MX2012006953A - Compuestos heterociclicos y sus usos. - Google Patents

Abstract

Heteroarilos bicíclicos sustituidos y composiciones que los contienen, para el tratamiento de inflamación general, artritis, enfermedades reumáticas, osteoartritis, trastornos inflamatorios del intestino, trastornos inflamatorios de los ojos, trastornos inflamatorios o inestables de la vejiga, psoriasis, malestares de la piel con componentes inflamatorios, condiciones inflamatorias crónicas, incluyendo pero no restringidas a enfermedades autoinmunitarias tales como lupus sistémico eritematoso (SLE), miastenia gravis, artritis reumatoide, encefalomielitis diseminada aguda, purpura trombocitopénico idiopático, esclerosis múltiple, síndrome de Sjoegren, y anemia hemolítica autoinmunitaria, condiciones alérgicas que incluyen todas las formas de hipersensibilidad. La presente invención también facilita métodos para el tratamiento de cánceres que están mediados, dependen de o están asociados con la actividad de p110d, incluyendo pero no restringido a leucemias, tales como leucemia mieloide aguda (AML), síndrome mielo-displástico (MDS), enfermedades mielo-proliferativas (MPD), leucemia mieloide crónica (CML), leucemia linfoblástica aguda de células T (T-ALL), leucemia linfoblástica aguda de células B (B-ALL), linfoma no Hodgkins (NHL), linfoma de células B y tumores sólidos, tales como cáncer de mama.

Description

COMPUESTOS HETEROCICLICOS Y SUS USOS CAMPO DE LA INVENCIÓN La presente invención se refiere generalmente a enzimas de fosfatidilinositol 3-cinasa (PI3K, por sus siglas en inglés), y más particularmente a inhibidores selectivos de la actividad de PI3K y a métodos para usar tales materiales.

ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN La señalización celular por medio de fosfoinositidos 3'-fosforilados se ha implicado ert una variedad de procesos celulares, por ejemplo, transformación maligna, señalización del factor de crecimiento, inflamación, e inmunidad (ver Rameh et al., J. . Biol Chem, .274:8347-8350 (1999) para una revisión). La enzima responsable de generar estos productos de señalización fosforilados , fosfatidilinositol 3-cinasa (PI 3-cinasa; PI3K) , se identificó originalmente como una actividad asociada con oncoproteinas víricas y tirosina cinasas del receptor del factor de crecimiento que fosforila fosfatidilinositol (PI) y sus derivados fosforilados en la 3'-hidroxilo del. anillo de inositol (Panayotou et al., Trends Cell Biol 2:358-60 (1992)).

Los niveles de fosfatidilinositol-3, 4 , 5-trifosfato (PIP3), el producto primario de la activación de PI 3-cinasa, incrementan durante el tratamiento de células con una variedad de estimulo. Esto incluye señalización a través de receptores para la mayoría de factores de crecimiento y mucho estímulo inflamatorio, hormonas, neurotransmisores y antígenos, y de esta manera la activación de PI3Ks representa uno, si no el más prevalente, eventos de transducción de señal asociados con activación del receptor de superficie celular mamíféra . (Cantley, Science 296:1655-1657 (2002); Vanhaesebroeck et al. Annu . Rev . Biochem, 70: 535-602 (2001)). La activación PI 3-cinasa, por lo tanto, se involucra en un intervalo amplio de respuestas celulares incluyendo crecimiento celular, migración, diferenciación, y apoptosis (Parker et al., Current Biology, 5:577-99 (1995); Yao et al., Science, 267:2003-05 (1995)). Aunque los objetivos cadena abajo de lípidos fosforilados generados después de la activación de PI 3-cinasa no se han caracterizado completamente, se conoce que las proteínas que contienen el dominio de dedo ·. FYVE y dominio de homología de pleckstrina (PH) se activan cuando enlazan a varios lípidos de fosfatidilinositol (Sternmark et al., J Cell Sci, 112:4175-83 (1999); Lemmon et al., Trends Cell Biol, 7:237-42 (1997)). Dos grupos de efectores PI3K que contienen el dominio PH se han estudiado en el contexto . de señalización celular inmunitaria, miembros de la familia TEC de tirosina cinasa y la serina/treonina cinasas de la familia AGC. Los miembros de la familia Téc que 'contienen dominios PH con selectividad aparente para Ptdlns (3,4,5) P3 incluyen Tec, Btk, Itk y Etk. El enlace de PH a PIP3 es crítico para la actividad de tirosina cinasa de los miembros de la familia Tec (Schaeffer y Schwartzberg, Curr . Opin . Immunol . 12: 282-288 (2000)). Los miembros de la familia AGC que se regulan por PI3K incluyen la cinasa dependiente de fosfoinositido (PDK1), AKT (también nombrada PKB) y ciertas isoformas de la proteína cinasa C (PKC) y cinasa S6. Existen tres, isoformas de AKT y la activación de AKT se asocia fuertemente con proliferación dependiente de PI3K y señales de sobrevivencia. La activación de AKT depende de la fosforilación por PDK1, que también tiene un dominio PH de 3-fosfoinositido-selectivo para reclutar a la membrana donde interactúa con AKT. Otros sustratos PDK1 importantes son PKC y. cinasa S6 (Deane y Fruman, Annu . Rev. Immunol . 22_563-598 (2004)). In vitro, algunas isoformas de la proteína cinasa C (PKC) se activan directamente por PIP3. (Burgering et al., Nature, 376:599-602 (1995)).

Actualmente, la familia de la enzima de PI 3-cinasa se ha dividido en tres clases con base en sus especificidades del sustrato. Los PI3Ks clase I pueden fosforilar fosfatidilinositol (PI), fosfatidilinositol-4^-fosfato, y fosfatidilinositol- , 5-bifosfato (PIP2) para producir fosfatidilinositol-3-fosfato (PIP), fosfatidilinositol-3, 4-bifosfato, y fosfatidilinositol-3 , , 5-trifosfato, respectivamente. Los PI3Ks de clase II fosforilan PI y fosfatidilinositol-4-fosfato, mientras que los Pl3Ks de clase III sólo pueden fosforilar PI.

La purificación inicial y clonación molecular de PI 3-cinasa revela que fue un heterodimero que consiste de subunidades p85 y pllO (Otsu et al,, Cell, 65:91-104 (1991); Hiles et al., Cell, 70:419-29 (1992)). Desde entonces, se han identificado cuatro Pl3Ks de clase I distintos, designados PI3K a, ß, d, y ?, · cada uno consiste de una subunidad catalítica 110 kDa distinta y una subunidad reguladora. Más específicamente, tres de las subunidades catalíticas, esto es, pllOa, ????ß y ????d, cada una interactúa con la misma subunidad reguladora, p85; mientras que ????? interactúa con una subunidad reguladora distinta, plOl. Como, se describe a continuación, los patrones de expresión de cada uno de estos PI3Ks en células y tejidos humanos también son distintos. Aunque una riqueza de información se ha acumulado en el pasado reciente en las funciones celulares de PI 3-cinasas en general, los papeles jugados por las isoformas individuales no se entienden completamente.

Se ha descrito la clonación de pllOa de bovino. Esta proteina se identificó en relación con la proteina Saccharomyces cerevisiae: Vps34p, una proteina involucrada en el procesamiento de proteina vacuolar. El producto pllOa recombinante también se mostró para asociarse con p85 , para proporcionar una actividad PI3K en células COS-1 transfectadas . Ver Hiles et al., Cell, 70, 419-29 (1992).

La clonación de una segunda isoforma pllO humana, designada ????ß, se describe en Hu et al., Mol Cell Biol, 13:7677-88 (1993). Esta isoforma se dice que se asocia con p85 en las células, y para expresarse ubicuamente, ya que ????ß mARN se ha encontrado en numerosos tejidos humanos y de ratón asi como en células' endoteliales de la vena umbilical humana, células T leucémicas humanas Jurkat, 293 células de riñon embriónicas humanas, fibroblastos 3T3 de ratón, células HeLa, y células de carcinoma de la vejiga de rata NBT2. Tal expresión amplia sugiere que esta isoforma es ampliamente importante en las trayectorias de señalización.

La identificación de la isofo.rma ????d de PI 3-cinasa se describe en Chantry et al., J Biol Chem, 272:19236-41 (1997). Se observó que la isoforma ????d humana se expresa en una forma restringida en tejido. Se expresa en niveles altos en linfocitos y tejidos de llnfoide y se ha mostrado que juega un papel clave en señalización mediada por PI 3-cinasa en el sistema inmunitario (Al-Alwan etl al. JI 178: 2328-2335 (2007); Okkenhaug et al JI, 177: 5122-5128 (2006); Lee et al. PNAS, 103: 1289-1294 (2006)). ????d también se ha mostrado que se expresa en niveles inferiores en células de mama, melanocitos y células endoteliales (Vogt et al. Virology, 344: 131-138 (2006) y ya que se ha implicado en conferir propiedades migratorias selectivas para las células de cáncer de mama (Sawyer et al. Cáncer Res . .63 : 1667-1675 (2003)). Los detalles acerca de la isoforma P1105 también pueden encontrarse en las Patentes de E.U.A. Nos. 5,858,753; 5,822,910; y 5,985,589. Ver también, Vanhaesebroeck et al., Proc Nat. Acad Sci ÉU , 94:4330-5 (1997), y publicación internacional WO 97/46688.

En cada uno de los subtipos ??3?a, ß, y d, la subunidad p85 actúa para localizar la PI 3-cinasa a la membrana de plasma por la interacción de su dominio SH2 con residuos de tirosina fosforilados (presente en un contexto de secuencia apropiado) en proteínas objetivo (Rameh et al., Cell, 83:821-30 (1995)). Cinco isoformas de p85 se han identificado (p85 , ?85ß, ?55?, ?55a y ?50a) codificadas por tres genes. Los transcriptos alternativos del gen Pik3rl codifican las proteínas p85 , p55 a y p50a (Deane y Fruman, Annu . Rev. Immunol . 22: 563-598 (2004)). p85a se expresa ubicuamente mientras que ?85ß, se encuentra principalmente en el cerebro y tejido de linfoide (Volinia et al., Oncogene, 7:789-93 (1992)). La asociación de la subunidad p85 a las subunidades catalíticas PI 3-cinasa ????a, ß, o d parece ser requerida para la actividad y estabilidad catalítica de estas enzimas. Además, el enlace de proteínas Ras también sobre regula la actividad de PI 3-cínasa.

La clonación de ????? todavía revela complejidad adicional dentro de la familia PI3K de enzimas (Stoyanov et al., Science, 269:690-93. (1995)). La isoforma ????? está estrechamente relacionada a pllOa y ????ß (45-48% de identidad en el dominio catalítico), pero como se nota no hace uso de p85 como una subunidad dirigida. En cambio, ????? enlaza una subunidad reguladora plOl que también enlaza a las subunidades ß? de proteínas G heterotriméricas . La subunidad reguladora plOl para PI3Kgamma se clonó originalmente en cerdo, y el ortólogo humano posteriormente identificado (Krugmann et al., J Biol Chem, 274:17152-8 (1999)). La interacción entre la región de ' terminal N de p.101 con la región de terminal N de ????? se conoce para activar ??3?? hasta eß?. Recientemente, un. homólogo plOl se ha identificado, p84 o p87PIKAP (proteína adaptadora ??3?? de 87 kDa) que enlaza ????? (Voigt et al. JBC, 281: 9977-9986 (2006), Suire et al. Qurr.Biol. 15: 566-570 (2005)). p87PIKAP es homólogo a plOl en áreas que enlazan pllOy y ?ß? y también media la activación de pllOy cadena abajo de receptores acoplados a la proteína G. Distinto de plOl, p87PIKAP se expresa altamente en el- corazón y puede ser crucial para función cardiaca ??3??.

Un polipéptido PI3K constitutivamente activo se describe en la publicación ' internacional WO 96/25488. Esta publicación describe la preparación de una proteína de fusión quimérica en la cual un fragmento de 102 residuos de p85 conocida como la región inter-SH2 (ÍSH2) se fusiona a través de una región ligadora a la terminal N de pllO de murino. El dominio p85 iSH2 aparentemente es capaz de activar la actividad PI3K en una manera comparable a p85 intacto (Klippel et al., Mol Cell Biol, 14:2675-85 (1994)).- De esta manera, las .PI 3-cinasas pueden definirse por su identidad de aminoácido o por su actividad. Los miembros adicionales de esta familia de gen en crecimiento incluyen lípido y proteína cinasas un poco más relacionadas incluyendo Vps34 TOR1, y TOR2 de Saccharomyces cerevisiae (y sus homólogos mamíferos tales como FRAP y mTOR) , el producto del gen de ataxia telangiectasia (ATR) y la subunidad catalítica de la proteína cinasa dependiente de ADN (ADN-PK) . Ver generalmente, Hunter, Cell, 83:1-4 (1995).

La PI 3-cinasa también se involucra en un número de aspectos de la activación de leucocito. Se ha mostrado una actividad de PI 3-cinasa asociada con p85 para asociarse físicamente con el dominio citoplásmico de CD28, que es una molécula coestimuladora importante para la activación de células T en respuesta al antígeno (Pages et al.', Nature, 369:327-29 (1994); Rudd, Immunity, 4:527-34 (1996)). La activación de células T a través de CD28 disminuye el umbral para activación por antígeno e incrementa la magnitud y duración de la respuesta proliferativa . Estos efectos se ligan para incrementos en la transcripción de un número de genes que incluyen . interleucina-2 (IL2) , un factor de crecimiento de célula T importante (Fraser et al., Science, 251:313-16 (1991)). La mutación de CD28 de manera que ya no puede interactuar con PI 3-cinasa lleva a una falla para iniciar la producción de IL2, sugiere un papel crítico para PI 3-cinasa en la activación de célula T.

Los inhibidores específicos contra miembros individuales de una familia de enzimas proporcionan herramientas invaluables para funciones de descifrar de cada enzima. Dos compuestos, LY2940.02 y wortmanina, se han usado ampliamente como inhibidores de PI 3-cinasa. Estos compuestos, sin embargo, son inhibidores PI3K no específicos, ya que no distingue entre los cuatro miembros de PI 3-cinasas clase I. Por ejemplo, los valores IC50 de wortmanina contra cada una de las varias PI 3-cinasas clase I están en el intervalo de 1-????. De manera similar, los valores IC50 para LY294002 contra cada una de estas PI 3-cinasas es alrededor de ?µ? (Fruman et al., Ann Rev Biochem, 67:481-507 (1998)). Por lo tanto, se limita la utilidad de estos compuestos a estudiar los papeles de PI 3-cinasas clase I individuales.

Con base en los estudios usando wortmanina, existe evidencia que la función- PI 3-cinasa también se requiere para algunos aspectos de señalización de leucocito a través de receptores acoplados a la proteina G (Thelen et al.., Proc Nati Acad Sci EUA, 91:4960-64 (1994)). Por lo tanto, se ha mostrado que wortmanina y LY294002 bloquean la migración de neutrofilo y liberación de superóxido. Sin embargo, en la medida que estos compuestos no distinguen entre las varias isoformas de PI3K, permanecen no claros de estos estudios cuya isoforma o isoformas PI3K particulares se involucran en este fenómeno y que funciona de las enzimas PI3 clase I diferentes realizadas en tanto, tejidos normales como enfermos en general. La co-expresión de varias isoformas PI3K en la mayoría de los tejidos tiene esfuerzos confusos para segregar las actividades de cada enzima hasta poco.

La separación de las actividades de las varias isozimas PI3K se ha adelantado recientemente con el desarrollo de ratones genéticamente manipulados que permiten el estudio de ratones con genes activados que mueren por cinasa y con genes inactivados específicos de la isoforma y el desarrollo de más inhibidores selectivos para algunas de las diferentes isoformas. Los ratones con genes inactivados PllOa y ????ß se han generado y son tanto letales embriónicos y puede obtenerse poca información de estos ratones con respecto a la expresión y función . de pllO alfa y beta (Bi et al. Mamm.Genome, 13:169-172 (2002); Bi. et al. J.Biol.Chem. 274:10963-10968 (1999)). Más' recientemente, se generaron ratones con genes activados suprimidos de pllOa cinasa con una mutación de . punto sencillo un la porción DFG de la bolsa de enlace ATP (pll0aD933A) que afecta la actividad de cinasa pero conserva la expresión de pllOa mutante. En contraste a los ratones con genes inactivados, el enfoque de genes activados conserva la estequiometria compleja de señalización, el andamiaje funciona e imita los enfoques de la molécula pequeña de forma más realista que los ratones con genes inactivados. Similar a ios ratones pllOa KO, los ratones homocigotos pll0aD933A son letales embriónicos. Sin embargo, los ratones heterocigotos son viables y fértiles pero muestran señalización severamente abrupta por medio de las proteínas del sustrato del receptor de insulina (IRS), mediadores clave de insulina, factor de crecimiento 1 tipo insulina y acción de leptina. . La capacidad de respuesta defectuosa para estas hormonas lleva a hiperinsulinemia, intolerancia a la ¦ glucosa, hiperfagia, adiposidad incrementada y crecimiento general reducido en heterocigotos (Foukas, et al. Nature, 441: 366-370 (2006)). Estos estudios revelan un papel no redundante, definido para · pllOa como un intermedio en IGF-1, la señalización de insulina y leptina que no se sustituye por otras isoformas. Se tendrá que esperar la descripción de los ratones con genes activados suprimidos de pllOa cinasa para entender además la función de esta isoforma (los ratones se. han. hecho pero aún no publicados; Vanhaesebroeck) .

Los ratones con genes activados suprimidos de cinasa y con genes inactivados ????? ambos se han generado y muestran fenotipos suaves ' y similares generales con defectos primarios en migración de células del sistema inmunitario innato y un defecto en desarrollo timico de células T (Li et al. Science, 287: 1046-1049 (2000), Sasaki et al. Science, 287: 1040-1046 (2000), Patrucco et al. Cell, 118: 375-387 (2004)).

Similar a los ratones con genes activados suprimidos de cinasa y con genes inactivados ?????, PI3K delta se han hecho y son viables con fenotipos suaves y similares. Los ratones con genes activados mutantes pll05D910A demuestran un papel importante para delta en el desarrollo y función de célula B, con células B de zona marginal y células Bl CD5+ casi no detectables, y señalización del receptor de ántigeno de la célula B y T (Clayton et al. J.Exp.Med. 196:753-763 (2002); Okkenhaug et al. Science, 297: 1031-1034 (2002)). Los ratones ?110d?910? se han estudiado extensivamente y ha elucidado el papel diverso que juega delta en el sistema inmunitario. Las respuestas inmunitarias . independientes de la célula T y dependientes de la célula T se atenúan severamente en pl l0§D9i0A y secreción de TH1 (INF-?) y citocina ??2 (IL-4, IL-5) se dañan (Okkenhaug et al. J.Immunol. 177: 5122-5128 (2006) ) . Un paciente humano con una mutación en ????d también se ha descrito recientemente. Un niño taiwanés con una inmunodeficiencia de célula B primaria y una gamma-hipoglobulinemia ' de etiología previamente . desconocida presentada con una sustitución de pares base sencilla, m.3256G para A en el codón 1021 en el exón 24 de ????d. Esta mutación resulta en una sustitución de aminoácido sentido erróneo (E hasta K) en el codón 102.1, que se ubica en el dominio catalítico altamente conservado de la proteína ????d. El paciente no tiene otras mutaciones identificadas y su fenotipo es consistente con la deficiencia de ????d en ratones hasta donde se ha estudiado. (Jou et al. Int . J. Immunogenet . 33: 361-369 (2006)).

Los compuestos de molécula' pequeña selectivos de isoforma se han desarrollado con éxito variado para todas las isoformas de PI3 cinasa de clase I (Ito et al. J. Pharm. Exp. Therapeut., 321:1-8 (2007)). Los inhibidores para alfa son deseables debido a que las mutaciones en pllOa se han identificado en varios tumores sólidos; por ejemplo, una mutación de amplificación de alfa se asocia con 50% de cáncer de ovarios, cervical, pulmonar y mama y una mutación de activación se ha descrito en más de 50% de los canceres del intestino y 25% de . mama (Hennessy et al. Nature Reviews, 4: 988-1004 (2005) ) . Yamanouchi ha desarrollado un compuesto YM-024 que inhibe, alfa y delta équipotentes y es 8 y 28 veces selectivo sobre beta y gamma respectivamente (Ito et al. J. Pharm. Exp. Therapeut . , 321:1-8 (2007)). ????ß está involucrado en la formación de trombos (Jackson et al. Nature Med. 11: 507-514 (2005)) e inhibidores de molécula pequeña específicos para esta isoforma se consideran después de la indicación que involucra .los trastornos de coagulación (TGX-221: 0.007uM en beta; 14 veces selectivo sobre delta, y más de 500 veces selectivo sobre gamma y alfa) (Ito et al. J. Pharm. Exp . Therapeut .., 321:1-8 (2007)).

Los compuestos selectivos para ????? se desarrollan por varios grupos como agentes inmunosupresivos para la enfermedad autoinmunitaria (Rueckle et al. Nature Reviews, 5: 903-918 (2006)). De la nota, AS 605240 se ha mostrado para ser eficaz en un modelo de ratón con artritis reumatoide (Camps et al. Nature Medicine, 11: 936-943 (2005)) y para retardar el comienzo de la enfermedad en un modelo de lupus eritematoso sistémico · (Barber et al. Nature Medicine, 11: 933-935 (205) ) .

Los inhibidores selectivos delta también se han descrito recientemente. Los compuestos más selectivos incluyen los inhibidores de quinazolinona purina (PIK39 e IC87114). El IC87114 inhibe ????d en el intervalo nanomolar alto (dígito triple) y tiene más de 100 veces de selectividad contra pllOa, es 52 veces selectivos contra ????ß pero carece de selectividad contra pllOy (aprox. .8 veces) . No se muestra actividad contra ninguna de las proteína cinasas probadas (Knight et al. Cell, 125: 733-747 (2006)). Usando compuestos selectivos delta o ratones genéticamente manipulados (pll05D910A) se mostró que además de jugar un papel clave en la activación de célula B y T, delta también se involucra parcialmente en la migración de neutrófilo y la explotación respiratoria del neutrófilo cebado y lleva a un bloqueo parcial de desgranulación de mastocito mediada por IgE de antígeno (Condliffe et al. Blood, 106: 1432-1440 (2005); Ali et al. Nature, 431: 1007-1011 (2002)). Por lo tanto ????d se emerge como un mediador importante de muchas respuestas inflamatorias clave qué también se conocen para participar en afecciones inflamatorias aberrantes, ' incluyendo pero no limitado a enfermedad autoinmunitaria y alergia. Para soportar esta idea, existe un cuerpo en crecimiento de los datos de validación objetivo ????d derivados de estudios usando tanto herramientas genéticas como agentes farmacológicos. De esta manera, usando el compuesto selectivo delta IC 87114 y el ratón pll05D910A, Ali et al. (Nature, 431: 1007-1011 (2002)) ha demostrado que delta juega un papel critico en un modelo de murino de la enfermedad alérgica. En ausencia de delta funcional, la anafilaxis cutánea pasiva (PCA) se reduce significativamente y puede atribuirse a una reducción en activación de mastocito inducida por IgE de alérgeno y desgranulación. Además, la inhibición de delta con IC 87114 se ha mostrado para aliviar significativamente la inflamación y enfermedad en un modelo murino de asma' usando inflamación de las vias respiratorias inducida por ovalbúmina (Lee et al. FASEB, 20: 455-465 (2006). Estos datos que utilizan el compuesto se corroborraron en ratones mutantes pll05D910A usando, el. mismo modelo de. inflamación de las vias respiratorias alérgicas por un grupo diferente (Nashed et al. Eur. J.Immunol. 37:416-424 (20?7)).

Existe una necesidad para caracterización adicional de la función PI3K5 en ajustes inflamatorios y autoinmunitarios . Adicionalmente, el entendimiento, del solicitante de PI3K5 requiere elaboración adicional de . las interacciones estructurales de ????d, tanto con su subunidad reguladora como con otras proteínas en la célula. También permanece una necesidad para inhibidores más potentes y selectivos o específicos de PI3K delta, con objeto de evitar toxicología potencial asociada con actividad en isozimas pllO alfa (señalización de insulina) y beta (activación de plaqueta) . En particular, los inhibidores específicos o selectivos de PI3K6 son deseables para explorar el papel de esta isozima adicional y para desarrollo de farmacéuticos superiores para modular la actividad de la isozima.

SUMARIO DE LA INVENCIÓN La presente invención comprende, una clase nueva de compuestos que tienen la fórmula general que son útiles para inhibir la actividad biológica de PI3K5 humano. Otro aspecto de la invención es, proporcionar compuestos que inhiben PI3K5 selectivamente mientras que tienen potencia inhibidora relativamente baja contra las otras isoformas PI3K. Otro aspecto de la invención es proporcionar métodos para caracterizar la función de · PI3K5 humano. Otro aspecto de la invención es proporcionar métodos para modular selectivamente la actividad PI3K5 humana, y por ello promover el tratamiento médico de enfermedades mediadas por disfunción de PI3K5. Otros aspectos y ventajas de la invención serán fácilmente aparentes para el técnico que tiene experiencia ordinaria en el arte.

DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN Un aspecto de la invención se. refiere a compuestos que tienen la estructura: o cualquier sal farmacéuticamente aceptable de los mismos, en donde: X1 es C(R10) o N; Y es N (R8) , 0, o S; n es 0, 1, 2 o 3; R1 es un anillo biciclico de 8, 9, 10 u 11 miembros o monociclico de 5,. 6 o 7 miembros saturado, parcialmente saturado o no saturado de enlace directo, ligado a alq C1-4, ligado a Oalq Ci_2, ligado a alq Ci-20 ' o ligado a 0 que contiene 0, 1, 2, 3 o 4 átomos seleccionados de N, O y S, pero que contiene no más de un átomo O, o S, sustituido por 0, 1, 2 o 3 sustituyentes independientemente seleccionados de halo, alq Ci-6, haloalq Ci- , ciano, nitro, -C(=0)Ra, -C(=0)ORa, -C(=0)NRaRa, -C (=NRa) NRaR'a, -ORa, -OC (=0) Ra, -OC (=0) NRaRa, -0C(=0)N(Ra)S(=0)2Ra, -OC2-6alqNRaRa, -Oalq C2-6ORa, -SRa, -S(=0)Ra, -S(=0)2Ra, -S (=0) 2NRaRa, . -S (=0) 2N (Ra) C (=0) Ra, -S(=0)2N(Ra)C(=0).0Ra, -S (=0) 2N (Ra) C (=0) NRaRa, -NRRa, -N (Ra) C (=0) Ra, -N (Ra) C (=0) 0Ra, -N (Ra) C (=0)'NRaRa, -N (Ra) C (=NRa) NRaRa, -N (Ra) S (=0) 2Ra, -N (Ra) S (=0) 2NRaRa, -NRaalq C2_6NRaRa y -NRaalq C2-6ORa, en donde los átomos de carbono disponibles del anillo están adicionalmente sustituidos por 0, 1 o 2 grupos oxo o tioxo; R2 se selecciona de H, halo, alq Ci-6, haloalq C1-4, ciano, nitro, 0Ra, NRaRa, -C(=0)Ra, -C(=0)0Ra, -C(=0)NRaRa, -C (=NRa) NRaRa, . -S(=0) Ra, -S(=0)2Ra, -S (=0) 2NRaRa, -S(=0)2N(Ra)C(=0)Ra, . -S (=0)2N(Ra)C(=0)0Ra, -S (=0) 2N (Ra) C (=0),NRaR%- R3 se selecciona de H, halo, nitro, ciano, alq Ci_ , Oalq C1-4, Ohaloalq Ci_ , NHalq Ci-4, N(alq Ci-4)alq C1-4 o haloalq Ci- R4 es, independientemente, cada que se presenta, halo, nitro, ciano, alq C1-4, Oalq C1-4, Ohaloalq C1-4, NHalq Ci-4, N(alq Ci-4)alq Ci-4, haloalq Ci-4 o un anillo monociclico de 5, 6 o 7 miembros no saturado que contiene 0, 1, 2, 3 o 4 átomos seleccionados de N, O y S, pero que contiene no más de un O, o S, sustituido por 0, 1, 2 o 3 sustituyentes seleccionados de halo, alq Ci-4, haloalq Ci-3, -Oalq Ci_4, -NH2, -NHalq Ci_4, -N (alq Ci_4) alq Ci_4; R5 es, independientemente, cada que se presenta, H, halo, alq Ci_6, haloalq Ci- , o alq.Ci-6 sustituido por 1, 2 o 3 sustituyentes seleccionados de halo, ciano, OH, Oalq Ci-4, alq Ci-4, haloalq Ci-3, Oalq Ci_4, NH2, NHalq Ci- , N(alq Cx-^alq Ci_ 4; o ambos grupos R5 juntos forman un espiroalq C3_6 sustituido por 0, 1, 2 o 3 sustituyentes seleccionados de halo, ciano, OH, Oalq Ci-4, alq Ci-4, haloalq C1.-3, Oalq Ci-4, NH2, NHalq Ci- , N(alq Ci-4)alq Ci_4; R6 es H, halo, NHR9 u OH; R7 se selecciona de H, halo, haloalq C1-4, ciano, nitro, -C(=0)Ra, -C(=0)ORa, -C(=0)NRaRa, -C (=NRa) NRaRa, -ORa, -OC(=0)Ra, -OC (=0) NRaRa, -OC (=0) N (Ra) S (=0) 2Ra, -Oalq C2_6NRaRa, -Oalq C2-6ORa, -SRa, -S(=0)Rd, -S(=0)2Ra, -S (=0) 2NRaRa, -S (=0) 2N (Ra) C (=0) Ra, -S (=0) 2N (Ra) C (=0) ORa, -S (=0) 2N (Ra) C (=0) NRaRa, . -NRaRa, -N (Ra) C (=0) Ra, -N (Ra) C (=0) 0Ra, -N (Ra) C (=0) NRaRa, -N ( Ra) C ( =NRa) NRaRa, -N (Ra) S (=0) 2Ra, -N (Ra) S (=0) 2NRaRa, -NRaalq C2-eNRaRa, -NRaalq C2-6ORa y alq Ci-e, en donde el alq C1-6 está sustituido por 0, 1 2 o 3 sustituyentes seleccionados de halo, haloalq Ci-4, ciano, nitro, -C(=0)Ra, -C(=0)ORa, -C(=0)NRaRa, -C (=NRa) NRaRa, -0Ra, -OC(=0)Ra, -0C (=0) NRaRa, -0C (=0) N (Ra) S (=0) 2Ra, -Oalq C2-6NRaRa, -Oalq C2-6ORa, -SRa, -S(=0)Ra, -S(=0)2Ra, -S (=0) 2NRaRa, -S(=0)2N(Ra)C(=0)Ra, -S (=0)2N (Ra)C (=0)0Ra, -S (=0) 2N (Ra) C (=0) NRaRa, -NRaRa, -N (Ra) C (=0) Ra, -N (Ra) C (=0) 0Ra, -N (Ra) C (=0) NRaRa, -N (Ra) C (=NRa) NRaRa, -N (Ra) S (=0) 2Ra, -N (Ra) S (=0) 2NRRa,. -NRaalq C2-6NRaRa y -NRaalq C2-6ORa, y el alq Ci_6 está adicionalmente sustituido por O o .1 anillo monociclico de 5, 6 o 7 miembros saturado, parcialmente saturado o no saturado que contiene 0, 1, 2, 3 o 4 átomos seleccionados de N, 0 y S, pero que contiene no más de un 0, o S, en donde los átomos de carbono disponibles del anillo están sustituidos por 0, 1 o 2 grupos oxo o tioxo, en donde el anillo está sustituido por 0,· 1, 2 o 3 sustituyentes independientemente seleccionados - de halo, nitro, ciano, alq Ci-4, Oalq Ci-4, Ohaloalq C.i_4, NHalq Ci- , N(alq Ci-4)alq Ci_4 y haloalq Ci_4; o R7 y R8 juntos forman un puente -C=N- en donde el átomo de carbono está sustituido por H, halo, ciano, o un anillo monociclico de 5, 6 o 7 miembros saturado, parcialmente saturado q no saturado que contiene 0, 1, 2, 3 o 4 átomos seleccionados de N, 0 y S, pero que contiene no más de un 0, o S, en donde los átomos de carbono disponibles del anillo están sustituidos por 0, 1 o 2 grupos oxo o tioxo, en donde el anillo . está sustituido por 0, 1, 2, 3 o 4 sustituyentes seleccionados de halo, alq Ci_g, haloalq C1- , ciano, nitro, -C(=0)Ra, -C(=0)ORa, -C(=0)NRaRa, -C (=NRa) NRaRa, -0Ra, -OC(=0)Ra, ¦ -OC (=0) NRaRa, -0C (=0) N (Ra) S (=0) 2Ra, -Oalq C2-6NRaRa, -Oalq C2.6ORa, -SRa, -S(=0)Ra, -S(=0)2Ra, -S (=0) 2NRaRa, -S (=0) 2N (Ra) C (=0) Ra, -S (=0)2N (Ra)C (=0)0Ra, -S(=0)2N(Ra)C(=0)NRaRa, -NRaRa, -N (Ra) C (=0) Ra, -N (Ra) C (=0) 0Ra, -N ( Ra ) C (=0) NRaRa , -N (Ra) C (=NRa) NRaRa, -N (Ra) S (=0) 2Ra, -N(Ra)S(=0)2NRaRa, -NRaalq C2-6NRRa y -NRaalq C2-6ORa; o R7 y R9 juntos forman un puente -N=C- en donde el átomo de carbono está sustituido por H, halo, alq C1-6, haloalq C1-4, ciano, nitro, 0Ra, NRaRa, -C(=0)Ra, -C(=0)0Ra, -C(=0)NRaRa, -C(=NRa)NRaRa, -S(=0)Ra,' -S(=0)2Ra, -S(-0)2NR¾a; R8 es H o alq Ci_6; R9 es H, alq C1-6 o haloalq Ci_4; R10 es H, halo, alq C1-3, haloalq C1-3 o ciano; R11 se selecciona de H, halo, alq Ci-6, haloalq Ci-4, ciano, nitro, -C(=0)Ra, -C(=0)0Ra, -C(=0)NRaRa, -C (=NRa) NRaRa, -0Ra, -0C(=0) Ra, -OC (=0) NRaR% -OC (=0) N (Ra) S (=0) 2R% -OC2-6alqNRaRa, -OC2_6álqORa, -SRa, -S(=0)Ra, -S(=0)2Rb, -S (=0) 2NRaRa, -S(=0)2N(Ra)C(=0)Ra, -S (=0) 2N (R ) C (=0) 0Ra, -S (=0) 2N (Ra) C (=0) NRaRa, -NRaRa, -N (Ra) C (=0) Ra, -N (Ra) C (=0) 0Ra, -N (Ra) C (=0) NRaRa, -N(Ra)C(=NRa)NRaRa, -N (Ra) S (=0) 2Ra, -N (Ra) S (=0) 2NRaRa, -NRaalq C2-6NRaRa y -NRaalq C2.6ORa; Ra es independientemente, cada que se presenta, H o Rb; y Rb es independientemente, cada que se presenta, fenilo, bencilo o alq Ci- 6 , el fenilo, bencilo y alq Ci-6 es sustituido por 0, 1, 2 o 3 sustituyentes seleccionados de halo, alq Ci-4, haloalq Ci_3, -Oalq Ci-4, -NH2, -NHalq Ci-4, -N(alq Ci-4)alq Ci_4.

En otra modalidad, en conjunto con las modalidades de arriba y enseguida, X1 es N.

En otra modalidad, en conjunto con las modalidades de arriba y enseguida, Y es N(R8).

En otra modalidad, en conjunto con las modalidades de arriba y enseguida, R1 es un anillo biciclico de 8, 9, 10 u 11 miembros o monociclico de 5, 6 o 7 miembros saturado, parcialmente saturado o no saturado de enlace directo que contiene 0, 1, 2,. 3 o 4 átomos seleccionados de N, O y S, pero que contiene no más de un átomo O, o S, sustituido por 0, 1, 2 o 3 sustituyentes independientemente seleccionados de halo, alq Ci-6, haloalq Ci-4, ciano, nitro, -C(=0)Ra, -C(=0)ORa, -C(=0)NRaRa, -C (=NRa)NRaRa, -ORa, -OC(=0)Ra, -OC (=0) NRaRa, -OC (=0)N (Ra) S (=0) 2Ra, -Oalq C2-6NRaRa, -Oalq C2-6ORa, -SRa, -S(=0)Ra, -S(=0)2Ra, -S(=0)2NRaRa, -S (=0) 2N (Ra) C (=0) Ra, -S (=0) 2N (R ) C (=0) 0Ra, -S (=0) 2N (Ra) C (=0) NRaRa, -NRaRa, -N (Ra) C (=0) Ra, -N(Ra)C(=0)ORa, -N (Ra) G (=0) NRaRa, -N(Ra)C(=NRa)NRaRa, -N (Ra) S (=0) 2Ra, -N (Ra) S (=0) 2NRaRa, -NRaalq C2.6NRaRa y -NRaalq C2-6ORa, en donde los átomos de carbono disponibles del anillo están adicionalmente sustituidos por O, 1 o 2 grupos oxo o tioxo.

En otra modalidad, en conjunto con las modalidades de arriba y enseguida, R1 es' un anillo ' monociclico de 6 miembros no saturado de enlace directo que contiene 0, 1, 2, 3 o 4 átomos seleccionados de N, O y S, pero que contiene no más de un átomo O, o S, sustituido por 0, 1, 2 o 3 sustituyentes independientemente seleccionados de halo, alq Ci_6, haloalq Ci-4, ciano, nitro, -C(=0)Ra, -C(=0)ORa, -C(=0)NRaRa, -C (=NRa) NRaRa, -ORa, -OC ( =0) Ra, -OC (=0) NRaRa, -OC (=0)N (Ra) S (=0) 2Ra, -Oalq C2-6NRaRa, -Oalq C2-6ORa, -SRa, -S(=0)Ra, -S(=0)2Ra, -S (=0)2NRaRa, ' -S (=0) 2N (Ra) C (=0) Ra, -S (=0) 2N (Ra) C (=0) 0Ra, -S (-0) 2N (Ra) C (=0) NRRa, -NRaRa, -N(Ra)C(=0)Ra, -N(Ra)C(=0)0Ra, -N (Ra) C (=0) NRaRa, -N (Ra) C (=NRa) NRaRa, -N (Ra) S (=0).2R , -N (Ra) S (=0) 2NRaRa, -NRaalq C2-6NRaRa y -NRaalq C2-6ORa.

En otra modalidad, en conjunto con las modalidades de arriba y enseguida, R1 es fenilo, piridilo o pirimidinilo, todos de los cuales están . sustituidos por 0, 1, 2 o 3 sustituyentes independientemente seleccionados de halo, alq Ci-6, haloalq Ci-4, ciano, nitro, -C(=0)Ra, -C(=0)ORa, -C(=0)NRaRa, -C (=NRa) NRaRa, -0Ra, ' -0C(=0)Ra, -OC (=0) NRaRa, -OC (=0)N (Ra) S (=0) 2Ra, -Oalq C2-6NRaRa, -Oalq C2-6ORa, -SRa, -S(=0)Ra, -S(=0)2Ra, -S(=0)2NRaRa, -S (=0) 2N (Ra) C (=0) Ra, -S (=0) 2N (Ra) C (=0) 0Ra, ' -S (=0) 2N (Ra) C (=0) NRaRa, -NRaRa, -N (Ra) C (=0) Ra, -N(Ra)C(=0)0Ra, -N (Ra) C (=0) NRaRa, -N (Ra) C (=NRa) NRaRa, -N ( Ra ) S ( =0) 2Ra , -N (Ra) S (=0) 2NRaRa, -NRaalq C2-6NRaRa y -NRaalq C2-6ORa.

En otra modalidad, en conjunto con las modalidades de arriba y enseguida, R1 es fenilo sustituido por 0, 1, 2 o 3 sustituyentes independientemente seleccionados de halo, alq Ci-6, haloalq Cx- , ciano, nitro, -C(=0)Ra, -C(=0)ORa, -C(=0)NRaRa, -C (=NRa) NRaRa, -0Ra,. -0C(=0)Ra, -0C (=0) NRaRa, -0C (=0)N (Ra) S (=0) 2Ra, -Oalq C2-6NRaRa, -Oalq C2-6ORa, -SRa, -S(=0)Ra, -S(=0)2Ra, -S (=0) 2NRaRa, -S (=0) 2N (Ra) C (=0) Ra, -S(=0)2N(Ra)C(=0)0Ra, -S(=0)2N(Ra)C(=0)NRaRa, -NRaRa, -N (Ra) C (=0) Ra, -N(Ra)C(=0)0Ra, -N (Ra) C (=0) NRaRa, -N (Ra) C (=NRa) NRaRa, -N (Ra) S (=0) 2Ra, -N ( Ra) S (=0) 2NRaRa, -NRaalq C2.6NRaRa y -NRaalq C2-6ORa.

En otra modalidad, en conjunto con las modalidades de arriba y enseguida, R es fenilo, piridilo o pirimidinilo, todos de los cuales están sustituidos por 1, 2 o 3 sustituyentes independientemente seleccionados de halo, alq Ci- 6 / y haloalq Ci-4. ¦ En otra modalidad, en conjunto con las modalidades de arriba y enseguida, R1 es fenilo que está sustituido por 1, 2 o 3 sustituyentes independientemente seleccionados de halo, alq Ci_6, y haloalq Ci-4, En otra modalidad, en conjunto con las modalidades de arriba y enseguida, R2 es H.

En otra modalidad, en conjunto con las modalidades de arriba y enseguida, R3 se selecciona de H y halo.

En otra modalidad, en conjunto con las modalidades de arriba y enseguida, R5 es, independientemente, cada que se presenta, H, halo, alq Ci-6, y haloalq C1-4.

En otra modalidad, en conjunto con las modalidades de arriba y enseguida, un R5 es H y el otro R5 es alq C1-6.

En otra modalidad, en conjunto con las modalidades de arriba y enseguida, un R5 es H y el otro R5 es metilo.

En otra modalidad, en conjunto con las modalidades de arriba y enseguida, un R5 es H y el otro R5 es (R) -metilo.

En otra modalidad, en conjunto con las modalidades de arriba y enseguida, un R5 es H y el otro R5 es (S) -metilo.

En otra modalidad, en conjunto con las modalidades de arriba y enseguida,. R6 es NHR9.

En otra modalidad, en conjunto con las modalidades de arriba y enseguida, R7 es ciano.

En otra modalidad, en conjunto con las modalidades de arriba y enseguida, R7 y R8 juntos forman un puente -C=N- en donde el átomo de carbono está sustituido por H, halo, ciano, o un anillo monociclico de 5,· 6 o 7 miembros saturado, parcialmente saturado o no saturado que contiene 0, 1, 2, 3 o 4 átomos seleccionados ' de N, O y S, pero que contiene no más de un O, o S, en donde los átomos de carbono disponibles del anillo están sustituidos por.O, 1 o 2 grupos oxo o tioxo, en donde el anillo está sustituido por 0, 1, 2, 3 o 4 sustituyentes seleccionados de halo, alq Ci-6, haloalq Ci-4, ciano, nitro, -C(=0)Ra, -C(=0)ORa, -C(=0)NRaRa, -C (=NRa) NRaRa, -0Ra, -OC(=0)Ra, -OC (=0) NRaRa, -0C (=0) N (Ra) S (=0) 2Ra, -OC2-6alqNRaRa, -OC2_6alqORa, -SR , -S(=0)Ra, -S(=0)2Ra, -S (=0)2NRaRa, -S(=0)2N (Ra)C(.=0) Ra, -S (=0) 2N (Ra) C (=0) 0Ra, -S (=0) 2N (Ra) C (=0) NRaRa, -NRaRa, -N (Ra) C (=0) Ra, -N (Ra) C (=0) 0Ra, -N (Ra) C (=0) NRaRa, -N (Ra) C (=NRa) NRaRa, -N (Ra) S (=0) 2Ra, -N (Ra) S (=0) 2NRaRa, -NRaalq C2-SNRaRa y -NRaalq C2_6ORa.

En otra modalidad, en conjunto con las modalidades de arriba y enseguida, R7 y R9 juntos forman un puente -N=C- en donde el átomo de carbono está sustituido por H, halo, alq Ci_ 6, haloalq Ci-4, ciano, . nitro, ORa, NRaRa, -C(=0)Ra, -C(=0)ORa, -C(=0)NRaRa, -C (=NRa) NRaRa, -S (=0) Ra, -S(=0)2Ra, -S (=0) 2NRaRa .

En otra modalidad, en conjunto con las modalidades de arriba y enseguida-, R7 y R9 juntos forman un puente -N=C- en donde el átomo de carbono está sustituido por H o halo.

En otra modalidad, en conjunto con las modalidades de arriba y enseguida, R11 se selecciona de H, halo, alq Ci-6, haloalq Ci_4 y ciano.

En otra modalidad, en conjunto con las modalidades de arriba y enseguida, R11 se selecciona de H, halo y alq Ci-6.

Otro aspecto de la invención se refiere a un método para tratar trastornos o afecciones mediadas por PI3K.

En ciertas modalidades, el trastorno o afección mediada por PI3K se selecciona de artritis reumatoide, espondilitis anquilosante, osteoartritis, artritis psoriática, psoriasis, enfermedades inflamatorias, y enfermedades autoinmunitarias . En otras modalidades, el trastorno o afección mediado por PI3K se selecciona de enfermedades cardiovasculares, ateroesclerosis , hipertensión, trombosis de vena profunda, apoplejía, infarto -al miocardio, angina inestable, tromboembolismo, embolismo pulmonar, enfermedades trombolíticas , isquemia arterial aguda, oclusiones trombóticas periféricas, y enfermedad de la arteria coronaria. Todavía en otras modalidades, el trastorno o afección mediada por PI3K se selecciona de cáncer, cáncer de colon, glioblastoma , carcinoma endometrial, hepatocellular cáncer, cáncer pulmonar, melanoma, carcinoma de célula renal, carcinoma de tiroide, linfoma celular, trastornos linfoproliferativos, cáncer pulmonar de célula pequeña, carcinoma pulmonar de- célula escamosa, glioma, cáncer de mama, cáncer de próstata, cáncer de ovarios, cáncer cervical, y leucemia. Aún en otra modalidad, el trastorno o afección mediado por PI3K se^ selecciona de diabetes tipo II. Todavía en otras modalidades, el trastorno o afección mediada por PI3K se selecciona de enfermedades respiratorias, bronquitis, asma, y enfermedad pulmonar obstructiva crónica. En ciertas modalidades, el sujeto es un humano.

Otro aspecto de la invención se refiere al tratamiento de artritis reumatoide, ' espondilitis anquilosante, osteoartritis, artritis psoriática, psoriasis, enfermedades inflamatorias o enfermedades autoinmunitarias que comprende la etapa de administrar un compuesto de acuerdo con cualquiera de las modalidades de arriba.

Otro aspecto de la invención se refiere al tratamiento de artritis reumatoide, espondilitis anquilosante, osteoartritis, artritis psoriática, psoriasis, enfermedades inflamatorias y enfermedades autoinmunitarias, trastornos inflamatorios del intestino, trastornos inflamatorios del ojo, trastornos de la vejiga inestables o inflamatorios, dolencias de la piel con . componentes inflamatorios, afecciones inflamatorias crónicas, enfermedades autoinmunitarias, lupus eritematoso sistémico (SLE) , miastenia gravis, artritis reumatoide, encefalomielitis diseminada aguda, púrpura trombocitopénica idiopática, esclerosis múltiple, síndrome de Sjoegren y anemia hemolítica autoinmunitaria, afecciones alérgicas e hipersensibilidad, que comprenden la etapa de administrar un . compuesto de acuerdo a cualquiera de las modalidades de arriba y enseguida.

Otro aspecto de la invención se refiere al tratamiento de canceres que se median, dependen de o asocian con actividad ????d, que , comprende la etapa de administrar un compuesto de acuerdo a cualquiera de las modalidades de arriba y enseguida.

Otro aspecto de la invención se refiere al tratamiento de canceres son seleccionados de leucemia mieloide aguda, síndrome mielo-displástico, enfermedades mielo-proliferativas , leucemia mieloide crónica, leucemia linfoblástica aguda de célula T, leucemia linfoblástica aguda de célula B, linfoma no. de Hodgkins, linfoma de célula B, tumores sólidos y cáncer de mama, que comprende la etapa de administrar un compuesto de acuerdo a cualquiera de las modalidades de arriba y enseguida.

Otro aspecto de la invención se refiere a una composición farmacéutica que comprende un compuesto de acuerdo con cualquiera de las modalidades de arriba y un portador o diluyente farmacéuticamente aceptable.

Otro aspecto de la invención se refiere al uso de un compuesto de acuerdo con cualquiera de las modalidades de arriba como un medicamento.

Otro aspecto de la invención se refiere al uso de un compuesto de acuerdo con cualquiera de las modalidades de arriba en la ' fabricación de un medicamento para el tratamiento de artritis reumatoide, espondilitis anquilosante, osteóartritis , artritis psoriática, psoriasis, enfermedades inflamatorias, y enfermedades autoinmunitarias .

Los compuestos de esta invención pueden tener en general varios centros asimétricos y se representan en la forma de mezclas racémicas. Esta invención se pretende para abarcar mezclas racémicas, parcialmente mezclas racémicas y enantiómeros y diaestereómeros separados.

A menos que se especifique de otra manera, las siguientes definiciones aplican para términos formados en la especificación y reivindicaciones: "alq Cc-p" significa un grupo alq que comprende un mínimo de a y un máximo de ·ß átomos de carbono en una relación ramificada, cíclica o lineal o cualquier combinación de las tres, en donde y ß representa enteros. Los grupos alq descritos en esta . sección también pueden contener uno o dos enlaces dobles o triples. Los ejemplos de alq Ci-e incluyen, pero no se limitan a lo siguiente: ¦· "Grupo benzo", solo o en combinación, significa que el radical divalente. C4H4=, una representación de la cual es -CH=CH-CH=CH-, que cuando se une vecinalmente a otro anillo forma un anillo . tipo benceno, por ejemplo tetrahidronaftileno, indol y similares.

Los términos "oxo" y "tioxo" representan los grupos =0 (como en carbonilo) y =S (como en tiocarbonilo) , respectivamente.

"Halo" o "halógeno" significan átomos de halógeno seleccionados de F, Cl, Br y I . "haloalq Cv-w" significa' un grupo alq, como se describe arriba, en donde cualquier número, al menos uno, de los átomos de hidrógeno unidos a la cadena alq se reemplazan por F, Cl, Br o I.

"Heterociclo" significa un anillo que comprende al menos uno átomo de carbono y al menos otro átomo seleccionado de N, 0 y S. Los ejemplos de heterociclos que pueden encontrarse en las reivindicaciones incluyen, pero no se limitan a, lo siguiente: nitrógeno que son parte de un heterociclo y se unen por dos enlaces sencillos (por ejemplo piperidina), dejando un enlace externo disponible para sustitución por, por ejemplo, H o CH3.

"Sal farmacéuticamente aceptable" significa una sal preparada por medios convencionales, y son bien conocidos por aquellos experimentados en la técnica. Las "sales farmacológicamente aceptables" incluyen sales básicas de ácidos orgánicos e inorgánicos, incluyendo pero no limitados a ácido clorhídrico, ácido' bromhídrico, ácido sulfúrico, ácido fosfórico, ácido metansulfónico, ácido etansulfónico, ácido málico, ácido acético, ácido oxálico, ácido tartárico, ácido cítrico, ácido láctico, ácido fumárico, ácido succínico, ácido maléico, ácido salicílico, ácido benzoico, ácido fenilacético, ácido mandélico y similares. Cuando los compuestos de la invención incluyen una función ácida tal como un grupo carboxi, entonces los pares de catión farmacéuticamente aceptables adecuados para el grupo carboxi son bien conocidos para aquellos experimentados en la técnica e incluyen cationes alcalinos, alcalinotérreos , de amonio, de amonio cuaternarios y similares.. Para ejemplos adicionales de "sales farmacológicamente aceptables," ver infra y Berge et al., J. Pharm. Sci. -66:1 (1977).

"Saturado, parcialmente saturado o no saturado" incluye sustituyentes saturados con hidrógenos, sustituyentes completamente no saturados con hidrógenos y sustituyentes parcialmente saturados con hidrógenos.

"Grupo de partida" generalmente se refiere a grupos fácilmente desplazables por un nucleófilo, tal como una amina, un tiol o un nucleófilo de alcohol. Tales grupos de partida son bien conocidos en la técnica. Los ejemplos de tales grupos de partida . incluyen, pero no se limitan a, N-hidroxisuccinimida, . N-hidroxibenzotriazol, haluros, triflatos, tosilatos y similares. Los grupos de partida preferidos se indican en la presente donde sean apropiados.

"Grupo protector" generalmente se refiere a grupos bien conocidos en la técnica que se usan para prevenir grupos reactivos seleccionados, tales como carboxi, amino, hidroxi, mercapto y similares, de reacciones indeseadas experimentadas, tales como nucleofilicas , electrofilicas , oxidación, reducción y similares. Los grupos protectores preferidos se indican en la presente donde sea apropiado. Los ejemplos de grupos protectores amino incluyen, pero no se limitan a, aralq, aralq sustituido, cicloalquenilalq y cicloalquenil alq sustituido,, alilo, alilo sustituido, acilo, alqoxicarbonil, aralqoxicarbonilo, sililo y similares. Los ejemplos de aralq incluyen, pero no se limitan a, bencilo, orto-metilbencilo, trifilo y benchidrilo, que pueden estar opcionalmente sustituidos con halógeno, alq, alqoxi, hidroxi, nitro,, acilamino, acilo ' y similares, y sales, tales como sales de fosfonio y amonio. Los ejemplos de grupos arilo incluyen fenilo, naftilo, indanilo,. antracenilo, 9- (9-fenilfluorenil ) , . fenantrenilo, durenilo y similares. Los ejemplos de radicales cicloalqenilalq o cicloalqenilalq sustituido, preferiblemente .tienen 6-10 átomos de carbono, incluyen, pero no . se limitan a, ciclohexenil metilo y similares. Los -grupos acilo, alqoxicarbonilo y aralqoxicarbonilo adecuados incluyen benciloxicarbonilo, t-butoxicarbonilo, iso-butoxicarbonilo, benzoilo, benzoilo sustituido, butirilo, acetilo, trifluoroacetilo, tricloro acetilo, ftaloiló y similares. Una mezcla de grupos protectores puede usarse para proteger el mismo grupo amino, tal como un grupo amino primario puede protegerse por tanto un grupo aralq como un grupo aralqoxicarbonilo. Los grupos protectores amino también pueden formar un anillo heterociclico con el nitrógeno al cual se unen, por ejemplo, 1, 2-bis (metilén) benceno, ftalimidilo, succinimidilo, maleimidilo y similares y donde estos grupos heterociclicos pueden incluir además anillos arilo y cicloalq contiguos. Además, los grupos heterociclicos pueden ser mono-, di o tri-sustituidos, tales como nitroftalimidilo . Los grupos amino también pueden protegerse contra reacciones indeseadas, tales como oxidación, aunque la formación de una sal de adición, tal como clorhidrato, ácido toluensulfónico, ácido trifluoroacético y similares. Muchos de los grupos protectores amino también son adecuados para proteger grupos carboxi, hidroxi . y mercapto. Por ejemplo, grupos aralq. Los grupos alq también son grupos adecuados para proteger grupos hidroxi y mercapto, tal como tert-butilo.

Los grupos protectores sililo son átomos de silicio opcionalmente sustituidos por uno o más grupos alq, arilo y aralq. Los grupos protectores . sililo adecuados incluyen, pero no se limitan a, trimetilsililo, trietilsililo, triisopropilsililo, tert-butildimetilsililo, dimetilfenilsililo, 1, 2-bis (dimetilsilil) benceno, 1 , 2-bis (dimetilsilil ) etano y difenilmetilsililo . La sililación de los grupos amino proporciona grupos mono o di-sililamino. La sililación de compuestos de aminoalcohol puede llevar a un derivado de N, N, O-trisililo . La eliminación de la función sililo de una función de éter de sililo se realiza fácilmente por tratamiento con, por ejemplo, un reactivo de hidróxido de metal o fluoruro de amonio, ya sea como una etapa de reacción discreta o in situ durante una reacción con el grupo de alcohol. Los agentes de sililación adecuados son, por ejemplo, cloruro de trimetilsililo, cloruro de tert-butil-dimetilsililo, cloruro de fenildimetilsililo, cloruro de difenilmetilo sililo o sus productos de combinación con imidazol o DMF. Los métodos para sililación de aminas y eliminación de grupos protectores sililo son bien conocidos para aquellos experimentados en la técnica. Los métodos de preparación de estos derivados de amina de aminoácidos correspondientes, amidas de aminoácideos o ésteres de aminoácidos también son bien conocidos para aquellos experimentados en la técnica de química orgánica incluyendo aminoácido/éster ' de aminoácido o química de aminoalcohol .

Los grupos protectores se remueven bajo condiciones que no afectarán la porción restante de la molécula. Estos métodos son bien conocidos en la técnica e incluyen hidrólisis ácida, . hidrogenolisis y similares. Un método preferido involucra eliminación de un grupo protector, tal como eliminación de un grupo benciloxicarbonilo por hidrogenolisis que utiliza paladio en carbono en un sistema de solvente adecuado tal como .un alcohol, ácido acético, y similares o mezclas de los mismos. Un grupo protector t-butoxicarbonilo puede removerse utilizando un ácido orgánico o inorgánico, tal como HC1 o ácido trifluoroacético, en un sistema de solvente adecuado, tal como dioxano o cloruro de metileno. La sal amino resultante puede fácilmente neutralizarse para proporcionar la amina libre. El grupo protector carboxi, tal como metilo, etilo, bencilo, tert-butilo, 4-metoxifenilmetilo y similares, puede removerse bajo condiciones de hidrólisis e hidrogenolisis bien conocidas para aquellos experimentados en la técnica.

Debe notarse que los compuestos de la invención pueden contener grupos que pueden existir en formas tautoméricas , tales como grupos cíclicos y de amidina y guanidina acíclicos, heteroátomo sustituido por grupos heteroarilo (Y' = O, S, NR) , y similares, que se ilustran en los siquientes e emplos y aunque una forma se' nombra, describe, muestra y/o reivindica en la presente, todas las formas tautoméricas se pretenden para incluirse inherentemente en tal nombre, descripción, exhibición y/o reivindicación.

Los profármacos de los compuestos de esta invención también se contemplan por esta invención. Un profármaco es un compuesto activo o inactivo que se modifica químicamente a través de acción fisiolóqica in vivo, tal como hidrólisis, metabolismo y similares, en un compuesto de esta invención después de la administración del profármaco a un paciente. Lo idóneo y técnicas involucradas en hacer y usar profármacos son bien conocidos por aquellos experimentados en la técnica. Para una discusión qeneral de profármacos que. involucran ásteres ver Svensson and Tunek Drug Metabolism Reviews 165 (1988) y Bundgaard Design of Prodrugs, Elsevier (1985). Los ejemplos de un anión de carboxilato enmascarado incluyen una variedad de ésteres, tales como alq (por ejemplo, metilo, etilo), cicloalq (por ejemplo,- ciclohexilo) , aralq (por ejemplo, bencilo, p-metoxibencilo) , y alqcarboniloxialq (por ejemplo, pivaloiloximetilo) . Las aminas se han enmascarado como derivados sustituidos de arilcarboniloximetilo que se desdoblan por esterases in vivo liberando el fármaco libre y formaldehido (Bungaard J. Med. Chem. 2503 (1989)). También, los fármacos que contienen un grupo NH ácido, tales como imidazol, imida, indol y similares, se han enmascarado con grupos N-aciloximetilo (Bundgaard Design of Prodrugs, Elsevier (1985)). Los grupos hidroxi se han enmascarado como ésteres y éteres. EP 039,051 (Sloan y Little, 4/11/81) describe profármacos de á.cido hidroxámicos de base Mannich, su preparación y uso.

La especificación y reivindicaciones contienen listado de especies usando el lenguaje "seleccionados de . . . y . . ." y "es . . . o . . ." (algunas veces referidos como grupos Markush) . Cuando este lenguaje se usa en esta solicitud, a menos que se establezca de otra manera significa incluir el grupo como un todo, o cualquiera de los miembros sencillos del mismo, o cualquiera de los subgrupos de los mismos. El uso de este lenguaje se meramente para propósitos de taquigrafía y no significa de ninguna manera limitar la eliminación de elementos o subgrupos individuales como sea necesario .

La presente invención también incluye compuestos etiquetados isotópicamente, que son idénticos a aquellos recitados en la presente, pero por el hecho de que uno o más átomos se reemplazan por un átomo que tiene una masa atómica o número de masa diferente de la masa atómica o número de masa usualmente encontrada en la naturaleza. Los ejemplos de isótopos que pueden incorporarse en compuestos de la invención incluyen isótopos de hidrogeno, carbono, nitrógeno, oxígeno, fósforo, flúor y cloro, tal como 2H, 3H, 13C, 14C, 15N, 160, 170, 31P, 32P, 35S, 18F, y 36C1.

Los compuestos de la presente invención que contienen los isótopos antes mencionados y/u otros isótopos de otros átomos están dentro del alcance de esta invención. Ciertos compuestos etiquetados isotópicamente de la presente invención, por ejemplo aquellos en los cuales los isótopos radioactivos tales como JH y 14C se incorporan, son útiles en ensayos de distribución de tejido de sustrato y/o fármaco. Los isótopos tritiados, esto es, isótopos 3H, y carbono-14, esto es, 14C, se prefieren particularmente por su facilidad de preparación y detección. Además, la sustitución con isótopos más pesados tales como deuterio, esto es, 2H, puede proporcionar ciertas ventajas terapéuticas que resultan de mayor estabilidad metabólica, por ejemplo vida media in vivo incrementada o requerimientos de dosificación reducidos y, por lo tanto, pueden preferirse en algunas circunstancias. Los compuestos isotópicamente etiquetados de esta invención pueden generalmente prepararse al sustituir un reactivo isotópicamente etiquetado fácilmente disponible para un reactivo no isotópicamente etiquetado.

Experimental Se usan las siguientes abreviaturas: ac . - acuoso BINAP - 2,2' -bis (difenilfosfino) -1,1' -binaftilo conc - concent ado DCM - diclorometano DIAD - azodicarboxilato de diisopropilo D F - N, N-dimetilformamidá Et20 - éter de dietilo EtOAc - acetato de etilo EtOH - alcohol etílico h - horas min - minutos MeOH - alcohol metílico MsCl - cloruro de metansulfonilo ta - temperatura ambiente sat - saturado THF - tetrahidrofurano General Los reactivos y solventes usados a continuación pueden obtenerse de fuentes comerciales. . Los espectros 1H-RMN se registraron en los espectrómetros Bruker 400 MHz y 500 MHz RMN . Los picos importantes se tabulan en el orden: multiplicidad (s, singlete; d, doblete; t, triplete; q, cuarteto; m, multiplete; br s, singlete amplio) , constantes de acoplamiento en Hertz (Hz) y número de protones. Los resultados de espectrometría de masa se reportan como la relación de masa sobre carga, seguido por la abundancia relativa de cada ion (entre paréntesis ionización de Electrorocío (ESI)) se condujo el análisis de espectrometría de masa en un espectrómetro de masa de electrorocío Agilent 1100 series LC/MSD. Todos los compuestos pueden analizarse en el modo ESI positivo usando acetonitrilo : agua con ácido fórmico al 0.1% como el solvente de suministro. Se llevó a cabo HPLC analítica de fase inversa usando un Agilent serie 1200 en columna Agilent Eclipse XDB-C18 5 µp? (4.6 x 150 mm) como la fase estacionaria y eluida con acetonitrilo : agua con TFA al 0.1%. Se llevó a cabo HPLC semi-prep de fase inversa usando un Agilent Serie 1100 en una columna Phenomenex Gemini™ 10 µp? C18 (250 x 21.20 mm) como la fase estacionaria y eluida con acetonitrilo H20 con TFA al 0.1%.

Ejemplo 1 : Preparación de N- (1- (2- (3-fluorofenil) -1 , 5-naftiridin-3-il) etil) -9H-purin-6-amina 2- (3-Fluorofenil) -1 , 5-naftiridin-3-carbonitrilo A una mezcla de 3- (3-fluorofenil) -3-oxopropanonitrilo (0.8991 g, 5.511 mmol) y 3-amino-2-piridincarbaldehido (0.6730 g, 5.511. mmol) en acetato de etilo (16.70 mL, 5.511 mmol) se agregó piperidina (0.04360 mL, 0.4409 mmol) y la mezcla se calentó bajo reflujo (témp. del baño 85°C) con agitación. Después de 1 h, la mezcla se enfrió a temperatura ambiente y concentró bajo presión reducida para dar un sólido café oscuro. El sólido café- oscuro se purificó por cromatografía de columna .en gel de sílice en unos 80 g de columna Redi-Sep™ usando 0 hasta 50% de gradiente de EtOAc en hexano durante 25 min y luego 50% isocrático de. EtOAc en hexano durante 25 min como eluyente para dar 2- (3- fluorofenil) -1, 5-naftiridin-3-carbonitrilo como un sólido café: XH RMN (400 MHz , DMSO-d6) d ppm 9.27 (1 H, d,. J=0.8 Hz) , 9.18 (1 H, dd, J=4.1, 1.8 Hz), 8.56 - 8.62 (1 H, m), .8.01 (1 H, dd, J=8.6, 3.9 Hz),' 7.76 - 7.85 (2 H, m) , 7.63 - 7.71 (1 H, m) , 7.44 - 7.52 (1 H, m) ; CL-EM (ESI) m/z 249.9 [M+H]+. 2- (3-Fluorofenil) -1 , 5-naftiridin-3-carbaldehido A una solución de 2- (3-fluorofenil) -1, 5-naftiridin-3-carbonitrilo (0.175 g, 0.702 mmol) en diclorometano (9.93 mL, 0.702 mmol) a -78°C se agregó hidruro de diisobutilaluminio 1.0 M en diclorometano (1.40 mL, 1.40 mmol, 2 eqv.) gota- a gota durante 3 min con agitación y la mezcla se permitió calentar hasta 15°C con agitación durante 24 h. La mezcla se enfrió hasta -78°C. Á la mezcla enfriada se agregó hidruro de diisobutilaluminio 1.0 M en diclorometano (0.702 mL, 0.702 mmol, 1 eqv.) gota a gota y la mezcla se agitó a -78°C durante 2 h adicionales. Después de 26 h, la mezcla se enfrió en baño de agua con hielo y apagó por adición, de HC1 ac. 1 N (4.21 mL, 4.21 mmol) a 0°C y agitó. Después de 1.5 h, a la mezcla se agregó acetato de potasio (0.413 g, 4.21 mmol) . La capa orgánica se separó y la capa ac. se extrajo con CH2CI2 (50 mL x 2) . Las capas orgánicas combinadas se lavaron con NaHC03 saturado (50 mL x 1), salmuera (50 mL x 1), secaron sobre a2SC>4 , filtraron, y concentraron a presión reducida para dar un sólido anaranjado. El sólido anaranjado se purificó por cromatografía de columna en gel de sílice en unos 40 g de columna Redi-Sep™ usando 0 hasta 100% de gradiente de EtOAc en héxano durante 14 min y luego 100% isocrático de EtOAc durante 5 min como eluyente para dar 2- ( 3-fluorofenil ) -1 , 5-naftiridin-3-carbaldehído como un sólido amarillo: XH RMN (400 MHz , DMSO-de) d ppm 10.15 (1 H, s), 9.17 (1 H , dd, J=4.1, 1.8 Hz), 8.90 (1 H, d, J=0.8 Hz), 8.54 -8.59 (1 H, m, J=8.6, 1.0, 0.8, 0.8 Hz) , 7.98 (1 H, dd, J=8.6, 4.1 Hz), 7.59 - 7.67 (2 H, m) , 7.53 - 7.58 (1 H, m) , 7.39 -7.47 (1 H, m) ; CL-EM (ESI) m/z 252.9 [M+H]+. 1- (2- (3-Fluorofenil) -1 , 5-naftiridin-3-il) etanol A una mezcla agitada de 2- ( 3-fluorofenil ) -1 , 5-naftiridin-3-carbaldehído (0.0293 g, 0.116 mmol) en tetrahidrofurano (2.00 mL, 0.116 mmol) se agregó bromuro de metilmagnesio 3M en dietilo éter (0.0581 mL, 0.174 mmol) gota a gota a 0°C y la mezcla se permitió entibiar a temperatura ambiente con agitación. Después de 2.5 h, la reacción se apagó con NH4CI ac. saturado (20 mL) y extrajo con EtOAc (30 mL x 2) . Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (30 mL x 3), secaron sobre Na2S04, filtraron, y concentraron bajo presión reducida. El residuo se purificó por cromatografía de columna en gel de sílice en unos 40 g de columna Redi-Sep™ usando 0 hasta 100% de gradiente de EtOAc en hexano durante 14 min y luego 100% isocrático de EtOAc durante 10 min como eluyente para dar 1- ( 2- ( 3-fluorofenil ) -1 , 5-naftiridin-3-il ) etanol como un jarabe incoloro: CL-EM (ESI) m/z 268.9 [M+H]+. 2- (1- (2- (3-Fluorofenil) -1 , 5-naftiridin-3-il) etil) -1H-isoindol-1 , 3 (2H) -diona Una solución, de 1- (2- (3-fluorofenil) -1, 5-naftiridin-3-il) etanol (0.0260 g, 0.0969 mmol) , trifenilfosfina (0.0508 g, 0.194 mmol), ftalimida (0.0285' g, 0.194 mmol), y tetrahidrofurano (1.29 mL, 0.0969 mmol) se agitó a temperatura ambiente durante 5 min para disolver todos los reactivos. La mezcla luego se. enfrió hasta 0°C y a la mezcla homogene enfriada se agregó gota a gota azodicarboxilato de diisopropilo (0.0382 mL, 0.194 mmol) a 0°C. La mezcla de reacción se permitió entibiar a temperatura ambiente y agitó a temperatura ambiente durante 1.5 h. Después de 1.5 h, la mezcla se concentró bajo presión reducida y dividió entre EtOAc (50 mL) y salmuera (50 mL) . La capa orgánica se secó sobre Na2S04, filtró, y concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó por cromatografía de columna en gel de sílice en unos 12 g de columna Redi-Sep™ usando 0 hasta 100% de gradiente de EtOAc en hexano durante 11 min y 100% isocrático de EtOAc durante 25 min como eluyente para dar 2-(1- (2- (3-fluorofenil) -1, 5-naftiridin-3-il ) etil) -lH-isoindol-1, 3 (2H) -diona como un sólido blanco: CL-EM (ESI) m/z 397.9 [M+H] + . 1- (2- (3-Fluorofenil) -1 , 5-naftiridin-3-il) etanamina A una suspensión de 2- (1- (2- (3-fluorofenil) -1, 5-naftiridin-3-il) etil) -lH-isoindol-1, 3 (2H) -diona (0.0317 g, 0.0798 mmol) en etanol (1.60 mL, 0.0798 mmol) se agregó monohidrato de hidrazina (0.0774 mL, 1.60 mmol), y la mezcla se agitó bajo reflujo.' Después de 1 h 20 min, la mezcla se enfrió hasta temperatura ambiente. La mezcla se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó por cromatografía de columna en unos 12 g de columna Redi-Sep™ usando 0% hasta 100% de gradiente, de CH2C12 : MeOH : NH4OH (89:9:1) en CH2C12 durante 11 min, y luego 100% isocrático de CH2Cl2:MeOH:NH4OH (89:9:1) durante 10 min como eluyente para dar 1- (2- ( 3-fluorofenil ) -1, 5-naftiridin-3-il ) etanamina como un jarabe amarillo ligero: CL-EM (ESI) m/z 268.0 [M+H]+.

N- (1- (2- (3-Fluorofenil) -1, 5-naftiridin-3-il) etil) -9H-purin-6-amina Una mezcla de 6-cloropurina (0.00925 g, 0.0599 mmol), 1-(2- (3-fluorofenil) -1, 5-naftiridin-3-il) etanamina (0.0160 g, 0.0599 mmol), y n, n-diisopropiletilamina (0.0313 mL, 0.180 mmol) en 1-butanol (0.599 mL, 0.0599 mmol) se agitó a 100°C. Después de 88.5 h, la mezcla se removió del calor y concentró bajo presión reducida.- El residuo se disolvió en CH2C12 (50 mL) . La mezcla orgánica se lavó con agua (30 mL x 1) y salmuera (30 mL x 1), secó sobre Na2S04, filtró, y concentró bajo presión . reducida. El residuo se purificó por cromatografía de columna en unos 40 g de columna Redi-Sep™ usando 0% hasta 50% de gradiente de CH2C12 : MeOH : NH„OH (89:9:1) en CH2CI2 durante 14 min, luego 50% isocrático de CH2Cl2:MeOH:NH4OH (89:9:1) en ' CH2C12. durante 14 min, luego 50% hasta 100% de gradiente de CH2C12 :MeOH : NH4OH (89:9:1) en CH2C12 durante 14 min, y luego 100% isocrático de CH2C12 : MeOH : NH40H (89:9:1) durante 14 min como eluyente para dar el producto deseado como un sólido café. El sólido café se suspendió en EtOAc-hexano (1:1) y filtró para dar N- ( 1- (2- (3-fluorofenil ) -1 , 5-naftiridin-3-il ) etil ) -9H-purin-6-amina como un sólido marrón: XH RMN (400 MHz , DMSO-d6) d ppm 12.92 (1 H, br. s.), 8.96 (1 H, dd, J=3.9, 1.6 Hz), 8.31 - 8.77 (3 H, m) , 7.99 -8.21 (2 H, m), 7.52 - 7.81 (4 H, m) , 7.35 (1 H, td, J=8.5, 1.8 Hz), 5.60 (1 H, b . s.),' 1.47 .(3 H, br. s.); CL-EM (ESI) m/z 385.9 [M+H]+.

Ejemplo 2: Preparación de 4-amino-6- ( (1- (2- (2-fluorofenil) -1 , 5-naftiridin-3-il) etil) amino) -5-pirimidincarbonitrilo , 4-amino-6- ( ( (IR) -1- (2- (2-fluorofenil) -1 , 5-naftiridin-3-il) etil) amino) -5-pirimidincarbonitrilo, y 4-amino-6- ( ( (1S) -1- (2- (2-fluorofenil) -1 , 5-naftiridin-3-il) etil) amino) -5-pirimidincarbonitrilo 2-Metil-3-nitropiridina La 2-cloro-3-nitropiridina (20 g, 126.18 mmol), ácido metan borónico (9.8 g, 164 mmol), tetraquis (trifenilfosfi'na) paladio . (11.66 g, 10 mmol) y carbonato de potasio (51.48 g, 378.6 mmol) se mezclaron todos en 1-4 dioxano (500 mL) , desgasificaron y calentaron hasta 100°C durante 48 h bajo N2. Se llevó a cabo el trabajo al permitir que la masa de reacción se enfrie hasta temperatura ambiente y apagó con agua y extrajo con acetato de etilo. La capa acuosa se volvió a extraer con acetato de etilo. Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre Na2S0 anhidro y concentraron bajo presión reducida para dar un sólido. El sólido se purificó además por cromatografía de columna en gel de sílice usando 6% de acetato de etilo en 'hexano como eluyente para dar 2-metil-3-nitropiridina como un sólido blanco opaco: 1H-RMN (CDC13) d: 2.9(s, 3H) , 7.4 (m, 1H) , 8.3(d, 1H) , 8.7 (d, 1H) . 3-Nitro-2-piridincarbaldehído La 2-metil-3-nitropiridina (24 g, 173.91 mmol) se disolvió en 1,4-dioxano (500 mL) y a la mezcla se agregó dióxido de selenio (23 g, 208.7 mmol) y la mezcla se calentó bajo reflujo durante 16 h. Después de completar la reacción, la mezcla se enfrió hasta ta' y filtró a través de Celite™ y el filtrado se concentró bajo presión reducida para dar masa aceitosa gruesa. La masa aceitosa se purificó por cromatografía de columna en gel de sílice usando 20% de acetato de etilo y hexano como eluyente para dar 3-nitro-2-piridi'ncarbaldehído como un sólido blanco opaco: 1H-RMN (CDC13) d: 7.7(m, 1H) , 8.3(d, 1H) , 9.0(d, 1H) , 10.3(s, 1H) . 2- (1 , 3-Dioxolan-2-il) -3-ni ropiridina Se disolvió 3-nitro-2-piridincarbaldehído (22 g, 144.74 mmol) en tolueno (500 mL) . A la mezcla se agregó cantidad catalítica de p-TSA (2 g) y etilen glicol (40 mL) y el matraz de reacción equipado con ensamble Dean-Stark se puso a reflujo durante 12 h a 120°C. Después de que la reacción se completó, la mezcla de reacción se trató con agua y acetato de etilo. La capa orgánica se separó y la capa acuosa se volvió a extraer con acetato de etilo. Las capas orgánicas se combinaron y secaron sobre Na2S04 anhidro y concentraron bajo presión reducida para dar una masa aceitosa gruesa. La masa aceitosa luego se purificó por cromatografía de columna en gel de sílice usando 20% de acetato de etilo y hexano como eluyente para dar 2- ( 1 , 3-dioxolan-2-il ) -3-nitropiridina : RMN (CDC13) d: 4.2(d, 5H) , 6.5(s, 1H) , 7.5 (m, 1H) , 8.3 (d, 1H) , 8.9(brs, 1H) .. 2- (1, 3-Dioxolan-2-il) -3-piridinamina Se suspendió 2- ( 1 , 3-Dioxolan-2-il ) -3-nitropiridina (10 g, 51 mmol) en'etanol (300 mL) . A la mezcla se agregó Pd/C al 10% (3 g) . La mezcla de reacción se mantuvo a 4.218 kg/cm2 (60 psi) de presión usando ensamble de hidrogenación de agitador Parr. Después de completar la reacción (6 h) , la mezcla de reacción se filtró a través de Celite™ y el filtrado se concentró bajo presión reducida para dar 2- (1,3-dioxolan-2-il ) -3-piridinamina como un sólido opaco: XH-RMN (CDCI3) d: 4.4- 4.0 (m, 6H) , 5.8(s 6.9 (m, 2H) , 8.0 (s, 1H) . 2- (2-Fluorofenil) -1 , 5-naftiridin-3-carbonitrilo Se disolvieron 3- (2-Fluorofenil) -3-oxopropanonitrilo (1.5 g, 9.2 mmol) y 2- ( 1 , 3-dioxolan-2-il ) -3-piridinamina (1.68 g, 10.12 mmol) en tolueno (100 mL) . A la mezcla se agregó cantidad catalítica de p-TSA (300 mg) y el matraz de reacción equipado con ensamble Dean-Stark se calentó durante 4 h a 120 °C. Después de completar la reacción, la mezcla de reacción se trató con agua y acetato de etilo. La capa orgánica se separó y la capa acuosa se volvió a extraer con acetato de etilo. Las capas orgánicas se combinaron y secaron sobre a2S04 anhidro y concentraron bajo presión reducida para dar una masa aceitosa gruesa. La masa aceitosa luego se purificó por cromatografía de columna en gel de sílice usando 20% de acetato de etilo y hexano como eluyente para dar 2- (2-fluorofenil) -1, 5-naftiridin- 3-carbonitrilo: XH-RMN (CDCI3) d: 7.2- 7.0(m, 3H) , 7.8-7.4 (m, 3H) , 8.4 (d, 1H) , 9.1 (Sf 1H) . 2- (2-Fluorofenil) -1 , 5-naftiridin-3-carbaldehído Se agregó DIBAL-H (1M en ciclohexano, 16 mL, 16 mmol) gota a gota a la solución de 2- (2-fluorofenil ) -1 , 5-naftiridin-3-carbonitrilo (1 g, 4.02 mmol) en tolueno (100 mL) a -78 °C. Luego la mezcla de reacción se permitió calentar lentamente hasta 0°C y agitó durante 3 h. Después de completar la reacción, la mezcla de reacción se apagó con solución NH4C1 saturada y acetato de etilo, luego filtró a través de Celite™. La capa orgánica se separó y la capa acuosa se volvió a extraer con acetato de etilo. Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre anhidro Na2S04 y concentraron bajo presión reducida para dar una masa aceitosa gruesa. El análisis revela que un alcohol se obtuvo en lugar del aldehido.

El alcohol de aceite crudo de arriba (1.2 g) se disolvió en 1,4-dioxano (60 mL) y a la mezcla se agregó dióxido de manganeso (Mn02) (400 mg) y agitó a ta durante 2 h. La mezcla se filtró a través de Celite™ y el filtrado se concentró bajo presión reducida para dar una masa aceitosa gruesa (derivado de aldehido) . La masa aceitosa luego se purificó por cromatografía de columna en gel de sílice usando 30% de acetato de etilo y hexano como eluyente para dar 2-(2-fluorofenil) -1, 5-naftiridin-3-carbaldehído como un aceite amarillo: CL-EM (ESI) m/z 252.9 [M+H]+. 1- (2- (2-Fluorofenil) -1 , 5-naf iridin-3-il) etanol Se agregó bromuro de metilo magnesio (2M en dietilo éter, 2.38 mL, y 4.76mmol.) gota a gota a la solución de 2-(2-fluorofenil ) -1 , 5-naftiridin-3-carbaldehido (600 mg, 4.76 mmol) en THF (60 mL)' a -0°C. Después de completar la reacción, la mezcla de reacción se apagó con solución NH4C1 saturada y acetato de etilo, y luego filtró a través de CelitelM. La capa Orgánica se separó y la capa acuosa se volvió a extraer con acetato de etilo. Las capas orgánicas se combinaron y secaron sobre anhidro Na2S04 y concentraron bajo presión reducida para dar una masa aceitosa. La masa aceitosa luego se purificó por cromatografía de columna en gel de sílice usando 30% de acetato de etilo y hexano como eluyente para dar 1- (2- (2-fluorofenil) -1, 5-naftiridin-3-il) etanol como un aceite amarillo: ^-RMN (CDC13) d: 1.3(s, 3H) , 5.0(brs, 1H), 7.7-7.2(m, 5H), 8.4(d, 1H) , 8.8(s, 1H) , 9.0(s, 1H) . 2- (1- (2- (2-Fluorofenil) -1 , 5-naftiridin-3-il) etil) -1H-isoindol-1 , 3 (2H) -diona Se disolvieron 1- (2- (2-Fluorofenil) -1, 5-naftiridin-3-il)etanol (550 mg, 2.04 mmol) y ftalimida (600 mg, 4.09 mmol) en THF (20 mL) y la mezcla se enfrió hasta 0°C. A la mezcla enfriada se agregó PPh3 (1.07 g, 4.09 mmol) y la mezcla se agitó durante 5-10 min a 0°C. Luego se agregó DIAD (800 mg, 4.09 mmol) gota a gota a la mezcla de reacción de arriba a 0°C, y la mezcla de reacción se permitió calentar lentamente hasta ta y mantuvo a ta durante 3 h. Después de completar la reacción, la mezcla de reacción se apagó con agua y acetato de etilo. La capa orgánica se separó y la capa acuosa se volvió a extraer con acetato de etilo. Las capas orgánicas se combinaron y secaron sobre Na2S04 anhidro y concentró bajo presión reducida para dar 2- (1- (2- (2-fluorofenil ) -1, 5-naftiridin-3-il ) etil) -lH-isoindol-1, 3 (2H) -diona como un sólido blanco: H-RMN (CDC13) d: 1.8 (s, 3H) , 5.0(brs, 1H) , 6.4(s, 2H) , 7.7-7.2(m, 7H) , 8. (d, 1H) , 9.0-8.8 (d, 2H) . 1- (2- (2-Fluorofenil) -1 , 5-naftiridin-3-il) etanamina sal de TFA Se agregó NH2NH2.H20 (4 mL, 8 mmol) gota' a gota a la solución de 2- (1- (2- (2-fluorofenil) -1, 5-naftiridin-3- _0 il) etil) -lH-isoindol-l, 3 (2H) -diona (500 mg, 1.26 mmol) en etanol (20 mL) a ta. La mezcla de reacción se agitó durante 18 h a ta. Después de completar la reacción, la mezcla de reacción se hizo ácida con HC1 diluido. Luego se concentró etanol bajo presión reducida y el residuo se lavó con acetato ]_5 de etilo. La mezcla se hizo básica con solución NaOH ac. a 0°C y extrajo con acetato de etilo. La capa orgánica se separó y la capa acuosa se volvió a extraer con acetato de etilo. Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre anhidro Na2S04 y concentraron bajo presión reducida para dar 20 el producto como un sólido blanco. El compuesto crudo se purificó además por HPLC preparativa para dar l-(2-(2- fluorofenil ) -1 , 5-naftiridin-3-il ) etanamina como una sal de TFA: 1H-RMN (DMSO) d: 1.6(s, 3H)., 4.3(brs, 1H) , 7.6- 7.4 (m, 3H), 7.9 (m, 1H) , 8.6(d, 1H) , 8.4(brs, 2H) , 8.9(s, 1H) , 9.1 1H); CL-EM (ESI) m/z 268.1 [M+H]+ 4 , 6-Dicloro-5-pirimidincarbaldehido Una mezcla de DMF '(64 mL) y P0C13 (200 mL) a 0°C se agitó durante 1 h y luego trató con 4 , 6-pirimidindiol (50.0 g, 446 mmol) , y agitó además durante 0.5 h a ta. Luego la mezcla heterogénea se calentó bajo reflujo durante 3 h. Los volátiles se removieron bajo presión reducida, y el residuo se vació en agua con hielo y extrajo seis veces con dietilo éter. La fase orgánica se lavó con NaHC03 acuoso y agua, secó sobre Na2S04, concentró bajo presión reducida, y cristalizó (EtOAc-éter de petróleo) para dar 4, 6-dicloro-5-pirimidincarbaldehido (43.5 g, 55%); CL-EM (ESI) m/z 177 [M+H]+.

Oxima de 4 , 6-dicloro-5-pirimidincarbaldehido Una mezcla de 4 , 6-dicloro-5-pirimidincarbaldehido (8.00 g, 44.8 mmol), NaOAc (3.7g, 1.0 eg) y NH20H.HC1 (3.1 g, 1.0 eq) en EtOH (320 mL) se agitó a ta durante 2 h. La mezcla de reacción se filtró, concentró y purificó por cromatografía de columna en gel de sílice (carga seca, primero DCM luego DCM/EtOAc, 1/9) para dar oxima de 4 , 6-dicloro-5-pirimidincarbaldehido como un sólido blanco. 4 , 6-Dicloro-5-pirimidincarbonitrilo Se disolvió oxima de 4 , 6-dicloro-5-pirimidincarbaldehído (8 g) en CHC13 (40 mL) y trató con S0C12 (6 mL) durante 2 h a ta. El solvente se. removió y el residuo se disolvió en DCM (5 mL) . El sólido resultante se filtró y lavó con DCM (5 mL) . El filtrado se concentró bajo presión reducida y purificó por cromatografía de columna en gel de sílice usando DCM-hexano (3:1) para dar 4 , 6-dicloro-5-pirimidincarbonitrilo como un sólido blanco. 4-Amino-6-cloro-5-pirimidincarbonitrilo El sólido blanco -de , 6-dicloro-5-pirimidincarbonitrilo (5.82 g, 33.5 mmol) se disolvió en THF (66.9 mL) en unos 500 mL de matraz de fondo redondo y la mezcla se burbujeó a través de gas de amoniaco (0.570 g, 33.5 mmol) durante 3 min cada 10 min durante 50 min del tiempo de reacción con agitación. Justo después' del burbujeo de gas de amoniaco, se formó el precipitado blanco (cloruro de amonio) . Después de 50 min, el precipitado se filtró y lavó con THF (100 mL) . Al filtrado se agregó gel de sílice y concentró bajo presión reducida. El producto en gel de sílice se purificó por cromatografía de columna en gel de sílice en unos 120 g de columna Redi-Sep™ usando 0 hasta 100% de gradiente de EtOAc en hexano durante 27 min y luego 100% isocrático de EtOAC en hexano durante 20 min como eluyente para dar 4-amino-6-cloro-pirimidin-5-carbonitrilo como un sólido blanco opaco. El sólido blanco opaco se suspendió en EtOAc-hexano (1:1, 20 mL) , filtró, lavó con EtOAc-hexano (1:1, 30 mL) , y secó para dar 4-amino-6-cloro-5-pirimidincarbonitrilo como un sólido blanco: 1H RMN (500 Hz, DMSO-d6) d ppm 7.91 - 8.77 (3 H, m) ; CL-EM (ESI) m/z 154.9 [M+HjV 4-Amino-6- ( (1- (2- (2-fluorofenil) -1 , 5-naftiridin-3- 11) etil) amlno) -5-pirimidincarbonitrilo Una mezcla de 4-amino-6-cloro-5-pirimidincarbonit rilo (0.045 g, 0.288 mmol), . sal TFA de 1- ( 2- ( 2-fluorofenil ) -1 , 5-naft iridin-3-il ) etanamina (0.110 g, 0.288 mmol), y n, n-diisopropiletilamina (0.251 mL, 1.44 mmol) en butan-1-ol (2.88 mL) se agitó a 120°C. Después de 5 h, la mezcla se removió del calor y enfrió hasta temperatura ambiente. Después del enfriamiento, la mezcla se concentró bajo presión reducida para dar el jarabe café. Al residuo se agregó agua (30 mL) y la mezcla se sónico. El precipitado resultante se recolectó por filtración,, lavó con agua (20 mL) , y secó para dar el producto deseado como un sólido amarillo. El sólido se purificó por cromatografía de columna en unos 40 g de columna Redi-Sep™ usando 0 hasta 100% de gradiente de' CH2C12 : MeOH : H4OH (89:9:1) en CH2C12 durante 14 min y luego 100% isocrático de CH2C12 : MeOH : NH4OH (89:9:1) durante 14 min como eluyente para dar un sólido amarillo. El sólido amarillo se suspendió en EtOAc-hexano (1:1) y filtró para dar 4 -amino- 6- ( (1- (2 -( 2-fluorofenil ) -1, 5-naftiridin-3-il) etil) amino ) -5-pirimidincarbonitrilo como un sólido amarillo ligero: XH. RMN (400 MHz, DMSO-d6) d ppm 9.03 (1 H, dd, J=4.2, 1.7 Hz), 8.68 (1 H, s), 8.41 (1 H, ddd, J=8.6, 1.6, 0.8 .Hz), 7.85 (1 H, d, J=7.2 Hz), 7.73 - 7.81 (2 H, m) , 7.58 (1 H, br. s.), 7,45 - 7.53 (1 H, m) , 7.26 - 7.37 (2 H, m) / 7.17 (2 H, br . s.), 5.24 - 5.36 (1 H, m) , 1.52 (3 H , d, J=7.0 Hz); CL-EM (ESI) m/z 386.0 [M+H]+. 4-Amino-6- ( ( (IR) -1- (2- (2-fluorofenil) -1,5-naftiridin-3-il) etil) amino) -5-pirimidincarbonitrilo y 4-Amino-6- ( ( | (2- (2-fluorofenil) -1 , 5-naftiridin-3-il) etil) amino) -5-pirimiddncarbonitrilo La mezcla racémica (44.13 mg) se separó por separación quiral usando SFC para dar dos fracciones: La estereoquímica de los dos isómeros se designó arbitrariamente el primer isómero eluido en columna IA como la configuración R y el segundo isómero eluido en columna IA como la configuración S y se confirmó el isómero menos potente como isómero R e isómero más potente como isómero S con base en sus potencias bioquímicas PI3Kdelta.

Primer pico en columna IA y Segundo pico en columna AD-H: 4-amino-6- ( ( (IR) -1- (2- ( 2-fluorofenil ) -1 , 5-naftiridin-3-il ) etil ) amino) -5-pirimidincarbonitrilo. como un sólido blanco opaco: 1ti RMN (400 MHz , DMSO-d6) d ppm 9.03 (1 H, dd, J=4.2, 1.7 Hz), 8.68 (1 H, s), 8.41 (1 H, ddd, J=8.6, 1.6, 0.8 Hz), 7.85 (1 H, d, J=7.8 Hz), 7.74 - 7.82 (2 H, m) , 7.58 (1 H, br. s.), 7.46 - 7.53 (1 H, m) , 7.27 - 7.36 (2 H, m) , 7.17 (2 H, br. s.), 5.23 - 5.37 (1 H, m) , 1.52 (3 H, d, J=6.8 Hz); CL-EM (ESI) m/z 386.0 [ +H]\ Segundo pico en columna IA y Primer pico en columna AD-H: 4-amino-6- ( ( (1S) -1- (2- (2-fluorofenil ) -1, 5-naftiridin-3-il ) etil ) amino) -5-pirimidincarbonitrilo como un sólido blanco opaco: 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) d ppm 9.03 (1 H, dd, J=4.2, 1.7 Hz), 8.68 (1 H, s), 8.41 (1 H, ddd, J=8.5, 1.5, 0.8 Hz), 7.85 (1 H, d, J=7.0 Hz) , 7.74 - 7.81 (2 H, m) , 7.58 (1 H, br. s.), 7.46 - 7.53 (1 H, m) , 7.27 - 7.35 (2 H, m) , 7.17 (2 H, br. s.), 5.24 - 5.36 (1 H, m) , 1.52 (3 H, d, J=7.0 Hz); CL-EM (ESI) m/z 386.0 [M+H]+.

Ejemplo 3: Preparación de 4-amino-6- ( (1- (2- (3 , 5-difluorofenil) -1 , 5-naftiridin-3-il) etil) amino) -5-pirimidincarbonitrilo, 4-amino-6- ( ( (1S) -1- (2- (3 , 5-difluorofenil) -1 , 5-naftiridin-3-il) etil) amino) -5-pirimidincarbonitrilo, y 4-amino-6- ( ( (IR) -1- (2- (3 , 5-difluorofenil) -1 , 5-naftiridin-3-il) etil) amino) -5-pirimidincarbonitrilo 1- (2- (3 , 5-Difluorofenil) -1 , 5-naftiridin-3-il) etanamina Preparada de acuerdo al procedimiento en el Ejemplo 2 usando 2- ( 1 , 3-dioxolan-2-il ) -3-piridinamina y 3- (3, 5-difluorofenil ) -3-oxopropanonitrilo para dar l-(2-(3,5-difluorofenil ) -1 , 5-naftiridin-3-il ) etanamina : CL-EM (ESI) m/z 286.0 [M+H]+. 4-Amino-6- ( (1- (2- (3 , 5-eüfluorofenil) -1 , 5-naf iridin-3-±1) etil) amino) -5-pirimidincarbonitrilo Una mezcla de 4-amino-6-cloro-5-pirimidincarbonitrilo (0.125 g, 0.807 mmol) , 1- ( 2- ( 3, 5-difluorofenil ) -1 , 5-naftiridin-3-il ) etanamina (0.2303 g, 0.807 mmol), y ?,?-diisopropiletilamina (0.703 mL, 4.04 mmol) en butan-l-ol (8.07 mL) se agitó a 120°C. Después de 21 h, la mezcla se removió del calor y enfrió hasta temperatura ambiente. Después del enfriamiento, la mezcla se concentró bajo presión reducida para dar el jarabe café. El residuo se disolvió en DCM (50 mL) . La solución se lavó con agua (50 mL x 1) y salmuera (50 mL x. 1), secó sobre MgS04, filtró, y concentró bajo presión reducida para dar un sólido rojo. El sólido rojo se purificó por cromatografía de columna en unos 40 g de columna Redi-Sep™ usando 0 hasta 5% de gradiente de CH2Cl2:MeOH:NH4OH (89:9:1) en ' CH2C12 durante 14 min y luego 5% isocrático de CH2C12 : MeOH : NH4OH (-89:9:1) durante 14 min como eluyente para dar un sólido blanco opaco. El sólido blanco opaco se suspendió en EtOAc-hexano (1:4, 10 m L) , filtró, y lavó con EtOAc-hexano (1:4, 10 m L) para dar 4-amino-6- ( ( 1-(2- (3, 5-difluorofen.il ) -1, 5-naftiridin-3-il) etil) amino) -5-pirimidincarbonitrilo como un sólido blanco: 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) d ppm 9.03 (1 H, dd, J=4.2, 1.7 Hz) , 8.66 (1 H, s), 8.42 (1 H, ddd, J=8.6, 1.6, 0.8 Hz), 7.94 (1 H, d, J=7.2 Hz) , 7.87 (1 H, s), 7.79 (1 H, dd, J=8.6, 4.1 Hz), 7.30 - 7.44 (3 H, m) , 7.23 (2 H, br.. s.), 5.46 (1 H, quin, J=7.1 Hz) , 1.48 (3 H, d, J=6.8 Hz); CL-EM (ESI) m/z 404.0 [M+H]+.

-Amino-6- ( ( (1S) -1- (2- (3 , 5-difluorofenil) -1 , 5-naftiridin-3- il) etil) amino) -5-pirimidincarbonitrilo y 4-Amino-6- ( ( (IR) -1- (2- (3 , 5-difluorofenil) -1 , 5-naftiridin-3-il) etil) amino) -5- pirimidincarbonitrilo La mezcla racémica (117 mg) se separó por separación quiral usando SFC para- dar dos fracciones: La estereoquímica de los dos isómeros se designó arbitrariamente el primer isómero eluido en columna OJ como la configuración S y el segundo isómero eluido en columna OJ como la configuración R y se confirmó el isómero más potente como isómero S y isómero menos potente como isómero R con base en sus potencias bioquímicas Pl3Kdelta.

Primer pico en columna OJ y Primer pico en columna AD-H: 4- amino-6- ( ( (1S) -1- (2- (3, 5-difluorofenil) -1, 5-naftiridin-3- il ) etil) amino) -5-pirimidincarbonitrilo como un sólido blanco opaco: XH RMN (400 MHz; DMSO-d6) d ppm 9.03 (1 H, dd, J=4.2, 1.7 Hz), 8.66 (1 H, s), 8.42 (1 H, ddd, J=8.6, .1.6, 0.8 Hz) , 7.94 (1 H, d, J=7.4 Hz) , 7.87 (1 H, s) , 7.79 (1 H, dd, J=8.5, 4.2 Hz), 7.30 - 7.45 (3 H, m) , 7.23 (2 H, br. s.), 5.46 (1 H, quin, J=7.1 Hz), 1.48 (3 H , d, J=7.0 Hz) ; CL-EM (ESI)] m/z 404.0 [ +H]+.

Segundo pico en columna OJ y Segundo pico en columna AD-H: 4- amino-6- ( ( (IR) -1- (2- (3, 5-difluorofenil ) -1, 5-naftiridin-3- il ) etil ) amino) -5-pirimidincarbonitrilo como un sólido amarillo ligero: XH RMN (400 MHz, DMSO-d6) d ppm 9.03 (1 H, dd, J=4.2, 1.7 Hz), 8.66 (1 H, s) , 8.42 (1 H, ddd, J=8.5, 1.7, 0.8 Hz), 7.94 (1 H, d, J=7.4 Hz), 7.87 (1 H, s), 7.79 (1 H, dd, 7=8.5, 4.2 Hz),. 7.30 - 7.45 (3 H, m) , 7.23 (2 H, br. s.), 5.46 (1 H, quin, J=6, 9 Hz), 1.48 (3 H, d, J=6.8 Hz); CL- EM (ESI) m/z 404.0 [M+H]+.

Ejemplo 4: Preparación de 4-amino-6- ( (1- (3-fenil-l , 5- naf iridin-2-il) etil) amino) -5-pirimidincarbonitrilo, 4-amino- 6- ( ( (IR) -1- (3-fenil-l , 5-naftiridin-2-il) etil) amino) -5- pirimidincarbonitrilo, y 4-amino-6- (( (1S) -1- (3-fenil-l , 5- naftiridin-2-il) etil) amino) -5-pirimidincarbonitrilo 2-Etil-3-fenil-l , 5-naf iridina Se hizo 2-cloro-3-fenil-l , 5-naftiridina de acuerdo a un procedimiento conocido (WO 2005/100356) . Una mezcla de 2- cloro-3-fenil-l , 5-naftiridina (200 mg, 0.85 mmol) , dietilo zinc (0.87 mL, 1 M en hexano, 1.02 eq) , K2C03 (354 mg, 3.0 eq) y complejo de DCM PdCl2(dppf)2 (62.5 mg, .0.1 eq) en THF (5 mL) se purgó con N2 durante 5 min antes de calentamiento a reflujo. Después de 6 h, la reacción se apagó con NH4CI y extrajo con EtOAc y el residuo se purificó por cromatografía de columna en gel de sílice usando hexano/DCM (2/3) como eluyente para dar un sólido' amarillo. CL-EM (ESI ) m/z 235 [M+H]+. 2- (1- (3-Fenil-l, 5-naftiridxn-2-il) etil) isoindolin-1 , 3-diona Se suspendieron 2-etil-3-fenil-1 , 5-naftiridina, (112 mg, 0.43 mmol) y 1, 3-dibromo-5 , 5-dimetilhidantoina (85 mg, 0.7 eq) en tetracloruro de carbono (5 mL) . A la mezcla se agregó peróxido de benzoilo (10.3 mg, 0.1 eq) y la mezcla se calentó a reflujo durante 3 h. A la mezcla se agregó solución de bicarbonato de sodio acuoso saturado (3 mL) . Las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo con CH2CH2 (3 mL x 2). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (3 mL) , secaron sobre Na2SC , filtraron, y concentraron bajo presión reducida para dar un jarabe anaranjado. El material se usa como tal para la siguiente etapa. CL-EM (ESI) m/z 314 [M+H]+. Una mezcla de 2- ( 1-bromoetil ) -3-fenil-1 , 5-naftiridina (120 mg, 0.38 mmol) en DMF (2.0 mL) se trató con sal de ftalimida potasio (142 mg, 2.0 eq) a 60°C durante 2 h. CLEM muestra la terminación. La mezcla de reacción se dividió entre agua y EtOAc, trabajó y purificó por cromatografía de columna en gel de sílice usando EtOAc-hexano (0/1 hasta 2/1) como eluyente para dar un sólido blanco. 1H'. RMN (500 MHz, CDC13) d ppm 8.88 (1 H, dd, J=5.0, 1.6 Hz), 8.31 (1 H, J=10 Hz), 8.1 (1 H, s), 7.63 - 7.54 (5 H, m) , 7.27-7.17 (8 H, m) , 5.88 (1 H , dd, J=10,5.0 Hz), 1.76 (3 H, J=10 Hz); CL-EM (ESI) m/z 380 [M+H]+. ' ¦ 1- (3-Fenil-l , 5-naf iridin-2-il) Ttanamina Se suspendió 2- ( 1- (3-Fenil-l, 5-naftiridin-2-il) etil) isoindolin-1, 3-diona (120 mg, 0.32 mmol) en EtOH (2 mL) y trató con NH2NH2 (0.2 mL) a 70°C durante 30 min y 11 trabajó para dar un aceite incoloro (92 mg, 96%) . CL-EM (ESI) m/z 250 [M+H]+.

-Amino-6- ( (1- (3-fenil-l , 5-naftiridin-2-il) etil) amino) -5-pirimidincarbonitrilo, 4-amino-6- (( (IR) -1- (3-fenil-l , 5-naftiridin-2-il) etil) amino) -5-pirimidincarbonitrilo , y 4-amino-6- ( ( (1S) -1- (3- enil-l , 5-naf iridin-2-il) etil) amino) -5-pirimidincarbonitrilo Se calentó 1- (3-Fenil-l , 5-naftiridin-2-il ) etanamina (46 mg, 0.19 mmol), 4 -amino- 6-cloropirimidin-5-carbonitrilo (28.5 mg, 1.0 eq) y base de Hunig (39 L, 1.2 eq) en n-BuOH (2 mL) hasta 130°C durante 4 h. La mezcla se enfrió hasta ta, filtró y lavó con cantidad pequeña de EtOH para dar un sólido blanco como 4-amino-6- (1- ( 3-fenil-1, 5-naftiridin-2-il) etilamino) pirimidin-5-carbonitrilo . 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) d ppm' 9.04 .(1 H, dd, J=8.0, 4.0 Hz), 8.44 (1 H, dd, J=8.0, 4.0 Hz), .8.21 (1H, s), 7.97 (1H, s), 7.84 (1H, dd, J=8.0, 4.0 Hz), 7.61 - 7.47 (6 H, m) , 7.30 (1 H, br, s), 5.63 (1 H, t, J=8.0 Hz)), 1.31 (3 H, d, J=8.0 Hz); CL-EM (ESI) m/z 368 [M+H]+.

La mezcla racémica (50. mg) se separó por separación quiral usando SFC para dar dos fracciones: La estereoquímica de los dos isómeros se designó arbitrariamente el primer isómero eluido en columna IA como la configuración S y el segundo isómero eluido en columna IA como la configuración R y se confirmó el isómero menos potente como isómero R e isómero más potente como isómero S con base en sus potencias bioquímicas Pl3Kdelta.

Primer pico en columna IA: (S) -4-amino-6- (1- (3-fenil-l, 5-naftiridin-2-il ) etilamino) pirimidin-5-carbonitrilo como un sólido blanco opaco: 1ti RMN (400 MHz, DMSO-d6) d ppm 9.04 (1 H, dd, J=8.0, 4.0 Hz), 8.44 (1 H, dd, J=8.0 , 4.0 Hz), 8.21 (1H, s), 7.97 (1H, s), 7.84 (1H, dd, J=8.0, 4.0 Hz), 7.61 - 7.47 (6 H, m) , 7.30 (1 H, br, s), 5.63 (1 H, t, J=8.0 Hz)), 1.31 (3 H, d, J=8.0 Hz); CL-E (ESI) m/z 368 [M+H]+.

Segundo pico en columna IA: (R) -4-amino-6- ( 1- ( 3-fenil-l , 5-naftiridin-2-il ) etilamino) pirimidin-5-carbonitrilo . como un sólido blanco opaco: XH RMN (400 MHz, DMSO-d6) d ppm 9.04 (1 H, dd, J=8.0, 4.0 Hz), 8.44- (1 H, dd, J=8.0, 4.0 Hz) , 8.21 (1H, s), 7.97· (1H, s), 7.84 (1H, dd, J=8.0, 4.0 Hz) , 7.61 -7.47 (6 H, m) , 7.30 (1 H, br, s) , 5.63 (1 H, t, J=8.0 Hz) ) , I.31 (3 H , d, J=8.0 Hz).; CL-EM (ESI) m/z 368 [M+H] + .

Ejemplo 5: Preparación de N- ( (1- (3-fenil-l , 5-naftiridin-2-il) etil) -9H-purin-6-amina N- (1- (3-Fenil-l , 5-naftiridin-2-il) etil) -9H-purin-6-amina Se calentó 1- ('3-Fenil-l , 5-naftiridin-2-il ) etanamina (46 mg, 0.19 mmol), -amino- 6-cloropurina (28.5 mg, 1.0 eq) y base de hunig (39 µ?,, 1.2 eq) en n-BuOH (2 mL) hasta 130°C durante la noche. La mezcla se enfrió hasta ta, concentró, y purificó por HPLC de fase inversa ( eCN/H20/TFA 0.1%, 10% hasta 60%) para dar un polvo blanco (50 mg) como sal TFA. 1H RMN (400 MHz, CD3OD) d ppm 9.05 (1 H, d, J=4.0 Hz), 8.65 (1 H, d, J=8.0 Hz), 8.50-8.47 (2 H, m) , 8.29 (1H, s) , 7.90. (1H, dd, J=8.0, 4.0 Hz), 7.62 -7.47 (5 H, m) , 6.12 -6.01 (1 H, m) , 1.63 (3 H, d, J=8.0 Hz); CL-EM (ESI) m/z 3'68 [M+H]+.

Ejemplo 6: Preparación de 4-amino-6- ( (2- (3-fluorofenil) -1 , 5-naftiridin-3-il)metoxi) -5-pirimidincarbonitrilo 3- (3-etoxi-3-oxopropanamido) picolinato de metilo A una solución agitada de 3-aminopicolinato de metilo (1.8 mL, 13.80 mmol) en dicloroetano (60 mL) se agregó 3-cloro-3-oxopropanoato de' etilo (2.08 g, 13.80 mmol). La reacción se calentó a reflujo durante 45 min. Después de este tiempo la reacción se enfrió hasta ta y dividió entre DCM (60 mL) y NaHC03 (solución acuosa saturada, 30 mL) . La capa ac. separada se extrajo con DCM (40 mL) y la capa orgánica combinada se lavaron con salmuera (20 mL) , secaron sobre MgS04, filtraron y concentraron in vacuo para dar 3- (3-etoxi-3-oxopropanamido) picolinato de metilo: CL-EM (ESI) m/z 267.1 [M+H]+. 3- (etoxicarbonil) -1 , 5-naftiridin-2 , -bis (olato) de sodio A una solución agitada de 3- (3-etoxi-3-oxopropanamido) picolinato de metilo (3.7 g, 14.67 mmol) en EtOH ' (50 mL) se agregó etanolato de sodio (6.56 mL, 17.60 mmol) . La reacción se agitó a ta durante 1 h.. Después de este tiempo la reacción se concentró in vacuo y secó bajo vacio durante la noche para dar 3- (etoxicarbonil ) -1 , 5-naftiridin-2, 4-bis (olato) de sodio: :H RMN (400 MHz, DMSO-d6) ? ppm lti RMN (400 MHz, DMSO-d6) d ppm 8.14 (1 H, dd, J=4.5, 1.6 Hz), 7.46 (1 H, dd, J=8.2, 1.6 Hz), 7.29 (1 H, dd, J=8.2, 4.3 Hz) , 4.08 (2 H, q, J=7.0 Hz) , .1.13 - 1.24 (3 H, m) . 2 , 4-dicloro-l , 5-naftiridin-3-carboxilato de etilo Una suspensión de 3- (etoxicarbonil) -1, 5-naftiridin-2 , 4-bis (olato) de sodio (4.0 g, 14.38 mmol) y tricloruro de fosforilo (88 g, 575 mmol) se calentó a 130°C durante 48 h. Después de este tiempo la reacción se enfrió hasta ta y evaporó in vacuo. El residuo resultante se vació cuidadosamente en agua con hielo (100 mL) y lúego se hizo básica hasta pH 10 con una solución ac. satd de Na2CÜ3. La capa ac. se extrajo con EtOAc (2 x 250 mL) y las capas orgánicas combinadas se lavaron con NaOH 1 M (40 mL) . La¦¦ capa orgánica se secó sobre MgS0 , filtró y concentró in vacuo para dar 2, 4-dicloro-l, 5-naftiridin-3-carboxilato de etilo: CL-EM (ESI) m/z 271.0 [M+H]+. 7ß 4-cloro-2- (3-fluorofenil) -1 , 5-naftiridin-3-carboxilato de etilo A una suspensión agitada de 2 , 4 -dicloro-1 , 5-naftiridin-3-carboxilato de etilo (1.0 g, 3.69 mmol) en acetonitrilo : agua (7 mL:2 mL) se agregó Pd (PPh3)4 (0.426 g, 0.369 mmol), ácido 3-fluorofenilborónico (0.568 g, 4.06 mmol) y carbonato de sodio (0.782 g, 7.38 mmol) y la reacción se calentó a reflujo durante 6 h. Después de este tiempo la reacción se enfrió hasta ta y dividió entre EtOAc (80 mL) y agua (30 mL) . La capa orgánica separada se secó sobre MgSC , filtró y concentró in vacuo. La mezcla se purificó por cromatografía de columna en gel de sílice usando un gradiente desde 1:0 hasta 4:1 de hexano:EtOA c para dar 4 -cloro-2- ( 3-fluorofenil ) -1 , 5-naftiridin-3-carboxilato de etilo como un sólido blanco: CL-EJ (ESI) m/z 331.0 [M+K]+. (2- (3-Fluorofenil) -1 ,5-naftiridin-3-il)metanol A una solución agitada de 4-cloro-2- (3-fluorofenil) -1, 5-naftiridin-3-carboxilato de etilo (614 mg, 1.856 mmol) en tolueno (10 mL) a 0°C se agregó DIBAL-H (4.1 mL, 4.1 mmol) gota a gota durante 2 min. Después de este tiempo la reacción se permitió calentar hasta ta durante 1 h. Después de este tiempo se agregó más DIBAL-H (4.1 mL, 4.1 mmol) y la reacción se agitó a ta durante la noche. Después de este tiempo se agregó hidruro de litio aluminio (0.92 mL, 3.68 mmol, solución 4.0M en THF) y la reacción se agitó a ta durante 10 min. Después de este tiempo la reacción se apagó cuidadosamente con agua (8 mL) , NaOH (5 mL, solución ac. 1.0M) y agua (5 mL) . A la mezcla agitada se agregó EtOAc (50 mL) y sal de Rochelle (50 mL, solución ac. satd) y la mezcla se agitó a ta durante 2 h. Después de este tiempo la capa orgánica separada se lavó con agua, secó sobre MgS04, filtró y concentró in vacuo. El sólido resultante se purificó por cromatografía de columna en gel de sílice usando un gradiente desde 1:0 hasta 1:2 de hexano:EtOAc para dar (2- (3-fluorofenil) -1, 5-naftiridin-3-il) metanol : CL-EM (ESI) m/z 255.1 [M+H]+. 4-Amino-6- ( (2- (3-fluorofenil) -1 ,5-naftiridin-3-il)metoxi) -5-pirimidincarbonitrilo A una solución agitada de (2- (3-fluorofenil) -1, 5-naftiridin-3-il ) metanol (65 mg, 0.256 mmol) en DMF (1.5 mL) se agregó hidruro de sodio (12.3 mg, 0.31 mmol, suspensión al 60% en aceite) y la reacción se agitó a ta durante 10 min. Después de este tiempo . se agregó 4 -amino-6-cloropirimidin-5-carbonitrilo (39.5 mg, 0.256 mmol) y la reacción se agitó a ta durante 30 min. Después de este tiempo se agregó una porción adicional de NaH (12.3 mg, 0.31 mmol, dispersión al 60% en aceite) y la reacción se calentó a 50°C durante 2 h y a ta durante la noche. Después de este tiempo la reacción se enfrió hasta ta y dividió entre EtOAc (50 mL) y LiCl (20 mL, solución ac. 1M) . La capa orgánica separada se lavó con LiCl (20 mL, solución ac. 1M) y luego, se secó sobre MgS04, filtró y concentró in vacuo. La mezcla se purificó por HPLC de fase inversa (acetonitrilo al 10 hasta 60% en agua) para dar 4-amino-6- ( (2- ( 3-fluorofenil ) -1, 5-naftiridin-3-il) metoxi) -5-pirimidincarbonitrilo como un sólido blanco: XH RMN (400 MHz, CLOROFORMO-d) d ppm 9.04 (1 H, dd, J=4.2, 1.7 Hz), 8.61 -8.66 (1 H, m) , 8.44 - 8.51 (1 H, m) , 8/28 (1 H, s), 7.71 (1 H, dd, J=8.6, 4.1 Hz), 7.36 - 7.56 (3 H, m) , 7.21 (1 H, tdd, J=8.3, 8.3, 2.7, 1.2 Hz) , 5.67 (2 H, s), 5.62 (2 H, br . s.): CL-EM (ESI) m/z 373.1 [M+H]+.

Ejemplo 7: Preparación de 4-amino-6- ( ( (1S) -1- (7-fluoro-2- (2- (metilsulfonil) -fenil) -1 , 5-naftiridin-3-il) etil) amino) -5-pirimidincarbonitrilo y 4-amino-6- ( ( (IR) -1- (7-fluoro-2- (2- (metilsulfonil) fenil) -1 , 5-naftiridin-3-il) etil) amino) -5-pirimidincarbonitrilo 3- (2- (Metilsulfonil) fenil) -3-oxopropanonitrilo A una solución de 3- (2-bromofenil) -3-oxopropanonitrilo (15 g, 66.94 mmol) en DMSO (267 mL) se agregaron sal de sodio de acido metansulfónico (13.6 g, 138.89 mmol), yoduro de cobre (6.3 g, 33.47 mmol), L-prolina (3.8 g, 33.47 mmol) e hidróxido de sodio (1.3 g, 33.47 mmol) a 25°C. La mezcla de reacción se agitó' durante 1 h a 60°C. Se agregó agua a la mezcla de reacción a 25°C y extrajo con EtOAc. La capa orgánica se secó sobre Na2SÜ y concentró in vacuo. El residuo se purificó por cromatografía de columna en gel de sílice usando EtOAc al 0-45% en hexano para dar 3- (2 (metilsulfonil) fenil) -3.-oxopropanonitrilo : 1ti RMN (400 MHz CLOROFORMO-d) : d 3.183 (S, 3H) , 4.041 (s, 2H) , 7.468 (dd, 1H J=1.2 Hz,J=7.6 Hz), 7.699-7.798 (m, 2H) , 8.084 (dd, 1H J=1.2Hz, J=7.6Hz); C.L-EM (ESI) m/z 224.0' [M+H] + . 3- (2- (metilsulfonil) fenil) -3-oxopropanoato de metilo A una solución de 3- ( 2- (metilsulfonil ) fenil ) -3-oxopropanonitrilo (4.5 g, 20.25 mmol) en metanol (100 mL) se agregó cloruro de trimetil sililo (11 mL, 100.58 mmol) a 25°C. La mezcla de reacción se agitó durante la noche a 70°C. Se agregó agua a la mezcla de reacción a 25°C y extrajo con EtOAc . La mezcla de reacción se concentró in vacuo y purificó por cromatografía de columna en gel de sílice usando EtOAc al 0-30% en hexano para dar 3- ( 2- (metilsulfonil ) fenil ) -3-oxopropanoato de metilo: XH RMN (400 MHz, DMSO-d6) : d 3.294 (S, 3H), 3.645 (s, 3H) , 4.12 (s, 2H) , 7.762-7.874 (m, 3H) , 7.979-7.984 (ra, 1H) ; CL-EM (ESI) m/z 256.9 [M+H]+. 5-Fluoro-3-nitro-2-vinilpiridina A una solución de 2-bromo-5-fluoro-3-nitropiridina (20 g, 90.50 mmol) en 1, 4 dioxano (270 mL) se agregó estaño estaño de tributil vinilo (34.54 g, 108.60 mmol) . La mezcla de reacción se desgasificó usando nitrógeno durante 30 min. Se agregó cloruro de . bis- (trifenilfosfin) -paladio (II) (3.17 g, 4.5 mmol) a la mezcla¦ de reacción. Masa de reacción se agitó a 110°C durante 16 h. La mezcla de reacción se enfrió hasta 25°C. Se agregó agua a la masa de reacción y extrajo con EtOAc. La capa orgánica se lavó con salmuera y secó sobre Na2SC>4. La capa orgánica se concentró in vacuo y purificó por cromatografía de columna en gel de sílice usando EtOAc al 0-2% en hexano para dar 5-fluoro-3-nitro-2-vinilpiridina : 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) : d 5.742 (dd, 1H; J=2Hz, 10.8Hz), 6.45 (dd, 1H, J=2Hz, J=16.8Hz), 7.11-7.17 (m, 1H) , 8.489-8.516 (m, 1H), 8.959 (d, 1H, J=2.4Hz). 5-Fluoro-3-nitropicolinaldehído A una solución de 5-fluoro-3-nitro-2-vinilpiridina (14.5 g, 86.24 mmol) en THF: H20 (2:1) (517 mL) se generó 4-metilmorfolin-N-óxido (15.1 g, 129.36 mmol), t-butanol (1 mL) y tetróxido de osmio (4%) (2 mL) . La mezcla de reacción se agitó durante 6 h a 25°C para formar diol. Se agregó metaperyodato de sodio (55.3 g, 258.87 mmol) a la mezcla de reacción. La masa de reacción se agitó a 25°C durante 8 h. La mezcla de reacción se filtró a través de Celite™ y lavó con EtOAc. El filtrado se extrajo con EtOAc. La capa orgánica se lavó con salmuera y secó sobre Na2S04. La capa orgánica se concentró in vacuo para dar 5-fluoro-3-nitropicolinaldehido: XH RMN (400 MHz, DMSO-d6) : d 8.695-8.722 (m, 1H), 9.123 (d, 1H, J=2.8Hz), 10.078 (s, 1H) ; CL-EM (ESI) m/z 171.0 [M+H]+. 2- (1 , 3-Dioxolan-2-il) -5-fluoro-3-nitropiridina A una solución de 5-fluoro-3-nitropicolinaldehído (12.5 g, 73.48 mmol) en tolueno (220 mL) se agregaron ácido p-toluen sulfónico (698 mg, 3.67 mmol) y etilen glicol (20.7 mL, 367.43 mmol) a 25°C. La mezcla de reacción se calentó hasta 120°C durante la noche y agua se removió usando aparato dean-stark. La masa de reacción se enfrió hasta 25°C. Se agregó agua a la masa de reacción y extrajo con EtOAc. La capa orgánica se lavó con salmuera y secó sobre Na2S0 . La capa orgánica se concentró in vacuo y purificó por cromatografía de columna en gel de sílice usando EtOAc al 0-10% en hexano para dar 2- ( 1, 3-dioxolan-2-il) -5-fluoro-3-nitropiridina: ? RMN (400 MHz, DMSO-d6) : d 4.02 (s, 4H) , 6.22 (s, 1H), 8.939 (d, 1H, J=1.2Hz); CL-EM (ESI) m/z 215.1 [M+H]+. 2- (l,3-Dioxolan-2-il) -5-fluoropiridin-3-amina A una solución de 2- ( 1 , 3-dioxolan-2-il ) -5-fluoro-3-nitropiridina (10 g, 46.69 mmol) en etanol (140 mL) se agregó Pd/C (1 g) bajo atmósfera de nitrógeno.. La mezcla de reacción se agitó durante la noche bajo atmósfera de hidrógeno a 25°C. La mezcla de reacción se filtró a través de Celite™ y lavó con EtOH. El filtrado se concentró in vacuo y el residuo se purificó por cromatografía dé columna en gel de sílice usando EtOAc al 0-40% en hexano para dar 2- ( 1 , 3-dioxolan-2-il ) -5-fluoropiridin-3-amina: CL-EM (ESI) m/z 185.2 [M+H]+. 3-Amino-5-fluoropicolinaldehido A una solución de 2- ( 1 , 3-dioxolan-2-il ) -5-fluoropiridin-3-amina (5 g, 27.14 mmol) en DMSO: H20 (1:1) (162 mL) se agregó cloruro de litio (6.9 g, 162.89 mmol). La mezcla de reacción se calentó hasta 90 °C durante 16 h y se removió agua usando aparato dean-stark. Se agregó agua a la masa de reacción y extrajo con EtOAc. La capa orgánica se lavó con salmuera y secó sobre a2S04. La capa orgánica se concentró in vacuo y purificó por cromatografía de columna en gel de sílice usando EtOAc al 0-40% en hexano para dar '3-amino-5-fluoropicolinaldehido: XH R N (400 MHz, DMSO-d6) : d 7.003-7.037 (m, 1H), 7.387 (br s, 2H) , 7.944 (d, 1H, . J=2.4Hz) , 9.853 (s, 1H) ; CL-EM (ESI) m/z 141.0 [M+H]+.

Metil-7-fluoro-2- (2- (metilsulfonil) fenil) -1 , 5-naf iridin-3-carboxilato Una mezcla de 3-amino-5-fluoropicolinaldehido (930 mg, 6.63 mmol), 3- (2- (metilsulfonil) fenil) -3-oxopropanoato de metilo (1.7 g, 6.63 mmol) y heptahidrato de cloruro de cerio (435 mg, 1.32 mmol) sé calentó hasta 100°C durante 3 h. El residuo se disolvió en MeOH y purificó por cromatografía de columna en alúmina neutral usando EtOAc al 0-30% en hexano para dar 7-fluoro-2- (2- (metilsulfonil) fenil) -1, 5-naftiridin-3-carboxilato de metilo: CL-EM (ESI) m/z 361.0 [M+H]+. (7-Fluoro-2- (2- (metilsulfonil) fenil) -1, 5-naftiridin-3-il)me anol A una solución de 7-fluoro-2- (2- (metilsulfonil ) fenil ) -1, 5-naftiridin-3-carboxilato (1.2 g, 3.33 mmol) en DCM (27 mL) se agregó DIBAL-H (34 mL, 33.3 mmol) a -78°C. La mezcla de reacción se agitó durante 4 h en la misma temperatura. La mezcla de reacción se apagó con solución satd de cloruro de amonio y extrajo con EtOAc. La capa orgánica se concentró in vacuo para dar . (7-fluoro-2- (2- (metilsulfonil) fenil) -1, 5-naftiridin-3-il ) metanol de metilo: CL-EM (ESI) m/z 333.1 [M+H]+. Se llevó a cabo en crudo para la siguiente etapa. 7-Fluoro-2- (2- (metilsulfonil) fenil) -1, 5-naftiridin-3-carbaldehido A una solución de ( 7-fluoro-2- ( 2- (metilsulfonil ) fenil) -1 , 5-naftiridin-3-il ) metanol de metilo (50 mg, 0.15 mmol) en DCM (0.5 mL) se agregó dicromato de piridinio (113 mg, 0.3 mmol) a 25°C. La mezcla de reacción se agitó durante la noche a la misma temperatura. La mezcla de reacción se filtró a través de Celite™. El filtrado se concentró in vacuo para dar 7-fluoro-2- (2- (metilsulfonil ) fenil) -1, 5-naftiridin-3-carbaldehido: CL-EM (ESI) m/z 331.1 [M+H] + . Se llevó a cabo en crudo para la siguiente etapa. 1- (7-Fluoro-2- (2- (metilsulfonil) fenil) -1 , 5-naftiridin-3-il)etanol A una solución de 7-fluoro-2- (2- (metilsulfonil ) fenil ) -1, 5-naftiridin-3-carbaldehido (1.0 g, 3.02 mmol) en THF (24 mL) se agregó bromuro de met'il magnesio (3 mL, 9.08 mmol) a 0°C. La mezcla de reacción se agitó durante 2 h a la misma temperatura. La mezcla de reacción se apagó con solución satd de cloruro de amonio y extrajo con EtOAc . La capa orgánica se secó sobre Na2S04 y concentró in vacuo. El residuo se purificó por cromatografía de columna en gel de sílice usando EtOAc al 0-40% en hexano para dar 1- (7-fluoro-2- (2- (metilsulfonil) fenil ) -1, 5-naftiridin-3-il ) etanol de metilo (500 mg) : CL-EM (ESI) .m/z 347.0 [M+H] + . Se llevó a cabo en crudo para la siguiente etapa. 2- (1- (7-Fluoro-2- (2- (metilsulfonil) fenil) -1 , 5-naftiridin-3-il) etil) isoindolin-1 , 3-diona A una mezcla de 1- ( 7-fluoro-2- (2- (metilsulfonil ) fenil ) -1 , 5-naftiridin-3-il ) etanol de metilo (500 mg, 1.44 mmol) y ftalimida (425 mg, 2.88 mmol) en THF (15 mL) se agregó trifenilfosfeno (757 mg, 2.88 mmol) a 0°C. La mezcla de reacción se agitó durante 10 min a la misma temperatura. Se agregó azodicarboxilato de diisopropilo (0.6 mL, 2..88 mmol) a la mezcla de reacción a 0°C. La mezcla de reacción se agitó durante la noche a 0°C- Se agregó agua a la mezcla de reacción y extrajo con EtOAc. La capa orgánica se secó sobre Na2S04 y concentró in vacuo para dar 2- ( 1- (7-fluoro-2- (2- (metilsulfonil) fenil) -1, 5-naftiridin-3-il) etil) isoindolin-1,3-diona: CL-EM (ESI) m/z 476.0 [M+H]+. Se llevó a cabo en crudo para la siguiente etapa. 1- (7-Fluoro-2- (2- (metilsulfonil) fenil) -1 , 5-naftiridin-3-il) etanamina A una solución de 2- (1- (7-fluoro-2- (2- (metilsulfonil) fenil) -1, 5-naftiridin-3-il ) etil) isoindolin-1,3-diona (1.2 g, 2.52 mmol en EtOH (40 mL) se agregó hidrato de hidracina (0.8 mL, 16.4 mmol) a 25°C. La mezcla de reacción se agitó durante la noche a 25°C. La mezcla de reacción se hizo ácida con ácido clorhídrico 5 N y concentró in vacuo. Se agregó agua- al residuo y extrajo con EtO/Ac. La capa ac. se hizo básica con solución NaOH ac. y extrajo con EtOAc. La capa orgánica se secó sobre Na2S04 y concentró in vacuo para dar 1- (7-fluoro-2- (2- (metilsulfonil) fenil) -1, 5- naftiridin-3-il) etanamina: CL-EM (ESI) m/z 345.96 [M+H]+. Se llevó a cabo en crudo para la siguiente etapa. 4-Amino-6- ( (1- (7-fluoro-2- (2- (metilsulfonil) fenil) naf iridin-3-il) etil) aniño) -5-pirimidincarbonitrilo A una mezcla de 1- ( 7-fluoro-2- (2- (metilsulfonil) fenil ) - 1 , 5-naftiridin-3-il ) etanamina (300 mg, 0.86 mmol) y 4-amino- 6-cloropirimidin-5-carbonitrilo (135 mg, 0.86 mmol) en n- butanol (5.2 mL) se agregó diisopropiletil amina (336 mg, 2.6 mmol) a 25°C. La mezcla de reacción se agitó durante la noche a 110°C. Se agregó agua a la mezcla de reacción y extrajo con EtOAc. La capa orgánica se secó sobre Na2S04 y concentró. El residuo se purificó por cromatografía de columna en alúmina neutra usando MeOH al 0-5% en DCM. Se purificó además por HPLC de fase inversa para dar 4-amino-6- ( (1- (7-fluoro-2- (2- (metilsulfonil) fenil) -1, 5-naftiridin-3- il ) etil) amino) -5-pirimidincarbonitrilo : XH RMN (400 MHz, DMSO-d6) : d 1.380 (d, 3H, J=6.8Hz), 3.215 (s, 3H) , 5.240- 5.310 (m, 1H), 7.256 (br s, 2H) , 7.718-7.828 (m, 2H) , 7.934-7.950(m, 3H) , 8.123(dd, 1H, J=1.2Hz, 7.6Hz), 8.336(dd, J=2.4Hz, 9.6Hz) . 8, 678.(s, 1H) , 9.117 (d, 1H, J=2.8Hz); CL (ESI) m/z 464.2 [M+H]\ 4-Amino-6- ( ( (1S) -1- (7-fluoro-2- (2- (metilsulfonil) fenil) -1 , ! naftiridin-3-il) etil) amino) -5-pirimidincarbonitrilo y amino-6- ( ( (IR) -1- (7- luoro-2- (2- (metilsulfonil) fenil) -1 , 5-naf iridin-3-il) etil) amino) -5-pirimidincarbonitrilo La mezcla racémica (60 mg) se separó usando SFC: Fracción 1: 4-amino-6- ((( 1S) -1- (7-fluoro-2- (2-(metilsulfonil ) fenil) -1, 5-naftiridin-3-il ) etil) amino) -5-pirimidincarbonitrilo (0.01993 g, 0.043 mmol, 33.2% de rendimiento) como un sólido marrón: ¾ RMN (400 MHz, DMSO-de) d ppm 9.12 (1 H, d, J=2.7 Hz), 8.68 (1 H, s), 8.30 - 8.38 (1 H, m) , 8.12 (1 H, dd, J=7.7,- 1.5 Hz) , 7.88 - 7.97 (3 H, m) , 7.72 - 7.85 (2 H, m) , 7.16 - 7.33 (2 H, m) , 5.28 (1 H, quin, J=7.0 Hz), 1.38 (3 H, d, J=7.0 Hz); CL-EM (ESI) m/z 464.0 [M+H]+. Fracción 2: 4 -amino-6- ( ( ( IR) -1- ( 7 -fluoro-2- ( 2-(metilsulfonil) fenil) -1, 5-naftiridin-3-il ) etil) amino) -5-pirimidincarbonitrilo como un sólido café: 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) d ppm 9.12 (1 H, d, J=2.7 Hz) , 8.68 (1 H, s) , 8.30 - 8.37 (1 H, m) , 8.12 (1 H, dd, J=7.7, 1.5 Hz), 7.88 - 7.97 (3 H, m) , 7.79 (2 H, dtd, J=19.6, 7.5, 1.5, 1.4 Hz) , 7.16 - 7.31 (2 H, m) , 5.28 (1 H, quin, J=6.9 Hz) , 1.38 (3 H, d, J=7.0 Hz); CL-EM (ESI) m/z 464.0 [M+H]+.

Ejemplo 8: Preparación de 4-amino-6- ( ( (1S) -1- (2- (2- (metilsulfonil) fenil) -1 , 5-naftiridin-3-il) etil) amino) -5-pirimidincarbonitrilo y 4-amino-6- ( ( (IR) -1- (2- (2- (metilsulfonil) fenil) -1 , 5-naftiridin-3-il) etil) amino) -5-pirimidincarbonitrilo 3-Nitro-2-vinilpiridina A una solución de 2-cloro-3-nitropiridina (20 g, 126.15 mmol) en 1,4 dioxano (378 mL). se agregó estaño de tributil vinilo (48 g, 151.38 mmol). La mezcla de reacción se desagasificó usando nitrógeno' durante 30 min. Se agregó cloruro de bis- ( trifenilfosfin ) -paladio (II) (4.4 g, 6.3 mmol) a la mezcla de reacción. La masa de reacción se agitó a 110°C durante la noche. La mezcla de reacción se enfrió hasta ta. Se agregó agua a la masa de reacción y extrajo con EtOAc. La capa orgánica se lavó con salmuera y secó sobre Na2S0 . La capa orgánica se concentró in vacuo y purificó por cromatografía de columna en gel de sílice usando EtOAc al 0-5% en hexano para dar 3-nitro-2-vinilpiridina : XH RMN (400 MHz, DMSO-de) d 5.741 (dd, J=2.0 Hz, J=10.4 Hz, 1H) , 6.536 (dd, J=2.4 Hz, J=16.8 Hz, 1H) , 7.134-7.202 (m, 1H) , 7.593 (dd, J=4.4 Hz, J=8.4 Hz, 1H) , 8.388 (dd, J=1.6Hz, J=8.4 Hz, 1H) , 8.857 (dd, J=0.8 Hz, J=4.4 Hz, 1H) ; CL-EM (ESI) m/z 151.1 [ +H]+. 3-Nitropicolinaldehido A una solución de 3-nitro-2~vinilpiridina (14 g, 93.25 mmol) en THF: H20 (2:1) (560 mL) se generó 4-metilmorfolin-N-óxido (16.3 g, 139.87 mmol) , t-butanol (1 mL) y tetróxido de osmio (4%, 2 mL) . La mezcla de reacción se agitó durante 5 h a 25°C para formar diol. Se agregó metaperyodato de sodio (64.87 g, 279.7 mmol) a la mezcla de reacción. La masa de reacción se agitó a 25°C durante 8 h. La mezcla de reacción se filtró a través de cilite y lavó con EtOAc. El filtrado se extrajo con EtOAc. La capa orgánica se lavó con salmuera y secó sobre a2S04. La capá orgánica se concentró in vacuo para dar 3-nitropicólinaldehído : . 1ti RMN (.400 MHz, DMSO-d6) d 7.931-7.963 (m, 1H) , 8.556 (d, J=8.0 ??,??), 9.034-9.046 (m,lH), 10.147 (s, 1H) ; CL-EM (EST) m/z 153.2 [M+H]+. 3-Aminopicolinaldehido A una solución de 3-nitropicolinaldehido (500 mg, 3.28 mmol) en EtOH (10 mL) se' agregó Pd/C (50 mg) bajo atmósfera de nitrógeno. La mezcla de. reacción se agitó durante la noche bajo atmósfera de hidrógeno. La mezcla de reacción se filtró a través de cilite y lavó con EtOH. El filtrado se concentró in vacuo para dar 3-aminopicolinaldehído (200 mg, 50% de rendimiento): XH RMN (.400 MHz, DMSO-d6) d 7.132 (br s, 2H), 7.217-7.325 (m,. 2H) , 7.979 (dd, J=1.6 Hz, J=4.0 Hz, 1H) , 9.899 (s,lH); CL-EM (ESI) m/z 123.0 [M+H]+. 2- (2- (metilsulfonil) fenil) -1 , 5-naf iridin-3-carboxilato de metilo Una mezcla de 3-aminopicolinaldehído (1.09 g, 8.97 mmol), 3- ( 2- (metilsulfonil ) fenil ) -3-oxopropanoato de metilo (2.3 g, 8.97 mmol) y heptahidrato de cloruro de cerio (587 mg, 1.79 mmol) se calentó hasta 100°C durante 3 h. El residuo se disolvió en MeOH y purificó por cromatografía de columna en alúmina neutra usando EtOAc al 0-50%en hexano para dar 2- ( 2- (metilsulfonil ) fenil ) -1 , 5-naftiridin-3-carboxilato de metilo (800 mg, 26% de rendimiento): XH RMN (400 MHz, DMSO-de) d 3.155 (s, 3H) , 3.688 (s, 3H) , 7.486-7.507 (m,lH), 7.733-7.816 (m, 2H) , 7.951-7.982 (m, 1H) , 8.059-8.081 (m, 1H), 8.510 (d, J=8.4 Hz, 1H), 8.965 (s, 1H) , 9.165-9.178 (m, 1H) ; CL-EM (ESI) m/z 342.9 [M+H]+. (2- (2- (Metilsulfonil) fenil) -1, 5-naftiridin-3-il)metanol A una solución de 2- ( 2- (metilsulfonil ) fenil ) -1 , 5-naftiridin-3-carboxilato de metilo (1.2 g, 3.5 mmol) en DCM (30 mL) se agregó DIBAL-H (35 mL, 35 mmol) a -78°C. La mezcla de reacción se agitó durante 4 h a la misma temperatura. La mezcla de reacción se apagó con solución satd de cloruro de amonio y extrajo con EtOAc. La capa orgánica se concentró in vacuo para dar metil (2- (2-(metilsulfonil ) fenil) -1, 5-naftiridin-3-il ) metanol : CL-EM (ESI) m/z 315.0. [M+H] + . Se llevó a cabo en crudo para la siguiente etapa. 2- (2- (Métilsulfonil) fenil) -1 , 5-naftiridin-3-carbaldehido A una solución de crudo de metilo (2- (2-(metilsulfonil) fenil) -1, 5-naftiridin-3-il ) metanol (lg, 3.18 mmol) en DCM (10 mL) se agregó dicromato de piridinio (2.4 g, 6.36 mmol) a 25°C. La mezcla de reacción se agitó durante la noche a la misma temperatura. La mezcla de reacción se filtró a través de Celite™. El filtrado se concentró in vacuo para dar 2- (2- (métilsulfonil) fenil) -1, 5-naftiridin-3-carbaldehido: CL-EM (ESI) m/z 313.0 [M+H]+. Se llevó a cabo en crudo para la siguiente etapa. 1- (2- (2- (Métilsulfonil) fenil) -1 , 5-naftiridin-3-il) etanol A una solución de crudo de 2- (2- (métilsulfonil ) fenil ) -1, 5-naftiridin-3-cárbaldehido (1.0 g, 3.2 mmol) en THF (25 mL) se agregó bromuro de metil magnesio (3.2 mL, 9.6 mmol) a 0°C. La mezcla de reacción se agitó durante 2 h a la misma temperatura. La mezcla de reacción se apagó con solución satd de cloruro de amonio y extrajo con EtOAc. La capa orgánica se secó sobre Na2S0,j y concentró in vacuo para dar 1- (2 - (2- (met'ilsulfonil) fenil) -1, 5-naftiridin-3-il ) etanol : CL-EM (ESI) m/z 329.0 [M+H] + . Se llevó a cabo en crudo para la siguiente etapa. 2- (1- (2- (2- (Metilsulfonil) fenil) -1 , 5-naf iridin-3- il) etil) isoindolin-1 , 3-diona A una mezcla de crudo de 1- (2- (2- (metilsulfonil) fenil) - 1, 5-naftiridin-3-il) etanol (700 mg, 2.13 mmol) y ftalimida (627 mg, 4.26 mmol) en THF (21 mL) se agregó trifenilfosfeno (1.12 g, 4.26 mmol) a 0°C. La mezcla de reacción se agitó durante 10 min a · la misma temperatura. Se agregó azodicarboxilato de diisopropilo (0.9 mL, 4.26 mmol) a la mezcla a 0°C. La mezcla de reacción se agitó durante la noche a 0°C. Se agregó agua a la mezcla de reacción y extrajo con EtOAc. La capa orgánica se secó sobre Na2S04 y concentró in vacuo para dar 2- ( 1- ( 2- ( 2- (metilsulfonil ) fenil ) -1 , 5-naftiridin-3-il ) etil ) isoindolin-1 , 3-diona : CL-EM (ESI) m/z 458.1 [M+H] + . Se llevó a cabo en crudo para la siguiente etapa. 1- (2- (2- (Metilsulfonil) fenil) -1 ,5-naftiridin-3-il) etanamina A una solución de crudo de 2-(l-(2-(2-(metilsulfonil) fenil) -1, 5^naftiridin-3-il ) etil) isoindolin-1, 3-diona (2g, 4.37 mmol). en etanol (70 mL) se agregó hidrato de hidracina (1.5 mL, 28.43 mmol) a 25°C. La mezcla de reacción se agitó durante la noche a 25°C. La mezcla de reacción se hizo ácida por ácido clorhídrico 5 N. Se agregó agua al residuo y extrajo con EtOAc. La capa ac. se hizo básica con solución NaOH ac. y extrajo con EtOAc. La capa orgánica se secó sobre Na2S04 y concentró in vacuo para dar 1-(2- (2- (metilsulfonil ) fenil) -1, 5-naftiridin-3-il ) etanamina: CL-EM (ESI) m/z 328.0 [M+H]+. Se llevó a cabo en crudo para la siguiente etapa. 4-Amino-6- ( (1- (2- (2- (metilsulfonil) fenil) -1 , 5-naftiridin-3-il) etil) amino) -5-pirimidincarbonitrilo A una mezcla de 1- (2- (2- (metilsulfonil) fenil) -1, 5-naftiridin-3-il) etanamina cruda (600 mg, 1.83 mmol) y 4-amino-6-cloropirimidin-5-carbonitrilo (283 mg, 1.83 mmol) en n-butanol (11 mL) se agregó base Hunig (709 mg, 5.49 mmol) a 25°C. La mezcla de reacción se agitó durante la noche a 110°C. Se agregó agua a la mezcla de reacción y extrajo con EtOAc. La capa orgánica se secó sobre a2S04 y concentró in vacuo. El residuo se purificó por cromatografía de columna en alúmina neutra usando MeOH al 0-5% en DCM. Se purificó además por HPLC de fase inversa para dar 4-amino-6- ( ( 1- (2- (2-(metilsulfonil) fenil) -1, -naftiridin-3-il ) etil) amino) -5-pirimidincarbonitrilo: xti RMN (DMSO-d6, 400 MHz) d 1.387 (d, J=6.8 Hz, 3H) , 5.250-5.322 (m, 1H) , 7.246 (br s, 2H) , 7.735- 7.843 (m, 3H) , 7.911-7.940 (m, ' 3H) , 8.110-8.129- (m,. 1H) , 8.395 (d, J=4.4Hz, 1H) , 8.622 (s, 1H) , 9.028-9.074 (m, 1H) ; CL-EM (ESI) m/z 446.0 [M+H]+. 4-Amino-6- ( ( (1S) -1- (2- (2- (metilsulfonil) fenil) naf iridin-3-il) etil) amino) -5-pirimidincarbonitrilo y 4-amino-6- ( ( (IR) -1- (2- (2- (metilsulfonil) fenil) -1 , 5-naftiridin-3-il) etil) amino) -5-pirimidincarbonitrilo La mezcla racémica (0.108 g) se separó usando SFC: Fracción 1: 4-amino-6- ((( 1S) -1- (2- (2- (metilsulfonil ) fenil ) -1, 5-naftiridin-3-il ) etil) amino) -5-pirimidincarbonitrilo como un sólido amarillo: XH RMN (400 MHz, DMSO-d6) d ppm 9.03 (1 H, dd, J=4.2, 1.7 Hz), 8.62 (1 H, s) , 8.35 - 8.43 (1 H, m) , 8.12 (1 H, dd, J=7.8, 1.4 Hz), 7.89 - 7.97 (3.H, m) , 7.69 - 7.86 (3 H, m) , 7.24 (2 H, br. s.), 5.28 (1 H, quin, J=7.1 Hz), 1.39 (3 H, d, J=7.0 Hz) ; CL-EM (ESI) m/z 446.0 [M+H]+.

Fracción 2: 4 -amino-6- ((( IR) -1- (2- (2- (metilsulfonil ) fenil ) -1, 5-naftiridin-3-il ) etil) amino) -5-pirimidincarbonitrilo como un sólido amarillo: H RMN (400 MHz, DMSO-d6) d ppm 9.03 (1 H, dd, J=4.2, 1.7 Hz), 8.62 (1 H, s), 8.39 (1 H, dt, J=8.5, 0.8 Hz), 8.12 (1 H, dd, J=7.7, 1.5 Hz), 7.89 - 7.96 (3 H, m) , 7.69 - 7.84 (3 H, m) , 7.25 (2 H, br. s.), 5.29 (1. H, quin, J=7.1 Hz), 1.39 (3 H, d, J=6.8 Hz) ; ' CL-EM (ESI) m/z 446.0 [M+H]+.

Ejemplo 9 3-oxo-4-fenilbutan-2-ilcarbamato de (S) -tert-butilo Una solución de 1- (metoxi (metil ) araino) -l-oxopropan-2-ilcarbamato de ( S ) -tert-butilo (1.16 g, 5 mmol) en THF (10 mL) se enfrió hasta -15°C y cargó lentamente con cloruro de isopropilmagnesio (2.0M, 2.37 mL, 0.95 eq) . Después de que se obtuvo una solución clara, se agregó cloruro de bencilmagnesio (1.0M, 4.99 mL, 1.0 eq) gota a gota con agitación a ta durante la noche. La mezcla de reacción se apagó con solución NH4C1 y extrajo con EtOAc (10 mL x2) . Las capas orgánicas combinadas se lavaron con agua, salmuera, secaron sobre sulfato de sodio antes de filtrarse, concentraron para dar un sólido blanco como 3-oxo-4-fenil-butan-2-ilcarbamato de ( S ) -tert-butilo . Espectro de masa (ESI) m/e = 264 (M + 1) . 3-OXO-4- (piridin-2-il)butan-2-ilcarbamato de (S) -tert-butilo Se enfrió 1- (metoxi (metil) amino) -l-oxopropan-2-ilcarbamato de tert-butilo (50.0 g, 215 mmol) en THF (450 mL) hasta -40°C (hielo seco/acetonitrilo) y cargó lentamente con cloruro de isopropilmagnesio (2.0M, 102.2 mL, 0.95 eq) . Después de que se obtuvo una solución clara (se volvió clara a -20°C y lechosa de nuevo a -40°C), se agregó solución bromo (piridin-2-ilmetil ) magnesio (ver enseguida para preparación) gota a gota usando cánula antes de entibiarse a ta durante la noche. La mezcla de reacción se apagó con solución NH4C.I y extrajo con EtOAc (500 mLx2). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con agua, salmuera, secaron sobre sodio sulfate, y concentraron bajo alto vacio para dar 3-???-4- (piridin-2-il ) butan-2-ilcarbamato de (S ) -tert-butilo como un aceite marrón. La reacción a escala pequeña se purificó por combiflash (EtOAc/hexano, hasta 1/3) para dar un aceite rojo. ass Spectrum (ESI) m/e = 265 (M + 1) .

Bromo (piridin-2-ilmetil)magnesio A una solución de picolina (.31.9 mL, 1.5 eq) en THF (300 mL) se agregó eLi (202 mL, 1.6 M, 1.5 eq) gota a gota a -40°C bajo nitrógeno. ¦ La mezcla de reacción se permitió calentar hasta -20°C y agitó durante 10 min. y luego se enfrió hasta -40°C y bromuro de magnesio (59.4 g, 1.5 eq) se agregó en tres partes. La mezcla de reacción se permitió calentar hasta ta, agitó durante 30 min para proporcionar bromo (piridin-2-ilmetil ) magnesio . 2- (3- (tert-butoxicarbonilamino)piridin-2-il) -2-oxoacetato etilo Una solución de 2-bromopiridin-3-ilcarbamato de tert-butilo (3.85 g, 14. mmol) (preparada a partir del procedimiento usado por Kowol etc, J. Med. Chem.-, 2009, 52, 5032-5043) en, THF seco (20 mL) se enfrió has.ta -78°C y se trató gota a gota con n-butilitio (11.2 mL dé solución 2.5M en hexano, 2.0 eq) de manera que la temperatura nunca excede -65°C, y la mezcla resultante se. agitó a -78 °C durante una hora adicional. Después de la adición gota . a gota de oxalato de dietilo (4 mL, 29 mmol, 2.1 eq) , la mezcla de reacción se permitió calentar hasta 0°C, mantuvo ahí durante 1 h, y luego se apagó por la adición de NH4C1 (40 mL) . La mezcla resultante se extrajo con acetato de etilo (3 x 20 mL) . Las capas orgánicas combinadas se lavaron con agua (3 x 20 mL) y salmuera -(20 mL) . Después del secado, filtración, y evaporación, el residuo se purificó por cromatografía de columna en gel de sílice con diclorometano como eluyente para proporcionar 2- (3- (tert-butoxi-carbonilamino) piridin-2-il) -2-oxoacetato de etilo como un sólido blanco. Espectro de masa (ESI) m/e = 295 (M + 1) . Ácido 2- (1- (tert-butoxicarbonilamino) etil) -3-fenil-l , 5-naftiridin-4-carboxilico Una mezcla de 3-oxo-4-fenilbutan-2-ilcarbamato de (S)-tert-butilo (249 mg, 0.95 mmol), 2-oxo-2-(2-pivalamidopiridin-3-il) acetato de etilo (278 mg, 1.0 eq) y KOH (212 mg, 4.0 eq) en EtOH (1-5 mL) se calentó hasta 88°C durante la noche. Después, de enfriar hasta ta, la mezcla se hizo ácida hasta pH 3 usando HC1 3M. El sólido resultante se filtró, lavó con agua y secó en el aire para dar un sólido amarillo. Espectro de masa (ESI) m/e = 394 (M + 1) . Ácido 2- (1- (tert-Butoxicarbonilamino) etil) -3- (piridin-2-il) -1 ,5-naf iridin-4-carboxilico Una mezcla de 3-oxo-4- (piridin-2-il) butan-2-ilcarbamato de (S) -tert-butilo (40 mg, 1.5 mmol), 2-oxo-2-(2-pivalamidopiridin-3-il) acetato de etilo (450 mg, 1.0. eq) y KOH (343 mg, 4.0 eq) en EtOH (15 mL) se calentó hasta 88°C durante la noche. Después de enfriarse hasta ta, la mezcla se concentró bajo presión reducida, disolvió en agua (10 mL) y extrajo con DCM (2 x 5mL) . La capa acuosa se hizo ácida con HCl 3M hasta pH 2 y secó por congelado para dar un polvo amarillo, que se extrajo con MeOH al 20%' en DCM (30 mL) . Los extractos se combinaron y concentraron para dar una espuma amarilla como el ácido crudo. Espectro de masa (ESI) m/e = 395 (M + 1) . 1- (4- (metilcarbamoil) -3-fenil-l , 5-naftiridin-2-il) etilcarbama o de tert-butilo A una solución de ácido 2-(l-(tert-butoxicarbonilamino) etil) -3-fenil-l, 5-naftiridin-4-carboxílico (205 mg, 0.52 mmol.) en DMF (5 mL) se agregó pybop (407 mg, 1.5 mmol), metanamina (0.52 mL, 2.0 eq) y N-etil-N-isopropilpropan-2-amina (0.18 mL, 2.0 eq) . La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante la noche. La mezcla se dividió entre agua (10 mL) y EtOAc (15 mL) . La capa de agua se extrajo con EtOAc (5 mLx2) . Los orgánicos combinados se lavaron con agua (10 mLx2), NaOH 0.5 N (5mLx2) , agua (5 mL x2), salmuera (5 mL) y secaron sobre sulfato de sodio. La eliminación de solventes sigue con cromatografía de columna en gel de sílice (EtOAc/hexano, hasta 2/1) para dar un sólido blanco. Espectro de masa (ESI) m/e = 407 (M + 1) . 1- (4- (metilcarbamoil) -3- (piridin-2-il) -1 , 5-naftiridin-2-il) etilcarbamato de tert-butilo Se preparó 1- (4- (metilcarbamoil) -3- (piridin-2-il) -1, 5-naftiridin-2-il ) etilcarbamato de tert-butilo en la manera similar como el experimento de arriba. Espectro de masa. (ESI) m/e = 408 (M + 1) . 2- (1- (6-Amino-5-cianopirimidin-4-ilamino) etil) -N-metil-3- enil-1 , 5-naftiridin-4-carboxamida A 1- (4- (metilcarbamoil) -3-fenil-l, 5-naftiridin-2-il ) etilcarbamato de tert-butilo (110 mg, 0.27 mmol) se agregó HC1 4N en 1,4-dioxano (1 mL, 15 eq) . La mezcla resultante se agitó a ta durante 30 min. La mezcla de reacción se diluyó con éter de etilo (5 mL) . El sólido blanco se filtró y lavó con éter de etilo y secó bajo vacio. Espectro de masa (ESI) m/e = 307 (M + 1 ) . A una solución de la sal de HC1 de amina en DMF (3 mL) se agregó 4-amino-6-cloropirimidin-5-carbonitrilo (41.8 mg, 1.0 eq) y DIEA (0.19 mL, 4.0 eq) . La mezcla resultante se calentó hasta 105°C durante 2'h. Después de enfriar hasta ta, se agregó EtOAc (10 mL) y la mezcla se lavó con agua (3 x 3 mL) , salmuera y secó sobre sulfato de sodio. . El solvente se removió y el residuo se purificó por combiflash (1:20, MeOH/DCM) para proporcionar 2- ( 1- ( 6-amino-5-cianopirimidin-4-ilaminc) etil) -N-metil-3-fenil-1 , 5-naft iridin-4-carboxamida. Después de separación HPLC quiral (gradiente de isopropanol/hexano, columna AD) , ( S ) -2- ( 1- ( 6-amino-5-cianopirimidin-4-ilamino) etil) -N-metil-3-fenil^-l, 5-naftiridin-4-carboxamida y (R) -2- ( 1- ( 6-amino-5-cianopirimidin- -i lamino) etil ) -N-metil-3-fenil-1 , 5-naftiridin-4-carboxamida se obtuvieron como sólido blanco.

(S) -2- (1- ( 6-Amino--5-cianopirimidin-4-ilamino) etil) -N-metil-3-fenil-1 , 5-naftiridin-4-carboxamida 1H-RMN (500 Hz, CD3OD) d ppm 1.41 (3H, d, J=5.0 Hz), 2.70 (3H, s), 5.55 (1H, m) , 7.45-7.56 (5H, m) , 7.85 (1H, dd, J=10, 5.0 Hz), 7.95 (1H, s), 8.54 (1H, d, J=10 Hz), 9.0 (1H, d, J=5.0 Hz) . Espectro de masa (ESI) m/e = 425 (M + 1).

(R) -2- ( 1- ( 6-amino-5-cianopirimidin-4-ilamino) etil) -N-metil-3-fenil-1, 5-naftiridin-4-carboxamida 1H-R N (500 Hz, CD3OD) d ppm 1.41 (3H, d, J=5.0 Hz), 2.70 (3H, s), 5.55 (1H, m) , 7.45-7.56 (5H, m) , 7.85 (1H, dd, J=10, 5.0 Hz), 7.95 (1H, s), 8.54 (1H, d, J=10 Hz), 9.0 (1H, d, J=5.0 Hz) . Espectro de masa (ESI) m/e = 425 (M + 1).

Ejemplo 10 2- ( 1- ( 6-Amino-5-cianopirimidin-4-ilamino) etil) -N-metil-3- (piridin-2-il) -1, 5-naftiridin-4-carboxamida Se preparó 2- ( 1- ( 6-Amino-5-cianopirimidin-4 - ilamino) etil) -N-metil-3- (piridin-2-il) -1, 5-naftiridin-4- carboxamida en la manera similar como el experimento de arriba. Espectro de masa (ESI) m/e = 426 (M + 1).

(S) -2- (1- ( 6-Amino-5-cianopirimidin-4-ilamino) etil) -N-metil-3- (piridin-2-il ) -1, 5-naftiridin-4-carboxamida ^-RM (500 Hz, CD3OD) d ppm 1.48 (3H, d, J=5.0 Hz), 2.74 (3H, s), 5.60 (1H, m) , 7.51 (1H, dd, J=10, 5.0 Hz) , 7.68 (1H, d, J=10 Hz), 7.88 (1H, dd, J=10, 5.0 Hz), 7.92 (1H, s), 7.98 (1H, t, J=5.0 Hz),8.57 (1H, d, J=10 Hz), 8.73 (1H, d, J=5.0 Hz), 9.0 (1H, d, J=5.0 Hz) . Espectro de masa (ESI ) m/e = 426 (M + 1) .

(R) -2- ( 1- ( 6-amino-5-cianopirimidin-4-ilamino) etil) -N-metil-3- (piridin-2-il ) -1, 5-naftiridin-4 -carboxamida J=5.0 Hz), 2.74 (3H, s), 5.60 (1H, m) , 7.51 (1H, dd, J=10, 5.0 Hz), 7.68 (1H, d, J=10 Hz), 7.88 (1H, dd, J=10, 5.0 Hz), 7.92 (1H, s), 7.98 (1H, t, J=5.0 Hz),8.57 (1H, d, J=10 Hz) , 8.73 (1H, d, J=5.0 Hz) , 9.0 (1H, d, J=5.0 Hz) . Espectro de masa (ESI) m/e = 426 (M + 1).

Ensayos biológicos Expresión recombinante de PI3Ks Las subunidades pllO de longitud completa de PI3k , ß y d, etiquetadas con terminal N con etiqueta polyHis, se coexpresaron con p85 con vectores de expresión de virus Báculo en células de insecto sf9. Los heterodimeros P110/p85 se purificaron por Ni-NTA secuencial, Q-HP, cromatografía Superdex-100. Las isozimas a, ß y d purificadas se almacenaron a -20°C en Tris 20mM, pH 8, NaCl 0.2M, glicerol al 50%, DTT 5mM, colato de Na · 2mM. El ??3?? truncado, residuos 114-1102, etiquetados con terminal N con etiqueta polyHis, se expresó con virus Báculo en células de insecto Hi5. La isozima ? se purificó por cromatografía Ni-NTA, Superdex-200 , Q-HP . secuencial. La isozima ? se almacenó congelada a -80°C en NaH2P04, pH 8, NaCl 0.2 , etilen glicol al 1%, ß-mercaptoetanol 2m .

Ensayos de enzima in vitro.

Los ensayos . se realizaron en 25 pL con las concentraciones finales de arriba de componentes en placas de polipropileno blancas (Costar 3355) . El fosfoaceptor de fosfatidil inositol, Ptdlns ( 4 , 5 ) P2 P4508, fue de Echelon Biosciences. La actividad ATPase de las isozimas alfa y gamma no se estimuló mucho por Ptdlns ( 4 , 5 ) P2 bajo estas condiciones y por lo tanto se omitió del ensayo de estas isozimas. Los compuestos de · prueba se disolvieron en sulfóxido de dimetilo y .diluyeron con diluciones en serie tres veces. El compuesto en DMSO (1 L) se agregó por pozo de prueba, y la inhibición relativa a reacciones que no contiene compuesto, con y sin enzima se determinó. Después de la incubación del ensayo a ta, la reacción se detuvo y el ATP residual se determinó por adición de un volumen igual de un kit de bioluminiscencia ATP comercial (Perkin Elmer EasyLite) de acuerdo a las instrucciones del fabricante, y detectó usando un luminómetro AnalystGT.

Proliferación de Células B Humanas estimulada por anti-IgM Células B humanas aisladas : Se aislan PBMCs de Leukopac o de sangre fresca humana. Se aislan células B humanas al usar protocolo Miltenyi y kit II de . aislamiento de . célula B. Se purificaron células B humanas al usar AutoMacs . column .

Activación de células B humanas Se usa placa de fondo planto de 96 pozos, la placa 50000/pozo purifica células B en medio de proliferación de célula B (DMEM + FCS al 5%, Hepes. 10 mM, 50 µ? 2-mercapto-etanol); 150 yL de medio contiene 250 ng/mL de proteina recombinante CD40L-LZ (Amgen) y 2 yg/mL de anticuerpo IgM anti-humano (Jackson ImmunoReseach Lab. #109-006-129) , se mezcla con 50 L de medio de célula B que contiene inhibidores PI3K y se incuba 72 h a 37 °C en la incubadora. Después de 72h, se pulsan células B etiquetadas con 0.5-1 uCi/pozo H timidina durante la noche -18 h, y se cosecha la célula usando cosechador TOM .

Proliferación de Células B Humanas estimulada por IL-4 Células B humanas aisladas: Se aislan PBMCs humanos de Leukopac o de sangre fresca humana. Se aislan células B humanas usando protocolo Miltenyi- kit de aislamiento de célula B. Las células B humanas se purificaron por AutoMacs . column.

Activación de células B humanas Se usa placa de . fondo plano de 96 pozos, la placa 50000/pozo purifica células B en medio de proliferación de célula B (DMEM + FCS al 5%, 50 µ? de 2-mercaptoetanol , Hepes lOmM) . El medio . (150 µ?,) contiene 250 ng/mL de proteina recombinante CD40L-LZ (Amgen) y 10 ng/mL de IL-4 (R&D system # 204-IL-025) , se mezcla con 50 150. yL de medio de célula B que contiene compuestos e incuba 72 h a 37 °C en la incubadora. Después de 72 h,- se pulsan células B etiquetadas con 0.5-1 uCi/pozo H timidina durante la noche -18 h, y se cosecha la célula usando cosechador TOM.

Antigeno T especifico (toxoide de Tétanos) inducido por ensayos de proliferación PBMC humano Los PBMC humanos se prepararon de soluciones madre congeladas o se purifican de sangre humana fresca usando un gradiente Ficoll. Se usan placa de fondo redondo de 96 pozos y placa 2xl05 PBMC/pozo con medio de cultivo (RPMI1640 + FCS al 10%, 50uM 2-Mercaptoetanol , Hepes 10 mM) . Para determinaciones IC50, los inhibidores PI3K se probaron desde 10 µ? hasta 0.001 µ?, en la mitad de los incrementos log y en triplicado. Se agregó toxoide de tétanos, antigeno especifico de célula T (University of Massachusetts Lab) a 1 pg/mL e incubó 6 días a 37 °C en la incubadora. Los sobrenadantes se recolectan después de 6 días durante ensayo IL2 ELISA, luego las células se pulsan con 3H-timidina durante ~18 h para medir la proliferación.

Ensayos GFP para detectar inhibición de PI3K clase la y clase III AKT1 (PKBa) se regula por PI3K Clase la activado por factores mitogénicos' (IGF-1, PDGF, insulina, trombina, NGF, etc.). En respuesta a estimulo mitogénico, AKT1 se transubica del citosol al Forkhead de membrana de plasma (FKHRL1) es un sustrato para AKT1. Es citoplásmico cuando se fosforila por AKT (sobrevivencia/crecimiento) . La inhibición de AKT (estasis/apoptosis) - transubicación forkhead a los dominios FYVE del núcleo enlaza a PI(3)P. La mayoría se genera por acción constitutiva de PI3K Clase III.

Ensayo para alterar la membrana AKT (células CHO-IR-AKTl-EGFP/GE Healthcare) Lavar células con solución, amortiguadora de ensayo. Tratar con compuestos en solución amortiguadora de ensayo 1 h. Agregar 10 ng/mL de insulina. Fijar después de 10 min a temperatura ambiente y formar en imagen.

Ensayo de transubicación Forkhead (células GFP Forkhead-Diversa MOA MB468) Tratar células con compuesto en medio de crecimiento 1 h. Fijar y formar en imagen.

Ensayo PI(3)P Clase III (células U20S EGFP-2XFYVE/GE Healthcare) Lavar células con solución amortiguadora de ensayo. Tratar con compuestos en la solución amortiguadora de ensayo 1 h. Fijar y formar en imagen.

Control para los 3 ensayos es Wort anina lOuM: AKT es citoplásmico Forkhead es nuclear PI(3)P eliminado de endosomas Ensayo biomarcador : Estimulación del receptor de célula B de expresión CD69 o B7.2 (CD86) La sangre completa huma.na heparinizada se estimuló con 10 pg/mL de anti-IgD (Southern Biotech, #9030-01). 90 pL de la sangre estimulada luego se colocó en alícuota por pozo de una placa de 96 pozos y trató con 10 pL de varias concentraciones de compuesto de bloqueo (desde 10-0.0003 µ?) diluido en IMDM + FBS al 10% (Gibco) . Las muestras se incubaron juntas durante 4 h (para expresión CD69) hasta 6 h (para expresión B7.2) a 37 °C. La sangre tratada (50 pL) se transfirió a una placa de pozo profundo de 96 pozos (Nunc) para tinción de anticuerpo con 10 pL cada uno de CD45-PerCP (BD Biosciences, #347464), CD19-FITC (BD Biosciences, #340719), y CD69-PE (BD Biosciences, #341652). Los segundos 50 pL de la sangre tratada se transfirió a una segunda placa de pozo profundo de 96 pozos para tinción de anticuerpo con 10 pL cada uno de CD19-FITC (BD Biosciences, #340719) y CD86-PeCy5 (BD Biosciences, #555666) . Todas las tinciones se realizaron durante 15-30 min en la oscuridad a ta. La sangre luego se lisó y fijó usando 450 pL de solución de lisis FACS (BD Biosciences, #349202) durante 15 min a ta. Las muestras luego se lavaron 2X en PBS + FBS al 2% antes del análisis FACS. Las muestras se separaron en ya sea células positivas dobles CD45/CD19 para tinción CD69, o células positivas CD19 para tinción CD86.

Contraselección Gamma: Estimulación de monoci os humanos para expresión fosfo-AKT Una linea celular de monocito humana, THP-1, se mantuvo en RP I + FBS al 10% (Gibco) . Un día antes de la estimulación, las células se contaron usando exclusión de azul de tripano en un hemocitómetro y suspendieron en una concentración de 1 x 106¦ células por mL de medio. 100 µ?, de células más medio (1 x 105 células) luego se colocó en alícuota por pozo de 4-96-pozo, platos de pozo profundo (Nunc) para probar ocho diferentes compuestos. Las células se reposaron durante la noche antes del tratamiento con varias concentraciones (desde 10-0.0003µ?) del compuesto de bloqueo. El compuesto diluido en medio (12 ]i ) se agregó a las células durante 10 min a 37 °C. El MCP-1 humano (12 \i , R&D Diagnostics, #279-MC) se diluyó en medio- y agregó a cada pozo en una concentración final, de 50 ng/mL. La estimulación se prolongó durante 2 min a ta. La solución amortiguadora FACS Phosflow Lyse/Fix . precalentada (1 mL de 37°C) (BD Biosciences, #558049) se agregó a cada pozo. Las placas luego se incubaron a 37°C durante unos 10-15 min adicionales.

Las placas se giraron en 1500' rpm durante 10 min, el sobrenadante se aspiró completamente, y 1 mL de MEOH al 90% enfriado con hielo se agregó a cada pozo con agitación vigorosa. Las placas · luego se incubaron ya sea durante la noche a -70°C o en hielo durante 30 min antes de la tinción del anticuerpo. Las placas se giraron y lavaron 2X en PBS + FBS al 2% (Gibco) . ¦ El lavado se aspiró y las células se suspendieron en solución amortiguadora restante. pAKT de conejo (50 µ?,, Señalización Celular, #4058L) en 1:10.0, se agregó a cada muestra durante 1 h a ta con agitación. Las células se lavaron y giraron en 1500 rpm durante 10 min. El sobrenadante se aspiró y las células se suspendieron en solución amortiguadora restante. El anticuerpo secundario, Alexa 647 anti-conejo -de cabra (50 µL, Invitrogen, #A21245) en 1:500, se agregó durante 30 min a ta con agitación. Las células luego se lavaron IX en solución amortiguadora y suspendieron en 150 yL de solución amortiguadora para análisis FACS. Las células necesitan dispersarse muy bien por pipeteo antes de correrlas en el citómetro de flujo. Las células se corrieron en un LSR II (Becton Dickinson) y separaron en dispersión lateral y delantera para determinar niveles de expresión de pAKT en la población de monocito.

Contraselección gamma: Estimulación de monocitos para expresión fosfo-AKT en médula ósea de ratón Los fémures de ratón se disecaron de cinco ratones BALB/c hembra (Charles River Labs.) y recolectaron en RPMI + medio FBS al 10% (Gibco) . La médula ósea de ratón se removió al cortar los extremos del fémur y al mojar con 1 mL de medio usando una jeringa de calibre 25. La médula ósea luego se dispersó en medio usando una aguja de calibre 21. El volumen del medio se incrementó hasta 20 mL y las células se contaron usando exclusión de azul de tripano en un hemocitómetro . La suspensión celular luego se incrementó hasta 7.5 x 106 células por 1 mL de medio y 100 pL (7.5 x 105 células) se puso en alícuota por pozo en platos de pozo profundo de 4-96 pozos (Nunc) para probar ocho diferentes compuestos. Las células se reposaron a 37°C durante 2 h antes del tratamiento con varias concentraciones (desde 10-0.0003µ?) de compuesto de bloqueo. El compuesto diluido en el medio (12 \ ) se agregó a las células de la médula ósea durante 10 min a 37°C. El CP-1 de ratón (12 \iL, R&D Diagnostics, #479-JE) se diluyó en medio y agregó a cada pozo en una concentración final de 50 ng/mL. La estimulación se prolonga durante 2 min a ta. 1 mL de solución amortiguadora FACS Phosflow Lyse/Fix pre-calentada a 37°C (BD Biosciences, #558049) se agregó a cada pozo. Las placas luego se incubaron a 37°C durante unos 10-15 min adicionales. Las placas se giraron en 1500 rpm durante 10 min. El sobrenadante se aspiró completamente y 1 mL de EOH al 90% enfriado con hielo sé agregó a cada pozo con agitación vigorosa. Las placas luego se incubaron ya sea durante la noche a -70°C'o en hielo durante 30 min antes de la tinción del anticuerpo. Las. placas se giraron y lavaron 2X en PBS + FBS al 2% (Gibco) . El lavado se aspiró y las células se suspendieron en solución amortiguadora restante. El bloqueo Fe (2 pL, BD Pharmingen, #553140) luego se agregó por pozo durante 10 min a ta. Después del bloqueo, 50 pL de anticuerpos primarios diluidos en solución amortiguadora; CDllb-Alexa488 (BD Biosciences, #557672) en 1:50, CD64-PE (BD Biosciences, #558455) en 1:50, y pAKT de conejo (Cell Signaling, #4058L) en 1:100, se agregaron a cada muestra durante 1 h a ta con agitación. La solución amortiguadora de lavado se agregó a células y giró en 1500 rpm durante 10 min. El sobrenadante se aspiró y las células se suspendieron en solución amortiguadora restante. El anticuerpo secundario; Alexa 647 anti-conejo de cabra (50 pL, Invitrogen, #A21245) en 1:500, se agregó durante -30 min a ta con agitación. Las células luego se lavaron IX en solución amortiguadora y suspendieron en 100 pL de solución amortiguadora para análisis FACS. Las células se corrieron en un LSR II (Becton Dickinson) y seccionaron en células positivas dobles CDllb/CD64 para determinar los niveles de expresión de pAKT en la población de monocito.

Ensayo pAKT in vivo El vehículo y compuestos se administran p.o. (0.2 mL) al dar (Oral Gavage Needles Popper & Sons, New Hyde Park, NY) a ratones (3751 de línea transgénica, hembra, 10-12 semana Amgen Inc, Thousand Oaks, CA) 15 min antes de la inyección i.v (0.2 mLs) de FITC anti-Ig (50 ug/ratón) (Jackson Immuno Research, West Grove, PA) . Después de 45 min los ratones se sacrifican dentro de una cámara C02. La sangre se retira por medio de punción cardiaca (0.3 mL) (jeringas Ice de 25 g, Sherwood, St . Louis, MO) y transfiere en un vial cónico de 15 mL (Nalge/Nunc International, Dinamarca) . La sangre se fija inmediatamente con 6.0 mL de solución amortiguadora BD Phosflow Lyse/Fix (BD Bioscience, San José, CA) , invierte 3X's y colocó en baño de agua a 37°C. La mitad del bazo se remueve y transfiere a1 un tubo eppendorf que contiene 0.5 mL de PBS ( Invitrog.en¦ Corp, Grand Island, NY) . El bazo se aplasta usando un molinillo de tejido (Pellet Pestle, Kimble/Kontes , Vineland, NJ) y fija inmediatamente con 6.0 mL de solución amortiguadora BD Phosflow Lyse/Fix, invierte 3X y coloca en baño de agua a 37°C. Una vez que los tejidos se han recolectado el ratón se disloca cervicalmente y es carcasa para eliminarse. Después de 15 min, los viales cónicos de 15 mL se remueven del baño de agua a 37 °C y colocan en hielo hasta que los tejidos además se procesan. Los bazos aplastados se filtran a través de un colador de célula 70 µp? (BD Bioscience, Bedford, ??) en otro vial cónico de 15 mL y lavan con 9 mL de PBS. Los esplenocitos y sangre se giran @ 2,000 rpms durante 10 min (frío) y la solución amortiguadora se aspira. Las células se volvieron a suspender en -2.0 mL de alcohol metílico al 90% frío (-20°C) (Mallinckrodt Chemicals, Phillipsburg, NJ) .. MeOH se agrega lentamente mientras que el vial cónico se coloca en vórtice rápidamente. Los tejidos luego se almacenan a -20°C hasta que las células pueden teñirse para análisis FACS .

Inmunización TNP de dosis múltiple La sangre se recolectó por sangrados del ojo retro-orbital de ratones hembra BALB/c de 7-8 semanas de edad (Charles River Labs.) en el día 0 antes de la inmunización. La sangre se permitió coagular durante 30 min y giró a 10,000 rpm en tubos microcontenedores de suero (Becton Dickinson) durante 10 min. Los sueros se recolectaron, colocaron en alícuotas en tubos' Matrix (Matrix Tech. Corp.) y almacenaron a -70°C hasta que se realizó el ELISA. Los ratones se les dieron oralmente el compuesto antes de la inmunización y en periodos de tiempo posteriores con base en la vida de la molécula. Los ratones luego se inmunizaron con ya sea 50 g de TNP-LPS (Biosearch Tech., #T-5065) , 50 ]ig de TNP-Ficoll (Biosearch Tech., #F-1300), o 100 ]iq de TNP-KLH (Biosearch Tech., #T-5060) más alum al 1% (Brenntag, #3501) en PBS . La solución de TNP-KLH más alum se preparó al invertir suavemente la mezcla 3-5 veces cada 10 min durante 1 h antes de la inmunización. En el día 5, después del último tratamiento, los ratones se sacrificaron con C02 y punción cardiaca. La sangre se permitió coagular durante 30 min y giró a 10, 000 rpm en tubos microcontenedores de suero durante 10 min. Los sueros se recolectaron, colocaron en alícuota en tubos Matrix, y almacenaron a -70°C hasta que se realizó el análisis adicional. Los niveles IgGl, IgG2a, IgG3 e IgM específicos de TNP en el suero luego se midieron por medio de ELISA. TNP-BSA (Biosearch Tech., #T-5050) se usó para capturar los anticuerpos específicos TNP. TNP-BSA (10 yg/mL) se usó para recubrir placas ELISA de 384 pozos (Corning Costar) durante la noche. Las placas luego se lavaron y bloquearon durante 1 h usando solución de Bloqueo' ELISA BSA al 10% (KPL) . Después del bloqueo, las placas ELISA se lavaron y muestras/estándares de suero se diluyeron en serie y permitieron para enlazar a las placas durante 1 h. Las placas se lavaron y los anticuerpos secundarios conjugados Ig-HRP (IgGl de anti-ratón de cabra, Southern Biotech #1070-05, IgG2a anti-ratón de cabra, Southern Biotech #1080-05, IgM anti-ratón de cabra, Southern Biotech #1020-05, IgG3 antiratón de cabra, Southern Biotech #1100-05) se diluyeron en 1:5000 e incubaron en las placas durante 1 h. Se usó solución de peroxidasa de TMB (SureBlue Reserve TMB de KPL) para visualizar los anticuerpos. Las placas se lavaron y las muestras se permitieron desarrollar en la solución TMB aproximadamente 5-20 min dependiendo del Ig analizado. La reacción se detuvo con ácido sulfúrico 2M y las placas se leyeron en un OD de 450 nm.

Para el tratamiento de enfermedades mediadas por PI3K5, tales como artritis reumatoide, espondilitis anquilosante, osteoartritis , artritis psoriática, psoriasis, enfermedades inflamatorias, y enfermedades autoinmunitarias , los compuestos de la presente invención puede administrarse oralmente, parentalmente, por rocío por inhalación, rectalmente, o tópicamente en formulaciones de dosificación unitaria que contienen portadores,- adyuvantes, y vehículos farmacéuticamente aceptables convencionales. El término parenteral como se usa en la presente incluye, subcutánea, intravenosa, intramuscular, intrasternal , técnicas de infusión o intraperitonealmente .

El tratamiento de enfermedades y trastornos en la presente se pretende también para incluir la administración profiláctica de un compuesto de la invención, una sal farmacéutica del mismo, o una composición farmacéutica de cualquier sujeto (esto es, un animal, preferiblemente un mamífero, lo más preferiblemente un humano) considerado que necesita de tratamiento preventivo, tal como, por ejemplo, artritis reumatoide, espondilitis anquilosante, osteoartritis , artritis psoriática, psoriasis, enfermedades inflamatorias, y enfermedades autoinmunitarias y similares.

El régimen de dosificación para tratar enfermedades mediadas por PI3K6, cáncer, e/o hiperglicemia con los compuestos de esta invención y/o composiciones de esta invención se basa en una variedad de factores, incluyendo el tipo de enfermedad, la' edad, peso, sexo, afección médica del paciente, la severidad de la afección, la ruta de administración, y el compuesto particular empleado. De esta manera, el régimen de dosificación puede variar ampliamente, pero puede determinarse de forma rutinaria usando métodos estándares. Los niveles de dosificación del orden desde alrededor de 0.01 mg hasta 30 mg por kilogramo de peso corporal por día, preferiblemente desde alrededor de 0.1 mg hasta 10 mg/kg, más preferiblemente desde alrededor de 0.25 mg hasta 1 mg/kg son útiles para todos los métodos de uso descritos en la presente.

Los compuestos farmacéuticamente activos de esta invención pueden procesarse de acuerdo con métodos convencionales de farmacia para producir agentes medicinales para administración a pacientes, incluyendo humanos y otros mamíferos.

Para administración oral, la composición farmacéutica puede estar en la. forma de, por ejemplo, una cápsula, un comprimido, una suspensión, o líquido. La composición farmacéutica preferiblemente se hace en la forma de una dosificación unitaria que contiene una cantidad dada del ingrediente activo. Por .ejemplo, estas pueden contener una cantidad de ingrediente activo desde alrededor de 1 hasta 2000 mg, preferiblemente desde alrededor de 1 hasta 500 mg, más preferiblemente desde alrededor de 5 hasta 150 mg. Una dosis diaria adecuada para un humano u otro mamífero puede variar ampliamente dependiendo de la afección del paciente y otros factores, pero, una vez de nuevo, puede determinarse usando métodos de rutina.

El ingrediente activo también puede administrarse por inyección como una composición con portadores adecuados incluyendo solución salina, dextrosa, o . agua. El régimen de dosificación parenteral diario será desde alrededor de 0.1 hasta alrededor de 30 mg/kg de peso corporal total, preferiblemente desde alrededor de 0.1 hasta alrededor de 10 mg/kg, y más preferiblemente desde alrededor de 0.25 mg hasta 1 mg/kg.

Las preparaciones inyectables, tales como suspensiones oleaginosas o ac . inyectables estériles, pueden formularse de acuerdo a lo conocido se usan agentes de suspensión y agentes de humectación o dispersión, adecuados. La preparación inyectable estéril también puede ser una solución o suspensión inyectable estéril en un solvente o diluyente parenteralmente aceptable no tóxico, por ejemplo como una solución en 1, 3-butandiol . .Entre los vehículos y solventes aceptables que pueden emplearse son agua, solución de Ringer, y solución de cloruro de sodio isotónico. Además, los aceites fijos, estériles se emplean convencionalmente como un solvente o medio de suspensión. Para este propósito cualquier aceite fijo blando puede emplearse, incluyendo mono o diglicéridos sintéticos. Además, los ácidos grasos tales como ácido oieico encuentran uso en la preparación de inyectables.

Los supositorios para administración rectal del fármaco pueden prepararse al mezcla .el fármaco con un excipiente no irritante adecuado tal como manteca de cacao y polietilen glicoles que son sólidos a temperaturas ordinarias pero líquidos a la temperatura rectal y y por lo tanto se fundirán en el recto y liberarán el fármaco.

Una dosis tópica adecuada de ingrediente activo de un compuesto de la invención es 0.1 mg hasta 150 mg administrada una hasta cuatro, preferiblemente una o dos veces al día. Paara administración tópica, el ingrediente activo puede comprender desde 0.001% hasta 10% p/p, por ejemplo, desde 1% hasta 2% en peso de la formulación, aunque puede comprender tanto como 10% p/p, pero preferiblemente no más de 5% p/p, y más preferiblemente desde 0.1% hasta 1% de la formulación.

Las formulaciones adecuadas para administración tópica incluyen preparaciones liquidas o semi-líquidas adecuadas para penetración a través de la piel (por ejemplo, linimentos, lociones, ungüentos, cremas, o pastas) y gotas adecuadas para administración al ojo, oído, o nariz.

Para administración, los compuestos de esta invención se combinan ordinariamente con uno o más adyuvantes apropiados por la ruta indicada de administración. Los compuestos pueden mezclarse con lactosa, sacarosa, polvo de almidón, ésteres de celulosa de ácido alcanoico, ácido esteárico, talco, estearato de magnesio, óxido de magnesio, sodio y sales de calcio de ácidos fosfórico y sulfúrico, acacia, gelatina, alginat.o de sodio, polivinil-pirrolidina, y/o alcohol de polivinilico, y comprimido o encapsulado para administración convencional. Alternativamente, los compuestos de esta invención pueden disolverse e solución salina, agua, polietilen glicol, propilen glicol, etanol, aceite de maíz, aceite de cacahuate, aceite de semilla de algodón, aceite de ajonjolí, goma de tragacanto, y/o varias soluciones amortiguadoras. Otros adyuvantes y modos de administración son bien conocidos en la técnica farmacéutica. El portador o diluyente puede incluir material para retardar el tiempo, tal como monoestearato de glicerilo o diestearato de glicerilo solo o con. una cera, u otros materiales bien conocidos en la técnica.

La composición farmacéutica puede hacerse en una forma sólida (incluyendo gránulos, polvos o supositorios) o en una forma líquida (por ejemplo, soluciones, suspensiones, o emulsiones) . Las composiciones farmacéuticas pueden someterse a operaciones farmacéuticas convencionales tales como esterilización y/o pueden contener adyuvantes convencionales, tales . como conservadores, estabilizadores, agentes humectantes, emulsificadores, soluciones amortiguadoras etc.

Las formas de dosificación sólidas para administración oral pueden incluir cápsulas, comprimidos, pildoras, polvos, y gránulos. En tales formas de dosificación sólida, el compuesto activo puede mezclarse con al menos un diluyente inerte tal como sacarosa, lactosa, o almidón. Tales formas de dosificación también pueden comprender, como en la práctica normal, sustancias adicionales diferentes de diluyentes inertes, por ejemplo, agentes lubricantes tales como estearato de magnesio. En el caso de cápsulas, comprimidos, y pildoras, las formas de dosificación también pueden comprender agentes amortiguantes. Los comprimidos y pildoras adicionalmente pueden prepararse con recubrimientos entéricos.

Las formas de dosificación liquidas para administración oral pueden incluir emulsiones farmacéuticamente aceptables, soluciones, suspensiones, jarabes, y elixires que contienen diluyentes inertes comúnmente usados en la técnica, tales como agua. Tales composiciones también pueden comprender adyuvantes, tales como agentes humectantes, edulcorantes, saborizantes, y de perfume.

Los compuestos de la presente invención pueden poseer uno o más átomos de carbono asimétricos y de esta manera son capaces de existir en la forma de isómeros ópticos así como en la forma de mezclas · racémicas o no racémicas de los mismos. Los isómeros ópticos pueden obtenerse por resolución de las mezclas racémicas de acuerdo a procesos ¦ convencionales, por ejemplo, por formación de sales diaestereoisoméricas , por tratamiento con un ácido o base ópticamente activo. Los ejemplos de ácidos apropiados son ácido tartárico, diacetiltartárico, dibenzoiltartárico, ditoluoiltartárico, y ácido canforsulfónico y luego separación de la mezcla de diaestereoisómeros por cristalización seguido por liberación de las bases ópticamente activas de estas sales. Un proceso diferente para separación de isómeros ópticos involucra el uso de una columna de cromatografía quiral óptimamente elegida para maximizar la separación de los enantiómeros . Todavía otro método disponible involucra síntesis de moléculas diaestereoisómericas covalentes al hacer reaccionar compuestos de la invención con un ácido ópticamente puro en una forma activa o un isocianato ópticamente puro. Los diaestereoisómeros sintetizados pueden separarse por medios concencionales tales como cromatografía, destilación, cristalización o sublimación, y luego hidrolizarse para suministrar el compuesto enantioméricamente puro. Los compuestos ópticamente activos de la invención pueden igualmente obtenerse al usar materiales de partida activos. Estos isómeros pueden estar en la- forma de un ácido libre, una base libre, un éster o una sal.

De la misma manera,, los compuestos de esta invención pueden existir como isómeros, que son compuestos de la misma fórmula molecular pero en la cual los átomos, uno con respecto al otro, se configuran diferentemente. En particular, los sustituyentes alquileno de los compuestos de esta invención, normalmente y preferiblemente se configuran e insertan en las moléculas como se indica en las definiciones para cada uno de estos grupos, que se len de izquierda a derecha. Sin embargo, en ciertos casos, alguien experimentado en la técnica apreciará que es posible preparar compuestos de esta invención en los ucales estos sustituyentes están inversos en orientación con relación a los otros átomos en la molécula. Esto es, el sustituyente a insertarse puede ser el mismo como aquel señalado arriba excepto que se inserta en la molécula en la orientación inversa. Alguien experimentado en la técnica apreciará que estas formas isoméricas de los compuestos de esta invención son para construirse como se abarca dentro del alcance de la presente invención.

Los compuestos de la presente invención pueden usarse en la forma de sales derivadas de ácidos orgánicos o inorgánicos. Las ' sales incluyen, pero no se limitan a, las siguientes: acetato, adipato, alginato, citrato, aspartato, benzoato, bencensulfonato, bisulfato, butirato, canforato, canforsulfonato, digluconato, ciclopentanpropionato, dodecilsulfato, etansulfonato, glucoheptanoato, glicerofosfato, hemisulfato, heptanoato, hexanoato, fumarato, clorhidrato, bromhidrato, yodhidrato, 2-hidroxietansulfonato, lactato, maleato, metansulfonato, nicotinato, 2-naftalensulfonato, oxalato, palmoato, pectinato, persulfato, 2-fenilpropionato, picrato, pivalato, propionato, succinato, tartrato, tiocianato, tosilato, mesilato, y undecanoato. También, los grupos que contienen nitrógeno básicos pueden cuaternizarse con tales agentes como haluros de alquilo inferior, tales como cloruro, bromuros y yoduros de metilo, etilo, propilo, y de butilo; sulfatos de dialquilo tipo sulfatos de dimetilo, dietilo, dibutilo, y diamilo, haluros de cadena larga tales como cloruros, bromuros y yoduros de decilo, laurilo, miristilo y estearilo, haluros de aralquilo tipo bromuros de bencilo y fenetilo, y otros. Agua o productos dispersables o solubles en aceite por ello se obtienen.

Los ejemplos de ácidos que pueden emplearse para sales de adición ácida farmacéuticamente aceptables incluyen tales ácidos inorgánicos como ácido clorhídrico, ácido sulfúrico y ácido fosfórico y tales óacidos orgánicos como ácido oxálico, ácido maleico, ácido succínico y ácido cítrico. Otros ejemplos incluyen sales, con metales alcalinos o metales alcalinotérreos , tales como sodio, potasio, calcio o magnesio o con bases orgánicas.

También abarcados en el alcance de la presente invención están los ésteres farmacéuticamente aceptables de un ácido carboxílico o hidroxilo que contiene el grupo, incluyendo un éster metabólicamente inestable o una forma de profármaco de un compuesto de esta invención. Un éster metabólicamente inestable es uno que puede producir, por ejemplo, un incremento en niveles sanguíneos y prolongar la eficacia de la forma no esterificada correspondiente del compuesto. Una forma de profármaco es una que no está en una forma activa de la molécula ya que se administra pero que se vuelva terapéuticamente activa después de alguna actividad in vivo o biotransformación, tal como metabolismo, por ejemplo, desdoblamiento enzimático o hidrolítico. Para una discusión general de profármacos que involucran ésteres ver Svensson y Tunek Drug Metabolism Reviews¦ 165 (1988) y Bundgaard Design of Prodrugs, Elsevier (1985) . Los ejemplos de un anión de carboxilato enmascarado incluyen una variedad de ésteres, tal como alquilo (por ejemplo, metilo, etilo), cicloalquilo (por ejemplo, ciclohexilo) , aralqquilo (por ejemplo, bencilo, p-metoxibencilo) , y alquilcarboniloxialquilo (por ejemplo, pivaloiloximetilo) . Las aminas se han enmascarado como derivados sustituidos. de arilcarboniloximetilo que se desdoblan por esterasas in vivo que se liberan del fármaco libre y formaldehído (Bungaard J. Med. Chem. 2503 (1989)). También, los fármacos qué contienen un grupo NH ácido, tal como imidazol, imida, indol y similares, se han enmascarado con grupos N-aciloximetilo (Bundgaard Design of . Prodrugs, Elsevier (1985)). Los grupos hidroxi se han enmascarado como ásteres y éteres. EP 039,051 (Sloan y Little, 4/11/81) describe profármacos de ácido hidroxámico de base Mannich, su preparación y uso. Los ésteres de un compuesto de esta invención, pueden incluir, por ejemplo, los ésteres de metilo, etilo, propilo, y butilo, asi como otros ésteres adecuados formados entre una porción ácida y un hidroxilo que contiene la porción. Los ésteres metabólicamente volubles, pueden incluir, por' ejemplo, metoximetilo, etoximetilo, iso-propoximetilo, a-metoxietilo, grupos tales como a- (alquiloxi (Ci-C4) ) etilo, por ejemplo, metoxietilo, etoxietilo, propoxietilo, iso-propoxietilo, etc.; grupos 2-oxo-l,3-dioxolen-4-i lmetilo, tales como 5-metil-2-oxo-l, 3, dioxolen-4-ilmetilo, etc.; grupos alquiltiometilo Ci-C3, por ejemplo, metiltiometilo, etiltiometilo, isopropiltiometilo, etc.; grupos aciloximetilo, ' por ejemplo, pivaloiloximetilo, a-acetoximetilo, etc.; etoxicarbonil-1-metil.o; o grupos metilo oí-aciloxi-a-sustituido, por ejemplo a-acetoxietilo .

Además, los compuestos de la invención pueden existir como sólidos cristalinos que pueden cristalizarse de solventes comunes tales como etanol, N, -dimetil-formamida, agua, o similares. De esta manera, . las formas cristalinas de los compuestos de la invención pueden existir como polimorfos, solvatos e/o hidratos de los compuestos precursores o sus sales farmacéuticamente aceptables. Todas de tales formas de manera similar son para construirse ya que caen dentro del alcance de la invención.

Aunque los compuestos de la invención pueden administrarse como el agente farmacéutico activo único, también pueden usarse en combinación con uno o más compuestos de la invención u otros agentes. Cuando se administran como una combinación,, los agentes terapéuticos pueden formularse como composiciones separadas que se dan al mismo tiempo o tiempo diferente, o los agente terapéuticos pueden darse como una composición sencilla.

Lo anterios es meramente ilustrativo de la invención y no se pretende limitar la ' invención para los compuestos descritos. Las variaciones y cambios que son obvios para agluien experimentado en la técnica se pretenden para estar dentro del alcance y- naturaleza de la invención que se definen en las reivindicaciones anexas.

De la descripción anterior, alguien experimentado en la técnica puede fácilmente establecer las características esenciales de esta invención, y sin alejarse del espíritu y alcance de la misma, pueden hacer varios cambios y modificaciones de la invención para adaptarse a varios usos y condiciones.

Claims (4)

NOVEDAD DE LA INVENCION Habiendo descrito la presente invención, se considera como novedad, y por lo tanto se reclama como propiedad lo contenido en las siguientes: REIVINDICACIONES

1. Un compuesto caracterizado porque tiene la estructura: o cualquier sal farmacéuticamente aceptable de los mismos, en donde: X1 es C(R10) o N; Y es N (R8) , O, o S; n es O, 1, 2 o 3 ; R1 es un anillo biciclico de 8 , 9, 10 u 11 miembros o monociclico de 5, 6 o 7 miembros saturado, parcialmente saturado o no saturado ligado a alq Ci_4, ligado a alq C1-2, ligado a alq C1-2O o ligado a O, de enlace directo que contiene 0, 1, 2, 3 o 4 átomos seleccionados de N, O y S, pero que contiene no más de un átomo 0, o S, sustituido por O, 1, 2 o 3 sustituyentes independientemente seleccionados de halo, alq Ci-6, haloalq Ci_4-, ciano, nitro, -C(=0)Ra, -C(=0)ORa, -C(=0)NRaRa, -C (=NRa) NRaRa, -0Ra, -OC(=0)Ra, -0C (=0) NRaRa, -0C(=0)N(Ra)S(=0)2Ra, -Oalq C2-6NRaRa, -Oalq C2-6ORa, -SRa, -S(=0)Ra, -S(=0)2Ra, -S (=0)2NRaRa, -S (=0) 2N (Ra) C (=0) Ra, -S(=0)2N(Ra)C(=0)0Ra, -S(=0)2N(Ra)C(=0)NRaRa, -NRaRa, -N (Ra) C (=0) Ra, , -N (Ra) C (=0) ORa, -N ( Ra) C ( =0) NRaRa , -N (Ra) C (=NRa) NRRa, -N (Ra) S (=0) 2Ra, -N (Ra) S (=0) 2NRaRa, -NRaalq C2-6NRaRa y -NRaalq C2-6ORa, en donde los átomos de carbono disponibles del anillo están adicionalmente sustituidos por 0, 1 o 2 grupos oxo o tioxo; R2 se selecciona de- H, halo, alq Ci-6, haloalq C1-4, ciano, nitro, 0Ra, NRaRa, -C(=0)Ra, -C(=0)0Ra, -C(=0)NRaRa, -C (=NRa) NRaRa, -S(=0)Ra, -S(=0)2Ra, -S (=0) 2NRaRa, -S (=0) 2N (Ra) C (=0) Ra, -S(=0)2N(Ra)C(=0)0Ra, -S (=0) 2N (Ra) C (=0) NRaRa; . R3 se selecciona de H, halo, nitro, ciano, alq C1-4, alq C1-4, haloalq Ci_ , NHalq C1-4, N(alq Ci-4)alq C1-4 o haloalq C1-4; R4 es, independientemente, cada que se presenta, halo, nitro, ciano, alq C1-4, Oalq C1-4, haloalq C1-4, NHalq C1-4, N(alq Ci-4)alq C1-4, haloalq C1-4 o anillo monociclico. de 5, 6 0 7 miembros no saturado que contiene 0, 1, 2, 3 o 4 átomos seleccionados de N, 0 y S, pero que contiene no más de un 0, o S, sustituido por 0, 1, 2 o 3 sustituyentes seleccionados de halo, alq Ci_4, haloalq Ci-¿, -Oalq Ci_4, -NH2, -NHalq i-ir -N (alq C1-4) alq Ci_ ; R5 es, independientemente, cada que se presenta, H, halo, alq Ci_6, haloalq Ci-4, o alq Ci_6 sustituido por 1, 2 o 3 sustituyentes seleccionados de halo, ciano, OH, Oalq Ci-4/ alq C1-4, haloalq C1-3, Oalq Ci-4, NH2, NHalq Ci_4, N(alq Ci-4)alq Ci-4; o ambos grupos R5 juntos forman un espiroalq C3-6 sustituido por 0, 1, 2 o 3 sustituyentes seleccionados de halo, ciano, OH, Oalq C1-4, alq C1-4, haloalq C1-3, Oalq Ci_4, NH2, NHalq Ci_4, N (alq Ci_4) alq Ci-4; . R6 es H, halo, NHR9 u OH; R7 se selecciona de H, halo, haloalq Ci_4, ciano, nitro, -C(=0)Ra, -C(=0)ORa, -C(=0)NRaRa, -C (=NRa) NRaRa, -ORa, -OC(=0)Ra, -OC (=0) NRaRa, -OC (=0) N (Ra) S (=0) 2Ra, -Oalq C2-6NRaRa, -Oalq C2-6ORa, -SRa, -S(=0)Ra, -S(=0)2Ra, -S (=0) 2NRaRa, -S (=0) 2N (Ra) C (=0) Ra, -S (=0) 2N (Ra) C (=0) ORa, -S (=0) 2N (Ra) C (=0) NRaRa, -NRaRa, -N (Ra) C (=0) Ra, -N (Ra) C (=0) 0Ra, -N (Ra) C (=0) NRaRa, -N (Ra) C (=NRa) NRaRa, -N (Ra) S (=0) 2Ra, -N (Ra) S (=0) 2NRaRa, -NRaalq C2-6NRaRa, -NRaalq C2_60Ra y alq CT.-6, en donde el alq C1-6 está sustituido por 0, 1 2 o 3 sustituyentes seleccionados de halo, haloalq Ci_4, ciano, nitro, -C(=0)Ra, -C(=0)0Ra, -C(=0)NRaRa, -C (=NRa) NRaRa, -0Ra, -0C(=0)Ra, -0C(=0)NRaRa, -OC (=0) N (Ra) S (=0) 2Ra, -Oalq C2-6NRaRa, -Oalq C2-6ORa, -SRa, -S(=0)Ra, -S (=0)2Ra, -S (=0) 2NRaRa, -S (=0) 2N (Ra) C (=0) Ra, -S (=0)2N (Ra) C (=0) 0Ra, -S (=0) 2N (Ra) C (=0) NRaRa, -NRaRa, -N (Ra) C (=0) Ra, -N (Ra) C (=0) 0Ra, -N ( Ra ) C ( =0) NRaRa, -N(Ra)C(=NRa)NRaRa, -N (Ra) S (=0) 2Ra, -N (Ra) S (=0) 2NRaRa, -NRaalq C2-6NRaRa y -NRaalq C2-6ORa, y el alq Ci_6 está adicionalmente sustituido por 0 o 1 anillo monociclico de 5, .5 o 7 meimbros saturado, parcialmente saturado o no saturado que contiene 0, 1, 2, 3 o 4 átomos seleccionados de N, 0 y S, pero que contiene no más de un 0, o 3, en donde, los átomos' de carbono disponibles del anillo están sustituidos por 0, 1 o 2 grupos oxo o tioxo, en donde el anillo está sustituido por 0, 1, 2 o 3 sustituyentes independientemente seleccionados de halo, nitro, ciano, alq Ci-4, Oalq Ci-4, Ohaloalq Ci_4/ NHalq Ci-4, N(alq Ci-4)alq Ci-, y haloalq Ci-4; o R7 y R8 juntos forman un puente -C=N- en donde el átomo de carbono está sustituido por H, halo, ciano, o un anillo monociclico. de 5, 6 o 7 miembros saturado, parcialmente saturado o no saturado que contiene 0, 1, 2, 3 o 4 átomos seleccionados de N, 0 y S, pero que contiene no más de un 0, o S, en donde los átomos de carbono disponibles del anillo están sustituidos por 0, i o 2 grupos oxo o tioxo, en donde el anillo está sustituido por 0, 1, 2, 3 o 4 sustituyentes seleccionados de halo, alq Ci-6, haloalq C1-4, ciano, nitro, -C(-0)Ra; -C(OI0Ra, -C(=0)NRaRa, -C (=NRa) NRaRa, -0Ra, -0C(-0)Ra, -0C (=0) NRaRa, -0C (=0) N (Ra) S (=0) 2Ra, -Oalq C2-6NRaRa, -Oalq C2-6ORa, -SRa, -S(=0)Ra, -S(=0)2Ra, -S (=0) 2NRaRa, -S (-0) 2N (Ra) C (=0) Ra, -S (=0)2N(Ra)C(=0)ORa, -S (=0) 2N (Ra) C (=0) NRaRa, -NRaRa, -N (Ra) C (=0) Ra, -N (Ra) C (=0) 0Ra, -N (Ra) C (=0) NRaRa, "-N (Ra) C (=NRa) NRaRa, -N (Ra) S (=0) 2Ra, -N (Ra) S (=0) 2NRaRa, -NRaalq¦ C2-6NRaRa y -NRaalq C2-6ORa; o R7 y R9 juntos forman un puente -N=C- en donde el átomo de carbono está sustituido por H, halo, alq Ci_6, haloalq Ci-4, ciano, nitro, 0Ra, ' NRaRa, -C(=0)Ra, -C(=0)0Ra, -C(=0)NRaRa, -C (=NR ) NRaRa, -S(=0)Ra, -S(=0)2Ra, -S (=0) 2NRaRa; R8 es H o alq CX-6; R9 es H, alq Ci-6 o haloalq Ci-4; R10 es H, halo, alq C1-3, haloalq C1-3 o ciano; R11 se selecciona de H, halo, alq C1-6, haloalq Ci-<¡, ciano, nitro, -C(=0)Ra, -C(=0)0Ra, -C(=0)NRaRa, -C (=NRa) NRaRa, -0Ra, -OC(=0)Ra, -0C (=0) NRaRa, -OC ( =0 ) N ( Ra ) S ( =0 ) 2Ra , -Oalq C2-6NRaRa, -Oalq C2-6ORa, -SRa, -S(=0)Ra, -S(=0)2Rb, -S (=0) 2NRaRa, -S(=0)2N(Ra)C(=0)Ra, -S (=0)2N (Ra)C (=0)0Ra, -S (=0) 2N (Ra) C (=0) NRaRa, -NRaRa, -N (Ra) C (=0) Ra, -N (Ra) C (=0) 0Ra, -N ( Ra ) C ( =0 ) NRaRa , -N ( Ra ) C ( =NRa ) NRaRa , -N (Ra) S (=0) 2Ra, -N (Ra) S (=0) 2NRaRa, -NRaalq C2-6NRaRa, -NRaalq C2-60Ra, -NRaalq C2-6S02Rb, -CH2C(=0)Ra, -CH2C (=0) 0Ra, -CH2C (=0) NRaRa, -CH2C (=NRa) NRaRa, -CH20Ra, -CH20C (=0) Ra, -CH20C (=0) NRaRa, -CH20C (=0)N (Ra) S (=0) 2Ra, -CH20alq C2.6NRaRa, -CH20alq C2-6ORa, -CH2SRa, -CH2S(=0)Ra, -CH2S (=0) 2Rb, -CH2S (=0) 2NRaRa, -CH2S (=0) 2N (Ra) C (=0) Ra, -CH2S (=0) 2N (Ra) C (=0) 0Ra, -CH2S(=0)2N(Ra)C(=0)NRaRa, -CH2NRaRa, -CH2N (Ra) C (=0) Ra, -CH2N (Ra) C (=0) 0Ra, -CH2N (Ra) C (=0) NRaRa, -CH2N (Ra) C (=NRa) NRaRa, -CH2N(Ra)S(=0)2Ra,. -CH2N (Ra) S (=0) 2NRaRa, -CH2NRaC2-6alqNRaRa, -CH2NRaalq C2_6ORa, -CH2RC, -C(=0)Rc- y -C (=0) N (Ra) Rc; Ra es independientemente, cada que se presenta, H o Rb; Rb es independientemente, cada que se presenta, fenilo, bencilo o alq Ci- 6 , el fenilo, bencilo y alq Ci_ 6 que está sustituido por 0, 1, 2 o 3 sustituyentes seleccionados de halo, alq Ci-4, haloalq _Ci-3, -OH, -Oalq Ci_4, -NH2, -NHalq Ci_4, -N(alq Ci-4)alq Ci_4; y Rc es un anillo de 4, 5 o 6 miembros saturado o parcialmente saturado que contiene 1, 2 o 3 heteroátomos seleccionados de N, 0 y S, el anillo que está sustituido por 0, 1, 2 o 3 sustituyentes seleccionados de halo, alq Ci_4, haloalq Ci-3, -Oalq Ci_4, -NH2, -NHalq Ci_ , -N(alq Ci-4)alq Ci_4.

2. Un método para tratar artritis reumatoide, espondilitis anquilosante, osteoartritis, artritis psoriática, psoriasis, enfermedades inflamatorias y enfermedades autoinmunitarias, trastornos inflamatorios del intestino, trastornos inflamatorios del ojo, trastornos de la vejiga inestables o inflamatorios, dolencias de la piel con componentes inflamatorios, afecciones inflamatorias crónicas, enfermedades autoinmunitarias, lupus eritematoso sistémico (SLE) , miastenia gravis, artritis reumatoide, encefalomielitis . diseminada aguda, púrpura trombocitopénica idiopática, esclérosis múltiple, síndrome de Sjoegren y anemia hemol tica autoinmunitaria, afecciones alérgicas e hipersensibilidad, . caracterizado porque comprende la etapa de administrar un compuesto de conformidad con la reivindicación 1.

3. Un método para tratar cánceres, que están mediados, dependen de o se asocian con actividad ????d, caracterizado porque comprende la etapa de administrar un compuesto de conformidad con la reivindicación 1.

4. Una composición farmacéutica caracterizada porque comprende un compuesto de conformidad con la reivindicación 1 y un portador o diluyente farmacéuticamente aceptable.