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la présente invention concerne de nouvelles substan- ces antibiotiques que l'on peut représenter par la formule suivante :
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dans laquelle R est un groupe alkyle inférieur, R. est un grou- pe raéthoxy ou amine et R2 est un atome d'hydrogène ou un grou- pe méthyle..'
Les nouveaux composta suivant l'invention sont des solides cristallisés de couleur orange et sont doués de pro- priétés faiblement basiques, Ils sont relativement insolubles dans l'eau, l'éther éthylique, l'éther de pétrole,, Ils sont très faiblement solubles dans les solvants tels que le benzène, le toluène, le chloroforme et les solvants analogues, mais relativement solubles dans l'éthanol, la pyridine, la diméthyl- formamide, et analogues.
Les diagrammes d'absorption infra- rouge et ultra-violet sont caractéristiques et permettent de distinguer et d'identifier les nouvelles substances.
Les nouveaux composés sont actifs in vitro sur une variété de microorganismes incluant des bactéries gram-posi- tives et grain-négatives. Deu tests réalisés sur des souris in vivo, démontrent que les nouveaux composés antibactériens sont extrêmement actifs quand on les aduinistre par la voie orale ou sous-cutanée à des souris infestées par une dose toxique d'une souche de Staphylococcus aureus de Smith.
On a également trouvé que les nouvelles substances sont à peu près aussi efficaces que la triéthylèemélamine dans le traitement
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des adénocarcinomes 72 jours chez la souris C3H.
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On prépare certains de ces composée à partir de la mitomycine A ou de la mitomycine B, groupe de nouveaux anti- biotiques doués d'une activité importante anti-tumorale et
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décrits par Hâta et autres dans "J.Anti'biotics, Sers A, .iXs" fi 4, 141, (Juillet 1956).
Ainsi, pour préparer le produit que l'on peut dési- gner sous le nom d'anhydro apo mitonycine B, pour lequel; dans la formule ci-dessus, il est un groupe méthyle, R1 est
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un groupe méthoxy et R2 est un groupe méthyle, on dissous, de préférence la mitooyne B dans un solvant polaire convenable. tel que l'eau, le dioxane, le 2-méthoxyéthanol, le 2-4thoxy- '
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éthanol, l'acétate d'éthyle, le méthanol, ltdthmolo la diméthylformamide, le dimwthylsulfoxyde, la d1méthylaclStlal41d., etc... avant de mettre la solution en contact avec de l'hydro- gène en présence d'un catalyseur à métal noble, de préférence
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du ptl.1J.n4:
LWIi métallique finement divine ua un a*at4 ipétal de la famille du palladium.
On peut employer le catalyseur sous forme de métal pur ou en suspension sur l'un des supports ordinaire tels que l'alumine finement divisée, le charbon activé, la terre d'infu- soires, etc,.. On peut procéder à l'hydrogénation à des tempes ratures dans l'intervalle de 0 à 50 C et, de préférence, en-
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viron à la température ambiante, c'ent-à-dire autour 4e 2509# et sous pression d'hydrogène d'environ une atmosphère,
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Une concentration de catalyseur d'au meine 1 en poids de la substance de départ est nécessaire ut on peut en utiliser jusqu'il 100% en poids; ordinairement, on utilise de
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10 à 20%.
On pousse généralement l'hydrogénation jusqutà ce qu'une molécule d'hydrogène ait été absorbée, au moment où la vitesse d' absorption tend à diminuer. Il faut fair% atten- tion à ne pas poursuivre ladite hydrogénation au-delà au , temps
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normal pour éviter que des réductions indésirables ne se produit 'sent,
Après la fin de l'hydrogénation. on-récupère le produit réduit selon les moyens désirés, par exemple, par éli- mination du catalyseur et concentration de la solution. On oxyde le produit réduit avec de l'air, de l'oxygène, de la benzoquinone ou d'autres agents d'oxydation similaires et on récupère le produit final du mélange réactionnel par filtration, lavage à l'alcool et séchage sous vide.
On peut purifier le produit final par recristallisation à partir de l'éthanol ou de la pyridine ou de la diméthylformamide, etc... selon les procédés standards.
On peut alternativement utiliser le produit appelé la N-méthylmitomcine A de formule :
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comme substance de départ pour la préparation de l'anhydre apo mitomycine B. Les conditions nécessaires à l'hydrogéna- tion catalytique de la N-méthylmitomycine A et la réoxydation par l'air consécutive sont pratiquement identiques à celles décrites ci-dessus à propos de la réduction et de l'oxydation de la mitomycine B.
Lesconditions nécessaires à la préparation du produit que l'on peut appeler anhydro apo mitomycine A, dans la formule (I) de laquelle R est un groupe méthyle, R1 est un groupe méthoxy et R2 est un atome d'hydrogène , Dont pratique- ment identiques à celles dont on donne un aperçu à propos de la préparation de l'anhydro apo mitomycine B.
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Pour préparer le produit que l'on peut désigner anhy- dro apo porfiromycine, dans la formule de laquelle (formule ci-dessus), R est un groupe méthyle, R1 est un groupe amine et R2 est un groupe méthyle, il est nécessaire de sou- mettre simplement l'anhydro apo mitoaycyne B au traitement par l'ammoniaque pendant un temps suffisant pour que l'amination désirée s'accomplisse. Les conditions de la réaction-ne sont pas primordiales et on peut y procéder à la température ambi- ante de 2 à 20 heures.
Les nouveaux produits de la présente invention ont une activité antibactérienne à spectre étendu. Le spectre an- ti-bactérien des nouveaux composés, représentant la quantité requise pour inhiber la croissance' de différentes bactéries types est déterminé selonun procédé standard par la technique de dilution sur agar sur plaque striée que l'on utilise commun- hément pour tester les nouveaux antibiotiques, Lesconcentra- tions minima inhibitrices exprimées en gamma par cm3, des nou- teaux produite sur les organismes tests sont indiquées dans 1. tableau ci-dessous.
Pour permettre la comparaison. on a éga- lement indiqué les spectres anti-bactériens de la mitomyoi- ne B,
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!rA3LEA.tJ
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Organisme Anhydro aJ)c Anhydro 4IDo Anhydro apo Kitonycine 11 Mitomycine B itomycne A Porfiromyoine 1,1-ycobacterium emermatis ATCC 607 10 1925 Staphvlococcus aureus 209P 195 0,64 25 20
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<tb> Sarcina <SEP> Lutea <SEP> 1001 <SEP> 0,62 <SEP> 0,04 <SEP> 25
<tb> Bacillus <SEP> subtilis
<tb>
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ATCC 6633 0,62 0,16 391 5 Streptococcus faeealia 2,5 2,5 125 20 ATCC 6043 125 Streptococcus pyoenes 203, . :
- 0,02 0,.02 , 1. 5 0,62 Streptococcus pyogene3 -'Y-5 0,15 - - 1, 25 tretococcus 1f ne 11 2,5 1,25 ) 25 20 Stri2hylococcus albus ne 69 0,16 0,16 25 10 Stren+ococcus téta ne 80 ,2,5 1,25 '> 25 20
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TABLEAU! (Suite)
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Organisme Anhydro a a Anhydre apo Anhydre apo itomyc1n B ¯ ¯#> ¯¯¯ Mitosycine B :
3toycin A Porfirosysine
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<tb> Staphylococcus <SEP> aureus <SEP>
<tb>
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NY 104 z5 - 20 Bacillus Cereus n 5 0,62 1925 25 20 Klebs1ella pneumon1ae 2,5 - lt25 > 25 20 Alcaligenes e2, ATOC 10153 2,5 5 25 > 20 ÇoràMebacterium xeroe3e N..' 4ilaW B-1397 0, 02 0,02 12,5 Salmonella lallinarum 10 20 > 25 7 20 Escherichia colt. nl 22 2,5 1,25 T 25 >20 Klebsiella pneumonit, A Strain AD 0962 1925 > 25 > 20
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Comme il est indiqué, les nouveaux produits eont très efficaces in vivo sur certaines infections normalisées
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des souris, le Starhylococcus aureus de Smitli par exemple, La souche Staphylococuus aureus de Smith a étú étu- diée à l'Institut Rockfeller.et décrite par J.M.Smith et R. J.
Dubos dans le "Journ. Expt. Lied." 103, 87 (1956). La souche en.question est positive à la coagulase, négative à. la tellurite, et sensible, in vitro, à la tétracycline., la
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pénicilline, la streptomycine, l'érythromycine, la carbomyci- ne, la néomycine, au chloramphénicol et ta la zovobiocine. On a fait des essais pour déterminer la phase type de cette sou- che mais on a trouvé qu'elle n'était paa susceptible d'être
EMI7.3
clasa6e.
L'anhydro kapo mitomycino 3, administrée on une sim- ple dose sous-cutanée, est efficace à un taux aussi bas que 1 mg/kg pour la protection à 93% de souris infestées par une
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dose toxique de la souche S t a phylo o t ce Lta aureus de Smith au moyen d'un ED54 de 0,5-1#0*mg/kg de poids du corps. Dans les mêmes conditions, la mitomycine les protège seulement à 33%.
Toutes celles infectées que l'on n'a pas traitées sont mortes en 1 à 2 jours. D'après ces conditions de test, le nouveau produit se révèle de 2-4 fois plus actif que la mitomycine et 8 fois moins toxique.
Dans les mêmes conditions, et sur la même souche,
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l'anhydroporfiromycine donne un BD 50 de 2-8 mg/kg de poids du corps.
Dans les mêmes conditions de tests et toujours sur
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la souche de Smith de Stnohlococcus aureus, excepté que l'on administre le médicament par voie orale unique par tubage, l'anhydre apo In1tomycine A donne un BD 50 de 8 + 16 mg.kg de poids de corps.
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Les exemples suivants fournissent des explications détaillées sur la présente invention. Les parties sont exprimées en poids, sauf indication contraire.
EXEMPLE 1
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Préparation de l'anhydro à mitoaycine B
On ajoute 25 et 14 parties de mitomycine B à une suspension de 25 parties d'oxyde de platine dans 3.000 parties
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de N,N-diméthylformamide en atmosphère hydrogénée dans un appareil d'hydrogénation. On agite le mélange réactionnel jus- qu'à ce que la couleur bleue disparaisse et qu'une molécule d'hydrogène ait été consommée. On élimine alors le catalyseur par fil'tration à travers une terre d'infusoirea et on fait évaporer le filtrat à basses température et pression. On trans-' porte le résidu séché dans 1.000 parties d'éthanol absolu et on fait barboter de l'air à travers la solution pendant 10 minutes.
On élimine par filtration les cristaux oranges qui se sont formés après l'oxydation par l'air, on les lave avec.
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un peu d'éthanol et on les abene moue vide. Le rendement dwa ,. cristaux oranges bruts est de 11 parties, On obtient un .upp14 ment à partir de la liqueur-mère. On purifie le produit par recristallisation à partir de la pyridine ou de l'éthanol.
Analyse !
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Calculé pour 0,6H17N,05 0=58,00; H=5,7?f N=12#68; Hm5947i "12,6i..
EXEMPLE 2 Préparation de la IT-aéthylmitomycine A On traite une solution de 41,5 mg de bicarbonate de soude dans 1,25 em3 d'eau par 1,25 ca3 de diméthylformamide et 10 mg de mitomyoine A puis on ajoute 0,5 cm3 d'ibdure de
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aéthyle"exempt d'acide. On ajoute le mélange dans un récipient fermé pendant 5 heures environ et on le laisse reposer une nuit à la température ambiante. On aère le mélange réactionnel
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ci-dessus avec de 1'.azote -pour éliminer 1'excès d'iodure de méthyle puis on le fait évaporer à siccité sous vide. On extrait le résidu avec du chloroforme et, après évaporation à sircité, on extrait ledit extrait par l'éther, L'évaporation
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de la solution éther donne la N-méthylmitomyoine A.
Ensuite, on procède à la purification par partage chromatographique liquide-liquide. On cristallise le produit, purifié (6,8 mg) partir du tétrachlorure de carbone et de l'heptane.
EXEMPLE 3
Préparation de l'anhydpo apo mitomycine B
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On réduit 2. parties de la-N-eéthylmitomycine A préparée dans l'exemple 2, dans 300 parties de I,N.dira6thyl l'ormamide avec de l'hydrogène et 0#2 partie d'oxyle de plati- ne. Après réduction, la solution pourpre devient incolore,, Après élimination du catalyseur et de l'oxydant,, on élimine
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le solvant a basse température ut on obtient un r4ndu orange.
On cristullise le produit brut de l'ethanol. Le rendement des cristaux oranges est u '0,9 partie aprba filtrage et né- c4age sous vide. Le produit "est identique à celui obtenu par réduction de la mitcnlyeinb B'dans 11 le EXEÎ.JP1S Préparation d I$w iliy4ro Uo mitosycine A ######################### On réduit une édition de 25 mu- de raitcuyclne A dans 3 cm3 de dthylforamide par l'hydrogène en Utilisant 2,5 mg de catalyseur Pt02 jusqu'à ce que la r'.ijLCtion devienne jaune pâle. On filtre la réaction, on la lave avec 1 em3 de diméthylformamide et en l'o.%. .yd* l' ai r k,endznt 5 minutes.
On élimine le solvant sous vide, sans chauffer et on purifie chromatogràphiquemcnt le proauit brut en utili.unt un système de solvant cyclohexane, EcOAet d:.dthylfora:.ide, H20 (110; 90, 40; 5)' On obtient des crdâtux li f e4,omont oritnjea à par- tir de l'acétate d'ethylo avec un reniement- Ae 21.', en poids,
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point de fusion 205-250 avec décomposition.
EXEMPLE 5
Préparation de l'anhydre apo perfiromycine
On enferme, en scellant, un échantillon de 31,5 mg d'anhydro apo mitomyoine B dans un tube Carius avec 5 cm3 d'ammoniac liquide et on secour pendant 18 heures à la tempé- rature. ambiante. On descelle alors et on laisse l'ammoniac s'évaporer. Le produit obtenu à raison de 65% en poids, est sous forme de cristaux pourpres à partir d'acétone.
REVENDICATIONS 1.- composé de formule :
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dans laquelle R est un group) allcyle inférieur, R1 est un groupe méthoxy OM amino et R2 est un atone d'hydrogène ou un groupe méthyle.
2.- Anhydro apo mitomycine 3.
3.- Anhydro apo mitomyoine A.
4.- Anhydro apo porfiromycine.
**ATTENTION** fin du champ DESC peut contenir debut de CLMS **.
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the present invention relates to novel antibiotic substances which can be represented by the following formula:
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wherein R is lower alkyl, R is an ethoxy or amine group and R 2 is hydrogen or methyl.
The new compost according to the invention are crystalline solids of orange color and are endowed with weak basic properties. They are relatively insoluble in water, ethyl ether, petroleum ether, They are very poorly soluble. in solvents such as benzene, toluene, chloroform and the like, but relatively soluble in ethanol, pyridine, dimethylformamide, and the like.
The infrared and ultraviolet absorption patterns are characteristic and help to distinguish and identify new substances.
The new compounds are active in vitro against a variety of microorganisms including gram-positive and grain-negative bacteria. Two tests carried out on mice in vivo, demonstrate that the new antibacterial compounds are extremely active when administered orally or subcutaneously to mice infested with a toxic dose of a strain of Smith's Staphylococcus aureus.
The newer substances have also been found to be about as effective as triethylemelamine in treating
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72-day adenocarcinoma in C3H mice.
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Some of these compounds are prepared from mitomycin A or mitomycin B, a group of new antibiotics with significant anti-tumor activity and
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described by Hâta et al in "J.Anti'biotics, Sers A, .iXs" fi 4, 141, (July 1956).
Thus, to prepare the product which may be designated under the name of anhydroapo mitonycin B, for which; in the above formula it is a methyl group, R1 is
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a methoxy group and R2 is a methyl group, preferably the mitoyne B is dissolved in a suitable polar solvent. such as water, dioxane, 2-methoxyethanol, 2-4thoxy- '
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ethanol, ethyl acetate, methanol, ltdthmolo dimethylformamide, dimethylsulfoxide, d1methylaclStlal41d., etc ... before contacting the solution with hydrogen in the presence of a noble metal catalyst preferably
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from ptl.1J.n4:
Finely divine metallic LWIi u has an a * at4 ipetal of the palladium family.
The catalyst can be employed as a pure metal or suspended on any of the ordinary supports such as finely divided alumina, activated carbon, diatomaceous earth, etc. The catalyst can be used. hydrogenation at temperatures in the range of 0 to 50 C and, preferably,
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about at room temperature, i.e. around 4th 2509 # and under hydrogen pressure of about one atmosphere,
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A catalyst concentration of at least 1 by weight of the starting material is required and up to 100% by weight can be used; usually we use
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10 to 20%.
The hydrogenation is generally carried on until one molecule of hydrogen has been absorbed, at which point the rate of absorption tends to decrease. Care must be taken not to continue said hydrogenation beyond the time
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normal to prevent unwanted reductions from occurring,
After the end of the hydrogenation. the reduced product is recovered by the desired means, for example, by removing the catalyst and concentrating the solution. The reduced product is oxidized with air, oxygen, benzoquinone or other similar oxidizing agents and the final product is recovered from the reaction mixture by filtration, washing with alcohol and drying in vacuo.
The final product can be purified by recrystallization from ethanol or pyridine or dimethylformamide, etc., according to standard methods.
We can alternatively use the product called N-methylmitomcin A of formula:
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as a starting material for the preparation of the anhydrous apo mitomycin B. The conditions necessary for the catalytic hydrogenation of N-methylmitomycin A and the subsequent reoxidation in air are practically identical to those described above in connection with reduction and oxidation of mitomycin B.
The conditions necessary for the preparation of the product which may be called anhydroapo mitomycin A, in formula (I) of which R is a methyl group, R1 is a methoxy group and R2 is a hydrogen atom, of which practically identical to those outlined for the preparation of anhydroapo mitomycin B.
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In order to prepare the product which can be designated anhydro apo porfiromycin, in the formula of which (formula above), R is a methyl group, R1 is an amine group and R2 is a methyl group, it is necessary to simply subject the anhydro apo mitoaycyne B to treatment with ammonia for a sufficient time for the desired amination to be accomplished. The reaction conditions are not critical and can be carried out at room temperature for 2 to 20 hours.
The new products of the present invention have broad spectrum antibacterial activity. The anti-bacterial spectrum of the new compounds, representing the amount required to inhibit the growth of different typical bacteria, is determined according to a standard method by the streak plate agar dilution technique commonly used to test for bacteria. new antibiotics, The minimum inhibitory concentrations expressed in gamma per cm3, new produced on the test organisms are shown in the table below.
To allow comparison. the anti-bacterial spectra of mitomyoin B have also been indicated,
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! rA3LEA.tJ
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Organism Anhydro aJ) c Anhydro 4IDo Anhydro apo Kitonycin 11 Mitomycin B itomycne A Porfiromyoine 1,1-ycobacterium emermatis ATCC 607 10 1925 Staphvlococcus aureus 209P 195 0.64 25 20
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<tb> Sarcina <SEP> Lutea <SEP> 1001 <SEP> 0.62 <SEP> 0.04 <SEP> 25
<tb> Bacillus <SEP> subtilis
<tb>
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ATCC 6633 0.62 0.16 391 5 Streptococcus faeealia 2.5 2.5 125 20 ATCC 6043 125 Streptococcus pyoenes 203,. :
- 0.02 0, .02, 1. 5 0.62 Streptococcus pyogene3 -'Y-5 0.15 - - 1, 25 tretococcus 1f ne 11 2.5 1.25) 25 20 Stri2hylococcus albus ne 69 0.16 0.16 25 10 Stren + tetanus ococcus 80, 2.5 1.25 '> 25 20
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BOARD! (After)
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Organism Anhydro a a Anhydrous apo Anhydrous apo itomyc1n B ¯ ¯ #> ¯¯¯ Mitosycin B:
3toycin A Porfirosysin
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<tb> Staphylococcus <SEP> aureus <SEP>
<tb>
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NY 104 z5 - 20 Bacillus Cereus n 5 0.62 1925 25 20 Klebs1ella pneumon1ae 2.5 - lt25> 25 20 Alcaligenes e2, ATOC 10153 2.5 5 25> 20 ÇoràMebacterium xeroe3e N .. '4ilaW B-1397 0, 02 0.02 12.5 Salmonella lallinarum 10 20> 25 7 20 Escherichia colt. nl 22 2.5 1.25 T 25> 20 Klebsiella pneumonit, A Strain AD 0962 1925> 25> 20
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As indicated, the new products are very effective in vivo on certain standardized infections.
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mice, Smitli's Starhylococcus aureus for example, Smith's Staphylococcus aureus strain has been studied at the Rockefeller Institute and described by J.M. Smith and R. J.
Dubos in the "Journ. Expt. Lied." 103, 87 (1956). The strain in question is positive for coagulase, negative for. tellurite, and sensitive, in vitro, to tetracycline.
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penicillin, streptomycin, erythromycin, carbomycin, neomycin, chloramphenicol and zovobiocin. Attempts were made to determine the type phase of this strain but found that it was not likely to be
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classed.
Anhydro kapo mitomycino 3, administered as a single subcutaneous dose, is effective at as low as 1 mg / kg for the 93% protection of mice infested with
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toxic dose of Smith's strain S t a phylo o t ce Lta aureus using an ED54 of 0.5-1 # 0 * mg / kg body weight. Under the same conditions, mitomycin protects them only 33%.
All those infected that were not treated died within 1 to 2 days. According to these test conditions, the new product is shown to be 2-4 times more active than mitomycin and 8 times less toxic.
Under the same conditions, and on the same strain,
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anhydroporfiromycin gives a BD 50 of 2-8 mg / kg body weight.
Under the same test conditions and always on
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Smith's strain of Stnohlococcus aureus, except that the drug is administered only orally by tubing, the anhydrous apo In1tomycin A gives a BD 50 of 8 + 16 mg / kg body weight.
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The following examples provide detailed explanations of the present invention. Parts are expressed by weight, unless otherwise indicated.
EXAMPLE 1
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Preparation of mitoaycin B anhydro
25 and 14 parts of mitomycin B are added to a suspension of 25 parts of platinum oxide in 3,000 parts.
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of N, N-dimethylformamide in a hydrogenated atmosphere in a hydrogenation apparatus. The reaction mixture is stirred until the blue color disappears and one molecule of hydrogen has been consumed. The catalyst is then removed by filtration through diatomaceous earth, and the filtrate is evaporated at low temperature and pressure. The dried residue is transported into 1000 parts of absolute ethanol and air is bubbled through the solution for 10 minutes.
The orange crystals which formed after the oxidation with air are filtered off and washed with.
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a little ethanol and we abene pout empty. The yield dwa,. raw orange crystals is 11 parts. A supplement is obtained from the mother liquor. The product is purified by recrystallization from pyridine or ethanol.
Analysis!
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Calculated for 0.6H17N, 0 0 = 58.00; H = 5.7? F N = 12 # 68; Hm5947i "12.6i ..
EXAMPLE 2 Preparation of IT-aethylmitomycin A A solution of 41.5 mg of sodium bicarbonate in 1.25 em3 of water is treated with 1.25 ca3 of dimethylformamide and 10 mg of mitomyoin A then 0.5 cm3 is added. ibdure of
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Acid-free ethyl ". The mixture is added in a closed vessel for about 5 hours and allowed to stand overnight at room temperature. The reaction mixture is aerated.
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above with nitrogen to remove excess methyl iodide and then evaporated to dryness in vacuo. The residue is extracted with chloroform and, after evaporation to sircité, said extract is extracted with ether.
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ether solution gives N-methylmitomyoine A.
Then the purification is carried out by liquid-liquid chromatographic partitioning. The product, purified (6.8 mg) is crystallized from carbon tetrachloride and heptane.
EXAMPLE 3
Preparation of anhydpo apo mitomycin B
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2. parts of 1-N-Eethylmitomycin A prepared in Example 2 are reduced in 300 parts of I, N-dira6ethyl hormamide with hydrogen and 0 # 2 part of platinum alkyl. After reduction, the purple solution becomes colorless ,, After removal of the catalyst and the oxidant, the
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the solvent at low temperature ut an orange r4ndu is obtained.
The crude product is crystallized from ethanol. The yield of the orange crystals was 0.9 parts after filtering and filtering in vacuo. The product "is identical to that obtained by reduction of the mitcnlyeinb B 'in the EXEÎ.JP1S Preparation of I $ w iliy4ro Uo mitosycin A ##################### ##### We reduce an edition of 25 muraitcuyclne A in 3 cm3 of ethylforamide by hydrogen using 2.5 mg of Pt02 catalyst until the r'.ijLCtion turns pale yellow. The reaction is washed with 1 em 3 of dimethylformamide and in the o.% .yd * l 'ai rk, endznt 5 minutes.
The solvent is removed in vacuo, without heating, and the crude product is chromatographically purified using a cyclohexane, EcOA and d: .dthylfora: .ide, H2O (110; 90, 40; 5) solvent system. li f e4, omont oritnjea from ethyl acetate with a denial- Ae 21. ', by weight,
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melting point 205-250 with decomposition.
EXAMPLE 5
Preparation of apo perfiromycin anhydrous
A sample of 31.5 mg of anhydro apo mitomyoine B is sealed in a Carius tube with 5 cm3 of liquid ammonia and rescued for 18 hours at temperature. ambient. We then unseal and allow the ammonia to evaporate. The product obtained in an amount of 65% by weight is in the form of purple crystals from acetone.
CLAIMS 1.- compound of formula:
EMI10.1
wherein R is a lower alkyl group, R1 is a methoxy OM amino group and R2 is a hydrogen atom or a methyl group.
2.- Anhydro apo mitomycin 3.
3.- Anhydro apo mitomyoine A.
4.- Anhydro apo porfiromycin.
** ATTENTION ** end of DESC field can contain start of CLMS **.