JP3437016B2 - バイオセンサおよびそれを用いた基質の定量方法 - Google Patents
バイオセンサおよびそれを用いた基質の定量方法Info
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- JP3437016B2 JP3437016B2 JP19489395A JP19489395A JP3437016B2 JP 3437016 B2 JP3437016 B2 JP 3437016B2 JP 19489395 A JP19489395 A JP 19489395A JP 19489395 A JP19489395 A JP 19489395A JP 3437016 B2 JP3437016 B2 JP 3437016B2
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Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】本発明は、試料中の基質につ
いて、迅速かつ高精度な定量を簡便に実施するためのバ
イオセンサおよび同バイオセンサを用いた基質の定量方
法に関する。
いて、迅速かつ高精度な定量を簡便に実施するためのバ
イオセンサおよび同バイオセンサを用いた基質の定量方
法に関する。
【０００２】
【従来の技術】基質の定量法の一例として、グルコ−ス
の定量法について説明する。電気化学的なグルコ−スの
定量法としては、グルコ−スオキシダ−ゼ（ＥＣ１．
１．３．４：以下ＧＯＤと略す）と酸素電極あるいは過
酸化水素電極とを組み合わせた方式が一般的に知られて
いる（例えば、鈴木周一編「バイオセンサ−」講談
社）。ＧＯＤは、酸素を電子受容体として基質であるβ
−Ｄ−グルコ−スをＤ−グルコノ−δ−ラクトンに選択
的に酸化する。この反応に伴い、酸素は過酸化水素に還
元される。この時の酸素消費量を酸素電極によって測定
するか、もしくは過酸化水素の生成量を過酸化水素電極
によって測定することでグルコ−スの定量が行われる。
の定量法について説明する。電気化学的なグルコ−スの
定量法としては、グルコ−スオキシダ−ゼ（ＥＣ１．
１．３．４：以下ＧＯＤと略す）と酸素電極あるいは過
酸化水素電極とを組み合わせた方式が一般的に知られて
いる（例えば、鈴木周一編「バイオセンサ−」講談
社）。ＧＯＤは、酸素を電子受容体として基質であるβ
−Ｄ−グルコ−スをＤ−グルコノ−δ−ラクトンに選択
的に酸化する。この反応に伴い、酸素は過酸化水素に還
元される。この時の酸素消費量を酸素電極によって測定
するか、もしくは過酸化水素の生成量を過酸化水素電極
によって測定することでグルコ−スの定量が行われる。
【０００３】しかしながら上記方法では、その反応過程
からも推測できるように、測定結果は溶存酸素濃度の影
響を大きく受け、酸素のない条件下では測定が不可能と
なる。そこで、酸素を電子受容体として用いず、フェリ
シアン化カリウム、フェロセン誘導体、キノン誘導体等
の有機化合物や金属錯体を電子受容体として用いる新し
いタイプのグルコ−スセンサが開発されてきた。このタ
イプのセンサでは、酵素反応の結果生じた電子受容体の
還元体を電極で酸化することにより、その酸化電流から
グルコ−ス濃度を求めることができる。
からも推測できるように、測定結果は溶存酸素濃度の影
響を大きく受け、酸素のない条件下では測定が不可能と
なる。そこで、酸素を電子受容体として用いず、フェリ
シアン化カリウム、フェロセン誘導体、キノン誘導体等
の有機化合物や金属錯体を電子受容体として用いる新し
いタイプのグルコ−スセンサが開発されてきた。このタ
イプのセンサでは、酵素反応の結果生じた電子受容体の
還元体を電極で酸化することにより、その酸化電流から
グルコ−ス濃度を求めることができる。
【０００４】さらに、このような電子受容体を酸素の代
わりに用いることで、既知量のＧＯＤと電子受容体を安
定な状態で正確に電極上に担持させることが可能となる
場合があり、この場合電極系と反応層を乾燥状態に近い
状態で一体化することができる。この技術に基づいた使
い捨て型グルコ−スセンサは、測定器に挿入されたセン
サチップに検体試料を導入するだけで容易にグルコ−ス
濃度を測定することができるので、近年多くの注目を集
めている。このような手法は、グルコ−スの定量評価だ
けに限らず、他の基質の定量評価にも応用可能であり、
現在多くの研究対象となっている。
わりに用いることで、既知量のＧＯＤと電子受容体を安
定な状態で正確に電極上に担持させることが可能となる
場合があり、この場合電極系と反応層を乾燥状態に近い
状態で一体化することができる。この技術に基づいた使
い捨て型グルコ−スセンサは、測定器に挿入されたセン
サチップに検体試料を導入するだけで容易にグルコ−ス
濃度を測定することができるので、近年多くの注目を集
めている。このような手法は、グルコ−スの定量評価だ
けに限らず、他の基質の定量評価にも応用可能であり、
現在多くの研究対象となっている。
【０００５】
【発明が解決しようとする課題】上記のように電子受容
体を用い、さらに電極系と反応層を一体化する技術によ
り、基質の簡便な電気化学的定量評価が可能となった。
また、三電極式の導入に伴い、さらに高精度な評価が可
能となってきた。しかしながら、三電極式使い捨て型セ
ンサにて定量を行う際、用いる参照極の電極材料および
作製方法の選定に起因して、測定結果に誤差およびばら
つきが生じることがあった。
体を用い、さらに電極系と反応層を一体化する技術によ
り、基質の簡便な電気化学的定量評価が可能となった。
また、三電極式の導入に伴い、さらに高精度な評価が可
能となってきた。しかしながら、三電極式使い捨て型セ
ンサにて定量を行う際、用いる参照極の電極材料および
作製方法の選定に起因して、測定結果に誤差およびばら
つきが生じることがあった。
【０００６】
【課題を解決するための手段】本発明は、絶縁性の基板
上に形成された作用極、対極および銀からなる参照極を
有する電極系と、少なくとも酵素を含む反応層とを具備
するバイオセンサを用いて、前記酵素と試料中の基質と
の反応に際しての物質濃度変化を、作用極に電位を印加
することで得られる電気化学的応答に基づいて検知する
ことにより、前記基質を定量する方法において、作用極
に電位を印加する前に、参照極にアノード電位を印加す
ることにより試料中に含まれる水溶性塩化物またはセン
サに備える水溶性塩化物と反応させて、参照極上に銀／
塩化銀電極を作製するものである。
上に形成された作用極、対極および銀からなる参照極を
有する電極系と、少なくとも酵素を含む反応層とを具備
するバイオセンサを用いて、前記酵素と試料中の基質と
の反応に際しての物質濃度変化を、作用極に電位を印加
することで得られる電気化学的応答に基づいて検知する
ことにより、前記基質を定量する方法において、作用極
に電位を印加する前に、参照極にアノード電位を印加す
ることにより試料中に含まれる水溶性塩化物またはセン
サに備える水溶性塩化物と反応させて、参照極上に銀／
塩化銀電極を作製するものである。
【０００７】また、ここに用いるバイオセンサは、絶縁
性の基板上に形成された作用極、対極および参照極を有
する電極系と、少なくとも酵素を含む反応層とを具備
し、参照極が銀からなり、反応層が水溶性塩化物を含ん
でいる。反応層は、電子受容体を含むことが好ましい。
また、反応層は、親水性高分子を含むことが好ましい。
性の基板上に形成された作用極、対極および参照極を有
する電極系と、少なくとも酵素を含む反応層とを具備
し、参照極が銀からなり、反応層が水溶性塩化物を含ん
でいる。反応層は、電子受容体を含むことが好ましい。
また、反応層は、親水性高分子を含むことが好ましい。
【０００８】三電極式使い捨て型センサの参照極にカー
ボン、銀、白金などの分極性電極を単独で導入する場
合、その電極界面で生ずる電極電位、すなわち基準とな
る電位は試料中に含まれるイオンの活量に大きく依存す
る。故に、試料中の溶存種、および濃度の違いによりそ
の電極電位が大きく変化する場合がある。そこで、本発
明では、理想非分極性電極として、通常よく用いられる
銀／塩化銀電極をセンサの参照極に導入することによ
り、参照極電位を安定させ、センサ応答特性を向上する
ものである。
ボン、銀、白金などの分極性電極を単独で導入する場
合、その電極界面で生ずる電極電位、すなわち基準とな
る電位は試料中に含まれるイオンの活量に大きく依存す
る。故に、試料中の溶存種、および濃度の違いによりそ
の電極電位が大きく変化する場合がある。そこで、本発
明では、理想非分極性電極として、通常よく用いられる
銀／塩化銀電極をセンサの参照極に導入することによ
り、参照極電位を安定させ、センサ応答特性を向上する
ものである。
【０００９】
【発明の実施の形態】以下、本発明の実施の形態を具体
例により説明する。 ［実施例１］定量法の一例として、グルコ−スの定量に
ついて説明する。本実施例において用いた電極系の構成
を図１に示す。ポリエチレンテレフタレ−トからなる絶
縁性の基板１上に、スクリ−ン印刷により銀ペ−ストを
印刷しリ−ド２、３、および４を形成した。次に、樹脂
バインダ−を含む導電性カ−ボンペ−ストを印刷して作
用極５、および対極８を形成した。作用極５は、リ−ド
２と接触しており、対極８はリード４と接触している。
次に、絶縁性ペ−ストを印刷して絶縁層６を形成した。
絶縁層６は、作用極５の外周部を覆っており、これによ
って作用極５の露出部分の面積を一定に保っている。ま
た、リード３の先端を露出させることにより、参照極７
を形成した。さらに、絶縁層６は、リ−ド２、３、およ
び４を部分的に覆っている。
例により説明する。 ［実施例１］定量法の一例として、グルコ−スの定量に
ついて説明する。本実施例において用いた電極系の構成
を図１に示す。ポリエチレンテレフタレ−トからなる絶
縁性の基板１上に、スクリ−ン印刷により銀ペ−ストを
印刷しリ−ド２、３、および４を形成した。次に、樹脂
バインダ−を含む導電性カ−ボンペ−ストを印刷して作
用極５、および対極８を形成した。作用極５は、リ−ド
２と接触しており、対極８はリード４と接触している。
次に、絶縁性ペ−ストを印刷して絶縁層６を形成した。
絶縁層６は、作用極５の外周部を覆っており、これによ
って作用極５の露出部分の面積を一定に保っている。ま
た、リード３の先端を露出させることにより、参照極７
を形成した。さらに、絶縁層６は、リ−ド２、３、およ
び４を部分的に覆っている。
【００１０】次に、前記電極系上にカルボキシメチルセ
ルロース（以下ＣＭＣと略す）の水溶液を滴下し、乾燥
させることでＣＭＣ層を形成した。さらに、前記電極系
上に、酵素としてＧＯＤ、電子受容体としてフェリシア
ン化カリウムを含有する水溶液を滴下し、乾燥させるこ
とで反応層を形成した。次に、反応層上に試料液の供給
をより一層円滑にするために、レシチンの有機溶媒溶
液、例えばトルエン溶液を試料供給部（センサ先端部）
から反応層上にわたって広げ、乾燥させることでレシチ
ン層を形成した。次いで、カバ−９およびスペ−サ１０
を図１中、一点鎖線で示すような位置関係をもって基板
１に接着してグルコ−スセンサを作製した。
ルロース（以下ＣＭＣと略す）の水溶液を滴下し、乾燥
させることでＣＭＣ層を形成した。さらに、前記電極系
上に、酵素としてＧＯＤ、電子受容体としてフェリシア
ン化カリウムを含有する水溶液を滴下し、乾燥させるこ
とで反応層を形成した。次に、反応層上に試料液の供給
をより一層円滑にするために、レシチンの有機溶媒溶
液、例えばトルエン溶液を試料供給部（センサ先端部）
から反応層上にわたって広げ、乾燥させることでレシチ
ン層を形成した。次いで、カバ−９およびスペ−サ１０
を図１中、一点鎖線で示すような位置関係をもって基板
１に接着してグルコ−スセンサを作製した。
【００１１】このセンサに、試料液として人血液３μｌ
を試料供給孔１１より供給した。試料液は、空気孔１２
部分まで達し、電極系上の反応層が溶解した。試料液の
供給と同時に、参照極７に、対極８を基準にして一定の
アノード電位を印加した。これにより参照極の銀の表面
には、人血液中に含まれる塩素イオンと反応して生成し
た塩化銀が析出し、銀／塩化銀電極が形成される。所定
時間経過後、参照極７への電位印加を停止した。さらに
所定時間経過後、作用極５に参照極７を基準にして一定
の電位を印加し、５秒後の電流値を測定した。フェリシ
アン化イオン、ＧＯＤ、および人血液中のグルコ−スが
反応し、グルコースがグルコノラクトンに酸化され、フ
ェリシアン化イオンがフェロシアン化イオンに還元され
る。このフェロシアン化イオンを作用極５にて酸化する
ことで電流応答が得られる。その結果、試料液中のグル
コ−ス濃度に依存した電流応答が得られた。この応答の
変動係数は２．４％であった。一方、参照極７に塩化銀
を析出させないで測定した比較例では４。０％であっ
た。このように、本発明によれば、より小さい変動係
数、すなわち、センサ応答のばらつきの減少が確認され
た。
を試料供給孔１１より供給した。試料液は、空気孔１２
部分まで達し、電極系上の反応層が溶解した。試料液の
供給と同時に、参照極７に、対極８を基準にして一定の
アノード電位を印加した。これにより参照極の銀の表面
には、人血液中に含まれる塩素イオンと反応して生成し
た塩化銀が析出し、銀／塩化銀電極が形成される。所定
時間経過後、参照極７への電位印加を停止した。さらに
所定時間経過後、作用極５に参照極７を基準にして一定
の電位を印加し、５秒後の電流値を測定した。フェリシ
アン化イオン、ＧＯＤ、および人血液中のグルコ−スが
反応し、グルコースがグルコノラクトンに酸化され、フ
ェリシアン化イオンがフェロシアン化イオンに還元され
る。このフェロシアン化イオンを作用極５にて酸化する
ことで電流応答が得られる。その結果、試料液中のグル
コ−ス濃度に依存した電流応答が得られた。この応答の
変動係数は２．４％であった。一方、参照極７に塩化銀
を析出させないで測定した比較例では４。０％であっ
た。このように、本発明によれば、より小さい変動係
数、すなわち、センサ応答のばらつきの減少が確認され
た。
【００１２】［実施例２］実施例１と同様に、絶縁性基
板上に電極系を作製した。次に、前記電極系上にＣＭＣ
の水溶液を滴下し、乾燥させることでＣＭＣ層を形成し
た。さらに、前記電極系上に、酵素としてＧＯＤ、塩化
物として塩化ナトリウムをそれぞれ含有する水溶液を滴
下し、乾燥させることで反応層を形成した。次に、反応
層上に試料液の供給をより一層円滑にするために、レシ
チンの有機溶媒溶液、例えばトルエン溶液を試料供給部
（センサ先端部）から反応層上にわたって広げ、乾燥さ
せることでレシチン層を形成した後、カバ−９およびス
ペ−サ１０を図１中、一点鎖線で示すような位置関係を
もって基板に接着してグルコ−スセンサを作製した。
板上に電極系を作製した。次に、前記電極系上にＣＭＣ
の水溶液を滴下し、乾燥させることでＣＭＣ層を形成し
た。さらに、前記電極系上に、酵素としてＧＯＤ、塩化
物として塩化ナトリウムをそれぞれ含有する水溶液を滴
下し、乾燥させることで反応層を形成した。次に、反応
層上に試料液の供給をより一層円滑にするために、レシ
チンの有機溶媒溶液、例えばトルエン溶液を試料供給部
（センサ先端部）から反応層上にわたって広げ、乾燥さ
せることでレシチン層を形成した後、カバ−９およびス
ペ−サ１０を図１中、一点鎖線で示すような位置関係を
もって基板に接着してグルコ−スセンサを作製した。
【００１３】このセンサに試料液としてグルコース水溶
液３μｌを試料供給孔１１より供給した。試料液は空気
孔１２部分まで達し、電極系上の反応層が溶解した。試
料液の供給と同時に、参照極７に、対極８を基準にして
一定のアノード電位を印加した。これにより反応層から
溶出した塩素イオンと銀が反応して塩化銀が析出し、銀
／塩化銀電極が参照極７上に形成される。所定時間経過
後、参照極７への電位印加を停止した。さらに所定時間
経過後、作用極５に参照極７を基準にして一定の電位を
印加し、５秒後の電流値を測定した。ＧＯＤ、酸素およ
びグルコ−スが反応し、グルコースがグルコノラクトン
に酸化され、酸素が過酸化水素に還元される。この過酸
化水素を作用極５にて酸化することで電流応答が得られ
る。その結果、試料液中のグルコ−ス濃度に依存した電
流応答が得られた。
液３μｌを試料供給孔１１より供給した。試料液は空気
孔１２部分まで達し、電極系上の反応層が溶解した。試
料液の供給と同時に、参照極７に、対極８を基準にして
一定のアノード電位を印加した。これにより反応層から
溶出した塩素イオンと銀が反応して塩化銀が析出し、銀
／塩化銀電極が参照極７上に形成される。所定時間経過
後、参照極７への電位印加を停止した。さらに所定時間
経過後、作用極５に参照極７を基準にして一定の電位を
印加し、５秒後の電流値を測定した。ＧＯＤ、酸素およ
びグルコ−スが反応し、グルコースがグルコノラクトン
に酸化され、酸素が過酸化水素に還元される。この過酸
化水素を作用極５にて酸化することで電流応答が得られ
る。その結果、試料液中のグルコ−ス濃度に依存した電
流応答が得られた。
【００１４】この応答の変動係数は２．４％であった。
一方、参照極７に塩化銀を析出させないで測定した比較
例では４．０％であった。このように反応層に塩化物と
して塩化ナトリウムを含ませることによって、試料液に
塩化物を含まない場合においても実施例１と同様の測定
を行うことができた。また、塩化ナトリウムをカバーも
しくは基板上に担持した場合においても、同様の結果が
得られた。
一方、参照極７に塩化銀を析出させないで測定した比較
例では４．０％であった。このように反応層に塩化物と
して塩化ナトリウムを含ませることによって、試料液に
塩化物を含まない場合においても実施例１と同様の測定
を行うことができた。また、塩化ナトリウムをカバーも
しくは基板上に担持した場合においても、同様の結果が
得られた。
【００１５】上記実施例では、ＣＭＣ層を有するセンサ
について記述したが、ＣＭＣ層を除いたセンサにおいて
も、グルコース濃度に依存するセンサ応答が得られた。
また親水性高分子としてＣＭＣを用いたが、これに限定
されることはなく、ポリリジン等のポリアミノ酸、ポリ
ビニルアルコール、ポリスチレンスルホン酸なども使用
できる。また、電子受容体としてフェリシアン化カリウ
ムを用いたセンサについて記述したが、フェリシアン化
カリウム以外に、ｐ−ベンゾキノン、フェナジンメトサ
ルフェート、メチレンブルー、フェロセン誘導体なども
使用できる。酸素を電子受容体とした場合にもセンサ応
答が得られる。
について記述したが、ＣＭＣ層を除いたセンサにおいて
も、グルコース濃度に依存するセンサ応答が得られた。
また親水性高分子としてＣＭＣを用いたが、これに限定
されることはなく、ポリリジン等のポリアミノ酸、ポリ
ビニルアルコール、ポリスチレンスルホン酸なども使用
できる。また、電子受容体としてフェリシアン化カリウ
ムを用いたセンサについて記述したが、フェリシアン化
カリウム以外に、ｐ−ベンゾキノン、フェナジンメトサ
ルフェート、メチレンブルー、フェロセン誘導体なども
使用できる。酸素を電子受容体とした場合にもセンサ応
答が得られる。
【００１６】また、酵素としては、上記実施例に示した
グルコースオキシダーゼ以外に、乳酸オキシダーゼ、コ
レステロールオキシダーゼ、キサンチンオキシダーゼな
ども使用できる。一方、添加する塩化物としては、実施
例に示した塩化ナトリウム以外に、塩化カリウム、塩化
リチウム、塩化カルシウムなども用いることができる。
上記実施例では、電極系の一例を図１に示したが、電
極、リードの配置はこれらに限定されるものではない。
さらに、上記実施例ではカバー部材を接着させたセンサ
について述べたが、これに限定されることはなく、カバ
ー部材がないセンサにおいても、グルコース濃度に依存
するセンサ応答が得られる。上記実施例においては、試
料液に反応層を溶解させる方式について示したが、これ
に制限されることはなく、固定化によって試料液に不溶
化させた場合にも適用することができる。
グルコースオキシダーゼ以外に、乳酸オキシダーゼ、コ
レステロールオキシダーゼ、キサンチンオキシダーゼな
ども使用できる。一方、添加する塩化物としては、実施
例に示した塩化ナトリウム以外に、塩化カリウム、塩化
リチウム、塩化カルシウムなども用いることができる。
上記実施例では、電極系の一例を図１に示したが、電
極、リードの配置はこれらに限定されるものではない。
さらに、上記実施例ではカバー部材を接着させたセンサ
について述べたが、これに限定されることはなく、カバ
ー部材がないセンサにおいても、グルコース濃度に依存
するセンサ応答が得られる。上記実施例においては、試
料液に反応層を溶解させる方式について示したが、これ
に制限されることはなく、固定化によって試料液に不溶
化させた場合にも適用することができる。
【００１７】
【発明の効果】以上のように本発明によると、高い信頼
性を有する基質の定量を行なうことができる。
性を有する基質の定量を行なうことができる。
【図１】本発明の一実施例に用いたグルコ−スセンサの
反応層を除いた分解斜視図である。
反応層を除いた分解斜視図である。
１ 絶縁性の基板
２、３、４ リ−ド
５ 作用極
６ 絶縁層
７ 参照極
８ 対極
９ カバー
１０ スペーサ
１１ 試料供給孔
１２ 空気孔
─────────────────────────────────────────────────────
フロントページの続き
(56)参考文献 特開 平６−174679（ＪＰ，Ａ)
特開 平６−130023（ＪＰ，Ａ)
特開 平４−319658（ＪＰ，Ａ)
特開 平２−19758（ＪＰ，Ａ)
特開 平８−50112（ＪＰ，Ａ)
(58)調査した分野(Int.Cl.7，ＤＢ名)
G01N 27/327
G01N 27/30 311
G01N 27/416
Claims (4)
- 【請求項１】 絶縁性の基板上に形成された作用極、対
極および参照極を有する電極系と、少なくとも酵素を含
む反応層とを具備し、前記酵素と試料中の基質との反応
に際しての物質濃度変化を、前記作用極に電位を印加す
ることで得られる電気化学的応答に基づいて、前記電極
系で電気化学的に検知するバイオセンサにおいて、前記
参照極が銀からなり、前記反応層が水溶性塩化物を含
み、前記作用極に電位を印加する前に、前記参照極にア
ノード電位を印加することにより、前記参照極と前記反
応層に備える水溶性塩化物とが反応して、前記参照極上
に銀／塩化銀電極が作製されることを特徴とするバイオ
センサ。 - 【請求項２】 反応層が、電子受容体を含む請求項１に
記載のバイオセンサ。 - 【請求項３】 反応層が、親水性高分子を含む請求項１
または２に記載のバイオセンサ。 - 【請求項４】 絶縁性の基板上に形成された作用極、対
極および銀からなる参照極を有する電極系と、少なくと
も酵素を含む反応層とを具備するバイオセンサを用い
て、前記酵素と試料中の基質との反応に際しての物質濃
度変化を、作用極に電位を印加することで得られる電気
化学的応答に基づいて検知することにより、前記基質を
定量する方法において、作用極に電位を印加する前に、
参照極にアノード電位を印加することにより試料中に含
まれる水溶性塩化物またはセンサに備える水溶性塩化物
と反応させて、参照極上に銀／塩化銀電極を作製する工
程を設けたことを特徴とする基質の定量方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP19489395A JP3437016B2 (ja) | 1995-07-31 | 1995-07-31 | バイオセンサおよびそれを用いた基質の定量方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP19489395A JP3437016B2 (ja) | 1995-07-31 | 1995-07-31 | バイオセンサおよびそれを用いた基質の定量方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH0943189A JPH0943189A (ja) | 1997-02-14 |
| JP3437016B2 true JP3437016B2 (ja) | 2003-08-18 |
Family
ID=16332088
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP19489395A Expired - Fee Related JP3437016B2 (ja) | 1995-07-31 | 1995-07-31 | バイオセンサおよびそれを用いた基質の定量方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP3437016B2 (ja) |
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| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
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