Europea (AT, BE, BG, CH, CY, CZ, DE, DK, EE, ES, FI, Para códigos de dos letras y otras abreviaturas consultar FR, GB, GR, IttJ, ÍE, IT, LU, MC, NI-, PL, PT, RO, SE, SI, las notas "Guias sobre Códigos y Abreviaturas" que aparecen SK, TR), OAPI (BF, BJ, CP, CCi, l CU, GA, GN, «Q, al inicio de la Gaceta PCT. GW, MI., MR.. NE, SN. TO IG). Publicada: — con reporte internacional de búsqueda
TERAPIA DE COMBINACIÓN DE CÁNCER QUE COMPRENDE AZD2171 Y ZD1839
Campo del Invento La presente invención se refiere a un método para la producción de un efecto de reducción de permeabilidad antiangiogénica y/o vascular en un animal de sangre caliente, tal como un humano, el cual es tratado opcionalmente con radiación por ionización, particularmente a un método para el tratamiento de cáncer, particularmente un cáncer que comprende un tumor sólido, el cual comprende la administración de AZD2171 en combinación con ZD1839; a una composición farmacéutica que comprende AZD2171 y ZD1839; a un producto de combinación que comprende AZD2171 y ZD1839 para utilizarse en un método de tratamiento de un cuerpo humano o de animal a través de terapia; a un equipo que comprende AZD2171 y ZD1839; al uso de AZD2171 y ZD1839 en la fabricación de un medicamento para utilizarse en la producción de un efecto de reducción de permeabilidad antiangiogénica y/o vascular en un animal de sangre caliente, tal como un humano el cual es opcionalmente tratado con radiación por ionización. Antecedentes del Invento La angiogénesis normal juega un papel importante en 2
una variedad de procesos, incluyendo desarrollo embriónico, curación de heridas y diversos componentes de la función reproductora femenina. La angiogénesis no deseable o patológica ha estado asociada con estados de enfermedad que incluyen retinopatía diabética, psoriasis, cáncer, artritis reumatoide, ateroma, sarcoma de Kaposi's y hemangioma (Fan y asociados, 1995, Trends Pharmacol. Sci. 16:57-66; Folkman, 1995, Nature Medicine 1:27-31). Se considera que la alteración de la permeabilidad vascular juega un papel importante tanto en procesos fisiológicos normales como patológicos (Cullinan-Bove y asociados, 1993, Endocrinology 133:829-837; Senger y asociados, 1993, Cáncer and Metástasis Reviews, 12:303-324). Diversos polipéptidos con crecimiento de célula endotelial in vitro que promueven la actividad, han sido identificados incluyendo factores de crecimiento de fibroblasto ácido o básico (aFGF & bFGF) y factor de crecimiento-A endotelial vascular (VEGF). En virtud de la expresión restringida de sus receptores, la actividad del factor de crecimiento de VEGF, en contraste con el de FGFs, es relativamente específica para células endoteliales . La evidencia reciente indica que VEGF es un estimulador importante de angiogénesis tanto normal como patológica (Jakeman y asociados, 1993, Endocrinology, 133:848-859; Kolch y asociados, 1995, Breast Cáncer Research and Treatment, 3
36:139-155) y permeabilidad vascular (Connolly y asociados, 1989, J. Biol. Chem. 264:20017-20024). El antagonismo de la acción VEGF mediante secuestro de VEGF con anticuerpos, puede dar como resultado la inhibición de crecimiento de tumor (Kim y asociados, 1993, Nature 362:841-844). Las cinasas de tirosina de receptor (RTKs) son importantes en la transmisión de señales bioquímicas a través de la membrana de plasma de las células. Estas moléculas de transmembrana consisten característicamente en un dominio de enlace de ligandos extracelular conectado a través del segmento en la membrana de plasma a un dominio de cinasa de tirosina intracelular. El enlace del ligando al receptor da como resultado el estímulo de la actividad de cinasa de tirosina asociada con receptor, la cual conduce a la fosforilación de residuos de tirosina tanto en el receptor como en otras moléculas intracelulares. Estos cambios en la fosforilación de tirosina inician una cascada de señalización que conduce a una variedad de respuestas celulares. Hasta la fecha, al menos 19 subfamilias RTK distintas, definidas a través de la homología de secuencia de aminoácidos, han sido identificadas. Una de estas subfamilias está comprendida actualmente del receptor de cinasa de tirosina tipo-fms, Flt-1, el receptor que contiene el dominio de inserto de cinasa, 4
KDR, (también referido como Flk-1) y otros receptores de cinasa de tirosina tipo-fms, Flt-4. Dos de estos RTKs relacionados, FIt-1 y KDR, han demostrado enlazar a VEGF con alta afinidad (De Vries y asociados, 1992, Science 255:989-991; Terman y asociados, 1992, Biochem. Biophys. Res. Comm. 1992, 187:1579-1586). El enlace de VEGF a estos receptores expresado en células heterólogas, ha estado asociado con cambios en el estado de fosforilación de tirosina de proteínas celulares y flujos de calcio. VEGF es un estímulo clave para la vasculogénesis y angiogénesis. Esta citosina induce a un fenotipo de germinación vascular induciendo la proliferación de célula endotelial, expresión y migración de proteasa y la organización subsecuente de las células para formar un tubo capilar (Keck, P.J., Hauser, S.D., Krivi, G., Sanzo, K., Warren, T., Feder, J., and Connolly, D.T., Science (Washington DC), 246: 1309-1312, 1989; Lamoreaux, W.J., Fitzgerald, M.E., Reiner, A., Hasty, K.A., and Charles, S.T., icrovasc. Res., 55: 29-42, 1998; Pepper, M.S., Montesano, R., Mandroita, S.J., Orci; L. and Vassalli, J.D., Enzyme Protein, 49: 138-162, 1996). Además, VEGF induce a permeabilidad vascular significativa (Dvorak, H.F, Detmar, M., Claffey, K.P., Nagy, J.A., van de Water, L., and Senger, D.R., (Int. Arch. Allergy Immunol., 107: 233-235, 1995; Bates, D.O., Heald, R.I., Curry F.E. and Williams, B.J.
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Physiol. (Lond.), 533: 263-272, 2001), promoviendo la formación de una red vascular inmadura, hiper-permeable, la cual es característica de angiogénesis patológica. Se ha mostrado que la activación de KDR sola es suficiente para promover todas las respuestas fenotípicas mayores a VEGF, incluyendo proliferación de célula endotelial, migración y supervivencia y la inducción de permeabilidad vascular (Meyer, M., Clauss, M., Lepple-Wienhues, A., Waltenberger, J., Augustin, H.G., Ziche, M., Lanz, C, Büttner, M., Rziha, H-J., and Dehio, C, EMBO J., 18: 363-374, 1999; Zeng, H., Sanyal, S. And Mukhopadhyay, D., J. Biol. Chem., 276: 32714-32719, 2001; Gille, H., Kowalski, J., Li, B., LeCouter, J., Moffat, B, Zioncheck, T.F., Pelletier, N. And Ferrara, N., Biol. Chem., 276: 3222-3230, 2001). Los derivados de quinazolina que son inhibidores de la cinasa de tirosina de receptor VEGF, se describen en la Publicación de Solicitud de Patente Internacional No. WO 00/47212. En la Publicación WO 00/47212 los compuestos que se describen poseen actividad contra la cinasa de tirosina de receptor VEGF (VEGF RTK). AZD2171 es 4-(4-fIuoro-2-metilindol-5-¡loxi)-6-metoxi-7-(3-(pirrolidín-1-ilo)propoxi)quinazolina: 6
AZD2171 AZD2171 es el ejemplo 240 de la Publicación WO 00/47212. AZD2171 es un inhibidor muy potente de KDR y también tiene cierta actividad contra Flt-1. El valor IC50 para la inhibición AZD2171 de KDR y la actividad de cinasa de tirosina Flt-1, en ensayos in vitro de enzima recombinante, es <2nM y 5nM respectivamente. AZD2171 ha demostrado provocar actividad anti-tumor de amplio espectro en un rango de modelos después de una administración oral de una vez al día. En la Publicación WO 00/47212 se manifiesta que los compuestos de dicha invención: "pueden aplicarse como una sola terapia o pueden comprender, además de un compuesto de dicha invención, una o más de otras substancias y/o tratamientos. Dicho tratamiento en conjunto se puede lograr por medio de la administración simultánea, en secuencias o por separado de los componentes individuales del tratamiento". Posteriormente la Publicación WO 00/47212 describe ejemplos de dicho tratamiento en conjunto que incluye 7
cirugía, radioterapia y varios tipos de agentes quimioterapéuticos incluyendo inhibidores de la función del factor de crecimiento. En la Publicación WO 00/47212 no se sugiere la combinación de un compuesto de dicha invención y un inhibidor de cinasa de tirosina del receptor de factor de crecimiento epidérmico para el tratamiento de cualquier estado de enfermedad incluyendo cáncer. En la Publicación WO 00/47212 no se sugiere la combinación específica de AZD2171 y ZD1839. En la Publicación WO 00/47212 no se manifiesta que el uso de cualquier compuesto de dicha invención con otros tratamientos, pueda producir efectos sorpresivamente benéficos. Hemos descubierto en forma inesperada y sorpresiva que el compuesto particular AZD2171 utilizado en combinación con una selección particular de la amplia descripción de las terapias de combinación descritas en la Publicación WO 00/47212, es decir con ZD1839, produce efectos significativamente mejores que ya sea AZD2171 y ZD1839 utilizados solos. En particular, AZD2171 utilizado en combinación con ZD1839 produce efectos significativamente mejores en tumores sólidos, que ya sea AZD2171 y ZD1839 utilizados solos. ZD1839 es /V-(3-cloro-4-fluorofen¡I)-7-metoxi-6-(3- 8
morfolinopropoxi) quinazolina-4-amina:
ZD1839 ZD1839 también se conoce como Iressa™ (marca comercial de AstraZeneca UK Limited) y es un inhibidor de cinasa de tirosina (TKI) del receptor de factor de crecimiento epidérmico (EGFR). ZD1839 se describe en la Publicación de Solicitud de Patente Internacional WO 96/33980. En años recientes se ha descubierto que ciertas enzimas de cinasa de tirosina del factor de crecimiento son importantes en la transmisión de señales bioquímicas que inician la réplica celular. Son proteínas grandes las cuales abarcan la membrana celular y poseen un dominio de enlace extracelular para factores de crecimiento, por ejemplo el receptor del factor de crecimiento epidérmico (EGFR) que enlaza al factor de crecimiento epidérmico (EGF) y una parte ¡ntracelular que funciona como una cinasa para fosforilar los aminoácidos de tirosina en proteínas y por lo tanto tener influencia en la proliferación celular.
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EGFR es un miembro de la familia erbB de las cinasas de tirocina de receptor, que incluye EGFR, erbB2, erbB3 y erbB4 y se sabe que estas cinasas de tirosina receptoras están involucradas frecuentemente en conducir la proliferación y supervivencia de células de tumor (revisadas en la Publicación de Olayioye y asociados, EMBO J., 2000, 19, 3159). Un mecanismo a través del cual esto se puede lograr, es mediante la sobreexpresión del receptor en el nivel de proteína, generalmente como resultado de la amplificación de gen. Esto ha sido observado en muchos cánceres humanos comunes (revisados en la Publicación Klapper y asociados, Adv. Cáncer Res., 2000, 77, 25), tal como cáncer de seno (Sainsbury y asociados Brit. J. Cáncer, 1988, 58, 458; Guerin y asociados, Oncogene Res., 1988, 3, 21; Slamon y asociados, Science, 1989, 244, 707; Klijn/ y asociados, Breast Cáncer Res. Treat. 1994, 29, 73 y revisado en la Publicación de Salomón y asociados, Crit. Rev. Oncol. Hematol., 1995, 19, 183), cánceres de pulmón de célula no pequeña (NSCLCs) incluyendo adenocarcinomas (Cerny y asociados, Brit. J. Cáncer, 1986, 54, 265; Reubi y asociados, Int. J. Cáncer, 1990, 45, 269; Rusch y asociados, Cáncer Research, 1993, 53, 2379; Brabender y asociados, Clin. Cáncer Res, 2001, 7, 1850) así como otros cánceres de pulmón (Hendler y asociados, Cáncer Cells, 1989, 7, 347; Ohsaki y asociados, Oncol.
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Rep., 2000, 7, 603), cáncer de vejiga (Neal y asociados, Lancet, 1985, 366; Chow y asociados, Clin. Cáncer Res.., 2001, 7, 1957, Zhau y asociados, Mol Carcinog, 3, 254), cáncer oesofageal (Mukaida y asociados, Cáncer, 1991, 68, 142), cáncer gastrointestinal tal como cáncer de colon, recto o estómago (Bolen y asociados, Oncogene Res., 1987, 1, 149; Kapitanovic y asociados, Gastroenterology, 2000, 112, 1103; Ross y asociados, Cáncer Invest., 2001, 19, 554), cáncer de próstata (Visakorpi y asociados, Histochem. J., 1992, 24, 481; Kumar y asociados, 2000, 32, 73; Scher y asociados, J. Nati. Cáncer Inst., 2000, 92, 1866), leucemia (Konaka y asociados, Cell, 1984, 37, 1035, Martin-Subero y asociados, Cáncer Genet Cytogenet., 2001, 127, 174), cáncer de ovario (Hellstrom y asociados, Cáncer Res., 2001, 61, 2420), cáncer de cabeza y cuello (Shiga y asociados , Head Neck, 2000, 22, 599) y cáncer de páncreas (Ovotny y asociados, Neoplasma, 2001, 48, 188). Se considera ampliamente que como consecuencia de la regulación disfuncional de uno o más de estos receptores, muchos tumores se vuelven clínicamente más agresivos y esto se correlaciona con un pronóstico más deficiente del paciente (Brabender y asociados, Clin. Cáncer Res, 2001, 7, 1850; Ross y asociados, Cáncer Invest., 2001, 19, 554; Yu y asociados, Bioessays, 2000, 22.7, 673). Además de estos descubrimientos clínicos, un 11
gran cantidad de la información preclínica sugiere que la familia erbB de las cinasas de tiroslna receptoras están involucradas en la transformación celular. Esto incluye las observaciones de que muchas líneas de células de tumor sobre-expresan uno o más de los receptores erbB y que EGFR y erbB2 cuando se transfecta en células sin tumor tienen la capacidad de transformar estas células. Además de esto, un número de estudios preclínicos han demostrado que se pueden inducir efectos anti-proliferativos eliminando una o más actividades erbB a través de inhibidores de molécula pequeña, anticuerpos negativos o inhibidores dominantes (revisados en la Publicación de Mendelsohn y asociados, Oncogene, 2000, 19, 6550). Por lo tanto se ha reconocido que los inhibidores de estas cinasas de tirosina receptora deben tener valor como inhibidores selectivos de la proliferación de células de cáncer de mamífero (Yaish y asociados, 1988, 242, 933, Kolibaba y asociados, Biochimica y Biofísica Acta, 1997, 133, F217-F248; Al-Obeidi y asociados, 2000, Oncogene, 19, 5690-5701; Mendelsohn y asociados, 2000, Oncogene, 19, 6550-6565). Además de estos datos pre-clínicos, el uso de anticuerpos inhibidores contra EGFR y erbB2 (c-225 y trastuzumab, respectivamente) han probado ser benéficos clínicamente para el tratamiento de tumores sólidos seleccionados (revisados en la Publicación de Mendelsohn y asociados, 12
2000, Oncogene, 19, 6550-6565). Se considera que los miembros de la familia de cinasa de tirosina receptora tipo erbB pueden implicarse en un número de padecimientos proliferativos no malignos debido a la amplificación y/o actividad de las cinasas de tirosina receptora erbB que han sido detectadas en psoriasis (Ben-Bassat, Curr. Pharm. Des., 2000, 6, 933; Eider y asociados, Science, 1989, 243, 811), hiperplasia prostética benigna (BPH) (Kumar y asociados, Int. Urol. Nephrol., 2000, 32, 73), ateroesclerosis y restenosis (Bokemeyer y asociados, Kidney Int., 2000, 58 549). Por consiguiente se espera que los inhibidores de las cinasas de tirosina receptora tipo erbB serán útiles en el tratamiento de estos y otros padecimientos no malignos, que comprenden proliferación celular excesiva. Se sabe a partir de la Publicación de Solicitud de Patente Internacional No. WO 96/33980 que ZD1839 posee actividad inhibidora EGF RTK (J R Woodburn y asociados in proc. Amer. Assoc. Canc. Res., 1997, 38 633 y Pharmacol. Ther., 1999, 82, 241-250) y es un inhibidor de la proliferación de tejido cancerígeno. En la Publicación WO 96/33980, se manifiesta que los compuestos de dicha invención, los cuales incluyen ZD1839, pueden ser administrados en conjunto con otras terapias de cáncer. En dicha Publicación se manifiesta que "El 13
tratamiento anti-proliferativo definido anteriormente puede aplicarse como una terapia individual o puede comprender, además del derivado de quinasolina de dicha invención, una o más de otras substancias anti-tumor, por ejemplo substancias anti-tumor citotóxicas o citostáticas, por ejemplo aquellas seleccionadas de, por ejemplo, inhibidores mitóticos, por ejemplo vinblastina, vindesina y vinorelbina; inhibidores de desensamble de tubulina tales como taxol; agentes de alquilación, por ejemplo cis-platín, carboplatín y ciclofosfamida; antimetabolitos, por ejemplo 5-fluorouracil, tegafur, metotrexato, arabinosida de citosina e hidroxiurea, o por ejemplo, uno de los antimetabolitos preferidos que se describen en la Solicitud de Patente Europea No. 239362 tal como ácido N.-{5-[N.-(3,4-dihidro-2-metil-4-oxoquinazolina-6-ilmetilo)-N.-metilamino]-2-tenoilo}-L-glutámico; anti ióticos de intercalado, por ejemplo adriamicín, mitomicín y bleomicín; enzimas, por ejemplo asparaginasa; inhibidores de topoisomerasa , por ejemplo etoposida y camptotecina; modificadores de respuesta biológica, por ejemplo interferón; anti-hormonas, por ejemplo anti-estrógenos tal como tamoxifén, por ejemplo anti-andrógenos tales como 4'-ciano-3-(4-fluorofenilsulfonilo)-2-hidroxi-2-metil-3'-(trifluorometilo)-propionanilida, o por ejemplo antagonistas LHRH o agonistas LHRH tal como goserelín, leuprorelín o buserelín e inhibidores de síntesis de hormonas, por 14
ejemplo inhibidores de aromatasa tal como ios que se describen en la Solicitud de Patente Europea No.0296749, por ejemplo 2,2'-[5-(1 J±-1 ,2,4-triazole-1 -ilmeti lo )- 1 ,3-fenilene]bis(2-metilpropionitrilo) y, por ejemplo, inhibidores de 5a-reductasa tal como 173-(N-tert-butilcarbamoilo)-4-aza-5a-androst-1-en-3-ona." En la Publicación WO 96/33980 no se sugiere combinación alguna de un inhibidor EGF RTK con un inhibidor VEGF RTK para el tratamiento de cualquier estado de enfermedad incluyendo cáncer. La Publicación de Solicitud de Patente Internacional WO 02/41882 describe, en forma general, combinaciones de agentes que disminuyen la actividad VEGF y agentes que disminuyen la actividad EGF. Se ha llevado a cabo un estudio para examinar la administración en conjunto de anticuerpos a KDR y EGFR (Shaheen, R. M., y asociados, Brit. J. Cáncer, 2001, 85, 584-589). Hemos descubierto en forma inesperada y sorpresiva que el compuesto particular AZD2171 utilizado en combinación con el compuesto particular ZD1839, produce efectos anti-tumor significativamente mejores ya sea que AZD2171 y ZD1839 utilizados solos. Los efectos anti-cáncer de un método de tratamiento de la presente invención, incluyen pero no se limitan a, efectos anti-tumor, el rango de respuesta, el tiempo de 15
progreso de la enfermedad y el rango de supervivencia. Los efectos anti-tumor de un método de tratamiento de la presente invención, incluyen pero no se limitan a, inhibición de crecimiento de tumor, retraso de crecimiento de tumor, regresión de tumor, contracción de tumor, tiempo incrementado de nuevo crecimiento de tumor al término de tratamiento, disminución del progreso de la enfermedad. Se espera que cuando un método de tratamiento de la presente invención se administre a un animal de sangre caliente tal como un humano, que necesita de dicho tratamiento para cáncer, con o sin un tumor sólido, el método de tratamiento produzca un efecto, según se ha considerado, por ejemplo, a través de uno o más de: el grado del efecto anti-tumor, el rango de respuesta, el tiempo de progreso de la enfermedad y el rango de supervivencia. Los efectos anti-cáncer incluyen tratamiento profiláctico así como el tratamiento de enfermedades existentes. De acuerdo con la presente invención, se proporciona un método para la producción de un efecto de reducción de permeabilidad anti-angiogénica y/o vascular en un animal de sangre caliente, tal como un humano, en donde el método comprende administrar al animal una cantidad efectiva de AZD2171 ó una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, antes, después o en forma simultánea con una cantidad efectiva de ZD1839 ó una sal farmacéuticamente 16
aceptable del mismo. De acuerdo con un aspecto adicional de la presente invención, se proporciona un método para el tratamiento de cáncer en un animal de sangre caliente tal como un humano, en donde el método comprende administrar al animal una cantidad efectiva de AZD2171 ó una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, antes, después o en forma simultánea con una cantidad efectiva de ZD1839 ó una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. De acuerdo con un aspecto adicional de la presente invención, se proporciona un método para el tratamiento de un cáncer que comprende un tumor sólido en un animal de sangre caliente, tal como un humano, en donde el método comprende administrar al animal una cantidad efectiva de AZD2171 ó una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, antes, después o en forma simultánea con una cantidad efectiva de ZD1839 ó una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. De acuerdo con un aspecto adicional de la presente invención, se proporciona un método para la producción de un efecto de reducción de permeabilidad anti-angiogénica y/o vascular en un animal de sangre caliente tal como un humano, en donde el método comprende administrar al animal una cantidad efectiva de AZD2171 ó una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, antes, después o 17
en forma simultánea con una cantidad efectiva de ZD1839 ó una sal farmacéuticamente aceptable del mismo; en donde AZD2171 y ZD1839 pueden ser administrados cada uno opcionalmente junto con un excipiente o vehículo farmacéuticamente aceptable. De acuerdo con un aspecto adicional de la presente invención, se proporciona un método para el tratamiento de un cáncer en un animal de sangre caliente tal como un humano, en donde el método comprende administrar al animal una cantidad efectiva de AZD2171 ó una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, antes, después o en forma simultánea con una cantidad efectiva de ZD1839 ó una sal farmacéuticamente aceptable del mismo; en donde AZD2171 y ZD1839 pueden cada uno ser administrados opcionalmente junto con un excipiente o vehículo farmacéuticamente aceptable. De acuerdo con un aspecto adicional de la presente invención, se proporciona un método para el tratamiento de un cáncer que comprende un tumor sólido en un animal de sangre caliente tal como un humano, en donde el método comprende administrar al animal una cantidad efectiva de AZD2171 ó una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, antes, después o en forma simultánea con una cantidad efectiva de ZD1839 ó una sal farmacéuticamente aceptable del mismo; en donde AZD2171 y ZD1839 pueden cada uno 18
ser administrados opcionalmente junto con un excipiente o vehículo farmacéuticamente aceptable. De acuerdo con un aspecto adicional de la presente invención, se proporciona una composición farmacéutica que comprende AZD2171 ó una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y ZD1839 ó una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en asociación con un excipiente o vehículo farmacéuticamente aceptable. De acuerdo con un aspecto adicional de la presente invención, se proporciona un producto de combinación que comprende AZD2171 ó una sal farmacéuticamente aceptable del mismo y ZD1839 ó una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, para utilizarse en un método de tratamiento de un cuerpo humano o de un animal a través de terapia. De acuerdo con un aspecto adicional de la presente invención, se proporciona un equipo que comprende AZD2171 ó una sal farmacéuticamente aceptable del mismo y ZD1839 ó una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. De acuerdo con un aspecto adicional de la presente invención, se proporciona un equipo que comprende: a) AZD2171 ó una sal farmacéuticamente aceptable del mismo en una primera forma de dosificación por unidad; b) ZD1839 ó una sal farmacéuticamente aceptable del mismo en una segunda forma de dosificación por unidad;
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c) medios de contención para contener la primera y segundas formas de dosificación. De acuerdo con un aspecto adicional de la presente invención, se proporciona un equipo que comprende: a) AZD2171 ó una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, junto con un excipiente o vehículo farmacéuticamente aceptable, en una primera forma de dosificación por unidad; b) ZD1839 ó una sal farmacéuticamente aceptable del mismo junto con un excipiente o vehículo farmacéuticamente aceptable, en una segunda forma de dosificación por unidad; c) medios de contención para contener la primera y segunda formas de dosificación. De acuerdo con un aspecto adicional de la presente invención, se proporciona el uso de AZD2171 ó una sal farmacéuticamente aceptable del mismo y ZD1839 ó una sal farmacéuticamente aceptable del mismo en la fabricación de un medicamento para utilizarse en la producción de un efecto de reducción de permeabilidad anti-angiogénica y/o vascular en un animal de sangre caliente, tal como un humano. De acuerdo con un aspecto adicional de la presente invención, se proporciona el uso de AZD2171 ó una sal farmacéuticamente aceptable del mismo y ZD1839 ó una sal 20
farmacéuticamente aceptable del mismo en la fabricación de un medicamento para utilizarse en la producción de un efecto anti-cáncer en un animal de sangre caliente, tal como un humano. De acuerdo con un aspecto adicional de la presente invención, se proporciona el uso de AZD2171 ó una sal farmacéuticamente aceptable del mismo y ZD1839 ó una sal farmacéuticamente aceptable del mismo en la fabricación de un medicamento para utilizarse en la producción de un efecto anti-tumor en un animal de sangre caliente, tal como un humano. De acuerdo con un aspecto adicional de la presente invención, se proporciona un tratamiento de combinación terapéutica que comprende la administración de una cantidad efectiva de AZD2171 ó una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, opcionalmente junto con un vehículo o excipiente farmacéuticamente aceptable, y la administración simultánea en secuencias o por separado de la cantidad efectiva de ZD1839 ó una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde ZD1839 puede ser administrado opcionalmente junto con un excipiente o vehículo farmacéuticamente aceptable, a un animal de sangre caliente tal como un humano que necesita de dicho tratamiento terapéutico. Dicho tratamiento terapéutico incluye un efecto de 21
permeabilidad anti-angiogénica y/o vascular, un efecto anticáncer y un efecto anti-tumor. Se puede lograr un tratamiento de combinación de la presente invención tal como aquí se define, a través de la administración simultánea, en secuencias o por separado de los componentes individuales del tratamiento. El tratamiento de combinación que aquí se define se puede aplicar en la forma de una terapia individual o puede comprender cirugía o radioterapia o un agente quimioterapéutico adicional, además de un tratamiento de combinación de la presente invención. La cirugía puede comprender el paso de la resección parcial o total del tumor, antes, durante o después de la administración del tratamiento de combinación con AZD2171 que aquí se describe. Otros agentes quimioterapéuticos para uso opcional con un tratamiento de combinación de la presente invención, incluyen los que se describen en la Publicación WO 00/47212 la cual está incorporada a la presente invención como referencia. Dicha quimioterapia puede cubrir 5 categorías principales de agentes terapéuticos: (i) otros agentes anti-angiogénicos que incluyen agentes de dirección vascular; (ii) agentes citostáticos; (iii) modificadores de respuesta biológica (por 22
ejemplo ¡nterferón); (iv) anticuerpos (por ejemplo edrecolomab); y (v) fármacos antiproliferativos/antineoplásticos y combinaciones de los mismos, tal como se utiliza en oncología médica; y otras categorías de agentes son: (vi) terapias antisentido; (vii) métodos de terapia genética; y (vüi) métodos de inmunoterapia. La administración de una combinación triple de AZD2171, ZD1839 y radiación por ionización puede producir efectos, tales como efectos anti-tumor, mayores a los que se pueden lograr ya sea con AZD2171, ZD1839 y radiación por ionización utilizados solos, mayores a los que se logran con la combinación de AZD2171 y ZD1839, mayores a los que se logran con la combinación de AZD2171 y radiación por ionización y mayores a los que se logran con la combinación de ZD1839 y radiación por ionización. De acuerdo con la presente invención, se proporciona un método para la producción de un efecto de reducción de permeabilidad anti-angiogénica y/o vascular en un animal de sangre caliente tal como un humano en donde el método comprende administrar al animal una cantidad efectiva de AZD2171 ó una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, antes, después o en forma simultánea con una cantidad efectiva de ZD1839 ó una sal farmacéuticamente aceptable 23
del mismo y antes, después o en forma simultánea con una cantidad efectiva de radiación por ionización. De acuerdo con un aspecto adicional de la presente invención, se proporciona un método para el tratamiento de un cáncer en un animal de sangre caliente tal como un humano, en donde el método comprende administrar al animal una cantidad efectiva de AZD2171 ó una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, antes, después o en forma simultánea con una cantidad efectiva de ZD1839 ó una sal farmacéuticamente aceptable del mismo y antes, después o en forma simultánea con una cantidad efectiva de radiación por ionización. De acuerdo con un aspecto adicional de la presente invención, se proporciona un método para el tratamiento de un cáncer que comprende un tumor sólido en un animal de sangre caliente tal como un humano, en donde el método comprende administrar al animal una cantidad efectiva de AZD2171 ó una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, antes, después o en forma simultánea con una cantidad efectiva de ZD1839 ó una sal farmacéuticamente aceptable del mismo y antes, después o en forma simultánea con una cantidad efectiva de radiación por ionización. De acuerdo con un aspecto adicional de la presente invención, se proporciona un método para la producción de un efecto de reducción de permeabilidad anti-angiogénico 24
y/o vascular en un animal de sangre caliente tal como un humano, en donde el método comprende administrar al animal una cantidad efectiva de AZD2171 ó una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, antes, después o en forma simultánea con una cantidad efectiva de ZD1839 ó una sal farmacéuticamente aceptable del mismo y antes, después o en forma simultánea con una cantidad efectiva de radiación por ionización, en donde AZD2171 y AZ1839 pueden ser administrados opcionalmente cada uno junto con un vehículo o excipiente farmacéuticamente aceptable. De acuerdo con un aspecto adicional de la presente invención, se proporciona un método para el tratamiento de un cáncer en un animal de sangre caliente tal como un humano, en donde el método comprende administrar al animal una cantidad efectiva de AZD2171 ó una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, antes, después o en forma simultánea con una cantidad efectiva de ZD1839 ó una sal farmacéuticamente aceptable del mismo y antes, después o en forma simultánea con una cantidad efectiva de radiación por ionización, en donde AZD2171 y AZ1839 pueden ser administrados opcionalmente cada uno junto con un excipiente o vehículo farmacéuticamente aceptable. De acuerdo con un aspecto adicional de la presente invención, se proporciona un método para el tratamiento de un cáncer que comprende un tumor sólido en un animal de 25
sangre caliente tal como un humano, en donde el método comprende administrar al animal una cantidad efectiva de AZD2171 ó una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, antes, después o en forma simultánea con una cantidad efectiva de ZD1839 ó una sal farmacéuticamente aceptable del mismo y antes, después o en forma simultánea con una cantidad efectiva de radiación por ionización, en donde AZD2171 y AZ1839 pueden ser administrados opcionalmente cada uno junto con un excipiente o vehículo farmacéuticamente aceptable. De acuerdo con un aspecto adicional de la presente invención, se proporciona el uso de AZD2171 ó una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y ZD1839 ó una sal farmacéuticamente aceptable del mismo en la fabricación de un medicamento para utilizarse en la producción de un efecto de reducción de permeabilidad anti-angiogénica y/o vascular en un animal de sangre caliente tal como un humano, el cual está siendo tratado con radiación por ionización. De acuerdo con un aspecto adicional de la presente invención, se proporciona el uso de AZD2171 ó una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y ZD1839 ó una sal farmacéuticamente aceptable del mismo en la fabricación de un medicamento para utilizarse en la producción de un efecto anti-cáncer en un animal de sangre 26
caliente tal como un humano, que está siendo tratado con radiación por ionización. De acuerdo con un aspecto adicional de la presente invención, se proporciona el uso de AZD2171 ó una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y ZD1839 ó una sal farmacéuticamente aceptable del mismo en la fabricación de un medicamento para utilizarse en la producción de un efecto anti-tumor en un animal de sangre caliente tal como un humano, el cual está siendo tratado con radiación por ionización. De acuerdo con un aspecto adicional de la presente invención, se proporciona un tratamiento de combinación terapéutica que comprende la administración de una cantidad efectiva de AZD2171 ó una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, opcionalmente junto con un excipiente o vehículo farmacéuticamente aceptable y la administración de una cantidad efectiva de ZD1839 ó una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, opcionalmente junto con un excipiente o vehículo farmacéuticamente aceptable y la administración de una cantidad efectiva de radiación por ionización, a un animal de sangre caliente tal como un humano que necesita de dicho tratamiento terapéutico, en donde el AZD2171, ZD1839 y la radiación por ionización se puede administrar en forma simultánea, en secuencias o por separado y en cualquier orden.
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Un animal de sangre callente, tal como un humano el cual está siendo tratado con radiación por ionización, significa un animal de sangre caliente tal como un humano, el cual es tratado con radiación por ionización antes, después o al mismo tiempo que la administración de un medicamento o tratamiento de combinación que comprende AZD2171 y ZD1839. Por ejemplo la radiación por ionización puede administrarse al animal de sangre caliente tal como un humano, dentro del período de una semana antes de una semana después de la administración de un medicamento o tratamiento de combinación que comprende AZD2171 y ZD1839. Esto significa que AZD2171, ZD1839 y la radiación por ionización puede administrarse por separado o en secuencias en cualquier orden, puede administrarse en forma simultánea. El animal de sangre callente puede experimentar el efecto de cada uno de AZD2171, ZD1839 y radiación en forma simultánea. De acuerdo con un aspecto de la presente invención, la radiación por ionización se administra antes ya sea de AZD2171 y ZD1839 ó después ya sea de AZD2171 y ZD1839. De acuerdo con un aspecto de la presente invención, la radiación por ionización se administra antes tanto de AZD2171 y ZD1839 como después tanto de AZD2171 y ZD1839.
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De acuerdo con un aspecto de la presente Invención AZD2171 se administra a un animal de sangre caliente después de que el animal ha sido tratado con radiación por ionización. En otro aspecto de la presente invención AZD2171 y
ZD1839 se dosifican diariamente en forma continua durante un período de tiempo mayor durante el cual se administra en forma periódica la radiación por ionización, esto es durante algunos días, por ejemplo 1, 2, 3, 4 ó 5 días a la vez. De acuerdo con otro aspecto de la presente invención el efecto de un método de tratamiento de la presente invención, se espera que sea al menos equivalente a la adición de los efectos de cada uno de los componentes del tratamiento utilizado solo, esto es, de cada uno de AZD2171 y ZD1839 ó de cada uno de AZD2171, ZD1839 y radiación por ionización utilizados solos. De acuerdo con otro aspecto de la presente invención, el efecto de un método de tratamiento de la presente invención, se espera que sea mayor a la adición de los efectos de cada uno de los componentes del tratamiento utilizado solo, esto es, de cada uno de AZD2171 y ZD1839 ó de cada uno de AZD2171, ZD1839 y radiación por ionización, utilizados solos. De acuerdo con otro aspecto de la presente invención, 29
el efecto de un método de tratamiento de la presente invención se espera que sea un efecto sinérgico. Se deberá apreciar que de acuerdo con la presente invención, se define un tratamiento de combinación como que produce un efecto sinérgico, si el efecto es terapéuticamente superior, al que se mide, por ejemplo, mediante el grado de la respuesta, rango de respuesta, el tiempo de progreso de la enfermedad o el período de supervivencia, al que se puede lograr en una dosificación de uno u otros de los componentes del tratamiento de combinación, en su dosis convencional. Por ejemplo, el efecto del tratamiento de combinación es sinérgico, si el efecto es terapéuticamente superior al efecto que se puede lograr con AZD2171 ó ZD1839 ó radiación por ionización solos. Además, el efecto del tratamiento de combinación es sinérgico si se obtiene un efecto benéfico en un grupo de pacientes que no responden (o responden en forma deficiente) a AZD2171 ó ZD1839 ó radiación por ionización sola. Además, el efecto del tratamiento de combinación se define como que produce un efecto sinérgico si uno de los componentes se dosifica en su dosis convencional y el otro componente(s) se dosifica en una dosis reducida y el efecto terapéutico, tal como se mide por ejemplo, a través del grado de respuesta, el rango de respuesta, el tiempo de progreso de la enfermedad o el período de supervivencia es 30
equivalente al que se puede lograr en la dosificación de cantidades convencionales de los componentes del tratamiento de combinación. En particular, se considera que hay sinergia si la dosis convencional de AZD2171 ó ZD1839 ó radiación por ionización pueden reducirse sin perjuicio a uno o más del grado de respuesta, el rango de respuesta, el tiempo de progreso de la enfermedad y datos de supervivencia, en particular sin perjuicio a la duración de la respuesta, aunque con más o menos efectos secundarios problemáticos de los que ocurren cuando se utilizan dosis convencionales de cada componente. Tal como se manifestó anteriormente, los tratamientos de combinación de la presente invención tal como se define en la misma, son de interés por sus efectos de permeabilidad anti-angiogénica y/o vascular. Los tratamientos de combinación de la presente invención se espera que sean útiles en la profilaxis y tratamiento de un amplio rango de estados de enfermedad, en donde ocurre la angiogénesis adecuada incluyendo cáncer (incluyendo leucemia, mieloma múltiple y linfoma), diabetes, psoriasis, artritis reumatoide, sarcoma de Kaposi, hemangioma, nefropatías agudas y crónicas, ateroma, restenosis arterial, enfermedades autoinmunes, inflamación aguda, linfoedema, endometriosis , sangrado uterino disfuncional y enfermedades oculares con proliferación de vasos retínales 31
incluyendo degeneración macular. En particular, se espera que dichos tratamientos de combinación de la presente invención disminuyan en forma ventajosa el crecimiento de tumores sólidos primarios y recurrentes, por ejemplo, del colon, seno, próstata, pulmones y piel. Más especialmente los tratamientos de combinación de la presente invención, se esperan que disminuyan en forma ventajosa el crecimiento de tumores en cáncer de pulmón, particularmente cáncer de pulmón de célula no pequeña (NSCLC). Más particularmente dichos tratamientos de combinación de la presente invención se espera que inhiban cualquier forma de cáncer asociado con VEGF incluyendo leucemia, mieloma múltiple, linfoma y también, por ejemplo, que inhiban el crecimiento de aquellos tumores sólidos primarios y recurrentes que están asociados con VEGF, especialmente aquellos tumores que son significativamente dependientes de VEGF en cuanto a su crecimiento y dispersión, incluyendo por ejemplo, ciertos tumores del colon (incluyendo recto), riñon, seno, próstata, pulmón, vulva y piel, particularmente NSCLC. En otro aspecto de la presente invención, AZD2171 y ZD1839, opcionalmente con radiación por ionización, se espera que inhiban el crecimiento de aquellos tumores sólidos primarios y recurrentes que están asociados con EGF, especialmente aquellos tumores que son 32
significativamente dependientes de EGF en cuanto a su crecimiento y dispersión. En otro aspecto de la presente invención, se espera que AZD2171 y ZD1839, opcionalmente con radiación por ionización, inhiban el crecimiento de aquellos tumores sólidos primarios y recurrentes que están asociados tanto con VEGF como EGF especialmente aquellos tumores que son significativamente dependientes de VEGF y EGF en cuanto a su crecimiento y dispersión. Las composiciones aquí descritas pueden estar en una forma adecuada para administración oral, por ejemplo en la forma de una tableta o cápsula, para administración nasal o administración mediante inhalación, por ejemplo en la forma de un polvo o solución, para inyección parenteral (incluyendo intravenosa, subcutánea, intramuscular, intravascular o infusión) por ejemplo en la forma de una solución, suspensión o emulsión estéril, para administración tópica por ejemplo en la forma de un ungüento o crema, para administración rectal por ejemplo en la forma de un supositorio o la ruta de administración puede ser mediante inyección directa en el tumor o mediante suministro regional o mediante suministro local. En otras modalidades de la presente invención, el AZD2171 y ZD1839 del tratamiento de combinación pueden suministrarse en forma endoscópica, intratraqueal, intralesión, percutánea, 33
intravenosa, subcutánea, intraperitoneal o intratumoral. Preferentemente AZD2171, se administra en forma oral. Preferentemente ZD1839, se administra en forma oral. En general las composiciones aquí descritas pueden prepararse en una forma convencional utilizando excipientes convencionales. Las composiciones de la presente invención se presentan de manera ventajosa en una forma de dosificación por unidad. AZD2171 normalmente será administrada a un animal de sangre caliente en una dosis por unidad entre los rangos de 1 a 50 mg por metro cuadrado de área corporal del animal, por ejemplo aproximadamente 0.03-1.5 mg/kg en un humano. Una dosis por unidad dentro del rango de, por ejemplo, 0.01-1.5 mg/kg preferentemente 0.03-0.5 mg/kg se considera y es normalmente una dosis terapéuticamente efectiva. Una forma de dosificación por unidad tal como una tableta o cápsula normalmente contendrán, por ejemplo 1-50 mg de ingrediente activo. Preferentemente una dosis diaria dentro del rango de 0.03-0.5 mg/kg es la que se emplea. Para ZD1839, se puede utilizar una formulación de tableta convencional para la administración oral a humanos, que contiene 50 mg, 100 mg, 250 mg ó 500 mg de ingrediente activo. Convenientemente la dosis oral diaria de ZD1839 es por ejemplo, dentro del rango de 25 a 750 mg, preferentemente dentro del rango de 50 a 600 mg, más 34
preferentemente dentro del rango de 100 a 400 mg. Se puede administrar radioterapia de acuerdo con prácticas conocidas en radioterapia clínica. Las dosis de radiación por ionización serán las conocidas para uso en radioterapia clínica. La terapia de radiación utilizada incluirá por ejemplo el uso de rayos-gamma, rayos-X y/o el suministro dirigido de radiación a partir de radioisótopos. También se incluyen otras formas de factores que dañan el ADN en la presente invención, tales como microondas e irradiación-U V. Por ejemplo, los rayos-X pueden ser dosificados en dosis diarias de 1.8-2.0 Gy, 5 días a la semana durante de 5 a 6 semanas. Normalmente una dosis fraccionada total estará dentro del rango de 45-60 Gy. Las dosis mayores simples, por ejemplo 5-10 Gy pueden administrar como parte de un curso de radioterapia. Las dosis simples pueden ser administradas en forma intraoperativa. Se puede utilizar radioterapia hiperfraccionada, mediante lo cual se administran pequeñas dosis de rayos-X en forma regular durante un período de tiempo, por ejemplo 0.1 Gy por hora durante un número de días. Los rangos de dosis para radioisótopos varían ampliamente, y dependen de la vida media del isótopo, la fuerza y tipo de radiación emitida y de la captación otra vez de las células. Tal como se manifestó anteriormente el tamaño de la 35
dosis de cada terapia que se requiere para el tratamiento terapéutico o profiláctico de un estado de enfermedad en particular, variará necesariamente dependiendo del huésped tratado, la ruta de administración y la severidad en la enfermedad que esté siendo tratada. Por consiguiente, la dosis óptica puede ser determinada por el especialista quien esté tratando al paciente en particular. Por ejemplo, puede ser necesario o deseable reducir las dosis antes mencionadas de los componentes de los tratamientos de combinación con el objeto de reducir la toxicidad. La presente invención se refiere a combinaciones de ZD1839 o una sal del mismo con AZD2171 o con una sal de AZD2171. Las sales de ZD1839 para utilizarse en composiciones farmacéuticas, serán sales farmacéuticamente aceptables, aunque pueden ser útiles otras sales en la producción de ZD1839 y sus sales farmacéuticamente aceptables. Las sales incluyen, por ejemplo, una sal de adición de ácido de ZD1839, por ejemplo, una sal de adición de mono- ó di-ácido con por ejemplo un ácido orgánico o inorgánico, por ejemplo ácido clorhídrico, bromhídrico, sulfúrico, fosfórico, trifluoroacético, cítrico, maleico, tartárico, fumárico, metanosulfónico ó 4-toluenosulfónico. Las sales de AZD2171 para utilizarse en composiciones farmacéuticas, serán sales 36
farmacéuticamente aceptables, aunque pueden ser útiles otras sales en la producción de AZD2171 y sus sales farmacéuticamente aceptables. Las sales farmacéuticamente aceptables, pueden incluir por ejemplo sales de adición de ácido. Dichas sales de adición de ácido incluyen por ejemplo sales con ácidos orgánicos e inorgánicos que producen aniones farmacéuticamente aceptables, tal como con haluros de hidrógeno o con ácido sulfúrico o fosfórico, o con ácido trifluoroacético, cítrico o maleico. Además las sales farmacéuticamente aceptables pueden ser formadas con bases orgánicas e inorgánicas las cuales producen un catión farmacéuticamente aceptable. Dichas sales con bases orgánicas e inorgánicas incluyen por ejemplo una sal de metal álcali tal como una sal de sodio o potasio y una sal de metal de tierra alcalina, tal como una sal de calcio o magnesio. AZD2171 puede ser sintetizado de acuerdo con los procesos que se describen en la Publicación WO 00/47212, en particular aquéllos que se describen en el Ejemplo 240 de la Publicación WO 00/47212. ZD1839 puede ser sintetizada de acuerdo con cualesquiera de los procesos conocidos para elaborar ZD1839. Por ejemplo ZD1839 puede elaborarse de acuerdo con los procesos que se describen en la Publicación WO 96/33980 (ver ejemplos 1, 10 y 24 a 31).
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Las pruebas que se encuentran a continuación puede ser utilizadas para demostrar la actividad de AZD2171 en combinación con ZD1839. Xenoiniertos de tumor de carcinoma de vulva A431 de humano en ratones Nude Se inyectaron en forma subcutánea (s.c.) 5 x 108 de células de tumor A431 en 0.1 mi de Medio de Eagle Modificado por Dulbecco (DMEM) dentro del flanco de cada ratón atímico (genotipo nu/nu). Once días después de la inoculación, los tumores fueron cortados y divididos para generar fragmentos de tumor cúbicos de 0.5 a 1 mm3, los cuales se implantaron en ratones nude adicionales para un experimento de terapia. Los volúmenes de los tumores fueron ¦ evaluados mediante medida de calibrador Vernier bilateral y, tomando la longitud que será el diámetro más largo a través del tumor y el ancho de la perpendicular correspondiente, se hizo el cálculo utilizando la fórmula (largo x ancho) por la raíz cuadrada de (largo x ancho) x (TT/6). Veintiocho días después del implante, cuando los tumores alcanzaron un volumen promedio de 0.9 cm3, los ratones fueron tratados con AZD2171 (3 mg/kg/administración), ZD1839 (50 mg/kg/administración) o una combinación de los mismos, en forma oral (p.o.) diariamente durante 24 días (día 28 - 52). AZD2171, ZD1839, o la combinación, fueron dosificados en 0.1 ml/10 38
g peso corporal, en la forma de suspensiones en 1 % de polisorbato 80 (por ejemplo una solución al 1 % (v/v) de mono-oleato de sorbitano de polioxietileno (20) en agua desionizada). La inhibición del crecimiento de tumor a partir del inicio del tratamiento, se evaluó en el día 45 (punto en el cual los animales de control fueron eliminados del experimento debido a la carga del tumor) a través de la comparación de las diferencias en el volumen de tumor entre grupos de control y tratados. Además, el número de regresiones de tumor después de 24 días de tratamiento fue confirmado (la regresión del tumor es evidente si el volumen del tumor al día 52 era más pequeño que el valor previo al tratamiento en el día 28). Tabla 1
Tratamiento % Promedio de inhibición de crecimiento de Número de regresión de
tumor después de 17 días de tratamiento tumor después de 24 días de
(tratamiento a partir del día 28 al día 45) tratamiento (tratamiento a [valor P a través de dos pruebas t diseñadas
a la medldal partir del día 28 al día 52)
AZD2171 (3 mg/kg/día, días 95% (P<0.001) 2/10 28-53, p.o.)
ZD1839 (50 mg/kg/día, días 94% (PO.001) 2/10 28-53, p.o.)
AZD2171 +ZD1839 141% (PO.001) 10/10 (es decir, regresión de tumor 41%) 39
La combinación de AZD2171 con ZD1839 produjo una mayor inhibición del crecimiento del tumor que cada uno de AZD2171 y ZD1839 solo (P<0.005 versus ya sea AZD2171 ó ZD1839 solos al día 52; una prueba-t diseñada a la medida). En contraste con el tratamiento con AZD2171 ó ZD1839 solo, se indujo la regresión en todos los xenoinjertos de carcinoma de vulva A431 tratados con la combinación de AZD2171 y ZD1839. La magnitud de regresión de tumor inducida por la combinación (calculada comparando el volumen de tumor previo al tratamiento (día 28) con el volumen después de 24 días de tratamiento (día 52)), alcanzó 55 +. 3% (promedio +. SE) al término del experimento. Los datos se muestran en forma gráfica en la figura 1. Modelo transgénico MMTV-neu El efecto de combinar AZD2171 con ZD1839 también fue examinado en ratones MMTV-neu. Estos ratones expresan en forma transgénica una forma activada del oncogén rat neu (ErbB2) bajo el control del promotor de virus de tumor mamario de ratón (MMTV). Después del embarazo, lo cual induce la activación del promotor, los ratones MMTV-neu desarrollaron en forma espontánea múltiples tumores dentro de cada glándula mamaria. Los ratones fueron seleccionados para dosificación, cuando su tumor mamario más grande alcanzó un volumen de ^0.4 40
cm3. Posteriormente los ratones fueron tratados en forma crónica (oral, una vez al día) con AZD2171 (1 ó 3 mg/kg/día), ZD1839 (50 mg/kg/día) ó combinación de ambos. Los animales de control fueron dosificados con vehículo (1% polysorbate 80). Debido a la variabilidad en el crecimiento de tumores espontáneos. La dosificación comenzó en momentos diferentes en forma relativa a la evaluación del volumen del tumor, el cual se determinó dos veces a la semana en todos los animales utilizando calibradores. Para simplificar el análisis, los datos dentro de cada grupo fueron recolectados en intervalos de 3 días (por ejemplo volúmenes de tumor de ratones que reciben ya sea 2, 3, ó 4 dosis de compuesto fueron recolectados y el volumen promedio fue trazado con "día 3"). Los datos se trazaron para las medidas agrupadas en períodos de 3 días es decir 2-4, 5-7, 8-10, etc. Se llevó a cabo el análisis estadístico en medidas entre los días 20 y 22 de la dosificación. A los tumores que se pudieron medir previamente, los cuales se convirtieron impalpables, se les asignó un valor de 0. El tratamiento con AZD2171 solo (1 a 3 mg/kg/día) inhibió significativamente el crecimiento (P<0.05) de tumores MTV-neu establecidos (>0.4 cm3). El tratamiento con ZD1839 solo, no inhibió el crecimiento del tumor MMTV-neu en una dosis de 50 mg/kg/día, aunque se ha 41
descubierto que provoca un efecto antitumor significativo cuando se dosifica en 100 mg/kg/día. Sin embargo, la combinación de AZD2171 (1 ó 3 mg/kg/día) con 50 mg/kg/día de ZD1839, produjo una mayor inhibición del tumor, que ya sea la dosis respectiva de AZD2171 solo (1 ó 3 mg/kg/día) ó ZD1839 (50 mg/kg/día) solo (P<0.002, una prueba-t diseñada a la medida). Los datos se muestran gráficamente en la figura 2.