JP2004513901A - New compound - Google Patents

Abstract

The present invention provides a novel compound of formula (I) for use in the treatment of a disease in a mammal in which inappropriate, excessive or undesired angiogenesis has occurred and / or excessive Tie2 receptor activity has occurred. For compounds.

Description

［式中、
Ｖは、ＣＨまたはＮであり；
Ｘは、Ｏ、ＣＨ_２、ＳまたはＮＨであり；
ｎは、０、または１〜４の値を有する整数であり；
ｔは、０、または１〜１０の値を有する整数であり；
Ａｒは、置換されていてもよい、ナフタ−２−イル、ナフタ−１−イル、二環式もしくは三環式炭素環、二環式もしくは三環式芳香族複素環、または二環式もしくは三環式複素環であり；
Ｑは、水素、（ＣＲ^１３Ｒ^１４）_ｔＯＲ^９、（ＣＲ^１３Ｒ^１４）_ｔＯＲ^１１、Ｃ_１−１０アルキル、ハロ置換Ｃ_１−１０アルキル、Ｃ_２−１０アルケニル、Ｃ_２−１０アルキニル、Ｃ_３−７シクロアルキル、Ｃ_３−７シクロアルキルＣ_１−１０アルキル、Ｃ_５−７シクロアルケニル、Ｃ_５−７シクロアルケニルＣ_１−１０アルキル、アリール、アリールＣ_１−１０アルキル、ヘテロアリール、ヘテロアリールＣ_１−１０アルキル、ヘテロサイクリル、ヘテロサイクリルＣ_１−１０アルキル、（ＣＲ^１３Ｒ^１４）_ｔＳ（Ｏ）_ｍＲ^８、（ＣＲ^１３Ｒ^１４）_ｔＮＨＳ（Ｏ）_２Ｒ^８、（ＣＲ^１３Ｒ^１４）_ｔＮＲ^１０Ｒ^１１、（ＣＲ^１３Ｒ^１４）_ｔＮＯ_２、（ＣＲ^１３Ｒ^１４）_ｔＣＮ、（ＣＲ^１３Ｒ^１４）_ｔＳ（Ｏ）_２ＮＲ^１０Ｒ^１１、（ＣＲ^１３Ｒ^１４）_ｔＣ（Ｚ）Ｒ^１１、（ＣＲ^１３Ｒ^１４）_ｔＯＣ（Ｚ）Ｒ^１１、（ＣＲ^１３Ｒ^１４）_ｔＣ（Ｚ）ＯＲ^１１、（ＣＲ^１３Ｒ^１４）_ｔＣ（Ｚ）ＮＲ^１０Ｒ^１１、（ＣＲ^１３Ｒ^１４）_ｔＣ（Ｚ）ＮＲ^１１ＯＲ^９、（ＣＲ^１３Ｒ^１４）_ｔＮＲ^１０Ｃ（Ｚ）Ｒ^１１、（ＣＲ^１３Ｒ^１４）_ｔＮＲ^１０Ｃ（Ｚ）ＮＲ^１０Ｒ^１１、（ＣＲ^１３Ｒ^１４）_ｔＮ（ＯＲ^１０）Ｃ（Ｚ）ＮＲ^１０Ｒ^１１、（ＣＲ^１３Ｒ^１４）_ｔＮ（ＯＲ^１０）Ｃ（Ｚ）Ｒ^１１、（ＣＲ^１３Ｒ^１４）_ｔＣ（＝ＮＯＲ^１０）Ｒ^１１、（ＣＲ^１３Ｒ^１４）_ｔＮＲ^１０Ｃ（＝ＮＲ^１５）ＮＲ^１０Ｒ^１１、（ＣＲ^１３Ｒ^１４）_ｔＯＣ（Ｚ）ＮＲ^１０Ｒ^１１、（ＣＲ^１３Ｒ^１４）_ｔＮＲ^１０Ｃ（Ｚ）ＮＲ^１０Ｒ^１１、または（ＣＲ^１３Ｒ^１４）_ｔＮＲ^１０Ｃ（Ｚ）ＯＲ^１０であり；ここで、シクロアルキル、シクロアルキルアルキル、アリール、アリールアルキル、ヘテロアリール、ヘテロアリールアルキル、ヘテロサイクリックおよびヘテロサイクリックアルキル基は置換されていてもよく；
Ｒ^１は、水素、Ｘ−Ｒ^４、ハロゲン、ヒドロキシ、置換されていてもよいＣ_１−６アルキル、置換されていてもよいＣ_１−６アルキルスルフィニル、ＣＨ_２ＯＲ^５、アミノ、モノもしくはジ−Ｃ_１−６アルキルアミノ、Ｎ（Ｒ^６）Ｃ（Ｏ）Ｒ^７、Ｎ（Ｒ^６）Ｓ（Ｏ）_２Ｒ^８、またはＯ、ＳおよびＮＲ^９から選択される付加的ヘテロ原子を含有していてもよい５〜７員Ｎ−ヘテロサイクリル環であり；
Ｒ^２およびＲ^３は、独立して、置換されていてもよいＣ_１−６アルキルを表すか、またはＲ^２とＲ^３はそれらと結合している炭素原子と一緒になって置換されていてもよいＣ_３−７シクロアルキルもしくはＣ_５−７シクロアルケニル環を形成するか、またはＲ^２とＲ^３はそれらと結合している炭素原子と一緒になってＮ、ＯおよびＳから選択されるヘテロ原子３個までを含有する置換されていてもよい５〜７員ヘテロサイクリル環を形成し；
Ｒ^４は、独立して、Ｃ_１−６アルキル、アリール、アリールＣ_１−６アルキル、ヘテロサイクリル、ヘテロサイクリルＣ_１−６アルキル、ヘテロアリール、またはヘテロアリールＣ_１−６アルキル基であり、ここで、これらの基はいずれも置換されていてもよく；
Ｒ^５は、水素、Ｃ（Ｚ）Ｒ^１０または置換されていてもよいＣ_１−６アルキル、置換されていてもよいアリール、置換されていてもよいアリールＣ_１−６アルキル、またはＳ（Ｏ）_２Ｒ^８であり；
Ｒ^６は、水素またはＣ_１−６アルキルであり；
Ｒ^７は、水素、Ｃ_１−６アルキル、Ｃ_３−７シクロアルキル、アリール、アリールＣ_１−６アルキル、ヘテロアリール、ヘテロアリールＣ_１−６アルキル、ヘテロサイクリル、またはヘテロサイクリルＣ_１−６アルキルであり；
Ｒ^８は、Ｃ_１−６アルキル、Ｃ_３−７シクロアルキル、アリール、アリールＣ_１−６アルキル、ヘテロアリール、ヘテロアリールＣ_１−６アルキル、ヘテロサイクリル、またはヘテロサイクリルＣ_１−６アルキルであり；
Ｒ^９は、水素、Ｃ_１−４アルキル、Ｃ_３−７シクロアルキルまたはアリールであり；
Ｒ^１０は、水素、Ｃ_１−６アルキル、Ｃ_３−７シクロアルキル、Ｃ_３−７シクロアルキルＣ_１−６アルキル、アリール、アリールＣ_１−６アルキル、ヘテロサイクリル、ヘテロサイクリルＣ_１−６アルキル、ヘテロアリールおよびヘテロアリールＣ_１−６アルキルから選択され、これらはいずれも置換されていてもよく；
Ｒ^１３およびＲ^１４は、独立して、水素、Ｃ_１−６アルキル、Ｃ_３−７シクロアルキル、Ｃ_３−７シクロアルキルＣ_１−６アルキル、アリール、アリールＣ_１−６アルキル、ヘテロサイクリル、ヘテロサイクリルＣ_１−６アルキル、ヘテロアリール、またはヘテロアリールＣ_１−６アルキルであるか（これらはいずれも置換されていてもよい）；またはＲ^１１とＲ^１２はそれらと結合している窒素と一緒になって、Ｏ、Ｓ、またはＮＲ^９から選択される付加的ヘテロ原子を含有していてもよい５〜７員複素環を形成し；
Ｒ^１５は、水素、シアノ、Ｃ_１−４アルキル、Ｃ_３−７シクロアルキルまたはアリールであり；
Ｚは、酸素または硫黄である］
で示される新規化合物またはその医薬上許容される塩を提供する。
【００１２】
（発明の詳細な説明）
本発明は、Ｔｉｅ２キナーゼを阻害することができる新規化合物、および過剰なまたは不適当な血管形成により引き起こされる慢性炎症性または増殖性または血管形成性疾患の治療を必要とする哺乳類におけるかかる治療における血管形成の阻害のためのこれらの化合物の使用に関する。
【００１３】
式（Ｉ）で示される化合物において、Ｖは、好適には、ＣＨまたはＮであり、好ましくは、炭素である。
【００１４】
好適には、ピリジルまたはピリミジン環は、Ｒ^１基により独立して１〜２回、独立して置換されていてもよい。
【００１５】
好適には、Ｒ^１は、独立して、水素、Ｘ−Ｒ^４、ハロゲン、ヒドロキシ、置換されていてもよいＣ_１−６アルキル、置換されていてもよいＣ_１−６アルキルスルフィニル、ＣＨ_２ＯＲ^５、アミノ、モノもしくはジ−Ｃ_１−６アルキルアミノ、Ｎ（Ｒ^６）Ｃ（Ｏ）Ｒ^７、Ｎ（Ｒ^６）Ｓ（Ｏ）_２Ｒ^８、またはＯ、ＳおよびＮＲ^９から選択される付加的ヘテロ原子を含有していてもよい５〜７員Ｎ−ヘテロサイクリル環から選択される。好ましくは、ピリジルまたはピリミジンは２位が置換されている。好ましくは、Ｒ^１は、水素またはＸ−Ｒ^４である。
【００１６】
Ｘは、好適には、Ｏ、ＣＨ_２、ＳまたはＮＨである。好ましくは、Ｘは、酸素または窒素である。
【００１７】
Ｒ^４は、独立して、Ｃ_１−６アルキル、アリール、アリールＣ_１−６アルキル、ヘテロサイクリル、ヘテロサイクリルＣ_１−６アルキル、ヘテロアリール、またはヘテロアリールＣ_１−６アルキル基であり、ここで、これらの基はいずれも置換されていてもよい。好ましくは、Ｒ^４は、置換されていてもよいアルキル、アリール、アリールアルキル、またはヘテロサイクリックアルキル基である。
【００１８】
Ｒ^４がアリールである場合、好ましくは、置換されていてもよいフェニルである。Ｒ^４がアリールアルキルである場合、好ましくは、置換されていてもよいベンジルまたはフェネチルである。
【００１９】
Ｒ^４がヘテロアリールまたはヘテロアリールＣ_１−６アルキル基である場合、それは以下に定義するとおりである。好ましくは、置換されていてもよいピロール、キノリン、イソキノリン、ピリジン、ピリミジン、オキサゾール、チアゾール、チアジアゾール、トリアゾール、イミダゾール、ベンゾイミダゾール、イソオキサゾール、チオフェン、ベンゾチオフェン、フラン、ベンゾフラン、ピラゾール、ピラン、キナゾリニル、ピリダジン、ピラジン、ウラシル、オキサジアゾール、オキサチアジアゾール、イソチアゾール、テトラゾール、およびインダゾールである。
【００２０】
Ｒ^４がヘテロサイクリル、またはヘテロサイクリルＣ_１−６アルキルである場合、それは以下に定義するとおりである。好ましくは、置換されていてもよいテトラヒドロピロール、テトラヒドロピラン、テトラヒドロフラン、テトラヒドロチオフェン（硫黄部分の酸化型を包含する）、ピロリジン、ピペリジン、ピペラジン、モルホリン、チオモルホリン（硫黄部分の酸化型を包含する）、イミダゾリジンおよびピラゾリジン環である。
【００２１】
これらのＲ^４基は、ハロゲン；Ｃ_１−４アルキル、例えば、メチル、エチル、プロピル、イソプロピルもしくはｔ−ブチル；ハロ置換アルキル、例えば、ＣＦ_３；ヒドロキシ；ヒドロキシ置換Ｃ_１−４アルキル；Ｃ_１−４アルコキシ、例えば、メトキシもしくはエトキシ；Ｓ（Ｏ）_ｍアルキルおよびＳ（Ｏ）_ｍアリール（ここで、ｍは、０、１または２である）；Ｃ（Ｏ）ＯＲ^１１、例えば、Ｃ（Ｏ）Ｃ_１−６アルキルもしくはＣ（Ｏ）ＯＨ基；Ｃ（Ｏ）；Ｃ（Ｏ）Ｒ^１１；ＯＣ（Ｏ）Ｒ^８；ケタールもしくはジオキシアルキレン架橋におけるようなＯ−（ＣＨ_２）_ｓ−Ｏ−（ｓは、１〜５の値を有する数である）；アミノ；モノ−およびジ−Ｃ_１−６アルキル置換アミノ；Ｎ（Ｒ^１０）Ｃ（Ｏ）Ｒ^７；Ｃ（Ｏ）ＮＲ^１０Ｒ^１１；シアノ；ニトロ；または酸素、硫黄もしくはＮＲ^９から選択される付加的ヘテロ原子を含有していてもよい５〜７員Ｎ−ヘテロサイクリル環；置換されていてもよいアリール、例えば、フェニル；置換されていてもよいアリールＣ_１−６アルキル、例えば、ベンジルもしくはフェネチル；アリールオキシ、例えば、フェノキシ；またはアリールＣ_１−６アルキルオキシ、例えば、ベンジルオキシで独立して１回またはそれ以上、好ましくは、１〜３回置換されていてもよい；ここで、これらのアリールおよびアリールアルキル基自体が、ハロゲン、Ｃ_１−６アルキル、アルコキシ、Ｓ（Ｏ）_ｍアルキル、アミノ、またはモノ−およびジ−Ｃ_１−６アルキル置換アミノで置換されていてもよい。
【００２２】
好ましくは、Ｒ^４基は、アミノ、モノ−またはジ−Ｃ_１−６アルキル置換アミノ、ヘテロサイクリックアルキル環、より好ましくは、酸素、硫黄もしくはＮＲ^９から選択される付加的ヘテロ原子を含有していてもよい５〜７員Ｎ−ヘテロサイクリル（アルキル）環、例えば、モルホリノ、ピロリジン、ピペラジン、ピペリジン、またはピロリジノンで置換されている。
【００２３】
好適には、Ｒ^２およびＲ^３は、独立して、置換されていてもよいＣ_１−６アルキルを表すか、またはＲ^２とＲ^３がそれらと結合している炭素原子と一緒になって置換されていてもよいＣ_３−７シクロアルキルまたはＣ_５−７シクロアルケニル環を形成するか、またはＲ^２とＲ^３がそれらと結合している炭素原子と一緒になってＮ、ＯおよびＳから選択されるヘテロ原子３個までを含有する、置換されていてもよい５〜７員ヘテロサイクリル環を形成する。好ましくは、Ｒ^２およびＲ^３は、独立して、置換されていてもよいＣ_１−６アルキルを表す。
【００２４】
好適には、ｎは、０、１、２、３または４である。好ましくは、ｎは１である。
【００２５】
好適には、Ｒ^１１は、水素、Ｃ_１−６アルキル、Ｃ_３−７シクロアルキル、Ｃ_３−７シクロアルキルＣ_１−６アルキル、アリール、アリールＣ_１−６アルキル、ヘテロサイクリル、ヘテロサイクリルＣ_１−６アルキル、ヘテロアリール、またはヘテロアリールＣ_１−６アルキルであるか（これらはいずれも置換されていてもよい）；またはＲ^１０とＲ^１１はそれらと結合している窒素と一緒になってＯ、ＳまたはＮＲ^９から選択される付加的ヘテロ原子を含有していてもよい５〜７員複素環を形成する。
【００２６】
好適には、Ｒ^１３およびＲ^１４は、独立して、水素、Ｃ_１−６アルキル、Ｃ_３−７シクロアルキル、Ｃ_３−７シクロアルキルＣ_１−６アルキル、アリール、アリールＣ_１−６アルキル、ヘテロサイクリル、ヘテロサイクリルＣ_１−６アルキル、ヘテロアリール、またはヘテロアリールＣ_１−６アルキルであるか（これらはいずれも置換されていてもよい）；またはＲ^１１とＲ^１２はそれらと結合している窒素と一緒になってＯ、ＳもしくはＮＲ^９から選択される付加的ヘテロ原子を含有していてもよい５〜７員複素環を形成する。
【００２７】
好適には、Ｒ^１２は、水素、Ｃ_１−６アルキル、Ｃ_３−７シクロアルキル、Ｃ_３−７シクロアルキルＣ_１−６アルキル、ヘテロサイクリル、ヘテロサイクリルＣ_１−６アルキル、アリール、アリールＣ_１−６アルキル、ヘテロアリールまたはヘテロアリールＣ_１−６アルキルから選択され、これらはいずれも置換されていてもよい。Ｒ^１０基およびＲ^１２基は、アルキルなる用語について定義したように置換されていてもよい。
【００２８】
好適には、Ｒ^５は、水素、Ｃ（Ｚ）Ｒ^１２または置換されていてもよいＣ_１−６アルキル、置換されていてもよいアリール、置換されていてもよいアリールＣ_１−６アルキル、またはＳ（Ｏ）_２Ｒ^８である。
【００２９】
好適には、Ｒ^６は、水素またはＣ_１−６アルキルである。
【００３０】
好適には、Ｒ^７は、水素、Ｃ_１−６アルキル、Ｃ_３−７シクロアルキル、アリール、アリールＣ_１−６アルキル、ヘテロアリール、ヘテロアリールＣ_１−６アルキル、ヘテロサイクリル、またはヘテロサイクリルＣ_１−６アルキルである。
【００３１】
好適には、Ｒ^８は、Ｃ_１−６アルキル、Ｃ_３−７シクロアルキル、アリール、アリールＣ_１−６アルキル、ヘテロアリール、ヘテロアリールＣ_１−６アルキル、ヘテロサイクリル、またはヘテロサイクリルＣ_１−６アルキルである。
【００３２】
好適には、Ｒ^９は、水素、シアノ、Ｃ_１−４アルキル、Ｃ_３−７シクロアルキルまたはアリールである。
【００３３】
好適には、Ｒ^１０およびＲ^１２は、独立して、水素、Ｃ_１−６アルキル、Ｃ_３−７シクロアルキル、ヘテロサイクリル、ヘテロサイクリルＣ_１−６アルキル、アリール、アリールＣ_１−６アルキル、ヘテロアリールまたはヘテロアリールＣ_１−６アルキルから選択され、これらはいずれも置換されていてもよい。
【００３４】
好適には、Ｚは、酸素または硫黄である。
【００３５】
Ａｒは、好適には、ナフタ−２−イル、ナフタ−１−イル、二環式もしくは三環式炭素環、二環式もしくは三環式芳香族複素環、または二環式もしくは三環式複素環であり、ここで、該系におけるいずれの環も、本明細書において以下に定義するように１回またはそれ以上置換されていてもよい。二環式または三環式芳香族複素環または複素環系は、炭素環を含む縮合環系であり得る。芳香族複素環系については、それは芳香環であり、炭素環が飽和されていてもよい複素環系については、それは多少の不飽和を含むかまたは芳香環である。
【００３６】
より詳しくは、二環式もしくは三環式複素環または二環式もしくは三環式芳香族複素環としてのＡｒとしては、キノリン、イソキノリン、ベンゾオキサゾール、ベンゾチアゾール、ベンゾフラン、ジベンゾフラン、ベンゾチアフェン、ジベンゾチアフェン、ベンゾチアジアゾール、ベンゾトリアゾール、ベンゾイミダゾール、チオアントラセン、フェノキサチン、ベンゾイミダゾール、インドリルまたはキナゾリニルが挙げられるがそれらに限定されるものではない。Ａｒは、好ましくは、二環式または三環式芳香族複素環である。
【００３７】
複素環系としてのＡｒとしては、少なくとも１個またはそれ以上の芳香環または芳香族複素環、および１個またはそれ以上の飽和または不飽和４〜７員炭素環または１個またはそれ以上の、酸素、窒素もしくは硫黄（その酸化型を包含する）から選択される１個またはそれ以上のヘテロ原子を有する飽和または不飽和４〜７員環を含有する二環式または三環式縮合環系が挙げられる。該環系は、酸素、窒素または硫黄から選択される少なくとも１個のヘテロ原子を含有しなければならない。該環系は、７〜１４個の環原子を含み得る。
【００３８】
芳香族複素環系としてのＡｒは、少なくとも１個の芳香環および／または１個またはそれ以上の芳香族複素環を含み得るが、該環系は、酸素、窒素または硫黄から選択される１個またはそれ以上のヘテロ原子を含有し得る。該環系は、８〜１２個の環原子を含み得る。
【００３９】
二環式または三環式炭素環としてのＡｒとしては、別に示した特定のナフチル環に加えて、インデン、テトラリン、またはインダン誘導体が挙げられるが、これらに限定されるものではない。この炭素環系は、少なくとも１個の芳香環およびそれに結合した１個またはそれ以上の飽和または不飽和４〜７員炭素環を含む。
【００４０】
Ａｒ環は、いずれの環においても、独立して、１回またはそれ以上、好ましくは、１〜３回置換されていてもよい。好適な置換基としては、ハロゲン、Ｃ_１−６アルキル、アリール、アリールＣ_１−６アルキル、シクロアルキル、シクロアルキルＣ_１−６アルキル、Ｃ_１−６アルコキシＣ_１−６アルキル、ハロ置換Ｃ_１−６アルキル、アリールＣ_１−６アルコキシ、（ＣＲ^１３Ｒ^１４）_ｔＯＲ^１２、ニトロ、シアノ、（ＣＲ^１３Ｒ^１４）_ｔＮＲ^１０Ｒ^１１、（ＣＲ^１３Ｒ^１４）_ｔＮＲ^１０Ｃ（Ｚ）Ｒ^１２、（ＣＲ^１３Ｒ^１４）_ｔＣ（Ｚ）ＮＲ^１０Ｒ^１１、（ＣＲ^１３Ｒ^１４）_ｔＣＯＲ^１２、（ＣＲ^１３Ｒ^１４）_ｔＺＣ（Ｚ）Ｒ^１２、（ＣＲ^１３Ｒ^１４）_ｔＣ（Ｚ）ＯＲ^１２、（ＣＲ^１３Ｒ^１４）_ｔＣ（Ｏ）ＮＲ^１０Ｒ^１１、（ＣＲ^１３Ｒ^１４）_ｔＮＲ^１０Ｃ（Ｚ）ＮＲ^１０Ｒ^１１、（ＣＲ^１３Ｒ^１４）_ｔＮＲ^１０Ｃ（＝ＮＨ）ＮＲ^１０Ｒ^１１、（ＣＲ^１３Ｒ^１４）_ｔＣ（＝ＮＨ）−ＮＲ^１０Ｒ^１１、（ＣＲ^１３Ｒ^１４）_ｔＮＲ^１０Ｓ（Ｏ）_２Ｒ^８、（ＣＲ^１３Ｒ^１４）_ｔＳ（Ｏ）_２ＮＲ^１０Ｒ^１１、（ＣＲ^１３Ｒ^１４）_ｔＳ（Ｏ）_ｍＲ^１２、ヘテロサイクリル、ヘテロアリール、ヘテロサイクリルＣ_１−６アルキルまたはヘテロアリールＣ_１−６アルキルが挙げられる。
【００４１】
好適には、ｔは０、または１〜１０の値を有する整数である。好ましくは、ｔは０、または１であり、より好ましくは、０である。
【００４２】
好適には、Ｒ^１３およびＲ^１４は、独立して、水素、またはＣ_１−６アルキルである。
【００４３】
好ましくは、Ａｒ基は、いずれの環においても、ハロ、シアノ、（ＣＲ^１３Ｒ^１４）_ｔＣ（Ｚ）ＮＲ^１０Ｒ^１１、（ＣＲ^１３Ｒ^１４）_ｔＣ（Ｚ）ＯＲ^１２、（ＣＲ^１３Ｒ^１４）_ｔＣＯＲ^１２、（ＣＲ^１３Ｒ^１４）_ｔＳ（Ｏ）_ｍＲ^１２、（ＣＲ^１３Ｒ^１４）_ｔＯＲ^１２、ハロ置換Ｃ_１−６アルキル、Ｃ_１−６アルキル、（ＣＲ^１３Ｒ^１４）_ｔＮＲ^１０Ｃ（Ｚ）Ｒ^１２、（ＣＲ^１３Ｒ^１４）_ｔＮＲ^１０Ｓ（Ｏ）_２Ｒ^８、（ＣＲ^１３Ｒ^１４）_ｔＳ（Ｏ）_２ＮＲ^１０Ｒ^１１、（ＣＲ^１３Ｒ^１４）_ｔＺＣ（Ｚ）Ｒ^１２、または（ＣＲ^１３Ｒ^１４）_ｔＮＲ^１０Ｒ^１１により１回またはそれ以上置換されている。
【００４４】
より好ましくは、Ａｒ環は、ハロゲン、Ｓ（Ｏ）_ｍＲ^１２、ＯＲ^１２、Ｃ_１−６アルキル、ハロ置換Ｃ_１−６アルキル、ヒドロキシＣ_１−６アルキル、およびＣ_１−６アルコキシ、ＮＲ^１０Ｓ（Ｏ）_２Ｒ^８、ＮＲ^１０Ｃ（Ｚ）Ｒ^１２またはＮＲ^１０Ｒ^１１により１回またはそれ以上置換されている。より好ましい置換基は、ヒドロキシ；Ｃ_１−６アルコキシ基、例えば、メトキシ；Ｃ_１−６アルキル、例えば、メチル；またはハロゲン、例えば、フッ素もしくは塩素である。
【００４５】
好ましくは、Ａｒ環は、ナフチル環、より好ましくは、ナフタ−２−イル環である。Ａｒが二環式ヘテロアリール環である場合、好ましくは、ベンゾチオフェンまたはベンゾフラン環である。ナフタ−２−イル環についての好ましい環配置は６位である。
【００４６】
本明細書における使用については、個々に、または、「アルコキシ」のような大きな基の一部としての用語「アルキル」および「アルケニル」基は、他に限定されない限り、炭素原子６個までを含有する直鎖または分枝鎖残基であり得、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、ｓｅｃ−ブチル、イソブチル、ｔｅｒｔ−ブチルなどが挙げられるが、これらに限定されるものではない。アルキルおよびアルケニル基は、本明細書で定義したように置換されていてもよい。
【００４７】
本明細書における使用については、「シクロアルキル」としては、３〜８個の環炭素原子を有する環状残基が挙げられ、シクロプロピル、シクロペンチル、シクロヘキシルなどが挙げられるが、これらに限定されるものではない。シクロアルキル基は、本明細書で定義したように置換されていてもよい。
【００４８】
本明細書における使用については、「シクロアルケニル」としては、少なくとも１つの結合を有する環状残基、好ましくは、炭素原子５〜８個の環状残基が挙げられ、シクロペテニル、シクロヘキセニルなどが挙げられるが、これらに限定されるものではない。シクロアルケニル基は、本明細書で定義したように置換されていてもよい。
【００４９】
本明細書における使用については、用語「アリール」（それ自体、または「アリールアルキル」もしくは「アリールオキシ」のような如何なる組合せでも）としては、単環または縮合環系、好適には、各環中に環原子４〜７個、好ましくは、５または６個を含有する単環または縮合環系が挙げられ、これらの環は、各々、非置換であるか、または、例えば、独立して置換基３個までにより置換されていてもよい。縮合環系は、飽和または部分飽和環のような脂肪族環を含み得、１個の芳香環を必要とするだけである。好適なアリール基としては、フェニル、および１−ナフチルまたは２−ナフチルのようなナフチルが挙げられる。該アリール環は、他に示さない限り、本明細書で定義したように置換されていてもよい。
【００５０】
本明細書における使用については、用語「ヘテロサイクリル」（それ自体、または、「ヘテロサイクリルアルキル」もしくは「ヘテロサイクリルオキシ」のような如何なる組合せでも）としては、好適には、他に定義しない限り、好適には、Ｏ、ＮおよびＳまたはＳ（Ｏ）_ｍ（ここで、ｍは０または１もしくは２の値を有する整数である）から各々独立して選択される４個までのヘテロ原子を含有する非芳香族飽和または部分不飽和単環および縮合環が挙げられ、これらの環は非置換であるか、または、例えば、置換基３個までにより独立して置換されていてもよい。各複素環は、好適には、環原子４〜７個、好ましくは、５または６個を有するか、または、縮合環系は、環原子７〜１４個を含有する。縮合複素環系は、炭素環を含み得、複素環として１個のヘテロ原子を含むことを必要とするだけである。ヘテロサイクリル基の例としては、テトラヒドロピロール、テトラヒドロピラン、テトラヒドロフラン、テトラヒドロチオフェン（硫黄部分の酸化型を包含する）、ピロリジン、ピペリジン、ピペラジン、モルホリン、チオ−モルホリン（硫黄部分の酸化型を包含する）、イミダゾリジンおよびピラゾリジンのような本明細書で定義したヘテロアリール基の飽和または部分飽和型が挙げられるが、これらに限定されるものではない。複素環は、他に示さない限り、本明細書において以下に定義するように置換されていてもよい。
【００５１】
本明細書で使用する場合、用語「ヘテロアリール」（それ自体、または「ヘテロアリールオキシ」もしくは「ヘテロアリールアルキル」のような如何なる組合せでも）としては、好適には、他に定義されない限り、Ｏ、ＮおよびＳから選択されるヘテロ原子４個まで、好ましくは、１または２個を含む単環式および二環式芳香族複素環系が挙げられる。各環は、環原子４〜７個、好ましくは、５または６個を有することができるか、または、環原子８〜１２個を含有する縮合環系である。二環式芳香族複素環系は、炭素環を含み得る。ヘテロアリール基の例としては、ピロール、キノリン、イソキノリン、ピリジン、ピリミジン、オキサゾール、チアゾール、チアジアゾール、トリアゾール、イミダゾール、ベンゾイミダゾール、イソオキサゾール、チオフェン、ベンゾチオフェン、フラン、ベンゾフラン、ピラゾール、ピラン、キナゾリニル、ピリダジン、ピラジン、ウラシル、オキサジアゾール、オキサチアジアゾール、イソチアゾール、テトラゾール、およびインダゾールが挙げられるが、これらに限定されるものではない。ヘテロアリール環は、他に示さない限り、本明細書において以下に定義するように置換されていてもよい。
【００５２】
好適には、アルキル、アルケニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、アリール、アリールアルキル、ヘテロサイクリル、ヘテロサイクリックアルキル、ヘテロアリール、およびヘテロアリールアルキル基についてのように用語「置換されていてもよい」が本明細書において使用される場合、他に定義しない限り、該用語は、その基が１回またはそれ以上置換されていてもよく、好ましくは、ハロゲン、Ｃ_１−６アルキル、アリール、アリールＣ_１−６アルキル、シクロアルキル、シクロアルキルＣ_１−６アルキル、Ｃ_１−６アルコキシＣ_１−６アルキル、ハロ置換Ｃ_１−６アルキル、アリールＣ_１−６アルコキシ、ＯＲ^１２、ニトロ、シアノ、（ＣＲ_１０Ｒ_２０）_ｎＮＲ^１０Ｒ^１１、（ＣＲ_１０Ｒ_２０）_ｎＮＲ^１０Ｃ（Ｚ）Ｒ^１２、（ＣＲ_１０Ｒ_２０）_ｎＣ（Ｚ）ＮＲ^１０Ｒ^１１、（ＣＲ_１０Ｒ_２０）_ｎＣＯＲ^１２、（ＣＲ_１０Ｒ_２０）_ｎＺＣ（Ｚ）Ｒ^１２、（ＣＲ_１０Ｒ_２０）_ｎＣ（Ｚ）ＯＲ^１２、（ＣＲ_１０Ｒ_２０）_ｎＣ（Ｏ）ＮＲ^１０Ｒ^１１、（ＣＲ_１０Ｒ_２０）_ｎＮＲ^１０Ｃ（Ｚ）ＮＲ^１０Ｒ^１１、（ＣＲ_１０Ｒ_２０）_ｎＮＲ^１０Ｃ（＝ＮＨ）ＮＲ^１０Ｒ^１１、（ＣＲ_１０Ｒ_２０）_ｎＣ（＝ＮＨ）−ＮＲ^１０Ｒ^１１、（ＣＲ_１０Ｒ_２０）_ｎＮＲ^１０Ｓ（Ｏ）_２Ｒ^８、（ＣＲ_１０Ｒ_２０）_ｎＳ（Ｏ）_２ＮＲ^１０Ｒ^１１、Ｓ（Ｏ）_ｍＲ^１２、ヘテロサイクリル、ヘテロアリール、ヘテロサイクリルＣ_１−６アルキルまたはヘテロアリールＣ_１−６アルキルから独立して選択される１〜３個の置換基により置換されていてもよいことを意味する。加えて、２個の隣接環炭素原子が結合して二環式系を形成し得る。
【００５３】
本発明の特定の化合物としては、実施例に記載する化合物、およびそれらの医薬上許容される塩が挙げられる。
【００５４】
医薬における使用について、式（Ｉ）で示される化合物の塩は医薬上許容されるべきであると理解されるであろう。好適な医薬上許容される塩は、当業者に明らかであろうし、無機酸、例えば、塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸またはリン酸；および有機酸、例えば、コハク酸、マレイン酸、酢酸、フマル酸、クエン酸、酒石酸、安息香酸、ｐ−トルエンスルホン酸、メタンスルホン酸またはナフタレンスルホン酸との酸付加塩のような Ｊ． Ｐｈａｒｍ． Ｓｃｉ．， １９７７， ６６， １−１９ に記載されているものが挙げられる。他の塩、例えば、シュウ酸塩は、例えば、式（Ｉ）で示される化合物の単離において使用することができ、本発明の範囲内に含まれる。
【００５５】
本発明の化合物は、結晶形または非晶形であり得、結晶の場合は、水和化または溶媒和化されていてもよい。本発明は、化学量論的水和物および可変量の水を含有する化合物をその範囲内に包含する。
【００５６】
本発明は、エナンチオマーおよびその混合物、例えば、ラセミ体を包含する式（Ｉ）で示される化合物の立体異性体および幾何異性体を包含する全ての異性体に及ぶ。種々の異性体は、慣用的な方法により互いに分離または分割され得るか、または、慣用的な合成法または立体特異的合成もしくは不斉合成により、いずれかの所定の異性体を得ることができる。
【００５７】
式（Ｉ）で示される化合物は医薬組成物用であるので、それらは、好ましくは、実質的に純粋な形態で、例えば、少なくとも純度６０％、より好適には、少なくとも純度７５％、好ましくは、少なくとも純度８５％、特に、少なくとも純度９８％（％は重量対重量に基づいている）で提供されることが容易に理解されるであろう。当該化合物の不純物を含む調製物は、医薬組成物に使用される、より純粋な形態を調製するために使用し得る。
【００５８】
式（Ｉ）で示される化合物は、商業的に入手可能であるかまたは周知のプロセスから類推して製造され得る出発物質から、当業者に周知であり、かつ、例えば、Ｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅ Ｈｅｔｅｒｏｃｙｃｌｉｃ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ， Ｅｄｉｔｏｒｓ Ｋａｔｒｉｔｚｋｙ ａｎｄ Ｒｅｅｓ， Ｐｅｒｇａｍｏｎ Ｐｒｅｓｓ， １９８４， ５， ４５７−４９７ に記載されている手順を用いて容易に製造され得るイミダゾール誘導体である。多くのかかる合成における重要な工程は、式（Ｉ）で示される化合物を得るための中心イミダゾール核の形成である。好適な手順は、とりわけ、米国特許第３，７０７，４７５号および第３，９４０，４８６号に記載されている（それらは出典明示により全体として本明細書の記載とする）。これらの特許には、ａ−ジケトン類およびα−ヒドロキシケトン類（ベンゾイン類）の合成ならびにイミダゾール類およびＮ−ヒドロキシルイミダゾール類の製造におけるそれらの次なる使用が開示されている。その後、慣用的な官能基相互転換法を用いてＲ^１、Ｒ^２、およびＲ^３のいずれかの基において置換基を操作することにより式（Ｉ）で示される別の化合物を得ることができる。
【００５９】
【化３】

スキームＩ
【００６０】
Ｑ＝Ｈである一般式Ｉで示される化合物は、スキームＩに概略記載するように製造され得る。４−メチル−２−（メチルチオ）ピリミジンのアニオンとアリール酸のＷｅｉｎｒｅｂアミドとの縮合によりケトンを得、亜硝酸ナトリウムで酸化した後、ケトオキシムを得る。この生成物を酢酸中にてアルキルアルデヒドおよび酢酸アンモニウムと一緒に加熱してイミダゾール核を得る。該ヒドロキシイミダゾールを、亜リン酸トリアルキルと一緒に加熱するか、または、室温で三塩化チタンと一緒に撹拌することにより還元することができる。３−クロロ過安息香酸またはオキソンを用いてメチルスルフィニル誘導体に酸化し、次いで、水素化ナトリウム、有機リチウムまたはトリアルキルアミンのような塩基を添加するかまたは添加せずに求核物質と置換することにより、メチルチオ基（Ｒ^１＝ＳＭｅ）を求核物質（Ｒ^１＝ＯＲ^４、ＮＨＲ^４、ＳＲ^４）と置換することができる。アミン（Ｒ^１＝ＮＨＲ^４）の場合、アルミニウムアミド誘導体を使用して該置換をおこなうことができる。
【００６１】
【化４】

スキームＩＩ
【００６２】
本発明の化合物を製造するための別の方法は、スキームＩＩにおいて概略記載されるとおりである。例えば、４−置換ピリジン誘導体（Ｖ＝ＣＨ、Ｒ^１＝Ｈ）のアニオンをアリール酸またはアリール−アルデヒドのＷｅｉｎｒｅｂアミドと縮合させ、中間生成物を酸化することにより、α−ジケトン類を製造する。該ジケトンを酢酸中にてアルデヒドおよび酢酸アンモニウムと一緒に加熱してイミダゾール核を得る。
【００６３】
一般式で示される化合物（Ｒ^１＝ＯＲ^４、ＮＨＲ^４、ＳＲ^４）は、４−メチルピリジンの代わりに４−メチル−２−クロロピリジンまたは４−メチル−２−フルオロピリジンを用いる以外はスキームＩまたはＩＩに記載したとおり製造され得る（Ｇａｌｌａｇｈｅｒ ｅｔ ａｌ Ｂｉｏｏｒｇ． Ｍｅｄ． Ｃｈｅｍ． ５， ４９， １９９７）。米国特許第５，６７０，５２７号に記載されている方法により、得られた２−ハロピリジニルイミダゾールの求核置換を行うことができる。
【００６４】
別法として、化合物は、アリール（Ａｒ）基を最後に付加するスキームＩＩＩにおけるように製造され得る。
【００６５】
【化５】

スキームＩＩＩ
【００６６】
４−アセチル置換ピリジン誘導体（Ｖ＝ＣＨ、Ｒ^１＝Ｈ）の亜硝酸ナトリウムによる酸化によりケトオキシムを得る。この生成物を酢酸中にてアルキルアルデヒドおよび酢酸アンモニウムと一緒に加熱することによりイミダゾール核を得る。亜リン酸トリアルキルと一緒に加熱するかまたは三塩化チタンと一緒に室温で撹拌することにより、ヒドロキシイミダゾールを還元することができる。該イミダゾールをＮ−ヨードスクシンイミドで処理してヨードイミダゾールを得、次いで、パラジウム触媒下にて種々のボロン酸と反応させてアリールまたはヘテロアリールイミダゾールを得ることができる。別のビアリールカップリング反応を用いることもできる。
【００６７】
上記した合成スキームによりＱ＝Ｈである式Ｉで示される化合物が得られる。この中間体を適当な塩基および溶媒の存在下にてハロゲン化（Ｃｌ、Ｂｒ、ＩまたはＦ）アルキルまたは他の反応性アルキル化剤（例えば、メシラートまたはトシラートのようなスルホン酸エステル）でアルキル化して、Ｑが一般的に概略記載した構造要求または本発明の化合物を満たすものである式Ｉで示される化合物を得る。別法として、ビアリールカップリング化学を用いて、Ｑが、直接結合したアリール、ヘテロアリール、アルケニルまたはアルキニルである化合物を製造することができる。かかる化学は、当業者に周知であり、イミダゾールにおける窒素のようなヘテロサイクリック窒素に結合することが報告されている。アルキル化反応およびカップリング反応はまた、ともに可変量の望ましくない位置異性体を生じ、クロマトグラフィーおよび結晶化を包含するかなり多数の標準的な分離法を使用してこれらから所望の生成物を得ることができるということは理解されるべきである。アルキル化条件のバリエーションにより、両方の反応体の特定の構造に依存して、所望の式Ｉで示される生成物の望ましくない生成物に対する比は非常に影響を受け得る。アルキル化反応についての一般に有効な条件および式Ｉで示される位置異性体の生成に好都合である条件の例は、Ｌｉｖｅｒｔｏｎ， ｅｔ． ａｌ．， Ｊ． Ｍｅｄ． Ｃｈｅｍ． Ｖｏｌ． ４２， Ｎｏ． １２， ｐ２１８０−２１９０， １９９９ に開示されている。
【００６８】
スキームＩＶにおいて例示するように、式（Ｉ）で示される化合物におけるＱの位置選択的配置が可能である。ケトオキシムを添加する前に、該アルデヒドに第一アミンを加えてヒドロキシイミダゾールのアリール環に隣接する選択的Ｎ−Ｑ形が得られる。スキームＩＩＩにおけるような亜リン酸トリアルキルまたは三塩化チタンでの還元により式（Ｉ）で示される化合物が得られる。
【００６９】
【化６】

スキームＩＶ
【００７０】
ヒドロキシル基およびイミダゾール窒素について使用するのに好適な保護基は、当該技術分野において周知であり、多くの参考文献、例えば、Ｐｒｏｔｅｃｔｉｎｇ Ｇｒｏｕｐｓ ｉｎ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ， Ｇｒｅｅｎｅ Ｔ Ｗ， Ｗｉｌｅｙ−Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ， Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ， １９８１ に記載されている。ヒドロキシル保護基の好適な例としては、シリルエーテル、例えば、ｔ−ブチルジメチルまたはｔ−ブチルジフェニル、およびアルキルエーテル、例えば、可変結合のアルキル鎖（ＣＲ^１３Ｒ^１４）_ｎにより連結されているメチルが挙げられる。イミダゾール窒素保護基の好適な例としては、テトラヒドロピラニルが挙げられる。
【００７１】
合成例
ここで、単に例示的であり、本発明の範囲を制限しようとするものではない以下の実施例により本発明を記載する。
【００７２】
全ての温度は摂氏（℃）で記載され、全ての溶媒は、入手可能な最高純度のものであり、全ての反応は、他に示さない限り、アルゴン雰囲気下にて無水条件下で行われる。マススペクトルは、他に示さない限り、高速原子衝撃を用いてＶＧ Ｚａｂマススペクトロメーターにて、または、キャリヤー溶媒として１％ギ酸と一緒にＣＨ_３ＣＮ／ＣＨ_３ＯＨ（９５：５）を用いて陽イオンモードでミクロマスプラットフォームエレクトロスプレーイオン化マススペクトロメーターにて行った。^１Ｈ−ＮＭＲ（以下、「ＮＭＲ」と記す）スペクトルは、Ｂｒｕｋｅｒ ＡＭ ２５０またはＡｍ ４００スペクトロメーターを用いて２５０ＭＨｚまたは４００Ｍｚで記録した。示された多重度は、ｓ＝一重項、ｄ＝二重項、ｔ＝三重項、ｑ＝四重項、ｍ＝多重項であり、ｂｒは幅広いシグナルを示す。Ｓａｔ．は、飽和溶液を示し、ｅｑは、主反応体に対する試薬のモル当量の割合を示す。フラッシュクロマトグラフィーは、Ｍｅｒｃｋ Ｓｉｌｉｃａ ｇｅｌ ６０（２３０〜４００メッシュ）にて行われる。
【００７３】
実施例１
２−ｔｅｒｔ−ブチル−４−ナフタレン−２−イル−５−ピリジン−４−イル−イミダゾールの製造
【化７】

【００７４】
ａ）２−オキソ−２−ピリジン−４−イル−アセトアルデヒドオキシム
亜硝酸イソアミル（１１．７グラム（以下、「ｇ」と記す）、０．１ミリモル（以下、「ｍｍｏｌ」と記す））をアルカリエタノール［ＥｔＯＨ（５０ミリリットル（以下、「ｍｌ」と記す））中にＮａＯＨ（４ｇ）］に添加し、次いで、０℃に冷却し、強く撹拌しながら４−アセチルピリジン（９５％エタノール１０ｍｌ中１２．１ｇ）を滴下した。添加完了後、該反応物を冷蔵庫に一夜入れた。該混合物をエーテルで希釈し、濾過して、淡い赤味茶色の固体を得た。これを水に溶解し、０℃にて氷酢酸でｐＨ５．０に酸性化して橙色の固体６．７６ｇを得た。該固体をＥｔＯＨ／Ｈ_２Ｏ（３０／７０）から再結晶して針状結晶として２−オキソ−２−ピリジン−４−イル−アセトアルデヒドオキシムを得た（５．０ｇ、３３％）。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ ８．６１（ｄｄ，Ｊ＝４．６Ｈｚ，１．４２ ２Ｈ）、７．８５（ｓ，１Ｈ）、７．８０（ｄｄ，Ｊ＝４．６，１．５Ｈｚ，２Ｈ）。
【００７５】
ｂ）２−ｔｅｒｔ−ブチル−５−ピリジン−４−イル−イミダゾール−１−オール
２−オキソ−２−ピリジン−４−イル−アセトアルデヒドオキシム（９．８７ｇ、６５．８ｍｍｏｌ）、トリメチルアセトアルデヒド（６．８ｇ、７９ｍｍｏｌ）、および酢酸アンモニウム（５０．７ｇ）の氷酢酸（６００ｍｌ）中溶液を８７℃で４時間維持し、次いで、トリメチルアセトアルデヒド（１ｍｌ）を添加した後、８０℃で４時間維持した。黄色溶液を０℃に冷却し、強く撹拌しながら濃水酸化アンモニウムで注意深く中和した。ｐＨ７．０〜７．２にて多量の沈殿物が形成され、該混合物を３０分間撹拌した。ベージュ色の固体を濾過し、４０℃の真空オーブン中にて乾燥させて、標記化合物（１１．０ｇ）を得た。水性濾液をＣＨ_２Ｃｌ_２でさらに抽出して、標記化合物と対応するイミダゾールとの混合物としてさらなる黄色油状物（３．１２ｇ）を得た。
【００７６】
ｃ）４−（２−ｔｅｒｔ−ブチル−１−Ｈ−イミダゾール−４−イル）−ピリジン
実施例１（ｂ）における化合物をＤＭＦ（２００ｍｌ）中にて亜リン酸トリメチル（２５ｍｌ）で処理し、９０℃で３時間維持した。ＤＭＦを減圧下にて留去し、残留物を水（ｐＨ８）とクロロホルムとの間で分配させ、クロロホルム中に数回抽出した。有機部分をＭｇＳＯ_４で乾燥させ、蒸発させ、次いで、エーテルでトリチュレートして標記化合物を得た（９．３３ｇ）。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ ９．３５（ｂｒ ｓ，１Ｈ）、８．５６（ｄ，Ｊ＝５．６Ｈｚ，２Ｈ）、７．６８（ｄ，Ｊ＝４．９，２Ｈ）７．３８（ｓ，２Ｈ）、１．４４（ｓ，９Ｈ）。
【００７７】
ｄ）４−（２−ｔｅｒｔ−ブチル−５−ヨード−３−Ｈ−イミダゾール−４−イル）−ピリジン
ＥｔＯＨ（６０ｍｌ）中の実施例１（ｃ）における化合物（３．）ｇ、１４．９２ｍｍｏｌ）をＮ−ヨードスクシンイミドで室温にて４時間処理した。薄層クロマトグラフィー（Ｔｌｃ）は反応が完了したことを示し、該混合物を水でゆっくりと希釈した。得られた固体を濾過し、６０℃で高真空下にて一夜乾燥させて標記化合物を得た（４．３９ｇ、９０％）。ＭＳ ｍ／ｅ：３２８ ［Ｍ＋Ｈ］^＋、３２６ ［Ｍ−Ｈ］⁻；
【００７８】
ｅ）２−ｔｅｒｔ−ブチル−４−ナフタレン−２−イル−５−ピリジン−４−イル−イミダゾール
厚肉圧力容器中にて、４−（２−ｔｅｒｔ−ブチル−５−ヨード−３−Ｈ−イミダゾール−４−イル）−ピリジン（１００ミリグラム（以下、「ｍｇ」と記す）、０．３ｍｍｏｌ）およびテトラキス−トリフェニルホスフィンパラジウム（０）触媒をトルエン（２〜３ｍｌ）に溶解し、該溶液にアルゴンを通気させながら他の試薬を添加した：１−ナフチルボロン酸（８６ｍｇ、０．５ｍｍｏｌ）、固体ＮａＨＣＯ_３（８４ｍｇ）、水（５００ｕＬ）、ＥｔＯＨ（５００ｕＬ）。該容器を密封し、該反応を１００℃に一夜加熱した。該反応混合物を５％ＮａＨＣＯ_３とＥｔＯＡｃとの間で分配させ、ＥｔＯＡｃで数回抽出した。合わせた有機層を食塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ_４で乾燥させ、濾過し、蒸発させた。粗製生成物をシリカゲルクロマトグラフィー（クロマトトロン、１−４％ＭｅＯＨ／ＣＨ_２Ｃｌ_２で溶離）に付して標記化合物を黄色固体として得た（５８ｍｇ、５９％）。融点２１８〜２２０℃；ＭＳ ｍ／ｅ：３２８ ［Ｍ＋Ｈ］^＋、３２６ ［Ｍ−Ｈ］⁻；^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ ９．６３（ｂｒ ｓ，１Ｈ）、８．１６（ａｐｐｄ，Ｊ＝４．８Ｈｚ，２Ｈ）、７．９２（ｂｒ ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，２Ｈ）、７．６４（ｂｒ ｄ，１Ｈ）、７．５２（ｍ，３Ｈ）、７．４１（ｔ，Ｊ＝６Ｈｚ，１Ｈ）、７．２９（ｂｒ ｓ，２Ｈ）、１．４９（ｓ，９Ｈ）。
【００７９】
実施例２
２−ｔｅｒｔ−ブチル−４−（６−エトキシナフタレン−２−イル）−５−ピリジン−４−イル−イミダゾールの製造
【化８】

【００８０】
ａ）２−ブロモ−６−エトキシ−ナフタレン
水素化ナトリウム（８００ｍｇ、６０％油分散体）のＤＭＦ（２０ｍｌ）中懸濁液に６−ブロモ−２−ナフトールの溶液を、０℃で撹拌しながら滴下した。ガス発生が止んだ後、撹拌した溶液に純粋なヨウ化エチル（１．６ｍｌ）を滴下した。該反応を室温で一夜撹拌した。該反応混合物を水中に注ぎ、ｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテルで数回抽出した。合わせた有機抽出物を水および食塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ_４にて乾燥させ、濾過し、減圧下にて蒸発させて黄褐色固体を得た。これをＭｅＯＨから再結晶し、高真空下にて一定の重量に乾燥させて白色固体を得た（３．１１ｇ、６０％）。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ ７．９２（ｄ，Ｊ＝１．７Ｈｚ，１Ｈ）、７．６５（ｄ，Ｊ＝８．９Ｈｚ，１Ｈ）、７．５９（ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ，２Ｈ）、７．１６（ｄｄ，Ｊ＝８．９Ｈｚ，２．４８，１Ｈ）、７．０９（ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，１Ｈ）、４．１５（ｑ，２Ｈ）、１．４９（ｔ，３Ｈ）。
【００８１】
ｂ）６−エトキシ−ナフタ−２−イルボロン酸
実施例２（ａ）（２．５１ｇ、１０ｍｍｏｌ）の−７８℃の乾燥ＴＨＦ（１５ｍｌ、Ｎａから新しく蒸留した）中溶液に２．５Ｍ ｎ−ブチルリチウム（４ｍｌ、１０ｍｍｏｌ）を約５分間にわたって滴下した。該反応を−７８℃で１０分間撹拌し、次いで、ホウ酸トリイソプロピル（３．４６ｍｌ）を添加し、該反応を室温にした。該反応を１０％塩化アンモニウムとｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテルとの間で分配させ、ｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテル（×３）でさらに抽出し、食塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ_４で乾燥させ、白色固体に蒸発させた。該固体を熱ヘキサンでトリチュレートして純粋な標記化合物を得た（１．９ｇ、８８％）。ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｅ：２１７ ［Ｍ＋Ｈ］^＋。
【００８２】
ｃ）２−ｔｅｒｔ−ブチル−４−（６−エトキシナフタレン−２−イル）−５−ピリジン−４−イル−イミダゾール
１−ナフチルボロン酸の代わりに６−エトキシ−ナフタ−２−イルボロン酸を用いた以外は実施例１（ｅ）の手順に従って、標記化合物を製造した（３４ｍｇ、３４％）。融点２５８−２５９°；ＭＳ ｍ／ｅ：３７２ ［Ｍ＋Ｈ］^＋、３７０ ［Ｍ−Ｈ］⁻；
【００８３】
実施例３
４−（２−ｔｅｒｔ−ブチル−５−（６−メトキシ−ナフタレン−２−イル）−３Ｈ−イミダゾール−４−イル）−ピリジンの製造
【化９】

【００８４】
ａ）６−メトキシ−２−ナフトイック−Ｎ−メトキシ−Ｎ−メチルアミド
０℃で、ＳＯＣｌ_２（１．１５ｍＬ、１５．８ｍｍｏｌ）を６−メトキシ−２−ナフトエ酸（２．９ｇ、１４．３ｍｍｏｌ）のＣＨ_２Ｃｌ_２（４０ｍＬ）およびＥｔ_３Ｎ（７．９ｍＬ、５７．２ｍｍｏｌ）中撹拌溶液に非常にゆっくりと添加した。該溶液は黒ずんで均質になった。室温で４０分間撹拌した後、Ｎ，Ｏ−ジメチルヒドロキシルアミン・塩酸塩（１．８６ｇ、１７．１６ｍｍｏｌ）を添加した。該反応を２時間撹拌した後、水でクエンチし、次いで、ＣＨ_２Ｃｌ_２（３×）で抽出した。有機層を飽和Ｎａ_２ＣＯ_３（３×）で洗浄し、乾燥させ（Ｎａ_２ＳＯ_４）、濃縮して６−メトキシ−２−ナフトイック−Ｎ−メトキシ−Ｎ−メチルアミドを得た（３．６５ｇ、９４％）ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｅ ２４６ ［Ｍ＋Ｈ］^＋。
【００８５】
ｂ）６−メトキシナフタ−２−イル−４−ピリジルメチルケトン
０℃で、ｎ−ＢｕＬｉ（ヘキサン中２．５Ｍ、８．１２ｍＬ、２０．３ｍｍｏｌ）をジイソプロピルアミン（３．３２ｍＬ、２３．６ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（２０ｍＬ）中溶液に添加してＬＤＡを得た。該溶液を−７８℃に冷却し、該溶液に４−ピコリン（２．００ｍＬ、２０．３ｍｍｏｌ）を添加し、該溶液を−７８℃で維持し、１５分間撹拌し、次いで、実施例３（ａ）における化合物（３．６５ｇ、１４．９ｍｍｏｌ）を添加した。該反応を０．５時間にわたって室温に加温し、さらに１時間撹拌した。該反応をＮＨ_４Ｃｌ（５ｍＬ）によりクエンチし、ＣＨ_２Ｃｌ_２（３×）で抽出した。有機層を食塩水で洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ_４）、濃縮した。得られた残留物をフラッシュカラム（ＣＨ_２Ｃｌ_２中１％ＭｅＯＨ〜ＣＨ_２Ｃｌ_２中４％ＭｅＯＨ）に付して６−メトキシナフタ−２−イル−４−ピリジルメチルケトンを得た（３．３ｇ、７０％）。ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｅ ２７８ ［Ｍ＋Ｈ］^＋。
【００８６】
ｃ）２−ヒドロキシイミノ−１−（６−メトキシナフタ−２−イル）−２−（４−ピリジル）エタン−１−オン
ＮａＮＯ_２（０．９ｇ、１４．３ｍｍｏｌ）を実施例３（ｂ）における化合物（３．３ｇ、１１．９ｍｍｏｌ）の３Ｎ ＨＣｌ（７０ｍＬ）およびＨ_２Ｏ（７０ｍＬ）中懸濁液に添加した。該スラリーを３時間撹拌し、濾過し、水洗し、風乾させて２−ヒドロキシイミノ−１−（６−メトキシナフタ−２−イル）−２−（４−ピリジル）エタン−１−オンを得た（３．４ｇ、９３％）。ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｅ ３０７ ［Ｍ＋Ｈ］^＋。
【００８７】
ｄ）４−（２−ｔｅｒｔ−ブチル−５−（６−メトキシ−ナフタレン−２−イル）−５−ピリジン−４−イル）−イミダゾール−１−オール
トリメチルアセトアルデヒド（２１μＬ、１．３７ｍｍｏｌ）、酢酸アンモニウム（１２５ｍｇ、１．６ｍｍｏｌ）および実施例３（ｃ）における化合物（５０ｍｇ、０．１６ｍｍｏｌ）の混合物に酢酸（３ｍＬ）を添加した。得られた溶液を１１０℃で一夜加熱した後、０℃に冷却し、次いで、撹拌しながら、該溶液にＮＨ_４ＯＨをゆっくりと添加した。形成された沈殿物を濾過し、乾燥させて４−（２−ｔｅｒｔ−ブチル−５−（６−メトキシ−ナフタレン−２−イル）−５−ピリジン−４−イル）−イミダゾール−１−オールを得た（３５ｍｇ、５７％）。ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｅ ３７５ ［Ｍ＋Ｈ］^＋。
【００８８】
ｅ）４−（２−ｔｅｒｔ−ブチル−５−（６−メトキシ−ナフタレン−２−イル）−３Ｈ−イミダゾール−４−イル）−ピリジン
亜リン酸トリエチル（６３ｍｇ、０．４ｍｍｏｌ）を実施例３（ｄ）における化合物（５０ｍｇ、０．１３ｍｍｏｌ）およびＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２ｍＬ）の撹拌溶液に室温にて添加した。該反応物を８時間撹拌した。次いで、過剰量の水を添加し、該混合物を３時間撹拌した。固体沈殿物を濾過し、真空乾燥させて標記化合物を得た（２７ｍｇ、５７％）。ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｅ ３５８ ［Ｍ＋Ｈ］^＋。
【００８９】
実施例４
２−ｔｅｒｔ−ブチル−４−インデン−２−イル）−５−ピリジン−４−イル−１Ｈ−イミダゾールの製造
【化１０】

２−ｔｅｒｔ−ブチル−４−インデン−２−イル）−５−ピリジン−４−イル−１Ｈ−イミダゾール・トリフルオロ酢酸塩
インデン（１７５ｕＬ、１．５ｍｍｏｌ）、テトラブチルアンモニウムクロリド（８３ｍｇ、０．３ｍｍｏｌ）、酢酸パラジウム（３ｍｇ）、トリ−ｏ−トリルホスフィン（６ｍｇ）、および実施例１（ｄ）における化合物（１００ｍｇ、０．３ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１ｍｌ）中混合物を３０Ｗで１０分間、次いで、４５Ｗで２４分間マイクロ波処理した。ｔｌｃおよびｌｃ／ｍｓは共に反応が完了したことを示した。該混合物をＣＨ_２Ｃｌ_２と５％ＮａＨＣＯ_３との間で分配させた。水性層をＣＨ_２Ｃｌ_２（×４）で抽出し、Ｈ_２Ｏで洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ_４）、濃縮させた。粗製生成物をシリカゲルクロマトグラフィー（クロマトトロン、ＣＨ_２Ｃｌ_２中１％ＭｅＯＨ〜ＣＨ_２Ｃｌ_２中４％ＭｅＯＨ）に付してテトラブチルアンモニウムクロリドが混入した標記化合物を得た（２７ｍｇ）。分取ｈｐｌｃ（ＹＭＳ−ｃｏｍｂｉｐｒｅｐ ＯＤＳ−Ａ、２０〜８０％アセトニトリル／水 ０．１％ＴＦＡ）により標記化合物を鮮烈な黄色の固体として得た（９．２ｍｇ、１０％）。ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｅ ３５８ ［Ｍ＋Ｈ］^＋ 、３７０ ［Ｍ−Ｈ］⁻、３５０ ［Ｍ＋Ｃｌ−Ｈ］⁻、４４２ ［Ｍ＋Ｉ−Ｈ］⁻。
【００９０】
実施例５
２−ｔｅｒｔ−ブチル−４−ベンゾフラン−２−イル−５−ピリジン−４−イル−１Ｈ−イミダゾール
【化１１】

１−ナフチルボロン酸の代わりにベンゾフラン−２−ボロン酸を用い、ＮａＨＣＯ_３の代わりにＮａ_２ＣＯ_３を用いた以外は実施例１（ｅ）の手順に従って、４５Ｗで１６分間マイクロ波処理することにより標記化合物を得た（３４ｍｇ、６６％）。ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｅ ３１８ ［Ｍ＋Ｈ］^＋、３１６ ［Ｍ−Ｈ］⁻。
【００９１】
実施例６
４−（２−ｔｅｒｔ−ブチル−５−ジベンゾチオフェン−４−イル−１Ｈ−イミダゾール−４−イル）−ピリジン
【化１２】

１−ナフチルボロン酸の代わりにジベンゾチアフェン−４−ボロン酸を用い、ＮａＨＣＯ_３の代わりにＮａ_２ＣＯ_３を用いた以外は実施例１（ｅ）の手順に従って、６５℃を超えない温度にて１００〜２００Ｗで２時間マイクロ波を用いて９６ウェルプレートフォーマット中にて標記化合物を製造した。ｈｐｌｃ（ＹＭＳ−ｃｏｍｂｉｐｒｅｐ ＯＤＳ−Ａ、２０〜８０％アセトニトリル／水 ０．１％ ＴＦＡ）により精製した（６ｍｇ、１０％）。Ｌｃ−ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｅ ３８４ ［Ｍ＋Ｈ］^＋、９７％。
【００９２】
実施例７
４−（２−ｔｅｒｔ−ブチル−５−ジベンゾフラン−４−イル−１Ｈ−イミダゾール−４−イル）−ピリジン
【化１３】

１−ナフチルボロン酸の代わりにジベンゾフラン−４−ボロン酸を用い、ＮａＨＣＯ_３の代わりにＮａ_２ＣＯ_３を用いた以外は実施例１（ｅ）の手順に従って、６５℃を超えない温度にて１００〜２００Ｗで２時間マイクロ波を用いて９６ウェルプレートフォーマット中にて標記化合物を製造した。ｈｐｌｃ（ＹＭＳ−ｃｏｍｂｉｐｒｅｐ ＯＤＳ−Ａ、２０〜８０％アセトニトリル／水 ０．１％ ＴＦＡ）により精製した（９ｍｇ、１６％）。Ｌｃ−ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｅ ３６８ ［Ｍ＋Ｈ］^＋、１００％。
【００９３】
実施例８
４−（５−ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−イル−２−ｔｅｒｔ−ブチル−１Ｈ−イミダゾール−４−イル）−ピリジン
【化１４】

１−ナフチルボロン酸の代わりにチアフェン−２−ボロン酸を用い、ＮａＨＣＯ_３の代わりにＮａ_２ＣＯ_３を用いた以外は実施例１（ｅ）の手順に従って、６５℃を超えない温度にて１００〜２００Ｗで２時間マイクロ波を用いて９６ウェルプレートフォーマット中にて標記化合物を製造した。ｈｐｌｃ（ＹＭＳ−ｃｏｍｂｉｐｒｅｐ ＯＤＳ−Ａ、２０〜８０％アセトニトリル／水 ０．１％ ＴＦＡ）により精製した（３４ｍｇ、６４％）。Ｌｃ−ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｅ ３３４ ［Ｍ＋Ｈ］^＋、１００％。
【００９４】
実施例９
４−（５−ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イル−２−ｔｅｒｔ−ブチル−１Ｈ−イミダゾール−４−イル）−ピリジン
【化１５】

１−ナフチルボロン酸の代わりにチアフェン−３−ボロン酸を用い、ＮａＨＣＯ_３の代わりにＮａ_２ＣＯ_３を用いた以外は実施例１（ｅ）の手順に従って、６５℃を超えない温度にて１００〜２００Ｗで２時間マイクロ波を用いて９６ウェルプレートフォーマット中にて標記化合物を製造した。ｈｐｌｃ（ＹＭＳ−ｃｏｍｂｉｐｒｅｐ ＯＤＳ−Ａ、２０〜８０％アセトニトリル／水 ０．１％ ＴＦＡ）により精製した（５ｍｇ、８％）。Ｌｃ−ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｅ ３３４ ［Ｍ＋Ｈ］^＋、１００％。
【００９５】
実施例１０
４−（２−ｔｅｒｔ−ブチル−５−チアントレン−１−イル−１Ｈ−イミダゾール−４−イル）−ピリジン
【化１６】

１−ナフチルボロン酸の代わりにチアントレン−１−ボロン酸を用い、ＮａＨＣＯ_３の代わりにＮａ_２ＣＯ_３を用いた以外は実施例１（ｅ）の手順に従って、６５℃を超えない温度にて１００〜２００Ｗで２時間マイクロ波を用いて９６ウェルプレートフォーマット中にて標記化合物を製造した。ｈｐｌｃ（ＹＭＳ−ｃｏｍｂｉｐｒｅｐ ＯＤＳ−Ａ、２０〜８０％アセトニトリル／水 ０．１％ ＴＦＡ）により精製した（３ｍｇ、５％）。Ｌｃ−ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｅ ４１６ ［Ｍ＋Ｈ］^＋、１００％。
【００９６】
実施例１１
４−（２−ｔｅｒｔ−ブチル−５−フェノキサチン−４−イル−１Ｈ−イミダゾール−４−イル）−ピリジン
【化１７】

１−ナフチルボロン酸の代わりに４−フェノキサチンボロン酸を用い、ＮａＨＣＯ_３の代わりにＮａ_２ＣＯ_３を用いた以外は実施例１（ｅ）の手順に従って、６５℃を超えない温度にて１００〜２００Ｗで２時間マイクロ波を用いて９６ウェルプレートフォーマット中にて標記化合物を製造した。ｈｐｌｃ（ＹＭＳ−ｃｏｍｂｉｐｒｅｐ ＯＤＳ−Ａ、２０〜８０％アセトニトリル／水 ０．１％ ＴＦＡ）により精製した（４ｍｇ、６％）。Ｌｃ−ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｅ ４００ ［Ｍ＋Ｈ］^＋、９３％。
【００９７】
実施例１２
４−［２−ｔｅｒｔ−ブチル−５−（６−メトキシ−ナフタレン−２−イル）−１−メチル−１Ｈ−イミダゾール−４−イル］−ピリジン
【化１８】

メチルアミン（メタノール中１Ｍ溶液２ｍＬ）をトリメチルアセトアルデヒド（３５３μＬ、３．２ｍｍｏｌ）の酢酸溶液（２ｍｌ）に添加した。室温にて１時間撹拌した後、ケト−オキシム（２００ｍｇ、０．６５ｍｍｏｌ）を添加した。得られた溶液を８０℃で４時間加熱した。該反応を室温に冷却し、次いで、該溶液をＮＨ_４ＯＨで中和した。該反応混合物を塩化メチレンで抽出し、合わせた有機物を無水硫酸マグネシウムにて乾燥させた。
粗製生成物をメタノール５ｍＬに溶解し、ＴｉＣｌ_３（ＨＣｌ中＞１０％）１ｍＬを添加した。該反応を室温で１８時間撹拌した。メタノールを減圧除去し、該スラリーを水で希釈した。ＮＨ_４ＯＨの添加によりｐＨを８に調整し、該溶液をＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機抽出物をＭｇＳＯ_４にて乾燥させ、濾過し、濃縮した。粗製生成物をフラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル、５％メタノール／塩化メチレン）により精製して７５ｍｇ（０．２ｍｍｏｌ、収率３１％）を得た；^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ ８．２５（ｄ，２Ｈ）、７．８０（ｄ，１Ｈ）、７．７０（ｓ，１Ｈ）、７．６５（ｄ，１Ｈ）、７．２５（ｄ，１Ｈ）、７．１０（ｍ，４Ｈ）、３．９０（ｓ，３Ｈ）、３．１０（ｓ，３Ｈ）、０．２０（ｓ，３Ｈ）； ＭＳ（ＥＳ）３７２ ［Ｍ＋Ｈ］^＋。
【００９８】
実施例１３
４−［２−ｔｅｒｔ−ブチル−５−（６−メトキシ−ナフタレン−２−イル）−３−Ｈ−イミダゾール−４−イル］−ピリジン−２−イル｝−（３−モルホリン−４−イル−プロピル）−アミン
【化１９】

【００９９】
ａ）６−メトキシナフタ−２−イル−（２−フルオロピリジン−４−イル）−メチルケトン
０℃で、ｎ−ＢｕＬｉ（ヘキサン中２．５Ｍ、１９．６ｍＬ、４８．９２ｍｍｏｌ）をジイソプロピルアミン（８．０ｍＬ、５７．０８ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（６０ｍＬ）中溶液に添加してＬＤＡを得た。０℃にて１５分間撹拌した後、該溶液を−７８℃に冷却し、該溶液にＴＨＦ（３０ｍｌ）中の２−フルオロピコリン（５．４４ｍＬ、４８．９２ｍｍｏｌ）を添加した。該溶液を−７８℃で維持し、３０分間撹拌し、次いで、実施例３（ａ）の化合物（１０．０ｇ、４０．７７ｍｍｏｌ）を添加した。該反応を０．５時間にわたって室温に加温し、さらに４０分間撹拌した。該反応をＫＨＰＯ_４（０．５Ｍ）によりクエンチし、ＥｔＯＡｃ（３×）で抽出した。有機層を食塩水で洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ_４）、濃縮し、次いで、高真空下にてポンピングして６−メトキシナフタ−２−イル−４−ピリジルメチルケトンを薄黄色固体として得た（１１．８２ｇ、９８％）。ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｅ ２９６ ［Ｍ＋Ｈ］^＋。
【０１００】
ｂ）２−ヒドロキシイミノ−１−（６−メトキシナフタ−２−イル）−２−（２−フルオロピリジン−４−イル）エタン−１−オン
０℃で、アルゴン下の実施例ｘ（１）（８．０ｇ、２７．１ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（４００ｍＬ）中溶液にｔ−ブチルニトリル（３．４６ｍＬ、２８．５ｍｍｏｌ）を滴下した。０℃で３分間撹拌した後、該溶液にＨＣｌ溶液（エーテル中２Ｍ、３２．０ｍＬ、約６４ｍｍｏｌ）を滴下した。該溶液を室温にて２時間維持し、次いで、溶媒を減圧除去し、茶色の油状残留物を、ｐＨを８に調整した後、水とＣＨ_２Ｃｌ_２との間で分配させ、ＣＨ_２Ｃｌでさらに抽出し、食塩水で洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ_４）、濃縮し、次いで、高真空下にて一夜ポンピングして油状物を得、これをｔ−ブチル−Ｏ−メチルエーテル／ヘキサンから再結晶して２−ヒドロキシイミノ−１−（６−メトキシナフタ−２−イル）−２−（２−フルオロピリジン−４−イル）エタン−１−オンを橙色の固体として得た（７．６６ｇ、８７％）。ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｅ ３２５ ［Ｍ＋Ｈ］^＋。
【０１０１】
ｃ）｛４−［２−ｔｅｒｔ−ブチル−５−（６−メトキシ−ナフタレン−２−イル）−３−Ｈ−イミダゾール−４−イル］−ピリジン−２−イル｝−（３−モルホリン−４−イル−プロピル）−アミン
トリメチルアセトアルデヒド（６０μＬ、０．５５ｍｍｏｌ）、トリフルオロ酢酸アンモニウム（５００ｍｇ）、Ｎ−（３−アミノプロピル）モルホリン（２００μＬ、＞１．２ｍｍｏｌ）および実施例２（ｘ）における化合物（１３０ｍｇ、０．４０ｍｍｏｌ）の混合物を１５０℃にて数時間溶融液として加熱した。室温に冷却した後、該反応混合物を水に溶解し、ＥｔＯＡｃ（３×）で抽出した。合わせた抽出物を濃縮し、ＤＭＳＯに再溶解し、ｈｐｌｃにより精製し、凍結乾燥後、純粋な｛４−［２−ｔｅｒｔ−ブチル−５−（６−メトキシ−ナフタレン−２−イル）−３−Ｈ−イミダゾール−４−イル］−ピリジン−２−イル｝−（３−モルホリン−４−イル−プロピル）−アミンを得た（６８．４ｍｇ、５７％）。ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｅ ５００ ［Ｍ＋Ｈ］^＋ １００％。
【０１０２】
実施例１４
｛４−［２−ｔｅｒｔ−ブチル−５−（６−メトキシ−ナフタレン−２−イル）−３−Ｈ−イミダゾール−４−イル］−ピリジン−２−イル｝−（３−モルホリン−４−イル−エチル）−アミン
【化２０】

Ｎ−（３−アミノプロピル）モルホリンの代わりにＮ−（３−アミノエチル）モルホリンを用いた以外は実施例１３（ｃ）の手順に従って、標記化合物を製造した（１２４ｍｇ、４３％）。Ｌｃ−ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｅ ４８６ ［Ｍ＋Ｈ］^＋、１００％ｕｖ、１００％ｅｌｓ。
【０１０３】
実施例１５
｛４−［２−ｔｅｒｔ−ブチル−５−（６−メトキシ−ナフタレン−２−イル）−３−Ｈ−イミダゾール−４−イル］−ピリジン−２−イルアミノ｝−プロピル）−ピロリジン−２−オン
【化２１】

Ｎ−（３−アミノプロピル）モルホリンの代わりにＮ−（３’−アミノプロピル）−２−ピロリジノンを用いた以外は実施例１３（ｃ）の手順に従って、標記化合物を製造した（９９．１ｍｇ、４１％）。Ｌｃ−ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｅ ４９８ ［Ｍ＋Ｈ］^＋、８９％ｕｖ、１００％ｅｌｓ。
【０１０４】
実施例１６
｛４−［２−ｔｅｒｔ−ブチル−５−（６−メトキシ−ナフタレン−２−イル）−３−Ｈ−イミダゾール−４−イル］−ピリジン−２−イル｝−［３−（２−メチル−ピペリジン−１−イル）−プロピル］−アミン
【化２２】

Ｎ−（３−アミノプロピル）モルホリンの代わりに１−（３−アミノプロピル）−２−ピペコリンを用いた以外は実施例１３（ｃ）の手順に従って、標記化合物を製造した（５７．１ｍｇ、２３％）。Ｌｃ−ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｅ ５１２ ［Ｍ＋Ｈ］^＋、９６％ｕｖ、１００％ｅｌｓ。
【０１０５】
実施例１７
｛４−［２−ｔｅｒｔ−ブチル−５−（６−メトキシ−ナフタレン−２−イル）−３−Ｈ−イミダゾール−４−イル］−ピリジン−２−イル｝−Ｎ，Ｎ−ジエチル−ブタン−１，４−ジアミン
【化２３】

Ｎ−（３−アミノプロピル）モルホリンの代わりに４−（ジエチルアミノ）ブチルアミンを用いた以外は実施例１３（ｃ）の手順に従って、標記化合物を製造した（５１．４ｍｇ、２１％）。Ｌｃ−ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｅ ５００ ［Ｍ＋Ｈ］^＋、９１％ｕｖ、１００％ｅｌｓ。
【０１０６】
実施例１８
｛４−［２−ｔｅｒｔ−ブチル−５−（６−メトキシ−ナフタレン−２−イル）−３−Ｈ−イミダゾール−４−イル］−ピリジン−２−イル｝−（３−ピロリジン−１−イル−プロピル）−アミン
【化２４】

Ｎ−（３−アミノプロピル）モルホリンの代わりにｎ−（２−アミノプロピル）ピロリジンを用いた以外は実施例１３（ｃ）の手順に従って、標記化合物を製造した（１０．２ｍｇ、４％）。Ｌｃ−ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｅ ４８４ ［Ｍ＋Ｈ］^＋、１００％ｕｖ、１００％ｅｌｓ。
【０１０７】
実施例１９
｛４−［２−ｔｅｒｔ−ブチル−５−（６−メトキシ−ナフタレン−２−イル）−３−Ｈ−イミダゾール−４−イル］−ピリジン−２−イル｝−［３−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−プロピル］−アミン
【化２５】

Ｎ−（３−アミノプロピル）モルホリンの代わりに１−（３−アミノプロピル）−４−メチルピペラジンを用いた以外は実施例１３（ｃ）の手順に従って、標記化合物を製造した（５４．１ｍｇ、２２％）。Ｌｃ−ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｅ ５１３ ［Ｍ＋Ｈ］^＋、１００％ｕｖ、１００％ｅｌｓ。
【０１０８】
実施例２０
｛４−［２−ｔｅｒｔ−ブチル−５−（６−メトキシ−ナフタレン−２−イル）−３−Ｈ−イミダゾール−４−イル］−ピリジン−２−イル｝−Ｎ，Ｎ−ジエチル−エタン−１，２−ジアミン
【化２６】

Ｎ−（３−アミノプロピル）モルホリンの代わりにＮ，Ｎ−ジエチルエチレンジアミンを用いた以外は実施例１３（ｃ）の手順に従って、標記化合物を製造した（２３．２ｍｇ、１０％）。Ｌｃ−ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｅ ４７２ ［Ｍ＋Ｈ］^＋、８９％ｕｖ、１００％ｅｌｓ。
【０１０９】
処置方法
Ｔｉｅ受容体は、１個の推定膜貫通領域を有する約１２５ｋＤａのタンパク質である。これらの受容体の細胞外ドメインはいくつかの領域に分割される：ＥＧＦ様ドメインにおいて見られるシステイン発現のパターンを持つ３つの領域がある；免疫グロブリン様ドメインに対する多少弱い相同性および該免疫グロブリン様ドメインの構造特徴を有する２つの領域がある；そして、フィブロネクチンＩＩＩ反復構造に対する相同性を有する３つの領域がある。細胞外ドメインのこの特定の組合せはＴｉｅ受容体に固有のものである。Ｔｉｅ２の細胞内部分は、ＦＧＦ−Ｒ１、ＰＤＧＦ−Ｒおよびｃ−ｋｉｔのキナーゼドメインに最も密接に関係している（約４０％の同一性）。Ｔｉｅ２の細胞内部分はチロシンキナーゼの特徴の全てを含有しており、該特徴はＧＸＧＸＸＧ ＡＴＰ結合部位コンセンサス配列および典型的なチロシンキナーゼモチーフ（すなわち、ＨＲＤＬＡＡＲＮおよびＤＦＧＬ）を包含する。
【０１１０】
これらの受容体はそれらの発現がほとんど内皮細胞に制限されている血管内皮細胞増殖因子（ＶＥＧＦ）に対するこれらの受容体以外の受容体チロシンキナーゼのみであるので興味が掻き立てられた。以下のパラグラフにおいて詳述される、Ｔｉｅ２が血管形成において重要であることを示す証拠の系がいくつかある。
【０１１１】
ａ．Ｔｉｅ１およびＴｉｅ２受容体位置
ｉ．発生学的な血管発生
胎芽におけるＴｉｅ受容体の位置は、ｉｎ ｓｉｔｕハイブリダイゼーションを使用して多くの研究者により研究された。Ｋｏｒｈｏｎｅｎ ｅｔ ａｌ．（Ｂｌｏｏｄ ８０：２５４８−２５５５， １９９２）により、Ｔｉｅ受容体のｍＲＮＡが全ての形成中の血管の内皮細胞中およびマウス胎芽の心内膜中に位置することが示された。胎芽の発育の間、血管芽細胞および全ての発育中の脈管構造にＴｉｅ受容体の発現が見られる。Ｔｉｅ受容体の発現は、マウス胎芽形成の間１２〜２４時間、主要なＶＥＧＦ受容体であるＦｌｋ−１の発現のあとに生じ、おそらくこれらの受容体系の連続した異なる作用を示唆しているであろう（Ｓｃｈｎｕｒｃｈ ａｎｄ Ｒｉｓａｕ， Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ １１９： ９５７−９６８， １９９３）。ｌａｃＺ遺伝子に結合し、トランスジェニックマウスにおいて発現したＴｉｅ２の１．２Ｋｂゲノム５’フランキング領域のクローニングは、胎芽の発育の間、内皮細胞における選択的な発現パターンを示した（Ｓｃｈｌａｅｇｅｒ ｅｔ ａｌ．， Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ １２１：１０８９−１０９８，１９９５）。Ｔｉｅ２プロモーターが作用してＴｉｅ２の内皮細胞特異的発現を確実にする。
【０１１２】
ｉｉ．成体組織において
胚性血管形成と病原性血管形成との間の類似性から、腫瘍または慢性炎症性設定におけるＴｉｅ２機能の遮断は、例えば、血管形成を遮断し得、さらなる細胞増殖を遮断し、治療上の利点をもたらすという仮説が得られる。Ｔｉｅ ｍＲＮＡは、成体の皮膚において、肉芽組織において増殖している毛細血管が大量のＴｉｅ ｍＲＮＡを含んでいる活性な創傷治癒部位以外では観察することができない（Ｋｏｒｈｏｎｅｎ ｅｔ ａｌ．， Ｂｌｏｏｄ ８０：２５４８−２５５５， １９９２）。正常な皮膚由来のｃＤＮＡのＰＣＲ増幅はＴｉｅ受容体についてのシグナルを示さない（Ｋａｉｐａｉｎｅｎ ｅｔ ａｌ．， Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ． ５４：６５７１−６５７７， １９９４）。対照的に、転移性メラノーマ由来のｃＤＮＡについては強いシグナルが見られ、この場合、インサイツ実験はこのシグナルを血管内皮に局在化させる。Ｔｉｅ受容体発現は樹立した脈管構造においてダウンレギュレートされるが、排卵の間に卵巣において、創傷において、および腫瘍（乳がん、メラノーマおよび腎細胞癌）脈管構造において生じる血管形成においてはアップレギュレートされ、成体における血管形成が胚性血管形成メカニズムを模倣しているという一般的な見解と一致する。
【０１１３】
ｂ．Ｔｉｅノックアウト動物
Ｔｉｅ２ノックアウトを有するか、または、「ドミナントネガティブ」なＴｉｅ２受容体をコードする導入遺伝子を担持しているホモ接合マウスは、Ｔｉｅ２受容体が胎芽の発育に重要であることが確認された（Ｄｕｍｏｎｔ ｅｔ ａｌ．， Ｇｅｎｅｓ Ｄｅｖ． ８：１８９７−１９０９， １９９４；Ｓａｔｏ ｅｔ ａｌ．， Ｎａｔｕｒｅ ３７６：７０−７４， １９９５）。これらのマウスの胎芽死は血管機能不全により引き起こされ、内皮細胞数が劇的に減少していた。内皮細胞の分化および血管のｉｎ ｓｉｔｕ形成である血管形成は、Ｔｉｅ２欠損
マウスにおいて比較的正常であると思われる。引き続いて起こる、血管分枝の形成（血管形成）を引き起こす出芽およびリモデリングがＴｉｅ２変異マウス胎芽において強烈に減少した。この出芽および血管形成の欠損は、特に、脳、神経管および心臓の実質的な成長遅延を引き起こし、生育力を欠乏させた。このことは、血管形成におけるＴｉｅ２の重要性を例示している。血管形成は多くの成長因子により調節されるので、このことは意義深いことである。興味深いことには、Ｆｌｋ１（ＶＥＧＦ受容体）ノックアウトマウスは、Ｔｉｅ２の分裂よりも早期に生じる血管形成における胎芽致死性欠損を示す。Ｔｉｅ１受容体の分裂により、非常に異なる表現型が生じ、後に欠損した表現型が生じる；マウス胎芽は、他の十分に形成された脈管構造の完全性の欠損により引き起こされる出血のために発育の後期に死亡する。これらの研究をひとまとめにして考えると、ＶＥＧＦ／Ｆｌｋ１およびＴｉｅ系は連続的な形態で作用し、Ｔｉｅ２が血管形成において重要な役割を有することが示唆される。
【０１１４】
ｃ．Ｔｉｅ２リガンド
最近、Ｔｉｅ２受容体の２つリガンドが報告された。アンジオポエチン（Ａｎｇｉｏｐｏｉｅｔｉｎ）−１は、Ｔｉｅ２と結合してＴｉｅ２のチロシンリン酸化を誘発し、インビボでのその発現は、血管の発生と極めて密接な関係がある（Ｄａｖｉｓ ｅｔ ａｌ．， Ｃｅｌｌ ８７：１１６１−１１６９， １９９６）。アンジオポエチン−１を欠損するように操作されたマウスは、Ｔｉｅ２受容体を欠損するマウスにおいてすでに見られた血管形成を暗示させる血管形成欠損を示し、これは、アンジオポエチン−１がＴｉｅ２に対する主要な生理学的リガンドであり、Ｔｉｅ２が重要なインビボ血管形成作用を有することを示している（Ｓｕｒｉ ｅｔ ａｌ．， Ｃｅｌｌ ８７：１１７１−１１８０， １９９６）。アンジオポエチン−２は相同性スクリーニングにより同定され、Ｔｉｅ２受容体に対する自然発生のアンタゴニストであることが示された。アンジオポエチン−２のトランスジェニック過剰発現は、マウス胎芽における血管形成を破壊する（Ｍａｉｓｏｎｐｉｅｒｒｅ ｅｔ ａｌ．， Ｓｃｉｅｎｃｅ ２７７：５５−６０， １９９７）。これらの結果をまとめると、血管形成におけるＴｉｅ２受容体に対する役割が支持される。
【０１１５】
式（Ｉ）で示される化合物を治療において使用するためには、それらは、通常、標準的な製薬プラクティスに従って医薬組成物に処方される。
【０１１６】
本発明のさらなる態様によると、式（Ｉ）で示される化合物またはその医薬上許容される塩および医薬上許容される担体を含む医薬組成物が提供される。
【０１１７】
式（Ｉ）で示される化合物を上記投与量範囲内で投与する場合、毒物学的効果は示されない／予想されない。
【０１１８】
式（Ｉ）で示される化合物、その医薬上許容される塩およびそれを配合した医薬組成物は、好都合には、薬物投与に慣用的に使用される経路のいずれによっても、例えば、経口、局所、非経口または吸入により投与され得る。式（Ｉ）で示される化合物は、慣用的な手順に従って式（Ｉ）で示される化合物を標準的な医薬担体と配合することにより調製される慣用的な投与形態で投与され得る。式（Ｉ）で示される化合物は、また、公知の第２の治療上活性な化合物と組み合わせて慣用的な製剤にて投与され得る。これらの手順は、所望の製剤に応じて成分を混合、造粒および圧縮または溶解することを含み得る。医薬上許容される担体または希釈剤の形態または特性は、配合されるべき活性成分の量、投与経路および他の周知の可変要因により決定される。担体（複数も可）は、処方物の他の成分と適合し、かつ、その受容者に有害ではないという意味で「許容」されなければならない。
【０１１９】
使用される医薬担体は、例えば、固体または液体のいずれであってもよい。固体担体の例は、ラクトース、白土、シュークロース、タルク、ゼラチン、寒天、ペクチン、アカシア、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸などである。液体担体の例は、シロップ、落花生油、オリーブ油、水などである。同様に、担体または希釈剤は、単独でまたはワックスと一緒にモノステアリン酸グリセリンまたはジステアリン酸グリセリンのような当業者に周知の徐放性物質を含み得る。
【０１２０】
広範囲に及ぶ種々の医薬剤形を使用することができる。固体担体を使用する場合、該製剤は、錠剤化され得るか、粉末もしくはペレットの形態でハードゼラチンカプセル中に入れることができるか、または、トローチ剤もしくはロゼンジ剤の剤形であり得る。固体担体の量は、広範囲に変化するであろうが、好ましくは、約２５ｍｇ〜約１ｇであろう。液体担体を使用する場合、該製剤は、シロップ剤、乳剤、ソフトゼラチンカプセル剤、アンプル剤のような無菌注射液剤、または非水性液体懸濁剤の剤形であろう。
【０１２１】
式（Ｉ）で示される化合物は、局所的に、すなわち、非全身投与により投与され得る。これは、式（Ｉ）で示される化合物の表皮または頬側口腔への外用およびかかる化合物の耳、目および鼻への滴下を包含し、その結果、当該化合物は、血流に有意には進入しない。対照的に、全身投与は、経口投与、静脈内投与、腹腔内投与および筋肉内投与を意味する。
【０１２２】
局所投与に好適な処方物としては、リニメント剤、ローション剤、クリーム剤、軟膏剤またはペースト剤のような皮膚を介して炎症部位への浸透に好適な液体または半液体製剤、および目、耳または鼻への投与に好適な滴剤が挙げられる。活性成分は、局所投与については、処方物の０．００１％〜１０％ｗ／ｗ、例えば、１重量％〜２重量％を含み得る。しかしながら、処方物の１０％ｗ／ｗほど含んでいてよく、好ましくは、５％ｗ／ｗ未満、より好ましくは、０．１％〜１％ｗ／ｗ含むであろう。
【０１２３】
本発明によるローション剤としては、皮膚または目への適用に適したものが挙げられる。眼ローション剤は、殺菌剤を含有していてもよい滅菌水溶液を含むことができ、滴剤の調製方法と類似の方法により調製できる。皮膚への適用のためのローション剤またはリニメント剤は、また、アルコールまたはアセトンのような皮膚を速乾させ冷却させる薬剤、および／またはグリセロールまたはヒマシ油もしくは落花生油などの油のような保湿剤を包含してもよい。
【０１２４】
本発明によるクリーム剤、軟膏剤またはペースト剤は、外用のための活性成分の半固体処方物である。それらは、適当な機械により、微細または微粉砕形態の活性成分を単独でまたは水性または非水性流体中の溶液または懸濁液中で油脂性または非油脂性基剤と混練することにより調製できる。該基剤は、固形パラフィン、ソフトパラフィンもしくは流動パラフィン、グリセロール、蜜蝋、金属石鹸のような炭化水素；漿剤；扁桃油、トウモロコシ油、落花生油、ヒマシ油またはオリーブ油のような天然起源の油；羊毛脂もしくはその誘導体またはステアリン酸もしくはオレイン酸のような脂肪酸をプロピレングリコールまたはマクロゲルのようなアルコールと一緒に含んでもよい。該処方物は、ソルビタンエステルまたはそのポリオキシエチレン誘導体の如き陰イオン性、陽イオン性または非イオン性界面活性剤のような適当な界面活性剤を配合してもよい。天然ガム、セルロース誘導体または珪酸性シリカの如き無機物質のような懸濁化剤、およびラノリンのような他の成分を含んでもよい。
【０１２５】
本発明の滴剤は、滅菌水性または油性溶液または懸濁液を含むことができ、殺菌剤および／または殺真菌剤および／または他の適当な保存剤の適当な水溶液に活性成分を溶解することにより調製でき、好ましくは、界面活性剤を含み得る。次いで、得られた溶液を濾過により浄化し、適当な容器に移し、次いで、密封し、オートクレーブ処理するかまたは９８〜１００℃で半時間維持することにより滅菌することができる。別法としては、該溶液を濾過滅菌し、無菌技法により容器に移すことができる。滴剤に包含させるのに適当な殺菌剤および殺真菌剤の例は、硝酸フェニル水銀または酢酸フェニル水銀（０．００２％）、塩化ベンザルコニウム（０．０１％）および酢酸クロルヘキシジン（０．０１％）である。油性溶液の調製に適した溶媒としては、グリセロール、希アルコールおよびプロピレングリコールが挙げられる。
【０１２６】
式（Ｉ）で示される化合物は、非経口的に、すなわち、静脈内投与、筋肉内投与、皮下投与、鼻腔内投与、直腸内投与、膣内投与または腹腔内投与により投与され得る。非経口投与の皮下形態および筋肉内形態が一般的に好ましい。かかる投与に適当な投与剤形は、慣用的な技法により調製され得る。式（Ｉ）で示される化合物は、また、吸入により、すなわち、鼻腔内および経口吸入投与により投与され得る。エアゾール剤または定量型吸入器のようなかかる投与に適当な投与剤形は、慣用的な技法により調製され得る。
【０１２７】
式（Ｉ）で示される化合物は、また、過剰なまたは不適当な血管形成により憎悪される病態の治療または予防において局所的に使用され得る。
【０１２８】
式（Ｉ）で示される化合物は、Ｔｉｅ２受容体活性を阻害するのに十分な量で投与され、その結果、正常なレベルに、または、ある場合には正常以下のレベルにダウンレギュレートされて、該病態を改善または予防することができる。
【０１２９】
不適当な血管形成要素を有する慢性疾患は、糖尿病性網膜症および黄斑変性のような種々の眼新血管新生である。脈管構造の過剰なまたは増大した増殖を有する他の慢性疾患は、腫瘍増殖および転移、アテローム性動脈硬化症およびある種の関節炎症状である。したがって、Ｔｉｅ２チロシンキナーゼ受容体阻害剤は、これらの病態の血管形成要素の遮断に有用なものである。
【０１３０】
本明細書で用いる用語「脈管構造の過剰なまたは増大した増殖」としては、血管腫および眼疾患により特徴付けられる疾患が挙げられるが、これらに限定されるものではない。本明細書で用いる用語「不適当な血管形成」としては、癌、転移、関節炎、乾癬およびアテローム性動脈硬化症において生じるような組織増殖を伴う血管増殖により特徴付けられる疾患が挙げられるがこれらに限定されるものではない。
【０１３１】
式（Ｉ）で示される化合物について本明細書にて記載した全ての使用方法について、１日経口投与計画は、好ましくは、全体重１ｋｇにつき約０．１〜約８０ｍｇ、好ましくは、約０．２〜３０ｍｇ／ｋｇ、より好ましくは、約０．５ｍｇ〜１５ｍｇであろう。１日非経口投与計画は、全体重１ｋｇにつき約０．１〜約８０ｍｇ／ｋｇ、好ましくは、約０．２〜約３０ｍｇ／ｋｇ、より好ましくは、約０．５ｍｇ〜１５ｍｇ／ｋｇであろう。１日局所投与計画は、好ましくは、１日１〜４回、好ましくは、２または３回投与される０．１ｍｇ〜１５０ｍｇであろう。１日吸入投与計画は、好ましくは、１日あたり約０．０１ｍｇ／ｋｇ〜約１ｍｇ／ｋｇであろう。式（Ｉ）で示される化合物またはその医薬上許容される塩の個々の投与の最適な量および間隔は、処置される症状の性質および程度、投与の経路および部位、ならびに処置される特定患者により決定されるであろうし、かかる最適値は、慣用技法により決定され得ることは当業者により理解されるであろう。最適な治療単位、すなわち、所定日数の間に１日あたりに投与される式（Ｉ）で示される化合物またはその医薬上許容される塩の投与回数は、慣用の治療単位決定試験を使用して当業者により確定され得ることは当業者により理解されるであろう。
【０１３２】
薬理試験法
Ａ．Ｔｉｅ２キナーゼ活性の測定
Ｔｉｅ２受容体の部分的ｃＤＮＡクローンを使用してＴｉｅキナーゼ研究のためのタンパク質を調製した。主要なスクリーニングアッセイを生じさせるために、Ｔｉｅ２キナーゼドメインに対するバキュロウイルス発現ＧＳＴ融合体を構築し、市販のベクターｐＡｃＧ１（ファーミンゲン（Ｐｈａｒｍｉｎｇｅｎ））を用いて発現させた。
【０１３３】
この最終構築物をバキュロウイルス中にトランスフェクトし、可溶性ＧＳＴ融合生成物をスクリーニングアッセイに使用した。先の研究により、候補標的／シグナリング分子についてスクリーニングするためのネズミＴｉｅ２キナーゼドメインに対するバキュロウイルス発現ＧＳＴ融合体の使用が示された（Ｈｕａｎｇ ｅｔ ａｌ．， Ｏｎｃｏｇｅｎｅ １１：２０９７−２１０３， １９９５）。
【０１３４】
Ｔｉｅ２キナーゼ活性アッセイ：Ｔｉｅ２キナーゼ活性アッセイは、典型的には、以下のとおり、記載された２つの方法のうちの１つにて行われた。アッセイにおいてわずかに変更させても同様の結果が得られる。
【０１３５】
１．自己リン酸化フラッシュプレートアッセイ
材料：
キナーゼ緩衝液（最終２０ｍＭ Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ、ｐＨ７．０、１００ｍＭ ＮａＣｌ、１２ｍＭ ＭｇＣｌ_２、１ｍＭ ＤＴＴ）。
ガンマ^３３ｐ−ＡＴＰ（通常、最終量０．５〜１ｕＣｉ／ウェル）
ＡＴＰ（最終３０ｕＭ、または他の所望の濃度）
フラッシュプレート（９６−ウェル、プラスチックシンチレーター被覆ウェルを有するポリスチレンマイクロプレート）
ＴｏｐＣｏｕｎｔ（マイクロプレートシンチレーションカウンター）
手順：
インキュベーター振盪器を作動させ、温度を３０℃に調節する。
ウェルあたり３Ｘキナーゼ緩衝液２０ｕｌをフラッシュプレートに添加する。
バックグラウンドを除いてウェルあたりタンパク質２０ｕｌを添加する。化合物を、典型的には、ＤＭＳＯ貯蔵液にて、１〜２ｕｌ添加する。
ウェルあたりガンマ^３３ｐ−ＡＴＰと冷ＡＴＰとの混合液２０ｕｌを添加する。
総容量は６０ｕｌである。
透明なポリエステルフィルムで覆う。
振盪器中にて３０℃で２時間または所望の時間インキュベートする。
フラッシュプレートを振盪器から取り出し、（例えば、ウェルあたり１Ｘ ＰＢＳ中１０ｕＭ ＡＴＰ ３００ｕｌで）５回洗浄する。
ＴｏｐＣｏｕｎｔまたは他の計数装置にてプレートを読み取る。通常の算出法を使用して結果を阻害％およびＩＣ５０として算出する。
【０１３６】
２．Ｔｉｅ２キナーゼについての蛍光偏光
最終アッセイ条件：
５０ｍＭ ＨＥＰＥＳ ｐＨ７．５
２％ＤＭＳＯ（化合物をスクリーニングする場合）
２５０ｕＭ ＡＴＰ
２ｍＭ ＭｇＣｌ_２
１ｍＭ ＤＴＴ
５０ｕＭ Ｎａ Ｖａｎｉｄａｔｅ
１０ｕＭペプチド基質
活性化ｔｉｅ ２キナーゼ　^＊ 以下の活性化プロトコールを参照
ペプチド基質：
ＲＦＷＫＹＥＦＷＲ−ＯＨ
ＭＷ（ＴＦＡ塩）＝１８７３Ｄａ
１ｍＭペプチド貯蔵液を調製し、−２０℃で貯蔵する。
使用直前に１００ｕＭに希釈する。
９Ｘキナーゼ緩衝液：
４５０ｍＭ ＨＥＰＥＳ ｐＨ７．５
９００ｍＭ ＮａＣｌ
４５０ｕＭ Ｎａ Ｖａｎｉｄａｔｅ
１８ｍＭ ＭｇＣｌ_２
１００ｍＭ ＤＴＴ
予定よりも早く調製し、アリコートにて−２０℃で貯蔵することができる。
ＡＴＰ貯蔵液：
２５ｍＭ ＡＴＰ貯蔵液を調製し、必要になるまでアリコートにて−２０℃で貯蔵する。使用前に２．５ｍＭに希釈する。
手順：
反応５０ｕｌについて、９６−ウェル黒色ハーフエリアプレート（コースター（Ｃｏｓｔａｒ）、カタログ番号３６９４）の各ウェルに以下の成分を添加する。
１．２０％ＤＭＳＯ中化合物５ｕｌ
２．９Ｘキナーゼ緩衝液５ｕｌ
３．２．５ｍＭ ＡＴＰ ５ｕｌ
４．１００ｕＭペプチド基質５ｕｌ
５．ＰＴＫ検出混合液（パンベラ（Ｐａｎｖｅｒａ）、Ｐ−２６５２、５０ｍｌ − 英国販売代理店はケンブリッジ・バイオサイエンス（Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ）である）２５ｕｌ
６．反応を開始するために１Ｘ緩衝液で希釈した活性化ｔｉｅ ２キナーゼ（以下のプロトコール）５ｕｌ。
７．酵素活性にしたがって３０〜５０分間循環させてＦＰ装置にて偏光を読み取る。
【０１３７】
式（Ｉ）で示される代表的な化合物である実施例１〜２０の化合物は、この蛍光アッセイにおいて活性であり、＜１ｕＭのＩＣ５０を有することが判明した。
【０１３８】
Ｔｉｅ２キナーゼの活性化プロトコール：
最終緩衝液条件：
２０ｍＭ Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ ｐＨ７．５
１２ｍＭ ＭｇＣｌ_２
１００ｍＭ ＮａＣｌ
２０ｕＭ Ｎａ Ｖａｎｉｄａｔｅ
１ｍＭ ＤＴＴ
３００ｕＭ ＡＴＰ
手順
１．３００ｕＭ ＡＴＰおよび上記緩衝条件にて５ｕＭ ｔｉｅ ２キナーゼをインキュベートする。
２．２７℃で２時間インキュベートする。
３．２０ｍＭ Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ ｐＨ７．５、１００ｍＭ ＮａＣｌ_２で前平衡化したＮＡＰ−２５脱塩カラム（ファルマシア・ビオテク（Ｐｈａｒｍａｃｉａ Ｂｉｏｔｅｃｈ）カタログ番号１７−０８５２−０２）に反応物２．５ｍｌを添加して酵素からＡＴＰを分取する。
４．５．０ｍｌの２０ｍＭ Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ ｐＨ７．５、１００ｍＭ ＮａＣｌ_２で酵素を溶離する；タンパク質濃度は、この時点で２．５ｕＭである。
５．酵素をアリコートに分け、できる限り早く−８０℃で貯蔵する。
Ｂ．Ｔｉｅ２受容体シグナル伝達の測定 − 細胞アッセイ
ＨＥＬ細胞（ＡＴＣＣ ＃ ＴＩＢ１８０）を、懸濁培養液として２ｍＭグルタミンおよび１０％ＦＢＳを追加したＲＰＭＩ−１６４０培地中にて１〜５×１０^５ｍｌで培養する。実験の１６〜３６時間前に必要な数の細胞を０．５％ＦＢＳ／ＲＰＭＩ培地中に継代培養する。実験当日、細胞を収集し、０．５％ＦＢＳ ＲＰＭＩ中０．５〜１．０×１０^７細胞／ｍｌの密度で再懸濁させ、６ウェルプレートに２〜３ｍｌ／ウェルで播く。
【０１３９】
別法として、ヒト臍帯静脈内皮細胞（ＨＵＶＥＣ）（クローンティクス（Ｃｌｏｎｅｔｉｃｓ） − メリーランド州ウォーカーズヴィル）をアッセイに使用し得る。２〜１２継代目のＨＵＶＥＣを補足ＥＧＭ（クローンティクス）中にて６ウェルプレートにウェルあたり２×１０^５および１×１０^６細胞でプレーティングする。２４時間後、培地を、３％ＢＳＡ（クローンティクス）を含有するＥＢＭと交換し、細胞を一夜培養し、翌日、アッセイに使用する。
【０１４０】
細胞を適当な濃度の阻害化合物で３０〜４５分間処理する。ウェルの内容物をロッカーにて簡単に混合し（約３０秒）、３７℃でインキュベートする。次いで、細胞を血清または線維芽細胞条件培地のような天然リガンド源で１０分間処理する。
【０１４１】
１０分間のインキュベーション時間の最後に、該プレートを氷上に置く。細胞を収集し、培地を取り除く。細胞を変性試料緩衝液（インビトロジェン（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ） − カリフォルニア州カールズバッド）中にて溶解する。懸濁液を中程度に設定して５回超音波処理し、氷に戻す。以下に詳細に記載するように、Ｔｉｅ２受容体のリン酸化状態を、ウェスタンブロッティングおよび抗−ホスホ−Ｔｉｅ２抗体による検出により判定する（Ｈａｒｌｏｗ， Ｅ．， ａｎｄ Ｌａｎｅ， Ｄ． Ｐ．， Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ − Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ， Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒｅｓｓ： Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ， １９８８）。溶解物３０ｕｌを７．５％ＳＤＳ／ポリアクリルアミドゲルにて泳動させる。次いで、ウェスタンブロッティングに関する製造者の使用説明書に従って、該ゲルをニトロセルロースまたはＰＶＤＦ膜に転移させる。
【０１４２】
ブロットをＰＢＳ／０．０５％Ｔｗｅｅｎ−２０で洗浄し、次いで、室温にて３％ＢＳＡ／ＰＢＳ／Ｔｗｅｅｎで１時間遮断する。次いで、ブロットをＰＢＳ／０．０５％Ｔｗｅｅｎ中１ｕｇ／ｍｌの抗−ホスホ−Ｔｉｅ２抗体（スミスクライン・ビーチャム（ＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ Ｂｅｅｃｈａｍ）と一緒に１時間インキュベートする。次いで、該ブロットをＰＢＳ／Ｔｗｅｅｎで４回、毎回５分間洗浄する。該ブロットを、製造者が推奨する希釈度にＰＢＳ／Ｔｗｅｅｎで希釈した抗−マウス−ＨＲＰコンジュゲート二次抗体と一緒に１時間インキュベートする。該ブロットをＰＢＳ／Ｔｗｅｅｎで４回、毎回５分間洗浄する。最後の洗浄後、ＥＣＬ法（アマシャム（Ａｍｅｒｓｈａｍ））または同等の方法によりブロットを発色させる。
【０１４３】
デンシトメーターまたはグラフィックスプログラム（例えば、ＩｍａｇｅＱｕａｎｔ − Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｄｙｎａｍｉｃｓ）を使用して、各ブロットをスキャンする。Ｔｉｅ−２バンドを単離し、各レーンに関して「ボックスト・アウト（ｂｏｘｅｄ ｏｕｔ）」する。各試料のピクセル量または比較基準を分析する。また、各試料について同一寸法の適当なバックグラウンド領域を測定する。バックグラウンドについて調節した後、リン酸化を、未処理対照に対するホスホチロシン染色の割合として表す。
【０１４４】
血管形成インビボモデル
インビボでの血管形成測定 − ネズミ空気嚢肉芽腫モデル：
Ｔｉｅ２の阻害が血管の過剰または不適当な増殖の組織破壊を止めることを示すために使用される炎症性血管形成のモデルを以下に記載する。慢性炎症のネズミ空気嚢肉芽腫モデル（Ｋｉｍｕｒａ ｅｔ ａｌ．， １９８５， Ｊ． Ｐｈａｒｍａｃｏｂｉｏ−Ｄｙｎ．， ８：３９３−４００；Ｃｏｌｖｉｌｌｅ−Ｎａｓｈ ｅｔ ａｌ．， １９９５， Ｊ． Ｐｈａｒｍ． ａｎｄ Ｅｘｐ． Ｔｈｅｒ．， ２７４：１４６３−１４７２（その開示内容は出典明示により全体として本明細書の記載とする））は、炎症細胞流入、線維組織増殖および激しい血管形成により特徴付けられる。それは、炎症性血管形成の代表的なものであり、血管形成要素が肉芽腫増殖およびサイズを除いて薬理学的にモジュレートされ得ることを示している。加えて、血管形成は、血管キャスティング法により正確に定量化され得る。
【０１４５】
１日目、Ａｅｒｒａｎｅ（イソフルラン）ガス（５％）または他の適当な方法を使用してマウスを麻酔し、その後、２７ｇ針を使用して空気３ｍｌを背部皮下組織中に注入する。マウスを回復させる。
【０１４６】
０日目、Ａｅｒｒａｎｅまたは他の適当な方法を使用してマウスを再度麻酔し、麻酔したらすぐに、−１日目に形成させた空気嚢中に０．１％ｖ／ｖクロトン油を含むフロイント完全アジュバント０．５ｍｌを注入する。該動物はまた、典型的には０．２ｍｌのＮ，Ｎ−ジメチルアセトアセトアミド（ＤＭＡ）（シグマ（Ｓｉｇｍａ）、ミズーリ州セントルイス）／Ｃｒｅｍｅｐｈｏｒ Ｅｌ（シグマ、ミズーリ州セントルイス）、生理食塩水（１０／１０／８０）または他の適当なビヒクル中にて化合物を投与してそれらの投与計画（実験に依存する日数）を開始する。動物を回復させ、麻酔薬の不在下にて該動物に全ての次なる投与を行う。
【０１４７】
１〜５日目、スケジュールに従って動物に投薬する。
【０１４８】
６日目、該動物を再度麻酔し、その後、血管キャストを作製する（Ｋｉｍｕｒａ ｅｔ ａｌ．， １９８６， Ｊ． Ｐｈａｒｍａｃｏｂｉｏ−Ｄｙｎ．， ９：４４２−４４６）；これは、カーミンレッド（１０％）（シグマ、ミズーリ州セントルイス）／ゼラチン（５％）（シグマ、ミズーリ州セントルイス）溶液の１ｍｌ尾静脈注射を含む。次いで、動物を致死量の麻酔薬により屠殺し、肉芽腫組織を取り出す前に２時間４℃で冷却する。
【０１４９】
肉芽腫を取り出した後、それを計量し、次いで、４５℃で３日間乾燥させ、再度、計量する。次いで、乾燥組織を、５７℃で３日間、１２Ｕ／ｍｌ^−１パパイン（シグマ、ミズーリ州セントルイス）および０．３３ｇ／Ｌ^−１Ｎ−アセチル−１−システイン（シグマ、ミズーリ州セントルイス）を含有する０．０５Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ７．０）０．９ｍｌ中にて消化する。３日間の消化後、５ｍＭ ＮａＯＨ ０．１ｍｌの添加によりカーミンレッドを可溶化する。試料を遠心分離し、次いで、０．２ｕｍアクロディスクを使用して濾過する。次いで、非カーミン処置動物からの抽出組織において作成したカーミンレッド標準曲線（０．５〜２ｍｇ／ｍｌ）に対してカーミン含量を測定し、４９０ｎｍで読み取る。試料および標準曲線は、典型的には、ＤｅｌｔａＳｏｆｔ Ｅｌｉｓａ分析ソフトウエア（ビオメタリクス・インコーポレーテッド（Ｂｉｏｍｅｔａｌｌｉｃｓ Ｉｎｃ．）、ニュージャージー州プリンストン）を使用して測定する。次いで、カーミン含量を使用して、種々の処置についての血管指数を測定する。ここで、血管指数とは、乾燥組織１ｇあたりのカーミン染料のｍｇのことである。
【０１５０】
血管密度に対する化合物の効果を、典型的には、肉芽腫の誘発後、６日間測定した。この時点が血管形成のピーク時またはその付近であることが測定された。正の対照として、血管新生抑制ステロイドであるメドロキシプロゲステロン（Ｇｒｏｓｓ ｅｔ ａｌ．， １９８１， Ｐｒｏｃ． Ｎａｔｌ． Ａｃａｄ． Ｓｃｉ． ＵＳＡ， ７８：１１７６−１１８０（その開示内容は出典明示により全体として本明細書の記載とする））を使用した。この対照は、このモデルにおいて５０％の最大減少を示した。メドロキシプロゲステロンは、乾燥重量により測定した場合、肉芽腫の大きさに対して効果を及ぼさなかった。
【０１５１】
血管形成モデル − インビボ
インビボでの血管形成の測定 − マトリゲルモデル：
約１週間、マウスの皮膚の下に細胞外マトリックスゲルを入れ、次いで、いくつかの基準を用いて該ゲルの血管形成性浸潤を定量化することによりインビボにて血管形成モデルを作成する（Ｂｉａｎｃｏｎｅ， Ｌ， ｅｔ． ａｌ． Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ｏｆ Ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ Ａｎｇｉｏｇｅｎｅｓｉｓ ｂｙ Ｌｏｃａｌ Ｓｔｉｍｕｌａｔｉｏｎ ｏｆ Ｆａｓ Ｉｎ Ｖｉｖｏ． Ｊ． Ｅｘｐ． Ｍｅｄ． １８６：１４７， １９９７）。すなわち、減少した還元型増殖因子である無エンドトキシンＭａｔｒｉｇｅｌ^Ｒ（ベクトン−ディッキンソン（Ｂｅｃｔｏｎ−Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ）、マサチューセッツ州ベッドフォード）は低温でゲルである。抗体または既知の血管形成剤と該ゲルとを、それらが総容量の２％よりも多くならないように混合する。８週齢またはそれ以上のＣ５７雌性マウスに、冷却した注射器による背面皮下注射によりＭａｔｉｇｅｌ^Ｒ０．５ｍｌを投与する。生理学的温度で、液体Ｍａｔｒｉｇｅｌ^Ｒは、迅速に固体および凝集性ゲルを形成する。実験過程の間、マウスに上記したように投与される試験化合物または対照を投与した。６日後、該マウスを屠殺し、Ｍａｔｒｉｇｅｌ^Ｒプラグを回収する。Ｄｒａｂｋｉｎの方法（Ｄｒａｂｋｉｎ， ＤＬ ａｎｄ Ａｕｓｔｉｎ， ＪＨ： Ｓｐｅｃｔｒｏｐｈｏｔｏｍｅｔｒｉｃ Ｓｔｕｄｉｅｓ ＩＩ． Ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎｓ ｆｒｏｍ ｗａｓｈｅｄ ｂｌｏｏｄ ｃｅｌｌｓ； ｎｉｔｒｉｃ ｏｘｉｄｅ ｈｅｍｏｇｌｏｂｉｎ ａｎｄ ｓｕｌｆｈｅｍｏｇｌｏｂｉｎ． Ｊ Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ １１２：５１， １９３５）（シグマ、ミズーリ州セントルイス）によりゲルのヘモグロビン含量を分析することにより、または上記したようにＣＤ３１染色を用いて血管を染色して定量化することにより、血管形成を定量化する。
【０１５２】
本明細書にて引用した特許および特許出願を包含するがこれらに限定されない全ての刊行物は、個々の刊行物が十分に開示されているかの如く具体的かつ個別的に出典明示により本明細書の一部とすることが明示されているかのように出典明示により本明細書の一部とする。
好ましい実施態様を包含する上記記載事項は本発明を十分に開示する。本明細書に具体的に開示した実施態様の変更および改良は特許請求の範囲の範囲内に含まれる。さらに推敲することなく、当業者は上記記載内容を用いて本発明を最大限に利用することができると考えられる。したがって、本明細書における実施例は単に例示的であって、如何なる場合も本発明の範囲を制限するものではないと考えられる。排他的性質および優先権を主張する本発明の実施態様は特許請求の範囲に定義するとおりである。[0001]
(Field of the Invention)
The present invention relates to a method of treating a disease in a mammal in which inappropriate, excessive or undesired angiogenesis has occurred and / or excessive Tie2 receptor activity has occurred.
[0002]
(Background of the Invention)
Chronic proliferative diseases often can cause or maintain inflammatory and / or proliferative conditions or involve severe angiogenesis leading to tissue destruction through invasive growth of blood vessels . (Folkman, EXS 79: 1-8, 1997; Folkman, Nature Medicine 1: 27-31, 1995; Folkman and Shining, J. Biol. Chem. 267: 10931, 1992).
[0003]
Angiogenesis is generally used to describe the development of new or replacement blood vessels, or neovascularization. It is a necessary and physiological normal process of establishing vasculature in the embryo. Angiogenesis generally does not occur in most normal adult tissues except at sites of ovulation, menstruation and wound healing. However, many diseases are characterized by persistent and uncontrolled angiogenesis. For example, in arthritis, new capillaries invade joints and destroy cartilage (Colville-Nash and Scott, Ann. Rheum. Dis., 51, 919, 1992). In diabetes (and in many different eye diseases), new blood vessels can invade the macula or retina or other ocular structures and cause blindness (Brooks et al., Cell, 79, 1157, 1994). . The process of atherosclerosis has been linked to angiogenesis (Kahlon et al., Can. J. Cardiol. 8, 60, 1992). Tumor growth and metastasis were found to be angiogenesis-dependent (Folkman, Cancer Biol, 3, 65, 1992; Denekamp, Br. J. Rad. 66, 181, 1993; Fidler and Ellis, Cell, 79, 185, 1994).
[0004]
Recognition of the involvement of angiogenesis in major diseases has involved research to identify and develop inhibitors of angiogenesis. These inhibitors generally involve activation of endothelial cells by angiogenic signals; synthesis and release of degradative enzymes; endothelial cell migration; proliferation of endothelial cells; and distinct targets in the angiogenic cascade such as the formation of capillaries. Classified according to. Thus, angiogenesis occurs at many stages and attempts are underway to discover and develop compounds that act at these various stages to block angiogenesis.
[0005]
Inhibitors of angiogenesis that act by a wide variety of mechanisms include cancer and metastasis (O'Reilly et al., Cell, 79, 315, 1994; Ingber et al., Nature, 348, 555, 1990), eye diseases (Friedlander). et al., Science, 270, 1500, 1995), arthritis (Peackock et al., J. Exp. Med. 175, 1135, 1992; Peacock et al., Cell. Immun. 160, 178, 1995) and hemangiomas. (Taraboletti et al., J. Natl. Cancer Inst. 87, 293, 1995) are publications teaching that they are beneficial in diseases.
[0006]
Angiogenic signals result from the interaction of certain ligands with their receptors. Tie1 and Tie2 receptors are one-pass transmembrane tyrosine kinase receptors (Tie is an immunoglobulin (i(mmunoglobulin) andETyrosine with GF homology domain (Tyrosine) meaning kinase receptor). Both have recently been cloned and reported by several groups (Dumont et al., Oncogene 8: 1293-1301, 1993; Partanen et al., Mol. Cell Biol. 12: 1698-1707, 1992; Sato et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 90: 9355-9358, 1993).
[0007]
Based on the importance of the Tie2 receptor in angiogenesis, inhibition of Tie2 kinase activity is expected to prevent angiogenesis, resulting in a disease-specific therapeutic effect. Recently, Lin et al. (J. Clin. Invest. 100: 2072-2078, 1997) showed that exogenous administration of soluble Tie2 receptor in animal models inhibited angiogenesis and cancer growth. Thus, inhibition of the Tie2 receptor by other means, such as inhibition of Tie2 receptor kinase activity, is expected to have therapeutic benefits in proliferative diseases, including angiogenesis.
[0008]
The present application discloses that compounds having a specific structure can inhibit the kinase activity of the Tie2 receptor and block its signaling, thus preventing proliferative diseases through inhibition of signals for angiogenesis. Teaches new findings that may be beneficial.
[0009]
(Summary of the Invention)
The present invention relates to a novel compound, which is capable of inhibiting Tie2 kinase, which is used to treat angiogenesis for the treatment of chronic inflammatory or proliferative or angiogenic diseases caused by excessive or inappropriate angiogenesis. It is a finding that it can be used for inhibition.
[0010]
The present invention relates to novel compounds of formula (I), and pharmaceutical compositions comprising a compound of formula (I) and a pharmaceutically acceptable diluent or carrier thereof.
[0011]
Accordingly, the present invention provides a compound of formula (I) represented by the structure:
Embedded image

[Where,
V is CH or N;
X is O, CH₂, S or NH;
n is 0 or an integer having a value from 1 to 4;
t is 0 or an integer having a value from 1 to 10;
Ar represents an optionally substituted naphth-2-yl, naphth-1-yl, bicyclic or tricyclic carbocyclic, bicyclic or tricyclic aromatic heterocyclic, or bicyclic or tricyclic A cyclic heterocycle;
Q is hydrogen, (CR^ThirteenR¹⁴)_tOR⁹, (CR^ThirteenR¹⁴)_tOR¹¹, C_1-10Alkyl, halo substituted C_1-10Alkyl, C_2-10Alkenyl, C_2-10Alkynyl, C_3-7Cycloalkyl, C_3-7Cycloalkyl C_1-10Alkyl, C_5-7Cycloalkenyl, C_5-7Cycloalkenyl C_1-10Alkyl, aryl, aryl C_1-10Alkyl, heteroaryl, heteroaryl C_1-10Alkyl, heterocyclyl, heterocyclyl C_1-10Alkyl, (CR^ThirteenR¹⁴)_tS (O)_mR⁸, (CR^ThirteenR¹⁴)_tNHS (O)₂R⁸, (CR^ThirteenR¹⁴)_tNR¹⁰R¹¹, (CR^ThirteenR¹⁴)_tNO₂, (CR^ThirteenR¹⁴)_tCN, (CR^ThirteenR¹⁴)_tS (O)₂NR¹⁰R¹¹, (CR^ThirteenR¹⁴)_tC (Z) R¹¹, (CR^ThirteenR¹⁴)_tOC (Z) R¹¹, (CR^ThirteenR¹⁴)_tC (Z) OR¹¹, (CR^ThirteenR¹⁴)_tC (Z) NR¹⁰R¹¹, (CR^ThirteenR¹⁴)_tC (Z) NR¹¹OR⁹, (CR^ThirteenR¹⁴)_tNR¹⁰C (Z) R¹¹, (CR^ThirteenR¹⁴)_tNR¹⁰C (Z) NR¹⁰R¹¹, (CR^ThirteenR¹⁴)_tN (OR¹⁰) C (Z) NR¹⁰R¹¹, (CR^ThirteenR¹⁴)_tN (OR¹⁰) C (Z) R¹¹, (CR^ThirteenR¹⁴)_tC (= NOR¹⁰) R¹¹, (CR^ThirteenR¹⁴)_tNR¹⁰C (= NR^Fifteen) NR¹⁰R¹¹, (CR^ThirteenR¹⁴)_tOC (Z) NR¹⁰R¹¹, (CR^ThirteenR¹⁴)_tNR¹⁰C (Z) NR¹⁰R¹¹, Or (CR^ThirteenR¹⁴)_tNR¹⁰C (Z) OR¹⁰Wherein the cycloalkyl, cycloalkylalkyl, aryl, arylalkyl, heteroaryl, heteroarylalkyl, heterocyclic and heterocyclicalkyl groups are optionally substituted;
R¹Is hydrogen, X-R⁴, Halogen, hydroxy, optionally substituted C_1-6Alkyl, optionally substituted C_1-6Alkylsulfinyl, CH₂OR⁵, Amino, mono or di-C_1-6Alkylamino, N (R⁶) C (O) R⁷, N (R⁶) S (O)₂R⁸Or O, S and NR⁹A 5-7 membered N-heterocyclyl ring optionally containing an additional heteroatom selected from:
R²And R³Is independently an optionally substituted C_1-6Represents alkyl or R²And R³Is an optionally substituted C together with the carbon atom to which they are attached._3-7Cycloalkyl or C_5-7Forming a cycloalkenyl ring, or²And R³Together with the carbon atom to which they are attached form an optionally substituted 5-7 membered heterocyclyl ring containing up to 3 heteroatoms selected from N, O and S;
R⁴Is independently C_1-6Alkyl, aryl, aryl C_1-6Alkyl, heterocyclyl, heterocyclyl C_1-6Alkyl, heteroaryl, or heteroaryl C_1-6An alkyl group, wherein any of these groups may be substituted;
R⁵Is hydrogen, C (Z) R¹⁰Or optionally substituted C_1-6Alkyl, optionally substituted aryl, optionally substituted aryl C_1-6Alkyl or S (O)₂R⁸And;
R⁶Is hydrogen or C_1-6Alkyl;
R⁷Is hydrogen, C_1-6Alkyl, C_3-7Cycloalkyl, aryl, aryl C_1-6Alkyl, heteroaryl, heteroaryl C_1-6Alkyl, heterocyclyl, or heterocyclyl C_1-6Alkyl;
R⁸Is C_1-6Alkyl, C_3-7Cycloalkyl, aryl, aryl C_1-6Alkyl, heteroaryl, heteroaryl C_1-6Alkyl, heterocyclyl, or heterocyclyl C_1-6Alkyl;
R⁹Is hydrogen, C_1-4Alkyl, C_3-7Cycloalkyl or aryl;
R¹⁰Is hydrogen, C_1-6Alkyl, C_3-7Cycloalkyl, C_3-7Cycloalkyl C_1-6Alkyl, aryl, aryl C_1-6Alkyl, heterocyclyl, heterocyclyl C_1-6Alkyl, heteroaryl and heteroaryl C_1-6Selected from alkyl, any of which may be substituted;
R^ThirteenAnd R¹⁴Is independently hydrogen, C_1-6Alkyl, C_3-7Cycloalkyl, C_3-7Cycloalkyl C_1-6Alkyl, aryl, aryl C_1-6Alkyl, heterocyclyl, heterocyclyl C_1-6Alkyl, heteroaryl, or heteroaryl C_1-6Alkyl (all of which may be substituted); or R¹¹And R¹²Together with the nitrogen to which they are attached form O, S, or NR⁹Forming a 5- to 7-membered heterocycle optionally containing additional heteroatoms selected from:
R^FifteenIs hydrogen, cyano, C_1-4Alkyl, C_3-7Cycloalkyl or aryl;
Z is oxygen or sulfur]
Or a pharmaceutically acceptable salt thereof.
[0012]
(Detailed description of the invention)
The present invention relates to novel compounds capable of inhibiting Tie2 kinase and vasculature in such treatments in mammals in need of treatment for chronic inflammatory or proliferative or angiogenic diseases caused by excessive or inappropriate angiogenesis. It relates to the use of these compounds for the inhibition of formation.
[0013]
In the compounds of formula (I), V is suitably CH or N, preferably carbon.
[0014]
Preferably, the pyridyl or pyrimidine ring is R¹It may be independently substituted once or twice with a group.
[0015]
Preferably, R¹Is independently hydrogen, XR⁴, Halogen, hydroxy, optionally substituted C_1-6Alkyl, optionally substituted C_1-6Alkylsulfinyl, CH₂OR⁵, Amino, mono or di-C_1-6Alkylamino, N (R⁶) C (O) R⁷, N (R⁶) S (O)₂R⁸Or O, S and NR⁹And 5 to 7 membered N-heterocyclyl rings which may contain additional heteroatoms selected from Preferably, pyridyl or pyrimidine is substituted at the 2-position. Preferably, R¹Is hydrogen or XR⁴It is.
[0016]
X is preferably O, CH₂, S or NH. Preferably, X is oxygen or nitrogen.
[0017]
R⁴Is independently C_1-6Alkyl, aryl, aryl C_1-6Alkyl, heterocyclyl, heterocyclyl C_1-6Alkyl, heteroaryl, or heteroaryl C_1-6An alkyl group, wherein any of these groups may be substituted. Preferably, R⁴Is an optionally substituted alkyl, aryl, arylalkyl, or heterocyclicalkyl group.
[0018]
R⁴When is an aryl, it is preferably an optionally substituted phenyl. R⁴When is an arylalkyl, it is preferably an optionally substituted benzyl or phenethyl.
[0019]
R⁴Is heteroaryl or heteroaryl C_1-6When it is an alkyl group, it is as defined below. Preferably, optionally substituted pyrrole, quinoline, isoquinoline, pyridine, pyrimidine, oxazole, thiazole, thiadiazole, triazole, imidazole, benzimidazole, isoxazole, thiophene, benzothiophene, furan, benzofuran, pyrazole, pyran, quinazolinyl, Pyridazine, pyrazine, uracil, oxadiazole, oxathiadiazole, isothiazole, tetrazole, and indazole.
[0020]
R⁴Is heterocyclyl or heterocyclyl C_1-6When it is alkyl, it is as defined below. Preferably, optionally substituted tetrahydropyrrole, tetrahydropyran, tetrahydrofuran, tetrahydrothiophene (including the oxidized form of the sulfur moiety), pyrrolidine, piperidine, piperazine, morpholine, thiomorpholine (including the oxidized form of the sulfur moiety) , Imidazolidine and pyrazolidine rings.
[0021]
These R⁴The group is halogen; C_1-4Alkyl, such as methyl, ethyl, propyl, isopropyl or t-butyl; halo-substituted alkyl, such as CF₃Hydroxy; hydroxy-substituted C_1-4Alkyl; C_1-4Alkoxy, such as methoxy or ethoxy; S (O)_mAlkyl and S (O)_mAryl (where m is 0, 1 or 2); C (O) OR¹¹, For example, C (O) C_1-6Alkyl or C (O) OH group; C (O); C (O) R¹¹; OC (O) R⁸O- (CH as in ketal or dioxyalkylene bridges;₂)_s-O- (s is a number having a value of 1 to 5); amino; mono- and di-C_1-6Alkyl-substituted amino; N (R¹⁰) C (O) R⁷C (O) NR¹⁰R¹¹Cyano; nitro; or oxygen, sulfur or NR⁹A 5-7 membered N-heterocyclyl ring optionally containing an additional heteroatom selected from: optionally substituted aryl, eg, phenyl; optionally substituted aryl C_1-6Alkyl, such as benzyl or phenethyl; aryloxy, such as phenoxy; or aryl C_1-6Alkyloxy, for example benzyloxy, may be independently substituted one or more times, preferably 1-3 times; wherein the aryl and arylalkyl groups themselves are halogen, C_1-6Alkyl, alkoxy, S (O)_mAlkyl, amino, or mono- and di-C_1-6It may be substituted with an alkyl-substituted amino.
[0022]
Preferably, R⁴The group is amino, mono- or di-C_1-6Alkyl-substituted amino, heterocyclic alkyl ring, more preferably oxygen, sulfur or NR⁹Substituted with a 5-7 membered N-heterocyclyl (alkyl) ring which may contain additional heteroatoms selected from, for example, morpholino, pyrrolidine, piperazine, piperidine, or pyrrolidinone.
[0023]
Preferably, R²And R³Is independently an optionally substituted C_1-6Represents alkyl or R²And R³Together with the carbon atom to which they are attached may be substituted C_3-7Cycloalkyl or C_5-7Forming a cycloalkenyl ring, or²And R³Together with the carbon atom to which they are attached form an optionally substituted 5- to 7-membered heterocyclyl ring containing up to three heteroatoms selected from N, O and S. Preferably, R²And R³Is independently an optionally substituted C_1-6Represents alkyl.
[0024]
Preferably, n is 0, 1, 2, 3, or 4. Preferably, n is 1.
[0025]
Preferably, R¹¹Is hydrogen, C_1-6Alkyl, C_3-7Cycloalkyl, C_3-7Cycloalkyl C_1-6Alkyl, aryl, aryl C_1-6Alkyl, heterocyclyl, heterocyclyl C_1-6Alkyl, heteroaryl, or heteroaryl C_1-6Alkyl (all of which may be substituted); or R¹⁰And R¹¹Together with the nitrogen attached thereto are O, S or NR⁹To form a 5- to 7-membered heterocycle optionally containing additional heteroatoms.
[0026]
Preferably, R^ThirteenAnd R¹⁴Is independently hydrogen, C_1-6Alkyl, C_3-7Cycloalkyl, C_3-7Cycloalkyl C_1-6Alkyl, aryl, aryl C_1-6Alkyl, heterocyclyl, heterocyclyl C_1-6Alkyl, heteroaryl, or heteroaryl C_1-6Alkyl (all of which may be substituted); or R¹¹And R¹²Together with the nitrogen attached thereto are O, S or NR⁹To form a 5- to 7-membered heterocycle optionally containing additional heteroatoms.
[0027]
Preferably, R¹²Is hydrogen, C_1-6Alkyl, C_3-7Cycloalkyl, C_3-7Cycloalkyl C_1-6Alkyl, heterocyclyl, heterocyclyl C_1-6Alkyl, aryl, aryl C_1-6Alkyl, heteroaryl or heteroaryl C_1-6Selected from alkyl, any of which may be substituted. R¹⁰Group and R¹²The groups may be substituted as defined for the term alkyl.
[0028]
Preferably, R⁵Is hydrogen, C (Z) R¹²Or optionally substituted C_1-6Alkyl, optionally substituted aryl, optionally substituted aryl C_1-6Alkyl or S (O)₂R⁸It is.
[0029]
Preferably, R⁶Is hydrogen or C_1-6Alkyl.
[0030]
Preferably, R⁷Is hydrogen, C_1-6Alkyl, C_3-7Cycloalkyl, aryl, aryl C_1-6Alkyl, heteroaryl, heteroaryl C_1-6Alkyl, heterocyclyl, or heterocyclyl C_1-6Alkyl.
[0031]
Preferably, R⁸Is C_1-6Alkyl, C_3-7Cycloalkyl, aryl, aryl C_1-6Alkyl, heteroaryl, heteroaryl C_1-6Alkyl, heterocyclyl, or heterocyclyl C_1-6Alkyl.
[0032]
Preferably, R⁹Is hydrogen, cyano, C_1-4Alkyl, C_3-7Cycloalkyl or aryl.
[0033]
Preferably, R¹⁰And R¹²Is independently hydrogen, C_1-6Alkyl, C_3-7Cycloalkyl, heterocyclyl, heterocyclyl C_1-6Alkyl, aryl, aryl C_1-6Alkyl, heteroaryl or heteroaryl C_1-6Selected from alkyl, any of which may be substituted.
[0034]
Suitably, Z is oxygen or sulfur.
[0035]
Ar is preferably naphth-2-yl, naphth-1-yl, bicyclic or tricyclic carbocycle, bicyclic or tricyclic aromatic heterocycle, or bicyclic or tricyclic heterocycle. A ring, wherein any ring in the system may be optionally substituted one or more times as defined herein below. The bicyclic or tricyclic aromatic heterocycle or heterocyclic ring system can be a fused ring system including a carbocyclic ring. For a heteroaromatic ring system it is an aromatic ring and for a heterocyclic ring system wherein the carbocycle may be saturated, it contains some unsaturation or is an aromatic ring.
[0036]
More specifically, as Ar as a bicyclic or tricyclic heterocyclic ring or a bicyclic or tricyclic aromatic heterocyclic ring, quinoline, isoquinoline, benzoxazole, benzothiazole, benzofuran, dibenzofuran, benzothiphene, dibenzo Thiophene, benzothiadiazole, benzotriazole, benzimidazole, thioanthracene, phenoxatin, benzimidazole, indolyl or quinazolinyl, but is not limited thereto. Ar is preferably a bicyclic or tricyclic aromatic heterocycle.
[0037]
Ar as a heterocyclic ring system includes at least one or more aromatic rings or aromatic heterocyclic rings, and one or more saturated or unsaturated 4- to 7-membered carbon rings or one or more oxygen atoms. And bicyclic or tricyclic fused ring systems containing saturated or unsaturated 4- to 7-membered rings having one or more heteroatoms selected from nitrogen or sulfur (including their oxidized forms). Can be The ring system must contain at least one heteroatom selected from oxygen, nitrogen or sulfur. The ring system may contain 7-14 ring atoms.
[0038]
Ar as an aromatic heterocyclic ring system may include at least one aromatic ring and / or one or more aromatic heterocyclic rings, wherein the ring system is a one-ring selected from oxygen, nitrogen or sulfur. Or it may contain more heteroatoms. The ring system may contain from 8 to 12 ring atoms.
[0039]
Ar as a bicyclic or tricyclic carbocycle includes, but is not limited to, indene, tetralin, or indane derivatives, in addition to the specific naphthyl rings shown separately. The carbocyclic ring system contains at least one aromatic ring and one or more saturated or unsaturated 4- to 7-membered carbocycles attached thereto.
[0040]
The Ar ring may be independently substituted once or more, preferably 1 to 3 times, in any ring. Suitable substituents include halogen, C_1-6Alkyl, aryl, aryl C_1-6Alkyl, cycloalkyl, cycloalkyl C_1-6Alkyl, C_1-6Alkoxy C_1-6Alkyl, halo substituted C_1-6Alkyl, aryl C_1-6Alkoxy, (CR^ThirteenR¹⁴)_tOR¹², Nitro, cyano, (CR^ThirteenR¹⁴)_tNR¹⁰R¹¹, (CR^ThirteenR¹⁴)_tNR¹⁰C (Z) R¹², (CR^ThirteenR¹⁴)_tC (Z) NR¹⁰R¹¹, (CR^ThirteenR¹⁴)_tCOR¹², (CR^ThirteenR¹⁴)_tZC (Z) R¹², (CR^ThirteenR¹⁴)_tC (Z) OR¹², (CR^ThirteenR¹⁴)_tC (O) NR¹⁰R¹¹, (CR^ThirteenR¹⁴)_tNR¹⁰C (Z) NR¹⁰R¹¹, (CR^ThirteenR¹⁴)_tNR¹⁰C (= NH) NR¹⁰R¹¹, (CR^ThirteenR¹⁴)_tC (= NH) -NR¹⁰R¹¹, (CR^ThirteenR¹⁴)_tNR¹⁰S (O)₂R⁸, (CR^ThirteenR¹⁴)_tS (O)₂NR¹⁰R¹¹, (CR^ThirteenR¹⁴)_tS (O)_mR¹², Heterocyclyl, heteroaryl, heterocyclyl C_1-6Alkyl or heteroaryl C_1-6Alkyl.
[0041]
Suitably, t is 0 or an integer having a value between 1 and 10. Preferably, t is 0 or 1, more preferably 0.
[0042]
Preferably, R^ThirteenAnd R¹⁴Is independently hydrogen, or C_1-6Alkyl.
[0043]
Preferably, the Ar group is halo, cyano, (CR^ThirteenR¹⁴)_tC (Z) NR¹⁰R¹¹, (CR^ThirteenR¹⁴)_tC (Z) OR¹², (CR^ThirteenR¹⁴)_tCOR¹², (CR^ThirteenR¹⁴)_tS (O)_mR¹², (CR^ThirteenR¹⁴)_tOR¹², Halo-substituted C_1-6Alkyl, C_1-6Alkyl, (CR^ThirteenR¹⁴)_tNR¹⁰C (Z) R¹², (CR^ThirteenR¹⁴)_tNR¹⁰S (O)₂R⁸, (CR^ThirteenR¹⁴)_tS (O)₂NR¹⁰R¹¹, (CR^ThirteenR¹⁴)_tZC (Z) R¹², Or (CR^ThirteenR¹⁴)_tNR¹⁰R¹¹Has been substituted one or more times.
[0044]
More preferably, the Ar ring is halogen, S (O)_mR¹², OR¹², C_1-6Alkyl, halo substituted C_1-6Alkyl, hydroxy C_1-6Alkyl, and C_1-6Alkoxy, NR¹⁰S (O)₂R⁸, NR¹⁰C (Z) R¹²Or NR¹⁰R¹¹Has been substituted one or more times. More preferred substituents are hydroxy; C_1-6An alkoxy group such as methoxy; C_1-6Alkyl, for example methyl; or halogen, for example fluorine or chlorine.
[0045]
Preferably, the Ar ring is a naphthyl ring, more preferably a naphth-2-yl ring. When Ar is a bicyclic heteroaryl ring, it is preferably a benzothiophene or benzofuran ring. The preferred ring configuration for the naphth-2-yl ring is 6-position.
[0046]
For the purposes herein, the terms "alkyl" and "alkenyl" groups, individually or as part of a larger group such as "alkoxy", contain, unless otherwise limited, up to 6 carbon atoms. Can be a linear or branched residue such as, but not limited to, methyl, ethyl, n-propyl, isopropyl, n-butyl, sec-butyl, isobutyl, tert-butyl, and the like. . Alkyl and alkenyl groups may be optionally substituted as defined herein.
[0047]
For use herein, "cycloalkyl" includes cyclic residues having 3-8 ring carbon atoms, including, but not limited to, cyclopropyl, cyclopentyl, cyclohexyl, and the like. is not. A cycloalkyl group may be optionally substituted as defined herein.
[0048]
For use herein, "cycloalkenyl" includes a cyclic residue having at least one bond, preferably a cyclic residue of 5-8 carbon atoms, including cyclopetenyl, cyclohexenyl, and the like. However, the present invention is not limited to these. A cycloalkenyl group may be optionally substituted as defined herein.
[0049]
For use herein, the term "aryl" (by itself or in any combination such as "arylalkyl" or "aryloxy") refers to a single or fused ring system, preferably in each ring. Include monocyclic or fused ring systems containing 4 to 7, preferably 5 or 6, ring atoms, each of which is unsubstituted or, for example, independently substituted It may be replaced by up to three. Fused ring systems can include aliphatic rings, such as saturated or partially saturated rings, and require only one aromatic ring. Suitable aryl groups include phenyl, and naphthyl such as 1- or 2-naphthyl. The aryl ring may be optionally substituted as defined herein, unless otherwise indicated.
[0050]
For use herein, the term "heterocyclyl" (by itself or in any combination, such as "heterocyclylalkyl" or "heterocyclyloxy") is preferably defined elsewhere. Preferably, unless otherwise indicated, O, N and S or S (O)_m(Where m is 0 or an integer having a value of 1 or 2), wherein each of the non-aromatic saturated or partially unsaturated monocyclic and fused rings containing up to 4 heteroatoms independently selected from And these rings may be unsubstituted or independently substituted, for example by up to three substituents. Each heterocycle suitably has 4 to 7, preferably 5 or 6, ring atoms, or the fused ring system contains 7-14 ring atoms. Fused heterocyclic systems can include carbocycles and need only include one heteroatom as a heterocycle. Examples of heterocyclyl groups include tetrahydropyrrole, tetrahydropyran, tetrahydrofuran, tetrahydrothiophene (including the oxidized form of the sulfur moiety), pyrrolidine, piperidine, piperazine, morpholine, thio-morpholine (including the oxidized form of the sulfur moiety) ), Saturated or partially saturated heteroaryl groups as defined herein, such as, but not limited to, imidazolidine and pyrazolidine. Heterocycles may be optionally substituted as defined herein below unless otherwise indicated.
[0051]
As used herein, the term “heteroaryl” (by itself or in any combination, such as “heteroaryloxy” or “heteroarylalkyl”) preferably refers to O 2 unless otherwise defined. , N and S include mono- and bicyclic aromatic heterocyclic systems containing up to 4, preferably 1 or 2, heteroatoms. Each ring can have from 4 to 7, preferably 5 or 6, ring atoms, or is a fused ring system containing from 8 to 12 ring atoms. Bicyclic aromatic heterocyclic systems can include carbocycles. Examples of heteroaryl groups include pyrrole, quinoline, isoquinoline, pyridine, pyrimidine, oxazole, thiazole, thiadiazole, triazole, imidazole, benzimidazole, isoxazole, thiophene, benzothiophene, furan, benzofuran, pyrazole, pyran, quinazolinyl, pyridazine , Pyrazine, uracil, oxadiazole, oxathiadiazole, isothiazole, tetrazole, and indazole. Heteroaryl rings, unless otherwise indicated, may be substituted as defined herein below.
[0052]
Preferably, the term "optionally substituted" is as for alkyl, alkenyl, cycloalkyl, cycloalkenyl, aryl, arylalkyl, heterocyclyl, heterocyclicalkyl, heteroaryl, and heteroarylalkyl groups. As used herein, unless otherwise defined, the term refers to a group wherein the group may be substituted one or more times, preferably halogen, C_1-6Alkyl, aryl, aryl C_1-6Alkyl, cycloalkyl, cycloalkyl C_1-6Alkyl, C_1-6Alkoxy C_1-6Alkyl, halo substituted C_1-6Alkyl, aryl C_1-6Alkoxy, OR¹², Nitro, cyano, (CR₁₀R₂₀)_nNR¹⁰R¹¹, (CR₁₀R₂₀)_nNR¹⁰C (Z) R¹², (CR₁₀R₂₀)_nC (Z) NR¹⁰R¹¹, (CR₁₀R₂₀)_nCOR¹², (CR₁₀R₂₀)_nZC (Z) R¹², (CR₁₀R₂₀)_nC (Z) OR¹², (CR₁₀R₂₀)_nC (O) NR¹⁰R¹¹, (CR₁₀R₂₀)_nNR¹⁰C (Z) NR¹⁰R¹¹, (CR₁₀R₂₀)_nNR¹⁰C (= NH) NR¹⁰R¹¹, (CR₁₀R₂₀)_nC (= NH) -NR¹⁰R¹¹, (CR₁₀R₂₀)_nNR¹⁰S (O)₂R⁸, (CR₁₀R₂₀)_nS (O)₂NR¹⁰R¹¹, S (O)_mR¹², Heterocyclyl, heteroaryl, heterocyclyl C_1-6Alkyl or heteroaryl C_1-6It means that it may be substituted by 1 to 3 substituents independently selected from alkyl. In addition, two adjacent ring carbon atoms can be joined to form a bicyclic system.
[0053]
Particular compounds of the present invention include those described in the Examples, and pharmaceutically acceptable salts thereof.
[0054]
It will be appreciated that for use in medicine, the salts of the compounds of formula (I) shall be pharmaceutically acceptable. Suitable pharmaceutically acceptable salts will be apparent to those skilled in the art, and include inorganic acids, such as hydrochloric, hydrobromic, sulfuric, nitric or phosphoric acids; and organic acids, such as succinic, maleic, acetic acids Acid addition salts with, fumaric acid, citric acid, tartaric acid, benzoic acid, p-toluenesulfonic acid, methanesulfonic acid or naphthalenesulfonic acid. Pharm. Sci. , 1977, 66, 1-19. Other salts, for example, oxalates, can be used, for example, in isolating the compounds of formula (I) and are included within the scope of this invention.
[0055]
The compounds of the invention may be in crystalline or amorphous form, and if crystalline, may be hydrated or solvated. The present invention includes within its scope stoichiometric hydrates and compounds containing variable amounts of water.
[0056]
The present invention extends to all isomers, including stereoisomers and geometric isomers of the compounds of formula (I), including enantiomers and mixtures thereof, eg, racemates. The various isomers can be separated or resolved from one another by conventional methods, or any given isomer can be obtained by conventional synthetic methods or stereospecific or asymmetric synthesis.
[0057]
Since the compounds of formula (I) are for pharmaceutical compositions, they are preferably in substantially pure form, for example at least 60% pure, more suitably at least 75% pure, preferably , At least 85%, in particular at least 98% (% on a weight to weight basis). Preparations containing impurities of the compound can be used to prepare purer forms for use in pharmaceutical compositions.
[0058]
Compounds of formula (I) are well known to those skilled in the art from starting materials that are commercially available or that can be prepared by analogy with known processes, and include, for example, Comprehensive Heterocyclic Chemistry, Editors Katritzky. and Rees, Pergamon Press, 1984, 5, 457-497. An important step in many such syntheses is the formation of a central imidazole nucleus to obtain compounds of formula (I). Suitable procedures are described, inter alia, in U.S. Patent Nos. 3,707,475 and 3,940,486, which are hereby incorporated by reference in their entirety. These patents disclose the synthesis of a-diketones and α-hydroxy ketones (benzoins) and their subsequent use in the production of imidazoles and N-hydroxyl imidazoles. Thereafter, R is converted using a conventional functional group interconversion method.¹, R², And R³Other compounds of formula (I) can be obtained by manipulating the substituents on any of the groups.
[0059]
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Scheme I
[0060]
Compounds of general formula I wherein Q = H can be prepared as outlined in Scheme I. Condensation of the anion of 4-methyl-2- (methylthio) pyrimidine with Weinreb amide of an aryl acid gives a ketone, which after oxidation with sodium nitrite gives a ketoxime. The product is heated in acetic acid with an alkyl aldehyde and ammonium acetate to give the imidazole nucleus. The hydroxyimidazole can be reduced by heating with a trialkyl phosphite or by stirring at room temperature with titanium trichloride. Oxidation with 3-chloroperbenzoic acid or oxone to a methylsulfinyl derivative, and then replacing the nucleophile with or without the addition of a base such as sodium hydride, organolithium or trialkylamine To form a methylthio group (R¹= SMe) with a nucleophile (R¹= OR⁴, NHR⁴, SR⁴). Amine (R¹= NHR⁴In the case of), the substitution can be performed using an aluminum amide derivative.
[0061]
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Scheme II
[0062]
Another method for making the compounds of the present invention is as outlined in Scheme II. For example, a 4-substituted pyridine derivative (V = CH, R¹The α-diketones are prepared by condensing the anion of = H) with a Weinreb amide of an aryl acid or aryl-aldehyde and oxidizing the intermediate product. The diketone is heated with aldehyde and ammonium acetate in acetic acid to give the imidazole nucleus.
[0063]
A compound represented by the general formula (R¹= OR⁴, NHR⁴, SR⁴) Can be prepared as described in Scheme I or II except that 4-methylpyridine is replaced by 4-methyl-2-chloropyridine or 4-methyl-2-fluoropyridine (Galllagher et al Bioorg. Med. Chem. 5, 49, 1997). The resulting 2-halopyridinyl imidazole can be subjected to nucleophilic substitution by the method described in U.S. Patent No. 5,670,527.
[0064]
Alternatively, the compounds can be prepared as in Scheme III, adding an aryl (Ar) group last.
[0065]
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Scheme III
[0066]
4-acetyl substituted pyridine derivative (V = CH, R¹= H) with sodium nitrite to give the ketoxime. The product is heated with alkyl aldehyde and ammonium acetate in acetic acid to give the imidazole nucleus. The hydroxyimidazole can be reduced by heating with a trialkyl phosphite or stirring at room temperature with titanium trichloride. The imidazole can be treated with N-iodosuccinimide to give iodoimidazole, and then reacted with various boronic acids under palladium catalyst to give aryl or heteroaryl imidazole. Other biaryl coupling reactions can be used.
[0067]
The above synthesis scheme gives compounds of formula I where Q = H. This intermediate is alkylated with a (Cl, Br, I or F) alkyl halide or other reactive alkylating agent (eg, a sulfonic ester such as a mesylate or tosylate) in the presence of a suitable base and solvent. To give compounds of formula I wherein Q satisfies the structure requirements generally outlined or the compounds of the invention. Alternatively, compounds wherein Q is a directly attached aryl, heteroaryl, alkenyl or alkynyl can be prepared using biaryl coupling chemistry. Such chemistry is well known to those of skill in the art and has been reported to bind heterocyclic nitrogens, such as the nitrogen in imidazole. The alkylation and coupling reactions also produce variable amounts of undesired regioisomers, from which the desired product can be obtained using any number of standard separation techniques, including chromatography and crystallization. It should be understood that it is possible. Due to variations in the alkylation conditions, depending on the particular structure of both reactants, the ratio of the desired product of Formula I to the undesired product can be greatly affected. Examples of generally effective conditions for alkylation reactions and conditions that favor the formation of regioisomers of Formula I are described in Liberton, et. al. , J. et al. Med. Chem. Vol. 42, no. 12, p2180-2190, 1999.
[0068]
As illustrated in Scheme IV, a regioselective configuration of Q in the compound of formula (I) is possible. Prior to the addition of the ketoxime, a primary amine is added to the aldehyde to give the selective NQ form adjacent to the aryl ring of hydroxyimidazole. Reduction with a trialkyl phosphite or titanium trichloride as in Scheme III gives compounds of formula (I).
[0069]
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Scheme IV
[0070]
Suitable protecting groups for use with hydroxyl groups and imidazole nitrogens are well known in the art and are described in many references, for example, Protecting Groups in Organic Synthesis, Greene TW, Wiley-Interscience, New York, 1981. Has been described. Suitable examples of hydroxyl protecting groups include silyl ethers, such as t-butyldimethyl or t-butyldiphenyl, and alkyl ethers, such as alkyl chains of variable bonds (CR^ThirteenR¹⁴)_nAnd methyl linked by. A preferred example of an imidazole nitrogen protecting group is tetrahydropyranyl.
[0071]
Synthesis example
The invention will now be described by the following examples, which are merely illustrative and are not intended to limit the scope of the invention.
[0072]
All temperatures are stated in degrees Celsius (° C), all solvents are of the highest purity available, and all reactions are performed under anhydrous conditions under an argon atmosphere unless otherwise indicated. Mass spectra were obtained on a VG Zab mass spectrometer using fast atom bombardment, or CH with 1% formic acid as the carrier solvent unless otherwise indicated.₃CN / CH₃Performed on a micromass platform electrospray ionization mass spectrometer in cation mode using OH (95: 5).¹H-NMR (hereinafter referred to as "NMR") spectra were recorded at 250 MHz or 400 Mz using a Bruker AM 250 or Am 400 spectrometer. The indicated multiplicity is s = singlet, d = doublet, t = triplet, q = quartet, m = multiplet, and br indicates a broad signal. Sat. Indicates a saturated solution, and eq indicates the ratio of the molar equivalent of the reagent to the main reactant. Flash chromatography is performed on Merck Silica gel 60 (230-400 mesh).
[0073]
Example 1
Production of 2-tert-butyl-4-naphthalen-2-yl-5-pyridin-4-yl-imidazole
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[0074]
a) 2-oxo-2-pyridin-4-yl-acetaldehyde oxime
Isoamyl nitrite (11.7 g (hereinafter, referred to as "g"), 0.1 mmol (hereinafter, referred to as "mmol")) is treated with alkali ethanol [EtOH (50 ml (hereinafter, referred to as "ml")) In NaOH (4 g)], then cooled to 0 ° C. and dropwise added 4-acetylpyridine (12.1 g in 10 ml 95% ethanol) with vigorous stirring. After the addition was complete, the reaction was placed in the refrigerator overnight. The mixture was diluted with ether and filtered to give a light reddish brown solid. This was dissolved in water and acidified to pH 5.0 with glacial acetic acid at 0 ° C. to give 6.76 g of an orange solid. The solid was washed with EtOH / H₂Recrystallization from O (30/70) gave 2-oxo-2-pyridin-4-yl-acetaldehyde oxime as needles (5.0 g, 33%).¹1 H NMR (400 MHz, CDCl₃) Δ 8.61 (dd, J = 4.6 Hz, 1.422H), 7.85 (s, 1H), 7.80 (dd, J = 4.6, 1.5 Hz, 2H).
[0075]
b) 2-tert-butyl-5-pyridin-4-yl-imidazol-1-ol
A solution of 2-oxo-2-pyridin-4-yl-acetaldehyde oxime (9.87 g, 65.8 mmol), trimethylacetaldehyde (6.8 g, 79 mmol), and ammonium acetate (50.7 g) in glacial acetic acid (600 ml). Was maintained at 87 ° C. for 4 hours, then trimethylacetaldehyde (1 ml) was added, followed by 4 hours at 80 ° C. The yellow solution was cooled to 0 ° C. and carefully neutralized with concentrated ammonium hydroxide with vigorous stirring. A large amount of precipitate formed at pH 7.0-7.2 and the mixture was stirred for 30 minutes. The beige solid was filtered and dried in a vacuum oven at 40 ° C. to give the title compound (11.0 g). The aqueous filtrate was washed with CH₂Cl₂Further extraction with afforded a further yellow oil (3.12 g) as a mixture of the title compound and the corresponding imidazole.
[0076]
c) 4- (2-tert-butyl-1-H-imidazol-4-yl) -pyridine
The compound in Example 1 (b) was treated with trimethyl phosphite (25 ml) in DMF (200 ml) and maintained at 90 ° C. for 3 hours. DMF was distilled off under reduced pressure, and the residue was partitioned between water (pH 8) and chloroform and extracted several times into chloroform. Organic part is MgSO₄And evaporated, then triturated with ether to give the title compound (9.33 g).¹1 H NMR (400 MHz, CDCl₃) Δ 9.35 (br s, 1H), 8.56 (d, J = 5.6 Hz, 2H), 7.68 (d, J = 4.9, 2H) 7.38 (s, 2H), 1.44 (s, 9H).
[0077]
d) 4- (2-tert-butyl-5-iodo-3-H-imidazol-4-yl) -pyridine
Compound (3.) g in Example 1 (c), 14.92 mmol) in EtOH (60 ml) was treated with N-iodosuccinimide for 4 hours at room temperature. Thin layer chromatography (Tlc) indicated that the reaction was complete, and the mixture was slowly diluted with water. The resulting solid was filtered and dried at 60 ° C. under high vacuum overnight to give the title compound (4.39 g, 90%). MS m / e: 328 [M + H]⁺, 326 [MH]⁻;
[0078]
e) 2-tert-butyl-4-naphthalen-2-yl-5-pyridin-4-yl-imidazole
In a thick-walled pressure vessel, 4- (2-tert-butyl-5-iodo-3-H-imidazol-4-yl) -pyridine (100 milligrams (hereinafter, referred to as “mg”), 0.3 mmol) And tetrakis-triphenylphosphine palladium (0) catalyst were dissolved in toluene (2-3 ml) and the other reagents were added while bubbling argon through the solution: 1-naphthylboronic acid (86 mg, 0.5 mmol), Solid NaHCO₃(84 mg), water (500 uL), EtOH (500 uL). The vessel was sealed and the reaction was heated to 100 C overnight. The reaction mixture is treated with 5% NaHCO₃And EtOAc and extracted several times with EtOAc. The combined organic layers were washed with brine, MgSO₄, Filtered and evaporated. The crude product is chromatographed on silica gel (chromatotron, 1-4% MeOH / CH).₂Cl₂Eluting with) to give the title compound as a yellow solid (58 mg, 59%). Mp 218-220 ° C; MS m / e: 328 [M + H].⁺, 326 [MH]⁻;¹1 H NMR (400 MHz, CDCl₃) Δ 9.63 (brs, 1H), 8.16 (appd, J = 4.8 Hz, 2H), 7.92 (brd, J = 8.3 Hz, 2H), 7.64 (brd, 1H), 7.52 (m, 3H), 7.41 (t, J = 6 Hz, 1H), 7.29 (brs, 2H), 1.49 (s, 9H).
[0079]
Example 2
Preparation of 2-tert-butyl-4- (6-ethoxynaphthalen-2-yl) -5-pyridin-4-yl-imidazole
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[0080]
a) 2-bromo-6-ethoxy-naphthalene
A solution of 6-bromo-2-naphthol was added dropwise to a suspension of sodium hydride (800 mg, 60% oil dispersion) in DMF (20 ml) at 0 ° C. with stirring. After gas evolution ceased, pure ethyl iodide (1.6 ml) was added dropwise to the stirred solution. The reaction was stirred overnight at room temperature. The reaction mixture was poured into water and extracted several times with tert-butyl methyl ether. The combined organic extracts were washed with water and brine, MgSO₄, Filtered and evaporated under reduced pressure to give a tan solid. This was recrystallized from MeOH and dried to constant weight under high vacuum to give a white solid (3.11 g, 60%).¹1 H NMR (400 MHz, CDCl₃) Δ 7.92 (d, J = 1.7 Hz, 1H), 7.65 (d, J = 8.9 Hz, 1H), 7.59 (d, J = 8.7 Hz, 2H), 7.16 (Dd, J = 8.9 Hz, 2.48, 1H), 7.09 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 4.15 (q, 2H), 1.49 (t, 3H).
[0081]
b) 6-ethoxy-naphth-2-ylboronic acid
To a solution of Example 2 (a) (2.51 g, 10 mmol) in dry THF (15 ml, freshly distilled from Na) at −78 ° C. was added 2.5 M n-butyllithium (4 ml, 10 mmol) dropwise over about 5 minutes. did. The reaction was stirred at −78 ° C. for 10 minutes, then triisopropyl borate (3.46 ml) was added and the reaction was brought to room temperature. The reaction was partitioned between 10% ammonium chloride and tert-butyl methyl ether, further extracted with tert-butyl methyl ether (× 3), washed with brine, MgSO 4₄And evaporated to a white solid. The solid was triturated with hot hexane to give the pure title compound (1.9 g, 88%). MS (ES) m / e: 217 [M + H]⁺.
[0082]
c) 2-tert-butyl-4- (6-ethoxynaphthalen-2-yl) -5-pyridin-4-yl-imidazole
The title compound was prepared according to the procedure of Example 1 (e), except that 6-ethoxy-naphth-2-ylboronic acid was used instead of 1-naphthylboronic acid (34 mg, 34%). Mp 258-259; MS m / e: 372 [M + H].⁺370 [MH]⁻;
[0083]
Example 3
Preparation of 4- (2-tert-butyl-5- (6-methoxy-naphthalen-2-yl) -3H-imidazol-4-yl) -pyridine
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[0084]
a) 6-methoxy-2-naphthoic-N-methoxy-N-methylamide
At 0 ° C, SOCl₂(1.15 mL, 15.8 mmol) in 6-methoxy-2-naphthoic acid (2.9 g, 14.3 mmol) in CH₂Cl₂(40 mL) and Et₃Added very slowly to the stirred solution in N (7.9 mL, 57.2 mmol). The solution became dark and homogeneous. After stirring at room temperature for 40 minutes, N, O-dimethylhydroxylamine hydrochloride (1.86 g, 17.16 mmol) was added. After stirring the reaction for 2 hours, it is quenched with water and then CH 2₂Cl₂(3x). Organic layer is saturated Na₂CO₃(3x), dried (Na)₂SO₄) And concentrated to give 6-methoxy-2-naphthoic-N-methoxy-N-methylamide (3.65 g, 94%) MS (ES) m / e 246 [M + H]⁺.
[0085]
b) 6-methoxynaphth-2-yl-4-pyridylmethylketone
At 0 ° C., n-BuLi (2.5 M in hexane, 8.12 mL, 20.3 mmol) was added to a solution of diisopropylamine (3.32 mL, 23.6 mmol) in THF (20 mL) to give LDA. The solution was cooled to -78 [deg.] C, 4-picoline (2.00 mL, 20.3 mmol) was added to the solution, the solution was maintained at -78 [deg.] C, stirred for 15 minutes, and then treated with Example 3 ( The compound from a) (3.65 g, 14.9 mmol) was added. The reaction was warmed to room temperature over 0.5 hour and stirred for another hour. The reaction is carried out with NH₄Quench with Cl (5 mL) and add CH₂Cl₂(3x). The organic layer was washed with brine, dried (MgSO₄) And concentrated. The obtained residue is subjected to flash column (CH₂Cl₂1% MeOH to CH₂Cl₂4% MeOH in water) to give 6-methoxynaphth-2-yl-4-pyridylmethylketone (3.3 g, 70%). MS (ES) m / e 278 [M + H]⁺.
[0086]
c) 2-Hydroxyimino-1- (6-methoxynaphth-2-yl) -2- (4-pyridyl) ethan-1-one
NaNO₂(0.9 g, 14.3 mmol) was added to the compound (3.3 g, 11.9 mmol) in Example 3 (b) with 3N HCl (70 mL) and H₂Added to the suspension in O (70 mL). The slurry was stirred for 3 hours, filtered, washed with water and air dried to give 2-hydroxyimino-1- (6-methoxynaphth-2-yl) -2- (4-pyridyl) ethan-1-one. (3.4 g, 93%). MS (ES) m / e 307 [M + H]⁺.
[0087]
d) 4- (2-tert-butyl-5- (6-methoxy-naphthalen-2-yl) -5-pyridin-4-yl) -imidazol-1-ol
Acetic acid (3 mL) was added to a mixture of trimethylacetaldehyde (21 μL, 1.37 mmol), ammonium acetate (125 mg, 1.6 mmol) and the compound in Example 3 (c) (50 mg, 0.16 mmol). The resulting solution was heated at 110 ° C. overnight, then cooled to 0 ° C. and then, with stirring,₄OH was added slowly. The precipitate formed is filtered and dried to give 4- (2-tert-butyl-5- (6-methoxy-naphthalen-2-yl) -5-pyridin-4-yl) -imidazol-1-ol. (35 mg, 57%). MS (ES) m / e 375 [M + H]⁺.
[0088]
e) 4- (2-tert-butyl-5- (6-methoxy-naphthalen-2-yl) -3H-imidazol-4-yl) -pyridine
Triethyl phosphite (63 mg, 0.4 mmol) was added to a stirred solution of the compound (50 mg, 0.13 mmol) in Example 3 (d) and N, N-dimethylformamide (2 mL) at room temperature. The reaction was stirred for 8 hours. Then excess water was added and the mixture was stirred for 3 hours. The solid precipitate was filtered and dried in vacuo to give the title compound (27mg, 57%). MS (ES) m / e 358 [M + H]⁺.
[0089]
Example 4
Preparation of 2-tert-butyl-4-inden-2-yl) -5-pyridin-4-yl-1H-imidazole
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2-tert-butyl-4-inden-2-yl) -5-pyridin-4-yl-1H-imidazole trifluoroacetate
Indene (175 uL, 1.5 mmol), tetrabutylammonium chloride (83 mg, 0.3 mmol), palladium acetate (3 mg), tri-o-tolylphosphine (6 mg), and the compound in Example 1 (d) (100 mg, 0 (0.3 mmol) in DMF (1 ml) was microwaved at 30 W for 10 min, then at 45 W for 24 min. Both tlc and lc / ms indicated that the reaction was complete. The mixture is washed with CH₂Cl₂And 5% NaHCO₃And was distributed between. CH2 aqueous layer₂Cl₂(× 4)₂Washed with O, dried (MgSO₄) And concentrated. The crude product is chromatographed on silica gel (Chromatotron, CH₂Cl₂1% MeOH to CH₂Cl₂(4% MeOH in water) to give the title compound contaminated with tetrabutylammonium chloride (27 mg). Preparative hplc (YMS-combiprep ODS-A, 20-80% acetonitrile / water 0.1% TFA) provided the title compound as a bright yellow solid (9.2 mg, 10%). MS (ES) m / e 358 [M + H]⁺ 370 [MH]⁻, 350 [M + Cl-H]⁻, 442 [M + I-H]⁻.
[0090]
Example 5
2-tert-butyl-4-benzofuran-2-yl-5-pyridin-4-yl-1H-imidazole
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Using benzofuran-2-boronic acid instead of 1-naphthylboronic acid, NaHCO₃Instead of Na₂CO₃The title compound was obtained by microwave treatment at 45 W for 16 minutes according to the procedure of Example 1 (e) except that was used (34 mg, 66%). MS (ES) m / e 318 [M + H]⁺, 316 [MH]⁻.
[0091]
Example 6
4- (2-tert-butyl-5-dibenzothiophen-4-yl-1H-imidazol-4-yl) -pyridine
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Using dibenzothiaphen-4-boronic acid instead of 1-naphthylboronic acid, NaHCO₃Instead of Na₂CO₃The title compound was prepared in a 96-well plate format using microwaves at a temperature not exceeding 65 ° C. at 100-200 W for 2 hours according to the procedure of Example 1 (e) except that was used. Purified by hplc (YMS-combiprep ODS-A, 20-80% acetonitrile / water 0.1% TFA) (6 mg, 10%). Lc-MS (ES) m / e 384 [M + H]⁺, 97%.
[0092]
Example 7
4- (2-tert-butyl-5-dibenzofuran-4-yl-1H-imidazol-4-yl) -pyridine
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Using dibenzofuran-4-boronic acid instead of 1-naphthylboronic acid,₃Instead of Na₂CO₃The title compound was prepared in a 96-well plate format using microwaves at a temperature not exceeding 65 ° C. at 100-200 W for 2 hours according to the procedure of Example 1 (e) except that was used. Purified by hplc (YMS-combiprep ODS-A, 20-80% acetonitrile / water 0.1% TFA) (9 mg, 16%). Lc-MS (ES) m / e 368 [M + H]⁺, 100%.
[0093]
Example 8
4- (5-benzo [b] thiophen-2-yl-2-tert-butyl-1H-imidazol-4-yl) -pyridine
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Thiaphen-2-boronic acid was used instead of 1-naphthylboronic acid, and NaHCO₃Instead of Na₂CO₃The title compound was prepared in a 96-well plate format using microwaves at a temperature not exceeding 65 ° C. at 100-200 W for 2 hours according to the procedure of Example 1 (e) except that was used. Purified by hplc (YMS-combiprep ODS-A, 20-80% acetonitrile / water 0.1% TFA) (34 mg, 64%). Lc-MS (ES) m / e 334 [M + H]⁺, 100%.
[0094]
Example 9
4- (5-benzo [b] thiophen-3-yl-2-tert-butyl-1H-imidazol-4-yl) -pyridine
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Thiaphen-3-boronic acid was used in place of 1-naphthylboronic acid, and NaHCO₃Instead of Na₂CO₃The title compound was prepared in a 96-well plate format using microwaves at a temperature not exceeding 65 ° C. at 100-200 W for 2 hours according to the procedure of Example 1 (e) except that was used. Purified by hplc (YMS-combiprep ODS-A, 20-80% acetonitrile / water 0.1% TFA) (5 mg, 8%). Lc-MS (ES) m / e 334 [M + H]⁺, 100%.
[0095]
Example 10
4- (2-tert-butyl-5-thianthren-1-yl-1H-imidazol-4-yl) -pyridine
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Using thianthrene-1-boronic acid instead of 1-naphthylboronic acid, NaHCO₃Instead of Na₂CO₃The title compound was prepared in a 96-well plate format using microwaves at a temperature not exceeding 65 ° C. at 100-200 W for 2 hours according to the procedure of Example 1 (e) except that was used. Purified by hplc (YMS-combiprep ODS-A, 20-80% acetonitrile / water 0.1% TFA) (3 mg, 5%). Lc-MS (ES) m / e 416 [M + H]⁺, 100%.
[0096]
Example 11
4- (2-tert-butyl-5-phenoxatin-4-yl-1H-imidazol-4-yl) -pyridine
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Using 4-phenoxatin boronic acid instead of 1-naphthylboronic acid, NaHCO₃Instead of Na₂CO₃The title compound was prepared in a 96-well plate format using microwaves at a temperature not exceeding 65 ° C. at 100-200 W for 2 hours according to the procedure of Example 1 (e) except that was used. Purified by hplc (YMS-combiprep ODS-A, 20-80% acetonitrile / water 0.1% TFA) (4 mg, 6%). Lc-MS (ES) m / e 400 [M + H]⁺, 93%.
[0097]
Example 12
4- [2-tert-butyl-5- (6-methoxy-naphthalen-2-yl) -1-methyl-1H-imidazol-4-yl] -pyridine
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Methylamine (2 mL of a 1 M solution in methanol) was added to a solution of trimethylacetaldehyde (353 μL, 3.2 mmol) in acetic acid (2 ml). After stirring at room temperature for 1 hour, keto-oxime (200 mg, 0.65 mmol) was added. The resulting solution was heated at 80 C for 4 hours. The reaction is cooled to room temperature, then the solution is treated with NH₄Neutralized with OH. The reaction mixture was extracted with methylene chloride, and the combined organics were dried over anhydrous magnesium sulfate.
Dissolve the crude product in 5 mL of methanol and add TiCl₃1 mL (> 10% in HCl) was added. The reaction was stirred at room temperature for 18 hours. The methanol was removed under reduced pressure and the slurry was diluted with water. NH₄The pH was adjusted to 8 by the addition of OH and the solution was extracted with EtOAc. The combined organic extracts were extracted with MgSO₄, Filtered and concentrated. The crude product was purified by flash chromatography (silica gel, 5% methanol / methylene chloride) to give 75 mg (0.2 mmol, 31% yield);¹1 H NMR (400 MHz, CDCl₃) Δ 8.25 (d, 2H), 7.80 (d, 1H), 7.70 (s, 1H), 7.65 (d, 1H), 7.25 (d, 1H), 7.10 (M, 4H), 3.90 (s, 3H), 3.10 (s, 3H), 0.20 (s, 3H); MS (ES) 372 [M + H]⁺.
[0098]
Example 13
4- [2-tert-butyl-5- (6-methoxy-naphthalen-2-yl) -3-H-imidazol-4-yl] -pyridin-2-yl}-(3-morpholin-4-yl- Propyl) -amine
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[0099]
a) 6-methoxynaphth-2-yl- (2-fluoropyridin-4-yl) -methylketone
At 0 ° C., n-BuLi (2.5 M in hexane, 19.6 mL, 48.92 mmol) was added to a solution of diisopropylamine (8.0 mL, 57.08 mmol) in THF (60 mL) to obtain LDA. After stirring at 0 ° C. for 15 minutes, the solution was cooled to −78 ° C. and to the solution was added 2-fluoropicoline (5.44 mL, 48.92 mmol) in THF (30 ml). The solution was maintained at -78 C and stirred for 30 minutes, then the compound of Example 3 (a) (10.0 g, 40.77 mmol) was added. The reaction was warmed to room temperature over 0.5 hour and stirred for another 40 minutes. The reaction is performed with KHPO₄(0.5M) and extracted with EtOAc (3x). The organic layer was washed with brine, dried (MgSO₄), Concentrated and then pumped under high vacuum to give 6-methoxynaphth-2-yl-4-pyridylmethylketone as a pale yellow solid (11.82 g, 98%). MS (ES) m / e 296 [M + H]⁺.
[0100]
b) 2-hydroxyimino-1- (6-methoxynaphth-2-yl) -2- (2-fluoropyridin-4-yl) ethan-1-one
At 0 ° C., a solution of Example x (1) (8.0 g, 27.1 mmol) in THF (400 mL) under argon was added dropwise t-butylnitrile (3.46 mL, 28.5 mmol). After stirring at 0 ° C. for 3 minutes, an HCl solution (2M in ether, 32.0 mL, ca. 64 mmol) was added dropwise to the solution. The solution was kept at room temperature for 2 hours, then the solvent was removed in vacuo and the brown oily residue was adjusted to pH 8 with water and CH₂Cl₂Between and CH₂Further extracted with Cl, washed with brine, dried (MgSO₄), Concentrated and then pumped under high vacuum overnight to give an oil which was recrystallized from t-butyl-O-methyl ether / hexane to give 2-hydroxyimino-1- (6-methoxynaphtha). -2-yl) -2- (2-Fluoropyridin-4-yl) ethan-1-one was obtained as an orange solid (7.66 g, 87%). MS (ES) m / e 325 [M + H]⁺.
[0101]
c) {4- [2-tert-Butyl-5- (6-methoxy-naphthalen-2-yl) -3-H-imidazol-4-yl] -pyridin-2-yl}-(3-morpholine-4 -Yl-propyl) -amine
Trimethylacetaldehyde (60 μL, 0.55 mmol), ammonium trifluoroacetate (500 mg), N- (3-aminopropyl) morpholine (200 μL,> 1.2 mmol) and the compound in Example 2 (x) (130 mg, 0.40 mmol) )) Was heated as a melt at 150 ° C. for several hours. After cooling to room temperature, the reaction mixture was dissolved in water and extracted with EtOAc (3x). The combined extracts were concentrated, redissolved in DMSO, purified by hplc, and after lyophilization, pure {4- [2-tert-butyl-5- (6-methoxy-naphthalen-2-yl) -3]. -H-Imidazol-4-yl] -pyridin-2-yl}-(3-morpholin-4-yl-propyl) -amine was obtained (68.4 mg, 57%). MS (ES) m / e 500 [M + H]⁺ 100%.
[0102]
Example 14
{4- [2-tert-butyl-5- (6-methoxy-naphthalen-2-yl) -3-H-imidazol-4-yl] -pyridin-2-yl}-(3-morpholin-4-yl -Ethyl) -amine
Embedded image

The title compound was prepared according to the procedure of Example 13 (c) except that N- (3-aminoethyl) morpholine was used instead of N- (3-aminopropyl) morpholine (124 mg, 43%). Lc-MS (ES) m / e 486 [M + H]⁺, 100% uv, 100% els.
[0103]
Example 15
{4- [2-tert-butyl-5- (6-methoxy-naphthalen-2-yl) -3-H-imidazol-4-yl] -pyridin-2-ylamino} -propyl) -pyrrolidin-2-one
Embedded image

The title compound was prepared according to the procedure of Example 13 (c) except that N- (3'-aminopropyl) -2-pyrrolidinone was used instead of N- (3-aminopropyl) morpholine (99.1 mg, 41%). Lc-MS (ES) m / e 498 [M + H]⁺, 89% uv, 100% els.
[0104]
Example 16
{4- [2-tert-butyl-5- (6-methoxy-naphthalen-2-yl) -3-H-imidazol-4-yl] -pyridin-2-yl}-[3- (2-methyl- Piperidin-1-yl) -propyl] -amine
Embedded image

The title compound was prepared according to the procedure of Example 13 (c) except that 1- (3-aminopropyl) -2-pipecholine was used instead of N- (3-aminopropyl) morpholine (57.1 mg, 23 %). Lc-MS (ES) m / e 512 [M + H]⁺, 96% uv, 100% els.
[0105]
Example 17
{4- [2-tert-butyl-5- (6-methoxy-naphthalen-2-yl) -3-H-imidazol-4-yl] -pyridin-2-yl} -N, N-diethyl-butane- 1,4-diamine
Embedded image

The title compound was prepared according to the procedure of Example 13 (c) except that 4- (diethylamino) butylamine was used instead of N- (3-aminopropyl) morpholine (51.4 mg, 21%). Lc-MS (ES) m / e 500 [M + H]⁺, 91% uv, 100% els.
[0106]
Example 18
{4- [2-tert-butyl-5- (6-methoxy-naphthalen-2-yl) -3-H-imidazol-4-yl] -pyridin-2-yl}-(3-pyrrolidin-1-yl -Propyl) -amine
Embedded image

The title compound was prepared according to the procedure of Example 13 (c) except that n- (2-aminopropyl) pyrrolidine was used instead of N- (3-aminopropyl) morpholine (10.2 mg, 4%). Lc-MS (ES) m / e 484 [M + H]⁺, 100% uv, 100% els.
[0107]
Example 19
{4- [2-tert-butyl-5- (6-methoxy-naphthalen-2-yl) -3-H-imidazol-4-yl] -pyridin-2-yl}-[3- (4-methyl- Piperazin-1-yl) -propyl] -amine
Embedded image

The title compound was prepared according to the procedure of Example 13 (c) except that 1- (3-aminopropyl) -4-methylpiperazine was used instead of N- (3-aminopropyl) morpholine (54.1 mg, 22%). Lc-MS (ES) m / e 513 [M + H]⁺, 100% uv, 100% els.
[0108]
Example 20
{4- [2-tert-butyl-5- (6-methoxy-naphthalen-2-yl) -3-H-imidazol-4-yl] -pyridin-2-yl} -N, N-diethyl-ethane- 1,2-diamine
Embedded image

The title compound was prepared according to the procedure of Example 13 (c) except that N, N-diethylethylenediamine was used instead of N- (3-aminopropyl) morpholine (23.2 mg, 10%). Lc-MS (ES) m / e 472 [M + H]⁺, 89% uv, 100% els.
[0109]
Treatment method
The Tie receptor is an approximately 125 kDa protein with one putative transmembrane region. The extracellular domain of these receptors is divided into several regions: there are three regions with the pattern of cysteine expression found in the EGF-like domain; somewhat weak homology to the immunoglobulin-like domain and the immunoglobulin-like There are two regions with structural features of the domain; and there are three regions with homology to the fibronectin III repeat structure. This particular combination of extracellular domains is unique to the Tie receptor. The intracellular portion of Tie2 is most closely related to the kinase domains of FGF-R1, PDGF-R and c-kit (about 40% identity). The intracellular portion of Tie2 contains all of the characteristics of the tyrosine kinase, including the GXGXXG ATP binding site consensus sequence and typical tyrosine kinase motifs (ie, HDLAARN and DFGL).
[0110]
These receptors have been of interest because they are the only receptor tyrosine kinases other than these receptors for vascular endothelial cell growth factor (VEGF), whose expression is mostly restricted to endothelial cells. There are several lines of evidence indicating that Tie2 is important in angiogenesis, detailed in the following paragraphs.
[0111]
a. Tie1 and Tie2 receptor locations
i. Embryological vascular development
The location of the Tie receptor in the embryo has been studied by many investigators using in situ hybridization. Korhonen et al. (Blood 80: 2548-2555, 1992) showed that the Tie receptor mRNA is located in endothelial cells of all developing blood vessels and in the endocardium of mouse embryos. During embryonic development, expression of the Tie receptor is found on hemangioblasts and all developing vasculature. Expression of the Tie receptor occurs 12-24 hours after mouse embryogenesis, following expression of the major VEGF receptor, Flk-1, possibly suggesting a series of different effects of these receptor systems. (Schnurch and Risau, Development 119: 957-968, 1993). Cloning of the 1.2 Kb genomic 5 'flanking region of Tie2, which bound to the lacZ gene and was expressed in transgenic mice, showed a selective expression pattern in endothelial cells during embryonic development (Schlaeger et al., 1988). Development 121: 1089-1098, 1995). The Tie2 promoter acts to ensure endothelial cell-specific expression of Tie2.
[0112]
ii. In adult tissue
Due to the similarity between embryonic angiogenesis and pathogenic angiogenesis, blocking Tie2 function in a tumor or chronic inflammatory setting can, for example, block angiogenesis, block further cell proliferation, and provide therapeutic benefits Is obtained. Tie mRNA can not be observed in adult skin except in active wound healing sites where large amounts of capillaries growing in granulation tissue contain large amounts of Tie mRNA (Korhonen et al., Blood 80: 2548-). 2555, 1992). PCR amplification of cDNA from normal skin shows no signal for the Tie receptor (Kaipainen et al., Cancer Res. 54: 6571-6577, 1994). In contrast, a strong signal is seen for cDNA from metastatic melanoma, where in situ experiments localize this signal to vascular endothelium. Tie receptor expression is down-regulated in established vasculature, but is up-regulated in ovaries during ovulation, in wounds, and in angiogenesis that occurs in tumor (breast, melanoma and renal cell carcinoma) vasculature. Rate, consistent with the general view that angiogenesis in adults mimics the mechanism of embryonic angiogenesis.
[0113]
b. Tie knockout animals
Homozygous mice with a Tie2 knockout or carrying a transgene encoding a "dominant negative" Tie2 receptor confirmed that the Tie2 receptor is important for embryonic development (Dumont et al. al., Genes Dev. 8: 1897-1909, 1994; Sato et al., Nature 376: 70-74, 1995). Embryonic death in these mice was caused by vascular dysfunction, resulting in a dramatic decrease in endothelial cell numbers. Endothelial cell differentiation and angiogenesis, which is an in situ formation of blood vessels, is due to Tie2 deficiency.
Seems relatively normal in mice. Subsequent sprouting and remodeling leading to the formation of vascular branches (angiogenesis) was severely reduced in Tie2 mutant mouse embryos. This defect in sprouting and angiogenesis caused, in particular, a substantial retardation of the growth of the brain, neural tube and heart, resulting in a lack of viability. This illustrates the importance of Tie2 in angiogenesis. This is significant because angiogenesis is regulated by many growth factors. Interestingly, Flk1 (VEGF receptor) knockout mice show embryonic lethal defects in angiogenesis that occur earlier than Tie2 division. Disruption of the Tie1 receptor results in a very different phenotype, which later results in a defective phenotype; mouse embryos develop due to bleeding caused by defects in the integrity of other well-formed vasculature Will die late. Taken together, these studies indicate that the VEGF / Flk1 and Tie systems act in a continuous fashion, suggesting that Tie2 has an important role in angiogenesis.
[0114]
c. Tie2 ligand
Recently, two ligands for the Tie2 receptor have been reported. Angiopoietin-1 binds to Tie2 and induces tyrosine phosphorylation of Tie2, and its expression in vivo is very closely related to vascular development (Davis et al., Cell 87: 1161-). 1169, 1996). Mice engineered to be deficient in Angiopoietin-1 show an angiogenesis deficiency that is indicative of the angiogenesis already seen in mice lacking the Tie2 receptor, indicating that Angiopoietin-1 is a major physiological receptor for Tie2. A ligand, Tie2 has been shown to have important in vivo angiogenic effects (Suri et al., Cell 87: 1171-1180, 1996). Angiopoietin-2 was identified by homology screening and was shown to be a naturally occurring antagonist to the Tie2 receptor. Transgenic overexpression of angiopoietin-2 disrupts angiogenesis in mouse embryos (Maisonpierier et al., Science 277: 55-60, 1997). Taken together, these results support a role for Tie2 receptors in angiogenesis.
[0115]
For use in therapy, the compounds of formula (I) are usually formulated into pharmaceutical compositions according to standard pharmaceutical practices.
[0116]
According to a further aspect of the present invention there is provided a pharmaceutical composition comprising a compound of formula (I) or a pharmaceutically acceptable salt thereof and a pharmaceutically acceptable carrier.
[0117]
No toxicological effects are shown / expected when the compounds of the formula (I) are administered in the above mentioned dosage range.
[0118]
Compounds of formula (I), pharmaceutically acceptable salts thereof and pharmaceutical compositions incorporating them, are conveniently prepared by any of the routes conventionally used for drug administration, eg, oral, topical It can be administered parenterally or by inhalation. The compound of formula (I) may be administered in conventional dosage forms prepared by combining the compound of formula (I) with a standard pharmaceutical carrier according to conventional procedures. The compounds of the formula (I) can also be administered in conventional formulations in combination with known second therapeutically active compounds. These procedures may involve mixing, granulating and compressing or dissolving the ingredients depending on the desired formulation. The form or nature of the pharmaceutically acceptable carrier or diluent will be determined by the amount of active ingredient to be incorporated, the route of administration and other well-known variables. The carrier (s) must be "acceptable" in the sense that they are compatible with the other ingredients of the formulation and are not deleterious to their recipients.
[0119]
The pharmaceutical carrier employed can be, for example, either a solid or liquid. Examples of solid carriers are lactose, terra alba, sucrose, talc, gelatin, agar, pectin, acacia, magnesium stearate, stearic acid and the like. Examples of liquid carriers are syrup, peanut oil, olive oil, water and the like. Similarly, the carrier or diluent, alone or with a wax, may include slow release materials known to those skilled in the art, such as glyceryl monostearate or glyceryl distearate.
[0120]
A wide variety of pharmaceutical dosage forms can be used. If a solid carrier is used, the preparation may be tableted, placed in a hard gelatin capsule in powder or pellet form, or in the form of a troche or lozenge. The amount of solid carrier will vary widely but, preferably, will be from about 25 mg to about 1 g. If a liquid carrier is used, the preparation will be in the form of a syrup, emulsion, sterile injectable liquid such as a soft gelatin capsule, ampoule, or a non-aqueous liquid suspension.
[0121]
The compounds of formula (I) may be administered locally, ie, by non-systemic administration. This includes the topical application of the compounds of formula (I) to the epidermis or buccal cavity and the instillation of such compounds into the ears, eyes and nose, so that the compounds enter the bloodstream significantly. do not do. In contrast, systemic administration means oral, intravenous, intraperitoneal and intramuscular.
[0122]
Formulations suitable for topical administration include liquid or semi-liquid formulations suitable for penetration into the site of inflammation through the skin, such as liniments, lotions, creams, ointments or pastes, and eyes, ears or Drops suitable for nasal administration are included. The active ingredient may comprise, for topical administration, from 0.001% to 10% w / w of the formulation, for example from 1% to 2% by weight. However, it may comprise as much as 10% w / w of the formulation, preferably less than 5% w / w, more preferably 0.1% to 1% w / w.
[0123]
Lotions according to the present invention include those suitable for application to the skin or eyes. An eye lotion may comprise a sterile aqueous solution which may contain a bactericide, and can be prepared by methods similar to those for the preparation of drops. Lotions or liniments for application to the skin may also include agents that dry and cool the skin quickly, such as alcohol or acetone, and / or humectants such as glycerol or oils, such as castor oil or peanut oil. May be included.
[0124]
Creams, ointments or pastes according to the invention are semisolid formulations of the active ingredient for external use. They can be prepared by kneading the active ingredient in fine or finely divided form, alone or in solution or suspension in aqueous or non-aqueous fluid, with a oleaginous or non-greasy base by means of a suitable machine. The base may be a hydrocarbon such as solid paraffin, soft paraffin or liquid paraffin, glycerol, beeswax, metal soap; a serum; an oil of natural origin such as tonsil oil, corn oil, peanut oil, castor oil or olive oil; Fatty acids such as wool fat or its derivatives or stearic acid or oleic acid may be included with alcohols such as propylene glycol or macrogels. The formulation may incorporate a suitable surfactant such as an anionic, cationic or nonionic surfactant such as a sorbitan ester or a polyoxyethylene derivative thereof. Suspending agents such as natural gums, inorganic substances such as cellulose derivatives or silicate silicas, and other ingredients such as lanolin may be included.
[0125]
Drops of the present invention can include sterile aqueous or oily solutions or suspensions, dissolving the active ingredient in a suitable aqueous solution of a bactericide and / or fungicide and / or other suitable preservative. And may preferably include a surfactant. The resulting solution can then be clarified by filtration, transferred to a suitable container, and then sealed and sterilized by autoclaving or maintaining at 98-100 ° C for half an hour. Alternatively, the solution can be sterile filtered and transferred to the container by an aseptic technique. Examples of fungicides and fungicides suitable for inclusion in drops are phenylmercuric nitrate or acetate (0.002%), benzalkonium chloride (0.01%) and chlorhexidine acetate (0.01%). %). Suitable solvents for the preparation of an oily solution include glycerol, diluted alcohol and propylene glycol.
[0126]
The compounds of formula (I) may be administered parenterally, ie by intravenous, intramuscular, subcutaneous, intranasal, rectal, vaginal or intraperitoneal administration. Subcutaneous and intramuscular forms for parenteral administration are generally preferred. Dosage forms suitable for such administration may be prepared by conventional techniques. The compounds of formula (I) may also be administered by inhalation, ie by intranasal and oral inhalation. Dosage forms suitable for such administration, such as an aerosol or metered dose inhaler, may be prepared by conventional techniques.
[0127]
The compounds of formula (I) may also be used topically in the treatment or prevention of conditions aggravated by excessive or inappropriate angiogenesis.
[0128]
The compound of formula (I) is administered in an amount sufficient to inhibit Tie2 receptor activity, such that it is down-regulated to normal or, in some cases, sub-normal levels. , Can improve or prevent the condition.
[0129]
Chronic diseases with inappropriate angiogenic components are various ocular neovascularizations such as diabetic retinopathy and macular degeneration. Other chronic diseases with excessive or increased proliferation of the vasculature are tumor growth and metastasis, atherosclerosis and certain forms of arthritis. Thus, Tie2 tyrosine kinase receptor inhibitors are useful for blocking the angiogenic components of these conditions.
[0130]
As used herein, the term "excessive or increased proliferation of the vasculature" includes, but is not limited to, diseases characterized by hemangiomas and ocular diseases. As used herein, the term "inadequate angiogenesis" includes, but is not limited to, diseases characterized by vascular growth with tissue growth, such as occurs in cancer, metastasis, arthritis, psoriasis and atherosclerosis. It is not limited.
[0131]
For all uses described herein for a compound of formula (I), a daily oral dosage regimen will preferably comprise about 0.1 to about 80 mg / kg of total body weight, preferably about 0.1 to about 80 mg / kg of total body weight. It will be between 2 and 30 mg / kg, more preferably between about 0.5 mg and 15 mg. A daily parenteral dosage regimen would be about 0.1 to about 80 mg / kg, preferably about 0.2 to about 30 mg / kg, more preferably about 0.5 mg to 15 mg / kg of total body weight. . The daily topical dosage regimen will preferably be from 0.1 mg to 150 mg administered 1 to 4 times, preferably 2 or 3 times a day. A daily inhalation dosage regimen will preferably be from about 0.01 mg / kg to about 1 mg / kg per day. The optimal amount and interval for individual administration of a compound of formula (I) or a pharmaceutically acceptable salt thereof will depend on the nature and extent of the condition being treated, the route and site of administration, and the particular patient being treated. It will be appreciated by those skilled in the art that such a value will be determined and that such an optimum may be determined by conventional techniques. The optimal unit of treatment, ie, the number of doses of a compound of formula (I) or a pharmaceutically acceptable salt thereof administered per day for a predetermined number of days, can be determined using conventional treatment unit determination tests. It will be understood by those skilled in the art that it can be determined by those skilled in the art.
[0132]
Pharmacological test method
A. Measurement of Tie2 kinase activity
The protein for Tie kinase studies was prepared using a partial cDNA clone of the Tie2 receptor. To generate the primary screening assay, a baculovirus-expressed GST fusion to the Tie2 kinase domain was constructed and expressed using the commercially available vector pAcG1 (Pharmingen).
[0133]
This final construct was transfected into baculovirus and the soluble GST fusion product was used in a screening assay. Previous studies have shown the use of baculovirus-expressed GST fusions against the murine Tie2 kinase domain to screen for candidate target / signaling molecules (Huang et al., Oncogene 11: 2097-2103, 1995).
[0134]
Tie2 kinase activity assay: The Tie2 kinase activity assay was typically performed in one of the two methods described, as follows. Similar results are obtained with minor changes in the assay.
[0135]
1. Autophosphorylation flash plate assay
material:
Kinase buffer (final 20 mM Tris-HCl, pH 7.0, 100 mM NaCl, 12 mM MgCl₂, 1 mM DTT).
gamma³³p-ATP (typically final volume 0.5-1 uCi / well)
ATP (30 uM final, or other desired concentration)
Flash plate (96-well, polystyrene microplate with plastic scintillator coated wells)
TopCount (microplate scintillation counter)
procedure:
Activate the incubator shaker and adjust the temperature to 30 ° C.
Add 20 ul of 3X kinase buffer per well to the flash plate.
Add 20 ul protein per well except background. Compounds are typically added in 1-2 ul in a DMSO stock solution.
Gamma per well³³Add 20 ul of a mixture of p-ATP and cold ATP.
Total capacity is 60ul.
Cover with clear polyester film.
Incubate at 30 ° C. for 2 hours or desired time in shaker.
Remove the flash plate from the shaker and wash 5 times (eg, with 300 ul of 10 uM ATP in 1X PBS per well).
Read plate on TopCount or other counting device. The results are calculated as% inhibition and IC50 using routine calculations.
[0136]
2. Fluorescence polarization for Tie2 kinase
Final assay conditions:
50 mM HEPES pH 7.5
2% DMSO (when screening compounds)
250uM ATP
2 mM MgCl₂
1 mM DTT
50uM Na Vanidate
10 uM peptide substrate
Activated tie 2 kinase^* See activation protocol below
Peptide substrate:
RFWKYEFWR-OH
MW (TFA salt) = 1873 Da
Prepare a 1 mM peptide stock solution and store at −20 ° C.
Dilute to 100 uM just before use.
9X kinase buffer:
450 mM HEPES pH 7.5
900 mM NaCl
450uM Na Vanidate
18 mM MgCl₂
100 mM DTT
It can be prepared earlier than expected and stored in aliquots at -20 ° C.
ATP stock solution:
Prepare a 25 mM ATP stock solution and store in aliquots at -20 ° C until needed. Dilute to 2.5 mM before use.
procedure:
For the 50 ul reaction, add the following components to each well of a 96-well black half-area plate (Costar, Cat. No. 3694).
1. 5% compound in 20% DMSO
2.9X kinase buffer 5ul
3. 5 ul of 2.5 mM ATP
4. 5ul of 100uM peptide substrate
5. 25ul of PTK detection mixture (Panvera, P-2652, 50ml-UK distributor is Cambridge Bioscience)
6. 5 ul of activated tie 2 kinase (protocol below) diluted in 1X buffer to start the reaction.
7. The polarized light is read by the FP device after circulating for 30 to 50 minutes according to the enzyme activity.
[0137]
Representative compounds of Formula (I), Examples 1-20, were active in this fluorescence assay and were found to have an IC50 of <1 uM.
[0138]
Tie2 kinase activation protocol:
Final buffer conditions:
20 mM Tris-HCl pH 7.5
12 mM MgCl₂
100 mM NaCl
20uM Na Vanidate
1 mM DTT
300uM ATP
procedure
1. Incubate 5 uM tie 2 kinase with 300 uM ATP and the above buffer conditions.
2. Incubate at 27 ° C for 2 hours.
3. 20 mM Tris-HCl pH 7.5, 100 mM NaCl₂ATP is separated from the enzyme by adding 2.5 ml of the reaction to a NAP-25 desalting column (Pharmacia Biotech Cat. No. 17-0852-02) pre-equilibrated with.
4.5.0 ml of 20 mM Tris-HCl pH 7.5, 100 mM NaCl₂To elute the enzyme; the protein concentration is now 2.5 uM.
5. The enzyme is divided into aliquots and stored at -80 ° C as soon as possible.
B. Measurement of Tie2 receptor signaling-cell assay
HEL cells (ATCC # TIB180) were cultured in RPMI-1640 medium supplemented with 2 mM glutamine and 10% FBS as a suspension culture medium at 1-5 × 10 5⁵Culture in ml. Subculture the required number of cells in 0.5% FBS / RPMI medium 16-36 hours before the experiment. On the day of the experiment, cells were harvested and 0.5-1.0 × 10 5 in 0.5% FBS RPMI.⁷Resuspend at a density of cells / ml and seed 2-3 wells / well in 6 well plates.
[0139]
Alternatively, human umbilical vein endothelial cells (HUVEC) (Clonetics-Walkersville, MD) can be used in the assay. HUVECs at passages 2-12 were supplemented in supplemented EGM (Clonics) in 6-well plates at 2 × 10 6 per well⁵And 1 × 10⁶Plate with cells. After 24 hours, the medium is replaced with EBM containing 3% BSA (Clonics) and the cells are cultured overnight and used for the next day in the assay.
[0140]
The cells are treated with the appropriate concentration of the inhibitor compound for 30-45 minutes. The contents of the wells are mixed briefly on a rocker (about 30 seconds) and incubated at 37 ° C. The cells are then treated with a source of natural ligand such as serum or fibroblast conditioned medium for 10 minutes.
[0141]
At the end of the 10 minute incubation period, place the plate on ice. Collect cells and remove medium. Lyse cells in denaturing sample buffer (Invitrogen-Carlsbad, CA). The suspension is sonicated 5 times at medium setting and returned to ice. As described in detail below, the phosphorylation status of the Tie2 receptor is determined by Western blotting and detection with an anti-phospho-Tie2 antibody (Harlow, E., and Lane, DP, Antibodies-A Laboratory). Manual, Cold Spring Harbor Laboratory Press: New York, 1988). Run 30 ul of lysate on a 7.5% SDS / polyacrylamide gel. The gel is then transferred to a nitrocellulose or PVDF membrane according to the manufacturer's instructions for western blotting.
[0142]
The blot is washed with PBS / 0.05% Tween-20 and then blocked for 1 hour with 3% BSA / PBS / Tween at room temperature. The blot is then incubated with 1 ug / ml of anti-phospho-Tie2 antibody (SmithKline Beecham) in PBS / 0.05% Tween for 1 hour, and the blot is then incubated 4 times with PBS / Tween. Wash the blot for 5 minutes each time. Incubate the blot for 1 hour with anti-mouse-HRP conjugated secondary antibody diluted in PBS / Tween to the manufacturer's recommended dilution. Wash four times for 5 minutes each time After the last wash, blots are developed by ECL method (Amersham) or equivalent.
[0143]
Each blot is scanned using a densitometer or graphics program (eg, ImageQuant-Molecular Dynamics). The Tie-2 band is isolated and "boxed out" for each lane. Analyze the pixel amount or comparison criteria for each sample. Also, an appropriate background area of the same size is measured for each sample. After adjusting for background, phosphorylation is expressed as a percentage of phosphotyrosine staining relative to the untreated control.
[0144]
Angiogenesis in vivo model
In vivo angiogenesis measurements-murine air pouch granuloma model:
The following is a model of inflammatory angiogenesis used to show that inhibition of Tie2 stops tissue destruction of excessive or inappropriate proliferation of blood vessels. Murine air pouch granuloma model of chronic inflammation (Kimura et al., 1985, J. Pharmacobio-Dyn., 8: 393-400; Colville-Nash et al., 1995, J. Pharm. And Exp. 27. Ther. 1463-1472, the disclosure of which is incorporated herein by reference in its entirety) is characterized by inflammatory cell influx, fibrous tissue proliferation and severe angiogenesis. It is representative of inflammatory angiogenesis and shows that angiogenic elements can be pharmacologically modulated except for granuloma growth and size. In addition, angiogenesis can be accurately quantified by vascular casting methods.
[0145]
On day 1, mice are anesthetized using Aerane (Isoflurane) gas (5%) or other suitable method, after which 3 ml of air is injected into the back subcutaneous tissue using a 27 g needle. Allow the mice to recover.
[0146]
On day 0, the mice are re-anesthetized using Aerane or other suitable method, and once anesthetized, Freund with 0.1% v / v croton oil in an air pouch formed on day -1. Inject 0.5 ml of complete adjuvant. The animals also typically contain 0.2 ml of N, N-dimethylacetoacetamide (DMA) (Sigma, St. Louis, Mo.) / Cremephor El (Sigma, St. Louis, Mo.), saline (10 / 10/80) or other suitable vehicle to begin their dosing regimen (days dependent on experiment). The animals are allowed to recover and the animals receive all subsequent doses in the absence of anesthetic.
[0147]
Animals are dosed on days 1-5 according to the schedule.
[0148]
On day 6, the animals are anesthetized again, after which vascular casts are made (Kimura et al., 1986, J. Pharmacobio-Dyn., 9: 442-446); this is carmin red (10%) ( Includes 1 ml tail vein injection of Sigma, St. Louis, Mo./gelatin (5%) (Sigma, St. Louis, Mo.) solution. The animals are then sacrificed with a lethal dose of anesthetic and cooled at 4 ° C. for 2 hours before removing the granuloma tissue.
[0149]
After removing the granuloma, it is weighed, then dried at 45 ° C. for 3 days and weighed again. Then, the dried tissue was treated at 57 ° C. for 3 days with 12 U / ml.^-1Papain (Sigma, St. Louis, MO) and 0.33 g / L^-1Digest in 0.9 ml of 0.05 M phosphate buffer (pH 7.0) containing N-acetyl-1-cysteine (Sigma, St. Louis, Mo.). After 3 days of digestion, carmin red is solubilized by the addition of 0.1 ml of 5 mM NaOH. The sample is centrifuged and then filtered using a 0.2 um acrodisc. The carmine content is then measured against a carmine red standard curve (0.5-2 mg / ml) generated in extracted tissues from non-carmine treated animals and read at 490 nm. Samples and standard curves are typically measured using DeltaSoft Elisa analysis software (Biometallics Inc., Princeton, NJ). The carmine content is then used to determine the vascular index for the various treatments. Here, the vascular index is mg of carmine dye per gram of dry tissue.
[0150]
The effect of the compound on vascular density was typically measured 6 days after the induction of granuloma. It was determined that this time was at or near the peak of angiogenesis. As a positive control, medroxyprogesterone, an angiogenesis-inhibiting steroid (Gross et al., 1981, Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 78: 1176-1180 (the disclosure of which is incorporated herein by reference in its entirety). )) Was used. This control showed a maximum reduction of 50% in this model. Medroxyprogesterone had no effect on granuloma size as measured by dry weight.
[0151]
Angiogenesis model-in vivo
Measurement of angiogenesis in vivo-Matrigel model:
An angiogenesis model is created in vivo by placing the extracellular matrix gel under the mouse skin for about one week and then quantifying the angiogenic infiltration of the gel using several criteria (Biancone J. Exp. Med. 186: 147, L., et al., Development of Inflammation Angiogenesis by Local Stimulation of Fas In Vivo. That is, endotoxin-free Matrigel, which is a reduced reduced growth factor,^R(Becton-Dickinson, Bedford, Mass.) Is a gel at low temperature. The antibody or known angiogenic agent and the gel are mixed such that they do not exceed 2% of the total volume. Eight weeks or older C57 female mice were injected with Matigel by subcutaneous dorsal injection with a chilled syringe.^RAdminister 0.5 ml. At physiological temperature, liquid Matrigel^RRapidly forms solid and cohesive gels. During the course of the experiment, mice were administered test compounds or controls, administered as described above. Six days later, the mice were sacrificed and Matrigel^RCollect the plug. Drabkin method (Drabkin, DL and Austin, JH:.. Spectrophotometric Studies II Preparations from washed blood cells; nitric oxide hemoglobin and sulfhemoglobin J Biol Chem 112: 51, 1935) (Sigma, St. Louis, MO) the hemoglobin content of the gel Angiogenesis is quantified by analysis or by staining and quantifying blood vessels using CD31 staining as described above.
[0152]
All publications, including but not limited to patents and patent applications, cited herein are specifically and individually incorporated by reference as if the individual publications were fully disclosed. Is hereby incorporated by reference as if it were explicitly part of the specification.
The above description, including the preferred embodiments, fully discloses the invention. Modifications and improvements of the embodiments specifically disclosed herein are within the scope of the following claims. Without further elaboration, it is believed that one skilled in the art can, using the preceding description, utilize the present invention to its fullest extent. Accordingly, the examples herein are intended to be illustrative only and are not intended to limit the scope of the invention in any way. Embodiments of the invention which claim exclusive property and priority are as defined in the claims.

Claims (22)

Formula (I):

[Where,
Ar is an optionally substituted naphth-2-yl or naphth-1-yl, an optionally substituted bicyclic or tricyclic carbocycle, an optionally substituted bicyclic or tricyclic An aromatic heterocycle, or an optionally substituted bicyclic or tricyclic heterocycle;
V is CH or N;
X is O, CH ₂ , S or NH;
Z is oxygen or sulfur;
n is 0 or an integer having a value from 1 to 4;
t is 0 or an integer having a value from 1 to 10;
Q is hydrogen, (CR ¹³ R ¹⁴ ) _t OR ⁹ , (CR ¹³ R ¹⁴ ) _t OR ¹¹ , C _1-10 alkyl, halo-substituted C _1-10 alkyl, C _2-10 alkenyl, C _2-10 alkynyl , _{C 3-7 cycloalkyl, C 3-7} cycloalkyl _{C 1-10 alkyl, C 5-7 cycloalkenyl, C 5-7} cycloalkenyl _{C 1-10} alkyl, aryl, aryl _{C 1C-10} alkyl, heteroaryl Heteroaryl C _1-10 alkyl, heterocyclyl, heterocyclyl C _1-10 alkyl, (CR ¹³ R ¹⁴ ) _t S (O) _m R ⁸ , (CR ¹³ R ¹⁴ ) _t NHS (O) ₂ R _{^{8, (CR 13 R 14)}} t NR 10 R 11, (CR 13 R 14) t NO 2, (CR 13 R 14) t CN, (CR 1 ^{_{R 14) t S (O)}} 2 NR 10 R 11, (CR 13 R 14) t C (Z) R 11, (CR 13 R 14) t OC (Z) R 11, (CR 13 R 14) t C _{^{(Z) OR 11, (CR}} 13 R 14) t C (Z) NR 10 R 11, (CR 13 R 14) t C (Z) NR 11 OR 9, (CR 13 R 14) t NR 10 C (Z _{^{) R 11, (CR 13 R}} 14) t NR 10 C (Z) NR 10 R 11, (CR 13 R 14) t N (OR 10) C (Z) NR 10 R 11, (CR 13 R 14) t ^{N (OR 10) C (Z} ) R 11, (CR 13 R 14) t C (= NOR 10) R 11, (CR 13 R 14) t NR 10 C (= NR 15) NR 10 R 11, (CR ¹³ R ¹⁴ ) _t OC (Z) NR ^{10 R 11, (CR 13 R} 14) t NR 10 C (Z) NR 10 R 11 or ^{(CR 13} R _14), be a ^{t NR 10 C (Z) OR} 10; wherein the cycloalkyl, cycloalkylalkyl , Aryl, arylalkyl, heteroaryl, heteroarylalkyl, heterocyclic and heterocyclicalkyl may be substituted;
R ¹ is hydrogen, X—R ⁴ , halogen, hydroxy, optionally substituted C _1-6 alkyl, optionally substituted C _1-6 alkylsulfinyl, CH ₂ OR ⁵ , amino, mono or di containing -C _1-6 ^{alkylamino, N (R 6) C (} O) R 7, N (R 6) S (O) 2 R 8 or O,, additional heteroatom selected from S and NR ⁹ A 5-7 membered N-heterocyclyl ring, which may be
R ² and R ³ independently represent optionally substituted C _1-6 alkyl, or R ² and R ³ together with the carbon atom to which they are attached are substituted and Or form a C _3-7 cycloalkyl or C _5-7 cycloalkenyl ring, or R ² and R ³ together with the carbon atom to which they are attached, are selected from N, O and S Forming an optionally substituted 5-7 membered heterocyclyl ring containing up to 3 heteroatoms;
R ⁴ is independently a C _1-6 alkyl, aryl, aryl C _1-6 alkyl, heterocyclyl, heterocyclyl C _1-6 alkyl, heteroaryl, or heteroaryl C _1-6 alkyl group. Wherein any of these groups may be substituted;
R ⁵ is hydrogen, C ^{(Z) R 10} or optionally substituted _{C 1-6} alkyl, aryl which may be substituted, an optionally substituted aryl _{C 1-6} alkyl or S (O, ) be a ₂ R ^8;
R ⁶ is hydrogen or C _1-6 alkyl;
R ⁷ is hydrogen, C _1-6 alkyl, C _3-7 cycloalkyl, aryl, aryl C _1-6 alkyl, heteroaryl, heteroaryl C _1-6 alkyl, heterocyclyl, or heterocyclyl C _{1- 6} alkyl;
R ⁸ is C _1-6 alkyl, C _3-7 cycloalkyl, aryl, aryl C _1-6 alkyl, heteroaryl, heteroaryl C _1-6 alkyl, heterocyclyl, or heterocyclyl C _1-6 alkyl And;
R ⁹ is hydrogen, C _1-4 alkyl, C _3-7 cycloalkyl or aryl;
R ¹⁰ is hydrogen, C _1-6 alkyl, C _3-7 cycloalkyl, C _3-7 cycloalkyl C _1-6 alkyl, aryl, aryl C _1-6 alkyl, heterocyclyl, heterocyclyl C _{1- 6} alkyl, heteroaryl and heteroaryl C _1-6 alkyl, any of which may be substituted;
R ¹³ and R ¹⁴ are independently hydrogen, C _1-6 alkyl, C _3-7 cycloalkyl, C _3-7 cycloalkyl C _1-6 alkyl, aryl, aryl C _1-6 alkyl, heterocyclyl , Heterocyclyl C _1-6 alkyl, heteroaryl, or heteroaryl C _1-6 alkyl, each of which may be substituted; or R ¹¹ and R ¹² are attached to them Together with the nitrogen forms a 5- to 7-membered heterocycle which may contain additional heteroatoms selected from O, S or NR ⁹ ;
R ¹⁵ is hydrogen, cyano, C _1-4 alkyl, C _3-7 cycloalkyl or aryl]
Or a pharmaceutically acceptable salt thereof. The compound according to claim 1, wherein V is CH. The compound according to claim 1, wherein V is N. R ¹ is hydrogen or a group ^{X-R 4} in which claims 1-3 compound according to any one. The compound according to claim 4, wherein X is oxygen or nitrogen. The compound according to claim 5, wherein R ⁴ is an optionally substituted alkyl, aryl, aryl C _1-6 alkyl, or heterocyclic C _1-6 alkyl. R ⁴ may be substituted, piperidine, morpholine, pyrrolidine, piperazine or compound of claim 6 wherein the heterocyclic C _1-6 alkyl pyrrolidinone,. The compound according to any one of the preceding claims, wherein Ar is an optionally substituted naphthyl, benzothiophene or benzofuran ring. 9. The compound of claim 8, wherein the Ar ring is substituted with up to three substituents independently selected from halo, hydroxy, _{hydroxyC1-6alkyl} , or _C1-6alkoxy . The compound according to claim 9, wherein Ar is naphth-2-yl optionally substituted by a _C1-6 alkoxy group. The compound according to claim 1, wherein R ² and R ³ are independently optionally substituted C _1-6 alkyl. The compound according to claim 1, wherein R ² and R ³ together with the carbon atom to which they are attached form an optionally substituted C _3-7 cycloalkyl or C _5-7 cycloalkenyl ring. R ² and R ³ are bonded to N together with the carbon atoms are, O and S optionally substituted 5- to 7-membered heterocyclyl ring containing up to three heteroatoms selected from those The compound of claim 1 which forms 2-tert-butyl-4-naphthalen-2-yl-5-pyridin-4-yl-imidazole;
2-tert-butyl-4- (6-ethoxynaphthalen-2-yl) -5-pyridin-4-yl-imidazole;
4- (2-tert-butyl-5- (6-methoxy-naphthalen-2-yl) -3H-imidazol-4-yl) -pyridine;
2-tert-butyl-4-inden-2-yl) -5-pyridin-4-yl-1H-imidazole;
2-tert-butyl-4-benzofuran-2-yl-5-pyridin-4-yl-1H-imidazole;
4- (2-tert-butyl-5-dibenzothiophen-4-yl-1H-imidazol-4-yl) -pyridine;
4- (2-tert-butyl-5-dibenzofuran-4-yl-1H-imidazol-4-yl) -pyridine;
4- (5-benzo [b] thiophen-2-yl-2-tert-butyl-1H-imidazol-4-yl) -pyridine;
4- (5-benzo [b] thiophen-3-yl-2-tert-butyl-1H-imidazol-4-yl) -pyridine;
4- (2-tert-butyl-5-thianthren-1-yl-1H-imidazol-4-yl) -pyridine;
4- (2-tert-butyl-5-phenoxatin-4-yl-1H-imidazol-4-yl) -pyridine;
4- [2-tert-butyl-5- (6-methoxy-naphthalen-2-yl) -1-methyl-1H-imidazol-4-yl] -pyridine; or a pharmaceutically acceptable salt thereof. 2. The compound according to 1. 4- [2-tert-butyl-5- (6-methoxy-naphthalen-2-yl) -3-H-imidazol-4-yl] -pyridin-2-yl}-(3-morpholin-4-yl- Propyl) -amine;
{4- [2-tert-butyl-5- (6-methoxy-naphthalen-2-yl) -3-H-imidazol-4-yl] -pyridin-2-yl}-(3-morpholin-4-yl -Ethyl) -amine;
{4- [2-tert-butyl-5- (6-methoxy-naphthalen-2-yl) -3-H-imidazol-4-yl] -pyridin-2-ylamino} -propyl) -pyrrolidin-2-one ;
{4- [2-tert-butyl-5- (6-methoxy-naphthalen-2-yl) -3-H-imidazol-4-yl] -pyridin-2-yl}-[3- (2-methyl- Piperidin-1-yl) -propyl] -amine;
{4- [2-tert-butyl-5- (6-methoxy-naphthalen-2-yl) -3-H-imidazol-4-yl] -pyridin-2-yl} -N, N-diethyl-butane- 1,4-diamine;
{4- [2-tert-butyl-5- (6-methoxy-naphthalen-2-yl) -3-H-imidazol-4-yl] -pyridin-2-yl}-(3-pyrrolidin-1-yl -Propyl) -amine;
{4- [2-tert-butyl-5- (6-methoxy-naphthalen-2-yl) -3-H-imidazol-4-yl] -pyridin-2-yl}-[3- (4-methyl- Piperazin-1-yl) -propyl] -amine;
{4- [2-tert-butyl-5- (6-methoxy-naphthalen-2-yl) -3-H-imidazol-4-yl] -pyridin-2-yl} -N, N-diethyl-ethane- The compound according to claim 1, which is 1,2-diamine; or a pharmaceutically acceptable salt thereof. A pharmaceutical composition comprising the compound according to any one of claims 1 to 15 or a pharmaceutically acceptable salt thereof, and a pharmaceutically acceptable carrier. 16. A method of treating a TIE2 receptor mediated disease in a mammal in need of treatment thereof, including prevention, comprising administering to said mammal an effective amount of a compound of any one of claims 1-15. . 18. The method of claim 17, wherein the disease is characterized by excessive, undesirable, or inappropriate angiogenesis. 19. The method of claim 18, wherein the disease is diabetic retinopathy, macular degeneration, or other ocular neovascularization. 18. The method of claim 17, wherein the disease is characterized by excessive or increased proliferation of the vasculature. 21. The method according to claim 20, wherein the disease is tumor growth and metastasis. 18. The method according to claim 17, wherein the disease is atherosclerosis.