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CN117281921A - TF@Pt-Aln纳米颗粒及其制备方法和应用 - Google Patents

TF@Pt-Aln纳米颗粒及其制备方法和应用 Download PDF

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CN117281921A
CN117281921A CN202311271166.2A CN202311271166A CN117281921A CN 117281921 A CN117281921 A CN 117281921A CN 202311271166 A CN202311271166 A CN 202311271166A CN 117281921 A CN117281921 A CN 117281921A
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CN
China
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nanoparticles
aln
porous platinum
preparation
alendronate
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CN202311271166.2A
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安海龙
田梦
王金平
史东鸿
贾然
屈畅
邵新悦
赵晓玲
王兵豪
冯海涛
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Hebei University of Technology
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Hebei University of Technology
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Abstract

本发明提供了一种TF@Pt‑Aln纳米颗粒及其制备方法和应用，涉及纳米材料技术领域。TF@Pt‑Aln纳米颗粒包含多孔铂基纳米颗粒，多孔铂基纳米颗粒表面连接阿仑膦酸盐，内部包裹茶黄素。该TF@Pt‑Aln纳米颗粒具有较高的载药率和靶向能力，在体内具有更好的稳定性，能够降低给药频率，改善现有的治疗骨质疏松药物的缺陷。

Description

TF@Pt-Aln纳米颗粒及其制备方法和应用
技术领域
本发明涉及纳米材料技术领域，尤其是涉及一种TF@Pt-Aln纳米颗粒及其制备方法和应用。
背景技术
骨质疏松症是一种以骨量低下，骨组织恶化，骨微结构破坏为特征使得骨折风险增加的全身性骨骼疾病。骨质疏松症通常被称为沉默的杀手，因为骨质疏松是逐渐发展的，没有先兆或症状，它的第一个警告信号通常就是骨折。据研究调查，1/3的女性和1/5的男性在50岁后会遭遇一次骨质疏松性的骨折，而且，预计到2050年，全球髋部骨折发生率会明显的增加。所以骨质疏松症已经成为全球50岁以上人群的严重健康问题。骨质疏松的临床表现主要有三种，分别是疼痛、脊柱变形、骨折。这些症状对患者的身体造成严重的伤害甚至导致死亡。
目前针对治疗骨质疏松的方法主要依赖药物治疗。常见药物包括双磷酸盐类(BPS)、选择性雌激素受体调节剂、钙剂和维生素D等。但这些药物的使用效果因人而异，有一定的副作用，如肠胃不适、下肢肌肉疼痛、心脏问题和骨损伤等。例如长期使用(超过5年)，可能会导致不满意的临床结果和并发症，包括不典型骨折和骨强度下降。因此，如何改进治疗骨质疏松的药物是目前亟待解决的问题。
有鉴于此，特提出本发明。
发明内容
本发明的目的在于提供一种TF@Pt-Aln纳米颗粒，该TF@Pt-Aln纳米颗粒改善了现有的治疗骨质疏松药物的缺陷。本发明的另一目的在于提供上述TF@Pt-Aln纳米颗粒的制备方法和它们的应用。
为解决上述技术问题，本发明特采用如下技术方案：
第一方面，提供了一种TF@Pt-Aln纳米颗粒，包含多孔铂基纳米颗粒，所述多孔铂基纳米颗粒表面连接阿仑膦酸盐；所述多孔铂基纳米颗粒内部包裹茶黄素。
可选的实施方式中，多孔铂基纳米颗粒为具有大介孔的多孔铂基纳米颗粒。
可选的实施方式中，多孔铂基纳米颗粒与阿仑膦酸盐通过酰胺键连接。
第二方面，还提供了上述TF@Pt-Aln纳米颗粒的制备方法，包括使多孔铂基纳米颗粒包裹茶黄素，然后在多孔铂基纳米颗粒表面连接阿仑膦酸盐。
可选的实施方式中，所述多孔铂基纳米颗粒以脂质体为模板合成。
可选的实施方式中，所述多孔铂基纳米颗粒的制备方法包括在含有DPPC和胆固醇的第一有机相中旋蒸至成为薄膜，加入α-抗坏血酸水溶液，将混合体系超声至澄清，然后加入氯铂酸溶液反应至溶液变成黑色，固液分离得到多孔铂基纳米颗粒。
可选的实施方式中，多孔铂基纳米颗粒与阿仑膦酸盐通过酰胺键连接。
可选的实施方式中，所述制备方法包括将所述多孔铂基纳米颗粒羧基化后包裹茶黄素。
可选的实施方式中，所述制备方法包括将多孔铂基纳米颗粒溶解于第二有机相中，然后加入硫辛酸反应，使多孔铂基纳米颗粒羧基化，获得Pt-COOH纳米颗粒，然后将Pt-COOH纳米颗粒溶解于水中，加入茶黄素搅拌，获得TF@Pt-COOH纳米颗粒。
可选的实施方式中，所述制备方法包括将EDC和NHS加入到含有所述TF@Pt-COOH纳米颗粒的水溶液中，然后加入阿仑膦酸盐反应至得到所述TF@Pt-Aln纳米颗粒。
第三方面，还提供了第一方面的TF@Pt-Aln纳米颗粒，或第二方面的制备方法在制备用于治疗骨质疏松的药物中的应用。
第四方面，还提供了用于治疗骨质疏松的药物组合物，其含有第一方面的TF@Pt-Aln纳米颗粒。
与现有技术相比，本发明具有如下有益效果：
本发明提供的TF@Pt-Aln纳米颗粒以多孔铂基纳米颗粒作为骨架，其表面连接靶向骨内羟基磷灰石的阿仑膦酸盐，且内部包裹抑制Ano1基因的茶黄素，对骨微环境进行调控，重新实现骨平衡。该TF@Pt-Aln纳米颗粒具有如下有益效果：(1)该TF@Pt-Aln纳米颗粒的多孔结构具有较高的载药率。(2)不同于传统的系统给药方法，TF@Pt-Aln纳米颗粒可与靶向组一起进行功能化，以实现靶向给药。这可以增加局部药物浓度，从而提高治疗效率，同时避免对健康组织的不良副作用。(3)TF@Pt-Aln纳米颗粒可以保护负载药物免受体内生化环境的影响，导致药物活性延长。(4)与小分子药物相比，TF@Pt-Aln纳米颗粒在体内具有更好的稳定性，因此可以增加药物循环时间，从而降低给药频率。
附图说明
为了更清楚地说明本发明具体实施方式或现有技术中的技术方案，下面将对具体实施方式或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图是本发明的一些实施方式，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
图1为实施例1制备得到的TF@Pt-Aln纳米颗粒的透射电子显微镜图(a)以及粒径分布图(b)；
图2为茶黄素(TF)、Pt NF和TF@Pt-Aln纳米颗粒的紫外(a)和红外(b)吸收峰图；
图3a为Free TF、Pt NF以及TF@Pt-Aln清除DPPH自由基的结果；
图3b为Free TF、Pt NF以及TF@Pt-Aln清除超氧阴离子的结果；
图3c为Free TF、Pt NF以及TF@Pt-Aln清除H2O2的结果；
图4为TF@Pt-Aln纳米颗粒对细胞活性影响分析结果(MTT)；
图5为各试验组的TRAP染色结果；
图6为各试验组的μCT照片；
图7a为各实验组处理小鼠后小鼠的骨小梁体积分数；
图7b为各实验组处理小鼠后小鼠的骨小梁分离度；
图7c为各实验组处理小鼠后小鼠的骨密度；
图7d为各实验组处理小鼠后小鼠的骨小梁数量分析。
具体实施方式
下面将结合实施例对本发明的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
第一方面，提供了一种TF@Pt-Aln纳米颗粒，该TF@Pt-Aln纳米颗粒包括多孔铂基纳米颗粒，以所述多孔铂基纳米颗粒为基础骨架，其表面连接阿仑膦酸盐且内部包裹茶黄素。
本发明提供的TF@Pt-Aln纳米颗粒的骨架为铂基纳米颗粒，其为一种多孔材料。多孔铂基纳米颗粒可以清除ROS，抑制破骨细胞生成，其表面连接阿仑膦酸盐，使纳米颗粒精确的靶向骨组织。
可选的实施方式中，多孔铂基纳米颗粒为具有大介孔的多孔铂基纳米颗粒。其中大介孔指的是孔径大于50nm的多孔纳米材料。
可选的实施方式中，多孔铂基纳米颗粒采用软膜法制成，是以脂质体为模板合成的具有大介孔的多孔铂基纳米颗粒。
多孔铂基纳米颗内包裹茶黄素。Ano1基因(其编码ANO1，钙激活氯通道蛋白1)敲除能够显著缓解骨质疏松症的发生，茶黄素对Ano1是一种很好的抑制剂，采用茶黄素去抑制Ano1，从而调控破骨细胞的分化及功能，降低骨吸收的速率。茶黄素还能抑制抑制RANKL(Receptor Activator of Nuclear Factor-κB Ligand，核因子κB受体活化因子配体)与RANK(Activator of Nuclear Factor-κB，核因子κB受体活化因子)的结合进而减轻胞外骨基质的溶解。
多孔铂基纳米颗表面连接的阿仑膦酸盐作为一种广谱抗骨吸收药物，与骨内羟基磷灰石有强亲和力，为治疗骨质疏松症提供一些靶点，其被为递送纳米颗粒的药物。
阿仑膦酸盐包括但不限于碱金属盐，例如钠盐和钾盐；碱土金属盐，例如钙盐和镁盐；以及铵盐；在一些具体的实施方式中，阿仑膦酸盐选自阿仑膦酸钠。
可选的实施方式中，多孔铂基纳米颗粒与阿仑膦酸盐通过酰胺键连接。
可选的实施方式中，TF@Pt-Aln纳米颗粒的粒径为110～120nm，例如可以但不限于110、111、112、113、114、115、116、117、118、119或120nm，或上述任意两点之间的范围，优选为约115nm。
可选的实施方式中，TF@Pt-Aln纳米颗粒的阿仑膦酸盐的负载量为每1mg纳米粒子负载0.1～5mg的阿仑膦酸盐，例如可以但不限于0.1、0.5、1、2、3、4或5mg，优选为1mgTF@Pt-Aln纳米颗粒负载10mg阿仑膦酸盐。
可选的实施方式中，TF@Pt-Aln纳米颗粒中茶黄素的包封率为130～150％，例如可以但不限于130％、135％、140％、145％或150％，或上述任意两点之间的范围，优选为140％。
可选的实施方式中，TF@Pt-Aln纳米颗粒的电位为-38mV。
第二方面，还提供了第一方面的TF@Pt-Aln纳米颗粒制备方法，该制备方法包括使多孔铂基纳米颗粒包裹茶黄素，然后在多孔铂基纳米颗粒表面连接阿仑膦酸盐。
可选的实施方式中，所述多孔铂基纳米颗粒以脂质体为模板合成，脂质体合成的多孔铂基纳米颗粒不使用任何有毒试剂，具有很高的生物相容性和纳米颗粒产率。
可选的实施方式中，所述多孔铂基纳米颗粒的制备方法包括在含有DPPC(1,2-二棕榈酰-sn-甘油-3-磷酸胆碱)和胆固醇的第一有机相中旋蒸至成为薄膜，加入α-抗坏血酸水溶液，将混合体系超声至澄清，然后加入氯铂酸溶液至溶液变成黑色，固液分离得到多孔铂基纳米颗粒。
可选的实施方式中，第一有机相包括氯仿。
可选的实施方式中，DPPC的浓度为0.5～1mg/mL，例如可以为但不限于0.5、0.6、0.7、0.8、0.9或1mg/mL，或上述任意两点之间的浓度范围。可选的实施方式中，DPPC的浓度为0.7mg/mL。
可选的实施方式中，胆固醇的浓度为0.1～0.5mg/mL，例如可以为但不限于0.1、0.2、0.3、0.4或0.5mg/mL，或上述任意两点之间的浓度范围。可选的实施方式中，胆固醇的浓度为0.3mg/mL。
可选的实施方式中，α-抗坏血酸水溶液的浓度为52.8mg/mL。
可选的实施方式中，氯铂酸的浓度为10～20mM，例如可以为但不限于10、12、15、18或20mM，或上述任意两点之间的浓度范围，进一步优选为15mM。
可选的实施方式中，多孔铂基纳米颗粒与阿仑膦酸盐通过酰胺键连接。
可选的实施方式中，所述制备方法包括将所述多孔铂基纳米颗粒羧基化后包裹茶黄素。
可选的实施方式中，所述制备方法包括将多孔铂基纳米颗粒溶解于第二有机相中，然后加入硫辛酸反应，使多孔铂基纳米颗羧基化，获得Pt-COOH纳米颗粒，然后将Pt-COOH纳米颗粒溶解于水中，加入茶黄素搅拌，获得TF@Pt-COOH纳米颗粒。
可选的实施方式中，所述第二有机相包括C1～C4的低碳醇，进一步优选为乙醇。
可选的实施方式中，硫辛酸的质量是多孔铂基纳米颗的8～12倍，例如可以为但不限于8、9、10、11或12倍，或前述任意两点之间的质量范围，进一步优选为10倍。
可选的实施方式中，多孔铂基纳米颗和硫酸锌的反应时间为10～15h，例如可以为但不限于10、11、12、13、14或15h，或前述任意两点之间的时间范围，进一步优选为12h。
可选的实施方式中，所述制备方法还包括在多孔铂基纳米颗和硫酸锌反应结束后，使用C1～C4的低碳醇洗涤纯化。
可选的实施方式中，使用乙醇洗涤纯化多次。
可选的实施方式中，所述Pt-COOH纳米颗粒和茶黄素的搅拌时间为10～15h，例如可以为但不限于10、11、12、13、14或15h，或前述任意两点之间的时间范围，进一步优选为12h。
可选的实施方式中，使用EDC和NHS活化羧基化的孔铂基纳米颗粒，包括将EDC和NHS加入到含有所述TF@Pt-COOH纳米颗粒的水溶液中，然后加入阿仑膦酸盐反应至得到所述TF@Pt-Aln纳米颗粒。
可选的实施方式中，EDC和NHS的质量是TF@Pt-COOH纳米颗粒的5～15倍，例如可以为但不限于5、6、7、8、9、10、11、12、13、14或15倍，或前述任意两点之间的质量范围，进一步优选为10倍。
可选的实施方式中，TF@Pt-COOH纳米颗粒和阿仑膦酸盐在搅拌状态下反应。
可选的实施方式中，TF@Pt-COOH纳米颗粒和阿仑膦酸盐的反应时间为10～15h，例如可以为但不限于10、11、12、13、14或15h，或前述任意两点之间的时间范围，进一步优选为12h。
可选的实施方式中，所述制备方法还包括在反应得到所述TF@Pt-Aln纳米颗粒后使用去离子水洗涤纯化。
可选的实施方式中，所述制备方法包括将DPPC和胆固醇溶解在氯仿中，进行旋蒸，待溶液旋蒸成为白色薄膜，加入α-抗坏血酸水溶液，充分溶解白色固体，溶解完毕后，将溶液进行超声至澄清状液体。随后，向溶液中加入氯铂酸溶液，反应6小时，溶液最终变成黑色。通过离心机10000RPM，10分钟清洗纳米颗粒三次，制备完成Pt纳米颗粒。
将Pt纳米颗粒溶解于乙醇中，加入硫辛酸反应12小时后用乙醇洗涤多次纯化。然后将获得的Pt-COOH纳米颗粒溶解于水中，加入茶黄素搅拌12小时，制备完成TF@Pt-COOH纳米颗粒。
将EDC和NHS加入到制备好的TF@Pt-COOH纳米颗粒溶液中，随后加入阿仑膦酸盐，搅拌12小时，最后，通过离心获得TF@Pt-Aln纳米颗粒，并用去离子水洗涤多次纯化。
第三方面，还提供了上述第一方面的TF@Pt-Aln纳米颗粒，或上述第二方面的制备方法在制备用于治疗骨质疏松的药物中的应用。
第四方面，还提供了一种用于治疗骨质疏松的药物组合物，该药物组合物含有上述第一方面的TF@Pt-Aln纳米颗粒。
可选的实施方式中，所述药物组合物还包括任选地药物学上可接受的辅料。可选的实施方式中，所述药学上任选地可接受的辅料包括溶剂、增溶剂、助溶剂、乳化剂、着色剂、崩解剂、填充剂、渗透压调节剂、稳定剂、助流剂、矫味剂、抑菌剂、助悬剂、包衣剂、抗氧剂、抗氧增效剂、螯合剂、pH调节剂、吸附剂、保护剂、保湿剂、柔软剂、吸收剂、稀释剂、空心胶囊、基质和载体材料中的一种或多种。
可选的实施方式中，所述药物组合物可选择本领域任意选的可接受的剂型，包括但不限于注射剂型或口服剂型。
下面通过具体的实施例进一步说明本发明，但是，应当理解为，这些实施例仅仅是用于更详细地说明之用，而不应理解为用于以任何形式限制本发明。
下述实施例使用的主要试剂如下：
胆固醇和α-抗坏血酸购自Sigma-Aldrich(St.Louis,MO,USA)。
1,2-二棕榈酰-sn-甘油-3-磷酸胆碱(DPPC)购自AVT Pharmaceutical Tech CO.,Ltd.(中国上海)。
N-(3-(二甲氨基)-丙基)-3-乙基碳二胺盐酸盐(EDC)购自北京索莱生物科技有限公司(中国北京)。
N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)购自J&K Scientific Ltd.(中国北京)。
氯铂酸(H2PtCl6)购自化学科技有限公司(中国天津)。
H2O2购自江天化工科技有限公司(中国天津)。
阿仑膦酸钠购自上海麦克林生化科技股份有限公司
所有化学品均按原样使用，无需进一步处理。
实施例1
TF@Pt-Aln纳米颗粒的合成：
将7mg DPPC和3mg胆固醇溶解在10mL氯仿中，进行旋蒸，待溶液旋蒸成为白色薄膜，加入α-抗坏血酸(528mg溶解于10mL去离子水中)，充分溶解白色固体，溶解完毕后，将溶液进行超声至澄清状液体。随后，向溶液中加入氯铂酸(15mM，200μL)溶液，反应6小时，溶液最终变成黑色。通过离心机10000RPM，10分钟清洗纳米颗粒三次，制备完成Pt纳米颗粒。
将Pt纳米颗粒溶解于乙醇中，加入10倍质量的硫辛酸，反应12小时后用乙醇洗涤多次纯化。然后将获得的Pt-COOH纳米颗粒溶解于水中，加入1：1的TF(茶黄素)搅拌12小时，制备完成Pt-COOH@TF纳米颗粒。
将10倍纳米颗粒质量的EDC和NHS加入到制备好的Pt-COOH@TF纳米颗粒溶液中，随后加入10倍Aln(阿仑膦酸钠)，搅拌12小时，最后，通过离心获得TF@Pt-Aln纳米颗粒，并用去离子水洗涤多次纯化。
本实施例制备得到的TF@Pt-Aln纳米颗粒的透射电子显微镜图和粒径分布图如图1所示，紫外和红外吸收峰图如图2所示。
该实施例中，TF@Pt-Aln纳米颗粒的粒径大约115nm左右，Free TF的电位大约为-17mV，Pt NF的电位为-24.7mV，TF@Pt-Aln电位为-38mV。阿仑膦酸盐的负载量为每1mg纳米粒子负载1mg的阿仑膦酸钠；茶黄素的包封率约为140％。
对比例1
本对比例制备了Pt NF(Pt纳米颗粒)，制备方法同实施例1，具体的：将7mg DPPC和3mg胆固醇溶解在10mL氯仿中，进行旋蒸，待溶液旋蒸成为白色薄膜，加入α-抗坏血酸(528mg溶解于10mL去离子水中)，充分溶解白色固体，溶解完毕后，将溶液进行超声至澄清状液体。随后，向溶液中加入氯铂酸(15mM，200μL)溶液，反应6小时，溶液最终变成黑色。通过离心机10000RPM，10分钟清洗纳米颗粒三次，制备完成Pt纳米颗粒。
效果例1
验证TF@Pt-Aln纳米颗粒清除ROS的能力：
为了验证TF@Pt-Aln纳米颗粒清除ROS的能力，我们研究了超氧阴离子、DPPH自由基和对过氧化氢的清除活性，评价了Free TF，Pt NF以及TF@Pt-Aln的抗氧化能力。采用超氧阴离子检测试剂盒(A001-3，南京建成生物工程研究所，中国)研究了超氧阴离子的清除活性。最终溶液的吸光度用550nm处的紫外-可见分光光度计测定吸光度。利用DPPH(1,1-二苯基-2-吡啶肼)自由基研究了TF@Pt-Aln纳米颗粒清除氮自由基的活性。简而言之，在48mL无水乙醇中加入2mg DPPH制备DPPH工作溶液。然后将25μgTF@Pt-Aln纳米颗粒加入到DPPH工作溶液中，均匀搅拌。在37℃下反应0.5h后，在519nm处测定DPPH工作溶液的吸光度。此外，还研究了其对过氧化氢的清除活性。简单地说，将30μgTF@Pt-Aln纳米颗粒加入到25mM的过氧化氢中，反应0.5h。离心后，用Cary-60紫外-可见分光光度计测定240nm处的吸光度。结果表明(图3a～图3c)与Free TF和Pt NF相比，TF@Pt-Aln能显著清除ROS。
效果例2
评估TF@Pt-Aln纳米颗粒对破骨细胞的毒性：
通过MTT实验检测细胞存活和生长。用细胞培养基将细胞稀释成浓度(5-7)×104/mL，充分吹打，混匀细胞悬液。取96孔板，每孔加入100μL细胞悬液，24h后换为设置好的浓度梯度的待测药的培养液，继续培养24h。每孔加入10μL MTT溶液(5mg/mL)，用锡纸包裹避光，孵育4h。除去上清液，每孔加入150μL DMSO溶液结晶，避光，摇床低速振荡15min，酶标仪检测490nm处的吸光度。MTT实验数据显示，TF@Pt-Aln纳米颗粒对骨髓巨噬细胞毒性较小，结果如图4所示，表明TF@Pt-Aln纳米颗粒只抑制破骨细胞分化，并不杀伤破骨细胞。
效果例3
TF@Pt-Aln纳米颗粒对破骨细胞分化的影响：
通过TRAP染色证实了TF@Pt-Aln对OC分化的影响。TRAP染色使用酸性磷酸酶试剂盒，根据制造商的说明(Sigma-Aldrich，387)。培养5天后，RANKL诱导的破骨细胞在室温下用4％的多聚甲醛固定5min，并在PBS中彻底冲洗。将平板置于37℃的TRAP染色溶液中避孵育1h。去除TRAP溶液后，用PBS洗涤平板三次。在倒置显微镜下(尼康)计数含有三个或更多核的TRAP阳性多核细胞。破骨细胞被标记物TRAP染色，并在光镜下拍照。单独诱导破骨细胞培养基对照组在培养5天后检测到破骨细胞数量最多，TF@Pt-Aln抑制破骨细胞分化的效果最优，结果如图5所示。
效果例4
TF@Pt-Aln纳米颗粒在体内治疗骨质疏松的效果：
构建小鼠骨质疏松模型(OVX小鼠)，分五组，如表1所示。
表1
分组 成分 浓度
1 TF@Pt-Aln+PBS 5mg/mL
2 Pt NF+PBS 5mg/mL
3 Free TF+PBS 2mg/mL
4 OVX+PBS
5 Shame
用PBS溶解TF,Pt、NF,TF@Pt-Aln纳米颗粒，每两天尾静脉注射一次，共30天。对照组仅注射PBS。安乐死后，用μCT分析解剖股骨、松质骨和皮质骨的轮廓(图6)。定量分析显示，OVX小鼠给药TF@Pt-Aln后，骨密度(BMD),骨小梁体积分数(BV/TV)，骨小梁数量(Tb.N)，显著提高，骨小梁分离度(Tb.SP)减少。体内实验结果表明，TF@Pt-Aln纳米颗粒给药可减轻OVX小鼠的骨丢失。实验结果如图7a～图7d所示。
最后应说明的是：以上各实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对其限制；尽管参照前述各实施例对本发明进行了详细的说明，本领域的普通技术人员应当理解：其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分或者全部技术特征进行等同替换；而这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明各实施例技术方案的范围。

Claims (10)

1.一种TF@Pt-Aln纳米颗粒，其特征在于，包含多孔铂基纳米颗粒，所述多孔铂基纳米颗粒表面连接阿仑膦酸盐；所述多孔铂基纳米颗粒内部包裹茶黄素。
2.根据权利要求1所述的TF@Pt-Aln纳米颗粒，其特征在于，所述多孔铂基纳米颗粒为具有大介孔的多孔铂基纳米颗粒；
优选地，多孔铂基纳米颗粒为以脂质体为模板合成的具有大介孔的多孔铂基纳米颗粒。
3.根据权利要求1所述的TF@Pt-Aln纳米颗粒，其特征在于，多孔铂基纳米颗粒与阿仑膦酸盐通过酰胺键连接；
优选地，所述阿仑膦酸盐包括阿仑膦酸钠。
4.根据权利要求1～3任一项所述的TF@Pt-Aln纳米颗粒，其特征在于，TF@Pt-Aln纳米颗粒的粒径为110～120nm；
优选地，阿仑膦酸盐的负载量为每1mg纳TF@Pt-Aln纳米颗粒负载0.1～5mg的阿仑膦酸盐；
优选地，茶黄素的包封率为130～150％；
优选地，TF@Pt-Aln纳米颗粒的电位为-38mV。
5.权利要求1～4任一项所述的TF@Pt-Aln纳米颗粒的制备方法，其特征在于，包括使多孔铂基纳米颗粒包裹茶黄素，然后在多孔铂基纳米颗粒表面连接阿仑膦酸盐。
6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，所述多孔铂基纳米颗粒以脂质体为模板合成；
优选地，所述多孔铂基纳米颗粒的制备方法包括在含有DPPC和胆固醇的第一有机相中旋蒸至成为薄膜，加入α-抗坏血酸水溶液，将混合体系超声至澄清，然后加入氯铂酸溶液反应至溶液变成黑色，固液分离得到多孔铂基纳米颗粒；
优选地，第一有机相包括氯仿；
优选地，DPPC的浓度为0.5～1mg/mL，进一步优选为0.7mg/mL；
优选地，胆固醇的浓度为0.1～0.5mg/mL，进一步优选为0.3mg/mL。
优选地，α-抗坏血酸水溶液的浓度为52.8mg/mL；
优选地，氯铂酸的浓度为10～20mM，进一步优选为15mM。
7.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，多孔铂基纳米颗粒与阿仑膦酸盐通过酰胺键连接；
优选地，所述制备方法包括将所述多孔铂基纳米颗粒羧基化后包裹茶黄素；
优选地，所述制备方法包括将多孔铂基纳米颗粒溶解于第二有机相中，然后加入硫辛酸反应，获得Pt-COOH纳米颗粒，然后将Pt-COOH纳米颗粒溶解于水中，加入茶黄素搅拌，获得TF@Pt-COOH纳米颗粒；
优选地，所述第二有机相包括C1～C4的低碳醇，进一步优选为乙醇；
优选地，硫辛酸的质量是多孔铂基纳米颗的8～12倍，进一步优选为10倍；
优选地，多孔铂基纳米颗和硫酸锌的反应时间为10～15h，进一步优选为12h；
优选地，所述制备方法还包括在多孔铂基纳米颗和硫酸锌反应结束后，使用C1～C4的低碳醇洗涤纯化；
优选地，所述Pt-COOH纳米颗粒和茶黄素的搅拌反应时间为10～15h，进一步优选为12h。
8.根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于，将EDC和NHS加入到含有所述Pt-COOH@TF纳米颗粒的水溶液中，然后加入阿仑膦酸盐反应至得到所述TF@Pt-Aln纳米颗粒；
优选地，EDC和NHS的质量是Pt-COOH纳米颗粒的5～15倍，进一步优选为10倍；
优选地，Pt-COOH@TF纳米颗粒和阿仑膦酸盐在搅拌状态下反应；
优选地，Pt-COOH@TF纳米颗粒和阿仑膦酸盐的反应时间为10～15h，进一步优选为12h；
优选地，所述制备方法还包括在反应得到所述TF@Pt-Aln纳米颗粒后使用去离子水洗涤纯化。
9.权利要求1～4任意一项所述的TF@Pt-Aln纳米颗粒，或权利要求5～8任一项所述的制备方法在制备用于治疗骨质疏松的药物中的应用。
10.用于治疗骨质疏松的药物组合物，其特征在于，含有权利要求1～4任意一项所述的TF@Pt-Aln纳米颗粒。
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