CN117396234A - 用于治疗前列腺癌的组合物和方法 - Google Patents

Abstract

本发明的实施方案提供了用于治疗癌症，特别是前列腺癌的组合物和方法。根据某些实施方案，一种治疗患者的癌症的方法包括向该患者施用治疗有效量的放射性缀合物，其中该放射性缀合物包含对hK2具有结合特异性的抗体或抗原结合结构域。本文还提供了包含对hK2具有结合特异性的放射性标记抗体的药物组合物。

Description

用于治疗前列腺癌的组合物和方法

相关申请的交叉引用

本申请要求2021年5月27日提交的美国临时专利申请63/193,704和2022年4月28日提交的美国临时专利申请63/335,761的优先权权益，这两篇专利申请全文以引用方式并入本文并用于所有目的。

技术领域

本发明的实施方案涉及用于治疗前列腺癌的组合物和方法。特别地，本发明的实施方案涉及用于靶向hK2的疗法的放射性缀合物组合物。

以电子方式提交的参考序列表

本申请包含序列表，该序列表作为ASCII格式的序列表经由EFS-Web以电子方式提交，文件名为“JBI6423WOPCT1_SeqListing.txt”并且创建日期为2022年5月12日，并且大小为17kb。经由EFS-Web提交的该序列表是本说明书的一部分并且全文以引用方式并入本文。

背景技术

前列腺癌是最常见的癌症形式之一。肿瘤的生长通常是在长时间内发生的过程。前列腺癌通常是轻度形式的癌症。事实上，大多数被诊断患有前列腺癌的人存活并恢复。少数人遭遇更具侵袭性形式的前列腺癌，其在早期阶段转移。这种侵袭性形式的前列腺癌只有在癌症已经扩散到囊外组织之前在早期阶段被诊断时才可以治愈。

随着多种新药剂陆续获批，转移性去势抵抗性前列腺癌(mCRPC)的患者管理格局发生了改变，这些药剂包括雄激素受体(AR)导向疗法(例如，恩扎鲁胺和醋酸阿比特龙加泼尼松)、化学疗法(例如，多西他赛和卡巴他赛)和细胞免疫疗法(例如，Sipuleucel-T)。使用这些药剂，总体生存已从先前报道的6个月至10个月的范围改善至18个月至24个月。然而，在接受抗雄激素或雄激素合成抑制剂治疗的前列腺癌患者中，多数会在13个月至20个月内进展。

仍然需要用于治疗和诊断前列腺癌的新的治疗剂和方法；特别地，具有克服抗性途径的作用机制的疗法在开发用于治疗mCRPC的替代策略中至关重要。

发明内容

本发明涉及药物组合物、制备药物组合物的方法以及治疗需要此类治疗的患者的癌症的方法。

根据本发明的一个实施方案，一种治疗患者的癌症的方法包括：向该患者施用治疗有效量的药物组合物，该药物组合物包含放射性缀合物和一种或多种药学上可接受的赋形剂，其中：该放射性缀合物包含至少一种缀合至对hK2具有结合特异性的抗体或抗原结合片段的放射性金属络合物；该放射性金属络合物包含放射性金属；并且在给药时，该放射性金属提供每剂该药物组合物约50μCi至约350μCi的靶向放射性。

根据本发明的一个实施方案，一种治疗患者的癌症的方法包括：向该患者施用治疗有效量的药物组合物，该药物组合物包含放射性缀合物和一种或多种药学上可接受的赋形剂，其中：该放射性缀合物包含至少一种缀合至对hK2具有结合特异性的抗体的放射性金属络合物；该放射性金属络合物包含为²²⁵Ac的放射性金属；并且在给药时，该放射性金属提供每剂该药物组合物约50μCi至约350μCi的靶向放射性。

根据一个实施方案，放射性缀合物包含至少一种缀合至对hK2具有结合特异性的抗体的放射性金属络合物，其中该抗体包含重链可变区和轻链可变区，该重链可变区包含SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2和SEQ ID NO:3的氨基酸序列，该轻链可变区包含SEQ ID NO:4和SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6的氨基酸序列。

根据一个实施方案，放射性金属络合物包含为DOTA的螯合剂。

根据一个实施方案，放射性缀合物包含螯合至以下项的放射性金属：(a)式(IV)的化合物

或其药学上可接受的盐，其中：

R₁为氢并且R₂为-L₁-R₄；

另选地，R₁为-L₁-R₄并且R₂为氢；

R₃为氢；

另选地，R₂和R₃与它们所附接的碳原子合在一起以形成5元或6元环烷基，其中所述5元或6元环烷基任选地被-L₁-R₄取代；

L₁不存在或为连接基；和

R₄为抗体；或者

(b)式(V)的化合物

或其药学上可接受的盐，其中：

L₁不存在或为连接基；和

R₄为抗体；

例如，其中螯合剂为下式的化合物或其药学上可接受的盐：

根据一个实施方案，放射性金属为²²⁵Ac并且放射性金属提供每约2mg总抗体约25μCi至约350μCi、或每约2mg总抗体约50μCi至约350μCi的靶向比活性。

根据一个实施方案，该方法包括向患者静脉内施用药物组合物。

本发明的实施方案在治疗已被诊断患有前列腺癌的患者中特别有用；例如，患有晚期前列腺癌的患者。根据一个实施方案，该癌症是非限局性前列腺癌。根据另一个实施方案，该癌症是转移性前列腺癌。根据另一个实施方案，该癌症是去势抵抗性前列腺癌(CRPC)。根据另一个实施方案，该癌症是转移性去势抵抗性前列腺癌(mCRPC)。根据另一个实施方案，该癌症是伴有腺癌的mCRPC。

本发明的另一个实施方案提供了一种药物组合物，该药物组合物包含放射性缀合物和一种或多种药学上可接受的赋形剂，其中：该放射性缀合物包含至少一种缀合至对hK2具有结合特异性的抗体或抗原结合片段的放射性金属络合物，并且该放射性金属络合物包含放射性金属。

根据一个实施方案，药物组合物包含放射性缀合物和一种或多种药学上可接受的赋形剂，其中：该放射性缀合物包含至少一种缀合至对hK2具有结合特异性的抗体的放射性金属络合物，该放射性金属络合物包含为²²⁵Ac的放射性金属，并且该抗体包含重链可变区和轻链可变区，该重链可变区包含SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2和SEQ ID NO:3的氨基酸序列，该轻链可变区包含SEQ ID NO:4和SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6的氨基酸序列。

根据一个实施方案，一种或多种药学上可接受的赋形剂包含一种或多种辐射防护剂，诸如抗坏血酸钠、龙胆酸或它们的组合(例如，以约0.1w/v％至约5w/v％、或约0.1w/v％至约4w/v％、或约0.1w/v％至约3w/v％、约0.1w/v％至约2w/v％、或约0.1w/v％至约1w/v％、或约0.25w/v％至约0.75w/v％、或约0.5w/v％的量)。

根据一个实施方案，一种或多种药学上可接受的赋形剂包含一种或多种表面活性剂，诸如聚山梨酸酯20。

根据一个实施方案，药物组合物包含放射性缀合物、抗坏血酸钠、聚山梨酸酯20、乙酸盐缓冲液和水。

根据一个实施方案，药物组合物包含放射性缀合物、约24mM至28mM乙酸盐、约0.25w/v％至0.75w/v％抗坏血酸钠和约0.01w/v％至0.15w/v％聚山梨酸酯20的水溶液。

根据一个实施方案，药物组合物具有约5至约6(例如，约5.5)的pH。

根据一个实施方案，药物组合物不含任何冷冻保护剂，诸如糖或糖醇。

根据一个实施方案，放射性金属为²²⁵Ac并且放射性金属在给药时提供每约2mg总抗体约50μCi至约350μCi的比活性。

根据一个实施方案，药物组合物包含总量为约0.1mg/mL至1.0mg/mL的缀合物中间体和放射性缀合物；例如，约0.5mg/mL。

本发明的另一个实施方案提供了一种制备药物组合物的方法，该方法包括将第一中间体组合物和第二中间体组合物组合以形成该药物组合物，其中：该第一中间体组合物包含放射性缀合物，并且该第二中间体组合物包含缀合物中间体并且不包含任何放射性缀合物。

附图说明

以下附图构成本说明书的一部分，并且被包括以进一步说明本发明的某些方面。通过参考这些附图中的一个或多个附图并结合本文给出的具体实施方案的描述，可以更好地理解本发明。

图1A和图1B是药物产品组合物的高效液相色谱图(图1A)和¹¹¹In-DOTA-h11B6的高效液相色谱图(图1B)。

图2A和图2B是²²⁵Ac-DOTA-h11B6药物产品的高效液相色谱图，该药物产品包含蔗糖并在T＝0(图2A)和T＝96小时(图2A)处缺乏抗坏血酸盐。

图3A至图3D是药物产品的高效液相色谱图。该组合物每4mL药物产品包含约50μCi(图3A和图3B)和200μCi ²²⁵Ac-DOTA-h11B6(图3C和图3D)。图3A和图3C的组合物还包含抗坏血酸钠，图3B和图3D的组合物还包含蔗糖。

图4A和图4B示出了本发明的放射性缀合物的示例(Ac-225与螯合剂之间的键未示出)。

图5示出了本发明的缀合物中间体的示例。图5A提供了包含DOTA的缀合物中间体的图示，其中未示出赖氨酸部分。图5B提供了包含DOTA的缀合物中间体的图示，其中表示了赖氨酸部分。图5C提供了包含DOTA的缀合物中间体的缀合过程的图示。

图6示出了本发明的缀合物中间体的示例(TOPA-h11B6)。图6A提供了包含TOPA螯合剂(TOPA-h11B6)的缀合物中间体的图示，其中未示出赖氨酸部分。图6B提供了图6A所示的缀合物中间体的图示，其中表示了赖氨酸部分。图6C提供了缀合物中间体的缀合过程的图示。

图7示出了h11B6抗体的本体重链和轻链的氨基酸序列。

具体实施方式

本文所述的化合物、组合物和方法可用于治疗需要此类治疗的患者的癌症。化合物、组合物和方法的实施方案有效治疗前列腺癌，包括晚期前列腺癌，特别是去势抵抗性前列腺癌(CRPC)，并且因此提高患者的生存率。这些化合物在对晚期前列腺的现有治疗被认为不成功的患者中特别有用。

人激肽释放酶2(hK2)是由柱状前列腺上皮细胞产生并以与密切相关的前列腺特异性抗原(PSA；人腺体激肽释放酶3)相同的方式由雄激素受体(AR)信号传导驱动的胰蛋白酶样抗原，该前列腺特异性抗原与PSA基因在遗传上具有80％同源性。然而，与PSA不同，发现hK2的循环水平处于异常低的水平，其中它们可以被多种蛋白酶抑制剂络合物结合。尽管认为hK2主要是分泌的，但有证据表明它能够经由抗原-抗体络合物诱导内化，因此认为它也存在于细胞表面上。因为hK2表达对前列腺腺癌高度特异并且在整个疾病进展中增加，所以靶向hK2的疗法是有吸引力的。

示例性hK2序列被描述为转录物：KLK2-201(ENST00000325321)，在本文中被提供为SEQ ID NO:7，基因ENSG00000167751的产物，如在总体数据库中给出的。

某些术语

“抗原结合片段”或“抗原结合结构域”是指分离蛋白质的结合抗原的部分。抗原结合结构域可以是合成的、可酶促获得的或经遗传工程化的多肽，并且包括免疫球蛋白的结合抗原的部分，诸如VH、VL、VH和VL、Fab、Fab'、F(ab')₂、Fd和Fv片段；由一个VH结构域或一个VL结构域组成的结构域抗体(dAb)；鲨鱼可变IgNAR结构域；驼峰化VH结构域；VHH结构域；由模拟抗体的CDR诸如FR3-CDR3-FR4部分、HCDR1、HCDR2和/或HCDR3以及LCDR1、LCDR2和/或LCDR3的氨基酸残基组成的最小识别单元；结合抗原的替代支架；以及包含抗原结合片段的多特异性蛋白质。抗原结合片段(诸如VH和VL)可经由合成连接基连接在一起以形成各种类型的单抗体设计，其中在VH和VL结构域由单独的单链表达的那些情况下，VH/VL结构域可在分子内或分子间配对，以形成单价抗原结合位点，诸如单链Fv(scFv)或双链抗体。

“抗体”广义上是指并包括免疫球蛋白分子，具体包括单克隆抗体(包括鼠科动物单克隆抗体、人单克隆抗体、人源化单克隆抗体和嵌合单克隆抗体)，抗原结合片段，多特异性抗体(诸如双特异性抗体、三特异性抗体、四特异性抗体)，二聚、四聚或多聚抗体，单链抗体、结构域抗体，以及包含具有所需特异性的抗原结合位点的免疫球蛋白分子的任何其他经修饰构型。“全长抗体”包含由二硫键互连的两条重链(HC)与两条轻链(LC)以及它们的多聚体(例如IgM)。每条重链由重链可变区(VH)和重链恒定区(由结构域CH1、铰链、CH2和CH3构成)构成。每条轻链由轻链可变区(VL)和轻链恒定区(CL)构成。VH区和VL区可进一步细分为超变区，该超变区称为互补决定区(CDR)并间插有框架区(FR)。各个VH和VL由三个CDR和四个FR片段构成，并按以下顺序从氨基端至羧基端排列：FR1、CDR1、FR2、CDR2、FR3、CDR3和FR4。免疫球蛋白可根据重链恒定结构域氨基酸序列被指定为五种主要种类，即IgA、IgD、IgE、IgG和IgM。IgA和IgG进一步亚分类为同种型IgA1、IgA2、IgG1、IgG2、IgG3和IgG4。基于其恒定域的氨基酸序列，可将任何脊椎物种的抗体轻链指定为两种完全不同的类型即κ和λ中的一种。

当与抗原或抗体相关使用时，术语“变体”可以指与天然或未修饰序列相比包含一个或多个(诸如例如约1个至约25个、约1个至约20个、约1个至约15个、约1个至约10个、或约1个至约5个)氨基酸序列取代、缺失和/或添加的肽或多肽。例如，hK2变体可由对天然hK2的氨基酸序列的一种或多种(诸如例如，约1种至约25种、约1种至约20种、约1种至约15种、约1种至约10种或约1种至约5种)变化得到。同样以举例的方式，抗hK2抗体的变体(诸如h11B6)可由对天然或先前未修饰抗hK2抗体的氨基酸序列的一种或多种(诸如例如，约1种至约25种、约1种至约20种、约1种至约15种、约1种至约10种或约1种至约5种)变化得到。变体可以是天然存在的，诸如等位基因或剪接变体，或者可以是人工构造的。多肽变体可由编码变体的相应核酸分子制备。在具体的实施方案中，hK2变体或抗hK2抗体变体至少分别保持hK2或抗hK2抗体功能活性。在具体的实施方案中，抗hK2抗体变体结合hK2和/或对hK2活性拮抗。在某些实施方案中，变体由核酸分子的编码hK2或抗hK2抗体VH或VL区或亚区诸如一个或多个CDR的单核苷酸多态性(SNP)变体编码。

当关于抗体使用时，变体的非限制性示例是“Fc变体”，其是具有变体Fc区的抗体。“变体Fc区”包括由于至少一个氨基酸修饰(例如，取代、添加或缺失)而与天然序列Fc区的氨基酸序列不同的氨基酸序列。在某些实施方案中，变体Fc区与天然序列Fc区或亲本多肽的Fc区相比具有至少一个氨基酸取代，例如，在天然序列Fc区或亲本多肽的Fc区中约一至约十个氨基酸取代，或约一至约五个氨基酸取代。本文的变体Fc区可与天然序列Fc区和/或亲本多肽的Fc区具有至少约80％的同源性，或者与其具有至少约90％的同源性，例如与其具有至少约95％的同源性。

术语“同一性”是指如通过比对和比较序列所确定的两个或更多个多肽分子或者两个或更多个核酸分子的序列之间的关系。相对于参考多肽序列的“序列同一性百分比(％)”定义为候选序列中与参考多肽序列中的氨基酸残基相同的氨基酸残基的百分比，在比对序列并引入缺口(如果需要的话)以实现最大的序列同一性百分比之后，不考虑任何保守置换作为序列同一性的一部分。出于确定氨基酸序列同一性百分比的目的进行的比对可以本领域技术范围内的多种方式实现，例如使用可公开获得的计算机软件诸如BLAST、BLAST-2、ALIGN或MEGALIGN(DNAStar,Inc.)软件。本领域技术人员可确定用于比对序列的合适参数，包括在所比较序列的全长上实现最大比对所需的任何算法。

“特异性结合”或“结合”是指蛋白质分子与抗原或该抗原内的表位以比对其他抗原更大的亲和力结合。通常，蛋白质分子与抗原或抗原内的表位结合，平衡解离常数(K_D)为约1×10^-7M或更低，例如约5×10^-8M或更低、约1×10^-8M或更低、约1×10^-9M或更低、约1×10^-10M或更低、约1×10^-11M或更低或约1×10^-12M或更低，通常K_D比它与非特异性抗原(例如BSA、酪蛋白)结合的K_D低至少一百倍。如本文所用，“对hK2具有结合特异性”的抗体或抗原结合结构域是指分别与hK2特异性结合的抗体或抗原结合结构域。

如本文所用，在某些实施方案中，术语“受试者”是指哺乳动物，诸如非灵长类动物(例如，牛、猪、马、猫、狗、大鼠等)或灵长类动物(例如，猴和人)。在具体实施方案中，受试者是人。在一个实施方案中，受试者是被诊断患有病症或障碍的哺乳动物，例如人。在另一个实施方案中，受试者是具有发展病症或障碍的风险的哺乳动物，例如人。如本文所用，术语“患者”是指人。

“施用”(administer或administration)是指将存在于体外的物质通过注射或以其他方式物理递送至患者体内的动作，诸如通过粘膜、皮内、静脉内、肌内、皮下递送和/或本文所述或本领域已知的任何其他物理递送方法。

如本文所用，术语“治疗”(treat、treatment和treating)是指由施用一种或多种疗法引起的疾病或病症的进展、严重程度和/或持续时间的减少或改善。治疗可通过评估是否已存在与潜在障碍相关的一种或多种症状的减少、减轻和/或缓解来确定，使得尽管患者可能仍然受到潜在障碍的折磨，但观察到患者的改善。术语“治疗”包括管理和改善疾病。术语“管理”(manage、managing和management)是指受试者从不一定导致疾病治愈的疗法中获得的有益效果。

如本文所用，术语“有效量”或“治疗有效量”是指足以对给定条件和施用方案产生期望治疗效果的本文提供的放射性缀合物或药物组合物的量。

术语“药剂”、“药物”(pharmaceutical、drug、medication)、“活性剂”、“活性药物成分”(API)和“活性的”在本文中可互换使用以描述药物组合物中的药学活性化合物。根据本发明适用的API的示例是对hK2具有结合特异性的放射性缀合物。药物组合物可包含一种或多种API和一种或多种本文称为“赋形剂”的附加成分。优选地，赋形剂基本上或完全具有药学上的惰性。

术语“剂量”是指在特定时间施用给患者的特定药物组合物的总量。优选地，以单次施用单位剂量的药物组合物的形式递送一个剂量(例如，经由静脉施用)。另选地，可以多次施用已被细分为多个子剂量的单位剂量(其中子剂量是指单位剂量的一部分)。

如本文所用，术语“药学上可接受的”意指无毒的，并且优选地由监管机构(例如，欧洲或美国联邦或州政府)允许的或者在美国药典或其他公认药典中列出的用于在动物并且更具体地人类中使用的物质。

放射性衰变是指不稳定的原子核通过辐射损失能量以产生至少一个子体核素的过程。半衰期是指放射性样本的原子核的一半衰变成其子体核素所需的时间。物质放射性的非国际单位制计量单位是居里(Ci)。一居里等于其中每秒衰变的原子数目等于37,000,000,000(3.7×10¹⁰)的放射性材料的量。物质放射性的另一种计量单位是国际单位制贝克勒尔(Bq)。贝克勒尔等于其中每秒一个原子核衰变的放射性材料的量。比活性是指样本中每单位摩尔或质量的放射性量；例如，有时表示为Ci/mmol或Ci/mg。放射性浓度，也称为比浓度(例如，表示为mCi/mL或μCi/mL)是指每单位体积的放射性总量。

关于免疫缀合物和放射性缀合物，术语“缀合的”意指“接合的”。分子(诸如抗体和螯合剂)可以例如通过共价键合接合到彼此。

“癌症”是指广泛的各种疾病，其特征在于身体中异常细胞的不受控制的生长。未受控制的细胞分裂和生长导致形成侵入相邻组织的恶性肿瘤，并且还可通过淋巴系统或血流转移到身体的远侧部分。“癌症”或“癌症组织”可包括肿瘤。

过渡术语“包括”旨在暗示其在专利用语中的公认含义。“包括”与“包含”或“含有”同义，并且是包括端值在内或末端开放的，并且不排除附加的、未列出的要素或方法步骤。

在诸如“介于A和B之间”或“介于A-B之间”的短语中使用的术语“介于”是指包括A和B两者的范围。在诸如“从A到B”或“从A-B”的短语中使用的术语“从”是指包括A和B两者的范围。

当使用描述符“约”将值表示为近似值时，应当理解，该具体值构成了另一个实施方案。一般来讲，术语“约”的使用表示近似值，这些近似值可根据所公开的主题试图获得的期望特性而变化，并且将在使用该近似值的特定上下文中基于其功能进行解释。在一些情况下，用于特定值的有效数字的数目可以是确定“约”这个词的范围的一种非限制性方法。在其他情况下，可以使用一系列值中使用的梯度来为每个值确定可用于术语“约”的预期范围。在存在的情况下，所有范围均包括端值在内并且是可组合的。即，对范围内规定的值的引用包括该范围内的每一个值。在某些实施方案中，术语“约”表示相关值±10％的方差，并且附加的实施方案包括其中方差可为±5％、±15％、±20％、±25％或±50％的那些。

应当理解，为了清楚起见，本发明的某些特征在单独实施方案的上下文中进行阐述，但也可以组合形式提供在单个实施方案中。也就是说，除非明显不相容或明确地被排除在外，否则每个单独实施方案被认为可与任何其他实施方案组合，并且这种组合被视为另一个实施方案。相反地，为简明起见，本发明的各种特征在单个实施方案的上下文中进行阐述，也可单独地或以任何子组合形式提供。最终，尽管实施方案可描述为一系列步骤的一部分或更普遍结构的一部分，但每个所述步骤本身也可被视为独立的实施方案，可与其他实施方案组合。

当提供一个列表时，除非另行指出，否则应当理解，该列表中的每个单独元素和该列表的每种组合都是单独的实施方案。例如，作为“A、B或C”呈现的实施方案的列表将被理解为包括实施方案“A”、“B”、“C”、“A或B”、“A或C”、“B或C”或者“A、B或C”。

本公开中使用的缩写包括：

参考下列结合对构成本公开的一部分的全部附图和实施例的说明可更易于理解本发明。应当理解，本发明不限于本文所描述或示出的具体化合物、方法、条件或参数，并且本文所用术语仅用于以举例方式描述具体实施方案，并不旨在限制任何受权利要求书保护的本发明。类似地，除非另外特别说明，否则关于可能的机制或作用模式或改善原因的任何描述仅旨在出于示例性目的，并且本文的发明不受任何此类建议的机制或作用模式或改善原因的正确或错误的约束。

本发明的放射性缀合物

本发明的实施方案涉及用于用放射性缀合物靶向hK2以在前列腺癌患者中实现有效的癌细胞死亡(例如，肿瘤细胞死亡)的组合物和方法。如本文所用，“免疫缀合物”是指缀合(接合，例如，经由共价键结合)至第二分子诸如毒素、药物、放射性金属离子、螯合剂、放射性金属络合物等的抗体或抗原结合结构域。“放射性缀合物”(本文也称为“放射性免疫缀合物”)特别是指缀合(接合，例如，经由共价键结合)至至少一种放射性金属络合物的抗体或抗原结合结构域。换句话说，放射性缀合物是指至少一种与抗体或抗原结合结构域接合(例如，经由共价键结合)的放射性金属络合物。放射性缀合物可包括至少一种包含连接基的放射性金属络合物，其中放射性金属络合物经由连接基与抗体或抗原结合结构域接合。

如本文所用，“抗体-螯合剂络合物”或“缀合物中间体”或“药物物质中间体”是指放射性缀合物的前体，放射性缀合物包含缀合(接合，例如，经由共价键结合)至不包含放射性金属的螯合剂的抗体或抗原结合结构域。缀合物中间体可包含连接基，其中螯合剂经由连接基与抗体或抗原结合结构域接合。在放射性金属螯合至缀合物中间体的螯合剂之后，其变成放射性缀合物。例如，“DOTA-mAb”是指包含缀合至抗体的DOTA的缀合物中间体。缀合物中间体的示例是DOTA-h11B6。如本文所用，“DOTA-h11B6”是包含任选地经由连接基缀合至h11B6的DOTA的缀合物中间体。DOTA-mAb的非限制性示例示于图5A至图5C中。缀合物中间体的另一个示例是TOPA-h11B6。如本文所用，“TOPA-h11B6”是包含任选地经由连接基缀合至h11B6的TOPA的缀合物中间体。TOPA-mAb的非限制性示例示于图6A至图6C中。

螯合剂可根据本领域已知的方法缀合至抗体；例如，螯合剂可经由连接基缀合至抗体。因此，本发明的放射性缀合物和缀合物中间体可包含通过连接基与抗体接合的螯合剂。如本文所用，术语“连接基”通常是指将螯合剂接合到抗体或抗原结合结构域的化学部分。根据本公开，本领域技术人员已知的任何合适的连接基可用于本发明中。连接基可包含例如取代或未取代的烷基、取代或未取代的杂烷基部分、取代或未取代的芳基或杂芳基、聚乙二醇(PEG)连接基、肽连接基、基于糖的连接基或可裂解的连接基，诸如二硫键联或蛋白酶裂解位点，诸如缬氨酸-瓜氨酸-对氨基苄基(PAB)。

根据某些实施方案，螯合剂或螯合剂-连接基包含如本文所述的亲核部分或亲电部分。螯合剂或螯合剂-连接基的亲核基团或亲电基团与包含对应反应配偶体的抗体或抗原结合结构域的反应允许抗体或抗原结合结构域共价键联到螯合剂-连接基。如本文所用，关于式(I)、(II)、(III)、(IV)、(V)和(VI)的化合物，连接基(L₁)可与亲电部分或亲核部分(R₁₁)接合以形成-L₁-R₁₁。亲核基团的示例包括但不限于叠氮化物、胺和硫醇。亲电基团的示例包括但不限于胺反应性基团、硫醇反应性基团、炔基和环炔基。胺反应性基团优选地与伯胺(包括存在于每个多肽链的N-末端和赖氨酸残基的侧链中的伯胺)反应。胺反应性基团的示例包括但不限于N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)、取代的NHS(诸如磺基-NHS)、异硫氰酸酯(-NCS)、异氰酸酯(-NCO)、酯、羧酸、酰卤、酰胺、烷基酰胺以及四氟苯基酯和全氟苯基酯。硫醇反应性基团与硫醇或巯基(优选地存在于多肽半胱氨酸残基侧链中的硫醇)反应。硫醇反应性基团的示例包括但不限于迈克尔受体(例如，马来酰亚胺)、卤代乙酰基、酰卤、活化二硫化物和苯基噁二唑砜。

根据某些实施方案，缀合反应导致一个或多个螯合剂分子(例如，DOTA分子)添加到抗体(例如，h11B6 mAb)的赖氨酸侧链的ε氨基基团上。例如，1个、2个、3个、4个或5个DOTA分子可以缀合至抗体。根据某些实施方案，p-SCN-Bn-DOTA可与抗体反应以形成包含DOTA的缀合物中间体，如图5所示。图5A提供了包含DOTA的缀合物中间体的图示，其中未示出赖氨酸部分。图5B提供了包含DOTA的缀合物中间体的图示，其中表示了赖氨酸部分。图6B和图6C提供了包含根据本发明的另选的螯合剂的缀合物中间体的图示。

螯合剂与抗体的比率(CAR)，其表示每个抗体分子的螯合剂-连接基分子的数目，可以通过使用带有在线质量分析的RP-HPLC的完整质量分析来测量。根据某些实施方案，本发明的缀合物中间体(例如，DOTA-mAb诸如DOTA-h11B6)的平均CAR为约1至约8、约1至约7、或约1至约6、或约1至约5、或约1至约4、或约1至约3、或约2至约4、或约2至约3。

根据特定实施方案，本文所述的放射性缀合物包含缀合至抗体或抗原结合结构域的放射性金属络合物，该抗体或抗原结合结构域对激肽释放酶相关肽酶2(hK2)具有结合特异性。根据特定实施方案，放射性缀合物是放射性标记的抗体，该放射性标记的抗体包含缀合(接合)至放射性金属络合物的抗体。根据特定实施方案，放射性缀合物包含缀合至包含螯合剂和放射性金属的放射性金属络合物的抗体，诸如h11B6。在一些实施方案中，抗体共价结合至螯合剂。如本文所述，放射性金属络合物任选地包含连接基。

如本文所用，“放射性金属络合物”是指包含与作为大环化合物的螯合剂缔合的放射性金属离子的络合物。通常，放射性金属离子经由配位键合与大环化合物结合或配位。大环的杂原子可参与放射性金属离子与大环化合物的配位键合。大环化合物可被一个或多个取代基基团取代，并且除了大环的杂原子以外或另选地，该一个或多个取代基基团也可参与放射性金属离子与大环化合物的配位键合。螯合剂与放射性同位素之间可能的键联的其他示例包括客体-宿主结合，诸如离子键合、氢键合、范得瓦尔力或疏水相互作用。放射性金属络合物可任选地包含连接基，该连接基为将螯合剂接合到抗体或抗原结合结构域的化学部分。

如本文所用，术语“放射性金属”、“放射性同位素”、“放射性金属离子(radiometalion)”和“放射性金属离子(radioactive metal ion)”可互换使用并且是指发射粒子和/或光子的元素的一种或多种同位素。根据本发明可用于治疗应用的放射性同位素的非限制性示例包括例如β发射体或α发射体，诸如例如²²⁵Ac、¹⁷⁷Lu、³²P、⁴⁷Sc、⁶⁷Cu、⁷⁷As、⁸⁹Sr、⁹⁰Y、⁹⁹Tc、¹⁰⁵Rh、¹⁰⁹Pd、¹¹¹Ag、¹³¹I、¹³⁴Ce、¹⁴⁹Tb、¹⁵²Tb、¹⁵⁵Tb、¹⁵³Sm、¹⁵⁹Gd、¹⁶⁵Dy、¹⁶⁶Ho、¹⁶⁹Er、¹⁸⁶Re、¹⁸⁸Re、¹⁹⁴Ir、¹⁹⁸Au、¹⁹⁹Au、²¹¹At、²¹²Pb、²¹²Bi、²¹³Bi、²²³Ra、²⁵⁵Fm和²²⁷Th。根据本发明可用作显像剂的放射性同位素的其他非限制性示例包括发射γ的放射性同位素，诸如例如¹⁷⁷Lu、⁶²Cu、⁶⁴Cu、⁶⁷Ga、⁶⁸Ga、⁸⁶Y、⁸⁹Zr和¹¹¹In。在某些实施方案中，放射性金属离子为“治疗发射体”，意指可用于治疗应用的放射性金属离子。治疗发射体的示例包括但不限于β发射体或α发射体，诸如¹³²La、¹³⁵La、¹³⁴Ce、¹⁴⁴Nd、¹⁴⁹Tb、¹⁵²Tb、¹⁵⁵Tb、¹⁵³Sm、¹⁵⁹Gd、¹⁶⁵Dy、¹⁶⁶Ho、¹⁶⁹Er、¹⁷⁷Lu、¹⁸⁶Re、¹⁸⁸Re、¹⁹⁴Ir、¹⁹⁸Au、¹⁹⁹Au、²¹¹At、²¹²Pb、²¹²Bi、²¹³Bi、²²³Ra、²²⁵Ac、²⁵⁵Fm以及²²⁷Th、²²⁶Th、²³⁰U。优选地，本发明中使用的放射性金属离子为发射α的放射性金属离子，诸如锕-225(²²⁵Ac)。

注意，某些放射性金属可用作治疗剂(例如，²²⁵Ac)和/或显像剂(例如，¹¹¹In)。用作治疗剂的合适的放射性金属是能够减少或抑制癌细胞(诸如前列腺癌细胞)的生长或具体地讲杀死癌细胞(诸如前列腺癌细胞)的放射性金属。在某些实施方案中，本发明的放射性缀合物可递送细胞毒性有效载荷，其具有通过结合到癌细胞表面抗原上并引发细胞死亡而在肿瘤附近发射α和/或β粒子的能力。在某些实施方案中，本发明的放射性缀合物被内化到表达hk2的癌细胞中。

如本文所用，术语“225Ac”、“²²⁵Ac”或“Ac-225”是指锕-225，其为发射α的放射性金属。根据特定实施方案，²²⁵Ac的大约十天半衰期(约9.9天)足够长以能够制备本文所述的化合物，但是足够短以匹配缀合至放射性金属络合物(诸如h11B6)的抗体的循环药代动力学。²²⁵Ac在一系列步骤中衰变，其在达到稳定同位素²⁰⁹Bi之前最终发射四个α粒子，从而提供增加的化合物效能。

本发明的抗体

根据特定实施方案，本发明的放射性缀合物包括抗体，其为h11B6抗体。在美国专利10,100,125中描述了h11B6抗体的实施方案，该专利以引用方式并入本文。如本文所用，“h11B6抗体”或“h11B6 mAb”或“h11B6”或“hu11B6”是指对人激肽释放酶-2(hK2)具有结合特异性的抗体，其中该抗体包含(a)重链可变区和/或(b)轻链可变区，该重链可变区包含SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2和SEQ ID NO:3的氨基酸序列，该轻链可变区包含SEQ ID NO:4和SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6的氨基酸序列，其中重链可变区和轻链可变区包含来自一种或多种人抗体的框架氨基酸序列。

根据特定实施方案，本发明的放射性缀合物包含h11B6抗体，该抗体包含(a)重链可变区(VH)，该VH包含具有SEQ ID NO:1(SDYAWN)的氨基酸序列的VH CDR1、具有SEQ IDNO:2(YISYSGSTTYNPSLKS)的氨基酸序列的VH CDR2和具有SEQ ID NO:3的氨基酸序列(GYYYGSGF)的VH CDR3；和(b)轻链可变区(VL)，该VL包含具有SEQ ID NO:4(KASESVEYFGTSLMH)的氨基酸序列的VL CDR1、具有SEQ ID NO:5(AASNRES)的氨基酸序列的VL CDR2和具有SEQ ID NO:6(QQTRKVPYT)的氨基酸序列的VL CDR3。

上述六个氨基酸序列代表互补决定区(CDR)，如根据Kabat等人，(1991年)Sequences of Immunological Interest，第5版，NIH,Bethesda,Md.所定义的(其公开内容以引用方式并入本文)。在本说明书全文中使用Kabat编号方案(Kabat等人，1991年)。

根据特定实施方案，本发明的放射性缀合物包含h11B6抗体，该抗体包含重链可变区(VH)和/或轻链可变区(VL)，该重链可变区与SEQ ID NO:8的氨基酸序列具有至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少98％序列同一性，该轻链可变区与SEQ ID NO:9的氨基酸序列具有至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少98％序列同一性。

根据特定实施方案，本发明的放射性缀合物包含h11B6抗体，该抗体包含含有SEQID NO:8的氨基酸序列的重链可变区(VH)和含有SEQ ID NO:9的氨基酸序列的轻链可变区(VL)。

SEQ ID NO:8如下：

QVQLQESGPGLVKPSDTLSLTCAVSGNSITSDYAWNWIRQPPGKGLEWIGYISYSGSTTYNPSLKSRVTMSRDTSKNQFSLKLSSVTAVDTAVYYCATGYYYGSGFWGQGTLVTVSS

SEQ ID NO 9如下：

DIVLTQSPDSLAVSLGERATINCKASESVEYFGTSLMHWYQQKPGQPPKLLIYAASNRESGVPDRFSGSGSGTDFTLTISSLQAEDVAVYYCQQTRKVPYTFGQGTKLEIK

根据特定实施方案，本发明的放射性缀合物包含h11B6抗体，该抗体包含重链恒定区和/或轻链恒定区，该重链恒定区与SEQ ID NO:10的氨基酸序列具有至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少98％序列同一性，该轻链恒定区与SEQ ID NO:11的氨基酸序列具有至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少98％序列同一性。

根据特定实施方案，本发明的放射性缀合物包含h11B6抗体，该抗体包含含有SEQID NO:10的氨基酸序列的重链恒定区和/或含有SEQ ID NO:11的氨基酸序列的轻链恒定区。

SEQ ID NO:10如下：

A S T K G P S V F P L A P S S K S T S G G T A A L G C L V K D Y F P EP V T V S W N S G A L T S G V H T F P A V L Q S S G L Y S L S S V V T V P S SS L G T Q T Y I C N V N H K P S N T K V D K K V E P K S C D K T H T C P P C PA P E L L G G P S V F L F P P K P K D T L M I S R T P E V T C V V V D V S H ED P E V K F N W Y V D G V E V H N A K T K P R E E Q Y N S T Y R V V S V L T VL H Q D W L N G K E Y K C K V S N K A L P A P I E K T I S K A K G Q P R E P QV Y T L P P S R E E M T K N Q V S L T C L V K G F Y P SD I A V E W E S N G QP E N N Y K T T P P V L D SD G S F F L Y S K L T V D K S R W Q Q G N V F S CS V M H E A L H N H Y T Q K S L S L S P G K

SEQ ID NO:11如下：

R T V A A P S V F I F P P SD E Q L K S G T A S V V C L L N N F Y P RE A K V Q W K V D N A L Q S G N S Q E S V T E Q D S K D S T Y S L S S T L T LS K A D Y E K H K V Y A C E V T H Q G L S S P V T K S F N R G E C

根据特定实施方案，本发明的放射性缀合物包含h11B6抗体，该抗体包含重链和/或轻链，该重链与SEQ ID NO:12的氨基酸序列具有至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少98％序列同一性，该轻链与SEQ ID NO:13的氨基酸序列具有至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少98％序列同一性。

根据特定实施方案，本发明的放射性缀合物包含h11B6抗体，该抗体包含具有SEQID NO:12的氨基酸序列的重链和/或具有SEQ ID NO:13的氨基酸序列的轻链。

h11B6重链和轻链的氨基酸序列也在图7中示出。

根据特定实施方案，本发明的抗体(例如h11B6)包括完整的(即完全的)抗体(诸如IgA、IgD、IgE、IgG或IgM分子)，或由其组成。

根据特定实施方案，本发明的抗体(例如，h11B6)包括完整的IgG分子或其变体，或由其组成。IgG分子可具有任何已知的亚型，例如IgG1、IgG2、IgG3或IgG4。

根据特定实施方案，本发明的放射性缀合物包括h11B6抗体，其为IgG1抗体。根据特定实施方案，本发明的放射性缀合物包括h11B6抗体，其为IgG1κ同种型。根据特定实施方案，本发明的放射性缀合物包括h11B6抗体，其为IgG1抗体或其变体，诸如Fc变体。

根据一个实施方案，本发明的放射性缀合物包含任选地经由连接基缀合至DOTA的抗体。例如，h11B6抗体可缀合至DOTA以产生DOTA-h11B6缀合物中间体，然后将DOTA-h11B6螯合至²²⁵Ac以产生放射性缀合物²²⁵Ac-DOTA-h11B6。

根据某些实施方案，DOTA-h11B6通过根据已知方法将h11B6与DOTA衍生物p-SCN-Bn-DOTA(CAS注册号：127985-74-4；化学名：2-S-(4-异硫氰基苄基)-1,4,7,10-四氮杂环十二烷-1,4,7,10-四乙酸)化学缀合而形成，导致多个DOTA分子添加到h11B6 mAb的赖氨酸侧链的ε氨基基团。然后可将DOTA-h11B6螯合至²²⁵Ac以产生放射性缀合物²²⁵Ac-DOTA-h11B6。当施用给患者时，放射性缀合物²²⁵Ac-DOTA-h11B6可结合并内化于表达hK2的细胞内。

根据一个实施方案，本发明的放射性缀合物包含任选地经由连接基缀合至TOPA的抗体。例如，h11B6抗体可缀合至TOPA以产生TOPA-h11B6缀合物中间体，然后将TOPA-h11B6螯合至²²⁵Ac以产生放射性缀合物²²⁵Ac-TOPA-h11B6。

根据某些实施方案，TOPA-h11B6如WO 2020/229974或PCT/IB2021/060350中所述形成。然后可将TOPA-h11B6螯合至²²⁵Ac以产生放射性缀合物²²⁵Ac-TOPA-h11B6。当施用给患者时，放射性缀合物²²⁵Ac-TOPA-h11B6可结合并内化于表达hK2的细胞内。

根据一个实施方案，本发明的抗体，诸如h11B6抗体，可以如美国专利10,100,125和9,873,891中所述制备，这两篇专利以引用方式并入本文。在一些实施方案中，使用CHO-DG44细胞制备本发明的抗体，诸如h11B6。

用于产生抗体的方法在本领域中是众所周知的。例如，用于产生重组多肽的合适方法是本领域已知的，诸如在原核或真核宿主细胞中表达(例如，参见Sambrook&Russell，2000年，Molecular Cloning，A Laboratory Manual，第三版，Cold Spring Harbor,N.Y.，该文献中的相关公开内容以引用的方式并入本文)。

本发明的一个方面提供了编码本发明的抗体或其组分多肽链的分离的核酸分子。“核酸分子”包括DNA(例如，基因组DNA或互补DNA)分子和mRNA分子，其可以是单链或双链的。在一个实施方案中，核酸分子是cDNA分子。本领域技术人员应当理解，可以对核酸分子进行密码子优化以在特定宿主细胞内表达抗体多肽，例如在人细胞内表达(例如，参见Angov，2011年，Biotechnol.J.6(6):650-659)。

在一个特定实施方案中，本发明的核酸分子包含(a)SEQ ID NO:14的核苷酸序列，和/或(b)SEQ ID NO:15的核苷酸序列。

本发明的抗体变体

在一些实施方案中，设想了本文所提供的抗体的氨基酸序列修饰。例如，可能期望改善抗体的结合亲和力和/或其他生物特性，包括但不限于特异性、热稳定性、表达水平、效应子功能、糖基化(例如，岩藻糖基化)、降低的免疫原性或溶解度。因此，除本文所述的抗体之外，预期可制备抗体变体。例如，可通过将适当的核苷酸变化引入编码DNA和/或通过合成期望的抗体或多肽来制备抗体变体。本领域技术人员将理解，氨基酸变化可改变抗体的翻译后过程，诸如改变糖基化位点的数量或位置或改变膜锚固特征。

在一些实施方案中，本文提供的抗体例如通过将任何类型的分子共价连接至抗体而被化学修饰。抗体衍生物可包括已经例如通过糖基化、乙酰化、聚乙二醇化、磷酸化、酰胺化、通过已知保护/封闭基团的衍生化、蛋白水解裂解、与细胞配体或其他蛋白质的连接等被化学修饰的抗体。许多化学修饰中的任一种化学修饰可通过已知技术进行，这些技术包括但不限于特异性化学裂解、乙酰化、配制、衣霉素的代谢合成等。另外，抗体可含有一种或多种非典型氨基酸。

变体可以是编码抗体或多肽的一个或多个密码子的取代、缺失或插入，这导致氨基酸序列与天然序列抗体或多肽相比发生变化。氨基酸取代可以是用具有类似结构和/或化学特性的一个氨基酸替换另一个氨基酸的结果，诸如用丝氨酸替换亮氨酸，例如，保守氨基酸替换。本领域技术人员已知的标准技术可用于在编码本文提供的分子的核苷酸序列中引入突变，包括例如导致氨基酸取代的定点诱变和PCR介导的诱变。插入或缺失可任选地在约1至5个氨基酸的范围内。在某些实施方案中，取代、缺失或插入包括相对于原始分子少于25个氨基酸取代、少于20个氨基酸取代、少于15个氨基酸取代、少于10个氨基酸取代、少于5个氨基酸取代、少于4个氨基酸取代、少于3个氨基酸取代或少于2个氨基酸取代。在一个具体的实施方案中，取代是在一个或多个预测的非必需氨基酸残基处进行的保守氨基酸取代。所允许的变体可通过系统地对序列中的氨基酸进行插入、缺失或取代并针对全长或成熟天然序列所表现出的活性测试所得变体来确定。

氨基酸序列插入包括长度范围从一个残基到含有一百个或更多个残基的多肽的氨基和/或羧基末端融合物，以及单个或多个氨基酸残基的序列内插入。末端插入的示例包括具有N-末端甲硫氨酰残基的抗体。抗体分子的其他插入变体包括抗体的N-末端或C-末端与酶(例如，对于抗体导向的酶前药疗法来说)或多肽的融合物，这延长了抗体的血清半衰期。

“保守氨基酸取代”是其中氨基酸残基被具有带类似电荷的侧链的氨基酸残基替换的取代。本领域已经定义了具有带类似电荷的侧链的氨基酸残基家族。这些家族包括具有碱性侧链(例如，赖氨酸、精氨酸、组氨酸)、酸性侧链(例如，天冬氨酸、谷氨酸)、不带电荷的极性侧链(例如，甘氨酸、天冬酰胺、谷氨酰胺、丝氨酸、苏氨酸、酪氨酸、半胱氨酸)、非极性侧链(例如，丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、脯氨酸、苯丙氨酸、甲硫氨酸、色氨酸)、β-支链侧链(例如，苏氨酸、缬氨酸、异亮氨酸)和芳族侧链(例如，酪氨酸、苯丙氨酸、色氨酸、组氨酸)的氨基酸。另选地，突变可沿编码序列的全部或部分诸如通过饱和诱变随机引入，并且可筛选所得突变体的生物活性以鉴定保留活性的突变体。在诱变后，可表达所编码的蛋白质，并且可确定蛋白质的活性。

抗体的生物特性中的基本修饰是通过选择取代而实现的，这些取代对维持(a)多肽主链在取代区域中的结构，例如，作为折叠或螺旋构象；(b)分子在靶位点处的电荷或疏水性；或(c)侧链的本体的效果显著不同。另选地，(例如，在具有相似特性和/或侧链的氨基酸基团内)可进行保守取代，以便维持或不显著改变特性。氨基酸可根据其侧链特性的相似性来分组(参见例如，Lehninger，Biochemistry 73-75(第2版1975))：(1)非极性：Ala(A)、Val(V)、Leu(L)、Ile(I)、Pro(P)、Phe(F)、Trp(W)、Met(M)；(2)不带电荷极性：Gly(G)、Ser(S)、Thr(T)、Cys(C)、Tyr(Y)、Asn(N)、Gln(Q)；(3)酸性：Asp(D)、Glu(E)；和(4)碱性：Lys(K)、Arg(R)、His(H)。

另选地，天然存在的残基可基于常见的侧链特性分成几组：(1)疏水性：正亮氨酸、Met、Ala、Val、Leu、Ile；(2)中性亲水：Cys、Ser、Thr、Asn、Gln；(3)酸性：Asp、Glu；(4)碱性：His、Lys、Arg；(5)影响链取向的残基：Gly、Pro；和(6)芳族：Trp、Tyr、Phe。

非保守取代需要将这些类别中的一个类别的成员交换为另一类别。也可将此类经取代的残基引入保守取代位点或引入剩余(非保守)位点。

因此，在一个实施方案中，与hK2表位结合的抗体包含与本文所述抗体的氨基酸序列，例如本文所述的h11B6抗体的氨基酸序列至少35％、至少40％、至少45％、至少50％、至少55％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少99％相同的氨基酸序列。

本发明的螯合剂

根据特定实施方案，本发明的螯合剂是指金属(优选地放射性金属)可与其络合以形成放射性金属络合物的螯合剂。优选地，螯合剂为大环化合物。在某些实施方案中，螯合剂包含含有一个或多个杂原子(例如，氧和/或氮)作为环原子的大环(macrocycle/macrocyclic ring)。

根据特定的实施方案，螯合剂包含大环螯合部分。大环螯合部分的示例包括但不限于1,4,7,10-四氮杂环十二烷-1,4,7,10-四乙酸(DOTA)、S-2-(4-异硫氰基苄基)-1,4,7-三氮杂环壬烷-1,4,7-三乙酸(NOTA)、1,4,8,11-四氮杂环十二烷-1,4,8,11-四乙酸(TETA)、3,6,9,15-四氮杂双环[9.3.1]-十五碳-1(15),11,13-三烯-4-(S)-(4-异硫氰基苄基)-3,6,9-三乙酸(PCTA)、5-S-(4-氨基苄基)-1-氧杂-4,7,10-三氮杂环十二烷-4,7,10-三(乙酸)(DO3A)或它们的衍生物。在一些方面，该螯合剂为1,4,7,10-四氮杂环十二烷-1,4,7,10-四乙酸(DOTA)。在其他方面，该螯合剂为S-2-(4-异硫氰基苄基)-1,4,7-三氮杂环壬烷-1,4,7-三乙酸(NOTA)。在其他方面，该螯合剂为1,4,8,11-四氮杂环十二烷-1,4,8,11-四乙酸(TETA)。在其他方面，该螯合剂为3,6,9,15-四氮杂双环[9.3.1]-十五碳-1(15),11,13-三烯-4-(S)-(4-异硫氰基苄基)-3,6,9-三乙酸(PCTA)。在另外的方面，该螯合剂为5-S-(4-氨基苄基)-1-氧杂-4,7,10-三氮杂环十二烷-4,7,10-三(乙酸)(DO3A)。在其他方面，该螯合剂为DOTA、DFO、DTPA、NOTA或TETA。

在另选的实施方案中，该螯合剂包含为4,13-二氮杂-18-冠-6的衍生物的大环。4,13-二氮杂-18-冠-6可以多种方式制备(参见，例如，Gatto等人，Org.Synth.1990,68,227；DOI:10.15227/orgsyn.068.0227)。根据本发明的其他实施方案，该螯合剂为H₂bp18c6或H₂bp18c6衍生物，诸如在WO2020/229974中所述的那些。H₂bp18c6是指N,N'-双[(6-羧基-2-吡啶基)甲基]-4,13-二氮杂-18-冠-6，如本文所述。H₂bp18c6和H₂bp18c6衍生物也描述于例如Thiele等人，“An Eighteen-Membered Macrocyclic Ligand for Actinium-225Targeted Alpha Therapy”Angew.Chem.Int.Ed.(2017)56:14712-14717，和Roca-Sabio等人，“Macrocyclic Receptor Exhibiting Unprecedented Selectivity for LightLanthanides”J.Am.Chem.Soc.(2009)131,3331-3341中，其以引用方式并入本文。根据本发明适于使用的附加螯合剂描述于WO2018/183906和WO2020/106886中，其以引用方式并入本文。

如本文所用，术语“TOPA”是指本领域已知为H₂bp18c6的大环，并且可另选地被称为N,N'-双[(6-羧基-2-吡啶基)甲基]-4,13-二氮杂-18-冠-6或者被称为6,6'-((1,4,10,13-四氧杂-7,16-二氮杂环十八烷-7,16-二基)双(亚甲基))吡啶二羧酸。参见例如Roca-Sabio等人，

式(I)、(II)和(III)的螯合剂

根据本发明适于使用的附加螯合剂描述于WO2020/229974中，其以引用方式并入本文。根据特定实施方案，例如，如WO2020/229974中所述，该螯合剂具有式(I)的结构：

其中：

环A和环B各自独立地为6-10元芳基或5-10元杂芳基，其中环A和环B各自任选地被一个或多个取代基取代，所述取代基独立地选自由以下项组成的组：卤代基、烷基、烯基、环烷基、环烯基、芳基、杂环基、杂芳基、-OR₁₃、-SR₁₃、-(CH₂)_pCOOR₁₃、-OC(O)R₁₃、-N(R₁₃)₂、-CON(R₁₃)₂、-NO₂、-CN-OC(O)N(R₁₃)₂和X；

Z₁和Z₂各自独立地为–(C(R₁₂)₂)_m–或–(CH₂)_n-C(R₁₂)(X)-(CH₂)_n-；

每个X独立地为-L₁-R₁₁；

每个n独立地为0、1、2、3、4或5；

每个m独立地为1、2、3、4或5；

每个p独立地为0或1；

L₁不存在或为连接基；

R₁₁是亲核部分或亲电部分，或R₁₁包含抗体或抗原结合结构域；

每个R₁₂独立地为氢、烷基、环烷基、芳基、杂环基或杂芳基；

每个R₁₃独立地为氢或烷基；

R₁₄、R₁₅、R₁₆和R₁₇各自独立地为氢、烷基或X，

或另选地R₁₄和R₁₅和/或R₁₆和R₁₇与它们所附接的碳原子合在一起以形成任选地被X取代的5元或6元环烷基环；

前提条件是该螯合剂包含至少一个X，并且当X存在于环A或环B上时，L₁为连接基，或R₁₂和R₁₄-R₁₇中的至少一者不为氢。

根据本发明的实施方案，螯合剂包含至少一个X基团，其中X为-L₁-R₁₁，其中L₁不存在或为连接基，并且R₁₁为亲电部分或亲核部分，或R₁₁包含抗体或抗原结合结构域。当R₁₁为亲核或亲电部分时，此类部分可用于将螯合剂直接或经由连接基间接地附接到抗体或抗原结合结构域。根据优选的实施方案，R₁₁包含对hK2具有结合特异性的抗体，诸如h11B6。

在某些实施方案中，螯合剂包含单个X基团，并且优选地X基团的L₁为连接基。

本发明的螯合剂可在大环的碳原子中的任一者处、Z₁或Z₂位置处或在环A或环B上被X取代，前提条件是当环A或环B包含X基团时，L₁为连接基，或R₁₂和R₁₄-R₁₇中的至少一者不为氢(即Z₁、Z₂的碳原子和/或大环的碳中的至少一者例如被烷基基团诸如甲基或乙基取代)。优选地，此类位置处的取代不影响螯合剂对放射性金属离子，具体地²²⁵Ac的螯合效率，并且在一些实施方案中，取代可提高螯合效率。

在一些实施方案中，L₁不存在。当L₁不存在时，R₁₁直接结合(例如，经由共价键联)到螯合剂。

在一些实施方案中，L₁为连接基。如本文所用，关于式(I)、(II)、(III)、(IV)、(V)和(VI)的化合物，L₁是指将螯合剂接合到亲核部分、亲电部分、抗体或抗原结合结构域的化学部分。根据本公开，本领域技术人员已知的任何合适的连接基可用于本发明中。连接基可包含例如取代或未取代的烷基、取代或未取代的杂烷基部分、取代或未取代的芳基或杂芳基、聚乙二醇(PEG)连接基、肽连接基、基于糖的连接基或可裂解的连接基，诸如二硫键联或蛋白酶裂解位点，诸如缬氨酸-瓜氨酸-对氨基苄基(PAB)。适用的示例性连接基结构包括但不限于：

其中n为0至10的整数，优选地1至4的整数；并且m为0至12的整数，优选地0至6的整数。

在一些实施方案中，R₁₁为亲核部分或亲电部分。“亲核部分”或“亲核基团”是指在化学反应中提供电子对以形成共价键的官能团。“亲电部分”或“亲电基团”是指在化学反应中接受电子对以形成共价键的官能团。亲核基团与亲电基团反应，并且反之亦然，以在化学反应中形成新的共价键。本发明的螯合剂的亲核基团或亲电基团与包含对应反应配偶体的抗体或抗原结合结构域或其他化学部分(例如，连接基)的反应允许抗体或抗原结合结构域或化学部分共价键联到本发明的螯合剂。

亲核基团的示例性示例包括但不限于叠氮化物、胺和硫醇。亲电基团的示例性示例包括但不限于胺反应性基团、硫醇反应性基团、炔基和环炔基。胺反应性基团优选地与伯胺(包括存在于每个多肽链的N-末端和赖氨酸残基的侧链中的伯胺)反应。适用于本发明中的胺反应性基团的示例包括但不限于N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)、取代的NHS(诸如磺基-NHS)、异硫氰酸酯(-NCS)、异氰酸酯(-NCO)、酯、羧酸、酰卤、酰胺、烷基酰胺以及四氟苯基酯和全氟苯基酯。硫醇反应性基团与硫醇或巯基(优选地存在于多肽半胱氨酸残基侧链中的硫醇)反应。适用于本发明中的硫醇反应性基团的示例包括但不限于迈克尔受体(例如马来酰亚胺)、卤代乙酰基、酰卤、活化二硫化物和苯基噁二唑砜。

在特定实施方案中，R₁₁为-NH₂、-NCS(异硫氰酸酯)、-NCO(异氰酸酯)、-N₃(叠氮基)、炔基、环炔基、羧酸、酯、酰氨基、烷基酰胺、马来酰亚胺基、酰卤、四嗪或反式环辛烯，更具体地-NCS、-NCO、-N₃、炔基、环炔基、-C(O)R₁₃、-COOR₁₃、-CON(R₁₃)₂、马来酰亚胺基、酰卤(例如，-C(O)Cl、-C(O)Br)、四嗪或反式环辛烯，其中每个R₁₃独立地为氢或烷基。

在一些实施方案中，R₁₁为炔基、环炔基或叠氮基基团，从而允许使用点击化学反应将螯合剂附接到抗体或抗原结合结构域或其他化学部分(例如，连接基)。在此类实施方案中，可进行的点击化学反应为叠氮基(-N₃)与炔基或环炔基基团之间的Huisgen环加成或1,3-偶极环加成，以形成1,2,4-三唑连接基或部分。在一个实施方案中，螯合剂包含炔基或环炔基基团，并且抗体或抗原结合结构域或其他化学部分包含叠氮基基团。在另一个实施方案中，螯合剂包含叠氮基基团，并且抗体或抗原结合结构域或其他化学部分包含炔基或环炔基基团。

在某些实施方案中，R₁₁为具体地经由应变促进的叠氮-炔环加成(SPAAC)与叠氮化物基团反应的炔基基团，更优选地末端炔基基团或环炔基基团。可经由SPAAC与叠氮化物基团反应的环炔基基团的示例包括但不限于环辛炔基或双环壬炔基(BCN)、二氟化环辛炔基(DIFO)、二苯并环辛炔基(DIBO)、酮基-DIBO、二芳基氮杂环辛炔酮基(BARAC)、二苯并氮杂环辛炔基(DIBAC、DBCO、ADIBO)、二甲氧基氮杂环辛炔基(DIMAC)、二氟苯并环辛炔基(DIFBO)、单苯并环辛炔基(MOBO)和四甲氧基二苯并环辛炔基(TMDIBO)。

在一个特定实施方案中，R₁₁为二苯并氮杂环辛炔基(DIBAC、DBCO、ADIBO)，其具有以下结构：

在其中R₁₁为DBCO的此类实施方案中，DBCO可直接或经由连接基间接地共价连接到螯合剂，并且优选地经由连接基间接地附接到螯合剂。

在一些实施方案中，R₁₁包含抗体或抗原结合结构域。抗体或抗原结合结构域可经由共价键联直接连接到螯合剂，或经由连接基间接连接到螯合剂。根据优选的实施方案，R₁₁包含对hK2具有结合特异性的抗体，诸如h11B6。

根据本发明的实施方案，环A和环B中的每一者独立地为6-10元芳基或5-10元杂芳基。在另选的实施方案中，设想环A和环B中的每一者为任选取代的杂环基环，诸如噁唑啉。环A和环B各自可任选地且独立地被一个或多个取代基取代，所述取代基独立地选自由以下项组成的组：卤代基、烷基、烯基、环烷基、环烯基、芳基、杂环基、杂芳基、-OR₁₃、-SR₁₃、-(CH₂)_pCOOR₁₃、-OC(O)R₁₃、-N(R₁₃)₂、-CON(R₁₃)₂、-NO₂、-CN-OC(O)N(R₁₃)₂和X。适用于此目的的6至10元芳基基团的示例包括但不限于苯基和萘基。适用于此目的的5至10元杂芳基的示例包括但不限于吡啶基、噻唑基、异噻唑基、噁唑基、异噁唑基和咪唑基。5至10元杂芳基和6至10元芳基基团的合适取代基的示例包括但不限于-COOH、四唑基和-CH₂COOH。在优选的实施方案中，取代基为-COOH或四唑基，其为-COOH的等排体。

在某些实施方案中，环A和环B中的每一者独立地且任选地被一个或多个羧基基团取代，该羧基基团包括但不限于-COOH和-CH₂COOH。

在某些实施方案中，环A和环B中的每一者独立地且任选地被四唑基取代。

在一个实施方案中，环A和环B为相同的，例如环A和环B两者为吡啶基。在另一个实施方案中，环A和环B为不同的，例如环A和环B中的一者为吡啶基，并且另一者为苯基。

在一个特定实施方案中，环A和环B两者为被-COOH取代的吡啶基。

在一个特定实施方案中，环A和环B两者为被四唑基取代的吡啶基。

在另一个特定实施方案中，环A和环B两者为具有以下结构的吡啶甲酸基团：

根据本发明的实施方案，Z₁和Z₂各自独立地为–(C(R₁₂)₂)_m-或–(CH₂)_n-C(R₁₂)(X)-(CH₂)_n-；每个X独立地为-L₁-R₁₁；每个R₁₂独立地为氢、烷基、环烷基、芳基、杂环基或杂芳基；每个n独立地为0、1、2、3、4或5；并且每个m独立地为1、2、3、4或5。

在一些实施方案中，每个R₁₂独立地为氢或烷基，更优选地为氢、-CH₃或-CH₂CH₃。

在一些实施方案中，每个R₁₂为氢。

在一些实施方案中，Z₁和Z₂两者均为-(CH₂)_m-，其中每个m优选地为1。在此类实施方案中，大环、环A或环B的碳原子被X基团取代。

在一些实施方案中，Z₁和Z₂中的一者为-(CH₂)_n-C(R₁₂)(X)-(CH₂)_n-并且另一者为-(CH₂)_m-。

在一些实施方案中，Z₁和Z₂-(CH₂)_n-C(R₁₂)(X)-(CH₂)_n-中的一者和另一者为-(CH₂)_m-；每个n为0；m为1；X为-L₁-R₁₁；并且L₁为连接基。

在一些实施方案中，Z₁和Z₂两者均为-(CH₂)_m-；每个m独立地为0、1、2、3、4或5，优选地每个m为1；并且R₁₄、R₁₅、R₁₆和R₁₇中的一者为X，并且R₁₄、R₁₅、R₁₆和R₁₇中的其余者各自为氢。

在一些实施方案中，R₁₄和R₁₅与它们所附接的碳原子合在一起以形成5元或6元环烷基环(即，环戊基或环己基)。此类5元或6元环烷基环可被X基团取代。

在一些实施方案中，R₁₆和R₁₇与它们所附接的碳原子合在一起以形成5元或6元环烷基环(即，环戊基或环己基)。此类5元或6元环烷基环可被X基团取代。

在某些实施方案中，螯合剂具有式(II)的结构：

其中：

A₁为N或CR₁或不存在；

A₂为N或CR₂；

A₃为N或CR₃；

A₄为N或CR₄；

A₅为N或CR₅；

A₆为N或CR₆或不存在；

A₇为N或CR₇；

A₈为N或CR₈；

A₉为N或CR₉；

A₁₀为N或CR₁₀；

前提条件是A₁、A₂、A₃、A₄和A₅中不超过三者为N，并且A₆、A₇、A₈、A₉和A₁₀中不超过三者为N；

R₁、R₂、R₃、R₄、R₅、R₆、R₇、R₈、R₉和R₁₀各自独立地选自由以下项组成的组：氢、卤代基、烷基、烯基、环烷基、环烯基、芳基、杂环基、杂芳基、-OR₁₃、-SR₁₃、-(CH₂)_pCOOR₁₃、-OC(O)R₁₃、-N(R₁₃)₂、-CON(R₁₃)₂、-NO₂、-CN-OC(O)N(R₁₃)₂和-X，

或者，另选地，任两个直接相邻的R₁、R₂、R₃、R₄、R₅、R₆、R₇、R₈、R₉和R₁₀与它们所附接的原子合在一起以形成五元或六元取代或未取代的碳环或含氮环；

并且Z₁、Z₂、X、n、m、p、L₁和R₁₁-R₁₇如上文对于式(I)所述的，

前提条件是该螯合剂包含至少一个X，并且当R₁、R₂、R₃、R₄、R₅、R₆、R₇、R₈、R₉和R₁₀中任一者为X时，则L₁为连接基，或R₁₂和R₁₄-R₁₇中至少一者不是氢。

在一些实施方案中，任两个直接相邻的R₁、R₂、R₃、R₄、R₅、R₆、R₇、R₈、R₉和R₁₀与它们所附接的原子合在一起以形成五元或六元取代或未取代的碳环或含氮环。可形成的此类碳环的示例包括但不限于萘基。可形成的此类含氮环的示例包括但不限于喹啉基。碳环或含氮环可为未取代的或被一个或多个合适的取代基，例如-COOH、-CH₂COOH、四唑基等取代。

在一些实施方案中，L₁不存在。当L₁不存在时，R₁₁直接结合(例如，经由共价键联)到螯合剂。

在一些实施方案中，L₁为连接基。根据本公开，本领域技术人员已知的任何合适的连接基可用于本发明中，诸如上述的那些。

在一些实施方案中，A₁、A₂、A₃、A₄和A₅中的一者为氮，A₁、A₂、A₃、A₄和A₅中的一者是被-COOH取代的碳并且其余者为CH，即形成被羧酸取代的吡啶基环。

在一些实施方案中，A₆、A₇、A₈、A₉和A₁₀中的一者为氮，A₆、A₇、A₈、A₉和A₁₀中的一者是被-COOH取代的碳，并且其余者为CH，即形成被羧酸取代的吡啶基环。

在一个实施方案中，R₁、R₂、R₃、R₄和R₅中的至少一者为-COOH。在一个实施方案中，R₆、R₇、R₈、R₉和R₁₀中的至少一者为-COOH。在另一个实施方案中，R₁、R₂、R₃、R₄和R₅中的至少一者为-COOH；并且R_6，R₇、R₈、R₉和R₁₀中的至少一者为-COOH。

在一些实施方案中，A₁和A₁₀各自为氮；A₂为CR₂且R₂为-COOH；A₉为CR₉且R₉为-COOH；A₃-A₈各自分别为CR₂、CR₃、CR₄、CR₅、CR₆、CR₇和CR₈；并且R₃至R₈各自为氢。

在一些实施方案中，A₁、A₂、A₃、A₄和A₅中的一者为氮，A₁、A₂、A₃、A₄和A₅中的一者为被四唑基取代的碳，并且其余者为CH。

在一些实施方案中，A₆、A₇、A₈、A₉和A₁₀中的一者为氮，A₆、A₇、A₈、A₉和A₁₀中的一者为被四唑基取代的碳，并且其余者为CH。

在一个实施方案中，R₁、R₂、R₃、R₄和R₅中的至少一者为四唑基。在一个实施方案中，R₆、R₇、R₈、R₉和R₁₀中的至少一者为四唑基。在另一个实施方案中，R₁、R₂、R₃、R₄和R₅中的至少一者为四唑基；并且R6，R₇、R₈、R₉和R₁₀中的至少一者为四唑基。

在一些实施方案中，每个R₁₂为氢。

在一些实施方案中，R₁₁为炔基基团或环炔基基团，优选环辛炔基或环辛炔基衍生物，例如DBCO。

在式(II)的螯合剂的特定实施方案中：

A₁和A₁₀各自为氮；

A₂为CR₂且R₂为-COOH；

A₉为CR₉且R₉为-COOH；

A₃-A₈各自分别为CR₂、CR₃、CR₄、CR₅、CR₆、CR₇和CR₈；

R₃至R₈各自为氢；

Z₁和Z₂中的一者为-(CH₂)_m，并且Z₁和Z₂中的另一者为–(CH₂)_n-C(R₁₂)(X)-(CH₂)_n-；

R₁₂为氢；

m为1；

每个n为0；

X为-L₁-R₁₁，其中L₁为连接基并且-R₁₁为亲电基团，例如，环辛炔基或环辛炔基衍生物诸如DBCO；和

R₁₄-R₁₇各自为氢，或另选地R₁₆和R₁₇与它们所附接的碳原子合在一起以形成5元或6元环烷基环。

在某些实施方案中，螯合剂具有式(III)的结构：

其中：

每个A₁₁独立地为O、S、NMe或NH；

每个R₁₈独立地选自由以下项组成的组：氢、卤代基、烷基、烯基、环烷基、环烯基、芳基、杂环基、杂芳基、-OR₁₃、-SR₁₃、-COOR₁₃、-OC(O)R₁₃、-N(R₁₃)₂、-CON(R₁₃)₂、-NO₂、-CN-OC(O)N(R₁₃)₂和-X，

并且Z₁、Z₂、X、n、m、L₁、R₁₁-R₁₇如上文对于式(I)所述，

前提条件是该螯合剂包含至少一个X，并且R₁₈为X时，则L₁为连接基，或R₁₂和R₁₄-R₁₇中的至少一者不为氢。

在一些实施方案中，每个A₁₁相同，并且每个A₁₁为O、S、NMe或NH。例如，每个A₁₁可为S。在其他实施方案中，每个A₁₁不同，并且各自独立地选自O、S、NMe和NH。

在一些实施方案中，每个R₁₈独立地为-(CH₂)_p-COOR₁₃或四唑基，其中R₁₃为氢并且每个p独立地为0或1。

在一些实施方案中，每个R₁₈为COOH。

在一些实施方案中，每个R₁₈为-CH₂COOH。

在一些实施方案中，每个R₁₈为四唑基。

在式(III)的螯合剂的特定实施方案中：

每个R₁₈为COOH；

Z₁和Z₂中的一者为-(CH₂)_m，并且Z₁和Z₂中的另一者为–(CH₂)_n-C(R₁₂)(X)-(CH₂)_n-；

R₁₂为氢；

m为1；每个n为0；

X为-L₁-R₁₁，其中L₁为连接基并且-R₁₁为亲电基团，例如环辛炔基或环辛炔基衍生物诸如DBCO或BCN；和

R₁₄-R₁₇各自为氢，或另选地R₁₆和R₁₇与它们所附接的碳原子合在一起以形成5元或6元环烷基环。

在本发明的特定实施方案中，螯合剂选自由以下项组成的组：

其中：

L₁不存在或为连接基；

R₁₁为亲核部分或亲电部分，或R₁₁包含抗体或抗原结合结构域(例如，h11B6)；和

每个R₁₂独立地为氢、-CH₃或-CH₂CH₃，前提条件是至少一个R₁₂为-CH₃或-CH₂CH₃。

在一些实施方案中，R₁₁为-NH₂、-NCS、-NCO、-N₃、炔基、环炔基、-C(O)R₁₃、-COOR₁₃、-CON(R₁₃)₂、马来酰亚胺基、酰卤、四嗪或反式环辛烯。

在某些实施方案中，R₁₁为环辛炔基或选自由以下项组成的组的环辛炔基衍生物：双环壬炔基(BCN)、二氟化环辛炔基(DIFO)、二苯并环辛炔基(DIBO)、酮基-DIBO、二芳基氮杂环辛炔酮基(BARAC)、二苯并氮杂环辛炔基(DIBAC、DBCO、ADIBO)、二甲氧基氮杂环辛炔基(DIMAC)、二氟苯并环辛炔基(DIFBO)、单苯并环辛炔基(MOBO)和四甲氧基二苯并环辛炔基(TMDIBO)。

优选地，R₁₁为炔基基团或环炔基基团，更优选地环炔基基团，例如DBCO或BCN。

本发明的示例性螯合剂包括但不限于：

此类螯合剂可共价附接到抗体或抗原结合结构域，以通过使螯合剂与叠氮化物标记的抗体或抗原结合结构域反应以经由点击化学反应形成1,2,3-三唑连接基来形成免疫缀合物或放射性免疫缀合物，如WO 2020/229974中描述的。

根据本公开，本发明的螯合剂可通过本领域已知的任何方法产生。例如，侧芳族/杂芳族基团可通过本领域已知的方法(诸如WO 2020/229974中举例说明和描述的那些)附接到大环部分。

式(IV)、(V)和(VI)的螯合剂

根据本发明适于使用的附加螯合剂描述于PCT/IB2021/060350中，其以引用方式并入本文。根据特定实施方案，例如，如PCT/IB2021/060350中所述，该螯合剂具有式(IV)的结构：

或其药学上可接受的盐，其中：

R₁为氢并且R₂为-L₁-R₄；

另选地，R₁为-L₁-R₄并且R₂为氢；

R₃为氢；

另选地，R₂和R₃与它们所附接的碳原子合在一起以形成5元或6元环烷基，其中所述5元或6元环烷基任选地被-L₁-R₄取代；

L₁不存在或为连接基；和

R₄为亲核部分、亲电部分、或抗体或抗原结合结构域(例如，h11B6)。

在一些实施方案中，L₁不存在。当L₁不存在时，R₄直接结合(例如，经由共价键联)到化合物。

在一些实施方案中，L₁为连接基。如本文所用，术语“连接基”是指将本发明的化合物接合到亲核部分、亲电部分、或抗体或抗原结合结构域的化学部分。根据本公开，本领域技术人员已知的任何合适的连接基可用于本发明中。连接基可具有例如取代或未取代的烷基、取代或未取代的杂烷基部分、取代或未取代的芳基或杂芳基、聚乙二醇(PEG)连接基、肽连接基、基于糖的连接基或可裂解的连接基，诸如二硫键联或蛋白酶裂解位点，诸如缬氨酸-瓜氨酸-对氨基苄基(PAB)。适用于本发明的示例性连接基结构包括但不限于：

其中m为0至12的整数。

在一些实施方案中，R₄为亲核部分或亲电部分。“亲核部分”或“亲核基团”是指在化学反应中提供电子对以形成共价键的官能团。“亲电部分”或“亲电基团”是指在化学反应中接受电子对以形成共价键的官能团。亲核基团与亲电基团反应，并且反之亦然，以在化学反应中形成新的共价键。本发明的化合物的亲核基团或亲电基团与包含对应反应配偶体的抗体或抗原结合结构域或其他化学部分(例如，连接基)的反应允许抗体或抗原结合结构域或化学部分共价键联到本发明的化合物。

亲核基团的示例包括但不限于叠氮化物、胺和硫醇。亲电基团的示例包括但不限于胺反应性基团、硫醇反应性基团、炔基和环炔基。胺反应性基团优选地与伯胺(包括存在于每个多肽链的N-末端和赖氨酸残基的侧链中的伯胺)反应。适用于本发明中的胺反应性基团的示例包括但不限于N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)、取代的NHS(诸如磺基-NHS)、异硫氰酸酯(-NCS)、异氰酸酯(-NCO)、酯、羧酸、酰卤、酰胺、烷基酰胺以及四氟苯基酯和全氟苯基酯。硫醇反应性基团与硫醇或巯基(优选地存在于多肽半胱氨酸残基侧链中的硫醇)反应。适用于本发明中的硫醇反应性基团的示例包括但不限于迈克尔受体(例如马来酰亚胺)、卤代乙酰基、酰卤、活化二硫化物和苯基噁二唑砜。

在某些实施方案中，R₄为-NH₂、-NCS(异硫氰酸酯)、-NCO(异氰酸酯)、-N₃(叠氮基)、炔基、环炔基、羧酸、酯、酰氨基、烷基酰胺、马来酰亚胺基、酰卤、四嗪或反式环辛烯，更具体地-NCS、-NCO、-N₃、炔基、环炔基、-C(O)R₁₃、-COOR₁₃、-CON(R₁₃)₂、马来酰亚胺基、酰卤(例如，-C(O)Cl、-C(O)Br)、四嗪或反式环辛烯，其中每个R₁₃独立地为氢或烷基。

在一些实施方案中，R₄为炔基、环炔基或叠氮基基团，从而允许使用点击化学反应将本发明的化合物附接到抗体或抗原结合结构域或其他化学部分(例如，连接基)。在此类实施方案中，可进行的点击化学反应为叠氮基(-N₃)与炔基或环炔基基团之间的Huisgen环加成或1,3-偶极环加成，以形成1,2,4-三唑连接基或部分。在一个实施方案中，本发明的化合物包含炔基或环炔基基团，并且抗体或抗原结合结构域或其他化学部分包含叠氮基基团。在另一个实施方案中，本发明的化合物包含叠氮基基团，并且抗体或抗原结合结构域或其他化学部分包含炔基或环炔基基团。

在某些实施方案中，R₄为具体地经由应变促进的叠氮-炔环加成(SPAAC)与叠氮化物基团反应的炔基基团，更优选地末端炔基基团或环炔基基团。可经由SPAAC与叠氮化物基团反应的环炔基基团的示例包括但不限于环辛炔基或双环壬炔基(BCN)、二氟化环辛炔基(DIFO)、二苯并环辛炔基(DIBO)、酮基-DIBO、二芳基氮杂环辛炔酮基(BARAC)、二苯并氮杂环辛炔基(DIBAC、DBCO、ADIBO)、二甲氧基氮杂环辛炔基(DIMAC)、二氟苯并环辛炔基(DIFBO)、单苯并环辛炔基(MOBO)和四甲氧基二苯并环辛炔基(TMDIBO)。

在某些实施方案中，R₄为二苯并氮杂环辛炔基(DIBAC、DBCO、ADIBO)，其具有以下结构：

在其中R₄为DBCO的实施方案中，DBCO可直接或经由连接基间接地共价连接到化合物，并且优选地经由连接基间接地附接到化合物。

在某些实施方案中，R₄包含抗体或抗原结合结构域。抗体或抗原结合结构域可经由共价键联直接连接到化合物，或经由连接基间接连接到化合物。在优选的实施方案中，抗体或抗原结合结构域对hK2具有结合特异性，诸如h11B6。

在另一个实施方案中，螯合剂涉及式(V)的化合物：

或其药学上可接受的盐，其中：

L₁不存在或为连接基；和

R₄为亲核部分、亲电部分、或抗体或抗原结合结构域。

在另一个实施方案中，螯合剂为式(VI)的化合物：

或其药学上可接受的盐，其中：

L₁不存在或为连接基；和

R₄为亲核部分、亲电部分、或抗体或抗原结合结构域(例如，h11B6)。

在另一个实施方案中，螯合剂为如上所述的化合物，其中：R₁为-L₁-R₄；R₂和R₃与它们所附接的碳原子合在一起以形成5元或6元环烷基；L₁不存在或为连接基；并且R₄为亲核部分、亲电部分、或抗体或抗原结合结构域；或其药学上可接受的盐。

在另一个实施方案中，螯合剂为如上所述的化合物，其中R₁为H；R₂和R₃与它们所附接的碳原子合在一起以形成被-L₁-R₄取代的5元或6元环烷基；L₁不存在或为连接基；并且R₄为亲核部分、亲电部分、或抗体或抗原结合结构域；或其药学上可接受的盐：

上述螯合剂的附加的实施方案包括其中R₄为抗体的那些。根据优选的实施方案，R₄包含对hK2具有结合特异性的抗体，诸如h11B6。

在一个实施方案中，螯合剂为独立地选自由以下化合物及其药学上可接受的盐的组成的组的任一者或多者：

其中n为1至10。

在一个实施方案中，本发明的放射性缀合物包含下式的螯合剂或其药学上可接受的盐：

所述螯合剂可共价附接到抗体或抗原结合结构域(例如，h11B6)，以通过使化合物与叠氮化物标记的抗体或抗原结合结构域反应以例如经由点击化学反应形成1,2,3-三唑连接基来形成免疫缀合物或放射性免疫缀合物，如WO2020/229974中描述的，或者如PCT/IB2021/060350中描述的。

根据本公开，本发明的螯合剂、放射性金属络合物和放射性免疫缀合物可通过本领域已知的任何方法产生；例如，侧芳族/杂芳族基团可通过本领域已知的方法(诸如WO2020/229974和PCT/IB2021/060350中举例说明和描述的那些)附接到大环部分。

化学命名

本领域技术人员理解，可以使用通常公认的命名系统和符号来命名或鉴定化合物结构。以举例的方式，该化合物可以用通用名、系统名或非系统名来命名或鉴定。化学领域通常认可的命名系统和符号包括但不限于化学文摘服务(CAS)和国际纯粹与应用化学联合会(IUPAC)。

通常，对某种元素诸如氢或H的提及意在包括该元素的所有同位素。例如，如果将R基团定义为包括氢或H，则其还包括氘和氚。包含放射性同位素诸如氚、C¹⁴、P³²和S³⁵的化合物因此在本技术的范围内。基于本文的公开内容，将此类标记物插入本技术的化合物中的方法对于本领域技术人员而言将是显而易见的。

术语“取代的”是指至少一个氢原子被非氢基团置换，前提条件是保持所有正常化合价并且取代产生稳定的化合物。当特定基团被“取代”时，该基团可具有一个或多个取代基，优选地一至五个取代基，更优选地一至三个取代基，最优选地一至二个取代基，这些取代基独立地选自取代基列表。例如，“取代的”是指如以下定义的有机基团(例如，烷基基团)，其中一个或多个与其中所含的氢原子的键被与非氢原子或非碳原子的键置换。取代的基团还包括其中一个或多个与碳原子或氢原子的键被一个或多个与杂原子的键(包括双键或三键)置换。因此，除非另有说明，否则取代的基团被一个或多个取代基取代。在一些实施方案中，取代的基团被1、2、3、4、5或6个取代基取代。取代基基团的示例包括：卤素(即，F、Cl、Br和I)；羟基；烷氧基、烯氧基、芳氧基、芳烷氧基、杂环基、杂环基烷基、杂环氧基和杂环烷氧基基团；羰基(氧代)；羧酸盐；酯；氨基甲酸酯；肟；羟胺；烷氧基胺；芳烷氧基胺；硫醇；硫化物；亚砜；砜；磺酰基；五氟硫烷基(即SF)、磺酰胺；胺；N-氧化物；肼；酰肼；腙；叠氮化物；酰胺；脲；脒；胍；烯胺；酰亚胺；异氰酸酯；异硫氰酸酯；氰酸酯；硫氰酸酯；亚胺；硝基；腈(即，CN)；等。当参考取代基使用时，术语“独立地”是指当可能有多于一个此类取代基时，此类取代基可彼此相同或不同。

取代的环基团诸如取代的环烷基、芳基、杂环基和杂芳基基团还包括环和环系，其中与氢原子的键被与碳原子的键置换。因此，取代的环烷基、芳基、杂环基和杂芳基基团也可以被如以下定义的取代或未取代的烷基、烯基和炔基基团取代。

如本文所用，当在基团之前使用时，Cm-Cn诸如C₁-C₁₁、C₁-C₈或C₁-C₆是指含有m至n个碳原子的基团。

烷基基团包括具有1个至12个碳原子，并且通常1个至10个碳，或在一些实施方案中，1个至8个、1个至6个或1个至4个碳原子的直链和支链烷基基团；例如，烷基基团可含有1个至12个碳原子(C_1-12烷基)、或1个至8个碳原子(C_1-8烷基)、或1个至6个碳原子(C_1-6烷基)。直链烷基基团的示例包括诸如甲基、乙基、正丙基、正丁基、正戊基、正己基、正庚基和正辛基基团的基团。支链烷基基团的示例包括但不限于异丙基、异丁基、仲丁基、叔丁基、新戊基、异戊基和2,2-二甲基丙基基团。烷基基团可为取代或未取代的。代表性的取代的烷基基团可以被诸如以上列出的那些的取代基取代一次或多次，并且包括但不限于卤代烷基(例如，三氟甲基)、羟烷基、硫代烷基、氨基烷基、烷基氨基烷基、二烷基氨基烷基、烷氧基烷基、羧基烷基等。

环烷基基团包括单环、二环或三环烷基基团，其在环中具有3至12个碳原子，或在一些实施方案中，3至10个、3至8个或3至4个、5个或6个碳原子。示例性单环环烷基基团包括但不限于环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基和环辛基基团。在一些实施方案中，环烷基基团具有3至8个环成员，而在其他实施方案中，环碳原子的数目范围为3至5、3至6或3至7。二环和三环环系包括桥环烷基基团和稠环，诸如但不限于二环[2.1.1]己烷、金刚烷基、十氢萘基等。环烷基基团可为取代或未取代的。取代的环烷基基团可以被如以上所定义的非氢基团和非碳基团取代一次或多次。然而，取代的环烷基基团还包括被如以上所定义的直链或支链烷基取代的环。代表性的取代的环烷基基团可以被单取代或取代多于一次，诸如但不限于可以被诸如以上所列那些的取代基取代的2,2-二取代的、2,3-二取代的、2,4-二取代的、2,5-二取代的或2,6-二取代的环己基基团。

环烷基烷基基团是如以上所定义的烷基基团，其中烷基基团的氢键或碳键被与如上定义的环烷基基团的键置换。在一些实施方案中，环烷基烷基基团具有4至16个碳原子、4至12个碳原子，并且通常4至10个碳原子。环烷基烷基基团可为取代或未取代的。取代的环烷基烷基基团可以在该基团的烷基部分、环烷基部分或烷基部分和环烷基部分两者处被取代。代表性的取代的环烷基烷基基团可以被单取代或取代多于一次，诸如但不限于被诸如以上所列那些的取代基单取代、二取代或三取代。

烯基基团包括如以上所定义的直链和支链烷基基团，除了在两个碳原子之间存在至少一个双键。烯基基团具有2至12个碳原子，并且通常2至10个碳，或在一些实施方案中，2至8个、2至6个或2至4个碳原子。在一些实施方案中，烯基可具有一个碳-碳双键或多个碳-碳双键，诸如2个、3个、4个或更多个碳-碳双键。烯基基团的示例包括但不限于次甲基、乙烯基、丙烯基、丁烯基等。烯基基团可为取代的或未取代的。代表性的取代的烯基基团可以被单取代或取代多于一次，诸如但不限于被诸如以上所列那些的取代基单取代、二取代或三取代。

环烯基基团包括如以上所定义的环烷基基团，其在两个碳原子之间具有至少一个双键。环烯基基团可为在环中具有3个至12个、更优选地3个至8个碳原子并且在两个碳原子之间包含至少一个双键的单环或多环烷基基团。环烯基基团可为取代或未取代的。在一些实施方案中，环烯基基团可具有一个、两个或三个双键或多个碳-碳双键，诸如2个、3个、4个或更多个碳-碳双键，但不包含芳族化合物。环烯基基团具有3至14个碳原子，或在一些实施方案中，5至14个碳原子、5至10个碳原子、或甚至5个、6个、7个或8个碳原子。环烯基基团的示例包括环己烯基、环戊烯基、环己二烯基、环丁二烯基和环戊二烯基。

环烯基烷基基团是如以上所定义的烷基基团，其中烷基基团的氢键或碳键被与如上定义的环烯基基团的键置换。环烯基烷基基团可为取代或未取代的。取代的环烯基烷基基团可以在该基团的烷基部分、环烯基部分或烷基部分和环烯基部分两者处被取代。代表性的取代的环烯基烷基基团可以被诸如以上所列那些的取代基取代一次或多次。

炔基基团包括如以上所定义的直链和支链烷基基团，除了在两个碳原子之间存在至少一个三键。炔基基团具有2至12个碳原子，并且通常2至10个碳，或在一些实施方案中，2至8个、2至6个或2至4个碳原子。在一些实施方案中，炔基基团具有一个、两个或三个碳-碳三键。示例包括但不限于-C＝CH、-C＝CCH₃、-CH₂C＝CCH₃、-C＝CCH₂CH(CH₂CH₃)₂等。炔基基团可为取代或未取代的。末端炔烃具有至少一个结合到三键碳原子的氢原子。代表性的取代的炔基基团可以被单取代或取代多于一次，诸如但不限于被诸如以上所列那些的取代基单取代、二取代或三取代。“环状炔烃”或“环炔基”为在两个碳原子之间包含至少一个三键的环烷基环。环状炔烃或环炔基基团的示例包括但不限于环辛炔、双环壬炔(BCN)、二氟化环辛炔(DIFO)、二苯并环辛炔(DIBO)、酮基-DIBO、二芳基氮杂环辛炔酮基(BARAC)、二苯并氮杂环辛炔(DIBAC)、二甲氧基氮杂环辛炔(DIMAC)、二氟苯并环辛炔(DIFBO)、单苯并环辛炔(MOBO)和四甲氧基DIBO(TMDIBO)。

芳基基团是不含杂原子的环状芳族烃。本文中的芳基基团包括单环、双环和三环环系。因此，芳基基团包括但不限于苯基、甘菊环基(azulenyl)、并环庚烯基(heptalenyl)、联苯基、芴基、菲基、蒽基、茚基、茚满基、并环戊二烯基(pentalenyl)和萘基基团。在一些实施方案中，芳基在基团的环部分中含有6-14个碳，并且在其他实施方案中含有6至12个或甚至6-10个碳原子。在一些实施方案中，芳基基团为苯基或萘基。芳基基团可为取代或未取代的。短语“芳基基团”包括含有稠环的基团，诸如稠合的芳族-脂族环系(例如茚满基、四氢萘基等)。代表性的取代的芳基基团可以是单取代的或被取代多于一次。例如，单取代的芳基基团包括但不限于可以被诸如以上所列那些的取代基取代的2-取代的、3-取代的、4-取代的、5-取代的或6-取代的苯基或萘基基团。芳基部分是熟知的，并且描述于例如Lewis,R.J.编辑，Hawley’s Condensed Chemical Dictionary，第13版，John Wiley&Sons,Inc.,NewYork(1997)。芳基基团可为单环结构(即单环)或包含为稠环结构的多环结构(即多环)。优选地，芳基基团为单环芳基基团。

烷氧基基团是其中与氢原子的键被与如以上所定义的取代或未取代的烷基基团的碳原子的键置换的羟基基团(-OH)。直链烷氧基基团的示例包括但不限于甲氧基、乙氧基、丙氧基、丁氧基、戊氧基、己氧基等。支链烷氧基具有的示例包括但不限于异丙氧基、仲丁氧基、叔丁氧基、异戊氧基、异己氧基等。环烷氧基基团的示例包括但不限于环丙氧基、环丁氧基、环戊氧基、环己氧基等。烷氧基基团可为取代或未取代的。代表性的取代的烷氧基基团可以被诸如以上所列那些的取代基取代一次或多次。

类似地，烷硫基或硫代烷氧基是指-SR基团，其中R为通过硫桥附接到母体分子的烷基，例如-S-甲基、-S-乙基等。烷硫基的代表性示例包括但不限于-SCH₃、-SCH₂CH₃等。

本文所用的术语“卤素”是指溴、氯、氟或碘。相应地，术语“卤代基”是指氟代基、氯代基、溴代基或碘代基。在一些实施方案中，卤素为氟。在其他实施方案中，卤素为氯或溴。

术语“羟基(hydroxy)”和“羟基(hydroxyl)”可互换使用并且是指-OH。

术语“羧基”是指-COOH。

术语“氰基”是指-CN。

术语“硝基”是指-NO₂。

术语“异硫氰酸酯”是指-N＝C＝S。

术语“异氰酸酯”是指-N＝C＝O。

术语“叠氮基”是指-N₃。

术语“氨基”是指-NH₂。术语“烷基氨基”是指其中附接到氮的氢原子中的一个或两个氢原被烷基基团取代的氨基基团。烷基胺基团可表示为-NR₂，其中每个R独立地为氢或烷基基团。例如，烷基胺包括甲胺(-NHCH₃)、二甲胺(-N(CH₃)₂)、-NHCH-₂CH₃等。如本文所用，术语“氨基烷基”旨在包括被一个或多个氨基基团取代的支链饱和脂族烃基团和直链饱和脂族烃基团两者。氨基烷基基团的代表性示例包括但不限于-CH₂NH₂、-CH₂CH₂NH₂和-CH₂CH(NH₂)CH₃。

如本文所用，“酰胺”是指-C(O)N(R)₂，其中每个R独立地为烷基基团或氢。酰胺的示例包括但不限于-C(O)NH₂、-C(O)NHCH₃和-C(O)N(CH₃)₂。

术语“羟基烷基”和“羟烷基”可互换使用，并且是指被一个或多个羟基基团取代的烷基基团。烷基可为支链或直链脂族烃。羟基烷基的示例包括但不限于羟甲基(-CH₂OH)、羟乙基(-CH₂CH2OH)等。

如本文所用，术语“杂环基”包括含有至少一个杂原子环成员(诸如硫、氧或氮)的稳定单环和多环烃。如本文所用，术语“杂芳基”包括含有至少一个杂原子环成员(诸如硫、氧或氮)的稳定单环和多环芳族烃。杂芳基可为单环或多环的，例如双环或三环的。含有杂原子的杂环基或杂芳基基团的每个环可含有一个或两个氧或硫原子和/或一至四个氮原子，前提条件是每个环中的杂原子总数为四个或更少，并且每个环具有至少一个碳原子。多环(例如双环或三环)的杂芳基基团必须包括至少一个全芳环，但另一个或多个稠环可为芳族或非芳族的。杂环基或杂芳基基团可附接在杂环基或杂芳基基团的任何环的任何可用的氮或碳原子处。优选地，术语“杂芳基”是指在至少一个环中具有至少一个杂原子(O、S或N)的5元或6元单环基团和9元或10元双环基团，其中含杂原子的环优选地具有选自O、S和/或N的1、2或3个杂原子、更优选地1或2个杂原子。杂芳基的氮杂原子可为取代或未取代的。另外，杂芳基的氮和硫杂原子可任选地被氧化(即，N→O和S(O)_r，其中r为0、1或2)。

术语“酯”是指-C(O)₂R，其中R为烷基。

术语“氨基甲酸酯”是指-OC(O)NR₂，其中每个R独立地为烷基或氢。

术语“醛”是指-C(O)H。

术语“碳酸酯”是指-OC(O)OR，其中R为烷基。

术语“马来酰亚胺”是指具有化学式H₂C₂(CO)₂NH的基团。术语“马来酰亚胺基”是指共价连接到另一基团或分子的马来酰亚胺基团。优选地，马来酰亚胺基团为N-连接的，例如：

术语“酰卤”是指-C(O)X，其中X为卤代基(例如Br、Cl)。示例性酰卤包括酰基氯(-C(O)Cl)和酰基溴(-C(O)Br)。

根据本领域中使用的惯例：

用于本文的结构式中以描述作为部分、官能团或取代基与核心、母体或主链结构(诸如本发明的抗原结合结构域)的附接点的键。

当任何变量在化合物的任何成分或式中出现不止一次时，它在每次出现时的定义独立于它在其他每次出现时的定义。因此，例如，如果基团示出被0-3个R基团取代，则所述基团可任选地被至多三个R基团取代，并且在每次出现时，R独立地选自R的定义。

当与取代基连接的键显示为与连接环中两个原子的键交叉时，则此类取代基可结合到环上的任何原子。

在某些实施方案中，放射性缀合物为²²⁵Ac-DOTA-h11B6，也被称为锕225-1,4,7,10-四氮杂环十二烷-1,4,7,10-四乙酸-h11B6。如本文所用，²²⁵Ac-DOTA-h11B6为包含螯合至DOTA的²²⁵Ac的放射性缀合物，其中所述DOTA任选地经由连接基缀合至h11B6。如本文所用，¹¹¹In-DOTA-h11B6为包含螯合至DOTA的¹¹¹In的放射性缀合物，其中所述DOTA任选地经由连接基缀合至h11B6。

在某些实施方案中，放射性缀合物可由以下化合物或其变体表示：

在某些实施方案中，放射性缀合物为²²⁵Ac-TOPA-h11B6。如本文所用，²²⁵Ac-TOPA-h11B6为包含螯合至TOPA的²²⁵Ac的放射性缀合物，其中所述TOPA任选地经由连接基缀合至h11B6。在一个实施方案中，²²⁵Ac-TOPA-h11B6放射性缀合物可由以下化合物或其变体表示，其也可被称为TOPA-[C7]-苯基硫脲-h11B6抗体缀合物：

在上述TOPA-[C7]-苯基硫脲-h11B6抗体缀合物中，结构未显示连接到苯基硫脲部分的h11b6的赖氨酸残基，如图6B和图6C所示。

药物组合物及使用方法

本发明的实施方案提供了治疗患者的癌症的方法，该方法包括向患者施用治疗有效量的放射性缀合物。根据一个实施方案，该方法包括向患者施用治疗有效量的药物组合物，该药物组合物包含放射性缀合物和一种或多种药学上可接受的赋形剂。

本发明的实施方案在治疗已被诊断患有前列腺癌的患者中特别有用；例如，患有晚期前列腺癌的患者。根据一个实施方案，该癌症是非限局性前列腺癌。根据另一个实施方案，该癌症是转移性前列腺癌。根据另一个实施方案，该癌症是去势抵抗性前列腺癌(CRPC)。根据另一个实施方案，该癌症是转移性去势抵抗性前列腺癌(mCRPC)。根据另一个实施方案，该癌症是伴有腺癌的mCRPC。根据特定实施方案，患者的睾酮去势水平为约50ng/dL或更低。根据附加的实施方案，患者先前已暴露于至少一种雄激素受体(AR)靶向疗法；例如，醋酸阿比特龙、恩扎鲁胺、阿帕他胺、达洛鲁胺或前述任一种的组合。根据附加的实施方案，患者先前进行过化学疗法；例如，化学疗法包括施用紫杉烷。根据另一个实施方案，患者先前进行过睾丸切除术或医学阉割。根据另一个实施方案，患者正在接受用促性腺激素释放激素(GnRH)激动剂或拮抗剂进行的雄激素去势疗法。

根据本文所述的治疗方法的实施方案，施用给患者的放射性缀合物包含至少一种缀合至对hK2具有结合特异性的抗体或抗原结合片段的放射性金属络合物。优选地，放射性缀合物包含至少一种缀合至对hK2具有结合特异性的抗体的放射性金属络合物。在优选的实施方案中，放射性金属络合物包含²²⁵Ac。

根据一个实施方案，药物组合物中的放射性金属为²²⁵Ac并且提供每剂药物组合物约50μCi至约350μCi的靶向放射性。根据附加的实施方案，药物组合物中的放射性金属提供每剂药物组合物约50μCi至约300μCi、或约50μCi至约250μCi、或约50μCi至约240μCi、或约50μCi至约230μCi、或约50μCi至约220μCi、或约50μCi至约210μCi、或约50μCi至约200μCi、或约50μCi至约175μCi、或约50μCi至约150μCi、或约50μCi至约125μCi、或约50μCi至约100μCi、或约100μCi至约300μCi、或约100μCi至约250μCi、或约100μCi至约240μCi、或约100μCi至约230μCi、或约100μCi至约220μCi、或约100μCi至约210μCi、或约100μCi至约200μCi、或约100至约175μCi、或约100μCi至约150μCi、或约150μCi至约300μCi、或约150μCi至约250μCi、或约175μCi至约225μCi的靶向放射性。

根据一个实施方案，药物组合物中的放射性金属为²²⁵Ac并且提供每剂药物组合物约50μCi至约500μCi的靶向放射性。根据附加的实施方案，药物组合物中的放射性金属提供每剂药物组合物约50μCi至约450μCi、或约50μCi至约400μCi、或约50μCi至约350μCi、或约100μCi至约500μCi、或约100μCi至约450μCi、或约100μCi至约400μCi、或约100μCi至约350μCi、或约150μCi至约500μCi、或约150μCi至约450μCi、或约150μCi至约400μCi、或约150μCi至约350μCi、或约200μCi至约500μCi、或约200μCi至约450μCi、或约200μCi至约400μCi、或约200μCi至约350μCi的靶向放射性。

根据一个实施方案，药物组合物中的放射性金属为²²⁵Ac，并且提供该药物组合物中每约2mg总抗体约50μCi至约350μCi的靶向比活性。根据附加的实施方案，药物组合物中的放射性金属提供该药物组合物中每约2mg总抗体约50μCi至约300μCi、或约50μCi至约250μCi、或约50μCi至约240μCi、或约50μCi至约230μCi、或约50μCi至约220μCi、或约50μCi至约210μCi、或约50μCi至约200μCi、或约50μCi至约175μCi、或约50μCi至约150μCi、或约50μCi至约125μCi、或约50μCi至约100μCi、或约100μCi至约300μCi、或约100μCi至约250μCi、或约100μCi至约240μCi、或约100μCi至约230μCi、或约100μCi至约220μCi、或约100μCi至约210μCi、或约100μCi至约200μCi、或约100至约175μCi、或约100至约150μCi、或约150μCi至约300μCi、或约150μCi至约250μCi、或约175μCi至约225μCi的靶向比活性。根据附加的实施方案，药物组合物中的放射性金属提供该药物组合物中每约2mg总抗体约50μCi、或约100μCi、或约150μCi、或约175μCi、或约200μCi、或约225μCi、或约250μCi、或约275μCi、或约300μCi的靶向比活性。例如，应当理解，每2mg抗体300μCi的量等同于150μCi/mg抗体，每2mg抗体200μCi等同于100μCi/mg抗体等。

根据另一个实施方案，药物组合物中的放射性金属为²²⁵Ac，并且提供该药物组合物中每约2mg和约10mg之间的总抗体(例如，药物组合物中每约2mg、或约4mg、或约6mg、或约8mg、或约10mg总抗体)约50μCi至约350μCi的靶向比活性。根据附加的实施方案，药物组合物中的放射性金属提供该药物组合物中每约2mg和约10mg之间的总抗体(例如，药物组合物中每约2mg、或约4mg、或约6mg、或约8mg、或约10mg总抗体)约50μCi至约300μCi、或约50μCi至约250μCi、或约50μCi至约240μCi、或约50μCi至约230μCi、或约50μCi至约220μCi、或约50μCi至约210μCi、或约50μCi至约200μCi、或约50μCi至约175μCi、或约50μCi至约150μCi、或约50μCi至约125μCi、或约50μCi至约100μCi、或约100μCi至约300μCi、或约100μCi至约250μCi、或约100μCi至约240μCi、或约100μCi至约230μCi、或约100μCi至约220μCi、或约100μCi至约210μCi、或约100μCi至约200μCi、或约100至约175μCi、或约100至约150μCi、或约150μCi至约300μCi、或约150μCi至约250μCi、或约175μCi至约225μCi的靶向比活性。根据附加的实施方案，药物组合物中的放射性金属提供该药物组合物中每约2mg和约10mg之间的总抗体(例如，药物组合物中每约2mg、或约4mg、或约6mg、或约8mg、或约10mg总抗体)约50μCi、或约100μCi、或约150μCi、或约175μCi、或约200μCi、或约225μCi、或约250μCi、或约275μCi、或约300μCi、或约350μCi的靶向比活性。

根据另一个实施方案，药物组合物中的放射性金属为²²⁵Ac，并且在该药物组合物中提供每约2mg和约10mg之间的总抗体(例如，药物组合物中每约2mg、或约4mg、或约6mg、或约8mg、或约10mg总抗体)约50μCi至约500μCi的靶向比活性。根据附加的实施方案，药物组合物中的放射性金属提供该药物组合物中每约2mg和约10mg之间的总抗体(例如，药物组合物中每约2mg、或约4mg、或约6mg、或约8mg、或约10mg总抗体)约50μCi至约450μCi、或约50μCi至约400μCi、或约50μCi至约350μCi、或约100μCi至约500μCi、或约100μCi至约450μCi、或约100μCi至约400μCi、或约100μCi至约350μCi、或约150μCi至约500μCi、或约150μCi至约450μCi、或约150μCi至约400μCi、或约150μCi至约350、或约200μCi至约500μCi、或约200μCi至约450μCi、或约200μCi至约400μCi、或约200μCi至约350μCi的靶向比活性。根据附加的实施方案，药物组合物中的放射性金属提供该药物组合物中每约2mg和约10mg之间的总抗体(例如，药物组合物中每约2mg、或约4mg、或约6mg、或约8mg、或约10mg总抗体)约350μCi、或约375μCi、或约400μCi、或约425μCi、或约450μCi、或约475μCi、或约500μCi的靶向比活性。

根据一个实施方案，药物组合物中的放射性金属为²²⁵Ac，并且药物组合物的靶向放射性浓度为约1μCi/mL至约100μCi/mL、或约5μCi/mL至约75μCi/mL、或约10μCi/mL至约60μCi/mL、或约12.5μCi/mL至约50μCi/mL、或约12.5μCi/mL、或约25μCi/mL、或约37.5μCi/mL、或约50μCi/mL。

如本文所用，“给药时间”是指患者被施用一剂包含放射性缀合物的药物组合物(例如，无论是作为单次施用还是以多于一个子剂量的多次施用)的时间。由于²²⁵Ac的衰变，药物组合物中由²²⁵Ac提供的放射性的量从制备时间到给药时间降低，即从制备过程中²²⁵Ac螯合至缀合物中间体以形成放射性缀合物的大致时间到放射性缀合物被施用给患者的时间。根据一个示例，如果由药物组合物中的²²⁵Ac提供的放射性在²²⁵Ac螯合至缀合物中间体以形成放射性缀合物的近似时间处为约264μCi(例如，在放射性缀合物形成并纯化之后)，则在给药时约96小时后的放射性可以为约200μCi。衰变以及因此在任何给定时间的²²⁵Ac的量可以基于在时间零处测量的活性的初始量、经过的时间量和²²⁵Ac的半衰期来计算。

如本文所用，放射性金属的“靶向”比活性或“靶向”放射性或“靶向”放射性浓度分别是指比活性或放射性或放射性浓度的量，其被计算为在施用给患者的预期时间处存在于一剂药物组合物中，例如基于在制备时存在于组合物中的放射性金属的量和在制备与施用给患者之间预期的时间量(和伴随的放射性金属衰变)。应当理解，给药时的实际比活性或放射性或放射性浓度可分别与靶向比活性或放射性或放射性浓度略有不同(例如，在患者的实际施用时间与预期施用时间略有不同的情况下)。

根据特定实施方案，药物组合物还含有非放射性标记的抗体。例如，可将包含非放射性标记的抗体的组合物与包含放射性缀合物的组合物组合，以将放射性缀合物组合物稀释至所需剂量的放射性。如本文所用，术语“非放射性标记的抗体”是指不缀合至放射性金属的抗体或抗体-螯合剂络合物。根据特定实施方案，存在于组合物中的非放射性标记的抗体是缀合物中间体，诸如DOTA-mAb(例如，DOTA-h11B6)。优选地，非放射性标记的抗体包括与组合物中所含的放射性缀合物相同的抗体；例如，药物组合物可包含一定量的²²⁵Ac-DOTA-h11B6和一定量的DOTA-h11B6。另选地，药物组合物可包含一定量的²²⁵Ac-TOPA-h11B6和一定量的TOPA-h11B6。如本文所用，“总抗体”是指药物组合物中抗体的总量；例如，总抗体可包括(a)缀合至放射性金属络合物的抗体的量和(b)非放射性标记的抗体(诸如缀合物中间体)的量。靶向总抗体是指在施用给患者的预期时间计算存在于一剂药物组合物中的抗体的量。根据某些实施方案，组合物中抗体(放射性标记的和非放射性标记的)的总量不超过约10mg、或约9mg、或约8mg、或约7mg、或约6mg、或约5mg、或约4mg、或约3mg、或约2mg。

根据某些实施方案，一种制备本发明的药物组合物的方法包括将第一中间体组合物和第二中间体组合物组合以形成该药物组合物，其中：该第一中间体组合物包含放射性缀合物，并且该第二中间体组合物包含缀合物中间体并且不包含任何放射性缀合物。根据某些实施方案，第一中间体组合物和第二中间体组合物包含相同的药学上可接受的赋形剂。

根据特定实施方案，药物组合物包含约0.1mg至约5mg总抗体、或约0.1mg至约4mg总抗体、或约0.1mg至约3mg总抗体、或约0.1mg至约4mg总抗体、约0.1mg至约3mg总抗体、约0.1mg至约2mg总抗体、或约0.5mg至约5mg总抗体、或约0.5mg至约4mg总抗体、或约0.5mg至约3mg总抗体、或约0.5mg至约3.5mg总抗体、或约0.5mg至约4mg总抗体、或约1mg至约10mg总抗体、或约1mg至约7mg总抗体、或约1mg至约5mg总抗体、或约1mg至约4mg总抗体、或约1mg至约3mg总抗体、或约1.5mg至约2.5mg总抗体、或约1.1mg至约1.2mg总抗体、或约1.3mg总抗体、或约1.4mg总抗体、或约1.5mg总抗体、或约1.6mg总抗体、或约1.7mg总抗体、或约1.8mg总抗体、或约1.9mg总抗体、或约2mg总抗体、或约2.1mg总抗体、或约2.2mg总抗体、或约2.3mg总抗体、或约2.4mg总抗体、或约2.5mg总抗体、或约2.6mg总抗体、或约2.7mg总抗体、或约2.8mg总抗体、或约2.9mg总抗体。

根据特定实施方案，药物组合物的剂量具有约1mL至约20mL、或约1mL至约10mL、或约2mL至约6mL、或约3mL至约5mL、或约4mL的体积。根据一个实施方案，药物组合物的剂量包含每约4mL剂量约2mg总抗体(即，每约2mL剂量约1mg总抗体)。如本文所述，该剂量可以作为多个子剂量施用；例如，8mL剂量可以作为两个4mL子剂量施用。在一个实施方案中，向受试者施用两个4mL子剂量，每个子剂量含有2mg抗体，每8mL剂量总共4mg抗体。

根据特定实施方案，药物组合物包含约0.01mg/mL至5.0mg/mL、或约0.01mg/mL至4.0mg/mL、或约0.01mg/mL至3.0mg/mL、约0.01mg/mL至2.0mg/mL、或约0.01mg/mL至1.0mg/mL、约0.1mg/mL至5.0mg/mL、或约0.1mg/mL至4.0mg/mL、或约0.1mg/mL至3.0mg/mL、约0.1mg/mL至2.0mg/mL、或约0.1mg/mL至1.0mg/mL、约0.3mg/mL至0.7mg/mL、或约0.4mg/mL至0.6mg/mL、或约0.5mg/mL的量的总抗体。

根据一个实施方案，含有一剂药物组合物的小瓶中的靶向总抗体浓度为约0.5mg/mL±0.1mg/mL；例如，在含有²²⁵Ac-DOTA-h11B6和DOTA-h11B6的小瓶中。在一个实施方案中，如果一个剂量含有约4mL药物组合物，则该剂量中的靶向总抗体浓度为约0.5mg/mL，该剂量的靶向放射性为约50μCi，并且靶向放射性浓度为约12.5μCi/mL(例如，12.5μCi/mL±10％)。在另一个实施方案中，如果一个剂量含有约4mL药物组合物，则该剂量中的靶向总抗体浓度为约0.5mg/mL，该剂量的靶向放射性为约100μCi，并且靶向放射性浓度为约25μCi/mL(例如，25μCi/mL±10％)。在另一个实施方案中，如果一个剂量含有约4mL药物组合物，则该剂量中的靶向总抗体浓度为约0.5mg/mL，该剂量的靶向放射性为约150μCi，并且靶向放射性浓度为约37.5μCi/mL(例如，37.5μCi/mL±10％)。在另一个实施方案中，如果一个剂量含有约4mL药物组合物，则该剂量中的靶向总抗体浓度为约0.5mg/mL(约2mg总抗体)，该剂量的靶向放射性为约200μCi，并且靶向放射性浓度为约50μCi/mL(例如，50μCi/mL±10％)。在另一个实施方案中，如果一个剂量含有约8mL药物组合物，则该剂量中的靶向总抗体浓度为约0.5mg/mL(约4mg总抗体)，该剂量的靶向放射性为约300μCi，并且靶向放射性浓度为约37.5μCi/mL(例如，37.5μCi/mL±10％)。

根据其他实施方案，总抗体以约0.1mg/mL至约1mg/mL的浓度存在于药物组合物中。在一些实施方案中，药物组合物中总抗体的浓度为约0.1mg/mL至约0.9mg/mL、约0.1mg/mL至约0.8mg/mL、约0.1mg/mL至约0.7mg/mL、约0.1mg/mL至约0.6mg/mL、约0.1mg/mL至约0.5mg/mL、约0.1mg/mL至约0.4mg/mL、约0.1mg/mL至约0.3mg/mL、约0.1mg/mL至约0.2mg/mL、约0.2mg/mL至约1mg/mL、约0.2mg/mL至约0.9mg/mL、约0.2mg/mL至约0.8mg/mL、约0.2mg/mL至约0.7mg/mL、约0.2mg/mL至约0.6mg/mL、约0.2mg/mL至约0.5mg/mL、约0.2mg/mL至约0.4mg/mL、约0.2mg/mL至约0.3mg/mL、约0.3mg/mL至约1mg/mL、约0.3mg/mL至约0.9mg/mL、约0.3mg/mL至约0.8mg/mL、约0.3mg/mL至约0.7mg/mL、约0.3mg/mL至约0.6mg/mL、约0.3mg/mL至约0.5mg/mL、约0.3mg/mL至约0.4mg/mL、约0.4mg/mL至约1mg/mL、约0.4mg/mL至约0.9mg/mL、约0.4mg/mL至约0.8mg/mL、约0.4mg/mL至约0.7mg/mL、约0.4mg/mL至约0.6mg/mL、约0.4mg/mL至约0.5mg/mL、约0.5mg/mL至约1mg/mL、约0.5mg/mL至约0.9mg/mL、约0.5mg/mL至约0.8mg/mL、约0.5mg/mL至约0.7mg/mL、约0.5mg/mL至约0.6mg/mL、约0.6mg/mL至约1mg/mL、约0.6mg/mL至约0.9mg/mL、约0.6mg/mL至约0.8mg/mL、约0.6mg/mL至约0.7mg/mL、约0.7mg/mL至约1mg/mL、约0.7mg/mL至约0.9mg/mL、约0.7mg/mL至约0.8mg/mL、约0.8mg/mL至约1mg/mL、约0.8mg/mL至约0.9mg/mL、或约0.9mg/mL至约1mg/mL。在其他实施方案中，药物组合物含有约0.5mg/mL的总抗体。在其他实施方案中，药物组合物含有总共约0.1mg/mL至约1mg/mL的²²⁵Ac-DOTA-h11B6和DOTA-h11B6。在其他实施方案中，药物组合物含有总共约0.5mg/mL的²²⁵Ac-DOTA-h11B6和DOTA-h11B6。在其他实施方案中，药物组合物含有总共约0.1mg/mL至约1mg/mL的²²⁵Ac-TOPA-h11B6和TOPA-h11B6。在其他实施方案中，药物组合物含有总共约0.5mg/mL的²²⁵Ac-TOPA-h11B6和TOPA-h11B6。

本发明的药物组合物可以经由本领域技术人员已知的任何合适的途径施用。例如，组合物可以肠胃外施用。施用途径的非限制性示例包括静脉内(IV)、肌肉内或皮下，或者它们可以通过输注技术施用。在某些方面，本文的治疗方法包括静脉内注射药物组合物。

根据一个实施方案，本发明的药物组合物以一次性无菌注射溶液提供。该组合物优选在密封小瓶中冷藏直至注射时；例如，在用不含乳胶的塞子和铝密封件封闭的环烯烃聚合物小瓶中。

本发明的药物组合物可由保健专业人员施用给患者。在一些实施方案中，药物组合物每约2周、约3周、约4周、约5周、约6周、约7周、约8周、约9周、约10周、约11周、约12周、约13周、约14周、约15周或约16周施用一次。在一些实施方案中，药物组合物每约4周至约12周、约4周至约10周、约4周至约8周、约4周至约6周、约6周至约12周、约6周至约10周、约6周至约8周、约8周至约12周、约8周至约10周、约10周至约12周施用一次。在某些方面，药物组合物每约4周施用给患者一次。在某些方面，药物组合物每约6周施用给患者一次。在其他方面，药物组合物每约8周施用给患者一次。在某些方面，药物组合物每约10周施用给患者一次。在其他方面，药物组合物每约12周施用给患者一次。根据某些实施方案，患者被施用约2个至约12个剂量、或约2个至约10个剂量、或约2个至约8个剂量、或约2个至约6个剂量、或约2个至约4个剂量。根据一个实施方案，患者的给药方案包括施用至少2个剂量、或至少3个剂量、或至少4个剂量、或至少5个剂量、或至少6个剂量，其中每8周施用一个剂量。根据一个实施方案，患者的给药方案包括施用4个总剂量，其中每8周施用一个剂量。另选地，患者的给药方案包括施用5个或6个或7个或8个或9个或10个或11个或12个总剂量，其中每8周施用一次一个剂量。在更进一步的实施方案中，患者的给药方案可以继续，使得其包括多于12个总剂量。

本发明的药物组合物的剂量可以通过单次施用或者通过在多于一个子剂量的多次施用中施用该剂量(例如，通过在该剂量的多次细分中施用该剂量)而施用给患者。另选地，可以在延长的时间段内以连续输注的形式提供该剂量。

本领域技术人员应当理解，本发明的药物组合物可以单独施用或者与一种或多种由主治医师确定的附加的治疗剂或显像剂或方法组合施用。本发明的药物组合物可以在用于治疗前列腺癌的其他治疗方法之前或与之同时施用给患者。

优选地，本发明的药物组合物为无菌水溶液形式，其可含有其他物质以使溶液与血液等渗和/或提供合适的pH。在一些实施方案中，水性溶液的pH为约4至约7、约4.5至约6.5、约5至约6、或约5.5。在其他实施方案中，水性溶液的pH为约5、约5.1、约5.2、约5.3、约5.4、约5.5、约5.6、约5.7、约5.8、约5.9或约6。在其他实施方案中，水性溶液的pH为约5.5。

如本文所述，由于²²⁵Ac的衰变，在一剂药物组合物中由²²⁵Ac提供的放射性的量从制备时间(从²²⁵Ac螯合至缀合物中间体以形成放射性缀合物的大致时间)到将该剂量施用给患者的时间降低。优选地，在制备期间用足量的²²⁵Ac标记放射性缀合物，以说明估计在大约螯合时间与对患者给药时间之间发生的²²⁵Ac比活性的降低。还优选限制放射性缀合物的形成(通过螯合²²⁵Ac)与向患者施用该剂量之间的时间量。

根据特定实施方案，在从放射性金属螯合至缀合物中间体以形成放射性缀合物后约7天(168小时)内、或从将放射性金属螯合至缀合物中间体以形成放射性缀合物后约144小时内、或在约120小时内、或在约96小时内、或在约72小时内、或在约48小时内、或在约24小时内将本发明的药物组合物施用给患者。根据特定实施方案，本发明的方法包括在从放射性金属螯合至缀合物中间体以形成放射性缀合物起约120小时或更短时间内向患者施用药物组合物(即，给药发生的时间)。根据特定实施方案，本发明的方法包括在从放射性金属螯合至缀合物中间体以形成放射性缀合物起约96小时或更短时间内向患者施用药物组合物(即，给药发生的时间)。根据特定实施方案，本发明的方法包括在从放射性金属螯合至缀合物中间体以形成放射性缀合物起约72小时或更短时间内向患者施用药物组合物(即，给药发生的时间)。

根据特定实施方案，本发明的放射性缀合物与一种或多种药学上可接受的赋形剂混合施用。术语“药物组合物”和“药物制剂”在整个公开内容中可互换使用。可使用本领域已知的技术制备药物组合物。在特定实施方案中，药物组合物具有足够的储存稳定性并且适于施用给人。

赋形剂可以由本领域技术人员选择，并且可以根据期望的施用途径采取多种形式。例如，对于非肠道施用，赋形剂可包括无菌水，并且可以添加其他成分以增加组合物的溶解度和保存性。注射用混悬剂或溶液剂也可以利用包含水载体和/或适当的添加剂(诸如增溶剂和防腐剂)制备。

在一些实施方案中，赋形剂包括缓冲液，其为优选含有酸-碱混合物的水溶液，目的是稳定溶液的pH。缓冲液的示例包括但不限于Trizma、Bicine、麦黄酮、MOPS、MOPSO、MOBS、Tris、Hepes、HEPBS、MES、磷酸盐、碳酸盐、乙酸盐、柠檬酸盐、乙醇酸盐、乳酸盐、硼酸盐、ACES、ADA、酒石酸盐、AMP、AMPD、AMPSO、BES、CABS、二甲胂酸盐、CHES、DIPSO、EPPS、乙醇胺、甘氨酸、HEPPSO、咪唑、咪唑乳酸、PIPES、SSC、SSPE、POPSO、TAPS、TABS、TAPSO或TES。在一些实施方案中，缓冲液为Trizma。在一些实施方案中，缓冲液为Bicine。在其他实施方案中，缓冲液为麦黄酮。在其他实施方案中，缓冲液为MOPS。在其他实施方案中，缓冲液为MOPSO。在其他实施方案中，缓冲液为MOBS。在其他实施方案中，缓冲液为Tris。在其他实施方案中，缓冲液为Hepes。在其他实施方案中，缓冲液为HEPBS。在其他实施方案中，缓冲液为MES。在其他实施方案中，缓冲液为磷酸盐。在其他实施方案中，缓冲液为碳酸盐。在其他实施方案中，缓冲液为乙酸盐。在其他实施方案中，缓冲液为柠檬酸盐。在其他实施方案中，缓冲液为乙醇酸盐。在其他实施方案中，缓冲液为乳酸盐。在其他实施方案中，缓冲液为硼酸盐。在其他实施方案中，缓冲液为ACES。在其他实施方案中，缓冲液为ADA。在其他实施方案中，缓冲液为酒石酸盐。在其他实施方案中，缓冲液为AMP。在其他实施方案中，缓冲液为AMPD。在其他实施方案中，缓冲液为AMPSO。在其他实施方案中，缓冲液为BES。在其他实施方案中，缓冲液为CABS。在其他实施方案中，缓冲液为二甲胂酸盐。在其他实施方案中，缓冲液为CHES。在其他实施方案中，缓冲液为DIPSO。在其他实施方案中，缓冲液为EPPS。在其他实施方案中，缓冲液为乙醇胺。在其他实施方案中，缓冲液为甘氨酸。在其他实施方案中，缓冲液为HEPPSO。在其他实施方案中，缓冲液为咪唑。在其他实施方案中，缓冲液为咪唑乳酸。在其他实施方案中，缓冲液为PIPES。在其他实施方案中，缓冲液为SSC。在其他实施方案中，缓冲液为SSPE。在其他实施方案中，缓冲液为POPSO。在其他实施方案中，缓冲液为TAPS。在其他实施方案中，缓冲液为TABS。在其他实施方案中，缓冲液为TAPSO。在其他实施方案中，缓冲液为TES。缓冲液理想地以获得所需pH的浓度提供。在一些方面，缓冲液的浓度为约10mM至约50mM。在其他方面，缓冲液的pH为约20mM至约50mM、约25mM至约50mM、约30mM至约50mM、约35mM至约50mM、约40mM至约50mM、约45mM至约50mM、约20mM至约45mM、约25mM至约45mM、约30mM至约45mM、约35mM至约45mM、约40mM至约45mM、约20mM至约40mM、约25mM至约40mM、约30mM至约40mM、约35mM至约40mM、约20mM至约35mM、约25mM至约35mM、约30mM至约35mM、约20mM至约30mM、约25mM至约30mM、约20mM至约25mM。在其他方面，缓冲液的浓度为约24mM至约28mM、约25mM至约28mM、约25mM至约27mM、约26mM至约28mM、或约26mM至约27mM。在其他方面，缓冲液的浓度为约25mM。在其他方面，缓冲液的浓度为约26.75mM。在一个实施方案中，缓冲液包含乙酸盐。

在附加的实施方案中，赋形剂包括稀释剂。术语“稀释剂”是指用于稀释药物组合物的水性或非水性溶液。例如，稀释剂可包括盐水、水、聚乙二醇、丙二醇、乙醇或油(诸如红花油、玉米油、花生油、棉籽油或芝麻油)中的一者或多者。在某些实施方案中，稀释剂为水。稀释剂的附加的非限制性示例包括无菌水、不同浓度的盐水(NS/0.9％、1/2NS/0.45％)、不同浓度的右旋糖(D5W、D10W)或右旋糖+盐水(1/2NSD5W)。

药物组合物可以经受常规的药物操作诸如灭菌和/或可以含有常规的助剂。药物组合物还可以含有水性和非水性无菌注射溶液，其可以含有抗氧化剂、缓冲液、抑菌剂和/或使制剂与预期接受者的血液等渗的溶质。

在其他实施方案中，赋形剂可包含粘结剂、碳水化合物、包衣剂、着色剂、崩解剂、分散剂、乳化剂、填充剂、调味剂、成粒剂、脂质、润滑剂、矿物质、聚合物、防腐剂、辐射防护剂、增溶剂、稳定剂、悬浮剂、甜味剂、增稠剂、润湿剂或它们的组合中的一者或多者。

根据特定实施方案，赋形剂包含至少一种辐射防护剂。在某些实施方案中，药物组合物包含：放射性缀合物和一种或多种药学上可接受的赋形剂，其中：该放射性缀合物包含至少一种缀合至对hK2(例如，h11B6或其变体)具有结合特异性的抗体或抗原结合片段的放射性金属络合物，并且该一种或多种药学上可接受的赋形剂包含一种或多种辐射防护剂。

辐射防护剂的示例包括但不限于抗坏血酸钠、龙胆酸或它们的组合。根据一个实施方案，组合物包含抗坏血酸钠。根据另选的实施方案，组合物包含龙胆酸。

在其他实施方案中，赋形剂包含一种或多种表面活性剂。表面活性剂的非限制性示例包括聚山梨酸酯和泊洛沙姆，诸如聚山梨酸酯20、聚山梨酸酯80和泊洛沙姆188。根据一个实施方案，赋形剂包含聚山梨酸酯20。在其他实施方案中，赋形剂包含抗坏血酸钠、聚山梨酸酯20或它们的组合。在一些实施方案中，药物组合物含有放射性缀合物和抗坏血酸钠。在其他实施方案中，药物组合物含有聚山梨酸酯20。在其他实施方案中，药物组合物含有抗坏血酸钠和聚山梨酸酯20。在一些实施方案中，药物组合物含有放射性缀合物和龙胆酸。在其他实施方案中，药物组合物含有龙胆酸和聚山梨酸酯20。

赋形剂的量基于期望的施用途径、患者和药物组合物中的特定赋形剂来选择。在优选的实施方案中，存在于药物组合物中的抗坏血酸钠的量抑制放射性缀合物的降解。理想地，与不含抗坏血酸钠的组合物相比，抗坏血酸钠抑制放射性缀合物的降解，例如通过光谱方法(诸如高效液相色谱法、核磁共振、质谱或元素分析等)测量。在其他实施方案中，药物组合物含有约0.05w/v％至约5.0w/v％的抗坏血酸钠和/或龙胆酸。在其他实施方案中，药物组合物含有约0.1w/v％至约5w/v％、约0.1w/v％至约4w/v％、约0.1w/v％至约3w/v％、约0.1w/v％至约2w/v％、约0.1w/v％至约1w/v％、约0.2w/v％至约1w/v％、约0.3w/v％至约1w/v％、约0.4w/v％至约1w/v％、约0.5w/v％至约1w/v％、约0.6w/v％至约1w/v％、约0.7w/v％至约1w/v％、约0.8w/v％至约1w/v％、约0.9w/v％至约1w/v％、约0.1w/v％至约0.9w/v％、约0.2w/v％至约0.9w/v％、约0.3w/v％至约0.9w/v％、约0.4w/v％至约0.9w/v％、约0.5w/v％至约0.9w/v％、约0.6w/v％至约0.9w/v％、约0.7w/v％至约0.9w/v％、约0.8w/v％至约0.9w/v％、约0.1w/v％至约0.8w/v％、约0.2w/v％至约0.8w/v％、约0.3w/v％至约0.8w/v％、约0.4w/v％至约0.8w/v％、约0.5w/v％至约0.8w/v％、约0.6w/v％至约0.8w/v％、约0.7w/v％至约0.8w/v％、约0.1w/v％至约0.7w/v％、约0.2w/v％至约0.7w/v％、约0.3w/v％至约0.6w/v％、约0.4w/v％至约0.6w/v％、约0.5w/v％至约0.6w/v％、约0.1w/v％至约0.5w/v％、约0.2w/v％至约0.5w/v％、约0.3w/v％至约0.5w/v％、约0.4w/v％至约0.5w/v％、约0.1w/v％至约0.4w/v％、约0.2w/v％至约0.4w/v％、约0.3w/v％至约0.4w/v％、约0.1w/v％至约0.3w/v％、约0.2w/v％至约0.3w/v％、或约0.1w/v％至约0.2w/v％的抗坏血酸钠。在其他实施方案中，药物组合物含有约0.lw/v％、约0.2w/v％、约0.3w/v％、约0.4w/v％、约0.5w/v％、约0.6w/v％、约0.7w/v％、约0.8w/v％、约0.9w/v％、或约1w/v％的抗坏血酸钠。在其他实施方案中，药物组合物含有约0.5w/v％的抗坏血酸钠。

在其他实施方案中，药物组合物含有约0.005w/v％至约0.15w/v％、或约0.005w/v％至约0.12w/v％、或约0.005w/v％至约0.1w/v％、或约0.005w/v％至约0.08w/v％、或约0.005w/v％至约0.06w/v％、或约0.005w/v％至约0.12w/v％、或约0.005w/v％至约0.04w/v％的聚山梨酸酯20。在某些方面，药物组合物含有约0.01w/v％至约0.12w/v％、约0.02w/v％至约0.12w/v％、约0.03w/v％至约0.12w/v％、约0.04w/v％至约0.12w/v％、约0.05w/v％至约0.12w/v％、约0.06w/v％至约0.12w/v％、约0.07w/v％至约0.12w/v％、约0.08w/v％至约0.12w/v％、约0.09w/v％至约0.12w/v％、约0.01w/v％至约0.1w/v％、约0.02w/v％至约0.1w/v％、约0.03w/v％至约0.1w/v％、约0.04w/v％至约0.1w/v％、约0.05w/v％至约0.1w/v％、约0.06w/v％至约0.1w/v％、约0.07w/v％至约0.1w/v％、约0.08w/v％至约0.1w/v％、约0.09w/v％至约0.1w/v％、约0.01w/v％至约0.09w/v％、约0.02w/v％至约0.09w/v％、约0.03w/v％至约0.09w/v％、约0.04w/v％至约0.09w/v％、约0.05w/v％至约0.09w/v％、约0.06w/v％至约0.09w/v％、约0.07w/v％至约0.09w/v％、约0.08w/v％至约0.09w/v％、约0.01w/v％至约0.08w/v％、约0.02w/v％至约0.08w/v％、约0.03w/v％至约0.08w/v％、约0.04w/v％至约0.08w/v％、约0.05w/v％至约0.08w/v％、约0.06w/v％至约0.08w/v％、约0.07w/v％至约0.08w/v％、约0.01w/v％至约0.07w/v％、约0.02w/v％至约0.07w/v％、约0.03w/v％至约0.06w/v％、约0.04w/v％至约0.06w/v％、约0.05w/v％至约0.06w/v％、约0.01w/v％至约0.05w/v％、约0.02w/v％至约0.05w/v％、约0.03w/v％至约0.05w/v％、约0.04w/v％至约0.05w/v％、约0.01w/v％至约0.04w/v％、约0.02w/v％至约0.04w/v％、约0.03w/v％至约0.04w/v％、约0.01w/v％至约0.03w/v％、约0.02w/v％至约0.03w/v％、或约0.01w/v％至约0.02w/v％的聚山梨酸酯20。在其他方面，药物组合物含有约0.01w/v％、约0.02w/v％、约0.03w/v％、约0.04w/v％、约0.05w/v％、约0.06w/v％、约0.07w/v％、约0.08w/v％、约0.09w/v％、约0.1w/v％、约0.11w/v％、约0.12w/v％、约0.13w/v％、约0.14w/v％或约0.15w/v％的聚山梨酸酯20。在其他方面，药物组合物含有约0.04w/v％的聚山梨酸酯20。

根据某些实施方案，药物组合物不含任何防腐剂。

根据某些实施方案，所述药物组合物不含任何蔗糖；特别地，当放射性金属为²²⁵Ac时，例如当放射性缀合物为²²⁵Ac-DOTA-h11B6时，药物组合物可以不含有任何蔗糖。根据某些实施方案，在含有²²⁵Ac的组合物中包含蔗糖导致形成辐解分解降解物，如本文所述。因此，在某些实施方案中，蔗糖可被排除或限于少量，例如小于1％、小于0.5％、小于0.1％、小于0.05％、或小于0.01％。

根据某些实施方案，药物组合物不含任何糊精(例如，环糊精)、单糖、二糖、寡糖或多糖。

根据某些实施方案，药物组合物不含任何单糖或二糖。

根据某些实施方案，药物组合物不含任何二糖。

根据某些实施方案，药物组合物不含任何糖醇(例如，山梨醇)。

根据某些实施方案，药物组合物不含任何冷冻保护剂(例如，糖、糖醇、甘油、乙二醇、丙二醇、二甲基亚砜等)。

在某些实施方案中，药物组合物含有约0.5mg/mL的放射性缀合物和缀合物中间体以及约0.5％w/v％的抗坏血酸钠。在其他实施方案中，药物组合物含有约0.5mg/mL的放射性缀合物和缀合物中间体以及约0.04w/v％的聚山梨酸酯20。在其他实施方案中，药物组合物含有约0.5mg/mL的放射性缀合物和缀合物中间体以及约25mM至27mM的乙酸盐缓冲液。在其他实施方案中，药物含有约0.5mg/mL的放射性缀合物和缀合物中间体、约0.5w/v％的抗坏血酸钠以及约0.04w/v％的聚山梨酸酯20。在其他实施方案中，药物含有约0.5mg/mL的放射性缀合物和缀合物中间体、约0.5w/v％的抗坏血酸钠以及约25mM至27mM的乙酸盐缓冲液。在其他实施方案中，药物含有约0.5mg/mL的放射性缀合物和缀合物中间体、约0.04w/v％的聚山梨酸酯20以及约25mM至27mM的乙酸盐缓冲液。在其他实施方案中，药物组合物含有约0.5mg/mL的放射性缀合物和缀合物中间体、约0.5w/v％的抗坏血酸钠、约0.04w/v％的聚山梨酸酯20以及约25mM至27mM的乙酸盐缓冲液。

在某些方面，药物组合物含有放射性缀合物和乙酸盐缓冲液。在其他方面，药物组合物含有放射性缀合物、乙酸盐缓冲液和抗坏血酸钠。在其他方面，药物组合物含有放射性缀合物和聚山梨酸酯20。在其他方面，药物组合物含有放射性缀合物、抗坏血酸钠、聚山梨酸酯20和乙酸盐缓冲液。在其他方面，药物组合物含有²²⁵Ac-DOTA-h11B6、乙酸盐缓冲液。在其他方面，药物组合物含有²²⁵Ac-DOTA-h11B6、乙酸盐缓冲液和抗坏血酸钠。在其他方面，药物组合物含有²²⁵Ac-DOTA-h11B6、聚山梨酸酯20。在其他方面，药物组合物含有²²⁵Ac-DOTA-h11B6、抗坏血酸钠、聚山梨酸酯20和乙酸盐缓冲液。在其他方面，药物组合物含有²²⁵Ac-TOPA-h11B6、乙酸盐缓冲液。在其他方面，药物组合物含有²²⁵Ac-TOPA-h11B6、乙酸盐缓冲液和抗坏血酸钠。在其他方面，药物组合物含有²²⁵Ac-TOPA-h11B6、聚山梨酸酯20。在其他方面，药物组合物含有²²⁵Ac-TOPA-h11B6、抗坏血酸钠、聚山梨酸酯20和乙酸盐缓冲液。

根据一个实施方案，药物组合物含有总量为约0.5mg/mL的²²⁵Ac-DOTA-h11B6和DOTA-h11B6的25mM至27mM(例如，25mM或26.75mM)乙酸盐、0.5％抗坏血酸钠和0.04％聚山梨酸酯20的无菌水溶液，优选pH为约5.5。根据某些实施方案，²²⁵Ac-DOTA-h11B6的放射性²²⁵Ac剂量在预期的给药时间处靶向4mL(约2mg h11B6质量量)中的约50μCi、约100μCi、约150μCi、或约200μCi。根据其他实施方案，²²⁵Ac-DOTA-h11B6的放射性²²⁵Ac剂量在给药时间处靶向大于200μCi(例如，约250μCi或约300μCi或约350μCi等)；例如，在预期的给药时间处，该剂量可包含约8mL中的约250μCi或约8mL中的约300μCi或约8mL中的约350μCi(例如，每个剂量约2mg h11B6或约4mg或约6mg或约8mg或约10mg质量)。

根据一个实施方案，药物组合物含有总量为约0.5mg/mL的²²⁵Ac-TOPA-h11B6和TOPA-h11B6的25mM至27mM(例如，25mM或26.75mM)乙酸盐、0.5％抗坏血酸钠和0.04％聚山梨酸酯20的无菌水溶液，优选pH为约5.5。根据某些实施方案，²²⁵Ac-TOPA-h11B6的放射性²²⁵Ac剂量在预期的给药时间处靶向4mL(约2mg h11B6质量量)中的约50μCi、约100μCi、约150μCi、或约200μCi。根据其他实施方案，²²⁵Ac-TOPA-h11B6的放射性²²⁵Ac剂量在给药时间处靶向大于200μCi(例如，约250μCi或约300μCi或约350μCi等)；例如，在预期的给药时间处，该剂量可包含约8mL中的约250μCi或约8mL中的约300μCi或约8mL中的约350μCi(例如，每个剂量约2mg h11B6或约4mg或约6mg或约8mg或约10mg质量)。

枚举的实施方案

下面提供了本发明的编号的示例性实施方案。

1.一种治疗患者的癌症的方法，该方法包括：

向该患者施用治疗有效量的药物组合物，该药物组合物包含放射性缀合物和一种或多种药学上可接受的赋形剂，其中：

该放射性缀合物包含至少一种缀合至对hK2具有结合特异性的抗体或抗原结合片段的放射性金属络合物，

该放射性金属络合物包含放射性金属，并且

在给药时，该放射性金属提供每剂该药物组合物约50μCi至约350μCi的靶向放射性。

1A.一种治疗患者的癌症的方法，该方法包括：

向该患者施用治疗有效量的药物组合物，该药物组合物包含放射性缀合物和一种或多种药学上可接受的赋形剂，其中：

该放射性缀合物包含至少一种缀合至对hK2具有结合特异性的抗体或抗原结合片段的放射性金属络合物，

该放射性金属络合物包含放射性金属，并且

在给药时，该放射性金属提供每剂该药物组合物约350μCi至约500μCi的靶向放射性。

2.根据实施方案1或1A所述的方法，其中该放射性缀合物包含至少一种缀合至对hK2具有结合特异性的抗体的放射性金属络合物。

3.根据实施方案2所述的方法，其中该抗体包含重链可变区和轻链可变区，该重链可变区包含SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2和SEQ ID NO:3的氨基酸序列；该轻链可变区包含SEQ ID NO:4和SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6的氨基酸序列。

4.根据实施方案2或3所述的方法，其中该抗体包含重链可变区(VH)和轻链可变区(VL)，该重链可变区与SEQ ID NO:8的氨基酸序列具有至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少98％序列同一性，该轻链可变区与SEQ ID NO:9的氨基酸序列具有至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少98％序列同一性。

5.根据实施方案2或3所述的方法，其中该抗体包含含有SEQ ID NO:8的氨基酸序列的重链可变区(VH)和含有SEQ ID NO:9的氨基酸序列的轻链可变区(VL)。

6.根据实施方案2至5中任一项所述的方法，其中该抗体包含重链恒定区和轻链恒定区，该重链恒定区与SEQ ID NO:10的氨基酸序列具有至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少98％序列同一性，该轻链恒定区与SEQ ID NO:11的氨基酸序列具有至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少98％序列同一性。

7.根据实施方案2至5中任一项所述的方法，其中该抗体包含含有SEQ ID NO:10的氨基酸序列的重链恒定区和含有SEQ ID NO:11的氨基酸序列的轻链恒定区。

8.根据实施方案2至7中任一项所述的方法，其中该抗体包含重链和轻链，该重链与SEQ ID NO:12的氨基酸序列具有至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少98％序列同一性，该轻链与SEQ ID NO:13的氨基酸序列具有至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少98％序列同一性。

9.根据实施方案2至7中任一项所述的方法，其中该抗体包含具有SEQ ID NO:12的氨基酸序列的重链和具有SEQ ID NO:13的氨基酸序列的轻链。

10.根据实施方案1至9或1A中任一项所述的方法，其中该放射性金属选自由以下项组成的组：²²⁵Ac、¹¹¹In、¹⁷⁷Lu、³²P、⁴⁷Sc、⁶⁷Cu、⁷⁷As、⁸⁹Sr、⁹⁰Y、⁹⁹Tc、¹⁰⁵Rh、¹⁰⁹Pd、¹¹¹Ag、¹³¹I、¹³⁴Ce、¹⁴⁹Tb、¹⁵²Tb、¹⁵⁵Tb、¹⁵³Sm、¹⁵⁹Gd、¹⁶⁵Dy、¹⁶⁶Ho、¹⁶⁹Er、¹⁸⁶Re、¹⁸⁸Re、¹⁹⁴Ir、¹⁹⁸Au、¹⁹⁹Au、²¹¹At、²¹²Pb、²¹²Bi、²¹³Bi、²²³Ra、²⁵⁵Fm和²²⁷Th。

11.根据实施方案1至9或1A中任一项所述的方法，其中该放射性金属为²²⁵Ac。

12.根据实施方案1至11或1A中任一项所述的方法，其中该放射性金属络合物包含选自由以下项组成的组的螯合剂：1,4,7,10-四氮杂环十二烷-1,4,7,10-四乙酸(DOTA)、S-2-(4-异硫氰基苄基)-1,4,7-三氮杂环壬烷-1,4,7-三乙酸(NOTA)、1,4,8,11-四氮杂环十二烷-1,4,8,11-四乙酸(TETA)、3,6,9,15-四氮杂双环[9.3.1]-十五碳-1(15),11,13-三烯-4-(S)-(4-异硫氰基苄基)-3,6,9-三乙酸(PCTA)、5-S-(4-氨基苄基)-1-氧杂-4,7,10-三氮杂环十二烷-4,7,10-三(乙酸)(DO3A)以及它们的衍生物。

13.根据实施方案1至11或1A中任一项所述的方法，其中该放射性金属络合物包含为DOTA的螯合剂。

13A.根据实施方案1至11或1A中任一项所述的方法，其中该放射性金属络合物包含为TOPA的螯合剂。

14.根据实施方案1至13或1A中任一项所述的方法，其中该放射性金属络合物包含螯合至DOTA的²²⁵Ac。

14A.根据实施方案1至11或1A中任一项所述的方法，其中该放射性金属络合物包含螯合至TOPA的²²⁵Ac。

15.根据实施方案1至11或1A中任一项所述的方法，其中该放射性缀合物包含螯合至以下项的放射性金属：(a)式(IV)的化合物

或其药学上可接受的盐，其中：

R₁为氢并且R₂为-L₁-R₄；

另选地，R₁为-L₁-R₄并且R₂为氢；

R₃为氢；

另选地，R₂和R₃与它们所附接的碳原子合在一起以形成5元或6元环烷基，其中所述5元或6元环烷基任选地被-L₁-R₄取代；

L₁不存在或为连接基；和

R₄为抗体；或者

(b)式(V)的化合物

或其药学上可接受的盐，其中：

L₁不存在或为连接基；和

R₄为抗体；

例如，其中用于形成该放射性缀合物的该螯合剂为下式的化合物或其药学上可接受的盐：

16.根据实施方案2至15或13A或14A中任一项所述的方法，其中该放射性金属为²²⁵Ac并且该放射性金属提供每约2mg总抗体约25μCi至约350μCi、或每约2mg总抗体约50μCi至约350μCi的靶向比活性。

16A.根据实施方案2至15或13A或14A中任一项所述的方法，其中该放射性金属为²²⁵Ac并且该放射性金属提供每约2mg总抗体至约10mg总抗体(例如，每约4mg总抗体)约25μCi至约350μCi的靶向比活性；或者每约2mg总抗体至约10mg总抗体(例如，每约4mg总抗体)约50μCi至约350μCi的靶向比活性。

17.根据实施方案2至15或13A或14A中任一项所述的方法，其中该放射性金属为²²⁵Ac并且该放射性金属提供每约2mg总抗体约25μCi至约300μCi、或每约2mg总抗体约50μCi至约300μCi的靶向比活性。

17A.根据实施方案2至15或13A或14A中任一项所述的方法，其中该放射性金属为²²⁵Ac并且该放射性金属提供每约2mg总抗体至约10mg总抗体(例如，每约4mg总抗体)约25μCi至约300μCi的靶向比活性；或者每约2mg总抗体至约10mg总抗体(例如，每约4mg总抗体)约50μCi至约300μCi的靶向比活性。

18.根据实施方案2至15或13A或14A中任一项所述的方法，其中该放射性金属为²²⁵Ac并且该放射性金属提供每约2mg总抗体约25μCi至约250μCi、或每约2mg总抗体约50μCi至约250μCi的靶向比活性。

18A.根据实施方案2至15或13A或14A中任一项所述的方法，其中该放射性金属为²²⁵Ac并且该放射性金属提供每约2mg总抗体至约10mg总抗体(例如，每约4mg总抗体)约25μCi至约250μCi的靶向比活性；或者每约2mg总抗体至约10mg总抗体(例如，每约4mg总抗体)约50μCi至约250μCi的靶向比活性。

19.根据实施方案2至15或13A或14A中任一项所述的方法，其中该放射性金属为²²⁵Ac并且该放射性金属提供每约2mg总抗体约25μCi至约200μCi、或每约2mg总抗体约50μCi至约200μCi的靶向比活性。

20.根据实施方案2至15或13A或14A中任一项所述的方法，其中该放射性金属为²²⁵Ac并且该放射性金属提供每约2mg总抗体约25μCi至约150μCi、或每约2mg总抗体约50μCi至约150μCi的靶向比活性。

21.根据实施方案2至15或13A或14A中任一项所述的方法，其中该放射性金属为²²⁵Ac并且该放射性金属提供每约2mg总抗体约25μCi至约100μCi、或每约2mg总抗体约50μCi至约100μCi的靶向比活性。

22.根据实施方案2至15或13A或14A中任一项所述的方法，其中该放射性金属为²²⁵Ac并且该放射性金属提供每约2mg总抗体约150μCi至约250μCi的靶向比活性。

23.根据实施方案2至15或13A或14A中任一项所述的方法，其中该放射性金属为²²⁵Ac并且该放射性金属提供每约2mg总抗体约50μCi的靶向比活性。

24.根据实施方案2至15或13A或14A中任一项所述的方法，其中该放射性金属为²²⁵Ac并且该放射性金属提供每约2mg总抗体约100μCi的靶向比活性。

25.根据实施方案2至15或13A或14A中任一项所述的方法，其中该放射性金属为²²⁵Ac并且该放射性金属提供每约2mg总抗体约150μCi的靶向比活性。

26.根据实施方案2至15或13A或14A中任一项所述的方法，其中该放射性金属为²²⁵Ac并且该放射性金属提供每约2mg总抗体约200μCi的靶向比活性。

27.根据实施方案2至26或13A或14A或16A或17A或18A中任一项所述的方法，其中该药物组合物包含约1μCi/mL至约100μCi/mL、或约5μCi/mL至约75μCi/mL、或约10μCi/mL至约60μCi/mL、或约12.5μCi/mL至约50μCi/mL、或约12.5μCi/mL、或约25μCi/mL、或约37.5μCi/mL、或约50μCi/mL的靶向放射性浓度。

28.根据实施方案2至26或13A或14A或16A或17A或18A中任一项所述的方法，其中该药物组合物包含约1mg至约5mg总抗体、或约1mg至约4mg总抗体。

28A.根据实施方案2至26或13A或14A或16A或17A或18A中任一项所述的方法，其中该药物组合物包含约1mg至约10mg总抗体、或约2mg至约8mg总抗体。

29.根据实施方案2至26或13A或14A或16A或17A或18A中任一项所述的方法，其中该药物组合物包含约1mg至约4mg总抗体。

30.根据实施方案2至26或13A或14A或16A或17A或18A中任一项所述的方法，其中该药物组合物包含约1mg至约3mg总抗体。

31.根据实施方案2至26或13A或14A或16A或17A或18A中任一项所述的方法，其中该药物组合物包含约1.5mg至约2.5mg总抗体。

32.根据实施方案2至26或13A或14A或16A或17A或18A中任一项所述的方法，其中该药物组合物包含约2mg总抗体。

32A.根据实施方案2至26或13A或14A或16A或17A或18A中任一项所述的方法，其中该药物组合物包含约4mg总抗体或约8mg总抗体。

33.根据实施方案1至31或1A或13A或14A或16A或17A或18A或28A中任一项所述的方法，其中该一种或多种药学上可接受的赋形剂包含一种或多种辐射防护剂。

34.根据实施方案32或32A所述的方法，其中该一种或多种辐射防护剂包括抗坏血酸钠、龙胆酸或它们的组合。

35.根据实施方案32或32A所述的方法，其中该一种或多种辐射防护剂包括抗坏血酸钠。

36.根据实施方案32或32A所述的方法，其中该一种或多种辐射防护剂包括龙胆酸。

37.根据实施方案1至35或1A或13A或14A或16A或17A或18A或28A或32A中任一项所述的方法，其中该一种或多种药学上可接受的赋形剂还包含一种或多种表面活性剂。

38.根据实施方案36所述的方法，其中该一种或多种表面活性剂包括聚山梨酸酯20。

39.根据实施方案1至37或1A或13A或14A或16A或17A或18A或28A或32A中任一项所述的方法，其中该一种或多种药学上可接受的赋形剂还包含乙酸盐缓冲液。

40.根据实施方案1至38或1A或13A或14A或16A或17A或18A或28A或32A中任一项所述的方法，其中该药物组合物包含放射性缀合物、抗坏血酸钠、聚山梨酸酯20、乙酸盐缓冲液和水(并且可任选地添加乙酸用于pH调节)。

41.根据实施方案1至38或1A或13A或14A或16A或17A或18A或28A或32A中任一项所述的方法，其中该药物组合物包含放射性缀合物、约24mM至28mM乙酸盐、约0.25％至0.75％抗坏血酸钠和约0.01％至0.15％聚山梨酸酯20的水溶液。

42.根据实施方案1至38或1A或13A或14A或16A或17A或18A或28A或32A中任一项所述的方法，其中该药物组合物包含放射性缀合物、约25mM乙酸盐、约0.5％抗坏血酸钠和约0.04％聚山梨酸酯20的水溶液。

43.根据实施方案1至38或1A或13A或14A或16A或17A或18A或28A或32A中任一项所述的方法，其中该药物组合物包含放射性缀合物、约26.75mM乙酸盐、约0.5％抗坏血酸钠和约0.04％聚山梨酸酯20的水溶液。

44.根据实施方案1至42或1A或13A或14A或16A或17A或18A或28A或32A中任一项所述的方法，其中该药物组合物具有约5至约6(例如，约5.5)的pH。

45.根据实施方案1至43或1A或13A或14A或16A或17A或18A或28A或32A中任一项所述的方法，其中该药物组合物不含任何防腐剂。

46.根据实施方案1至44或1A或13A或14A或16A或17A或18A或28A或32A中任一项所述的方法，其中该药物组合物不含任何蔗糖。

47.根据实施方案1至44或1A或13A或14A或16A或17A或18A或28A或32A中任一项所述的方法，其中该药物组合物不含任何单糖、二糖、寡糖或多糖。

48.根据实施方案1至44或1A或13A或14A或16A或17A或18A或28A或32A中任一项所述的方法，其中该药物组合物不含任何单糖或二糖。

49.根据实施方案1至44或1A或13A或14A或16A或17A或18A或28A或32A中任一项所述的方法，其中该药物组合物不含任何二糖。

50.根据实施方案1至48或1A或13A或14A或16A或17A或18A或28A或32A中任一项所述的方法，其中该药物组合物在约2℃至8℃的温度范围处稳定至少约72小时、或至少约96小时、或至少约120小时。

51.根据实施方案2至49或13A或14A或16A或17A或18A或28A或32A中任一项所述的方法，其中该药物组合物的剂量具有约1mL至约20mL、或约1mL至约10mL、或约2mL至约6mL、或约3mL至约5mL、或约4mL的体积。

52.根据实施方案2至49或13A或14A或16A或17A或18A或28A或32A中任一项所述的方法，其中该药物组合物的剂量包含每约4mL剂量约2mg总抗体。

53.根据实施方案2至51或13A或14A或16A或17A或18A或28A或32A中任一项所述的方法，其中该药物组合物包含约0.1mg/mL至1.0mg/mL、或约0.4mg/mL至0.6mg/mL、或约0.5mg/mL的量的总抗体。

54.根据实施方案2至52或13A或14A或16A或17A或18A或28A或32A中任一项所述的方法，其中该药物组合物还包含非放射性标记的抗体(例如，缀合物中间体，诸如DOTA-mAb，例如DOTA-h11B6)，其中该非放射性标记的抗体是与缀合至该放射性金属络合物的该抗体相同的抗体。

55.根据实施方案53所述的方法，其中该缀合抗体和该非放射性标记抗体的总量不超过约10mg、或约9mg、或约8mg、或约7mg、或约6mg、或约5mg、或约4mg、或约3mg、或约2mg。

56.根据实施方案1至54或1A或13A或14A或16A或17A或18A或28A或32A中任一项所述的方法，包括向该患者静脉内施用该药物组合物。

57.根据实施方案1至55或1A或13A或14A或16A或17A或18A或28A或32A中任一项所述的方法，包括在将该放射性金属螯合至缀合物中间体以形成该放射性缀合物后约168小时内、或约144小时内、或约120小时内、或约96小时内、或约72小时内、或约48小时内、或约24小时内向该患者施用该药物组合物。

58.根据实施方案1至56或1A或13A或14A或16A或17A或18A或28A或32A中任一项所述的方法，包括每约4周向该患者施用一次该药物组合物。

59.根据实施方案1至56或1A或13A或14A或16A或17A或18A或28A或32A中任一项所述的方法，包括每约8周向该患者施用一次该药物组合物。

60.根据实施方案1至56或1A或13A或14A或16A或17A或18A或28A或32A中任一项所述的方法，包括每约12周向该患者施用一次该药物组合物。

61.根据实施方案1至59或1A或13A或14A或16A或17A或18A或28A或32A中任一项所述的方法，其中该癌症是前列腺癌。

62.根据实施方案1至59或1A或13A或14A或16A或17A或18A或28A或32A中任一项所述的方法，其中该癌症是非局部前列腺癌。

63.根据实施方案1至59或1A或13A或14A或16A或17A或18A或28A或32A中任一项所述的方法，其中该癌症是转移性前列腺癌。

64.根据实施方案1至59或1A或13A或14A或16A或17A或18A或28A或32A中任一项所述的方法，其中该癌症是去势抵抗性前列腺癌(CRPC)。

65.根据实施方案1至59或1A或13A或14A或16A或17A或18A或28A或32A中任一项所述的方法，其中该癌症是转移性去势抵抗性前列腺癌(mCRPC)。

66.根据实施方案1至59或1A或13A或14A或16A或17A或18A或28A或32A中任一项所述的方法，其中该癌症是伴有腺癌的mCRPC。

67.根据实施方案1至65或1A或13A或14A或16A或17A或18A或28A或32A中任一项所述的方法，其中该患者的睾酮去势水平为约50ng/dL或更低。

68.根据实施方案1至66或1A或13A或14A或16A或17A或18A或28A或32A中任一项所述的方法，其中该患者先前已暴露于至少一种雄激素受体(AR)靶向疗法。

69.根据实施方案67所述的方法，其中该AR靶向疗法是醋酸阿比特龙、恩扎鲁胺、阿帕他胺、达洛鲁胺或前述任一种的组合。

70.根据实施方案1至68或1A或13A或14A或16A或17A或18A或28A或32A中任一项所述的方法，其中该患者先前进行过化学疗法。

71.根据实施方案69所述的方法，其中该化学疗法涉及施用紫杉烷。

72.根据实施方案1至70或1A或13A或14A或16A或17A或18A或28A或32A中任一项所述的方法，其中该患者先前进行过睾丸切除术或医学阉割。

73.根据实施方案1至71或1A或13A或14A或16A或17A或18A或28A或32A中任一项所述的方法，其中该患者正在接受用促性腺激素释放激素(GnRH)激动剂或拮抗剂进行的雄激素去势疗法。

74.根据实施方案1至72或1A或13A或14A或16A或17A或18A或28A或32A中任一项所述的方法，包括将该剂量在单次施用中施用给该患者。

75.根据实施方案1至72或1A或13A或14A或16A或17A或18A或28A或32A中任一项所述的方法，包括以多于一个子剂量的多次施用来施用该剂量。

75A.根据实施方案75所述的方法，包括以两个子剂量(例如，两个4mL子剂量)施用该剂量。

76.一种药物组合物，包含：

放射性缀合物和一种或多种药学上可接受的赋形剂，其中：

该放射性缀合物包含至少一种缀合至对hK2具有结合特异性的抗体或抗原结合片段的放射性金属络合物，并且

该放射性金属络合物包含放射性金属。

77.根据实施方案76所述的药物组合物，其中该一种或多种药学上可接受的赋形剂包含一种或多种辐射防护剂。

78.根据实施方案76或77所述的药物组合物，其中该放射性缀合物包含至少一种缀合至对hK2具有结合特异性的抗体的放射性金属络合物。

79.根据实施方案78所述的药物组合物，其中该抗体包含重链可变区和轻链可变区，该重链可变区包含SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2和SEQ ID NO:3的氨基酸序列；该轻链可变区包含SEQ ID NO:4和SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6的氨基酸序列。

80.根据实施方案78或实施方案79所述的药物组合物，其中该抗体包含重链可变区(VH)和轻链可变区(VL)，该重链可变区与SEQ ID NO:8的氨基酸序列具有至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少98％序列同一性，该轻链可变区与SEQ ID NO:9的氨基酸序列具有至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少98％序列同一性。

81.根据实施方案78或实施方案79所述的药物组合物，其中该抗体包含含有SEQID NO:8的氨基酸序列的重链可变区(VH)和含有SEQ ID NO:9的氨基酸序列的轻链可变区(VL)。

82.根据实施方案78至81中任一项所述的药物组合物，其中该抗体包含重链恒定区和轻链恒定区，该重链恒定区与SEQ ID NO:10的氨基酸序列具有至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少98％序列同一性，该轻链恒定区与SEQ ID NO:11的氨基酸序列具有至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少98％序列同一性。

83.根据实施方案78至81中任一项所述的药物组合物，其中该抗体包含含有SEQID NO:10的氨基酸序列的重链恒定区和含有SEQ ID NO:11的氨基酸序列的轻链恒定区。

84.根据实施方案78至83中任一项所述的药物组合物，其中该抗体包含重链和轻链，该重链与SEQ ID NO:12的氨基酸序列具有至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少98％序列同一性，该轻链与SEQ ID NO:13的氨基酸序列具有至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少98％序列同一性。

85.根据实施方案78至83中任一项所述的药物组合物，其中该抗体包含具有SEQID NO:12的氨基酸序列的重链和具有SEQ ID NO:13的氨基酸序列的轻链。

86.根据实施方案76至85中任一项所述的药物组合物，其中该放射性金属选自由以下项组成的组：²²⁵Ac、¹¹¹In、¹⁷⁷Lu、³²P、⁴⁷Sc、⁶⁷Cu、⁷⁷As、⁸⁹Sr、⁹⁰Y、⁹⁹Tc、¹⁰⁵Rh、¹⁰⁹Pd、¹¹¹Ag、¹³¹I、¹³⁴Ce、¹⁴⁹Tb、¹⁵²Tb、¹⁵⁵Tb、¹⁵³Sm、¹⁵⁹Gd、¹⁶⁵Dy、¹⁶⁶Ho、¹⁶⁹Er、¹⁸⁶Re、¹⁸⁸Re、¹⁹⁴Ir、¹⁹⁸Au、¹⁹⁹Au、²¹¹At、²¹²Pb、²¹²Bi、²¹³Bi、²²³Ra、²⁵⁵Fm和²²⁷Th。

87.根据实施方案76至85中任一项所述的药物组合物，其中该放射性金属为²²⁵Ac。

88.根据实施方案76至87中任一项所述的药物组合物，其中该放射性金属络合物包含选自由以下项组成的组的螯合剂：1,4,7,10-四氮杂环十二烷-1,4,7,10-四乙酸(DOTA)、S-2-(4-异硫氰基苄基)-1,4,7-三氮杂环壬烷-1,4,7-三乙酸(NOTA)、1,4,8,11-四氮杂环十二烷-1,4,8,11-四乙酸(TETA)、3,6,9,15-四氮杂双环[9.3.1]-十五碳-1(15),11,13-三烯-4-(S)-(4-异硫氰基苄基)-3,6,9-三乙酸(PCTA)、5-S-(4-氨基苄基)-1-氧杂-4,7,10-三氮杂环十二烷-4,7,10-三(乙酸)(DO3A)以及它们的衍生物。

89.根据实施方案76至87中任一项所述的药物组合物，其中该放射性金属络合物包含为DOTA的螯合剂。

90.根据实施方案76至89中任一项所述的药物组合物，其中该放射性金属络合物包含螯合至DOTA的²²⁵Ac。

91.根据实施方案76至87中任一项所述的药物组合物，其中该放射性缀合物包含螯合至以下项的放射性金属：(a)式(IV)的化合物

或其药学上可接受的盐，其中：

R₁为氢并且R₂为-L₁-R₄；

另选地，R₁为-L₁-R₄并且R₂为氢；

R₃为氢；

另选地，R₂和R₃与它们所附接的碳原子合在一起以形成5元或6元环烷基，其中所述5元或6元环烷基任选地被-L₁-R₄取代；

L₁不存在或为连接基；和

R₄为抗体；或者

(b)式(V)的化合物

或其药学上可接受的盐，其中：

L₁不存在或为连接基；和

R₄为抗体；

例如，其中用于形成该放射性缀合物的该螯合剂为下式的化合物或其药学上可接受的盐：

92.根据实施方案77至91中任一项所述的药物组合物，其中该一种或多种辐射防护剂包括抗坏血酸钠、龙胆酸或它们的组合(例如，以约0.1w/v％至约5w/v％、或约0.1w/v％至约4w/v％、或约0.1w/v％至约3w/v％、约0.1w/v％至约2w/v％、或约0.1w/v％至约1w/v％、或约0.25w/v％至约0.75w/v％、或约0.5w/v％的量)。

93.根据实施方案77至91中任一项所述的药物组合物，其中该一种或多种辐射防护剂包括抗坏血酸钠(例如，以约0.1w/v％至约5w/v％、或约0.1w/v％至约4w/v％、或约0.1w/v％至约3w/v％、约0.1w/v％至约2w/v％、或约0.1w/v％至约1w/v％、或约0.25w/v％至约0.75w/v％、或约0.5w/v％的量)。

94.根据实施方案77至91中任一项所述的药物组合物，其中该一种或多种辐射防护剂包括龙胆酸(例如，以约0.1w/v％至约5w/v％、或约0.1w/v％至约4w/v％、或约0.1w/v％至约3w/v％、约0.1w/v％至约2w/v％、或约0.1w/v％至约1w/v％、或约0.25w/v％至约0.75w/v％、或约0.5w/v％的量)。

95.根据实施方案76至94中任一项所述的药物组合物，其中该一种或多种药学上可接受的赋形剂还包含一种或多种表面活性剂。

96.根据实施方案95所述的药物组合物，其中该一种或多种表面活性剂包括聚山梨酸酯20。

97.根据实施方案76至96中任一项所述的药物组合物，其中该一种或多种药学上可接受的赋形剂还包含乙酸盐缓冲液。

98.根据实施方案76至97中任一项所述的药物组合物，包含该放射性缀合物、抗坏血酸钠、聚山梨酸酯20、乙酸盐缓冲液和水(并且可任选地添加乙酸以调节pH)。

99.根据实施方案76至97中任一项所述的药物组合物，包含该放射性缀合物、约24mM至28mM乙酸盐、约0.25w/v％至0.75w/v％抗坏血酸钠和约0.01w/v％至0.15w/v％聚山梨酸酯20的水溶液。

100.根据实施方案76至97中任一项所述的药物组合物，包含该放射性缀合物、约25mM乙酸盐、约0.5w/v％抗坏血酸钠和约0.04w/v％聚山梨酸酯20的水溶液。

101.根据实施方案76至97中任一项所述的药物组合物，包含该放射性缀合物、约26.75mM乙酸盐、约0.5w/v％抗坏血酸钠和约0.04w/v％聚山梨酸酯20的水溶液。

102.根据实施方案76至101中任一项所述的药物组合物，其中该药物组合物具有约5至约6(例如，约5.5)的pH。

103.根据实施方案76至101中任一项所述的药物组合物，其中该药物组合物不含任何防腐剂。

104.根据实施方案76至103中任一项所述的药物组合物，其中该药物组合物不含任何蔗糖。

105.根据实施方案76至103中任一项所述的药物组合物，其中该药物组合物不含任何单糖、二糖、寡糖或多糖。

106.根据实施方案76至103中任一项所述的药物组合物，其中该药物组合物不含任何单糖或二糖。

107.根据实施方案76至103中任一项所述的药物组合物，其中该药物组合物不含任何二糖。

108.根据实施方案76至103中任一项所述的药物组合物，其中该一种或多种药学上可接受的赋形剂由或基本上由乙酸盐缓冲液、抗坏血酸钠和聚山梨酸酯20的水溶液组成。

109.根据实施方案76至108中任一项所述的药物组合物，其中该药物组合物被配制成用于静脉内施用。

110.根据实施方案76至109中任一项所述的药物组合物，其中该药物组合物在约2℃至8℃的温度范围处稳定至少72小时、或至少96小时、或至少120小时。

111.根据实施方案77至110中任一项所述的药物组合物，其中该放射性缀合物包含平均约1个至约4个、或约2个至约3个缀合至该抗体的螯合剂分子。

112.根据实施方案77至111中任一项所述的药物组合物，其中该放射性金属为²²⁵Ac并且该放射性金属提供每约2mg总抗体约50μCi至约350μCi的比活性。

112A.根据实施方案77至111中任一项所述的药物组合物，其中该放射性金属为²²⁵Ac并且该放射性金属提供每约2mg至约10mg总抗体约50μCi至约350μCi的比活性。

112B.根据实施方案77至111中任一项所述的药物组合物，其中该放射性金属为²²⁵Ac并且该放射性金属提供每约2mg至约10mg总抗体约350μCi至约500μCi的比活性。

113.根据实施方案77至111中任一项所述的药物组合物，其中该放射性金属为²²⁵Ac并且该放射性金属提供每约2mg总抗体约50μCi至约300μCi的比活性。

113A.根据实施方案77至111中任一项所述的药物组合物，其中该放射性金属为²²⁵Ac并且该放射性金属提供每约2mg至约10mg总抗体约50μCi至约300μCi的比活性。

114.根据实施方案77至111中任一项所述的药物组合物，其中该放射性金属为²²⁵Ac并且该放射性金属提供每约2mg总抗体约50μCi至约250μCi的比活性。

114A.根据实施方案77至111中任一项所述的药物组合物，其中该放射性金属为²²⁵Ac并且该放射性金属提供每约2mg至约10mg总抗体约50μCi至约250μCi的比活性。

115.根据实施方案77至111中任一项所述的药物组合物，其中该放射性金属为²²⁵Ac并且该放射性金属提供每约2mg总抗体约50μCi至约200μCi的比活性。

116.根据实施方案77至111中任一项所述的药物组合物，其中该放射性金属为²²⁵Ac并且该放射性金属提供每约2mg总抗体约50μCi至约150μCi的比活性。

117.根据实施方案77至111中任一项所述的药物组合物，其中该放射性金属为²²⁵Ac并且该放射性金属提供每约2mg总抗体约50μCi至约100μCi的比活性。

118.根据实施方案77至111中任一项所述的药物组合物，其中该放射性金属为²²⁵Ac并且该放射性金属在给药时提供每约2mg总抗体约50μCi至约200μCi的靶向比活性。

119.根据实施方案77至111中任一项所述的药物组合物，其中该放射性金属为²²⁵Ac并且该放射性金属在给药时提供每约2mg总抗体约50μCi的靶向比活性。

120.根据实施方案77至111中任一项所述的药物组合物，其中该放射性金属为²²⁵Ac并且该放射性金属在给药时提供每约2mg总抗体约100μCi的靶向比活性。

121.根据实施方案77至111中任一项所述的药物组合物，其中该放射性金属为²²⁵Ac并且该放射性金属在给药时提供每约2mg总抗体约150μCi的靶向比活性。

122.根据实施方案77至111中任一项所述的药物组合物，其中该放射性金属为²²⁵Ac并且该放射性金属在给药时提供每约2mg总抗体约200μCi的靶向比活性。

122A.根据实施方案77至111中任一项所述的药物组合物，其中该放射性金属为²²⁵Ac并且该放射性金属在给药时提供每约4mg总抗体约300μCi的靶向比活性。

123.根据实施方案77至122中任一项所述的药物组合物，包含约1mg至约20mg总抗体。

124.根据实施方案77至122中任一项所述的药物组合物，包含约1mg至约10mg总抗体。

125.根据实施方案77至122中任一项所述的药物组合物，包含约1mg至约5mg总抗体。

126.根据实施方案77至122中任一项所述的药物组合物，包含约2mg总抗体。

127.根据实施方案77至122中任一项所述的药物组合物，包含约10mg总抗体。

128.根据实施方案77至127中任一项所述的药物组合物，包含总量为约0.1mg/mL至1.0mg/mL的缀合物中间体和该放射性缀合物。

129.根据实施方案77至127中任一项所述的药物组合物，包含总量为约0.4mg/mL至0.6mg/mL的缀合物中间体和该放射性缀合物。

130.根据实施方案77至127中任一项所述的药物组合物，包含总量为约0.5mg/mL的缀合物中间体和该放射性缀合物。

131.根据实施方案77至127中任一项所述的药物组合物，还包含非放射性标记的抗体(例如，缀合物中间体，诸如DOTA-mAb，例如DOTA-h11B6)，其中该非放射性标记的抗体是与缀合至该放射性金属络合物的该抗体相同的抗体。

132.根据实施方案131所述的药物组合物，其中该缀合抗体和该非放射性标记抗体的总量不超过约10mg、或约9mg、或约8mg、或约7mg、或约6mg、或约5mg、或约4mg、或约3mg、或约2mg。

133.一种用于治疗患者的癌症的方法，该方法包括向该患者施用治疗有效量的实施方案76至132、或112A、或112B、或113A、或114A、或122A中任一项的药物组合物。

134.根据实施方案133所述的方法，包括每约4周向该患者施用一次该药物组合物。

135.根据实施方案133所述的方法，包括每约8周向该患者施用一次该药物组合物。

136.根据实施方案133所述的方法，包括每约12周向该患者施用一次该药物组合物。

137.根据实施方案133至136中任一项所述的方法，其中该癌症是前列腺癌。

138.根据实施方案133至136中任一项所述的方法，其中该癌症是非局部前列腺癌。

139.根据实施方案133至136中任一项所述的方法，其中该癌症是转移性前列腺癌。

140.根据实施方案133至136中任一项所述的方法，其中该癌症是去势抵抗性前列腺癌(CRPC)。

141.根据实施方案133至136中任一项所述的方法，其中该癌症是转移性去势抵抗性前列腺癌(mCRPC)。

142.根据实施方案133至136中任一项所述的方法，其中该癌症是伴有腺癌的mCRPC。

143.根据实施方案133至142中任一项所述的方法，其中该患者的睾酮去势水平为约50ng/dL或更低。

144.根据实施方案133至143中任一项所述的方法，其中该患者先前已暴露于至少一种雄激素受体(AR)靶向疗法。

145.根据实施方案144所述的方法，其中该AR靶向疗法是醋酸阿比特龙、恩扎鲁胺、阿帕他胺、达洛鲁胺或前述任一种的组合。

146.根据实施方案133至145中任一项所述的方法，其中该患者先前进行过化学疗法。

147.根据实施方案146所述的方法，其中该化学疗法涉及施用紫杉烷。

148.根据实施方案133至147中任一项所述的方法，其中该患者先前进行过睾丸切除术或医学阉割。

149.根据实施方案133至148中任一项所述的方法，其中该患者正在接受用促性腺激素释放激素(GnRH)激动剂或拮抗剂进行的雄激素去势疗法。

150.根据实施方案76至132或112A或112B或113A或114A或122A中任一项所述的药物组合物，该药物组合物用于治疗癌症；例如，前列腺癌，诸如mCRPC。

151.一种制备根据实施方案76至132或112A或112B或113A或114A或122A中任一项所述的药物组合物的方法，该方法包括将第一中间体组合物和第二中间体组合物组合以形成该药物组合物，其中：该第一中间体组合物包含放射性缀合物，并且该第二中间体组合物包含缀合物中间体并且不包含任何放射性缀合物。

152.根据实施方案151所述的方法，其中该放射性缀合物和该缀合物中间体包含相同的抗体。

153.根据实施方案151所述的方法，其中该放射性缀合物和该缀合物中间体包含相同的抗体和相同的螯合剂。

154.根据实施方案151至153中任一项所述的方法，其中该第一中间体组合物和该第二中间体组合物包含相同的药学上可接受的赋形剂。

155.根据实施方案151至153中任一项所述的方法，其中该第一中间体组合物和该第二中间体组合物包含相同量或基本上相同量的相同的药学上可接受的赋形剂。

156.根据实施方案151至155中任一项所述的方法，还包括将该放射性金属螯合至缀合物中间体以形成该放射性缀合物。

根据特定实施方案，包括上述枚举的实施方案1至156或16A、17A、18A、28A、32A、75A、112A、112B、113A、114A或122A中的任一项，该放射性缀合物为²²⁵Ac-DOTA-h11B6。

根据特定实施方案，包括上述枚举的实施方案1至156或16A、17A、18A、28A、32A、75A、112A、112B、113A、114A或122A中的任一项，该放射性缀合物为TOPA-[C7]-苯基硫脲-h11B6抗体缀合物，诸如²²⁵Ac-TOPA-h11B6(例如，如图6A至图6C所示)。

以下实施例旨在进一步说明本发明的实质。应当理解，以下实施例不限制本发明。

实施例

以下实施例中使用的h11B6抗体包含根据SEQ ID NO:12的重链和根据SEQ ID NO:13的轻链。

实施例1：¹¹¹In-DOTA-h11B6在人体中的0期成像研究

进行¹¹¹In-DOTA-h11B6的首次人体0期成像研究以确定靶向hK2在患有晚期前列腺癌的受试者中的放射性免疫治疗潜力。(临床试验标识符NCT04116164)。

2Mg[111In]-DOTA-h11B6(标称185MBq[111In])的单次缓慢推注输注与或不与8mgh11B6一起静脉内施用。施用给患者的制剂是0.5mg/mL¹¹¹In-DOTA-h11B6的25mM乙酸盐、8.5％蔗糖(w/v)、0.04％聚山梨酸酯20(w/v)，pH 5.5。获得该制剂的紫外和放射性HPLC色谱图。参见图1A和图1B。

观察患者的不良事件(AE)至少2周。进行包括至少一次SPECT/CT扫描的连续γ照相机成像直至施用后8天。在2周内获得系列血液样本以测定血清放射性和h11B6蛋白质水平。使用OLINDA-EXM估计正常器官的剂量测定。

前6名患者的结果总结在表1中。治疗在所有患者中是耐受的，没有不良事件并且没有在任何器官(包括唾液腺)中增加积累的证据。最初的分布体积似乎局限于血管隔室。在所有患者中观察到放射性从血管隔室的缓慢清除，逐渐靶向骨骼和非骨骼病变。定位于骨骼和软组织转移的h11B6mAb没有显著的正常组织摄取，并且保留了唾液腺。血清药代动力学和关键的正常器官(肝、脾、肾)生物分布均显示在2mg和10mg抗体质量量下抗体的生物行为基本上没有差异。

表1：患者特征、施用量和肿瘤靶向。

患者编号	PSA	肿瘤位置	mAb质量	[111In](MBq)	靶向
						1	19.73	骨	2mg	218	是
2	22.58	肝脏	2mg	221	是
						3	39.33	骨	2mg	202	是
4	4.96	骨	10mg	206	是
						5	49.39	骨	10mg	196	是
6	N/A	节点	10mg	193	是

实施例2：包含²²⁵Ac-DOTA-h11B6的制剂“A”的制备

为了制备包含缀合至h11B6的锕的制剂，制备阶段0中使用的相同制剂，但用²²⁵Ac-DOTA-h11B6代替¹¹¹In-DOTA-h11B6。制备“制剂A”，其含有0.5mg/mL ²²⁵Ac-DOTA-h11B6的26.75mM乙酸盐、8.5％蔗糖(w/v)和0.04％聚山梨酸酯20(w/v)，pH 5.5。在该制剂的紫外和放射性HPLC色谱图中观察到辐解分解降解物。参见图2A和图2B。辐解分解降解物被鉴定为由制剂中蔗糖的放射性分解产生。

实施例3：包含²²⁵Ac-DOTA-h11B6的制剂“B”的制备

由于由初级辐射形成次级辐射分解降解产物，从制剂A中消除了冷冻保护剂蔗糖。将形式从冷冻固体改变为液体溶液。然而，蔗糖的消除导致²²⁵Ac-DOTA-h11B6药物产品的加速降解，特别是h11B6抗体的加速降解。添加0.5％w/v抗坏血酸钠(维生素C)作为牺牲性辐射防护剂以减弱降解，这产生含有0.5mg/mL ²²⁵Ac-DOTA-h11B6的26.75mM乙酸盐、0.5％w/v抗坏血酸钠(维生素C)和0.04％聚山梨酸酯20的“制剂B”，pH 5.5。获得该制剂的紫外和放射性HPLC色谱图。参见图3A至图3D。²²⁵Ac-DOTA-h11B6药物产品的降解在制剂B中显著降低。

实施例4：²²⁵Ac-DOTA-h11B6和包含²²⁵Ac-DOTA-h11B6的制剂“B”的制备

尽管该实施例描述了含有²²⁵Ac-DOTA-h11B6的药物产品的制备，但类似的方法也可用于制备含有²²⁵Ac-TOPA-h11B6代替²²⁵Ac-DOTA-h11B6的药物产品。

本实施例描述了制备²²⁵Ac-DOTA-h11B6药物产品和含有该药物产品的溶液的方法。例如，在美国专利10,100,125中描述了抗体h11B6，该专利以引用方式并入本文。抗体h11B6还可以使用美国专利9,873,891中描述的方法制备，该专利以引用方式并入本文，使用CHO DG44衍生的细胞系和hEF1α启动子双基因载体，可从Fujifilm DiosynthBiotechnologies商购获得。

预培养和扩增后，可使用已知的过滤技术使细胞培养物澄清。浓缩滤液并在缓冲液(25mM NaOAc，pH 5.5)中渗滤至10g/L的目标终浓度。将h11B6通过0.2μm过滤器过滤，填充到灭菌袋中，并且可以在缀合之前在≤-65℃下冷冻用于长期储存。

然后将解冻的h11B6渗滤(缓冲液交换)至50mM Bicine，120mM NaCl，pH 8.5，用于随后将DOTA(1,4,7,10-四氮杂环十二烷-1,4,7,10-四乙酸)缀合至h11B6。将来自前一步骤的渗余物转移至反应器中并搅拌，同时升温至25℃。制备p-SCN-Bn-DOTA的水溶液并加入到反应器中。将反应在25℃下保持20小时。将缀合反应的产物(DOTA-h11B6)直接转移到渗余物容器中，用于用25mM NaOAc，pH 5.5进行最终渗滤。接着，将DOTA-h11B6缀合物中间体通过0.2μm过滤器过滤，填充到灭菌的聚碳酸酯容器中，并且可以在≤-65℃下冷冻用于长期储存。

缀合反应导致多个DOTA分子添加到h11B6 mAb的赖氨酸侧链的ε氨基基团上。缀合物与抗体的比率(CAR)，其表示每个h11B6 mAb分子的DOTA分子的数目，可以通过使用带有在线质量分析的RP-HPLC的完整质量分析来测量。基于p-SCN-Bn-DOTA的分子结构，每个DOTA残基向抗体添加552Da质量，这可以通过完整的质量分析容易地检测。为了降低样本复杂性，用PNGase F处理DOTA-h11B6缀合物中间体以除去N-键合的聚糖并用羧肽酶B处理以除去C末端赖氨酸残基。2.6的DOTA-h11B6的平均CAR计算为所有检测到的CAR种类的加权平均值。

²²⁵Ac-DOTA-h11B6药物产品在连续操作中由前体DOTA-h11B6缀合物中间体产生，其与²²⁵三氯化锕反应以产生具有≥170μCi/mg的目标比活性的²²⁵锕-放射性标记的药物物质。合成²²⁵Ac-DOTA-h11B6药物物质，通过PD-10柱纯化进行纯化，并原位配制。如下所述，通过将²²⁵Ac-DOTA-h11B6药物物质与DOTA-h11B6和重新配制缓冲液混合来制备四种药物产品形式(在2mg蛋白质中为50μCi、100μCi、150μCi和200μCi)。将混合的产品分别无菌过滤并无菌填充到最终的患者小瓶中。

制备中间纯化缓冲液(26.75mM乙酸盐、0.04％聚山梨酸酯20、乙酸，pH 5.5)用于最终的复合纯化缓冲液并且可以在使用前30天在2℃至8℃下储存≤。将抗坏血酸钠加入到中间纯化缓冲液中并通过0.2μm灭菌过滤器过滤到无菌产品保持容器中以产生最终的复合纯化缓冲液(26.75mM乙酸盐、0.5％(w/v)抗坏血酸钠、0.04％(w/v)聚山梨酸酯20、乙酸，pH5.5)。

将DOTA-h11B6缀合物中间体在室温下解冻。通过将三硝酸锕溶解在0.1N氢氯酸中制备三氯化锕溶液(也可以使用已经为三氯化形式的Ac-225源)。三氯化锕(800μCi至1300μCi)与4.4mg DOTA-h11B6和乙酸钠缓冲液(用乙酸调节pH，提前制备并储存≤6个月)一起温育，pH调节至6.5。然后在预处理的PD-10柱上纯化²²⁵Ac-DOTA-h11B6，并用最终纯化缓冲液洗脱。纯化后，测定放射性的量。

在制备中获得四个剂量(50μCi、100μCi、150μCi和200μCi)，使用最终的重新配制缓冲液将DOTA-h11B6缀合物中间体重新配制为0.5mg/mL(26.75mM乙酸盐、0.5％(w/v)抗坏血酸钠、0.04％(w/v)聚山梨酸酯20、乙酸，pH 5.5)，并通过0.2μm灭菌过滤器进行过滤。然后将²²⁵Ac-DOTA-h11B6分配到中间体小瓶中以实现期望的单位剂量(在施用给患者的预期时间处，在4mL中为50μCi、100μCi、150μCi和200μCi)并添加重新配制的DOTA-h11B6缀合物中间体至6.8mL的体积以产生药物产品。然后将药物产品通过0.2μm灭菌过滤器进行过滤并无菌填充至4.8mL的体积。剩余的药物产品也通过0.2μm灭菌过滤器进行过滤并无菌填充用于药物产品的释放测试。药物产品立即储存在2℃至8℃下。

因此，放射性标记的药物产品²²⁵Ac-DOTA-h11B6被制备成无菌溶液供静脉注射用并且不含防腐剂。在施用给患者的预期时间处，²²⁵Ac-DOTA-h11B6以四种药物产品(DP)单位剂量获得：50μCi、100μCi、150μCi和200μCi。

药物产品的靶向组成在下表2中提供。组合物可另选地分别用²²⁵Ac-TOPA-h11B6和TOPA-h11B6代替²²⁵Ac-DOTA-h11B6和DOTA-h11B6来制备。

表2：50μCi、100μCi、150μCi和200μCi药物产品的组成和浓度

a目标填充体积(4.8mL)包括额外的0.8mL。

b校正时的目标活性浓度。

c将²²⁵Ac-DOTA-h11B6与DOTA-h11B6和重新配制缓冲液组合以产生各自的药物产品单位剂量，如本文所述。

实施例5A：DOTA-h11B6稳定性研究

进行该研究以监测DOTA-h11B6药物物质中间体(在25mM乙酸盐中配制的10mg/mL，pH调节至5.5)在各种环境条件和时间长度下的稳定性属性。通过将药物物质中间体(DSI)以9mL的填充体积等分到20mL聚碳酸酯瓶中来制备研究测试制品。

研究参数

稳定性研究结果

DOTA-h11B6 DSI保持在推荐、加速和两种应力条件下的稳定性结果如下所示。在推荐的储存条件下保持的DSI的所有时间点，每个测定研究观察到的所有测试参数结果值超过与在约-65℃的温度下储存约48个月或更久后，在约-40℃的温度下储存约6个月或更久后，在约5℃的温度下储存约6个月或更久后，和/或在约-65℃的温度下储存约4年或更久后保持时的稳定性的最优选的实施方案一致的标准。特别值得注意的是，在加速条件(-40℃)下保持6个月的DSI和在应力条件(5℃)下保持6个月的DSI显示出与在-65℃下保持约4年或更长时间时的稳定性的优选实施方案一致的结果。

在应力条件(25℃)下保持1个月的DOTA-h11B6 DSI的结果显示暴露于该应力储存条件下的药物物质中间体的降解速率较低。

-65℃数据

表A：DOTA-h11B6药物物质中间体(DSI)在-65℃下的稳定性结果。

表A(续)：DOTA-h11B6药物物质中间体(DSI)在-65℃下的稳定性结果

表A(续)：DOTA-h11B6药物物质中间体(DSI)在-65℃下的稳定性结果

SE-HPLC＝体积排阻高效液相色谱；HMW＝高分子量；LMW＝低分子量；CE-SDS＝毛细管电泳十二烷基硫酸钠；LC＝轻链；HC＝重链；NGHC＝非糖基化重链；IgG＝免疫球蛋白G；CIEF＝阳离子交换；NR＝未报告

-40℃数据

表B：DOTA-h11B6药物物质中间体(DSI)在-40℃下的稳定性结果

表B(续)：DOTA-h11B6药物物质中间体(DSI)在-40℃下的稳定性结果

表B(续)：DOTA-h11B6药物物质中间体(DSI)在-40℃下的稳定性结果

SE-HPLC＝体积排阻高效液相色谱；HMW＝高分子量；LMW＝低分子量；CE-SDS＝毛细管电泳十二烷基硫酸钠；LC＝轻链；HC＝重链；NGHC＝非糖基化重链；IgG＝免疫球蛋白G；cIEF＝毛细管等电聚焦；RP-HPLC＝反相高效液相色谱

5℃数据

表C：DOTA-h11B6药物物质中间体(DSI)在5℃下的稳定性结果

表C(续)：DOTA-h11B6药物物质中间体(DSI)在5℃下的稳定性结果

表C(续)：DOTA-h11B6药物物质中间体(DSI)在5℃下的稳定性结果

SE-HPLC＝体积排阻高效液相色谱；HMW＝高分子量；LMW＝低分子量；CE-SDS＝毛细管电泳十二烷基硫酸钠；LC＝轻链；HC＝重链；NGHC＝非糖基化重链；IgG＝免疫球蛋白G；cIEF＝毛细管等电聚焦；RP-HPLC＝反相高效液相色谱

25℃数据

表D：DOTA-h11B6药物物质中间体(DSI)在25℃下的稳定性结果

表D(续)：DOTA-h11B6药物物质中间体(DSI)在25℃下的稳定性结果

表D(续)：DOTA-h11B6药物物质中间体(DSI)在25℃下的稳定性结果

SE-HPLC＝体积排阻高效液相色谱；HMW＝高分子量；LMW＝低分子量；CE-SDS＝毛细管电泳十二烷基硫酸钠；LC＝轻链；HC＝重链；NGHC＝非糖基化重链；IgG＝免疫球蛋白G；cIEF＝毛细管等电聚焦；RP-HPLC＝反相高效液相色谱

实施例5B：¹¹¹In-DOTA-h11B6稳定性研究

进行该研究以监测¹¹¹In-DOTA-h11B6药物产品(DP)在推荐的储存条件下的稳定性属性。通过经预塞、加盖和卷边密封的10R硼硅酸盐小瓶的隔膜填充药物产品来制备研究测试制品。

研究参数

稳定性研究结果

¹¹¹In-DOTA-h11B6 DP保持在推荐和加速条件下的稳定性结果如下所示。在推荐的储存条件下保持的DP的所有时间点，每个测定研究观察到的所有测试参数结果值超过与在约-40℃的温度下储存约72小时或更久后和/或在约5℃的温度下储存约72小时或更久后保持时的稳定性的最优选的实施方案一致的标准。

在加速(5℃)下保持72小时的DP显示出与在-40℃下保持约72小时或更久时的稳定性的优选实施方案一致的结果。

40℃数据

表A1：¹¹¹In-DOTA-h116B6在-40℃下储存的稳定性结果

表A1：(续)¹¹¹In-DOTA-h116B6在-40℃下储存的稳定性结果

ND＝未检出，HMWS＝高分子量物质，LMWS＝低分子量物质

5℃数据

表A2：¹¹¹In-DOTA-h116B6在5℃下储存的稳定性结果

表A2：(续)¹¹¹In-DOTA-h116B6在5℃下储存的稳定性结果

HMWS＝高分子量物质，LMWS＝低分子物质，μCi＝微居里；ND＝未检出

实施例5C：²²⁵Ac-DOTA-h11B6稳定性研究

进行该研究以监测²²⁵Ac-DOTA-h11B6药物产品(50μCi和200μCi)在推荐的储存条件下的稳定性属性。通过经预密封的10R环烯烃聚合物小瓶的隔膜填充药物产品来制备研究测试制品。

研究参数

稳定性研究结果

²²⁵In-DOTA-h11B6 DP保持在推荐储存条件下的稳定性结果如下所示。在推荐的储存条件下保持的DP的所有时间点，每个测定研究观察到的所有测试参数结果值超过与储存约96小时后保持时的稳定性的最优选的实施方案一致的标准。

2℃至8℃数据

表B1：²²⁵Ac-DOTA-h116B6在2℃至8℃(50μCi)下储存的稳定性结果

表B1：(续)225Ac-DOTA-h116B6在2℃至8℃(50μCi)下储存的稳定性结果

SEC＝尺寸排阻色谱法，HMWS＝高分子量物质，LMWS＝低分子物质，μCi＝微居里；

表B2：²²⁵Ac-DOTA-h116B6在2℃至8℃(200μCi)下储存的稳定性结果

表B2：(续)225Ac-DOTA-h116B6在2℃至8℃(200μCi)下储存的稳定性结果

SEC＝尺寸排阻色谱法，HMWS＝高分子量物质，LMWS＝低分子物质，μCi＝微居里；

实施例6：靶向人激肽释放酶-2(hK2)的锕-225标记的抗体用于晚期前列腺癌的用途(研究编号：NCT04644770；69086420PCR1001)

该实施例描述了首次人体1期研究以评价²²⁵Ac-DOTA-h11B6施用给患有mCRPC的成年患者的安全性、药代动力学、药效学和初步抗肿瘤活性，该成年患者在AR靶向治疗时或之后具有疾病进展。将实施例3和4中所述的制剂B施用给1期试验中的患者。如本文所讨论的，²²⁵Ac-DOTA-h11B6是hK2特异性单克隆抗体h11B6，其用DOTA标记并螯合至α-微粒发射核素²²⁵Ac，并且是靶向hK2抗原的放射免疫疗法。应注意，根据本实施例中描述的类似临床方法并使用类似药物组合物，将向本研究的患者队列施用²²⁵Ac-TOPA-h11B6代替²²⁵Ac-DOTA-h11B6。

主要目的是确定²²⁵Ac-DOTA-h11B6的安全性和推荐的2期剂量(RP2D)以及评价不良事件的发生率、持续时间和严重程度，包括剂量限制性毒性(DLT)。次要目的和终点将评价初步抗肿瘤活性并提供对²²⁵Ac-DOTA-h11B6的药理学进一步理解。参见例如表3。

表3

将²²⁵Ac-DOTA-h11B6施用给患有mCRPC的≥18岁的成年男性，其先前已暴露于至少一种新型AR靶向疗法。²²⁵Ac-DOTA-h11B6的施用将以2个部分进行：剂量递增(第1部分)和剂量扩展(第2部分)。

根据PCWG3的响应标准评估对治疗的响应。

收集血液样本以表征血清放射性的药代动力学和h11B6抗体的浓度，并表征²²⁵Ac-DOTA-h11B6的抗药物抗体的存在。

²²⁵Ac-DOTA-h11B6的安全性将通过体格检查、东部合作肿瘤学组(ECOG)表现状态、心电图、临床实验室检测、生命体征、和不良事件监测来评估。将在筛选时评估超声波心动图或多门控采集扫描；如果临床上指示，则将进行后续的评价。不良事件的严重程度将使用“美国国家癌症研究所不良事件通用术语标准”(5.0版)来评估。将记录伴随的药物使用。

剂量递增决策将由基于贝叶斯逻辑回归模型(BLRM)以及控制过量用药(EWOC)的改进的连续重新评估方法(mCRM)支持。

纳入标准包括以下内容：

每个潜在患者必须满足以下所有标准：

排除标准包括以下内容：

任何符合以下标准中的任一者的潜在患者将被排除在外。

A.第1部分：剂量递增

参与者将接受²²⁵Ac-DOTA-h11B6的静脉内(IV)注射，一个或多个剂量，剂量如下所述。

在部分1中，将50μCi/2mg ²²⁵Ac-DOTA-h11B6施用给第一剂递增队列。在该初始队列中进行DLT评估后，放射性²²⁵Ac-DOTA-h11B6的剂量递增至下一剂量水平将基于所有可获得的额外数据的回顾，该数据包括但不限于药代动力学、药效学、安全性和初步抗肿瘤活性。

表4示出了计划的(临时的)剂量递增时间表以说明可能的剂量递增途径，其包括高于200μCi(例如，300μCi或更高)的剂量。中间剂量水平增量可确保研究参与者的安全性。初始队列将接受50μCi放射性量的²²⁵Ac-DOTA-h11B6。递增最初以50μCi增量发生。将使用每8周一剂的给药间隔。起始抗体(h11B6)的质量为2mg，有可能增加至10mg。最初，抗体质量剂量将随着队列间放射性的增加而保持恒定。

表4：剂量递增方案

在该研究中，将施用给参与者的最终药物产品有两种组分：²²⁵Ac-DOTA-h11B6和未标记的DOTA-h11B6抗体。这两种组分可以在单个小瓶中预混合。这两种组分将以规定的放射性剂量以及2mg和10mg之间的总抗体质量在每次参与者访视时提供。参见表5。

表5：²²⁵Ac-DOTA-h11B6放射疗法施用

225Ac-DOTA-h11B6放射性研究产品是在用无胶乳塞子和铝密封件封闭的环烯烃聚合物小瓶中用于注射的单次使用、无菌、冷藏溶液。将225Ac-DOTA-h11B6配制于26.75mM乙酸盐、0.5％抗坏血酸钠和0.04％聚山梨酸酯20的无菌水溶液(pH 5.5)中。所研究的产品是澄清、无色至浅黄色的，并且不含可见的颗粒物质。225Ac-DOTA-h11B6小瓶在2℃至8℃的温度范围内冷藏储存并避光保存。药物产品不包含任何防腐剂并且被设计成仅供单次使用。供应到诊所的小瓶含有额外的0.8mL(总共4.8mL)，以便最终抽取4.0±0.4mL的剂量，这取决于实际施用时间。225Ac-DOTA-h11B6的放射性浓度最初针对4mL(2mg)中的50μCi、100μCi、150μCi或200μCi，随后剂量高于200μCi(例如，300μCi，其将具有8mL的总体积，具有2mg/4mL的蛋白质浓度，因此在预期的施用时间为4mg总蛋白)。中间剂量水平增量可确保研究参与者的安全性。如上所述，对于附加的患者队列，用于该研究的类似研究产品将包含²²⁵Ac-TOPA-h11B6代替²²⁵Ac-DOTA-h11B6。

使用由基于BLRM与EWOC的改进的连续重新评估方法指导的适应性剂量递增策略来支持剂量递增。

在回顾所有可获得的药代动力学、药效学、安全性和功效数据后测定RP2D。一旦测定了RP2D，将治疗患者以确认²²⁵Ac-DOTA-h11B6对部分2中的RP2D的安全性、药代动力学、药效学和初步抗肿瘤活性。

B.第2部分：剂量扩展

在部分2中，将如部分1中所测定的²²⁵Ac-DOTA-h11B6的RP2D施用给一个或多个队列中的患者。

将对所有不良事件和满足DLT标准的不良事件进行回顾和确认。不良事件将根据NCI CTCAE 5.0版进行评价。DLT的标准概述于表6中。

如上所述，根据本实施例中描述的类似临床方法，将向本研究的患者队列施用²²⁵Ac-TOPA-h11B6代替²²⁵Ac-DOTA-h11B6。

表6：剂量限制性毒性标准^a

结果指标在表7中提供。

表7：结果指标

二级结果指标在表8中提供。

表8：二级结果指标

期中临床结果

对于患有转移性去势抵抗性前列腺癌(mCRPC)的23名参与者，在69086420PCR1001研究中，在50μCi、100μCi、150μCi和200μCi的4种放射性剂量水平上给予²²⁵Ac-DOTA-h11B6，所接受的剂量的中值数目是2个剂量(范围：1至6)，并且中值治疗持续时间是1.87个月(范围：1至10.8)。在4种放射性剂量水平的任何一种下都没有报道剂量限制性毒性(DLT)。

对于那些参与者，最频繁报告(≥15％)的治疗-紧急不良事件(TEAE)是疲劳(39.1％)、食欲下降(34.8％)、腹泻(26.1％)、贫血症和血小板减少(各21.7％)以及恶心和白细胞减少症(各17.4％)。这些通常报道的TEAE大多数为1级或2级，除了1位参与者在50μCi时为3级疲劳，1位参与者在150μCi时为4级血小板减少，2位参与者(1位在50μCi，1位在200μCi)为3级贫血症。已经报道了2名参与者的治疗引发的严重不良事件(SAE)：1名参与者在100μCi时低钾血症，1名参与者在150μCi时低钙血症。一(1)名参与者在150μCi下由于血小板减少而中断，而所有其他中断的参与者是由于进行性疾病或其他原因。在任何参与者中都不需要减少剂量。没有观察到治疗中的死亡。这些参与者中的功效信号包括，例如，在放射性剂量大于或等于100uCi的患者中，PSA从基线降低50％或更多。

出于所有目的，本文档所引用或描述的每项专利、专利申请和公布的公开内容各自的全文据此以引用方式并入本文。

序列表

<110> 詹森生物科技公司（Janssen Biotech, Inc.）

<120> 用于治疗前列腺癌的组合物和方法

<130> JBI6423WOPCT1

<150> US 63/193,704

<151> 2021年5月27日

<150> US 63/335,761

<151> 2022年4月28日

<160> 15

<170> PatentIn3.5版本

<210> 1

<211> 6

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成多肽

<400> 1

Ser Asp Tyr Ala Trp Asn

1 5

<210> 2

<211> 16

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成多肽

<400> 2

Tyr Ile Ser Tyr Ser Gly Ser Thr Thr Tyr Asn Pro Ser Leu Lys Ser

1 5 10 15

<210> 3

<211> 8

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成多肽

<400> 3

Gly Tyr Tyr Tyr Gly Ser Gly Phe

1 5

<210> 4

<211> 15

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成多肽

<400> 4

Lys Ala Ser Glu Ser Val Glu Tyr Phe Gly Thr Ser Leu Met His

1 5 10 15

<210> 5

<211> 7

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成多肽

<400> 5

Ala Ala Ser Asn Arg Glu Ser

1 5

<210> 6

<211> 9

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成多肽

<400> 6

Gln Gln Thr Arg Lys Val Pro Tyr Thr

1 5

<210> 7

<211> 261

<212> PRT

<213> 智人（Homo sapiens）

<220>

<223> hK2序列

<400> 7

Met Trp Asp Leu Val Leu Ser Ile Ala Leu Ser Val Gly Cys Thr Gly

1 5 10 15

Ala Val Pro Leu Ile Gln Ser Arg Ile Val Gly Gly Trp Glu Cys Glu

20 25 30

Lys His Ser Gln Pro Trp Gln Val Ala Val Tyr Ser His Gly Trp Ala

35 40 45

His Cys Gly Gly Val Leu Val His Pro Gln Trp Val Leu Thr Ala Ala

50 55 60

His Cys Leu Lys Lys Asn Ser Gln Val Trp Leu Gly Arg His Asn Leu

65 70 75 80

Phe Glu Pro Glu Asp Thr Gly Gln Arg Val Pro Val Ser His Ser Phe

85 90 95

Pro His Pro Leu Tyr Asn Met Ser Leu Leu Lys His Gln Ser Leu Arg

100 105 110

Pro Asp Glu Asp Ser Ser His Asp Leu Met Leu Leu Arg Leu Ser Glu

115 120 125

Pro Ala Lys Ile Thr Asp Val Val Lys Val Leu Gly Leu Pro Thr Gln

130 135 140

Glu Pro Ala Leu Gly Thr Thr Cys Tyr Ala Ser Gly Trp Gly Ser Ile

145 150 155 160

Glu Pro Glu Glu Phe Leu Arg Pro Arg Ser Leu Gln Cys Val Ser Leu

165 170 175

His Leu Leu Ser Asn Asp Met Cys Ala Arg Ala Tyr Ser Glu Lys Val

180 185 190

Thr Glu Phe Met Leu Cys Ala Gly Leu Trp Thr Gly Gly Lys Asp Thr

195 200 205

Cys Gly Gly Asp Ser Gly Gly Pro Leu Val Cys Asn Gly Val Leu Gln

210 215 220

Gly Ile Thr Ser Trp Gly Pro Glu Pro Cys Ala Leu Pro Glu Lys Pro

225 230 235 240

Ala Val Tyr Thr Lys Val Val His Tyr Arg Lys Trp Ile Lys Asp Thr

245 250 255

Ile Ala Ala Asn Pro

260

<210> 8

<211> 117

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成多肽

<400> 8

Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Asp

1 5 10 15

Thr Leu Ser Leu Thr Cys Ala Val Ser Gly Asn Ser Ile Thr Ser Asp

20 25 30

Tyr Ala Trp Asn Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp

35 40 45

Ile Gly Tyr Ile Ser Tyr Ser Gly Ser Thr Thr Tyr Asn Pro Ser Leu

50 55 60

Lys Ser Arg Val Thr Met Ser Arg Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Ser

65 70 75 80

Leu Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Val Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Thr Gly Tyr Tyr Tyr Gly Ser Gly Phe Trp Gly Gln Gly Thr Leu

100 105 110

Val Thr Val Ser Ser

115

<210> 9

<211> 111

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成多肽

<400> 9

Asp Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Asp Ser Leu Ala Val Ser Leu Gly

1 5 10 15

Glu Arg Ala Thr Ile Asn Cys Lys Ala Ser Glu Ser Val Glu Tyr Phe

20 25 30

Gly Thr Ser Leu Met His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Pro Pro

35 40 45

Lys Leu Leu Ile Tyr Ala Ala Ser Asn Arg Glu Ser Gly Val Pro Asp

50 55 60

Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser

65 70 75 80

Ser Leu Gln Ala Glu Asp Val Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Thr Arg

85 90 95

Lys Val Pro Tyr Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys

100 105 110

<210> 10

<211> 330

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成多肽

<400> 10

Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys

1 5 10 15

Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr

20 25 30

Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser

35 40 45

Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser

50 55 60

Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr

65 70 75 80

Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys

85 90 95

Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys

100 105 110

Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro

115 120 125

Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys

130 135 140

Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp

145 150 155 160

Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu

165 170 175

Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu

180 185 190

His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn

195 200 205

Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly

210 215 220

Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu

225 230 235 240

Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr

245 250 255

Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn

260 265 270

Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe

275 280 285

Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn

290 295 300

Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr

305 310 315 320

Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys

325 330

<210> 11

<211> 107

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成多肽

<400> 11

Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu

1 5 10 15

Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe

20 25 30

Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln

35 40 45

Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser

50 55 60

Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu

65 70 75 80

Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser

85 90 95

Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys

100 105

<210> 12

<211> 447

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成多肽

<400> 12

Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Asp

1 5 10 15

Thr Leu Ser Leu Thr Cys Ala Val Ser Gly Asn Ser Ile Thr Ser Asp

20 25 30

Tyr Ala Trp Asn Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp

35 40 45

Ile Gly Tyr Ile Ser Tyr Ser Gly Ser Thr Thr Tyr Asn Pro Ser Leu

50 55 60

Lys Ser Arg Val Thr Met Ser Arg Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Ser

65 70 75 80

Leu Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Val Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Thr Gly Tyr Tyr Tyr Gly Ser Gly Phe Trp Gly Gln Gly Thr Leu

100 105 110

Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu

115 120 125

Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys

130 135 140

Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser

145 150 155 160

Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser

165 170 175

Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser

180 185 190

Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn

195 200 205

Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His

210 215 220

Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val

225 230 235 240

Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr

245 250 255

Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu

260 265 270

Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys

275 280 285

Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser

290 295 300

Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys

305 310 315 320

Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile

325 330 335

Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro

340 345 350

Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu

355 360 365

Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn

370 375 380

Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser

385 390 395 400

Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg

405 410 415

Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu

420 425 430

His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys

435 440 445

<210> 13

<211> 218

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成多肽

<400> 13

Asp Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Asp Ser Leu Ala Val Ser Leu Gly

1 5 10 15

Glu Arg Ala Thr Ile Asn Cys Lys Ala Ser Glu Ser Val Glu Tyr Phe

20 25 30

Gly Thr Ser Leu Met His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Pro Pro

35 40 45

Lys Leu Leu Ile Tyr Ala Ala Ser Asn Arg Glu Ser Gly Val Pro Asp

50 55 60

Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser

65 70 75 80

Ser Leu Gln Ala Glu Asp Val Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Thr Arg

85 90 95

Lys Val Pro Tyr Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Arg

100 105 110

Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln

115 120 125

Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr

130 135 140

Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser

145 150 155 160

Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr

165 170 175

Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys

180 185 190

His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro

195 200 205

Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys

210 215

<210> 14

<211> 351

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成DNA

<400> 14

caggttcagc tgcaggaaag cggacctggc ttggtgaaac ccagcgatac ccttagcctg 60

acatgtgctg tgtctggcaa ttccatcact tccgactatg cgtggaactg gattcggcaa 120

ccaccgggaa aagggctcga gtggataggg tacatcagct attctggttc aaccacgtac 180

aatccctcac tgaagagtag ggttaccatg tccagagaca cctccaagaa ccagttcagc 240

ctgaagctga gtagtgtgac agccgtagat acagccgtct attactgcgc aacagggtac 300

tactatggct ctggcttttg gggtcaagga actctcgtca ctgtgtcaag c 351

<210> 15

<211> 333

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成DNA

<400> 15

gacatagtgc tcactcagag ccctgatagc ttggctgtca gtcttgggga aagagccacc 60

atcaactgca aagcgtccga aagcgtcgag tatttcggga ctagcctgat gcactggtat 120

cagcagaaac ccggacaacc gcctaagctg ctgatctatg cagcctctaa tcgcgaaagt 180

ggcgttccag acaggttttc cggttctgga tcaggcacag acttcaccct cacgatttcc 240

tcactgcaag ctgaggatgt agccgtgtac tactgtcagc agacacggaa agtgccctac 300

acctttggtc agggcacaaa gctggagatt aag 333

Claims (149)

1.一种治疗患者的癌症的方法，所述方法包括：

向所述患者施用治疗有效量的药物组合物，所述药物组合物包含放射性缀合物和一种或多种药学上可接受的赋形剂，其中：

所述放射性缀合物包含至少一种缀合至对hK2具有结合特异性的抗体或抗原结合片段的放射性金属络合物，

所述放射性金属络合物包含放射性金属，并且

在给药时，所述放射性金属提供每剂所述药物组合物约50μCi至约350μCi的靶向放射性。

2.根据权利要求1所述的方法，其中所述放射性缀合物包含至少一种缀合至对hK2具有结合特异性的抗体的放射性金属络合物。

3.根据权利要求2所述的方法，其中所述抗体包含重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区包含SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2和SEQ ID NO:3的氨基酸序列；所述轻链可变区包含SEQ ID NO:4和SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6的氨基酸序列。

4.根据权利要求2或3所述的方法，其中所述抗体包含重链可变区(VH)和轻链可变区(VL)，所述重链可变区与SEQ ID NO:8的氨基酸序列具有至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少98％序列同一性，所述轻链可变区与SEQ ID NO:9的氨基酸序列具有至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少98％序列同一性。

5.根据权利要求2或3所述的方法，其中所述抗体包含含有SEQ ID NO:8的氨基酸序列的重链可变区(VH)和含有SEQ ID NO:9的氨基酸序列的轻链可变区(VL)。

6.根据权利要求2至5中任一项所述的方法，其中所述抗体包含重链恒定区和轻链恒定区，所述重链恒定区与SEQ ID NO:10的氨基酸序列具有至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少98％序列同一性，所述轻链恒定区与SEQ ID NO:11的氨基酸序列具有至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少98％序列同一性。

7.根据权利要求2至5中任一项所述的方法，其中所述抗体包含含有SEQ ID NO:10的氨基酸序列的重链恒定区和含有SEQ ID NO:11的氨基酸序列的轻链恒定区。

8.根据权利要求2至7中任一项所述的方法，其中所述抗体包含重链和轻链，所述重链与SEQ ID NO:12的氨基酸序列具有至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少98％序列同一性，所述轻链与SEQID NO:13的氨基酸序列具有至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少98％序列同一性。

9.根据权利要求2至7中任一项所述的方法，其中所述抗体包含具有SEQ ID NO:12的氨基酸序列的重链和具有SEQ ID NO:13的氨基酸序列的轻链。

10.根据权利要求1至9中任一项所述的方法，其中所述放射性金属选自由以下项组成的组：²²⁵Ac、¹¹¹In、¹⁷⁷Lu、³²P、⁴⁷Sc、⁶⁷Cu、⁷⁷As、⁸⁹Sr、⁹⁰Y、⁹⁹Tc、¹⁰⁵Rh、¹⁰⁹Pd、¹¹¹Ag、¹³¹I、¹³⁴Ce、¹⁴⁹Tb、¹⁵²Tb、¹⁵⁵Tb、

¹⁵³Sm、¹⁵⁹Gd、¹⁶⁵Dy、¹⁶⁶Ho、¹⁶⁹Er、¹⁸⁶Re、¹⁸⁸Re、¹⁹⁴Ir、¹⁹⁸Au、¹⁹⁹Au、²¹¹At、²¹²Pb、²¹²Bi、²¹³Bi、²²³Ra、²⁵⁵Fm和²²⁷Th。

11.根据权利要求1至9中任一项所述的方法，其中所述放射性金属为²²⁵Ac。

12.根据权利要求1至11中任一项所述的方法，其中所述放射性金属络合物包含选自由以下项组成的组的螯合剂：1,4,7,10-四氮杂环十二烷-1,4,7,10-四乙酸(DOTA)、S-2-(4-异硫氰基苄基)-1,4,7-三氮杂环壬烷-1,4,7-三乙酸(NOTA)、1,4,8,11-四氮杂环十二烷-1,4,8,11-四乙酸(TETA)、3,6,9,15-四氮杂双环[9.3.1]-十五碳-1(15),11,13-三烯-4-(S)-(4-异硫氰基苄基)-3,6,9-三乙酸(PCTA)、5-S-(4-氨基苄基)-1-氧杂-4,7,10-三氮杂环十二烷-4,7,10-三(乙酸)(DO3A)以及它们的衍生物。

13.根据权利要求1至11中任一项所述的方法，其中所述放射性金属络合物包含为DOTA的螯合剂。

14.根据权利要求1至13中任一项所述的方法，其中所述放射性金属络合物包含螯合至DOTA的²²⁵Ac。

15.根据权利要求1至11中任一项所述的方法，其中所述放射性缀合物包含螯合至以下项的放射性金属：(a)式(IV)的化合物

或其药学上可接受的盐，其中：

R₁为氢并且R₂为-L₁-R₄；

另选地，R₁为-L₁-R₄并且R₂为氢；

R₃为氢；

另选地，R₂和R₃与它们所附接的碳原子合在一起以形成5元或6元环烷基，其中所述5元或6元环烷基任选地被-L₁-R₄取代；

L₁不存在或为连接基；并且

R₄为抗体；或者

(b)式(V)的化合物

或其药学上可接受的盐，其中：

L₁不存在或为连接基；并且

R₄为抗体。

16.根据权利要求2至15中任一项所述的方法，其中所述放射性金属为²²⁵Ac并且所述放射性金属提供每约2mg总抗体约50μCi至约350μCi的靶向比活性。

17.根据权利要求2至15中任一项所述的方法，其中所述放射性金属为²²⁵Ac并且所述放射性金属提供每约2mg总抗体约50μCi至约300μCi的靶向比活性。

18.根据权利要求2至15中任一项所述的方法，其中所述放射性金属为²²⁵Ac并且所述放射性金属提供每约2mg总抗体约50μCi至约250μCi的靶向比活性。

19.根据权利要求2至15中任一项所述的方法，其中所述放射性金属为²²⁵Ac并且所述放射性金属提供每约2mg总抗体约50μCi至约200μCi的靶向比活性。

20.根据权利要求2至15中任一项所述的方法，其中所述放射性金属为²²⁵Ac并且所述放射性金属提供每约2mg总抗体约50μCi至约150μCi的靶向比活性。

21.根据权利要求2至15中任一项所述的方法，其中所述放射性金属为²²⁵Ac并且所述放射性金属提供每约2mg总抗体约50μCi至约100μCi的靶向比活性。

22.根据权利要求2至15中任一项所述的方法，其中所述放射性金属为²²⁵Ac并且所述放射性金属提供每约2mg总抗体约150μCi至约250μCi的靶向比活性。

23.根据权利要求2至15中任一项所述的方法，其中所述放射性金属为²²⁵Ac并且所述放射性金属提供每约2mg总抗体约50μCi的靶向比活性。

24.根据权利要求2至15中任一项所述的方法，其中所述放射性金属为²²⁵Ac并且所述放射性金属提供每约2mg总抗体约100μCi的靶向比活性。

25.根据权利要求2至15中任一项所述的方法，其中所述放射性金属为²²⁵Ac并且所述放射性金属提供每约2mg总抗体约150μCi的靶向比活性。

26.根据权利要求2至15中任一项所述的方法，其中所述放射性金属为²²⁵Ac并且所述放射性金属提供每约2mg总抗体约200μCi的靶向比活性。

27.根据权利要求2至26中任一项所述的方法，其中所述药物组合物包含约1μCi/mL至约100μCi/mL、或约5μCi/mL至约75μCi/mL、或约10μCi/mL至约60μCi/mL、或约12.5μCi/mL至约50μCi/mL、或约12.5μCi/mL、或约25μCi/mL、或约37.5μCi/mL、或约50μCi/mL的靶向放射性浓度。

28.根据权利要求2至27中任一项所述的方法，其中所述药物组合物包含约1mg至约5mg总抗体、或约1mg至约4mg总抗体。

29.根据权利要求2至27中任一项所述的方法，其中所述药物组合物包含约1mg至约3mg总抗体。

30.根据权利要求2至27中任一项所述的方法，其中所述药物组合物包含约1.5mg至约2.5mg总抗体。

31.根据权利要求2至27中任一项所述的方法，其中所述药物组合物包含约2mg总抗体。

32.根据权利要求1至31中任一项所述的方法，其中所述一种或多种药学上可接受的赋形剂包含一种或多种辐射防护剂。

33.根据权利要求32所述的方法，其中所述一种或多种辐射防护剂包括抗坏血酸钠、龙胆酸或它们的组合。

34.根据权利要求32所述的方法，其中所述一种或多种辐射防护剂包括抗坏血酸钠。

35.根据权利要求32所述的方法，其中所述一种或多种辐射防护剂包括龙胆酸。

36.根据权利要求1至35中任一项所述的方法，其中所述一种或多种药学上可接受的赋形剂还包含一种或多种表面活性剂。

37.根据权利要求36所述的方法，其中所述一种或多种表面活性剂包括聚山梨酸酯20。

38.根据权利要求1至37中任一项所述的方法，其中所述一种或多种药学上可接受的赋形剂还包含乙酸盐缓冲液。

39.根据权利要求1至38中任一项所述的方法，其中所述药物组合物包含放射性缀合物、抗坏血酸钠、聚山梨酸酯20、乙酸盐缓冲液和水。

40.根据权利要求1至38中任一项所述的方法，其中所述药物组合物包含放射性缀合物、约24mM至28mM乙酸盐、约0.25％至0.75％抗坏血酸钠和约0.01％至0.1％聚山梨酸酯20的水溶液。

41.根据权利要求1至38中任一项所述的方法，其中所述药物组合物包含放射性缀合物、约25mM乙酸盐、约0.5％抗坏血酸钠和约0.04％聚山梨酸酯20的水溶液。

42.根据权利要求1至38中任一项所述的方法，其中所述药物组合物包含放射性缀合物、约26.75mM乙酸盐、约0.5％抗坏血酸钠和约0.04％聚山梨酸酯20的水溶液。

43.根据权利要求1至42中任一项所述的方法，其中所述药物组合物具有约5至约6(例如，约5.5)的pH。

44.根据权利要求1至43中任一项所述的方法，其中所述药物组合物不含任何防腐剂。

45.根据权利要求1至44中任一项所述的方法，其中所述药物组合物不含任何蔗糖。

46.根据权利要求1至44中任一项所述的方法，其中所述药物组合物不含任何单糖、二糖、寡糖或多糖。

47.根据权利要求1至44中任一项所述的方法，其中所述药物组合物不含任何单糖或二糖。

48.根据权利要求1至44中任一项所述的方法，其中所述药物组合物不含任何二糖。

49.根据权利要求1至48中任一项所述的方法，其中所述药物组合物在约2℃至8℃的温度范围处稳定至少96小时或至少120小时。

50.根据权利要求2至49中任一项所述的方法，其中所述药物组合物的剂量具有约1mL至约20mL、或约1mL至约10mL、或约2mL至约6mL、或约3mL至约5mL、或约4mL的体积。

51.根据权利要求2至49中任一项所述的方法，其中所述药物组合物的剂量包含每约4mL剂量约2mg总抗体。

52.根据权利要求2至51中任一项所述的方法，其中所述药物组合物包含约0.01mg/mL至5.0mg/mL、或约0.1mg/mL至1.0mg/mL、或约0.4mg/mL至0.6mg/mL、或约0.5mg/mL的量的总抗体(例如，其中总抗体包含缀合物中间体和放射性缀合物的总量)。

53.根据权利要求2至52中任一项所述的方法，其中所述药物组合物还包含非放射性标记的抗体，其中所述非放射性标记的抗体是与缀合至所述放射性金属络合物的所述抗体相同的抗体。

54.根据权利要求53所述的方法，其中所述缀合抗体和所述非放射性标记抗体的总量不超过约10mg、或约9mg、或约8mg、或约7mg、或约6mg、或约5mg、或约4mg、或约3mg、或约2mg。

55.根据权利要求1至54中任一项所述的方法，包括向所述患者静脉内施用所述药物组合物。

56.根据权利要求1至55中任一项所述的方法，包括在将所述放射性金属螯合至缀合物中间体以形成所述放射性缀合物后约168小时内、或约144小时内、或约120小时内、或约96小时内、或约72小时内、或约48小时内、或约24小时内向所述患者施用所述药物组合物。

57.根据权利要求1至56中任一项所述的方法，包括每约4周向所述患者施用一次所述药物组合物。

58.根据权利要求1至56中任一项所述的方法，包括每约8周向所述患者施用一次所述药物组合物。

59.根据权利要求1至56中任一项所述的方法，包括每约12周向所述患者施用一次所述药物组合物。

60.根据权利要求1至59中任一项所述的方法，其中所述癌症是前列腺癌。

61.根据权利要求1至59中任一项所述的方法，其中所述癌症是非局部前列腺癌。

62.根据权利要求1至59中任一项所述的方法，其中所述癌症是转移性前列腺癌。

63.根据权利要求1至59中任一项所述的方法，其中所述癌症是去势抵抗性前列腺癌(CRPC)。

64.根据权利要求1至59中任一项所述的方法，其中所述癌症是转移性去势抵抗性前列腺癌(mCRPC)。

65.根据权利要求1至59中任一项所述的方法，其中所述癌症是伴有腺癌的mCRPC。

66.根据权利要求1至65中任一项所述的方法，其中所述患者的睾酮去势水平为约50ng/dL或更低。

67.根据权利要求1至66中任一项所述的方法，其中所述患者先前已暴露于至少一种雄激素受体(AR)靶向疗法。

68.根据权利要求67所述的方法，其中所述AR靶向疗法是醋酸阿比特龙、恩扎鲁胺、阿帕他胺、达洛鲁胺或前述任一种的组合。

69.根据权利要求1至68中任一项所述的方法，其中所述患者先前进行过化学疗法。

70.根据权利要求69所述的方法，其中所述化学疗法涉及施用紫杉烷。

71.根据权利要求1至70中任一项所述的方法，其中所述患者先前进行过睾丸切除术或医学阉割。

72.根据权利要求1至71中任一项所述的方法，其中所述患者正在接受用促性腺激素释放激素(GnRH)激动剂或拮抗剂进行的雄激素去势疗法。

73.根据权利要求1至72中任一项所述的方法，包括将所述剂量在单次施用中施用于所述患者。

74.根据权利要求1至72中任一项所述的方法，包括以多于一个子剂量的多次施用来施用所述剂量。

75.根据权利要求74所述的方法，包括以两个子剂量施用所述剂量。

76.一种药物组合物，包含：

放射性缀合物和一种或多种药学上可接受的赋形剂，其中：

所述放射性缀合物包含至少一种缀合至对hK2具有结合特异性的抗体或抗原结合片段的放射性金属络合物，并且

所述放射性金属络合物包含放射性金属。

77.根据权利要求76所述的药物组合物，其中所述一种或多种药学上可接受的赋形剂包含一种或多种辐射防护剂。

78.根据权利要求76或77的药物组合物，其中所述放射性缀合物包含至少一种缀合至对hK2具有结合特异性的抗体的放射性金属络合物。

79.根据权利要求78所述的药物组合物，其中所述抗体包含重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区包含SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2和

SEQ ID NO:3的氨基酸序列；所述轻链可变区包含SEQ ID NO:4和

SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6的氨基酸序列。

80.根据权利要求78或权利要求79所述的药物组合物，其中所述抗体包含重链可变区(VH)和轻链可变区(VL)，所述重链可变区与SEQ

ID NO:8的氨基酸序列具有至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少98％序列同一性，所述轻链可变区与SEQ ID NO:9的氨基酸序列具有至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少98％序列同一性。

81.根据权利要求78或权利要求79所述的药物组合物，其中所述抗体包含含有SEQ IDNO:8的氨基酸序列的重链可变区(VH)和含有SEQ

ID NO:9的氨基酸序列的轻链可变区(VL)。

82.根据权利要求78至81中任一项所述的药物组合物，其中所述抗体包含重链恒定区和轻链恒定区，所述重链恒定区与SEQ ID NO:10的氨基酸序列具有至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少98％

序列同一性，所述轻链恒定区与SEQ ID NO:11的氨基酸序列具有至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少98％序列同一性。

83.根据权利要求78至81中任一项所述的药物组合物，其中所述抗体包含含有SEQ IDNO:10的氨基酸序列的重链恒定区和含有SEQ ID

NO:11的氨基酸序列的轻链恒定区。

84.根据权利要求78至83中任一项所述的药物组合物，其中所述抗体包含重链和轻链，所述重链与SEQ ID NO:12的氨基酸序列具有至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少98％序列同一性，所述轻链与SEQ ID NO:13的氨基酸序列具有至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少98％序列同一性。

85.根据权利要求78至83中任一项所述的药物组合物，其中所述抗体包含具有SEQ IDNO:12的氨基酸序列的重链和具有SEQ ID NO:13的氨基酸序列的轻链。

86.根据权利要求77至85中任一项所述的药物组合物，其中所述放射性金属选自由以下项组成的组：²²⁵Ac、¹¹¹In、¹⁷⁷Lu、³²P、⁴⁷Sc、⁶⁷Cu、

⁷⁷As、⁸⁹Sr、⁹⁰Y、⁹⁹Tc、¹⁰⁵Rh、¹⁰⁹Pd、¹¹¹Ag、¹³¹I、¹³⁴Ce、¹⁴⁹Tb、¹⁵²Tb、¹⁵⁵Tb、¹⁵³Sm、¹⁵⁹Gd、¹⁶⁵Dy、¹⁶⁶Ho、¹⁶⁹Er、¹⁸⁶Re、¹⁸⁸Re、¹⁹⁴Ir、¹⁹⁸Au、¹⁹⁹Au、²¹¹At、²¹²Pb、²¹²Bi、²¹³Bi、²²³Ra、²⁵⁵Fm和²²⁷Th。

87.根据权利要求77至85中任一项所述的药物组合物，其中所述放射性金属为²²⁵Ac。

88.根据权利要求77至87中任一项所述的药物组合物，其中所述放射性金属络合物包含选自由以下项组成的组的螯合剂：1,4,7,10-四氮杂环十二烷-1,4,7,10-四乙酸(DOTA)、S-2-(4-异硫氰基苄基)-1,4,7-三氮杂环壬烷-1,4,7-三乙酸(NOTA)、1,4,8,11-四氮杂环十二烷-1,4,8,11-四乙酸(TETA)、3,6,9,15-四氮杂双环[9.3.1]-十五碳-1(15),11,13-三烯-4-(S)-(4-异硫氰基苄基)-3,6,9-三乙酸(PCTA)、5-S-(4-氨基苄基)-1-氧杂-4,7,10-三氮杂环十二烷-4,7,10-三(乙酸)(DO3A)以及它们的衍生物。

89.根据权利要求77至87中任一项所述的药物组合物，其中所述放射性金属络合物包含为DOTA的螯合剂。

90.根据权利要求77至89中任一项所述的药物组合物，其中所述放射性金属络合物包含螯合至DOTA的²²⁵Ac。

91.根据权利要求77至87中任一项所述的药物组合物，其中所述放射性缀合物包含螯合至以下项的放射性金属：(a)式(IV)的化合物

或其药学上可接受的盐，其中：

R₁为氢并且R₂为-L₁-R₄；

另选地，R₁为-L₁-R₄并且R₂为氢；

R₃为氢；

另选地，R₂和R₃与它们所附接的碳原子合在一起以形成5元或6元环烷基，其中所述5元或6元环烷基任选地被-L₁-R₄取代；

L₁不存在或为连接基；并且

R₄为抗体；或者

(b)式(V)的化合物

或其药学上可接受的盐，其中：

L₁不存在或为连接基；并且

R₄为抗体。

92.根据权利要求77至91中任一项所述的药物组合物，其中所述一种或多种辐射防护剂包括抗坏血酸钠、龙胆酸或它们的组合(例如，以约0.1w/v％至1w/v％、或约0.25w/v％至0.75w/v％、或约0.5w/v％的量)。

93.根据权利要求77至91中任一项所述的药物组合物，其中所述一种或多种辐射防护剂包括抗坏血酸钠(例如，以约0.1w/v％至1w/v％、或约0.25w/v％至0.75w/v％、或约0.5w/v％的量)。

94.根据权利要求77至91中任一项所述的药物组合物，其中所述一种或多种辐射防护剂包括龙胆酸(例如，以约0.1w/v％至1w/v％、或约0.25w/v％至0.75w/v％、或约0.5w/v％的量)。

95.根据权利要求76至94中任一项所述的药物组合物，其中所述一种或多种药学上可接受的赋形剂还包含一种或多种表面活性剂。

96.根据权利要求95所述的药物组合物，其中所述一种或多种表面活性剂包括聚山梨酸酯20。

97.根据权利要求76至96中任一项所述的药物组合物，其中所述一种或多种药学上可接受的赋形剂还包含乙酸盐缓冲液。

98.根据权利要求76至97中任一项所述的药物组合物，包含放射性缀合物、抗坏血酸钠、聚山梨酸酯20、乙酸盐缓冲液和水。

99.根据权利要求76至97中任一项所述的药物组合物，包含放射性缀合物、约24mM至28mM乙酸盐、约0.25％至0.75％抗坏血酸钠和约0.01％至0.1％聚山梨酸酯20的水溶液。

100.根据权利要求76至97中任一项所述的药物组合物，包含放射性缀合物、约26.75mM乙酸盐、约0.5％抗坏血酸钠和约0.04％聚山梨酸酯20的水溶液。

101.根据权利要求76至97中任一项所述的药物组合物，包含放射性缀合物、约26.75mM乙酸盐、约0.5％抗坏血酸钠和约0.04％聚山梨酸酯20的水溶液。

102.根据权利要求76至101中任一项所述的药物组合物，其中所述药物组合物具有约5至约6(例如，约5.5)的pH。

103.根据权利要求76至101中任一项所述的药物组合物，其中所述药物组合物不含任何防腐剂。

104.根据权利要求76至103中任一项所述的药物组合物，其中所述药物组合物不含任何蔗糖。

105.根据权利要求76至104中任一项所述的药物组合物，其中所述药物组合物不含任何单糖、二糖、寡糖或多糖。

106.根据权利要求76至104中任一项所述的药物组合物，其中所述药物组合物不含任何单糖或二糖。

107.根据权利要求76至104中任一项所述的药物组合物，其中所述药物组合物不含任何二糖。

108.根据权利要求76至104中任一项所述的药物组合物，其中所述一种或多种药学上可接受的赋形剂由或基本上由乙酸盐缓冲液、抗坏血酸钠和聚山梨酸酯20的水溶液组成。

109.根据权利要求76至108中任一项所述的药物组合物，其中所述药物组合物被配制成用于静脉内施用。

110.根据权利要求76至109中任一项所述的药物组合物，其中所述药物组合物在约2℃至8℃的温度范围处稳定至少72小时、或至少96小时、或至少120小时。

111.根据权利要求77至110中任一项所述的药物组合物，其中所述放射性缀合物包含平均约1个至约4个、或约2个至约3个缀合至所述抗体的螯合剂分子。

112.根据权利要求77至111中任一项所述的药物组合物，其中所述放射性金属为²²⁵Ac并且所述放射性金属提供每约2mg总抗体约50μCi至约350μCi的比活性。

113.根据权利要求77至111中任一项所述的药物组合物，其中所述放射性金属为²²⁵Ac并且所述放射性金属提供每约2mg总抗体约50μCi至约300μCi的比活性。

114.根据权利要求77至111中任一项所述的药物组合物，其中所述放射性金属为²²⁵Ac并且所述放射性金属提供每约2mg总抗体约50μCi至约250μCi的比活性。

115.根据权利要求77至111中任一项所述的药物组合物，其中所述放射性金属为²²⁵Ac并且所述放射性金属提供每约2mg总抗体约50μCi至约200μCi的比活性。

116.根据权利要求77至111中任一项所述的药物组合物，其中所述放射性金属为²²⁵Ac并且所述放射性金属提供每约2mg总抗体约50μCi至约150μCi的比活性。

117.根据权利要求77至111中任一项所述的药物组合物，其中所述放射性金属为²²⁵Ac并且所述放射性金属提供每约2mg总抗体约50μCi至约100μCi的比活性。

118.根据权利要求77至111中任一项所述的药物组合物，其中所述放射性金属为²²⁵Ac并且所述放射性金属在给药时提供每约2mg总抗体约50μCi至约200μCi的靶向比活性。

119.根据权利要求77至111中任一项所述的药物组合物，其中所述放射性金属为²²⁵Ac并且所述放射性金属在给药时提供每约2mg总抗体约50μCi的靶向比活性。

120.根据权利要求77至111中任一项所述的药物组合物，其中所述放射性金属为²²⁵Ac并且所述放射性金属在给药时提供每约2mg总抗体约100μCi的靶向比活性。

121.根据权利要求77至111中任一项所述的药物组合物，其中所述放射性金属为²²⁵Ac并且所述放射性金属在给药时提供每约2mg总抗体约150μCi的靶向比活性。

122.根据权利要求77至111中任一项所述的药物组合物，其中所述放射性金属为²²⁵Ac并且所述放射性金属在给药时提供每约2mg总抗体约200μCi的靶向比活性。

123.根据权利要求77至122中任一项所述的药物组合物，包含约1mg至约20mg总抗体。

124.根据权利要求77至122中任一项所述的药物组合物，包含约1mg至约10mg总抗体。

125.根据权利要求77至122中任一项所述的药物组合物，包含约1mg至约5mg总抗体。

126.根据权利要求77至122中任一项所述的药物组合物，包含约2mg总抗体。

127.根据权利要求77至122中任一项所述的药物组合物，包含约10mg总抗体。

128.根据权利要求77至127中任一项所述的药物组合物，包含总量为约0.1mg/mL至1.0mg/mL的缀合物中间体和所述放射性缀合物。

129.根据权利要求77至127中任一项所述的药物组合物，包含总量为约0.4mg/mL至0.6mg/mL的缀合物中间体和所述放射性缀合物。

130.根据权利要求77至127中任一项所述的药物组合物，包含总量为约0.5mg/mL的缀合物中间体和所述放射性缀合物。

131.根据权利要求77至130中任一项所述的药物组合物，还包含非放射性标记的抗体，其中所述非放射性标记的抗体是与缀合至所述放射性金属络合物的所述抗体相同的抗体。

132.根据权利要求131所述的药物组合物，其中所述缀合抗体和所述非放射性标记抗体的总量不超过约10mg、或约9mg、或约8mg、或约7mg、或约6mg、或约5mg、或约4mg、或约3mg、或约2mg。

133.一种用于治疗患者的癌症的方法，所述方法包括向所述患者施用治疗有效量的权利要求76至132中任一项所述的药物组合物。

134.根据权利要求133所述的方法，包括每约4周向所述患者施用一次所述药物组合物。

135.根据权利要求133所述的方法，包括每约8周向所述患者施用一次所述药物组合物。

136.根据权利要求133所述的方法，包括每约12周向所述患者施用一次所述药物组合物。

137.根据权利要求133至136中任一项所述的方法，其中所述癌症是前列腺癌。

138.根据权利要求133至136中任一项所述的方法，其中所述癌症是非局部前列腺癌。

139.根据权利要求133至136中任一项所述的方法，其中所述癌症是转移性前列腺癌。

140.根据权利要求133至136中任一项所述的方法，其中所述癌症是去势抵抗性前列腺癌(CRPC)。

141.根据权利要求133至136中任一项所述的方法，其中所述癌症是转移性去势抵抗性前列腺癌(mCRPC)。

142.根据权利要求133至136中任一项所述的方法，其中所述癌症是伴有腺癌的mCRPC。

143.根据权利要求133至142中任一项所述的方法，其中所述患者的睾酮去势水平为约50ng/dL或更低。

144.根据权利要求133至142中任一项所述的方法，其中所述患者先前已暴露于至少一种雄激素受体(AR)靶向疗法。

145.根据权利要求144所述的方法，其中所述AR靶向疗法是醋酸阿比特龙、恩扎鲁胺、阿帕他胺、达洛鲁胺或前述任一种的组合。

146.根据权利要求133至145中任一项所述的方法，其中所述患者先前进行过化学疗法。

147.根据权利要求146所述的方法，其中所述化学疗法涉及施用紫杉烷。

148.根据权利要求133至147中任一项所述的方法，其中所述患者先前进行过睾丸切除术或医学阉割。

149.根据权利要求133至148中任一项所述的方法，其中所述患者正在接受用促性腺激素释放激素(GnRH)激动剂或拮抗剂进行的雄激素去势疗法。