NL9000625A - Sulfonylderivaten van thieno-triazolo-diazepines, werkwijze ter bereiding ervan en farmaceutische preparaten, die deze bevatten. - Google Patents

Description

Reg.Nr.: 132831 Bnt/SE

Sulfonylderivaten van thieno-triazolo-diazepines, werkwijze ter bereiding ervan en farmaceutische preparaten, die deze bevatten.

De onderhavige uitvinding heeft betrekking op nieuwe sulfonylderivaten van thieno-triazolo-diazepine, die in het bijzonder van belang zijn als anti-PAF en anti-ischemische middelen.

De uitvinding heeft meer in het bijzonder betrekking op thieno-triazolo-diazepinederivaten van de formule 1, waarin R

- een rechte of vertakte alkylgroep is met 1-20 koolstofatomen, - een fenylgroep, al of niet gesubstitueerd door een halogeenatoom, een rechte of vertakte alkyl groep met 1-8 koolstofatomen, een alkoxygroep met 1-5 koolstofatomen, een carboxygroep of een alkylsulfonylgroep of een alkylthiogroep, of een trifluormethylgroep of een eventueel gesubsti tueerde fenoxygroep of - een furyl, thienyl, pyrrolyl, chinolyl of naftylgroep en farmaceutisch aanvaardbare zouten daarvan.

Deze uitvinding heeft ook betrekking op een werkwijze ter bereiding van genoemde verbindingen, waarbij men de thienotriazolodiazepineverbinding van de formule 2 laat reageren met RS02C1 in aanwezigheid van een mild basisch middel in een polair oplosmiddel bij een temperatuur tussen bij voorkeur 10-30°C.

De bekende stand van de techniek op het gebied van deze uitvinding kan worden geïllustreerd met US patent 4 621 083 (of E.P. 176 927), waarin thieno-triazolo-diaze-pine met PAF-antagonistische aktiviteit worden geopenbaard.

Deze uitvinding heeft tenslotte betrekking op therapeutische preparaten, die deze verbindingen bevatten.

Deze nieuwe verbindingen vertonen een PAF-antago-nistische aktiviteit, die tien-duizend maal groter is dan die van de diazepines geopenbaard in bovengenoemd octrooi-schrift, en hebben ook een krachtiger doelmatigheid.

De bereiding van het uitgangsmateriaal wordt beschreven in de volgende preparatieve voorbeelden I-X.

I - (2-chloorbenzovlmethvlcvanide van de formule 3.

In een geschikte reactor geplaatst onder stikstof-circulatie giet men bij -70°C 7 liter watervrij THF en 115,9 g (1,36 mol) tevoren gedroogd cyaanazijnzuur. Dan voegt men druppelsgewijs 1715 ml (2,74 mol) 1,6 M oplossing van butyllithium in hexaan toe, terwijl men de temperatuur laat stijgen van -70°C tot 0°C. Men roert het reactiemeng-sel dan gedurende één uur. Daarna koelt men het reactie-mengsel weer tot -70°C en voegt druppelsgewijs aan de oplossing 120 g (0,685 mol) chloor-2 benzoylchloride in 1 liter watervrije THF toe. Na roeren gedurende één uur bij nog steeds -70°C, laat men de temperatuur stijgen van -70°C tot 0°C gedurende één uur. Dan voegt men druppelsgewijs 3 liter 1 N zoutzuur toe en na roeren gedurende enkele minuten extraheert men het reactiemengsel met chloroform. Men wast de organische fase met een 10%'s waterige natr iumb i c arbona atop1oss ing, daarna met een verzadigde natriumchlorideoplossing, droogt, filtreert en dampt het oplosmiddel af ter verkrijging van 135 g residu. Men voert de kristallisatie uit door toevoeging van diisopropylether, en filtreert het produkt af, en wast met hexaan ter verkrijging van 97,2 g van de titelverbinding (opbrengst 79%).

II - 2-amino-3-t2-chloorbenzovl)-6-(ethoxycarbonyll^ 4.5.6.7-tetrahvdro-pyrido Γ 3,4-bl thiofeen van de formule 4.

In een Erlenmeyerkolf van twee liter voorzien van een roerder, giet men 85,5 g (0,501 mol) N-carbethoxy-4- piperidon, 90 g (0,501 mol) van verbinding 3, 19,3 g (0,600 mol) zwavelbloem en 44,4 g (0,501 mol) morfoline, in 550 ml methanol. Men kookt het mengsel aan een terugvloeikoeler gedurende één uur. Na verdamping van 250 ml oplosmiddel, slaat men de gewenste verbinding neer, filtreert af, wast met ethanol, daarna met diethylether en droogt ter verkrijging van 155,4 g (85%) van de titelverbinding.

III - 2-(broomacetamido)-3- (2-chloorbenzoyl)-6-(ethoxv- carbonyl)-4,5,6,7-tetrahvdro-pvrido Γ3,4-bl thiofeen van de formule 5.

In een reactor van vijf liter voorzien van geschikte organen en met een scheitrechter, giet men 2,5 liter chloroform en 146 g (0,400 mol) van de verbinding van de formule 4. Daarna voegt men druppelsgewijs vanuit de scheitrechter 87,7 g (0,43 mol) broomacetylbromide toe. Men roert het reactiemengsel gedurende één uur bij kamertemperatuur, wast dan met 300 ml ijswater en droogt de organische fase met watervrij magnesiumsulfaat en filtreert. Men dampt de chloroform af en behandelt het residu met ethanol. Men filtreert het verkregen neerslag af, wast met ethanol, daarna met diethylether en droogt ter verkrijging van 184,6 g (95%) van de titelverbinding.

IV - 2-(aminoacetamido)-3-(2-chloorbenzoyl)-6-(ethoxv- carbonvl)-4,5,6,7-tetrahvdro-pyrido Γ3,4-bl thiofeen van de formule 6.

In een reactor van vijf liter voorzien van een gasinjector giet men 174,8 g (0,36 mol) van de verbinding van de formule 5 en 3 liter THF. Men koelt de suspensie tot 0°C en voegt dan gasvormige ammoniak, tevoren gedroogd boven kaliumhydroxyde, toe. Men voegt 8 uur lang toe (60 g ammoniak kan worden geabsorbeerd). Men roert het mengsel gedurende de nacht bij 0°C, dampt dan 2 liter THF af onder verminderde druk en voegt 750 ml ethy lacetaat toe. Na decantering wast men de organische fase eenmaal met 300 ml van een 10%'s natriumchlorideoplossing, driemaal met 300 ml water, en droogt met watervrij magnesiumsulfaat. Na filtratie dampt men het oplosmiddel gedeeltelijk af met een roterende verdamper. Men laat het neerslag staan gedurende de nacht in de koelkast. Na filtratie wast men het neerslag met diethylether en droogt ter verkrijging van 119 g van de titelverbinding. Men concentreert de resterende organische fase en behandelt met een mengsel van 1,5 liter diethylether/THF (3/1 naar het volume) ter verkrijging van 14,6 g van de titelverbinding (totale opbrengst 88%).

V - s—(2-chloorfenvl)-8-(ethoxvcarbonvl)-6,7,8,9^ tetrahvdro-3H-pvrido Γ4' ,3 : 4,51 thieno Γ3,2-.fi 1.4- diazepine-2-on van de formule 7.

In een reactor van twee liter voorzien van een roerder, koel- en verwarmingsorganen en geplaatst onder stikstof circulatie giet men 126,6 g (0,3 mol) van de verbinding van de formule 6 en 800 ml pyridine. Men kookt het reactiemengsel aan een terugvloeikoeler gedurende 18 uur. Nadat men heeft nagegaan of alle uitgangsmateriaal gereageerd heeft, verdampt men de pyridine gedeeltelijk in een roterende verdamper onder verminderde druk.

Men lost de verkregen (donkerbruine) olie op in 1 liter ethanol. Na afkoeling in een ijsbad verkrijgt men een neerslag, dat men affiltreert, wast met ethanol en diiso-propyloxyde ter verkrijging van 101,3 g (83,6%) van de titelverbinding.

VI - 5-(2-chloorfenv1)-8-(ethoxvcarbonvl-6,7,8,9- tetrahvdro-3H-pyrido Γ41,31 ?_4,.5J_thieno—[3,2 -f.1 1.4- diazepine-2-thion van de formule 8.

In een reactor van drie liter voorzien van geschikte organen giet men 93 g (0,230 mol) van de verbinding van formule 7 en 1,75 liter pyridine. Als alles is opgelost voegt men 56,3 g (0,25 mol) fosforpentasulfide toe en roert het reactiemengsel gedurende drie uur bij 80-85°C. Daarna dampt men de pyridine af en behandelt het verkregen residu met ijswater. Men extraheert het mengsel dan met methyleen-chloride, droogt met watervrij magnesiumsulfaat, filtreert, verdampt en behandelt met diethylether. Dan filtreert het verkregen produkt af en behandelt met 700 ml acetonitril. Men verwarmt de suspensie op 60°C gedurende 30 minuten en laat dan afkoelen.

Na filtratie en wassen met acetonitril, daarna met diethylether, droogt men het residu ter verkrijging van 80,2 g (83%) van de titelverbinding.

VII - 5-2-(chloorfenvl)-8-(ethoxvcarbonvl)-2-hvdrazino- 6,7,8,9-tetrahvdro 3H-pvrido ^.31 : 4.51 thieno T3,2-fl 1,4-diazepine van de formule 9.

In een reactor van twee liter voorzien van geschikte organen en met een scheitrechter giet men 73,5 g (0,175 mol) van de verbinding van de formule 8 en 1 liter methanol. Dan voegt men 26,4 ml (0,525 mol) hydrazinehy-draat, dat in de scheitrechter zit, toe bij kamertemperatuur en roert het mengsel gedurende twee uur bij kamertemperatuur. Dan dampt men 1/7 van de methanol af bij 30°C en laat het residu gedurende de nacht kristalliseren in de koelkast. Na affiltreren wast men de diethylether en droogt ter verkrijging van 65,1 g van de titelverbinding (opbrengst 89%) .

VIII - 5-(2-chloorfenvl)-8-(ethoxycarbonvl)-2-acetamido- amino-6.7,8,9-tetrahvdro-3H-pvrido Γ4',3' ; 4,51 thieno T3,2-f1 1,4-diazepine van de formule 10.

In een reactor van twee liter voorzien van koelor-ganen en geplaatst onder stikstofcirculatie giet men 58,5 g (0,140 mol) van de verbinding van de formule 9 en 1 liter tetrahydrofuran. Dan voegt men 11 g (0,140 mol) acetylchlo-ride en 150 ml tetrahydrof uran toe in de loop van 30 minuten bij 0°C. De oplossing wordt rood na roeren gedurende 45 minuten. Men dampt de tetrahydrof uran dan af en behandelt het verkregen residu met ijswater. Dan voegt men 17,5 g natriumbicarbonaat toe en extraheert het mengsel met 1 liter methyleenchloride. Men wast de organische fase eenmaal met water en droogt met watervrij magnesiumsulfaat. Na filtratie dampt men het oplosmiddel af en behandelt het verkregen residu met diethylether, filtreert en droogt ter verkrijging van 54,1 g (84%) van de titelverbinding.

IX _ 6- (2-chloorfenvl) -9 - (ethoxycarbonyl)_r.7r 8#9,10- tetrahvdro-i-methvl-4H-pyrido Μ',Β' : 4,5] thieno [3.2—fl i^.4-triazolo T4,3-a1 1,4-diazepine van.

de formule 11.

In een reactor van twee liter voorzien van de geschikte organen en geplaatst onder stikstofcirculatie giet men 750 ml azijnzuur en 46,9 g (0,102 mol) van de verbinding van de formule 10. Men brengt de (rode) oplossing langzaam in de loop van één uur op de terugvloeitempe-ratuur en kookt aan de terugvloeikoeler gedurende 15 minuten. Men concentreert de (gele) oplossing dan met de roterende verdamper bij een badtemperatuur van niet meer dan 35°C, en extraheert azijnzuur af met 700 ml tolueen. Men behandelt het residu dan met diethylether, filtreert, wast met diethylether en droogt ter verkrijging van 42,8 g (95%) van de titelverbinding.

X _ 6-ï2-chloorfenvl) -7,8.9. lO-tetrahydro-l-methyl 4Hr_ pvrido Γ41.31 : 4.51 thieno T3,2-f1 1,2,4-triazolo [4.3-al i.4-diazepine van de formule 2.,

In een reactor van één liter voorzien van geschikte organen giet men 500 ml mengsel van broomwaterstof-zuur/azijnzuur (30 vol.% broomwaterstofzuur). . Daarna voegt men 35,8 g (0,081 mol) van de verbinding van de formule 11 portiegewijze toe bij 5°C en roert het mengsel dan bij kamertemperatuur gedurende vijf dagen (uit CCM-analyse blijken sporen uitgangsmateriaal). Dan dampt men 250 ml azijnzuur af en de verbinding slaat neer. Men voegt dan 250 ml diethylether toe en roert het mengsel gedurende 30 minuten. Men filtreert het neerslag af, wast met diethylether en giet uit in een kolf van één liter, waarin zich 500 ml ijswater bevindt. Men stelt de pH in op 9,5 door toevoegen van een 40%'s waterige natriumhydroxydeoplossing. Men houdt de reactiemassatemperatuur beneden 20°C. Na extractie met dichloormethaan droogt men de organische fase met watervrij magnesiumsulfaat, filtreert af en dampt de dichloormethaan gedeeltelijk af. Dan voegt men 120 ml ethylacetaat toe onder roeren. Na neerslaan voegt men 160 ml diethylether toe en laat het mengsel kristalliseren gedurende de nacht in een koelkast. Na filtratie en wassen met diethylether verkrijgt men 28,1 g van de titelverbinding (opbrengst 93,6%).

De uitvinding zal beter worden begrepen na de beschrijving van de volgende voorbeelden.

Voorbeeld l : 6- (2-chloorfenyl) -9-hexadecylsulfonyl-7,8,9,10-tetrahydro-1-methyl 4H-pyrido [4',3':4,5] thieno [3,2-f] 1,2,4-triazo-lo [4,3-a] 1,4-diazepine R = CH3 - (CH2)15 -

In een reactor van 4 liter giet men 25 g (67,6 mM) 6-(2-chloorfenyl)-7,8,9,10-tetrahydro-l-methyl 4H-pyrido [4',3':4,5] thieno [3,2-f] 1,2,4-triazolo [4,3-a] 1,4- diazepine, 11,21 g (81 mM) K2C03, 23,36 g (81 mM) hexadecy-sulfonylchloride) en 2 liter van een 10/1 (volume) aceton/H20 mengsel.

Men roert het reactiemengsel gedurende 3 uur bij kamertemperatuur. Nadat men heeft nagegaan of alle uit- gangsmateriaa1 gereageerd heeft, verdampt men het oplosmiddel in een roterende verdamper bij een temperatuur van niet meer dan 30°C.

De verkregen verbinding slaat neer en men filtreert af, wast tweemaal met water, droogt onder verminderde druk en lost dan op in methyleendichloride en wast met water. Na drogen van de organische fase boven magnesiumsul-faat, filtreert men de oplossing nog eens, dampt droog in een roterende verdamper bij een temperatuur van niet meer dan 30°C, en neemt dan op in 0,5 liter pentaan en roert gedurende de nacht. Men scheidt de verbinding af door filtratie, wast met pentaan en droogt onder verminderde druk.

Opbrengst 38 g (85%) van een oranje poeder, dat smelt bij 80°C (Tottoli), onoplosbaar is in water bij kamertemperatuur maar oplost in DMSO. De elementair analyse en de infrarood en NMR-analyses tonen een goede overeenkomst met de formule C34H48CIN502S2 (molecuulgewicht 658.37) en met de bovengenoemde structuur.

Men bereidt de volgende verbindingen als beschreven in voorbeeld 1, maar nu gaat men uit van het geschikte chloorsulfonylderivaat.

Voorbeeld 2 ! 6-(2-chloorfenyl) -9-fenylsulfonyl-7,8,9,10-tetrahydro-l-methyl 4H-pyrido [4',3':4,5] thieno [3,2-f] 1,2,4-triazolo [4,3-a] 1,4-diazepine R = fenyl- voorbeeld 3 : 6-(2-chloorfenyl)-9-(2,4,6-trichloor)fenylsulfonyl- 7,8,9,10-tetrahydro-l-methyl 4H-pyrido [4^3^:4,5] thieno [3,2-f] 1,2,4-triazolo [4,3-a] 1,4-diazepine R = (2,4,6-trichloor)fenyl-

Voorbeeld 4 : 6-(2-chloorfenyl)-9-(trifluormethyl)fenylsulfonyl-7,8,9,10-tetrahydro-l-methyl 4H-pyr ido [4^3^4,5] thieno [ 3,2 -f ] 1.2.4- triazolo [4,3-a] 1,4-diazepine R = (4-trifluormethyl)fenyl-

Voorbeeld 5 s 6-(2-chloorfenyl)-9-(4,5,6-trimethoxy)fenylsulfonyl- 7.8.9.10- tetrahydro-l-methyl 4H [4',3':4,5] thieno [3,2-f] 1.2.4- triazolo [4,3-a] 1,4-diazepine R = (4,5,6-trimethoxy)fenyl-

Voorbeeld 6 : 6-(2-chloorfenyl)-9-(4-tert. butyl)fenylsulfonyl-7,8,9,10-tetrahydro-l-methyl 4H-pyrido [4',3':4,5] thieno [3,2-f] 1.2.4- triazolo [4,3-a] 1,4-diazepine R = (4-tert.butyl)fenyl-

Voorbeeld 7 : 6- (2-chloorfenyl)-9-(3,4-dimethoxy)fenylsulfonyl-7,8,9,10-tetrahydro-l-methyl 4H-pyrido [4',3':4,5] thieno [3,2-f] 1.2.4- triazolo [4,3-a] 1,4-diazepine R = (3,4-dimethoxy)fenyl-

Voorbeeld 8 ï 6-(2-chloorfenyl)-9-(2,4,6-trimethyl)fenylsulfonyl- 7.8.9.10- tetrahydro-l-methyl 4H-pyrido [4',3':4,5] thieno [3,2-f] 1,2,4-triazolo [4,3-a] 1,4-diazepine R = (2,4,6-trimethyl)fenyl-

Voorbeeld 9 : 6- (2-chloorfenyl)-9-(4-methoxy)fenylsulfonyl-7,8,9,10-tetrahydro-l-methy1 4H-pyrido [4',3':4,5] thieno [3,2-f] 1,2,4-triazolo [4,3-a] 1,4-diazepine R = (4-methoxy)fenyl- voorbeeld 10 : 6-(2-chloorfenyl)-9-[4-(4'-nitrofenoxy)]fenylsulfonyl- 7,8,9,10-tetrahydro-l-methyl 4H-pyrido [4^3^4,5] thieno [3,2-f] 1,2,4-triazolo [4,3-a] 1,4-diazepine r = [4-(4,-nitrofenoxy)]-

Voorbeeld 11 ï 6- (2-chloorf enyl) -9-α-thienylf enylsulf onyl-7,8,9,10-tetra-hydro-l-methyl 4H-pyrido [4',3':4,5] -thieno' [3,2-f] 1,2,4-triazolo [4,3-a] 1,4-diazepine R = a-thienyl-

Voorbeeld 12 : 6- (2-chloorf enyl) -9-a-furylf enylsulf onyl-7,8,9,10-tetrahy-dro-l-methyl 4H-pyrido [.4 *, 31:4#.5] ' thieno [3,2-f] 1,2,4-triazolo [4,3-a] 1,4-diazepine r = a-furyl- voorbeeld 13 ï 6-(2-chloorfenyl)-9-(a-pyrrolyl) sulfonyl-7,8,9,10-tetrahy- dro-l-methyl-4H-pyrido [4 ',3 ' :4,5] thieno [3,2-f] 1,2,4- triazolo [4,3-a] 1,4-diazepine R = a-pyrrolyl-

Voorbeeld 14 : 6- (2-chloorfenyl) -9- (8-chinolyl) sulfonyl-7,8,9,10-tetrahy-dro-l-methyl-4H-pyrido-[4',3':4,5] thieno [3,2-f] 1,2,4- triazolo [4,3-a] 1,4-diazepine R = (8-chinolyl)-

Voorbeeld 15 ï 6-(2-chloorfenyl)-9-(2-naftyl)sulfonyl-7,8,9,10-tetrahydro-l-methyl-4H-pyrido [4^3^4,5] thieno [3,2-f] 1,2,4-triazo-lo [4,3-a] 1,4-diazepine R = (2-nafthyl)-

Voorbeeld 16 ï 6- (2-chloorfenyl)-9-(4-carboxy)fenylsulfonyl-7,8,9,10-tetrahydro-l-inethyl-4H-pyrido [4',3':4,5] thieno [3,2-f] 1,2,4-triazolo [4,3-a] 1,4-diazepine R = (4-carboxy)fenyl-

Voorbeeld 17 : 6-(2-chloorfenyl)-9-[4-(41 -(carboxy)fenyloxy)fenyl]sulfo-nyl-7,8,9,10-tetrahydro-l-methyl-4H-pyrido [4^3^4,5] thieno [3,2-f] 1,2,4-triazolo [4,3-a] 1,4-diazepine R = 4-(41-carboxy)fenyloxy)fenyl-

Voorbeeld 18 : 6-(2-chloorfenyl)-9-[5-(methylthio 2,4-dimethoxy]fenylsul-fonyl-7,8,9,10-tetrahydro-l-methyl-4H-pyrido [4',3':4,5] thieno [3,2-f] 1,2,4-triazolo [4,3-a] 1,4-diazepine R = (5-(methylthio) 2,4-(dimethoxy)fenyl-

Voorbeeld 19 : 6-(2-chloorfenyl)-9-[5-mesyl 2,4-dimethoxy]fenylsulfonyl- 7,8,9,10-tetrahydo-l-methyl-4H-pyrido [4',3':4,5] thieno [3,2-f] 1,2,4-triazolo [4,3-a] 1,4-diazepine R = (5-mesyl 2,4-dimethoxy)fenyl- voorbeeld 20 : 6- (2-chloorfenyl) -9-isopropylsulfonyl-7,8,9,10-tetrahydro-l-methyl-4H-pyrido [4,· ,31:4,53 thieno [3,2-f] 1,2,4-triazolo [4,3-a] 1,4-diazepine R = isopropyl-

Giftiqheid

Geen van de verbindingen volgens de uitvinding is giftig bij orale toediening in een dosis van 1 g/kg aan muizen.

Geen van de verbindingen is giftig bij een intra-peritoneale toediening in een dosis van 1 g/kg bij muizen met uitzondering van de voorbeelden 1, 5 en 10, waarvoor de LD50 ligt tussen 0,5-1 g/kg.

Wanneer men het feit in beschouwing neemt, dat deze verbindingen aktief zijn in doses van ongeveer 10 M, hebben deze giftigheidswaarden geen enkel nadeel.

Farmacologie

Er zijn verschillende farmacologische bepalingen gedaan bij deze verbindingen, die samengevat zijn als volgt: 1) Inhibitie van bloedplaatiesaqqreqatie geïnduceerd

door PAF

Deze proef wordt uitgevoerd volgens de methode van R. KINLOUGH. RATHBONE, J.P. CAZENAVE, M. PACKHAM en F. MUSTARD, Lab. Invest. 48, 98, 1980. Bij deze proef gebruikt men konijnen uit Nieuw Zeeland (mannelijke Nieuwzeelandse konijnen met een gemiddeld gewicht van 5 kg).

De bepalingen worden gedaan op een chrono-log Coultronics agregometer bij 57°C, gekoppeld met een grafische recorder; de resultaten van deze bepalingen (in moleculaire concentratie) zijn opgetekend in de middelste kolom van tabel I.

2) Inhibitie van de binding aan benzodiazepine- receotoren

Het belang van de voorgaande proef hangt af van de resultaten verkregen bij deze proefneming: als een verbinding volgens de uitvinding een benzodiazepineachtige structuur heeft, is het van belang na te gaan of de specifieke benzodiazepineaktiviteit niet zal optreden bij de dosis, waarbij witte bloedlichaampjesaggregatie wordt geïnhibeerd.

Daarom wordt deze proefneming uitgevoerd volgens de methode van MOHLER H. en RICHARD J.G. Agonist and antagonist benzodiazepine receptor intereaction in vitro, Nature, vol. 294, 763-765, 1981.

Deze proef wordt uitgevoerd op rattehersenen geïncubeerd gedurende 1,5 uur bij 4°C onder toepassing van 3H-RO-15-1788 en 3H-RO-5-4864 (NEN) als tracers en RO-15-4788 en RO-5-4864 als referentieantagonisten.

De resultaten in moleculaire concentratie staan in de rechterkolom van tabel 1.

3) Globale ischemia bii gerbilles

Bij deze proef verdooft men mannelijke gerbilles met brietal in een dosis van 35 mg/kg intraperitoneaal; daarna klemt men beide slagaders af gedurende 10 minuten, en maakt daarna weer vrij. Behandelde dieren ontvangen elk 10 mg/kg van de verbindingen van één van de voorbeelden.

Eén week later doodt men de dieren en neemt beide hippocampes weg, weegt deze en vriest in bij -80°C.

Na verbrijzelen met 1 ml TRIS—HC1 buffer pH 7,4 gedurende 30 seconden, neemt men evenredige delen van elk 50 microliter van dit preparaat en incubeert deze in elk 1 ml TRIS-HC1 buffer die 3H-PK 11195 bij 2 nM (90 Ci/mmol, NENE, Duitsland) bevatten gedurende 1 uur bij 25°C. Voor elk preparaat doet men 3 bepalingen. De dichtheid van omega 3 plaatsen (gemarkeerd door de specifieke 3H PK 11195 markering) worden uitgedrukt in f-molen van PK 11195/mg van verse weefsels en omgezet in een percentage bescherming in vergelijking met de blanco^

De resultaten van deze proef zijn weergegeven in de volgende tabel II.

Presentatie - Posologie

In de menselijke therapie kunnen de verbindingen volgens de uitvinding worden toegediend langs orale weg. Voorkeursvormen van toediening zijn tabletten, gelatinecap-sules en dergelijke. Gebruikelijke posologie is van 50-500 mg per dag naar gelang het geval is. Eenheidsdoseringen kunnen 10-100 mg, bij voorkeur 50 mg bevatten samen met geschikte dragers en middelen. Indien toegepast door injectie zijn de eenheidsdoseringen van 1-20 mg bij voorkeur 5 mg.

Tabel' I A

Tabel I B

Tabel I

Claims (5)

1. Thieno-triazolo-diazepinederivaten van de formule 1, waarin R voorstelt - een rechte of vertakte alkylgroep met 1-20 koolstofatomen; - een fenylgroep, al of niet gesubstitueerd door een halogeenatoom, een rechte of vertakte alkyl groep met 1-8 koolstofatomen, een alkoxygroep met 1-5 koolstofatomen, een carboxygroep of een alkylsulfonylgroep of een alkylthiogroep, of een trifluormethylgroep of een eventueel gesubsti tueerde fenoxygroep of - een furyl, thienyl, pyrrolyl, chinolyl, of naftylgroep en farmaceutisch aanvaardbare zouten ervan.

2. Werkwijze ter bereiding van verbindingen van conclusie 1, waarbij men de thieno-triazolo-diazepinever-binding van de formule 2 laat reageren met RS02C1 in aanwezigheid van een mild basisch middel in een polair oplosmiddel bij een temperatuur tussen bij voorkeur 10-30°C.

3. Therapeutische samenstelling met als aktieve ingrediënt erin een voldoende hoeveelheid van tenminste één van de verbindingen volgens conclusie 1 samen met dragers, die geschikt zijn voor de gekozen toedieningsvorm.

4. Therapeutische samenstelling volgens conclusie 3 voor orale toediening met 10-100 mg aktieve ingrediënt per doseringseenheid.

5. Therapeutische samenstelling volgens conclusie 3 voor injecties met 1-20 mg aktieve ingrediënt per dose-ringseenheid.