565 (AstraZeneca), e enecadina;

[00209] (xi) inibidores catecol O-metiltransferase (COMT), tal como nitecapona, tolcapona (TASMAR), entacapona (COMTAN), e tropolona;

[00210] (xii) estimulantes do sistema nervoso central, tal como atomoxetina, reboxetina, ioimbina, cafeína, fenmetrazina, fendimetrazina, pemolina, fencamfamina (GLUCOENERGAN, REACTIVAN), fenetillina (CAPTAGON), pipradol (MERETRAN), deanol (também conhecido como dimetilaminoetanol), metilfenidato (DAYTRANA), cloridrato de metilfenidato (RITALIN), dexmetilfenidato (FOCALIN), anfetamina (sozinhos ou em combinação com outros estimulantes de CNS, por exemplo, ADDERALL (asparato de anfetamina, sulfato de anfetamina, sacarato de dextroanfetamina, e sulfato de dextroanfetamina)), sulfato de dextroanfetamina (DEXEDRINE, DEXTROSTAT), metanfetamina (DESOXYN), lisdexamfetamina (VYVANSE), e benzfetamina (DIDREX);

[00211] (xiii) corticoesteroides, tal como prednisona (STERAPRED, DELTASONE), prednisolona (PRELONE), acetate de predisolona (OMNIPRED, PRED BRANDO, PRED FORTE), fosfato de sódio de prednisolona (ORAPRED ODT), metilprednisolona (MEDROL); acetate de metilprednisolona (DEPO-MEDROL), e succinate de sódio de metilprednisolona (A-METHAPRED, SOLU-MEDROL);

[00212] (xiv) agonistas de receptor de dopamina, tal como apomorfina (APOKYN), bromocriptina (PARLODEL), cabergolina (DOSTINEX), diidrexidina, diidroergocriptina, fenoldopam (CORLOPAM), lisurida (DOPERGIN), tergurida espergolida (PERMAX), piribedil (TRIVASTAL, TRASTAL), pramipexol (MIRAPEX), quinpirol, ropinirol (REQUIP), rotigotina (NEUPRO), SKF-82958 (GlaxoSmithKline), cariprazina, pardoprunox e sarizotano;

[00213] (xv) antagonistas de receptores de dopamina, tal como clorpromazina, flufenazina, haloperidol, loxapina, risperidona, tioridazina, tiotixeno, trifluoperazina, tetrabenazina (NITOMAN, XENAZINE), 7-hidroxiamoxapina, droperidol (INAPSINE, DRIDOL, DROPLETAN), domperidona (MOTILIUM), L-741742, L-745870, racloprida, SB-277011A, SCH-23390, ecopipam, SKF-83566, e metoclopramida (REGLAN);

[00214] (xvi) inibidores de recaptação de dopamina tais como bupropiona, safinamida, maleato de nomifensina (MERITAL), vanoxerina (também conhecido como GBR-12909) e seu éster de decanoato DBL-583, e amineptina;

[00215] (xvii) agonistas receptores de ácido gam-amino-butírico (GABA), tal como blacofeno (LIORESAL, KEMSTRO), siclofeno, pentobarbital (NEMBUTAL), progabida (GABRENE), e clometiazol;

[00216] (xviii) antagonista de histamina 3 (H3) tal como ciproxifano, tiprolisanto, S-38093, irdabisanto, pitolisanto, GSK-239512, GSK- 207040, JNJ-5207852, JNJ-17216498, HPP-404, SAR-110894, trans- N-etil-3-fluoro-3-[3-fluoro-4-(pirrolidin-1-ilmetil)fenil]- ciclobutanocarboxamida (PF-3654746 e aqueles descritos nos pedidos de patente US nos US2005-0043354, US2005-0267095, US2005- 0256135, US2008-0096955, US2007-1079175, e US2008-0176925; Publicações de patentes internacionais nos WO2006/136924, WO2007/063385, WO2007/069053, WO2007/088450, WO2007/099423, WO2007/105053, WO2007/138431, e WO2007/088462; e Patente US n° 7.115.600);

[00217] (xix) imunomoduladores tais como acetato de glatiramer (também conhecido como copolímero-1; COPAXONE), MBP-8298 (peptídeo de proteína básica de mielina sintética), fumarato de dimetila, fingomlimode (também conhecido como FTY720), roquinimex (LINOMIDE), laquinimode (também conhecido como ABR-215062 e SAIK-MS), ABT-874 (ANTICORPO anti-IL-12 humano; Abbott), rituximabe (RITUXAN), alemtuzumabe (CAMPATH), daclizumabe (ZENAPAX), e natalizumabe (TYSABRI);

[00218] (xx) imunossupressores tais como metotrexato (TREXALL, RHEUMATREX), mitoxantrona (NOVANTRONE), micofenolato de mofetila (CELLCEPT), micofenolato de sódio (MYFORTIC), azatioprina (AZASAN, IMURAN), mercaptopurina (PURI-NETHOL), ciclofosfamida (NEOSAR, CYTOXAN), clorambucila (LEUKERAN), cladribina (LEUSTATIN, MYLINAX), alfa-fetoproteína, etanercepto (ENBREL), e 4-(benziloxi)-5-[(5-undecil-2H-pirrol-2-ilideno)metil]-1H,1'H-2,2'-bipirrol (também conhecido como PNU-156804);

[00219] (xxi) interferons, incluindo interferon beta-1a (AVONEX, REBIF) e interferon beta-1b (BETASERON, BETAFERON);

[00220] (xxii) levodopa (ou seu éster de metila ou etila), sozinhos ou em combinação com um inibidor de DOPA decarboxilase (por exemplo, carbidopa (SINEMET, CARBILEV, PARCOPA), benserazida (MADOPAR), α-metildopa, monoflurometildopa, difluorometildopa, brocresina, ou m-hidroxibenzilidrazina);

[00221] (xxiii) antagonistas de receptor de N-metil-D-aspartato (NMDA) tais como memantina (NAMENDA, AXURA, EBIXA), amantadina (SYMMETREL), acamprosato (CAMPRAL), besonprodila, cetamina (KETALAR), delucemina, dexanabinol, dexefaroxano, dextrometorfano, dextrorfano, traxoprodila, CP-283097, himantano, idantadol, ipenoxazona, L-701252 (Merck), lancicemina, levorfanol (DROMORAN), LY-233536 e LY-235959 (ambos de Lilly), metadona, (DOLOPHINE), neramexano, perzinfotel, fenciclidina, tianeptina (STABLON), dizocilpina (também conhecido como MK-801), EAB-318 (Wyeth), ibogaina, voacangina, tiletamina, riluzol (RILUTEK), aptiganel (CERES0TAT), gavestinel, e remacimida;

[00222] (xxiv) inibidores de monoamina oxidase (MAO), tais como selegilina (EMSAM), cloridrato de selegilina (l-deprnila, ELDEPRYL, ZELAPAR), dimetilselegileno, brofaromina, fenelzina (NARDIL), tranilcipromina (PARNATE), moclobemida (AURORIX, MANERIX), befloxatona, safinamida, isocarboxazida (MARPLAN), nialamida (NIAMID), rasagilina (AZILECT), iproniazida (MARSILID, IPROZID, IPRONID), CHF-3381 (Chiesi Farmaceutici), iproclozida, toloxatona (HUMORYL, PERENUM), bifemelano, desoxipeganina, harmina (também conhecido como telepatina ou banasterina), harmalina, linezolida (ZYVOX, ZYVOXID), e pargilina (EUDATIN, SUPIRDYL);

[00223] (xxv) agonistas de receptor de muscarínico (particularlmente subtipo M1), tais como cevimelina, levetiracetam, cloreto de betanecol (DUVOID, URECHOLINE), itamelina, pilocarpina (SALAGEN), NGX267, arecolina, L-687306 (Merck), L-689660 (Merck), iodeto de furtretônio (FURAMON, FURANOL), benzensulfonato de furtretônio, p-toluenossulfonato de furtretônio, McN-A-343, oxotremorina, sabcomelina, AC-90222 (Acadia Pharmaceuticals), e carbachol (CARBASTAT, MIOSTAT, CARBOPTIC);

[00224] (xxvi) Fármacos neuroprotetores tais como bosutinib, condoliase, airmoclomol, lamotrigina, perampanel, aniracetam, minaprima, riluzol, N-hidróxi-1,2,4,9-tetra-hidro-3H-carbazol-3-imina, desmoteplase, anatibanto, astaxantina, neuropeptídeo NAP (por exemplo, AL-108 e AL-208; ambos de Allon Therapeutics), neurostrol, perampenel, isproniclina, bis(4-β-D-glicopiranossiloxibenzil)-2-β-D- glicopiranosil-2-isobutiltartarato (também conhecido como dactilorina B ou DHB), formobactina, xaliproden (XAPRILA), lactacistina, cloridrato de dimebolina (DIMEBON), disufenton (CEROVIVE), ácido arúndico (ONO-2506, PROGLIA, CEREACT), citicolina (também conhecido como citidina 5'-difosfocolina), edaravona (RADICUT), AEOL-10113 e AEOL-10150 (both Aeolus Pharmaceuticals), AGY-94806 (também conhecido como SA-450 e Msc-1), fator estimulante de colônia de granulócito (também conhecido como AX-200), BAY-38-7271 (também conhecido como KN-387271; Bayer AG), ancrodo (VIPRINEX, ARWIN), DP-b99 (D-Pharm Ltd), HF-0220 (17-β- hidroxiepiandroesterona; Newron Pharmaceuticals), HF-0420 (também conhecido como oligotropina), piridoxal 5'-fosfato (também conhecido como MC-1), microplasmina, S-18986, piclozotano, NP031112, tacrolimo, L-seril-L-metionil-L-alanil-L-lisil-L-glutamil-glicil-L-valina, AC- 184897 (Acadia Pharmaceuticals), ADNF-14 (National Institutes of Health), estilbazulenil nitrona, SUN-N8075 (Daiichi Suntory Biomedical Research), e zonampanel;

[00225] (xxvii) agonistas de receptor de nicotínicos, tal como epibatidina, bupropiona, CP-601927, vareniclina, ABT-089 (Abbott), ABT-594, AZD-0328 (AstraZeneca), EVP-6124, R3487 (também conhecido como MEM3454; Roche/Memory Pharmaceuticals), R4996 (também conhecido como MEM63908; Roche/Memory Pharmaceuticals), TC-4959 e TC-5619 (ambos de Targacept), e RJR- 2403;

[00226] (xxviii) inibidores de recaptação de norepinefrina (noradrenalina), tal como atomoxetina (STRATTERA), doxepina (APONAL, ADAPIN, SINEQUAN), nortriptilina (AVENTYL, PAMELOR, NORTRILEN), amoxapina (ASENDIN, DEMOLOX, MOXIDIL), reboxetina (EDRONAX, VESTRA), viloxazina (VIVALAN), maprotilina (DEPRILEPT, LUDIOMIL, PSYMION), bupropiona (WELLBUTRIN), e radaxafina;

[00227] (xxix) inibidores de fosfodiesterase (PDE), incluindo, porém não limitados a, (a) inibidores de PDE1 (por exemplo, vinpocetina (CAVINTON, CERACTIN, INTELECTOL) e aqueles descritos na Patente US n° 6.235.742, (b) inibidores de PDE2 (por exemplo, eritro- 9-(2-hidróxi-3-nonil)adenina (EHNA), BAY 60-7550, e aqueles descritos na Patente US n° 6.174.884), (c) inibidores de PDE3 (por exemplo, anagrelida, cilostazol, milrinona, olprinona, parogrelila, e pimobendano), (d) Inibidores de PDE4 (por exemplo, apremilast, ibudilastroflumilast, rolipram, Ro 20-1724, ibudilast (KETAS), piclamilast (também conhecido como RP73401), CDP840, cilomilast (ARIFLO), roflumilast, tofimilast, oglemilast (também conhecido como GRC 3886), tetomilast (também conhecido como OPC-6535), lirimifast, teofillina (UNIPHYL, THEOLAIR), arofilina (também conhecido como LAS-31025), doxofillina, RPR-122818, ou mesembrina), e (e) inibidores de PDE5 (por exemplo, sildenafil (VIAGRA, REVATIO), tadalafil (CIALIS), vardenafil (LEVITRA, VIVANZA), udenafila, avanafila, dipiridamol (PERSANTINE), E-4010, E-4021, E-8010, zaprinast, iodenafila, mirodenafila, DA-8159, e aqueles descritos nos pedidos de patente internacional WO2002/020521, WO2005/049616, WO2006/120552, WO2006/126081, WO2006/126082, WO2006/126083, e WO2007/122466), (f) inibidores de PDE7; (g) inibidores de PDE8; (h) inibidores de PDE9 (por exemplo, BAY 736691 (Bayer AG) e aqueles descritos nos pedidos de patente US nos US2003/0195205, US2004/0220186, US2006/0111372, US2006/0106035, e USSN 12/118.062 (depositado em 9 de maio de 2008)), (i) inibidores de PDE10 tais como 2-({4-[1-metil-4-(piridin-4-il)- 1H-pirazol-3-il]fenóxi}metil)quinolin-3(4H)-ona e SCH-1518291; e (j) inibidores de PDE11;

[00228] (xxx) quinolinas, tal como quinina (incluindo seus sais de cloridrato, diidrocloreto, sulfato, bissulfato e gliconato), cloroquina, sontoquina, hidroxicloroquina (PLAQUENIL), mefloquina (LARIAM), e amodiaquina (CAMOQUIN, FLAVOQUINE);

[00229] (xxxi) inibidores de β-secretase, tal como ASP-1702, SCH- 745966, JNJ-715754, AMG-0683, AZ-12304146, BMS-782450, GSK- 188909, NB-533, LY-2886721, E-2609, HPP-854, tartrato de (+)- fenserina (POSIPHEN), LSN-2434074 (também conhecido como LY- 2434074), KMI-574, SCH-745966, Ac-rER (N2-acetil-D-arginil-L- arginina), loxistatina (também conhecido como E64d), e CA074Me;

[00230] (xxxii) inibidores e moduladores de Y-secretase, tais como BMS-708163 (Avagacest), WO20060430064 (Merck), DSP8658 (Dainippon), ITI-009, L-685458 (Merck), ELAN-G, ELAN-Z, 4-cloro-N- [(2S)-3-etil-1-hidroxipentan-2-il]benzenossulfonamida;

[00231] (xxxiii) antagonistas de receptor de serotonina (5- hidroxitriptamina) 1A (5-HT1A), tais como espiperona, levo-pindolol, BMY 7378, NAD-299, S-(-)-UH-301, NAN 190, lecozotano;

[00232] (xxxiv) agonistas de receptor de serotonina (5- hidroxitriptamina) 2C (5-HT2c), tais como vabicaserina e zicronapina;

[00233] agonistas de receptor de serotonina (5-hidroxitriptamina) 4 (5-HT4), tal como PRX-03140 (Epix);

[00234] (xxxvi) antagonistas de receptor serotonina (5- hidroxitriptamina) 6 (5-HT6), tal como A-964324, AVI-101, AVN-211, mianserina (TORVOL, BOLVIDON, NORVAL), metiotepina (também conhecido como metitepine), ritanserina, ALX-1161, ALX-1175, MS- 245, LY-483518 (também conhecido como SGS518; Lilly), MS-245, Ro 04-6790, Ro 43-68544, Ro 63-0563, Ro 65-7199, Ro 65-7674, SB- 399885, SB-214111, SB-258510, SB-271046, SB-357134, SB-699929, SB-271046, SB-742457 (GlaxoSmithKline), Lu AE58054 (Lundbeck A/S), e PRX-07034 (Epix);

[00235] (xxxvii) inibidores de recaptação de serotonina (5-HT) tal como alaproclato, citalopram (CELEXA, CIPRAMIL), escitalopram (LEXAPRO, CIPRALEX), clomipramina (ANAFRANIL), duloxetina (CYMBALTA), femoxetina (MALEXIL), fenfluramina (PONDIMIN), norfenfluramina, fluoxetina (PROZAC), fluvoxamina (LUVOX), indalpina, milnaciprano (IXEL), paroxetina (PAXIL, SEROXAT), sertralina (ZOLOFT, LUSTRAL), trazodona (DESYREL, MOLIPAXIN), venlafaxina (EFFEXOR), zimelidina (NORMUD, ZELMID), bicifadina, desvenlafaxina (PRISTIQ), brasofensina, vilazodona, cariprazina, neuralstem e tesofensina;

[00236] (xxxviii) fatores tróficos, tais como fator de crescimento nervoso (NGF), fator de crescimento de fibroblasto básico (bFGF; ERSOFERMIN), neurotrofina-3 (NT-3), cardiotrofina-1, fator neutrófico derivado do cérebro (BDNF), neublastina, meteorina, e fator neurotrófico derivado da glia (GDNF), e agentes que estimulam aprodução de fatores tróficos, tal como propentofilina, idebenona, PYM50028 (COGANE; Phytopharm), e AIT-082 (NEOTROFIN);

[00237] (xxxix) Inibidores transportador-1 de glicina tais como paliflutina, ORG-25935, JNJ-17305600, e ORG-26041;

[00238] (xl) Moduladores de receptor de glutamato tipo AMPA tal como perampanel, mibampator, selurampanel, GSK-729327, N- {(3S,4S)-4-[4-(5-ccanotiofen-2-il)fenóxi]tetra-hidro-furan-3-il}propano-2- sulfonamida, e similares.

[00239] (xli) Inibidores de Janus cinase (JAK) tais como, porém não limitados a, tofacitinibe, ruxolitinibe, baricitinibe, CYT387, GLPG0634, lestaurtinibe, pacritinibe, e TG101348.

[00240] (xlii) Inibidores de cinase 4 associado com receptor de interleucina-1 (IRAK4) tal como, porém não limitados a, PF-06650833.

[00241] A presente invenção também compreende kits que são adequados para uso na realização dos métodos de tratamento descritos acima. Em uma modalidade, o kit contém uma primeira forma de dosagem compreendendo um ou mais dos compostos da presente invenção e um recipiente para a dosagem, em quantidades suficientes para realizar os métodos da presente invenção.

[00242] Em outra modalidade, o kit da presente invenção compreende um ou mais compostos da invenção.

[00243] Os compostos da invenção, ou seus sais farmaceuticamente aceitáveis, podem ser preparados por vários métodos que são analogamente conhecidos na técnica. O esquema de reação descrito abaixo, juntamente com métodos sintéticos conhecidos na técnica de química orgânica, ou modificações e derivações que são familiares àqueles versados na técnica, ilustram um método para preparação dos compostos. Outros, incluindo as modificações dos mesmos, serão facilmente evidentes para alguém versado na técnica.

[00244] Os materiais de partida usados aqui são comercialmente disponíveis ou podem ser preparados por métodos de rotina conhecidos na técnica (tais como aqueles métodos descritos em livros de referência padrão tal como the COMPENDIUM OF ORGANIC SYNTHETIC MÉTODOS, volume I-XII (publicado por Wiley- Interscience)). Os métodos preferidos incluem, porém não limitados a, aqueles descritos abaixo.

[00245] Durante quaisquer sequências sintéticas seguintes, pode ser necessário e/ou desejável proteger grupos reativos ou sensíveis em qualquer das moléculas relacionadas. Isso pode ser obtido por meio de grupos de proteção convencionais, tais como aqueles descritos no T. W. Greene, Protective Groups in Organic Chemistry, John Wiley & Sons, 1981; T. W. Greene and P. G. M. Wuts, Protective Groups in Organic Chemistry, John Wiley & Sons, 1991; e T. W. Greene and P. G. M. Wuts, Protective Groups in Organic Chemistry, John Wiley & Sons, 1999; e T. W. Greene and P. G. M. Wuts, Protective Groups in Organic Chemistry, John Wiley & Sons, 2006, que são por meio deste incorporados por referência.

[00246] Os compostos da presente invenção, ou os sais farmaceuticamente aceitáveis de referidos compostos ou tautômeros e radioisótopos, podem ser preparados de acordo com os esquemas de reação descritos aqui abaixo. A menos que de outro modo indicado, os substituintes nos esquemas são definidos como acima. O isolamento e purificação dos produtos é realizado por procedimentos padrão, que são conhecidos por um químico versado na técnica.

[00247] Alguém versado na técnica reconhecerá que em alguns casos, os compostos no Esquema 1 serão gerados como uma mistura de diastereômeros e/ou enantiômeros; estes podem ser separados em vários estágios do esquema sintético usando técnicas convencionais ou uma combinação de tais técnicas, tais como, porém não limitadas a, cristalização, cromatografia de fase normal, cromatografia de fase reversa e cromatografia quiral, para fornecer os enantiômeros únicos da invenção.

[00248] Será entendido por alguém versado na técnica que vários símbolos, sobrescritos e subscritos usados nos Esquema, métodos e exemplos são usados por conveniência de representação e/ou para refletir a ordem na qual eles são introduzidos no Esquema, e não são destinados a necessariamente corresponder aos símbolos, sobrescritos ou subscritos nas reivindicações anexadas. O Esquema é representativo de métodos úteis na sintetização dos compostos da presente invenção. Eles não devem restringir o escopo da invenção de qualquer modo.

[00249] O Esquema 1 abaixo ilustra uma série de reações sintéticas para a preparação de compostos de Fórmula I, como representado acima, em que o hidroxipirazol de partida AA, cuja síntese foi descrita previamente (WO 2003/035644 and Chemical & Pharmaceutical Bulletin 1983, 31(4), 1228-1234), é alquilado com a cadeia de três carbonos apropriadamente substituída BB com grupos de partida (LG) que facilitam uma reação SN2 tais como cloro, bromo, e iodo e metanossulfonato, benzenossulfonato, e p-clorobenzenossulfonato. Esta bis-alquilação é realizada combinando-se AA com BB em um solvente apropriado na presença de uma base para fornecer os compostos de pirazolo-oxazina CC, cuja síntese, em que R4 = H, foi previamente descrita (Journal of Medicinal Chemistry 2006, 49(15), 4623; WO 2003/093279, US 2004/0132708, e WO 2006/130588). Durante a etapa de bis-alquilação, o (R4)a substituinte de BB deve ser representado pela mesma porção, conforme é desejado no produto final, Fórmula I, ou uma variação protetora do mesmo.

[00250] Na etapa seguinte, o composto de pirazolo-oxazina CC é halogenado pelo tratamento com reagentes de halogenação eletrofílicos tal como N-bromossuccinimida (NBS), N-iodossuccinimida (NIS), bromo, ou iodo em um solvente apropriadamente inerte para forncer o composto de halo-pirazolo-oxazina DD (veja os exemplos WO 2011092187; Chemische Berichte 1976, 109(1), 261-7; Journal of Medicinal Chemistry 2012, 55(17), 7636-7649).

[00251] Em uma outra etapa, a transformação do halo-pirazolo- oxazina DD em compostos de Fórmula I ocorre por meio de um de duas sequências de reação diferentes.

[00252] Uma sequência de reação parte com uma reação de acoplamento tipo Suzuki-Miyaura (Chemical Society Reviews 2014, 43, 412-443; Accounts of Chemical Research 2013, 46, 2626-2634), em que DD é tratado com um boronato apropriado (por exemplo, alquila, arila, ou heteroarila, etc...) na presença de base, um catalisador de metal de transição [potencialmente bis[di-terc-butil(4- dimetilaminofenil)fosfina]dicloropaládio(II) ou 1,1’- bis(difenilfosfino)ferroceno]dicloropaládio(II)], e um ligante quelante de metal (geralmente baseado em fosfina), em um solvente apropriado para instalar a porção de R1 apropriada para fornecer um éster substituído por R1 EE. Durante esta etapa, o substituinte de R1 do boronato de alquila, arila, ou heteroarila deve ser representado pela mesma porção, conforme é desejado no produto final, Fórmula I, ou uma variante protetora do mesmo.

[00253] O éster EE é em seguida convertido na Fórmula I desejada pelo tratamento do éster EE com a amina apropriada na presença de calor e um ácido de Lewis, tal como metóxido de magnésio ou cloreto de cálcio. Alternativamente, a transformação de EE em Fórmula I é realizada em um processo de duas etapas em que o éster é hidrolisado para um ácido por tratamento com água básica ou acídica em um cossolvente adequado. O ácido resultante é em seguida convertido na Fórmula I por tratamento com a amina apropriada na presença de um reagente de acoplamento/desidratação de amida tal como 2,4,6-trióxido de 2,4,6-tripropil-1,3,5,2,4,6-trioxatrifosfinano (T3P), hexafluorofosfato de O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N’,N’- tetrametilurônio (HATU), 1,3-diciclo-hexilcarbodiimida (DCC), etc., em temperaturas que variam de -20 °C a 100 °C. Durante destas etapas, os substituintes R2 e R3 da amina devem ser independentemente representados pela mesma porção, conforme desejado no produto final, Fórmula I, ou uma variante protetora do mesmo.

[00254] Como anteriormente mencionado, a transformação do halo- pirazolo-oxazina DD em compostos de Fórmula I por meio de um de duas sequências de reação diferentes. A segunda sequência para a conversão de halo-pirazolo-oxazina (DD) em compostos de Fórmula I é a conversão do éster na amida desejada por tratamento com a amina apropriada, como descrito anteriormente, para fornecer intermediário FF. Alternativamente, a transformação de DD em intermediário FF pode ser realizada em um processo de duas etapas em que o éster é hidrolisado para um ácido e o ácido resultante é em seguida convertido em Fórmula I pelo tratamento com a amina apropriada na presença de um reagente de acoplamento/desidratação de amida como previamente descrito. Durante cada uma destas etapas, os substituintes de R2 e R3 da amina devem ser independentemente representados pela mesma porção, conforme desejado no produto final, Fórmula I, ou uma variante protetora do mesmo.

[00255] Finalmente, a amida FF é em seguida convertida na Fórmula I desejada por meio de um acoplamento tipo Suzuki-Miyaura com o boronato apropriado (por exemplo, alquila, arila, ou heteroarila, etc....) [(RO)2B-R1]. Durante esta etapa, o substituinte de R1 do boronato de alquila, arila, ou heteroarila deve ser representado pela mesma porção, conforme desejado no produto final, Fórmula I, ou uma variante protetora do mesmo. Esquema 1

Procedimento Experimental

[00256] Os seguintes ilustram a síntese de vários compostos da presente invenção. Os compostos adicionais dentro do escopo desta invenção podem ser preparados usando os métodos ilustrados nestes exemplos, sozinhos ou em combinação com técnicas (techniques) geralmente conhecidas na técnica (art).

[00257] Os experimentos foram geralmente realizados sob atomosfera inerte (nitrogênio ou argônio), particularmente nos casos onde reagentes ou intermediários sensíveis a mistura ou oxigênio foram empregados. Os solventes e reagentes comerciais foram geralmente usados sem outra purificação. Os solventes anidrosos foram empregados onde apropriados, geralmente produtos AcroSeal® de produtos Acros Organics ou DriSolv® de EMD Chemicals. Em outros casos, solventes comerciais foram passados através de colunas embaladas com peneiras moleculares 4Â, até os seguintes padrões de QC para água serem atingidos: a) <100 ppm para diclorometano, tolueno, N,N-dimetilformamida e tetra-hidrofurano; b) <180 ppm para metanol, etanol, 1,4-dioxano e di-isopropilamina. Quanto às várias reações sensíveis, os solventes foram também tratados com sódio metálico, hidreto de cálcio ou peneiras moleculares, e diluídos justamente antes do uso. Os produtos foram geralmente secados sob vácuo antes de serem realizados em outras reações ou submetidos a testes biológicos. Os dados de espectrometria de massa são relatados a partir da instrumentação de espectrometria de massa de cromatografia líquida (LCMS), ionização química de pressão atmosférica (APCI) ou espectrometria de massa de cromatografia de gás (GCMS). Os desvíos químicos para os dados de ressonância magnética nuclear (RMN) são expressos em partes por milhão (ppm, δ) referendas a picos residuais dos solventes deuterados empregados. Em alguns exemplos, as separações quirais foram realizadas para separar os enantiômeros de certos compostos da invenção (em alguns exemplos, os enantiômeros separados podem ser designados como ENT-1 e ENT-2, de acordo com sua ordem de eluição). Em alguns exemplos, a reação ótica de um enentiômero foi medida usando um polarímetro. De acordo com seus dados de rotação observados (ou seus dados de rotação específicos), um enantiômero com uma rotação em sentido horário foi designado como o (+)-enantiômero e um enantiômero com uma rotação de sentido anti-horário foi designado como o (-)-enantômero. Os compostos racêmicos podem ser indicados pela presença de (+/-) adjacente à estrutura; nestes casos, a estequiometria indicada representa a configuração (em vez de absoluta) relativa dos substituintes do composto.

[00258] Reações procedentes de intermediários detectáveis foram geralmente seguidas por LCMS, e deixadas proceder para conversão total antes da adição de reagentes subsequentes. Para sínteses que se referem a procedimentos em outros exemplos e métodos, as condições de reação (tempo e temperature de reação) podem variar. Em geral, as reações foram seguidas por cromatografia de camada fina ou espectrometria de massa, e submetidas ao trabalho quando apropriadas. Em casos onde um agente de secagem não é especificado, sulfato de sódio pode ser empregado. As purificações podem variar entre os experimentos: em geral, os solventes e as relações de solvente usadas para eluentes/gradients foram escolhidas para fornecer tempos de retenção ou Rfs apropriados. Todos os materias de partida nestas preparações e exemplos são comercialmente disponíveis ou podem ser preparados por métodos conhecidos na técnica ou como descritos aqui.

[00259] Os seguintes são abreviações que podem aparecer no Procedimento Experimental descrito aqui:

[00260] Abreviações: 9-BBN = 9-borabiciclo[3,3,1]nonano; BFrEfeO = dietil eterato de trifluoreto de boro; Boc = terc-butoxicarbonila; br = amplo; n-BuLi = n-butil-lítio; t-BuONa = terc-butóxido de sódio; t- butilXPhos = di-terc-butil[2',4',6'-tri(propan-2-il)bifenil-2-il]fosfano; Bz = benzoila; CDCl3 = deuteroclorofórmio; CD3OD = deuterometanol; d = dupleto; dd = dupleto de dupleto; ddd = dupleto de dupleto de dupletos; DBU = 1,8-diazabiciclo[5,4,0]undec-7-eno; DCM = diclorometano; DEPT = realce sem distorção de transferência de polarização; DMB = (2,4- dimetoxifenil)metila; EDC ou EDCI = cloridrato de 1-[3- (dimetilamino)propil]-3-etilcarbodiimida; EtOAc = acetato de etila; EtOH = etanol; g = grama; h = hora; H2O = água; HATU = hexafluorofosfato de O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N’,N’-tetrametilurônio; HPLC = cromatografia líquida de alto desepenho; Hz = hertz; K2CO3 = carbonato de sódio; KF = fluoreto de potássio; L = litro; LCMS = espectrometria de massa de cromatografia líquida; m = multipleto; M = molar; MeOH = metanol; mg = miligrama; MHz = megahertz; min = minutos; mL = mililitro; μL = microlitro; mmol = milimol; μmol = micromol; Mo(CO)6 = molibidênio hexacarbonila; mol = mol; N = normal; N2 = nitrogênio; NaH = hidreto de sódio; NaHCO3 = bicarbonato de sódio; NaOCl = hipoclorito de sódio; NaOH = hidróxido de sódio; Na2SO4 = sulfato de sódio; NEt3 = trietilamina; NH4Cl = cloreto de amônio; RMN = ressonância magnética nuclear; NOE = efeito nuclear Overhauser; Pd(Anfos)2Cl2 = bis[di-terc- butil(4-dimetilaminofenil)fosfina]dicloropaládio(II); Pd2(dba)3 = tris(dibenzilidenoacetona)dipaládio(0); Pd(dppf)Cl2 = [1,1’-bis(difenil- fosfino)ferroceno]dicloropaládio(II); Pd(dtbpf)Ch = [1,1‘-bis(di-terc- butil- fosfino)ferroceno]dicloropaládio(II); Pd(PCy3)2Cl2 = diclorobis(triciclo- hexilfosfina)paládio(II); psi = libras por polegada quadrada; q = quarteto; rt = temperatura ambiente; s = singleto; T3P = 2,4,6-tripropil-1,3,5,2,4,6- trioxatrifosfinano 2,4,6-trióxido; TBAF = fluoreto de tetrabutilamônio; TEA = trietilamina; TEA^3HF = tetra-hidrofluoreto de trietilamina; TFA = ácido trifluoroacético; THF = tetra-hidrofurano; TLC = cromatografia de camada fina; tr = tripleto.

Preparação P1

[00261] 3-bromo-6,7-di-hidro-5H-pirazolo[5,1-b][1,3]oxazina-2- carboxilato de etila (P1)

Etapa 1. Síntese de 5-hidróxi-1H-pirazol-3-carboxilato de etila (C1).

[00262] Ácido acético (150 mL) foi adiciondo gota a gota a uma solução de 1,4-dietóxi-1,4-dioxobut-2-en-2-olato de sódio (30,0 g, 0,143 mol) em tolueno (150 mL), e a mistura foi agitada em temperatura ambiente durante 30 minutos, após os quais monoidrocloreto de hidrazina (85%, 17 g, 0,29 mol) foi dicionado. A mistura reacional foi agitada durante mais 30 minutos em temperatura ambiente e subsequentemente aquecida a 100 °C durante a noite foi concentrada em seguida a vácuo e extraída com acetato de etila (500 mL); a camada orgânica foi lavada sequencialmente com solução de bicarbonato de sódio aquosa saturada (200 mL) e solução de cloreto de sódio aquosa saturada (200 mL), secada sobre sulfato de sódio, filtrada e concentrada sob pressão reduzida para fornecer o produto como um sólido amarelo. Produção: 17 g, 0,11 mol, 77%. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 12,75 (br s, 1H), 5,91 (br s, 1H), 4,24 (q, J==1 Hz, 2H), 1,27 (t, J=7 Hz, 3H).

Etapa 2. Síntese de 6,7-di-hidro-5H-pirazolo[5,1-b][1,3]oxazina-2- carboxilato de etila (C2).

[00263] Carbonato de potássio (48,3 g, 349 mmol) foi adicionado a uma solução de C1 (13,65 g, 87,42 mmol) em acetonitrila (250 mL). A mistura foi agitada em temperatura ambiente durante 15 minutos, após os quais 1,3-dibromopropano (10 mL, 98 mmol) foi adicionado gota a gota, e a mistura reacional foi aquecida em refluxo durante 16 horas. Foi em seguida deixada resfriar para temperatura ambiente e filtrada; os sólidos filtrados foram lavados com acetonitrila (2 x 100 mL). O filtrado foi concentrado a vácuo, e o resíduo foi purificado por meio de cromatografia em sólica gel (Gradiente: 50% a 95% de acetato de etila em heptano) para fornecer o produto como um óleo laranja. Produção: 10,48 g, 53,4 mmol, 61%. LCMS m/z 197,0 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, CDCh) δ 6,03 (s, 1H), 4,39 (q, J=7,1 Hz, 2H), 4,34-4,30 (m, 2H), 4,26 (t, J=6,2 Hz, 2H), 2,33-2,26 (m, 2H), 1,39 (t, J=7,1 Hz, 3H).

Etapa 3. Síntese de 3-bromo-6,7-di-hidro-5H-pirazolo[5,1- b][1,3]oxazina-2-carboxilato de etila (P1).

[00264] N-bromossuccinimida (6,00 g, 33,7 mmol) foi adicionado em porções a uma solução de C2 (6,00 g, 30,6 mmol) em acetonitrila (100 mL). Após a mistura reacional ter sido agitada a 50 °C durante 1 hora, ela foi deixada resfriar para temperatura ambiente, concentrada a vácuo, e dividida entre acetato de etila (200 mL) e água (150 mL). A camada orgânica foi lavada com água (150 mL) e com solução de cloreto de sódio aquosa saturada (100 mL), secada sobre sulfto de magnésio, filtrada e concentrada a vácuo. Cromatografia de sílica-gel (Gradiente: 20% a 80% de acetato de etila em heptano) forneceu material que continha succinimida residual; este foi dissolvido em acetato de etila (100 mL), lavado com água (2 x 100 mL) e com solução de cloreto de sódio aquosa saturada (100 mL), secado sobre sulfto de magnésio, filtrado e concentrado sob pressão resuzida. O sólido amarelo resultante foi triturado com pentano para fornecer o produto como um pó branco. Produção: 6,00 g, 21,8 mmol, 71%. LCMS m/z 276,9 (padrão de isótopo de brometo observado) [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 4,44-4,40 (m, 2H), 4,42 (q, J=7,1 Hz, 2H), 4,26 (t, J=6,2 Hz, 2H), 2,36-2,29 (m, 2H), 1,41 (t, J=7,1 Hz, 3H). Preparação P2 Azetidin-1-il(3-bromo-6,7-di-hidro-5H-pirazolo[5,1-b][1,3]oxazin-2- il)metanona (P2)

[00265] Uma mistura de cloridrato de azetidina (2,46 g, 26,3 mmol) e N,N-di-isopropiletilamina (3,72 g, 28,8 mmol) em metanol (15 mL) foi agitada a 20 °C durante 20 minutos, após os quais P1 (1,1 g, 4,0 mmol) e cloreto de cálcio (444 mg, 4,00 mmol) foram adicionados. Após a mistura reacional ter sido agitada a 50 °C durante 18 horas, foi concentrada a vácuo e purificada usando cromatografia de sílica-gel (Gradiente: 0% a 100% de acetato de etila em éter de petróleo). O produto foi isolado como um sólido branco. Produção: 900 mg, 3,14 mmol, 78%. 1H RMN (400 MHz, CDCI3) δ 4,44 (br dd, J=8,0, 7,5 Hz, 2H), 4,39 (dd, J=5,3, 5,3 Hz, 2H), 4,22-4,13 (m, 4H), 2,37-2,26 (m, 4H). Preparação P3 3-bromo-N-ciclopropil-6,7-di-hidro-5H-pirazolo[5,1-b][1,3]oxazina-2- carboxamida (P3)

[00266] Uma mistura de P1 (1,00 g, 3,64 mmol), ciclopropanamina (98%, 2,60 mL, 36,8 mmol), e cloreto de cálcio (404 mg, 3,64 mmol) em metanol (36 mL) foi aquecida durante a noite a 50 °C. O solvente foi removido a vácuo, e o resíduo foi dividido entre água (50 mL) e acetato de etila (175 mL). A camada orgânica foi secada sobre sulfto de magnésio, filtrada e concentrada sob pressão reduzida para fornecer o produto como um sólido branco. Produção: 1,00 g, 3,49 mmol, 96%. 1H RMN (400 MHz, CDCI3) δ 6,81 (br s, 1H), 4,39 (dd, J=5,3, 5,2 Hz, 2H), 4,16 (t, J=6,2 Hz, 2H), 2,89-2,81 (m, 1H), 2,35-2,27 (m, 2H), 0,86-0,79 (m, 2H), 0,64-0,58 (m, 2H).

Preparações P4 e P5

[00267] (6S)-6-fluoro-6,7-di-hidro-5H-pirazolo[5,1-b][1,3]oxazina-2- carboxilato de etila (P4) e (6R)-6-fluoro-6,7-di-hidro-5H-pirazolo[5,1- b][1,3]oxazina-2-carboxilato de etila (P5)

Etapa 1. Síntese de 2-fluoropropano-1,3-diol (C3).

[00268] Hidreto de alumínio de lítio (solução a 1M em tetra- hidrofurano; 53,3 mL, 53,3 mmol) foi adicionado durante 10 minutos a uma solução a 0 °C de fluoropropanodioato de dimetila (5,00 g, 33,3 mmol) em tetra-hidrofurano (210 mL). Após 2 minutos de agitação a 0°C, o banho de gelo foi removido e a mistura reacional foi deixada aquecer para temperatura ambiente durante 2 horas, após os quais ela foi resfriada para 0 °C. Uma solução aquosa de ácido L(+)-tartárico, sal de sódio de potássio (sal de Rochelle; 2 N, 100 mL) foi cautelosamente adicionada, e a mistura resultante foi agitada em temperatura ambiente durante a noite. Acetato de etila foi adicionado, e a camada aquosa foi extraída três vezes com acetato de etila; as camadas orgânicas combinadas foram secadas sobre sulfato de sódio, filtradas e concentradas a vácuo para fornecer o produto. Produção: 2,31 g, 24,6 mmol, 74%. 1H RMN (400 MHz, CD3CN) δ 4,48 (d de quintetos, J=48,9, 4,7 Hz, 1H), 3,72-3,59 (m, 4H), 2,95 (br s, 2H).

Etapa 2. Síntese de bis(4-metilbenzenossulfonato) de 2-fluoropropano- 1,3-di-ila (C4).

[00269] Anidrido 4-metilbenzenossulfônico (16,8 g, 51,5 mmol) foi adicionado a uma solução a 0 °C de C3 (2,31 g, 24,6 mmol) em diclorometano (120 mL). Trietilamina (7,87 mL, 56,5 mmol) foi em seguida adicionado durante 1 minuto, e a mistura reacional foi agitada a 0 °C durante 1 hora, após os quais ela foi lavada sequencialmente com solução de bicarbonato de sódio aquosa saturada e ácido hidroclórico a 1 M, secada sobre sulfato de sódio, filtrada e concentrada a vácuo. O resíduo foi tratado com etanol (50 mL), aquecido em refluxo e em seguida resfriado em um banho de gelo. Após a mistura ter sido agitada a 0 °C durante 20 minutos, ela foi filtrada; o material coletado foi lavado com etanol frio para fornecer o produto como um sólido. Produção: 8,42 g, 20,9 mmol, 85 %. 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 7,78 (br d, J=8,2 Hz, 4H), 7,38 (br d, J=8,3 Hz, 4H), 4,82 (d de quintetos, J=46,5, 4,4 Hz, 1H), 4,18 (br dd, J=20, 4,4 Hz, 4H), 2,48 (s, 6H).

Etapa 3. Síntese de 6-fluoro-6,7-di-hidro-5H-pirazolo[5,1- b][1,3]oxazina-2-carboxilato de etila (C5).

[00270] Uma mistura de C4 (20 g, 50 mmol), C1 (8,2 g, 52 mmol), carbonato de césio (48,5 g, 149 mmol), e iodeto de sódio (7,5 g, 50 mmol) em N,N-dimetilformamida (150 mL) foi aquecida a 100 °C durante 2 horas. Água (1 L) e acetato de etila (500 mL) foram adicionados, e a camada orgânica foi concentrada a vácuo; cromatografia de sílica-gel (Gradiente: 1% a 50% de acetato de etila em éter de petróleo) forneceu o produto como um sólido branco. Produção: 8,0 g, 37 mmol, 74%. 1H RMN (400 MHz, CDCI3) δ 6,10 (s, 1H), [5,32-5,27 (m) e 5,21-5,16 (m), JHF=46 Hz, 1H], 4,67-4,54 (m, 2H), 4,48-4,32 (m, 1H), 4,39 (q, J=7,1 Hz, 2H), 4,22 (br dd, J=36,6, 12,4 Hz, 1H), 1,39 (t, J=7,1 Hz, 3H).

Etapa 4. Isolamento de (6S)-6-fluoro-6,7-di-hidro-5H-pirazolo[5,1- b][1,3]oxazina-2-carboxilato de etila (P4) e (6R)-6-fluoro-6,7-di-hidro- 5H-pirazolo[5,1-b][1,3]oxazina-2-carboxilato de etila (P5).

[00271] Uma mistura racêmica de P4 e P5 (833 mg) foi separada usando cromatografia fluida supercrítica (Coluna: Phenomenex Lux Celulose-4, 5 μm; Fase móvel: 4:1 de dióxido de carbono / metanol). O enantiômero de primeira eluição foi P4; este material exibiu uma rotação negativa (-). Produção para a separação: 250 mg, 30%. O enantiômero de segunda eluição foi P5; este material exibiu uma rotação positiva (+). Produção para a separação: 241 mg, 29%. As configurações absolutas indicadas para P4 e P5 foram designados com base na análise estrutural de análise estrutural de raio X de P4 (veja abaixo); o cristal foi obtido por meio de recristalização de P4 a partir de acetato de etila e hexanos.

Determinação de estrutura de raio X de cristal único em P4

[00272] A coleta de dados foi realizada em um difractrômetro Bruker APEX em temperatura ambiente. A coleta de dados consistia em omega e varreduras phi.

[00273] A estrutura foi resolvida por métodos diretos usando pacote de software SHELX no grupo de espaço P21. A estrutura foi subsequentemente refinada pelo método de quadrados mínimos de matriz total. Os átomos de não hidrogênio foram encontrados e refinados usando parâmetros de deslocamento anisotrópicos.

[00274] Todos os átomos de hidrogênio foram colocados em posições calculadas e foram deixados percorrer em seus átomos veículo. O refinamento final incluiu parâmetros de deslocamento isotrópico para todos os átomos de hidrogênio.

[00275] A análise da estrutura absoluta usando métodos de probabilidade (Hooft, 2008) foi realizada usando PLATON (Spek, 2010). Os resultados indicam que a estrutura absoluta foram corretamente desiganados. O método calcula que a probabilidade de a estrutura estar correta é de 100,0. O parâmetro de Hooft é reportado como 0,05 com um esd de 0,05.

[00276] O índice de R foi de 3,2 %. Um Fourier de diferença final não revelou nenhuma densidade eletrônica ausente ou perdida.

[00277] Cristal pernitente, a coleta de dados e informação de refinamento são sumariadas na Tabela 1. As coordenadas atômicas, os comprimentos de ligação, os ângulos de ligação, e os parâmetros de deslocamento são listados nas tabelas 2 a 5. Software e referências SHELXTL, Versão 5.1, Bruker AXS, 1997. PLATON, A. L. Spek, J. Appl. Cryst. 2003, 36, 7-13. MERCURY, C. F. Macrae, P. R. Edington, P. McCabe, E. Pidcock, G. P. Shields, R. Taylor, M. Towler, and J. van de Streek, J. Appl. Cryst. 2006, 39, 453-457. OLEX2, O. V. Dolomanov, L. J. Bourhis, R. J. Gildea, J. A. K. Howard, e H. Puschmann, J. Appl. Cryst. 2009, 42, 339-341. R. W. W. Hooft, L. H. Straver, and A. L. Spek, J. Appl. Cryst. 2008, 41, 96-103. H. D. Flack, Acta Cryst. 1983, A39, 867-881. Tabela 1. Dados de cristal e refinamento de estrutura para P4. Tabela 2. Coordenadas atômicas (x 104) e parâmetros de deslocamento isotrópicos esquivalentes (Â2 x 103) para P4. U(eq) é definido como um terço do traço do tensor Uij ortogonalizado. Tabela 3. Comprimentos de ligação [Â] e ângulos [°] para P4. Transformações de simetria usadas para gerar átomos equivalentes. Tabela 4. Parâmetros de deslocamento anisotrópico (Â2 x 103) para P4. O expoente de fator de deslocamento anisotrópico toma a forma: -2π2[h2 a*2U11 + .. . + 2 h k a* b* U12 ]. Tabela 5. Coordenadas de hidrogênio (x 104) e parâmetros de deslocamento isotrópico (Â2 x 103) para P4.

Preparações P6 e P7

[00278] (6S)-3-bromo-6-fluoro-6,7-di-hidro-5H-pirazolo[5,1- b][1,3]oxazina-2-carboxilato de etila (P6) e (6R)-3-bromo-6-fluoro-6,7- di-hidro-5H-pirazolo[5,1-b][1,3]oxazina-2-carboxilato de etila (P7)

Etapa 1. Síntese de 3-bromo-6-fluoro-6,7-di-hidro-5H-pirazolo[5,1- b][1,3]oxazina-2-carboxilato de etila (C6).

[00279] N-bromossuccinimida (7,3 g, 41 mmol) foi adicionada a uma solução de C5 (8,0 g, 37 mmol) e ácido acético (0,5 mL) em diclorometano (120 mL), e a mistura reacional foi agitada em temperatura ambiente durante 3 horas. Após remoção de solventes a vácuo, o resíduo foi purificado por meio de cromatografia de sílica-gel (Gradiente: 9% a 50% de acetato de etila em éter de petróleo) para fornecer o produto como um sólido branco. Produção: 8,5 g, 29 mmol, 78%. LCMS m/z 294,8 (padrão de isótopo de brometo observado) [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, CDCh) δ [5,37-5,31 (m) e 5,25-5,20 (m), JHF=45 Hz, 1H], 4,79-4,70 (m, 1H), 4,66-4,55 (m, 1H), 4,48-4,32 (m, 1H), 4,43 (q, J=7,2 Hz, 2H), 4,29 (br dd, J=36,8, 12,9 Hz, 1H), 1,42 (t, J=7,2 Hz, 3H).

[00280] Etapa 2. Síntese de (6S)-3-bromo-6-fluoro-6,7-di-hidro-5H- pirazolo[5,1-b][1,3]oxazina-2-carboxilato de etila (P6) e (6R)-3-bromo- 6-fluoro-6,7-di-hidro-5H-pirazolo[5,1-b][1,3]oxazina-2-carboxilato de etila (P7).

[00281] Uma mistura racêmica de P6 e P7 (1,0 g) foi separada usando cromatografia fluida supercrítica (Coluna: Phenomenex Lux Celulose-3, 5 μm; Fase móvel: 4:1 de dióxido de carbono / metanol). O enantiômero de primeira eluição foi P6; este material exibiu uma rotação negativa (-). Produção para a separação: ~500 mg, ~50%. 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ [5,36-5,32 (m) e 5,25-5,21 (m), JHF=45 Hz, 1H], 4,79-4,70 (m, 1H), 4,67-4,56 (m, 1H), 4,48-4,33 (m, 1H), 4,43 (q, J=7,1 Hz, 2H), 4,29 (br dd, J=36,9, 12,9 Hz, 1H), 1,42 (t, J=7,1 Hz, 3H). O enantiômero de segunda eluição foi P7; este material exibiu uma rotação positiva (+). Produção para a separação: ~500 mg, ~50%. 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ [5,36-5,32 (m) e 5,25-5,20 (m), JHF=45 Hz, 1H], 4,79-4,70 (m, 1H), 4,67-4,56 (m, 1H), 4,49-4,32 (m, 1H), 4,43 (q, J=7,1 Hz, 2H), 4,29 (br dd, J=36,8, 12,8 Hz, 1H), 1,42 (t, J=7,1 Hz, 3H). As configurações absolutas de P6 e P7 foram desiganadas por meio da correlação com P5 (veja Síntese alternada de P7 abaixo). Síntese alternada de (6R)-3-bromo-6-fluoro-6,7-di-hidro-5H- pirazolo[5,1-b][1,3]oxazina-2-carboxilato de etila (P7).

[00282] N-bromossuccinimida (229 mg, 1,29 mmol) foi adicionado a uma solução de P5 (250 mg, 1,17 mmol) em diclorometano (5 mL). Algumas gotas de ácido acético foram adicionadas, e a mistura reacional foi agitada durante a noite em temperatura ambiente. Foi em seguida diluída com diclorometano, lavada com solução de bicarbonato de sódio aquosa, secada sobre sulfto de magnésio, filtrada e concentrada a vácuo. Cromatografia em sílica-gel (Gradiente: 0% a 100% de acetato de etila em heptano) forneceu o produto como um sólido. Este material exibiu uma rotação positiva (+), confirmando-o como P7. Produção: 259 mg, 0,884 mmol, 76%. LCMS m/z 315,1 (padrão de isótopo de brometo observado) [M+Na+]. 1H RMN (400 MHz, CDCI3) δ [5,36-5,32 (m) e 5,25-5,20 (m), JHF=45 Hz, 1H], 4,784,68 (m, 1H), 4,65-4,54 (m, 1H), 4,48-4,32 (m, 1H), 4,41 (q, J=7,1 Hz, 2H), 4,29 (br dd, J=37,1, 12,8 Hz, 1H), 1,40 (t, J=7,1 Hz, 3H). Preparações P8 e P9 5-metil-6,7-di-hidro-5H-pirazolo[5,1-b][1,3]oxazina-2-carboxilato de etila (P8) e 7-metil-6,7-di-hidro-5H-pirazolo[5,1-b][1,3]oxazina-2- carboxilato de etila (P9)

[00283] 1,3-dibromobutano (5,8 g, 27 mmol) foi adicionado a uma suspensão de C1 (4,0 g, 26 mmol) e carbonato de sódio (14,1 g, 102 mmol) em acetonitrila (100 mL), e a mistura reacional foi aquecida em refluxo durante a noite. Após ter sido resfriada para temperatura ambiebte, ela foi filtrada, e os sólidos coletados foram lavados com acetonitrila (3 x 30 mL). Os filtrados combinados foram concentrados a vácuo para fornecer uma mistura de P8 e P9 como um óleo amarelo. Por 1H RMN, esta mistura foi de aproximadamente 2 a 3 para 1. 1H RMN (400 MHz, CDCI3), componente menor, presumiu-se ser P8: δ 6,00 (s, 1H), 4,42-4,14 (m, 5H), 2,25-2,17 (m, 1H), 2,15-2,06 (m, 1H), 1,48 (d, J=6,3 Hz, 3H), 1,39 (t, J=7,1 Hz, 3H); componente maior, presumiu-se ser P9: δ 6,00 (s, 1H), 4,49-4,22 (m, 5H), 2,37 (dddd, J=14,4, 7,4, 5,6, 3,1 Hz, 1H), 2,01 (dddd, J=14,4, 7,8, 6,6, 3,1 Hz, 1H), 1,64 (d, J=6,5 Hz, 3H), 1,38 (t, J=7,1 Hz, 3H). Esta mistura foi submetida à cromatografia de sílica-gel (Gradiente: 17% a 67% de acetato de etila em éter de petróleo) para fornecer os produtos. A regioquímica indicada foi designada na base dos estudos de RMN realizados em derivados de bromo C7 e C9 (veja abaixo). Produção de P8: 0,9 g, 4 mmol, 15 %. Rendimento de P9: 1,7 g, 8,1 mmol, 31%. Preparação P10 Ácido 3-(4-clorofenil)-5-metil-6,7-di-hidro-5H-pirazolo[5,1- b][1,3]oxazina-2-carboxílico (P10)

Etapa 1. Síntese de 3-bromo-5-metil-6,7-di-hidro-5H-pirazolo[5,1- b][1,3]oxazina-2-carboxilato de etila (C7).

[00284] Uma solução de P8 (0,84 g, 4,0 mmol) e N- bromossuccinimida (0,86 g, 4,8 mmol) em tetraclorometano (30 mL) foi agitada a 60 °C durante 3 horas, após as quais ela foi dividida entre água (30 mL) e diclorometano (50 mL). A camada orgânica foi lavada com solução de cloreto de sódio aquosa saturada (30 mL), secada sobre sulfato de sódio, filtrada e concentrada a vácuo. Cromatografia de sílica-gel (Gradiente: 9% a 50% de acetato de etila em éter de petróleo) forneceu o produto como um sólido amarelo. Produção: 0,80 g, 2,8 mmol, 70%. A posição do grupo metila foi estabelecida por meio do exame do espectro de 13C RMN de C7 em comparação com os espectros de 13C RMN e DEPT de C9. 1H RMN (400 MHz, CDCI3) δ 4,52-4,43 (m, 1H), 4,42 (q, J=7,1 Hz, 2H), 4,32 (ddd, metade do padrão de ABXY, J=12,9, 5,8, 2,9 Hz, 1H), 4,19 (ddd, metade do padrão de ABXY, J=12,8, 11,0, 5,4 Hz, 1H), 2,29-2,21 (m, 1H), 2,192,05 (m, 1H), 1,55 (d, J=6,3 Hz, 3H), 1,41 (t, J=7,1 Hz, 3H).

Etapa 2. Síntese de 3-(4-clorofenil)-5-metil-6,7-di-hidro-5H- pirazolo[5,1-b][1,3]oxazina-2-carboxilato de etila (C8).

[00285] A uma solução de C7 (332 mg, 1,15 mmol) em 1,4-dioxano (10 mL) e água (2,5 mL) foram adicionados ácido (4-clorofenil)borônico (187 mg, 1,20 mmol), carbonato de césio (560 mg, 1,72 mmol), e diclorobis(triciclo-hexilfosfina)paládio(II) (39 mg, 53 μmol). A mistura reacional foi desgaseificada por pulverização com nitrogênio e, em seguida, agitada a 110 °C durante a noite, tempo após o qual foi dividida entre água (10 mL) e acetato de etila (60 mL). A camada orgânica foi lavada com solução de cloreto de sódio aquosa saturada (20 mL), secada sobre sulfato de sódio, filtrada e concentrada a vácuo; cromatografia de sílica-gel (Gradiente: 9% a 50% de acetato de etila em éter de petróleo) forneceu o produto como um sólido amarelo. Este material foi impuro, como avaliado por análise de 1H RMN. Produção: 0,38 g, ~60% de pureza, 0,7 mmol, 60%. 1H RMN (400 MHz, CDCl3), picos característicos: δ 7,38 (br quarteto de AB, JAB=8,6 Hz, ΔαAB=33,7 Hz, 4H), 4,35 (q, J=7,1 Hz, 2H), 1,49 (d, J=6,3 Hz, 3H), 1,34 (t, J=7,2 Hz, 3H).

Etapa 3. Síntese de ácido 3-(4-clorofenil)-5-metil-6,7-di-hidro-5H- pirazolo[5,1-b][1,3]oxazina-2-carboxílico (P10).

[00286] A uma solução de C8 (a partir da etapa anterior, de aproximadamente 60% de pureza; 250 mg, 0,47 mmol) em metanol (6 mL) foi adicionado mono-hidrato de hidróxido de lítio (79 mg, 1,9 mmol), e a mistura reacional foi agitada a 60 °C durante a noite. Foi em seguida acidificada até um pH de aproximadamente 6 por meio da adição de ácido lorídrico concentrado. A remoção dos voláteis a vácuo forneceu um produto cru (350 mg), que foi usado no Exemplo 9 sem purificação adicional. LCMS m/z 292,7 (padrão de isótopo de cloro observado) [M+H]+. Preparação P11 ácido 3-(4-clorofenil)-7-metil-6,7-di-hidro-5H-pirazolo[5,1- b][1,3]oxazina-2-carboxílico (P11)

Etapa 1. Síntese de 3-bromo-7-metil-6,7-di-hidro-5H-pirazolo[5,1- b][1,3]oxazina-2-carboxilato de etila (C9).

[00287] A conversão de P9 em C9 foi realizada usando o método descrito para a síntese de C7 na Preparação P10; o produto foi isolado como um sólido amarelo. A posição do grupo metila foi estabelecida por meio do exame dos espectros de 13C RMN e DEPT de C9 em comparação com o espectro de 13C RMN de C7. Produção: 1,1 g, 3,8 mmol, 76%, 1H RMN (400 MHz, CDCI3) δ 4,51-4,40 (m, 2H), 4,42 (q, J=7,2 Hz, 2H), 4,36 (ddd, J=11,3, 7,9, 3,1 Hz, 1H), 2,40 (dddd, J=14,6, 7,4, 5,4, 3,1 Hz, 1H), 2,10-2,00 (m, 1H), 1,64 (d, J=6,4 Hz, 3H), 1,41 (t, J=7,1 Hz, 3H).

Etapa 2. Síntese de 3-(4-clorofenil)-7-metil-6,7-di-hidro-5H- pirazolo[5,1-b][1,3]oxazina-2-carboxilato de etila (C10).

[00288] A conversão de C9 no produto foi realizada usando o método descrito para a síntese de C8 na Preparação P10. O produto foi obtido como um sólido amarelo de aproximadamente 60% de pureza por meio de análise de 1H RMN. Produção: 1,2 g, ~60% de pureza, 2 mmol, 50%. 1H RMN (400 MHz, CDCl3), picos de produto característicos apenas: δ 7,36 (br quarteto de AB, JAB=8,7 Hz, ΔdAB=24,2 Hz, 4H), 4,34 (q, J=7,2 Hz, 2H), 1,68 (d, J=6,5 Hz, 3H), 1,31 (t, J=7,2 Hz, 3H).

Etapa 3. Síntese de ácido 3-(4-clorofenil)-7-metil-6,7-di-hidro-5H- pirazolo[5,1-b][1,3]oxazina-2-carboxílico (P11).

[00289] A uma solução de C10 (a partir da etapa anterior, de aproximadamente 60% de pureza; 320 mg, 0,6 mmol) em metanol (6 mL) foi adicionado mono-hidrato de hidróxido de lítio (126 mg, 3,00 mmol), e a mistura reacional foi agitada a 60 °C durante a noite. Foi em seguida acidificada até um pH de aproximadamente 6 por meio da adição de ácido hidroclórico concentrado. A remoção dos voláteis a vácuo forneceu um produto cru (500 mg), que foi usado no Exemplo 10 sem purificação adicional. LCMS m/z 292,8 (padrão de isótopo de cloro observado) [M+H]+. Preparação P12 3-bromo-N-ciclopropil-6,6-difluoro-6,7-di-hidro-5H-pirazolo[5,1- b][1,3]oxazina-2-carboxamida (P12)

Etapa 1. Síntese de bis(4-metilbenzenossulfonato) de 2- hidroxipropano-1,3-di-ila (C11).

[00290] Cloreto de p-toluenossulfonila (747 g, 3,92 mol) foi adicionado em porções a uma solução a 0 °C de propano-1,2,3-triol (180 g, 1,95 mol) e 4-(dimetilamino)piridina (24 g, 0,20 mol) em piridina (400 mL) e diclorometano (1,5 L). Após a mistura reacional ter sido agitada em temperatura ambiente durante a noite, ela foi tratada com água gelada, e o pH foi ajustado para 3 por meio da adição de ácido hidroclórico concentrado. A mistura foi extraída com diclorometano (3 x 1 L), e as camadas orgânicas combinadas foram secadas, filtradas e concentradas a vácuo. Cromatografia de sílica-gel (Gradiente: 9% a 33% de acetato de etila em éter de petróleo) forneceu o produto como um óleo incolor, que foi impuro por análise de 1H RMN. Produção: 280 g, <699 mmol, <36%. 1H RMN (400 MHz, CDCl3), picos de produto apenas: δ 7,77 (d, J=8,3 Hz, 4H), 7,36 (d, J=8,0 Hz, 4H), 4,10-4,01 (m, 5H), 2,47 (s, 6H).

Etapa 2. Síntese de bis(4-metilbenzenossulfonato) de 2-oxopropano- 1,3-di-ila (C12).

[00291] Dess-Martin periodinano [1,1,1-tris(acetilóxi)-1,1-di-hidro- 1,2-benziodoxol-3-(1H)-ona] (9,50 g, 22,4 mmol) foi adicionado a uma solução de C11 (3,0 g, 7,5 mmol) em diclorometano (100 mL), e a mistura reacional foi agitada em temperatura ambiente durante a noite. A solução de bicarbonato de sódio aquosa saturada e a solução de tiossulfato de sódio aquosa saturada foram adicionadas, e a mistura resultante foi extraída com diclorometano. As camadas orgânicas combinadas foram secadas, filtradas e concentradas a vácuo; cromatografia de sílica-gel (Gradiente: 9% a 50% de acetato de etila em éter de petróleo) forneceu o produto como um sólido branco. Produção: 2,0 g, 5,0 mmol, 67%. 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 7,81 (d, J=8,3 Hz, 4H), 7,39 (d, J=8,1 Hz, 4H), 4,71 (s, 4H), 2,48 (s 6H).

Etapa 3. Síntese de bis(4-metilbenzenossulfonato) de 2,2- difluoropropano-1,3-di-ila (C13).

[00292] Uma solução de C12 (1,2 g, 3,0 mmol) em diclorometano (30 mL) foi lentamente adicionada ao trifluoreto de (dietilamino)enxofre (2,4 g, 15 mmol) a 0 °C. A mistura reacional foi agitada a 40 °C durante 6 horas, após as quais ela foi lentamente tratada com solução de bicarbonato de sódio aquosa saturada. A mistura resultante foi extraída com diclorometano, e a camada orgânica foi secada, filtrada e concentrada a vácuo. O resíduo foi purificado por meio de cromatografia de sílica-gel (Gradiente: 9% a 50% de acetato de etila em éter de petróleo), fornecendo o produto como um sólido amarelo claro. Produção: 550 mg, 1,3 mmol, 43%. LCMS m/z 442,9 [M+Na+]. 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 7,78 (br d, J=8,3 Hz, 4H), 7,39 (br d, J=8,0 Hz, 4H), 4,18 (t, JHF=11,4 Hz, 4H), 2,48 (s, 6H).

Etapa 4. Síntese de 6,6-difluoro-6,7-di-hidro-5H-pirazolo[5,1- b][1,3]oxazina-2-carboxilato de etila (C14).

[00293] Uma mistura de C13 (460 mg, 1,1 mmol), C1 (600 mg, 3,8 mmol), carbonato de césio (1,1 g, 3,4 mmol), e iodeto de sódio (140 mg, 0,93 mmol) em N,N-dimetilformamida (13 mL) foi aquecida para 100 °C durante 3 horas. A mistura reacional foi em seguida diluída com água (30 mL) e extraída com acetato de etila (3 x 15 mL). As camadas orgânicas combinadas foram concentradas sob pressão reduzida e purificadas por meio de cromatografia de sílica-gel (Gradiente: 0% a 50% de acetato de etila em éter de petróleo); o produto foi isolado como um sólido branco. Produção: 220 mg, 0,95 mmol, 86%. 1H RMN (400 MHz, CDCh) δ 6,15 (s, 1H), 4,59 (br t, JHF=12,4 Hz, 2H), 4,40 (q, J=7,2 Hz, 2H), 4,36 (br t, JHF=10,4 Hz, 2H), 1,40 (t, J=7,2 Hz, 3H).

Etapa 5. Síntese de 3-bromo-6,6-difluoro-6,7-di-hidro-5H-pirazolo[5,1- b][1,3]oxazina-2-carboxilato de etila (C15).

[00294] Uma mistura de C14 (200 mg, 0,86 mmol) e N- bromossuccinimida (178 mg, 1,00 mmol) em diclorometano (30 mL) foi agitada em temperatura ambiente durante 16 horas. A mistura reacional foi em seguida diluída com diclorometano (50 mL), lavada com solução de cloreto de sódio aquosa saturada, secada sobre sulfato de sódio, filtrada e concentrada a vácuo para fornecer o produto como um sólido amarelo. Produção: 230 mg, 0,74 mmol, 86%. Etapa 6. Síntese de 3-bromo-N-ciclopropil-6,6-difluoro-6,7-di-hidro-5H- pirazolo[5,1-b][1,3]oxazina-2-carboxamida (P12).

[00295] Uma mistura de C15 (290 mg, 0,93 mmol), ciclopropanamina (2 mL), e cloreto de cálcio (100 mg, 0,90 mmol) em metanol (20 mL) foi aquecida para 50 °C durante 3 horas. A mistura reacional foi em seguida concentrada sob pressão resuzida; o resíduo foi diluído com diclorometano (80 mL), lavado sequencialmente com água (15 mL) e solução de cloreto de sódio aquosa saturada, secado sobre sulfato de sódio, filtrado e concentrado a vácuo para fornecer o produto como um sólido amarelo. Produção: 250 mg, 0,78 mmol, 84%. 1H RMN (400 MHz, CDCh) δ 4,50 (t, JHF=11,9 Hz, 2H), 4,43 (t, JHF=10,4 Hz, 2H), 2,90-2,81 (m, 1H), 0,89-0,80 (m, 2H), 0,66-0,58 (m, 2H). Exemplo 1 Azetidin-1-il[3-(4-cloro-2-metilfenil)-6,7-di-hidro-5H-pirazolo[5,1- b][1,3]oxazin-2-il]metanona (1)

[00296] A uma solução de P2 (100 mg, 0,35 mmol) em 1,4-dioxano (20 mL) e água (0,5 mL) foram adicionados ácido (4-cloro-2- metilfenil)borônico (71 mg, 0,42 mmol), bis[di-terc-butil(4- dimetilaminofenil)fosfina]dicloropaládio(II) [Pd(Anfos)2Cl2;13 mg, 18 μmol] e fluoreto de césio (161 mg, 1,06 mmol), e a mistura reacional foi agitada a 100 °C durante 15 horas. Foi em seguida filtrada, e o filtrado foi concentrado a vácuo; o resíduo foi purificado por HPLC de fase reversa (Coluna: Phenomenex Gemini C18, 8 μm; Fase móvel A: amônia aquosa, pH 10; Fase móvel B: acetonitrila; Gradiente: 38% a 58% B) para fornecer o produto como um sólido branco. Produção: 13,3 mg, 40 μmol, 11%. LCMS m/z 354,1 (padrão de isótopo de cloro observado) [M+Na+]. 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 7,22 (br s, 1H), 7,18-7,13 (m, 2H), 4,34-4,28 (m, 2H), 4,28-4,17 (m, 4H), 4,11-4,04 (m, 2H), 2,37-2,28 (m, 2H), 2,27-2,17 (m, 2H), 2,20 (s, 3H). Exemplo 2 3-(4-cloro-2-metilfenil)-N-ciclopropil-6,7-di-hidro-5H-pirazolo[5,1- b][1,3]oxazina-2-carboxamida (2)

[00297] Um frasconete contendo tolueno (25 mL) foi evacuado e carregado com nitrogênio. A adição de P3 (250 mg, 0,874 mmol) e ácido (4-cloro-2-metilfenil)borônico (298 mg, 1,75 mmol) foi realizada usando o mesmo procedimento de desgaseificação após cada adição. Uma solução de fluoreto de césio (664 mg, 4,37 mmol) em água (4,4 mL) foi adicionada, seguida por uma solução de bis[di-terc-butil(4- dimetilaminofenil)fosfina]dicloropaládio(II) (77,2 mg, 0,109 mmol) em 1,2-dicloroetano (2,2 mL), e a mistura reacional foi aquecida para 100°C durante 16 horas. Foi em seguida concentrada a vácuo e submetida à cromatografia em sílica-gel (Eluente: acetato de etila), seguida por HPLC de fase reversa (Coluna: Phenomenex Luna C18(2), 5 μm; Fase móvel A: 0,1% de ácido fórmico em água; Fase móvel B: 0,1% de ácido fórmico em metanol; Gradiente: 30% a 80% B). O produto foi isolado como um sólido. Produção: 67,5 mg, 0,203 mmol, 23%. LCMS m/z 332,1 (padrão de isótopo de cloro observado) [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, CDCh) δ 7,20 (br s, 1H), 7,15 (quarteto de AB, dupleto campo acima é ampliado, JAB=8,2 Hz, Δα AB=10,7 Hz, 2H), 6,79 (br s, 1H), 4,27 (dd, J=5,1, 5,1 Hz, 2H), 4,20 (t, J=6,2 Hz, 2H), 2,79-2,70 (m, 1H), 2,33-2,24 (m, 2H), 2,17 (s, 3H), 0,78-0,71 (m, 2H), 0,56-0,49 (m, 2H). Exemplo 3 Azetidin-1-il[3-(4-cloro-2,5-difluorofenil)-6,7-di-hidro-5H-pirazolo[5,1- b][1,3]oxazin-2-il]metanona (3)

Etapa 1. Síntese de 2-(4-cloro-2,5-difluorofenil)-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2- dioxaborolano (C16).

[00298] Uma mistura de 1-bromo-4-cloro-2,5-difluorobenzeno (9,00 g, 39,6 mmol), 4,4,4',4',5,5,5',5'-octametil-2,2'-bi-1,3,2-dioxaborolano (15,1 g, 59,5 mmol), e acetato de potássio (7,8 g, 80 mmol) em 1,4- dioxano (80 mL) foi desgaseificada por meio de pulverização com nitrogênio durante 2 minutos. [1,1’- bis(difenilfosfino)ferroceno]dicloropaládio(II) (1,5 g, 2,0 mmol) foi em seguida adicionado, e a mistura reacional foi agitada a 100 °C durante 18 horas. Foi em seguida filtrada; o filtrado foi concentrado a vácuo e submetido à cromatografia de sílica-gel (Gradiente: 0% a 10% de acetato de etila em éter de petróleo), fornecendo o produto como um sólido amarelo. Produção: 6,1 g, 2,2 mmol, 56%. 1H RMN (400 MHz, CDCI3) δ 7,48 (dd, J=8,8, 4,9 Hz, 1H), 7,12 (dd, J=8,0, 5,6 Hz, 1H), 1,36 (s, 12H).

Etapa 2. Síntese de azetidin-1-il[3-(4-cloro-2,5-difluorofenil)-6,7-di- hidro-5H-pirazolo[5,1-b][1,3]oxazin-2-il]metanona (3).

[00299] Uma mistura de P2 (1,8 g, 6,3 mmol), C16 (4,32 g, 15,7 mmol), e carbonato de césio (4,10 g, 12,6 mmol) em 1,4-dioxano (20 mL) foi desgaseificada por meio de pulverização com nitrogênio durante 2 minutos. [1,1’-bis(difenilfosfino)ferroceno]dicloropaládio(II) (460 mg, 0,63 mmol) foi em seguida adicionado, e a mistura reacional foi agitada a 100 °C durante 18 horas. Após água (60 mL) e diclorometano (60 mL) terem sido adicionados, a mistura foi filtrada, e o filtrado foi extraído com diclorometano (3 x 40 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com solução de cloreto de sódio aquosa saturada, secadas sobre sulfato de sódio, filtradas e concentradas a vácuo; HPLC de fase reversa (Coluna: Phenomenex Gemini, 10 μm; Fase móvel A: 0,05% de ácido hidroclórico aquoso; Fase móvel B: acetonitrila; Gradiente: 30% a 70% B) forneceu o produto como um sólido amarelo claro. Produção: 700 mg, 2,0 mmol, 32%. LCMS m/z 354,1 (padrão de isótopo de cloro observado) [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, CDCh) δ 7,26 (dd, J=9,4, 6,4 Hz, 1H), 7,13 (dd, J=8,8, 6,3 Hz, 1H), 4,41 (br dd, J=7,8, 7,5 Hz, 2H), 4,36 (dd, J=5,3, 5,3 Hz, 2H), 4,22 (t, J=6,3 Hz, 2H), 4,14 (br dd, J=7,8, 7,8 Hz, 2H), 2,382,25 (m, 4H). Exemplo 4 Azetidin-1-il[3-(4-cloro-2,3-difluorofenil)-6,7-di-hidro-5H-pirazolo[5,1- b][1,3]oxazin-2-il]metanona (4)

Etapa 1. Síntese de 3-(4-cloro-2,3-difluorofenil)-6,7-di-hidro-5H- pirazolo[5,1-b][1,3]oxazina-2-carboxilato de etila (C18).

[00300] A uma solução de 2-(4-cloro-2,3-difluorofenil)-4,4,5,5- tetrametil-1,3,2-dioxaborolano (C17; este material foi preparado usando o método descrito para a síntese de C16 no Exemplo 3, exceto que ele foi usado usado de modo cru e em excesso) em 1,4-dioxano (8 mL) e água (2 mL) foram adicionados P1 (150 mg, 0,545 mmol), diclorobis(triciclo-hexilfosfina)paládio(II) (20 mg, 27 μmol), e carbonato de césio (355 mg, 1,09 mmol). A mistura reacional foi agitada a 100 °C durante a noite, tempo após o qual foi concentrada a vácuo e purificada por meio de cromatografia de sílica-gel, fornecendo o produto como um sólido amarelo. Produção: 24,1 mg, 70,3 μmol, 13%. LCMS m/z 342,9 (padrão de isótopo de cloro observado) [M+H]+.

Etapa 2. Síntese de azetidin-1-il[3-(4-cloro-2,3-difluorofenil)-6,7-di- hidro-5H-pirazolo[5,1-b][1,3]oxazin-2-il]metanona (4).

[00301] Cloreto de azetadina (37,6 mg, 0,402 mmol), N,N-di- isopropiletilamina, e cloreto de cálcio (22,2 mg, 0,200 mmol) foram adicionados a uma solução de C18 (35 mg, 0,10 mmol) em metanol (10 mL), e a mistura reacional foi agitada a 50 °C durante a noite. Após remoção do solvente a vácuo, o resíduo foi purificado usando HPLC de fase reversa (Coluna: Phenomenex Synergi C18, 4 μm; Fase móvel A: 0,225% de ácido fórmico em água; Fase móvel B: metanol; Gradiente: 40% a 60% B) para fornecer o produto como um sólido branco. Produção: 11,2 mg, 31,6 μmol, 32%. LCMS m/z 354,2 (padrão de isótopo de cloro observado) [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, CDCI3) δ 7,21-7,10 (m, 2H), 4,46-4,37 (m, 2H), 4,36 (dd, J=5,4, 4,9 Hz, 2H), 4,23 (t, J=6,2 Hz, 2H), 4,18-4,10 (m, 2H), 2,39-2,25 (m, 4H). Exemplo 5 3-(4-ciano-5-fluoro-2-metilfenil)-N-ciclopropil-6,7-di-hidro-5H- pirazolo[5,1-b][1,3]oxazina-2-carboxamida (5) Etapa 1. Síntese de 2-fluoro-5-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2- dioxaborolan-2-il)benzonitrila (C19).

[00302] 4-bromo-2-fluoro-5-metilbenzonitrila (600 mg, 2,8 mmol) foi convertido no produto usando o método descrito para a síntese de C16 no Exemplo 3. Neste caso, cromatografia de sílica-gel foi realizada usando um gradiente de 0% a 30% de acetato de etila em éter de petróleo; o produto foi obtido como um sólido branco. Produção: 500 mg, 1,9 mmol, 68%. 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 7,56 (d, J=9,4 Hz, 1H), 7,38 (d, J=5,9 Hz, 1H), 2,51 (s, 3H), 1,36 (s, 12H). Etapa 2. Síntese de 3-(4-ciano-5-fluoro-2-metilfenil)-N-ciclopropil-6,7- di-hidro-5H-pirazolo[5,1-b][1,3]oxazina-2-carboxamida (5).

[00303] [1,1’-bis(difenilfosfino)ferroceno]dicloropaládio(II) (96 mg, 0,13 mmol) foi adicionado a uma mistura de P3 (750 mg, 2,62 mmol), C19 (1,03 g, 3,94 mmol), e carbonato de césio (723 mg, 2,22 mmol) em 1,4-dioxano (20 mL) e água (2 mL). Após a reação ter sido agitada a 100 °C durante 16 horas, ela foi concentrada a vácuo, dissolvida em acetato de etila (10 mL) e lavada com água (5 mL). A camada orgânica foi secada sobre sulfato de sódio, filtrada e concentrada sob pressão resuzida; cromatografia de sílica-gel (Gradiente: 20% a 40% de acetato de etila em éter de petróleo) forneceu o produto como um sólido branco. Produção: 381,4 mg, 1,120 mmol, 43%. LCMS m/z 340,9 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, CDCI3) δ 7,43 (d, J=6,5 Hz, 1H), 7,11 (d, J=9,7 Hz, 1H), 6,90 (br s, 1H), 4,34 (dd, J=5,3, 5,1 Hz, 2H), 4,22 (dd, J=6,3, 6,2 Hz, 2H), 2,79-2,72 (m, 1H), 2,39-2,30 (m, 2H), 2,18 (s, 3H), 0,82-0,75 (m, 2H), 0,61-0,54 (m, 2H). Exemplo 6 (6S)-3-(4-cloro-2-metilfenil)-N-ciclopropil-6-fluoro-6,7-di-hidro-5H- pirazolo[5,1-b][1,3]oxazina-2-carboxamida (6)

Etapa 1. Síntese de (6S)-3-(4-cloro-2-metilfenil)-6-fluoro-6,7-di-hidro- 5H-pirazolo[5,1-b][1,3]oxazina-2-carboxilato de etila (C20).

[00304] A uma mistura desgaseificada de 1,4-dioxano (5 mL) e água (0,5 mL) foram adicionados P6 (2,50 g, 8.53 mmol), ácido (4- cloro-2-metilfenil)borônico (1,60 g, 9,39 mmol), carbonato de césio (5,56 g, 17,1 mmol), e [1,1‘-bis(di-terc- butilfosfino)ferroceno]dicloropaládio(II) (278 mg, 0,426 mmol). O vaso de reação foi evacuado e carregado com nitrogênio. O ciclo de evacuação foi repetido duas vezes, e em seguida a reação foi deixada processar em temperatura ambiente durante 3 horas. O solvente foi removido a vácuo, e o resíduo foi cromatografado em sílica-gel (Eluente: 1:1 acetato de etila / heptano) para fornecer o produto. Produção: 2,1 g, 6,2 mmol, 73%. LCMS m/z 339,4 (padrão de isótopo de cloro observado) [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, CDCl3), picos característicos: δ 7,24 (br s, 1H), 7,17 (br dd, metade do padrão de ABX, J=8,2, 2,0 Hz, 1H), 7,13 (br d, metade do quarteto de AB, J=8,2 Hz, 1H), [5,34-5,29 (m) e 5,23-5,18 (m), JHF=45 Hz, 1H], 4,30-4,13 (m, 3H), 2,16 (s, 3H), 1,23 (t, J=7,1 Hz, 3H).

Etapa 2. Síntese de ácido (6S)-3-(4-cloro-2-metilfenil)-6-fluoro-6,7-di- hidro-5H-pirazolo[5,1-b][1,3]oxazina-2-carboxílico (C21).

[00305] Hidróxido de potássio (13 mmol) foi adicionado a uma solução de C20 (2,2 g, 6,5 mmol) em metanol (10 mL), e a mistura reacional foi agitada durante a noite em temperatura ambiente. Ela foi em seguida resfriada em um banho de gelo, acidificada até um pH de 4 a 5 por meio da adição de solução de cloreto de hidrogênio, e concentrada a vácuo. Este material foi usado sem outra purificação na etapa seguinte. LCMS m/z 311,3 (padrão de isótopo de cloro observado) [M+H]+.

Etapa 3. Síntese de (6S)-3-(4-cloro-2-metilfenil)-N-ciclopropil-6-fluoro- 6,7-di-hidro-5H-pirazolo[5,1-b][1,3]oxazina-2-carboxamida (6).

[00306] Uma solução de C21 (a partir da etapa anterior, <6,5 mmol) e ciclopropanamina (600 mg, 10,5 mmol) em diclorometano (50 mL) foi tratada com N,N-di-isopropiletilamina (2,49 mL, 14,3 mmol). 2,4,6- tripropil-1,3,5,2,4,6-trioxatrifosfinano 2,4,6-trióxido (4,55 g, 14,3 mmol, como uma solução a 50% em acetato de etila) foi em seguida adicionado, e a mistura reacional foi agitada em temperatura ambiente durante a noite. Foi em seguida lavada sequencialmente com solução de bicarbonato de sódio aquosa saturada (10 mL) e solução de cloreto de sódio aquosa saturada (10 mL), secada, filtrada e concentrada a vácuo. Uma porção do material resultante foi submetida à cromatografia fluida supercrítica (Coluna: Princeton 4-etilpiridina, 5 μm; Fase móvel: 4:1 de dióxido de carbono / etanol), fornecendo o produto como um sólido branco (0,89 g). Este material foi cristalino por meio de difração de raio X em pó. O resíduo foi recristalizado de metanol para fornecer produto adicional (0,97 g). Produto combinado durante 2 etapas: 1,86 g, 5,32 mmol, 82%. LCMS m/z 350,4 (padrão de isótopo de cloro observado) [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, CDCh) δ 7,24 (br s, 1H), 7,21 (d, metade do quarteto de AB, J=8,2 Hz, 1H), 7,17 (br dd, metade do padrão de ABX, J=8,2, 1,4 Hz, 1H), 6,75 (br s, 1H), [5,345,29 (m) e 5,23-5,18 (m), JHF=45 Hz, 1H], 4,65-4,49 (m, 2H), 4,40 (ddd, metade do padrão de ABXY, J=36,7, 14,2, 3,3 Hz, 1H), 4,21 (dd, J=36,9, 12,7 Hz, 1H), 2,81-2,72 (m, 1H), 2,19 (s, 3H), 0,80-0,73 (m, 2H), 0,57-0,50 (m, 2H). Exemplo 7 (6S)-3-(4-cloro-2,5-difluorofenil)-N-ciclopropil-6-fluoro-6,7-di-hidro-5H- pirazolo[5,1-b][1,3]oxazina-2-carboxamida (7)

Etapa 1. Síntese de (6S)-3-bromo-N-ciclopropil-6-fluoro-6,7-di-hidro- 5H-pirazolo[5,1-b][1,3]oxazina-2-carboxamida (C22).

[00307] Trimetilalumínio (solução a 2 M em tolueno; 8 mL, 16 mmol) foi adicionado a uma solução de P6 (2,5 g, 8,5 mmol) e ciclopropanamina (8 mL) em tolueno (50 mL), e a mistura reacional foi aquecida a 80 °C durante 2 horas. Água (200 mL) foi adicionada, e a mistura resultante foi extraída com acetato de etila (3 x 100 mL); as camadas orgânicas combinadas foram secadas e filtradas. Após o filtrado ter sido tratado com sílica-gel, foi filtrado e o filtrado foi concentrado a vácuo, fornecendo o produto como um sólido amarelo. Produção: 2,30 g, 7,56 mmol, 89%. 1H RMN (400 MHz, CDCI3) δ 6,81 (br s, 1H), [5,36-5,30 (m) e 5,25-5,18 (m), JHF=45,2 Hz, 1H], 4,77-4,67 (m, 1H), 4,53-4,42 (m, 1H), 4,42-4,21 (m, 2H), 2,88-2,80 (m, 1H), 0,860,79 (m, 2H), 0,64-0,58 (m, 2H).

Etapa 2. Síntese de (6S)-3-(4-cloro-2,5-difluorofenil)-N-ciclopropil-6- fluoro-6,7-di-hidro-5H-pirazolo[5,1-b][1,3]oxazina-2-carboxamida (7).

[00308] Uma mistura de C22 (600 mg, 1,97 mmol), C16 (850 mg, 3,10 mmol), e carbonato de césio (1,3 g, 4,0 mmol) em 1,4-dioxano (15 mL) e água (1,5 mL) foi desgaseificada por meio de pulverização com nitrogênio durante 2 minutos, após [1,1‘-bis(di-terc- butilfosfino)ferroceno]dicloropaládio(II) (30 mg, 46 μmol) ser adicionado. Após a mistura reacional ter sido aquecida a 100 °C durante 3 horas, ela foi filtrada e concentrada a vácuo. Purificação usando HPLC de fase reversa (Coluna: YMC-Triart C18, 5 μm; Fase móvel A: 0,225% de ácido fórmico em água; Fase móvel B: acetonitrila; Gradiente: 42% a 62% B) forneceu o produto como um sólido amarelo. Produção: 257 mg, 0,691 mmol, 35 %. LCMS m/z 371,9 (padrão de isótopo de cloro observado) [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 7,28 (dd, J=9,0, 6,5 Hz, 1H, assumido; parcialmente obscurecido por pico de solvente), 7,15 (dd, J=8,6, 6,4 Hz, 1H), 6,87 (br s, 1H), [5,37-5,29 (m) e 5,25-5,18 (m), JHF=44,9 Hz, 1H], 4,69-4,59 (m, 1H), 4,51 (br dd, J=16,5, 15 Hz, 1H), 4,37 (ddd, metade do padrão de ABXY, J=36,5, 14,6, 3,0 Hz, 1H), 4,25 (dd, J=36,9, 12,8 Hz, 1H), 2,83-2,74 (m, 1H), 0,84-0,76 (m, 2H), 0,63-0,56 (m, 2H). Exemplo 8 3-(4-cloro-2-metilfenil)-N-ciclopropil-6,6-difluoro-6,7-di-hidro-5H- pirazolo[5,1-b][1,3]oxazina-2-carboxamida (8)

[00309] Uma mistura de P12 (50 mg, 0,16 mmol), ácido (4-cloro-2- metilfenil)borônico (40 mg, 0,23 mmol), e fluoreto de césio (73 mg, 0,48 mmol) em 1,4-dioxano (3 mL) e água (0,3 mL) foi desgaseificada por meio de pulverização com nitrogênio durante 2 minutos. Bis[di- terc- butil(4-dimetilaminofenil)fosfina]dicloropaládio(II) (10 mg, 14 μmol) foi adicionado, e a mistura reacional foi aquecida a 100 °C durante 16 horas. Foi em seguida filtrada, e o filtrado foi concentrado a vácuo; HPLC de fase reversa (Coluna: DIKMA Diamonsil(2) C18, 5 μm; Fase móvel A: 0,225 % de ácido fórmico em água; Fase móvel B: acetonitrila; Gradiente: 40% a 60% B) forneceu o produto como um sólido branco. Produção: 8 mg, 20 μmol, 12%. LCMS m/z 368,0 (padrão de isótopo de cloro observado) [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, CDCI3) δ 7,24 (br s, 1H), 7,18 (br s, 2H), 6,74 (br s, 1H), 4,57 (t, JHF=12,0 Hz, 2H), 4,34 (t, JHF=10,4 Hz, 2H), 2,81-2,72 (m, 1H), 2,17 (s, 3H), 0,81-0,74 (m, 2H), 0,58-0,51 (m, 2H). Exemplo 9 3-(4-clorofenil)-N-ciclopropil-5-metil-6,7-di-hidro-5H-pirazolo[5,1- b][1,3]oxazina-2-carboxamida (9)

[00310] A uma solução de P10 (da Preparação P10, etapa 3; 350 mg, <0,47 mmol) em N,N-dimetilformamida (5 mL) foram adicionados hexafluorofosfato O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N’,N’-tetrametilurônio (HATU; 757 mg, 2,0 mmol) e N,N-di-isopropiletilamina (2 mL). A mistura reacional foi agitada em temperatura ambiente durante 20 minutos, após os quais ela foi tratada com ciclopropanamina (126 mg, 2,2 mmol), e a agitação foi continuada em temperatura ambiente durante a noite. A mistura reacional foi dividida entre água (20 mL) e acetato de etila (60 mL), e a camada orgânica foi lavada com solução de cloreto de sódio aquosa saturada (10 mL), secada sobre sulfato de sódio, filtrada e concentrada a vácuo. O resíduo foi purificado usando HPLC de fase reversa (Coluna: Boston Symmetrix C18 ODS-H, 5 μm; Fase móvel A: 0,225% de ácido fórmico em água; Fase móvel B: acetonitrila; Gradiente: 40% a 60% B), fornecendo o produto como um sólido branco. Produção: 52 mg, 0,16 mmol, 34%. LCMS m/z 331,8 (padrão de isótopo de cloro observado) [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, CDCh) δ 7,57 (br d, J=8,3 Hz, 2H), 7,31 (br d, J=8,5 Hz, 2H), 6,90 (br s, 1H), 4,47-4,35 (m, 1H), 4,29-4,09 (m, 2H), 2,86-2,75 (m, 1H), 2,302,20 (m, 1H), 2,20-2,06 (m, 1H), 1,49 (d, J=6,0 Hz, 3H), 0,85-0,76 (m, 2H), 0,63-0,55 (m, 2H). Exemplo 10 3-(4-clorofenil)-N-ciclopropil-7-metil-6,7-di-hidro-5H-pirazolo[5,1- b][1,3]oxazina-2-carboxamida (10)

[00311] Conversão de P11 no produto foi realizada usando o método descrito para a síntese de 9 no Exemplo 9. Neste caso, o produto foi purificado por meio de HPLC de fase reversa (Coluna: Phenomenex Synergi C18, 4 μm; Fase móvel A: 0,225% de ácido fórmico em água; Fase móvel B: acetonitrila; Gradiente: 45% a 65% B), e foi isolado como um sólido branco. Produção: 68 mg, 0,20 mmol, 33%. LCMS m/z 331,9 (padrão de isótopo de cloro observado) [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, CDCh) δ 7,56 (d, J=8,5 Hz, 2H), 7,31 (d, J=8,3 Hz, 2H), 7,00 (br s, 1H), 4,46-4,33 (m, 2H), 4,33-4,25 (m, 1H), 2,85-2,76 (m, 1H), 2,45-2,34 (m, 1H), 2,11-2,01 (m, 1H), 1,64 (d, J=6,3 Hz, 3H), 0,84-0,77 (m, 2H), 0,65-0,58 (m, 2H). Exemplo 11 3-(4-ciano-3-fluorofenil)-N-ciclopropil-6,7-di-hidro-5H-pirazolo[5,1- b][1,3]oxazina-2-carboxamida (11)

Etapa 1. Síntese de 3-(4-ciano-3-fluorofenil)-6,7-di-hidro-5H- pirazolo[5,1-b][1,3]oxazina-2-carboxilato de etila (C23).

[00312] Uma mistura de P1 (200 mg, 0,73 mmol), ácido (4-ciano-3- fluorofenil)borônico (160 mg, 0,97 mmol), e carbonato de césio (400 mg, 1,23 mmol) em 1,4-dioxano (10 mL) e água (1 mL) foi desgaseificada por meio de pulverização com nitrogênio durante 2 minutos. Diclorobis(triciclo-hexilfosfina)paládio(II) (10 mg, 14 μmol) foi adicionado, e a mistura reacional foi agitada a 100 °C durante 16 horas. Foi em seguida diluída com água (50 mL), e a mistura resultante foi extraída com acetato de etila (3 x 100 mL); as camadas orgânicas combinadas foram lavadas com solução de cloreto de sódio aquosa saturada, secadas sobre sulfato de sódio, filtradas e concentradas a vácuo. Cromatografia de camada fina preparativa forneceu o produto como um óleo amarelo. Produção: 200 mg, 0,63 mmol, 86%.

Etapa 2. Síntese de 3-(4-ciano-3-fluorofenil)-N-ciclopropil-6,7-di-hidro- 5H-pirazolo[5,1-b][1,3]oxazina-2-carboxamida (11).

[00313] Uma mistura de C23 (150 mg, 0,476 mmol), cloreto de cálcio (50 mg, 0,45 mmol), e ciclopropanamina (0,5 mL) em metanol (2 mL) foi agitada a 50 °C durante 2 horas, após os quais a mistura reacional foi filtrada. O filtrado foi concentrado sob pressão reduzida e submetido à HPLC de fase reversa (Coluna: Phenomenex Gemini C18, 8 μm; Fase móvel A: amônia aquosa, pH 10; Fase móvel B: acetonitrila; Gradiente: 36% a 56% B), fornecendo o produto como um sólido branco. Produção: 47,4 mg, 0,145 mmol, 30%. LCMS m/z 327,1 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, CDCh) δ 7,68-7,60 (m, 2H), 7,55 (dd, J=7,8, 7,0 Hz, 1H), 6,99 (br s, 1H), 4,41 (dd, J=5,3, 5,0 Hz, 2H), 4,21 (t, J=6,3 Hz, 2H), 2,86-2,79 (m, 1H), 2,40-2,33 (m, 2H), 0,87-0,81 (m, 2H), 0,65-0,59 (m, 2H). Método A

[00314] Síntese de duas etapas de 3-substituída-N-substituída-6,7- di-hidro-5H-pirazolo[5,1-b][1,3]oxazina-2-carboxamidas de P1

[00315] Uma mistura de P1 (55 mg, 200 μmol), cloreto de cálcio (22 mg, 200 μmol), e a amina necessária R2R3NH (800 μmol) em metanol (2 mL) foi agitada em um frasconete tampado a 65 °C durante 16 horas, após os quais o solvente foi removido usando um concentrador Speedvac®. O resíduo foi diluído com água (1 mL) e extraído com acetato de etila (3 x 2 mL); as camadas orgânicas combinadas foram secadas sobre sulfato de sódio, filtradas e concentradas usando um concentrador Speedvac® para fornecer intermediário cru 3-bromo-N- - 6,7-di-hidro-5H-pirazolo[5,1-b][1,3]oxazina-2-carboxamida substituída C24. Uma solução deste C24 no 1,4-dioxano (solução a 0,1 M, 1,0 mL, 100 μmol) foi misturada com o reagente de éster borônico ou ácido borônico necessário (150 μmol), seguida por adição de solução de carbonato de césio aquosa (1 M, 200 μL, 200 μmol) e [1,1‘-bis(di-terc- butilfosfino)ferroceno]dicloropaládio(II) (1,3 mg, 2 μmol), e o frasconete de reação foi tampado e agitado a 100 °C durante 16 horas. Após a mistura reacional ter sido concentrada até secura usando um concentrado Speedvac®, ela foi submetida à HPLC de fase reversa usando um dos seguintes sistemas para fornecer o produto: 1) Coluna: DIKMA Diamonsil(2) C18, 5 μm; Fase móvel A: 0,225% de ácido fórmico em água; Fase móvel B: acetonitrila; Gradiente: 25% a 60% B. 2) Coluna: Phenomenex Gemini C18, 8 μm; Fase móvel A: amônia aquosa, pH 10; Fase móvel B: acetonitrila; Gradiente: 30% a 70% B. Tabela 6. Método de preparação, estrutura e propriedades fisicoquímicas para os exemplos 12 a 19.

[00316] 1. O ácido 6,7-di-hidro-5H-pirazolo[5,1-b][1,3]oxazina-2- carboxílico necessário foi sintetizado de P1 usando a química descrita na Preparação P10.

[00317] 2. O reagente de boronato foi sintetizado do brometo de arila apropriado, usando o método descrito no Exemplo 3. Tabela 7. Método de Preparação, estrutura e dados de espectrometria de massa para os exemplos 20 a 58.

[00318] 1 . O ácido 6,7-di-hidro-5H-pirazolo[5,1-b][1,3]oxazina-2- carboxílico necessário foi sintetizado de P1 usando a química descrita na Preparação P10.

[00319] 2. Neste caso, o 4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolano foi usado, em vez do ácido borônico.

[00320] 3. O reagente de boronato foi sintetizado do brometo de arila apropriado, usando o método descrito no Exemplo 3.

[00321] 4. O Intermediário C6 foi convertido no 3-bromo-N- ciclopropil-6-fluoro-6,7-di-hidro-5H-pirazolo[5,1-b][1,3]oxazina-2- carboxamida necessário usando a química descrita para a síntese de 6 a partir de C20 no Exemplo 6.

[00322] 5. O Exemplo 51 foi separado em seus enantiômeros de componente por meio de cromatografia fluida supercrítica (Coluna: Phenomenex Lux Celulose-2, 5 μm; Fase móvel 7:3 de dióxido de carbono / metanol). O enantiômero de primeira eluição foi designado como Exemplo 53A, e enantiômero de eluição tardia como o Exemplo 52.

[00323] 6. A estereoquímica absoluta indicada foi inicialmente designado na base da bioatividade relativa dos exemplos 52 e 53A (veja a Tabela 8), na analogia aos exemplos 54 e 55, que foram sintetizados a partir dos intermediários de quiralidade conhecida (C22 e P7, respectivamente).

[00324] 7. A estereoquímica absoluta indicada de Exemplo 53A foi também suportada por meio da síntese a partir de enantiômero C22 único (veja o Exemplo 53B). A bioatividade dos exemplos 53A e 53B foi essencialmente equivalente, e dramaticamente diferente daqueles do Exemplo 52 (veja a Tabela 8).

[00325] 8. O Intermediário P7 foi convertido no (6R)-3-bromo-N- ciclopropil-6-fluoro-6,7-di-hidro-5H-pirazolo[5,1-b][1,3]oxazina-2- carboxamida necessário usando a química descrita para a síntese de 6 de C20 no Exemplo 6.

[00326] 9. 3-(4-cloro-5-fluoro-2-metilfenil)-N-ciclopropil-6-fluoro-6,7- di-hidro-5H-pirazolo[5,1-b][1,3]oxazina-2-carboxamida racêmica foi separada em seus enantiômeros de componente por meio de cromatografia fluida supercrítica [Coluna: Chiral Technologies Chiralpak AD, 10 μm; Fase móvel: 7:3 de dióxido de carbono / (0,1% de hidróxido de amônio em etanol)]. O enantiômero de primeira eluição foi o Exemplo 56, e o enantiômero de eluição tardia foi de Exemplo 57. O Exemplo 57 foi também purificado por meio de HPLC de fase reversa (Coluna: Agela Durashell C18, 5 μm; Fase móvel A: 0,225% de ácido fórmico em água; Fase móvel B: 0,225% de ácido fórmico em acetonitrila; Gradiente: 32% a 52% B).

[00327] 10. As estereoquímicas absolutas indicadas para os exemplos 56 e 57 foram experimentalmente designadas na base de suas atividades relativas (veja a Tabela 8); a estereoquímica absoluta do flúor foi fixada em analogia aos exemplos 54 e 55, que foram preparados de intermediários homoquirais C22 e P7, respectivamente.

[00328] Usando a metodologia descrita acima para os exemplos 1 a 58, os compostos na Tabela 8 foram também feitos. Tabela 8. Exemplos 59 a 64.

[00329] A afinidade de ligação de PDE4A, PDE4B, PDE4C e PDE4D com os compostos da presente invenção foi determinada utilizando ensaio(s) biológico(s):

Ensaios Biológicos

[00330] Sequência de codificação de PDE4A3 humana (aminoácidos 2 a 825 da sequência com o número de acesso NP_001104779) foi clonada no vetor de expressão de baculovírus pFastBac (Invitrogen) criado para incluir um rótulo de afinidade de His6 de terminal N e um rótulo de afinidade de FLAG de terminal C para auxiliar na purificação. O Bacmid recombinante foi isolado e usado para transfectar as células de inseto para gerar um estoque viral. Para gerar a pasta celular para purificação, as células de inseto foram infectadas com o estoque viral e as células foram colhidas 72 horas após infecção. A pasta de célula de inseto foi lisada e após centrifugação, o sobrenadante foi batelada ligada à Ni-NTA agarose (GE Healthcare) e eluída com imidazol a 250 mM. Este eluato foi diluído com tampão FLAG (Tris a 50 mM HCl pH 7.5, NaCl a 100 mM, 5% de glicerol, TCEP a 1 mM com inibidores de protease) e batelada ligada à ant-FLAG M2 agarose (Sigma) durante a noite a 4 °C. The agarose foi packed into a column, lavada com tampão e eluída com tampão contendo elute usando 250 μg/mL Peptídeo Flag. As frações foram analisadas usando manchamento azul SDS-PAGE Coomassie e agrupadas com base na pureza. As frações agrupadas foram cromatografadas em em uma coluna S200 de 120 mL (GE Healthcare) em Tris a 50 mM, HCl pH 7,5, NaCl a 150 mM, 10% de glicerol, TCEP a 2 mM com inibidores de protease. PDE4A3 as frações foram analisadas por manchamento azul SDS-PAGE Coomassie, agrupadas com base na pureza, dialisadas contra Tris a 50 mM, HCl pH 7,5, NaCl a 100 mM, 20% de glicerol, TCEP a 2 mM, congeladas e armazenadas a -80 °C.

[00331] A sequência de codificação de PDE4B1 humana (aminoácidos 122 a 736 da sequência com o número de acesso Q07343) com as mutações resultando nas substituições de aminoácido S134E, S654A, S659A, e S661A foi clonada no vetor de expressão de baculovírus pFastBac (Invitrogen) criado para incluir um rótulo de afinidade de His6 de terminal N para auxiliar na purificação seguido por um sítio de clivagem de trombina. O Bacmid recombinante foi isolado e usado para transfectar as células de inseto para gerar um estoque viral. Para gerar a pasta celular para purificação, as células de inseto foram infectadas com o estoque viral e as células foram colhidas 72 horas após infecção como descrito em Seeger, T. F. et al., Brain Research 985 (2003) 113-126. A pasta de célula de inseto foi lisada e após centrifugação, o sobrenadante foi cromatographed on Ni- NTA agarose (Qiagen) como descrito em Seeger, T. F. et al., Brain Research 985 (2003) 113-126. As frações eluindo com Ni-NTA agarose contendo PDE4 foram agrupadas, diluídas com Q tampão A (Tris a 20 mM, HCl pH 8, 5% de glicerol, TCEP a 1 mM) para reduzir NaCl para ~100 mM e carregadas em coluna Source 15Q (GE Healthcare). Após lavagem com tampão A de Q/10% de tampão B para linha referência, PDE4D foi eluída com um gradiente de 10% a 60% de tampão B (Tris a 20 mM, HCl pH 8, NaCl a 1 M, 5% de glicerol, TCEP a 1 mM). As frações de PDE4D foram analisadas por manchamento azul SDS-PAGE Coomassie, agrupadas com base na pureza, congeladas e armazenadas a -80 °C.

[00332] Sequência de codificação de PDE4C1 humana (aminoácidos 2 a 712 da sequência com o número de acesso NP_000914.2) foi clonada no vetor de expressão de baculovírus pFastBac (Invitrogen) criado para incluir um rótulo de afinidade de His6 de terminal N e um rótulo de afinidade de FLAG de terminal C para auxiliar na purificação. O Bacmid recombinante foi isolado e usado para transfectar as células de inseto para gerar um estoque viral. Para gerar a pasta celular para purificação, as células de inseto foram infectadas com o estoque viral e as células foram colhidas 72 horas após infecção. A pasta de célula de inseto foi lisada e após centrifugação, o sobrenadante foi a batelada ligada à Ni-NTA agarose (GE Healthcare) e eluído com imidazol a 250 mM. Este eluato foi diluído com tampão FLAG (Tris a 50 mM, HCl pH 7,5, NaCl a 100 mM, 5% de glicerol, TCEP a 1 mM com inibidores de protease) e batelada ligada à agarose anti-FLAG M2 (Sigma) durante a noite a 4 °C. A agarose foi embalada em uma coluna, lavada com tampão e eluída com tampão contendo eluato usando 250 μg/mL de peptídeo Flag. As frações foram analisadas usando manchamento azul SDS-PAGE Coomassie e agrupadas com base na pureza. As frações agrupadas foram cromatografadas em em uma coluna S200 de 120 mL (GE Healthcare) em Tris a 50 mM HCl pH 7,5, NaCl a 150 mM, 10% de glicerol, TCEP a 2 mM com inibidores de protease. As frações de PDE4C1 foram analisadas por manchamento azul SDS-PAGE Coomassie, agrupadas com base na pureza, dialisadas contra Tris a 50 mM, HCl pH 7,5, NaCl a 100 mM, 20% de glicerol, TCEP a 2 mM, congeladas e armazenadas a -80 °C.

[00333] Uma porção da sequência de codificação de PDE4D3 humana (aminoácidos 50 a 672 da sequência com número de acesso Q08499-2) foi clonada no vetor de expressão de baculovírus pFastBac (Invitrogen) criado para incluir um rótulo de afinidade de His6 de terminal C para auxiliar na purificação como descrito em Seeger, T. F. et al., Brain Research 985 (2003) 113-126. O Bacmid recombinante foi isolado e usado para transfectar as células de inseto para gerar um estoque viral. Para gerar a pasta celular para purificação, as células de inseto foram infectadas e as células foram colhidas 72 oras após infecção. A pasta de célula de inseto foi lisada e após centrifugação, o sobrenadante foi cromatografado em Ni-NTA agarose (Qiagen) como descrito em Seeger, T. F. et al., Brain Research 985 (2003) 113-126. Frações eluindo com Ni-NTA contendo PDE4 foram agrupadas, diluídas com Tampão A de Q (Tris a 50 mM HCl pH 8, 4% de glicerol, NaCl a 100 mM, TCEP a 1 mM, inibidores de Protease livres de EDTA (Roche)) para reduzir NaCl para ~200 mM, e carregadas em uma coluna Q Sepharose (GE Healthcare). Após lavagem com tampão A de Q para linha de base, PDE4D foi eluído com um gradiente de 10% a 60% de Tampão B (Tris a 50 mM, HCl pH 8, NaCl a 1 M, 4% de glicerol, TCEP a 1 mM). As frações de PDE4D foram analisadas por manchamento azul SDS-PAGE Coomassie, agrupadas com base na pureza, congeladas e armazenadas a -80 °C.

[00334] Os ensaios PDE4A3, PDE4B1, PDE4C1 e PDE4D3 usam a tecnologia de Ensaio de Proximidade de Cintilação (SPA) para medir a inibição de atividade de enzima PDE4A3, PDE4B1, PDE4C1, e PDE4D3 recombinante humana por compostos in vitro. Os ensaios de PDE4A3, PDE4B1, PDE4C1, e PDE4D3 são realizados em paralelo usando parâmetros idênticos, exceto para a concentração de enzima (80 pM de PDE4A3, 40 pM de PDE4B1, 40 pM de PDE4C1 e 10 pM de PDE4D3). Os ensaios são realizados em um formato de 384 cavidades com 50 μL de tampão de ensaio (TRIS a 50 mM pH 7,5; MgCl2 a 1,3 mM; .01% de Brij) contendo PDE4A3, PDE4B1, PDE4C1, e PDE4D3 suficiente para converter ~20% de substrato (1 μM de cAMP consistindo em 3H-cAMP a 20 nM + 980 μM de cAMP frio) e uma faixa de inibidores. As reações são incubadas durante 30 minutos a 25 °C. A adição de 20 μL de 8 mg/mL de contas de SPA silicato de ítrio (PerkinElmer) interrompe a reação. As placas são seladas (TopSeal, PerkinElmer) e as contas são deixadas assentar-se durante 8 hrs, após as quais elas são lidas no TriLux MicroBeta durante a noite. Tabela 9. Atividade Biológica de Exemplos 1 - 58. a. Valores representam a média geométrica de 2 - 6 determinações, a menos que de outro modo indicado. b. Valor representa a média geométrica de >7 determinações. c. Não determinado. d. Valor representa uma única determinação.

Claims (27)

1. Composto, caracterizado pelo fato de que apresenta a Fórmula I: ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que: R1 é um substituinte selecionado do grupo que consiste em (C3-C8)cicloalquila, (de 4 a 10 membros)heterocicloalquila, (C6- C10)arila, e (de 5 a 10 membros)heteroarila, em que a (C3- C8)cicloalquila, (de 4 a 10 membros)heterocicloalquila, (C6-C10)arila e (de 5 a 10 membros)heteroarila são opcionalmente substituídas com um a cinco R5; R2 e R3 são cada qual independentemente selecionados do grupo que consiste em hidrogênio, (C1-C6)alquila opcionalmente substituída, (C3-C8)cicloalquila, (de 4 a 10 membros)heterocicloalquila, (C6-C10)arila, e (de 5 a 10 membros)heteroarila, em que a (C3- C8)cicloalquila, (de 4 a 10 membros)heterocicloalquila, (C6-C10)arila, e (de 5 a 10 membros)heteroarila são opcionalmente substituídas com um a cinco R6; ou R2 e R3 considerados juntamente com o nitrogênio ao qual eles são ligados formam uma (de 4 a 10 membros)heterocicloalquila ou uma (de 5 a 10 membros)heteroarila, em que a (de 4 a 10 membros)heterocicloalquila e (de 5 a 10 membros)heteroarila são opcionalmente substituídas com um a cinco R6; quando presente, R4, em cada ocorrência, é independentemente selecionado do grupo que consiste em halogênio, ciano, hidróxi, -SF5, nitro, (C1-C6)alquila opcionalmente substituída, (C2-C6)alquenila opcionalmente substituída, (C2-C6)alquinila opcionalmente substituída, (C1-C6)alquiltio opcionalmente substituído, (C1-C6)alcóxi opcionalmente substituído, -N(R7)(R8), -N(R7)(C=(O)R8), -C(=O)N(R7)(R8), -O-C(=O)-N(R7)(R8), -C(=O)-R7, e -C(=O)-OR7; quando presente, R5 e R6, em cada ocorrência, são independentemente selecionados do grupo que consiste em halogênio, oxo, ciano, hidróxi, -SF5, nitro, (C1-C6)alquila opcionalmente substituída, (C2-C6)alquenila opcionalmente substituída, (C2- C6)alquinila opcionalmente substituída, (C1-C6)alquiltio opcionalmente substituído, (C1-C6)alcóxi opcionalmente substituído, -N(R7)(R8), - N(R7)(C=(O)R8), -C(=O)N(R7)(R8), -O-C(=O)-N(R7)(R8), -C(=O)-R7, e - C(=O)-OR7; R7 e R8 em cada ocorrência são independentemente selecionados do grupo que consiste em hidrogênio e (C1-C6)alquila; e a é representado por um número inteiro selecionado de 0, 1, 2 ou 3.

2. Composto, de acordo com a reivindicação 1, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado pelo fato de que R1 é: (a) uma (C6-C10)arila opcionalmente substituída selecionada de fenila ou naftila; ou (b) uma (de 5 a 10 membros)heteroarila opcionalmente substituída.

3. Composto, de acordo com a reivindicação 2, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado pelo fato de que R1 é uma (C6-C10)arila opcionalmente substituída, e a arila é fenila.

4. Composto, de acordo com a reivindicação 2, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado pelo fato de que R1 é uma (de 5 a 10 membros)heteroarila opcionalmente substituída selecionada do grupo que consiste em: (a) triazolila, imidazolila, furanila, isoxazolila, isotiazolila, 1,2,3-oxadiazolila, 1,2,4-oxadiazolila, 1,2,5-oxadiazolila, ou 1,3,4- oxadiazolila, oxazolila, tiofenila, tiazolila, isotiazolila, pirazolila, piridinila, pirazinila, pirimidinila, piridazinila, indolila, indazolila, benzofuranila, benzimidazolila, benzotienila, benzoxadiazolila, benzotiazolila, isobenzotiofuranila, benzotiofuranila, benzisoxazolila, benzoxazolila, benzodioxolila, furanopiridinila, purinila, imidazopiridinila, imidazopirimidinila, pirrolopiridinila, pirazolopiridinila, pirazolopirimidinila, tienopiridinila, triazolopirimidinila, triazolopiridinila, quinolinila, isoquinolinila, cinolinila, quinazolinila, oxocromenila, e 1,4-benzoxazinila, cada uma das quais é opcionalmente substituída com um a três R5; ou (b) piridinila, triazolopiridinila, pirazolopiridinila, e benzo- oxazolila, cada uma das quais é opcionalmente substituída com um a três R5.

5. Composto, de acordo com a reivindicação 4, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado pelo fato de que R1 é uma (de 5 a 6 membros)heteroarila opcionalmente substituída e a heteroarila é piridinila.

6. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 5, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado pelo fato de que R1 é substituído com um a três R5, em que cada R5 é independentemente selecionado do grupo que consiste em halogênio, ciano, (C1-C6)alquila opcionalmente substituída e (C1-C6)alcóxi opcionalmente substituída.

7. Composto, de acordo com a reivindicação 6, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado pelo fato de que R5é: (a) um halogênio selecionado de flúor ou cloro; (b) uma (C1-C6)alquila opcionalmente substituída, e a alquila é selecionada de metila, etila ou propila, e a metila, etila e propila são opcionalmente substituídas com um a três átomos de flúor; ou (c) um (C1-C6)alcóxi opcionalmente substituído, e o alcóxi é selecionado de metóxi, etóxi ou propóxi e o metóxi, etóxi e propóxi são opcionalmente substituídos com um a três átomos de flúor.

8. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 7, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado pelo fato de que: (a) R2 e R3 são cada qual independentemente selecionados do grupo que consiste em hidrogênio, opcionalmente substituída (C1- C6)alquila, (C3-C8)cicloalquila, e (de 5 a 6 membros)heteroarila, e onde quimicamente permissível, a (C3-C8)cicloalquila, e (de 5 a 6 membros)heteroarila são opcionalmente substituídas com um a três R6; (b) um de R2 e R3 é hidrogênio e o outro é uma (C1- C6)alquila, opcionalmente substituída com um a três R6; (c) um de R2 e R3 é hidrogênio e o outro é uma (C3- C8)cicloalquila opcionalmente substituída com um a três R6; ou (d) R2 e R3 considerados juntamente com o nitrogênio ao qual eles são ligados formam uma (de 4 a 6 membros)heterocicloalquila opcionalmente substituída com um a três R6.

9. Composto, de acordo com a reivindicação 8, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado pelo fato de que uma (C1-C6)alquila opcionalmente substituída é selecionada do grupo que consiste em metila, etila, propila, e isopropila.

10. Composto, de acordo com a reivindicação 8, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado pelo fato de que uma (C3-C8)cicloalquila opcionalmente substituída é selecionada do grupo que consiste em ciclopropila, ciclobutila, e ciclopentila.

11. Composto, de acordo com a reivindicação 8, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado pelo fato de que uma (C3-C8)cicloalquila opcionalmente substituída é ciclopropila.

12. Composto, de acordo com a reivindicação 8, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado pelo fato de que uma (de 4 a 6 membros)heterocicloalquila é selecionada do grupo que consiste em azetidinila, tetra-hidropirazolila, tetra-hidro-oxazinila, tetra-hidropirimidinila, imidazolidinila, piperidinila, piperazinila, oxazolidinila, e pirrolidinila.

13. Composto, de acordo com a reivindicação 12, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado pelo fato de que uma (de 4 a 6 membros)heterocicloalquila é azetidinila.

14. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 8 a 13, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado pelo fato de que R6 é independentemente selecionado do grupo que consiste em halogênio, oxo, ciano, hidróxi, (C1-C6)alquila opcionalmente substituída, e (C1-C6)alcóxi opcionalmente substituído.

15. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 14, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado pelo fato de que cada R4, quando presente, é independentemente selecionado do grupo que consiste em halogênio, ciano, hidróxi, -SF5, nitro, (C1-C6)alquila opcionalmente substituída, e (C1-C6)alcóxi opcionalmente substituído.

16. Composto, de acordo com a reivindicação 15, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado pelo fato de que R4 é: (a) halogênio, e o halogênio é selecionado de flúor ou cloro; ou (b) (C1-C6)alquila opcionalmente substituída.

17. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 16, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado pelo fato de que a é um número inteiro selecionado de 0, 1 ou 2.

18. Composto, caracterizado pelo fato de que apresenta a Fórmula II: ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que: R2 e R3 são cada qual independentemente selecionados do grupo que consiste em hidrogênio, (C1-C6)alquila opcionalmente substituída, e (C3-C8)cicloalquila, em que uma (C3-C8)cicloalquila é opcionalmente substituída com um a três R6; ou R2 e R3 considerados juntamente com o nitrogênio ao qual eles são ligados formam uma (de 4 a 6 membros)heterocicloalquila opcionalmente substituída com um a três R6; quando presente, cada R4 é independentemente selecionado de halogênio ou (C1-C6)alquila opcionalmente substituída; quando presente, R5 e R6, em cada ocorrência, são independentemente selecionados do grupo que consiste em halogênio, ciano, (C1-C6)alquila opcionalmente substituída, e (C1- C6)alcóxi opcionalmente substituído; e a é um número inteiro de 0, 1, ou 2.

19. Composto, de acordo com a reivindicação 18, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado pelo fato de que: (a) um de R2 e R3 é hidrogênio e o outro é uma (C1- C6)alquila opcionalmente substituída, e a (C1-C6)alquila é selecionada do grupo que consiste em metila, etila, propila, e isopropila; (b) um de R2 e R3 é hidrogênio e o outro é uma (C3- C8)cicloalquila, em que a (C3-C8)cicloalquila é ciclopropila; ou (c) R2 e R3 considerados juntamente com o nitrogênio ao qual eles são ligados formam uma (de 4 a 6 membros)heterocicloalquila opcionalmente substituída com um a três R6.

20. Composto, de acordo com a reivindicação 19, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado pelo fato de que a (de 4 a 6 membros)heterocicloalquila é azetidinila.

21. Composto, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que um composto é selecionado do grupo que consiste em: azetidin-1-il[3-(4-cloro-2-metilfenil)-6,7-di-hidro-5H- pirazolo[5,1-b][1,3]oxazin-2-il]metanona; 3-(4-cloro-2-metilfenil)-N-ciclopropil-6,7-di-hidro-5H- pirazolo[5,1-b][1,3]oxazina-2-carboxamida; azetidin-1-il[3-(4-cloro-2,5-difluorofenil)-6,7-di-hidro-5H- pirazolo[5,1-b][1,3]oxazin-2-il]metanona; azetidin-1-il[3-(4-cloro-2,3-difluorofenil)-6,7-di-hidro-5H- pirazolo[5,1-b][1,3]oxazin-2-il]metanona; 3-(4-ciano-5-fluoro-2-metilfenil)-N-ciclopropil-6,7-di-hidro- 5H-pirazolo[5,1-b][1,3]oxazina-2-carboxamida; (6S)-3-(4-Cloro-2-metilfenil)-N-ciclopropil-6-fluoro-6,7-di- hidro-5H-pirazolo[5,1-b][1,3]oxazina-2-carboxamida; (6S)-3-(4-cloro-2,5-difluorofenil)-N-ciclopropil-6-fluoro-6,7- di-hidro-5H-pirazolo[5,1-b][1,3]oxazina-2-carboxamida; 3-(4-cloro-2-metilfenil)-N-ciclopropil-6,6-difluoro-6,7-di-hidro- 5H-pirazolo[5,1-b][1,3]oxazina-2-carboxamida; 3-(4-clorofenil)-N-ciclopropil-5-metil-6,7-di-hidro-5H- pirazolo[5,1-b][1,3]oxazina-2-carboxamida; 3-(4-clorofenil)-N-ciclopropil-7-metil-6,7-di-hidro-5H- pirazolo[5,1-b][1,3]oxazina-2-carboxamida; 3-(4-ciano-3-fluorofenil)-N-ciclopropil-6,7-di-hidro-5H- pirazolo[5,1-b][1,3]oxazina-2-carboxamida; 3-(4-clorofenil)-N-ciclopropil-6,7-di-hidro-5H-pirazolo[5,1- b][1,3]oxazina-2-carboxamida; 3-(4-cloro-3-fluorofenil)-N-ciclopropil-6,7-di-hidro-5H- pirazolo[5,1-b][1,3]oxazina-2-carboxamida; azetidin-1-il[3-(3,4-diclorofenil)-6,7-di-hidro-5H-pirazolo[5,1- b][1,3]oxazin-2-il]metanona; azetidin-1-il[3-(4-cloro-3-fluorofenil)-6,7-di-hidro-5H- pirazolo[5,1-b][1,3]oxazin-2-il]metanona; 3-(4-cloro-2,5-difluorofenil)-N-ciclopropil-6,7-di-hidro-5H- pirazolo[5,1-b][1,3]oxazina-2-carboxamida; 3-(4-cloro-5-fluoro-2-metilfenil)-N-ciclopropil-6,7-di-hidro-5H- pirazolo[5,1-b][1,3]oxazina-2-carboxamida; 4-[2-(azetidin-1-ilcarbonil)-6,7-di-hidro-5H-pirazolo[5,1- b][1,3]oxazin-3-il]-2-fluoro-5-metilbenzonitrila; 3-(4-clorofenil)-N-ciclopropil-6,6-difluoro-6,7-di-hidro-5H- pirazolo[5,1-b][1,3]oxazina-2-carboxamida; azetidin-1-il[3-(4-clorofenil)-5-metil-6,7-di-hidro-5H- pirazolo[5,1-b][1,3]oxazin-2-il]metanona, sal de cloridrato; N-ciclopropil-3-(3,4-diclorofenil)-6,7-di-hidro-5H- pirazolo[5,1-b][1,3]oxazina-2-carboxamida; azetidin-1-il[3-(4-clorofenil)-6,7-di-hidro-5H-pirazolo[5,1- b][1,3]oxazin-2-il]metanona; 4-[2-(azetidin-1-ilcarbonil)-6,7-di-hidro-5H-pirazolo[5,1- b][1,3]oxazin-3-il]-2,6-difluorobenzonitrila; azetidin-1-il[3-(3,5-difluoro-4-metoxifenil)-6,7-di-hidro-5H- pirazolo[5,1-b][1,3]oxazin-2-il]metanona; N-ciclopropil-3-([1,2,4]triazolo[1,5-a]piridin-6-il)-6,7-di-hidro- 5H-pirazolo[5,1-b][1,3]oxazina-2-carboxamida, sal de cloridrato; 3-(4-ciano-2-metilfenil)-N-ciclopropil-6,7-di-hidro-5H- pirazolo[5,1-b][1,3]oxazina-2-carboxamida; N-ciclopropil-3-[2-(difluorometóxi)piridin-4-il]-6,7-di-hidro- 5H-pirazolo[5,1-b][1,3]oxazina-2-carboxamida; 3-(5-ciano-2-fluorofenil)-N-ciclopropil-6,7-di-hidro-5H- pirazolo[5,1-b][1,3]oxazina-2-carboxamida; N-ciclopropil-3-(pirazolo[1,5-a]piridin-6-il)-6,7-di-hidro-5H- pirazolo[5,1-b][1,3]oxazina-2-carboxamida; 3-(4-ciano-2,5-difluorofenil)-N-ciclopropil-6,7-di-hidro-5H- pirazolo[5,1-b][1,3]oxazina-2-carboxamida; 3-(6-cianopiridin-3-il)-N-ciclopropil-6,7-di-hidro-5H- pirazolo[5,1-b][1,3]oxazina-2-carboxamida; azetidin-1-il[3-(3-clorofenil)-6,7-di-hidro-5H-pirazolo[5,1- b][1,3]oxazin-2-il]metanona; 3-(3-clorofenil)-N-ciclopropil-6,7-di-hidro-5H-pirazolo[5,1- b][1,3]oxazina-2-carboxamida; 3-(4-cloro-3-fluorofenil)-N-(propan-2-il)-6,7-di-hidro-5H- pirazolo[5,1-b][1,3]oxazina-2-carboxamida; 3-(4-cloro-3-fluorofenil)-N-metil-6,7-di-hidro-5H-pirazolo[5,1- b][1,3]oxazina-2-carboxamida; 3-(4-ciano-5-fluoro-2-metilfenil)-N-etil-6,7-di-hidro-5H- pirazolo[5,1-b][1,3]oxazina-2-carboxamida; 3-(4-cloro-5-fluoro-2-metilfenil)-N-metil-6,7-di-hidro-5H- pirazolo[5,1-b][1,3]oxazina-2-carboxamida; 3-(4-cloro-5-fluoro-2-metilfenil)-N-etil-6,7-di-hidro-5H- pirazolo[5,1-b][1,3]oxazina-2-carboxamida; 3-(4-cloro-2,5-difluorofenil)-N-etil-6,7-di-hidro-5H- pirazolo[5,1-b][1,3]oxazina-2-carboxamida; 3-(4-cloro-3-fluorofenil)-N-ciclopropil-6-fluoro-6,7-di-hidro- 5H-pirazolo[5,1-b][1,3]oxazina-2-carboxamida; azetidin-1-il[3-(4-cloro-2-fluorofenil)-6,7-di-hidro-5H- pirazolo[5,1-b][1,3]oxazin-2-il]metanona; 3-(4-cloro-2-fluorofenil)-N-ciclopropil-6,7-di-hidro-5H- pirazolo[5,1-b][1,3]oxazina-2-carboxamida; 3-(4-clorofenil)-N-ciclopropil-6-fluoro-6,7-di-hidro-5H- pirazolo[5,1-b][1,3]oxazina-2-carboxamida; 3-(4-cloro-2-metilfenil)-N-ciclopropil-6-fluoro-6,7-di-hidro-5H- pirazolo[5,1-b][1,3]oxazina-2-carboxamida; 3-(3-cloro-4-fluorofenil)-N-ciclopropil-6,7-di-hidro-5H- pirazolo[5,1-b][1,3]oxazina-2-carboxamida; 3-(4-cloro-2,3-difluorofenil)-N-ciclopropil-6,7-di-hidro-5H- pirazolo[5,1-b][1,3]oxazina-2-carboxamida; 3-(4-cloro-3,5-difluorofenil)-N-ciclopropil-6,7-di-hidro-5H- pirazolo[5,1-b][1,3]oxazina-2-carboxamida; azetidin-1-il[3-(4-cloro-5-fluoro-2-metilfenil)-6,7-di-hidro-5H- pirazolo[5,1-b][1,3]oxazin-2-il]metanona; azetidin-1-il[3-(4-cloro-3,5-difluorofenil)-6,7-di-hidro-5H- pirazolo[5,1-b][1,3]oxazin-2-il]metanona; 4-[2-(azetidin-1-ilcarbonil)-6,7-di-hidro-5H-pirazolo[5,1- b][1,3]oxazin-3-il]-2,5-difluorobenzonitrila; 3-(4-ciano-5-fluoro-2-metilfenil)-N-ciclopropil-6-fluoro-6,7-di- hidro-5H-pirazolo[5,1-b][1,3]oxazina-2-carboxamida; (6R)-3-(4-ciano-5-fluoro-2-metilfenil)-N-ciclopropil-6-fluoro- 6,7-di-hidro-5H-pirazolo[5,1-b][1,3]oxazina-2-carboxamida; (6S)-3-(4-ciano-5-fluoro-2-metilfenil)-N-ciclopropil-6-fluoro- 6,7-di-hidro-5H-pirazolo[5,1-b][1,3]oxazina-2-carboxamida; (6S)-3-(4-ciano-5-fluoro-2-metilfenil)-N-ciclopropil-6-fluoro- 6,7-di-hidro-5H-pirazolo[5,1-b][1,3]oxazina-2-carboxamida; (6S)-3-(4-clorofenil)-N-ciclopropil-6-fluoro-6,7-di-hidro-5H- pirazolo[5,1-b][1,3]oxazina-2-carboxamida; (6R)-3-(4-clorofenil)-N-ciclopropil-6-fluoro-6,7-di-hidro-5H- pirazolo[5,1-b][1,3]oxazina-2-carboxamida; (6R)-3-(4-cloro-5-fluoro-2-metilfenil)-N-ciclopropil-6-fluoro- 6,7-di-hidro-5H-pirazolo[5,1-b][1,3]oxazina-2-carboxamida; (6S)-3-(4-cloro-5-fluoro-2-metilfenil)-N-ciclopropil-6-fluoro- 6,7-di-hidro-5H-pirazolo[5,1-b][1,3]oxazina-2-carboxamida; 3-(4-cloro-2,5-difluorofenil)-N-ciclopropil-6,6-difluoro-6,7-di- hidro-5H-pirazolo[5,1-b][1,3]oxazina-2-carboxamida; 3-(5-cloropiridin-2-il)-N-ciclopropil-6,7-di-hidro-5H- pirazolo[5,1-b][1,3]oxazina-2-carboxamida; 3-(5-cloropiridin-2-il)-N-ciclopropil-6,7-di-hidro-5H- pirazolo[5,1-b][1,3]oxazina-2-carboxamida; N-ciclopropil-3-(5-(trifluorometil)piridin-3-il)-6,7-di-hidro-5H- pirazolo[5,1-b][1,3]oxazina-2-carboxamida; 3-(5-ciano-2-metilfenil)-N-ciclopropil-6,7-di-hidro-5H- pirazolo[5,1-b][1,3]oxazina-2-carboxamida; 3-(4-ciano-2-fluorofenil)-N-isopropil-6,7-di-hidro-5H- pirazolo[5,1-b][1,3]oxazina-2-carboxamida; e 3-(6-(difluorometoxi)piridin-3-il)-N-metil-6,7-di-hidro-5H- pirazolo[5,1-b][1,3]oxazina-2-carboxamida; ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

22. Composto, caracterizado pelo fato de que é (6S)-3-(4- Cloro-2-metilfenil)-N-ciclopropil-6-fluoro-6,7-di-hidro-5H-pirazolo[5,1- b][1,3]oxazina-2-carboxamida, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

23. Composto, caracterizado pelo fato de que é 4-[2- (Azetidin-1-ilcarbonil)-6,7-di-hidro-5H-pirazolo[5,1-b][1,3]oxazin-3-il]-2- fluoro-5-metilbenzonitrila, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

24. Composto, caracterizado pelo fato de que é 3-(4-ciano- 5-fluoro-2-metilfenil)-N-ciclopropil-6,7-di-hidro-5H-pirazolo[5,1- b][1,3]oxazina-2-carboxamida, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

25. Composto, caracterizado pelo fato de que é 3-(4-ciano- 5-fluoro-2-metilfenil)-N-ciclopropil-6-fluoro-6,7-di-hidro-5H-pirazolo[5,1- b][1,3]oxazina-2-carboxamida, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

26. Composição farmacêutica, caracterizada pelo fato de que compreende um composto, como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 25, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, e um excipiente farmaceuticamente aceitável.

27. Uso de um composto, como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 25, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado pelo fato de que é para a preparação de uma composição e/ou medicamento para tratamento de um paciente sofrendo de uma doença ou condição mediada pelas isoformas PDE4A, PDE4B, e PDE4C; sendo que a referida doença ou condição é selecionada do grupo que consiste em esquizofrenia, depressão, ansiedade, abuso de substância, doença de Alzheimer, doença de Parkinson, esclerose múltipla, esclerose lateral amiotrófica, doença pulmonar obstrutiva crônica, inflamação, acidente vascular cerebral, asma, doença vascular cerebral, conjuntivite alérgica, psicose, artrite psoriática, lesão cerebral traumática, epilepsia, doenças autoimunes e inflamatórias e distúrbios comportamentais devido à dependência e abuso de drogas.