HUP0002669A2 - Diabetes kezelése dioxo-tiazolidinnel és szulfonil-karbamiddal - Google Patents

Abstract

A találmány diabetes mellitus, különösen II. típusú diabetes, valamintdiabetes mellitusszal kapcsolatos állapotok emlősökben végzettkezelési eljárására vonatkozik, amelynek során egy ilyen kezeléstigénylő emlősnek beadják egy inzulinszenzibilizátor, például 5-[4-{2-[N-metil-N-(2-piridil)-amino]-etoxi}-benzil]-2,4-dioxo-tiazolidin,(+)-5-{4-[(3,4-dihidro-6-hidroxi-2,5,7,8-tetrametil-2H-1-benzopirán-2-il)-metoxi]-benzil}-2,4-dioxo-tiazolidin vagy troglitazon, 5-{4-[(1-metil-ciklohexil)-metoxi]-benzil}-2,4-dioxo-tiazolidin vagyciglitazon, 5-{4-[2-(5-etil-2-piridil)-etoxi]-benzil}-2,4-dioxo-tiazolidin vagy pioglitazon vagy 5-[(2-benzil-2,3-dihidro-5-benzopiranil)-metil]-2,4-dioxo-tiazolidin vagy englitazon, és egyinzulinsecretagogum, így egy szulfonil-karbamid, például glibenklamid,glipizid, gliklazid, glimepirid, tolazamid vagy tolbutamid hatásos,nemtoxikus és gyógyászatilag elfogadható mennyiségét. Ó

Description

68.389/SM

S.B.G. & K. Nemzetközi Szabadalmi iroda H-1062 Budapest. Andrássy út 113. Telefon: 34-24-950, Fax: 34-24-323 fit

KÖZZÉTÉTELI PÉLDÁNY

Benzotiofén-karboxamid-származékok^és-PGDz^etagonisták.ésaz ezeket tartal mazó gyógyszerkészítmények j<

Shionogi & Co., Ltd., Osaka, JP

Feltalálók: HONMA Tsunetoshi, Nara, JP

HIRAMATSU Yoshiharu, Osaka, JP

ARIMURA Akinori, Osaka, JP

A bejelentés napja: 1997. 12. 10.

Elsőbbségei: 1996. 12. 13. (8/333495) JP

1997. 09. 19. (9/254001) JP

A nemzetközi bejelentés száma: PCT/JP97/04527

A nemzetközi közzététel száma: WO 98/25919

A találmány benzotiofén-karboxamid-származékokra PGD₂ antagonistákra, (prosztaglandin D₂) antagonistákra azok intermedierjeire és az azokat tartalmazó gyógyszerkészítményekre vonatkozik, a találmány tárgya továbbá gyógyszer, mely a találmány szerinti benzotiofén-karboxamid-származékokat foglalja magába nazális blokk kezelésére.

• *

A technika állása

Néhány, találmány szerinti vegyület biciklikus amid-származék analógját mint tromboxán A₂ (TXA₂) antagonistaként használható vegyületet ir le az 53295/1991 számú publikált japán közrebocsátási irat. Azonban az 53295/1991 számú japán publikált közrebocsátási irat csak azokat a vegyületeket írja le, amelyek TXA₂ antagonistaként használhatók, de nem említi PGD₂ antagonistaként történő felhasználhatóságukat mint azt a jelen találmány megállapítja. Másfelől a 79060/1993 számú publikált japán közrebocsátási irat, a 23170/1994 publikált japán közrebocsátási irat és a Chern. Pharm. Bull. 37, 6, 1524-1533 (1989) irodalmi hely biciklikus amidszármazékokról tudósít, amelyek a biciklikus szulfon-amid-származékok intermedierjei. A jelen találmány szerinti vegyületek azonban különböznek az említett irodalmi helyen leírt vegyületektől az amid csoport szubsztituenseinek fajtájában. Néhány vegyület analógot a találmány szerinti vegyületek vonatkozásában melyek mint PGD₂ antagonisták használhatók a WO 97/00853 számú szabadalmi leírás ismertet. Azonban a WO 97/00853 számú szabadalmi bejelentés nem említi azt, hogy ezek a vegyületek gátló hatást mutatnak az Eozionofilia infiltráció aktivitással szemben.

A TXA₂ úgy ismert, mint különböző aktivitással rendelkező anyag, így vérlemezke aggregáció és trombogenezis aktivitással stb. rendelkezik. A TXA₂ antagonisták ezért mint antitrombotikus szerek használhatók és gyógyszerként is alkalmazhatók a miokardiális infarktus vagy asztma kezelésében.

Másfelől a találmány szerinti PGD₂ antagonisták a PGD₂ túltermelés befolyásolására használhatók, különösen mint olyan gyógyszerek, amelyek a mast sejt diszfunkció kezelésére alkalmas szerek, beleértve például ezen eltérésekbe a szisztémás mastocitozist és a szisztémás mast sejt aktivitás rendellenességeit, to68.389/SM vábbá a tracheális kontrakciókat, az asztmát, az allergiás rhinitist, az allergiás konjunktivitist, az ultikáriát, az ischémiás reperfúziós sérüléseket, bizonyos gyulladásokat és az apotikus dermatitist.

A PGD₂ egy fő prosztanoid, amely a mast sejtekből termelődik és szabadul föl és mely a PGG₂ és PGH₂-n keresztül az arachidon savból termelődik a ciklooxigenáz aktiválásával immunológiai vagy immunológiai stimulációval. A PGD₂ különböző potenciális fiziológiai és patológiai aktivitással rendelkezik. A PGD₂ például erős tracheális kontrakciót okozhat, amely bronciális asztmához vezet és szisztémás allergiás állapotban megnyújtja a perifériális véredényeket és ily módon anafilaxiás sokkot vált ki. A kutatások arra a megállapításra terjedtek ki, hogy a PGD₂ az egyik olyan anyag, amely allergiás rhinitisben a nazális blokkért felelős. Ennek megfelelően javasoljuk olyan gátló anyag kifejlesztését, mely a PGD₂ bioszintézisével szemben PGD₂ receptor antagonista, mint nazális blokk redukciós gyógyszer. Azonban az PGD₂ inhibitor bioszintézise a lehetséges sokkal nagyobb mértékben hat a prosztaglandinok szintézisére a szervezet más részeiben és ezért kívánatosnak látszik kifejleszteni valamely olyan antagonistát (blokkoló), amely a PGD₂ receptorokra specifikus.

A jelen találmány feltalálói intenzíven tanulmányozták a PGD₂ receptor antagonisták (blokkolók) kifejlesztését specifikus PGD₂ receptorokhoz és azt találták, hogy a találmány szerinti alábbi (I) általános képletű vegyületek szériája, továbbá azoknak gyógyászatilag elfogadható sói vagy hidrátjai potenciális aktivitással rendelkeznek mint PGD₂ receptor antagonisták és gátló aktivitást mutatnak az eozionofiliák infiltrációjával szemben és ezért a nazális blokk kezelésére alkalmas gyógyszerként használhatók. A jelen találmány szerinti vegyületek PGD₂

68.389/SM antagonists aktivitást mutatnak és különböznek az ismert TXA₂ antagonistáktól, az aktív helyeikben, a mechanizmusban, az alkalmazásukban és jellegzetességeikben.

A jelen találmány tárgya az (I) általános képletű vegyület - ahol a képletben Y jelentése valamely (A) vagy (B) képletű csoport, R jelentése hidrogénatom, alkilcsoport, alkoxicsoport, halogénatom, hidroxilcsoport, acil-oxi-csoport vagy kívánt esetben helyettesített aril-szulfonil-oxi-csoport, X jelentése hidrogénatom vagy alkilcsoport és az α-láncon a kettős kötés E- vagy Z-konfigurációjú, azzal a feltétellel, hogy az (la) általános képletű vegyületek, ahol R^1a jelentése hidrogénatom, alkilcsoport vagy alkoxicsoport, X jelentése a fentiekben megadott és az α-láncon a kettős kötés E- vagy Z-konfigurációjú, az oltalmi körből kizártak - és annak valamely gyógyászatilag elfogadható sói vagy hidrátjai.

A jelen leírásban az (I) általános képletű vegyületekben a kötést az (a) képletü csoporttal jellemezzük, ahol a képletben X jelentése a fentiekben megadott az α-lánc esetében az ω-lánc esetében a kötést a (b) általános képletű csoporttal jellemezzük, ahol a képletben R jelentése a fentiekben megadott.

A kettős kötés az α-láncon E- vagy Z-konfigurációjú.

Az ábrák leírása

Az 1. ábra az (IA-a-5) vegyületek aktivitását mutatja eozinofiliák infiltrációjával szemben antigén indukálta nazális kavitásokban. Az ábrában a fehér oszlop olyan csoportot jelez, amely sóoldatot inhalált ovalbumin helyett; a fekete oszlop olyan csoportot jelent, amely valamely antigént inhalált a gyulladásos reakció kiváltására de nem kapott (IA-a-5) vegyületet; a szürke oszlopok olyan csoportot jeleznek, amelyek antigént kaptak a gyulladásos reakció indukálására és (IA-a-5) vegyületet is kaptak. A ** jelzés szignifikáns differenciát mutat a vehikulumtól p<0,01.

68.389/SM

A találmány szerinti legjobb megvalósítási mód

Még közelebbről, az (I) általános képletű vegyületeket, példa szerint az (IA) általános képletű vegyületekkel emeljük ki, ahol a képletben R és X jelentése a fentiekben megadott és az α-lánc kettős kötése E- vagy Z-konfigurációjú, azzal a feltétellel, hogy az (I’) képletben R^1a jelentése hidrogénatom, alkilcsoport vagy alkoxicsoport, X jelentése a fentiekben megadott és az α-lánc kettős kötés E- vagy Z-konfigurációja az (I) általános képletű vegyületek köréből kizárt. Továbbá a találmány az (IA) általános képletű vegyületek gyógyászatilag elfogadható sóira vagy hidrátjaira is vonatkozik.

Hasonlóan az (IA) általános képletű vegyületeket az (IB) általános képletű vegyületekkel mutatjuk be példa szerűen, ahol R és X jelentése a fentiekben megadott és az α-lánc kettős kötése E- vagy Z-konfigurációjú, továbbá a találmány vonatkozik az (IB) vegyületek gyógyászatilag elfogadható sóira vagy hidrátjaira.

Közelebbről, az (IA) általános képletű vegyületek példa szerűen azok oltalmi körébe tartozó (lA-a), (ΙΑ-b), (lA-c), (ΙΑ-d), (IA-a’), (IA-b'), (IA-c’), (IA-d’) képletű vegyületekkel mutathatók be, ahol a képletekben R¹ jelentése halogénatom, hidroxilcsoport, acil-oxi-csoport vagy kívánt esetben helyettesített aril-szulfonil-oxicsoport, R és X jelentése a fentiekben megadott és az a-lánc kettős kötése E- vagy Z-konfigurációjú.

Előnyösek azok az (IA) képletű vegyületek körébe tartozó vegyületek, melyek az (IA-a), (ΙΑ-b), (IA-c), (IA-d) és (IA-b') képlettel írhatók le. Különösen előnyösek az (IA-a) képletű vegyületek.

Hasonlóan, az (IB) vegyületek oltalmi körébe tartozó vegyületek példa szerűen az (IB-a), (IB-b), (IB-c). QB-d), (IB-a’), (|B-b‘), (IB-c’), (IB-d’) képletű vegyületek,

68.389/SM ahol a képletben R és X jelentése a fentiekben megadott és az α-lánc kettős kötése E- vagy Z-konfigurációjú.

Előnyösek az (IB) képletű vegyületek körébe tartozó (IB-a’) és (IB-b’) képletű vegyületek.

A találmány szerinti vegyületek körébe tartozó más példa szerint kiemelt vegyületek azon vegyületek, melyeknek képletében az α-lánc kettős kötése E- vagy Zkonfigurációjú az (I) általános képletű, az (IA) általános képletű, (IB) általános képletű, az (ΙΑ-a), az (ΙΑ-b), (lA-c), (ΙΑ-d), (IA-b’), az (IB-a’) és az (IB-b’) képletű vegyületek vonatkozásában.

Hasonlóan kiemeljük azokat a vegyületeket, melyeknek képletében az a-lánc kettős kötése Z-konfigurációjú, ilyenek az (I), az (IA), az (IB), az (ΙΑ-a), az (IA-b), (lA-c), (ΙΑ-d), (IA-b’), az (IB-a’) és az (IB-b’) képletű vegyületek.

Hasonlóan kiemeljük azokat a találmány szerinti vegyületeket, ahol az (I) általános képletben R jelentése brómatom, fluoratom, hidroxilcsoport, acetoxi-csoport vagy fenil-szulfonil-csoport és X jelentése hidrogénatom. Ilyen vegyületek az (I) általános képletű vegyületeken túlmenően, az (IA), az (IB), az (ΙΑ-a), az (IA-b), (lA-c), (ΙΑ-d), (IA-b’), az (IB-a’) és az (IB-b¹) képletű vegyületek.

Hasonlóan kiemeljük azokat a vegyületeket, melyek képletében R jelentése hidrogénatom, metilcsoport vagy metoxicsoport és X jelentése hidrogénatom, az (I), (IA), (IB), (IA-b), (lA-c), (ΙΑ-d), (IA-b’), (IB-a’) és (IB-b’) képletű vegyületek vonatkozásában.

A találmány szerinti vegyületek intermedierjeként kiemeljük az (V) általános képletű vegyületeket, ahol a képletben Y gyűrű és R jelentése a fentiekben megadott.

68.389/SM

Más intermedierek a találmány szerinti vegyületek szintézise során a (VI) általános képletű vegyületek, ahol a képletben az Y gyűrű és R szubsztituens jelentése a fentiekben megadott.

További példák a találmány szerinti vegyületek intermedierjeire a (Illa) általános képletű vegyületek, ahol a képletben R² jelentése acil-oxi-csoport vagy kívánt esetben helyettesített aril-szulfonil-oxi-csoport és R³ jelentése hidroxilcsoport és halogén csoport.

Előnyösek a (lllb) általános képletű vegyületek, ahol a képletben R² és R³ jelentése a fentiekben megadott vagy a (lile) általános képletű vegyületek, ahol a képletben R² és R³ jelentése a fentiekben megadott.

Különösen előnyösek azok a vegyületek, melyeknek képletében R³ jelentése hidroxilcsoport vagy R² jelentése fenil-szulfonil-oxi-csoport vagy acetil-oxi-csoport a (Illa), (lllb) és (lile) vegyületek vonatkozásában.

A találmány tárgya továbbá gyógyszerkészítmény, amely az (I) általános képletű vegyületeket, PGD₂ antagonistákat foglal magába. Közelebbről, az (I) általános képletű vegyületek nazális blokk kezelésére alkalmas gyógyszerek. A jelen találmány szerinti PGD₂ antagonisták gátolják a gyulladásos sejtek infiltrációját. A „gyulladásos sejtek” kifejezés alatt valamennyi limfocitát, eozionofiliát, neutrofiliát és makrofágokat értünk, különösen az eozionofiliákat jelöljük.

Az (I) általános képletű találmány szerinti vegyületek PGD₂ antagonista aktivitást mutatnak a PGD₂ receptorokon keresztül, ezért olyan betegségek kezelésére alkalmas gyógyszerek, melyekben a mast sejtek diszfunkciója a PGD₂ túltermelés következtében keletkezik. Például az (I) általános képletű vegyületek olyan betegségek kezelésére alkalmas gyógyszerként használhatók mint a szisztémás mastocitozis vagy a szisztémás mast sejtek rendellenességei, továbbá a tracheális

68.389/SM kontrakciók, az asztma, az allergiás rinitisz, az allergiás konjunktivitisz, az urtikária, az ischemiás reperfuziós sérülések, a gyulladásos és atopikus dermatitiszek. Továbbá az (I) általános képletű találmány szerinti vegyületek a gyulladásos sejtek infiltrációját gátló aktivitást mutatnak. Az (I) általános képletű vegyületek különösen a nazális blokk kezelésére alkalmas gyógyszerként használhatók fel.

A jelen leírásban használt kifejezéseket az alábbiak szerint értelmezzük.

A „halogén” kifejezés alatt fluor-, klór-, bróm- vagy jódatomot értünk.

Az „acil” vagy „acil-oxi” kifejezés alatt 1-9 szénatomszámú alifás karbonsavból levezetett acilcsoportot értünk, ilyenek például a formilcsoport, az acetilcsoport, a propionilcsoport, a butirilcsoport, valerilcsoport és hasonló csoportok. Az „acil-oxi” kifejezés alatt a fent említett csoportokból levezetett acil-oxi-csoportot értünk, például az acet-oxi-csoportot, a propionil-oxi-csoport, a butiril-oxi-csoport, a valeril-oxicsoport és hasonló csoportokat.

Az „aril kifejezés alatt 6-14 szénatomszámú monociklusos vagy kondenzált gyűrűt értünk, például ilyen afenilgyűrű, a naftilgyűrű (például 1-naftil- vagy 2-naftilgyürű), az antril (például 1-antril-, 2-antril-, 9-antril-gyürű) és hasonló gyűrűk. Az alcsoporton elhelyezkedő szubsztituensek az alkilcsoport, az alkoxicsoport, a halogénatom, a hidroxilcsoport és hasonló csoportok.

Az „alkil kifejezés alatt 1-6 szénatomszámú egyenes vagy elágazó láncú alkilcsoportot értünk, például ilyen a metilcsoport, az etilcsoport, az n-propil-csoport, az i-propil-csoport, az n-butil-csoport, az i-butil-csoport, az s-butil-csoport, a t-butilcsoport, az n-pentil-csoport, az i-pentil-csoport, a neopentil-csoport, a t-pentilcsoport, a hexilcsoport és hasonló csoportok.

68.389/SM

Az „alkoxi” kifejezés alatt 1-6 szénatomszámú alkoxicsoportot értünk, például metoxicsoportot, etoxicsoportot, n-propoxi-csoport, i-propoxi-csoport, n-butoxicsoport és hasonló csoportokat.

Az (I) általános képletű vegyületek sóit valamely alkálifémmel (például lítium, nátrium és kálium), valamely alkáli földfémmel (például kálcium), valamely szerves bázissal (például trometamin, trimetil-amin, trietil-amin, 2-amino-bután, t-butil-amin, diizopropil-etil-amin, n-butil-metil-amin, ciklohexil-amin, diciklohexil-amin, Nizopropil-ciklohexil-amin, furfuril-amin, benzil-amin, metil-benzil-amin, dibenzil-amin, Ν,Ν-dimetil-benzil-amin, 2-klór-benzil-amin, 4-metoxi-benzil-amin, 1-naftalin-metilamin, difenil-benzil-amin, trifenil-amin, 1-naftil-amin, 1-amino-antracén, 2-aminoantracén, dehidro-abietil-amin, N-metil-morfolin vagy piridin), valamely aminosavval (például lizin vagy arginin) és hasonló vegyületekkel képezzük.

Az (I) általános képletű találmány szerinti vegyületek hidrátjait adott esetben az (I) általános képletű vegyületek kívánt mennyiségével koordináljuk.

Az (I) általános képletű vegyületek kívánt szférikus konfigurációja az a-lánc kettős kötése E- vagy Z-konfigurációjú, a biciklusos gyűrűhöz kötődő kötés Rkonfigurációt vagy S-konfigurációt képvisel és az (I) általános képletű vegyületekbe beleértjük valamennyi izomert (diasztereomert, epimert, enantiomert és hasonlókat), racemátokat és ezen izomerek keverékét.

Az (I) általános képletű vegyületek általános előállítási eljárását a találmány szerint az alábbiakban mutatjuk be. A szubsztituenssel ellátott vegyületek esetében, melyek részt vettek a reakcióban, az ilyen szubsztituenseket előzetesen valamely védöcsoporttal védjük és azokat adott esetben valamely alkalmas művelettel eltávolítjuk.

68.389/SM

- 10 1. eljárás

Az 1. eljárás vegyületeiben az Y gyűrű, X és R jelentése a fentiekben megadott és az α-lánc kettős kötése E- vagy Z-konfigurációjú.

Az (I) általános képletű vegyületeket, mint azt az 1. eljárás mutatja, oly módon állítjuk elő, hogy a (III) általános képletű karbonsavat vagy annak valamely reaktív származékát a (II) általános képletű amino vegyülettel reagáltatjuk.

Az eljárás kiindulási anyaga a (II) általános képletű vegyület, ahol Y jelentése (A) képletű csoport, mint azt a 23170/1994 számú publikált japán közrebocsátási irat ismerteti.

A (II) általános képletű vegyületek, ahol Y jelentése valamely (B) képletű csoport, a 49/1986 és a 180862/1990 számú publikált japán közrebocsátási iratban kerültek ismertetésre.

A (III) általános képletű vegyületek körébe tartozó karbonsavak a 4-brómbenzo[b]tiofén-3-karbonsav, az 5-bróm-benzo[b]tiofén-3-karbonsav, a 5-brómbenzo[b]tiofén-3-karbonsav, a 7-bróm-benzo[b]tiofén-3-karbonsav, az 5-fuorbenzo[b]tiofén-3-karbonsav, a 6- fuor-benzo[b]tiofén-3-karbonsav, a 4-hidroxibenzo[b]tiofén-3-karbonsav, az 5-hidroxi-benzo[b]tiofén-3-karbonsav, a 6-hidroxibenzo[b]tiofén-3-karbonsav, a 7-hidroxi-benzo[b]tiofén-3-karbonsav, az 5-acetoxibenzo[b]tiofén-3-karbonsav, a benzo[b]tiofén-3-karbonsav és az 5-benzoszulfoniloxi-benzo[b]tiofén-3-karbonsav, az 5-metil-benzo[b]tiofén-3-karbonsav, a 6-metilbenzo[b]tiofén-3-karbonsav, az 5-metoxi-benzo[b]tiofén-3-karbonsav, a 6-metoxibenzo[b]tiofén-3-karbonsav. Ezek a karbonsavak adott esetben a fentiekben definiált szubsztituensekkel ellátottak.

68.389/SM

- 11 A találmány szerinti karbonsavakat adott esetben a Nippon Kagaku Zasshi, 88, 7, 758-763 (1967), a Nippon Kagaku Zasshi 86, 10, 1067-1072 (1965), a J. Chem. Soc. (c) 1899-1905 (1967), a J. Heterocycle. Chem. 10, 679-681 (1973), a J. Heterocyclic Chem. 19, 1131-1136 (1982) és a J. Med. Chem. 29, 1637-1643 (1986) irodalmi helyeken leírtak szerint állítjuk elő.

A (III) általános képletű karbonsav reaktív származékok a megfelelő sav halidot (például kloridot, bromidot, jodidot), a megfelelő sav anhidridet (például vegyes sav anhidrid, melyet hangyasavból vagy ecetsavból képzünk), valamely aktív észtert (például szukcinimid-észtert) és hasonlókat jelentenek, melyeket általában mint acilezö szereket definiálunk az aminocsoport acilezése során. Például ha valamely sav halidot alkalmazunk, akkor a (III) általános képletű vegyületet valamely tionil-haliddal (például tionil-kloriddal) foszfor-haliddal (például foszfor-trikloriddal, foszfor-pentakloriddal), oxalil-haliddal (például oxalil-kloriddal) és hasonlókkal reagáltatjuk összhangban a szakirodalomban leírt eljárásokkal, például a Shin-JikkenKagaku-Koza, 14, 1787 (1978); Synthesis 852-854 (1986); Shin-Jikken-KagakuKoza 22, 115 (1992) irodalmi hely szerint eljártakat megvalósítva.

A reakciót az aminocsoport acilezése során használt általános reakciókörülményeket megvalósítva végezzük. Például sav haliddal történő kondenzáció esetében a reakciót valamely oldószerben, így éteres oldószerben (például dietil-éterben, tetrahidrofuránban vagy dioxánban), benzolos oldószerben (például benzolban, toluolban, xilolban), halogénezett oldószerben (például diklór-metánban, diklóretánban vagy kloroformban), továbbá etil-acetátban, dimetil-formamidban, dimetilszuífoxidban, acetonitrilben vagy ezek vizes oldószereiben vagy hasonlókban, kívánt esetben valamely bázis, például szerves bázis, így trietil-amin, piridin, N,N-dimetil

68.389/SM

- 12 amino-piridin, N-metil-morfolin, valamely szervetlen bázis, így nátrium-hidroxid, kálium-hidrpxid, kálium-karbonát és hasonlók) jelenlétében szobahőmérsékleten történő hűtés vagy melegítés, előnyösen -20°C - jég hőmérséklet vagy szobahőmérséklet és a reakcióközeg reflux hőmérsékleten néhány perc - néhány óra, előnyösen 0,5 óra -24 óra, különösen előnyösen 1-12 óra időtartam alatt hajtjuk végre. Valamely karbonsav szabad formában történő felhasználása esetében a reaktív származék kialakítása nélkül végezzük a reakciót valamely kondenzálószer [például diciklohexil-karbodiimid (DCC), 1-etil-3-(3-metil-amino-propil)-karbodiimid, N,Nkarbonil-diimidazol] jelenlétében, melyeket rend szerint a kondenzációs reakcióban felhasználunk.

Az (I) általános képletű találmány szerinti vegyületeket a 2. eljárás szerint is előállíthatjuk, ahol a képletekben Y gyűrű, R és X jelentése a fentiekben megadott és az α-lánc kettős kötése E- vagy Z-konfigurációjú.

(1. művelet)

Az 1. műveletben az (V) általános képletű vegyületeket oly módon állítjuk elő, hogy a (IV) általános képletű amino vegyületet valamely (III) általános képletű karbonsavval vagy annak reaktív származékával reagáltatjuk, ezt a műveletet az 1. eljárással hasonló eljárást megvalósítva hajtjuk végre. Néhány (IV) általános képletű amino vegyületet ír le a Chern. Pharm. Bull. 37, 6, 1524-1533 (1989) irodalmi hely.

(2. művelet)

Ebben a műveletben az (V) általános képletű vegyületet a (VI) általános képletü aldehid vegyületté oxidáljuk. Ezt a műveletet kromát oxidáló szerrel hajtjuk végre, így Jones reagenst, Collins reagenst, piridinium-klór-kromátot, piridiniumdikromátot használunk valamely oldószerben, így klórozott szénhidrogénekben

68.389/SM ····»··

- 13 - rl· Λ ^;2· :’ (például kloroformban, diklór-metánban), éterben (például etil-éterben, tetrahidrofuránban) vagy acetonban, benzolban és hasonló oldószerekben, hűtés közben vagy szobahőmérsékleten néhány órán keresztül a reakciót megvalósítva. Ezen műveletet adott esetben valamely oxidáló szerrel, valamely megfelelő aktiváló szerrel kombinációban (például trifluor-ecetsav-anhidriddel, oxalil-kloriddal) és dimetilszulfoxiddal hajtjuk végre, kívánt esetben valamely bázis (például szerves bázis, így trietil-amin, dietil-amin) jelenlétében.

(3. művelet)

Ebben a műveletben a (VI) általános képletű aldehid vegyület α-láncát vezetjük az (I) általános képletű vegyületbe. Ezen műveletben az (I) általános képletű vegyületeket oly módon állítjuk elő, hogy a (VI) általános képletű aldehidet valamely ilid vegyülettel reagáltatjuk az α-lánc maradék részével reagáltatva Wittig reakciós körülmények között. Továbbá az ilid vegyület megfelel az α-lánc maradék részének, melyet oly módon állítunk elő, hogy trifenil-foszfint a megfelelő halogénezett alkanoin savval vagy észter-származékkal reagáltatjuk valamely bázis jelenlétében önmagában ismert eljárást megvalósítva.

Más reaktív származékok vagy szabad sav reakciójában, melyet valamely (II) általános képletű aminnal vagy (IV) általános képletű vegyülettel hajtunk végre, mely megfelel minden egyes reaktív származék vagy szabad sav tulajdonságainak, önmagában ismert reakciót valósítunk meg és a reakciókörülmények meghatározottak. A kapott reakcióterméket adott esetben önmagában ismert módon tisztítjuk, így valamely oldószerrel extrahálunk, kromatografálunk, átristályosítunk és hasonló műveleteket végzünk.

68.389/SM

Az (I) általános képletű találmány szerinti vegyületet kívánt esetben a megfelelő észter-származékká alakíthatjuk. Például az észtert a karbonsav észterifikációjával állítjuk elő önmagában ismert módon. Kívánt esetben az E-izomert, a Z-izomert vagy ezek keverékét állítjuk elő a reakció körülményeitől függően.

Ha az (I) általános képletű találmány szerinti vegyületet valamely kezelés során alkalmazzuk, akkor azokat orális vagy parenterális adagolással megfelelő készítményekké alakítjuk. Az (I) általános képletű találmány szerinti vegyületeket tartalmazó gyógyszerkészítményeket adott esetben orálisan vagy parenterálisan adjuk. Közelebbről, az (I) általános képletű vegyületeket orális adatolás céljára tablettákká, kapszulákká, granulátumokká, porokká, szirupokká és hasonlókká alakítjuk, parenterális adagolás céljára injekciós oldatokat vagy szuszpenziókat készítünk intervénás, intramuszkuláris vagy szubkután injektálási célokra vagy inhalátumokat, szemcseppeket, orrcseppeket, végbélkúpokat vagy perkután készítményt, így kenőcsöket állítunk elő.

A gyógyszerkészítmények előállítása során vivöanyagokat, hígítóanyagokat, oldószereket és bázisokat alkalmazunk, mely szerek a szakember számára jól ismertek. Tabletta készítmény esetében azokat oly módon állítjuk elő, hogy a hatóanyagot a vivöanyagokkal együtt tablettává nyomjuk vagy alakítjuk. A felhasználható vivöanyagok példa szerint valamely gyógyászatilag elfogadható hígítóanyagok, így kötőanyagok (például búzakeményítö), töltőanyagok (például tejcukor vagy mikrokristályos cellulóz), dezintegráló szerek (például keményítő, nátrium-glikolát) vagy lubrikánsok (például magnézium-sztearát). A tablettákat adott esetben bevonattal állítjuk elő. Folyékony készítmények esetében például szirupok, oldatok vagy szuszpenziók kialakításakor azok adott esetben valamely szuszpendáló szert (például metil-cellulózt), emulgeáló szert (például lecitint) vagy konzerváló szert tartalmaz

68.389/SM

- 15 - '-·* ··* .· » i nak. Injekciós készítmények esetén azok adott esetben oldatot vagy szuszpenziót vagy olajos vagy vizes emulziót képeznek, amelyek adott esetben szuszpenziós stabiláló szert vagy diszpergáló szert és hasonlókat tartalmaznak. Inhalátumok esetében azokat folyékony készítményekbe visszük, melyek inhalátorokban alkalmazhatók. Szemcseppek esetében azokat oldat vagy szuszpenzió formájában állítjuk elő. Különösen a nazális gyógyszerkészítmények esetében a nazális blokk kezelésére adott esetben oldatokat vagy szuszpenziókat használunk a szokásos kikészítési eljárásokat megvalósítva vagy por formát képzünk porképző szerekkel (például hidroxi-propil-cellulóz, karbopol), melyeket a nazális kavitásukba adunk. Más eljárásváltozat szerint az aeroszolt töltés után valamely speciális tartályba valamely alacsony forráspontú oldószerrel együtt visszük.

Bár az (I) általános képletű találmány szerinti vegyületek dózisa az adagolás módjától, a beteg korától, testsúlyától, nemétől, általános egészségi kondíciójától és a felhasznált gyógyszerfajtától változik, adott esetben a dózist a gyakorló orvos határozza meg, orális adagolás esetében a napi dózis általában 0,01-100 mg, előnyösen 0,001-10 mg, különösen előnyösen 0,01-1 mg/testtömeg kg. Parenterális adagolás esetén a napi dózis általában 0,001-100 mg, előnyösen 0,001-1 mg, különösen előnyösen 0,001-0,1 mg/testtömeg kg. A napi dózist naponta 1-4 adagra osztva adjuk.

Az alábbi példákban találmányunkat bemutatjuk anélkül, hogy igényünket csupán a példákra korlátoznánk.

A jelen találmány leírásában ismertetett példákban a rövidítések jelentése az alábbi: Me = metilcsoport, Ac = acetilcsoport, Ph = fenilcsoport.

68.389/SM

1. Referencia példa

5-Benzol-szulfonil-oxi-benzo[b]tiofén-3-karbonil-klorid (3) előállítása

8,63 g (44,4 mmol) (1) képletű 5-hidroxi-benzo[b]tiofén-3-karbonsav [J. Chem. Soc (C), 1899-1905 (1967), M. Martin-Smith és munkatársai) 160 ml 80%-os vizes tetrahidrofuránban és 44 ml 1N nátrium-hidroxidban elkészített oldatához 87 ml 0,56N nátrium-hidroxidot és 6,2 ml (48,4 mmol) benzol-szulfonil-kloridot adunk szimultán oly módon, hogy a pH értéket 11-12 értéken tartjuk jeges hűtés és keverés közben. Miután a reakció lejátszódott, az elegyet vízzel hígítjuk, meglúgosítjuk és toluollal mossuk. A vizes fázist koncentrált sósavval keverés közben gyengén megsavanyítjuk. A kivált kristályokat szűrjük, vízzel mossuk és szárítás után 14,33 g (2) képletű 5-benzol-szulfonil-oxi-benzo[b]tiofén-3-karbonsavat kapunk. Op: 202-203°C. NMR δ (CDCI₃), 300 MHz: 7,16 (1H, dd, J=2,6 és 9,0Hz), 7,55-7,61 (2H, m), 7,73 (1H, m), 7,81 (1H, d, J=9,0Hz), 7,90-7,94 (2H, m), 8,16 (1H, d, J=2,7Hz), 8,60 (1H, s).

IR (Nujol): 3102, 2925, 2854, 2744, 2640, 2577, 1672, 1599, 1558, 1500, 1460, 1451 cm'¹.

Elemanalizis adatok a C15H10O5S2 összegképletre: számított (%); C, 53,88; H, 3,01; S, 19,18 mért: (%): C, 53,83; H, 3,03; S, 19,04.

A fentek szerint előállított 5,582 g (16,7 mmol) 5-benzol-szulfonil-oxibenzol[b]tiofén-3-karbonsav (2), 1 csepp dimetil-formamid, 3,57 ml (50 mmol) tionilkiorid és 22 ml toluol keverékét 1,5 órán keresztül refluxáljuk, majd csökkentett nyomáson bepárolva 5,89 g (3) képletű cím szerinti vegyületet kapunk.

68.389/SM

2. Referencia példa

5-acetoxi-benzofbltiofén-3-karbonil-klorid (5) előállítása

100 mg (0,3 mmol) fentiek szerint előállított (2) képletű 5-benzol-szulfonil-oxibenzo[b]tiofén-3-karbonsav 1,2 ml 1N nátrium-hidroxidban elkészített oldatát 40°C hőmérsékleten 8 órán keresztül hagyjuk állni. Ezután 1,2 ml 1N sósavat adunk az oldathoz és a kivált kristályokat szűrjük, vízzel mossuk és szárítás után 58 mg (1) képletű 5-hidroxi-benzo[b]tiofén-3-karbonsavat kapunk. Hozam: 96,6%, op: 262263°C.

1,140 ml fentiek szerint előállított (1) képletű 5-hidroxi-benzo[b]-tiofén-3karbonsav 2 ml ecetsav anhidridben és 4 ml piridinben elkészített oldatát 3 órán keresztül állni hagyjuk. Ezután vizet adagolunk és az elegyet 1,5 órán keresztül jeges hűtés közben keverjük és a kivált kristályokat szűrjük, vízzel mossuk és szárítás után 1,349 mg (4) képletű 5-acetoxi-benzo[b]tiofén-3-karbonsavat kapunk. Hozam: 97,3%, op: 239-240°C.

1,349 mg fentiek szerint előállított (4) képletű 5-acetoxi-benzo[b]tiofén-3karbonsav, 1 csepp dimetil-formamid, 1,22 ml (17,13 mmol) tionil-klorid és 25 ml toluol keverékét 1,5 órán keresztül refluxáljuk, majd csökkentett nyomáson történő bepárlás után 1,454 mg cím szerinti (5) vegyületet kapunk.

3. Referencia példa (1R, 2S, 3S, 5S)-2-(2-amino-6,6-dimetil-biciklo[3.1.1]hept-3-il)-etanol (IVA-b-1) és (1R, 2R, 3S, 5S)-2-(2-amino-6,6-dimetil-biciklo[3.1.1]hept-3-il)etanol (IVA-c-1) előállítása

A (6) képletű vegyületet [Chern. Pharm. Bull. Vol. 37. 6, 1524-1533 (1989)] nátriummal redukáljuk a szakirodalomban leírt fentiekben említett módszerek szerint eljárva és a kapott (IVA-a-1) képletű vegyületet benzoesav só formájában szűréssel

68.389/SM

- 18 elkülönítjük. A 79 g tömegű anyalúgot 150 ml etil-acetátban szuszpendáljuk, a szuszpenzióhoz keverés közben 260 ml 1N sósavat adunk. A vizes fázist elválasztjuk és 65 ml 4N nátrim-hidroxiddal meglúgosítjuk, majd etil-acetáttal kirázzuk. A szerves fázist vízzel mossuk, vízmentes magnézium-szulfát felett szárítjuk és csökkentett nyomáson bepároljuk. A kapott olajos maradékot (6,7 g a 30 g-ból) 40 ml 90%-os metanolban oldjuk, 500 ml ioncserélő gyantán abszorbeáljuk. A gyanta típusa Amberlite CG-50 (NH₄+)típus I és 2,2 liter vízzel, továbbá 1N 2,2 liter vizes ammónia oldattal eluáljuk gradiens elúciós módszerrel. Első frakció: 300 ml. Mindenegyes frakciót vékonyréteg kromatográfiásan ellenőrizzük (kifejlesztő oldószer: kloroform:metanol:koncentrált vizes ammónia = 90:10:1). a 3-8 frakciót összegyűjtjük és csökkentett nyomáson bepároljuk. A párlási maradékot hexánból átkristályosítjuk és átkristályosítás után 538 mg pálcika szerű terméket kapunk. Op: 117-118°C. NMR δ (CDCI₃), 300 MHz: 1,01 és 1,21 (mindenegyes 3H, mindenegyes s), 1,34 (1H, d, J=9,9Hz), 1,52-1,66 (2H, m), 1,90-2,07 (4H, m), 2,18 (1H, m), 2,48 (1H, m), 3,12 (3H, bs), 3,49 (1H, dd, J= 3,9 és 9,6Hz), 3,61 (1H, dt, J=2,4 és 10,5Hz), 3,84 (1H, ddd, J=3,3, 4,8 és 10,5Hz).

IR (Nujol): 3391, 3293, 3108, 2989, 2923, 2869, 2784, 2722, 2521, 1601, 1489, 1466 cm’¹.

[a]_D ²³.2.5° (c=1,02, CH₃OH)

Elemanalizis adatok a CnH₂₁NO összegképletre: számított (%): C, 72,08; Η, 11,55; N, 7,64;

mért (%): C, 72,04; Η, 11,58; N, 7,58.

68.389/SM

- 19 Röntgendiffrakciós kristályanalízis módszerrel a kapott vegyület szerkezeti képletét meghatároztuk, mely képlet az (1R, 2R, 3S, 5S)-2-(2-amino-6,6-dimetilbiciklo[3.1.1 ]hept-3-il)-etanol szerkezettel írható le (IVA-c-1). 2,9 g anyalúgot hexánból történő átkristályosítás után 15 ml etil-acetátban oldunk és az oldathoz 30 ml 1,93 g benzoesavat tartalmazó etil-acetátot adunk. A kivált kristályokat szűrjük és ily módon 2,93 g (IVa-a-1) képletű vegyület benzoesavas sóját kapjuk. Op: 182-183°C.

A 10-17 frakciót összegyűjtjük és csökkentett nyomáson bepároljuk. A 2,66 g párlási maradékot 15 ml etil-acetátban tartalmazó oldathoz 11 ml 1,77 g benzoesavat tartalmazó etil-acetátot adunk. A kivált kristályokat szűréssel elkülönítjük és ily módon 4,08 g pálcika alakú kristályt kapunk. Op: 160-16ΓΟ.

NMR δ (CDCI₃), 300 MHz: 0,61 és 1,06 mindenegyes 3H, mindenegyes s), 1,36 (1H, m), 1,53-1,65 (2H, m), 1,75-1,88 (2H, m), 1,95-2,04 (4H, m), 3,18 (1H, d, J=6,3Hz), 3,58 (1H, dt, J=3,0 és 10,8Hz), 3,81 (1H, m), 5,65 (4H, bs), 7,33-7,42 (3H, m), 7,988,01 (2H, m).

IR (Nujol): 3320, 2922, 2854, 2140, 1628, 1589, 1739, 1459, 1389 cm’¹.

[(x]_d ²³-31 ,8° (ο=1,01, CH₃OH)

Elemanalízis adatok a C₁₈H₂7NO₃ összegképletre:

számított (%): C, 70,79; H, 8,91; N, 4,59;

mért (%): C, 70,63; H, 8,86; N, 4,58.

Röntgendiffrakciós kristályanalízises módszerrel a termék szerkezeti képletét meghatároztuk, mely képlet az (1R, 2S, 3S, 5S)-2-(2-amino-6,6-dimetilbiciklo[3.1.1 ]hept-3-il)-etanol szerkezettel írható le (IVA-b-1).

68.389/SM

1. példa

Nátrium (5Z)-7-((1R,2R,3S.5S)-2-(5-hidroxi-benzo[bltiofén-3-il-karbonilarnino)-6.6-dimetil-biciklo[3.1.1]hept-3-il)-5-heptenoát (IA-a-6) előállítása (1. művelet)

1,450 mg (5,2 mmol) (IIA-a-1) [23170/1994 számú publikált japán közrebocsátási irat] vegyületet 25 ml tetrahidrofuránban oldunk és az oldathoz 2,6 ml (18,7 mmol) trietil-aminí és 1,454 mg (1,1 mmol) (5) képletű 5-acetoxi-benzo[b]tiofén-3karbonil-klorid (előállítva a 2. referencia példa szerint) elegyét adjuk. 1,5 órán át történő keverés után az elegyet vízzel hígítjuk és toluollal kirázzuk. A szerves fázist hígított sósavas vízzel mossuk, vízmentes magnézium-szulfát felett szárítjuk és csökkentett nyomáson bepároljuk. A párlási maradékot szilikagélen kromatografáljuk toluol/etil-acetát = 9:1 eluensrendszert használva és ily módon 2,481 mg (IA-a-10) képletű vegyületet kapunk. Hozam: 96,1%.

[cx]d²³⁼⁺48,0° (c=1,01, CH₃OH)

Elemanalízis adatok a C^HasNOsS.O.IHzO összegképletre: számított (%); C, 67,34; H, 7,10; N, 2,80; S, 6,42 mért (%): C, 67,23; H, 7,12; N, 2,86; S, 6,59.

(2. művelet)

A fentiek szerint előállított (IA-a-10) vegyület 2,357 mg (4,73 mmol) 25 ml etanolban elkészített oldatához 4,1 ml (16,4 mmol) 4N nátrium-hidroxidot adunk. 6 órán át történő keverés után az elegyet 17 ml 1N sósavval semlegesítjük, vízzel hígítjuk és etil-acetáttal kirázzuk. A szerves fázist vízzel mossuk, magnézium-szulfát felett szárítjuk és csökkentett nyomáson bepároljuk. A párlási maradékot etil

68.389/SM

- 21 acetát/n-hexán rendszerből átkristályosítva 1,859 mg (IA-a-5) vegyületet kapunk prizma alakú kristályok formájában. Hozam: 86,5%, op: 142-143°C.

[_a]_D ²³=+47,6° (c=1,01, CH₃OH)

Elemanalízis adatok a C25H31NO4S összeg képletre: számított (%): C, 68,00; H, 7,08; N, 3,17; S, 7,26;

mért (%): C, 67,93; H, 7,08; N, 3,19; S, 7,24.

(3. művelet)

A fentiek szerint előállított (IA-a-5) 203 mg tömegű (0,46 mmol) vegyület 3 ml metanolban elkészített oldatához 0,42 ml (0,42 mmol) 1N nátrium-hidroxidot adunk és az elegyet csökkentett nyomáson bepároljuk. A párlási maradékot kis mennyiségű etil-acetátban oldjuk és n-hexánnal hígítjuk. Az oldhatatlan anyagokat metanolban oldjuk és csökkentett nyomáson történő bepárlás után 210 mg cím szerinti vegyületet kapunk (IA-a-6). Hozam: 98,5%. [a]_D ²⁵=+38,9° (c=1,00%, CH₃OH) Elemanalízis adatok a C₂5H3oN0₄SNa.O,5H₂0 összegképletre: számított (%): C, 63,54; H, 6,61; N, 2,96; S, 6,78; N a, 4,86;

mért (%): C, 63,40; H, 6,69; N, 3,13; S, 6,73; N a, 4,68.

2. példa (5Z-7-[(1R,2S,3R,5S)-2-(5-hidroxi-benzo[bltiofén-3-il-karbonil-amino)-6,6dimetil-biciklo|3.1.1lhept-3-il]-5-hepténsav (IA-b-1) előállítása (1. művelet)

916 mg (3 mmol) (1R, 2S, 3S, 5S)-2-(2-amino-6,6-dimetil-biciklo[3.1.1]hept-3il)-etanol-benzoesav só 3 ml vízben elkészített szuszpenziójához 3,1 ml 1N sósavat adunk. A kivált benzoesavat etil-acetáttal kirázzuk. A vizes fázis pH értékét pH =

68.389/SM

- 22 10,5 értékre állítjuk 700 ml vízmentes nátrium-karbonáttal, melyhez cseppenként 1,06 g (3 mmol) 5-benzol-szulfonil-oxi-benzo[b]tiofén-3-karbonil-kloridot (3) adunk 6 ml tetrahidrofuránban. 1,5 óra elteltével az elegyet vízzel hígítjuk és toluollal kirázzuk. A szerves fázist vízzel mossuk, vízmentes magnézium-szulfát felett szárítjuk és csökkentett nyomáson bepároljuk. Az így nyert 1,5 g tömegű párlási maradékot szilikagélen kromatografáljuk hexán:etil-acetát -1:1 arányú eluensrendszert használva és ily módon 1,497 g (VA-b-1) vegyületet kapunk. Hozam: 99,8%. [a]_D ²³-31,1° (c=1,00, CH₃OH)

Elemanalízis adatok a C26H29NO₅S2.0,2H₂O összeg képletre: számított (%): C, 62,05; H, 5,89; N, 2,78; S, 12,74;

mért (%): C, 62,03; H, 5,93; N, 2,79; S, 12,72.

(2. művelet)

0,61 ml (8,6 mmol) dimetil-szulfoxid 9,7 ml 1,2-dimetoxi-etánban elkészített oldatát -60°C hőmérsékletre hűtjük és ahhoz cseppenként 0,37 ml (4,3 mmol) oxalilkloridot adunk. 15 perc elteltével az oldathoz 1,427 g (2,9 mmol) fentiek szerint elkészített vegyület (VA-b-1) 11 ml 1,2-dimetoxi-etánban elkészített oldatát adjuk. 30 perc keverés után 1,2 ml trietil-amint adunk az elegyhez és azt 30 percen keresztül keverjük, majd fokozatosan szobahőmérsékletre melegítjük. Az elegyet vízzel hígítjuk és toluollal kirázzuk. A szerves fázist vízzel mossuk, vízmentes magnéziumszulfát felett szárítjuk és csökkentett nyomáson bepároljuk. Az így nyert párlási maradékot szilikagélen kromatografáljuk hexán:etil-acetát = 6:4 arányú eluensrendszert használva és így 1,338 g (VIA-b-1) vegyületet kapunk. Hozam: 94,1%. [a]_D ²⁴-29,1° (c=1,01, CH₃OH)

68.389/SM

- 23 Elemanalízis adatok a C26H27NO₅S2.0,4H₂O összegképletre: számított (%): C, 61,85; H, 5,55; N, 2,77; S, 12,70;

mért (%): C, 61,92; H, 5,60; N, 2,79; S, 12,88.

(3. művelet)

1,72 g (3,9 mmol) 4-karboxi-butil-trifenil-foszfónium-bromid és 1,016 g (9 mmol) kálium-t-butoxid 9 ml tetrahidrofuránban elkészített szuszpenzióját 1 órán keresztül jeges hűtés közben keverjük. A keverékhez ezután 1,288 g (2,6 mmol) fentiek szerint előállított vegyület (VIA-b-1) 4 ml tetrahidrofuránban elkészített elegyét adjuk 6 perc alatt és az elegyet ugyanezen a hőmérsékleten 2 órán keresztül keverjük. Az elegyet ezután 15 ml vízzel hígítjuk, 1N sósavval pH = 10,5 értékre savanyítjuk és 15 ml toluollal kétszer mossuk. A vizes fázist 1N sósavval pH = 8,0 értékre savanyítjuk, majd 1,15 g (10,4 mmol) vízmentes kálcium-kloridot adagolunk és 15 ml etil-acetáttal kétszer kirázzuk. A szerves fázist 16 ml vízzel hígítjuk, 1N sósavval pH = 2-3 értékre savanyítjuk és etil-acetáttal kirázzuk. A szerves fázist vízzel mossuk, vízmentes magnézium-szulfát felett szárítjuk és csökkentett nyomáson történő bepárlás után 1,44 g (IA-b-T) képletű vegyületet kapunk. Hozam: 95,5%.

A kapott vegyületet a következő műveletben tisztítás nélkül használjuk fel.

(4. művelet)

1,44 g (2,6 mmol) fentiek szerint előállított vegyület (IA-b-T) 2,8 ml dimetilszulfoxidban elkészített oldatához 3,9 ml 4N nátrium-hidroxidot adunk és az elegyet 50°C hőmérsékleten 3 órán keresztül keverjük. Az elegyet ezután vízzel hígítjuk és 15 ml toluollal kétszer mossuk. A vizes fázist 1N sósavval megsavanyítjuk és etilacetáttal kirázzuk. A szerves fázist vízzel mossuk, vízmentes magnézium-szulfát felett szárítjuk és csökkentett nyomáson történő bepárlás után 1,097 g (IA-b-1) vegyüfetet kapunk. Hozam: 95,9%.

68.389/SM

- 24 [a]_D ²⁵-43,0° (c=1,01, CH₃OH)

Elemanalízis adatok a C2₅H3iNO4S.0,2H₂O összegképletre: számított (%): C, 67,45; Η, 7,11; N, 3,15; S, 7,20;

mért (%): C, 67,51; H, 7,15; N, 3,38; S, 6,96.

3. példa (5E)-7-[(1R,2R,3S,5S)-2-(5-hídroxi-benzo|'b]tiofén-3-il-karbonil-amino)-6,6dimetíl-biciklo[3.1.1 ]hept-3-ill-5-hepténsav (IA-a-17) előállítása

11,04 g (25 mmol) (5Z)-7-[(1R,2R,3S,5S)-2-(5-hidroxi-benzo[b]tiofén-3-ilkarbonil-amino)-6,6-dimetil-biciklo[3.1.1]hept-3-il]-5-hepténsav (IA-a-5), 4,32 g (18,8 mmol) 1 -metil-tetrazol-5-il-diszulfid [J. Org. Chem., 50, 2795-2796 (1985), M. Narisada, Y, Terui, M. Yamakawa, F. Watanebe, M. Ohtani és H. Miyazaki és munkatársai] és 2,84 g (17,3 mmol) 2,2’-azobisz-izobutironitril 1,1 liter benzolban elkészített elegyét 8 órán keresztül keverjük reflux hőmérsékleten. Az elegyet ezután 400 ml 0,4N nátrium-hidroxiddal kétszer kirázzuk. A vizes fázist sósavval megsavanyítjuk és a kivált csapadékot szűréssel elkülönítjük. A 11,08 g tömegű csapadékot szilikagélen kromatografáljuk kloroform:metanol = 10:1 arányú eluensrendszert használva és ily módon 6,93 g vegyületet kapunk. A kapott vegyületet 69 ml dimetoxi-etánban oldjuk és az oldathoz 2,15 g 4-metoxi-benzil-amint adunk és 120 ml éterrel jeges hűtés közben hígítunk. A csapadékot szűréssel elkülönítjük és ily módon 7,45 g kristályos terméket kapunk, melyet izopropil-alkohol/etil-acetát/éter rendszerből (térfogatarány 2/10/5) tisztítás céljából átkristályosítjuk. Op: 108-111°C. [a]_D ²³+18,9^o (c=1,00, CH3OH)

A 4-metoxi-benzil-amin só izomer tisztaságát HPLC módszerrel vizsgáljuk. Eredmény: (E-izomer): (Z-izomer) = 98,4 : 1,6. [HPLC körülmények] Oszlop: YMC

68.389/SM

- 25 töltet AM-303-10(10 pm . 120Α . ODS) (4,6 mm Φ X 250 mm); áramlási sebesség: 1 ml/perc; detektálás: UV 254 nm; mobil fázis: ecetsav/víz/acetonitril = 0,1/52/48; retenciós idő: (E-izomer) 21 perc, (Z-izomer) 23 perc.

1,6 g tisztított 4-metoxi-benzil-amin sót 25 ml vízben szuszpendálunk, a szuszpenziót 25 ml 1N sósavval megsavanyítjuk és etil-acetáttal kirázzuk. A szerves fázist vízzel mossuk, vízmentes magnézium-szulfát felett szárítjuk és csökkentett nyomáson történő bepárlás után 1,21 g (IA-a-17) vegyületet kapunk.

[a]_D ²⁴+14,4° (c=1,01, CH₃OH)

Elemanalízis adatok a C₂5H₃₁NO₄S.0,1H₂O összegképletre:

számított (%): C, 67,72; H, 7,09; N, 3,16; S, 7,23;

mért (%); C, 67,59; H, 7,26; N, 3,35; S, 7,39.

Az ugyanezen módszer szerinti eljárással előállított vegyületeket és fizikai állandóikat az 1-14. táblázat foglalja össze.

68.389/SM

1. táblázat

Vegyüleszám

Vegyületszám

IA-*-9 H

I-A-a-10 CET,

IA-«-U H

U-a-12 H

IA-a-13 _H lA-i-14 _H

IAmhLS _h

OAc

W'·

Vegyület- Vegyületszám szám

IA-b-17

IA-c-2 lA-c-3

IA-c-4

IA-b-1

IA-b-2

Vegyület szám

IB-b'-l

ΠΜ»'-2

XB-b-3

IB-e'-l

IB-»'-2

H 11 jí j lA-a'-2 N IT lí^*l H sKb, Λζ*·^..»*\^\-Ζ*Ζ\^Ζ·ΟΟΟΗ IA-.-3 ? N li---iT^I H <1 JL J OH IA-c-1 fpT'V^^000» h |l Jl Ί IA-c-2 Ni;-- H VA IA-c -3 j? N li—lí^ h |l Jl Ί s'y OH

IA-*M '^^^^COOH ^ιΑ-τΤν* H 0 Jl J ΙΑ-β'-5 βζϊ ^^^^COOH ^Αγ^ΟΜβ . H 0 Jl J IA-c’-4 Λ/· IA-c -5 Λρσ“·

Vegyületszám

6. táblázat

IB-a-2

EB-b-5

Vegyületszám

IB-c-4

IB-d-2

IB-d-3

IB-d-4

IB-d-5

9. táblázat

Vegyületszám	Fizikai állandó^
IA-a-1	NME δ (CDCh ppm), 300MHz 0.97 (lH,d,J=10.2Hz), 1.16 és 1.25 (mind 3H,mindé), 1.53-2.46 (14H,m), 4.28 (lH,m), 5.36-5.53 (2H,m), 6.34 (lH,d,J=8.7Hz), 7.26 (lH,t,7.8Hz), 7.56 (lH,dd,J=0.9 és 7.8Hz), 7.77 (lH,m), 7.80 (lH,d,J=0.6Hz). IR (CHC13): 3509, 3446, 3429, 1738, 1708, 1651, 1548, 1525, 1498cm-1. [a]D +53.4’ (CHíOH, c=1.01,25T:).
LA-a-2	0.99 (lH,d,J=10.2Hz), 1.13 és 1.26 (mind 3H,minde), 1.54-2.51 (14H,m), 4.32 (lH,m), 5.37-5.54 (2H,m), 6.17 (lH,d,J=8.4Hz), 7.49 (lH,dd,J=1.8 és 8.7Hz), 7.72 (lH,d,J=8.7Hz), 7.81 (lH,s), 8.54 (lH,d,J=1.8Hz). IR (CHCh): 3517, 3443, 2665, 1708, 1654, 1514cm-1. [a]D +39.5’ (CHaOH, ¢=1.00,26^).
LA-a-3	0.98 (lH,d,J=10.2Hz), 1.11 és 1.24 (mind 3H, mind a), 1.53-2.50 (14H,m), 4.32 (lH,m), 5.36-5.54 (2H,m), 6.18 (lH,d,J=8.7Hz), 7.54 (lH,dd,J=1.8 és 8.7Hz), 7.75 (1Η,ε), 7.98 (lH,d,J=7.5Hz), 8.23 (lH,d,J=8.7Hz). IR (CHCh): 3517, 3443, 3095, 1708, 1654, 1585,1512cm-1. [e]D +49.4’ (CH3OH, c=1.01,23*C).
IA-a-4	0.99 (lH,d,J=10.2Hz), 1.12 és 1.25 (mind 3H, mind e), 1.54-2.51 (14H,m), 4.32 (lH.m), 5.36-5.54 (2H,m), 6.19 (lH,d,J=9.0Hz), 7.34 (lH,dd,J=7.8 és 8.4Hz), 7.55 (lH,m), 7.86 (lH,e), 8.33 (lH,dd,J=0.9 és 8.4Hz). IR (CHCls): 3517, 3442, 3095, 2667, 1708, 1653, 1545, 1515 cm-1. [a]D +54.6’ (CH3OH, ¢=1.01,23^),

10. táblázat

Vegyületszám	Fizikai állandó^
IA-a-5	1.02 (lH,d,J=10.2Hz),1.12 és 1.24 (mind 3H,mind b),1.56- 2.55 (14H,m), 4.29 (lH,m), 5.32-5.51 (2H,m), 6.20 (lH,d,J=9.3Hz), 7.01 (lH,dd,J=2.4 és 9.0Hz), 7.66 (lH,d,J=9.0Hz), 7.69 (ΙΗ,ε), 8.03 (lH,d,J=2.4Hz). IR (CHCls): 3600, 3440, 3226, 1707, 1638, 1602, 1516 cm·1. [a]D +47.6* (CH3OH, c=1.00,23l3). op 142-14313.
lA-a-6	(CD3OD) 0.97 (lH,d,J=9.9Hz), 1.16 és 1.25 (mind 3H,mindé), 1.55-2.43 (14H,m), 4.18 (lH,m), 5.41-5.53 (2H,m), 6.93 (lH,dd,J=0.6 8.7Hz), 7.68 (lH,dd,0.6 és 8.7Hz), 7.71 (lH,m), 8.01 (ΙΗ,ε). IR (KBr): 3436, 2621, 1637, 1600, 1557, 1520, 1434cm-1. [a]D +38.9’ (CH3OH, c=l.00,2513).
IA-a-7	0.97 (lH,d,J=10.2Hz), 1.10 és 1.23 (mind 3H,mind s), 1.54-2.52 (14H,m), 4.32 (lH,m), 5.35-5.54 (2H,m), 6.26 (lH,d,J=8.7Hz), 6.98 (lH,dd,J=2.4 és 9.0Hz), 7.26 (lH,m), 7.58 (ΙΗ,ε), 8.07 (lH,d,J=9.0Hz). IR (CHCh): 3592, 3439, 3223, 3102, 1708, 1639, 1604, 1518cm1. [a]D +51.5° (CH3OH, c=l.01,2513).
LA-a-8	0.96 (lH,d,J=10.2Hz), 1.11 és 1.24 (mind 3H,mind s), 1.54-2.53 (14H,m), 4.34 (lH,m), 5.35-5.53 (2H,m), 6.31 (lH,d,J=9.0Hz), 6.79 (lH,d,J=7.5Hz), 7.25 (lH,dd,J=7.5 és 8.4Hz), 7.74 (lH,d,J=8.4Hz), 7.86 (ΙΗ,ε). IR (CHCls): 3586, 3437, 3104, 1708, 1638, 1568, 1522, 1501, 1471 cm-1, [a]D +57.1’ (CH3OH, c=l.01,2513). |

11. táblázat

Vegyületszám	Fizikai állandók
IA-a-9	0.98 (lH,d,J=10.2Hz), 1.12 és 1.25 (mind 3H, mind a), 1.54 -2.51 (14H,ni), 2.33 (3H,a), 4.30 (lH,m), 5.36-5.54 (2H,m), 6.17 (lH,d,J=8.7Hz), 7.15 (lH,dd,J=2.1 és 9.0Hz), 7.83 (lH,d,J=9.0Hz), 7.84 (IH.s), 8.11 (lH,d,J=2.1Hz). IR (CHCls): 3510, 3443, 2665, 1758, 1708, 1653, 1514cm-i. [a]D +47.8* (CHaOH, c=1.00,25O).
IA-a-17	NMR δ (CDCla),300MHz 1.00(lH,d,J=10.5Hz),1.12 és 1.23faind 3H, mind 6),1.501.66(3H,m), 1.84-2.03(4H,m),2.17-2.40(7H,m),4.33(lH,m), 5.42- 5.45(2H,m),6.16(lH,d,J=9.0Hz),7.01(lH,dd,J=2.4 és 8.7Hz),7.66(lH,d,J=8.7Hz),7.69(lH,6), 8.04(lH,d,J=2.4Hz). IR(CHCla):3441,3237,3035,3009,2992,2924,2870,1708,1637 ,1601,1516,1436 cnH [α]π24+14.4* (c=1.01%,CHsOH)
LA-c-1	1.09 és 1.25(mind 3H, mind e),1.50(lH,d,J=9.9Hz), 1.521.69(3H,m), 2.02- 2.30(10H,m),2.49(lH,xn), 4.89(lH,dt, J=3.9 és 9.6Hz), 5.30-5.54(2H,m), 6.49(lH,d,J=9.6Hz), 7.03(lH,dd,J=2.4 és 8.7Hz), 7.67(lH,d,J=8.7Hz), 7.74(lH,6),8.00(lH,d,J=2.4Hz). IR(CHCls):3464,3225,3022,3016,2924,2870,1707,1639, 1602,1519,1479,1459,1437 cxxr1 [α]ο25-57.1* (c=1.00%,CHsOH)

12. táblázat

Vegyülets zárna	Fizikai állandók
IA-c-2	1.08 és 1.25(mind és mind s), 1.49-1.62(48,m), 1.842.10(53,m), 2.14-2.30(53,m),2.56(13,m),4.89(13,dt,J= 3.3 és 9.9Bz),5.25-5.40(28,m),6.50(13,d,J=10.2Bz), 7.04(13,dd,J=2.4 és 9.0Bz),7.68(lB,d,J=9.03z),7.69(lB ,s), 8.09(13,d,J=2.4Bz). IR(Nujol):3460,3178,2927,2854,2726,2680,1702,1639, 1600,1517 cm*1 [a]D2<-34.6e (c=1.01%,CB8OB) 166-167Γ
IA-b-1	1.00 és 1.23(mind és mind s),1.22-1.40(63,m),1.92-2.25 (8B,m), 2.47(13,m),4.32(13,t,J=8.6Bz),5.26-5.50(23,m), 6.15(13,d,J=9.0Hz), 7.02(13,dd,J=2.4 és 8.7Bz),7.65 (13,d,J=8.7Bz),7.73(1Β,ε), 8.07(13,d,j=2.4Bz). IR(CBCb):3423,3223,3033,3016,2925,2870,1707,1638, 1601,1436cm*1 [α]02»-43.θ· (c=1.01%»CB8OB)
IA-d-1	1.06 és 1.23(piind és mind s), 1.07(13,d,J=9.9Bz), 1.511.68(33,m), 1.80-2.60(113,m),4.81(13,dt,J=2.7 és 9.9 Bz),5.29-5.51(23,m), 6.32(13,d,J=9.6Bz),7.02(13,dd, J=2.4 és 9.0Bz),7.66(18,d,J=9.0Bz), 7.77(13,s), 7.99(13, d,J=2.4Bz). IR(C3C13):3394,3163,2926,2854,2681,2609,1698,1636, 1599,1529,1458,1437 cm1 [α]ϋ2δ+77.3β (c=1.01%,CB3OB) op 148-149Ό

13. táblázat

Vegyületszám	Fizikai állandó^
lA-b’-l	1.02(lH,d,J=10.2Hz),1.13 és 1.24(mind 3H, mind 6),1.56- 2.55(14H,m), 4.29(lH,m),5.35-5.51(2H,m),6.20(lH, d,J=9.3Hz),7.01(lH,dd,J=2.4 és 9.0Hz),7.65(lH,d,J=9.0Hz),7.69(lH,6),8.00(lH,d,J=2.4Hz). IR(CHCls):3440,3226,1708,1637,1602,1516 cm-1 [α)ϋ2δ-49.9β (c=1.01%,CH3OH) op 143-14413
IB-b’-l	0.87 és 1.24(mind3H,minds),1.51(lH,d,J=10.5Hz),1.60- 2.61(14H,m),4.24(lH,m),5.32~5.45(2H,m), 6.12(lH,d,J=9.0 Hz), 7.37-7.48(2H,m),7.85-7.88(2H,m), 8.33(lH,d,J=7.8Hz) IR(CHC1»):3429,3067,3023,3014,2923,2871,1708,1652, 1556,1516, 1494cm1 [a]D«-23.0· (c=1.00%,CHjGH)
IB-b'-2	1.11 és 1.24(mind3H, mind s),1.50(lH,d, J=10.8Hz),1.592.60(14H,m), 4.2(lH,m),5.32-5.45(2H,m),6.09(lH,d, J= 8.4Hz), 7.16(lH,ddd,J=2.4,9.0 és 10.2Hz),7.77(lH,dd, J=4.8 és 9.0Hz),7.93(lH,s),8.09(lH,dd,J=2.4 és 0.2Hz) IR(CHCla):3429,3095,3030,3015,2923,2871,1708,1653, 1603,1566,1517,1432cm-1 [α)ϋ26-22.4β (c=1.01%,CH3OH)
IB-b’-3	0.86 és 1.23( mind3Hjnind s),1.49-2.58(15H,m),4.24 (lH,m),5.25-5.40(2H,m),6.18(lH,d,J=9.0Hz), 7.03(lH,dd, J=2.4 és 8.7Hz),7.66(lH,d,J=8.7Hz),7.77(lH,s), 8.06(lH,d,J=2.4Hz). IR(CHC13):3425,3237,3029,3021,3017,2924,2871,1707, 1637,1519,1457,1437cm-1 [α]ϋ2δ-18.7’ (c=1.00%,CH3OH)

• · ·

14. táblázat

Vegyületszám	Fizikai állandók
IB-a’-l	0.91(lH,d,J=10.2Hz),1.13 és 1.25(mind 3H, mind s),1.601.88(3H,m), 2.01- 2.50(10H,m),2.79(lH,t,J=11.6Hz), 4.54(lH,m),5.31- 5.50(2H,m),6.10(lH,d,J=8.4Hz),7.377.48(2H,m),7.85-7.88(2H,m),8.33(lH,d,J=7.5Hz). IR(CHCh):3429,3065,3023,3015,2923,2872,1708,1651, 1556,1516,1493cm-1 [o]d2&+26.5‘ (c=1.01%,CH3OH)
IB-a'-2	0.91(lH,d,J=10.2Hz),1.12 és 1.25(mind3Hpiind s),1.601.90(3H,m),2.01-2.50(10H,m),2.78(lH,t,J=12.2Hz), 4.52(lH,m),5.30-5.50(2H,m),6.08(lH,d,J=8.4Hz), 7.16(lH,dt,J=2.7 és 8.7Hz), 7.77(lH,dd,J=4.5 és 8.7Hz),7.91(1H,b), 8.09(lH,dd,J=2.7 és 9.9Hz). IR(CHCh):3430,3095,3024,3015,2923,2872,1708,1652, 1603,1565,1517,1433cm-1 [α]χ>2β+25.8’ (c=1.00%,CHaOH)
IB-a’-3	0.88(lH,d,J=9-9Hz),l.ll és 1.26(mind3H, minds), 1.501.90(3H,m),2.00-2.23(8H,m),2.40-2.50(2H,m), 2.83(lH,t,J=12.0Hz), 4.55(lH,m),5.24-5.44(2H,m), 6.11(lH,d,J=9.0Hz),7.02(lH,dd,J=2.4 és 8.4Hz), 7.67(lH,d,J=8.4Hz),7.75(lH,s),8.12(lH,d,J=2.4Hz). IR(CHC13):3425,3222,3028,3022,3015,2923,2872,1707, 1637,1601,1519,1456,1437cm·1 [α]ρ25+19.3’ (c=1.00%,CH3OH)

- 40 A fenti példákból előállított vegyületeket in vivo és in vitro aktivitás meghatározásával vizsgáltuk az alábbi kísérleti példákban leírt módszerek szerint.

1. Kísérleti példa: PGD₂ receptor kötés.

Anyagok és módszerek (1) Humán lemezke membrán frakció előállítása

A vérmintát 3,8%-os nátrium-citrátot tartalmazó műanyag fecskendők felhasználásával vettük egészséges önkéntesek vénájából (férfiak és nők), műanyag teszt csőbe helyeztük és enyhe rázással kevertük. A mintákat ezután 1800 rpm fordulattal 10 percen keresztül szobahőmérsékleten centrifugáltuk és a PRP (lemezkegazdag plazma) tartalmazó szupernatánst összegyűjtöttük. A PRP-t 2300 rpm fordulattal 22 percen keresztül szobahőmérsékleten újra centrifugáltuk és ily módon lemezkéket kaptunk. A lemezkéket homogenizátorral (Ultra-Turrax) homogenizáltuk, majd háromszor 20,000 rpm fordulatszám mellett 10 percig 4°C hőmérsékleten centrifugáltuk és így a lemezke membrán frakcióhoz jutottunk. A protein meghatározás után a membrán frakciókat 2 mg/ml értékre állítottuk és -80°C hőmérsékleten felhasználásig mélyhűtőben félretettük.

(2) PGD₂ receptorhoz való kötés

A kötési reakcióoldathoz (50 mmol Tris/HCI, pH = 7,4, 5 mg MgCI₂) (0,2 ml) humán lemezke membrán frakciót adtunk 0,1 mg tömegben és további 5 nmmol [³H]PGD₂ (115Ci/mmol) adagoltunk, a reagáltatást 4°C hőmérsékleten 90 percen keresztül végezve. Miután a reakció lejátszódott, a reakciókeveréket üvegszürön szűrőpapíron keresztül szűrtük, néhányszor hideg sóoldattal mostuk és a radioaktivitást a szűrőpapíron visszamaradt anyagon mértük. A specifikus kötést a nemspecifikus kötés (kötés 10 μηιοΙ PGD₂ jelenlétében) szubtrakciójából számoltuk a

68.389/SM

- 41 teljes kötésből. Mindenegyes vegyület gátló aktivitást, mint azt a koncentrációt fejeztük ki, amely 50% gátláshoz (IC50) szükséges, melyet a szubsztitúciós görbe és a kötési arány (%) ábrázolásával határoztunk meg mindenegyes vegyület jelenlétében ha a kötő arány a teszt vegyület hiányában 100%. Az eredményeket a 15. táblázat mutatja.

15. táblázat

Vegyület száma	IC50 (nM)
IA-a-2	3,3
IA-a-5	0,4
IA-a-7	1,3
IA-a-9	6,5
IA-a-17	1,2
IA-c-1	28
IA-c-2	1
IB-a’-2	37

2. Kísérleti példa: Az antagonista aktivitás kiértékelése PGD₂ receptorral szemben humán lemezkék felhasználásával

A perifériás vért egészséges önkéntesekből nyertük 1/9 térfogat citromsav/dextróz oldatot tartalmazó fecskendők felhasználásával, melyeket az előzőekben nyertünk. A fecskendőt 180 g értéken 10 percen keresztül centrifugáltuk és ily módon szupernatánst nyertünk (PRP: lemezke-gazdag plazma). A kapott PRP-t háromszor pufferral mostuk és a lemezke számot mikrosejt számlálóval számoltuk. A szuszpenziót 5 x 10⁸/ml végső lemezkeszám koncentrációra állítottuk és 37°C-re melegítettük, majd 0,5 mmol 3-izobutil-1-metil-xantinnal előkezeltük 5 percen keresztül. A szuszpenzíóhoz különböző koncentrációjú hígított teszt vegyületet adtunk.

68.389/SM

- 42 10 perc elteltével a reakciót 0,1 pmol PGD₂ adagolásával indukáltuk, 2 perc elteltével a reakciót sósav adagolásával leállítottuk. A lemezkéket ultraszonikus homogenizátorral összetörtük. Centrifugálás után a cAMP-t a szupernatánsban radioimmuno vizsgálattal meghatároztuk. A PGD₂ receptor antagonizmust a gyógyszer esetében az alábbiak szerint értékeltük. A gátló mennyiség a cAMP vonatkozásában PGD₂ adagolásával növekedett, az individuális koncentrációkat meghatároztuk és a szükséges gyógyszer koncentrációt az 50%-os gátló hatás (IC₅o) eléréséhez számoltuk. Az eredményeket a 16. táblázat mutatja.

16. táblázat

Vegyület száma	IC50 (nM)
IA-a-5	1,3
IA-a-7	2,8
IA-a-9	0,21
IA-a-17	28
IA-c-1	55
IA-c-2	61
IB-b'-3	57
IB-a’-1	41

3. Kísérleti példa: Kísérlet nazális blokk modell felhasználásával

Az alábbiakban ismertetjük az intranazális nyomás mérésére felhasznált módszert az anti-nazális blokk kiértékelésére tengerimalacokat használva.

% ovalbumin (OVA) oldatot kezeltünk ultraszonikus nebulizerrel és ily módon aeroszolt kaptunk. Hartley hím tengerimalacot szenzitivizáltuk oly módon, hogy 2 x 10 percig egy hetes intervallumokban aeroszollal inhaláltattuk. 7 nappal a szenzitivizálás után a tengerimalacot antigén iniciálta reakciónak tettük ki. A tracheát

68.389/SM

- 43 metszettük érzéstelenítés alatt, melyet pentobarbitállal (30 mg/kg, i.p.) végeztünk és kanült helyeztünk a tracheába a tüdőnél és a nazális kavitációs helyeknél. A kanült a pulmonális oldalon helyeztük be és az artifikális respirátorral hoztuk kapcsolatba 4 ml x 60 levegő adag/perc értéket megvalósítva. Miután a spontán respirációt a tengerimalacon Galiamin (2 mg/kg, i.v.) leállítottuk, levegőt bocsátottunk a snout félre artifikális respirátorral 70 frekvencia/perc értéket megvalósítva és a folyási sebesség 4 ml levegő/egységnyi idő volt. Az atmoszférikus nyomást, mely a levegőztetéshez szükséges volt, a fürdőben elhelyezett transducerrel valósítottuk meg. A mérések adatait mint a nazális kavitás ellenállás paraméterét használtuk fel. Az antigén expozíciót 3% ÓVA oldat aeroszollal végeztük 3 percen keresztül a respirátor és a nazális kavitásos kanül között. A teszt gyógyszert orálisan 60 perccel az antigén expozíció előtt adtuk. Az intranazális nyomást 0-30 perc között mértük folyamatosan és a hatást mind gátlási mennyiséget fejeztük ki, melyet AUC felhasználásával mint vehikulummal nyertük 30 percen keresztül [a vertikális axison, intranazális nyomáson (cm H₂O) és a horizontális axison, idő 0-30 perc] indikációként. Az eredményeket a 17. táblázat foglalja össze.

17. táblázat

Vegyület száma	Gátlási százalék
IA-a-5	96

4, Kísérleti példa: Antigén kiváltotta eosionofilia infiltráció aktivitás nazális kavitásban

Hartley hím tengerimalacot intraperitoneálisan ciklofoszfamiddal (30 mg/kg) rrjektáltunk és 2 nap elteltével 1 ml 1 mg ovalbumint (ÓVA) tartalmazó szuszpenziót adtunk, majd 100 mg aluminium-hidroxid injekciót adtunk intraperitoneálisan. 3 hét

68.389/SM

- 44 elteltével 1 ml OVA (10 pg) és 100 ml aluminium-hidroxid keverékét adtuk intraperitoneálisan injektálva mint további immunizáció szenzitív szisztémás szert. 3 hét elteltével a lokális szenzitiváció során mindenegyes 10 pl 1%-os ÓVA oldatot a nazális kavitációkba helyeztnük négyszer 2-4 napos intervallumokban. 5-7 nappal a végső szenzitiváció után a nazális antigén irritációt 10 μΙ 1%-os ÓVA oldattal történő kezeléssel végeztük a tengerimalacokban mindkét nazális kavitásban. 5 órával a nazális irritáció után a tengerimalacokat excsanguináltuk altatás alatt. A nazális légutakat 10 ml sóoldat infúzióval mostuk és a mosófolyadékot összegyűjtöttük. A mosófolyadékot ezután centriguáltuk, a sejtlemezkéket 100 μΙ sóoldatba reszuszpendáltuk és a végső sejtszámot Türk festés után számoltuk. Ezután a smear mintákat előállítottuk, a sejteket May-Grünwald-Giemsa festéssel osztályoztuk. Az eozinofilia számot multiplex eozinofilia mennyiségben határoztuk meg a teljes sejtszámmal. A teszt vegyületet (IA-a-5) 01,5%-os metil-cellulózban szuszpendáltuk és orálisan adtuk 1 mg/kg, 3 mg/kg és 10 mg/kg dózisban 1 órával az antigénnel történő irritáció előtt. Az eredményeket az 1. ábra foglalja összeg.

A fenti 1. és 2. kísérlet alapján bebizonyítottuk, hogy a találmány szerinti vegyületek potenciális PGD₂ antagonista aktivitással rendelkeznek; a 4. kísérletből megállapítottuk, hogy a találmány szerinti vegyületek bizonyosan szignifikánsan elnyomják az eozinofiliák infiltrációját; és a 3. kísérletből belátható, hogy a találmány szerinti vegyületek bizonyítottan használhatók a nazális blokk kezelésére alkalmas gyógyszerként.

Ipari alkalmazhatóság

A találmány tárgya PGD₂ antagonisták és eozinofilia infiltráció gátlók, melyek bizonyos betegségek kezelésére gyógyszerként használhatók, ilyen betegségek a

68.389/SM

- 45 szisztémás mastocitozis és a szisztémás mast sejt aktiválás rendellenességei és a trachealis kontrakciók, az asztma, az allergiás rinitisz, az allergiás konjunktivitis, az ultricaria, az ischemiás reperfúziós sérülések, a gyulladások és az atopikus dermatitis.

68.389/SM

Claims (26)

1. SZABADALMI IGÉNYPONTOK

   1. (I) általános képletű vegyület, ahol a képletben Y jelentése valamely (A) vagy (B) képletű csoport, R jelentése hidrogénatom, alkilcsoport, alkoxicsoport, halogénatom, hidroxilcsoport, acil-oxi-csoport vagy kívánt esetben helyettesített arilszulfonil-oxi-csoport, X jelentése hidrogénatom vagy alkilcsoport és az α-láncon a kettős kötés E- vagy Z-konfigurációjú, azzal a feltétellel, hogy az (I) általános képletű vegyület körébe tartozó (I’) általános képletű vegyületet, ahol a képletben R^1a jelentése hidrogénatom, alkilcsoport vagy alkoxicsoport, X jelentése a fentiekben megadott és az α-láncon a kettős kötés E- vagy Z-konfigurációjú, az oltalmi körből kizártak - és annak valamely gyógyászatilag elfogadható sói vagy hidrátjai.
2. 2. Az 1. igénypont szerinti (I) általános képletű vegyület, annak valamely gyógyászatilag elfogadható sója vagy hidrátja, ahol a képletben Y jelentése valamely (A) képletű csoport.
3. 3. Az 1. igénypont szerinti (I) általános képletű vegyület, annak valamely gyógyászatilag elfogadható sója vagy hidrátja, ahol a képletben Y jelentése valamely (B) képletű csoport.
4. 4. Az 1. igénypont szerinti (I) általános képletű vegyület, annak valamely gyógyászatilag elfogadható sója vagy hidrátja, ahol a képletben Y jelentése valamely (C) képletű csoport és R¹ jelentése halogénatom, acil-oxi-csoport vagy kívánt esetben helyettesített aril-szulfonil-oxi-csoport.
5. 5. Az 1. igénypont szerinti (I) általános képletű vegyület, annak valamely gyógyászatilag elfogadható sója vagy hidrátja, ahol a képletben Y jelentése valamely (D) képletű csoport.

   68.389/SM
6. 6. Az 1. igénypont szerinti (I) általános képletű vegyület, annak valamely gyógyászatilag elfogadható sója vagy hidrátja, ahol a képletben Y jelentése valamely (E) képletű csoport.
7. 7. Az 1. igénypont szerinti (I) általános képletű vegyület, annak valamely gyógyászatilag elfogadható sója vagy hidrátja, ahol a képletben Y jelentése valamely (F) képletű csoport.
8. 8. Az 1. igénypont szerinti (I) általános képletű vegyület, annak valamely gyógyászatilag elfogadható sója vagy hidrátja, ahol a képletben Y jelentése valamely (G) képletű csoport.
9. 9. Az 1. igénypont szerinti (I) általános képletű vegyület, annak valamely gyógyászatilag elfogadható sója vagy hidrátja, ahol a képletben Y jelentése valamely (H) képletű csoport.
10. 10. Az 1. igénypont szerinti (I) általános képletű vegyület, annak valamely gyógyászatilag elfogadható sója vagy hidrátja, ahol a képletben Y jelentése valamely (i) képletű csoport.
11. 11. Az 1-10. igénypontok bármelyike szerinti (I) általános képletű vegyület, annak gyógyászatilag elfogadható sója vagy hidrátja, ahol az α-lánc kettős kötése E-konfigurációjú.
12. 12. Az 1-10. igénypontok bármelyike szerinti (I) általános képletű vegyület, annak gyógyászatilag elfogadható sója vagy hidrátja, ahol az α-lánc kettős kötése Zkonfigurációjú.
13. 13. Az 1-12. igénypontok bármelyike szerinti (I) általános képletű vegyület, annak gyógyászatilag elfogadható sója vagy hidrátja, ahol a képletben R jelentése

    68.389/SM

    - 48 brómatom, fluoratom, hidroxilcsoport, acetoxi-csoport, fenil-szulfonil-oxi-csoport és X jelentése hidrogénatom.
14. 14. Az 1-3. vagy 5-10. igénypontok bármelyike szerinti vegyület, annak gyógyászatilag elfogadható sója vagy hidrátja, ahol a képletben R jelentése hidrogénatom, metilcsoport vagy metoxicsoport és X jelentése hidrogénatom.
15. 15. (V) általános képletű vegyület, ahol a képletben Y a gyűrűt képviseli és R jelentése a fentiekben megadott.
16. 16. (VI) általános képletű vegyület, ahol a képletben Y a gyűrűt képviseli és R jelentése a fentiekben megadott.
17. 17. (Illa) általános képletű vegyület, ahol a képletben R² jelentése aciloxicsoport vagy kívánt esetben helyettesített aril-szulfonil-oxi-csoport és R³ jelentése hidroxilcsoport vagy halogénatom.
18. 18. A 17. igénypont szerinti (lllb) általános képletű vegyület, ahol a képletben R² és R³ jelentése a fentiekben megadott.
19. 19. A 17. igénypont szerinti (lile) általános képletű vegyület, ahol a képletben R² és R³ jelentése a fentiekben megadott.
20. 20. A 17-19. igénypontok bármelyike szerinti vegyület, ahol a képletben R³ jelentése hidroxilcsoport.
21. 21. A 17-20. igénypontok bármelyike szerinti vegyület, ahol a képletben R² jelentése fenil-szulfonil-oxi-csoport vagy acetil-oxi-csoport.
22. 22. Gyógyszerkészítmény, amely az 1-14. igénypontok bármelyike szerinti vegyületet vagy annak gyógyászatilag elfogadható sóját vagy hidrátját tartalmazza.
23. 23. Az 1-14. igénypontok bármelyike szerinti vegyületet vagy annak gyógyászatilag elfogadható sóját vagy hidrátját magába foglaló PGD₂ antagonista.

    68.389/SM
24. 24. Gyulladásos sejtek infiltrációját gátló PGD₂ antagonista, amely az 1-14. igénypontok bármelyike szerinti vegyületet vagy annak gyógyászatilag elfogadható sóját vagy hidrátját tartalmazza.
25. 25. A 24. igénypont szerinti PGD₂ antagonista, ahol a gyulladásos sejtek eozionofiliák.
26. 26. Gyógyszer nazális blokk kezelésére, amely az 1-14. igénypontok bármelyike szerinti (I) általános képletű vegyületet vagy annak gyógyászatilag elfogadható sóját vagy hidrátját tartalmazza.

    A meghatalmazott ^aZs