JP5468866B2 - 皮膚外用剤 - Google Patents
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Description
このような事情により、本発明者らは鋭意検討した結果、キツネノマゴ科クロサンドラ属植物抽出物が優れた活性酸素消去作用、コラゲナーゼ阻害、ヒアルロニダーゼ阻害及びメラニン生成抑制作用をもち、安定性においても優れていることを見出した。さらに、その抽出物を含有する皮膚外用剤が、安全で安定であり、老化防止及び美白作用に優れていることを見出し、本発明を完成するに至った。
クロサンドラ・インフンディブリフォルミス(Crossandra infundibuliformis)の全草の乾燥物20gに精製水400mLを加え、95〜100℃で2時間抽出した後、濾過し、その濾液を濃縮し、凍結乾燥してクロサンドラ・インフンディブリフォルミスの熱水抽出物を2.2g得た。
クロサンドラ・インフンディブリフォルミス(Crossandra infundibuliformis)の全草の乾燥物100gに50%エタノール1Lを加え、常温で7日間抽出した後、濾過し、その濾液を濃縮乾固して、クロサンドラ・インフンディブリフォルミスの50%エタノール抽出物を4.2g得た。
クロサンドラ・インフンディブリフォルミス(Crossandra infundibuliformis)の全草の乾燥物100gにエタノール1Lを加え、常温で7日間抽出した後、濾過し、その濾液を濃縮乾固して、クロサンドラ・インフンディブリフォルミスのエタノール抽出物を3.9g得た。
クロサンドラ・インフンディブリフォルミス(Crossandra infundibuliformis)の全草の乾燥物20gに50%1,3−ブチレングリコール400mLを加え、常温で7日間抽出した後、濾過し、クロサンドラ・インフンディブリフォルミスの50%1,3−ブチレングリコール抽出物を380g得た。
クロサンドラ・プンゲンス(Crossandra Pungens)の全草の乾燥物20gに精製水400mLを加え、95〜100℃で2時間抽出した後、濾過し、その濾液を濃縮し、凍結乾燥してクロサンドラ・プンゲンスの熱水抽出物を2.5g得た。
処方 配合量(部)
1.クロサンドラ・インフンディブリフォルミスの熱水抽出物
(製造例1) 1.0
2.1,3−ブチレングリコール 8.0
3.グリセリン 2.0
4.キサンタンガム 0.02
5.クエン酸 0.01
6.クエン酸ナトリウム 0.1
7.エタノール 5.0
8.パラオキシ安息香酸メチル 0.1
9.ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油(40E.O.) 0.1
10.香料 適量
11.精製水にて全量を100とする
[製造方法]成分1〜6及び11と、成分7〜10をそれぞれ均一に溶解し、両者を混合し濾過して製品とする。
処方例1において、クロサンドラ・インフンディブリフォルミスの熱水抽出物を精製水に置き換えたものを従来の化粧水とした。
処方 配合量(部)
1.クロサンドラ・インフンディブリフォルミスの50%エタノール抽出物
(製造例2) 0.5
2.スクワラン 5.5
3.オリーブ油 3.0
4.ステアリン酸 2.0
5.ミツロウ 2.0
6.ミリスチン酸オクチルドデシル 3.5
7.ポリオキシエチレンセチルエーテル(20E.O.) 3.0
8.ベヘニルアルコール 1.5
9.モノステアリン酸グリセリン 2.5
10.香料 0.1
11.パラオキシ安息香酸メチル 0.2
12.パラオキシ安息香酸エチル 0.05
13.1,3−ブチレングリコール 8.5
14.精製水にて全量を100とする
[製造方法]成分2〜9を加熱溶解して混合し、70℃に保ち油相とする。成分1及び11〜14を加熱溶解して混合し、75℃に保ち水相とする。油相に水相を加えて乳化して、かき混ぜながら冷却し、45℃で成分10を加え、更に30℃まで冷却して製品とする。
処方例2において、クロサンドラ・インフンディブリフォルミスの50%エタノール抽出物を精製水に置き換えたものを従来のクリームとした。
処方 配合量(部)
1.クロサンドラ・プンゲンスの熱水抽出物(製造例5) 0.01
2.スクワラン 5.0
3.オリーブ油 5.0
4.ホホバ油 5.0
5.セタノール 1.5
6.モノステアリン酸グリセリン 2.0
7.ポリオキシエチレンセチルエーテル(20E.O.) 3.0
8.ポリオキシエチレンソルビタンモノオレエート(20E.O.) 2.0
9.香料 0.1
10.プロピレングリコール 1.0
11.グリセリン 2.0
12.パラオキシ安息香酸メチル 0.2
13.精製水にて全量を100とする
[製造方法]成分2〜8を加熱溶解して混合し、70℃に保ち油相とする。成分1及び10〜13を加熱溶解して混合し、75℃に保ち水相とする。油相に水相を加えて乳化して、かき混ぜながら冷却し、45℃で成分9を加え、更に30℃まで冷却して製品とする。
処方 配合量(部)
1.クロサンドラ・インフンディブリフォルミスのエタノール抽出物
(製造例3) 1.0
2.エタノール 5.0
3.パラオキシ安息香酸メチル 0.1
4.ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油(60E.O.) 0.1
5.香料 適量
6.1,3−ブチレングリコール 5.0
7.グリセリン 5.0
8.キサンタンガム 0.1
9.カルボキシビニルポリマー 0.2
10.水酸化カリウム 0.2
11.精製水にて全量を100とする
[製造方法]成分2〜5と、成分1及び6〜11をそれぞれ均一に溶解し、両者を混合して製品とする。
処方 配合量(部)
1.クロサンドラ・インフンディブリフォルミスの熱水抽出物
(製造例1) 1.0
2.クロサンドラ・インフンディブリフォルミスの
50%1,3−ブチレングリコール抽出物(製造例4) 0.1
3.ポリビニルアルコール 12.0
4.エタノール 5.0
5.1,3−ブチレングリコール 8.0
6.パラオキシ安息香酸メチル 0.2
7.ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油(20E.O.) 0.5
8.クエン酸 0.1
9.クエン酸ナトリウム 0.3
10.香料 適量
11.精製水にて全量を100とする
[製造方法]成分1〜11を均一に溶解し製品とする。
処方 配合量(部)
1.クロサンドラ・インフンディブリフォルミスの50%エタノール抽出物
(製造例2) 1.0
2.ステアリン酸 2.4
3.ポリオキシエチレンソルビタンモノステアレート(20E.O.) 1.0
4.ポリオキシエチレンセチルエーテル(20E.O.) 2.0
5.セタノール 1.0
6.液状ラノリン 2.0
7.流動パラフィン 3.0
8.ミリスチン酸イソプロピル 6.5
9.カルボキシメチルセルロースナトリウム 0.1
10.ベントナイト 0.5
11.プロピレングリコール 4.0
12.トリエタノールアミン 1.1
13.パラオキシ安息香酸メチル 0.2
14.二酸化チタン 8.0
15.タルク 4.0
16.ベンガラ 1.0
17.黄酸化鉄 2.0
18.香料 適量
19.精製水にて全量を100とする
[製造方法]成分2〜8を加熱溶解し、80℃に保ち油相とする。成分19に成分9をよく膨潤させ、続いて、成分1及び10〜13を加えて均一に混合する。これに粉砕機で粉砕混合した成分14〜17を加え、ホモミキサーで撹拌し75℃に保ち水相とする。この水相に油相をかき混ぜながら加え、冷却し、45℃で成分18を加え、かき混ぜながら30℃まで冷却して製品とする。
処方 配合量(部)
1.クロサンドラ・インフンディブリフォルミスの熱水抽出物
(製造例1) 5.0
2.炭酸水素ナトリウム 50.0
3.黄色202号(1) 適量
4.香料 適量
5.硫酸ナトリウムにて全量を100とする
[製造方法]成分1〜5を均一に混合し製品とする。
処方 配合量(部)
1.クロサンドラ・インフンディブリフォルミスの熱水抽出物
(製造例1) 0.01
2.クロサンドラ・インフンディブリフォルミスの
50%1,3−ブチレングリコール抽出物(製造例4) 0.5
3.ポリオキシエチレンセチルエーテル(30E.O.) 2.0
4.モノステアリン酸グリセリン 10.0
5.流動パラフィン 5.0
6.セタノール 6.0
7.パラオキシ安息香酸メチル 0.1
8.プロピレングリコール 10.0
9.精製水にて全量を100とする
[製造方法]成分3〜6を加熱溶解して混合し、70℃に保ち油相とする。成分1、2及び7〜9を加熱溶解して混合し、75℃に保ち水相とする。油相に水相を加えて乳化して、かき混ぜながら30℃まで冷却して製品とする。
フリーラジカル捕捉除去作用の評価を行った。陽性対照としてはアスコルビン酸を用いた。フリーラジカルのモデルとしては、安定なフリーラジカルであるα,α−ジフェニル−β−ピクリルヒドラジル(以下DPPHとする)を用い、試料と一定の割合で一定時間反応させ、減少するラジカルの量を波長517nmの吸光度の減少量から測定した。
試料は、製造例1,2,3及び5に記載の抽出物を用いた。
各試料を、最終濃度0.01mg/mL(アスコルビン酸は0.01mg/mL)となるように加えた0.1M酢酸緩衝液(pH5.5)2mLに無水エタノール2mL及び0.5mM DPPH無水エタノール溶液1mLを加えて反応液とした。また、油溶性の試料の場合は無水エタノール2mLに試料を加えて反応液とした。その後、37℃で30分間反応させ、水を対照として波長517nmの吸光度(A)を測定した。また、ブランクとして試料の代わりに精製水を用いて吸光度(B)を測定した。フリーラジカル捕捉除去率は、以下に示す式より算出した。
フリーラジカル捕捉除去率(%)=(1−A/B)×100
対数増殖期にあるB16マウスメラノーマをφ60mmdishに3×104個の細胞を播種し、最終濃度1μg/mLの試料を含むEagles’MEM(10%牛胎児血清含有)培地を加え、37℃、5%CO2の条件下にて培養した。培養5日後に細胞をdishから剥離し、細胞を超音波破砕した後、4NNaOHを加え60℃で2時間の処理を行い、分光光度計でO.D.475nmを測定した。尚、超音波処理後の細胞破砕液をLowryの方法(J.Biol.Chem.,193,265−275,1951)でタンパク定量し、タンパク量当りのメラニン量を比較することによって、メラニン生成抑制効果の指標とした。
製造例1,2,3及び5を試料として用い、コラゲナーゼ阻害作用を測定した。最終濃度が1mg/mLの試料液50μLに酵素液として50U/mLのコラゲナーゼ Type IV(シグマ製)水溶液を50μL加えた。基質溶液として0.39mg/mLのPz−ペプタイド(Pz−Pro−Leu−Gly−Pro−D−Arg−OH、シグマ製)を含む20mM塩化カルシウム入りトリス塩酸緩衝液(pH7.1)を400μL加えて混合し、37℃、30分反応させた後、25mMクエン酸0.5mLを加えて反応を停止させた。酢酸エチル2.5mLを加え、酢酸エチル層について320nmにおける吸光度を測定した。また、各試料の阻害作用は、次の式から求められる阻害率で算出した。なお、対照には試料の代わりに精製水を用い、ブランクとしてコラゲナーゼの代わりに20mM塩化カルシウム入りトリス塩酸緩衝液(pH7.1)を用いた。
阻害率(%)=〔1−(C−D)/(A−B)〕×100
A:対照の320nmにおける吸光度(O.D.320)
B:対照ブランクのO.D.320
C:試料のO.D.320
D:試料ブランクのO.D.320
製造例1,2,3及び5を試料として用い、ヒアルロニダーゼ阻害作用をMorgan−Elson法を応用した方法〔食品衛生学雑誌,31,3(1990)〕に準じて測定した。すなわち、最終濃度0.1mg/mLの試料液に0.1M酢酸バッファ(pH4.0)175μLを加え、さらにヒアルロニダーゼの酵素活性を250U/mL、ヒアルロン酸の濃度を0.4mg/mL、活性化剤のコンパウンド48/80を0.08mg/mLになるようにして全量を500μLに調整した後、ヒアルロニダーゼ反応を37℃で40分間実施した。反応後にp−ジメチルアミノベンズアルデヒド試薬を加えて発色させ、585nmにおける吸光度を測定した。また、各試料の阻害作用は、次の式から求められる阻害率で算出した。なお、対照には試料液の代わりに精製水を用い、ブランクとしてヒアルロニダーゼの代わりに0.1M酢酸バッファ(pH4.0)を用いた。
阻害率(%)=〔1−(C−D)/(A−B)〕×100
A:対照の585nmにおける吸光度(O.D.585)
B:対照ブランクのO.D.585
C:試料のO.D.585
D:試料ブランクのO.D.585
処方例1の化粧水、処方例2のクリーム、比較例1の従来の化粧水及び比較例2の従来のクリームを用いて、女性20人(22〜48才)を対象に1ヶ月間の使用試験を行った。使用後、肌のシワ、タルミの改善効果をアンケートにより判定した。
処方例1の化粧水、処方例2のクリーム、比較例1の従来の化粧水及び比較例2の従来のクリームを用いて、シミ、ソバカスに悩む女性20人(22〜48才)を対象に1ヶ月間の使用試験を行った。使用後、シミ、ソバカスの改善効果をアンケートにより判定した。
Claims (4)
- クロサンドラ・インフンディブリフォルミス(Crossandra infundibuliformis)の抽出物を含有することを特徴とする美白剤。
- クロサンドラ・インフンディブリフォルミス(Crossandra infundibuliformis)の抽出物を含有することを特徴とする抗酸化剤。
- クロサンドラ・インフンディブリフォルミス(Crossandra infundibuliformis)の抽出物を含有することを特徴とするコラゲナーゼ阻害剤。
- クロサンドラ・インフンディブリフォルミス(Crossandra infundibuliformis)の抽出物を含有することを特徴とするヒアルロニダーゼ阻害剤。
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