PT2178504E

PT2178504E - Solução oftálmica à base de prostaglandinas sem conservante

Info

Publication number: PT2178504E
Application number: PT08826597T
Authority: PT
Inventors: Frederic Pilotaz; Fabrice Mercier; Henri Chibret
Original assignee: Thea Lab
Priority date: 2007-07-20
Filing date: 2008-07-17
Publication date: 2011-01-31
Also published as: WO2009013435A3; WO2009013435A2; DE602008004356D1; ES2355018T3; PL2178504T3; US8772337B2; EP2178504B1; EP2178504A2; FR2918891A1; FR2918891B1; ATE493970T1; US20100210720A1

Description

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DESCRIÇÃO

SOLUÇÃO OFTÁLMICA À BASE DE PROSTAGLANDINAS SEM CONSERVANTE A invenção tem por objecto um colírio ou solução oftálmica que compreende, como princípio activo, pelo menos prostaglandina, sendo a referida solução exemplo de agente conservante de tipo antimicrobiano, em particular do tipo amónio quaternário (por exemplo cloreto de benzalcónio (BAK)).

No desenrolar da descrição, por "agente conservante de tipo antimicrobiano ou antimicrobiano" designa-se um agente conservante que apresenta propriedades antimicrobianas, ou seja, um composto capaz de garantir a protecção da solução oftálmica perante uma eventual contaminação microbiana. Um tal agente na acepção da invenção distingue-se dos agentes conservantes que actuam sobre a conservação química da solução, tais como, por exemplo, agentes antioxidantes como a EDTA.

As prostaglandinas são princípios activos bem conhecidos que são administrados a seres humanos ou a animais por via tópica sob a forma de colírio para o tratamento do glaucoma. A posologia habitual destas fórmulas é de 1 gota por dia nos dois olhos, sabendo-se que as prostaglandinas podem ser utilizadas igualmente em associação com um segundo agente antiglaucomatoso, tal como, por exemplo, beta-bloqueador, inibidor da anidrase carbónica ou ainda um agonista alfa-adrenérgico. 1 ΕΡ2178504Β1

As prostaglandinas apresentam um primeiro inconveniente que é o de não serem solúveis em água, de modo que a sua colocação em solução no seio do colírio passa necessariamente por uma etapa prévia de solubilização. Além disso, um outro inconveniente para o formulador reside no facto de propor uma solução oftálmica que seja quimicamente estável no tempo, na prática num período compreendido entre 18 e 24 meses. Uma outra característica exigida da solução oftálmica é ser estável no que se refere à embalagem na qual é armazenada, em particular no que toca às embalagens em material plástico do tipo polietileno básico densidade (PEBD) .

Actualmente a maioria das soluções oftálmicas à base de prostaglandinas no mercado contêm um agente conservante que, além das suas propriedades antimicrobianas, assegura igualmente a solubilização do princípio activo e em parte a sua estabilização. Trata-se, por exemplo, do produto comercializado sob a marca Xalatan® pela sociedade PFIZER que associa Latanoprost e BAK até 0,02% em peso. Deve notar-se que, apesar da presença de BAK, este colírio não é estável à temperatura ambiente e deve ser armazenado a frio, a uma temperatura da ordem dos 5°C. A sociedade ALLERGAN comercializa, além disso, um colírio sob a marca Lumigan® que associa Bimatoprost e BAK até 0,005% em peso.

No entanto, numerosas publicações desaconselham o uso de conservantes de tipo antimicrobiano, em particular o BAK, em oftalmologia no âmbito de tratamentos de longo prazo, como é o caso, designadamente do glaucoma por problemas de tolerância (ver neste sentido The New Class of Ophthalmic Agents: "Here's how to choose the right prostaglandin for 2 ΕΡ2178504Β1 the each patient" by J. JAMES THIMONS, O.D., F.A.A.O. -Optometric management, publicada em Maio de 2002. Por conseguinte, estabelece-se doravante que os agentes conservantes de tipo antimicrobiano mostram ser tóxicos num uso de longo prazo, de modo que se tende hoje a limitar o seu uso, reduzindo ao máximo a sua concentração nos colirios, ou melhor, a eliminá-los das fórmulas.

Esta problemática foi tida em conta no documento WO 97/29752, que divulga a utilização, em vez de uma parte de BAK, de um agente não iónico do tipo Cremophor®. Na fórmula proposta, a concentração em BAK é limitada a 0,01% em peso, sendo a concentração de Cremophor® EL de 0,05% em peso. Encontra-se no mercado um produto designado Travatan® que associa Travoprost, BAK e Cremophor®, comercializado pela sociedade ALCON, titular do pedido de patente WO/9729752. O polisorbato 80 foi igualmente proposto em soluções oftálmicas para se substituir parcialmente ao BAK, como é o caso, por exemplo, do produto comercializado sob a marca Rescula® pela sociedade NOVARTIS que associa unoprostona a uma mistura BAK e polisorbato 80 representando 0,015% em peso da solução.

Os documentos EP 1321144 e EP 1666043, quanto a si, descrevem a capacidade do polisorbato 80 de mais ou menos retardar a adsorção de prostaglandina especifica, no caso o tafluprost, sucessivamente sobre o polietileno (PE), o polietileno de baixa densidade (PEBD), o polipropileno (PP), o polietileno tereftalato (PET), uma mistura PET/poliarilato constitutiva da embalagem. Não é dada qualquer indicação sobre a eventual capacidade de o polisorbato 80 estabilizar 3 ΕΡ2178504Β1 a solução no tempo num período de 18 a 24 meses. Estes documentos não contêm nenhum exemplo de solução oftálmica pronta a ser usada e apenas necessita que se possa acrescentar um certo número de aditivos à combinação prostaglandina e polisorbato 80, tal como por exemplo, agentes conservantes do tipo BAK. Neste documento nada indica que o BAK, ou os conservantes em geral, seriam excluídos expressamente da composição final. O documento US2004/0082660 descreve uma solução oftálmica desprovida de BAK e contendo uma mistura de latanoprost e de polisorbato 80 (Tabela 1, teste 2). Os resultados mencionados caracterizam a homogeneidade da solução obtida 30 minutos após 7 horas de agitação, isto é, a capacidade de o polisorbato 80 solubilizar o latanoprost em 7 horas. Não é dada qualquer indicação sobre a estabilidade química da solução no tempo. O documento ep 0850 926 descreve soluções oftálmicas que associam prostaglandina, polisorbato 80 e glicerina. Não é dada qualquer informação sobre a solubilidade da prostaglandina, nem da estabilidade química da solução no tempo e em face da embalagem.

Por conseguinte, o problema que a invenção se propõe resolver consiste em desenvolver uma fórmula à base de prostaglandina que seja desprovida de agente conservante antimicrobiano e que seja estável no tempo em solução à temperatura ambiente (num prazo de 18 a 24 meses), assim como face à embalagem em material plástico na qual é geralmente armazenada, em particular, as embalagens em PEBD. 4 ΕΡ2178504Β1

Outro objectivo consiste em propor uma formulação suficientemente fluida para ser esterilizada por filtração e embalada por técnica de embalagem asséptica de tipo "Blow-Fill-Seal". A Requerente verificou que o facto de substituir o polisorbato 80 pelo solutol HS 15 permitia resolver o problema de estabilidade das prostaglandinas no tempo e face à embalagem primária, em particular as embalagens em PEBD. O solutol HS15 é um produto cuja denominação CAS é o polioxil-15-hidroxiestearato e cujo número CAS é o 70142-34-6. Este produto comercializado sob a denominação Solutol® HS 15 dispõe igualmente de uma monografia inscrita na farmacopeia europeia e identificada sob a denominação Macrogol 15 hidroxiestearato.

Deve notar-se que o Solutol® HS 15 é descrito num documento WO 91/12008 no seio de uma composição oftálmica em combinação com um antibiótico que pertence à família dos macrolides, e em particular a primicina. A Requerente verificou que, de maneira completamente surpreendente, a utilização de Solutol® HS 15 como agente solubilizante de prostaglandina numa solução oftálmica permite, além disso, conferir à solução obtida uma estabilidade à temperatura ambiente durante pelo menos 18 meses, mas igualmente no que toca às embalagens, em particular, embalagens plásticas do tipo PEBD de qualidade farmacopeia europeia (EP) que são embalagens para produtos estéreis, fabricados a partir de polietileno sem aditivos. 5 ΕΡ2178504Β1

Por conseguinte, a invenção tem por objecto uma solução oftálmica pronta a ser utilizada desprovida de agente conservante antimicrobiano compreendendo como principio activo pelo menos uma prostaglandina, assim como enquanto agente solubilizante, um tensio-activo caracterizado por o agente solubilizante ser o polioxil-15-hidroxiestearato.

De acordo com uma primeira caracteristica, a concentração do agente solubilizante (Solutol® HS 15) na solução está compreendida entre 1 e 20 g/1, vantajosamente entre 2 e 10 g/1.

Abaixo da concentração de 0,1% (m/v), o efeito solubilizante é incompleto. Acima de 2% (m/v), não se observa melhoria notória de solubilização.

De acordo com outra caracteristica, a concentração em prostaglandina na solução está compreendida entre 0,02 e 1,5 g/1.

Na prática, as prostaglandinas estão na solução em número de pelo menos uma e são escolhidas do grupo que compreende 17-fenil-13,14 dihidro trinor prostaglandina F2a isopropil éster (latanoprost), 20-etil prostaglandina F2a, ( + ) - fluprostenol isopropil éster (travoprost) , 17-fenil trinor prostaglandina F2a amida, 17-fenil-13,14 dihidro trinor prostaglandina F2a etil amida (bimatoprost), tafluprost prostaglandina F2a etanolamida, bimatoprost (livre de ácido) - d4, bimatoprost-d4, latanoprost etil amida, 13,14 dihidro-15-ceto-20-etil prostaglandina F2a (unoprostona), 13,14 dihidro-15-ceto-20-etil prostaglandina F2a isopropil éster (unoprostona isopropil éster). 6 ΕΡ2178504Β1

Como já se referiu, a ou as prostaglandinas podem ser associadas a um segundo principio activo, em particular com agentes antiglaucomatosos de outras classes que podem assim agir de maneira sinérgica. Pode tratar-se, por exemplo, dos beta-bloqueadores escolhidos do grupo que compreende o maleato de timolol e o cloreto de carteolol, dos inibidores da anidrase carbónica, como por exemplo as escolhidas do grupo que compreende o cloreto de dorzolamida ou ainda agonistas alfa-adrenérgicos, como por exemplo, tartrato de brimonidina. Exemplos de associações de prostaglandinas e de beta-bloqueadores são por exemplo:

Xalacom® - Pfizer: Latanoprost 0,005% + Timolol 0,5%,

Ganfort® - Allergan: Bimatoprost 0,03% + Timolol 0,5%

Duatrav® - Alcon: Travoprost 0,004% + Timolol 0,5%

Na prática, o agente antiglaucomatoso representa entre 0,1 e 0,5% em peso da solução.

Naturalmente, a composição da invenção pode conter aditivos habituais para a exclusão dos agentes conservantes antimicrobianos. Pode tratar-se, por exemplo, de agentes isotonizantes de tipo não iónicos como polióis (Exemplo: glicerol, manitol e sorbitol) . A formulação da invenção pode ser apresentada em frascos de uso único ou num frasco multidose, por exemplo do tipo Abak®, ou Comod®, ou equivalente, permitindo esses frascos emitir colirios sem conservantes durante vários dias. 7 ΕΡ2178504Β1

Além disso e como já referido, a Requerente verificou que a solução oftálmica da invenção era estável no que diz respeito a embalagens plásticas do tipo PEBD de qualidade EP "Polietileno sem aditivos destinado à embalagem de produto estéril" que corresponde à definição da farmacopeia europeia.

Por conseguinte, a invenção tem por objecto um frasco de uso único ou multidose que compreende a solução oftálmica previamente descrita feito em PEBD de qualidade EP que não contem aditivos. A composição oftálmica que se apresenta sob a forma de uma solução, pode ser esterilizada por filtração a 0,2 pm sobre uma membrana adequada como o PES ou o PVDF. Além disso, esta propriedade, associada à estabilidade do produto quando é embalado num recipiente em PEBD, torna o seu fabrico compatível com a tecnologia BFS.

Naturalmente, a invenção refere-se igualmente à utilização da solução oftálmica tal como anteriormente descrita para o fabrico de um medicamento destinado ao tratamento do glaucoma em seres humanos ou em animais, em particular pela sua capacidade de reduzir a pressão intraocular e/ou assegurar a neuroprotecção dos tecidos retinianas.

Na prática o colírio é administrado à razão de uma gota por dia em cada olho. A invenção tem igualmente por objecto um método de tratamento terapêutico do glaucoma em seres humanos ou em 8 ΕΡ2178504Β1 animais que consiste em instilar a solução oftálmica previamente descrita à razão de uma gota por dia em cada olho. A invenção e as vantagens que dela decorrem tornar-se-ão claras a partir dos exemplos de realização seguintes com 0 auxilio das figuras anexas. A figura 1 compara o efeito estabilizador do Cemophor® EL e do Solutol® HS 15 com concentração idêntica (0,5%) no que se refere ao travoprost. A figura 2 compara o efeito estabilizador do Solutol® HS 15 (0,5%) e do polisorbato 20 (2%) no que se refere ao latanoprost. A figura 3 compara o efeito estabilizador do Solutol® HS 15 (0,5%) e do polisorbato 80 (2% e 0,5%) no que se refere ao latanoprost. A figura 4 compara o efeito estabilizador do Solutol® HS 15 (0,5%) no que se refere ao BAK (formulação xalatan®).

Exemplo 1: Comparação do efeito estabilizador do Solutol® HS 15 e do Cremophor® EL no que se refere ao travoprost 1 - Fórmula à base de Solutol® HS 15 9 ΕΡ2178504Β1

Produtos Funções Fórmula centesimal travoprost Principio activo 0,004 g PEG-15 Agente solubilizante e 0, 5 g hidroxiestearato* estabilizante Agente tampão 0,317g Na2HP04, 12H20 Agente tampão 0,067 g NaH2P04, 2H20 Agente isotonizante 4, 5 g Sorbitol Agente antioxidante 0,05 g EDTA Veiculo qsp 100 g Água purificada *Solutol® HS 15

2 - Fórmula à base de Cremophor® EL

Produtos j Funções Fórmula centesimal travoprost | Principio activo 0,004 g PEG-35 Castor oil* j Agente solubilizante 0, 5 g Na2HP04, 12H20 | Agente tampão 0,317g NaH2P04, 2H20 | Agente tampão 0,067 g Sorbitol [ Agente isotonizante 4.5 g EDTA | Agente antioxidante 0,05 g Água purificada | Veiculo qsp 100 g

* Nome comercial : Cremophor® EL 3 - Modo de preparação das fórmulas - Introduzir água PPI no tanque inox do misturador. - Efectuar uma aspersão em azoto para eliminar ao máximo o oxigénio dissolvido na água. Manter a neutralização de azoto ao longo de todo o fabrico.

Acrescentar e dissolver, mantendo a agitação, os excipientes: agente isotonizante, agente tampão, agente antioxidante e agente solubilizante. 10 ΕΡ2178504Β1 - Cada ingrediente deve ser dissolvido completamente antes da adição do produto seguinte. - Acrescentar e dissolver, mantendo a agitação, o principio activo. - Quando a homogeneização é total, o ajuste em peso é efectuado com água ppi. - Efectuar a filtração esterilizante com o auxilio de um filtro PES ou PVDF 0,2 pm sob fluxos de azoto. 4 - Embalagem

As soluções estéreis assim preparadas são embaladas em frascos plásticos de tipo PEBD.

Como mostra a figura 1, a uma concentração igual, o efeito estabilizador do Solutol® HS 15 no que se refere ao travoprost a uma concentração de 0,004% é melhor do que o do Cremophor®. Em particular, após 180 dias de conservação num recinto climático a 60°C, a concentração de travoprost é de 96% na fórmula do Solutol® HS 15 e de apenas 88% na fórmula do Cremophor® EL.

Exemplo 2: Estabilidade do Solutol® HS 15 e do polisorbato 20 no que se refere ao latanoprost

As duas fórmulas seguintes são comparadas: 1 - Fórmula à base de Solutol® HS 15 11 ΕΡ2178504Β1

Produtos Funções Fórmula centesimal | latanoprost* Principio activo 0,005 g ) PEG-15 hidroxiestearato* Agente solubilizante e estabilizante 0,5 g l Na2HP04, 12H20 Agente tampão 0,317g 1 NaH2P04, 2H20 Agente tampão 0,067 g | Sorbitol Agente isotonizante 4,5 g I EDTA Agente antioxidante 0, 0 5 g Água purificada Veiculo qsp 100 g *latanoprost sob a forma de isopropil éster *Solutol® HS 15 2 - Fórmula à base de polisorbato 20

Produtos Funções Fórmula centesimal j latanoprost (isopropil éster) Principio activo 0, 0 0 5 g Polisorbato 20* Agente solubilizante 2,0 g Na2HP04, 12H20 Agente tampão 0,317 g | j NaH2P04, 2H20 Agente tampão 0,067 g j Sorbitol Agente isotonizante 3, 5 g \ EDTA Agente antioxidante 0,05 g í Água purificada Veiculo qsp 100 g )

* Nome comercial MONTANOX® 20PHA

Como mostra a figura 2, a uma concentração inferior (0,5% contra 2%), o Solutol® HS 15 tem um efeito estabilizante face ao latanoprost superior ao do polisorbato 20. Em especial, após 90 dias de conservação num recinto climático O o O a concentração residual em latanoprost é de mais de 90% no caso da fórmula do Solutol® HS 15, enquanto que é de apenas 65% no caso da fórmula do polisorbato 20. 12 ΕΡ2178504Β1

Exemplo 3: Estabilidade do Solutol® HS 15 e o polisorbato 80 face ao latanoprost 1 - Fórmula à base de Solutol® HS 15

Produtos j Funções Fórmula centesimal \ latanoprost* j Princípio activo 0,005 g | ! PEG-15 : hidroxiestearato* Agente solubilizante e estabilizante 0, 5 g | Na2HP04, 12h20 j Agente tampão 0,317 g j NaH2P04, 2H20 j Agente tampão 0,067 g | í................................................................. Sorbitol j Agente isotonizante 4,5 g j EDTA j Agente antioxidante 0,05 g i Água purificada j Veículo qsp 100 g | *latanoprost sob a *S0lut0l® HS 15 forma de isopropil éster 2 - Fórmula à base de polisorbato 80 a 2%

Produtos Funções Fórmula centesimal S latanoprost (isopropil éster) Princípio activo 0,005 g Polisorbato 80* Agente solubilizante 2,0 g | Na2HP04, 12H20 Agente tampão 0,317 g | NaH2P04, 2H20 Agente tampão 0,067 g I Sorbitol Agente isotonizante 3,5 g | EDTA Agente antioxidante LO O o Agua purificada Veículo qsp 100 g

* Nome comercial ΜΟΝΤΑΝΟΧ® 80PHA 13 ΕΡ2178504Β1 3 - Fórmula à base de polisorbato 80 a 0,5%

Produtos Funções Fórmula centesimal j latanoprost (isopropil éster) Principio activo 0,005 g | Polisorbato 80* Agente solubilizante 0,5 g | Na2HP04, 12H20 Agente tampão 0,317 g ! NaH2P04, 2H20 Agente tampão 0,067 g | Sorbitol Agente isotonizante 4,5 g | EDTA Agente antioxidante 0,0 5 g Água purificada Veiculo qsp 100 g

Como mostra a figura 3, em concentração inferior (0,5% contra 2%), o Solutol® HS 15 tem um efeito estabilizante face ao latanoprost superior ao do polisorbato 80. Após 90 dias de conservação num recinto climático a 60°C, a concentração residual em latanoprost é de mais de 90% no caso da fórmula do Solutol® HS 15, isto é, para lá do limite necessário para considerar o produto de acordo com o critério de estabilidade.

Para uma concentração em polisorbato 80 de 2%, a concentração residual em latanoprost é igualmente de mais de 90%, mas continua a ser superior à obtida na presença de solutol®HS 15. Além disso, este resultado é obtido com uma concentração superior em polisorbato em relação ao solutol® HS15. A fórmula a 2% de polisorbato 80 apresenta, por conseguinte, mais riscos em termos de efeitos secundários do que a fórmula ao solutol® HS15.

Para uma concentração em polisorbato 80 de 0,5%, a concentração residual em latanoprost é inferior a 90%, o que torna produto não-conforme ao critério de estabilidade. 14 ΕΡ2178504Β1

Exemplo 4: Estabilidade à temperatura ambiente (25°C/40% HR) da fórmula à base de Solutol® HS 15 em comparação com uma formulação com conservante (Xalatan®) embalada em frasco em PEBD de qualidade EP.

Neste estudo, comparam-se duas fórmulas, respectivamente: - fórmula à base de Solutol® HS 15

Produtos Funções Fórmula centesimal Latanoprost* Princípio activo 0,005 g PEG-15 hidroxiestearato* Agente solubilizante e estabilizante 0,5 g Na2HP04, 12H20 Agente tampão 0,317g | NaH2P04, 2H20 Agente tampão 0,067 g | Sorbitol Agente isotonizante 4,5 g j EDTA Agente antioxidante 0,05 g | Água purificada Veículo ...................................................jt qsp 100 g j *latanoprost sob a forma de isopropil éster * Solutol® HS 15 - produto comercial Xalatan® contendo 0,005% de latanoprost sob a forma de isopropil éster e 0,02% de conservante (BAK)

Fórmula Solutol (sem conservante) (= fórmula A) ...........................................................................J Fórmula Xalatan® (com conservante/BAK) Tempo inicial 1 100,0 % 100,0 % ! Tempo 6 meses 1 100,3% 93,7% I

Como mostra o quadro acima e a figura 4, a formulação com conservante não é estável a 25°C numa embalagem em PEBD de qualidade EP. Em contrapartida, a solução oftálmica da invenção pode ser comercializada em embalagens feitas 15 ΕΡ2178504Β1 simplesmente em PEBD de qualidade EP sem que a estabilidade da referida solução seja afectada.

Exemplo 5: Colírio de unoprostona a 0,1%

Produtos Funções ..................................................1 Fórmula í centesimal j unoprostone * Principio activo 0,1 g i PEG-15- hidroxiestearato* Agente solubilizante e estabilizante 2,0 g i Na2HP04, 12H20 Agente tampão 0,317g j r.................................................................... NaH2P04, 2H20 Agente tampão 0,067 g j Sorbitol Agente isotonizante 3,5 | r.................................................................... EDTA Agente antioxidante 0,05 g i Água purificada Veiculo qsp 100 g j *Unoprostona sob a forma de isopropil * Solutol® HS 15

Exemple 6 : Colírio latanoprost + timolol

Produtos Funções -η-J Fórmula centesimal latanoprost (isopropil éster) Principio activo No 1 j 0,005 g Timolol maleato Principio activo No 2 | 0,685 g | PEG-15-hidroxiestearato* Agente solubilizante e estabilizante | 0,5 g Na2HP04, 12H20 Agente tampão | 0,317g | NaH2P04, 2H20 Agente tampão | 0,067 g | Sorbitol Agente isotonizante 1 4,0 ! EDTA Agente antioxidante | 0, 0 5 g Água purificada Veículo | qsp 100 g * Solutol® H S 15 16 ΕΡ2178504Β1

Exemplo 7 : Colírio latanoprost + carteolol

Produtos Funções -( Fórmula centesimal latanoprost (isopropil éster) Principio activo 0,005 g Carteolol (cloridrato) Principio activo 2,0 g PEG-15-hidroestearato* Agente solubilizante e estabilizante 0,5 g Na2HP04, 12H20 Agente tampão 0,317g | NaH2P04, 2H20 Agente tampão 0,067 g | Sorbitol Agente isotonizante 3,0 j EDTA Agente antioxidante 0,05 g j Água purificada Veiculo qsp 100 g ) * Solutol® HS 15

Exemplo 8 : Colírio latanoprost + dorzolamida 1 Produtos Funções Fórmula ) centesimal Latanoprost (isopropil éster) Principio activo No 1 1 0,005 g Dorzolamida (HC1) Principio activo No 2 2,0 g PEG-15-hidroestearato* Agente solubilizante e estabilizante 0,5 g Na2HP04, 12H20 Agente tampão 0,317 g | NaH2P04, 2H20 Agente tampão 0,067 g | Sorbitol Agente isotonizante 3,0 j ' EDTA Agente antioxidante 0, 05 g Água purificada Veiculo qsp 100 g * Solutol® HS 15

Exemplo 9: Teste de irritaçao ocular comparativo de diferentes colírios de Latanoprost em animais

Obiectivo do estudo: Para avaliar a compatibilidade de duas fórmulas oftálmicas sem conservantes de prostaglandinas com 17 ΕΡ2178504Β1 a superfície ocular, é efectuado um teste de irritação no coelho: teste de Draize.

Metodologia: 0 teste é realizado de maneira comparativa contra um produto de referência, cuja compatibilidade com a superfície ocular é considerada como aceitável: Xalatan® -colírio comercial. É igualmente seguido um testemunho negativo (solução NaCl à 0,9%).

Protocolo: São registados diferentes critérios de avaliação após várias instilações dos produtos a testar. 12 coelhos, machos albinos (brancos da Nova Zelândia)) são repartidos em grupos de 3. Cada grupo recebe várias gotas de colírio no olho direito durante 5 dias de acordo com o calendário seguinte: Dia n° 1: 5 gotas administradas > em 20 minutos. Dia n° 2: 5 gotas administradas em 20 minutos, 2 vezes por dia. Dia n° 3: 5 gotas administradas em 20 minutos, 4 vezes por dia. Dia n° 4: 5 gotas administradas em 20 minutos, 6 vezes por dia. Dia n° 5: 5 gotas administradas em 20 minutos, 8 vezes por dia. Quantidade de produto administrado à cada instilação: uma gota de 50 pL. 18 ΕΡ2178504Β1

As avaliações oculares são realizadas com o auxílio de um oftalmoscópio utilizando a escala de Draize. Os dois olhos de cada animal são observados. As leituras são realizadas como segue:

Dia n° 1: antes do tratamento (estado básico), depois 5 minutos, 30 minutos, 1 hora e 4 horas após a última instilação.

Dia 2 a 5: exactamente antes da primeira instilação e 5 minutos após a última instilação do dia. 19 ΕΡ2178504Β1

Resultados:

Olhos tratados Conjuntiva Vermelhidão Inflamação Descarga Dia 1 Dias2 a 5 Dia 1 Dias 2 a 5 Dia 1 Dias 2 a 5 Fórmula A (latanoprost 0,005% sem conservante) Média O O O 0,0 - 0,3 O O o o O O o o O O o o O O o o Score Max 2 1 0 0 0 0 Número de animais com efeito 2/3 2/3 0/3 0/3 0/3 0/3 Fórmula B (travoprost 0,004% sem conservante) Média 0,3-1,0 0,0-1,0 0,0-0,0 0,0-0,0 0,0-0,3 0,0-0,0 Score Max 2 2 0 0 0 0 Número de animais com efeito 3/3 2/3 0/3 0/3 1/3 0/3 Xalatan® (latanoprost 0,005% com conservante) Média 0,3-1,7 0,0-0,7 0,0-0,0 0,0-0,0 0,0-0,0 0,0-0,0 Score Max 2 1 0 0 0 0 Número de animais com efeito 3/3 2/3 0/3 0/3 0/3 0/3 NaCI 0,9 % (solução salina = branca) Média 0,0-0,0 0,0-0,3 0,0-0,0 0,0-0,0 0,0-0,0 0,0-0,0 Score Max 0 1 0 0 0 0 Número de animais com efeito 0/3 1/3 0/3 0/3 0/3 0/3 Fórmula de Latanoprost sem conservante: Após várias instilações repetidas no olho direito, a soma da vermelhidão conjuntival é de 6/108 para o olho direito, para 0 no olho esquerdo. As somas da inflamação conjuntival e da quitação conjuntival é de 0 para cada olho. A soma dos efeitos sobre a córnea e a iris é nula, para cada olho. 20 ΕΡ2178504Β1 Fórmula de Travoprost sem conservante: Após as várias instilações repetidas no olho direito, a soma da vermelhidão conjuntival é de 11/108 para o olho direito, para 0 no olho esquerdo. A soma da inflamação conjuntival é de 0 para cada olho. A soma da quitação conjuntival é de 1/108 para o olho direito e de 0 para o olho esquerdo. A soma dos efeitos sobre a córnea e a iris é nula, para cada olho. Fórmula de Latanoprost com conservante (Referência/Xalatan®): Após várias instilações repetidas no olho direito, a soma da vermelhidão conjuntival é de 18/108 para o olho direito, para 0 no olho esquerdo. As somas da inflamação conjuntival e da quitação conjuntival é de 0 para cada olho. A soma dos efeitos sobre a córnea e da iris é nula, para cada olho.

Testemunho negativo (Solução de NaCl a 0,9%): Após várias instilações repetidas no olho direito, a soma da vermelhidão conjuntival é de 1/108 para o olho direito, para 0 no olho esquerdo. As somas da inflamação conjuntival e da quitação conjuntival é de 0 para cada olho. A soma dos efeitos sobre a córnea e da iris é nula, para cada olho.

Conclusão:

Seguindo este protocolo de várias instilações repetidas de diferentes colírios no olho direito de coelho albino durante 5 dias, as duas fórmulas prostaglandinas sem conservante induzem aproximadamente as mesmas reacções oculares, que são ligeiramente mais fracas que as obtidas para a solução de referência (Xalatan®). Os resultados são considerados como válidos devido à resposta obtida com o 21 ΕΡ2178504Β1 testemunho negativo (solução salina). Conclui-se assim que nas condições do estudo os dois colírios prostaglandinas sem conservante apresentam uma muito boa tolerância ocular.

Exemplo 10: Estudo comparativo da farmacocinética ocular no coelho pigmentado

Objectivo: Comparar a remanência do latanoprost (forma ácida) em dois tecidos oculares, após instilação de uma dose única de dois colírios doseados a 0,005% (Latanoprost isopropil éster). O colírio Xalatan®, é considerado aqui como o produto de referência. O estudo tem assim por objectivo avaliar se a fórmula A apresenta um perfil de cinética ocular equivalente ao do produto de referência.

Metodologia:

Estudo realizado em dois grupos de 18 coelhos pigmentados (Cervos de Bourgognes), após instilação única de uma gota de uma formulação tópica oftálmica de Latanoprost a 0,005% no olho direito. O olho esquerdo é utilizado como testemunho negativo. O primeiro grupo recebe o colírio sem conservante (Fórmula A) , enquanto o segundo grupo recebe o produto de referência com conservante (Xalatan®). Dimensão da gota instilada: 50 pL. Uma dosagem do Latanoprost (forma ácido) por CLHP-MS é realizada após extracção dos dois tecidos oculares: a conjuntiva e a córnea. A dosagem é realizada em diferentes momentos. 6 coelhos por grupo são testados em cada tempo de análise. 22 ΕΡ2178504Β1

Resultados:

Tempo (horas) Fórmula A (sem conservante) Xalatan® (referência, com conservante) Córnea Conjuntiva Córnea Conjuntiva 0,5 100 % 100 % 100 % 100 % 6 5,3%+/-5% 1,0%+/-5% 5,5% +/- 5 % 1,2% +/- 5% 24 0,2 % +/- 5 % 0,3 % +/- 5% 0,1% +/- 5% 0,2% +/- 5 %

Conclusão: As cinéticas de concentração ocular do latanoprost após instilação de uma única gota de uma fórmula tópica oftálmica a 0,005% são equivalente para os dois produtos, nas condições do estudo.

Lisboa, 24 de Janeiro de 2011 23

Claims

ΕΡ2178504Β1 REIVINDICAÇÕES 1. Solução oftálmica desprovida de agente conservante antimicrobiano que compreende como principio activo pelo menos uma prostaglandina, assim como, enquanto agente solubilizante um tensio-activo, caracterizada por o agente solubilizante ser o polioxil-15-hidroxiestearato.
2. Solução de acordo com a reivindicação 1, caracterizada por a concentração do agente solubilizante na solução estar compreendida entre 1 e 20 g/1, vantajosamente entre 2 e 10g/l.
3. Solução de acordo com a reivindicação 1, caracterizada por a concentração em prostaglandina na solução estar compreendida entre 0,02 e 1,5 g/1.
4. Solução de acordo com a reivindicação 1, caracterizada por a prostaglandina ser escolhida do grupo que compreende 17-fenil-13,14 dihidro trinor Prostaglandina F2a isopropil éster (latanoprost), 20-etil Prostaglandina F2a, ( + ) Fluprostenol isopropil éster (travoprost), 17-fenil trinor Prostaglandina F2a amida, 17-fenil-13,14 dihidro trinor Prostaglandina F2a etil amida (bimatoprost), tafluprost Prostaglandina F2a etanolamida, bimatoprost (freeacid) - d4, bimatoprost-d4, latanoprost etil amida, 13,14 dihidro-15-ceto-20-etil Prostaglandina F2a (unoprostona), 13,14 dihidro-15-ceto-20-etil Prostaglandina F2a isopropil éster (unoprostona isopropil éster).
5. Solução de acordo com a reivindicação 1, caracterizada por conter, além disso, um agente antiglaucomatoso escolhido 1 ΕΡ2178504Β1 do grupo que compreende os beta-bloqueadores, os inibidores de anidrase carbónica e os agonistas alfa-adrenérgicos.
6. Solução de acordo com a reivindicação 5, caracterizada por o agente antiglaucomatoso representar entre 0,1 e 0,5% em peso da solução.
7. Solução de acordo com a reivindicação 1, caracterizada por conter, além disso, um aditivo escolhido do grupo que compreende os agentes isotonizantes, os agentes antioxidantes e os sistemas tampões.
8. Frasco de uso único ou multidose feito em PEBD sem aditivos, que compreende a solução oftálmica objecto de uma das reivindicações 1 a 7.
9. Utilização da solução de acordo com qualquer das reivindicações 1 a 7 para o fabrico de um medicamento destinado ao tratamento do glaucoma, capaz de reduzir a pressão intraocular e/ou capaz de assegurar a neuroprotecção dos tecidos retinianos.
10. Utilização da solução de acordo com a reivindicação 9, que consiste em administrar a seres humanos ou a animais, por via tópica, uma gota por dia da referida solução em cada olho. Lisboa, 24 de Janeiro de 2011 2