MX2012008819A - Sales de lantibioticos. - Google Patents

Abstract

Se describen ciertas sales de compuestos lantibióticos, las composiciones farmacéuticas que comprenden las mismas y el uso de las sales y las composiciones para el tratamiento de infecciones microbianas, particularmente infección por Staphylococcus aureus resistente a la meticilina (MRSA). Las sales tienen una solubilidad acuosa de 2.5 mg/ml o mayor.

Description

SALES DE LANTIBIOTICOS Campo de la Invención La presente descripción se refiere a ciertas sales nuevas de ciertos compuestos lantibióticos , las composiciones f rmacéuticas que comprenden las mismas y el uso de las sales y composiciones para el tratamiento de infección microbiana, particularmente infección por Staphylococcus aureus resistente a la Meticilina (MRSA) .

Antecedentes de la Invención Muchos compuestos antibióticos han sido identificados de fuentes naturales incluyendo microorganismos . A menudo los compuestos antibióticos tienen una estructura química complicada y en particular una estructura estereoquímica complicada.

La actagardina es un producto natural preparado a partir de Actinoplanes garbadinensis, y tiene propiedades antibióticas , ver por ejemplo el documento EP0195359, en particular contra Streptococcus pyogenes, el cual provoca la fiebre escarlatina y la infección de amigdalitis estreptocócica . A pesar de la necesidad para nuevos antibióticos en los 22 años desde la publicación del documento EP0195359, no han sido autorizados ni comercializados antibióticos derivados de la actagardina.

Una nueva familia' de compuestos basados en la REF. 233486 desoxiactagardina B fue recientemente descrita en el documento O 2007/083112. La desoxiactagardina B es preparada a partir 'de A. liguriae y tiene un número de características distintivas de la actagardina, en particular los compuestos tienen diferencias en la secuencia de aminoácidos de la estructura de núcleo. Adicionalmente , la actagardina contiene un puente de lantionina oxidada en contraste a la desoxiactagardina B, en donde todos los puentes de lantionina están presentes en una forma reducida. Obviamente diferentes genes y diferente maquinaria biológica son requeridos para elaborar los diferentes compuestos. Además, estos compuestos muestran actividad diferente cuando son probados contra una gama de patógenos comunes. En algunos casos la actagardina y ciertos compuestos derivados de la misma muestran mayor actividad contra un patógeno dado que la desoxiactagardina B y derivados de la misma. De manera interesante,. contra otros ciertos patógenos, la desoxiactagardina B y los compuestos derivados de ésta muestra mayor actividad que la actagardina y los derivados de la misma.

La actividad de actagardina contra MRSA cuando se mide por una prueba estándar, tal como las concentraciones inhibitorias mínimas (MICs, por sus siglas en inglés) puede ser tan alta como de aproximadamente 32 g/ml, dependiendo de la cepa probada. De este modo, la actagardina tiene únicamente actividad baja a moderada contra MRSA debido a que entre más alto sea el valor de MIC menor es la actividad antimicrobiana del compuesto.

La actividad de la desoxiactagardina B contra MRSA, cuando se mide por una prueba estándar, tal como las concentraciones inhibitorias mínimas (MICs) , pueden tener una actividad tan alta como de aproximadamente 32 g/ml, dependiendo de la cepa probada. De este modo, desoxiactagardina B tiene únicamente actividad baja a moderada contra MRSA.

MRSA es una bacteria responsable de diferentes infecciones difíciles de tratar en humanos y animales. La o las cepas particulares de S. aureus que es etiquetada como MRSA es o son resistentes a un gran número de antibióticos llamados beta-lactamas, los cuales incluyen las penicilinas y las cefalosporinas .

La o las cepas recibieron una cantidad significativa de atención en el medio y fueron apodadas como " supergérmenes o superbacterias" . Los pacientes con heridas abiertas, aquellos quienes tienen procedimientos que involucran dispositivos invasores, y aquellos con un sistema inmunitario debilitado, están más en riesgo de infección, especialmente durante la hospitalización. La infección es altamente contagiosa y si ésta es identificada en una sala de hospital, la sala puede ser cerrada hasta que ésta es descontaminada .

De este modo, los compuestos antimicrobianos con actividad contra MRSA podrían ser particularmente útiles.

La monocarboxamida de la desoxiactagardina B (3,5-diclorobencilamina) y la monocarboxamida de la actagardina (3 , 5-diclorobencilamina) tienen actividad contra una gama de bacterias gram positivas, incluyendo S. aureus sensible a la Meticilina, y por ejemplo tienen actividad contra una o más cepas de MRSA de 8 g/ml o menos, tal como 4 ó 2 pg/ml, lo cual representa al menos un incremento de 2 veces, tal como de 4 u 8 veces, en la actividad sobre los compuestos progenitores de actagardina o desoxiactagardina B. Además, el hecho de que éstos tengan actividad contra una gama de bacterias gram positivas, los hace terapéuticamente útiles.

.No obstante, la solubilidad acuosa de estos compuestos es baja, por ejemplo aproximadamente 0.25 mg/ml después de la liofilización, lo cual hace con esto a los compuestos no adecuados para la formulación por las vías parenterales .

A valores de pH moderados, por ejemplo entre pH 4 y pH 8, el compuesto existe como un anfotero. Un ácido fuerte, tal como el ácido clorhídrico, podría en general romper el anfotero en el compuesto y formar una sal que pudiera normalmente esperarse que muestre solubilidad aumentada en agua. Sorprendentemente, la forma salina con ácidos fuertes como el ácido clorhídrico y ácido fosfórico no dio un material con solubilidad acuosa sustancialmente incrementada. En general, una solubilidad de al menos 2 mg/ml y probablemente 5 mg/ml es requerida para la preparación de las formulaciones parenterales.

Breve descripción de la Invención Los presentes inventores han encontrado un número pequeño de sales con buena solubilidad acuosa, lo cual permite que éstas sean formuladas para la administración parenteral .

De este modo, se proporciona una sal de un compuesto de la fórmula (I) : en donde R1 junto con el átomo de carbono al cual está enlazado y el nitrógeno alfa y el carbonilo alfa representa un residuo de aminoácido; R2 junto con el átomo de carbono al cual está enlazado y el nitrógeno alfa y el carbonilo alfa representa un residuo de aminoácido; y p representa 0 ó 1, en donde la sal es formada a partir de una amina orgánica pequeña que comprende al menos un grupo hidroxilo.

Con el fin de ser útil para la preparación de formulaciones parenterales , un compuesto, o una sal de un compuesto requiere en general una solubilidad mayor de 2.5 mg/ml, tal como 5 mg/ml.

Venta osamente, las sales de la presente descripción tienen una solubilidad acuosa de 2.5 mg/ml o más, tal como en el intervalo de 2.5 a 50 mg/ml, en particular una solubilidad en el intervalo de 2.5 a 20, más particularmente en el intervalo de 5 a 15, tal como 10, lo cual representa al menos un incremento de 20 veces en la solubilidad acuosa sobre el compuesto progenitor.

La solubilidad, como es empleada en la presente, es utilizada genéricamente para referirse a una distribución de un compuesto de la fórmula (I) en un solvente (por ejemplo agua, solución salina, o solución salina isotónica tal como glucosa) tal que la formulación/composición que resulta de ésta, está sustancialmente libre de agregados visibles y por ejemplo es sustancialmente transparente observada a simple vista. Tal formulación podría incluir por lo tanto una gama completa de formatos que son adecuados para la venoclisis y/o inyección tales como soluciones, suspensiones, coloides y similares .

No obstante de cómo sean formuladas las sales de la presente invención, la solubilidad incrementada (habilidad para ser distribuida en un solvente tal como un ambiente acuoso) es una propiedad importante.

Ventajosamente, las sales de la presente descripción tienden a tener una solubilidad más alta que las sales inorgánicas.

La Tabla 1 muestra la solubilidad de ciertas sales de acuerdo a la presente descripción. * cálculos realizados a partir de dos determinaciones Otras propiedades de ciertas sales de acuerdo a la descripción incluyen la habilidad para elaborar "soluciones" claras (ver tabla 3 en la sección experimental) y/o la habilidad para controlar el pH final de la "solución" formada .

La Figura 6 muestra el intervalo óptimo de valores de pH para obtener la mejor solubilidad (mg/ml) . Los intervalos mostrados están entre 6.5-9 tal como 7-8.5. No obstante, la solubilidad no es la única propiedad que es importante cuando se selecciona un candidato a fármaco.

Breve descripción de las Figuras La Figura 1 es una gráfica que representa la eficacia in vivo del compuesto del Ejemplo 1 en un modelo de bacteremia en ratón, en 7 días.

La Figura 2 es una gráfica que evalúa la eficacia in vivo del compuesto del Ejemplo 1 en el tratamiento de infecciones tisulares bacterianas utilizando un modelo de muslo de ratón neutropénico .

La Figura 3 es una gráfica que representa la dependencia a la dosis en el compuesto del Ejemplo 1 y la vancomicina .

La Figura 4 es una gráfica que describe la vida media plasmática in vivo del compuesto del Ejemplo 1, en ratones .

La Figura 5 es un cromatograma de HPLC para la estabilidad en solución acuosa del compuesto del Ejemplo 1.

La Figura 6 es una gráfica de solubilidad versus pH del compuesto del Ejemplo 1.

Descripción detallada de la Invención En una modalidad p es 1.

En una modalidad p es 0.

En una modalidad R1 junto con el átomo de carbono al cual está enlazado y el nitrógeno alfa y el carbono alfa, es un aminoácido proteinpgénico .

En una modalidad R1 junto con el átomo de carbono al cual está enlazado y el nitrógeno alfa y el carbonilo alfa, representa leucina o valina.

En una modalidad R2 junto con el átomo de carbono al cual está enlazado y el nitrógeno alfa y el carbono alfa, es un aminoácido proteinogénico .

En una modalidad R2 junto con el átomo de carbono al cual está enlazado y el nitrógeno alfa y el carbonilo alfa, representa isoleucina o valina.

En una modalidad R1 junto con el átomo de carbono al cual está enlazado y el nitrógeno alfa y el carbonilo alfa, representa valina y R2 junto con el átomo de carbono al cual está enlazado y el nitrógeno alfa y el carbonilo alfa, representa isoleucina.

En una modalidad R1 junto con el átomo de carbono al cual está enlazado y el nitrógeno alfa y el carbonilo alfa, representa leucina y R2 junto con el átomo de carbono al cual está enlazado y el nitrógeno alfa y el carbonilo alfa, representa valina.

En una modalidad R1 junto con el átomo de carbono al cual está enlazado y el nitrógeno alfa y el carbonilo alfa, representa valina y R2 junto con el átomo de carbono al cual está enlazado y el nitrógeno alfa y el carbonilo alfa, representa valina.

En una modalidad R1 junto con el átomo de carbono al cual está enlazado y el nitrógeno alfa y el carbonilo alfa, representa leucina y R2 junto con el átomo de carbono al cual está enlazado y el nitrógeno alfa y el carbonilo alfa, representa isoleucina.

En una modalidad el compuesto es : En una modalidad, el compuesto no es la sal de N-metil-D-glucamina de la monocarboxamida de la desoxiactagardina B (3 , 5-diclorobencilamina) .

La formación de las sales de los compuestos lantibióticos tipo B con buena solubilidad, es algo impredecible . De este modo, es sorprendente que las sales de la presente invención en general tengan una solubilidad acuosa de al menos 10 mg/ml, por ejemplo.20 mg/ml, tal como 30-40 mg/ml, en particular 50 mg/ml.

La amina orgánica pequeña, como es empleada en la presente, está destinada a referirse a un compuesto que contiene carbono, que contiene no más de 10 átomos de carbono, por ejemplo 9, 8, 7, 6 ó 5 átomos de carbono, en donde la entidad contiene una amina en algún sitio en ésta.

En una modalidad, el compuesto de amina orgánica con la cual es formada la sal, comprende no más de 8, en particular 6, 7 u 8 átomos de carbono. En una modalidad, la amina orgánica comprende no más de 4, 5 ó 6 átomos de carbono .

En una modalidad, la amina orgánica comprende uno, dos, tres, cuatro ó cinco grupos hidroxilo. En una modalidad, la amina orgánica comprende uno, dos, tres o cuatro grupos hidroxilo, en particular tres o cuatro grupos hidroxilo .

Una amina orgánica pequeña que comprende al menos un grupo hidroxilo como se emplea en la presente, puede referirse al material a partir del cual es preparada la sal.

En una modalidad, la amina del compuesto de la amina orgánica es un grupo -NH2. En una modalidad, la amina del compuesto de amina orgánica es un grupo -NHR1, donde -R1 es un grupo alquilo que tiene al menos 2 átomos de carbono.

En una modalidad, un grupo hidroxilo en la amina orgánica es enlazado a un carbono carbonílico en ésta para formar un ácido carboxílico, al menos en el material inicial a partir del cual la sal es formada. De este modo, en una modalidad, la entidad de amina orgánica comprende un ácido carboxílico. En una modalidad, la entidad de amina orgánica comprende un ácido carboxílico.

En una modalidad, la sal es formada a partir de un aminoalcohol .

En una modalidad, el grupo hidroxilo es enlazado a un carbono situado en posición beta con relación al nitrógeno de la amina .

En una modalidad, la amina orgánica es seleccionada de glucamina, tal como N-metilglucamina o N-etilglucamina, etanolamina, dietanolamina y arginina. En una modalidad, la amina orgánica es seleccionada de N-etilglucamina, dietanolamin y arginina. Adicional o alternativamente, la amina orgánica puede ser N-metil-L-glucamina .

De este modo, en una modalidad, se proporciona una sal de un compuesto descrito en la presente en donde la amina orgánica es una glucamina, por ejemplo N-metilglucamina o N-etilglucamina, tal como N-metilglucamina.

En una modalidad, la amina orgánica es N-etilglucamina .

En una modalidad, el compuesto aminohidroxilo orgánico es una glucosamina.

En otra modalidad más, se proporciona una sal de un compuesto descrito en la presente en donde la amina orgánica es etanolamina.

En una modalidad, la sal no es trietanolamina .

En una modalidad adicional, se proporciona una sal de un compuesto descrito en la presente, en donde la amina orgánica es selecciona de arginina, lisina o 2-amino-l,3-propanodiol .

En una modalidad, la amina orgánica no es etanolamina. En una modalidad, la amina orgánica no es N-metil-D-glucamina . En una modalidad, la amina orgánica no es glutamato .

Aquellas personas expertas en la técnica de la química orgánica apreciarán que muchos compuestos orgánicos pueden formar complejos con solventes en los cuales éstos se hacen reaccionar a partir de los cuales éstos son precipitados o cristalizados. Estos complejos son conocidos como "solvatos". Por ejemplo, un complejo con agua es conocido como un "hidrato" . Las sales de la descripción pueden formar solvatos (por ejemplo, hidratos) y la descripción también incluye todos los solvatos tales.

En una modalidad, se proporciona un solvato, tal como un hidrato, de una sal de un compuesto descrito en la presente.

Con respecto a los estereoisómeros , las sales de la presente descripción tienen más de un átomo de carbono asimétrico. En la fórmula general (I) como se dibuja, el enlace en forma de cuña sólida indica que el enlace está por arriba del plano del papel. El enlace discontinuo indica que el enlace está por debajo del plano del papel.

Las sales del compuesto de la fórmula (I) pueden estar en forma cristalina o amorfa. Además, algunas de las formas cristales pueden existir como polimorfos, todas las formas que son incluidas en la presente descripción. Habiendo dicho esto, en general los compuestos son amorfos.

Las sales de la presente invención son preparadas al hacer reaccionar el compuesto descrito en la presente, con una base en un solvente apropiado.

Típicamente, una sal farmacéuticamente aceptable puede ser fácilmente preparada mediante el uso de una base deseada, como sea apropiado. La sal puede precipitarse a partir de la solución y ser recolectada por filtración, o se recuperada por evaporación del solvente, por ejemplo, un compuesto de la fórmula (I) puede ser disuelto en un solvente adecuado, por ejemplo un alcohol tal como metanol, o t-butanol y la base puede ser agregada en el mismo solvente o en otro solvente adecuado. La sal resultante puede ser entonces precipitada directamente, o por adición de un solvente menos polar tal como éter diisopropílico o hexano, y aislada por filtración.

La sal puede ser preparada mediante la disolución de un compuesto descrito en la presente especificación en un solvente alcohólico adecuado, tal como t-butanol en presencia de uno, dos o tres equivalentes de una amina orgánica pequeña que comprende al menos un grupo hidroxilo.

De este modo, se proporciona un proceso de producción de una sal en solución, que comprende disolver el solvente progenitor en un solvente polar orgánico adecuado en presencia de una cantidad apropiada del socio formador de la sal.

En una modalidad, el solvente es t-butanol y/o DMSO. ??· una modalidad, el solvente es t-butanol. En una modalidad, el solvente es t-butanol y/o agua, por ejemplo 20% p/p o menos de agua, tal como 10% p/p o menos, en particular 5% p/p o menos de agua.

En una modalidad, el socio formador de sal es proporcionado en más de 1 equivalente tal como en el intervalo de 0.5 a 3.5 por ejemplo 1 a 3 equivalentes, tal como 1, 1.5, 2 ó 2.5 equivalentes, en particular 1.1, 1.2, 1.3, 1.4, 1.5, etc.

Los compuestos descritos en la presente son monobásicos, y de este modo, cuando más de un equivalente de la amina orgánica es empleado, la entidad resultante puede de hecho comprender una sal verdadera y la amina adicional en mezcla. No obstante, la presente invención se extiende a tales composiciones (o mezclas) , que pueden ser benéficas para mejorar la solubilidad.

En una modalidad, la sal de la presente descripción es proporcionada por evaporación del solvente, por ejemplo bajo presión reducida, por ejemplo empleando un evaporador rotatorio .

La liofilización (deshidratación por congelamiento) puede ser empleada en la preparación de la sal para proporcionar un producto liofilizado de la presente descripción .

De este modo, se proporciona un proceso de preparación de una sal de un compuesto descrito en la presente,, que comprende el paso de disolver el compuesto progenitor y un socio formador de sal en un solvente adecuado, y liofilizando para proporcionar un producto liofilizado de la presente descripción.

De este modo, en una modalidad, se proporciona una composición, por ejemplo un producto liofilizado que comprende una sal de un compuesto de la fórmula (I) y una amina orgánica pequeña y un exceso de dicha amina.

En una modalidad, la sal o el producto liofilizado de la presente descripción comprende menos de 10% p/p, por ejemplo 5% p/p o menos, tal como 3% p/p o menos de agua.

En una modalidad, la sal o el producto liofilizado de la presente descripción comprende menos de 5% p/p, por ejemplo 2% p/p o menos, tal como 1% p/p o menos de solvente, tal como t-butanol.

El producto de liofilización de la presente descripción puede comprender cantidades pequeñas de agentes de ajuste del pH, por ejemplo HCl o amortiguador de TRIS.

Alternativamente, el secado por rocío puede ser empleado para extraer la sal de la solución. En una modalidad, la sal de la presente descripción es secada por rocío, por ejemplo para proporcionar un material con propiedades de flujo adecuadas.

En un aspecto, la sal descrita en la presente es secada por rocío en uno o más excipientes para proporcionar partículas que son aglomeraciones de la sal y los excipientes.

Las sales de la descripción pueden ser formuladas para la administración de cualquier manera conveniente para el uso en medicina humana o veterinaria, y la descripción incluye por lo tanto dentro de su alcance las composiciones farmacéuticas que comprenden una sal de la descripción para el uso en medicina humana o veterinaria. Tales composiciones pueden ser presentadas para el uso de una manera convencional con la ayuda de uno o más excipientes, diluyentes y/o portadores adecuados. Los excipientes, diluyentes y portadores adecuados para uso terapéutico son bien conocidos en la técnica farmacéutica, y se describe en, por ejemplo, en Remington's Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Co. (A. R. Gennaro edit. 1985) . La elección del excipiente, el diluyente y/o el portador farmacéutico, puede ser seleccionada con respecto a la vía pretendida de administración y a la práctica farmacéutica estándar. Las composiciones farmacéuticas pueden comprender como (o en adición a) el excipiente, el diluyente y/o el portador, cualesquiera aglutinante (s) , lubricante ( s ) , agente (s) suspensor (es) , agente (s) de recubrimiento ( s) , agente (s) de solubilización .

Pueden ser proporcionados en la composición farmacéutica los conservantes, estabilizadores, colorantes o incluso agentes saborizantes . Los ejemplos de conservantes incluyen benzoato de sodio, ácido sórbico y ásteres de ácido p-hidroxibenzoico . Pueden ser también utilizados antioxidantes y agentes suspensores.

Para algunas modalidades, las sales de la presente descripción pueden también ser utilizadas en combinación con una ciclodextrina. Se sabe que las ciclodextrinas forman complejos de inclusión y no de inclusión con las moléculas del fármaco. La formación de un complejo fármaco-ciclodextrina puede modificar la solubilidad, la velocidad de disolución, la biodisponibilidad y/o la propiedad de estabilidad de una molécula de fármaco. Los complejos f rmaco-ciclodextrina son en general útiles para la mayoría de las formas de dosis y vías de administración. Como una alternativa a la formación directa del complejo con el fármaco, la ciclodextrina puede ser utilizada como un aditivo auxiliar, por ejemplo, como un portador, diluyente, o solubilizador . Las alfa-, beta- y gamma-ciclodextrinas son más comúnmente utilizadas y los ejemplos adecuados se describen en los documentos WO 91/11172, WO 94/02518 y O 98/55148.

En una modalidad', la formulación comprende hasta 15% p/p de una ciclodextrina.

En un aspecto, la invención proporciona una composición farmacéutica que comprende una cantidad terapéuticamente efectiva de una sal de la presente descripción y un excipiente, diluyente y/o portador f rmacéuticamente aceptable (incluyendo combinaciones de los mismos) . Las sales de la descripción pueden ser molidas utilizando procedimientos de molienda conocidos tales como la molienda húmeda para obtener un tamaño de partícula apropiado para la formación de tabletas y para otros tipos de formulaciones. Las preparaciones finamente divididas (nanopartículas) de las sales de la invención pueden ser preparadas mediante procesos conocidos en la técnica, por ejemplo ver la Solicitud de Patente International No. WO 02/00196 (SmithKline Beecham) .

Las vías para la administración (distribución) incluyen, pero no están limitadas a, una o más de: oral (por ejemplo, como una formulación de partículas de polvo seco/de flujo libre, tableta, cápsula, o como una solución o suspensión ingerible) rectal, bucal, y sublingual. Las composiciones de la descripción incluyen aquellas en una forma especialmente formulada para el uso parenteral, oral, bucal, rectal, tópico, por implante, oftálmico, nasal o genito-urinario . En un aspecto de la invención, los agentes son distribuidos oralmente, por lo tanto, el agente está en una forma que es adecuada para la distribución oral.

En algunos casos, puede ser posible distribuir las sales de la descripción por una ruta tópica, parenteral (por ejemplo, mediante una forma inyectable) o transdérmica, incluyendo mucosal (por ejemplo, como un rocío nasal o aerosol para inhalación), nasal, gastrointestinal, intraespinal , intraperitoneal , intramuscular, intravenosa, intrauterina, intraocular, intradérmica, intracraneal, intratraqueal , intravaginal , intracerebroventricular, intracerebral , subcutánea, oftálmica (incluyendo intravitreal o intracameral) .

Pueden ser existir diferentes requerimientos de composición/formulación dependiendo de los sistemas de distribución diferentes o de las diferentes rutas de administración. A manera de ejemplo, la composición farmacéutica de la presente descripción puede ser formulada para ser distribuida utilizando una mini-bomba o por una ruta mucosal, por ejemplo, como un rocío nasal o aerosol para inhalación o solución ingerible, o parenteralmente en la cual la composición es formulada en una forma inyectable, para la distribución por, por ejemplo, una ruta intravenosa, intramuscular o subcutánea. Alternativamente, la formulación puede ser diseñada para ser distribuida por ambas rutas. Donde es apropiado, las composiciones farmacéuticas pueden ser administradas por inhalación, en la forma de un supositorio o pesario, tópicamente en la forma de una loción, solución, crema, ungüento o polvo de espolvoreo, mediante el uso de un parche cutáneo, oralmente en la forma de tabletas que contienen excipientes tal como almidón o lactosa, o en cápsulas u óvulos, ya sea solos o en mezcla con excipientes, o en la forma de elíxires, soluciones o suspensiones que contienen agentes saborizantes o colorantes, o éstos pueden ser inyectados parenteralmente, por ejemplo intravenosamente, intramuscularmente o subcutáneamente .

Para la administración parenteral, las composiciones pueden ser utilizadas mejor en la forma de una solución acuosa estéril que puede contener otras sustancias, por ejemplo suficientes sales o sacáridos, en particular un monosacárido, para hacer a la solución isotónica con la sangre. Los ejemplos de administración parenteral incluyen uno o más de: intravenosamente, intraarterialmente , intraperitonealmente , intratecalmente, intraventricularmente , intrauretralmente , intrasternalmente, intracranealmente, intramuscularmente o subcutáneamente para administrar el agente, y/o mediante el uso de técnicas de infusión.

En una modalidad, la formulación está adaptada por la distribución por venoclisis o inyección lenta.

En una modalidad, la formulación es adaptada para la distribución por inyección de bolo.

En una modalidad, la formulación que va a ser administrada es una solución clara.

Para la administración bucal o sublingual, las composiciones pueden ser administradas en la forma de tabletas o pastillas, las cuales pueden ser formuladas de una manera convencional.

Las sales de la descripción pueden ser administradas (por ejemplo, oralmente o tópicamente) en la forma de tabletas, cápsulas, óvulos, elixires, soluciones o suspensiones, que pueden contener agentes saborizantes o colorantes, para aplicaciones de liberación inmediata, retardada, modificada, sostenida, pulsada o controlada.

Las sales de la descripción pueden también ser presentadas para uso humano o veterinario en una forma adecuada para la administración oral o bucal, por ejemplo en la forma de soluciones, geles, jarabes, lavados bucales o suspensiones, o como un polvo seco para la constitución con agua u otro vehículo adecuado antes del uso, opcionalmente con agentes saborizantes y colorantes.

Las composiciones tales como tabletas, cápsulas, pastillas, pastillas para chupar, pildoras, polvos, pastas, gránulos, balas o preparaciones de pre-mezcla pueden ser también utilizadas. Las composiciones sólidas y líquidas para el uso oral pueden ser preparadas de acuerdo a los métodos bien conocidos en la técnica. Tales composiciones pueden también contener uno o más portadores y excipientes farmacéuticamente aceptables los cuales pueden estar en forma sólida o líquida.

Las tabletas pueden contener excipientes tal como celulosa microcristalina, lactosa, citrato de sodio, carbonato de calcio, sulfato de calcio, fosfato dibásico de calcio y glicina, manitol,. almidón pregelatinizado , almidón de maíz, almidón de papa, desintegradores tales como glicolato de almidón de sodio, croscarmelosa de sodio, y ciertos silicatos complejos, y aglutinantes de granulación tales como polivinilpirrolidona, hidroxipropilmetilcelulosa (HP C) , hidroxipropilcelulosa (HPC) , sucrosa, gelatina y acacia .

Además, los agentes lubricantes tales como estearato de magnesio, ácido esteárico, behenato de glicerilo y talco, pueden ser también incluidos.

Las composiciones sólidas de un tipo similar pueden ser también administradas en cápsulas de gelatina o de HPMC (hidroxipropilmetilcelulosa) . Los excipientes adecuados a este respecto incluyen celulosa microcristalina, lactosa, carbonato de calcio, sulfato de calcio, fosfato dibásico de calcio, y manitol, almidón pregelatinizado, almidón de maíz, almidón de papa, o polietilenglicoles de alto peso molecular.

Para suspensiones acuosas y/o elíxires, el agente puede ser combinado con diversos agentes endulzantes o saborizantes , material colorante o pigmentos, con agentes emulsificantes y/o suspensores y con diluyentes tales como agua, etanol, propilenglicol y glicerina, y combinaciones de los mismos.

Las cápsulas pueden ser llenadas con un polvo (de medicamento solo o como una mezcla con uno o varios rellenadores seleccionados) o alternativamente un líquido, cada una comprendiendo una o más sales de la presente descripción y opcionalmente un portador. Donde la cápsula es llenada con un polvo, las sales de la presente descripción y/o el portador pueden ser molidas o micronizadas para proporcionar el material con un tamaño de partícula apropiado .

Las sales de la descripción pueden ser recubiertas, por ejemplo con un recubrimiento entérico cuando son administradas oralmente como una tableta o cápsula. La tableta o cápsula, como es apropiado, puede, por ejemplo ser recubierta con una película delgada tal como la película EUDRAGIT® disponible de Rohm Pharma Polymers, la cual permite la disolución controlada en el tracto gastrointestinal. Las películas están disponibles como polímeros catiónicos tales como EUDRAGIT® E 100 (copolímeros de metacrilato de aminoalquilo) o como polímeros acrílicos aniónicos tales como EUDRAGIT® L (copolímeros de ácido metacrílico) y EUDRAGIT S.

Los polímeros acrílicos permeables tales como EUDRAGIT® RL (copolímero de aminometacrilato) y EUDRAGIT® RS están también disponibles.

Estas formulaciones de recubrimiento pueden ser preparadas como una dispersión acuosa que incluye ingredientes opcionales tales como talco, emulsión antiespumante de silicona, polietilenglicol .

Alternativamente, la formulación de recubrimiento puede ser preparada como una solución polimérica orgánica.

Alternativamente, las tabletas pueden ser recubiertas utilizando los sistemas de recubrimiento OPADRY® (Surelease®) , disponibles de Colorcon. Los sistemas acuosos comprenden en general hasta 15% p/p de OPADRY®. Los sistemas de solventes orgánicos comprenden en general hasta 5% p/p de OPADRY® .

Los recubrimientos pueden ser preparados mediante técnicas conocidas, por ejemplo mediante; 1. el pesaje de la cantidad requerida del sistema de recubrimiento de película OPADRY®, 2. el pesaje de la cantidad requerida de agua u otro u otros solventes en un recipiente mezclador, 3. con un propulsor de mezclado en el centro del recipiente y tan cercano al fondo del recipiente como sea posible, agitando los solventes para formar un torbellino sin atraer aire hacia el líquido, 4. Agregar gradualmente y de manera rápida el polvo OPADRY® al vórtice, evitando la flotación del polvo sobre la superficie del líquido, 5. incrementando la velocidad del agitador con el fin de mantener el torbellino, si se requiere, y 6. después de que todos los ingredientes del polvo han sido agregados, se reduce la velocidad del mezclador y se continúa el mezclado por aproximadamente 45 minutos .

Los recubrimientos pueden ser aplicados mediante técnicas conocidas, utilizando máquinas de recubrimiento de tabletas .

El espesor del recubrimiento aplicado está en general en el intervalo de 5 a 35 micrometros tal como de 10 a 30 micrometros, más específicamente de 10 ó 20 micrometros, dependiendo del efecto requerido.

Alternativamente, la tableta o una cápsula, como sea apropiado, puede ser llenada dentro de otra cápsula (preferentemente, una cápsula de HPMC tal como Capsugel®) para proporcionar ya sea una tableta en configuración de cápsula o de cápsula en cápsula, la cual, cuando se administra a un paciente produce una disolución controlada en el tracto gastrointestinal, con lo cual se proporciona un efecto similar a un recubrimiento entérico.

De este modo, en un aspecto la descripción proporciona una formulación de dosis sólida de una sal de la presente descripción, por ejemplo donde la formulación tiene un recubrimiento entérico.

En otro aspecto más, la descripción proporciona una formulación de dosis sólida que comprende una cápsula protectora como capa exterior, por ejemplo como una tableta en una cápsula o en una cápsula en una cápsula. El recubrimiento entérico puede proporcionar un perfil de estabilidad mejorado sobre las formulaciones no recubiertas.

Habiendo dicho esto, se cree que las sales de la presente descripción no son particularmente susceptibles a la degradación por el ácido estomacal o las enzimas intestinales in vivo.

Las sales de la descripción pueden también ser administradas oralmente, en medicina veterinaria, en la forma de . un baño líquido tal como una solución, suspensión o dispersión del ingrediente activo junto con un portador o excipiente farmacéuticamente aceptable.

Las sales de la invención pueden también, por ejemplo, ser formuladas como supositorios, por ejemplo, conteniendo bases de supositorio convencionales, para el uso en medicina veterinaria o humana o como pesarios, por ejemplo, conteniendo bases de pesario convencionales.

En una modalidad, la formulación es proporcionada como una formulación para la administración tópica incluyendo inhalación.

Las preparaciones inhalables adecuadas incluyen polvos inhalables, aerosoles de medición que contienen gases propelentes o soluciones inhalables libres de gases propelentes. Los polvos inhalables de acuerdo a la descripción que contienen la sustancia activa, pueden consistir únicamente de las sustancias activas anteriormente mencionadas, o de una mezcla de las sustancias activas anteriormente mencionadas con el excipiente fisiológicamente aceptable.

Estos polvos inhalables pueden incluir monosacáridos (por ejemplo, glucosa o arabinosa) , disacáridos (por ejemplo, lactosa, sacarosa, maltosa) , oligo- y polisacáridos (por ejemplo, dextranos) , polialcoholes (por ejemplo, sorbitol, manitol, xilitol) , sales (por ejemplo, cloruro de sodio, carbonato de calcio) o mezclas de éstos uno con el otro. Los mono- o disacáridos son preferentemente utilizados, el uso de lactosa o glucosa, particularmente pero no de manera exclusiva en la forma de sus hidratos.

Las partículas para deposición en el pulmón requieren un tamaño de partícula menor de 10 micrometros, tal como 1-9 micrometros, adecuadamente de 0.1 a 5 µt?, particularmente y de manera preferida de 1 a 5 µ??.

Los gases propelentes que pueden ser utilizados para preparar los aerosoles inhalables, son conocidos de la técnica anterior. Los gases propelentes adecuados son seleccionados dentro de los hidrocarburos tal como n-propano, n-butano o isobutano, y halohidrocarburos tales como derivados clorados y/o fluorados de metano, etano, propano, butano, ciclopropano, o ciclobutano. Los gases propelentes anteriormente mencionados pueden ser utilizados por si solos o en mezclas de los mismos.

Lós gases propelentes particularmente adecuados son derivados de alcano halogenado seleccionados de entre TG11, TG12, TG134a y TG227. De los hidrocarburos halogenados anteriormente mencionados, el TG134a (1,1,1,2-tetrafluoroetano) y TG227 (1 , 1 , 1 , 2 , 3 , 3 , 3-heptafluoropropano) y mezclas de los mismos, son adecuados para el uso en las formulaciones de la presente invención.

Los aerosoles inhalables que contienen el gas propelente pueden también contener otros ingredientes tales como co-solventes , estabilizadores, agentes activos de superficie (tensioactivos) , antioxidantes, lubricantes y medios para ajustar el pH. Todos estos ingredientes son conocidos en la técnica.

Los aerosoles inhalables que contienen el gas propelente de acuerdo a la invención, pueden contener hasta 5% en peso de la sustancia activa. Los aerosoles de acuerdo a la descripción pueden contener, por ejemplo, 0.002 a 5% en peso, 0.01 a 3% en peso, 0.015 a 2% en peso, 0.1 a 2% en peso, 0.5 a 2% en peso o 0.5 a 1% en peso del ingrediente activo.

Las sales de la descripción pueden también ser utilizadas en combinación con otros agentes terapéuticos. La descripción proporciona de este modo, en un aspecto adicional, una combinación que comprende una sal de la presente descripción, junto con un agente terapéutico adicional. La combinación puede, por ejemplo ser una combinación de una sal del compuesto de la fórmula (I) y un antibiótico, tal como vancomicina, una beta-lactama (tal como una cefalosporina) , un aminoglucósido, un macrólido, una tetraciclina, un lipopéptido, una oxazolidinona y/o un anti-inflamatorio tal como un esteroide. La combinación puede ser proporcionada como una co- formulación o simplemente empacada junto con formulaciones separadas, para la distribución simultánea o secuencial.

En una modalidad, se proporcionan las sales de la presente descripción en combinación con un agente terapéutico adicional .

Se debe entender que no todos los compuestos/sales de la combinación necesitan ser administrados por la misma ruta. De este modo, si la terapia comprende más de un componente activo, entonces esos componentes pueden ser administrados por rutas diferentes.

Los componentes individuales de tales combinaciones pueden ser administrados ya sea secuencialmente o de manera simultánea en formulaciones farmacéuticas separadas o combinadas, mediante cualquier ruta conveniente.

Cuando la administración es secuencial, ya sea la sal de la descripción o bien el segundo agente terapéutico puede ser administrado primeramente. Cuando la administración es simultánea, la combinación puede ser administrada ya sea en la misma o en una composición farmacéutica diferente.

Las combinaciones referidas anteriormente pueden ser presentadas convenientemente para el uso en la forma de una formulación farmacéutica y de este modo las formulaciones farmacéuticas que comprenden una combinación como se definió anteriormente junto con un portador o excipiente farmacéuticamente aceptable, comprenden un aspecto adicional de la descripción.

Cuando se combinan en la misma formulación se apreciará que los dos compuestos/sales deben ser estables y compatibles uno con el otro y con los otros componentes de la formulación. Cuando se formulan separadamente, éstos pueden ser proporcionados en cualquier formulación conveniente, de una manera tal como son conocidos para tales compuestos en la técnica .

Las composiciones pueden contener desde 0.01 hasta 99% del material activo. Para la administración tópica, por ejemplo, la composición contendrá en general de 0.01-10%, más preferentemente tal como 0.01-1% del material activo.

Cuando una sal de la descripción es utilizada en combinación con un segundo agente terapéutico activo contra el mismo estado de enfermedad, la dosis de cada compuesto/sal puede ser la misma o diferente de aquella empleada cuando el compuesto/sal es utilizado solo. Las dosis apropiadas serán fácilmente apreciadas por aquellos expertos en la técnica. Se apreciará también que una sal de la descripción, requerida para el tratamiento variará con la naturaleza de la condición que se trate y la edad y la condición del paciente, y al final será a la discreción del médico o veterinario que atiende .

Típicamente, un médico determinará la dosis efectiva que será más adecuada para un sujeto individual. El nivel de dosis específico y la frecuencia de dosificación para cualquier individuo particular puede ser variada y dependerá de una variedad de factores que incluyen la actividad de la sal específica empleada, la estabilidad metabólica y la longitud de acción de esa sal, la edad, el peso corporal, la salud general, el sexo, la dieta, el modo y el tiempo de administración, la velocidad de excreción, la combinación del fármaco, la severidad de la condición particular y el individuo que sufre terapia.

Para la administración oral y parenteral a humanos, el nivel de dosis diaria del agente puede ser en dosis simples o divididas. Para la administración sistémica, la dosis diaria, como es empleada para el tratamiento de humanos adultos, estará en el intervalo de 2-100 mg/Kg de peso corporal, tal como 5-60 mg/Kg de peso corporal, que pueden ser administrados en 1 a 4 dosis diarias, por ejemplo, dependiendo de la vía de administración y de la condición del paciente. Cuando la composición comprende unidades de dosis, cada unidad contendrá preferentemente 100 mg a lg del ingrediente activo. La duración del tratamiento será dictada por la velocidad de respuesta en vez por números arbitrarios de días .

En una modalidad, el régimen de tratamiento es continuado por 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21 o más días.

Como se describió anteriormente, las sales de la presente descripción pueden ser empleadas en el tratamiento o la profilaxis de humanos y/o animales.

En otro aspecto más, la invención proporciona una composición farmacéutica que comprende una cantidad terapéuticamente efectiva de una sal de la presente descripción y un excipiente, diluyente y/o portador farmacéuticamente aceptable, para el uso en terapia, y en particular, en el tratamiento de sujetos humanos o animales, que sufren de una condición susceptible al mejoramiento por un compuesto antimicrobiano.

Se proporciona además por la presente descripción, un proceso de preparación de una composición farmacéutica, cuyo proceso comprende mezclar una sal de la descripción o un derivado farmacéuticamente aceptable de la misma, junto con un excipiente, diluyente y/o portador farmacéuticamente aceptable .

En una modalidad, las sales de la presente descripción son útiles en el tratamiento, por ejemplo en el tratamiento de infecciones por bacterias gram positivas.

En una modalidad, las sales de la presente descripción son útiles en el tratamiento de infecciones de la piel, en particular infección bacteriana de la piel y del tejido blando.

En un aspecto, las sales de la presente descripción son adecuadas para el uso en terapia, por ejemplo, para el tratamiento de infecciones microbianas, tales como bacteremia, neumonía e infección microbiana del tejido blando, incluyendo heridas quirúrgicas, en particular infecciones por estafilococos incluyendo la infección MRSA.

En una modalidad, las sales de la presente descripción son útiles para el tratamiento de infecciones por enterococos incluyendo, infección por E. faecalis y E. faecium, por ejemplo infecciones de la piel y de la estructura de la piel, endocarditis, infección del tracto urinario y sepsis.

, En una modalidad, las sales de la presente descripción son útiles para el tratamiento de S. pyogenes, por ejemplo infecciones de la piel, tales como impétigo, erisipelas y celulitis, infecciones de la garganta, fiebre escarlatina y glomerulonefritis aguda.

En una modalidad, las sales de la presente descripción pueden ser útiles en el tratamiento de infección de S. pneumoniae, por ejemplo neumonía, sinusitis aguda, otitis media, meningitis, bacteremia, osteomielitis, artritis sética y endocarditis.

En un aspecto, las sales de la presente descripción pueden ser empleadas para controlar el síndrome del sobrecrecimiento bacteriano. El síndrome de sobrecrecimiento (BOS, por sus siglas en Inglés) ocurre cuando la colonización bacteriana normalmente baja en el tracto gastrointestinal superior y/o en los intestinos inferiores se incrementa significativamente .

En un aspecto, la descripción proporciona el uso de sales de la presente descripción en terapia, por ejemplo, para el tratamiento de infecciones bacterianas tales como infección por C. difficile, en particular diarrea asociada con la misma, y una o más infecciones microbianas descritas en la presente, particularmente por distribución oral de una de las sales de la presente descripción.

En un aspecto, se proporciona el uso de las sales de la presente descripción para la profilaxis, tratamiento o mantenimiento de síndrome del intestino irritable (IBS, por sus siglas en inglés) . Ver por ejemplo, Rifaximin Treatment for Symptoms of Irritable Bowel Syndrome . Andrea L. Fumi y Katherine Trexler, The Annals of Pharmacotherap, 2008, 4, 408.

En una modalidad, las sales de la presente descripción pueden ser útiles en el tratamiento de la colitis ulcerativa, incluyendo el tratamiento profiláctico para prevenir la recurrencia de la misma. Los compuestos pueden ser particularmente adecuados para el tratamiento de colitis ulcerativa refractaria a esteroides. Ver por ejemplo, la colitis ulcerativa refractaria a esteroides tratada con corticosteroides , metronidazol y vancomicina: un reporte de caso J. Miner, M. M Gillan, P. Alex, M Centola, BMC Gastroenterology 2005, 5:3.

Las sales de la presente descripción pueden¦ ser particularmente útiles para el tratamiento a largo plazo.

En un aspecto, se proporciona una sal de la presente descripción o una composición que comprende la misma, para el uso en el tratamiento o profilaxis por ejemplo, en el tratamiento o profilaxis de cualquiera de las indicaciones descritas en la presente.

En un aspecto, se proporciona una sal de la presente descripción o una composición que comprende la misma para la fabricación de un medicamento para una o más indicaciones definidas anteriormente.

En un aspecto, se proporciona un método de tratamiento que comprende el paso de administrar una cantidad terapéuticamente efectiva de una sal de la presente invención, o una composición farmacéutica que contiene la misma, a un paciente (humano o animal) en necesidad de la misma, por ejemplo para el tratamiento de una infección/enfermedad o trastorno como se describe en la presente .

Se proporciona una composición farmacéutica que comprende una sal de la presente descripción y un excipiente farmacéuticamente aceptable.

En un aspecto, se proporciona una sal como se definió anteriormente, o una composición que comprende la misma para el uso en tratamiento.

En un aspecto, se proporciona una sal como se definió anteriormente, o una composición que comprende la misma para el uso como un agente antimicrobiano.

Se proporciona también una sal o composición como se describe anteriormente, para el uso en el tratamiento de la infección microbiana, tal como por S. aureus incluyendo MRSA, E. faecalis, E. faecium, S. pyogenes, S. pneumoniae y/o C. difficile.

En un aspecto, se proporciona un método de tratamiento que comprende administrar una cantidad terapéuticamente efectiva de una sal o composición como se definió anteriormente, a un paciente en necesidad del mismo.

En un aspecto, se proporciona un método de tratamiento como se describió anteriormente, en donde el método es empleado en el tratamiento de la infección microbiana por S. aureus tal como MRSA, E. faecalis, S. pyogenes, S. pneumoniae y/o C. difficile .

En el contexto de esta especificación "que comprende" tiene que ser interpretado como "que incluye".

Los aspectos de la invención que comprenden ciertos elementos están también destinados a extenderse a las modalidades alternativas "que consisten" o "que consisten esencialmente" de los elementos relevantes.

Donde es técnicamente apropiado, las modalidades pueden ser combinadas y de este modo, la descripción se extiende a todas las permutaciones/combinaciones de las modalidades proporcionadas en la presente.

Se da preferencia para las sales de los compuestos de la fórmula (I) que pueden aplicar igualmente a otras sales de la invención, descritas en la presente, como técnicamente apropiadas .

EJEMPLOS En el compuesto 1 siguiente el sustituyente mostrado está enlazado a -la entidad DAB a través del extremo C, y por lo tanto los sustituyentes específicos mostrados corresponden a la modificación C-terminal en los compuestos de la fórmula (I) .

Compuesto 1: Monocarboxamida de desoxiactagardina B (3,5- diclorobencilamina) La * desoxiactagardina B [DAB] (200 mg) , 3,5- diclorobencilamina (38 mg) y diisopropiletilamina (35 µ?) se disolvieron en dimetilformamida anhidra (1 mi) . Se agregó en porciones una solución de hexafluorofosfato de benzotriazol- 1-il-oxi-tris-pirrolidino-fosfonio (PyBOP) (84 mg) en D F anhidro (2 mi) . La reacción fue seguida mediante HPLC analítica (Ver Tabla 1) y se agregó PyBOP hasta que el material inicial se había consumido.

Tabla 1 : Condiciones de HPLC analítica para la separación de lantibióticos (por ejemplo actagardina, actagardina B, o desoxi-actagardina B) los productos derivatizados diaminoalcano .

Columna : Zorbax 5µ C18 (2) 150 x 4.6 Fase Móvil A: 30% de acetonitrilo en amortiguador de fosfato de potasio 20 mM, pH 7.0 Fase Móvil C: 65% de acetonitrilo en amortiguador de fosfato de potasio 20 mM, pH 7.0 Velocidad de flujo: 1 ml/minuto Gradiente : Tiempo 0 minutos 100% A 0% Tiempo 10 minutos 0% A 100% B Tiempo 11 minutos 0% A 100% B Tiempo 11.2 minutos 100% A 0% B Tiempo de ciclo 15 minutos Volumen de inyección 10 L Detección: 210 nm La mezcla de reacción cruda fue vaciada dentro de metanol acuoso al 30% y la solución resultante se cargó sobre una columna Varían Bond Elut C18 (30 g) . La columna fue luego lavada secuencialmente con metanol acuoso al 50%, 60%, 70%, 80%, 90%, con la mayor parte del material deseado que • eluye en la fracción de 70% (Figura 6) la cromatografía en columna sobre gel de - sílice (eluyente de diclorometano : etanol : amoniaco 10:8:1) dio el material con una pureza >90% por U.V. a 210 nm. Rendimiento 107 mg (50%) . Masa calculada para (M+2H)+2 1015.5, encontrado 1015.57. Calculado para [M+H+Na] +2 1026, encontrado 1025.32.

Las muestras fueron analizadas por LC-MS utilizando las condiciones descritas en la Tabla 2.

Tabla 2: Condiciones de LC/MS para el análisis de lantibiótico (por ejemplo desoxi-actagardina B) y productos derivatizados .

Columna: Zorbax 5µ C18(2) 150 x 4.6 mm Fase Móvil A: 10% de acetonitrilo, 0.1% de ácido fórmico Fase Móvil B: 90% de acetonitrilo, 0.1% de ácido fórmico Velocidad de flujo 1 ml/minuto Gradiente : Tiempo 0 minutos 100% A 0% B Tiempo 10 minutos 0% A 100% B Tiempo 11 minutos 0% A 100% B Tiempo 11.1 minutos 100% A 0% B Tiempo de ciclo 15 minutos Volumen den inyección: 20 i Parámetros del Espectrómetro de masa Ionización Electrorrocío + ve Intervalo de masa 250-1500 mu Voltaje del capilar 3.10 KV Voltaje del cono 40 V Desplazamiento del lente 5 V de Skimmer Energía iónica 1.4 V Ejemplo 1: Preparación de la sal de N-metilglucamina de la monocarboxamida de desoxiactagardina B (3,5-diclorobencilamina) (referida como en el Ejemplo 1) El compuesto 1 (500 mg) fue suspendido en t-butanol (250 mi) y la suspensión se dejó en agitación a 45°C por 4 horas hasta que todo el sólido se disolvió. Se agregó una solución de N-metilglucamina (acuosa 1M, 492 µ?) y la mezcla se agitó por 1 hora adicional. La mezcla de reacción se congeló instantánea a -80°C y luego el material se liofilizó toda la noche, para proporcionar un sólido blanco (587 mg) . Actividad antibacteriana del Ejemplo 1 La prueba de susceptibilidad con la excepción de Streptococcus pneumoniae fue realizada por diluciones seriales a un medio, en Caldo Mueller Hinton suplementado con 50 pg/ml de Ca+. La prueba de susceptibilidad de S. pneumoniae fue realizada por diluciones seriales a un medio en el Caldo de Infusión de Cerebro y Corazón suplementado con 50 pg/ml de Ca2+.

Valores modales de hasta 6 determinaciones Eficacia in vivo de los compuestos en un modelo de bacteremia en ratón.

Se utilizaron grupos de 6 ratones CD-1 (Control) derivados dé ratones que pesaban 24 + 2 g. Los ratones fueron inoculados intraperitonealmente (IP) con una LD90. ioo de Staphylococcus aureus resistente a la meticilina ATCC 33591 (1.1 x 107 UFC/ratón) en 0.5 mi de caldo BHI que contiene 5% de mucina.

El Ejemplo 1 y la vancomicina fueron disueltos en 15% de HPbetaCD/4.4% de glucosa/KH2P04 0.5 mM, pH 5.0 y dosis de 1, 3, 5, 10 y 20 mg/Kg fueron administradas subcutáneamente (SC) a animales de prueba a las 0, 2 y 24 hora(s) después del reto con bacterias. El volumen de dosificación fue de 5 ml/Kg. La mortalidad fue registrada una vez al día por 7 días (figura 1) . La ED50 para cada compuesto fue determinada mediante regresión no lineal .

Se demostró que el Ejemplo 1 a 3, 5, 10 y 20 mg/Kg x 3, SC estuvo asociado con un efecto antimicrobiano significativo contra S. aureus (MRSA) en ratones (al menos un incremento del 50% en la tasa de supervivencia) con un valor de ED50 estimado de 1.07 mg/Kg) .

Concurrentemente, la vancomicina a 3, 5, 10 y 20 mg/Kg x 3, SC mostró efecto antimicrobiano significativo contra S. aureus (MRSA) en ratones, con un valor de ED50 estimado de 3.0 mg/Kg. Los ratones que recibieron el Ejemplo 1 a 3 mg/Kg tuvieron una tasa de supervivencia de 100%.

En un segundo experimento grupos de 6 ratones CD-1 (Control) derivados de ratones que pesaban 24 ± 2 g fueron utilizados. Los ratones fueron inoculados-intraperitonealmente (IP) con una LD90. ioo de Staphylococcus aureus resistente a la meticilina ATCC 33591 (1.35 x 108 UFC/ratón) en 0.5 mi de caldo BHI que contenía 5% de mucina. El Ejemplo 1 fue disuelto en 5% de dextrosa/fosfato de potasio 1.5 mM, pH 5.0 y dosis de 1, 3, 5 y 10 mg/Kg fueron administradas intravenosamente (IV) a los animales de prueba a las 1 y 13 hora(s) después del reto con bacterias. El volumen de dosificación fue de 5 ml/Kg. La mortalidad fue registrada una vez al día por 7 días.

Se demostró que la vancomicina y el Ejemplo 1 mostraron un incremento dependiente de la dosis en la supervivencia de los ratones después de 7 días . Para la vancomicina, el número de muertes a 0, 1, .3, 5 y 10 mg/kg fue de 5, 5, 3, 1 y 0, mientras que para el Ejemplo 1, el número de muertes fue de 5, 5, 4, l y l a estas mismas dosis.

Eficacia de los compuestos en un modelo de infección en muslo de ratón neutropénico .

La eficacia in vivo de los compuestos de la presente invención en el tratamiento de infecciones bacterianas tisulares, fue evaluada utilizando un modelo de muslo de ratón neutropénico.

Grupos de 6 ratones macho ICR que pesaban 24 ± 2 g fueron utilizados. Los animales de prueba fueron inmunosuprimidos por 2 inyecciones intraperitoneales de ciclofosfamida, la primera a 150 mg/Kg 4 días antes de la infección (día -4) y la segunda a 100 mg/Kg 1 día antes de la infección (día -1) . En el día 0, los animales individuales fueron inoculados intramuscularmente (IM) dentro del muslo derecho de los animales de prueba con 1.15 x 105 UFC/ratón de Staphylococcus aureus resistente a la meticilina (MRSA, ATCC 33591) suspendido en 100 ]L de PBS estéril, pH 7.4. Él vehículo y las sustancias de prueba fueron administrados intravenosamente (IV) a un volumen de dosis de 6 ml/Kg, 2 y 14 horas después de la infección en el muslo. El Ejemplo 1 y la vancomicina fueron disueltos en 15% de hidroxipropil- -ciclodextrina/4.4% de glucosa/amortiguador de fosfato de potasio 1.5 mM, pH 7.0 y administrado a dosis de 5, 10, 20, 30 y 40 mg/Kg. A las 26 horas después de la inoculación, fue cosechado el músculo del muslo derecho de cada ratón de prueba. A partir de un grupo adicional sin tratamiento, el músculo del muslo derecho fue cosechado a las 2 horas después de la inoculación para la determinación basal de UFC. Los tejidos musculares removidos fueron luego homogeneizados en 3-4 mi de PBS, pH 7.4 con un mortero de cerámica. Los homogeneizados de 0.1 mi fueron utilizados para las diluciones seriales a 10 veces y sembradas en placas sobre caldo Mueller Hinton en agar Bacto al 1.5%. para la determinación de las UFC.

Se demostró que el Ejemplo l dosificado IV a 5, 10, 20 30 y 40 mg/Kg x 2, estuvo asociado con un efecto antimicrobiano significativo, dando como resultado una reducción > 1000 veces en la reducción UFC/g a 10 mg/kg y superior. Concurrentemente, la vancomicina también mostró un efecto antimicrobiano significativo con reducciones de UFC/g > 100 veces a 30 mg/kg y superior, mientras que no se alcanza la reducción > 1000 veces observada para el Ejemplo 1. Los resultados (ufe media/g) son representados gráficamente en la Figura 2.

En un experimento adicional, grupos de 6 ratones macho ICR que pesaban 24 + 2 g fueron utilizados. Los animales de prueba fueron inmunosuprimidos por 2 inyecciones intraperitoneales de ciclofosfamida, la primera a 150 mg/Kg 4 días antes de la infección (día -4) y la segunda a 100 mg/Kg 1 día antes de la infección (día -1) . En el día 0, los animales individuales fueron inoculados intramuscularmente (IM) dentro del muslo derecho de los animales de prueba con 1.5 x 10s UFC/ratón de Staphylococcus aureus resistente a la meticilina (MRSA, ATCC 33591) suspendido en 100 pL de PBS estéril, pH 7.4. El vehículo y las sustancias de prueba fueron administrados intravenosamente (IV) a un volumen de dosis de 8 ml/Kg, 2 y 14 horas después de la infección del muslo. El Ejemplo 1 fue disuelto en 5% de dextrosa/fosfato de potasio 1 mM, pH 5.0 y administrado a dosis de 2.5, 5, 10, 15, 25 y 50 mg/Kg. A las 26 horas después de la inoculación, el músculo del muslo derecho de cada ratón de prueba fue cosechado. A partir de un grupo adicional sin tratamiento, el músculo del muslo derecho fue cosechado a las 2 horas después de la inoculación para la determinación basal de UFC. Los tejidos musculares removidos fueron luego homogeneizados en 3-4 mi de PBS, pH 7.4 con un mortero de cerámica. Los homogeneizados de 0.1 mi fueron utilizados para las diluciones seriales a 10 veces y sembradas en placas sobre el caldo Mueller Hinton en agar Bacto al 1.5% para la determinación de las UFC.

El Ejemplo 1 y la vancomicina mostraron una reducción dependiente de la dosis en las cuentas bacterianas en el tejido del muslo (Figura 3) .

Vida media plasmática in vivo de los compuestos de la presente invención en ratones.

La vida media in vivo del Compuesto 1 en ratones fue determinada por la medición de sus concentraciones plasmáticas a diversos puntos de tiempo después de la dosificación IV. 18 ratones CD-1 de edades de 7-9 semanas fueron dosificados IV con una dosis de 9.3 ml/Kg de una solución de 3.2 mg/ml del Ejemplo 1 en 15% de hidroxipropil- -ciclodextrina/4.4% de glucosa/fosfato de potasio 1 mM (pH = 7.6) . Las muestras de plasma fueron obtenidas a los 10, 20, 30, 60, 120 y 240 minutos después de la dosificación, muestreando de 3 animales en cada punto de. tiempo. Las concentraciones del Compuesto 1 en plasma fueron determinadas por la cuantificación de LC-MS.

Los datos resumidos en la Figura 4, muestran que el Compuesto 1 tiene una vida media plasmática de aproximadamente 2 horas en los ratones .

Solubilidad El Ejemplo 1 (10 mg) fue disuelto en WFI (agua para inyección 1 ó 2 mi) . La solución fue filtrada a través de un filtro Millex GP de 0.2 µp? El pH de las soluciones de 5 y 10 mg/ml del Ejemplo 1 en WFI estuvo aproximadamente en el intervalo de pH 8.5 a 9.2.

El pH de las soluciones de 5 y 10 mg/ml del Ejemplo 1 puede ser amortiguado dentro del intervalo de pH de 8.0 a 8.5 utilizando amortiguador de fosfato de potasio de 0.5 a 1.5 mM, de pH 5.0.

La sal de N-metilglucamina del compuesto 1 tiene una solubilidad de más de 10 mg/ml.

La sal de N-etilglucamina del compuesto 1 tiene una solubilidad de más de 10 mg/ml.

La sal de etanolamina del compuesto 1 tiene una solubilidad mayor de 10 mg/ml.

La sal de dietanolamina del compuesto 1 tiene una solubilidad mayor de 5 mg/ml.

En seguida está una tabla de los resultados de una evaluación de solubilidad cualitativa de los sólidos: Tabla 3 10 20 X = suspensión/solución turbia 25 Se hace constar que con relación a esta fecha, el mejor método conocido por la solicitante para llevar a la práctica la citada invención, es el que resulta claro de la presente descripción de la invención.

Claims (37)

REIVINDICACIONES Habiéndose descrito la invención como antecede, se reclama como propiedad lo contenido en las siguientes reivindicaciones :

1. Una sal de un compuesto de la fórmula (I) caracterizada porque R1 junto con el átomo de carbono al cual está enlazado y el nitrógeno alfa y el carbonilo alfa representa un residuo de aminoácido; ' R2 junto con el átomo de carbono al cual está enlazado y el nitrógeno alfa y el carbonilo alfa representa un residuo de aminoácido; y p representa 0 ó 1, en donde la sal es formada a partir de una amina orgánica pequeña que comprende al menos un grupo hidroxilo.

2. La sal de conformidad con la reivindicación 1, caracterizada porque p es 1.

3. La sal de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 ó 2, caracterizada porque R1 junto con el átomo de carbono al cual está enlazado y el nitrógeno alfa y el carbonilo alfa, representa leucina o valina.

4. La sal de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, caracterizada porque R2 junto con el átomo de carbono al cual está enlazado y el nitrógeno alfa y el carbonilo alfa, representa isoleucina o valina.

5. La sal de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 2, caracterizada porque R1 junto con el átomo de carbono al cual está enlazado y el nitrógeno alfa y el carbonilo alfa, representa valina, y R2 junto con el átomo de carbono al cual está enlazado y el nitrógeno alfa y el carbonilo alfa, representa isoleucina.

6. La sal de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 2, caracterizada porque R1 junto con el átomo de carbono al cual está enlazado y el nitrógeno alfa y el carbonilo alfa, representa leucina, y R2 junto con el átomo de carbono al cual está enlazado y el nitrógeno alfa y el carbonilo alfa, representa valina.

7. La sal de conformidad con la reivindicación 1, caracterizada porque el compuesto tiene la fórmula:

8. La sal de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7, caracterizada porque el compuesto a partir del cual se forma la sal es una amina orgánica.

9. La sal de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1-8, caracterizada porque el compuesto comprende 10% p/p de agua o menos, por ejemplo 5% p/p o menos tal como 4% p/p o menos, en particular 3% p/p o menos.

10. La sal de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1-9, caracterizada porque la sal comprende 5% p/p o menos de t-butanol, por ejemplo 4% p/p o menos tal como 3% o menos, en particular 2% p/p o menos.

11. La sal de conformidad con la reivindicación 8, caracterizada porque el compuesto de amina orgánica a partir del cual se forma la sal, comprende no más de 6 átomos de carbono .

12. La sal de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 8-11, caracterizada porque la amina orgánica comprende uno, dos, tres, cuatro o cinco grupos hidroxilo.

13. La sal de conformidad con la reivindicación 12, caracterizada porque un hidroxilo en la amina orgánica está enlazado a un carbonilo en ésta para formar un ácido, al menos en el material inicial a partir del cual se forma la sal .

14. La sal de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 12 a 13, caracterizada porque la amina orgánica se selecciona de glucamina, tal como N-metilglucamina o N-etilglucamina, etanolamina, dietanolamina y arginina.

15. La sal de conformidad con la reivindicación 14, caracterizada porque la amina orgánica es una glucamina, por ejemplo N-metilglucamina o N-etilglucamina .

16. La sal de conformidad con la reivindicación 14, caracterizada porque la amina orgánica es N-metilglucamina .

17. La sal de conformidad con la reivindicación 14, caracterizada porque la amina orgánica es N-etilglucamina .

18. La sal de conformidad con la reivindicación 14, caracterizada porque la amina orgánica es etanolamina.

19. La sal de conformidad con la reivindicación 14, caracterizada porque la amina orgánica es arginina.

20. Un solvato de una sal, tal como un hidrato, de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 19.

21. Un proceso para producir una sal de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 20, caracterizado porque comprende: a) disolver el compuesto progenitor en un solvato adecuado en presencia de una cantidad apropiada del socio formador de sal; y b) liofilizar el producto del paso a) ; o c) evaporar el solvente.

22. El proceso de conformidad con la reivindicación 21, caracterizado porque el solvente es t-butanol y/o DMSO.

23. El proceso de conformidad con la reivindicación 21, caracterizado porque el solvente es t-butanol y agua.

24. El proceso de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 21 a 23, caracterizado porque el socio formador de sal es proporcionado como 1 a 2 equivalentes.

25. Un proceso, caracterizado porque la solución del paso a) de conformidad con la reivindicación 21, es secado por rocío con uno o más excipientes, para proporcionar partículas que son aglomeraciones de la sal y los excipientes.

26. Una composición farmacéutica, caracterizada porque comprende una cantidad terapéuticamente efectiva de una sal de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 19, y un excipiente, diluyente y/o portador farmacéuticamente aceptable.

27. La composición farmacéutica de conformidad con la reivindicación 26, para usarse en terapia, y en particular, en el tratamiento de sujetos humanos o animales que sufren de una condición susceptible al mejoramiento por un compuesto antimicrobiano.

28. Un proceso de preparación de una composición farmacéutica de conformidad con la reivindicación 26 ó 27, caracterizado porque comprende mezclar una sal de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 19, junto con un excipiente, diluyente y/o portador farmacéuticamente aceptable .

29. una sal o una composición farmacéutica de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 19, 26 ó 27, caracterizadas porque están en combinación con un agente terapéutico adicional.

30. Una sal o una composición farmacéutica de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 19, 26, 27 ó 29, para usarse en el tratamiento o profilaxis.

31. La sal o una composición farmacéutica de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 19, 26, 27 ó 29, caracterizada porque es para la fabricación de un medicamento.

32. Un método de tratamiento, caracterizado porque comprende el paso de administrar una cantidad terapéuticamente efectiva de una sal o composición farmacéutica de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 19, 26, 27 ó 29, a un paciente (humano o animal) en necesidad de la misma.

33. La sal o una composición farmacéutica de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 19, 26, 27 ó 29, para usarse en el tratamiento de infecciones de la piel, en particular infección bacteriana de la piel y del tejido blando.

34. La sal o una composición farmacéutica de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 19, 26, 27 ó 29, para usarse en el tratamiento de infecciones por microbios gram positivos.

35. La sal o una composición farmacéutica de conformidad con la reivindicación 34, para usarse en el tratamiento de la infección microbiana, tal como S. aureus incluyendo MRSA, E. faecalis, E. faecium, S. pyogenes, S. pneumoniae y/o C. diffícile.

36. La sal o una composición farmacéutica de conformidad con la reivindicación 35, para usarse en el tratamiento de Staphylococcus aureus.

37. La sal o una composición farmacéutica de conformidad con la reivindicación 36, para usarse en el tratamiento de Staphylococcus aureus resistente a la meticilina.