KR19990022839A

KR19990022839A - 장 질환 치료용 n-사이클로헥실 벤자미드의 용도

Info

Publication number: KR19990022839A
Application number: KR1019970709308A
Authority: KR
Inventors: 띠애리 뷔쑤; 헬렌 크리스티나끼; 알랭 르노
Original assignee: 로즈애 에릭; 라보라토와 쟈크 로즈애
Priority date: 1995-06-23
Filing date: 1996-06-21
Publication date: 1999-03-25
Also published as: AU696447B2; BR9608595A; US5804589A; NO976024D0; CA2221863A1; NO976024L; FR2735693A1; FR2735693B1; TW464498B; EA000951B1; KR100261372B1; EP0833634A1; JP2999557B2; EA199800085A1; WO1997000680A1; AU6460696A; NZ312713A; JPH10511694A

Abstract

내장 유리의 통증을 치료를 의도한 약제 제조를 위한, 배열에서 2R인, 다음 식의 화합물들, 또, 상기 화합물들을 포함하는 라세미들, 및 이들의 약학적으로 허용 가능한 염의 용도에 관한 것이다.

단;

R₁은 직선상, 분지상 또는 고리상 C₁-C₅알킬 라디칼;

R₂는 수소 원자, 직선상 또는 분지상의 C₁-C₅의 알킬 라디칼, 하이드록실 라디칼, C₁-C₅알콕시 라디칼 또는 C₁-C₂하이드록시알킬 라디칼, 및;

R₃은 수소원자;

또는 R₂및 R₃은 모두 C₁-C₅알칼 라디칼이다.

Description

장 질환 치료용 N-사이클록헥실 벤자미드의 용도

EP 0,507,672호에서 설명된 N-사이클로헥실벤자미드(N-cyclohexyl benzamides)는 소화기의 운동성을 자극하는 것으로 알려져 있으므로, 변비가 주 증상인 IBS 환자에서 대장의 이동성을 회복하기 위해서 제안될 수 있다.

이 질환에 있어서, 병적인 통증을 호소하는 환자는 낮아진 내장의 민감성 문턱치(visceral secsitivity threshold)를 보인다는 것이 알려졌다

상기 문턱치는 그레니세트론(granisetron)과 같은 특정 5-HT₃길항제 또는 카파 아고니스트(kappa agonist)와 같은 다양한 약제에 의해서 올라갈 수 잇다(WO 94/01095). 또한, 후자의 화합물은 직장의 운동성을 감소하는 것이 개시되었고(Aliment. Pharmacol. Ther. (1993), 7, 175-80), 온단세트론(ondansetron)과 같은 기타 5-TH₃이 대장의 이동을 느리게 하는 것으로 알려졌다(Dig. Dis. Sci. (1990), 35, 477-80).

그레니세트론과 같은 화합물과는 반대로, EP 0,507,672호에 설명된 N-사이클로헥실 벤자미드는 5-TH₃수용체에 대해서 효과를 가지고 있지 않다.

본 발명은 N-사이클로헥실 벤자미드의 새로운 치료학적 용도에 관한 것이다.

과민성 장 증상(irritable bowel syndrome)(IBS)은 병적인 통증, 상기 병적인 통증과 관련되거나 관련 없는 불규칙적인 배변, 병적인 팽만의 일반적인 존재로 정의된다.

이들 증상의 다양성은 변비 또는 설사의 존재의 기능에 따라서 이들 질환을 분류를 제안하도록 한다.

특정한 형태의 IBS에서 관찰된 변비는 장의 운동성을 자극하고, 특히 대장의 운동성을 자극하는 제제에 의해서 치료될 수 있다.

본 출원인 회사는 EP 0,507,672호에 설명된 특정 화합물이 내장 유래의 통증을 인식하는 문턱치를 올리는 특성을 가진다는 것을 발견하였다.

본 출원인 회사는 또한 상기 화합물이 궤양성 대장염의 모델에 대한 항-염증 효과를 가지는 것을 발견하였다.

이들 화합물은 하기의 일반식에 부합된다.

[화학식 1]

단;

R₁은 직선상, 분지상 또는 고리상 C₁-C₅알킬 라디칼;

R₃은 수소원자;

또는 R₂및 R₃은 모두 C₁-C₅알칼 라디칼이다.

2개의 비대칭적인 센터의 존재는 식 I이 4개의 입체이성체를 포함한다는 것을 의미한다. 본 발명에 사용된 화합물은 2R 절대 배열을 가지고, 바람직한 화합물은 1R, 2R 절대 배열을 가진다. 시스 상대 배열을 가잔 라세미 화합물(1R, 2R과 1S, 2S 거울이성체의 동일한 몰수의 혼합물)은 활성 이성체를 가지므로, 본 발명에서 이용될 수 있다. 마찬가지로, 트랜스 상대 배열을 가진 라세미 화합물(1S, 2R과 1R, 2S 거울이성체의 동일한 몰수의 혼합물) 또한 본 발명에 이용될 수가 있다.

특히 바람직한 화합물은 R₁이 메틸 또는 사이클로프로필메틸 라디칼이고, R₂가 메틸 라디칼이고, R₃가 수소 원자인 상기 식 I에 해당하는 것이다.

식, I의 화합물은 EP 0,507,672에서 설명된 바와 같은 합성 방법으로 바람직한 입체화학을 보여주는 다음의 식 II의 벤조익 에시드와 식 III의 디아민을 농축하여 준비될 수 있다.

[화학식 2]

EP 0,507,672에서 설명된 바와 같이 (시스)-2-(트리플루오로 아세트아미도)사이클로헥산카르복실산에서 합성 경로에 따라서 시스 상대 배열을 가진 상기 라세스 디아민 III이 제조된다.

1R, 2R 절대 배열을 가진 R₂=H 및 R₃=CH₃인 디아민 III은 또한 EP 0,507,672에 설명된다. 1S, 2R 절대 배열을 가진 R₂=H 및 R₃=CH₃인 디아민 III은 다음의 일련의 반응식 1에 따라서 아미노 에스테르 IV(Tetrahedron Letters(1984), 25, 2557-2560에서 설명된 방법에 따라서 자체 획득됨)로 부터 제조되었다.

[반응식 1]

따라서, 본 발명의 대상은 식 I의 화합물 또는 내장 유래, 특히 IBS를 앓고 있는 환자에서 나타나는 통증의 치료를 의도한 약제의 제조를 위한 약제학적으로 수용가능한 염의 용도이다.

본 발명의 또 다른 대상은 식 I의 화합물 또는 출혈성 직장결장염 또는 크론병과 같은 염증성 대장염의 치료를 의도한 약제의 제조를 위한 약제학적으로 수용가능한 염의 용도이다.

인체에서 구강 투여에 의한 약용량학은 매일 약 1mg 내지 약 200mg이다.

언급된 상기 약제학적 특성을 설명하는 실험에 대해서 얻어진 결과가 이하에 주어진다.

I-5-HT₃수용체에 대한 활성

1) 수용체에 대한 친화성

5-HT₃수용체에 대한 화합물의 친화성은 Bioch. Pharmacol. (1990), 40, (7), 1541-1550에서 설명된 방법에 따라서 NG 108-15 셀의 막 제조물 및 측정 리간드로서 트리티화된(tritiated) BRL 43694를 이용하여 측정된다.

식 I의 화합물은 5-HT₃수용체에 대한 마이크로물 이상의 낮은 친화성을 보인다. 비교를 위해서 온다세트론의 Ki은 16nM이다.

2) 베졸드-자리시(Bezold-Jarisch) 반사

생산물의 5-TH₃길항제 활성은 세로토닌에 의해서 유도된 느린 맥박(bradycardia)을 저해하는 그들의 특성을 측정하기 위해서 J. Pharm. Exp. Therap. (1989), 248, 197-201에서 설명된 방법에 따라 인 비보에서 평가되었다.

식 I의 화합물의 어느 것도 1mg/kg i. v.의 투여량 이하에서 느린 맥박을 길항작용하지 않는다. 이와 반대로, 온단세트론은 약 0.003mg/kg i.v.의 IC₅₀으로 느린 맥박을 길항작용을 한다.

II. 내장의 민감성

제 1 모델은 래트에서 이전에 자극시켜 놓은 점막에 적용된 직장의 팽만으로 생산된 복부의 경축(abdominal constracture)을 관찰하는 것으로 이루어진다. 경축의 수는 경험된 통중의 강도에 비례한다. 유사한 모델은 인체에서 통증의 인지를 감소하는 생산물이 래트에서 관찰된 경축의 수를 감소한다는 것을 보여주는 Neurogastroenterol. and Mot. (1994), 6, 140에서 설명되었다.

과정 :

180g의 중량을 가진 Male Sprague-Dawley 래트는 12시간 동안 절식을 하였다. 약간의 플루오테인 마취 하에, 직장내의 탐침이 유도되고(항문에서 5cm) 1% 희석된 초산의 1.5㎖가 주입되었다. 상기 산은 항문을 통해서 즉시 흘러나왔다. 상기 산의 빠른 접촉은 점막(직장 대장염의 모델)을 민감하게 할 수 있게 하였다. 자극 후 1시간 30후에, 약한 플루오테인 마취 하에 카테테르(catheter)(int. 지름 1mm)를 장착한 작은 락텍스 풍선(빈 경우에 지름 2mm, 길이 1cm)이 직장에 유도되었다(항문에서 5cm). 상기 카테테르는 접착테이프로 테일의 바닥에 부착되고, 유리튜브에 의해서 보호되었다. 실험 생산물은 강제 투입에 의해 투여되었고, 래트는 글라이드로 덮인 결정제 접시에 유입되었다. 상기 튜브 및 카테테르의 단말은 팽만을 수행하기 위한 글리드를 통해 통과되었다.

팽만은 직장 자극 후에 2시간 30동안 수행되었다. 작은 풍선은 증류수 1.5㎖로 팽창되었다(대장내 압력은 평균적으로 60mm Hg였다). 이 팽창은 10분 동안 유지되어서 복부 경축을 계수하였다. 작은 풍선은 증류수를 흡취하여 수축시켰다.

결과 :

팽창을 실시한 10분 동안 5마리의 래트에 대해서 관찰된 경축의 수의 평균으로 표현된다.

[표 1]

* p0.05에서 플레시보와 유의적인 차이가 있다.(Dunett test)

III. 항염증 활성

트리니트로벤젠술폰산의 대장내 적하에 의해서 래트에 유도된 궤양성 대장염을 위한 모델은 예를 들면 Gut(1992), 33, 1498-1503에서 이미 개시되어 있다.

이 대장염의 발병에 대한 치료 효과가 한편으로, 예를 들면 체중의 변화로 표현되는 총괄적인 동물의 건강 상태에 따라서, 그리고 다른 한편으로 실험의 마지막에서 대장의 역학적 연구에 따라서 평가될 수 있다.

과정 :

Male Sprague-Dawley 래트(140-150g)는 하루 전부터 절식을 하고 일반적인 마취(이소플루란)하에서 50mg/㎖ 수성 트리니트로벤젠술폰산(TNB) 용액의 1㎖으로 원위 결장(항문에서 7cm)의 점막의 자극을 실시하였다. 다음날 래트는 2개의 동일한 규모의 그룹(n=7)으로 랜던하게 하여, 아침 저녁으로 강제 투입으로 처치(플레시보 또는 생생산물)를 실시하도록 하였다. 생생산물은 1mg/kg p.o.로 1일 2회로 투여되었다.

처치는 결장의 자극에 이어서 10일 동안 투여된다. 상기 동물은 D5에서 D10까지 매일 아침 체중을 측정하였다. 상기 동물은 D9에서 절식하였고 D10에서 인도적으로 도살되었다. 결장은 제거되었고 육안으로 그리고 역학적으로 실험되었다.

결과 :

정보는 화합물 6으로 얻어진 결과로서 주어진다.

체중의 변화

[표 2]

* p0.05에서 플레시보와 유의적으로 다름.(Dunett test)

대장의 육안 분석

결장의 것적인 모양은 다음의 등급으로 평가되었다.

등급 0 : 자극의 흔적이 없음

1 : 약간 혈관 학장된 점막

2 ; 혈관 확장된 점막 및 협착

3 : 출혈성 및 경화된 점막 및 협착

4 : 궤양되고 출혈성 점막 및 협착

결과는 이하의 표 3에 통합되고 여러 등급을 나타내는 동물의 수로 표현된다.

[표 3]

손상의 심각성은 p0.50에서 화합물 6에서 보다 플레시보에서 더 컸다. 통계적인 계산은 카이-스퀘어 테스트에 의해서 산출되었다. 등급 1 및 2의 클라스(플레시보로 처치된 0, 본 생생산물으로 처치된 5)는 단계 3 및 4의 클라스(플레시보로 처리된 6, 본 생생산물으로 처리된 2)와 비교되었다.

역학적 분석

대장의 단면은 포름알데히드로 고정되었고 파라핀 블록으로 둘러막았다. 5㎛단면이 제조되었고, 해말룸-에오신(haemalum-eosin)으로 염색되었고 다음의 등급에 따라서 광학적 현미경으로 평가되었다.

등급 0 : 염증 셀이 없음

1 : 소수의 염증 셀이 존재

2 : 다수의 염증 셀이 존재

3 : 관련된 막의 두께가 증가된 염증 셀이 다수 존재하나 구조상의 왜곡은 없음

4 : 관련된 막의 두께가 증가된 염증셀이 다수 존재하고 구조상의 왜곡(정상적 건축상의 형태가 손실)이 존재

대장은 3개의 점막층, 점막하층의 및 근육층으로 나누었고, 각 층은 다음의 분류에 따라서 등급되었다.

내부 구조에 속한 등급의 합계는 각 동물에서, 염증 셀의 출혈과 구조상의 왜곡 모두를 고려한 인덱스로 정의된다.

[표 4]

통계적 계산은 카이-스퀘어 테스트로 산출되었다. 인덱스 0 내지 5를 통합한 클라스(플레시보로 처치된 것 0, 본 생생산물로 처치된 것 5)는 인덱스 6 내지 12를 합산한 클라스(플레시보로 처치된 것 6, 본 생생산물로 처치된 것 2)와 비교되었다. 염증 상태는 화합물 6으로 처치된 것보다 플레시보로 처치된 것이 유의적으로 더욱 심각하였다.

이 모델에서 화합물 6으로 처치하는 것은 플레시보에 대해서 래트가 유의적으로 개선된 체중의 변화를 보이고 대장의 손상된 형태는 덜 심각하였다. 이 개선된 염증 셀의 출혈의 감소와 관련이 있다.

식 I의 화합물의 제조의 실시예는 다음에서 주어질 것이다.

[화학식 3]

4-아미노-5-클로로-2-메톡시벤조익 에시드(2.92g) 및 N,N-카르복닐디이미다졸(2.35g)은 THF의 80㎖에 용해되었다. 실온에서 한 시간동안 교반된 후에, 2-(4-하이드록시피페리디노메틸)사이클로헥실아민(B.p. : 160℃/0.5mm Hg)(3.45g)이 반응 혼합물에 첨가되었다. 20시간 동안 교반된 후에, 용매는 증발되었고 잔류물은 물로 채워졌고 pH 5로 산성화되었다. 수계 상은 에틸 아세테이트로 추출되었고, pH 10까지 염기화된 후에 다시 에틸 아세테이트로 추출되었다. 최종 유기 상은 소디움 술페이트로 건조되고 여과된 후에 진공 하에서 증발된다. 획득된 잔류물은 에테르에서 하이드로클로릭 에시드 용액으로 처치되었고 따라서 획득된 하이드로클로라이드는 물에서 결정제되었고, 여과에 의해서 수집되었다.

용융점 : 145-216℃(dec);

IR(C=O) : 1635cm^-1(KBr)

화합물 8 :

화합물 8은 상기 과정에 따라서 4-아미노-5-클로로-2-(사이클로펜틸옥시)벤조익 에시드 및 (1R, 2R)-2-(4-메틸피페리디노메틸)사이클로헥실아민에서 얻어진다. 염기는 실리카에서 크로마토그래피에 의해서 정제되었고(용출액 CH₂Cl₂/CH₃CO₂C₂H₅/CH₃OH; 80/15/5)물에서 결정되었다.

용융점 : 173-175℃ ; IR(C=O) : 1634cm^-1(CHCl₃)

[α]_D=-52.6°(c=1, CH₃OH). T=20℃.

화합물 9 :

화합물 9는 4-아미노-5-클로로-2-(사이클로프로필메톡시)벤조익 에시드 및 (1S, 2R)-2-(4-메틸피페리디노메틸)사이클로헥실아민으로 동일한 방법으로 획득된다. 상기 획득된 벤자미드는 실리카에서 크로마토그래피에 의해서 염기로 정제되었고(용출액 CH₂Cl₂/CH₃CO₂C₂H₅/CH₃OH; 80/15/5) 에틸 에테르에서 결정제되었다.

용융점 : 145-147℃ ; IR(C=O) : 1635cm^-1(CHCl₃)

[α]_D=+68.1°(c=1, CH₃OH). T=20℃.

(1S, 2S)-2-트리플루오로아세테이트아미도-4-사이클로헥센-카르복실산 (V)

아미노 에테르 IV(6.4g)은 5일 동안 트리플루오로아세틱 안히드라이드(176㎖)로 처리되었다. 반응 혼합물은 진공 하에서 증발되었고 잔류물은 5% 수성 NaHCO₃용액에 취해졌다. 수계 상은 에틸 아세테이트로 추출하였고, 산성화하였고, 에틸 아세테이트로 추출하였다. 최종 유기 상은 소디움 술페이트로 건조하였고 용매를 진공 하에서 증발되어서 새산물 V의 2.4g를 제공하였다. [IR(C=O) : 1705cm^-1(KBr)

(1S, 2S)-1-트리플루오로아세트아미도-2-(4-메틸-피페리디노)카르보닐-4-사이클로헥센 (VI)

부가적인 정제없이 사용된 이전 단계에서 획득된 화합물(0.2g) 및 카르보닐 디이미다졸 (0.137g)은 THF(5㎖)에 용해되었다. 2시간 30동안 교반한 후에, 4-메틸피페리딘(0.084g)이 첨가되었고 반응 혼합물은 24시간동안 방치되었다. 용매는 감소된 압력에서 증발되었고, 잔류물은 디클로로메탄에 취해졌다. 유기 상은 포화된 수상 NaHCO₃용액으로 세정되었고 Na₂SO₄로 건조되었고 진공 하에서 증발되었다. 잔류물은 페트롤륨 에테르로부터 결정제되어서 소망의 생산물의 100mg을 제공하였다.

용융점 : 169-170℃ ; IR(C=O) : 1721, 1623cm^-1(CHCl₃)

[α]_D=-9.9°(c=1, CH₃OH). T=20℃.

(1S, 2S)-1-아미노-2-(4-메틸피페리디노)카르보닐-4-사이클로헥센 (VII)

이전 단계에서 획득된 생산물(1.3g)이 에탄올(30㎖)에 용해되어서 7시간 동안 역류에서 소디움 하이드록사이드(물 10㎖의 0.33g)의 수용액으로 처리되었다. 반응 혼합물은 1N HCl로 중성화한 후에, 용매는 진공 하에서 제거되었다. 잔유물은 2N HCl에서 취해졌고, 수계 상은 에틸 에테르로 추출되고, 2N NaOH로 pH 10까지 염기화되었고 에틸 아세테이트로 추출되었다. 유기 상은 Na₂SO₄로 건조되었고 진공하에서 증발되었다. 생산물(0.63g)은 오일의 형태로 획득되었고 부가적인 정제없이 사용되었다.

(1S, 2R)-2-(4-메틸피페리디노카르보닐)사이클로헥실아민 (VIII)

사이클로헥센 VI (0.57g)은 10% Pd/C(50mg)존재시에 메탄올(50㎖)에 용해되었다. 반응 혼합물은 20시간 동안 약한 수소압력 하에서 교반되었다. 촉매는 여과에 의해서 제거되었고 용매는 진공 하에서 제거되었다. 잔유물은 포화된 K₂CO₃용액에서 취해졌고 수계 상은 에틸 아세테이트로 추출되었다. 유기 상은 Na₂SO₄로 건조되었고 진공 하에서 휘발되어 감소된 유도체 VIII (0.46g)를 오일 상으로 제공하였다.

[α]_D=+82.8°(c=1, CH₃OH). T=20℃.

IR(C=O): 1616cm^-1(CHCl₃)

(1S, 2S)-1-(4-메틸피페리디노메틸)사이클로헥실아민 (IX)

아미드 유도체 VIII (0.42g)는 톨루엔 10㎖에 용해되었고 -60℃에서 8시간 동안 디이소부틸알루미늄 하이드라이드(1M 톨루엔용액의 9.4㎖)로 처리하였다. 반응 혼합물은 2N HCl을 첨가하여 수화되었다. 상기 수계 상은 톨루엔에서 분리되고 클로로포름으로 세척되고 2N NaOH의 첨가에 의해서 알칼리로 되었고 클로로포름으로 추출되었다. 유기 상은 Na₂SO₄로 건조되었고 진공 하에서 증발되어서 디아민(0.25g)을 제공하였다.

[α]_D=-12.1°(c=1, CH₃OH). T=20℃.

Claims

내장 유래의 통증의 치료를 의도한 약제 제조를 위한

배열에서 2R인, 다음 식의 화합물들,

또, 상기 화합물들을 포함하는 라세미체들,

및 이들의 약학적으로 허용 가능한 염들의 용도.

단,

R₁은 직선상, 분지상 또는 고리상 C₁-C₅알킬 라디칼,

R₂는 수소 원자, 직선상 또는 분지상의 C₁-C₅의 알킬 라디칼, 하이드록실 라디칼, C₁-C₅알콕시 라디칼 또는 C₁-C₂하이드록시알킬 라디칼, 및

R₃은 수소원자

또는 R₂및 R₃은 모두 C₁-C₅알칼 라디칼.
염증 대장염의 치료를 의도한 약제 제조를 위한

배열에서 2R인, 다음 식의 화합물들,

또, 상기 화합물들을 포함하는 라세미체들,

및 이들의 약학적으로 허용 가능한 염들의 용도.

단,

R₁은 직선상, 분지상 또는 고리상 C₁-C₅알킬 라디칼,

R₂는 수소 원자, 직선상 또는 분지상의 C₁-C₅의 알킬 라디칼, 하이드록실 라디칼, C₁-C₅알콕시 라디칼 또는 C₁-C₂하이드록시알킬 라디칼, 및

R₃은 수소원자

또는 R₂및 R₃은 모두 C₁-C₅알칼 라디칼.
청구항 1 또는 2에 있어서, 1R, 2R 배열을 가진 식 I의 화합물이 사용된 용도.
청구항 1 내지 3의 어느 하나의 항에 있어서, R₁이 메틸 또는 사이클로프로필메틸 라디칼, R₂가 메틸 라디칼 및 R₃이 수소원자인 식 I의 화합물이 사용된 용도.