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Peptides et derives peptidiques, leur préparation et leur utilisation comme medicaments
L'invention concerne en particulier les composes de formule I
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dans laquelle A represente l'hydrogène ou un substituant, 8 represente un groupe hydroxy ou un substituant, au moins un des symboles A et B devant représenter un reste peptidique, R represente l'hydrogene, un groupe alkyle, cycloalkyle, cycloalkylalkyle ou un groupe aryle, aralkyle, hétéroaryle ou heteroarylalkyle eventuellement substi- tues dans le reste aryle ou heteroaryl,
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R, represente un groupe hydroxy, alcoxy ou acyloxy et R2 represente l'hydrogene, ou bien Rl et R2 representent ensemble un groupe oxo et R-ä R,., independamment les uns des autres, represen- tent l'hydrogène, le fluor, le chlore, un groupe alkyle, cycloalkyle,
cycloalkylalkyle, ou un groupe aryle, aralkyle, heteroaryle ou heteroarylalkyle eventuel- lement substitues dans le reste aryle ou hétéroaryle au moins un des symboles R3 à R6 devant signifier le fluor ou le chlore, et les formes isostères de ces composes.
Les composes de formule I et leurs formes isostères seront designes par la suite"les composes de l'invention".
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Les composes preferes de formule I sont ceux dans lesquels Rr et R6 ne signifient pas tous les
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deux le fluor, lorsque R3 et R4 ont tous les deux une signification autre que le fluor.
Un groupe prefere de composes de 1'invention est celui comprenant les composes de formule Ia-
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dans laquelle R et R, à R6 ont les significations donnees precedemment, X represente l'hydrogène ou un groupement bloquant le groupe amino terminal d'un peptide, Y represente un groupe hydroxy ou un groupement bloquant le groupe carboxy terminal d'un peptide, l'un des symboles A et Ba represente un reste peptidique a a et l'autre est une liaisonou un reste peptidique, et les formes festers de ces composes.
Un groupement bloquant le groupe amino terminal d'un peptide est par exemple un groupe alcoxycarbonyle contenant au total de 2 ä 10 atomes de carbone, un groupe alcanoyle contenant au total de 2 ä 25 atomes de carbone, un groupe cycloa1kylcarbonyle contenant au total de 4 à 8 atomes de carbone, un groupe aroyle, ou un groupe lkylsulfonyule contenant au total de 1 ä 10 atomes de carbone, specialement un groupe alcoxycarbonyle contenant au total de 4 A 6 atomes de carbone, en particulier un groupe tert. -butoxycarbonyle (80C), ou un groupe alcanoyle contenant au total de 2 ä 6 atomes de carbone,
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en particulier un groupe isovaleryl (Iva). Les groupes cycloalkylcarbonyle contiennent de preference un total de 4,6 ou 7 atomes de carbone.
Le groupe aroyle est de préférence un groupe benzoyle. Le groupe alkylsulfo- nyle contient de preference de 3 ä 6 atomes de carbone, et est de preference ramifie.
Un groupement bloquant le groupe carboxy terminal d'un peptide est par exemple un groupe hydroxy, un groupe alcoxy en C.-Cc. amino, alkylamino en C,-C-, dialkylamino dans lequel chaque reste alkyle independamment est en C1-C6, un groupe (1-benzylpip$ridine-4yl) amino ou un groupe (-yridine-2-yl)méthylamino, en particulier un groupe alcoxy en C.-Cr, amino, alkyla-
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amino en CI-CS' (1-benzylpipêridine-4-yl) amino ou (pyrtdine-2-yl) méthylamino, spêcialement un groupe alcoxy en C,-C, en particulier un groupe methoxy ou ethoxy.
Un reste peptidique est de preference constitue de un oude plusieurs restes d'amino-acides. Lorsqu'un reste peptidique contient plusieurs restes d'amino-acides, ceux-ci sont normalement relies par un groupe carbamoyle peptidique, c'est6-à-dire par un groupe-CONH-.
Cependant, un compose de l'invention peut éventuellement être sous une forme isostère, c'est-ä-dire, par exemple, contenir un ou plusieurs groupes carbamoyle peptidiques sous forme isostere ou contenir un ou plusieurs restes d'amino-acides ayant une configuration non naturelle lorsqu'il existe le correspondant naturel.
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Un groupe carbamoyl peptidique sous forme isostere est par exemple un groupe-CHNH- (redu-it), - COCH- (ceto),-CH (OH) CH- (hydroxy),-CH (NH) CH- (amino), -CH2CH2- ou -CH2CH2CH2- (hydrocarboné).
Un compose de 1'invention ne contient de preference
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aucun groupe carbamoyl peptidique sous forme isostere.
Lorsqu'il contient des groupes carbamoyl peptidiques sous forme isostère, i1 contient de preference un ou deux groupes, en particulier un groupe carbamoyl sous forme isostere.
Un reste peptidique est de preference constitue de restes d'amino-acides naturels ayant la configuration naturelle. Lorsque des restes d'amino-acides ont la configuration non naturelle, le reste peptidique contient de preference seulement un ou deux restes d'amino-acides ayant la configuration non naturelle.
Les restes d'amino-acides tels qu'utilises selon l'invention comprennent ecalement les restes d'imino-acides tels que ceux de la proline et de l'hydroxyproline.
Un reste peptidique est de preference constitué de 1 ä 7 restes d'amino-acides.
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La partie R - ' R1 R2 RS R6 Ri R2 Rs R6 de la formule I represente un reste d'amino-acide de l'homostatine ou de ses derives. Cette partie a de preference la meme configuration que la statine naturelle en ce qui concerne l'atome de carbone auquel R est fixe
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lorsqu'il est asymétrique. L'atome de carbone auquel R, et R2 sont fixes a de preference la configuration R lorsqu'il est asymétrique.
Les groupes alkyle contiennent de preference de 1 ä 5 atomes de carbone ; ils sont en particulier ramifies et signifient plus specialement un groupe isobutyle. Les groupes cycloalkyle contiennent de preference de 3 ä 7 atomes de carbone et signifient
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en particulier un groupe cylopentyle ou cyclohexyle.
Les groupes cycloalkylalkyle contiennent de preference de 3 à 7 atomes de carbone dans le reste cycloalkyle, en particulier 5ou 6 atomes de carbone, et de 1 ä 5 atomes de carbone, en particulier 1 atome de carbone, dans le reste alkylène. Les groupes aryle signifient de preference un groupe phényle. Les groupes aralkyle signifient de préférence un groupe phénylalkyle en C7-C12 , en particulier un groupe benzyle. Les groupes hétéroaryle signifient de preference un groupe pyridinyle, en particulier 4-pyridinyle, un groupe thiényle, en particulier 2-thienyl, ou un groupe furyle, en particulier 2-furyle, plus préférablement un groupe pyridinyle. Les groupes heteroarylalkyle contiennent de preference de 1 ä 6 atomes de carbone, en particulier 1 atome de carbone dans le reste alkylène.
Le reste hétêroaryle des groupes heteroarylalkyle a de preference les significations preferees citees plus haut pour le groupe heteroaryl. Lorsque le reste aryle ou aralkyle est substitue, il comporte de preference un ou deux substituants choisis parmi les halogenes ayant un nombre atomique de 9 ä 35 et les groupes alkyle en Cl-C5' alcoxy en C,-Ce. hydroxy et amino, de preference un ou deux substituants choisis parmi le chlore, 1e brome et les groupes methyle, methoxy, hydroxy et amino, en particulier un groupe hydroxy, amino, chloro ou bromo, si necessaire eventuellement sous une forme protegee.
Les groupes alcoxy contiennent de preference 1 ä 5 atomes de carbone et signifient en particulier un groupe methoxy. Les groupes acyloxy contiennent de preference de 2 ä 6 atomes de carbone et signifient en particulier un groupe acetoxy.
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X signifie de preference un groupement bloquant le groupe amino terminal d'un peptide.
Y signifie de preference un groupement bloquant le groupe carboxy terminal d'un peptide.
A signifie de preference un reste peptidique.
B signifie de preference une liaison ou un reste peptidique, plus preferablement un reste peptidique.
De preference, A et B contiennent ensemble a a au moins 2 restes d'amino-acides et au total pas plus de 10 restes d'amino-acides. A et B ont de preference a a des significations similaires aux significations correspondantes pour les inhibiteurs connus de la rénine, par exemple : pour A : une liaison a - His- - Phe- - Leu- -Nle- -Phe-Phe- - Val-Val- - Phe-leu- -Phe-Nle- -Phe-His- - Pro-Phe-His- et
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pour Ba : une liaison a - He- -Leu- - Val- - Va1-Phe- -Val-Tyr- - Leu-Phe- - le-Phe- - I1e-His-
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- Ala-Phe- - Phe-Phe- -Leu-Tyr- - Leu-Val-Phe- -Val-Ile-His- - He-His-Lys-
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- Val-Ile-His-Lys-.
R signifie de preference un groupe alkyle ou cycloalkylalkyle, R1 signifie de preference un groupe hydroxy ou, ensemble avec R2, un groupe oxo ; en particulier, R, et R2 forment ensemble un groupe oxo.
R3 signifie de preference le fluor, R4 signifie de preference l'hydrogène ou le fluor, plus spécialement le fluor. Rus signifie de preference
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le fluor. R6 a de preference une signification autre que D l'hydrogene, et signifie en particulier le fluor ou un groupe alkyle, de preference un groupe alkyle.
De preference, trois des symboles R3 à R6 signifient le fluor ou le chlore et le quatrième a une signification autre que l'hydrogéne, que le fluor ou que le chlore ; en particulier R-, R. et R5 signifient le fluor et
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Rus un groupe alkyle.
Un groupe prefere de composes de l'invention est celui comprenant les composes de formule Iaa,
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dans laquelle X et Y ont les significations donnees précédemment. l'un des symboles A et Baa represent un reste aaaa
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peptidique contenant de 1 à 7 amino-acides et l'autre est une liaison ou un reste peptidique contenant de 1 ä 7 amino-acides, Ra représente l'hydrogène, un groupe alkyle en Cl-C10' un groupe cycloalkyle en C3-C10 , un groupe cyclo- alkylalkyle dans lequel le reste cycloalkyle contient de 4 ä 10 atomes de carbone et 1e reste alkylène de 1 ä 5 atomes de carbone,
un groupe phenyle ou phenylalkyl en C7-C12 dans lesquels le cycle phenyle porte eventuellement un ou deux substituants choisis parmi les halogènes ayant un nombre atomique de 9 ä 35 et les groupes hydroxy, amino, alkyle en C,-C. et alcoxy en
C1-C5, un groupe pyridinyle, thienyle ou furyle,
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un groupe pyridinylalkyle en Ce-C.,, un groupe thiény1alkyle en C5-C10 ou un groupe furylalkyle en Cg-C, Rua represent un groupe hydroxy, alcoxy en C,-C. f o'b ou alcanoyloxy en C,-Cr et R2a représente l'hydrogène, ou bien Rla et R2a forment ensemble un groupe oxo, ! a a R,,R, et R5a représentent indépendamment le fluor ou le chlore et R6a reprêsente l'hydrogène.
le fluor, le chlore, un ba groupe alkyle en C1-C5, un groupe cycloalkylalkyle dans lequel le reste cycloalkyle contient de 3 ä 7 atomes de carbone et le reste alkylène de 1 ä 5 atomes de carbone, un groupe phenyle ou phénylalkyle en C7-C12 dans lesquels le cycle phenyle porte éventuellement un ou deux substituants choisis parmi les halogènes ayant un nombre atomique de 9 à 35 et les groupes hydroxy, amino, alkyle en C1-C5 et alcoxy en C1-C5, un groupe pyridinyle,
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thienyle ou furyle, un groupe pyridiny1a1ky1e en C,-C.,, un groupe thienylakeen Cr-Co ou un groupe furylalkyle en C-C, , et les formes isostères de ces composes.
Un groupe de composes particulierement préférés est celui comprenant les composes de formule Iaaa
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dans laquelle
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X, Y, A et Baa ont les significations donnees aa a precedemment, R represente un groupe alkyle en Cl-C'0 ou cycloalkyla a < ) u alkyle en C4-C12' R-represente le fluor, le chlore ou un groupe alkyle aa en C1-C5, Rl représente un groupe hydroxy et R2 1'hydrogène, ou bien R, et R3 forment ensemble un groupe oxo et 1aa 2aa
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R 3aa'R 4aa et R5aa reprüsentent le fluor, Jaa aa haa et les formes isostères de ces composes.
Un groupe de composes spécialement preferes est celui comprenant les composes de formule 1,,,, aaaa
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dans laquelle R. R,@@, R2 et R# ont les significations donnees aa 1aa, 2aa 6aa precedemment,
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X représente l'hydrogène, un groupe alcoxycarbonyle a contenant au total de 2 à 25 atomes de carbone ou un groupe alcanoyle contenant au total de
2 ä 25 atomes de carbone,
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ya represente un groupe hydroxy, alcoxy en C,-Cr, a t o amino, alkyl amino en C1-C5, par exemple isobutylamino ou 2-méthylbutylamino, un groupe (1-benzyl-
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pipéridine-4-yl) amino ou un groupe (pyridine-2-yl) methylamin ;
un des symboles Aaaa et Baaa represente un reste peptia a a a a a dique contenant de 1 ä 7 amino-acides naturels sous leurconfiguration naturelle, et
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l'autre represente une liaison ou un reste peptidique contenant de 1 ä 7 amino-acides naturels sous leur configuration naturelle, et les formes isostères de ces composes.
A signifie de preference une liaison, aaa -Phe-Phe-, -Phe-His-, Phe-Nle-, Phe-Leu-, -Val, -His-Pro-Phe-His-, spécialement une liaison, Phe-Pheou-Phe-His-.
B signifie de preference une liaison, aaa
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- Val-Phe-,-Ile-His-,-Leu-Phe-,-Ala-,-Leu-,-Ile-Phe-ou - le-, specialement-Ile-,-Leu-, ou-Val-Phe-.
Dans la presente description, on utilise les abreviations suivantes :.
BOC-tert-butoxycarbonyle His-L-histidine Iva = isovaléroyie
Ile=L-isoleucine
Leu=L-leucine Lys,. L-lysine
Phe=L-phénylalanine
Pro=L-proline
Try=L-tyrosine
Val-L-valine BLY = acide (2S)-2-amino-(4E)-hexénolque
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* statine = acide 4-amino-3-hydroxy-6-méthylheptanolque * statone = acide 4-amino-3-oxo-6-methylheptanolque * homostatine = acide 5-amino-4-hydroxy-7-méthyl- octanolque * homostatone = acide 5-amino-4-oxo-7-méthyloctanolque * ch-homostatine = acide 5-amino-6-cyclohexyl-4-hydroxy- hexanolque * ch-homostatone = acide 5-amino-6-cyclohexyl-4-oxo- hexane'que * La configuration absolue est specifiquement indiquee dans le texte.
Un composé de l'invention peut se presenter sous forme libre, par exemple sous forme amphotère. ou sous forme de sei, par exemple sous forme de sel d'addition d'acide ou sel anionique. Un compose sous forme libre peut être transforme en sel selon les methodes connues et vice-versa. Comme sel, on peut citer par exemple le trifluoroacétate, le chlorhydrate, et les sels de sodium, de potassium et d'ammonium.
L'invention concerne egalement un procede de preparation des composés de l'invention , caractérisé en ce qu'il comprend le couplage de deux restes peptidiques approprias, ou leursprecurseurs. et, si necessaire, la transformation de manibre appropriée de tout produit sous forme de précurseur ainsi obtenu.
Le procede est effectué de manière analogue aux methodes connues. Un precurseur d'un reste peptidique est par exemple un compose sous forme protée, par exemple ayant un groupe terminal amino et/ou carboxy protégé que l'on desire eliminer ou remplacer dans 1e compose de l'invention devant être obtenu, ou un autre groupe fonctionnel tel qu'un groupe hydroxy que l'on desire
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transformer en un autre groupe fonctionnel tel qu'un groupe \oxo. Un reste peptidique peut par exemple etre un reste d'un unique amino-acide selon 1a longueur de la chaine du peptide que 1'on desire obtenir. Ce qui a été indique ci-dessus s'applique, en tenant compte des changements necessaires, aux formes isosteres.
Le couplage est effectue selon les méthodes generale connues dans la synthèse des peptides.
On opère par exemple dans un solvant inerte tel que le diméthylformamide, de preference ä une temperature comprise entre 0 et 25 C. Le couplage est effectue de preference sous des conditions alkalines , par exemple en utilisant la N-methylmorpholine.
La transformation eventuelle est egalement effectuee de manière analogue aux methodes connues.
L'oxydation d'un groupe hydroxy en groupe oxo est par exemple effectuee dans un solvant inerte tel que le chlorure de methylene. L'agent d'oxydation est par exemple un complexe trioxyde de chrome-dipyridinium.
L'oxydation peut être effectuee ä une temperature comprise entre environ 0 et environ 50 C, de preference ä la temperature ambiante.
Les composes de l'invention peuvent etre isoles du melange reactionnel et etre purifiés de manière analogue aux methodes connues. Les racémiques et/ou 1es mélanges de diastéréoisomères peuvent etre
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separes selon les méthodes connues.
Lorsque la préparation d'un produit de depart n'est pas decrite en detail, cette preparation peut être effectuee selon les methodes classiques ou de maniere analogue ä celle decrite dans la presente demande de brevet.
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Les exemples suivants illustrent la presente invention sans aucunement en limiter la portee. Dans ces exemples, toutes les temperatures sont donnees en degrés Celsius et sont non corrigees. La purete des composes obtenue a êté contrölee par chromatographie liquide HPLC avec les temps de retention obtenus en utilisant une colonne Lichrosorb RP8 (diamètre 4 mm, longueur 250 mm) et un gradient desolution tamponnee (acetonitrile/eau, pH5) (10 ä 90% en 40 minutes) ä un debit de 1, 5 ml/min.
Exemple 1
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N-BOC (4R, 5S} -2-isobutyl-2, 3, 3-trifluoro-homostatineVal-OCHo (couplage des restes peptidiques)
On melange 150 mg d'un melange de diastereoisomeres du N-BOC-(4R,5S)-2-isobutyl-2,3,3-trifluoro-homostatiine- OCH-avec 80 mg d'ester methylique de la valine et on chauffe pendant 24 heures ä 800. On laisse refroidir le melange réactionnel. on le verse dans une solution de bisulfate de potassium, on l'extrait à l'ether, on seche la phase organique et on l'evapore. Le residu est Chromatographie sur gel de silice en utilisant un melange 50 : 1 de chlorure de methylene et d'ether comme éluant.
On obtient deux composes diastereoisomeres :
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20 - isomère A : [a] =-32 (c = 0, 88 dans CH2C12)' temps de retention 38 minutes - isomere B : [al = -290 (c = 0, 85 dans CHZC12)' D 2 2)' temps de rétention 37, 5 minutes.
Le produit de depart peut etre obtenu comme suit : a) On dissout 0, 85 9 de sodium dans 15 ml d'ethanol et on ajoute successivement 5 ml de fluoromalonate de diéthyle et 4,5 ml d'iodure d'isobutyle. On agite le melange pendant 15 heures ä 600, puis on 1'extrait
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à l'ether. On obtient ainsi le 2-fluoro-2-isobutylmalonate de diethyl (E = 1550 I 16 mm Hg). b) On dissout 5, 5 9 de 1'ester diéthylique ci-dessus dans 100 ml de dioxanne et on ajoute une solution de 0, 95 g d'hydroxyde de sodium dans 60 ml d'eau.
Après 15 heures, on concentre la solution sous pression réduite, on dissout le residu dans de l'eau et on 1'extrait ä l'éther. On acidifie la phase aqueuse avec de l'acide phosphorique et on la
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reextrait ä l'ether. Après evaporation à la température ambiante de la phase organique, on obtient le monoester éthylique de l'acide 2-fluoro-
2-isobutyl-malonique (ä l'êta brut). c) On dissout 4, 05 g du monoester ethylique ci-dessus et 3 g de n-BOC-(4S,3R)-2,2-difluorostatine dans
25 ml de methanol et on neutralise avec 4 ml de triéthylamine. On électrolyse le melange pendant 6 heures ä 15-200 en utilisant un courant d'environ
1 A.
On dilue le mélange reactionnel avec de l'ether, on le lave avec une solution aqueuse de bisulfate de potassium et une solution aqueuse de bicarbonate de sodium et on l'évapore ä sec. On chromatographie le résidu sur gel de silice en utilisant un melange 1 : 2 d'hexane et d'ether comme éludant. On obtient ainsi le N-BOC- (4R, 5S)-2- isobutyl-2,3,3-trifluorohomostatione-OC2H5 sous forme d'un melange de diastereoisomeresayant un Rf d'environ
0, 35 (gel de silice, éther / hexane 1:1).
La N-BOC-(4S,3R)-2,2,-difluorostatine utilisée ä l'étape c) est obtenue comme suit : a') Dans 30 ml de tetrahydrofuranne, on met en suspension
1, 45 g de poudre de zinc et on chauffe à 1a temperature du reflux. On ajoute en une fois 4, 4 g de bromodifluoro-
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acetate d'éthyle et, dès qu'une réaction vigoureuse se declenche, on ajoute goutte à goutte 2 9 de N-BOC-L-leucinal dissous dans 5 ml de tétrahydrofuranne. Après 30 minutes, on laisse refroidir le melange réactionnel, on le reprend dans de l'acetate d'ethyl et on lave avec de l'acide tartrique 2N.
On seche la phase organique sur sulfate de magnesium, on l'evapore ä sec et on chromatographie le residu sur gel de silice en utilisant un melange 2 : 8 d'éther et d'hexane comme eluant. On obtient ainsi 1'ester ethylique de 1a N-BOC- (4S, 3R)-2, 2-difluorostatine
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20 [a] =-12, 2 , c = 0, 29 dans l'ethanol). b') On dissout 1 g d'ester éthylique de la N-BOC- {4S, 3R) -
2, 2-difluorostatine dans un melange de méthanol et d'eau et on fait reagir avec 0, 25 g d'une solution aqueuse concentree d'hydroxyde de sodium. Apres
2 heures, on acidifie le melange avec une solution
2N d'acide tartrique et on l'extrait avec de l'ace- tate d'ethyle. On seche la phase organique sur.' sulfate de magnesium et on l'évapore à sec. On obtient ainsi la N-BOC-(4S,3R)-2,2,-difluorostatine
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(à l'état brut).
Exemple 2 N-BOC-Phe-Phe- (5S)-2-isobutyl-2, 3, 3-trifluorohomostatone- Val-OCH3 (transformation du précurseur par oxydation)
A une solution de 200 mg de complexe de trioxyde de chrome-pyridinium dans 2 ml de chlorure de methylene, on ajoute 10 mg de l'isomere A du compose du titre de l'exemple 6. Après 24 heures ä 1a temperature ambiante, on filtre 1e melange reactionnel sur gel de silice et on evapore le filtrat ä sec. On chromatographie le residu sur gel : de silice en utilisant un melange d'ether et de chlorure de methylene comme eluant.
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On obtient ainsi l'isomère A du compose du titre.
(Temps de retention 23, 1 minutes).
L'isomere B du compose du titre est obtenu de manière analogue en partant de l'isomère B du compose du titre de 1'exemple 6.
Exemple 3
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(4R, 5S)-2-isobutyl-2, 3, 3-trifluorohomostatine-Val-OCH 3 (elimination des groupes protecteurs du précurseur)
On dissout 30 mg de 1'isomère A du compose
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du titre de l'exemple 1 dans 1 m1 de chlorure de methylente. on refroidit ä 0-50 et on ajoute 1 ml d'acide trifluoroacetique. Apres 2 heures ä 0-5 , on evapore le solvant, on dissout le residu dans de l'acetate d'éthyle et on extrait avec une solution de bicarbonate de sodium. On seche la phase organique et on evapore le solvant, ce qui donne l'isomère A du compose du titre.
L'isomere B du compose du titre est obtenu de maniere analogue en partant de l'isomère B du compose du titre de l'exemple 1.
Exemple 4 n-BOC-Phe-Phe-(4R,5S)-2-isobutyl-2,3,3-trifluorohomosta-
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tine-Val-OCH, (couplage des unites peptidiques) On dissout 56 mg de. N-BOC-Phe-Phe-OH dans 1 ml de tetrahydrofuranne et on ajoute ä 00 56mg du compose du titre de l'exemple 3 (isomère A), 37 mg d'hydroxybenzotriazole et 29 mg de dicyclohexylcarbodiimide. On concentre 1e melange réactionnel sous pression reduite. Apres 24 heures, on chromatographie le produit sur gel de silice en utilisant un gradient solvant ether/chlorure de methylene
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(0 ä 20%) comme eluant. On obtient ainsi 1'isomère A du composedu titre, [J =-26, 2" (c = 0, 805 dans D CHpCl) ; temps de retention 34 minutes.
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Le diastereoisomere B est obtenu selon 1e même procede en partant de l'isomère B du compose
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du titre de l'exemple 3: [a]==-32, 8" (c=0, 53 dans D CH2C12) ; temps de retention 34 minutes.
Exemple 5 n-BOC-Phe-Phe-(4R,5S)-2-isobutyl-2,3,3-trifluorohomostatine-Val-0H
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On dissout 68 mg de l'isomère A du composé du titre de l'exemple 4 dans 3 m1 de dioxanne et 0, 5 ml d'eau et on traite pendant 1 heure ä la temperature ambiante par 14 ml d'une solution aqueuse de Na0H.
On acidifie le melange avec une solution aqueuse 2N d'acide tartrique et on l'extrait avec de l'acétate d'ethyle. On obtient ainsi l'isomère A du compose du
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titre : [a] = -29, 1 (c= 0, 82 dans CH2C12) ; temps D =-2 2) ; temps de retention 23, 1 minutes.
Le diastéréosiomère B est obtenu de manière analogue en partant de l'ismère B du compose du
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7f) titre de l'exemple 4 :Ca]-. = -26, 2" (c= 1, 05 dans CH2C12)' CH 2ci 2)-
Exemple 6 N-BOC-Phe-Phe-(4R,5S0-2-isobutyl-2,3,3-trifluoro- homostatine-Val-Phe-OCH3
Dans 1 ml de tétrahydrofurane, on dissout ä 0 48 mg de l'isomère A du compose du titre de l'exemple 5,15 mg d'ester methylique de 1a l-phényl- alanine, 16 mg d'hydroxybenzotriazole et 13 mg de dicyclohexylcarbodiimide et on concentre sous pression réduite.
Apres 15 heures ä la temperature ambiante, on purifie 1e produit brut par chromatographie sur gel de silice en utilisant un gradient solvant ether/ chlorure de methylene (0-20%). On obtient ainsi
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20 l'isomère A du compose du titre : Eal =-45, 2 D (c = 0, 79 dans CH2Cl2); temps de retention 36, 1 minutes.
L'isomère B est obtenu de manière analogue en partant de l'isomère B du composé du titre de l'exemple 5.
Exemple 7
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N- (bis- (1-naphty1n) ethy1) acety1)-N1e- (4R, 5S)-2, 2, 3, 3- êtrafluoro-ch-homostatine-butylamide
On melange 76 mg de N-(bis-(1-naphtylméthyl) acétyl) -Nle-OH dans une solution de 60 mg de 2, 2, 3, 3tétrafluoro-ch-homostatine-butylamide et de 46 mg d'hydroxybenzotriazole dans 1, 5ml de tétrahydrofuranne.
A 00, on ajoute 36 mg de N, N'-dicyclohexylcarbodiimide et on agite le melange pendant 15 heures. On purifie le produit brut sur gel de silice en utilisant un gradient solvant ether / chlorure de méthylène (0 ä 10%) comme eluant. On obtient ainsi le compose du titre sous forme d'un produit solide
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7n incolore. [a]"= -42, 0 (c = 1 dans CH2C12).
D 2 2)Exemple 8 N- (bis- (1-naphtylmêthyl} acétyl} -Nle- (4R) -2, 2, 3. 3tAtrafluoro-ch-homostatone-butylamide On traite 28 mg du compose de 1'exemple 7 par 170 mg de reactif de Collin en procédant comme décrit ä l'exemple 2.
Après purification on obtient le compose du 9D titre ; [a]O = -31, 60 (c= 0, 2 dans CH Ci D 31 2 2)-
Exemple 9 N-BOC-Phe-Nle-(4R,5S)-2,2,3,3-tétrafluoro-ch-homostatione- butylamide
En procedant comme décrit ä 1'exemple 7, on fait reagir 143 mg de BOC-Phe-Nle-OH, 135 mg de tétrafluoro-ch-homostatine-butylamide. 104 mg d'hydroxybenzotriazole et 81 mg de N. N'-dicyclohexyl-
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carbodiimide.
On obtient ainsi le compose du titre ;
EMI19.1
20 [a]D =-42, 30 (c = 0, 18 dans CH Ci D 2 2
Exemple 10 N-BOC-Phe-Nle-(5S)-2,2,3,3-tétrafluoro-ch-homostatione- butylamide
En procedant comme décrit ä l'exemple 2, on oxyde 23 mg du composé du titre de l'exemple 9
EMI19.2
par 230 mg de reactif de Collin.
On obtient ainsi le composé du titre ; yn Eo.]"=-51, 3 (c = 0, 26 dans CH Ci Exemple 11 N-BOC-Phe-Nle- (4R, 5S)-3, 3-difluoro-ch-homostatinebutylamide En procedant comme decrit a l'exemple 7, on fait reagir 97 mg de BOC-Phe-Nle-OH, 83 mg de difluoro-ch-homostatine-butylamide, 70 mg d'hydroxybenzotriazole et 55 mg de N, N'-dicyclohexylcarbodiimide.
On obtient ainsi le composé du titre ;
EMI19.3
20 [ap = -19, 40 (c = 0, 2 dans CH Ci D 2 2)Exemple 12 N-BOC-Phe-Nle- (4R) -3, 3-difluoro-ch-homostatone-butyl- amide
En procedant comme décrit ä l'exemple 2, on oxyde 25 mg du compose du titre de l'exemple 11 par 150 mg du réactif de Collin.
On obtient ainsi 1e compose du titre ;
EMI19.4
? n [a] = -42, 3 (c = 0, 17 dans CH2C12). Le compose du titre obtenu est en équilibre avec la forme énolique correspondante, c'est-a-dire le N-BOC-Phe-N1e- (4R)- 3, 3-difluoro-ch-homostatine-butylamide.
<Desc/Clms Page number 20>
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Exemple 13 N-BOC-Phe-Bly- (4R, 5S)-2, 2, 3, 3-tätrafluoro-ch-homostatineLeu-a-picoline
On fait reagir pendant 15 heures ä la temperature ambiante 163 mg de BOC-Phe-Bly-OH, 218 mg de H-tétrafluoro-ch-homostatine-leu-α-picoline, 116 mg d'hydroxybenzotriazole et 92 mg de N,N'-dicyclohexylcarbodiimide dans 2 ml de chlorure de méthylène.
Apres chromatographie sur gel de silice en utilisant
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un gradient solvant methanol J chlorure de methylene (0, 1-5%), on obtient le compose du 7r) titre ; [o. "=-50, 5 (c = 0, 3 dans CHZC12)' 0 2 2)Exemple 14 N-BOC-Phe-Bly- (5S} -2, 2, 3, 3-tëtrafluoro-ch-homostatoneLeu-a-picoline
On dissout 20 mg du compose du titre de l'exemple 13 dans 1 ml de chlorure de methylene et on oxyde avec 150 mg de reactif de Collin en procedant
EMI20.3
comme decrit ä l'exemple 2.
On obtient ainsi 1e composé du titre ; [a] ze (c = 0, 17 dans CH C'l D 2 2)-
En procédant de manière analogue ä celle décrite ä l'exemple 1 ä 14, on obtient les composes décrits dans le tableau suivant.
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EMI21.1
<tb>
<tb>
Exemple <SEP> COMPOSA
<tb> No.
<tb>
15 <SEP> N-BOC-Phe-His- <SEP> (4R-5S)-2-isobutyl-2,3,3-trifluoro-homostatine-Val-Phe-OCH3
<tb> 16 <SEP> H-BOC-Phe-Hls- <SEP> (5S)-2-isobutyl-2,3,3-trifluoro-homostatone-Val-Phe-OCh3
<tb> U <SEP> N-BOC-PHe-His <SEP> (4R,5S)-2-isobutyl-2,3,3-trifluoro-homostatone-Ile-His-OCh3
<tb> 18 <SEP> N-BOC-PHe-His <SEP> (5S)-2-isobutyl-2,3,3-trifluoro-homostatone-Ile-His-OCH3
<tb> 19 <SEP> N-BOC-Phe-His- <SEP> (4R,5S)-2-isobutyl-2,3,3-trifluoro-homostatone-Val-Phe-OCH3
<tb> 20 <SEP> N-BOC-Phe-His- <SEP> (5S)-2-isobutyl-2,3,3-trifluoro-homostatone-Val-Phe-OCH3
<tb> 21 <SEP> N-BOC-Phe-His- <SEP> (4R,5S)-2-isobutyl-2,3,3-trifluoro-ch-homostatine-Ile-His-OCH3
<tb> 22 <SEP> N-BOC-Phe-His- <SEP> (5S)-2-isobutyl-2,3,3-trifluoro-ch-homostatine-Ile-His-OCH3
<tb> 23 <SEP> N-BOC-Phe-His-(4R,5S)-2,2,3,3-t$trafluoro-ch-homostatine-Ile-His-OCH3
<tb> 24 <SEP> N-BOC-Phe-His-(5S)-2,2,3,
3-t$trafluoro-ch-homostatine-Ile-His-OCH3
<tb> 25 <SEP> N-BOC-Phe-His- <SEP> (4R,5S)-2-isobutyl-2,3,3-trifluoro-ch-homostatine-Ile-His-OCH3
<tb> 26 <SEP> N-BOC-Phe-His- <SEP> (5S)-2-isobutyl-2,3,3-trifluoro-ch-homostatine-Ile-His-OCH3
<tb> 27 <SEP> N-BOC-Phe-His-(5S)-2,2,3,3-tétrafluoroch-homsotatone-2-méthylbutylamine
<tb> 28 <SEP> N-Boc-Phe-(5S)-2,2,3,3-tétrafluoro-ch-homostatone-2-méthylbutylamine
<tb>
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Les composes de l'invention se signalent par d'interessantes propriétés pharmacologiques et peuvent par consequent être utilises en therapeutique comme medicaments.
En particulier, ils exercent des effets caractéristiques des inhibiteurs de la renine.
C'est ainsi que les composes de 1'invention inhibent de 50% l'activite de 1a rénine de 1a gande submaxilaire de souris sur le substrat octapeptidique synthetique ä une concentration comprise entre 10-5M et 10-3M, dans 1a methode décrite par K. Murakami et col., dans Analyt. Biochem. 110 232-239 (1981), avec la difference que la concentration du substrat synthetique est
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reduite de 20 jM µ 7 pM, dansla methode decrite par P. Corvol et co1. dans Biochem. Biophys. Acta 523 485-493 (1978), et l'activite de la renine humaine pure selon la methode decrite par P. Corvol et col. dans Biochem. Biophys. Acta (sous presse).
Dans 1a methode de fixation des anticorps
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decrits par K. Poulsen et J. Jprgensen dans J. Clin. Endocrin. Metab. 39 816-825 (1974), 1es composes de l'invention inhibent 1'activite de 1a renine dans le plasmahumainàuneconcentrationallantde10-5Mà 10-11M.
Les composes de l'invention peuvent donc être utilises en therapeutique pour la prophylaxie et le traitement de l'hypertension et de 1'insuffisance cardiaque congestive.
Les composes préférés pour la prophylaxie et le traitement de l'hypertension et de l'insuffisance cardiaque congestive sont ceux des exemples 13 et 14, en particulier de l'exemple 14.
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Pour leur utilisation en therapeutique, les composes de 1'invention seront administres à une dose quotidienne comprise entre 1 et environ 500mg, avantageusement, par exemple par voie orale, en doses fractionnees contenant chacune entre environ 0, 25 et environ 250 mg de substance active, ou sous une forme ä liberation prolonge.
Les composes de l'invention peuvent etre administras sous forme libre ou sous forme d'un sel pharmaceutiquement acceptable. De tels sels presentment le même ordre d'activite que les formes libres et peuvent etre facilement préparés selon les methodes
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conventionnelles.
L'invention concerne donc les composes de l'invention, sous forme libre ou sous forme d'un sel pharmaceutiquement acceptable, pour l'utilisation comme medicaments.
En tant que medicaments, les composes sont administres avantageusement sous forme d'une composition pharmaceutique comprenant un compose de l'invention. sous forme libre ou sous forme d'un sel pharmaceutiquement acceptable, en association avec un véhicule ou diluant pharmaceutiquement acceptable. De telles compositions, qui font également partie de l'invention, peuvent être preparees selon les methodes connues et se presenter pour l'administration par voie enterale, de preference par voie orale, par exemple sous forme de comprimas, ou pour l'administration par voie parenterale, par exemple sous forme de solutions ou de suspensions injectables.