کلونینگ و توالی یابی پلاسمید کد کننده پروتئین گرانولی متراکم ۱۴ سویه RH توکسوپلاسما گوندیی
Publish Year: 1393
نوع سند: مقاله ژورنالی
زبان: Persian
View: 116
This Paper With 9 Page And PDF Format Ready To Download
- Certificate
- من نویسنده این مقاله هستم
استخراج به نرم افزارهای پژوهشی:
شناسه ملی سند علمی:
JR_JMUMS-24-112_005
تاریخ نمایه سازی: 2 آبان 1402
Abstract:
سابقه و هدف: بیماری توکسوپلاسموز از بیماری های شایع در جهان می باشد که حدود یک سوم مردم دارای آنتی بادی بر علیه توکسوپلاسما هستند. این بیماری بیشتر به دلیل عوارض وخیم آن، در موارد مادرزادی و نیز بیماران نقص سیستم ایمنی اهمیت دارد. ژن کد کننده پروتئین ۱۴GRA می تواند به عنوان یک هدف مناسب جهت ساخت DNA (Deoxyribonucleic acid) واکسن و همچنین طراحی کیت تشخیصی مورد ارزیابی قرار گیرد. هدف از این بررسی، شناسایی و کلون کردن ژن کد کننده پروتئین ۱۴GRA سویه RH توکسوپلاسما گوندیی بود.
مواد و روش ها: در مرحله اول پس از جداسازی تاکی زوئیت های توکسوپلاسما از مایع صفاقی موش آلوده، DNA آن استخراج شد و پس از انجام PCR (Polymerase chain reaction)، محصول تکثیر شده بر روی ژل الکتروفورز بررسی گردید. سپس ژن حاصل در وکتور pTG۱۹-T کلون گردید. جهت تایید از روش های Colony-PCR و هضم آنزیمی به وسیله آنزیم های محدود کننده HindIII و EcoRI استفاده شد. در نهایت ژن ۱۴GRA کلون شده در وکتور pTG۱۹-T مورد تعیین توالی قرار گرفت.
یافته ها: بررسی واکنش PCR بر روی ژل الکتروفورز و همچنین تعیین توالی ژن کد کننده پروتئین ۱۴GRA نشان داد که این ژن ۱۲۲۷ جفت بازی با ژن ۱۴GRA سویه RH ثبت شده در ژن بانک تشابه کامل داشت. علاوه بر این، با استفاده از روش های هضم آنزیمی و Colony PCR کلون شدن، ژن ۱۴GRA در پلاسمید pTG۱۹-T مورد تایید قرار گرفت.
استنتاج: ژن ۱۴GRA به طور موفقیت آمیزی در پلاسمید pTG۱۹-T کلون شد و این پلاسمید می تواند برای مطالعات بعدی جهت ساخت واکسن DNA و طراحی کیت تشخیصی مورد استفاده قرار گیرد.
Keywords:
Authors
احسان احمدپور
علوم پزشکی مازندران
شهاب الدین سروی
علوم پزشکی مازندران
احمد دریانی
علوم پزشکی مازندران
مهدی شریف
علوم پزشکی مازندران
محمد باقر هاشمی
علوم پزشکی مازندران
آزاده میزانی
علوم پزشکی مازندران
کیان رضایی
علوم پزشکی مازندران
مراجع و منابع این Paper:
لیست زیر مراجع و منابع استفاده شده در این Paper را نمایش می دهد. این مراجع به صورت کاملا ماشینی و بر اساس هوش مصنوعی استخراج شده اند و لذا ممکن است دارای اشکالاتی باشند که به مرور زمان دقت استخراج این محتوا افزایش می یابد. مراجعی که مقالات مربوط به آنها در سیویلیکا نمایه شده و پیدا شده اند، به خود Paper لینک شده اند :